CA1038374A - Derives de la cephalosporine, leur preparation et les compositions qui les contiennent - Google Patents

Abstract

Dérivés de la céphalosporine de formule générale (I) dans laquelle A représente un atome d'oxygène ou de soufre, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical acétoxy et R2 représente un radical carboxy ou un radical de formule générale(II) dans laquelle R3 est hydrogène ou alcoyle et R4 est alcoyle ou cyclohexyle, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides et éventuellement leurs sels métalliques ou leurs sels d'addition avec les bases azotées autres que l'ammoniaque, leur préparation et les compositions qui les contiennent. Ces compositions sont particulièrement utiles dans le traitement des infections bactériennes. (I) (II)

Description

1038~7~
La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la c~phalosporine de fo~mule générale:

CH _ CO~

~ 2 ~ ~ ~ CH21~1 (I) leurs sels, leur préparation et les compositions médicinales qui les contiennent.
Dans la formule générale (I), A représente un atome d~oxygane ou de soufre, Rl représente un atome d'hydrogene ou un radical acétoxy, et R2 représente un radical carboxy ou un radical de formule générale:

- ~ - O - CH - O - I - R4 (II) dans laquelle R3 représente un atome d'hydrog~ne ou un radical alcoyle contenant 1 a 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifi~e et R4 représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée ou cyclohexyle, le radical - fH - - F - R4 (III) . R3 O

étant un radical facilement éliminable par voie enzymatique.
Il est entendu que les produits de formule générale (I) dérivent des formes D, L et DL des acides de formule générale: ~:

. ' A CH _ COOH (IV) . - .
~ S ~ 2 -1- ' ., - . - .

10383~74 dans laquelle A est défini comme précédemment, et que les formes diasteréo-isomères ainsi résultantes des produits de formule générale (I) et leurs mélanges entrent dans le cadre de la présente invention.
Selon l'invention les nouveaux produits de formule génerale (I) peuvent être obtenus par action d'un acide de formule genérale (IV) dans laquelle A est défini comme précédemment ledit acide étant sous forme rac~mique ou optiquement active, et sa fonction amine étant préalable-ment prot~gée, ou d'un dérivé réactif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale:

H2N~/ S~ ( V) 0 - ~ N ~ 2 dans laquelle Rl et R2 sont définis comme pr~céd0mment.
a) Lorsque l'on utilise l'acide de formule générale ~IV), la protection du groupe amino s'effectue par toute méthode connue en soi pour le blocage d'une fonction amine sans toucher au reste de la molécule. Il est n~cessaire de protéger la fonction amine par un groupement facilement éliminable~ Il est particulièrement avantageux d'utiliser le groupement tertiobutyl-oxycarbonyle qui peut ~tre introduit par action de l'azidoformiate de tertiobutyle, du chloroformlate de tertiobutyle ou d'un carbonate mixte de tertiobutyle et p.nitrophenyle sur l'acide de formule générale (IV~.
Lorsque R2 représente un radical carboxy, on effectue généralement la condensation de l'acide de formule g~nérale (IV) dont la fonction amine est prot~gée sur le dérivé de la céphalosporine de formule générale (V) dont la fonction acide a été préalablement protégée par un groupe-ment facilement éliminable t~l que le radical tertiobutyle . ,~ t ~ ~
., 10383~7~
ou le radical trichloro-2,2,2 éthyle.
Généralement on effectue la condensation dans un so],vant organique tel que le diméthylformamide ou le chloro~orme, en présence d'un agent de condensation tel que le dicyclohexylcarbod~mide à une température comprise entre 0 et 40C puis élimine les groupements protecteurs des fonctions amine et acide.
Selon la nature des groupements protecteurs, cette élimination peut être effectuée en une seule étape ou en deux étapes. Lorsque la réaction s'effectue en deux étapes il est préférable d'éliminer d'abord le groupement protecteur de la fonction acide puis celui de la fonction amine.
Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine représente le radical tertiobutyloxycarbonyle et celui de la fonction acide représente le radical tertio-butyle, leur remplacement par un atome d'h~drog~ne s'effectue en une seule phase par traitement en milieu acide. De préférence, on utilise l'acide trifluoracétique en opérant à une température voisine de 20C. Dans ces conditions, le produit de formule générale (I) est obtenu sous forme de trifluoracétate dont on peut libérer la ,, fonction amine par toute méthode connue en soi pour l'obtention d'une amine ~ partir de l'un de ses sels sans toucher au reste de la molécule.
Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine représente le radical tertiobutyloxycarbonyle et celui de la fonction acide représente le radical trichloro-, 2,2,2 éthyle, on remplace tout d'abord ce dernier par un atome d'hydrogene par traitement par le zinc dans l'acide ~, acétique, puis on remplace le radical tertiobutyloxycarbonyle par un atome d'hydrogene par traitement en milieu acide, de préférence par action de l'acide trifluoracétique.

~., 10;~83~74 Dans ces conditions le produit de ~ormule générale (I) est obtenu sous forme de trifluoroacétate et l'amine libre peut etre libérée de son sel dans les conditions décrites précédemment.
b) Lorsque dans la formule générale (V) R2 représente un radical de formule générale (II3 tel que défini précédemment, on effectue généralement la conden- ;
sation de l'acide de formule générale (IV) sur le dérivé
de formule générale (V) dans un solvant organique tel que le diméthylformamide ou le chloroforme, en présence d'un agent de condensation tel que le dicyclohexylcarbodiimide, a une temp~rature comprise entre 0 et 40C, puis on ~limine le groupement protecteur de la fonction amine dans les conditions décrites ci-dessus.
c)Lorsque l'on utilise l'acide de ~ormule gén~rale (IV) sous forme d'un d~rivé réactif, il est particuli~rement avantageux de mettre en oeuvre le chlorure d'acide. Dans ces conditions, on fait réagir le chlorhydra-te du chlorure de l'acide de formule générale (IV) sur un derivé de la céphalosporine de formule genérale (V) dans laquelle R2 est défini comme précédemment. Dans le cas o~
R2 represente un radical carboxy il n'est pas nécessaire de protéger la fonction acide.
Généralement, on effectue la condensation dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel qu'une base organique azotée comme la pyridine ou la triéthylamine, ou dans un milieu hydro-organique en présence d'un agent alcalin de condensation tel que le bicarbonate de sodium, a une température comprise entre - 20 et +20C.

