CN101407536B - 一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 - Google Patents
一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101407536B CN101407536B CN200810162211XA CN200810162211A CN101407536B CN 101407536 B CN101407536 B CN 101407536B CN 200810162211X A CN200810162211X A CN 200810162211XA CN 200810162211 A CN200810162211 A CN 200810162211A CN 101407536 B CN101407536 B CN 101407536B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- add
- solvent
- herba centellae
- total glycosides
- asiaticoside
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000002904 solvent Substances 0.000 title claims abstract description 72
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 title claims abstract description 40
- QCYLIQBVLZBPNK-UHFFFAOYSA-N asiaticoside A Natural products O1C(C(=O)C(C)C)=CC(C)C(C2(C(OC(C)=O)CC34C5)C)C1CC2(C)C3CCC(C1(C)C)C45CCC1OC1OCC(O)C(O)C1O QCYLIQBVLZBPNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 23
- WYQVAPGDARQUBT-FGWHUCSPSA-N Madecassol Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)OC[C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)OC(=O)[C@]12CC[C@H]([C@@H]([C@H]1C=1[C@@]([C@@]3(CC[C@H]4[C@](C)(CO)[C@@H](O)[C@H](O)C[C@]4(C)[C@H]3CC=1)C)(C)CC2)C)C)[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WYQVAPGDARQUBT-FGWHUCSPSA-N 0.000 title claims abstract description 22
- WYQVAPGDARQUBT-XCWYDTOWSA-N asiaticoside Natural products O=C(O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@]12[C@@H]([C@@H](C)[C@H](C)CC1)C=1[C@](C)([C@@]3(C)[C@@H]([C@@]4(C)[C@H]([C@@](CO)(C)[C@@H](O)[C@H](O)C4)CC3)CC=1)CC2 WYQVAPGDARQUBT-XCWYDTOWSA-N 0.000 title claims abstract description 21
- 229940022757 asiaticoside Drugs 0.000 title claims abstract description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 67
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 66
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 113
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 113
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 57
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 55
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 5
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 claims description 3
- NNWMHSNRRWMMBI-PJISEHJASA-N Asiaticoside B Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC(=O)[C@@]34[C@@H](CC(C)(C)CC3)C=3[C@@]([C@]5(C)C[C@@H](O)[C@H]6[C@](C)(CO)[C@@H](O)[C@H](O)C[C@]6(C)[C@H]5CC=3)(C)CC4)O2)O)[C@H](O)[C@H]1O NNWMHSNRRWMMBI-PJISEHJASA-N 0.000 abstract description 3
- BNMGUJRJUUDLHW-HCZMHFOYSA-N Madecassoside Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)OC[C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)OC(=O)[C@]12CC[C@H]([C@@H]([C@H]1C=1[C@@]([C@@]3(C[C@@H](O)[C@H]4[C@](C)(CO)[C@@H](O)[C@H](O)C[C@]4(C)[C@H]3CC=1)C)(C)CC2)C)C)[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O BNMGUJRJUUDLHW-HCZMHFOYSA-N 0.000 abstract description 3
- BNMGUJRJUUDLHW-HLUHVYOBSA-N Madecassoside Natural products C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@]3(C)C(=CC[C@@H]4[C@@]5(C)C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]5[C@H](O)C[C@@]34C)[C@@H]2[C@H]1C)C(=O)O[C@@H]6O[C@H](CO[C@@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O[C@@H]8O[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]8O)[C@H](O)[C@H]7O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]6O BNMGUJRJUUDLHW-HLUHVYOBSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 abstract 2
