CN101036691A - 一种用于提高骨密度及免疫力的保健品 - Google Patents

一种用于提高骨密度及免疫力的保健品 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于提高骨密度及免疫力的保健品，本发明保健品有效成分的重量配比为：葛根提取物60－140、D－氨基葡萄糖120－280、钙剂120－280。本发明保健品崩解快，易吸收，改善骨流失导致的关节疼痛，防治软骨组织退化引发的各种疾病；明显的增强肝、脾巨噬细胞对炭粒摄取功能，对淋巴细胞转化和巨噬细胞吞噬率有明显促进作用，可以使人体的非特异性免疫功能明显增强，本发明提高骨密度及免疫力的效果好、见效快。

Description

一种用于提高骨密度及免疫力的保健品
(一)技术领域
本发明涉及一种保健品，特别是一种用于提高骨密度及免疫力的保健品。
(二)背景技术
骨质疏松症是指单位体积内骨量减少，骨组织显微结构的异常，导致骨脆性增加和易发生骨折为特征的全身性骨骼疾病。骨质疏松症按发病原因可分为原发性骨质疏松症和继发性骨质疏松症，其最大危害是可引起骨折，尤其是髋骨骨折。骨质疏松症是中老年人，尤其是绝经后妇女常见的代谢性骨病。
机体的免疫功能是由一个复杂的免疫***实现的，它包括免疫器官、免疫细胞和免疫因子。免疫***的存在及功能的正常化是机体免疫功能稳定的基本保证，其中任何一部分的缺损或异常都会导致免疫功能的不全或紊乱，从而降低或丧失免疫功能。免疫功能不足或低下会对机体健康产生极为不利的影响，使多种传染病或非传染病的发病率和死亡率提高。
中国专利号03141607.1公开了一种由氨基酸葡萄糖盐酸盐、钙剂和维生素D组成的补钙和关节保健的食品，它具有一定的补钙效果，能改善骨质疏松症，但其疗效不明显，见效慢。
(三)发明内容
本发明的目的是：提供一种效果好、见效快的用于提高骨密度及免疫力的保健品。
为了实现上述目的，本发明保健品有效成分的重量配比为：葛根提取物60-140、D-氨基葡萄糖120-280、钙剂120-280。
本发明保健品最佳有效成分为：D-氨基葡萄糖为 D-氨基葡萄糖硫酸盐，钙剂为磷酸钙。
本发明所述的葛根提取物含有wt20％～80％的葛根总黄酮。
本发明有效成分的最佳重量配比为：葛根提取物100、D-氨基葡萄糖硫酸盐200、磷酸钙200。
为了便于食用，本发明保健品为胶囊或片剂。
本发明制备方法包括如下步骤：(1)预处理：磷酸钙铺成2-3cm厚，110℃烘干90分钟，粉碎，过40目筛，D-氨基葡萄糖硫酸盐110℃烘干2小时，过80目筛，葛根提取物过80目筛；(2)按配方比例取D-氨基葡萄糖硫酸盐、葛根提取物、磷酸钙在温度20-30℃、相对湿度45％以下粗混合25分钟，(3)在20-30℃、相对湿度45％以下灌装胶囊或压成片剂。
处方分析：
D-氨基葡萄糖属天然氨基糖类，易吸收利用。体内的钙质在D-氨基葡萄糖的作用下，可提高吸收。氨基葡萄糖以硫酸盐的形式存在，分子单一，分子量小，在细胞外基质中以弥散的方式接近软骨细胞，通过葡萄糖转运载体进行转运，在软骨细胞内事成氨基葡萄糖多聚糖，并进一步合成蛋白聚糖，蛋白聚糖胶体复合物附着在基质胶原网架上，与胶原网架结构共同构成一个弹性体，起着承载压力、传导和缓冲应力、保护软骨结构和软骨下骨的作用。
葛根提取物为豆科植物野葛的干燥根，经提取的干浸膏。主要含有异黄酮类、香豆素类和有机酸等，其中异黄酮类化合物是其主要活性成分，葛根素是其特有的功效成分。其主要功能因子为葛根素、黄豆甙元，除外还含有铁、锌、铜、硒、磷、钙等10余种人体必需的矿物质，以及多种氨基酸。
动物实验表明，含有葛根黄豆苷元和金雀异黄素的葛根总提取物可以增加去势后大鼠的骨密度、骨小梁含量及骨小梁厚度等。去势大鼠口服葛根异黄酮后，全身骨矿含量、骨矿密度和骨生物力学强度均有不同程度的改善，认为葛根异黄酮对去卵巢大鼠的原发性骨质疏松有良好的防治作用，***样作用是其主要作用机理。另外，骨代谢生化指标的改变也提示，葛根防治骨质疏松的药效与西药程序疗法相比无显著性差异。一些微量元素能促进骨形成，并在骨胶原合成和调节骨强度等方面发挥一定作用。葛根异黄酮对***缺乏引起的微量元素(如钙、磷、镁、锌、锰、铜、钴、钼和铬等)丢失都有明显的防治作用。同时，通过检测大鼠全身骨矿含量、骨密度、股骨生物力学性能和钙含量等发现，葛根异黄酮对皮质激素引起的大鼠继发性骨质疏松也有很好的保护作用，但作用强度比去卵巢模型低很多，并且25mg/kg组基本无效，而这一浓度在去卵巢模型中有良好的效果。
