CN101269151A - 玄参在制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属中药制药领域，涉及中药玄参在制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭药物中的用途。本发明采用国内外学术界公认的多种小鼠及大鼠心肌肥大、心室重构模型对中药玄参的作用进行研究。实验结果揭示，玄参水或醇提物具有明显的抗多种原因所致心肌肥大、心室重构、慢性心衰的作用，其作用机制与抑制肾素—血管紧张素—醛固酮等神经内分泌***的过度激活明显相关，同时也与降低血压、减慢心率、改善血流动力学的作用相关。玄参可用于制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病、慢性心衰的药物，并可减少心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭患者心律失常、猝死的发生率。

Description

玄参在制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭药物中的应用

技术领域

本发明属中药制药领域，涉及中药玄参在制备防治心室重构药物中的用途，具体涉及中药玄参在制备防治心肌肥大(myocardial hypertrophy)、肥厚性心肌病(hypertrophic cardiomyopathy)和慢性心力衰竭(chronic heart failure)药物中的用途。

背景技术

慢性心功能不全又称充血性心力衰竭(Congestive heart failure，CHF)，是多种病因所致心脏泵血功能降低，不能排出足够的血液以满足全身组织器官代谢需要的一种临床综合症，临床病死率很高。

以往临床对CHF的治疗重点是使用强心甙类正性肌力作用药物和利尿药。70年代后对CHF还提倡使用新型非洋地黄类正性肌力作用药物，主要有磷酸二酯酶抑制剂和β-受体激动剂。目前治疗慢性心力衰的长期基本治疗药物有①利尿剂、②洋地黄类药物如地高辛、③血管紧张素转换酶抑制剂，代表药：卡托普利及血管紧张素受体拮抗剂如氯沙坦，④β-受体阻滞剂如***、美托洛尔等四类药组成。其中利尿剂主要用于消除水肿，减轻心脏负担；洋地黄类药物主要用于改善血流动力学症状。

近年对大量的临床资料总结发现，所有加强心肌收缩力、改善血流动力学类药物虽然可短期收到一定改善症状的效果，但均不能防治心室肥厚，也不能降低患者病死率。长期使用磷酸二酯酶抑制剂和β-受体激动剂，虽能短期改善血流动力学和心衰症状，但反而能增加心衰患者心律失常的发生率、猝死率及远期死亡率。目前强心苷类药物因其可改善患者的血流动力学症状，仍用于治疗心衰。但众多文献报道此类药物对生命的影响是中性，并不延长患者生命。强心苷类药物也不能防治心室肥厚。

80年代后，人们逐渐认识到心肌肥大、心室重构是心力衰竭的特征，同时也是决定心力衰竭发病率，病程进展和死亡率的因素。心室肥厚常继发于高血压和心肌梗死。心室肥厚通常涉及心室结构的改变，即发生心室重构(remodeling)。心室重构包括心肌细胞肥大、***如成纤维细胞增殖，胶原增生，同时心脏的顺应性降低，射血功能也受到明显影响。随着心肌肥大、心室肥厚的发生和发展，心律失常、心衰、猝死的发生率提高。因此，心肌细胞肥大、心室肥厚是CHF的病理核心，使用药物干预和逆转心肌肥大、心室重构是防治CHF的有效手段。

心肌肥大、心室肥厚与肾素-血管紧张素-醛固酮***活性增强，神经内分泌激素的持续激活和交感神经的持续兴奋有关。近年临床对慢性心衰的治疗策略已发生改变，从短期的改善血液动力学措施，转为长期的修复性防治。目的是通过抑制与心肌肥大、心室肥厚的相关刺激、介导因素，从而改善心肌的生物学功能，改变衰竭心脏的生物学性质。有临床研究表明，采用血管紧张素转换酶抑制剂或β-受体阻滞剂类药物防治慢性心衰，即使在治疗的早期，有些药物对血流动力学的改变不明显，但对心肌仍有长期的生物学效应，可防止或延缓心肌肥大、心室肥厚的发展。例如β受体阻滞剂：80年代前禁止用于心衰，但大量的实验和临床资料证明，这类药能防止心肌肥大、心室肥厚的发展并降低心律失常、心衰、猝死的发生率。美国和欧洲心衰治疗指南认为：所有病情稳定的心衰患者均需应用β受体阻滞剂，除非有禁忌症，而且要尽早应用，不要等到其它疗法无效时再用。同样，心衰患者除非有禁忌症或不能耐受，也需无限期使用血管紧张素转化酶抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂。