- 244000146462 Centella asiatica Species 0.000 description 100
- 235000004032 Centella asiatica Nutrition 0.000 description 100
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 96
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 96
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 31
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 26
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 241000167550 Centella Species 0.000 description 2
- 208000037319 Hepatitis infectious Diseases 0.000 description 2
- 244000018434 Hydrocotyle sibthorpioides Species 0.000 description 2
- 235000002788 Hydrocotyle sibthorpioides Nutrition 0.000 description 2
- WRACWYWAPQQRKC-UHFFFAOYSA-N Madasiatic acid Chemical compound C1C(O)C(O)C(C)(C)C2C(O)CC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)C(C)C5C4=CCC3C21C WRACWYWAPQQRKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 241000644351 Carolus Species 0.000 description 1
- 241000125183 Crithmum maritimum Species 0.000 description 1
- 206010017553 Furuncle Diseases 0.000 description 1
- 241000134253 Lanka Species 0.000 description 1
- 206010027249 Meningitis meningococcal Diseases 0.000 description 1
- 201000010924 Meningococcal meningitis Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010053476 Traumatic haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- JXSVIVRDWWRQRT-UYDOISQJSA-N asiatic acid Chemical compound C1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C JXSVIVRDWWRQRT-UYDOISQJSA-N 0.000 description 1
- 229940011658 asiatic acid Drugs 0.000 description 1
- LBGFKBYMNRAMFC-PYSQTNCISA-N asiatic acid Natural products C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@]3(C)C(=CC[C@@H]4[C@@]5(C)C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@]2(C)[C@H]1C)C(=O)O LBGFKBYMNRAMFC-PYSQTNCISA-N 0.000 description 1
- DOAOYJIOTYDTNV-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;ethyl acetate;hydrate Chemical compound O.CCCCO.CCOC(C)=O DOAOYJIOTYDTNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 208000024732 dysthymic disease Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- CLXOLTFMHAXJST-UHFFFAOYSA-N esculentic acid Natural products C12CC=C3C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C(O)=O)CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1(CO)C CLXOLTFMHAXJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 229940090813 madecassoside Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- -1 triterpene compound Chemical class 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺，工艺步骤如下：1)积雪草总苷用溶剂I溶解后进行固液分离，得到积雪草总苷溶液；2)积雪草总苷溶液中加入溶剂II进行结晶，然后经固液分离后得到固形物与结晶母液两部分，最后固形物经真空干燥后得到高纯度积雪草苷产品。本发明一次结晶可制备纯度大于90％的积雪草苷产品，积雪草苷收率可达80％以上。若需要更高纯度的积雪草苷产品，可采用多次结晶的方式，例如经两次结晶可得到95％以上纯度的积雪草苷产品。另外，结晶母液富含积雪草苷A与积雪草苷B，可进一步加以利用。本发明具有过程简单、生产成本低、污染少、产品积雪草苷收率和纯度高等优点，适合于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺。
背景技术