103~374 L ' acide de formule generale ( IV) peut être obtenu par saponification de l'ester correspondant de formule générale:
A

CH_ CGOR5 (VI) ~ J NH

dans laquelle A représente un atome d'oxyyène ou de soufre et R5 repr~sente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone, en opérant dans les conditions habituelles de saponification d'un ester en l'acide correspondant.
Généralement, on traite l'ester a saponifier par un hydroxydé alcalin en milieu hydro-alcooliquè, une temperature comprise entre 0 et 50C. De préférence on utilise l'ester méthylique ou éthylique et effectue la saponification en milieu hydro-m~thanolique une température voisine de 5C.
L'ester de formule générale (VI) peut être obtenu par réductiond'une oxime de formule générale:
A (VII) , :, .

dans laquelle A et R5 sont définis-comme précédemment.
Généralement, on utilise le zinc dans un milieu hydroorganique tel qu'un mélange méthanol-acide formique-eau à une température comprise entre O et 25C.
~'oxime de formule générale (VII) peut être obtenue par action d'un produit de formule generale:
HA - CH2CH2 - SH (VIII) ` 10383~
dans laquelle A est défini comme précédemment, sur un ester de formule générale:
X - CH2CO - C - COOR5 (IX~
~ - OH

dans laquel]e R5 est défini comme précedemment et X
represente un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore, en passant intermediairement par un produit de formule générale:

CH2CH2 - S - CH2 - CO - C - COOR (X) N - OH

dans laquelle A et ~ sont définis comme précédemment.
La condensation du produit de formule générale (VIII) sur l'ester de formule générale (IX) s'effectue g~néralement dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel que la triéthylamine et en opérant ~ une température voisine de 20C.
La cyclisation de l'ester de formule générale ~X) en oxime de formule générale (VII) s'effectue g~né-ralement par chauffage dans un solvant organique tel que le benz~ne ou le toluène en présence d'un catalyseur tel que l'acide p.toluenesulfonique et en éliminant l'eau au fur et ~ mesure de sa formation.
Llester de formule générale (IX) peut être obtenu selon la méthode décrite par M. Hatanaka et T. Ishimaru, J. Med. Chem., 16, 978, (1973).
Les formes optiquement actives de l'acide de formule générale (IV) peuvent être obtenues soit par application de méthodes chimiques, soit par voie enzymatique.
Par exemple, on peut obtenir la forme D de B

l'acide de formule génerale (IV) en traitant la forme racemique par l'acide (~) camphosulfonique dans un solvant organique tel qu'un alcool comme le méthanol ou l'éthanol, en purifiant le sel obtenu de forme D par recrista~isation et en liberant l'acide libre ~ partir de ce sel.
Par.exemple, la forme L de l'acide de formule générale (IV) peut etre obtenue par désacétylation enzymatique sélective d'un acide de formule générale:

A (XI) CH _ COOH
J NH _ COCH3 " ,,.

, dans laquelle A est défini comme précédemment.
Le traitement de la forme rac~mique de l'acide de formule générale (XI) par une amino-acylase conduit la forme L de l'acide de formule générale (IV) et a la forme D de l'acide de formule générale (XI). :.
De préférence la désacetylation sélective est effectuée par une.amino-acylase d'Aspergillus en opérant à un pH voisin de 8 et a une température voisine de 37C. ..
. L'acide de formule générale (XI) peut 8tre obtenu selon l'un des procédés suivants: :
a) par acétylation de l'acide de formule générale (IV) au moyen par exemple de chlorure d'acétyle ou d'anhydride acétique, b) par saponification ou hydrolyse de l'ester correspondant. .
.De préférence on utilise l'ester méthylique ou éthylique.
L'ester méthylique ou éthylique de l'acide de formule générale (XI) peut etre obtenu par action d'un produit ~e formule générale (VIII) sur un ester de ~ormule générale: 7 ~ -., .. ~ . , ... .

Y - CH2 - co - fH -- COOR6 (XII) dans laquelle Y représente un atome d'halogène, de préférence un atome de brome et R6 représente le radical méthyle ou éthyle, en passant intermediarement par un produit de formule générale:
HA - CH2CH2 - S - CH2 - Co - CH - COOR6 (XIII) . NHCOCH3 dans laquelle A et R6 sont définis comme précédemment.
Généralement, la condensation du produit de formule générale (VIII) sur l'ester de formule générale (XII) s'effectue dans un solvant organique tel que le chloroforme en présence d'un accepteur d'acide tel que la triéthylamine a une température voisine de 20C.
La cyclisation du produit de formule générale (XIII) en ester de l'acide de formule g~nérale (XI) s'effectue généralement par chauffage dans un solvant organique tel que le benz~ne ou le toluene en présence d'un catalyseur tel que l'acide p.toluènesulfonique et en 81iminant l'eau formée au fur et a mesure de sa formation.
L'ester de formule générale (XII) peut être obtenu selon la méthode de M. Hatanaka et T. Ishimaru, J. Med. Chem., 16, 978 (1973).
Le produit de formule générale (V) dans laquelle Rl représente un atome d'hydrogene et R2 représente le radical carboxy est l'acide amino-7 désa-cétoxy-3 céphalosporanique (ou 7-ADCA) qui peut 8tre obtenu, soit a partir d'une pénicilline selon le procédé
qui fait l'objet du brevet belge 747,382, soit par désacétoxylation d'un produit de formule générale (V) dans laquelle R représente un radical acétoxy selon le procédé qui fait l'objet du brevet belge 779,034.
8 ~
,..:, :
.