心衰在中医药古籍中并没有相应的病名，但中医药古籍中对一些病症的描述与现代医学对心衰的描述极为相似。如“支饮不得息”(《伤寒论》)；“咳嗽上气，不得卧，或遍身气肿”(《本草纲目》)；“水始起也，目窠上微肿，如新卧起之状，其颈脉动，时咳。……足胫肿，腹乃大，其水已成矣。”(《内经》)。这类似于心衰时出现的呼吸困难、端坐呼吸及水肿、颈静脉扩张。这些描述更多地散在于中医的“喘证”、“水肿”之中。中医所描述的“喘、不能平卧、水肿、颈脉动”等，与现代医学对心衰的描述极为相似。

玄参为玄参科多年生草本植物玄参的根，是著名的传统中药。始载于《神农本草经》，列为中品，性味苦、甘、咸、寒，可入肺经、胃经、肾经，具有滋阴，降火，生津，凉血，解毒等功效。现代药理研究表明，玄参含有玄参素、单萜甙类、微量挥发油、甾醇、挥发性生物碱、糖类、脂肪酸等成分，具有使白细胞升高、抗心肌缺血、增加冠状动脉血流量、降血压、降血糖、解热和抗真菌等作用。但对防治心室重构，心肌肥大、慢性心力衰竭的作用未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供中药玄参在制药中的新用途。

本发明涉及中药玄参在制备防治心室重构药物中的新用途，尤其涉及中药玄参在制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭药物中的用途。

本发明涉及的中药玄参的上述作用及用途未见有相关的报道。

本发明所涉及的玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根，用其水提物或乙醇提取物。

本发明所涉及的玄参在冬季茎叶枯萎时采挖，除去根茎、幼芽、须根及泥沙，晒或烘至半干，堆放3～6天，反复数次至干燥。

本发明所涉及的玄参呈类圆柱形，中间略粗或上粗下细，有的微弯曲，长6～20cm，直径1～3cm。表面灰黄色或灰褐色，有不规则的纵沟、横向皮孔及稀疏的横纹和须根痕。质坚实，不易折断，断面黑色，微有光泽。气特异似焦糖，味甘、微苦。

本发明上述玄参水提物的提取方法为现有技术中的常规方法，即：取玄参，加水煎煮2～3次，每次煮沸30～45分钟，合并煎液，浓缩，干燥成干浸膏或颗粒备用。

本发明上述玄参乙醇提取物的提取方法为现有技术中的常规方法，即：取玄参40％～95％乙醇热回流提取2～3次，每次30～60分钟，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥成干浸膏或颗粒备用。

本领域公认，心肌肥大、心室重构是由于血流动力学异常和神经内分泌紊乱相互作用的结果。心脏在应对多种原因引起的血流动力学异常时，自主神经发生了一系列的变化。在心室肥厚的发病机制中神经内分泌因素较血流动力学因素可能更为重要。现已发现参与心肌肥大心室肥厚的神经内分泌因子和自分泌/旁分泌因子主要有：儿茶酚胺、血管紧张素II(Ang II)、醛固酮、血管内皮素-1(ET-1)、纤维细胞生长因子等。已发现，心脏超负荷时，局部交感神经活性提高，循环中儿茶酚胺含量明显增加。血浆肾上腺素浓度与心室肥厚程度呈正相关。有研究表明，在实验动物中长期注射亚高剂量的去甲肾上腺素或异丙肾上腺素均可诱发心肌肥大、心室肥厚。持久的交感神经兴奋性增强，除通过影响血流动力学和直接对心脏作用而诱发或加重心室肥厚外，还引起肾素分泌过多，导致全身及心脏局部组织的肾素-血管紧张素-醛固酮***(RAAS)活化，并进一步使交感神经兴奋性增强、神经内分泌过度激活，形成恶性循环。采用血管紧张素转化酶抑制剂和β受体阻滞剂具有阻断交感神经兴奋性增强、神经内分泌过度激活所形成的恶性循环作用，其疗效已被近年的临床实践所肯定。