积雪草【Centella asiatica(L.)UrBan】为伞形科植物，植物学家林奈(Linnaeus，Carolus)于1764年将积雪草归入天胡荽属(Hydrocotyle)，并定名为Hydrocotyleasiatica L.。在1879年，德国人UrBan根据花瓣的排列以及果实的棱数将其从天胡荽属中的独立出来并建立积雪草属(Centella)，积雪草归入该属并更名为Centella asiatica(L.)Urb.。积雪草主要分布于南北半球热带和亚热带地区，主产地为南非、印度、斯里兰卡、马来西亚、印度尼西亚、澳大利亚、日本等，我国亦产积雪草。积雪草在中国的药用历史已达二千多年之久，民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、跌打损伤、疔疮肿毒、外伤出血等。积雪草现代药理学研究和应用有了很大发展，表明积雪草可用于治疗抑郁症、皮肤创伤、胃溃疡、传染性肝炎、皮肤病和流行性脑脊髓膜炎等。
积雪草的化学成分复杂，主要有三萜类、黄酮类、挥发油类、多炔烯类等。其中三萜类化合物是主要的药效成分，包括积雪草苷、积雪草苷A、波热模苷、波热米苷、参枯尼苷、异参枯尼苷、积雪草酸、羟基积雪草波热米酸、马达积雪草酸等。积雪草总苷是从积雪草中提取得到的皂苷类物质的总称，主要由三萜苷类物质组成，其中代表性成分主要有积雪草苷(Aisaticoside，CAS No.：16830-15-2)、积雪草苷A(Asaiticoside A；Madecassoside，CAS No.：34540-22-2)和积雪草苷B(Asaiticoside B，CAS No.：125265-68-1)。积雪草苷A也叫羟基积雪草苷，积雪草苷B和积雪草苷A是一对同分异构体。积雪草苷A和积雪草苷B与积雪草苷相比多了一个羟基，极性差异较大，积雪草苷A和积雪草苷B的差异只在于其中一个甲基归属不同，且两个不同的归属处于邻位关系，极性差异较小。
积雪草苷(a)、积雪草苷A(b)与积雪草苷B(c)的结构式如下：
研究表明积雪草苷具有促进伤口愈合，治疗疤痕的药理作用。
积雪草苷在医药、化妆品等领域已有广泛的应用前景，而目前大多采用柱层析方法从积雪草总苷中分离制备积雪草苷，该方法存在操作周期长、溶剂消耗多、成本高等缺点，导致高纯度积雪草苷价格高，所以非常有必要寻找高效分离制备积雪草苷的工艺方法来改变现有积雪草苷的制备方法，以降低其生产成本并提高其生产效率。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺。
包括如下步骤：
1)积雪草总苷用溶剂I溶解后进行固液分离，得到积雪草总苷溶液；
2)积雪草总苷溶液中加入溶剂II进行结晶，然后经固液分离后得到固形物与结晶母液两部分，最后固形物经真空干燥后得到高纯度积雪草苷产品。
步骤1)中溶剂I为甲醇或二甲基甲酰胺(DMF)，加入量为2.5～100mL/g积雪草总苷。步骤2)中溶剂II为丙酮、乙腈、***、乙酸乙酯或水，加入量为溶剂I加入量的0.5～10倍。步骤1)和步骤2)中固液分离方法为过滤或离心。
本发明中的高纯度积雪草苷是指纯度大于90％的积雪草苷产品，通过一次结晶制备得到，积雪草苷收率可达80％以上。温度对结晶过程的影响不大，可在室温进行，结晶时间通常在12小时以上。若需要更高纯度的积雪草苷产品，可采用多次结晶的方式，例如经两次结晶可得到95％以上纯度的积雪草苷产品。另外，结晶母液富含积雪草苷A与积雪草苷B，可进一步加以利用。
本发明具有过程简单、生产成本低、污染少、产品积雪草苷收率和纯度高等优点，适合于工业化生产。
附图说明
附图是一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺流程简图。
具体实施方式
以下用实施例对本发明的工艺方法作进一步的说明。本发明的保护范围不受实施例的限制，本发明的保护范围由权利要求书决定。
积雪草总苷原料购自广西昌洲天然药业有限公司，经检测其中积雪草苷质量含量为30.0％，积雪草苷A与积雪草苷B质量含量合占49.5％。
实施例中所用的分析条件如下：
薄层色谱(TLC)分析条件：硅胶G254薄板，展开剂为正丁醇—乙酸乙酯—水＝4：1：5(取上层溶液使用)，显色剂为10％的浓硫酸乙醇溶液。
高效液相色谱(HPLC)分析条件：Agilentl 100液相色谱分析***，色谱柱为Phenomenex C-18 column SynergiTM Fusion-RP 80A(4μ，150mm×4.60mm ID)，流动相乙腈—水(50:50)，流速1mL/min，柱温30℃，紫外检测波长205nm。
实施例1
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入1000mL二甲基甲酰胺(100mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入5000mL丙酮(溶剂I加入量的5倍)于室温下进行结晶，24h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到1.1g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为93％，积雪草苷收率为31％。
实施例2
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入200mL甲醇(20mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入800mL水(溶剂I加入量的4倍)于30℃进行结晶，18h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为67％。
实施例3
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入100mL二甲基甲酰胺(10mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入300mL水(溶剂I加入量的3倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为68％。
实施例4
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入50mL甲醇(5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入100mL乙腈(溶剂I加入量的2倍)于室温下进行结晶，8h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.6g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为94％，积雪草苷收率为83％。
实施例5
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL二甲基甲酰胺(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入33mL丙酮(溶剂I加入量的1倍)于室温下进行结晶，6h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3.0g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为90％，积雪草苷收率为91％。
实施例6
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入25mL甲醇(2.5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入12.5mL乙酸乙酯(溶剂I加入量的0.5倍)于室温下进行结晶，6h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为85％，积雪草苷收率为92％。