i ~0383~74 Le produit de formule générale (v) dans laquelle Rl représente un radical acetoxy et R2 represente le radical carboxy est l'acide amino-7 céphalosporanique (ou 7-ACA) qui peut être obtenu selon le procédé qui fait l'objet du brevet belge 615 955 ou du brevet américain 3,239,394. :
Le produit de formule générale (V) dans ~ .
laquelle Rl est défini comme précédemment et R2 représente un radical de formule générale (II) dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précedemment, peut être préparé a partir d'un produit de formule générale (V) dans laquelle Rl est défini comme précédemment et R2 représente le radical carboxy, par toute mét~ode connue en soi pour préparer un ester partir d'un acide sans toucher au reste de la molécule.
G8n~ralement, on fait r~agir un sel alcalin ou un sel d'amine tertiaire d'un produit de formule général~ (V) dans laquelle Rl étant défini comme préc~demment, R2 représente le radical carboxy, sur un halogénure de formule générale :
Z - CH - O - C - R4 (XIV) dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précédemment et Z représente un atome d'halogene, dans un solvant .
inerte tel que le diméthylformamide, a une température comprise entre 0 et 30C.
Les produits de formule générale (XIV) peuvent 8tre préparés selon la méthode decrite dans la demande de brevet allemand 2,350,230.
Selon l'invention les produits de formule . .
générale (I) dans laquelle Rl est défini comme précédemment et R2 représente un radical de formule gén~rale (II) dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précédemment, peuvent également être obtenus ` ~Y' .,~

10383q4 par estérificati~n d'un produit de formule génerale (I) d~ns laquelle Rl est defini comme ci-dessus et R2 represen~e un radical carboxy et dont la fonction amine a été préalablement protégée, par toute méthode connue en soi pour préparer un ester à partir d'un acide sans toucher au reste de la molecule.
Genéralement on fait reagir un sel alcalin ou un sel d'amine tertiaire d'un produit de formule genérale (I) tel que défini ci-dessus dont la fonction amine a été préalablement protégée, sur un halogénure de formule générale (XIV) dans laquelle R3, R4 et Z
sont d~finis comme précédemment. De préférence on opère dans un solvant inerte tel que le dimethylformamide, ~ une tempéra~ure comprise entre 0 et 30C, puis on elimine le groupement protecteur de la fonction amine par toute méthode connue en soi pour l'obtention d'une amine à partir de l'un de ses sels sans toucher au reste de la molécule.
Les nouveaux dérivés de la céphalosporine selon la présente invention peuvent être éventuellement purifiés par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chromatographie.
Les nouveaux produits selon l'invention peut etre transformés en sels d'addition avec les acides. Selon les procédés de la présente invention, les produits sont généralement obtenus sous forme de trifluoracétate. Les produits de formule générale (I) obtenus sous forme de ce sel peuvent etre libérés et ;
transform~s en autres sels selon les méthodes habituelles. ~ -' ' ~.038374 Les produits de formule générale (I) dans laquelle R2 représente le radical carboxy peuvent aussi ~tre transformés en sels metalliques ou en sels d'addition avec les bases azotees autres que l'ammoniaque selon les méthodes connues en soi. Ces sels peuvent être obtenus par action d'une base alcaline ou alcalino-terreuse, ou dîune amine sur un produit de formule gén~rale (I) dans un solvant approprié tel qu'un alcool, un éther ou l'eau ou par réaction d'échange avec un sel d'un acide organique. Le sel formé précipite, apres concentration éventuelle de sa solution, il est séparé par filtration ou décantation.
Les ,nouveaux d~riv8s de la céphalosporine de formule g8nérale (I) et leurs sels présentent des pro-priétés antibact~riennes particulierement intéressantes.
Ils manifestent une activité remarquable in vitro et in vivo sur les germes Gram-positifs et Gram-négatifs.
In vitro, les produits se sont montrés actifs a des concentrations comprises entre 1 et 60 ~g/cm3 sur des souches de staphylocoques sensibles a la pénicilline G (Staphylococcus aureus 209 P, Staphylococcus aureus Smith) ou ~ des concentrations comprises entre 1 et 50 J~g/cm3 sur des souches de staphylocoques résistantes ~ la penicilline G (Staphylococcus aureus MB 9) ou a des concentrations comprlses entre 1 et 100 ~g/cm3 sur Escherichia coli, souche Monod.
In vivo, les produits se sont montrés actifs sur les infections experimentales de la souris a Staphylococcus aureus Smith (sensible a la pénicilline G) a des doses '~
comprises entre 0,05 et 5 mg/kg par jour par voie sous- -cutanee ou entre 0,05 et 30 mg/kg par jour par voie orale, ou ~ Escherichia coli, à des doses comprises entre 11 , .
, ' ~ ... :, , . , .. . ~ . . ... . . .. ... - , . . .. .~ , - . .. . . .

~038379L
1 et 50 mg/kg par jour par Yoie sous-cutanée~ ou comprises entre 5 et 500 mg/kg par jour par voie orale.
Sont particulierement actifs les produits de formule générale:

CI-I _ CONH

S 2 ~ ~ CH2R
OOH

dans laquelle Rl représente un atome d'hydrogene ou le radical acétoxy, étant entendu que ces produits qui déri-vent des formes D, L et DL de l'acide de formule générale (IV) dans laquelle A représente un atome de soufre, se trouvent sous forme diast~réoisomère ou sous forme d'un m~lange de diastéréoisom~reR.
Les exemples suivants, donn~s ~ titre non limitatif, montrent comment l'invention peut ~tre mise en pratique.
Exemple 1-A une solution de 11,5 g d'acide DL-~-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique et de 12,9 g d'acétoxy-3 amino-7 tert-butoxy-carbonyl-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2.07 octene-2 dans 100 cm3 de diméthylformamide anhydre, on ajoute 9,20 g de dicyclohexylcarbodiimide. Le milieu r~actionnel est agit~ pendant 30 minutes a une température voisine de 20C puis on sépare le précipité par filtration, ajoute 300 cm3 d'ac~tate d'éthyle au filtrat, lave la phase organique deux fois par 1000 cm3 d'eau, 500 cm3 d'une solution ~ 1% d'acide citrique, puis 300 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin '1~3~3q4 500 cm3 d7eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, traitée au noir décolorant , filtrée et concentrée ~ sec sous pression réduite (20 mm de mercure~. On obtient 26 g d'un résidu que l'on chromatographie sur 300 g de gel de silice. On élue avec 2000 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclo-; hexane (35-65 en volumes) et obtient, après concentrationde la BOlUtiOll, 1 9 g d'acétoxyméthyl-3 / DL-d-tert-butoxycar-bonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2)-ac~tamid ~-7 tert-butoxycar~onyl-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2.07 oct~ne-2.
Ce produit ~19 g) est dissous dans 100 cm3 d'acide trifluoroacétique et la solution est laissée 15 minutes ~ une température voisine de 20C; l'acide trifluoroacétique est ensuite chassé sous pres~ion r~duite (1 mm de mercure~. On d~ssout le résidu dan~
75 cm3 d'ac~tate d'éthyle puis on a~oute 100 cm3 d'oxyde d'isopropyle. Un précipit~ apparait que l'on sépare par ~iltration. On obtient ain~i 14,6 g de trifluoroacétate d'acétoxyméthyl-3 r DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) ac~tamido7-7 carboxy-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo r4.2Ø7 oct~ne-2, sous forme d'un solide cr~me.

