Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuer und wertvoller 2,6-Diaminonebularinderivate der Formel:
EMI1.1
in der R ein Phenylrest oder Cyclohexylrest ist, der mit einem niederen Alkylrest, einem niederen Alkoxyrest oder einem Halogenatom substituiert sein kann.
Es wurde überraschenderweise gefunden, dass diese Verbindungen ausgezeichnete pharmakologische Wirkungen aufweisen, z. B. eine starke und langanhaltende herzkranzgefässerweiternde Wirkung und eine starke hemmende Wirkung auf die Agglomeration der Blutplättchen.
In der Formel I kann der gegebenenfalls als Substituent vorhandene niedere Alkylrest geradkettig oder verzweigt sein und enthält vorteilhaft bis zu 4 C-Atome. Als Beispiel sind Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl und tert.-Butyl zu nennen. Der niedere Alkoxyrest kann geradkettig oder verzweigt sein und enthält vorzugsweise bis zu 4 C-Atome. Er kann ein Methoxyrest, Äthoxyrest, Isopropoxyrest oder n Butoxyrest sein. Als Halogenatome kommen Chlor, Brom, Jod und Fluor in Frage. Der Phenylrest oder Cyclohexylrest kann einen oder mehrere dieser Substituenten an einer beliebigen Stellung oder an beliebigen Stellungen seines Rings enthalten.
Erfindungsgemäss werden die 2,6-Diaminonebularinderivate der Formel I durch Umsetzung von 6-substituierten Nebu larinverbindungen der Formel:
EMI1.2
in der R die vorstehende Bedeutung hat, A ein aktiver Rest ist, der mit Ammoniak unter Bildung einer Aminogruppe zu reagieren vermag, und R' ein Wasserstoffatom oder ein Acylrest ist, mit Ammoniak hergestellt.
In der beim Verfahren verwendeten Verbindung der Formel III kann der aktive Rest A eine beliebige Gruppe sein, die mit Ammoniak unter Bildung einer Aminogruppe zu reagieren vermag. Beispielsweise können Halogene wie Chlor, Brom und Fluor und Gruppen der Formel -SOnR" (worin R" ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest oder Aralkylrest ist und n für 0, 1 oder 2 steht), z. B. eine Mercaptogruppe, Alkylmercaptogruppe, Aralkylmercaptogruppe, Alkylsulfingruppe und Alkylsulfongruppe, vorteilhaft verwendet werden.
Der Acylrest, für den R' steht, kann ein beliebiger aliphatischer, aromatischer, heterocyclischer, gesättigter oder ungesättigter Acylrest, z. B. ein Acetylrest, Propionylrest, Caproylrest, Palmitoylrest, Benzoylrest, Toluoykest und Furoylrest, sein. Besonders vorteilhaft ist ein niederer Alkanoylrest mit bis zu 4 C-Atomen.
Die 6-substituierte Nebularinverbindung rrr, in der R' ein Acylrest ist, lässt sich leicht beispielsweise durch Umsetzung einer Verbindung der Formel
EMI1.3
in der R die oben genannte Bedeutung hat, mit einem reaktionsfähigen Derivat einer Carbonsäure, die dem Acylrest R' entspricht, oder durch Umsetzung einer Verbindung der Formel
EMI1.4
in der R' der Acylrest und X ein Halogenatom ist, mit dem Amin der Formel II unter Bildung einer Verbindung der Formel
EMI1.5
in der R die oben genannte Bedeutung hat und R' der Acylrest ist, und anschliessende Einführung des aktiven Restes in die 6-Stellung der in dieser Weise gebildeten Verbindung VI herstellen. Die Umsetzung der Verbindung W mit dem reaktionsfähigen Derivat einer Carbonsäure, z. B. einem Carbonsäurehalogenid (z. B.
Chlorid oder Bromid) und Säureanhydrid kann in an sich bekannter Weise durchgeführt werden.
Es ist vorteilhaft, wenigstens drei molare Äquivalente, vor zugsweise etwa 5 bis 15 molare Äquivalente eines solchen reaktionsfähigen Derivats pro Mol der Verbindung IV in Ge genwart eines organischen Lösungsmittels (z. B. Benzol,
Chloroform und Pyridin) bei Raumtemperatur zu verwenden.
Die Umsetzung der Verbindung V mit dem Amin II kann in der vorstehend im Zusammenhang mit dem Verfahren I beschriebenen Weise, d. h. ähnlich wie die Umsetzung des 2
Halogenadenosins mit dem Amin II, durchgeführt werden.