本发明分别采用国内外学术界已广泛应用的异丙肾上腺素、L-甲状腺素钠及压力超负荷三种方法制备小鼠及大鼠的心肌肥大、心室重构模型。实验结果显示三种模型动物都出现全心和左心指数显著增加，心肌组织血管紧张素II(AngII)浓度提高等心肌肥大，心室重构的特征，进行玄参干预实验，结果证实，玄参可明显抑制三种模型动物心肌肥大，心室重构。

本发明通过下述技术方案施行：

按本领域公知技术，小鼠皮下注射(sc)异丙肾上腺素2mg/kg/d，连续7d，制备心肌肥大、心室肥厚模型；SD大鼠腹腔注射(ip)L-甲状腺素钠0.3mg/kg/d，连续7～10d，制备心肌肥大、心室肥厚模型；以及大鼠用内径为0.5mm的银夹不完全结扎左右肾动脉之间的腹主动脉，使之外径狭窄至0.5mm，制备压力超负荷性心室重构模型。模型动物分别口服玄参提取液，卡托普利和饮用水，观察动物心肌肥厚指数的变化，用放射免疫分析法测定大鼠左心室心肌组织的血管紧张素II(AngII)和血浆中的环磷酸腺苷(cAMP)，醛固酮(ALD)浓度的变化。结果显示：玄参可降低血浆cAMP浓度，提示其具有抑制交感神经兴奋性作用；又可降低心肌组织AngII，和血浆醛固酮浓度，说明玄参具有阻断肾素-血管紧张素-醛固酮***(RAAS)活化的作用，与正常组比较，模型组动物心肌肥厚指数、心肌Ang II含量，血浆cAMP，ALD浓度明显升高，(P＜0.05)。

实验证实，玄参通过抑制导致心肌肥大、心室肥厚的有关刺激、介导因素，从而改善心肌肥大、心室肥厚的症状和心肌的生物学功能。具有防治心肌肥大、心室重构的作用，可制备防治心肌肥大、心室重构的药物，进而可预防或延缓心衰的发生、发展，减少心肌肥大、心室肥厚患者心律失常、心衰、猝死的发生率。其作用机制与抑制肾素-血管紧张素-醛固酮***活性，抑制神经内分泌激素激活，及抑制交感神经的持续兴奋有关。

本发明的有益效果突出体现在：中药玄参价廉、易得，具有抗心肌肥大，心室重构、防治心衰的新作用，未见明显急性毒性，将其进一步开发应用于防治充血性心力衰竭，对于改善心衰患者的生活质量，降低心律失常的发生率、猝死率及远期死亡率具有重要意义。

据统计，心衰的发病率约为1.0％-1.5％。65岁以上人口的年平均发病率达10％左右。尽管在过去10-20年中，对慢性心衰的治疗取得了很大进步，但CHF患者的5年病死率仍高达50％。有研究分析认为，心衰的预后与恶性肿瘤一样，甚至比恶性肿瘤更差。因此，慢性心衰一旦发展到血流动力学变化明显之时，靠强心苷类药物治疗绝非上策。尽早使用具有抑制肾素-血管紧张素-醛固酮***活性，抑制神经内分泌激素激活，及抑制交感神经持续兴奋的药物尤其是本发明提供的玄参，对防治心肌肥大、心室肥厚，改善心肌的生物学功能，具有更大的临床推广价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

本发明以下实施例所用的玄参符合中国药典2005年版一部正文各药材项下的有关各项规定。药材已经过净制、切制、炮制、粉碎等加工处理，通过鉴定，各味药材实物与名称相符，质量符合国家药典标准(具体药材鉴定办法参照药典标准执行)。

本发明以下实施例所用的玄参水提物(水煎液)的制备包括如下步骤：取玄参，加水煎煮2～3次，每次煮沸30～45分钟，合并煎液，浓缩，干燥成干浸膏或颗粒备用。临用时加水配置成适当浓度。

