BRPI0717587A2 - Derivados de 4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOS DE 4-0X0-2,3,4,5-TETRA-HIDRO-BENZO[B][1,4]DIAZEPINA".

A presente invenção refere-se a derivados de 4-oxo-2,3,4,5- tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina de fórmula

em que

R1 é hidrogênio, alquila inferior substituída por halogênio ou alquila infe- rior substituída por hidróxi; R2 é alquila inferior substituída por halogênio ou alquila inferior substitu- ída por hidróxi ou é -COO(CH2)nR5 e R5 é hidróxi para η = 2 ou 3 ou é alquila inferior substituída por halogê- nio para η = 1, 2 ou 3; R3/R4 são independentemente um do outro hidrogênio ou halogênio; e a sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, enantiômeros opticamente puros, racematos ou misturas diastereoméricas dos mesmos.

Conforme aqui usado, o termo "alquila inferior" significa um gru- po alquila de cadeia reta ou ramificada saturada contendo de a partir de 1 a 7 átomos de carbono, por exemplo, metila, etila, propila, isopropila, n-butila, i-butila, 2-butila, t-butila e similar. Grupos alquila inferior preferidos são gru- pos com 1-4 átomos de carbono.

O termo "alquila inferior substituída por halogênio" significa um grupo alquila conforme acima definido, em que pelo menos um átomo de hidrogênio é substituído por halogênio, por exemplo, CF3, CHF2, CH2F, CH2CF3, CH2CH2F, CH2CF2CF3, CH2CH2CF2CF3, CH2CH2CF3, CH2CH2CH2CF3 e similares.

O termo "alquila inferior substituída por hidróxi" significa um grupo alquila conforme acima definido, em que pelo menos um átomo de hidrogênio é substituído por um grupo hidróxi, por exemplo, CH2CH2OH ou CH2CH2CH2OH.

O termo "sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis" compreende sais com ácidos inorgânicos e orgânicos, tal como ácido clorí- drico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido fórmi- co, ácido fumárico, ácido maléico, ácido acético, ácido succínico, ácido tartá- rico, ácido metanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico e similares.

Foi constatado que os compostos da fórmula geral I são inibido- res de γ-secretase e eles podem ser úteis no tratamento de doença de Al- zheimer. A vantagem de compostos de fórmula I para uso em um fármaco é sua boa inibição de γ-secretase, junto com sua boa solubilidade termodinâ- mica e/ou biodisponibilidade em comparação com compostos revelados no WO 2005/023772 e outros compostos relacionados.

A doença de Alzheimer (AD) é a causa mais comum de demên- cia no final da vida. Patologicamente AD é caracterizada pela deposição no cérebro de amilóide em placas extracelulares e feixes neurofibrilares intrace- lulares. As placas amilóides são principalmente compostas de peptídeos amilóide (peptídeos Abeta) que se originam da Proteína Precursora β- Amilóide (APP) através de uma série de etapas de clivagem proteolítica. Vá- rias formas de APP foram identificadas das quais a mais abundante são pro- teínas de 695, 751 e 770 aminoácidos de comprimento. Elas todas se origi- nam de um único gene através de união diferencial. Os peptídeos Abeta são derivados do mesmo domínio da APP, mas diferem em seus terminais N- e C-, as principais espécies são de 40 e 42 aminoácidos de comprimento. Peptídeos Abeta são produzidos a partir de APP através da ação

seqüencial de 2 enzimas proteolíticas chamadas β- e γ-secretase. β- secretase cliva primeiro no domínio extracelular de APP exatamente fora do domínio de transmembrana (TM) para produzir um fragmento C-terminal de APP contendo os domínios TM- e citoplásmico (ΟΤΡβ). ΟΤΡβ é o substrato para γ-secretase que cliva em várias posições adjacentes dentro de TM para produzir os peptídeos Αβ e o fragmento citoplásmico. A maioria dos peptí- deos Abeta é de 40 aminoácidos de comprimento (Αβ40), uma espécie se- cundária carrega 2 aminoácidos adicionais em seu terminal C. A última é suposta ser o peptídeo amilóide mais patogênico.