Die spezielle Art der Einführung des aktiven Restes A in die
Verbindung VI zur Bildung der Verbindung III wird je nach der Art des aktiven Restes A gewählt. Wenn A beispielsweise
Chlor ist, kann die Verbindung VI in die 6-Chlorverbindung umgewandelt werden, indem beispielsweise Phosphoroxychlorid mit der Verbindung VI in Gegenwart eines Säureakzeptors, z. B. Pyridin, oder Thionylchlorid mit der gleichen Verbindung
VI in Gegenwart von Dimethylformamid umgesetzt wird. In der gleichen Weise kann die 6-Mercaptoverbindung hergestellt werden, indem Phosphorpentasulfid mit-der Verbindung VI in
Gegenwart eines Säureakzeptors umgesetzt wird, und durch weitere Umsetzung der vorstehenden Verbindung mit einem Alkylhalogenid oder Aralkylhalogenid in Gegenwart eines
Säureakzeptors kann die entsprechende 6-Alkyl- oder 6-Aral kylmercaptoverbindung erhalten werden.
Wenn diese 6-Alkyl oder 6-Aralkyl-mercaptoverbindung mit Wasserstoffperoxyd oder N-Chlorsuccinimid umgesetzt wird, wird die 6-Alkyl (Aralkyl-)-sulfin- bzw. -sulfonverbindung gebildet.
Eine 6-substituierte Nebularinverbindung III, in der R' ein Wasserstoffatom ist, lässt sich leicht herstellen, indem die in der vorstehend beschriebenen Weise erhaltene Verbindung III einer an sich bekannten Deacylierung, z. B. einer Behandlung mit einer Alkaliverbindung wie Natriumhydroxyd, Natriumcarbonat oder Natriummethylat, unterworfen wird.
Bei der Umsetzung der 6-substituierten Nebularinverbindung der Formel III mit Ammoniak nach dem Verfahren gemäss der Erfindung ist es im allgemeinen vorteilhaft, das Ammoniak in einem Lösungsmittel zu lösen und wenigstens molares Äquivalent, vorzugsweise etwa 2- bis Smolare Äquivalente Ammoniak pro molares Äquivalent der Verbindung III zu verwenden. Als Lösungsmittel sind beispielsweise niedere Alkanole (Methanol, Äthanol usw.), Methylcellosolve, Wasser und Gemische dieser Lösungsmittel vorteilhaft. Diese Reaktion verläuft im allgemeinen vorteilhaft unter Erhitzen auf 100 bis 200 C. Es ist besonders zweckmässig, das Reaktionsgemisch in einem gasdichten Reaktor auf diese Temperatur zu erhitzen. Bei dieser Reaktion spaltet sich der Acylrest R' der Verbindung III ab.
Die in dieser Weise gebildeten 2,6-Diaminonebularinderivate lassen sich leicht in an sich bekannter Weise vom Reaktionsgemisch isolieren. Typisch ist ein Reinigungsverfahren, bei dem man das überschüssige Ammoniak und das Lösungsmittel beispielsweise durch Destillation vom Reaktionsgemisch entfernt, den Rückstand beispielsweise mit Chloroform wäscht und ihn an einer Kieselgelsäure chromatographiert. Nach einem anderen Reinigungsverfahren werden das Ammoniak, das Lösungsmittel usw. zuerst vom Reaktionsgemisch abdestilliert, worauf dem Rückstand ein Alkohol zugesetzt wird. Das gewünschte 2,6-Diaminonebularinderivat I kann in üblicher Weise in seine pharmazeutisch unbedenklichen Salze umgewandelt werden. Als typische Beispiele pharmazeutisch unbedenklicher Salze sind Salze mit Mineralsäuren, z. B. die Hydrochloride und Sulfate, zu nennen.
Die neuen 2,6-Diaminonebularinderivate I und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze zeichnen sich durch ihre starke und lang anhaltende herzkranzgefässerweiternde Wirkung sowie ihre hemmende Wirkung auf die Agglomeration der Blutplättchen aus. Sie sind wertvoll als Koronardilatatoren und/oder Mittel, die die Agglomeration der Blutplättchen hemmen, für Warmblüter.
Nachstehend werden die Tests beschrieben, bei denen die herzkranzgefässerweiternde Wirkung und die hemmende Wir kung auf die Agglomeration der Blutplättchen von repräsen tativen Verbindungen im Vergleich zu den Wirkungen von
2, 6-Diaminonebularin und N2-Äthyl-2 , 6-diaminonebularin, die bekannte Verbindungen sind, veranschaulicht werden.