葛根提取物中所含葛根素的化学名称为4，7-二羟基-8-D-葡糖基异黄酮，在4位和7位各有一个羟基，这两个羟基与其***活性密切相关，其中4位羟基是与***受体(CE)相结合的部位。葛根素不仅改善骨折后的骨的血液循环，而且还能改善骨胳肌的血运。其作用机理是通过β受体阻滞作用，解除受伤血管的痉挛，降低血管的阻力，增加血供，抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集，起到抗凝作用。体外实验表明，葛根素对大鼠成骨细胞增殖无有显的刺激作用，但能够促进成骨细胞合成、分泌ALP。同时，造成体外培养的破骨细胞空泡性变，骨吸收陷窝面积减少和培养液上清中Ca2-含量降低。提示葛根通过抑制骨吸收，刺激骨形成来调控骨代谢，其中抑制骨吸收的效果较强。
葛根素对D淋巴细胞免疫功能有促进作用。葛根素在一定条件下能促进巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)，而TNF有激活T细胞的生物活性。因此，从另一角度揭示了葛根素对T淋巴细胞有激活作用。葛根素能增强小鼠巨噬细胞吞噬能力，可使主要吞噬碳粒的肝脾脏碳粒摄取功能增强。二者均支持葛根素对细胞免疫有促进作用。所以葛根素之所以能提高T淋巴细胞Ag-NOPs含量，可能与其改善全身血液循环有关。
葛根汤可以提高吞噬细胞的摄取能力，增强机体免疫力，而对免疫亢进动物，葛根汤可使细胞的免疫反应性恢复，这说明葛根汤具有双向免疫调节作用。分别提取葛根的不同有效成分，即水溶性成分和醇溶性成分。水溶部分中以多糖为主，而醇溶部分中则以黄酮为主，进而研究这两部分对外同血嗜酸细胞(CE)和淋巴细胞(LC)受异戊佛波豆蔻乙酸醇刺激后激活过程的过程的影响，探讨葛根不同成分对这两类免疫活性细胞功能的调节作用，为葛根的双向免疫调节作用提供试验依据。试验结果表明：①末激活的两种实验细胞仅产生极微弱的化学发光，经P/VIA激活后，两种实验细胞均可发生呼吸爆发产生活性介质而氧化鲁米诺产生化学发光，但两种细胞产生的发光曲线有所不同，这可能与两种实验细胞在生物体内的功能有关。②以黄酮为主要成分的葛根酯溶部分可以有效抑制经P/VIA激活后两种实验细胞产生的化学发光(胎酚蓝柃色细胞活性大于90％，表明发光的降低不是由于细胞死亡)，这一结果可能与植物黄酮清除实验细胞激活后所产生的活性氧等具有氧化作用的活性介质有关。因此在临床用药中，葛根中的黄酮成分对生物体的免疫反应可能具有负调节作用，它可以拮抗免疫细胞产生的活性介质所致生物体的非特异性损伤。③以多糖成分为主的葛根水溶部分可以加强以PMA激活后两种实验细胞产生的化学发光，这一结果表明，葛根中的多糖成分具有加强两种实验细胞产生呼吸爆发的作用，其对生物体免疫反应可能起正调节，它可以加强免疫细胞产生活性介质对病源微生物等的杀伤作用。
磷酸钙：补钙可降低骨的再成型速率，增加骨矿物质密度，降低骨质丢失率。补充钙质对近端皮质骨桡骨骨密度的增加起促进作用。钙剂治疗也能减少长骨骨折，队列研究发现，增加钙摄入量可能对自主钙摄入水平最低的人群的骨质丢失的抑制作用最大。
葛根与氨基酸葡萄糖及钙剂相配伍，更加有利于软骨组织的修复和钙的吸收，协同作用好，并可以提高人体的免疫力，两相功能间又有很好的相关性，骨骼健康是免疫力提高的一种表现，而葛根的增强免疫的功效又促进了骨骼的健康。
功效：本发明保健品崩解快，易吸收，改善骨流失导致的关节疼痛，防治软骨组织退化引发的各种疾病；明显的增强肝、脾巨噬细胞对炭粒摄取功能，对淋巴细胞转化和巨噬细胞吞噬率有明显促进作用，可以使人体的非特异性免疫功能明显增强，本发明提高骨密度及免疫力的效果好、见效快。
增强骨密度动物试验：
1、实验动物：清洁级SD大鼠，雌性，60-70g。
2、剂量设计：本品人体推荐量为每日2g/60kg体重，样品含钙量为12.4％。本实验设低、中、高三个剂量，即0.17、0.33、1.00g/kg体重，相当于人体推荐剂量的5倍、10倍、30倍，相当于含钙量1.76、2.01、3.03g/kg饲料，另设低钙对照组(基础饲料组)与碳酸钙对照组(与高剂量钙水平相同)，含钙量分别为1.50、3.03g/kg饲料。
3、样品配制：根据本实验剂量设计要求及动物饲料摄入情况(约8g/100gBW/日)，分别将样品41.7g、83.3g、250g掺入基础饲料至20g，拌匀，经饲料机制成颗料饲料，即成低、中、高三种不同样品含量的饲料，分别给三组动物喂饲。低钙对照组给予基础饲料；取含钙量为40％的碳酸钙76.85g掺入基础饲料至20kg拌匀，制成颗粒饲料即成碳酸钙对照组饲料。