本发明以下实施例所用的乙醇提取物的制备包括如下步骤：取玄参加40％～95％乙醇热回流提取2～3次，每次30～60分钟，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥成干浸膏或颗粒备用。临用时加水配置成适当浓度。

实施例1(玄参抗异丙肾上腺素致小鼠心室重构观察)

选用20-22g小鼠，随机分为5组：正常对照组，模型组，美托洛尔组和玄参高、低剂量组。除正常对照组外，各组连续7d背部皮下注射异丙肾上腺素2mg/kg/d，每天1次，造成心肌肥厚模型。正常组小鼠背部皮下注射相同体积的生理盐水，连续7天。治疗组在给予异丙肾上腺素后1h灌胃给予玄参水煎液39g/(kg.d)×7d，19.5g/(kg.d)×7d和美托洛尔60mg/(kg.d)×7d；正常组、模型组灌胃给予相同体积的生理盐水。于末次给药后禁食不禁水12h，然后取血和心肌进行各项分析。

1.1小鼠心肌肥厚指数的测定

小鼠称重，摘眼球取血备用，脱颈椎处死，快速打开胸腔取心脏，去除心房组织，沿室间隔剪开，分离左、右心室，生理盐水漂洗去血，用滤纸吸干水分，电子天平准确称取左心室重量和全心重量。计算全心重量/体重(HW/BW)，左心室重量/体重(LVW/BW)，分别记为全心肥厚指数(HWI)，左心室肥厚指数(LVWI)。

1.2血浆cAMP含量测定

取血，加EDTA溶液50μL抗凝。低温离心机3500rpm离心10min，取上清液待测cAMP含量。具体方法按剂盒说明书进行。

1.3心室组织AngII浓度测定

取小鼠的心肌组织约40mg，在冰水中迅速剪碎，加入4ml预冷的生理盐水在冰浴环境中快速匀浆，制备成1％的组织匀浆，1000r/min离心5min，取上清液测定AngII。具体操作方法按试剂盒说明书。

结果表明，模型组动物心脏指数明显增加，玄参大、小剂量组均有明显减小心脏指数的作用，结果见表1。

表1  玄参抗异丙肾上腺素致小鼠心肌肥大作用的观察(心脏指数，x±s)

与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01

随机挑选每组10只小鼠的血清样本测cAMP。具体方法为：取0.1ml血浆，加入无水乙醇1ml，混匀，4000rpm离心10min，取上清液A，下层继续加75％乙醇1ml，混匀，4000rpm离心10min，取上清液B，A与B合并置于60℃水浴锅中水浴挥发掉乙醇，残留物中加入0.05M醋酸缓冲液2ml，混匀，从中取0.1ml再加入0.05M醋酸缓冲液0.2ml，混匀，再从中取0.1ml溶液进行cAMP含量检测。cAMP含量测定按试剂盒说明书进行。结果模型组小鼠较正常组血浆cAMP浓度明显升高，玄参大、小剂量组和美托洛尔组明显降低小鼠血浆cAMP浓度(见表2)。

表2  玄参对异丙肾上腺素致心肌肥大小鼠血浆cAMP的影响(x±s，n＝10)

与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

每组随机挑选10个小鼠的心肌组织样本测Ang II。具体方法为：取小鼠的心肌组织约40mg，加入4ml生理盐水在冰浴环境中快速匀浆，制成1％匀浆，按血管紧张素II试剂盒说明书进行操作。结果表明模型组小鼠较正常组小鼠心肌AngII含量明显升高，玄参大剂量组和美托洛尔组有明显降低小鼠心肌AngII含量的作用，结果见表3。

表3  玄参对异丙肾上腺素致心肌肥大小鼠心肌AngII含量的影响(x±s，n＝10)

与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

用玄参的乙醇提取物进行研究，发现也有减少异丙肾上腺素致小鼠心脏指数的作用。

实施例2(玄参抗甲状腺素致大鼠心肌肥大作用观察)

