CN101229373B - 治疗糖尿病肾病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物，它包括胰岛素增敏剂和内皮素受体阻断剂。本发明将作用机制完全不同的两种药物科学组合，达到机制互补、相互协同、提高疗效、合理用药的目的。不但在降糖方面有很好的协同作用，而且对于肾脏的保护也达到了相当好的协同效果。本发明将可能是糖尿病肾病治疗方法的新突破。

Description

治疗糖尿病肾病的药物组合物

所属技术领域

本发明涉及一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物及其制剂。

背景技术

糖尿病的慢性并发症渐渐成为了威胁患者健康的主要病症。其中糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性并发症之一；也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。据报道，1型糖尿病患者中有50％死于慢性肾功能衰竭，而2型糖尿病也有5％～10％死于肾功能衰竭。

随着糖尿病发病率的增加，DN患者日益增多，因其发病隐蔽，进展缓慢，如果任其发展，当临床上出现持续性蛋白尿时，肾脏病变已不属早期，肾脏已出现了不可逆的病变，再用药物也无法逆转，至今尚无有效的措施阻止其发生与发展。随着人均寿命延长，老年人口增加，糖尿病患病率的增高，诊断治疗糖尿病肾病及控制其高危因素，应引起足够的重视，以提高老年人的生命质量。

1型或2型糖尿病患者中大约有20％～40％会发展为肾病。然而，20％～40％具有早期肾脏病变标记的糖尿病患者依然会发展为晚期肾脏损害，最终演变为肾终末期疾病而导致死亡。

目前糖尿病肾病的药物治疗主要集中在控制血糖、血压和血脂水平，减轻高血糖、高血压和高血脂造成的肾脏损伤，近年来炎症在糖尿病肾病的发病中所起的作用已经引起许多学者的注意。抗炎治疗在理论上有望成为糖尿病肾病的治疗策略之一。但这些治疗措施取得的效果并不理想，不能有效地抑制糖尿病肾病的发展。研究开发全新作用机制、疗效好的新的治疗方法和药物，这是摆在我们医药工作者面前十分紧迫的任务。

格列酮类药物(TZDs)是一类新型的胰岛素增敏剂，通过激活过氧化物酶增殖物激活受体(PPARs)γ而显著改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗状态，降低血糖，并且可通过活化PPARγ，下调TGF-β1，显著减少糖尿病患者尿微量白蛋白，从而延缓肾脏损伤。TZDs的肾保护保护作用可以独立于胰岛素增敏和糖脂代谢的调节而直接发挥，如抑制系膜增生、抑制炎症损害等。TZDs可能通过抑制ox-LDL的受体Lox-1的表达及由其引起的氧化应激，从而减轻ox-LDL对肾脏的损伤。其中吡咯列酮(pioglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)、环格列酮(giglitazone)、恩格列酮(englitazonne)等都属于格列酮类药物。

内皮素受体阻断剂，能降低血管压力，阻止心脏和血管增生，减轻肺纤维化和炎症，临床用于肺动脉高压的治疗。对包括高血压、冠状动脉疾病和心衰在内的多种心血管疾病均有治疗作用。最近研究表明内皮素受体阻断剂还可以明显抑制SHR-DM组肾脏NF-κB、TGF-β1、p21和p27的表达，起到肾脏保护作用。现在临床上使用的内皮素受体阻断剂是波生坦，它的临床适应症是肺动脉高压，spp301已经进入临床研究，它是一个新型的内皮素受体拮抗剂。其化学名称为5-Methyl-pyridine-2-sulfonic acid[6-methoxy-5-(2-methoxy-phenoxy)-2-(pyridin-4-yl)-pyrimidin-4-yl]-amide。即5-甲基-吡啶-2-磺酸[6-甲氧基-5-(2-甲氧基-苯氧基)-2-(4-吡啶基)-4-嘧啶基]-酰胺。

它的结构式如下：

发明内容

本发明提供了一种治疗糖尿病肾病的新的药物组合物，它包括内皮素受体阻断剂和胰岛素增敏剂。

糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性并发症之一，其发生率和死亡率非常高，是威胁糖尿病患者生命安全的隐性杀手。但是目前治疗糖尿病肾病的方法却十分有限，没有有效的措施阻止其发生和发展。我们根据目前缺乏有效的治疗方法的现状，对糖尿病肾病进行了深入研究。惊奇的发现原来临床上一直用于治疗肺动脉高压的内皮素受体阻断剂与胰岛素增敏剂联合用药虽然对于糖尿病患者血糖水平的降低没有取得协同作用，但对于糖尿病肾脏的保护作用取得了相当好的协同作用。我们经过大量的动物药效学实验验证了我们的发明。控制好血糖是预防糖尿病肾病的关键，长期血糖控制不佳将可引起对肾脏的损害，患者最终因出现全身水肿、蛋白尿、***，而死于肾功能衰竭。我们通过实验比较了尿微量白蛋白、羟脯氨酸含量和肌酐清除率等肾功能的指标，结果均有显著性差异p＜0.05，甚至有极显著的差异p＜0.01，充分验证了我们的发明在糖尿病肾病的治疗中肾脏保护方面的协同作用。

