Procédé de préparation de nouveaux diamino stéroïdes La présente invention a pour objet un procédé de préparation de nouveaux diamino-stéroïdes da structure nouvelle, produits caractérisés par la présence d'une chaîne latérale accolée au carbone 17 de conformation symétrique suivante
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L'invention vise un procédé de préparation de nou veaux diamino-stéroïdes, de formule générale I dans laquelle R représente de l'hydrogène ou un radical acyle, RIII de l'hydrogène, un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, RIv un r u dical alcoyle, aryle ou aralcoyle, RIII+RIv pouvant représenter ensemble une structure cyclique éventuellement oxygénée, et Z=H2, ou
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ainsi que les sels de ces composés.
Les nouveaux composés obtenus par le procédé de l'invention sont des produits physiologiquement actifs et ils sont doués de propriétés pharmacodynamiques utiles. Plus particulièrement, ces composés exercent une acti vité coronarodilatatrice et spasmolytique.
Un des représentants actuellement préféré de la nou velle classe des stéroïdes obtenus par le procédé de l'in vention est la 3a-acétoxy-21,22-bis-(diméthylaminomé- thyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, dont les effets corona-
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rodilatateurs et spasmolytiques sont particulièrement in tenses et qui présente l'avantage d'exercer une activité vasodilatatrice relativement durable.
D'autres représentants intéressants de cette classe, obtenus également par le procédé de l'invention sont, par exemple, le 3α-acétoxy-11ss-hydroxy 21,22bis-(di- méthylaminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane et le dé rivé 11-cétonique correspondant.
Le procédé de l'invention se trouve résumé sur le schéma réactionnel annexé.
Ledit procédé est caractérisé en ce que l'on fait réagir un cyanure alcalin sur un dérivé du prégnane, de formule II
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dans laquelle R représente de l'hydrogène ou un radical acyle, RI de l'iode ou le groupe mésyloxy et Y=H2 ou = O, soumet le dérivé dicyano résultant, de formule III
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à l'hydrolyse alcaline, obtient un diacide carboxylique, de formule IV
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puis transforme par l'action d'un agent chlorurant les carboxyles du composé de formule IV en dichlorures d'acides,
condense le produit obtenu avec une amine de formule
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dans laquelle RIII représente de l'hydrogène, un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, RIv un radical alcoyle, aryle ou aralcoyle, RIII+RIV pouvant représenter ensemble une structure cyclique éventuellement oxygénée, ce qui fournit un diamide de formule V
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que l'on soumet à l'action de l'hydrure de lithium-alu minium pour obtenir la diamine correspondante. On peut protéger la fonction alcool en 3 par estérification sous l'action d'un dérivé fonctionnel d'un, acide organi que carboxylique inférieur, avant de procéder à la chlo- ruration.
L'exécution du procédé décrit a lieu de préférence dans les conditions suivantes a) la réaction du composé de formule II avec un cyanure alcalin est effectuée dans le diméthy1forma- mide ; b) dans le cas où le composé de formule II est un dimésylate, RI=OSO2CH3, la réaction avec le cyanure alcalin et notamment avec le cyanure de potassium est effectuée en présence d'une faible quantité d'iodure de potassium ;
c) on protège la fonction alcool du composé de for mule IV sous forme de formiate que l'on obtient par réaction de l'alcool libre avec l'acide formique, à tem pérature ambiante ; d) on tranforme les carboxyles du composé de for mule IV, en chlorures d'acides par réaction avec le pentachlorure de phosphore;
e) l'estérification de l'alcool en 3 du composé de for mule I, avec R=H, est effectuée par action de l'anhy dride d'un acide organique carboxylique inférieur en pyridine ; f) l'oxydation de l'alcool en 11 du composé de for mule I,
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est effectuée à l'aide du mélange sulfochromique. Les produits de départ du présent procédé, les com posés de formule II peuvent être préparés selon des procédés connus.
C'est ainsi, par exemple, qu'au départ de 3a-acé- toxy-21,22-dimésyloxy-23;24bis-nor-(5ss)-cholane, on prépare le 3α-acétoxy-21,22bis-(diméthylaminométhyl)- 23,24bis-nor(5ss)-cholane, et qu'au départ du 3a-acé- toxy-11-oxo-21,22-diiodo-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, on prépare le 3a-acétoxy-11ss-hydroxy-21,22bis-(diméthyl- aminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, ainsi que par oxydation de ce dernier composé le dérivé 11 -cétonique correspondant.
Le radical acyle, dont il est fait mention plus haut, correspond de préférence au reste d'un acide organique carboxylique comportant de 1 à 18 atomes de carbone.
Parmi ces acides organiques carboxyliques corres pondant au substituant R de la formule I, on peut citer ceux des acides carboxyliques aliphatiques ou cycloali- phatiques saturés ou non saturés ou ceux d'acides car boxyliques aromatiques ou hétérocycliques par exemple des acides formique, acétique, propionique, butyrique, isobutyrique, valérianique, isovalérianique, triméthylacé- tique, caproïque, ss-triméthylpropionique, oenanthique, caprylique, pélarginique, caprique, undécylique, undécy- lénique, laurique, myristique, palmitique, stéarique, oléi que, cyclopentyl,
cyclopropyl-, cyclobutyl et cyclohexyl- carbonique, de l'acide cyclopropylméthylcarbonique, cyclobutylméthylcarbonique, cyclopentyléthylcarbonique, cyclohexyléthylcarbonique, des acides cyclopentyl-, cy- clohexyl- ou phénylacétique ou propionique, de l'acide benzoïque, des acides phénoxyalcane-oïques comme les acides phénoxy acétique, p-chlorophénoxyacétique, 2,4- dichlorophénoxyacétique, 4-tert-butyl-phénoxyacétique, 3-phénoxypropionique, 4-phénoxybutyrique, des acides furane-2-carboxylique, 5-tert-butylfurane 2-carboxyli- que, 5-bromo-furane 2 carboxylique,
des acides nicoti- niques, des acides (3-céto-carboxyliques par exemple des acides acétylacétique, propionylaeétique, butyrylacétique.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter.
<I>Exemple 1</I> Préparation du 3α-acétoxy-11ss-hydroxy-21,22bis- (diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane), <I>composé de formule 1 avec</I>
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3a-acétoxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5ss)-cholane, composé de formule 111 avec R=COCH3, Y=O a) à partir du dérivé diiodé On met en suspension 6,264 g de 3a-acétoxy-11- oxo-21,22-diiodo-23,24bis-nor-(5ss)-cholane (composé de formule II avec R=COCH3, RI=I, Y=O) dans 60 crus de diméthylformamide, on ajoute 3,9 g de cya nure de potassium, chauffe à 60oC pendant deux heures sous atmosphère d'azote et verse sur un mélange eau glace, on essore,
lave à l'eau et évapore à sec sous vide. On dissout le résidu dans 25 cm3 de pyridine, ajoute 12,5 cm3 d'anhydride acétique et chauffe pendant une heure à 50oC, extrait avec un solvant organique et cris tallise le résidu dans le méthanol. On obtient ainsi 1,88 g de 3a-acétoxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor-(5ss)- cholane F. 1660C, [a]20=+65,50 (c = 0,75 10/0, chloro forme) soit un rendement de 61 %.
Le produit se présente sous, forme de cristaux inco lores solubles dans le benzène et le chloroforme. Analyse: C26H3603N2 = 424,57 Calculé: C 73,54% H 8,55 % O 11,31 % N 6,600/0 Trouvé : 73,5 8,7 10,9 6,7 Le produit n'est pas décrit dans la littérature.
b) â partir du dimésylate On dissout 15,19 g de 3a-acétoxy-11-oxo-21,22-m- mésyloxy-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, composé de for mule II avec R=COCH3, RI='OSO2CH3, Y=O, dans 135 cm3 de diméthylformamide, et on ajoute sous agi tation cyanure de potassium . . . . . . 8,8 g iodure de potassium . . . . . . 0,135 g eau . . . . . . . . . . . 45 cm3 On chauffe pendant trois heures à 100 C sous atmo sphère d'azote, verse sur le mélange eau-glace, essore, lave à l'eau et sèche.