实施例7
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入25mL二甲基甲酰胺(2.5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入150mL乙酸乙酯(溶剂I加入量的6倍)于室温下进行结晶，6h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.9g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为84％，积雪草苷收率为82％。
实施例8
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL甲醇(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入200mL水(溶剂I加入量的6倍)于室温下进行结晶，8h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.7g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为83％。
实施例9
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入50mL二甲基甲酰胺(5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入350mL水(溶剂I加入量的7倍)于室温下进行结晶，10h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.9g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为91％，积雪草苷收率为89％。
实施例10
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入100mL甲醇(10mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入800mL水(溶剂I加入量的8倍)于室温下进行结晶，10h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.8g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为87％，积雪草苷收率为81％。
实施例11
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入200mL二甲基甲酰胺(20mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入1800mL***(溶剂I加入量的9倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3.3g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为83％，积雪草苷收率为91％。
实施例12
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入1000mL甲醇(100mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入10000mL水(溶剂I加入量的10倍)于室温下进行结晶，36h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到1.7g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为80％，积雪草苷收率为45％。
实施例13
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入200mL甲醇(20mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入800mL丙酮(溶剂I加入量的4倍)于冰水浴下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为67％。
实施例14
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入100mL二甲基甲酰胺(10mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入300mL丙酮(溶剂I加入量的3倍)于室温下进行结晶，10h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为68％。
实施例15
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL二甲基甲酰胺(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入33mL乙腈(溶剂I加入量的1倍)于室温下进行结晶，4h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为90％，积雪草苷收率为91％。
实施例16
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入25mL甲醇(2.5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入12.5mL乙腈(溶剂I加入量的0.5倍)于室温下进行结晶，24h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为85％，积雪草苷收率为92％。
实施例17
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL甲醇(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入200mL乙酸乙酯(溶剂I加入量的6倍)于室温下进行结晶，18h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.7g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为83％。
实施例18
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入50mL二甲基甲酰胺(5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入350mL乙酸乙酯(溶剂I加入量的7倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.9g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为91％，积雪草苷收率为89％。
实施例19
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入100mL甲醇(10mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入800mL***(溶剂I加入量的8倍)于40℃进行结晶，14h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.8g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为87％，积雪草苷收率为81％。
