CN101518336A - 一种具有抗氧化功能的营养食品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有抗氧化功能的营养食品及其制备方法,属于功能性食品领域。本发明的功能性营养食品,主要由如下重量份的药食两用原料制成:石柱人参1-5份、菊花1-5份、短梗五加茶3-9份、茯苓3-9份、黑芝麻3-9份、桃仁1-5份、蜂花粉3-9份、银耳1-5份、黑木耳1-5份、猴头菇1-5份、香菇2-8份、葡萄籽1-5份、番茄红素0.5-1.5份、蜂王浆0.5-1.5份。经过动物实验和人体试服结果表明,本发明营养食品具有明显的抗氧化的效果,还能同时提高免疫力。适用于需要抗氧化的人群,但不适用于少年儿童。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗氧化功能的营养食品及其制备方法,属于功能性食品领域。
背景技术
氧化损伤是导致人类疾病的一个重要因素。抗氧化的功能性营养食品能预防或改善这些疾病的发生风险。机体在有氧条件下的生存和发育,即使在生理情况下也会产生活性氧(reactive oxygen speces,ROS)。后者作用于生物大分子如核酸、蛋白质及碳水化合物,使它们受到氧化损伤,从而启动了机体的不同的疾病过程。氧化损伤也是机体衰老的原因之一。Harman(1955)提出了衰老的自由基学说。该学说认为“自由基对机体损伤之总和,是机体衰老的一个重要原因”。下面是考察机体氧化损伤的一些指标
一、过氧化脂质和脂褐质(也称脂褐素)是根据衰老自由基学说建立的衰老生物学指标。机体在有氧过程中产生的自由基攻击多不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质。后者分解产生丙二醛。丙二醛可以和蛋白质和游离氨基酸发生交联反应形成Schiff碱。后者在溶酶体中不易被消化,随着年龄增长在细胞中逐渐积聚成脂褐质,因发荧光又称荧光色素。由于过氧化脂质和脂褐质在细胞内的含量均与年龄呈正相关,而且在细胞内稳定存在、易于测定,因而它们的含量可以作为体内自由基多寡的生物学指标。
二、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶,该两种酶为细胞内自由基的酶防御体系。SOD为猝灭自由基的酶,它使超氧自由基的财货淬灭速度提高1010倍,岐化反应产生的过氧化氢的毒性较02·低得多。H2O2在GSH—Px作用下生成无毒的水。体内SOD和GSH—Px的活性随龄下降,是老年机体清除自由基能力下降的主要原因。因而一种抗氧化的营养食品应当提高老年机体SOD和GSH—Px的活性,降低自由基浓度,减少LPO和脂褐质的积聚。
三、羟脯氨酸胶原是一种纤维状结构的蛋白质,它由三条α肽链呈螺旋状缠绕而成。有些组织,如韧带、尾键几乎全部由胶原蛋白组成。羟脯氨酸仅在胶原蛋白中存在,且含量极其恒定,占胶原蛋白12%~14%。因此,可以用羟脯氨酸含量或其含量的7.46倍代表胶原的量。许多文献报道,老人及老年动物胶原蛋白的多肽链间共价键交联程度增加,其溶解度降低,使老人及老年动物皮肤僵硬、少弹性、通透性降低、皱纹增加。而且皮肤、尾键内羟脯氨酸含量是随龄降低的。胶原中羟脯氨酸含量随龄降低的原因也可能与自由基有关。自由基反应能引起生物体内大分子的异常交联,细胞内羟化酶在自由基作用下交联而失去羟化功能,使脯氨酸不能变成羟脯氨酸。另外,合成胶原蛋白的纤维细胞在自由基作用下合成胶原蛋白的能力降低,使胜券在握数量减少。因此,羟脯氨酸的含量可作为反映衰老过程的特殊指标。
衰老是指机体生长发育达到成熟期后,随着年龄增长,阳气衰弱、***亏损,气血不足,出现脏腑功能减退,气血阴阳失调,组织细胞缓慢性、进行性、退化性功能降低和发生紊乱的全身性、我***、循序渐进的功能衰退过程的综合表现。个体的衰老带来整个社会的人口老龄化,这些年来,随着生活水平的提高和医疗保障体系的逐步完善,人口老龄化进程进一步加速,已成为人类在21世纪所面临的最严峻的挑战,是当今世界上最突出的社会问题。目前,世界上发达地区65岁以上人口在总人口中的比例已由1957年的7.0%增长到今天的13.5%,预计到2050年将达24.7%,在生育率较低的国家(主要为欧洲和北美国家、日本、澳大利亚和新西兰)65岁以上的人口已经增至总人口数的10%~15%,预计在今后的30~35年之内这一比例将翻一番,在人口老龄化最快的国家(包括日本、德国、意大利)老龄人口在总人口的比例将接近或超过40%。
我国目前≥60岁老年人口已达1.3亿,占全部人口的10%,已进入老龄型国家行列。预计到2020年,老龄人口将达2.24亿~3亿,其中80岁以上高龄老年人将达到2000万~3000万;2050年,我国≥60岁老年将达到4亿左右,占总人口数的25%以上。其中80岁以上高龄老年人口达8000万~1.14亿。
人口老龄化带来许多社会问题,因此,也促使提出许多应对措施,其中非常重要的问题就是延缓衰老和老年性疾病的预防和治疗。
延缓衰老实际上包括三项含义:一是增寿,即延年益寿,提高生存年龄。大量的研究表明:延缓衰老,延年益寿是完全可能的。第二个含义是提高老年人的生命质量。做到老而不衰。第三个含义是对老年常见多发病的预防和治疗。老年常见多发病有心脑血管疾病、糖尿病、老年性痴呆、老年性骨质疏松症、老年性便秘、老年岶金森症等,这些疾病与老年增龄有密切关系,对这些疾病的预防和治疗也是延缓衰老药物研究的一大主题。
在目前,市场上出售的中西各种抗氧化药剂,都有一定的抗氧化延缓衰老的效果。但是,这些中西药除了还同时具有大小不同的副作用外,效果也不尽如人意。常用的单方、复方中药效果也不是很明显。我国***健康专家表示,很早以前就有各种荷尔蒙疗法,羊胎素、牛胎素之类的;还有研究认为长期补充大量荷尔蒙得癌症的几率更高;健康的四大基石是合理膳食、适量运动、戒烟限酒、心理平衡;所以,很多的抗氧化抗衰老广告是商业炒作,忽悠消费者的钱包而已。因此研究开发食用安全的、具有明显的抗氧化延缓衰老的效果的功能性营养食品,可造福于上亿的需要抗氧化延缓衰老的消费者。
发明内容
本发明针对上述领域中的缺陷,提供一种更为有效的具有抗氧化功能性营养食品,其组方所用原料,均是国家药监局公布的可用于营养食品生产的药食两用原料,本组方完全符合药食同源的理念,是一种天然绿色营养食品。
本发明的目的就是提供一种更为有效的抗氧化功能性营养食品的组方。
本发明的另外一个目的是提供了该抗氧化功能性营养食品的制备方法。
1、一种具有抗氧化功能的营养食品及其制备方法,主要由如下重量份的药食两用原料制成:石柱人参1-5份、菊花1-5份、短梗五加茶3-9份、茯苓3-9份、黑芝麻3-9份、桃仁1-5份、蜂花粉3-9份、银耳1-5份、黑木耳1-5份、猴头菇1-5份、香菇2-8份、葡萄籽1-5份、番茄红素0.02-0.06份、蜂王浆0.5-1.5份。