On dissout le résidu dans 70 cm3 de pyridine, ajoute 35 em3 d'anhydride acétique et chauffe pendant une heure à 500C. On verse sur le mélange eau-glace, extrait au chlorure de méthylène, lave successivement à l'eau, à l'acide chlorhydrique, à l'eau, au bicarbonate de sodium et à l'eau. On sèche et évapore à sec sous vide.
On obtient 8,932 g (rendement 78 0/0) de 3a-acé- toxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor-(5ss-cholane (F.= 1650C) identique au produit obtenu ci-dessus.
Acide 3a-hydroxy-I1-axo-21-carboxy-24-nor-(5ss)- cholane-23-oïque, composé de formule IV avec Y=O On chauffe à 125-130oC, 8,5 g de 3a-acétoxy-11- oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, composé de formule III avec R=COCH3, Y=O, dans 150 cm3 d'éthylène-glycol. On ajoute 53 cm3 de lessive de potasse, 53 cm3 d'eau distillée, 16 cm3 d'éthanol et chauffe le mélange pendant une nuit à 105oC puis plu sieurs heures à 115oC. On verse sur le mélange eau glace, lave à l'éther, acidifie, par addition de 65 cm d'acide chlorhydrique concentré et abandonne pendant une nuit. On essore, lave à l'eau et sèche.
On obtient 7,82 g d'acide 3a-hydroxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor- (5ss)-cholane-23-oïque (F.190-1920C) rendement: 93%.
Cristaux sous forme d'aiguilles solubles dans l'alcool, peu solubles dans l'éther.
Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Acide 3a-formyloxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor- (5ss-cholane-23-oïque On dissout à température ambiante 7,3 g d'acide 3a-hydroxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor-(5ss)-aholane-23- oique, composé de formule IV avec Y= O, dans 51 cm3 d'acide formique, maintient la solution sous azote pen dant deux heures puis verse dans un mélange eau-glace.
On extrait le précipité obtenu au chlorure de méthylène, lave la solution à l'eau, sèche sur sulfate de magnésium et évapore à sec sous vide. On obtient 7,51 g d'acide 3a- formyloxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor-(5 (3)-cholane-23- oïque, que l'on emploiera tel quel dans la suite de la synthèse. Ce composé n'est pas décrit dans la littérature.
3a-hydroxy-11-oxo-21,22 bis-(diméthylformamido)- 23,24bis-nor-(5ss)-cholane, composé de formule V, avec R=H, RIII=RIv=CH3, Y=O On dissout 8,84 g d'acide 3a-formyloxy-11-oxo-21- carboxy-24-nor-(5ss)-cholane-23-oique, d'ans, 50 cm3 de chloroforme sec et introduit 10,7 g de pentachlorure de phosphore en suspension dans 60 cm3 de chloroforme.
La réaction est rapide, on observe un important dégagement gazeux et une augmentation de la tempé rature. On maintient la solution à 400C jusqu'à ce qu'il n'y sit plus de dégagement gazeux et évapore à sec sous vide. On dissout le résidu dans 100 cm3 de benzène puis introduit 36 cm3 de diméthylamine refroidie à O C. On maintient le mélange réactionnel pendant une nuit à O C, puis le verse dans un mélange eau-glace. On lave la solution benzénique successivement avec une solution de bicarbonate de sodium, à l'eau et à l'eau salée, sèche et évapore à sec.
On dissout le résidu dans 80 cm3 de méthanol puis ajoute 20 cm3 d'une solution de soude normale et aban donne sous azote à température ambiante pendant une heure. On dilue avec 500 cm3 d'eau et extrait au mé lange benzène-éther 1 : 1, lave à l'eau puis à l'eau salée, sèche et évapore à sec. On recristallise, le résidu dans l'acétate d'éthyle et obtient 4,79 g de 3a-hydroxy-11 oxo-21,22-bis-(diméthylformamido)-23,24bis-nor-(5ss)- cholane, rendement: 51 %.
Ce composé se présente sous forme de cristaux inco lores solubles dans le chloroforme et dans les alcools, insolubles dans l'eau, F. = 190-1910C, [α]D = -I-580 (c = 0,9%, éthanol).
Analyse: C28H4604N2 = 474,66 Calculé: C 70,84% H 9,77% N 5,90% O 13,48 % Trouvé : 70,7 9,5 5,8 13,4 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. 3a-acétoxy-11ss-hydroxy-21,22bis-(diméthylamino- méthyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, composé de <I>formule I avec</I>
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A une suspension de 7,5 g d'hydrure d'aluminium- lithium dans 125 cm3 de tétrahydrofurane, on ajoute une solution de 5 g de 3a-hydroxy-11-oxo-21,22-bis-(dimé- thylformamido)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, composé de formule V avec R=H, RIII=RIv=CH3 Y=O, dissous dans 125 cm3 de tétrahydrofurane.
On chauffe au reflux pendant vingt-deux heures, refroidit, ajoute 40 cm3 de tétrahydrofurane à 75 % d'eau, 250 cm3 de soude 2N et 300 cors du mélange benzène-éther 1 : 1. On filtre la suspension ainsi obtenue, lave la phase organique à l'eau salée, sèche et évapore à sec.
Au résidu on ajoute 26 cm3 de pyridine et 13 cm3 d'anhydride acétique. On maintient le milieu réactionnel à température ambiante et sous azote pendant trois heu res, puis verse dans. un mélange eau-glace. Après trente minutes de repos, on alcalinise par addition de 75 cm3 de triéthylamine et extrait au mélange benzène-éther 1 : 1. On lave les extraits à l'eau, au bicarbonate de sodium et à l'eau solée, sèche et évapore à sec. Le résidu cristallise dans l'éther isopropylique. On obtient le 3a-acétoxy-11ss-hydroxy-21,22bis-(diméthylaminomé- thyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane avec un rendement de 76 %, F. = 154 C, [a] =+h590, (c = 1%, éthanol).
Ce produit se présente sous forme de cristaux inco lores solubles dans le chloroforme et les alcools et peu solubles dans l'éther isopropylique.
Analyse : C30H54O3N2 = 490,75 Calculé: C 73,42 % H 11,10% N 5,71% Trouvé : 73,2 11,1 5,8 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Préparation du 3a-acétoxy-11-oxo-21,22bis- (diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane. On. dissout en agitant 1,96 g de 3a-acétoxy-11ss hydroxy-21,22bis-(diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor- (5ss)-cholane, composé de formule I avec R=COCH3 et
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obtenu dans 30 cm3 d'acide acétique à 1% d'eau.
On ajoute lentement 1,4 cm3 d'une solution sulfo- chromique préparée à partir de 135 g d'anhydride chromique 115 cm3 d'acide sulfurique concentré et 50 cm3 d'eau, et poursuit l'agitation à température ambiante pendant une heure.
Après addition de 2 cm3 de méthanol et de 65 cm3 d'eau, on neutralise avec 130 cm3 d'ammoniaque con centrée. On glace, ajoute 10 cm3 de triéthylamine et extrait avec le mélange benzène-éther. On lave les extraits à l'eau pure, sèche et distille à sec. On obtient 2,88 g de produit se présentant sous forme d'une huile incolore.
Dichlorhydrate : Le produit obtenu est dissous dans 20 cm3 d'acétone.
On filtre, puis ajoute 4 cm3 d'une solution éthérée d'acide chlorhydrique sec 2,6 N. On dilue avec 120 cm3 d'éther anhydre, laisse au repos une demi-journée, essore, lave successivement au mélange acétone-éther puis à l'éther anhydre et sèche.
