CN101437533B - 抗分泌蛋白对于治疗间室综合症的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及抗分泌蛋白，或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片断，和/或其药物学活性盐，对于制造用于治疗和/或防止间室综合症的药物合成物和/或医疗食品的应用。可能引起间室综合症或各种其他病症的原因(例如病毒和细菌性感染)也包括在本发明内。而且，本发明涉及用于治疗和/或防止哺乳动物间室综合症的方法。

Description

抗分泌蛋白对于治疗间室综合症的应用

技术领域

本发明涉及间室综合症领域，并涉及与之相关的多种病症。更具体地说，本发明涉及体内流体、盐和物质任选地为了正常化的目的在细胞与其他细胞外空间以及间室内血管***之间的传递，所述间室由组织、器官和/或限定结构组成。封闭的间室包括尺寸不同的各种结构，范围从细胞、组织、解剖学定义的单位到体内器官。受到病理影响的结构可能因为超负荷、损伤、毒剂、药物、出血、肿瘤、细菌和/或病毒之类的微生物感染而发生机能障碍，导致间隙液的压力升高和/或导致其他疾病。本发明还涉及特定抗分泌蛋白在正常和病理情况下对于间室综合症领域的应用。

背景技术

在医疗实践中使用术语“间室综合症”表征这样一种病理状况，其特征是，封闭体积(间室)内的压力发生不正常的升高，导致流过特定体积的血液和淋巴液减少或甚至阻断。血管压力太高会使血液透过静脉、毛细管、甚至微动脉和动脉，改变细胞外环境中间隙液的工作条件，导致所述空间内对细胞和组织的营养素和氧气的充分供应枯竭。一个同样重要的因素是无法排出废物和代谢产物，这些废物和代谢产物通常为酸性，发生积聚时会进一步加重对所述间室内细胞机能和代谢的影响。这种扰动的净效应是间室压力升高，并最终接近全身动脉压力的水平。因此，通向间室的动脉血管***入口处的实际血压构成主要因素，决定了压力可能升高达到的最高水平。在无血管结构(例如软骨和椎间盘)中，充足供应依赖于由细胞的离子和液体泵***通过扩散和通过渗透压梯度降液体和其他成分传递至某一区域或从该区域向外界传递，要求细胞正常地发挥机能。如果CP(间室压)持续地剧烈升 高，则会导致相关细胞、组织和器官发生严重损伤。所述间室中细胞和组织的出血和肿胀会进一步加重伤害，随后发生局部缺血。保持CP升高的时间越长，受到的伤害就越广泛越严重，最终变得不可逆转，然后发生坏死性细胞死亡。机械变形、移位和切断加重伤害。凋亡性细胞死亡会随后加重最初的伤害。CS(间室综合症)产生临床警报，例如疼痛、虚弱、肿胀、机能降低或甚至机能丧失，最终坏死。损伤的严重性取决于间室位置、相关细胞和组织的种类、细胞外环境的性质、实际CP、代谢紊乱及其持续时间，以及对于结果和长期后果非常重要的其他因素。

体内的大部分间室都由致密***分隔，这些***通常专门地作为鞘、筋膜、筋腱、韧带、关节囊或类似非依从性胶原膜，例如心包。另外，许多内分泌器官(例如甲状腺)和外分泌腺都被***膜和鞘包围和分隔，从而形成间室。包围、封闭、硬质间室的另一个例子是骨结构，例如肢干、头骨、腰椎和颜面骨。各种细胞和组织接触升高的CP时都会产生自身特征的、对主流代谢和机械扰动的承受性。不过，在合理时间内降低CP至正常水平能够减轻伤害。

抗分泌蛋白是41kDa蛋白，最初描述为能防止腹泻和肠炎(综述参见Lange和Lonnroth，2001)。已知抗分泌蛋白的序列，并且克隆了其cDNA。抗分泌活性似乎主要由位于抗分泌蛋白序列上位置35和50之间的肽行使。免疫化学和免疫组织化学研究显示，抗分泌蛋白由体内大部分组织和器官表达，并且也可以由它们合成。已经表征了包含抗腹泻序列的合成肽(WO97/08202；WO05/030246)。已经揭示抗分泌因子能够使病态的体液传输和/或炎性反应正常化，例如用霍乱菌毒素激发之后在肠管和中枢神经***的脉络丛中的情况(WO97/08202)。因此，在WO97/08202中建议可以在食物和饲料中添加抗分泌因子来治疗水肿、腹泻、脱水和炎症。WO98/21978揭示具有酶活性的产物用于制造诱导抗分泌蛋白形成的食物的应用。WO00/038535进一步揭示富含这种抗分泌蛋白的食品。

还显示，在治疗细胞损失和/或增益相关病症时，抗分泌蛋白及其片断 能够改善神经组织的修复以及干细胞和祖细胞及其衍生细胞的增殖、凋亡、分化和/或迁移(WO05/030246)。

对于已发生CS的情况，目前没有药物能够明确阻止压力升高并且使其 回到正常水平，也不能在威胁性或进行性CS情况下防止损害的发展。目前对患有ICP(颅内压)升高的病人使用尿素或甘露醇之类的高渗溶液，但是这种效果是瞬时的，只能持续几个小时，这取决于解剖定位和实际治疗程序。还使用皮质类固醇来对抗ICP升高，但是可能经常产生严重的副作用。还提出了其他药物，但是主要是抑制产生的综合症。人们认为降低体中心温度并结合巴比妥酸盐麻醉是有益的。但是对于例如肌肉、关节和神经中产生的CS，目前没有可靠的药物治疗方法。外科介入是一种常用的治疗方式，但是其固有缺点是加重额外伤害和不适感，并且有发生并发症的风险。

即使对于有经验的内科医生而言，可靠地诊断即发性、进行性或已发性CS也是困难的。已经使用基于例如超声波和磁共振成像(MRI)的辅助诊断，目前通常结合计算机程序。在本申请文本中，通过借助位于光导玻璃纤维尖端的非常小的传感器测量实际压力，确定待研究间室中间隙液的压力。探针直径为0.4毫米，柔软玻璃纤维的直径仅为0.3毫米，意味着测量装置引起的伤害不会很重要，几乎不会对压力水平增加任何注意得到的影响。因此，必须认为使用的装置能给出间室内主要压力的可靠值，这些压力值包括细胞外液，在某些情况下还包括相邻细胞和/或细胞集合体中的细胞内液。

抗分泌因子(AF)(如WO97/08202中详细描述的特定蛋白质和肽)能有效解除肠管中的高分泌性病症和疾病(如腹泻)。涉及AF对高分泌性病症的效果的其他例子有，例如炎性肠病、脑水肿、青光眼、颅内压升高、Meniere病症和***炎。人们还认为AF能够治疗青光眼(WO97/08202)。

发明内容

本发明涉及包含抗分泌蛋白、其具有抗分泌活性的同系物、衍生物和/或片断 、和/或其药物学可接受盐的药物合成物对于制造用于治疗和/或防止间室综合症的药物合成物和/或医疗食物的应用。本发明还涉及与间室综合症相关的各种病症的治疗和/或防止，这些病症例如是细胞和组织肿胀、细菌和/或病毒之类的微生物感染、和/或形成压塞，例如在心脏、肾脏、睾丸、卵巢、骨、关节、腺体、免疫***构、神经、脑、脊髓、皮肤、肌肉和/或血管壁处。

而且，本发明涉及治疗和/或防止如上所述的间室综合症的方法，所述方法包括给予需要的哺乳动物治疗有效量的药物合成物和/或医疗食物，所述药物合成物和/或医疗食物包含抗分泌蛋白、其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学可接受盐。

本发明还涉及适合于预期治疗目的以及病人年龄、性别、状况等的各种给药剂量和途径。

根据本发明的治疗可能最适合于有发生间室综合症风险和/或已患有间室综合症的病人，和/或已经发生病原物质摄取和/或排放的病人。另外，这种治疗也有利于特征性地表现为封闭间室的液体和离子不正常的其他病症，例如间室压力不正常。

附图简要说明

图1：图1显示根据本发明SEQ ID NO6的抗分泌蛋白氨基酸序列。该序列对应于US6344440的SEQ ID NO2。

图2：用植入侧脑室区域大脑皮质中的光导光纤探针测得的大鼠ICP。图2(a)证明HSV-1感染在第5天导致ICP增大至超过40。相反，每天用AF对受到HSV-1感染的大鼠处理两次，如图2b中所示，几乎使ICP回到正常水平。图2c显示正常、未接受处理、为受感染的大鼠具有低ICP。探针相对于环境气压进行校准。

图3：通过在第0天在右鼻孔给予病毒溶液，受到HSV-1感染的大鼠的存活率。一半数量的大鼠(n＝15)每天用1微克AF-16(上方的线)处理两次，而另一半数量的大鼠只在HSV-1感染之后接受载剂(下方的线)。在只经过载剂处理的大鼠中，到第14天只有10％存活，而经过AF-16处理的大鼠有60％存活。因此，对于HSV脑炎，AF-16显著提高了存活率。

图4：在啮齿类动物的右鼻孔点滴病毒溶液感染HSV之后的脑切片低倍放大(a，b)和高倍放大(c，d)照片。细胞质中含有HSV蛋白的神经细胞清楚地染成深色。丘脑中的胶质细胞(d)因为细胞质中HSV蛋白充裕而清楚地显示出来。注意到许多神经细胞是无反应的(未染色)。在经过AF-16处理或只用载剂处理的动物之间，HSV-1阳性脑细胞的出现频率或分布没有区别。