Test zur Ermittlung der koronarerweiternden Wirkung
Hunde mit einem Gewicht von 7 bis 17 kg wurden mit
Pentobarbital-Natriumsalz (30 mg/kg, intravenös) narkoti siert. Unter unterstützender Beatmung wurde eine linke Tho raktomie am fünften Rippeazwischenraum vorgenommen. Das
Herz jedes Tieres wurde freigelegt und mit dem Blut durch strömt, das von der linken Karotis des Tieres zum linken Ko ronarartheriencircumflex durch einen Polyäthylenkatheter ge führt wurde. Der Blutdurchgang durch die Koronarartherie wurde mit einem elektromagnetischen Durchflussmesser ge messen, der in die äussere Phase des Kreislaufs eingesetzt war.
Jede Testverbindung wurde durch den Polyäthylenkatheter in einer Dosis von 10,ug/Hund unmittelbar in die Koronar artherie eingeführt. Die Wirksamkeit jeder Verbindung wurde unter Verwendung der als 1 genommenen Wirksamkeit von
Adenosin als Bezugsgrösse ausgedrückt.
Verbindung Maximaler
Koronar durchnuss
Adenosin 1,00
N2-Phenyl-2,6-diaminonebularin 6,75
N2-Cyclohexyl-2,6-diaminonebularin 2,20
N2- (p-Methoxyphenyl)-2,6-diamino nebularin 2,37
2,6-Diaminonebularin 0,50
N2-Äthyl-2,6-diaminonebularin 0,91
Test zur Ermittlung der hemmenden Wirkung auf die durch Adenosin-5'-diphosphat verursachte Agglomeration der Blutplättchen von Ratten
Unter Verwendung des an Blutplättchen reichen Plasmas von Ratten eines Alters von 8 bis 10 Wochen wurde die Wir kung nach der Methode von Born und Cross (J. Physiol., 168,
178 {1963]) gemessen.
Hemmende Wirkung in % Konzentration"ug/ml 370 74 15 Adenosin 0 0 0 N2-Phenyl-2,6-diaminonebularin -85 -52 -38 N2-Cyclohexyl-2,6-diaminonebularin -95 -60 -32 2,6-Diaminonebularin 0 0 0 N2-Äthyl-2,6-diaminonebularin -40 -21 -11
Die 2,6-Diaminonebularinderivate (I) und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze können allein oder in Kombination mit einem oder mehreren pharmazeutisch unbedenklichen Trägern verabreicht werden. Als Arzneimittelzubereitungen kommen Pulver, Tabletten, Lösungen und Emulsionen für die orale Verabreichung und Injektionsflüssigkeiten in Frage.
Arzneimittelzubereitungen, die eine oder mehrere der neuen Verbindungen enthalten, können nach den für die Herstellung von Pulvern, Kapseln, Tabletten, Pillen, Injektionsflüssigkeiten und dergleichen üblichen Verfahren hergestellt werden. Die Wahl der Träger hängt von der Darreichungsart, der Löslichkeit der Verbindungen (I) usw. ab.
Die Dosierung der Verbindungen I wird in Abhängigkeit von der Art der Verabreichung, der Spezies der Warmblüter und dem Zweck der Behandlung gewählt. Wenn beispielsweise die Verbindungen Erwachsenen zur Behandlung der Koronarinsuffizienz oder Thrombose oral verabreicht werden, sind Dosen im Bereich von 0,1 bis 20 mg/Tag vorteilhaft.
Zur Zeit bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung werden in den folgenden Beispielen beschrieben. In diesen Beispielen verhalten sich Gewichtsteile zu Raumteilen wie Gramm zu Kubikzentimeter.
Beispiel 1 a) In 500 Raumteilen Methanol werden 60 Gewichtsteile 2-Brom-2',3',5'-tri-O-acetylinosin gelöst. Zur Lösung werden 75 Raumteile Anilin gegeben. Das Gemisch wird 3 Stunden bei 95" C gehalten. Das Reaktionsgemisch wird eingeengt und stehengelassen, wobei 35 Gewichtsteile Kristalle von 2-Phenyl amino-2',3',5'-tri-O-acetylinosin vom Schmelzpunkt 232 bis 233" C erhalten werden.
b) In 600 Raumteilen Chloroform werden 23 Gewichtsteile 2-Phenylamino-2',3',5'-tri-O-acetylinosin gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 17 Raumteile N,N-Dimethylformamid und 53 Raumteile Thionylchlorid zugesetzt.
Das Gemisch wird 2 Stunden bei der Badtemperatur von 90" C gekocht. Das Lösungsmittel wird dann abdestilliert und der Rückstand in 1000 Raumteilen Chloroform gelöst. Zur Lösung werden 1000 Raumteile Eiswasser gegeben. Das Gemisch wird mit Natriumhydrogencarbonat neutralisiert.
Die Chloroformschicht wird zweimal mit je 500 Raumteilen Wasser gewaschen und dann zur Trockene eingedampft.