4、实验方法：(1)钙吸收实验：出生四周的断乳大鼠分笼饲养4周。每周测量身长、体重一次。实验3周后进行3天钙代谢实验。记录3天进食量，收集72小时粪便，测定饲料及粪便中钙含量。饲料样品以均匀混合并过20目筛；鼠粪样品在80℃烘箱在烘干，置干燥器中冷却后磨细。注意防止在样品制备过程中的污染。根据样品中钙的含量，准确称取烘干磨细的均匀样品0.50克，置于150ml三角瓶中，上盖小漏斗，加入混合酸(硝酸∶高氯酸＝4∶1)15ml，在电热板上加热消化直至冒白烟并透明无色。酸液不够时可以再加入少量混合酸。消化液透明无色后加数毫升去离子水，煮沸以赶除剩余的酸，重复两次，最后消化液的体积不超过1ml。消化样品时应同时作空白试验，加入与样品消化时相同体积的混合酸，在相同条件下消化。按照原子吸收分光光度计仪器说明书的步骤进行。测定液、标准溶液和空白均用0.5％氧化镧溶液稀释，定容。按下列公式计算：
摄入钙(mg)＝饲料中钙含量(mg/g)×3天饲料消费量
粪钙(mg)＝粪便中钙含量(mg/g)×3天粪便排出量
钙的表观吸收率％＝(摄入钙-粪钙)/摄入钙×100％
(2)股骨骨密度测定：解剖大鼠，剥离左侧股骨，应用QDR-4000型骨密度仪测量大鼠股骨中点及股骨远心端骨密度。将股骨烤干至恒重，称量骨干重。
(3)骨钙含量及饲料含钙量测定：用原子吸收法测量。饲料样品经均匀混合并过20目筛，在烘箱中烘干，置干燥器中冷却后称重，磨细。注意防止在样品制备过程中的污染。取大鼠一侧股骨在105℃烘箱中烘干至恒重。根据样品中钙的含量，准确称取0.50克，置于150ml三角瓶中，上盖小漏斗，加入混合酸(硝酸∶高氯酸＝4∶1)15ml，在电热板上加热消化直至冒白烟并透明无色。酸液不够时可以再加入少量混合酸。消化液透明无色后加数毫升去离子水，煮沸以赶除剩余的酸，重复两次，最后消化液的体积不超过1ml。消化样品时应同时作空白试验，加入与样品消化时相同体积的混合酸，在相同条件下消化。按照原子吸收分光光度计仪器说明书的步骤进行。测定液、标准溶液和空白均用0.5％氧化镧溶液稀释，定容。
计算公式：钙(mg/g)＝(C×V)/(W×1000)
C：仪器上得出的钙浓度(μg/ml)
W：骨干重(g) V：样品定容体积(ml)
5、实验结果：
表1  样品对大鼠实验期内钙吸收的影响
  组别(Ca:g/kg饲料)   动物数(只)   摄入钙(mg/3d)   粪钙(mg/3d)   表观吸收率
  基础饲料组(1.50)   10   107.7±28.76   6.31±1.05   93.95±1.04a
  碳酸钙对照组(3.03)   10   152.6±16.93   60.46±11.59   60.51±5.73b
  0.17g/kg样品组(1.76)   10   119.6±20.26   10.91±6.11   90.69±5.13a
  0.33g/kg样品组(2.01)   10   104.0±27.56   28.08±10.42   73.15±5.30c
  1.00g/kg样品组(3.03)   10   127.8±15.64   48.99±6.62   61.12±7.41b
注：同一纵行，上标数字不同，表示组间差异有显著性，P＜0.05(经方差分析)。由表1可见，相同剂量钙摄入水平，1.00g/kg样品组钙的表观吸收率与碳酸钙对照组相比无显著性差异。
表2  样品以大鼠股骨的重量、骨钙及骨密度的影响
  组别(Ca/kg饲料)   动物数(只)   股骨干重(g)   股骨远心端骨密度(g/cm2)   股骨中点骨密度(g/cm2)   骨钙含量(mg/g)
  基础饲料组(1.50)   10   0.80±0.03a   0.189±0.012a   0.160±0.013a   208.5±17.68a
  碳酸钙对照组(3.03)   10   0.85±0.03b   0.232±0.012b   0.201±0.015c   252.8±13.30b
  0.17g/kg样品组(1.76)   10   0.77±0.03a   0.182±0.016a   0.156±0.016a   206.2±17.61a