图5：对来自通过右鼻孔感染HSV-1的大鼠的脑组织进行的定量PCR。脑样本在右鼻孔接种病毒5-14天之后获得。这些结果证明在经过载剂处理和经过AF处理的组群之间，HSV-1DNA的量没有任何区别。因此，与只用载剂进行处理的情况(图2a)相比，AF-16并没有显著影响HSV-1的产生，但是AF-16处理显著提高了存活率(图2b)。

图6：切过筛状板的切片，筛状板是分隔脑和鼻的骨结构，筛状板中有嗅神经穿过。在左图(a)中，HSV-1感染后第5天，染料-蛋白质络合物(Evans蓝-白蛋白，EBA)融合进蛛网膜下腔中。动物患中度脑炎。注意到筛状板中没有红色EBA，鼻中也没有，因为脑和鼻腔之间的通道被阻断。在右图(b)中，EBA融合进未感染的正常大鼠的蛛网膜下腔中。注意遍布筛状板的浓重红色染迹，显示出从脑(上方)至鼻腔(下方)的CSF通道。用AF-16处理受到HSV-1感染的动物，打开CSF通过筛状板的通道，从而产生看上去与图(b)中所示正常、未感染动物相同的照片。

定义和缩写

缩写

ICP：颅内压；CSF：脑脊液；CNS：中枢神经***，即大脑和脊髓；IFP：间隙液压；HSV：单纯性疱疹病毒；PBS：磷酸盐缓冲盐水；CP：间室压；CC：封闭间室；CS：间室综合症；AF：抗分泌因子；AF-16：由氨基酸VCHSKTRSNPENNVGL构成的肽；八肽IVCHSKTR；七肽VCHSKTR；六肽CHSKTR；五肽HSKTR。

定义

在本文中，“间室综合症”定义为压力升高导致代谢扰动，最终在耐压结构分隔的细胞、组织、限定结构和/或器官中的限定空间内造成伤害。术语“间室综合症”在医疗实践中用于表征这样一种病理状况，其特征是，封闭体积(即间室)内的压力发生不正常的增大，导致流过特指体积的例如血液和/或淋巴液减少或甚至受到阻断。间室综合症还可能由各种病症引起，例如本文所述的病毒和微生物感染，肿瘤、出血、局部缺血、外伤、机能或负荷过多和/或异常等。在本申请文本中，术语“封闭间室”指耐压结构分隔的细胞、组织、器官和/或解剖结构中的限定空间。

蛋白(质)是由氨基酸残基通过肽键连接在一起构成的生物大分子。蛋白(质)(作为氨基酸的线形聚合物)也称为多肽。蛋白(质)通常具有50-800个氨基酸残基，因此分子量约为6000至几十万道尔顿或以上。小型的蛋白(质)称为肽或寡肽。在本申请文本中，术语“蛋白(质)”和“肽”可以交换使用。

在本申请文本中，“药物合成物”指包含治疗活性量的抗分泌蛋白、任选组合有药物学活性赋形剂(例如载剂或载体)的合成物。所述药物合成物为适当的给药途径配制，给药途径根据病人情况以及其他因素(如年龄或优选选项)变化。包含抗分泌蛋白的药物合成物作为药物递送***发挥作用。给予的药物合成物为病人或动物体提供活性物质。所述药物合成物可以为例如片剂、丸剂、锭剂、胶囊、栓剂(stool pill)、凝胶等，但是并不限于此。

术语“药物学活性盐”指抗分泌蛋白的盐，其可以为基于所谓Hofmeiser系列的、由抗分泌蛋白衍生的任何盐。“药物学活性盐”的其他例子包括三氟乙酸盐、乙酸盐和赖氨酸盐酸(lysine chloride)盐，但是本发明并不限于此。

在本申请文本中，术语“抗分泌”指抑制或减少分泌，特别是肠道分泌。因此，术语“抗分泌蛋白”指能够抑制或减少体内分泌的蛋白质。

在本申请文本中，“医疗食物”指使用根据本发明的含有抗分泌蛋白的合成物制造的食物。所述食物可以为流体或固体形式的任何合适的食物，例如是液体或粉末，或任何其他合适的食物。这些物质的例子参见WO0038535。

在本申请文本中，“抗分泌蛋白”或其同系物、衍生物和/或片段可以与术语“抗分泌因子”或专利WO97/08202中定义的“抗分泌因子蛋白”交换使用，是指抗分泌蛋白或肽或其具有抗分泌活性的同系物、衍生物和/或片段。因此可以理解，本申请文本中的“抗分泌因子”、“抗分泌因子蛋白”、“抗分泌肽”、“抗分泌片段”或“抗分泌蛋白”也可以指其衍生物、同系物和/或片段。这些术语都可以在本发明的申请文本中交换使用。而且，在本申请文本中，术语“抗分泌因子”可以缩写成“AF”。在本申请文本中，“抗分泌蛋白”还指先前如WO97/08202和WO00/38535中定义的、具有抗分泌性质的蛋白质。在WO05/030246中也揭示了抗分泌因子。术语“抗分泌因子”还意指富含SE900028-2和WO00/38535中所揭示的抗分泌因子的蛋黄，下 文将进一步描述。

在本申请文本中，“喷雾器”指以气雾形式将药剂递送至气道的装置。“喷雾器”的压缩器迫使空气通过管道进入充满液体药剂的药剂杯中。空气的作用力使液体分散成细小气雾样颗粒，能够深深吸入气道中。

在本申请文本中，“吸入器”指以干粉末形式将药剂递送至气道的医疗装置。吸入的空气传递待吸入的干粉末，并对能深深吸入气道中的细小颗粒进行分散。可以让待治疗的对象做吸入动作从而对空气产生需要的作用力，或者使用压缩空气帮助吸入，也可以将这两者结合。

在本申请文本中，术语“气溶胶”指固体或液体颗粒的气相分散体。

本文揭示的“微生物”指微观活生物，例如细菌、真菌、原生动物和病毒。本文给出微生物的其他例子。

发明详细说明

本发明的发明人惊异地发现，用抗分泌蛋白和/或肽(AF)处理活体能够使间室综合症(CS)的营养素、废物、代谢产物、离子、水和/或其他分子的传递恢复并正常化。因此惊异地发现，抗分泌蛋白和肽能够使例如来自细胞和血管的水、离子、代谢产物和物质向封闭间室(CC)中的传递恢复和/或正常化。因此，抗分泌蛋白确实减少和/或抵制伤害效果，也可以防止进入细胞和/或由细胞释放的物质发生内在化和/或产生释放。因此，抗分泌蛋白、其同系物、衍生物、片段和/或肽在工作时可以不考虑引发间室综合症的最初起因是出血、局部缺血、高负荷、血管扰动、微生物和/或病毒干扰、毒素、或这些因素的任何组合。因此，抗分泌蛋白、其同系物、衍生物、片段和/或肽有助于提高CC中细胞和组织的存活率。从而降低或甚至防止因为CS引起的其他伤害。

长久以来需要能对间室综合症进行药物治疗的改进药物，目前没有足够有效的治疗方法。以下将举例证明根据本发明的抗分泌蛋白的有益效果。

本发明的发明人已经发现，抗分泌蛋白、其同系物、衍生物、片段和/或肽对于各种不同位置、不同发病机理的CS具有有益效果。不希望使本发明限于具体的科学解释，目前人们相信，抗分泌蛋白和肽(AF)能够以强有力的方式解除CS的发生，使上述病症正常化，原因是，抗分泌蛋白和肽(AF) 对细胞膜中的脂筏和细胞膜穴样内陷能产生作用。

脂筏是具有纳米级平均尺寸的膜微区，其特征是具有局部高浓度的胆固醇和鞘磷脂(参见Lodish等，2004；Pollard & Earnshaw，2002；Ross &Pawlina，2006)。脂筏包含各种参与物质传递和信号传导的内在膜蛋白和外周膜蛋白。这种信号传导平台漂浮在细胞膜中，具有为了作为受体、偶联因子、G蛋白体系、效应器、酶和化合物、以及基质发挥适当功能所需要的要素，从而能够接受和传递特定离子、分子和信号。这些微区进一步与例如细胞骨架相互作用，并且影响间隙液的组成和周转量及其压力。阀蛋白-1是一种蛋白质，是脂筏优势性的指示。脂筏的另一个指标是鞘磷脂GM1。另外，脂筏还与以下因素相关：细胞膜穴样内陷(在多种哺乳动物细胞中都能得到验证的瓶形内陷)，重要细胞发挥机能(例如囊泡运输和信号传导)的位置，以及例如病毒的摄取、内在化和进一步的细胞内表达。细胞膜穴样内陷的周转量也与病毒以及微生物的释放和内在化相关。在生长因子受体、炎症信号受体、神经递质受体和用于再摄取神经传递物质、离子通道、水通道蛋白和其他转运子的***的脂筏和细胞膜穴样内陷的细胞膜中具有群集。脂筏和细胞膜穴样内陷发生与各时刻细胞和器官的主要机能相关的快速、动态变化。

本发明的发明人目前已经能够证明，抗分泌蛋白、其具有抗分泌和/或等同功能和/或相同活性的同系物、衍生物或片段、或其药物学活性盐，具有处理和/或防止细胞膜中脂筏和/或细胞膜穴样内陷机能失调(例如机能异常、不足、减退和/或亢进)的有益效果。