Hierbei werden 24 Gewichtsteile eines gelblichbraunen harzigen Produkts erhalten. Dieses Produkt wird durch Säulenchromatographie an 500 Gewichtsteilen Kieselgel unter Verwendung von 5000 Raumteilen eines Gemisches von Chloroform und Methanol (Volumverhältnis 99: 1) gereinigt, wobei
18 Gewichtsteile 6-Chlor-2-phenylamino-2' ,3' ,5'-tri-O-acetyl- nebularin als blassgelbliches harziges Produkt erhalten werden.
Kernmagnetisches Resonanzspektrum (d6-Dimethyl sulfoxyd) b: 3,10; 3,03 (9H, 3COCH3), 4,3 (3H, m, Iii, 2es), 4,90 (1H, m, H3,), 6,0 (2H, m, H1 und H2,), 7,0-8,0 (5H, m, Phenyl), 8,05 (LH, s, H8), 10,0 (1H, s, -NH
EMI3.1
c) In 300 Raumteilen 20 %igem methanolischem Ammoniak werden 17,5 Gewichtsteile 6-Chlor-2-phenylamino 2',3',5'-tri-O-acetylnebularin gelöst. Die Lösung wird in einem verschlossenen Rohr 4 Stunden bei 1200 C gehalten.
Das Reaktionsgemisch wird eingeengt. Die abgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert. Durch Umkristallisation aus 3000 Raumteilen heissem Wasser werden 9,5 Gewichtsteile N2 Phenyl-2,6-diaminonebularin in Form von farblosen Nadeln vom Schmelzpunkt 244 bis 245 C erhalten.
UV-Absorptionsspektrum: 272 (16 800) Ä Po,,2 m,u (r):230 (Schulter), ) P,,Haxl2 nvt (E): 242 (16 500),
277 (19 700).
Elementaranalyse für C16H18N604:
Berechnet: C 53,62 H 5,06 N 23,45
Gefunden: C 53,33 H 5,10 N 22,75
Beispiel 2
In 100 Raumteilen Pyridin werden 10 Gewichtsteile 2 Phenylaminoinosin suspendiert. Der Suspension werden 50 Gewichtsteile Essigsäureanhydrid zugetropft. Das Gemisch wird 3 Stunden gerührt und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird aus 5 Raumteilen Methanol umkristallisiert. Hierbei werden 2 Gewichtsteile 2-Phenyl amino-2',3',5'-tri-O-acetylinosin in Form von farblosen Flokken vom Schmelzpunkt 234-235 C erhalten.
Auf die in Beispiel 1 (b) beschriebene Weise wird das erhaltene 2-Phenylamino-2',3',5'-tri-O-acetylinosin an der 6 Stellung chloriert und dann auf die in Beispiel 1 (c) beschriebene Weise mit Ammoniak behandelt. Hierbei werden 0,89 Gewichtsteile N2-Phenyl-2,6-diaminonebularin vom Schmelzpunkt 244 bis 245" C erhalten.
Beispiel 3
In 500 Raumteilen Pyridin werden 20 Gewichtsteile 2 Phenylamino-2',3',5'-tri-O-acetylinosin gelöst. Zur Lösung werden 60 Gewichtsteile Phosphorpentasulfid gegeben. Das Gemisch wird 5 Stunden gekocht, worauf es in 2000 Raumteile Eiswasser gegossen wird. Das Gemisch wird 1 Stunde gerührt und die gebildete Fällung abfiltriert. Die Fällung wird in 300 Raumteilen Chloroform gelöst. Von der Lösung werden die unlöslichen Bestandteile abfiltriert, worauf die Lösung zur Trockene eingedampft wird. Der Rückstand wird in 300 Raumteilen 50 %igem wässrigen Methanol gelöst. Zur Lösung werden 150 Raumteile 2n-Natriumhydroxyd und 25 Raumteile Methyljodid gegeben. Das Gemisch wird 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand erneut in 500 Raumteilen 50 %igem wässrigem Methanol gelöst.
Die Lösung wird auf pH 3 eingestellt und dann mit Wasser auf 2000 Raumteile verdünnt. Die Lösung wird dann auf eine Aktivkohlesäule (200 Gewichtsteile) aufgegeben. Die Säule wird mit Wasser gewaschen und dann mit 2000 Raumteilen eines Gemisches von Wasser, Äthanol, Butanol und 28 %igem wässrigem Ammoniak (Volumverhältnis 48:45:5:2) als Elutionsmittel eluiert. Das Eluat wird zur Trockene eingedampft und das als Rückstand erhaltene N2-Phenyl-6-methylmercapto-2-aminonebularin in 150 Raumteilen 20 %igem methanolischem Ammoniak gelöst. Die Lösung wird auf die in Beispiel 1 (c) be schriebene Weise weiterbehandelt, wobei 10,5 Gewichtsteile N2-Phenyl-2,6-diaminonebularin vom Schmelzpunkt 244 bis 245" C erhalten werden.