选用220-250g的雄性SD大鼠随机分为5组(每组11只)：分别为正常对照组，模型组，卡托普利40mg/kg，玄参高剂量组(玄参27g/kg)，玄参低剂量组(13.5g/kg)。除正常对照组外，各组连续7d腹腔注射L-甲状腺素0.25mg/kg/d，每天1次，制备心肌肥厚模型。正常组腹腔注射相同体积的生理盐水，连续7d。玄参高、低剂量组在给予L-甲状腺素的同时灌胃玄参水煎液27g/kg、13.5g/kg，连续灌胃给药9d；正常组灌胃给予相同体积的生理盐水；卡托普利组按照每日40mg/kg连续灌胃给药9d。于末次给药后禁食不禁水12h，然后取血和心肌进行各项分析。

2.1大鼠心肌肥厚指数的测定

大鼠称体重(BW)后腹主动脉取血。快速打开胸腔取心脏，去除心房组织，沿室间隔剪开，分离左、右心室，生理盐水漂洗去血，用滤纸吸干水分，电子天平准确称取左心室重量和全心重量。计算全心重量/体重(HW/BW)，左心室重量/体重(LVW/BW)，分别记为全心肥厚指数(HWI)，左心室肥厚指数(LVWI)。

结果表明，模型大鼠的心脏指数明显增加，玄参高剂量组和卡托普利组明显减小模型动物的心重指数，结果见表4。

表4  玄参抗甲状腺素致大鼠大鼠心肌肥大作用的观察(x±s，n＝11)

与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

用玄参的乙醇提取物进行研究，发现也有减少甲状腺素致小鼠心脏指数的作用。

2.2心肌组织AngII含量测定

取大鼠的心肌组织约200mg，加入2ml生理盐水在冰浴环境中快速匀浆，3500rpm离心10min，取上清200μl加生理盐水800μl，制成2％匀浆，按血管紧张素II试剂盒说明书进行操作。同时，按考马斯亮蓝蛋白测试盒说明书进行蛋白测定。结果，与正常组动物相比，模型组动物心肌组织中的Ang II含量非常显著升高(P＜0.01)，玄参高剂量组和卡托普利组灌胃9天后，与模型组比较左心室心肌组织中Ang II非常显著性降低(P＜0.01)；玄参低剂量组左心室心肌组织中Ang II与模型组比较无显著性差异(P＞0.05)。结果见表5。

表5  玄参对L-甲状腺素致心肌肥厚大鼠心肌AngII含量的影响(x±SD，n＝11)

与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

实施例3(玄参抗腹主动脉缩窄致大鼠心室重构作用观察)

大鼠用3％戊巴比妥钠0.1ml/100g腹腔注射麻醉，仰位固定，打开腹腔，钝性分离腹主动脉，用内径为0.5mm的银夹不完全结扎左右肾动脉之间的腹主动脉，使之外径狭窄至0.5mm，制备压力超负荷性心室重构模型。假手术组动物仅分离腹主动脉，不做结扎。术后肌肉注射青霉素1×104U·kg-1·d-1，共3d，预防感染。

造模后2周，手术组大鼠随机分组，每组11只。每天给药1次，20ml/kg/d，连续给药8周。①玄参高剂量组：灌胃给予玄参水煎液27g/kg。②玄参低剂量组：灌胃给予玄参水煎液13.5g/kg。③卡托普利组：灌胃给予卡托普利水溶液40mg/kg。④假手术组和模型组大鼠灌胃给予蒸馏水20ml/kg。

3.1对血流动力学的影响

8周后，25％乌拉坦腹腔注射麻醉大鼠，分离颈总动脉，***聚苯乙烯导管至主动脉，连接八导生理记录仪记录动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、心率(HR)后，继续将导管深入至左心室，记录左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力上升最大速度(+dp/dtmax)、左室压力下降最大速度(-dp/dtmax)等。

结果显示，腹主动脉缩窄10周后，模型组动物血压，无论是收缩压还是舒张压均显著高于假手术组(P＜0.01)，心率显著加快(P＜0.01)，同时+dp/dtmax明显降低(P＜0.01)，说明舒张功能、收缩已显著降低。玄参高低剂量治疗后，动物血压均显著降低(P＜0.01)，心率显著减慢(P＜0.01)，且显著升高+dp/dtmax(P＜0.01)。表明玄参治疗在降低血压的同时，显著降低压力超负荷大鼠较快的心率，并能在一定程度上改善舒张功能，结果见表6。