本发明将作用机制不同的两种药物科学组合，机制互补、作用协同、达到提高疗效、合理用药的目的。另外，内皮素受体阻断剂临床一直用于肺动脉高压的治疗，本发明创造性的将其和胰岛素增敏剂联合用药用于治疗糖尿病肾病取得了非常好的效果。全新作用机制和良好的治疗效果，使本发明可能成为糖尿病肾病治疗方法的新突破。

根据药物的性质、药效发挥的程度和患者的用药方便，我们将内皮素受体阻断剂和胰岛素增敏剂复方制备成固体制剂，主要以口服的形式给药。口服给药形式我们选择了片剂、胶囊等剂型。我们选择的片剂包括普通片剂、分散片、缓释片、泡腾片、口崩片等。

具体实施方式

实施例1片剂

处方  波生坦                    50g

      吡咯列酮                  10g

      微晶纤维素                100g

      8％羟丙基甲基纤维素溶液   适量

      低取代羟丙基纤维素        50g

      硬脂酸镁                  2g

制备工艺：波生坦和吡咯列酮过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛，称取处方量的波生坦、吡咯列酮与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入8％羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例2片剂

处方  波生坦              50g

      罗格列酮            1.5g

      微晶纤维素          100g

      PEG6％溶液          适量

      羧甲基纤维素钙      15g

      硬脂酸镁            2g

制备工艺：同实施例1。

实施例3胶囊

处方  波生坦        50g

      吡咯列酮      20g

预胶化淀粉                50g

甘露醇                    50g

乳糖                      40g

6％PVP的95％乙醇溶液      适量

微粉硅胶                  5g

制备工艺：将处方中的波生坦、吡咯列酮、预胶化淀粉、甘露醇、乳糖和微粉硅胶分别过100目筛，混匀，加6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。

实施例4分散片

处方  波生坦                     100g

      吡咯列酮                   20g

      交联聚乙烯吡咯烷酮         80g

      微晶纤维素                 110g

      5％PVP_K30无水乙醇溶液      适量

      硬脂酸镁                   2g

制备工艺：波生坦和吡咯列酮过100目筛，交联聚乙烯吡咯烷酮过80目筛，称取处方量的波生坦、吡咯列酮和交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，加入5％PVP_K30无水乙醇溶液适量制粒，干燥后加入处方量微晶纤维素、硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例5分散片

处方  波生坦                  100g

      罗格列酮                1.5g

      羟丙基纤维素            40g

      交联聚乙烯吡咯烷酮      40g

      10％淀粉浆              适量

      硬脂酸镁                4g

制备工艺：同实施例4。

实施例6胶囊

处方  Spp301        20g

      吡咯列酮      10g

微晶纤维素      80g

10％的淀粉浆    适量

硬脂酸镁        6g

碳酸氢钠        10g

枸橼酸          81g

制备工艺：按常规泡腾片的制备工艺制备成所需的泡腾片即可。

实施例10

动物模型与分组：选用SD大鼠，雄性，体重(250±20)g。适应性平衡饲养1周后，用于实验。实验大鼠禁食12h后，用10％水合氯醛300mg/kg体重腹腔麻醉下行左侧肾脏结扎术，结扎方法为：沿肾缔同时结扎肾脏动静脉及输尿管。术后2周，大鼠禁食18h，一次性腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)50mg/kg，即具体给药量为2.5ml/kg体重。注射药物后大鼠自由摄食水。以造模72h非空腹尾静脉血糖水平≥13.8mmol/L作为模型成立选择标准。

成模DN大鼠随机分成模型组(缓冲液)、波生坦组(波生坦，20mg.kg^-1.d^-1)、吡咯列酮组(吡咯列酮，3mg.kg^-1.d^-1)、复方(波生坦+吡咯列酮)低剂量组(6.67mg.kg^-1.d^-1波生坦+1mg.kg^-1.d^-1吡咯列酮)、复方中剂量组(20mg.kg^-1.d^-1波生坦+3mg.kg^-1.d^-1吡咯列酮)、复方高剂量组(60mg.kg^-1.d^-1波生坦+9mg.kg^-1.d^-1吡咯列酮)。另设一空白组，给予相同体积的生理盐水。每组8只，各组均为灌胃给药。

实验指标的测定：连续给药10个月，正常饲养。期间收集大鼠的尿测尿微量白蛋白。术次给药后，留24h尿检测尿肌酐。血标本检测血糖、肌酐。

1、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠血糖的影响

末次给药后，大鼠断尾去血放入蛋白沉淀剂中，室温放置7min后，离心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法测全血糖。

实验结果：各组与模型组比较均有显著性差异，即各给药组对于降低血糖都有效果。其中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方高组对于DN大鼠血糖的降低与模型组比较有极显著的差异。复方组与波生坦组比较都有显著性差异，与吡咯列酮组比较只有复方中组与复方高组有极显著性差异。说明波生坦与吡咯列酮复方对于降低DN大鼠血糖有很好的协同作用。

表1波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠血糖的影响

^▲与模型组比较p＜0.05，^▲▲与模型组比较p＜0.01.