A β-secretase é uma aspartil protease típica. A γ-secretase é uma atividade proteolítica consistindo em várias proteínas, sua composição exata é incompletamente compreendida. No entanto, as presenilinas são componentes essenciais desta atividade e podem representar um novo gru- po de aspartil proteases atípicas que cliva dentro do TM de seus substratos e que são em si proteínas de membrana politópica. Outros componentes essenciais de γ-secretase podem ser nicastrina e os produtos dos genes a- ph1 e pen-2. Substratos comprovados para γ-secretase são as APP e as proteínas da família de receptor Notch, no entanto, γ-secretase tem uma es- pecificidade de substrato livre e pode clivar proteínas de membrana adicio- nais não-relacionadas com APP e Notch.

A atividade de γ-secretase é absolutamente requerida para a produção de peptídeos Abeta. Isto foi mostrado ambos através de meios genéticos, isto é, ablação dos genes da presenilina e através de compostos inibidores de peso molecular baixo. Uma vez que de acordo com a hipótese de amilóide ou AD a produção e deposição de Abeta é a última causa para a doença, é pensado que inibidores seletivos e potentes de γ-secretase serão úteis para a prevenção e tratamento de AD.

Então, os compostos da presente invenção serão úteis no trata- mento de AD através do bloqueio da atividade de γ-secretase e redução ou prevenção da formação dos vários peptídeos Abeta amiloidogênicos.

Vários documentos descrevem o conhecimento corrente sobre inibição de γ-secretase, por exemplo, as publicações que seguem: Nature Reviews/Neuroscience, Vol. 3, Abril 2002/281, Biochemical Society Transaetions (2002), Vol. 30. parte 4, Current Topies in Medicinal Chemistry, 2002, 2, 371-383, Current Medicinal Chemistry, 2002, Vol. 9, N0 11, 1087-1106, Drug Development Research, 56, 211 -227, 2002,

Drug Discovery Today, Vol. 6, N0 9, Maio 2001, 459-462, FEBS Letters, 483, (2000), 6-10, Science, Vol. 297, 353-356, Julho 2002 e JournaIofMedicinaIChemistry, Vol. 44, N0 13, 2001, 2039-2060. Objetivos da presente invenção são os compostos de fórmula I per se, o uso de compostos de fórmula I e seus sais farmaceuticamente a- ceitáveis para a fabricação de medicamentos para o tratamento de doenças, relacionadas com a inibição de γ-secretase, sua fabricação, medicamentos baseados em um composto de acordo com a invenção e sua produção bem como o uso de compostos de fórmula I no controle ou prevenção de doença de Alzheimer.

Um objetivo adicional da invenção são todas as formas de enan-

tiômeros opticamente puros, racematos ou misturas diastereoméricas para compostos de fórmula I.

Compostos preferidos de fórmula I são aqueles em que R2 é al- quila inferior substituída por halogênio, por exemplo, os compostos que se- guem:

N-[(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H- benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida

(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida

(S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1 -(3,3,3-triflúor-propil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida

(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(4,4,4-triflúor-butil)-

2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida ou

(R ou S)-2-hidróxi-N-[(S)-1 -(2-hidróxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor- eti 1)-2,3,4,5-tetra-hid ro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-metil-N'-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonamida.

Compostos preferidos adicionais são aqueles em que R2 é alqui- Ia inferior substituída por hidróxi, por exemplo, os compostos que seguem: (RS)-2-hidróxi-N-[(S)-1-(2-hidróxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro- 1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)- malonamida ou

(R ou S)-2-hidróxi-N-[(S)-5-(2-hidróxi-etil)-2-oxo-1 -(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-metil-N'-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonamida.

Compostos preferidos de fórmula I são ainda aqueles em que R2 é -COO(CH2)nR5 e R5 é hidróxi para η = 2 ou 3 ou é alquila inferior substituí- da por halogênio para η = 1, 2 ou 3, por exemplo, os compostos que se- guem:

2,2,2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico,

2,2,2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico,

2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5- (2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico,

2,2,2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico, 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-

(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico,

2,2,2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico,

2,2,2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-[(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico,

4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(4,4,4-triflúor- butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico ou 2-hidróxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-[(S ou R)-2-

hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico.