因此已经显示，抗分泌蛋白、其具有相同功能活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐，对细胞膜中的脂筏和/或细胞膜穴样内陷的机能失调具有有益效果，因此能够用于调节和/或有益地影响细胞膜中脂筏和/或细胞膜穴样内陷的结构、分布和多项机能。这种有益效果的例子可以是对抗机能异常，例如机能减退或机能亢进，从而使脂筏或细胞膜穴样内陷的结构和机能恢复和/或正常化，在疾病、受伤、修复过程和其他机能失***况下促进恢复和提供帮助。另外，所述抗分泌蛋白可以用于调节细胞产物的胞内运输和释放，以及用于使组织成分的分布正常化。

具有发展成CS的威胁性风险的病症的例子有局部缺血(与出血有关或无关)、高负荷、肿瘤或肢体(例如腿或胸部)实质性损伤(例如心包压塞)。 肌肉或肌腱的极端负荷也会产生CS信号。同样，器官、组织或关节感染也会产生CS信号。微生物毒素和微生物(包括分支杆菌、假单胞菌、衣原体、球菌、布鲁氏菌和李斯特菌之类的细菌)以及广谱病毒可以是致病物。过多使用药物以及释放例如神经递质、粘液、酶和病毒的释放是其他病原化合物。导致CS的潜在性原因的例子还包括肿瘤(原发性或转移性)以及出血。

在本申请文本中，通过借助光导玻璃纤维尖端处的传感器测量实际压力，来确定待研究间室中间隙液的压力。由此获得间室内主要压力的可靠值，在某些情况下还能获得相邻细胞中的值。

由文献可知，例如，许多实体肿瘤具有高间隙液压，抑制了肿瘤细胞和血液循环与淋巴循环之间的跨毛细管传输。从而对于肿瘤治疗产生障碍，原因是治疗剂(例如细胞毒类药物)摄取不足(参见Heldin等，2004)。而且，在放射治疗时，由于血液循环受限造成氧能力有限，使得自由基的产生不足。因此，需要有新的治疗方案，通过降低间隙液压而促进癌症治疗的功效。

并不限于对实施例中所述的组织、器官和解剖结构使用抗分泌蛋白和肽(AF)，还包括以间隙组织液压升高为特征的其他综合症和疾病，以及摄取和释放特定物质。

根据本发明的药物合成物可以通过局部施用(口服、鼻内、皮下)和/或经由血管或呼吸道全身性施用来给予。

抗分泌因子是体内自然产生的蛋白质。人抗分泌因子是41kDa蛋白，从脑垂体分离时包含382个氨基酸。关于根据本发明的间室综合症效应的活性位点似乎位于接近蛋白质N端的区域中，定位于SEQ ID NO6的氨基酸1-163，或者定位于该区域片段。

本发明的发明人已经指出，抗分泌因子在某种程度上类似于蛋白S5a，也称为Rpn10，其构成所有细胞中占主要成分的亚单位，26S蛋白酶体，更具体地说是位于19S/PA700cap中。在本发明中，抗分泌蛋白定义为一类具有相同功能性质的类似蛋白。蛋白酶体具有多种与剩余蛋白以及短寿蛋白、无用蛋白、变性蛋白、错误折叠蛋白和异常蛋白的降解相关的功能。而且，抗分泌因子/S5a/Rpn10参与细胞成分(最明显的是指蛋白质)的细胞分布和传输。

根据本发明的抗分泌蛋白的同系物、衍生物和片段和/或肽都具有类似 的生物活性，能够用于制造用于治疗和/或防止间室综合症的药剂，以及用于治疗间室综合症的方法中。在本申请文本中，同系物、衍生物和片段包含天然产生的抗分泌蛋白的至少4个氨基酸，通过改变一个或多个氨基酸可以进一步改性，从而在治疗和/或防止间室综合症时优化抗分泌因子的生物活性。

而且，对于与根据本发明的抗分泌蛋白、肽、同系物、衍生物和/或片段的氨基酸序列有至少70％(如至少72％、75％、77％、80％、82％、85％、87％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)相同的任何氨基酸序列，也认为落在本发明范围之内。在本申请文本中，术语“类似”和“相同”可以交换使用，即，与另一种氨基酸序列具有指定程度相同性的氨基酸序列相对于指定的氨基酸序列具有相同程度的类似性。

本申请文本中的“衍生物”意指这样一种蛋白，其具有本文所定义的抗分泌活性，直接或通过改性或部分取代衍生自另一种物质，其中一种或多种氨基酸被另一种氨基酸取代，所述另一种氨基酸可以是改性的氨基酸或非天然的氨基酸。例如，根据本发明的抗分泌因子衍生物可以包含N端和/或C端保护基团。N端保护基团的一个例子包括乙酰基。C端保护基团的一个例子包括酰胺。

“相对于参比氨基酸序列具有至少例如95％相同性的氨基酸序列的蛋白、同系物、衍生物、肽和/或其片段”意指例如这种肽的氨基酸序列与参比序列类似，区别在于，该氨基酸序列在参比氨基酸序列的每100个氨基酸中可以包括最多5个点突变。换言之，要获得相对于参比氨基酸序列具有至少95％相同性的氨基酸序列的多肽，可以删除参比序列中最多5％的氨基酸或者用另一种氨基酸取代，或者可以在参比序列中***占参比序列中氨基酸总数最多5％的氨基酸。这些参比序列的突变可以在参比氨基酸序列的氨基或羧基端位置或者这些端位之间的任何位置发生，独立地***参比序列中的氨基酸之间或者作为一个或多个邻接的基团***参比序列中。

在本发明中，最适宜使用一种局部算法程序来确定类似性。局部算法程序(例如Smith-Waterman)对一个序列中的子序列与另一个序列中的子序列进行比较，找出子序列的组合以及那些子序列的队列，产生最高整体类似性评分。允许时对内部空隙进行罚分。局部算法在比较具有共同的单个域或仅 只一个结合位点的两个多域蛋白时能很好地工作。

确定相同性和类似性的方法编码成公开可用的程序。确定两个序列之间的相同性和类似性的优选计算机程序方法包括但并不限于GCG程序包(Devereux，J等人(1994))BLASTP，BLASTN和FASTA(Altschul，S.F.等人(1990))。BLASTX程序由NCBI和其他来源公开(BLAST Manual，Altschul，S.F.等人，Altschul，S.F.等人(1990))。各序列分析程序具有默认的评分矩阵和默认的空隙罚分。一般来说，分子学生物学家期望使用所选软件程序建立的默认设置。

本文定义的抗分泌蛋白、肽、或其具有抗分泌活性的同系物、衍生物和/或片段可以具有4个或更多个氨基酸，例如具有5-16个氨基酸，例如5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸或更多。在其他优选实施方式中，抗分泌因子由42、43、45、46、51、80、128、129或163个氨基酸组成。在优选实施方式中，抗分泌因子由5、6、7、8或16个氨基酸组成。

在一个优选实施方式中，所述蛋黄提供的所述抗分泌蛋白的浓度至少为1000FIL单位/毫升。在本申请文本中，1个FIL单位等于(相较于不提供抗分泌因子的对照)肠液流的50％减少量，如WO00/38535和SE9000028-2中所述。

在另一个优选实施方式中，根据本发明的抗分泌蛋白、肽或其具有抗分泌活性的同系物、衍生物或片段由根据下式的序列组成：

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5

其中X1是I、SEQ ID NO6的氨基酸1-35、或缺省，X2是H、R或K，X3是S或L，X4是T或A，X5是SEQ ID NO6的氨基酸43-46、43-51、43-80或43-163、或缺省。

根据本发明的抗分泌因子可以体内产生或体外产生，例如通过重组产生、化学合成、和/或从抗分泌因子的天然产生来源(如猪脑垂体或鸟卵)分离。形成之后，可以对抗分泌因子作进一步处理，例如通过化学或酶解成较小的抗分泌活性片断 、或通过氨基酸改性作进一步处理。目前无法通过纯化获得纯净形式的抗分泌因子。不过可以如WO97/08202和WO05/030246中所述通过重组产生或合成生物活性的抗分泌因子蛋白。WO97/08202还揭 示了这种蛋白的7-80个氨基酸的生物活性片断 的产生。

根据本发明的抗分泌因子可以进一步包含N端和/或C端保护基团。N端保护基团的一个例子包括乙酰基。C端保护基团的一个例子包括酰胺。

在本发明的一个优选实施方式中，抗分泌因子选自SEQ ID NO6或是根据SEQ ID NO6的抗分泌蛋白的氨基酸序列，即：VCHSKTRSNPENNVGL(SEQIDNO1，在本申请文本中也称为AF-16)、IVCHSKTR(SEQ ID NO2)、VCHSKTR(SEQ ID NO3)、CHSKTR(SEQ ID NO4)、HSKTR(SEQ ID NO5)，这些序列中使用共同的单字母缩写表示氨基酸。在例如WO05/030246中已经揭示了SEQ ID NO1、2和3。如所附序列表中指出的，可以用其他氨基酸代替以上列出的序列中的一些氨基酸。在本段落的以下部分中，对特定氨基酸序列中的特定氨基酸的位置进行计算，从左开始，将该特定序列中最靠近N端的氨基酸表示为位置1。对于该序列中的任何其他氨基酸取代都可以独立地进行如下所示的任何氨基酸取代。在SEQ ID NO1中，位置2的C可以被S取代，位置3的H可以被R或K取代，位置4的S可以被L取代，并且/或者位置6的T可以被A取代。在SEQ ID NO2中，位置3的C可以被S取代，位置4的H可以被R或K取代，位置5的S可以被L取代，并且/或者位置7的T可以被A取代。在SEQ ID NO3中，位置2的C可以被S取代，位置3的H可以被R或K取代，位置4的S可以被L取代，并且/或者位置6的T可以被A取代。在SEQ ID NO4中，位置1的C可以被S取代，位置2的H可以被R或K取代，位置3的S可以被L取代，并且/或者位置5的T可以被A取代。在SEQ ID NO5中，位置1的H可以被R或K取代，位置2的S可以被L取代，并且/或者位置4的T可以被A取代。