2、所述的营养食品,其优选的药食两用原料的重量份为:石柱人参1份、菊花1份、短梗五加茶3份、茯苓6份、黑芝麻3份、桃仁2份、蜂花粉3份、银耳2份、黑木耳2份、猴头菇3份、香菇3份、葡萄籽1份、番茄红素0.02份、蜂王浆0.5份。
3、所述的营养食品的制备方法:
(1)按比例称取石柱人参、茯苓等2味药食两用原料,提取用85%乙醇提取,回流3小时,提取二次,合并提取液真空浓缩得干浸膏1;
(2)按比例称取黑芝麻、葡萄籽、桃仁等3味药食两用原料,用95%乙醇提取,回流3小时,提取二次,将提取液真空浓缩得干浸膏2;
(3)按比例称取短梗五加茶、猴头菇、香菇等3味药食两用原料,用蒸馏水提取,回流3小时,提取二次,将提取液真空浓缩得干浸膏3;
(4)按比例称取菊花、银耳、黑木耳3味药食两用原料,用70%乙醇提取,回流3小时,提取三次,将提取液真空浓缩得干浸膏4;
4、合并干浸膏1、2、3、4将其粉碎成100目粉,再合并蜂花粉、番茄红素2味药食两用原料,共同粉碎成200目粉,即为本发明的活性成分。
5、按比例称取蜂王浆药食两用原料,合并权利要求4所述的本发明的活性成分粉,按比例调合后,按软胶囊的制做方法,灌装入胶囊壳。每粒软胶囊含活性成分560mg。
6、所述的制备方法,浓缩后得到的干浸膏还需在50-60℃下干燥3小时。
7、本组方中所述的石柱人参,是指主产于中国.辽宁省宽甸石柱子地区的,参令在15年生以上的林下参。
8、本组方中所用的短梗五加茶,是用我们已经申报的专利技术培育的,短梗五加茶树的蕊叶特制的。
我们通过对石柱人参、菊花、短梗五加茶、茯苓、黑芝麻、桃仁、蜂花粉、银耳、黑木耳、猴头菇、香菇、葡萄籽、番茄红素、蜂王浆等的化学成分及药理活性的现代研究表明:
石柱人参含有多种生理活性成分,其中人参皂苷是人参中主要功效成分。从人参、生晒参或白参中共分离出30余种人参皂苷(可以分为3组,即齐墩果酸组、原人参二醇组和原人参三醇组),分别称为人参皂苷(ginsenoside)-Rx(注:x=0、a1、a2、a3、b1、b2、b3、c、d、e、f、g1、g2、g3、h1、h2、h3、s1、s2、),尚有假人参皂苷(pseudoginsenoside saponin)F11等。皂苷为人参生理活性的物质基础。原人参二醇(protopanaxadiol)和原人参三醇(protopanaxadiol)是人参皂苷中的原存在形式,在分离苷元时,由于稀酸的作用,分子侧链部分的羟基和烯键环合而成人参二醇(panaxadiol)和参三醇(panaxadiol),人参二醇和人参三醇均是三萜类化合物。人参含少量挥发油。近年报道,挥发油中的主成分,低沸点部分为β—榄香烯(β—elemene);高沸点部分人参炔醇(panaxynol);挥发性成分中亦含人参环氧炔醇(panaxydol)、人参炔醇(panaxytriol)、人参炔(ginsenyne)B、C、D、E以及α-人参烯(α-panasinsene)、β—人参烯(β—panasinsene)、y—榄香烯(y—elemene)、α-古芸烯(α-gurjunene)、β—古芸烯(β—gurjunene)、α—新丁香三环稀(α—neodovene)、β—新丁香三环稀(β—neodovene)、α-芹子烯(α-selinene)、β-芹子烯(β-selinene)、y—芹子烯(y-selinene)、石竹烯(caryophyllene)等。有机酸及酯类有:柠檬酸(citric acid)、异柠檬酸(isocitric acid)、延胡索酸(fumaricacid)、酮戊二酸、油酸(oleic acid)、亚油酸(linoleic acid)、顺丁烯二酸(cis-butendi-carboxylicacid)、苹果酸(malic acid)、丙酮酸(pyruvic acid)、琥珀酸(succinic acid)、酒石酸(tartaric acid)、人参酸(panax acid)、水杨酸(salicyclic acid)、香草酸(vanillicacid)对羟基肉桂酸(p-hydroxycinnamic)、甘油三酯(triglyceride)、棕榈酸(palmitic acid)、三棕榈酸甘油酯(palmitin)、α,y—二棕榈酸甘油酸、三亚油酸甘油酯、糖基甘油二酯。含氮化合物有:吡咯烷酮、胆碱(choline)、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate)、腺苷(adenosine)、多肽及精氨酸、赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸等17种氨基酸。糖类有:果糖(fructose)、葡萄糖(glucose)、***糖(arabinse)、鼠李糖(rham-nose)、葡萄粮醛酸(glucuronic acid)、甘露糖(mannose)、木糖(xylose)、蔗糖(su-crose)、麦芽糖(maltose)、棉子糖(raffinose)及人参三糖(ginsengtrisaccharide)、A、B、C、D。人参尚含有38.7%的水溶性多糖和7.8%~10.0%的碱溶性多糖。维生素类有:维生素B1、维生素B2、维生素B12、维生素C;烟酸(nicotinic acid)、叶酸(folic acid)、泛酸、生物素(biotin)、及菸酰胺。甾醇及其苷类有β-谷甾醇(β-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、胡萝卜苷(daucosterol)、菜油甾醇(campesterol)、人参皂苷P[sitosteryl-0(6-0-fatty acyl)-glucopyranoside]及酯甾醇。此外,人参含有:腺苷转化酶、L—天冬氨酸酶、β-淀粉酶、蔗糖转化酶;麦芽醇(maltol);山柰酚(kaempferol)、人参黄酮苷(panasenoside)及铜、锌、铁、锰等20多种微量元素。
菊花为菊科多年生草本植物菊Chrysanthemum mori folium Ramat.的头状花序。味甘、苦,性凉。入肺、肝经。功能:疏风、清热、明目、解毒主治:头痛、眩晕、目赤、心胸烦热、疗疮、肿毒。菊花含挥发油、黄酮苷、菊苷(chrysanthemin)、水苏碱(stachydrine)、腺嘌呤(adenine)、胆碱(choline)、刺槐素(acacetin)、维生素B1及维生素A样物质、氨基酸和微量元素等。挥发油中含龙脑(borneol)、醋酸龙脑酯(bornylacetate)、菊油环酮(chrysanthenone)、樟脑(camphor)等。此外,尚含丁二酸二甲基酰肼(aminozide)。本品为菊科植物的干燥头状花序。9月至11月花盛开时分批采收,阴干或焙干,或熏、蒸后晒干供药用。药材按产地加工方法不同,分为“毫菊”、“滁菊”、“贡菊”、“杭菊”等。菊花原产于我国,栽培历史悠久,《礼记》中有“季秋之月,鞠有黄华”的记载。晋人傅玄,亦曾作赋,称菊花“服之者长寿,食之者通神”。