Os presentes compostos de fórmula I e seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser preparados através de métodos conhecidos na técnica, por exemplo, através de processos descritos abaixo, processos que compreendem

a) reação de um composto de fórmula

R\ P

R3

^vJ

R4

2a

com um composto de fórmula

o

para um composto de fórmula

o

Ia

em que R1a, R2a, R3 e R4 têm o significado conforme acima descrito para R1-R4, exceto para o grupo -CH2-CH2-OH, em que R1a e R2a têm o significa- do de -CH2-CH2-OP1 em que P representa um grupo de proteção hidróxi, e

se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis; ou

b) reação de um composto de fórmula

com um composto de fórmula

F

em que R1a, R2a, R3 e R4 têm os significados conforme acima descrito para R1-R41 exceto para o grupo -CH2-CH2-OH, em que R1a e R2a têm o significa- do de -CH2-CH2-OP, em que P representa um grupo de proteção hidróxi, e,

se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis ou

c) clivagem do(s) grupo(s) de proteção hidróxi de um composto

de fórmula

para um composto de fórmula R1x If u HO , u F ^F

-VAa

F

em que R11 R21 R3 e R4 têm o significado conforme acima descrito e,

se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis.

A descrição detalhada pode ser encontrada abaixo nos Exem- pios 1-14. O material de partida de fórmula IV é um composto conhecido e a amina de fórmula V é um produto disponível comercial.

Os compostos de partida de fórmulas Ila e Il para fabricação de compostos de fórmulas I e Ia podem ser preparados como segue:

Em analogia ao procedimento descrito na US6239131, compos- tos de fórmula IX podem ser preparados através de tratamento de ácidos 2,3-diamino-propiônicos N-protegidos, por exemplo, ácido (S)-3-amino-2- terc-butoxicarbonilamino-propiônico com 1,4-diflúor-2-nitrobenzeno ou 1,2,4- triflúor-5-nitro-benzeno. Um composto de fórmula Vlll é obtido que é então hidrogenado com Pd sobre carbono (10%) para dar um composto de fórmula IX. O composto de fórmula IX é então tratado com um agente de condensa- ção, por exemplo, com cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodi- imida para dar o composto ciclizado de fórmula X.

A introdução de substituintes R1a e R2a em compostos de fórmu- la X pode ser realizada de uma maneira conhecida per se usando um agente de alquilação, por exemplo, halogenida, metanossulfonato, trifluormetanos- sulfonato ou 4-toluenossulfonato, em combinação com uma base, por exem- plo, hidrogenocarbonato de sódio, carbonato de césio, hidreto de sódio ou bis(trimetilsilil)amida de lítio para obter compostos de fórmulas Xl e XII. Quando R2 ou R2a tem o significado de um carbamato, a carbamoilação de compostos de fórmula X pode ser conseguida usando um agente de alquila- ção, por exemplo, halogenida, metanossulfonato, trifluormetanossulfonato ou 4-toluenossulfonato, em combinação com uma base, por exemplo, hidroge- nocarbonato de sódio, carbonato de césio, hidreto de sódio ou bis(trimetil- silil)amida de lítio e na presença de dióxido de carbono para obter os com- postos correspondentes de fórmulas Xl e XII.

Esquema 1

R3

Atr4 f f

o,v iV ^r4

" í M °2N i Pd/C,MeOH^ · ---HN -:-- HN

J\\ 0 85°C, 18h ? U J/ 3h ? U J^

Vl S H Vlll 5 H

10

15

EDC, DMF

base,

Rls-Hal .

Rla-Sulfonato1 I

YvC

η I

Xl

base,

R1a-Hal

R2a-Hal.

R1a-sulfonato.

R2a-Sulfonato

VY

η ι ——

Xll

Um composto de fórmula Ila ou Il pode ser obtido tratando com- postos de fórmula Xl ou Xll com ácido, de preferência com ácido trifluoracé- tico em diclorometano ou com ácido clorídrico aquoso.

Compostos de fórmula I podem ser fabricados de acordo com a invenção, em que R1, R2, R1a, R2a, R3, R4 e η são conforme acima descrito, como segue (esquema 2): a uma solução de um composto de fórmula Il ou Ila em tetra-hidrofurano é adicionado um composto de fórmula III, hidrato de 1-hidroxibenzotriazol, cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodi- imida e N-etildiisopropilamina. Após agitar em temperatura ambiente da noite para o dia o solvente é removido através de destilação e o resíduo é purifi- cado para obter compostos de fórmula Ia.

