CN101380339B - 灰兜巴有效成份的提取方法 - Google Patents

Abstract

灰兜巴有效成份的提取方法，涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法，属于中草药开发应用领域。将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将滤液经旋转蒸发仪浓缩，然后用浓度不低于80％的乙醇沉淀，采用低温超速离心，分离出多糖沉淀，将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖。本方法工艺简单，不含游离的蛋白质，无需三氯醋酸沉淀蛋白质，不必洗涤除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作为口服药防治T型E型糖尿病使用，以提高药物疗效。

Description

灰兜巴有效成份的提取方法

技术领域

本发明涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法，属于中草药开发应用领域。

背景技术

灰兜巴(又名闭口袋)是一种山蜘蛛寄生在海拔1500米以上的峨眉山老茶树头部生长出来的菌科植物。性味：平、淡。功能：1、益气健脾，滋补肾阴、消除、缓解糖尿病症状。2、改善胰岛B细胞性不足，促进体内血糖的自然平衡。3、平衡阴阳，调和气血，纠正代谢絮乱，防止糖尿病并发症。主治：糖尿病。适用于T型E型糖尿病，当血糖下降到正常值时，应健康饮食，坚持运动，使其控制血糖稳定，不需依赖药物治疗。称为仙山灵药、糖尿病克星、天然纯绿色的大自然珍宝。民间已有患者服用并显示其免疫力增强，血糖下降到正常值，且无毒副作用。但目前为止，人们对灰兜巴的理论研究尚少。

发明内容

本发明目的在于从研究一种灰兜巴有效成份的提取方法，以进一步开发灰兜巴产品为目的。

本发明技术方案是：将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将滤液经旋转蒸发仪浓缩，然后用浓度不低于80％的乙醇沉淀，采用低温超速离心，分离出多糖沉淀，将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖。

本发明方法工艺简单，不含游离的蛋白质，无需三氯醋酸沉淀蛋白质，不必洗涤除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作为口服药防治T型E型糖尿病使用，以提高药物疗效，可望该多糖有效成份提取利用对增强人的免疫力，具有积极作用和深远意义。

本发明中，灰兜巴浸泡时，水为室温，提取时水浴温度60℃～90℃。如温度太低，有效成份溶出速率慢，如温度太高，可能会造成有效成份部分氧化。

为了将灰兜巴粗多糖尽可能完全地提取出来，按浓缩液体积3～4倍量的无水乙醇沉淀出多糖，并依次用有机溶剂洗涤。

为了进一步提纯，获得精制灰兜巴有成份，本发明还将粗多糖经柱层析分离得多糖产品。

为了充分利用灰兜巴，使有效成份尽可能完全溶解在水中，本发明先将灰兜巴粉碎后再浸泡。

所述有机溶剂为乙醇或丙酮或***或石油醚。

具体实施方式

一、灰兜巴有效成份的提取：

称取一定质量灰兜巴剪碎，投入圆底烧瓶中，加蒸馏水至刚好将药品浸没，室温浸泡1～3小时后，于水浴回流提取1h，水浴温度60℃～90℃，抽出提取液。用同样的方法以蒸馏水再提取2次，每次1h，合并提取液。

将滤液经旋转蒸发仪浓缩，再用浓缩液体积3～4倍量的无水乙醇沉淀多糖，冰箱冷藏静置12小时，采用低温超速离心分离出固体多糖，然后依次用无水乙醇、丙酮和***等有机溶剂反复洗涤多糖沉淀(每种溶剂至少洗3次)。真空干燥(由于最后用***洗涤，所以真空干燥箱内放置一定量的吸水剂、抗氧剂，室温抽真空12小时，)，得粉红色粉末，此为灰兜巴粗多糖。

将粗多糖再经柱层析分离得多糖产品。

洗涤多糖沉淀物时，可用的有机溶剂还有石油醚。

二、多糖产品性能表征、特点：

与镁粉-浓盐酸反应不显橙红色，提示不含黄酮类。

加入中性盐，三氯醋酸，未见絮状物析出，表明无游离蛋白质。

与茚三酮共热，显蓝紫色，紫外光谱测定在波长280nm处有吸收，表明提取物中有蛋白质结构部分。

红外光谱显示此多糖含有α-和β-糖苷键。

毛细管电泳分析灰兜巴多糖中氨基酸的组成。色谱法测定多糖分子量。

灰兜巴多糖系肽多糖。

三、应用：

某患者，经常感冒，血糖指数12mmol/L。

服用经本发明提取的灰兜巴粗多糖，每日30g灰兜巴的水提液，经60天后，其免疫力增强，与服用前的同季节相比，患感冒次数明显下降，血糖下降到正常值。

Claims (3)

1.灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于将灰兜巴浸泡水提，抽滤分离，将抽滤液经旋转蒸发仪浓缩，然后用浓度不低于80％的乙醇沉淀，采用低温超速离心分离出多糖沉淀，将沉淀出的多糖依次用无水乙醇、丙酮和***各至少洗涤3次，再经真空干燥，得灰兜巴粗多糖；浸泡灰兜巴时，水温为室温，提取时水浴温度为60℃～90℃。

2.根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于先将灰兜巴剪碎后再浸泡。

3.根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于沉淀多糖时，按浓缩液体积3～4倍量的无水乙醇沉淀出多糖。