Beispiel 4
Auf die in Beispiel 1 (a) beschriebene Weise wird 1 Gewichtsteil 2-Cyclohexylaminoinosin mit 5 Raumteilen Essigsäureanhydrid umgesetzt, wobei 1,1 Gewichtsteile 2-Cyclo hexylamino-2',3',5'-tri-O-acetyllnosin als farbloses harziges Produkt erhalten werden.
UV-Absorptionsspektrum: A mMax H 257, 285 (Schulter) mu
Auf die in Beispiel 1 (b) beschriebene Weise werden 0,5 Gewichtsteile dieses Produkts mit Thionylchlorid in Gegenwart von Dimethylformamid umgesetzt, wobei 0,44 Gewichtsteile 6-Chlor-2-cyclohexylamino-2',3' ,5'-tri-O-acetylnebularin in Form eines farblosen Harzes erhalten werden. Dieses Produkt wird in 20 Raumteilen 20 %igem methanolischem Ammoniak gelöst und auf die in Beispiel 1 (c) beschriebene Weise umgesetzt. Hierbei werden 0,23 Gewichtsteile N2-Cyclohexyl2,6-Diaminonebularin vom Schmelzpunkt 148-150 C erhalten.
Beispiel 5
Durch Umsetzung der Verbindung III mit Ammoniak auf die in den vorstehenden Beispielen beschriebene Weise werden die in der folgenden Tabelle genannten Verbindungen erhalten, die neu und wertvoll sind und unter die Formel I fallen.
Verbindung Elementaranalyse Schmelzpunkt und UV
Bruttoformel Berechnet Gefunden absorptionsspektrum
N2-(p-Methoxyphenyl)- Ci7H20N603 C 52,57 52,33 Schmelzpunkt 195-197 C
2,6-diaminonebularin H 5,19 4,76
N 21,64 21,73
N2-(p-Methylphenyl)- C17H20N604 C 54,83 54,67 Schmelzpunkt 164-165"C
2,6-diaminonebularin H 5,41 5,12
N 22,57 22,91
N2-(p-Chlorphenyl)- CX6H17N604Cl C 48,92 49,34 ,3.mMa H: 252, 268 (Schulter)
2,6-diaminonebularin H 4,36 4,13 274, 290 (Schulter)
N 21,39 20,97 AmPnH: 230, 259 m,u
N2-(p-Methylcyclohexyl)- C17H26N6O4 C 53,95 53,72 iPmHas: 222, 259, 288 m,u
2,6-diaminonebularin H 6,93 6,98 1 PmHinS :
: 242, 273 m,u
N 22,21 21,86
The invention relates to a process for the preparation of new and valuable 2,6-diaminonebularin derivatives of the formula:
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in which R is a phenyl radical or cyclohexyl radical which can be substituted by a lower alkyl radical, a lower alkoxy radical or a halogen atom.
It has surprisingly been found that these compounds have excellent pharmacological effects, e.g. B. a strong and long-lasting coronary vasodilator effect and a strong inhibitory effect on the agglomeration of blood platelets.
In the formula I, the lower alkyl radical which may be present as a substituent can be straight-chain or branched and advantageously contains up to 4 carbon atoms. Examples include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl and tert-butyl. The lower alkoxy radical can be straight-chain or branched and preferably contains up to 4 carbon atoms. It can be methoxy, ethoxy, isopropoxy or n-butoxy. Possible halogen atoms are chlorine, bromine, iodine and fluorine. The phenyl radical or cyclohexyl radical can contain one or more of these substituents in any position or in any positions on its ring.
According to the invention, the 2,6-diaminonebularin derivatives of the formula I are prepared by reacting 6-substituted nebularin compounds of the formula:
EMI1.2
in which R has the above meaning, A is an active radical which is able to react with ammonia to form an amino group, and R 'is a hydrogen atom or an acyl radical, produced with ammonia.
In the compound of formula III used in the process, the active radical A can be any group which is capable of reacting with ammonia to form an amino group. For example, halogens such as chlorine, bromine and fluorine and groups of the formula -SOnR "(where R" is a hydrogen atom or an alkyl radical or aralkyl radical and n is 0, 1 or 2), e.g. B. mercapto group, alkyl mercapto group, aralkyl mercapto group, alkylsulfine group and alkylsulfone group can be advantageously used.