Compostos de fórmula Ia em que grupos hidróxi estão presentes em forma protegida podem ser transformados em compostos de fórmula I através de clivagem do(s) grupo(s) de proteção. Exemplos de grupos de pro- teção hidróxi são grupos de proteção éter tal como tetra-hidropiranila, alila, tritila, terc-butildimetilsilila, de preferência benzila. A clivagem de grupos de proteção hidróxi que podem estar presentes pode ser realizada de uma ma- neira conhecida per se, por exemplo, através de hidrólise ácida, por meio de ácidos Lewis ou, no caso de grupo benzila preferido, através de hidrogenólise.

Esquema 2

R

xN-As^NH2

R

r\

R

- N

R2a

agente de condensação

R

R

R1\ P HHO N-V^N

R2a

F li F

Ia

clivagem opcional de grupo(s) de proteção

R1s /? HHO / Η F

3 , fyW^

Esquema 3

HO

r1\ f HOvvSr°alquila

N-jVNH,

O O

R2a

Xlll

R3—<

R \ jι NHO / ,^OO

alquila

XlV

Rias

R3-^l

S mo v/ Η Joo

N

R2a

F r

Ia

V

clivagem opcional de ψ grupo(s) de proteção

„1a O . HO

κ \

R3-/ \\

•NVrVH

o O

Rh

R

IV

o' O ,,HO N-

R

Joo

R

1 ? R2 Um processo alternativo para a preparação de compostos de fórmula I pode ser seguido de acordo com o esquema 3, em que R11 R21 R1a, R2a1 R31 R4 e η são conforme acima descrito. Um composto de fórmula I po- de ser obtido como segue: a uma solução de um composto de fórmula Il ou Ila em tetra-hidrofurano é adicionado um composto de fórmula XIII, por e- xemplo, monometil éster de ácido 2-hidróxi-2-metil-malônico, hidrato de 1- hidroxibenzotriazol, cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida e N-etildiisopropilamina. Após agitar em temperatura ambiente da noite para o dia o solvente é removido através de destilação e o resíduo é purificado para obter compostos de fórmula XIV. Saponificação da função éster em compostos de fórmula XIV, de preferência usando condições básicas, dá o ácido carboxílico de fórmula IV, que por sua vez é tratado com 2,2,3,3,3- pentaflúor-propilamina (V) sob as condições de condensação já descritas acima para dar compostos de fórmula Ia ou I, respectivamente. Compostos de fórmula Ia em que grupos hidróxi estão presentes

em forma protegida podem ser transformados em compostos de fórmula I através de clivagem do(s) grupo(s) de proteção. Exemplos de grupos de pro- teção hidróxi são grupos de proteção de éter tal como tetra-hidropiranila, alila, tritila, terc-butildimetilsilila, de preferência benzila. A clivagem de grupos de proteção hidróxi que podem estar presentes pode ser realizada de uma maneira conhecida per se, por exemplo, através de hidrólise ácida, por meio de ácidos Lewis ou, no caso do grupo benzila preferido, através de hidroge- nólise.

Os sais de adição de ácido de compostos de fórmula I podem ser convertidos nas bases livres correspondentes através de tratamento com pelo menos um equivalente estequiométrico de uma base adequada tal co- mo hidróxido de sódio ou potássio, carbonato de potássio, bicarbonato de sódio, amônia e similares.

Compostos de fórmulas I e Ia podem também existir em forma opticamente pura. Separação em antípodos pode ser realizada de acordo com métodos conhecidos per se ou em um estágio inicial da síntese ou, de preferência, em um estágio posterior através de separação dos produtos diastereoméricos através de cromatografia, opcionalmente em fases quirais. Exemplo 1

2.2.2-triflúor-etil ésterde ácido (S)-7,8-diflúor-3-r(R ou S)-2-hidróxi-2-(2.2,3. 3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2,3.4,5-tetra-hidro- benzoíblM.41diazepina-1-carboxílico e 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)- 7,8-diflúor-3-f(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)- propionilaminol^-oxo^.S^.S-tetra-hidro-benzofblfl^ldiazepina-l- carboxílico