  0.33g/kg样品组(2.01)   10   0.83±0.03b   0.212±0.015c   0.188±0.017b   238.5±11.60b
  1.00g/kg样品组(3.03)   10   0.85±0.03b   0.234±0.010b   0.208±0.014c   250.9±7.47b
注：同一纵行，上标数字不同，表示组间差异有显著性，P＜0.05(经方差分析)。由表2可见，0.33g/kg、1.00g/kg样品组股骨重量、股骨远心端骨密度、股骨中点骨密度、骨钙含量均显著高于基础饲料组；1.00g/kg样品组股骨重量、股骨远心端骨密度、股骨中点骨密度、骨钙含量与碳酸钙对照组相比无显著性差异。
小结：本发明具有增加大鼠骨密度的作用。
增强免疫力功能的动物试验：
1、试验动物：ICR种小白鼠，体重18-22g，雌性。
2、剂量设计：本样品人体推荐剂量为每日2g/60kg体重，本实验设低、中、高三个剂量组，分别为0.17、0.33、1g/kg，相当于人体推荐剂量5、10、30倍，另设蒸馏水空白对照组。
3、样品处理：取样品0.17、0.33、1g分别加蒸馏水至20ml，即为低、中、高三个剂量组的供试液。
4、给样途径：灌胃，灌胃容积为0.4ml/20g。
5、实验方法：
(1)血清溶血素试验：动物连续给样30天后，用2％(v/v)SRBC免疫动物5天后，眼眶采血，颈椎脱臼处死，分离血清。在96孔微量血凝板上加25μl生理盐水，再分别在第一排加25μl血清，以后各排作对倍稀释，每孔加1％SRBC100μl，振荡后37℃放置3小时，当血球对照出现沉落后观察结果。
表3  血清溶血素试验
  组别   动物数(只)   抗体积数
  对照   10   49.0±9.42
  0.17g/kg   10   49.8±8.45
  0.33g/kg   10   91.1±19.72*
  1g/kg   10   138.7±25.70*
*P＜0.05与对组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品0.33g/kg、1g/kg剂量组与对照组相比，均有显著性差异。
(2)抗体生成检测试验：动物连续给样30天后，将脱纤维绵羊红细胞免疫5天后，动物颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为5×106个/ml。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水100ml)加热溶解后，放入45℃水浴保温，与等量PH7.2-7.4、2倍浓度的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加入50μl 10％SRBC，20μl脾细胞悬液，迅速混匀，倾到于已刷琼脂薄层的6cm平皿上，放入二氧化碳培养箱中温育1.5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶10)加入到平皿中，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。结果用方差分析进行统计。
表4  抗体生成检测试验
  组别   动物数(只)   溶血空斑数(×103个/全脾)
  对照   10   9.5±2.17
  0.17g/kg   10   9.6±2.59
  0.33g/kg   10   12.0±3.16
  1g/kg   10   22.3±3.80*
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品1g/kg剂量组与对照组相比，有显著性差异。
(3)胸腺指数、脾指数的测定：动物连续给样30天后：每鼠称重，颈椎脱臼处死，取胸腺、脾脏称重，分别计算胸腺指数和脾指数。
表5  胸腺指数、脾指数
  组别   动物数(只)   胸腺指数(％)   脾指数(％)
  对照   10   0.24±0.03   0.42±0.12
  0.17g/kg   10   0.23±0.03   0.44±0.07
  0.33g/kg   10   0.23±0.03   0.43±0.05
  1g/kg   10   0.24±0.04   0.45±0.07
经统计学分析：样品各剂量组与对照组相比，均无显著性差异。