本发明还预期了根据SEQ ID NO1-6的任何片段中的两种或更多种的组合，任选还组合有富含有抗分泌因子的蛋黄。

本发明还预期了通过给予富含抗分泌因子的蛋黄来治疗和/或防止间室综合症的可能性。SE9000028-2揭示了可以刺激在鸟的体内形成抗分泌因子，然后通过蛋黄的消化回收或浓缩抗分泌因子。WO00/38535进一步揭示了通过食物或饲料、或者作为配制成药品的或多或少的独立产品的形式给予动物或人这种回收或浓缩的抗分泌因子。因此，本发明还预期了富含抗分泌因子的蛋黄对于制备产品(例如药物合成物)、对于治疗和/或防止间室综合 症的应用，或者这种蛋黄在治疗方法中的应用。

在本发明的一个实施方式中，根据本发明的药物合成物进一步包含药物学可接受赋形剂。本领域技术人员通过试验可以轻易地确定药物学可接受赋形剂的选择及其根据本发明使用的最佳浓度。根据本发明使用的药物学可接受赋形剂包括溶剂、缓冲剂、防腐剂、螯合剂、抗氧化剂、稳定剂、乳化剂、悬浮剂和/或稀释剂。本发明的药物合成物可以根据传统制药实践进行配制，例如根据“Remington：The science and practice of pharmacy”，第21版，ISBN0-7817-4673-6或“Encyclopedia of pharmaceutical technology”，第2版，Swarbri ck J.编，ISBN：0-8247-2152-7。药物学可接受赋形剂是对给予该合成物的个体基本无害的物质。这种赋形剂通常满足国家药品管理署的要求。官方药典如英国药典、美国药典和欧洲药典为药物学可接受赋形剂制定了标准。

以下是根据本发明使用的相关药物合成物的回顾。回顾的内容以特定给药途径为基准。但是，应当理解，对于其中的药物学可接受赋形剂以不同剂型使用或用于不同合成物的情况中，特定药物学可接受赋形剂的应用并不限于特定剂型，也不限于特定的赋形剂功能。需要重点指出的是，本发明并不限于下文提到的合成物的应用。

肠外合成物：

对于全身性应用，根据本发明的合成物可以包含传统的非毒性药物学可接受的载体和赋形剂，包括微球体和脂质体。透皮递送是全身性施用的另一种途径。

根据本发明使用的合成物可以包括所有种类的固体、半固体和流体合成物。

药物学可接受赋形剂可以包括溶剂、缓冲剂、防腐剂、螯合剂、抗氧化剂、稳定剂、乳化剂、悬浮剂和/或稀释剂。以下给出具体试剂的例子。

各种试剂的例子：

溶剂的例子包括但并不限于水、醇类、血液、血浆、脊髓液、腹水和淋巴液。

缓冲剂的例子包括但并不限于柠檬酸、乙酸、酒石酸、乳酸、磷酸氢盐(hydrogenphosphoric acid)、碳酸氢盐、磷酸盐、二乙胺等。

螯合剂的例子包括但并不限于EDTA钠和柠檬酸。

抗氧化剂的例子包括但并不限于丁基化的羟基苯甲醚(BHA)、抗坏血酸及其衍生物、维生素E及其衍生物、半胱氨酸、以及它们的混合物。

稀释剂和崩解剂的例子包括但并不限于乳糖、蔗糖、EMDEX聚合糖、磷酸钙、碳酸钙、硫酸钙、甘露醇、淀粉和微晶纤维素。

粘结剂的例子包括但并不限于蔗糖、多糖、山梨糖醇、金合欢胶、藻酸钠、明胶、淀粉、纤维素、壳聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮和聚乙二醇。

根据本发明使用的药物合成物可以局部施用或经由静脉内末梢注射或经由肌肉内或皮下注射给药至病人体内，或者经由口腔、肺部、鼻、皮肤或口服途径。而且，还可以通过外科***病人脑室中的分流器给予药物合成物。

在一个实施方式中，根据本发明使用的药物合成物是为眼内、局部、鼻内、口服、皮下和/或全身性给药而配制的。在一个优选实施方式中，本发明的合成物作为悬浮体、或甚至更优选作为喷雾吸入粉末、气溶胶或鼻腔喷雾剂通过呼吸道给予。

包含抗分泌因子的粉末形式药物合成物在稳定性和剂型方面具有额外优势。药物合成物还可以局部施用于眼内、鼻内、口服、皮下和/或经由血管全身性施用。在一个优选实施方式中，针对静脉内、肌肉内、局部、口服或鼻施用的目的配制药物合成物。通常，将本发明合成物局部施用于眼时，每天的施用浓度为每次1微克至10毫克，例如每次1微克至1毫克，优选每天50-1000微克，更优选每天50-250微克，每天施用单剂量或重复多次施用(多剂量)，但并不限于此。

对血液进行全身性给药时，其剂量通常为每次每千克体重0.1微克至10毫克，例如每次每千克体重0.1微克至1毫克，优选每千克体重1-1000微克，例如优选每千克体重1-50、10-100、100-250、或50-500微克，每天施用单剂量或重复多次施用。根据本发明使用富含抗分泌因子的蛋黄时，优选口服给药。

因此，本发明涉及抗分泌蛋白、或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物、和/或片段、和/或其药物学可接受盐，对于制造用于治疗和/或防止间室综合症的药物合成物和/或医疗食物的应用。在一个实施方式中，所述抗分泌 蛋白由根据下式的序列组成：

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5

其中X1是I、SEQ ID NO6的氨基酸1-35、或缺省，X2是H、R或K，X3是S或L，X4是T或A，X5是SEQ ID NO6的氨基酸43-46、43-51、43-80或43-163、或缺省。在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQ ID NO1中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白的应用。在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQID NO2中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白的应用。在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQ ID NO3中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白的应用。在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQ ID NO4中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白的应用。在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQIDNO5中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白的应用。

另外，在另一个实施方式中，本发明涉及包含如SEQ ID NO6中所示氨基酸序列的抗分泌蛋白、或其包含SEQ ID NO6的氨基酸38-42的同系物、衍生物和/或片段的应用。

在另一个实施方式中，本发明涉及本文所述药物合成物的应用，所述合成物包含选自以下的两种或更多种的抗分泌蛋白：SEQ ID NO1-6，其包含SEQ ID NO6的氨基酸38-42的同系物、衍生物和/或片段，或本文所示通式揭示的序列。所述序列都同等优选地用于本发明中。

在一个优选实施方式中，所述抗分泌蛋白在富含所述抗分泌蛋白的蛋黄中提供，所述蛋黄中提供了所述抗分泌蛋白的浓度优选至少为1000FIL单位/毫升。

在一个本发明实施方式中，所述药物合成物进一步包含药物学可接受赋形剂。这种赋形剂可以适合特定目的的任何优选赋形剂。本文揭示了赋形剂的例子。

在另一个本发明实施方式中，所述药物合成物针对眼内、鼻内、口服、局部、皮下和/或全身性给药的目的配制。选择的给药途径根据待治疗病人的情况以及病人的年龄和性别等因素变化。

在另一个实施方式中，药物合成物针对作为喷雾、气溶胶或通过喷雾器或吸入器给药的目的配制。在另一个实施方式中，本发明涉及针对向血液全身性给药的目的配制的药物合成物和/或医疗食物，给药剂量为每次每千克 体重0.1微克至10毫克，例如每次每千克体重0.1微克至1毫克，优选每千克体重1-1000微克，例如优选每千克体重1-50、10-100、100-250、或50-500微克，每天单剂量给予或每天重复多次。在另一个实施方式中，所述剂量为每次每千克体重每天1-100微克。向需要的病人提供的药物合成物的量，当然需要根据病人的情况变化，由本领域技术人员例如医师决定。所述给予可以每天单剂量或多次进行。

在一个实施方式中，本发明涉及抗分泌蛋白、其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐，对于制造用于治疗和/或防止间室综合症的药物合成物和/或医疗食物的应用，其中所述综合症导致细胞和组织发生异常的肿胀。在另一个实施方式中，所述间室综合症由关于肌肉、神经、血管和/或肌腱的不正常(异常)的负荷、伤害或疾病引起。这种对肌肉、神经、血管、关节和/或肌腱的不正常负荷可以例如发生在外伤、运动过度(extended motor activity)或高负荷时。而且，药物可能导致间隙组织液压升高并且导致细胞肿大。在另一个优选实施方式中，所述综合症由微生物引起。在本发明的申请文本中，所述微生物可以是细菌以及病毒感染，例如RNA病毒或DNA病毒，疱疹病毒(例如单纯性疱疹病毒1型)、乳多空病毒(papovaviridae)、正粘病毒、黄病毒、披膜病毒、嗜肝病毒、人类免疫缺陷病毒或丙型肝炎病毒，它们都包括在本发明范围内。在另一个实施方式中，本发明涉及抗分泌蛋白、或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐，对于制造用于治疗和/或防止病毒和/或微生物感染和/或与病毒和/或微生物感染有关的综合症的药物合成物和/或医疗食物的应用。本发明包括的细菌感染的例子包括病原菌株感染，例如分支杆菌、假单胞菌、衣原体、球菌、布鲁氏菌和李斯特菌。但是本发明并不限于此。在一个本发明实施方式中，所述微生物例如细菌释放酶、毒素和/或颜料，以及/或者引发相邻细胞和组织的反应性因素的形成和/或释放。而且，在本发明的申请文本中，所述微生物可选自原生生物、原生动物、蠕虫或真菌。