~a-7D ~ ~ 29,2 ~ 0,9 ~c - 1, dim~thylfo~namide) ' pré~ente le8 ré~ultat3 d~analy~e de la façon suiva~te:
Analy~e % C H ~ N O S
Calc. 39,58 3,75 8,05 7,91 22,60 18,11 ~r. 39,8 3'4 8,4 8,1 18,4 ~'acétoxyméthyl-3 amino-7 tert-butoxycarbo~yl-2 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo ~4.2.o.7 oct~ne-2 peut être préparé selon R.J. STEDMAN, J. Med. Chem., 9, 444 (1966). - -10383~7~
L'acide DL-~-tert-buto~ycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-l,~ yl-2) acetique peut être prepare de la fa~on suivante:
A une suspension de 9,55 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acetique dans 150 cm3 de dimethylformamide et 17,6 cm3 de triethylamine, on ajoute 14,3 g de tert-butoxycarbonylazide. Cette suspen-sion est agitée à 35 C pendant trois jours. Le mélange réactionnel est alors devenu homogane. On y ajoute 1000 cm3 d'eau et 10n cm3 d'une solution saturée de ; bicarbonate de sodium et lave deux fois par 300 cm3 d'éther éthylique. La phase aqueuse est amenée à pH 3 par addition d'acide citrique. Le pr~cipité formé est séparé par filtration, lavé à l'eaù et recristallisé
dans 400 cm3 d'acétonitrile. On obtient ainsi 12 g d'acide DL-o-tert-butoxycarbonylamino ~ihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique sous forme de cristaux blancs fondant vers 205C en se décomposant.
Le tert-butoxycarbonylazide peut être pr~paré
selon L.A. CARPINO, B.A. CARPINO, P.J. CROWLEY, C.A. GIZA
et P.H. TERRY, Org. Synth., 44, 15 (1964).
L'acide DL-o-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique peut être préparé de la façon suivante:
A une solution de 150 g de DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle dans 1500 cm3 de méthanol, on ajoute 820 cm3 de soude normale.
Le mélange réactionnel est laissé 16 heures à une température voisine de 5C puis concentré à sec sous pression r~duite (20 mm de mercure). Au résidu obtenu on ajoute 500 cm3 d'eau et filtre sur "Supercel". Le filtrat jaune obtenu est refroidi dans un bain de glace et acidifié par addition d~ ~600 cm3 d'acide chlorhydri~ue 4N.
., ~
.~'' ,. ,., ., ." - .- ,, , , . ,, ., ,~ , . ~038374 La solution acide est traitee au noir d~colorant, filtree puis amenée ~ pH 4,5 par addition de soude concentrée Le précitée apparu est séparé par filtration. On obtient ainsi 99 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique sous forme de cristaux ~lancs fondant vers 260C avec décomposition.
Le DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante:
A une solution de 171 g d'a-hydroxyimino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle dans 800 cm3 de méthanol, on ajoute 1600 cm3 d'acide formique a 50%. On refroidit a 5C puis ajoute 135 g de poudre de zinc par petites portions de fa~on que la température ne dépasse pas 28C. On laisse ensuite sous agitation â 5C pendant 30 minutes puis filtre et concentre le filtrat sous pression reduite (20 mm de mercure) ~usqu'~ un volume de 1000 cm3 environ. On lave ce r8sidu par deux fois 200 cm3 de chlorure de méthylene, a~oute 1500 cm3 d'eau a la phase aqueuse et neutralise par addition de carbonate de sodium jusqu'~ pH 8,9 en présence de 500 cm3 de chlorure de méthylene. On sépare la phase organique, lave la phase aqueuse avec 500 cm3 de chlorure de méthylène, réunit les extraits organiques, traite avec du noir decolorant et filtre.
Apr~s concentration a sec sous pression réduite ~20 mm de mercure) on o~tient 150 g de DL-a-amino ~ihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acëtate d'éthyle sous ~orme d'huile jaune pfile.
L'~-hydroxyimino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle peut etre préparé de la façon suivante:
On met en suspension 655 g d'hydroxyimino-2 (mercapto-2 ~thylthio)-4 oxo-3 ~utyrate d'éthyle dans .. , . ~ . . . .