(4)小鼠碳廓清试验：动物连续给样30天后，尾静脉注射1∶3稀释的印度墨汁，待墨汁注入，立即计时。注入墨法后2、10分钟，分别从眼静脉从取血20μl，并将其加到2ml Na2CO3溶液中，用分光光度计在600nm波长处测OD值，以Na2CO3溶液作空白对照。根据动物体重、肝重和脾重计算吞噬指数，结果以方差分析进行统计。
表6  碳廓清试验
  组别   动物数(只)   吞噬指数
  对照   10   2.67±0.25
  0.17g/kg   10   2.87±0.34
  0.33g/kg   10   3.10±0.52*
  1g/kg   10   3.74±0.12*
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品0.33g/kg、1g/kg剂量组与对照组相比，均有显著性差异。
(5)ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验：动物连续给样30天后：颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为2×106个/ml，将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加50μlConA液(相当于5μg/ml)，另一孔作为对照，置5％CO2，37℃培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的PRMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/ml)50μl/孔，继续培养4h，培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解后，以570nm波长进行比色，结果用方差分析进行分析。
表7  ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验
  组别   动物数(只)   加ConA的OD值   不加ConA的OD值   差值OD值
  对照   10   1.367±0.013   1.314±0.008   0.053±0.009
  0.17g/kg   10   1.369±0.015   1.314±0.011   0.055±0.010
  0.33g/kg   10   1.398±0.021*   1.315±0.009   0.083±0.015*
  1g/kg   10   1.501±0.018*   1.319±0.009   0.182±0.017*
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品0.33g/kg、1g/kg剂量组与对照组相比，均有显著性差异。
(6)DTH测定：致敏：动物连续给样30天后，每鼠腹部去毛，范围3×3cm，将1％ DNFB溶液50μl均匀涂抹致敏。DNFB的产生与测定：5日后，用1％ DNFB溶液10μl均匀涂抹于小鼠右耳(两面)进行攻击。24小时后，颈椎脱臼处死小鼠，用打孔器取下直径8mm的左右耳片，称重并计算肿胀度。
表8  DTH测定结果
  组别   动物数(只)   耳重均值(mg)右   耳重均值(mg)左   肿胀度(mg)
  对照   10   31.1±3.2   14.2±1.0   16.9±2.6
  0.17g/kg   10   32.3±2.9   14.3±1.1   18.0±3.0
  0.33g/kg   10   31.9±2.3   13.8±0.8   18.1±2.1
  1g/kg   10   32.7±2.8   14.1±1.1   18.6±2.8
经统计学分析：样品各剂量组与对照组相比，均无显著性差异。
(7)NK细胞活性测定：动物连续给样30天后：颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液(效应细胞)，取传代后24h YAC-1细胞加1640完全培养液，调整细胞浓度为1×105个/ml(靶细胞)，取靶细胞和效应细胞各100μl效靶比(50∶1)，加入U型96孔培养板，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl，上述各项均设三个复孔，于37℃、5％CO2培养箱中培养4小时，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/L的HCL30μl终止，用酶标仪在490mm处测定光密度值(OD)。