宋代大文豪苏东坡,甚至一年四季都在食菊,他春食苗,夏食叶,秋食花,冬食根。菊花的抗氧化功能以丹参为对照观察菊花水提液对大鼠心、脑组织体外孵育时自发脂质过氧化(LPO)反应的影响;对羟自由基(·OH)引发的小鼠心、脑匀浆和心、脑线体膜LPO反应的影响。结果表明,菊花水提液对上述过程的抑制作用与丹参相当;小鼠连续灌胃菊花水提液2g/(kg·d)、4g/(kg·d)、15g/(kg·d),其心、脑组织LPO反应产物丙二醛含量均显著低于生理盐水组。上述结果表明菊花水提液具有抑制自由基生成及抑制自由基引发的LPO反应的作用。菊花对D—半乳糖衰老抗氧化作用实验研究菊花水提液对小鼠血清SOD、GSH—Px、MAO活力及MDA含量的影响。模型组与对照组比较,SOD、GSH—Px活力均显著降低(P<0.01),而MAO活力及MDA含量均显著提高(P<0.01);实验组与模型组比较,SOD、GSH—Px的活力均显著提高(P<0.01),并且MAO活力及MDA含量均显著降低(P<0.01)。实验结果表明,菊花水提液能明显抵制D—半乳糖所致脂质过氧化,降低血中MDA含量、MAO活力;提高血中SOD、GSH—Px活力;增强机体对自由基的清除作用,延缓衰老进程,改善机体状况,并有一定的扶正固本、抗衰防老作用。由此提示菊花在抗衰老方面的作用,可能与菊花清除体内自由基有关。
短梗五加茶短梗五加中含刺五加苷A(eleutheroside刺五加苷B(紫丁香苷syringin)、刺五加苷B1(6,8—二甲氧基香豆素—7—葡萄糖苷)、刺五加苷L(乙基半乳糖苷)、刺五加苷D和E(为二种不同构型的紫丁得树脂酚的葡萄糖苷)等。此外,尚含多糖及1—芝麻脂素(1—sesamin)。短梗五加的抗氧化功能,陈月探讨刺五加皂苷(ASS)对X射线照射小鼠损伤的作用。将小鼠50只随机均分为阴性对照组、阳性对照组及低、中、高剂量ASS实验组。测定小鼠脾指数、胸腺指数、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)活性,并测定淋巴细胞转化率和外周血白细胞数。结果表明,3个ASS实验组小鼠各项指标与对照组比较,脾指数差异无显著性(P<0.05),胸腺指数、淋巴细胞刺激指数、血清SOD和GSH—PX活性差异均有显著性(P<0.05)。结论:ASS对辐射小鼠具有一定的抗辐射和抗氧化作用。短梗五加具有抗衰老作用,大鼠口服刺五加2个月后,细胞脂质氧化物含量降低,Na+,K+—ATP酶活性升高。本品乙醇提取物能延长小鼠结扎双侧颈总动脉或断头喘息的存活时间;能降低大鼠肝、脑中过氧化脂质的水平,提高血浆中SOD(超氧化物歧化酶)的活性,对缺血后再灌注脑内的过氧化脂质含量增加有保护作用。
茯苓为多孔菌科植物茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。味甘、淡,性平。归心、脾、肺经。功能:渗湿利水、益脾和胃、宁心安神。主治:小便不利、水肿胀满、痰饮咳逆、恶心呕吐、泄泻、遗精、淋浊、惊悸、健忘。茯苓主要含B—茯苓聚糖(B-pachyman),约占干重的93%,三萜类化合物茯苓酸(pachymic acid)、土牧酸(tumulosic acid)、三萜羧酸(triterpene carboxylicacid)、齿孔酸(eburioic acid)、松苓酸(pinicolic acid)等。亦含脂肪酸,如辛酸(caprylicacid)、十一酸(undecanoic acid)、月桂酸(lauric acid)、十二酸(dodecenoic acid)和棕榈酸(palmitic acid)。此外,尚含麦角甾醇(ergosterol)、树胶、甲壳质、蛋白质、脂肪、甾醇、卵磷脂、右旋葡萄糖、腺嘌呤(adenine)、组氨酸(histidine)、胆碱(choline)、B—茯苓聚糖分解酶、脂肪酶、蛋白酶等。茯苓的抗氧化和延缓衰老功能研究茯苓多糖抗动物衰老作用。采用正常小鼠和老龄大鼠为试验动物,观察茯苓多糖对丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶(MAO)活性和对动物抗寒和抗疲劳实验的影响。结果表明,茯苓多糖能不同程度增加血清中T—SOD和Cu—SOD活性,降低MDA含量,但对MAO活性则无明显影响。茯苓多糖还能延缓小鼠游泳死亡时间。结论:茯苓多糖有较好的抗动物衰老作用。探讨茯苓对老年大鼠红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,皮肤中SOD活性及羟脯氨酸含量的影响,进而推测茯苓延缓皮肤衰老的机制。Wistar大鼠分为青年对照组、老龄空白组、阳性对照组、茯苓低剂量组、茯苓中剂量组、茯苓高剂量组。分别予以生理盐水(20ml/kg),生理盐水(20ml/kg),维生素E(2g/kg),茯苓提取液2g/kg、4g/kg、8g/kg灌胃。30d后取材检测相应指标。结果表明,各组的羟脯氨酸含量均高于老年空白组(P<0.05).茯苓低剂量组、茯苓中剂量组、茯苓高剂量组中的红细胞及皮肤中SOD活性与老年空白组无显著差异(P>0.05)。结论:茯苓可能是通过提高皮肤中羟脯氨酸的含量来延缓皮肤衰老,而对SOD的活性没有影响。
黑芝麻为胡麻科植物脂麻Sesamum indicum DC.黑色种子,亦名胡麻、巨胜(《本经》)、乌麻、乌麻子(《备急千金要方》)、油麻(《食疗本草》)、黑芝麻(《三元延寿书》)。味甘,性平。归肝、肾经。功能:补肝肾、润五脏。主治:肝肾不足、虚风眩晕、风痹、瘫痪、大便燥结、病后虚羸、须发早白、妇人乳少。黑芝麻种子含脂肪油可达60%。油中含油酸、亚油酸、棕榈酸、花生酸、廿四酸、廿二酸等的甘油酯。亦含甾醇、芝麻素(sesamin)、芝麻酚(sesamol)、芝麻林素(sesamolin)、维生素E等。此外尚含叶酸18.45%、烟酸0.48%、蔗糖0.64%、卵磷脂0.65%、戊聚糖、蛋白质和多量的钙等。黑芝麻的抗氧化功能采用化学发光分析法,对从黑芝麻中提取的色素和多糖进行抵制全血发光和清除活性氧作用的研究。结果表明,黑芝麻多糖对全血化学发光的抵制作用比对非细胞体系产生的活性氧作用要强,而黑芝麻色素对细胞或非细胞体系所产生的活性氧都有较强的清除作用,提示黑芝麻多糖直接清除活性氧的能力较弱,而对吞噬细胞具有一定的免疫抵制作用。而黑芝麻素是黑芝麻成分中较强的自由基清除剂之一。