F

a) Ácido (S)-3-(2-amino-4.5-diflúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonilamino- propiônico e ácido 3-(4-amino-2.5-diflúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonil- amino-propiônico

F Quiral

Af

H2N^T o NH

>0ANVh

H O

Uma dispersão de 6,0 g (28,8 mmols) de ácido (S)-3-amino-2- terc-butoxicarbonilamino-propiônico em 190 ml de etanol foi tratada com 5,2 g (28,8 mmols) de 2,4,5-trifluornitrobenzeno e 4,0 g (28,8 mmols) de carbo- nato de potássio. A mistura de reação foi aquecida para 85°C sob agitação por 18 horas. Para o processamento, a solução de cor laranja foi completa- mente evaporada, o resíduo distribuído entre água (250 ml) e acetato de eti- Ia (250 ml) e, por isso, a camada aquosa re-extraída com acetato de etila (2 χ 250 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 χ 100 ml). As camada aquosas foram combinadas e o pH ajustado para 4,4.

15

20 Em seguida, a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (5 χ 250 ml), então as camadas orgânicas combinadas, secas em sulfato de sódio e eva- poradas sob pressão reduzida. A mistura de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonil- amino-3-(4,5-diflúor-2-nitro-fenilamino)-propiônico e ácido (S)-2-terc-butoxi- carbonilamino-3-(2,5-diflúor-4-nitro-fenilamino)-propiônico, 8,8 g de um sóli- do amarelo, foi empregada na etapa seguinte sem purificação adicional.

A mistura então obtida foi dissolvida em 250 ml de metanol e 0,52 g de paládio sobre carbono (10%) foi adicionado a ela. A mistura resul- tante foi agitada por 3 horas sob uma atmosfera de hidrogênio sob pressão ambiente. Para o processamento, a mistura foi filtrada e o filtrado foi evapo- rado sob pressão reduzida. Foram obtidos 7,97 g de uma mistura de ácido (S)-3-(2-amino-4,5-diflúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiônico e ácido 3-(4-amino-2,5-diflúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiô- nico como uma espuma escura que foi empregada na etapa seguinte sem purificação adicional.

b) terc-butil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-2-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-1H-benzo íbiri.41diazepin-3-il)-carbâmico

Uma solução de 7,97 g de uma mistura de ácido (S)-3-(2-amino- 4,5-diflúor-fenilaminoi)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiônico e ácido 3-(4- amino-2,5-diflúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiônico em 90 ml de Ν,Ν-dimetilformamida foi tratada consecutivamente com 10,2 g (77 mmols) de N-etildiisopropilamina, 3,6 g (26,5 mmols) de 1-hidroxibenzo- triazol e 5,2 g (26,5 mmols) de cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil- carbodiimida sob agitação a 0°C. Agitação foi continuada por 18 horas en- quanto a mistura de reação era deixada aquecer para temperatura ambiente. Para o processamento, a mistura de reação foi evaporada sob pressão re- duzida, em seguida, o resíduo foi tratado coma água e a fase aquosa extraí- da com acetato de etila (2 χ 400 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e evaporadas sob pressão reduzida. Para purificação, o sólido escuro obtido foi separado em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 50/50 como o eluente.

Foi obtido 1,4 g (18% de teoria) de terc-butil éster de ácido ((S)- 7,8-diflúor-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico como um sólido amarelo-claro; MS (m/e):314 ((M+H)+. c) 2,2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-7.8-diflúor- 4-oxo-2.3.4,5-tetra-hidro-benzoíb1f1,41diazepina-1-carboxílico

Quiral

Uma solução de 200 mg de terc-butil éster de ácido (S)-7,8- diflúor-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico em 6 ml de Ν,Ν-dimetilformamida foi tratada com 312 mg de carbonato de césio, 299 mg de 2,2,2-trifluoretil trifluormetanossulfonato e cerca de 200 mg de dióxido de carbono sólido. A mistura de reação foi agitada em um tubo ve- dado em temperatura ambiente por 4 horas. Para o processamento, o sol- vente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi distribuído entre 10 ml de uma solução de hidrogenocarbonato de sódio saturada e 30 ml de a- cetato de etila. A camada aquosa foi separada e extraída duas vezes com 30 ml de acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e evaporadas sob pressão reduzida. Para purificação, a es- puma amarelo-clara foi separada em sílica-gel usando um gradiente de hep- tano/acetato de etila=100/0 a 50/50 como o eluente. Foram obtidos 130 mg (46% de teoria) do composto do título [MS (m/e): 440 (M+H)+] e 127 mg de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-7,8-diflúor-4- oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carbo- xílico. MS (m/e): 522 (M+H)+] como o subproduto. d) Cloridrato de 2.2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-7.8-diflúor-4-oxo- 2.3.4.5-tetra-hidro-benzorbin,4ldiazepina-1-carboxílico