On obtient 2,057 g (soit un rendement de 91 0/0) de αichlorhydrate du 3a-acétoxy 11-oxo-21,22bis-(diméthyl- aminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, F. n,2 250- 260oC, [a]D = -i-470 (c = 1 0/0, éthanol).
Le produit est soluble dans l'eau, l'alcool et le chlo roforme.
Analyse : C30H5403N2C12 = 561,66 Calculé: C 64,15% H 9,69% N 4,99% Cl 12,63 % Trouvé : 64,2 9,9 4,7 12,3 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. <I>Exemple 2</I> Préparation du 3a-acétoxy-21,22-bis- (diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane, <I>composé de formule 1 avec</I> R=COCH3, RIII=RIv=CH3 et Z=H2 <I>Stade A :
Préparation du</I> 3a-acétoxy-21,22-dicyano- 23,24bis-nor-(5(3)-cholane <I>de formule 111 avec</I> R=COCH3, Y=H2 Dans un ballon, on dissout dans 120 cm3 de di- méthylformamide 13,45 g de diméthane sulfonate du 3a-acétoxy-20-hydroxyméthyl-21-hydroxy-5ss-prégnane de formule II. (Ce composé est obtenu selon la méthode décrite dans le brevet suisse No 411866).
On ajoute, sous agitation, une solution de 8 g de cyanure de potas sium et 0,13 g d'iodure de potassium dans 35 cm3 d'eau, chauffe pendant trois heures trente minutes à 100C sous atmosphère d'azote, refroidit, verse sur le mélange eau-glace, sépare le précipité qu'on essore, lave à l'eau et sèche. On: dissout le résidu dans 200 cm3 de chlorure de méthylène ; la solution méthylénique est lavée deux fois à l'eau, une fois avec une solution de chlorure de sodium, séchée sur sulfate de magnésium et distillée à sec.
On dissout le résidu cristallisé, fondant à ,...130C dans 40 cm3 de pyridine, ajoute 12 cm3 d'anhydride acétique, chauffe pendant une heure à 500C, refroidit, verse dans un mélange eau-glace, agite pendant trente minutes et extrait au chlorure de méthylène ; on lave la solution organique à l'eau, à l'acide chlorhydrique, à ('eau, avec une solution de bicarbonate de sodium et à l'eau, sèche la solution méthylénique sur sulfate de sodium, distille et ajoute 20 cm,' d'éther isopropylique à chaud, glace, essore le résidu, le lave à l'éther iso- propylique et le sèche ;
on obtient ainsi 8,74 g de 3c,(- acétoxy-21,22-dicyano-23,24bis-nor-(5(1)-cholane sous forme d'un produit cristallisé, fondant à 167-168¯,C (après recristallisation dans l'éthanol) [a]20 = -1-48,5o (c = 0,6%, chloroforme). Analyse: C26H3802N2 = 410,58 Calculé : C 76,06% H 9,33% O 7,79% N 6,82 % Trouvé : 76,l 9,3 7,8 6,9 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature.
Stade B : Préparation de l'acide 3a-hydroxy-21-carboxy- 24-nor-(5ss)-eholane-23-oïque de formule IV avec Y=H2 On chauffe à 900C 8,75 g de composé du formule III avec R=COCH3, Y=112, dans 165 cm3 d'éthylène-gly col, ajoute, sous agitation la solution formée de 56 cm3 de lessive de potasse; 56 cm3 d'eau et 17 cm3 d'éthanol, chauffe le mélange réactionnel pendant une nuit à 1050C, puis plusieurs .heures à 110-115C, refroidit, verse dans 900 cm3 de mélange eau-glace, épuise la phase aqueuse avec deux fois 650 cm3 d'éther, puis une fois 500 cm3 d'éther de pétrole; on extrait les phases organiques avec deux fois 200 cm3 d'eau ;
les solutions aqueuses réunies sont acidifiées par addition, sous agitation de 70 cm3 d'acide chlorhydrique concentré ; on abandonne pendant une nuit, filtre, essore le précipité, le lave à l'eau et le sèche sous vide. On purifie par empâtage au reflux avec l'acétate d'éthyle, refroidit, essore, lave à l'acétate d'éthyle et sèche ; on obtient ainsi 7,91 g d'acide 3α-hydroxy- 21-carboxy-24-nor-(5ss)-cholane-23-oïque sous forme d'un produit solide incolore fondant à 256-257 C. Le produit est utilisé tel quel pour le stade suivant.
Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Stade C : Préparation de l'acide 3a-forrnyloxy-21-car- boxy-24-nor-(5ss)-cholane-23-ôique On dissout à température ambiante, sous azote, 7,876 g de composé de formule IV avec Y=H2 dans 78 cm3 d'acide formique, verse la solution dans l'eau, sous agitation ; on filtre, lave le précipité jusqu'à. pH=7 et sèche sous vide ; on obtient ainsi 8,19 g d'acide 3a-formyloxy-21-carboxy-24-nor-(5ss)-cholane-23-oïque, sous forme d'un produit solide blanc, fondant vers 160C que l'on emploiera tel quel dans la suite de la synthèse.
Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Stade D : Préparation du 3a-hydroxy-21,22bis-(dimé- thylformamido)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane de formule V, avec R = H, RIII = RIv = -CH2 , Y =H2 On ajoute 2,5 g d'acide 3a-formyloxy-21-carboxy- 24-nor-(5ss)-cholane-23-oïque à 30 cm3 de benzène an hydre, évapore à sec, ajoute 30 cm' d'oxychlorure ce phosphore, puis 3 g de pentachlorure de phosphore, agite à température ambiante, la dissolution est totale après trente minutes, on chauffe à 70-750C pendant trois heures,
le dégagement gazeux est faible, on éva pore sous vide. Le résidu est dissous dans 25 cm3 de benzène, puis on ajoute 20 cm3 de diméthylamine, un maintient le mélange réactionnel à 0 C pendant une nuit, verse dans 250 cm3 de mélange eau-glace et extrait avec le mélange benzène-éther à parties égales ; on lave la solution éthérobenzénique avec une solution de bicar bonate de sodium, puis à l'eau, à l'eau salée, sèche sur sulfate de magnésium et évapore à sec.
On dissout le résidu dans 80 cm3 de méthanol et ajoute 10 cm3 de soude 5 N ; on agite une heure qua rante-cinq minutes, sous azote, à température ambiante, dilue avec 500 ce de mélange eau-glace et extrait avec un mélange benzène-éther à parties égales ; la phase organique est lavée à l'eau, à l'eau salée, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et évaporée à sec ;
on recristallise le résidu dans l'acétate d'éthyle et obtient 1,2 g de 3a-hydroxy-21,22bis-(diméthylformaniido)- 23,24bis-nor-(5ss)-cholane sous forme d'un produit cris tallisé, incolore, soluble dans l'alcool et le chloroforme, insoluble dans l'eau, fondant à 2120C [a]D = -I-370 1 (c = 1 %, éthanol).
Analyse: C28H4803N2 = 460,68 Calculé : C 73,00% H 10,50% N 6,08 % Trouvé : 73,0 10,4 6,0 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Stade E : Préparation du 3a-acétoxy-21,22bis-(diméthyl- aminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane de <I>formule 1 avec</I> R=COCH3, RIII=RIV=C112 Z=H2 On introduit une suspension de 2,7 g d'hydrure d'aluminium-lithium dans 45 cm3 de tétrahydrofurane, ajoute une solution de 1,8 g de composé de formule V avec R=H, RIIII=RIv= _CH3, Y=H2 dans 45 ce de tétrahydrofurane ;
on chauffe au reflux pendant vingt- sept heures sous agitation, refroidit, ajoute 40 cm3 de tétrahydrofurane à 75 % d'eau, 150 cm3 de soude 2N et 200 cm3 de mélange benzène-éther à parties égales, filtre ; le résidu est lavé plusieurs fois avec le mélange éthérobenzénique ; les phases organiques réunies sont lavées à l'eau salée, séchées sur sulfate de magnésium et évaporées à sec.