表9  NK细胞活性测定
  组别   动物数(只)   NK细胞活性(％)
  对照   10   26.99±1.73
  0.17g/kg   10   29.27±1.75
  0.33g/kg   10   33.04±4.74*
  1g/kg   10   33.44±3.18*
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品0.33g/kg、1g/kg剂量组与对照组相比，均有显著性差异。
(8)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验：动物连续给样30天后，每鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1ml，间隔30分钟，颈椎脱臼处死，固定于鼠板上，剪开腹壁皮肤，注射生理盐水2ml，转动鼠板1分钟，吸出腹腔洗液1ml，分滴于2片玻片上，37℃孵箱湿卵30分钟，用生理盐水漂洗，晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa-磷酸缓冲液染色3分钟，再用蒸馏水漂洗晾干，用油镜镜检，计算吞噬％和吞噬指数。
表10  巨噬细胞吞噬试验
  组别   动物数(只)   吞噬％   吞噬指数
  对照   10   11.0±1.8   0.164±0.03
  0.17g/kg   10   10.9±2.0   0.161±0.03
  0.33g/kg   10   13.4±2.3*   0.205±0.04*
  1g/kg   10   17.6±2.0*   0.296±0.04*
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
经统计学分析：样品0.33g/kg、1g/kg剂量组吞噬％和吞噬指数与对照组相比，均存在显著性差异。
结论：动物经口给予本发明样品具有增强免疫力功能。
(四)具体实施方式
实施例1
按下述配比称取原料：
含有wt50％葛根总黄酮的葛根提取物1000g、D-氨基葡萄糖硫酸盐2000g、磷酸钙2000g。
生产方法如下：(1)预处理：磷酸钙盛入托盘，厚度2-3cm，110℃烘干90分钟，粉碎，过40目筛，D-氨基葡萄糖硫酸盐110℃烘干2小时，过80目筛，葛根提取物过80目筛；(2)将D-氨基葡萄糖硫酸盐、葛根提取物、磷酸钙物料粗混，总混合25分钟。操作条件要求温度20-30℃、相对湿度45％以下；(3)将混合物料进入胶囊自动分装机装囊，每粒含内容物0.5g，操作条件要求温度20-30℃、相对湿度45％以下；对装填好的胶囊在胶囊抛光机上进行抛光。或者将混合物料装入压片机，制成0.5g的片剂。(5)质量检验。(6)封装，用高密度聚乙烯瓶包装，每瓶120粒。
用法与用量：口服，每日2次，每次2粒。
实施例2
按下述配比称取原料：
含有wt60％葛根总黄酮的葛根提取物900g、D-氨基葡萄糖2300g、葡萄糖酸钙2000g。
制法与用法用量同实施例1。
实施例3
按下述配比称取原料：
含有wt40％葛根总黄酮的葛根提取物1400g、D-氨基葡萄糖硫酸盐1300g、磷酸钙1500g。
制法与用法用量同实施例1。

Claims (4)

1.一种用于提高骨密度及免疫力的保健品，其特征在于：其有效成分的重量配比为：葛根提取物60-140、D-氨基葡萄糖120-280、钙剂120-280。
2.根据权利要求1所述的保健品，其特征在于：所述的D-氨基葡萄糖为D-氨基葡萄糖硫酸盐，钙剂为磷酸钙。
3.根据权利要求1或2所述的保健品，其特征在于：所述有效成分的重量配比为：葛根提取物100、D-氨基葡萄糖硫酸盐200、磷酸钙200。
4.根据权利要求1或2所述的保健品，其特征在于：所述的保健品为胶囊或片剂。
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101856128A (zh) * 2010-03-23 2010-10-13 无锡市天赐康生物科技有限公司 一种增加骨密度的保健食品及其制备方法
CN101947234A (zh) * 2010-09-02 2011-01-19 南京威尔曼药物研究所 含有氨基葡萄糖制剂的制备方法及其应用