在另一个实施方式中，所述综合症由朊病毒引起。朊病毒可以定义为蛋白质感染性颗粒，是类似于病毒但是没有核酸的感染性蛋白颗粒，人们认为它是造成羊瘙痒病和其他神经***退化疾病的致病剂。人们认为朊病毒是一 类造成许多神经***失调症的蛋白质，例如Creutzfeldt-Jakob病，包括其散发性、遗传性和获得性变型，构成相应的人类疯牛病、羊瘙痒病和相关病症和疾病。在另一个实施方式中，所述综合症由细胞或组织中产物的异常传输造成。

在另一个本发明实施方式中，所述综合症导致局部缺血。局部缺血可以定义为低氧状态，通常因为动脉血液供应受阻或血流不足而导致组织缺氧。在另一个实施方式中，所述综合症由药物和/或治疗或诊断方式引起。

在另一个本发明实施方式中，所述间室综合症由缺血引起，例如颅内出血和/或脑内出血和/或脊柱和脊髓出血和/或由动脉瘤引起，动脉瘤是由动脉、静脉或心脏壁扩张形成的液囊。在另一个实施方式中，所述综合症由囊泡封闭的器官或结构(例如心脏、睾丸、卵巢、腺体、淋巴器官和/或肾脏)发生压塞而引起。心包压塞是由血液或流体积聚在心肌(心脏的肌肉)和心包(心脏的外包液囊)之间引起的心脏压缩。在另一个实施方式中，所述综合症由位于体内各处的良性和/或恶性肿瘤引起，和/或与肿瘤和/或相邻结构的治疗相关。肿瘤的特征是间隙压升高，可能减少肿瘤细胞获得的药物量和治疗效果。而且，肿瘤中的压力升高可能影响其转移倾向。另外，肿瘤可能通过其尺寸的膨胀导致相邻正常组织和器官中的压力升高，引起CS。因此，CS是许多肿瘤患者常见和严重的并发症。在另一个实施方式中，所述综合症由免疫反应引起。另外，在一个实施方式中，所述综合症对椎间盘造成损伤，或者可能是椎间盘伤害或外伤造成的后果。

在进一步的实施方式中，所述综合症由关节和/或肌腱和/或韧带的细胞毒性肿胀引起。而且，在本发明的另一个方面，所述综合症由神经和/或血管壁的依赖于细胞毒性的肿胀引起。在另一个实施方式中，所述综合症由药物和/或药物合成物引起。在另一个实施方式中，所述综合症由X射线、高能辐射、局部冷却、局部加热、光疗法***的副作用以及用于***的药物的副作用引起。

在另一个方面，本发明涉及用于治疗和/或防止哺乳动物间室综合症的方法，所述方法包括给予有效量的药物合成物，所述合成物包含抗分泌蛋白、或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物、和/或片段、和/或其药物学活性盐。在一个实施方式中，本发明涉及方法，其中所述抗分泌蛋白由根据下式的序 列组成：

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5

其中，X1是I、SEQ ID NO6的氨基酸1-35、或缺省，X2是H、R或K，X3是S或L，X4是T或A，X5是SEQ ID NO6的氨基酸43-46、43-51、43-80或43-163、或缺省。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白包含如SEQ ID NO1中所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白包含如SEQ ID NO2中所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白包含如SEQ ID NO3中所示的氨基酸序列。另外，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白包含如SEQ ID NO4中所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白包含如SEQ ID NO5中所示的氨基酸序列。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述抗分泌蛋白是具有如SEQ ID NO6中所示氨基酸序列的蛋白，或者是其包含SEQ ID NO6的氨基酸38-42的同系物、衍生物和/或片段。在一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述药物合成物包含选自以下的两种或更多种抗分泌蛋白：SEQ ID NO1-6的蛋白，其包含SEQ ID NO6的氨基酸38-42的同系物、衍生物和/或片段，或如本文通式所示的序列。另外，在一个实施方式中，本发明涉及所述方法，其中，所述抗分泌蛋白在富含所述抗分泌蛋白的蛋黄中提供，所述蛋黄中提供的所述抗分泌蛋白的浓度至少为1000FIL单位/毫升。在另一个实施方式中，本发明涉及方法，其中，所述药物合成物进一步包含药物学可接受赋形剂。在一个实施方式中，所述药物合成物针对眼内、鼻内、口服、局部、皮下和/或全身性给药的目的配制。在另一个实施方式中，所述药物合成物和/或医疗食物针对作为喷雾、气溶胶或通过喷雾器或吸入器给药的目的配制。本发明实施方式还包括方法，其中，药物合成物针对向血液全身性给药的目的配制，给药剂量为每次每千克体重每天0.1微克至10毫克，优选每次每千克体重每天1-1000微克。在所述方法的一个实施方式中，所述给药每天以单剂量进行或者重复多次。本发明还涉及用于治疗和/或防止哺乳动物间室综合症的方法，所述方法包括给予有效量的药物合成物，所述合成物包含抗分泌蛋白、其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐，其中，所述综合症导致细胞和组织异常肿 胀。在一个实施方式中，所述综合症由关于肌肉、神经、血管、关节和/或肌腱的不正常负荷、伤害或疾病引起。在另一个实施方式中，所述综合症由微生物引起。在另一个实施方式中，所述综合症由病毒感染引起。在一个实施方式中，这种病毒感染由DNA病毒或RNA病毒引起，例如疱疹病毒、单纯性疱疹病毒1型、黄病毒、乳多空病毒、正粘病毒、披膜病毒、嗜肝病毒、丙型肝炎病毒和/或人类免疫缺陷病毒，这些都包括在本发明中。

在一个优选实施方式中，本发明还涉及用于治疗和/或防止哺乳动物间室综合症的方法，所述方法包括给予有效量的药物合成物，所述合成物包含抗分泌蛋白、或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐，其中，所述综合症由微生物引起，例如但并不限于原生生物、原生动物、蠕虫、真菌、细菌。在一个实施方式中，所述细菌选自分支杆菌、假单胞菌、衣原体、球菌、布鲁氏菌和李斯特菌。在另一个实施方式中，所述微生物例如细菌释放酶、毒素和/或颜料，并且/或者引发相邻细胞和组织的反应性因素的形成和/或释放。在另一个本发明实施方式中，所述综合症由朊病毒引起。在另一个实施方式中，所述综合症由细胞或组织中产物的异常传输引起。在另一个实施方式中，所述综合症导致局部缺血。在另一个实施方式中，所述综合症由药物和/或治疗或诊断方式引起。另外，本发明还包括这样一个实施方式，其中，所述综合症导致大脑和脊髓机能异常。在另一个实施方式中，所述综合症由颅内出血和/或脑内出血和/或脊柱和脊髓出血和/或动脉瘤引起。在另一个实施方式中，所述综合症由囊泡封闭的器官或结构(例如心脏、肾脏、睾丸、卵巢、腺体和/或淋巴器官)发生压塞而引起。在另一个实施方式中，所述综合症由体内的良性和/或恶性肿瘤引起，或者与肿瘤和相关结构的治疗相关。

另外，本发明还包括这样的实施方式，其中，所述综合症由免疫反应引起。在另一个实施方式中，所述综合症对椎间盘造成伤害。

还需要了解和弄清楚的是根据本发明的方法涉及与间室综合症相关的本文所述所有病症，所述方法包括给予哺乳动物有效量的药物合成物，以及/或者所述方法包括药物合成物的第二医疗应用，所述合成物包含抗分泌蛋白、或其具有抗分泌活性的衍生物、同系物和/或片段、和/或其药物学活性盐。

具体实施方式

本发明优选实施方式

实施例1

使用单纯性疱疹病毒1型溶液(HSV-1；菌株2762，批号041028；1.7×10⁷PFU/毫升；25微升)在右鼻孔点滴，使成年大鼠感染。一组大鼠(n＝6)在感染10分钟之后在右鼻孔接受25微升(10毫克)AF-16，然后每天两次接受相同剂量的AF-16，时间为每天早晨8AM和每天晚上6PM，直到本试验在第6天结束。另外一组HSV-1感染的大鼠(n＝6)以相同时间间隔在鼻内接受25微升载剂(磷酸盐缓冲盐水，PBS)。在第6天，麻醉大鼠，透过头部皮肤进行外科切开，从骨膜和***中剥离颅骨。透过右顶骨钻直径约为1毫米的一个孔，将微型压力传感器***大脑或侧脑室中3-5毫米。使用直径很小(约0.4毫米)的光纤压力测量***(Samba System3200 & SambaPreclin420传感器；Samba Sensors AB，V Frolunda，Sweden)。未感染的正常大鼠的颅内压(ICP)为4-8毫米汞柱，有时高达12毫米汞柱(图2c)。测得只用载剂处理的感染了HSV-1的大鼠的颅内压高达30-45毫米汞柱(图2a)，对这些动物产生严重影响，表现为严重的神经机能障碍综合症。相反，在感染HSV-1之后用AF-16每天处理两次的大鼠具有几乎正常的ICP，8-14毫米汞柱(图2b)。观察到的重要现象是，每天用AF-16鼻内处理两次防止发生神经机能障碍，例如鼻子湿润、红眼睛、多涎、呼吸窘迫、运动不稳、躁动、好斗、嗜睡、情绪变化快、重复性运动、癫痫发作、局部麻痹迹象、最终陷入无意识。