The acyl radical for which R 'stands can be any aliphatic, aromatic, heterocyclic, saturated or unsaturated acyl radical, e.g. B. an acetyl residue, propionyl residue, caproyl residue, palmitoyl residue, benzoyl residue, toluene residue and furoyl residue. A lower alkanoyl radical with up to 4 carbon atoms is particularly advantageous.
The 6-substituted nebularin compound rrr, in which R 'is an acyl radical, can easily be prepared, for example, by reacting a compound of the formula
EMI1.3
in which R has the meaning given above, with a reactive derivative of a carboxylic acid which corresponds to the acyl radical R ', or by reacting a compound of the formula
EMI1.4
where R 'is acyl and X is halogen, with the amine of formula II to form a compound of formula
EMI1.5
in which R has the meaning given above and R 'is the acyl radical, and then introducing the active radical in the 6-position of the compound VI formed in this way. The reaction of the compound W with the reactive derivative of a carboxylic acid, e.g. B. a carboxylic acid halide (e.g.
Chloride or bromide) and acid anhydride can be carried out in a manner known per se.
It is advantageous to use at least three molar equivalents, preferably about 5 to 15 molar equivalents, of such a reactive derivative per mole of the compound IV in the presence of an organic solvent (e.g. benzene,
Chloroform and pyridine) at room temperature.
The reaction of the compound V with the amine II can be carried out in the manner described above in connection with process I, i. H. similar to the implementation of the 2nd
Halogenadenosine with the amine II.
The special way of introducing the active residue A into the
Compound VI to form compound III is selected depending on the nature of the active residue A. For example, if A
Is chlorine, the compound VI can be converted into the 6-chloro compound by, for example, phosphorus oxychloride with the compound VI in the presence of an acid acceptor, e.g. B. pyridine, or thionyl chloride with the same compound
VI is implemented in the presence of dimethylformamide. In the same way, the 6-mercapto compound can be prepared by using phosphorus pentasulfide with-the compound VI in
The presence of an acid acceptor is reacted, and by further reacting the above compound with an alkyl halide or aralkyl halide in the presence of a
Acid acceptor, the corresponding 6-alkyl or 6-aral kylmercapto compound can be obtained.
If this 6-alkyl or 6-aralkyl-mercapto compound is reacted with hydrogen peroxide or N-chlorosuccinimide, the 6-alkyl (aralkyl) sulfine or sulfone compound is formed.
A 6-substituted nebularin compound III, in which R 'is a hydrogen atom, can easily be prepared by subjecting the compound III obtained in the manner described above to a deacylation known per se, e.g. B. is subjected to a treatment with an alkali compound such as sodium hydroxide, sodium carbonate or sodium methylate.
When reacting the 6-substituted nebularin compound of the formula III with ammonia by the process according to the invention, it is generally advantageous to dissolve the ammonia in a solvent and at least molar equivalents, preferably about 2 to 5 molar equivalents of ammonia per molar equivalent of the compound III to use. Lower alkanols (methanol, ethanol, etc.), methyl cellosolve, water and mixtures of these solvents are advantageous as solvents. This reaction generally proceeds advantageously with heating to 100 to 200 ° C. It is particularly advantageous to heat the reaction mixture to this temperature in a gas-tight reactor. In this reaction, the acyl radical R 'of the compound III is split off.
The 2,6-diaminonebularin derivatives formed in this way can easily be isolated from the reaction mixture in a manner known per se. Typical is a purification process in which the excess ammonia and the solvent are removed from the reaction mixture, for example by distillation, the residue is washed, for example with chloroform, and it is chromatographed on a silica gel acid. According to another purification method, the ammonia, the solvent, etc. are first distilled off from the reaction mixture, after which an alcohol is added to the residue. The desired 2,6-diaminonebularin derivative I can be converted into its pharmaceutically acceptable salts in a conventional manner. Typical examples of pharmaceutically acceptable salts are salts with mineral acids, e.g. B. the hydrochlorides and sulfates to name.
The new 2,6-diaminonebularin derivatives I and their pharmaceutically harmless salts are distinguished by their strong and long-lasting coronary vasodilator effect and their inhibitory effect on the agglomeration of blood platelets. They are valuable as coronary dilators and / or agents that inhibit platelet agglomeration for warm-blooded animals.
The following describes the tests in which the coronary vasodilator effect and the inhibitory effect on platelet agglomeration of representative compounds compared to the effects of
2,6-diaminonebularin and N2-ethyl-2,6-diaminonebularin which are known compounds can be exemplified.