表6  玄参对腹主动脉缩窄大鼠血流动力学的影响(x±s，n＝8)

续表6

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01；SAP：动脉收缩压，DAP：动脉舒张压，LVSP：左室收缩压，LVEDP：左室舒张末压，+dp/dtmax、-dp/dtmax：分别为左室压力上升和下降最大速度，HR：心率。

3.2对血浆醛固酮(ALD)含量影响

颈动脉取血，EDTA抗凝，低温离心机3500rpm离心10min，取上清液，用放射免疫法测定ALD含量。具体方法按试剂盒说明书进行。

结果表明，与假手术组比较，模型组醛固酮含量非常显著性增加(P＜0.01)。与模型组比较，玄参高低剂量组、卡托普利组血浆醛固酮含量非常显著性降低(P＜0.01)。结果见表7。

表7  玄参对腹主动脉缩窄致心室重构大鼠血浆醛固酮含量的影响(x±s，n＝8)

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.3对心脏指数的影响

左室舒缩功能测定完成及取血后，快速打开大鼠胸腔取心脏，去除心房组织，沿室间隔剪开，分离左、右心室。冰冷的生理盐水中漂洗去血，用滤纸吸干水分，电子天平准确称取左心室重量和全心重量。计算全心重量/体重(HW/BW)比，左心室重量/体重(LVW/BW)比，分别记为全心肥厚指数(HWI)，左心室肥厚指数(LVWI)。

结果显示，与假手术组比较，模型组心脏指数非常显著性增加(P＜0.01)。与模型组比较，卡托普利组心脏指数(LVWI、HWI)非常显著性降低(P＜0.01)，玄参高剂量组心脏指数显著降低(P＜0.05)，玄参低剂量组心脏指数虽有下降，但差异不具有显著性(P＞0.05)。结果见表8。

表8  玄参对腹主动脉缩窄大鼠心室重构的影响(心脏指数)(x±s，n＝11)

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.4对心肌组织血管紧张素II(AngII)含量测定

取大鼠的心肌组织约200mg，加入2ml生理盐水在冰浴环境中快速匀浆，3500rpm离心10min，离心，取上清即为10％心肌匀浆提取液。取200μl 10％心肌匀浆提取液加生理盐水800μl，即为2％匀浆提取液。取2％心肌组织匀浆按AngII试剂盒说明书进行操作。同时进行蛋白含量测定，按考马斯亮蓝蛋白测试盒说明书进行操作。结果以每毫克蛋白中的AngII含量表示。

结果显示，与假手术组比较，模型组心肌AngII含量非常显著性增加(P＜0.01)。与模型组比较，玄参高低剂量组、卡托普利组，心肌AngII含量非常显著性降低(P＜0.01)，结果见表9。

表9  玄参对腹主动脉缩窄致心室重构大鼠心肌Ang II含量影响(x±s，n＝11)

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.5心肌组织内皮素(ET-1)含量测定

取10％大鼠心肌匀浆，按内皮素试剂盒说明书进行操作。结果以每毫克蛋白中的ET-1含量表示。

结果显示，与假手术组比较，模型组心肌ET-1含量非常显著性增加(P＜0.01)。与模型组比较，玄参高剂量组、卡托普利组，心肌ET-1含量非常显著性降低(P＜0.01)，玄参低剂量组ET-1含量显著性降低(P＜0.05)。结果见表10。

表10  玄参对腹主动脉缩窄致心室重构大鼠心肌ET-1含量的影响)(x±s，n＝11)

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.6心肌组织羟脯氨酸含量测定

取2％大鼠心肌匀浆，按羟脯氨酸试剂盒说明书进行操作。结果以每毫克蛋白中的羟脯氨酸含量表示。

结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠心肌羟脯氨酸含量非常显著性增加(P＜0.01)。与模型组比较，玄参高剂量组、卡托普利组心肌羟脯氨酸含量非常显著性降低(P＜0.01)，玄参低剂量组羟脯氨酸含量虽有下降，但差异不具有显著性(P＞0.05)，结果见表11。

表11  玄参对腹主动脉缩窄致心室重构大鼠心肌羟脯氨酸含量的影响(x±s，n＝11)