10383~
3500 cm3 de toluène en présence de 22 g d'acide p.toluenesulfonique monohydrate. On chau~fe le melange au reflux (l'eau etant separee au fur et à
mesure de sa formation dans un appareil de Dean-Stark) pendant 40 minutes puis on refroidit à 60C et concentre a sec sous pression reduite (20 mm de mercure). Le résidu est dissous dans 200 cm3 d'acétate d'ethyle et la solution obtenue est lavee deux fois par 700 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, par deux fois 700 cm3 d'eau puis séchée sur du sulfate de magnésium et enfin traitée par du noir décolorant. La solution est filtrée et le filtrat est concentré ~ sec sous pression r~duite (20 mm de mercure). Le r~sidu obtenu est dissous a chaud dans 450 cm3 de chloroforme et 800 cm3 de tétrachlorure de carbone. Le mélange est refroidi à 0C pendant 16 heures et les cristaux obtenus sont filtrés. On obtient ainsi 173 g d'~-hydroxyimino (dihydro-5,6 dithiinne-l,~ yl-2) acétate d~'éthyle sous forme de cristaux blancs fondant ~ 142C.
L'hydroxyimino-2 (mercapto-2 éthylthio)-4 oxo-3 butyrate d'~thyle peut être préparé de la façon suivante:
A une solution de 900 cm3 d'éthanedithiol et de 765 cm3 de triéthylamine dans 2500 cm3 de chloroforme, on ajoute, en maintenant la température a 20C, une solution de 1050 g de chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 2500 cm3 de chloroforme.
On laisse le mélange a 20C pendant 1 heure puis on ajoute 2000 cm3 d'acide chlorhydrique normal, sépare la phase organique, la lave 2 fois par 20~ cm3 d'eau puis la seche sur sulfate de magnésium. Apres ' ; . . , . , - -filtration, le filtrat est concentré ~ sec sous pression réduite (20 mm de mercure). Au résidu partiellement cristallis~, on ajoute 500 cm3 de chlorure de méthylène puis refroidit à -10C. On filtre et obtient 655 g d'hydroxyimino-2 (mercapto-2 éthylthio)-4 oxo-3 butyrate d'éthyle sous forme de cristaux blancs fondant ~ 110C.
Le chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle peut être préparé selon M. Hatanaka et T. Ishimaru, J. Med. Chem., 16, 978 (1973).
Exemple 2-A une solution de 8,15 g d'acide D~-x-tert-buto-xycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique et de 9,55 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,~,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-1 bicyclo r 4.2.~
octene-2 dans 120 cm3 de diméthylformamide, on ajoute 6,2 g de dicyclohexylcarbodiimide et laisse 2 heures 90US agitation. Le mélange est filtré; le filtrat est dilue par 150 cm3 d'acétate d'éthyle, lavé par 600 cm3 d'eau, 250 cm3 d'acide chlorhydrique 4N, 250 cm3 de bicarbonate de sodium et 250 cm3 d'eau distillée.
La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, traitée au noir décolorant, filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 17,4 g d'un résidu qui est chromatographi~ sur 250 g de gel de silice. On élue 11~8 g de DL-a-tert-butoxycar-bonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1~4 yl-2) acétamid ~-7 méthyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo r4-2-07 octène-2, avec 2000 cm3 d'un ~ -mélange acétate d'éthyle-cyclohexane 30-70 (volumes), sous forme de laque jaune pale.

,i ... ,. .. ,. . . .. , . ... ., , .. . . ........ ... . . ~

103~q4 A la solution de 11,8 g de~DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 méthyl-3 oxo-8 ~trichloro-2,2,2 éthoxy-carbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo r4-2.0 7 octene-2 dans un mélange de 60 cm3 de diméthyl~o~mamide et de 30 cm3 d'acide acétique glacial refroidi au bain de glace, on ajoute 11,1 g de poudre de zinc et laisse agiter pendant 3 heures. Le mélange réactionnel est filtré; on ajoute 200 cm3 d'acétate d'éthyle au filtrat et lave avec 500 cm3 d'eau. La phase aqueuse est extraite avec 200 cm3 d'acétate d'éthyle; on réunit les phases organiques, les lave avec 200 cm3 d'eau, puis extrait deux fois par 200 cm3 d'une solution 8aturée de b~carbonate de sodium. La solution alcaline est acidiflee a pH 2,5 par addition d'acide chlorhydrique 4N en présence de 200 cm3 d'acétate d'~thyle et la fraction organique est lavee avec 200 cm3 d'eau, séchée sur ~ulfate de magnésium, traitée par du noir décolorant et filtrée. Le filtrat est concentré
à sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 8,5 g de rDL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2.07 oct8ne-2 80us forme de laque incolore.
On dissout 8,5 g de / DL-a-tert-butoxycarbonyl-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2.07 octene-2 dans 80 cm3 d'acide trifluoroacétique. La ~
solution obtenue est laissée au repos pendant 10 ~- -minutes, puis l'acide trifluoroacétique est chassé sous pression réduite (1 mm de mercure). On dissout le r~sidu obtenu dans 10 ~3 d'acétate d'éthyle et ajoute " ~, .

` ~a383~74 120 cm3 d'ether éthylique. Un produit precipite que llon separe par filtration. On obtient ainsi 6,8 g de trifluoracetate de / DL-~-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acetamido7-7 carboxy-2 methyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2, sous forme dlune poudre blanche.
/a 7D --~88,6 ~ 1,4 ~c = 1, diméthylformamide).
pré8ente le~ résultat3 d'analy~e de la façon suivante:
Analy~e % C H ~ N O S
Calc, 38,9 3,8 10,2 8,6 18,8 19,7 ~r. 39,0 4,1 10,5 8,4 19,4 L'amino-7 m~thyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2.07 octene-2 peut être préparé selon: R.R. CHAUVETTE, P.A. PENNINGTON, C.W. RYAN, R.D.G. COOPER, F.L. JOSE, I.G. WRIGHT, E.M. VAN HEYNINGEN et G.W. HUFFMAN, J. Org. Chem. 36, 1259 (1971).
Exemple 3-En opérant comme à l'exemple 2 mais à partir de 5,2 g d'acide D-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique et de 6,1 g d'amino-7 méthy~-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 ~thoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2.07 octane-2 dans 120 cm3 de diméthylformamide et en pr~sence de 4,02 g de dicyclohexylcarbodiimide, on obtient 5,2 g de / D-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 m~thyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 ethoxycarbonyl)-2 -thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2.
J~7D a~ 45,6- 1 (c = 1, chloroforme) En traitant 5,2 g de ~ D-a-tert-butoxy-carbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) 1~ , , . . . . . . .. .

10383~4 acetamido7-7 methyl-3 oxo-8 (trichloro-2,2,2 ethoxy-carbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2 par 5,05 g de poudre de zinc dans 30 cm3 de dimethyl-formamide et 15 cm3 d'acide acetique glacial on obtient 3,8 g de / D-o-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acetamido7-7 carboxy-2 methyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo r4-2~07 octene-2 sous forme d'une laque incolore.

On dissout 3,7 g de r D-a-tert-butoxycarbon amino (dihydro-5,~ dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 carboxy-2 methyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.o7 octene-2 dans 35 cm3 d'acide trifluoracétique et laisse cette solution sous agitation pendant 10 minutes à
20C environ. On concentre à sec sous pression réduite (1 mm de mercure), dissout le residu dans 6 cm3 d'ac~tate d'~thyle et ajoute 70 cm3 d'~ther ~thylique.
Il se forme un pr~cipite que l'on sépare par filtration.
On obtient ainsi 1,8 g de trifluorac~tate de ~ D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l ~icyclo ~4.2.07 oct~ne-2, sous forme d'une poudre blanche.