对于具有明显症状的其他HSV-1感染大鼠也用10或25微克AF-16进行年鼻内处理，从第5、6、或7天开始，即已经在前几天用载剂进行了处理。在这些情况下，上述神经机能障碍的症状在半小时内减轻，在一小时以后不再表现出症状。同时，在一小时内观察到AF-16在这些感染的大鼠和经过AF-16处理的大鼠体内产生有益的降压效果，并且这种效果持续几个小时。因此，经过AF-16积极处理的大鼠都没有表现出任何持续的有害的ICP信号，因此也没有发生CS。

注射染料Evans蓝，与牛血清白蛋白(EBA)结合，在正常大鼠的蛛网膜下腔和侧脑室，在15-30分钟之后能够在鼻粘膜中发现标记物(图 6b)。 这证明，CSF中的相当大部分排至鼻粘膜中的***，并进一步通过颈部淋巴腺，变成蓝色(如果用荧光显微镜观察则为红色)。具有神经机能障碍的HSV-1感染的大鼠显示，如果类似地注射EBA，筛状板没有染色，鼻粘膜也没有染色(图 6a)。可以从图 6a中看到，该图右半侧没有红色染色。但是，用10或25微克AF-16进行鼻内处理，使HSV-1感染的大鼠的图片与正常的未感染的大鼠的图片相同。因此，鼻内注射AF-16使HSV-1感染引起的CSF外流阻断发生逆转。从而恢复CSF外流并使ICP变正常。

我们得出以下结论：用AF-16处理啮齿类动物使HSV-1脑炎的临床症状减至最轻，最明显的是，使升高的ICP正常化，与之对比的是，在感染了HSV-1并且只用载剂PBS处理的啮齿类动物上测得的很高ICP产生了有害效果。从临床实践可知，脑炎患者具有升高的ICP，是造成急性以及持续性大脑损伤的主要因素。事实上，人们认为高ICP是最终导致神经机能障碍和死亡的重要因素。因此，本实施例1的结果揭示，向其病症符合CS标准的病体给予AF-16的确迅速对抗了ICP的病态升高，使ICP降低，甚至达到正常值，防止发生神经机能障碍，并且促进没有持续性全身性机能失调或使这种失调最轻。

实施例2

在第二个试验中，我们研究了如实施例1中所述的AF-16在以能降低升高的ICP的剂量使用时还能改善感染了HSV-1的成年啮齿类动物的存活率。因此，在大鼠由鼻孔点滴25微升单纯性疱疹病毒1型溶液(HSV-1；菌株2762，批号041028；1.7×10⁷PFU/毫升)使其感染。一半数量的大鼠在10分钟之后在右鼻孔接受25微升(1、10或25微克)AF-16，然后每天早晨8AM和每天晚上6PM点滴相同剂量的AF-16，直到本试验在第14天结束。另一半数量的已感染HSV-1的大鼠组以相同时间表接受25微升载剂PBS。每天密切观察这些大鼠若干次，观察是否有行为机能障碍或一般病情。如果发生以上病症，则处死这些大鼠。图3说明大鼠的存活率，它们都感染了HSV-1。用1微克AF-16感染的大鼠(n＝15；上方的线)的存活率明显更高，约为60％，在两周时间结束时，试验继续(图3)。相反，受到HSV-1感染、只接受了载剂的大鼠(n＝15)的死亡率较高，只有10％在测试期(14天)结束时仍然存活。所有受到感染、接受了载剂处理的大鼠都产生神经机能障碍信号。每天 用10或25微克AF-16鼻内处理两次导致所有已感染大鼠存活，无一表现出神经机能障碍的信号。对固定在***中的样本进行光学显微术，并按照组织病理学和免疫组织化学研究的常规程序进行处理(参见Zhu，Wang &Hansson 2003)，发现在海马区、小脑和脑干发生炎性、退化性和反应性变化，在那些发生感染并用载剂处理的大鼠中最为明显。需要强调的是，损伤的程度和严重性取决于接触时间、ICP升高的水平以及存活时间。对发生感染并经过载剂处理的大鼠进行免疫组织化学研究发现，例如，几乎再也不能验证脉络丛中的阀蛋白-1和水通道蛋白1的免疫反应性。相反，在受到感染并经过AF-16处理的脉络丛中，能够轻易地验证明显的阀蛋白-1和水通道蛋白1的免疫反应性，与正常、未受感染、未经处理的大鼠脑中的情况类似。因此，用AF-16进行处理抑制了细胞损失并促进神经***中有序结构例如血管、包括突触和支持细胞的神经元的正常化和分布。而且，对脉络丛中阀蛋白-1和水通道蛋白1的免疫反应性损失的免疫组织化学验证强烈地显示对脂筏的优势、分布和组织化的严重影响(其表现为阀蛋白-1的染色损失)，以及间室之间水分布的影响(例如，CSF产量、周转量和流量，其表现为水通道蛋白的低免疫反应性)。得出以下结论：对患有HSV-1脑炎的动物进行AF-16处理能使中枢神经***的基本机能正常化，从而消除ICP升高，防止产生CS。

得出以下结论：通过在鼻孔内每天两次点滴1、10或25微克AF-16进行处理，显著提高了感染有致脑炎HSV-1的成年大鼠的存活率，并且消除了神经机能障碍的发生。这种效果似乎是因为用AF-16进行处理能够防止颅内形成的CC中的ICP升高至有害水平，如实施例1中所验证的，并且使ICP大致回到正常值，防止发生有害的CS。

实施例3

对感染了HSV-1的动物的存活率提高的另一种说明可以是，用AF-16进行处理防止病毒复制和/或散布至大脑中。已经证明不是以下试验的情况。在右鼻孔中点滴单纯性疱疹病毒1型溶液(HSV-1；菌株2762，批号041028；1.7×10⁷PFU/毫升)使成年大鼠感染。一半数量的大鼠在10分钟之后在右鼻孔接受25微升(1或10微克)AF-16，然后每天早晨8AM和每天晚上6PM点滴相同剂量的AF-16，直到本试验在第6天结束。使另一组受到HSV-1感 染的大鼠以相同的时间间隔接受25微升载剂PBS。密切观察大鼠的一般病情和行为与动作的机能障碍信号。用过剂量的麻醉在第6天处死大鼠，打开颅骨并取出大脑。通过在缓冲***中浸渍至少一天，对大脑(包括嗅球)进行固定。解剖大脑并分成若干样本，处理之后，进行石蜡包埋、切片和光学显微术研究。对切片进行常规染色处理并对HSV-1蛋白进行免疫组织化学显示(图4)。令人惊异的发现是，可以证明HSV-1蛋白不仅在神经细胞(图4a-c)中，还在大脑的胶质细胞(图4d)中，包括嗅叶和三叉神经节中。注意到神经细胞的明显染色(图4a-c中的黑色)。但是，与只用载剂处理的大鼠相比，经过感染、并用AF-16处理的大鼠脑中HSV-1蛋白的普遍性和分布没有明显区别。平行地，用HSV-1感染小鼠，每天在右鼻孔点滴AF-16或载剂两次进行处理，六天之后，处死小鼠，如上所述对大脑样本进行处理，用于验证HSV抗原。对于大鼠，在与处理相关的病毒抗原分布或程度方面没有明显区别。

因此我们得出以下结论：用AF-16处理感染了致脑炎性(encephalolitogenic)HSV-1菌株(最初从人类致命疾病中分离)的啮齿类动物，与只用载剂处理的啮齿类动物相比，不会改变大脑中HSV-1病毒蛋白的普遍性，也不会改变其细胞分布。因此，用AF-16进行处理不会改变CNS中的HSV-1分布。显著提高啮齿类动物的存活率(如实施例2中所述)的原因可能是，通过AF-16防止颅骨中形成的CC中的ICP升高至有害水平，如实施例1中所述。因此，消除了有害CS的发生。

实施例4

如实施例2中所述受到HSV-1感染的啮齿类动物的存活率提高，其原因可能是因为AF-16阻断或至少减少了受感染大脑中HSV-1病毒的增殖。因此，用单纯性疱疹病毒1型溶液(HSV-1；菌株2762，批号041028；1.7×10⁷PFU/毫升)在右鼻孔点滴而感染的成年大鼠中，一半数量的受感染大鼠在10分钟之后在右鼻孔接受至少25微升(1或10微克)AF-16，然后每天早晨8AM和每天晚上6PM以相同剂量点滴AF-16，直到试验在第6天结束。另外一组受到HSV-1感染的大鼠以相同间隔接受25微升载剂PBS。密切观察这些大鼠的一般病症和行为与动作的机能障碍。在第6天用过剂量麻醉处死这些大鼠，然后迅速打开颅骨取出大脑。然后，通过RT-PCR处理脑组织样本，按照 Clinical Virology Laboratory，Sahlgrenska University Hospital，Goteborg，Sweden使用的常规步骤对脑组织中验证的HSV-1拷贝数量进行评价。令人惊异的发现是，与只接受载剂的情况相比(图5)，经过AF-16处理的啮齿类动物的HSV-1DNA拷贝普遍性和分布没有明显取。上述试验还在小鼠中平行进行，获得类似结果，证明了AF-16在多种物种中的功效。因此，由PCR数据(图5)证明，AF-16对于HSV-1病毒的复制没有明显效果。产生有益效果的原因似乎是因为AF-16消除了颅内形成的CC中ICP的异常升高(图2)，如实施例1中所述，如果不加处理会导致有害的CS，严重损害受感染动物的CNS。

