CN101514219B - 一种黑米花色素苷的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种黑米花色素苷提取新方法，特别涉及提取去杂工艺的改进，该方法特征在于，经过以下步骤：(1)黑米预处理；(2)极性溶剂提取去杂；(3)乙醇去杂；(4)酸化乙醇浸提液提取；(5)辅助措施的采用。本发明主要改进是提取过程中分为去除杂质工序和纯化工序，本发明的优点是耗时短、成本低、纯度高，同时本发明还具有工艺简单，便于操作的特点。

Description

一种黑米花色素苷的提取方法

技术领域

本发明涉及一种花色素苷提取方法，具体涉及从黑米提取花色素苷的方法。

背景技术

黑米是脱去谷壳的黑色糙米，颜色是由于色素(花青素)在种皮和谷壳上沉积而成，黑米色素的主要活性物质是花色素苷，为黄酮花色素苷类化合物，属植物多酚类化合物，是水溶性黄酮类色素中最重要的一类，黑米中天然花色素苷含量很高，为5000～15000mg/kg。研究证明花色素苷的具有广泛的生物医学活性；如抗氧化以及清除自由基功能，改善血脂和胆固醇，保护心血管作用；抗炎作用，抗突变活性，抗肿瘤并抑制癌细胞的侵入和转移，降血压降血糖等活性。

目前，国内关于黑米花色素苷的制备，一般是分为黑米色素的提取和花色素苷分离纯化两个步骤。

有关黑米天然色素的提取已有很多报道，常规提取方法所得到的花色素苷大都存在着萃取速率和萃取率低、纯度更低(10％以下)等缺点，故一般只能作为食品添加剂或天然着色剂使用。而要发挥花色素苷有效的药理活性就必须提高其纯度，通常使用层析等方法，常用的层析柱有硅胶柱、氧化铝柱、大孔吸附树脂柱及凝胶柱。但这些法也存在耗时长、成本高、操作复杂不便于大量制备等缺点。而且由于这两个步骤的工作通常是由具有不同专业背景的人员根据各自的需求分别完成的，这样就会导致提取和分离纯化两个步骤的分离或脱节，时间跨度太长，影响黑米中花色素苷的提取效益。

所以需要一种简易、有效的黑米花色素苷制备方法，在提取环节中即可得到较高纯度(10％以上)的花色素苷。这样可以节省后续分离纯化的时间和成本，有利于花色素苷的生产，同时也可以应用于一些初步的活性实验研究。申请号为200510049274.0专利中所公开“黑米中花色素苷提取方法”，其中使用了纤维素酶酶解，可以达到较好的提取效果，但是由于费用和操作的问题，限制了进一步的推广。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够降低提取成本，工艺简单，又具有较高纯度的黑米花色素苷提取方法。可以部分的节约柱层析所耗的时间和成本。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：它是在现有黑米中花色素苷提取方法的基础上改进而成的，其主要改进之处在于将花色素苷的提取分为两个工序；即去除杂质工序和酸化乙醇浸提工序，从而达到提高花色素苷纯度的目的。

1、去除杂质工序：黑米加工成黑米粉、极性溶剂浸提去除杂质和乙醇浸提去除杂质。极性溶剂为石油醚和水。极性溶剂浸提去除杂质的加热回流浸提时间为60min。乙醇浸提去除杂质，分别采用80-90％和10-20％乙醇浓度浸提。

2、酸化乙醇浸提工序：酸化乙醇提取花色素苷的乙醇浓度为50-60％。温度50-60℃，pH2-3，这种环境中花色素苷稳定性最好；料液比1∶5-7、时间1h-2h，用柠檬酸来调整pH值。