2~
J~ 7D-~ 119,2 ~ 1,8 (c- 1, diméthylformamide3 pr~sente le~ ré~ul tat~ d ' a~alyse de la façon ~uivante:

Analy8e % a E ~ N 0 S
Calc. 39,05 3,75 9,70 8,75 18,75 20,00 ~r, 38,7 3,65. 9'7 8,4 19,8 En opérant comme à l'exemple 1, on obtient 5,4 g d'acide D-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique. -~ 7 = -109 - 2 (c = 1, dimethylformamide) par action de 8,6 g de tert-butoxycarbonylazide sur 5,5 g d'acide D-~-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2 ~0 ., . .

~0383~7~
acetique dans 100 cm3 de dimethylformamide contenant 10,5 cm3 de triethylamine.
L'acide D-o-amino ~dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique peut etre prepare de la façon suivante:
A une suspension de 28,7 g d'acide DL-O-amino (dihydro-5l6 dithiinne-1,4 yl-2) acetique dans 150 cm3 de methanol, on ajoute 34,8 g d'acide ~) campho-sulphonique. On chauffe progressivement jusqu'a dissolution puis concentre ~ sec sous pression réduite (20 mm de mercure). Après cinq recris-tallisations du résidu dans un mélange acetonitrile-eau (90-10 en volume~, on obtient 5,5 g de sel de l'acide (~) camphosulfonique et de l'acide D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2~ acétique sous forme de cristaux blancs.
~ 7 - -39,3 ~ 1 (c= 1, eau) On dissout 3,5 g de ce sel dans 50 cm3 d'eau distillée et amène ~ pH 4 par addition de bicarbonate de sodium. La solution est concentrée aous pression réduite (20mm de mercure) jusqu'à un volume de 20 cm3 et lai~sée pendant 20 heures a 4C.
Le précipité form~ est séparé par filtration. On obtient ainsi 1,3 g d'acide D-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique sous forme de cristaux blancs.
~ ~ 7D =-138 ~ 1,6 ~c =1, acide chlorhydrique N) Exemple 4-A une solution de 14 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) ac~tique dans 120 cm3 de chloroforme, on ajoute 17,6 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 ~trichloro-2,2,2 éthoxy-carbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo r4.2.07 octene-2 21 - ;;
. '; '-103~3~74 et 11,5 g de dicyclohexylcar~odiimide et laissependant 12 heures sous agitation ~ une température voisine de 20 C. I,e mélange réactionnel est filtré
et le filtrat est concentré sous pression réduite (20 mrn de mercure). On obtient un residu gommeux que l'on dissout dans 250 cm3 d'acetate d'éthyle;
la solution est lavée deux ois avec au total 200 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N puis deux fois avec au total 200 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin deux fois avec au total 200 cm3 d'eau.
On sèche la phase organique sur sulfate de magnésium, traite au noir décolorant, filtre puis concentre sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 35 g d'un résidu que l'on chromatographie sur 350 g de silice.
On élue successivement par 400 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexan~ 9 en volumes) puis par 800 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (15-85 en volumes). Les éluats correspondants sont rejetés. On élue en~uite par 1400 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (15-85 en volumes).
Ces éluats sont concentrés ~ sec sous pre~sion réduite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 23,5 g de méthyl-3 oxo-8 / DL-a-tert-butoxy-carbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 (trichloro-2,2,2 ~thoxycarbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2, sous forme d'une poudre amorphe blanche.
~ On dissout 23,4 g de méthyl-3 oxo-8 DL-~tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiine-1,4 yl-2) acétamido7-7 (trichloro-2,2,2 éthoxy-carbonyl)-2 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2 , .:
'' ,', ''' ~ 03~3q4 dans 135 cm3 de dimethylformamide et 40 cm3 d'acide acétique. A cette solution on ajoute 22 g de zinc en poudre et on agite 3 heures à 20C environ. On filtre sur supercel, puis on concentre la solution sous pression réduite (0,1 mm de mercure). On obtient une huile qui est reprise par 800 cm3 d'eau et extraite deux fois par au total 40G cm3 d'acétate d'ethyle. La phase organique est traitee deux fois par au total 400 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et la fraction aqueuse est acidifiée en présence de 200 cm3 d'acétate d'~thyle par addition d'acide chlorhydrique 4 N jusqu'à pH
2,5. La phase organique est décantée, lavée par 100 cm3 d'eau, séchée sur sulfate de magnésium, traitée au noir décolorant, filtrée et concentrée sous pression reduite (20 mm de mercure). On obtient 13,9 g de carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 ~ DL-~a-~crt-butoxycarbon amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 thia-5 aza-1 ~icyclo r 4.2.07 octene-2, sous forme d'une poudre amorphe blanche.
On dissout 13,8 g de carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 r DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 thia-5 aza-l bicyclo r 4.2.07 octene-2 dans 139 cm3 d'acide trifluoracétique. On laisse en contact 15 minutes, sous agitation, a une température voisine de 0C. On concentre a sec sous pression réduite (1 mm de mercure) reprend le résidu par 100 cm3 d'acétate d'éthyle et concentre à nouveau a sec, sous pression réduite (1 mm de mercure). On dissout le résidu obtenu dans 100 cm3 d'acétate d'éthyle puis coule cette solution dans 300 cm3 d'éther anesthésique; un produit précipite. On lave le pr~cipité deux fois 23 :: :

par décantation avec au total 600 cm3 d'ether anesthesique puis on l'isole par filtration. On obtient ainsi 1l,4 g de trifluoracetate de rDL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-l,4 yl-2) acétamid_~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.o7 oct~ne-2.
/a 72-~1l4,2 ~ 1,7 (c - 1,3, diméthylformamide).
~ --D
pré~ente les résultats d'analyse de la façon suivante:
Analyse % C H ~ N O S
Calc. 39,59 3,73 11,75 8,65 27,03 13,21 Tr. 4O,~ 3,7 10,5 8,8 1~,4 L'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-l,4 yl-2) acétigue de départ peut être préparé
de la façon suivante:
On met en suspension 25,4 g d'acide DL-a-amino ~dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique dans 435 cm3 de diméthylformamide; on ajoute 41,5 g de tert-butoxycarbonyl-azide et 51 cm3 de triéthylamine. On laisse en contact 48 heures sous agitation a une température de 35C. On concentre la solution sous pression réduite (1 mm de mercure), reprend le résidu par 300 cm3 d'eau et ajuste le pH à 8,5 par addition d'une solution saturée de bicarbonate de sodium.
On extrait deux fois la phase aqueuse, avec au total 500 cm3 d'~ther anesthésique que l'on élimine puis on l'acidifie jusqu'à pH =3, par addition d'acide chlorhydrique 4 N. Un produit précipite que l'on sépare par filtration puis dissout dans 600 cm3 de chlorure de méthylene. La solution obtenue est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et concentrée sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 26,2 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino ~dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) ac~tique fondant ~ 160C. ~-L'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) ac~tique peut etre préparé de la façon suivante:
2~
.