Test to determine the coronary dilatation effect
Dogs weighing 7 to 17 kg were used
Pentobarbital sodium salt (30 mg / kg, intravenous) anesthetized. A left thoractomy was performed on the fifth intercostal space under supportive ventilation. The
Heart of each animal was exposed and perfused with blood passed from the animal's left carotid to the left coronary arterial circumflex through a polyethylene catheter. The passage of blood through the coronary artery was measured with an electromagnetic flow meter which was inserted in the outer phase of the circulation.
Each test compound was introduced directly into the coronary artery through the polyethylene catheter at a dose of 10 µg / dog. The potency of each compound was determined using the potency of
Adenosine expressed as a reference.
Connection maximum
Coronary nut
Adenosine 1.00
N2-phenyl-2,6-diaminonebularin 6.75
N2-cyclohexyl-2,6-diaminonebularine 2.20
N2- (p-methoxyphenyl) -2,6-diamino nebularine 2.37
2,6-diaminonebularin 0.50
N2-ethyl-2,6-diaminonebularin 0.91
Test to determine the inhibitory effect on the agglomeration of the platelets of rats caused by adenosine 5'-diphosphate
Using the platelet-rich plasma from rats aged 8 to 10 weeks, the effect was determined by the method of Born and Cross (J. Physiol., 168,
178 {1963]).
Inhibitory effect in% concentration "µg / ml 370 74 15 Adenosine 0 0 0 N2-phenyl-2,6-diaminonebularin -85 -52 -38 N2-cyclohexyl-2,6-diaminonebularin -95 -60 -32 2,6- Diaminonebularin 0 0 0 N2-ethyl-2,6-diaminonebularin -40 -21 -11
The 2,6-diaminonebularin derivatives (I) and their pharmaceutically acceptable salts can be administered alone or in combination with one or more pharmaceutically acceptable carriers. Powders, tablets, solutions and emulsions for oral administration and injection liquids can be used as pharmaceutical preparations.
Pharmaceutical preparations which contain one or more of the new compounds can be produced by the methods customary for the production of powders, capsules, tablets, pills, injection liquids and the like. The choice of carrier depends on the type of administration, the solubility of the compounds (I), etc.
The dosage of the compounds I is chosen depending on the mode of administration, the species of warm-blooded animals and the purpose of the treatment. For example, when the compounds are administered orally to adults for the treatment of coronary insufficiency or thrombosis, doses in the range of 0.1 to 20 mg / day are advantageous.
Presently preferred embodiments of the invention are described in the following examples. In these examples, parts by weight are related to parts of volume as grams are to cubic centimeters.
Example 1 a) 60 parts by weight of 2-bromo-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine are dissolved in 500 parts by volume of methanol. 75 parts by volume of aniline are added to the solution. The mixture is kept at 95 "C for 3 hours. The reaction mixture is concentrated and left to stand, giving 35 parts by weight of crystals of 2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine with a melting point of 232 to 233" C will.
b) 23 parts by weight of 2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine are dissolved in 600 parts by volume of chloroform. While cooling with ice, 17 parts by volume of N, N-dimethylformamide and 53 parts by volume of thionyl chloride are added.
The mixture is boiled for 2 hours at a bath temperature of 90 ° C. The solvent is then distilled off and the residue is dissolved in 1000 parts by volume of chloroform. 1000 parts by volume of ice water are added to the solution. The mixture is neutralized with sodium hydrogen carbonate.
The chloroform layer is washed twice with 500 parts by volume of water and then evaporated to dryness.
This gives 24 parts by weight of a yellowish brown resinous product. This product is purified by column chromatography on 500 parts by weight of silica gel using 5000 parts by volume of a mixture of chloroform and methanol (volume ratio 99: 1), wherein
18 parts by weight of 6-chloro-2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylnebularine are obtained as a pale yellowish resinous product.
Nuclear magnetic resonance spectrum (d6-dimethyl sulfoxide) b: 3.10; 3.03 (9H, 3COCH3), 4.3 (3H, m, III, 2es), 4.90 (1H, m, H3,), 6.0 (2H, m, H1 and H2,), 7, 0-8.0 (5H, m, phenyl), 8.05 (LH, s, H8), 10.0 (1H, s, -NH
EMI3.1
c) 17.5 parts by weight of 6-chloro-2-phenylamino 2 ', 3', 5'-tri-O-acetylnebularin are dissolved in 300 parts by volume of 20% strength methanolic ammonia. The solution is kept in a sealed tube at 1200 ° C. for 4 hours.
The reaction mixture is concentrated. The deposited crystals are filtered off. Recrystallization from 3000 parts by volume of hot water gives 9.5 parts by weight of N2 phenyl-2,6-diaminonebularin in the form of colorless needles with a melting point of 244 to 245 ° C.