桃仁为蔷薇科植物桃Prunus Persica(L.)Batsch或山桃Prunusdavidiana(Carr.)Franch.的种子。味苦、甘,性平。入心、肝、大肠经。功能:破血行淤、润燥滑肠。主治:经闭、癓瘕、风痹、疟疾、跌打损伤、淤血肿痛、血燥便秘。主要成分含苦杏仁苷(amygdalin)、苦杏仁酶(emulsin)、尿囊素酶(allantoinase)、乳糖酶(lactase)、维生素B1、挥发油、脂肪油、油中主要含油酸甘油酯和少量亚油酸甘油酯。苦杏仁酶包括苦杏仁苷酶(amygdalase)及樱叶酶(prunase)。桃仁中的苦杏仁苷和杏仁中的苦杏仁苷一样,经酶或酸水解后产生氢氰酸、苯甲醛和葡萄糖。桃仁的药用功效主要体现在抗氧化方面:观察不同年龄大鼠体内脂质过氧化物(LPO)及红细胞超氧化物歧化本酶(SOD)含量。结果显示,大鼠随年龄增长,血浆及肝、脑组织中LPO含量升高。红细胞中SOD活性下降。但喂饲核桃仁3个月后的老龄大鼠与对照组相比。LPO含量下降(P<0.05)。SOD活性增高(P<0.05),肝、脑组织匀浆体外培养,加核桃仁试管中的LPO明显低于对照组(P<0.01)。结果表明:核桃仁确有一定的抗氧化作用。
蜂花粉花粉是植物花朵中的雄蕊产生的生殖细胞,是植物的生命之源。它不仅携带着生命的遗传信息,而且包含孕育着新生命所必需的全部营养物质。含20种氨基酸、30种活性酶、多种维生素、矿物质、粗纤维、核苷酸等。花粉的脂肪组成已发现的有月桂酸、十四烷酸、棕榈脂酸、十八烷酸、花生酸、油酸、十七酸、亚油酸、亚麻酸和其他脂肪酸,其中,引人注目的还有不可替代的不饱和脂肪酸——亚油酸和亚麻酸,数量占一半。花粉的磷脂有胆碱磷酸甘油酯、肌醇磷酸甘油酯、氨基乙醇磷酸甘油酯(脑磷脂)、磷脂酰基氯氨酸等,它具有很多重要的生理功能。抗氧化功能采用超生法,分别以甲醇、水为溶剂提取油菜和荷花的蜂花粉活性成分,通过测定油菜和荷花蜂花粉的提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除率及对脂质过氧化的抵制率,评价两种蜂花粉的抗氧化能力。结果表明:两种蜂花粉提取物均具有较强的抗氧化作用,油菜蜂花粉提取物比荷花蜂花粉提取物有更强的抗氧化性。油菜蜂花粉甲醇提取物对超氧阴离子自由基、羟基阴离子自由基清除率可达到83.2%、99.2%,对脂质过氧化的抵制率可达到92.2%。
银耳银耳(Tremella fuciformis Berk.)又称白木耳,隶属于担子菌亚门层菌纲、有隔担子菌亚纲、银耳目(Tremellales)、银耳科、银耳属。银耳是我国一种著名的食药两用菌。我国历代医药学家都认为,银耳具有“补肾、润肺、生津、止咳”之功效。据张仁安《本草诗解药性注》云,“此物有麦冬之润而无其寒,有玉竹之甘而无其腻,诚润肺滋阴要品”。银耳含蛋白质6.7%~10%,碳水化合物65%~71.2%,脂肪0.6%~12.8%,粗纤维2.4%~2.75%,无机盐4.0%~5.4%,水分15.2%~18.7%及少量维生素B类。银耳蛋白质中含有18种氨基酸,即亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、酪氨酸、脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸、甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、组氨酸、甲硫氨基酸和丁氨酸。银耳原是野生枯木上的胶质菌,近年来我国银耳以人工栽培为主。目前我国银耳年产量8000~10000t左右,单产和总产均居世界之首。银耳多糖是从银耳中提取的主要生理活性物质,具有多方面的保健作用。
黑木耳黑木耳是木耳的一种。因其生长在朽木上,形似人的耳朵,色黑或褐黑,故名黑木耳,又名木菌、树鸡。本品既可食用,又可入药,是药食兼用之品。黑木耳源于木耳科真菌木耳、毛木耳或皱木耳的子实体,多寄生在桑、栎、榆、杨、槐树等枯朽的枝干上,原为野生,现多为人工培植。我国现存最早的药学专著、汉代的(《神农本草经》就已经记载了它的药用价值。该书在桑根白皮条下云:五木耳能“益气不饥,轻身强志”;又云桑耳黑者,“主女子漏下赤白汁,血病,瘸瘕积聚,阴痛,阴阳寒热,无子。”以上所说的五木耳包括今之黑木耳,而桑耳黑者即为今之黑木耳之一种历代本草如南北朝梁代的《名医别录》、唐代的《食疗本草》、明代的《本草纲目》、当代的《中华本划》等,对其均有论述。据《中华本草》记载:黑木耳甘性平,归脾、肺、肝、大肠经。主治气虚血亏,肺虚久咳,咯血,痔疮出血,妇女崩漏,***,踢打损伤等。现代实验研究证明,黑木耳主要含有蛋白质、脂肪、卵磷脂、鞘磷脂、多种维生素,以及钙、磷、铁等无机成分,具有抗血凝,抗血栓形成,促进免疫功能,调节血脂,抗动脉粥样硬化,降血糖,延缓衰老,抗溃疡,抗真菌等广泛的药理作用。
猴头菇猴头菇学名Hericium erinaceus(Bull.Fr.)Pers.俗名:猴头菌、猴头、猴头蘑、剌猬菌、羊毛菌、猴菇菌。猴头菇隶属于担子菌纲、非褶菌目、猴头菌科、猴头菌属。猴头菇性平,味甘。健胃,补虚,抗癌。中医认为,猴头菇性平味甘,有利五脏、助消化、滋补身体等功效。猴头菇是中国传统珍贵食用菌,与熊掌、海参、鱼翅并称“四大名菜”,并有“山珍猴头、海味燕窝”之说。20世纪70年代以来,现代医学陆续证明猴头菌有良好的药用价值,临床应用表明,猴头菇可治疗消化不良、胃溃疡、胃窦炎、胃痛、胃胀及神经衰弱等疾病。近年来的研究还表明,猴头菇具有抗癌作用。据报道,猴头菇对小白鼠肉瘤S—180有显著的抑制作用,对166例胃癌、贲门癌、食道癌等消化道恶性肿瘤患者试用,有效率达69.3%,显效15%。适宜患有胃病,包括慢性胃炎,胃及十二指肠溃疡者食用;适宜体质虚弱,营养不良,神经衰弱者食用;适宜痛症患者,尤其是食道癌、贲门癌、胃癌之人食用;也适宜心血管疾病患者食用。猴头菇补虚健胃,诸无所忌。猴头菇是被人们誉为“植物肉”的保健食品。据北京食品研究所测定,在100克干猴头菇中,含蛋白质26.3克,比香菇高出1倍;在所含的16种氨基酸中,有7种为人体必需氨基酸。所含脂肪量较少。另含维生素A原、维生素B1、维生素B2和尼克酸、多糖体、多肽类及微量元素钙、磷、快,以及食物纤维等营养成分。据临床研究证实,癌症患者使用猴头多糖体后,机体产生了干扰素,增强了抗癌效果。常食猴头菇,还能升高人体免疫球蛋白和白细胞,增强人体免疫功能,故对痛症患者颇有益处。
香菇香菇(Lentinus edodes)又名冬菇,属担子菌纲、伞菌目、侧耳科、香菇属,其产量占世界食用茹类总产量的15%以上,仅次于双孢菇,是栽培的第二大类食用菌。香菇香气浓郁、味道鲜美、营养丰富,具有高蛋白、低脂肪、低热量、多种维生素、氨基酸并存的特点,有健脾益气、扶正祛邪、疏风散淤、调和阴阳的功效,是食、药用菌中的佳品。现代医学研究发现,经常食用香菇有降低胆固醇、防止血管硬化、促进儿童生长发育、增强人体免疫功能和防治癌症等作用。香菇多糖为其中的主要生理活性物质,具有显著增强癌症患者的抵抗力等多种生物学功能。已明确有免疫活性的香菇多糖只有β-葡聚糖一类。