实施例20
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入1000mL二甲基甲酰胺(100mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入3000mL***(溶剂I加入量的3倍)于45℃进行结晶，24h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到1.4g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为73％，积雪草苷收率为35％。
实施例21
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入100mL二甲基甲酰胺(10mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入300mL丙酮(溶剂I加入量的3倍)于室温下进行结晶，8h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为68％。
将得到的2.9g积雪草苷产品加入烧杯中，加入30mL二甲基甲酰胺，溶解后加入90mL丙酮于室温下进行二次结晶，8h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到1.8g积雪草苷产品。经HPLC检测，纯度为96％，积雪草苷总收率为59％。
实施例22
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL甲醇(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入200mL水(溶剂I加入量的6倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.7g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为83％。
将得到的2.8g积雪草苷产品加入烧杯中，加入10mL甲醇，溶解后加入60mL水于室温下进行二次结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.2g积雪草苷产品。经HPLC检测，纯度为96％，积雪草苷总收率为69％。
实施例23
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入33mL甲醇(3.3mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入200mL乙酸乙酯(溶剂I加入量的6倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.7g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为92％，积雪草苷收率为83％。
将得到的2.7g积雪草苷产品加入烧杯中，加入9mL甲醇，溶解后加入54mL乙酸乙酯于室温下进行二次结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.1g积雪草苷产品。经HPLC检测，纯度为97％，积雪草苷总收率为66％。
实施例24
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入1000mL二甲基甲酰胺(100mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入3000mL***(溶剂I加入量的3倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到3.4g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为80％，积雪草苷收率为90％。
将得到的3.4g积雪草苷产品加入烧杯中，加入340mL二甲基甲酰胺，溶解后加入1020mL***于室温下进行二次结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.4g积雪草苷产品。经HPLC检测，纯度为97％，积雪草苷总收率为85％。
实施例25
取10g积雪草总苷原料加入烧杯中，加入50mL甲醇(5mL溶剂I/g积雪草总苷)，溶解后过滤得到积雪草总苷溶液；积雪草总苷溶液中加入100mL乙腈(溶剂I加入量的2倍)于室温下进行结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.6g积雪草苷产品，经HPLC检测，纯度为94％，积雪草苷收率为83％。
将得到的2.6g积雪草苷产品加入烧杯中，加入15mL甲醇，溶解后加入105mL乙腈于室温下进行二次结晶，12h后经过滤得到固形物，固形物经真空干燥后得到2.3g积雪草苷产品。经HPLC检测，纯度为97％，积雪草苷总收率为77％。
Claims (1)
1.一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺，其特征在于包括如下步骤：
1)积雪草总苷用溶剂I溶解后进行固液分离，得到积雪草总苷溶液；
2)积雪草总苷溶液中加入溶剂II进行结晶，然后经固液分离后得到固形物与结晶母液两部分，最后固形物经真空干燥后得到高纯度积雪草苷产品；
所述步骤1)中溶剂I为甲醇或二甲基甲酰胺；所述步骤1)中溶剂I的加入量为2.5～100mL/g积雪草总苷；所述步骤1)和步骤2)中固液分离方法为过滤或离心；所述步骤2)中溶剂II为丙酮、乙腈、***、乙酸乙酯或水；所述步骤2)中溶剂II的加入量为溶剂I加入量的0.5～10倍。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200810162211XA CN101407536B (zh) | 2008-11-27 | 2008-11-27 | 一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200810162211XA CN101407536B (zh) | 2008-11-27 | 2008-11-27 | 一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101407536A CN101407536A (zh) | 2009-04-15 |
| CN101407536B true CN101407536B (zh) | 2011-05-18 |
Family
ID=40570762
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200810162211XA Expired - Fee Related CN101407536B (zh) | 2008-11-27 | 2008-11-27 | 一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101407536B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101983966B (zh) * | 2010-11-19 | 2012-08-15 | 浙江大学 | 低积雪草苷含量总苷出发同时制备积雪草苷和羟基积雪草苷的工艺 |