10383~74 On dissout 37 g de DL- a-amino (dih~dro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2~ acetate d'ethyle dans 350 cm3 de methanol puis on ajoute 182 cm3 de soude N. On laisse en contact 3 heures ~ une temperature voisine de 4C, puis concentre la solution sous pression reduite ~20 mm de mercure) jusqu'à environ 1~3 du volume initial. On acidifie a température voisine de 5C jusqu'~ pH 4,5 par addition d'acide chlorhydrique 4 N. Un produit cristallise. On laisse agiter 15 minutes puis on sépare le précipité par filtration; on obtient ainsi 19,4 g d'acide DL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétique, sous forme de cristaux blancs fondant vers 270C.
Le DL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinrle-1,4 yl-2) acétate d`~thyle peut être préparé de la facon suivante:
j On dissout 295 g d~a-hydroxyimino (dihydro-5,6 oxathiinnQ-l~4 yl-2) ac~tate d'~thyle dans 1,5 litre de méthanol puis on ajoute 1,5 litre d'acide formique et 1,5 litre d'eau. On refroidit par un bain glace-eau et on a~oute 250 g de zinc en poudre par petites i 20 fractions, en 30 minutes. On laisse en contact pendant2 heures sous agitation a température voisine de 20C, puis on filtre et concentre la solution sous pression r~duite (20 mm de mercure) jusqu'a un volume de 1 litre.
On ajoute 1,5 litre d'eau et extrait deux fois avec au total 3 litres d'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont éliminés et la phase aqueuse est amenée a pH 10 par addition de soude puis extraite trois fois avec au total l,S litre de chlorure de méthylene. On réunit les extraits organiques, seche sur sulfate de sodium, traite au noir décolorant, filtre et concentre sous pression r~duite (20 mm de mercure). On obtient ainsi 150 g de DL-a-amino ~dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétate d'éthyle, sous forme d'huile. 2 ~ `

lQ383t74 L'a-hydroxyimino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acétate dlethyle peut être prepare de la façon suivante:
On dissout 321 g d'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'ethyle dans 3,2 litres de toluène ~ouillant puis on ajoute 26 g d'acide paratoluènesulfonique monohydraté. Une vive ébullition se produit avec libération d'eau qui est éliminée dans un appareil de DEAN-STARCK. Le chauffage au reflux du m~lange reactiQnnel est poursuivi pendant 15 minutes.
Apr~s refroidissement, la solution 'toluénique est filtrée, lavée trois fois avec au total 1,5 litre d'eau puis avec 200 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin par 500 cm3 d'eau. On sêche sur sulfate de magnésium, traite au noir d~colorant, filtre et concentre ~ sec sous pression r~duite (20 mm de mercure). On obtient 273 g d~ -hydroxyimino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) ac~tate d~éthyle sous forme d~une huile qui se prend lentement en masse.

L'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle peut être préparé de la façon suivante: ' On dissout 340 g de chloro-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate d'éthyle dans 1,5 litre de chloroforme puis on ajoute 126 cm3 de mercapto-2 éthanol. A la solution obtenue, on ajoute a 20C environ et en 30 ' ;' minutes, 248 cm3 de triéthylamine en solution dans 1 litre de chloroforme. On laisse en contact 15 heures sous agi-tation à 20C environ. Le mélange réactionnel est alors lavé par 200 cm3 d'eau puis par 200 cm3 d'acide chlorhy- ~' drique 2 N et enfin quatre fois par au total 1 litre d'eau.
On s~che la phase organique sur sul~ate de sodium, traite au noir décolorant, filtre et concentre a sec sous '' ~038374 pression reduite (20 mm de mercure). On obtien~ ainsi 321 g d'(hydroxy-2 éthylthio)-4 hydroxyimino-2 oxo-3 butyrate dléthyle sous forme d'une huile qui se prend lentement en masse.
Exemple 5-A une solution de 9,4 g d'acide DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathinne-1,4 yl-2) acé-tique dans 85 cm3 de chloroforme, on ajoute 11,2 g d'acé-toxyméthyl-3 amino-7 oxo-8 tert-butoxycarbonyl-2 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 oct~ne-2 et 7,7 g de dicyclo-hexylcarbodiimide. On laisse en contact pendant 12 heures sous agitation a une température voisine de 20C, puis on sépare le solide formé par filtration. On concentre le filtrat sous pression réduite (20 mm de mercure) et dissout le résidu dans 200 cm3 d'ac~tate d'éthyle. On lave cleux ~ois avec au total 150 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N
puis deux fois avec au total 150 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium et enfin deux fois avec au total 200 cm3 d'eau. On sèche la phase organique sur sulfate d0 sodium, traite au noir décolorant, filtre puis concentre sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 25 g d'un residu que l'on chromatographie sur 250 g de ~ilice. On élue successivement par 120 cm3 d'un mélange ac~tate d'éthyle-cyclohexane (1-9 en volumes) puis par 360 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (15-85 en volumes). Les éluats correspondants sont rejetés. On élue ensuite par 360 cm3 d'un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane (35-65 en volumes). Ces éluats sont concentrés a sec sous pression réduite (20 mm de mercure). On obtient 12,8 g d'acétoxyméthyl-3 oxo-8 r DL-~-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2~ acétamido7-7 tert-butoxycarbonyl-2 ~. . - . . , ~ .