葡萄籽葡萄营养丰富,富含钾、铁、硼等矿物质、维生素B1、维生素B2、烟酸、维生素E、酒石酸、草酸、柠檬酸等营养成分。性甘、酸,入脾、肺、肾经,具有多种治疗保健功效。中医认为其果、根和藤均可入药。葡萄籽提取物(grape seed extract,EGS)中含有大量多酚类、脂质类和矿物类等有益于人体的化学成分,对多种疾病有预防和治疗作用。文献中早有记载:《本草再新》:“暖胃健脾,治肺虚寒嗽,破血积疽瘤。”《随息居饮食谱》:“补气,滋肾液,益肝阴,强筋骨,止渴,安胎。”《百草镜》:“治筋骨湿痛,利水甚捷,除遍身浮肿。”《本草图经》:“治时气发疮疹不出者,研酒饮。”《陆川本草》:“滋养强壮,补血,强心利尿。治腰痛,胃痛,精神疲惫,血虚心跳。”《神农本草经》:“主筋骨湿痹,益气倍力,强志,令人肥健耐饥,忍风寒。”《滇南本草》:“大补气血,舒筋活络,泡酒服之。治阴阳脱症,又治盗汗虚症。汁,治咳嗽。”葡萄籽提取物中的化学成分多酚类物质葡萄籽中含有多酚类物质(GSP),主要有儿茶素类和原花青素类。儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯,是葡萄籽中主要的单聚体,也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。葡萄籽提取物原花青素(GSPE)是由不同数目的黄烷醇聚合而成,目前研究最广的主要是由(+)-儿茶素((+)-catechin)、(-)-表儿茶素((-)-epicatechin)为单体聚合而成的这类化合物。二至四聚体称为寡聚体(OPC),五聚体以上称为高聚体(PPC)。其生物活性随聚合度增大、增强。从葡萄籽中提取的生物类黄酮OPC与大多数黄酮相比,结构特殊,水溶性好,有效性高,生物利用度在90%以上,极易被人体吸收。脂质类及其他化学成分葡萄籽中约含有10%~15%的葡萄籽油,其主要成分为亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸和甾醇等以及多羟基类(PHS)如白藜芦醇等。葡萄籽油中含矿物元素钾、钠、钙和铁量较高,并含多种维生素。酚酸类主要包括原儿茶酸、香豆酸、没食子酸、咖啡酸和丁香酸等。生理活性抗氧化作用GSPE能够有效地清除过量自由基,对氧化损伤有保护作用。体外实验采用化学发光法和细胞色素C还原法测定GSPE、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶和甘露醇清除超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。结果表明,GSPE在100mg/L浓度时对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制能力为78%和81%,维生素C是12%和19%,维生素E是50%和75%,SOD和过氧化氢酶联合作用抑制超氧阴离子自由基约为83%,甘露醇抑制羟自由基约为87%,说明GSPE具有比上述两种维生素强的抗氧化能力。GSPE能够还原维生素E自由基而使维生素E再生,从而减少细胞内维生素E的损耗。GSPE与维生素E结合使用能明显延迟羟自由基诱导的卵磷脂脂质过氧化作用形成的共轭二烯,表明GSPE对维生素E的抗氧化作用具有明显的协同增强作用。对大鼠喂食GSPE高胆固醇-缺维生素E饲料,其主动脉、心、肝、肠、肌肉和肾中过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和SOD活性能明显恢复到喂食正常饲料大鼠的水平,表明GSPE可增强机体组织抗氧化酶***的能力,从而增强抗原化能力。PHS亦能使家兔血清SOD、谷胱甘肽过氧化物酶含量升高,提高机体抗氧化酶的活性,减少过氧化脂质的生成。
番茄红素番茄红素(lycopene)为暗红色粉未或油状液体,油溶液呈黄橙色,属胡萝卜素类,纯品为针状深红色晶体(从二硫化碳和乙醇的混合液析出者)。熔点174℃,可燃。耐热和耐光性优良。不溶于水,易溶于二硫化碳(1g/50ml)、沸腾***(1g/3L)、正已烷(1g/14L,0℃),溶于氯仿和苯;微溶于乙醇和甲醇。因属脂溶性色素,溶于油脂后方能被吸收利用。成熟的番茄中含量特别多。沿存在于灯笼大红辣椒、蔷薇果、西瓜、番石榴、君影草果实、柿子、南瓜的果肉、葡萄柚的果实以及红色细菌等中。其抗氧化功能番茄红素对臭氧所致大鼠氧化损伤的保护作用。利用大鼠吸入臭氧制造损伤模型,同时灌胃番茄红互,6周后检测大鼠血清及肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力及丙二醛(MDA)含量。表明,高、低剂量组与损伤模型组相比,SOD和GSH—Px活力升高,MDA含量下降,差异显著(P<0.05)。结论:番茄红素对臭氧所致大鼠氧化损伤具有一定的保护作用。观察番茄红素对大鼠抗氧化酶***的影响。大鼠饲喂番茄红素4周后处死,测定血清和肝匀浆的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力、总抗氧化能力(T—AOC)、丙二醛(MDA)及还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果表明,各番茄红素给药组的大鼠血清和肝组织的SOD活性、GSH—Px活力及T—AOC上升,MDA含量降低,与空白组相比,在统计学上差异有显著性(P<0.05)。结论:番茄红素可以提高大鼠机体的抗氧化能力,抵制脂质过氧化。延缓衰老功能采用脉冲辐射技术产生的CCI300·自由基模型,考察天然维生素E和番茄红素与该自由基反应时的协同增效关系。在此基础上,以这两种抗氧化剂为主要成分配成复合抗氧化剂,利用果蝇、老龄大鼠为生存动物模型。分别考察了该复合抗氧化剂对果蝇寿命、大鼠血清中超氧化歧化酶(SOD)活性和过氧化脂质(LPO)含量的影响。结果表明,该复合抗氧化剂具有协同清除自由基的作用;能够明显延长果蝇的平均寿命和最高寿命;具有显著增强SOD活性及降低LPO的功能。提示该复合抗氧化剂具有一定的抗氧化、延缓衰老的作用。
蜂王浆蜂王浆的营养价值高于蜂蜜。蜂王浆中含水分高达2/3,其余是蛋白质、氨基酸、无机盐和B族维生素,蜂王浆中还含有少量的核苷酸、激素、酶等生物活性物质。由于蜂王浆口味欠佳,带有辛辣涩味,一般常与10倍的蜂蜜混合后食用;亦可制成片剂、胶囊或口服液等剂型服用。主要成分是10—羟基—2—癸烯酸(亦称王浆酸,简称10—HAD,约含2%,C10H1803,186.25),另含水分62.5%~68.5%,蛋白质11.0%~14.5%,有多种维生素、腺苷(UDP—葡糖、UDP—葡糖酸、UD—Px)、尿苷、鸟苷、胞苷,有酸性及碱性磷酸酯酶、胆碱酯酶等酶类。乳白至淡黄色浆状物质,有酸涩辛辣味,略甜,有耐热,易溶于水。