On dissout le résidu dans 11 cm3 de pyridine et ajoute 5,5 cm3 d'anhydride acétique ; on maintient le milieu réactionnel à température ambiante et sous azote pendant une nuit, puis verse dans 110 cm3 de mélange eau-glace, laisse reposer une heure, ajoute 35 ce de triéthylamine et extrait par trois fois au mélange ben zène-éther à parties égales.
Les. phases. organiques réu nies sont lavées à l'eau, avec une solution saturée de bicarbonate de sodium, à l'eau et à l'eau salée, séchées sur sulfate de magnésium et distillées à sec; on obtient 1,93 g de 3a-acétoxy-21,22bis-(diméthylaminométhyl)- 23,24bis-nor-(5ss)-cholane sous forme d'un produit amorphe.
Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Stade F : Préparation du dichlorhydrate du 3a-acétoxy 21,22bis-(diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor- (5ss)-cholane de formule 1, avec R=COCH3, RIII=RIV=CH3, Z=H2 On dissout 1,5 g du composé de formule I ci-dessus dans 20 cm3 d'acétone, sous azote, ajoute 7 cm3 d'une solution d'acide chlorhydrique dans l'éther, filtre le pré cipité que l'on essore, lave à l'éther et sèche ;
on obtient 1,673 g de produit, fondant vers 2300C. On recristallise par dissolution dans 200 cm3 d'acétone et 7 cm3 de solution chlorhydrique dans l'éther à 40 g %o, filtre, con centre à 30 cm3, filtre, ajoute à nouveau 5 cm3 de solu tion éthéro-chlorhydrique et 15 cm3 d'éther, filtre, essore, lave le résidu avec une solution acétone-éther à parties égales ; on redissout le résidu dans l'acétone, ajoute un volume égal d'éther, agite deux heures, filtre, essore le résidu, le lave avec la solution acétone-éther à parties égales, à l'éther et le sèche sous vide ;
on obtient ainsi 1,30 g de dichlorhydrate du 3α-acétoxy 21,22bis- (diméthylaminométhyl)-23,24bis-nor-(5ss)-cholane sous forme d'un produit solide blanc, soluble dans l'eau, l'alcool et le chloroforme, peu soluble dans l'acétone, insoluble dans le benzène et l'éther fondant vers. 230- 240()C, [a]20 = +39,5() l (c = 1 %, éthanol).
Analyse: C36H5602N2Cl2 = 547,68 Calculé: C 65,79 % H 10,3l o/o N5,11% C112,95% Trouvé: 65,6 10,2 5,0 12,7 Ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Ainsi qu'il a été indiqué plus haut, les nouveaux produits obtenus par le procédé de l'invention, et notam ment le 3a-acétoxy-21,22bis-(diméthylaminométhyl)- 23,24bis-nor-(5ss-cholane,
sont dotés de propriétés phar- macologiques intéressantes. Ils exercent notamment des actions vasodilatatrices des coronaires et spasmolytiques importantes.
Le 3a-acétoxy-21,22bis-(diméthylamino- méthyl)-23,24bis-nor-(5ss)cholane et ses sels thérapeuti- quement compatibles, en particulier, peuvent être utili sés pour le traitement de l'angine de poitrine et des coronarites, de l'asthme, des spasmes bronchiques, des spasmes artériels ou viscéraux -et des troubles circula- toires.
Le 3a-acétoxy-21,22bis-(diméthylaminométhyl)-23, 24bis-nor-(5ss)-cholane et ses sels thérapeutiquement compatibles sont utilisés par voie buccale, transcutanée ou par voie rectale et peuvent se présenter sous forme de solutions ou de suspensions injectables, conditionnées en ampoules, en flacons à prises multiples ;
de com- primés, de gouttes, de préparations pour aérosols et de suppositoires. Leur posologie utile s'échelonne entre 10 et 50 milligrammes par jour chez l'adulte en fonction de la voie d'administration. Etude pharmacologique du dichlorhydrate du 3a-acétoxy-21,22 bis-(diméthylaminométhyl)-23,24bis- nor-(5ss)-cholane <I>1.
Action sur le débit coronaire</I> L'étude de l'action du composé sur le débit coro naire a été effectuée sur le ceur isolé de lapin, préala blement intoxiqué par un sel de baryum, en utilisant une technique inspirée de Langendorff (Arch. gesam. Physiol., 1895, 61, 291).
Dans cette méthode, le ceur est suspendu par l'aorte à une canule et le système coronaire est perfusé, au moyen de cette canule, sous une pression constante de 5 cm de mercure, par du sérum de Locke, de pH = 7,2 à 7,3, chauffé à 37oC.
Le corps étudié est mis en solution dans l'eau. Cette solution est diluée au moyen du sérum de Locke, jusqu'à concentration convenable. Un robinet à 3 voies permet de passer instantanément du sérum de Locke normal au sérum contenant le produit à étudier.
Grâce à un dispositif adéquat, on enregistre le débit coronaire et, parallèlement, les contractions ventriculai res.
On a recherché systématiquement la concentration liminaire du composé qui augmente nettement le débit coronaire d'une telle préparation, et le tableau ci-joint fournit les, résultats obtenus avec ce corps, ainsi qu'avec la trinitrine et la papavérine, dans les mêmes conditions expérimentales.
On a essayé également pour ce composé une dose supérieure à la dose liminaire active pour apprécier une augmentation éventuelle de la durée ou de l'intensité d'action du produit.
EMI0006.0087
Concentration <SEP> Augmentation <SEP> du
<tb> liminaire <SEP> active <SEP> en <SEP> débit <SEP> coronaire <SEP> Durée <SEP> Effets <SEP> sur <SEP> les <SEP> contractions <SEP> ventriculaires
<tb> Corps <SEP> étudié <SEP> erg <SEP> par <SEP> cm3 <SEP> dans <SEP> en <SEP> o% <SEP> o <SEP> du <SEP> débit <SEP> d'action <SEP> en <SEP> Vo <SEP> de <SEP> la <SEP> valeur <SEP> initiale
<tb> le <SEP> liquide <SEP> de <SEP> initial <SEP> en
<tb> perfusion <SEP> Locke--BaCI2 <SEP> minutes <SEP> sur <SEP> l'amplitude <SEP> sur <SEP> la <SEP> fréquence
<tb>
Trinitrine <SEP> 1 <SEP> 57 <SEP> 13 <SEP> + <SEP> 15 <SEP> (fugace) <SEP> -15
<tb> Papavérine <SEP> 1 <SEP> 60 <SEP> >20 <SEP> -30 <SEP> <B><I>+15</I></B>
<tb> Dichlorhydrate <SEP> du <SEP> 0,001 <SEP> environ <SEP> 10 <SEP> 12 <SEP> à <SEP> 16 <SEP> Néant <SEP> Néant
<tb> 3a-acétoxy-21,22bis- <SEP> 0,01 <SEP> 10 <SEP> à <SEP> 30 <SEP> 10 <SEP> à <SEP> 20 <SEP> Néant <SEP> Néant
<tb> (diméthylaminométhyl)- <SEP> 0,1 <SEP> environ <SEP> 20 <SEP> 18 <SEP> à <SEP> 25 <SEP> Néant <SEP> Néant
<tb> 23,24bis-nor-(5(3)- <SEP> 1 <SEP> environ <SEP> 200 <SEP> 15 <SEP> Augmentation <SEP> Néant
<tb> cholane <SEP> manifeste La concentration liminaire active est de 0,001 à 0,01 y par cm3.
<I>2. Activité</I> spasmolytique <I>Action sur l'intestin isolé de cobaye</I> L'action spasmolytique du dichlorhydrate du 3a- acétoxy-21, 22bis-(diméthylaminométhyl)-23, 24 bis-nor- (5ss)-cholane a été étudiée vis-à-vis de trois principaux agents contracturants : le chlorure de baryum, l'acétyl choline et l'histamine.