10383q~
thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2.07 octene-2, sous forme d'une poudre amorphe blanche.
On dissout 12,7 g d'acetoxymethyl-3 oxo-8 DL-a-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acetamido/-7 tert-butoxycarbonyl-2 thia-5 ~ -aza-l bicyclo / 4.2.0/ octene-2 dans 120 cm3 d'acide .......
trifluoracétique. On laisse en contact pendant 15 minutes sous agitation, ~ une température voisine de 20C. On concentre à sec sous pression réduite ~1 mm de mercure), on reprend le résidu par 100 cm3 d'acétate d'éthyle et on concentre a nouveau ~ sec sous pression réduite (1 mm de mercure). On dissout le résidu obtenu dans 25 cm3 d'acétate d'ethyle puis on coule cette solution dans 100 cm3 d'éther anesthésique; un produit pr~cipite.
On lave le précipité deux fois par décantation avec au total 500 cm3 d'éther anesthésique puis on le s~pare par filtration. On obtient ainsi 9,7 g de trifluoracétate dlacétoxyméthyl-3 r DL-a-amino (dihydro-5,6 oxathiinne-1,4 yl-2) acetamido7-i carboxy-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2. ~ octene-2.

~Q,~20+ 24,0 + 0,8 ~c = 1, diméthylformamide) présente les résultat~ d'analyse de la façon suivante:
Analy~e % C ~ ~ N 0 S

Calo. 39,78 3,71 10,49 7,73 26,49 11,80 Tr. 40~2 3,8 9,8 7-9 11,8 :, Exemple 6-A une solution de 6,1 g d'acide DL-a-tertio-butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétique, et de 7,8 g d'amino-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloxyméthoxy-carbonyl-2 thia-5 aza-l ~icyclo r4.2.07 oct~ne-2 dans ~
75 cm3 de diméthylformamide anhydre on ajoute, en maintenant la température a 5C, 5,15 g de dicyclohexyl-caxbodiimide. Le mélange est agité pendant 2 h a 5C , .

10383~74 puis filtré; le précipite est lavé avec 250 cm3 d'acétate d'ethyle, le filtrat est laYé aYec 600 cm3 d'eau et la phase aqueuse est extraite par 250 cm3 d'acétate d';~thyle.
Les phases organiques sont rassem~lées, lavées par 250 cm3 d'une solution saturée de chlorure de sodium, séchées sur sulfate de magnésium et filtrées en présence de noir décolorant. Apres évaporation de l'acétate d'~thyle sous pression réduite (20 mm de mercure), on obtient une laque jaune que l'on chromatographie sur une colonne contenant 125 g de gel de silice en ~luant avec un mélange acétate d'éthyle-cyclohexane(50-40 en volumes);
on recueille 500 cm3 d'éluat que l'on concentre sous pression réduite. On obtient ainsi 9 g de / DL-a-terti butoxycarbonylamino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) acétamido7-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloxyméthoxycarbonyl-2 thia-5 aza-l bicyclo ~ 4.2. ~ octane-2 sous forme de laque creme.
Ce produit est dissous sous agitation dans 75 cm3 d'acide trifluoroacétique et la solution est laissée a 5C pendant 45 mn. Llacide trifluoroacétique est chass~ sous pression réduite ~0,5 mm de mercure) et le résidu est mis en suspension dans 100 cm3 d'oxyde d'isopropyle. Le solide est séparé par filtration, lave deux fois par 50 cm3 d'oxyde d'isopropyle et s~ch~.
On obtient ainsi 8,5 g de trifluoroacétate de / DL-a-amino (dihydro-5,6 dithiinne-1,4 yl-2) ac~tamido7-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloxyméthoxycarbonyl-2 thia-5 aza-l bicyclo / 4.2.07 octene-2, sous forme de poudre jaune pâle.
; /a 7_ 55 + 1 (C =1, dimethylformamide).
pré~e~te les ré~ultat9 d'analyse de la façon 8uivante: -Analyse % C H F N O S
Calc. 42,92 4,58 9~26 6,83 20,79 15,62 ~r. 43,4 4,65 9,3 6,8 15,3 10~83~74 L~amino-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloxyméthoxy-carbonyl-2 thia-S aza-l bicyclo / 4.2. o7 octène-2 peut etre préparé selon la méthode décrite dans le brevet allemand 1,951,012.

Claims

Les réalisations de l'invention, au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit:

Procédé de préparation d'un nouveau dérivé
de la céphalosporine de formule générale:

dans laquelle A représente un atome d'oxygène ou de soufre, R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical acétoxy, et R2 représente un radical carboxy ou un radical de formule générale:

dans laquelle R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée et R4 représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, ou cyclohexyle, le radical étant un radical facilement éliminable par voie enzymatique, ses formes diastéréoisomères et leurs mélanges ainsi que de ses sels d'addition avec les acides et éventuellement de ses sels métalliques et sels d'addition avec les bases azotées autres que l'ammoniaque, caractérisé en ce que:

- lorsque A, R1 et R2 sont définis comme précédemment, on fait réagir un acide de formule générale:

dans laquelle A est défini comme précédemment, ledit acide étant sous forme racémique ou optiquement active et sa fonction amine étant préalablement protégée, ou un dérivé réactif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale:

dans laquelle R1 et R2 sont définis comme précédemment, étant entendu que lorsque R2 représente le radical carboxy cette fonction acide est éventuellement protégée, puis élimine les groupes protecteurs et transforme éventuellement le produit obtenu en sel d'ad-dition avec un acide ou, lorsque R2 représente le radical carboxy, en sel métallique ou en sel d'addition avec une base azotée autre que l'ammoniaque ou, - lorsque A et R1 sont définis comme précédemment et R2 représente le radical de formule générale:

dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précédemment, on estérifie un produit de formule générale (I) dans laquelle A et R1 sont définis comme précédemment et R2 représente le radical carboxy, ledit produit étant sous forme diastéréoisomère ou sous forme d'un mélange diastéréoisomère et sa fonction amine étant protégée, par toute méthode connue en soi pour préparer un ester à partir d'un acide sans toucher au reste de la molécule, puis élimine le groupement protecteur de la fonction amine et transforme éventuellement le produit obtenu en un sel d'addition avec un acide.