JP2012062279A (ja) * 2010-09-16 2012-03-29 Kyowa Hakko Bio Co Ltd 直打用高単位グルコサミン顆粒
CN104824677A (zh) * 2015-04-14 2015-08-12 贵阳德昌祥药业有限公司 一种增加骨密度的保健食品及其制备方法
CN104939054A (zh) * 2014-03-26 2015-09-30 营养屋(成都)生物医药有限公司 一种增强骨密度及免疫力的保健食品及其制备方法
CN106072651A (zh) * 2016-07-19 2016-11-09 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 一种具有增加骨密度、抗炎镇痛作用的组合物及其制备方法
CN109078094A (zh) * 2018-11-01 2018-12-25 苏州卫生职业技术学院 一种用于预防骨质疏松症的医药组合物及其制备方法
CN109078043A (zh) * 2018-09-27 2018-12-25 广东环凯微生物科技有限公司 一种增加骨密度的葛根保健品及其制备方法
CN114532530A (zh) * 2022-02-16 2022-05-27 浙江华方生命科技有限公司 一种初乳氨糖软骨素钙咀嚼片及其制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1509721A (zh) * 2002-12-26 2004-07-07 孙家莉 用于防治骨退行性病变的含植物***和氨基葡萄糖的组合物及制备方法
CN1256967C (zh) * 2003-01-30 2006-05-24 王晓 养生护肝药物及其制备方法
CN1284799C (zh) * 2004-03-17 2006-11-15 广东省农业科学院农业生物技术研究所 一种葛根中提取高总黄酮含量淀粉的方法

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101856128A (zh) * 2010-03-23 2010-10-13 无锡市天赐康生物科技有限公司 一种增加骨密度的保健食品及其制备方法
CN101856128B (zh) * 2010-03-23 2014-06-18 无锡市天赐康生物科技有限公司 一种增加骨密度的保健食品及其制备方法
CN101947234A (zh) * 2010-09-02 2011-01-19 南京威尔曼药物研究所 含有氨基葡萄糖制剂的制备方法及其应用
JP2012062279A (ja) * 2010-09-16 2012-03-29 Kyowa Hakko Bio Co Ltd 直打用高単位グルコサミン顆粒
CN104939054A (zh) * 2014-03-26 2015-09-30 营养屋(成都)生物医药有限公司 一种增强骨密度及免疫力的保健食品及其制备方法
CN104824677A (zh) * 2015-04-14 2015-08-12 贵阳德昌祥药业有限公司 一种增加骨密度的保健食品及其制备方法
CN106072651A (zh) * 2016-07-19 2016-11-09 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 一种具有增加骨密度、抗炎镇痛作用的组合物及其制备方法
CN106072651B (zh) * 2016-07-19 2019-08-23 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 一种具有增加骨密度、抗炎镇痛作用的组合物及其制备方法
CN109078043A (zh) * 2018-09-27 2018-12-25 广东环凯微生物科技有限公司 一种增加骨密度的葛根保健品及其制备方法
CN109078094A (zh) * 2018-11-01 2018-12-25 苏州卫生职业技术学院 一种用于预防骨质疏松症的医药组合物及其制备方法
CN114532530A (zh) * 2022-02-16 2022-05-27 浙江华方生命科技有限公司 一种初乳氨糖软骨素钙咀嚼片及其制备方法

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