一种黑米中花色素苷提取方法，其工艺步骤如下：

a、黑米进行预处理；主要是将黑米表皮层与米芯分离；

b、针对黑米存在的脂溶性和水溶性杂质，分别采用弱极性和强极性的溶剂进行去杂；

c、再以高浓度和低浓度的乙醇浸提去除与花色素苷极性相似的杂质；

d、最后以50-60％酸化乙醇提取花色素苷；

e、提取过程中的辅助措施为水浴加热和超声辅助。

本发明的优势为：

1.花色素苷的产率和纯度都较高；

2.相对于柱层析纯化方法具有成本低廉，耗时短的优势；

3.具有工艺流程简单，便于操作的特点。

具体实施方式

下面具体举例说明，但实际操作并不局限于此例。

实施例1一种黑米中花色素苷提取工艺

1.选取外被色深黑粳米，经碾米机过40目筛，制成黑米粉，目的是使富含花色素苷的黑米表层与黑米芯剥离，也提高了其与溶剂的接触面积。

2.称取一定量的黑米粉，加入石油醚，料液比1∶5，加热回流浸提60min，沥去石油醚部分，以去除脂溶性杂质。

3.然后用蒸馏水(相当于乙醇的浓度为0)，料液比1∶5，浸提60min，沥去水部分，以去除水溶性杂质。

4.再用90％的乙醇(高浓度的乙醇)，料液比1∶5，浸提60min，沥去乙醇部分，去除醇溶性杂质。

5.再用10％的乙醇(低浓度的乙醇)，料液比1∶5，浸提60min，沥去乙醇部分，去除杂质。

6.最后加浸提液(含1.0％柠檬酸，60％乙醇)，料液比1∶5，浸提60min，重复2次，去除色素米粉，合并提取液，真空抽滤去杂。

7.同时以60℃水浴和超声50KHz辅助浸提。

8.将过滤液减压蒸馏，经冷冻干燥得粉末状黑米花色素苷。

实施例2常规的方法(叶信潮法)

1.黑糙米加浸提液浸提1d，过滤，重复2次，合并3次浸提液，去除色素糙米；

2.浸提液减压蒸馏，回收浸提液，得到膏状黑米色素；

3.加石油醚回流，浸提1h，去除含脂肪石油醚，同时回收石油醚；

4.黑米色素加甲醇重溶，过滤，去除甲醇不溶液；

5.色素甲醇液，减压蒸馏，得黑米色素，80℃干燥得黑米色素。

实施例3按200510049274.0专利进行生产

用申请号为200510049274.0专利中所公开黑米中花色素苷提取方法进行生产。

1.以黑米的糙米粒为原料，精选去杂后，用纤维素酶酶解黑糙米粒的表层，使花色素苷易于分离；

2.再用90-95％的乙醇浸提和终止酶解反应，沥去醇溶性杂质；

3.将经过酶解并去醇溶性杂质后的黑糙米粒用45-55％浓度的乙醇萃取；

4.将萃取后的溶液减压去除乙醇，将去除乙醇后的萃取液喷雾干燥成黑米花色素苷粉末。

结果比较

将实施例1与2、3提取得到的花色素苷进行相关的检测和鉴定。其中纯度检测采用高效液相色谱法，结构鉴定采用紫外可见光光谱和质谱分析法。

结果列表对比，其比较的内容主要是产率和纯度项目，对比如表所示：

从表中可以看出，本发明即实施例1提取的黑米花色素苷与实施例2相比：所耗时间短、产率高、纯度则更高；与实施例3相比较：耗时与纯度都很接近，但由于没有使用纤维素酶，所以工艺相对简单而容易掌握，成本也较为低廉，适合规模制备。实施例1方法得到的花色素苷纯度较高，可以直接用于药理活性的研究。

Claims (1)

1.一种黑米花色素苷提取工艺，其特征在于包括如下步骤：

①选取外皮色深黑粳米，经碾米机过40目筛，制成黑米粉；

②称取一定量的黑米粉，加入石油醚，料液比1∶5，加热回流浸提60min，沥去石油醚部分，以去除脂溶性杂质；

③然后用蒸馏水，料液比1∶5，浸提60min，沥去水部分，以去除水溶性杂质；

④再用90％的乙醇，料液比1∶5，浸提60min，沥去乙醇部分，去除醇溶性杂质；

⑤再用10％的乙醇，料液比1∶5，浸提60min，沥去乙醇部分，去除杂质；

⑥最后加浸提液，料液比1∶5，浸提60min，重复2次，去除色素米粉，合并提取液，真空抽滤去杂；所述浸提液含有1.0％柠檬酸，60％乙醇；

⑦同时，以60℃水浴和超声50KHz辅助浸提；

⑧将过滤液减压蒸馏，经冷冻干燥得粉末状黑米花色素苷。