实施例5

AF-16对患有HSV-1脑炎的动物产生有益效果的原因可能是因为，AF降低了CNS中的炎性反应。要验证该假设，通过在右鼻孔点滴单纯性疱疹病毒1型溶液(HSV-1；菌株2762，批号041028；1.7×10⁷PFU/毫升)感染成年大鼠。一半数量的大鼠在10分钟之后在右鼻孔接受25微升(1或10微克)AF-16，然后每天早晨8AM和每天晚上6PM以相同剂量点滴AF-16，直到试验在第6天结束。另外一半数量的受到HSV-1感染的大鼠以相同时间间隔接受26微升载剂(磷酸盐缓冲盐水)。在第6天，按照Huang，Sal jo and Hansson(1996)中所述的过程，从这些大鼠中取出脑脊液(CSF)样本，有3个样本经过AF-16处理，有3个样本经过载剂处理。分析炎性标记物IL-1、IL-6和TNF-a的浓度时发现，与经过载剂处理的情况相比，受到感染并用AF-16处理的大鼠CSF中的浓度没有显著差别。得出以下结论：用AF-16进行处理并不是通过改变炎性响应来增加患有HSV-1脑炎的啮齿类动物的存活率，而是通过使颅内压正常化、防止CC中因为普遍出现高ICP而发生CS，从而提高存活率。因此我们认为，HSV-1脑炎引起的有害效果受到遏止的原因是AF抑制了CS的发展。

实施例6

通过在蛛网膜下腔进行自体全血注射(从文献中已知的方法)引起不同种类的大脑CS，导致发生脑水肿和ICP升高。通过在枕骨中钻的小孔在麻醉成年大鼠的蛛网膜下腔中沉积50-350微升肝素化的自体血液，或者通过透过寰枕膜在小脑延髓池中注射来进行沉积。最后在颅骨中钻出的孔中填堵 SuperBond胶。在蛛网膜下腔沉积血液进行处理增加了ICP，包括在一天或一周内发生CS，确切时间取决于身体情况和沉积血液的量，与医疗文献中的报道一致。在我们的试验中，在成年Sprague-Dawley大鼠的小脑延髓池中注射0.2-0.3毫升肝素化的自体血液导致在1-3天内ICP升高至13-30毫米汞柱，压力值由植入的微型压力光导探针(Samba System 3200 & SambaPreclin420传感器；Samba Sensors AB，Gruvgatan6，SE42120V，Frolunda，Sweden)测得。未经处理或者注射了磷酸盐缓冲盐水(PBS)的正常成年大鼠的ICP为6-9毫米汞柱。每天用25微克AF-16鼻内处理两次导致升高的ICP降低，在1-2小时内压力值可重现地几乎回到正常值。经过AF处理的啮齿类动物没有表现出大脑功能受损，也没有任何行为或动作功能的明显受损，而那些在蛛网膜下腔中进行了血液沉积、然后用载剂处理的动物的表现则相反。得出以下结论：与只接受了载剂PBS的动物相比，用AF-16进行处理降低了在蛛网膜下腔沉积血液造成的大脑损伤的程度和严重性。这意味着，AF-16消除了脑部CS，对于已经发生脑部CS的情况，AF-16减轻了脑部CS的严重性。对AF-16的快速响应对于AF-16产生的有益效果是决定性的。

实施例7

关节被柔软、非顺应性的胶原囊包围，进一步的特征是低弹性但非塑性。发生关节炎时，关节腔中滑液的压力升高，炎症使症状加重。CS是占主要的。为了研究用AF-16进行处理是否能够防止或至少减轻这种CS的发展，通过全身性注射致关节炎的金黄色葡萄球菌(SA；菌株LS1)感染成年大鼠。一组动物(n＝3)用AF-16处理，而第二组大鼠(n＝3)只接受载剂PBS。几天之后，膝关节随后是腿骨和脚关节***、肿胀，关节腔中的压力升高，压力值用Samba光纤压力探针(Samba System 3200 & Samba Preclin420传感器；Samba Sensors AB，Gruvgatan6，SE 42130V，Frolunda，Sweden)测得，并且立即发展到周围组织中。正常滑膜大关节中的压力为0-5毫米汞柱，但是受到感染、发炎的关节中可以增加至5倍以上。测量与受到感染的关节保持一定距离的皮下组织中的间隙液压以供比较，发现其保持正常限度，±2毫米汞柱。相反，大关节受到SA感染并用AF-16处理的啮齿类动物的关节不发软、不肿胀，也不疼痛，接近正常的关节的压力值。受到感染、只接受了载剂PBS处理的动物发生CS，并且随着时间流逝越发严重。对各组滑液样 本中细菌的普遍性进行定量和定性分析发现，不管大鼠是否经过AF-16处理，大关节中的金黄色葡萄球菌数量基本相等。

我们得出以下结论：接种致关节炎的微生物(例如细菌、可能还有病毒和免疫试剂)之后用AF-16处理，降低了受感染关节中的压力。但是，致病细菌(例如金黄色葡萄球菌(菌株LS1))在关节中的复制或分布没有区别。因此，受感染的关节似乎受到SA感染的伤害，因为没有给予抗生素。不过动物没有存活那么长的时间。

主要发现是，用AF-16进行处理可重现地抵制了受感染关节中压力的升高，而压力升高会导致CC。因此，本研究确定，对受感染的关节用AF-16进行处理，没有发生CS。

实施例8

在成年大鼠的骨骼肌中引起CC病症病进行研究。在后腿上，通过施加外压负荷使进入指长伸肌(EDL)的大血管堵塞1-3小时(参见Jennische&Hansson，1987；Jennische，Skottner & Hansson，1987)。然后，使血流恢复，修复和缝合周围的肌肉和皮肤切口。这种处理导致缺血性损伤，使EDL骨骼肌纤维的一部分坏死。当组织和间隙组织将液体积聚在这种封闭间室中时发生CS，而且肌肉组织发生肿胀和水肿。这种封闭间室中的压力增加，导致发生CS。如果没有其他处理，就需要外科介入来防止部分骨骼肌组织坏死。但是，如果用AF-16进行处理，就不会发生封闭间室综合症，可以用Samba压力传感器证明，受伤组织的肿胀趋于正常，间室内的压力大致回到正常值。对来自EDL肌肉的样本进行光学显微术证明，与载剂处理相比，用AF-16进行处理减轻了组织受伤的程度和体积。因此，用AF-16进行处理防止了CS的发生，最终减少了组织的伤害和损失。

实施例9

在成年大鼠体内试验性地引起影响心包的CC病症，就用肽AF-16进行处理的效果进行研究。心包腔分隔心脏，形成充满最小体积液体的囊泡，使得心脏在突然、强力收缩时能在囊泡内进行滑动。心包腔外周被富含胶原的腔膜包围。通过横膈和纵隔中的小“窗口”对麻醉大鼠的心包进行外科切开。通过切口摩擦心包使其遭受外科损伤。将这些大鼠分成两组，一组用AF-16进行处理，另一组只用载剂PBS进行处理。那些用AF-16处理一周的大鼠的 心包腔中只积聚了少量液体，压力低。相反，那些在摩擦之后用载剂处理的大鼠的心包中充满了受压状态的液体，而且还具有很多纤维蛋白束和炎性细胞。另外，心包腔膜肿胀、发炎，并且有许多扩张、部分新生成的血管渗入。

通过压缩和进行摩擦对肝脏、脾脏、肾脏和甲状腺进行类似的机械伤害。在这些情况中也能证明，分别与用载剂处理的情况相比，用AF-16进行处理能够减轻这些结构发生的水肿和肿胀。进一步降低出现腹水和相关的高压、过多细胞外液的普遍性。因此，AF-16减轻了实质性器官和组织中CS的程度和严重性。

因此，不太可能在经过AF处理的动物中发生严重影响心脏机能的CC。因此，AF-16抑制了心脏CS的发生。对于研究的其他实质性结构和器官，AF也有相同的有益效果。

实施例10

椎间盘分隔脊柱中的脊椎体，一天中有许多次根据实际负荷调节脊椎体的尺寸。椎间盘中无血管的髓核和纤维环的含水量取决于来自相邻韧带和椎骨底板的液体、离子、营养素和氧气供应(参见Holm等，2007)。来自无血管盘的许多产物必须先通过相同的障碍才能到达血管***。因此，就AF蛋白和AF肽对负荷和未负荷的椎间盘的影响，对啮齿类动物、兔和猪进行了研究。可以证明，用AF-16进行处理减轻了受伤椎间盘的肿胀和炎性反应。而且，用光学显微术观察染色的椎间盘切片时，证明经过AF-16处理的动物的髓核的伤害较小，其反应性变化较不显著，对于纤维环、周围韧带和相邻***也是如此。而且，在椎间盘受到超大负荷以及遭受外伤之后，AF和AF-16的效果也显示，相较于载剂处理的情况，用AF-16处理之后的所产生的椎间连接硬度和变形程度更接近正常值。因此证明，AF化合物有利于减轻椎间盘外伤或变形和/或过负荷时发生的肿胀和组织损伤。