| CN102114063B (zh) * | 2011-01-29 | 2012-05-23 | 桂林普兰德生物科技有限公司 | 逆流提取结合膜分离提取分离积雪草总苷的方法 |
| CN108395464B (zh) * | 2017-02-08 | 2019-12-31 | 桂林三金药业股份有限公司 | 一种从积雪草出发制备积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷b的方法 |
| CN112773745A (zh) * | 2021-02-06 | 2021-05-11 | 广州贝塔健康生物科技有限公司 | 一种积雪草苷提取物制备方法及在化妆品中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0383171A2 (en) * | 1989-02-11 | 1990-08-22 | Hoechst Aktiengesellschaft | 2,3,23-trihydroxy-urs-12-ene derivatives for treating cognitive disorders |
| CN1194154A (zh) * | 1997-03-24 | 1998-09-30 | 东国制药株式会社 | 自积雪草的积雪草苷和羟基的积雪草苷和羧基积雪草苷的水溶性提取物及其分离方法 |
| CN1387868A (zh) * | 2001-05-29 | 2003-01-01 | 中国人民解放军第二军医大学 | 积雪草总甙的制备新方法及其新用途 |
| CN1774257A (zh) * | 2002-12-10 | 2006-05-17 | 拜尔消费者保健股份公司 | 制备富含羟基积雪草苷和特米诺苷的积雪草酸提取物的方法 |
-
2008
- 2008-11-27 CN CN200810162211XA patent/CN101407536B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0383171A2 (en) * | 1989-02-11 | 1990-08-22 | Hoechst Aktiengesellschaft | 2,3,23-trihydroxy-urs-12-ene derivatives for treating cognitive disorders |
| CN1194154A (zh) * | 1997-03-24 | 1998-09-30 | 东国制药株式会社 | 自积雪草的积雪草苷和羟基的积雪草苷和羧基积雪草苷的水溶性提取物及其分离方法 |
| CN1387868A (zh) * | 2001-05-29 | 2003-01-01 | 中国人民解放军第二军医大学 | 积雪草总甙的制备新方法及其新用途 |
| CN1774257A (zh) * | 2002-12-10 | 2006-05-17 | 拜尔消费者保健股份公司 | 制备富含羟基积雪草苷和特米诺苷的积雪草酸提取物的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 王宝奎等."积雪草甙的提取与分离".《海峡药学》.1996,第8卷(第4期),第3页. |
| 黄怀鹏等."大孔树脂纯化积雪草总苷的工艺研究".《中药材》.2008,第31卷(第7期),第1072-1074页. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101407536A (zh) | 2009-04-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101559088B (zh) | 穿心莲总内酯与新穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯的生产工艺 | |
| CN102846784B (zh) | 鸡矢藤水提取物、其制备方法和用途 | |
| CN103483402A (zh) | 甜菊苷及莱鲍迪苷a的提纯制备方法 | |
| CN101407536B (zh) | 一种溶剂结晶法制备高纯度积雪草苷的工艺 | |
| Gupta et al. | Evolvosides C–E, flavonol-4-O-triglycosides from Evolvulus alsinoides and their anti-stress activity | |
| CN1966511A (zh) | 獐牙菜苦苷单体的分离纯化方法 | |
| CN106008647A (zh) | 一种苦瓜皂苷的新型提取方法 | |
| CN101891727A (zh) | 从神农香菊中分离提取芹菜素、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的方法 | |
| CN103342689B (zh) | 从瓜蒌皮中分离纯化木犀草素、芹菜素和香叶木素的方法 | |
| CN109796511B (zh) | 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途 | |
| CN103613629A (zh) | 从罗汉果中制备高纯度罗汉果苷iie的方法 | |
| CN102920727B (zh) | 制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法 | |
| CN101531721B (zh) | 一种三萜皂苷单体的工业化制备方法 | |
| CN100427501C (zh) | 逆流色谱法从柿叶中分离制备熊果酸及其衍生物的方法 | |
| CN103421058B (zh) | 一种高效率精确分离纯化去氧土大黄苷的方法 | |
| CN113354697B (zh) | 一种分离纯化柳穿鱼叶苷和蒙花苷的方法 | |
| CN101891729B (zh) | 一种从青天葵中提取高纯度鼠李秦素的方法 | |
| CN113440547B (zh) | 采用大孔树脂串联动态轴向压缩柱分离纯化大蓟总苷的方法 | |
| CN104140391A (zh) | 一种从千金子中分离制备高纯度千金二萜醇二乙酸烟酸酯的方法 | |
| CN103113439A (zh) | 从对叶大戟中制备山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法 | |
| CN104311615B (zh) | 从陇蜀杜鹃叶中提取分离金丝桃苷和棉花皮素‑3‑O‑β‑D‑半乳糖苷的方法 | |
| CN103524574B (zh) | 一种从列当科植物中制备类叶升麻苷的方法 | |
| CN101983966B (zh) | 低积雪草苷含量总苷出发同时制备积雪草苷和羟基积雪草苷的工艺 | |
| CN102212002B (zh) | 一种高纯度丹酚酸a的批量制备方法 | |
| CN104650164A (zh) | 一种制备辣椒叶活性黄酮苷单体的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20110518 Termination date: 20131127 |