本发明公开的具有抗氧化功能的营养食品,其主要是由药食两用药石柱人参、菊花、短梗五加茶、茯苓、黑芝麻、桃仁、蜂花粉、银耳、黑木耳、猴头菇、香菇、葡萄籽、番茄红素、蜂王浆等按一定重量配比制备而成,这个组方的其中一些药食两用药通过抗脂质过氧化及清除氧自由基而起到延缓衰老的作用。石柱人参乙醇提取活性成分和短梗五加茶、猴头菇、香菇的水溶成分具有很强的抗脂质过氧化和清除氧自由基的作用。老年人的基础代谢水平低下,使机体对物质代谢的功能明显下降,加速老化。人参、菊花、桃仁等能降低血糖,又有降低血脂的作用,能调节机体的糖代谢和脂质代谢。具有补肾助阳功能的药食两用药人参、黑芝麻、蜂花粉、猴头菇、香菇、蜂王浆具有抑制单胺氧化酶(MAO—B)活性的作用,还有改善衰老脑症状,其机制是通过提高某些神经递质受体的结合容量,改变某些酶的活性等途径而实现的。组方中的药食两用的温肾助阳药可改善老年人肾阳虚症状,提高眨眼值及对生长激素释放因子(GRF)的反应,产生对垂体激素作用,同时可使肾虚患者低下的T3、T4含量升高,产生对甲状腺激素的作用;组方中人参、黑芝麻、蜂花粉、蜂王浆对性腺的作用研究表明,补肾***可促性腺发育和功能。小鼠腹腔注射石柱人参、蜂花粉提取液能明显增加血浆睾酮的作用,并明显促进睾丸组织增生与分泌,亦能明显增加腺垂体、卵巢和子宫的重量,卵巢HCC/LH受体特异结合力明显提高。组方中的药食两用药葡萄籽、番茄红素等对胸腺的作用试验表明,均能提高小鼠胸腺重量,改善胸腺超微结构的老年性变化,增加胸腺胞浆蛋白、核RNA和DNA的含量,延缓胸腺功能的退化作用,改善老年胸腺依赖性免疫功能。本组方受试物能使老年大鼠编码酶蛋白的基因表达水平增强,从而提高了SOD和CAT的活性和对基因损伤的修复作用;还可以通过提高DNA甲基化水平,维持基因正常表达来延缓衰老;能明显提高老龄大鼠DNA合成水平,提高骨髓有核细胞内DNA、核酸的含量,提高DNA聚合酶活力,还能提取鼠肝DNA甲基化酶活动力及DNA甲基化水平;对老年肾虚者外周血白细胞线粒体DNA缺乏的影响,表明可以减少白细胞线粒体的缺失,减少有缺陷的呼吸链,增加细胞所需要的能量,从而达到维持细胞正常生理、延缓衰老的作用。
现代中医理论中关于中药组方应秉承君、臣、佐、使原则,在本发明公开的具有抗氧化功能的营养食品组方中,也得以体现,本组方主要是由药食两用药石柱人参、菊花、短梗五加茶、茯苓、黑芝麻、桃仁、蜂花粉、银耳、黑木耳、猴头菇、香菇、葡萄籽、番茄红素、蜂王浆等按一定重量配比制备而成,其中以石柱人参、短梗五加茶、蜂王浆为君药;为加强其效果和增加适应面,又采用菊花、茯苓、桃仁、银耳、黑木耳、葡萄籽、番茄红素为臣使,来加强药力;佐以黑芝麻、蜂花粉、猴头菇、香菇等。上述各种原料经过采取乙醇--水溶液提取得到的活性成分,经反复实验证实,本发明药物选择以石柱人参和短梗五加茶、蜂王浆等14种药食两用药物进行组合,将这些药物组合使得各药物功效产生协同作用,从而能够有效表现出其所具有的抗氧化延缓衰老的作用,效果十分明显而迅速。
本发明营养食品组合成分的用量,是经过发明人进行大量探索总结得出的,各组分用量需的各种常规辅料,如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型,如丸剂、冲剂、片剂、胶囊剂、口服液等。例如可以将这些药食两用原料研成粉末混合均匀制成颗粒剂冲服;还可以将这些药食两用原料一起水煎,然后浓缩水煎液等;但是这些不能用于限制本发明的保护范围。
具体实施方式
以下通过实施例和试验例两部分,来进一步阐述本发明所述营养食品的有效结果,这些试验例包括了本发明营养食品的功能学试验和安全性毒理学试验。
实施例1
(1)、所述的营养食品,其优选的药食两用原料的重量各为:石柱人参1000g、菊花1000g、短梗五加茶3000g、茯苓6000g、黑芝麻3000g、桃仁2000g、蜂花粉3000g、银耳2000g、黑木耳2000g、猴头菇3000g、香菇3000g、葡萄籽1000g、番茄红素20g、蜂王浆500g。
(2)、制备方法:按说明书所介绍的制备方法进行。
实施例2、
(1)、所述的营养食品,其优选的药食两用原料的重量各为:石柱人参2000g、菊花2000g、短梗五加茶6000g、茯苓12000g、黑芝麻6000g、桃仁4000g、蜂花粉6000g、银耳4000g、黑木耳4000g、猴头菇6000g、香菇6000g、葡萄籽2000g、番茄红素40g、蜂王浆1000g。
(2)、制备方法:按说明书所介绍的制备方法进行。
实施例3、
(1)、所述的营养食品,其优选的药食两用原料的重量各为:石柱人参3000g、菊花3000g、短梗五加茶9000g、茯苓18000g、黑芝麻9000g、桃仁6000g、蜂花粉9000g、银耳6000g、黑木耳6000g、猴头菇9000g、香菇9000g、葡萄籽3000g、番茄红素60g、蜂王浆1500g,
(2)、制备方法:按说明书所介绍的制备方法进行。
试验例1、抗氧化营养食品的功能学的动物实验
1.试验项目动物实验体重:过氧化脂质含量:丙二醛或脂褐质;抗氧化酶活力:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶;
2.试验原则
(1)动物实验所列的指标均为必测项目。
(2)过氧化操作模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
3.动物实验检验方法
(1)动物选择选用8~12月龄以上老龄小鼠,测定GSH、SOD指标时,可以选用正常成年动物。单一性别,小鼠每组10~15只,大鼠8~12只。
(2)剂量分组及受试样给予时间实验设3个剂量组、1个空白对照组,以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组,别设两个剂量组,空白对照组。受试样品给予30天。
(3)实验方法过氧化操作模型(D—半乳糖模型)。
原理:D—半乳糖供给过量,超常产生活性氧,打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态,引起过氧化效应。
4.动物实验结果判定
抗氧化酶活性中任一指标和过氧化脂质含量指标均为阳性,可判定该受试样品抗氧化动物实验结果阳性。
本营养食品的抗氧化动物实验结果见表1。
表1 本营养食品对老龄小鼠抗氧化各项指标的影响(X±SD)
*与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05)。
经口给予老龄小鼠不同剂量本营养食品36d,与空白组比较,该受试物在中剂量组能降低心肌脂褐素(P<0.05)、降低血清丙二醛含量(P<0.05)、提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05);在高剂量组能降低心肌脂褐素(P<0.05)、降低血清丙二醛含量(P<0.05)、提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05)。该受试物对小鼠体重增长无不良影响。根据试验结果可以判定该营养食品具抗氧化延缓衰老效果
试验例2、抗氧化营养食品的功能学的人体试食试验
1、试验项目
人体试食试验丙二醛;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽过氧化物酶;
2.试验原则
(1)人体试食试验所列的指标均为必测项目。
(2)在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3.试验方法和检验方法