UV absorption spectrum: 272 (16 800) Ä Po ,, 2 m, u (r): 230 (shoulder),) P ,, Haxl2 nvt (E): 242 (16 500),
277 (19,700).
Elemental analysis for C16H18N604:
Calculated: C 53.62 H 5.06 N 23.45
Found: C 53.33 H 5.10 N 22.75
Example 2
10 parts by weight of 2 phenylaminoinosine are suspended in 100 parts by volume of pyridine. 50 parts by weight of acetic anhydride are added dropwise to the suspension. The mixture is stirred for 3 hours and then concentrated under reduced pressure. The residue is recrystallized from 5 parts by volume of methanol. This gives 2 parts by weight of 2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine in the form of colorless flakes with a melting point of 234-235 ° C.
In the manner described in Example 1 (b), the obtained 2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine is chlorinated at the 6-position and then with ammonia in the manner described in Example 1 (c) treated. This gives 0.89 parts by weight of N2-phenyl-2,6-diaminonebularine with a melting point of 244 to 245 ° C.
Example 3
20 parts by weight of 2-phenylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylinosine are dissolved in 500 parts by volume of pyridine. 60 parts by weight of phosphorus pentasulfide are added to the solution. The mixture is boiled for 5 hours, after which it is poured into 2000 parts by volume of ice water. The mixture is stirred for 1 hour and the precipitate formed is filtered off. The precipitate is dissolved in 300 parts by volume of chloroform. The insoluble constituents are filtered off from the solution, whereupon the solution is evaporated to dryness. The residue is dissolved in 300 parts by volume of 50% aqueous methanol. 150 parts by volume of 2N sodium hydroxide and 25 parts by volume of methyl iodide are added to the solution. The mixture is stirred at room temperature for 20 hours. The reaction mixture is evaporated to dryness and the residue is redissolved in 500 parts by volume of 50% aqueous methanol.
The solution is adjusted to pH 3 and then diluted to 2000 parts by volume with water. The solution is then applied to an activated charcoal column (200 parts by weight). The column is washed with water and then eluted with 2000 parts by volume of a mixture of water, ethanol, butanol and 28% strength aqueous ammonia (volume ratio 48: 45: 5: 2) as the eluent. The eluate is evaporated to dryness and the N2-phenyl-6-methylmercapto-2-aminonebularin obtained as residue is dissolved in 150 parts by volume of 20% strength methanolic ammonia. The solution is further treated in the manner described in Example 1 (c), 10.5 parts by weight of N2-phenyl-2,6-diaminonebularine with a melting point of 244 to 245 "C being obtained.
Example 4
In the manner described in Example 1 (a), 1 part by weight of 2-cyclohexylaminoinosine is reacted with 5 parts by volume of acetic anhydride, 1.1 parts by weight of 2-cyclohexylamino-2 ', 3', 5'-tri-O-acetylnosine as a colorless resinous product can be obtained.
UV absorption spectrum: A mMax H 257, 285 (shoulder) mu
In the manner described in Example 1 (b), 0.5 part by weight of this product is reacted with thionyl chloride in the presence of dimethylformamide, 0.44 part by weight of 6-chloro-2-cyclohexylamino-2 ', 3', 5'-tri-O acetylnebularin can be obtained in the form of a colorless resin. This product is dissolved in 20 parts by volume of 20% strength methanolic ammonia and reacted in the manner described in Example 1 (c). This gives 0.23 parts by weight of N2-cyclohexyl2,6-diaminonebularine with a melting point of 148-150 ° C.
Example 5
By reacting the compound III with ammonia in the manner described in the above examples, the compounds listed in the table below, which are new and valuable and come under the formula I, are obtained.
Connection elemental analysis melting point and UV
Gross Formula Calculated Found absorption spectrum
N2- (p-Methoxyphenyl) - Ci7H20N603 C 52.57 52.33 Melting point 195-197 C
2,6-diaminonebularin H 5.19 4.76
N 21.64 21.73
N2- (p-Methylphenyl) - C17H20N604 C 54.83 54.67 m.p. 164-165 "C
2,6-diaminonebularin H 5.41 5.12
N 22.57 22.91
N2- (p-chlorophenyl) - CX6H17N604Cl C 48.92 49.34, 3.mMa H: 252, 268 (shoulder)
2,6-diaminonebularine H 4.36 4.13 274, 290 (shoulder)
N 21.39 20.97 AmPnH: 230, 259 m, u
N2- (p-methylcyclohexyl) - C17H26N6O4 C 53.95 53.72 iPmHas: 222, 259, 288 m, u
2,6-diaminonebularin H 6.93 6.98 1 PmHinS:
: 242, 273 m, u
N 22.21 21.86