注：与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01

慢性充血性心力衰竭(Congestive heart failure，CHF)是神经体液因素和心脏重构造成的恶化循环的病理生理过程。80年代后，人们逐渐认识到心肌肥厚、心室重构是心力衰竭的特征，同时也是决定心力衰竭发病率，病程进展和死亡率的主要因素。血管紧张素II(AngII)，醛固酮(ALD)，内皮素(ET-1)等神经内分泌细胞因子的长期慢性激活促进心肌重构，加重心肌损伤和心功能恶化，其中AngII和ALD被认为是促进心脏重构的主要因素。慢性充血性心力衰竭(CHF)是各种病因引起的多种心脏疾病的终末阶段，现已公认其发生发展的根本原因为神经内分泌被长期激活导致的心室重构(Colucci WS.Molecular andcellular mechanisms of myocardial failure[J].Am J Cardiol，1997.80：15L-25L)。

RAAS的激活引起血管紧张素II(AngII)和醛固酮(ALD)的分泌增加，AngII具有较强的致心肌纤维化的作用，它可以通过AT1受体的介导直接作用于心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CFs)引起胶原合成的增加(Shen Jingping，Li Ruifeng .et al.The Responseness of the Fibroblasts from theMyocardium-Infarcted Rats to AngiotensinII.ISSN 100723949 Chin JArterioscler，2002，10(2)：115-117)。ALD具有独立于AngII和相加于AngII的对心脏的不良作用，不仅引起钠水潴留、升高血压、增加血容量和心室负荷，还具有调节心脏血液动力学和血压效应以及心肌肥厚、心室重构的作用(Claude D，Jeansebastien S，Anne G.et al.Cardiac aldosterone production and ventricularremodeling[J].Kidney Int，2000，57：346)。ALD与Ang II之间存在着相互作用：一方面AngII可以刺激ALD合成；另一方面ALD又可以增加组织对AngII的结合，使Ang II的生物学效应增强(Lijin P.Petrov V.Induction of cardiac fibrosis byaldosterone.J Mol Cell Cardiol，2000，32(3)：865-879)。心室重构时，血浆内皮素(ET-1)水平明显升高，ET具有收缩血管，促进血管平滑肌细胞增生、肥大，细胞外基质合成、生长因子和黏附分子的释放和表达等多种生物学效应，在高血压发病中起着重要作用，其正性肌力作用可增加能耗，诱导心肌细胞肥大，引起心律失常，进一步恶化病情。此外，AngII可刺激ET-1的合成，ALD可以增加ET受体的数量，从而使胶原合成上调。

本发明上述实施例的3项实验均显示模型动物心脏指数增加，心肌组织AngII含量增加。其中腹主动脉不完全结扎造成心脏后负荷持续增加，交感神经兴奋增强，导致RAAS活化，神经内分泌因子失调明显，左室心肌组织中的AngII、ET，循环中的ALD均显著增加。上述神经内分泌***的激活促使左心室肥厚指数显著增高。该模型组的收缩压(SAP)和舒张压(DAP)明显升高，心脏指数LVWI、HWI，羟脯氨酸(Hyp)含量显著性增加，Hyp增加反应心肌间质胶原组织增生。这些模型成功地反应了心室重构的主要病理特征。

本发明的实验表明：玄参水提液具有较明显的抗多种原因所致心肌肥大，心室重构作用，其作用机制与抑制神经内分泌***的激活明显相关。同时其具有一定的降低血压、减慢心率、改善血流动力学的作用。对血流动力学的改善也有利于其产生抗心肌肥大，心室重构，预防心衰发生与发展。本发明的实验还显示，玄参乙醇提取物在防治心室重构和心衰方面具有开发价值。

Claims (5)

1. 玄参在制备防治心室重构药物中的应用。

2. 玄参在制备防治心肌肥大、肥厚性心肌病和慢性心力衰竭药物中的应用。

3. 玄参在制备防治与心肌肥大和心衰相关的心律失常或猝死的药物中的应用。

4. 根据权利要求1或2或3所述的用途，其特征是，玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根，用其水提物或乙醇提取物。

5. 根据权利要求1或2或3所述的用途，其特征是，玄参临床使用剂量相当于生药15～150g/天/成人口服。