(1)受试者纳入标准选年龄在45~65岁,身体健康状况良好,无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患,无长期服药史,志愿受试保证配合的人群。
(2)排除受试者标准①妊娠或哺乳期妇女,对保健食品过敏者。②合并有心、肝、肺、肾和造血***等严重全身性疾病患者。③短期内服用与受试功能有关的物品,影响到对结果的判断者。
(3)受试者分组对受试者按MDA、SOD、GSH—Px水平随机分为试食组和对照组,尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、生活饮食习惯等,进行均衡性检验,以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。
(4)试验方法采用自身和组间两种对照设计。试验组按推荐服用方法、服用量每日服用受试产品,对照组可用具有同样作用的阳性物,也可用安慰剂或阴性对照。观察时间不少于3个月,试验期间对照组和试食组原生活、饮食不变。
(5)观察指标(安全性指标)①一般状况,包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等;②血、尿、便常规检查;③肝、肾功能检查;④胸透、心电图、腹部B超检查。
4.结果判定
人体试食试验丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项实验中任一项实验结果阳性,可判定该受试样品具有抗氧化作用。
本营养食品的抗氧化人体实验结果见表1。
表1 本营养食品对人体抗氧化各项指标的影响(X±SD)
*与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05)。
经人体试食试验不同剂量本营养食品36d,与空白组比较,该受试物在中剂量组能降低心肌脂褐素(P<0.05)、降低血清丙二醛含量(P<0.05)、提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05);在高剂量组能降低心肌脂褐素(P<0.05)、降低血清丙二醛含量(P<0.05)、提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05)。该受试物对体重增长无不良影响。根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)对抗氧化功能保健食品的判定标准可判定该功能性营养食品抗氧化功能人体试验结果阳性。
试验例3、本抗氧化功能性营养食品的安全性毒理学动物30天喂养试验
1.材料与方法
1.1 样品:本营养食品,由北京惠中铭捷生物科技有限公司送检。性状:棕色膏状物。批号:20070421。比重:1.03g/mI。人体日摄入量:1.12g/d。
1.2 溶剂:玉米油。
1.3 实验动物:SPF级SD大鼠80只,雌、雄各半,体重60-80g。由北京大学医学部实验动物科学部提供。动物合格证号:SCXX(京)2006-0008。动物饲养于屏障环境。
1.4 动物饮料:由北京市科奥协力饮料有限公司提供。饲料合格证号:SCXX(京)2005-0007。
1.5 仪器:日本光电MEK-6318K全自动血球计数仪,荷兰SELECTRA-E自动生化分析仪。
1.6 试验方法:按照***《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)30天喂养试验规定的方法进行。
1.6.1 分组:动物按体重随机分为四组即阴性对照组和低、中、高三个剂量组,每组各20只,雌雄各半。动物采用单笼饲养。
1.6.2 灌胃:样品以玉米油为溶剂,稀释成所需浓度。高、中、低剂量组分别相当于人日推荐量的100、50和25倍。即1.87、0.94和0.47g/kg体重/天。每天在相同时间经口灌胃一次,灌胃量0.5ml/100g体重。对照组给予等量玉米油。每周灌胃7天,根据动物体重增长调整灌胃量,连续灌胃30天。于末次灌胃的次日处死动物。
1.6.3 观察:
一般观察:每天观察并记录动物的一般表现(进食、皮毛、粪便性状和口、鼻、眼、***等有无分泌物等)、行为、中毒症状和死亡情况。每周称一次体重,记录食物摄入量,计算食物利用率。
血常规及生化指标:给药第30天禁食16小时,股动脉取血,进行下列检查:血红蛋白和红细胞计数,白细胞计数和白细胞分类及血小板计数;丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、血糖(GIu)、总胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)检测。
***解剖和病理组织学检查:称取各组动物肝脏、脾脏、肾脏、性腺(睾丸/卵巢),并计算脏器系数。取各组动物肝脏、脾脏、肾脏、胃和十二脂肠、性腺(睾丸/卵巢),肉眼观察有无病理变化。10%***固定,常规HE染色,进行组织病理学检查。因对各剂量组动物作大体检查未发现明显病变,生化指标也未见明显改变,故只进行高剂量组和对照组动物的主要脏器的组织病理学检查。
1.6.4 统计学分析:各组数据分别录入Excel数据库,计算均数和标准差。各剂量组与对照组进行比较,进行差异的统计学分析。
2.结果
2.1 一般观察
本营养食品在30天的试验周期内,各剂量组均没有动物死亡,各组动物均未见明显中毒反应症状体征。
2.2 对体重及食物利用率的影响
本营养食品仅雄性动物的体重第一周与对照组比较有明显增加。其余各剂量组各时间点,动物体重与对照组无明显差异(见表1)。
表1 本营养食品对大鼠体重的影响(X±s)
本营养食品仅雄性动物的体重第一周与对照组比较有明显增加。其余各剂量组各时间点,动物体重与对照组比较无明显差异(见表2)。各受试组动物灌胃4周后,体重增长、进食量和总食物利用率与对照组比较均无明显差异(见表3)。
表2 本营养食品对大鼠每周食物利用率的影响(X±s)
※p<0.05
表3 本营养食品对大鼠总食物利用率的影响(X±s)
注:总食物利用率=(第4周体重-初始体重)÷总进食量×100%
2.3 对血液学指标的影响
本营养食品各剂量组动物的血红蛋白、红细胞计数和白细胞计数、血小板计数与对照组比较均无明显差异(见表4)。各组动物的淋巴细胞、中性粒细胞和其他细胞百分数与对照组比较均无明显差异(见表5)。
表4 本营养食品对大鼠血液学指标的影响(X±s)
表5 本营养食品对大鼠白细胞分类的影响(X±s)
2.4 对血清生化指标的影响
本营养食品中和高剂量组雌性动物的胆固醇及低和中剂量组雄性动物的尿素氮与对照组比较明显降低。其它各项血清生化指标,受试物组与对照组比较均无明显差异(见表6)。
表6 本营养食品对大鼠血清生化指标的影响(X±s)
与对照组比较※P<0.05,※※P<0.01.