On a opéré sur l'intestin isolé de cobaye, dans une cuve contenant 10 cm3 de liquide de Tyrode maintenu à 37 C et constamment oxygéné. On a recherché à quelle concentration le produit était capable d'inhiber l'action contracturante des trois agents spasmogènes.
Le corps étudié a été ajouté au bain sous un volume constant quelle que soit sa concentration.
Les résultats obtenus figurent sur le tableau ci- dessous
EMI0007.0012
Standords <SEP> Ihhibition
<tb> Baryum <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30 <SEP> %
<tb> Acètylcholine <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30
<tb> Histamine <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30 <SEP> % <I>3. Effet sur la circulation périphérique</I> L'action vasodilatatrice du dichlorhydrate du 3α- acétoxy-21, 22bis-(diméthylaminométhyl)-23, 24bis-nor- (5ss)-cholane a été étudiée sur la patte isolée de lapin, in situ, selon une technique inspirée de celle décrite par Binet et Burstein (Presse Médicale 1949, p. 445). L'ani mal est anesthésié à l'uréthane et son sang hépariné.
La patte est circulatairement isolée par ligature haute de l'artère fémorale. Le sang aspiré à la carotide est per- fusé à débit constant, par l'intermédiaire d'un appareil à transfusion de Jouvelet dans l'artère fémorale de la patte isolée. L'artère perfusée est, en outre, reliée à un manomètre de Ludwig qui permet l'enregistrement de la pression dans cette artère et renseigne donc sur la vasodilatation ou la vasoconstriction éventuelle.
Le composé étudié, utilisé en solution dans le sérum physiologique, a été administré par voie intraveineuse. La recherche de l'effet vasodilatateur périphérique a été pratiquée de deux manières a) soit sur un palier de constriction obtenu par injection intraveineuse de chlorure de baryum ; b) soit en augmentant brusquement le débit de l'ap pareil de Jouvelet, ce qui produit une augmentation de pression de la patte perfusée, cette augmentation se sta bilise en un palier qui permet d'apprécier l'effet vaso- dilatateur éventuel du produit étudié.
Pour le produit étudié, la dose liminaire active est égale par les deux méthodes utilisées à 2 mg/kg.
Process for the preparation of new diamino steroids The present invention relates to a process for the preparation of new diamino steroids of new structure, products characterized by the presence of a side chain attached to carbon 17 of the following symmetrical conformation
EMI0001.0001
The invention relates to a process for the preparation of new diamino-steroids, of general formula I in which R represents hydrogen or an acyl radical, RIII is hydrogen, an alkyl, aryl or aralkyl radical, RIv is a radical alkyl, aryl or aralkyl, RIII + RIv possibly together representing an optionally oxygenated cyclic structure, and Z = H2, or
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as well as the salts of these compounds.
The new compounds obtained by the process of the invention are physiologically active products and they are endowed with useful pharmacodynamic properties. More particularly, these compounds exert a coronarodilator and spasmolytic activity.
One of the presently preferred representatives of the new class of steroids obtained by the process of the invention is 3a-acetoxy-21,22-bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane. , whose corona-
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rodilators and spasmolytics are particularly intense and have the advantage of exerting a relatively long-lasting vasodilator activity.
Other interesting representatives of this class, also obtained by the process of the invention are, for example, 3 α -acetoxy-11ss-hydroxy 21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss ) -cholane and the corresponding 11-ketone derivative.
The process of the invention is summarized in the attached reaction scheme.
Said process is characterized in that an alkali cyanide is reacted with a derivative of pregnane, of formula II
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in which R represents hydrogen or an acyl radical, RI iodine or the mesyloxy group and Y = H2 or = O, subjects the resulting dicyano derivative, of formula III
EMI0002.0011
on alkaline hydrolysis, a dicarboxylic acid of formula IV is obtained
EMI0002.0013
then transforms, by the action of a chlorinating agent, the carboxyls of the compound of formula IV into acid dichlorides,
condenses the product obtained with an amine of formula
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in which RIII represents hydrogen, an alkyl, aryl or aralkyl radical, RIv an alkyl, aryl or aralkyl radical, RIII + RIV can together represent an optionally oxygenated cyclic structure, which provides a diamide of formula V
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which is subjected to the action of lithium aluminum hydride to obtain the corresponding diamine. The 3-alcohol function can be protected by esterification under the action of a functional derivative of a lower organic carboxylic acid, before proceeding with the chlorination.
The execution of the described process takes place preferably under the following conditions a) the reaction of the compound of formula II with an alkali cyanide is carried out in dimethylformamide; b) in the case where the compound of formula II is a dimesylate, RI = OSO2CH3, the reaction with alkali cyanide and in particular with potassium cyanide is carried out in the presence of a small amount of potassium iodide;
c) protecting the alcohol function of the compound of formula IV in the form of formate which is obtained by reaction of the free alcohol with formic acid, at room temperature; d) the carboxyls of the compound of formula IV are converted into acid chlorides by reaction with phosphorus pentachloride;
e) the esterification of the alcohol at 3 of the compound of formula I, with R = H, is effected by the anhydride of an organic lower carboxylic acid to pyridine; f) oxidation of the alcohol to 11 of the compound of formula I,
EMI0002.0045
is carried out using the sulfochromic mixture. The starting materials of the present process, the compounds of formula II can be prepared according to known processes.
Thus, for example, that starting from 3α-acetoxy-21,22-dimesyloxy-23; 24bis-nor- (5ss) -cholane, 3 α -acetoxy-21,22bis- ( dimethylaminomethyl) - 23,24bis-nor (5ss) -cholane, and that starting from 3a-acetotoxy-11-oxo-21,22-diiodo-23,24bis-nor- (5ss) -cholane, is prepared 3a-acetoxy-11ss-hydroxy-21,22bis- (dimethyl-aminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane, as well as by oxidation of the latter compound the corresponding 11-ketone derivative.
The acyl radical, which was mentioned above, preferably corresponds to the residue of an organic carboxylic acid containing from 1 to 18 carbon atoms.
Among these organic carboxylic acids corresponding to the substituent R of formula I, there may be mentioned those of saturated or unsaturated aliphatic or cycloaliphatic carboxylic acids or those of aromatic or heterocyclic carboxylic acids, for example formic, acetic or propionic acids. , butyric, isobutyric, valerian, isovaleric, trimethylacetic, caproic, ss-trimethylpropionic, oenanthic, caprylic, pelarginic, capric, undecyl, undecylenic, lauric, myristic, palmitic, stearic, oleic, cyclopentic
cyclopropyl-, cyclobutyl and cyclohexylcarbonic, cyclopropylmethylcarbonic acid, cyclobutylmethylcarbonic, cyclopentylethylcarbonic, cyclohexylethylcarbonic, cyclopentyl-, cy- clohexyl- or phenylacetic or propionic acid, benzoic acid such as phenoxy-phenoxy acids acetic, p-chlorophenoxyacetic, 2,4-dichlorophenoxyacetic, 4-tert-butyl-phenoxyacetic, 3-phenoxypropionic, 4-phenoxybutyric, furan-2-carboxylic, 5-tert-butylfuran 2-carboxylic, 5-bromo -carboxylic furan 2,
nicotinic acids, (3-keto-carboxylic acids, for example acetylacetic, propionylaeetic, butyrylacetic acids.
The following examples illustrate the invention without however limiting it.
<I> Example 1 </I> Preparation of 3 α -acetoxy-11ss-hydroxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane), <I> compound of formula 1 with < / I>
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3a-acetoxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula 111 with R = COCH3, Y = O a) from the diiodinated derivative 6.264 is suspended g of 3a-acetoxy-11- oxo-21,22-diiodo-23,24bis-nor- (5ss) -cholane (compound of formula II with R = COCH3, RI = I, Y = O) in 60 mg of dimethylformamide , 3.9 g of potassium cyanide are added, heated at 60oC for two hours under a nitrogen atmosphere and poured into an ice-water mixture, the mixture is filtered off,
washed with water and evaporated to dryness under vacuum. The residue is dissolved in 25 cm3 of pyridine, 12.5 cm3 of acetic anhydride is added and heated for one hour at 50 ° C., extracted with an organic solvent and the residue is crystallized in methanol. 1.88 g of 3a-acetoxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5ss) - cholane F. 1660C, [a] 20 = + 65.50 (c = 0 , 75 10/0, chloro form) or a yield of 61%.