^★★与波生坦组比较p＜0.01.

2、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠尿微量白蛋白的影响

试剂：1、10％(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。

2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸缓冲液(PH3.0)：称取22.72g甘氨酸，用10％冰醋酸溶液稀释成1000ml，加NaN₃100mg，室温密封可稳定1年。

3、溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液：精确称取257、36mgBPB，用无水乙醇溶至200ml，4℃冰箱可稳定1年。

4、溴酚蓝(0.231mmol/L)显色剂：取60mlBPB贮存液，加入2.5mlTriton X-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。

标本的采集和检测：于第2、4、6和8周将大鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。取4ml，叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min，取上清液置一20℃冰箱保存待测尿白蛋白。量取储存的大鼠尿液2ml，各加显色剂1ml，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计于600nm下测定吸光度A。

实验结果：各组与模型组比较均有显著性差异，其中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方高组有极显著性差异，即各组对于DN大鼠的尿微量白蛋白均有影响，复方中组和复方高组的影响更为显著。复方组分别与波生坦组和吡咯列酮组比较，结果都是复方低组无显著性差异，复方中组和复方高组有极显著性差异。说明波生坦和吡咯列酮复方对于影响DN大鼠尿微量白蛋白方面有协同作用。

表2波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠尿微量白蛋白的影响

^▲与模型组比较p＜0.05，^▲▲与模型组比较p＜0.01；

^★与波生坦组比较p＜0.05，^★★与波生坦组比较p＜0.01；

^■与吡咯列酮组比较p＜0.05；^■■与吡咯列酮组比较p＜0.01.

3、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肾脏羟脯氨酸含量的影响

最后一次给药24h后处死动物，取出肾脏，然后将肾肌组织匀浆，测定其胶原蛋白(羟脯氨酸含量测定法)含量。具体方法按试剂盒操作。

实验结果：各组与模型组比较均有显著性差异，其中波生坦与吡咯列酮复方中组和复方高组有极显著性差异，即各组对于DN大鼠的羟脯氨酸含量均有影响，复方中组和复方高组的影响更为显著。复方组分别与波生坦组比较都有显著性差异，与吡咯列酮组比较有极显著性差异。说明波生坦和吡咯列酮复方对于影响DN大鼠羟脯氨酸含量方面有很好的协同作用。

表3波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肾脏羟脯氨酸含量的影响

^▲与模型组比较p＜0.05，^▲▲与模型组比较p＜0.01；

^★与波生坦组比较p＜0.05，^★★与波生坦组比较p＜0.01；

^■与吡咯列酮组比较p＜0.05，^■■与吡咯列酮组比较p＜0.01.

4、波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肌酐清除率的影响

最后一次给药后留处死前24h尿，检测尿肌酐。

实验结果：各组与模型组比较均有显著性差异，其中复方组与模型组比较有极显著性差异，即各组对于DN大鼠的肌酐清除率均有影响，复方组的影响更为显著。复方组与波生坦组比较有显著性差异，与吡咯列酮组比较有极显著性差异。说明波生坦与吡咯列酮复方对于DN大鼠肌酐清除率的影响方面有很好的协同作用。

表4波生坦与吡咯列酮复方对DN大鼠肌酐清除率的影响

^▲与模型组比较p＜0.05，^▲▲与模型组比较p＜0.01；

^★与波生坦组比较p＜0.05，^★★与波生坦组比较p＜0.01；

^■与吡咯列酮组比较p＜0.05.

另外，我们公司根据现有技术所公开的spp301的结构式，由化学合成实验室合成出成品后，用它与罗格列酮复方治疗糖尿病肾病，对于肾脏的保护同样取得了很好的协同效果。即内皮素受体阻断剂与胰岛素增敏剂联合给药对于治疗糖尿病肾病有很好的效果。

Claims (4)

1.一种治疗糖尿病肾病的药物组合物，其特征在于它含有胰岛素增敏剂和内皮素受体阻断剂，其中胰岛素增敏剂是选自罗格列酮、吡咯列酮、环格列酮、恩格列酮、盐酸吡格列酮、马来酸罗格列酮或盐酸罗格列酮的噻唑烷二酮类药物，内皮素受体阻断剂是波生坦。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的胰岛素增敏剂为盐酸吡咯列酮。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于它是胶囊剂或片剂。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述的片剂是普通片、缓释片、分散片、双层片、泡腾片或口崩片。