2.5 对动物脏器与体重比值的影响
本营养食品各剂量组动物的脏/体比与对照组比较均无明显差异(见表7)。
表7 本营养食品对大鼠脏体比的影响(X±s)
※雄性为睾丸,雌性为卵巢
2.6 大体解剖观察与病理组织学检查结果
2.6.1 大体解剖观察
本营养食品各剂量组及对照组各脏器均未见明显的肉眼可见病理学改变。
2.6.2 病理组织学检查
对本营养食品高剂量组和对照组大鼠各20只进行病理组织学检查,结果显示肝脏、脾脏、肾脏、胃和十二指肠、性腺(睾丸或卵巢)病理组织学检查均未见明显与给受试物相关的病理改变。
高剂量组和对照组动物重要脏器的病理组织学检查结果如下:
肝脏:高剂量组和对照组雌雄性动物肝脏的肝细胞大致正常。各组均有部分动物出现少量点状的肝小叶内或汇管区的慢性炎细胞浸润,病变均很轻,在对照组和高剂量组雌雄性动物之间均无明显差异。在雌性高剂量组有两只动物出现了汇管区附近的轻度脂肪变性,由于病变仅在个别动物出现,且病变范围小、程度较轻,可能为动物自发病变。
脾脏:高剂量组和对照组雌雄动物的脾脏白髓正常,生发中心正常。各组红髓均可见扩张充盈,造血细胞可见。仅有极个别动物出现脾脏白髓轻度萎缩或扩张、髓外造血活跃或减低的现象,在对照组和高剂量组雌雄性动物之间均无明显差异。
肾脏:高剂量组和对照组雌雄性动物肾脏的肾小球、肾小管上皮未见明显病变。每组均有个别动物出现间质内少量慢性炎症细胞浸润或血管淤血扩张,在两组间无明显差异。
胃及十二批肠:高剂量组和对照组雌雄性动物前胃上皮细胞、腺胃、十二指肠的粘膜上皮细胞完整、结构基本正常。仅有极个别动物出现胃或肠粘膜下少量炎症细胞浸润的现象,程度很轻,在对照组和高剂量组雌雄性动物之间均无明显差别。
睾丸:曲细精管生***组合正常,生殖波存在,***正常。
卵巢:可见各发育期卵泡,黄体存在。
病理组织学检查结论:本营养食品高剂量组的肝、脾、肾、胃、肠、睾丸、卵巢病理组织学检查,均未见明显的与经药有关的特异病理改变。
3.结论:
本营养食品大鼠30天喂养试验的结果表明,按人推荐摄入量的100倍、50倍和25倍剂量灌胃,动物一般行为体征、体重增长、食物利用率、血液学、血液生化学、病理组织学等各项指标与对照组比较均未发现与给受试物相关的明显毒性表现。所以,本营养食品属实际无毒。
Claims (8)
1、一种具有抗氧化功能的营养食品及其制备方法,主要由如下重量份的药食两用原料制成:石柱人参1-5份、菊花1-5份、短梗五加茶3-9份、茯苓3-9份、黑芝麻3-9份、桃仁1-5份、蜂花粉3-9份、银耳1-5份、黑木耳1-5份、猴头菇1-5份、香菇2-8份、葡萄籽1-5份、番茄红素0.02-0.06份、蜂王浆0.5-1.5份。
2、根据权利要求1所述的营养食品,其优选的药食两用原料的重量份为:石柱人参1份、菊花1份、短梗五加茶3份、茯苓6份、黑芝麻3份、桃仁2份、蜂花粉3份、银耳2份、黑木耳2份、猴头菇3份、香菇3份、葡萄籽1份、番茄红素0.02份、蜂王浆0.5份。
3、根据权利要求1或2所述的营养食品的制备方法:
(1)按比例称取石柱人参、茯苓等2味药食两用原料,提取用85%乙醇提取,回流3小时,提取二次,合并提取液真空浓缩得干浸膏1;
(2)按比例称取黑芝麻、葡萄籽、桃仁等3味药食两用原料,用95%乙醇提取,回流3小时,提取二次,将提取液真空浓缩得干浸膏2;
(3)按比例称取短梗五加茶、猴头菇、香菇等3味药食两用原料,用蒸馏水提取,回流3小时,提取二次,将提取液真空浓缩得干浸膏3;
(4)按比例称取菊花、银耳、黑木耳3味药食两用原料,用70%乙醇提取,回流3小时,提取三次,将提取液真空浓缩得干浸膏4;
4、合并干浸膏1、2、3、4将其粉碎成100目粉,再合并蜂花粉、番茄红素2味药食两用原料,共同粉碎成200目粉,即为本发明的活性成分。
5、按比例称取蜂王浆药食两用原料,合并权利要求4所述的本发明的活性成分粉,按比例调合后,按软胶囊的制做方法,灌装入胶囊壳。每粒软胶囊含活性成分560mg。
6、根据权利要求4所述的制备方法,浓缩后得到的干浸膏还需在50-60℃下干燥3小时。
7、本组方中所述的石柱人参,是指主产于中国.辽宁省宽甸石柱子地区的,参令在15年生以上的林下参。
8、本组方中所用的短梗五加茶,是用我们已经申报的专利技术培育的,短梗五加茶树的蕊叶特制的。
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