The product is in the form of colorless crystals soluble in benzene and chloroform. Analysis: C26H3603N2 = 424.57 Calculated: C 73.54% H 8.55% O 11.31% N 6.600 / 0 Found: 73.5 8.7 10.9 6.7 The product is not described in Literature.
b) from dimesylate 15.19 g of 3a-acetoxy-11-oxo-21,22-m-mesyloxy-23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula II with R = COCH3, are dissolved. , RI = 'OSO2CH3, Y = O, in 135 cm3 of dimethylformamide, and potassium cyanide is added with stirring. . . . . . 8.8 g of potassium iodide. . . . . . 0.135 g water. . . . . . . . . . . 45 cm3 is heated for three hours at 100 ° C. under a nitrogen atmosphere, poured onto the water-ice mixture, filtered off, washed with water and dried.
The residue is dissolved in 70 cm3 of pyridine, added 35 em3 of acetic anhydride and heated for one hour at 500C. Poured onto the water-ice mixture, extracted with methylene chloride, washed successively with water, hydrochloric acid, water, sodium bicarbonate and water. It is dried and evaporated to dryness under vacuum.
This gives 8.932 g (yield 78 0/0) of 3a-acetotoxy-11-oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5ss-cholane (F. = 1650C) identical to the product obtained above. above.
3a-hydroxy-I1-axo-21-carboxy-24-nor- (5ss) - cholan-23-oic acid, compound of formula IV with Y = O Heated to 125-130oC, 8.5 g of 3a-acetoxy -11- oxo-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula III with R = COCH3, Y = O, in 150 cm3 of ethylene glycol. 53 cm3 of potassium hydroxide solution, 53 cm3 of distilled water, 16 cm3 of ethanol are added and the mixture is heated overnight at 105 ° C. and then several hours at 115 ° C. Poured onto the ice-water mixture, washed with ether, acidified by adding 65 cm of concentrated hydrochloric acid and left overnight. It is filtered off, washed with water and dried.
7.82 g of 3a-hydroxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor- (5ss) -cholane-23-oic acid (F.190-1920C) are obtained, yield: 93%.
Crystals in the form of needles soluble in alcohol, poorly soluble in ether.
This compound is not described in the literature. 3a-Formyloxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor- (5ss-cholan-23-oic acid 7.3 g of 3a-hydroxy-11-oxo-21-carboxy-24 acid are dissolved at room temperature -nor- (5ss) -aholane-23- oique, compound of formula IV with Y = O, in 51 cm3 of formic acid, maintains the solution under nitrogen for two hours then poured into a water-ice mixture.
The precipitate obtained is extracted with methylene chloride, the solution washed with water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under vacuum. 7.51 g of 3a-formyloxy-11-oxo-21-carboxy-24-nor- (5 (3) -cholane-23-oic acid is obtained, which will be used as it is in the remainder of the synthesis. This compound is not described in the literature.
3a-hydroxy-11-oxo-21,22 bis- (dimethylformamido) - 23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula V, with R = H, RIII = RIv = CH3, Y = O It is dissolved 8.84 g of 3a-formyloxy-11-oxo-21- carboxy-24-nor- (5ss) -cholane-23-oic acid, aged, 50 cm3 of dry chloroform and introduced 10.7 g of pentachloride of phosphorus suspended in 60 cm3 of chloroform.
The reaction is rapid, there is a significant evolution of gas and an increase in temperature. The solution is maintained at 400C until there is no gas evolution and evaporated to dryness under vacuum. The residue is dissolved in 100 cm3 of benzene and then introduced 36 cm3 of dimethylamine cooled to 0 C. The reaction mixture is maintained overnight at 0 C, then poured into a water-ice mixture. The benzene solution is washed successively with a solution of sodium bicarbonate, with water and with brine, dried and evaporated to dryness.
The residue is dissolved in 80 cm3 of methanol and then 20 cm3 of a normal sodium hydroxide solution is added and the mixture gives under nitrogen at room temperature for one hour. Diluted with 500 cm3 of water and extracted with a 1: 1 benzene-ether mixture, washed with water and then with brine, dried and evaporated to dryness. The residue is recrystallized from ethyl acetate and 4.79 g of 3a-hydroxy-11 oxo-21,22-bis- (dimethylformamido) -23,24bis-nor- (5ss) - cholane is obtained, yield: 51%.
This compound is in the form of colorless crystals soluble in chloroform and in alcohols, insoluble in water, F. = 190-1910C, [α] D = -I-580 (c = 0.9%, ethanol).
Analysis: C28H4604N2 = 474.66 Calculated: C 70.84% H 9.77% N 5.90% O 13.48% Found: 70.7 9.5 5.8 13.4 This compound is not described in the litterature. 3a-acetoxy-11ss-hydroxy-21,22bis- (dimethylamino-methyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane, composed of <I> formula I with </I>
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To a suspension of 7.5 g of lithium aluminum hydride in 125 cm3 of tetrahydrofuran is added a solution of 5 g of 3a-hydroxy-11-oxo-21,22-bis- (dimethylformamido) - 23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula V with R = H, RIII = RIv = CH3 Y = O, dissolved in 125 cm3 of tetrahydrofuran.
The mixture is refluxed for twenty-two hours, cooled, added 40 cm3 of tetrahydrofuran at 75% water, 250 cm3 of 2N sodium hydroxide and 300 cores of a 1: 1 benzene-ether mixture. The suspension thus obtained is filtered, washed. organic phase in salted water, dries and evaporates to dryness.
To the residue, 26 cm3 of pyridine and 13 cm3 of acetic anhydride are added. The reaction medium is maintained at room temperature and under nitrogen for three hours, then poured into. a water-ice mixture. After standing for thirty minutes, the mixture is basified by adding 75 cm3 of triethylamine and extracted with 1: 1 benzene-ether mixture. The extracts are washed with water, sodium bicarbonate and solated water, dried and evaporated at dry. The residue crystallizes from isopropyl ether. 3a-acetoxy-11ss-hydroxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane is obtained in a yield of 76%, mp = 154 C, [a] = + h590, (c = 1%, ethanol).
This product is in the form of colorless crystals which are soluble in chloroform and alcohols and poorly soluble in isopropyl ether.
Analysis: C30H54O3N2 = 490.75 Calculated: C 73.42% H 11.10% N 5.71% Found: 73.2 11.1 5.8 This compound is not described in the literature. Preparation of 3a-acetoxy-11-oxo-21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane. We. dissolved with stirring 1.96 g of 3a-acetoxy-11ss hydroxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane, compound of formula I with R = COCH3 and
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obtained in 30 cm3 of acetic acid at 1% water.
Slowly added 1.4 cm3 of a chromium sulfo solution prepared from 135 g of chromic anhydride 115 cm3 of concentrated sulfuric acid and 50 cm3 of water, and stirring continued at room temperature for one hour.
After addition of 2 cm3 of methanol and 65 cm3 of water, neutralized with 130 cm3 of concentrated ammonia. Ice, added 10 cm3 of triethylamine and extracted with a benzene-ether mixture. The extracts are washed with pure water, dried and distilled to dryness. 2.88 g of product are obtained which is in the form of a colorless oil.
Dihydrochloride: The product obtained is dissolved in 20 cm3 of acetone.
Filtered, then 4 cm3 of an ethereal solution of dry hydrochloric acid 2.6N is added. Diluted with 120 cm3 of anhydrous ether, left to stand for half a day, drained, washed successively with acetone-ether then with anhydrous and dry ether.