实施例11

在成年大鼠被软组织(tender enclosure)包围的限定结构(如肌腱和神经)中试验性地引起CS，就AF-16的效果进行研究。外周神经和自主神经都被神经内膜、神经束膜以及最外侧的神经外膜分隔。许多神经束形成神经(参见Hansson等，1987)。体内的肌腱和一些韧带被柔软胶原膜样结构(滑膜鞘)分隔。后者的内边界层通过其滑膜鞘与肌腱连接，使得滑动时的摩擦 力最小。后者结构的外周被纤维、膜样层(纤维鞘)包围。在一些位置处，肌腱外周(enclosing paratendinium)保持就位，通过腱系膜和连结物(vinculae)接受营养素(参见Hansson等，1980)。另一种润滑装置是液囊，液囊是具有液体薄膜的封闭纤维囊泡，能防止硬质结构旁和相邻硬质结构之间发生摩擦和重负荷。由于过负荷和外伤以及炎症引起的肿胀和水肿会削弱外周神经、肌腱和液囊的结构与功能。

如前所述，借助特别设计的镊子将麻醉兔的坐骨神经弄碎(Stemme等人，1985；Hansson等人，1987)。这种方法不仅导致削弱神经的功能和结构，还削弱血液和淋巴循环，导致坐骨神经肿胀，发生水肿，包括相邻和周围的结构。通过在受影响的组织中***Samba光纤压力测量探针，验证IFP升高。从开始受到损伤时每隔一秒钟都用AF-16以高剂量对大鼠进行处理。对于受到同样损伤的大鼠，从开始受到损伤时每隔一秒钟都只用载剂进行处理。对于只用载剂处理的大鼠，测得神经束膜钟的压力在一天内升高，与宏观观察到的肿胀和局部水肿一致，即发生CS。相反，对于用AF-16处理坐骨神经的大鼠，观察到神经内压在大多数情况下略有升高，或接近于在正常神经中测得的值。对受伤坐骨神经的染色薄切片进行光学显微术研究，证明AF-16减轻了炎症、水肿和组织变形。

用AF-16处理受伤的肌腱时，与给予载剂之后观察到的情况相比，也获得类似的结果(Hansson H A等，1980)。与用AF和AF-16处理的情况相反，用载剂处理的大鼠产生CS信号。

得出以下结论：在例如神经、肌腱或液囊受伤时，AF-16抑制了CS的发生。

实施例12

在外科手术和外伤时，动脉可能受损，导致血管壁肿胀。这些情况会导致血管壁中的IFP升高，出现炎性反应和重建(Hansson，Jennische &Skottner，1987)。对于一组大鼠，具有预先启动的Alza渗透性微泵，泵中充满AF-16，泵皮下植入，用细硅胶管连接至受伤处，将肽AF-16直接递送至水肿组织。对比组的其他大鼠的泵中充满载剂。在3、5、7或14天后研究受损的动脉。来自用载剂处理的大鼠的血管柔软，外径增大，发生肿胀。相反，用AF-16处理的大鼠的血管的肿胀程度和发炎程度都较低。与用载剂 处理的大鼠相比，用AF-16处理的大鼠的开通率较高。14天后，对股动脉的经过染色的切片样本进行研究，很明显，与只用载剂处理的情况相比，来自用AF-16处理的大鼠的股动脉受到的损害较轻，炎性反应较不显著，伸展性反应变化(例如形成包含平滑肌细胞的新内膜)较轻。而且，经过AF-16处理，巨噬细胞、泡沫细胞和淋巴细胞的数量也减少。得出以下结论：AF-16对受损血管的愈合具有有益效果。

实施例13

对啮齿类动物皮下植入和肌肉内恶性肿瘤和良性肿瘤。在这些动物中二选一，对于直径为10-15毫米的肿瘤，通过借助皮下植入的Alzet渗透性微泵，在肿瘤处或肿瘤中注射AF-16，用AF蛋白(AF-16)进行全身性处理。在另一个试验中，从植入的带细硅胶管的Alzet2001泵，将AF-16肽直接递送至肿瘤处和/或肿瘤中。其他大鼠通过饲料引入AF-蛋白或通过AF的蛋黄引入。为了进行比较，使相同数量的大鼠接受载剂的相同处理。借助Samba玻璃纤维压力传感器(直径0.4毫米，带有或没有保护管，以及通过“抽吸”技术测量间隙液压的装置)测量肿瘤中及其相邻区域中的间隙液压(IFP)。对于用载剂处理的大鼠，肿瘤中的IFP显著升高，超过12毫米汞柱。相邻***中的IFP为0-4毫米汞柱，但是可能为负值。如上所述对10-15毫米的肿瘤用AF-16进行处理，能降低IFP，通常至等于或小于12毫米汞柱。另外，通过对固定和处理样本的染色薄切片进行光学显微术研究确定，AF-16降低了炎性反应的强度和程度。

对啮齿类动物进行平行试验证明，与用载剂处理的情况相比，用富含AF蛋白的蛋黄处理动物对植入肿瘤的生长和扩散产生有益效果。

得出以下结论：降低肿瘤中的IFP似乎能促进微循环，从而使细胞外环境具有较低的低氧性，促进抗肿瘤药物的渗透以及更有效地分布。得出以下结论：AF-16能够降低肿瘤中的IFP，促进用特定药物治疗的功效。另外，放射疗法似乎更有效，因为AF-16处理之后促进了微循环，增加了曝光组织中的氧含量，从而促进自由基形成，对于抑制肿瘤生长非常关键，最终加强了杀死肿瘤细胞。人们认为，AF-16对IFP的这些效果归功于对肿瘤的清除得到促进，能够控制肿瘤的散播。

实施例14

还在原核细胞中研究了AF的效果，原核细胞被复杂细胞壁包围，从而会因为膜功能受抑制而使压力升高。在细菌中发生这些情况，细菌合成和释放多种物质，这些物质会损害哺乳动物细胞，由此损害动物体。这些产物的例子有颜料、酶和毒素，它们通过细菌外膜传递至细胞外环境。抑制这些膜活性会减少或甚至阻断这些病原物质的传递和/或释放。为了研究肽AF-16是否会对细菌产物从合成细菌向环境的传递产生影响，进行以下试验。在存在或不存在肽AF-16的情况下，在一晚上或两天中培养金黄色葡萄球菌(这种细菌会合成黄色颜料)。一、两天后，冲洗细菌培养物，然后离心浓缩。用甲醇从渗透的粒状细菌中萃取金黄色葡萄球菌形成的黄色颜料，并进行吸收光谱分析。与只接触载剂的情况相比，在对细菌数量的测量值进行校正之后，在AF-16存在条件下生长的细菌培养物的黄色颜料多得多。这些结果明确证明，用AF-16进行处理消除了细菌中形成的成分向环境的传递和释放。

得出以下结论：提出的试验证明AF-16有效地影响了细胞内物质的传递和产物从活细菌的释放。

总结和结论

用肽AF-16进行处理消除或至少减少了封闭间室中压力升高。用AF进行处理进一步减少在暴露于过负荷、损伤、局部缺血、毒剂、药物和受感染时产生的负面临床信号。如果用AF-16进行处理，则封闭间室内的压力不会升高至预期有害的水平，只用载剂处理动物可以证明以上这一点。处理的病症与AF蛋白和肽消除过分泌性病症无关。所述给予AF蛋白和肽的效果通常在一个小时内显示，并持续几个小时。对给予AF的响应很迅速，能够显著减轻封闭间室内压力升高的有害作用。因此，AF蛋白和肽能有效处理活体中的CS，消除封闭CS的产生，否则会有害于受影响的组织和器官的机能。本领域技术人员能够理解，封闭间室中压力的正常化促进了其他药物制剂的给予，目的在于减少压力升高及其并发症，并且使这些药物导向其目标。

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14.WO05/030246

15.WO97/08202

16.WO98/21978

17.US6344440

序列表

<120>治疗间室综合症的新颖途径

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370 375 380

Claims (12)

1.对应于氨基酸VCHSKTRSNPENNVGL的抗分泌蛋白在制造用于治疗和/或防止间室综合症的药物合成物和/或医疗食物中的应用，其中所述间室综合症是由HSV-1和/或SA感染引起的；由泌尿生殖道组织、腺体、肌肉、液囊、神经、血管、关节和/或肌腱的异常负荷、损伤和/或疾病引起；由颅内、脑内、脊柱和/或脊髓内的过负荷、损伤和/或出血引起；由来自于动脉瘤、中风和/或局部缺血的过负荷、损伤和/或出血引起；由皮肤、心脏、肾脏、睾丸、卵巢和/或淋巴器官的压塞引起；由体内的良性和/或恶性肿瘤引起，和/或其中所述综合症对一个或多个椎间盘造成损伤。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗分泌蛋白在富含所述抗分泌蛋白的蛋黄中提供。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物合成物进一步包含药物学可接受赋形剂。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物合成物针对局部和/或全身性给药的目的配制。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物合成物针对体腔、眼内、鼻内、口服、皮肤、皮下、肌肉内给药的目的配制。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物合成物针对作为气溶胶通过喷雾器或通过吸入器给药的目的配制。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物合成物针对作为喷雾通过喷雾器或通过吸入器给药的目的配制。

8.如权利要求1-7中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物合成物和/或医疗食物针对全身性给药至血液的剂量为每次每千克体重每天0.1微克至10毫克。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物合成物和/或医疗食物针对全身性给药至血液的剂量为每次每千克体重每天1-1000微克。

10.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物合成物的给药作为单剂量进行或每天多次给药。

11.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述综合症导致异常肿胀和/或细胞、组织和/或器官中的液体积聚。

12.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述间室综合症是由腺体的压塞引起的。