2.057 g (ie a yield of 91%) of α-3a-acetoxy-11-oxo-21.22bis- (dimethyl-aminomethyl) -23.24bis-nor- (5ss) -cholane hydrochloride are obtained, F. n, 2250-260oC, [a] D = -i-470 (c = 10/0, ethanol).
The product is soluble in water, alcohol and chloroform.
Analysis: C30H5403N2C12 = 561.66 Calculated: C 64.15% H 9.69% N 4.99% Cl 12.63% Found: 64.2 9.9 4.7 12.3 This compound is not described in the litterature. <I> Example 2 </I> Preparation of 3a-acetoxy-21,22-bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane, <I> compound of formula 1 with </I> R = COCH3, RIII = RIv = CH3 and Z = H2 <I> Stage A:
Preparation of </I> 3a-acetoxy-21,22-dicyano- 23,24bis-nor- (5 (3) -cholane <I> of formula 111 with </I> R = COCH3, Y = H2 In a flask 13.45 g of 3a-acetoxy-20-hydroxymethyl-21-hydroxy-5ss-pregnane dimethanesulphonate of formula II are dissolved in 120 cm3 of dimethylformamide. (This compound is obtained according to the method described in Swiss patent No 411866).
Was added, with stirring, a solution of 8 g of potassium cyanide and 0.13 g of potassium iodide in 35 cm3 of water, heated for three hours and thirty minutes at 100C under nitrogen atmosphere, cooled, poured on the water-ice mixture, separates the precipitate which is filtered off, washed with water and dried. The residue is: dissolved in 200 cm3 of methylene chloride; the methylene solution is washed twice with water, once with sodium chloride solution, dried over magnesium sulphate and distilled to dryness.
The crystalline residue is dissolved, melting at 130 ° C. in 40 cm3 of pyridine, 12 cm3 of acetic anhydride is added, heated for one hour at 500 ° C., cooled, poured into a water-ice mixture, stirred for thirty minutes and extracted. methylene chloride; the organic solution is washed with water, with hydrochloric acid, with water, with a solution of sodium bicarbonate and with water, the methylene solution is dried over sodium sulfate, distilled and added 20 cm, ' hot isopropyl ether with ice, wringing the residue, washing it with isopropyl ether and drying it;
8.74 g of 3c, (- acetoxy-21,22-dicyano-23,24bis-nor- (5 (1) -cholane are thus obtained in the form of a crystalline product, melting point 167-168¯, C ( after recrystallization from ethanol) [a] 20 = -1-48.5o (c = 0.6%, chloroform) Analysis: C26H3802N2 = 410.58 Calculated: C 76.06% H 9.33% O 7 , 79% N 6.82% Found: 76.1 9.3 7.8 6.9 This compound is not described in the literature.
Stage B: Preparation of 3a-hydroxy-21-carboxy-24-nor- (5ss) -eholan-23-oic acid of formula IV with Y = H2 8.75 g of compound of formula III are heated at 900C. R = COCH3, Y = 112, in 165 cm3 of ethylene-gly col, add, with stirring, the solution formed from 56 cm3 of potassium hydroxide solution; 56 cm3 of water and 17 cm3 of ethanol, heat the reaction mixture overnight at 1050C, then several hours at 110-115C, cool, pour into 900 cm3 of water-ice mixture, exhaust the aqueous phase with twice 650 cm3 of ether, then once 500 cm3 of petroleum ether; the organic phases are extracted with twice 200 cm 3 of water;
the combined aqueous solutions are acidified by adding, with stirring, 70 cm3 of concentrated hydrochloric acid; it is left overnight, filtered, the precipitate is filtered off, washed with water and dried under vacuum. Purified by mashing at reflux with ethyl acetate, cooled, filtered off, washed with ethyl acetate and dried; 7.91 g of 3 α -hydroxy-21-carboxy-24-nor- (5ss) -cholane-23-oic acid are thus obtained in the form of a colorless solid product melting at 256-257 C. The product is used as is for the next stage.
This compound is not described in the literature. Stage C: Preparation of 3a-formyloxy-21-carboxyl-24-nor- (5ss) -cholane-23-ôic acid 7.876 g of compound of formula IV are dissolved at room temperature under nitrogen with Y = H2 in 78 cm3 of formic acid, pour the solution into the water, with stirring; filtered, washing the precipitate until. pH = 7 and dried under vacuum; 8.19 g of 3a-formyloxy-21-carboxy-24-nor- (5ss) -cholane-23-oic acid are thus obtained, in the form of a white solid product, melting at about 160C which will be used as which in the rest of the synthesis.
This compound is not described in the literature. Stage D: Preparation of 3a-hydroxy-21,22bis- (dimethylformamido) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane of formula V, with R = H, RIII = RIv = -CH2, Y = H2 On add 2.5 g of 3a-formyloxy-21-carboxy- 24-nor- (5ss) -cholane-23-oic acid to 30 cm3 of anhydrous benzene, evaporated to dryness, add 30 cm 'of oxychloride to this phosphorus , then 3 g of phosphorus pentachloride, stirred at room temperature, dissolution is complete after thirty minutes, heated at 70-750C for three hours,
the gas evolution is low, the pore is evaporated under vacuum. The residue is dissolved in 25 cm3 of benzene, then 20 cm3 of dimethylamine is added, one maintains the reaction mixture at 0 C overnight, poured into 250 cm3 of water-ice mixture and extracted with the benzene-ether mixture in equal parts ; the etherobenzene solution is washed with a sodium bicar bonate solution, then with water and brine, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness.
The residue is dissolved in 80 cm3 of methanol and 10 cm3 of 5N sodium hydroxide added; stirred for one hour forty-five minutes, under nitrogen, at room temperature, diluted with 500 cc of water-ice mixture and extracted with a benzene-ether mixture in equal parts; the organic phase is washed with water, with salt water, dried over magnesium sulphate, filtered and evaporated to dryness;
the residue is recrystallized from ethyl acetate and 1.2 g of 3a-hydroxy-21,22bis- (dimethylformaniido) - 23,24bis-nor- (5ss) -cholane is obtained in the form of a crystallized product, colorless, soluble in alcohol and chloroform, insoluble in water, melting at 2120C [a] D = -I-370 1 (c = 1%, ethanol).
Analysis: C28H4803N2 = 460.68 Calculated: C 73.00% H 10.50% N 6.08% Found: 73.0 10.4 6.0 This compound is not described in the literature. Stage E: Preparation of 3a-acetoxy-21,22bis- (dimethyl-aminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane of <I> formula 1 with </I> R = COCH3, RIII = RIV = C112 Z = H2 A suspension of 2.7 g of lithium aluminum hydride in 45 cm3 of tetrahydrofuran is introduced, a solution of 1.8 g of compound of formula V with R = H, RIIII = RIv = _CH3, is added, Y = H2 in 45 cc of tetrahydrofuran;
refluxed for twenty-seven hours with stirring, cooled, added 40 cm3 of tetrahydrofuran at 75% water, 150 cm3 of 2N sodium hydroxide and 200 cm3 of benzene-ether mixture in equal parts, filter; the residue is washed several times with the etherobenzene mixture; the combined organic phases are washed with brine, dried over magnesium sulphate and evaporated to dryness.
The residue is dissolved in 11 cm3 of pyridine and 5.5 cm3 of acetic anhydride is added; the reaction medium is maintained at ambient temperature and under nitrogen overnight, then poured into 110 cm3 of water-ice mixture, left to stand for one hour, added 35 cc of triethylamine and extracted three times with ben zene-ether mixture in equal parts .
The. phases. combined organics are washed with water, with a saturated solution of sodium bicarbonate, with water and with brine, dried over magnesium sulphate and distilled to dryness; 1.93 g of 3a-acetoxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) - 23,24bis-nor- (5ss) -cholane are obtained in the form of an amorphous product.
This compound is not described in the literature. Stage F: Preparation of 3a-acetoxy 21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane dihydrochloride of formula 1, with R = COCH3, RIII = RIV = CH3, Z = H2 One dissolves 1 , 5 g of the compound of formula I above in 20 cm3 of acetone, under nitrogen, add 7 cm3 of a solution of hydrochloric acid in ether, filter the precipitate which is drained, washed with l ether and dry;
1.673 g of product are obtained, melting at about 2300C. Recrystallized by dissolving in 200 cm3 of acetone and 7 cm3 of hydrochloric solution in ether at 40 g% o, filter, con center at 30 cm3, filter, again add 5 cm3 of ethero-hydrochloric solution and 15 cm3 ether, filter, drain, wash the residue with an acetone-ether solution in equal parts; the residue is dissolved in acetone, an equal volume of ether is added, stirred for two hours, filtered, the residue is filtered off, washed with an acetone-ether solution in equal parts, with ether and dried under vacuum;
1.30 g of 3 α -acetoxy 21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane dihydrochloride is thus obtained in the form of a white solid product, soluble in water, the alcohol and chloroform, sparingly soluble in acetone, insoluble in benzene and ether melting worms. 230-240 () C, [a] 20 = +39.5 () 1 (c = 1%, ethanol).
Analysis: C36H5602N2Cl2 = 547.68 Calculated: C 65.79% H 10.3l o / o N5.11% C112.95% Found: 65.6 10.2 5.0 12.7 This compound is not described in the litterature. As indicated above, the new products obtained by the process of the invention, and in particular 3a-acetoxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) - 23,24bis-nor- (5ss-cholane,
are endowed with interesting pharmacological properties. In particular, they exert significant coronary and spasmolytic vasodilator actions.
3a-Acetoxy-21,22bis- (dimethylamino-methyl) -23,24bis-nor- (5ss) cholane and its therapeutically compatible salts, in particular, can be used for the treatment of angina pectoris and coronary heart disease, asthma, bronchial spasms, arterial or visceral spasms - and circulatory disorders.
3a-Acetoxy-21,22bis- (dimethylaminomethyl) -23, 24bis-nor- (5ss) -cholane and its therapeutically compatible salts are used by the buccal, transcutaneous or rectal route and can be presented in the form of solutions or of injectable suspensions, packaged in ampoules, in multi-dose vials;
tablets, drops, aerosol preparations and suppositories. Their useful dosage ranges between 10 and 50 milligrams per day in adults depending on the route of administration. Pharmacological study of 3a-acetoxy-21,22 bis- (dimethylaminomethyl) -23,24bis-nor- (5ss) -cholane dihydrochloride <I> 1.
Action on coronary flow </I> The study of the action of the compound on coronary flow was carried out on the isolated rabbit heart, previously intoxicated by a barium salt, using a technique inspired by Langendorff ( Arch. Gesam. Physiol., 1895, 61, 291).
In this method, the heart is suspended by the aorta from a cannula and the coronary system is perfused, by means of this cannula, under a constant pressure of 5 cm of mercury, with Locke's serum, pH = 7.2 at 7.3, heated to 37oC.
The studied body is dissolved in water. This solution is diluted with Locke's serum, to the appropriate concentration. A 3-way stopcock makes it possible to switch instantly from normal Locke's serum to the serum containing the product to be studied.
With a suitable device, the coronary flow is recorded and, at the same time, the ventricular contractions.
We systematically sought the initial concentration of the compound which markedly increases the coronary flow of such a preparation, and the attached table provides the results obtained with this body, as well as with trinitrin and papaverine, under the same conditions. experimental.
A dose greater than the initial active dose was also tested for this compound in order to assess a possible increase in the duration or intensity of action of the product.
EMI0006.0087
Concentration <SEP> Increase <SEP> in
<tb> introductory <SEP> activates <SEP> in <SEP> coronary <SEP> flow <SEP> Duration <SEP> Effects <SEP> on <SEP> the <SEP> contractions <SEP> ventricular
<tb> Body <SEP> studied <SEP> erg <SEP> by <SEP> cm3 <SEP> in <SEP> in <SEP> o% <SEP> o <SEP> of <SEP> flow <SEP> d ' action <SEP> in <SEP> Vo <SEP> of <SEP> the <SEP> initial <SEP> value
<tb> the <SEP> liquid <SEP> from <SEP> initial <SEP> in
<tb> perfusion <SEP> Locke - BaCI2 <SEP> minutes <SEP> on <SEP> the amplitude <SEP> on <SEP> the <SEP> frequency
<tb>
Trinitrine <SEP> 1 <SEP> 57 <SEP> 13 <SEP> + <SEP> 15 <SEP> (fleeting) <SEP> -15
<tb> Papaverine <SEP> 1 <SEP> 60 <SEP>> 20 <SEP> -30 <SEP> <B><I>+15</I> </B>
<tb> Dihydrochloride <SEP> of <SEP> 0.001 <SEP> approximately <SEP> 10 <SEP> 12 <SEP> to <SEP> 16 <SEP> None <SEP> None
<tb> 3a-acetoxy-21,22bis- <SEP> 0,01 <SEP> 10 <SEP> to <SEP> 30 <SEP> 10 <SEP> to <SEP> 20 <SEP> None <SEP> None
<tb> (dimethylaminomethyl) - <SEP> 0.1 <SEP> approximately <SEP> 20 <SEP> 18 <SEP> to <SEP> 25 <SEP> None <SEP> None
<tb> 23,24bis-nor- (5 (3) - <SEP> 1 <SEP> approximately <SEP> 200 <SEP> 15 <SEP> Increase <SEP> None
<tb> cholane <SEP> manifest The threshold active concentration is 0.001 to 0.01 y per cm3.
<I> 2. Activity </I> spasmolytic <I> Action on isolated guinea pig intestine </I> The spasmolytic action of 3a-acetoxy-21, 22bis- (dimethylaminomethyl) -23, 24 bis-nor- (5ss) dihydrochloride -cholane has been studied against three main contracting agents: barium chloride, acetyl choline and histamine.
The operation was carried out on the isolated guinea pig intestine, in a tank containing 10 cm3 of Tyrode's liquid maintained at 37 ° C. and constantly oxygenated. We investigated at what concentration the product was capable of inhibiting the contracting action of the three spasmogenic agents.
The studied body was added to the bath in a constant volume regardless of its concentration.
The results obtained are shown in the table below
EMI0007.0012
Standords <SEP> Ihhibition
<tb> Barium <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30 <SEP>%
<tb> Acetylcholine <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30
<tb> Histamine <SEP> 1 <SEP> γ <SEP> 30 <SEP>% <I> 3. Effect on peripheral circulation </I> The vasodilatory action of 3 α - acetoxy-21, 22bis- (dimethylaminomethyl) -23, 24bis-nor- (5ss) -cholane dihydrochloride was studied on isolated rabbit paws, in situ, using a technique inspired by that described by Binet and Burstein (Presse Médicale 1949, p. 445). The ani mal is anesthetized with urethane and his blood heparinized.
The leg is circularly isolated by upper ligation of the femoral artery. The blood drawn from the carotid artery is infused at a constant rate, through a Jouvelet transfusion machine into the femoral artery of the isolated leg. The perfused artery is, moreover, connected to a Ludwig manometer which allows the recording of the pressure in this artery and therefore provides information on any vasodilation or vasoconstriction.
The test compound, used in solution in physiological saline, was administered intravenously. The search for the peripheral vasodilator effect was carried out in two ways: a) either on a constriction bearing obtained by intravenous injection of barium chloride; b) either by suddenly increasing the flow rate of the Jouvelet apparatus, which produces an increase in the pressure of the perfused paw, this increase becomes stabilized in a level which makes it possible to assess the possible vasodilating effect of the product studied.
For the product studied, the initial active dose is equal by the two methods used to 2 mg / kg.