Quiral

/-NH2 __J CIH

Uma solução de 120 mg de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3- terc-butoxicarbonilamino-7,8-diflúor-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico em 4 ml de dioxano foi tratada com 0,27 ml de ácido clorídrico (37%). A mistura de reação foi aquecida para 50°C por 3 horas. Para o processamento, a mistura foi evaporada sob pres- são reduzida. O resíduo oleoso foi evaporado três vezes com 25 ml de tolu- eno para dar então quantitativamente o composto do título como um sólido amarelo-claro que foi empregado na etapa seguinte sem purificação adicio- nal; MS (m/e): 340 (M+H)+.

e) 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7.8-diflúor-3-r(R ou S)-2-hidróxi-2- (2,2,3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2,3.4,5-tetra- hidro-benzofbin,41diazepina-1-carboxílico e 2.2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7.8-diflúor-3-í(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)- propionilamino1-4-oxo-2.3,4,5-tetra-hidro-benzorb1í1,41diazepina-1- carboxílico

Uma solução de 103 mg de cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-7,8-diflúor-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4] dia- zepina-1-carboxílico em 6 ml de tetra-hidrofurano foi tratada consecutiva- mente com 80 mg de ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonâmico, 0,15 ml de N-etildiisopropilamina, 42 mg de 1-hidróxi- benzotriazol e 59 mg de cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodi- imida sob agitação a O0C. Agitação foi continuada por 18 horas enquanto a mistura de reação era deixada aquecer para temperatura ambiente. Para processamento, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi diretamente separado em sílica-gel usando um gradiente de hep- tano/acetato de etila=100/0 a 50/50 como eluente. Foram obtidos 65 mg (41% de teoria) de uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos co- mo uma espuma branca; MS (m/e): 587 (M+H)+.

Os dois epímeros foram parcialmente separados através de H- PLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 4:1 de heptano e etanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2,2,2-triflúor- etil éster de ácido (-)-(S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-penta- flúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4] diazepina-1-carboxílico como um sólido amarronzado [MS (m/e: 587 (M+H)+] e uma mistura 3:7 de 2,2,2-triflúor-etil ester do ácido (+)-(-)-(S)-7,8-diflúor-3- [(S e R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4- oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico como um sólido amarronzado; MS (m/e): 587 (M+H)+. Exemplo 2

2.2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-r(R ou S)-2-hidróxi-2- (2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-5-(2,2.2-triflúor- etiD-2.3,4,5-tetra-hidro-benzoíb1H ,41diazepina-1-carboxílico e 2.2.2-triflúor- etil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-r(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2.3.3.3-pentaflúor- propilcarbamoin-propionilamino1-4-oxo-5-(2.2,2-triflúor-etil)-2,3.4,5-tetra- hidro-benzolM1.41diazepina-1 -carboxílico

F

F F

a) terc-butil éster de ácido r(S)-7.8-diflúor-2-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etil)-2,3,4,5- tetra-hidro-1 H-benzoíblíl .41diazepin-3-ill-carbámico F Quiral

Uma solução de 200 mg de terc-butil éster de ácido ((S)-7,8- diflúor-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico em 7 ml de tetra-hidrofurano foi esfriada para -78°C sob uma atmosfera de ar- gônio. Em seguida, a solução foi tratada com 0,62 ml de bis(trimetilsilil)amida de lítio (solução 1M em tetra-hidrofurano), agitada por 30 minutos a -78°C, então aquecida para temperatura ambiente antes de 0,13 ml de 2,2,2- trifluoretil trifluormetanossulfonato ser adicionado à mistura de reação. Após agitar da noite para o dia em um frasco vedado, outro 0,05 ml de 2,2,2- trifluoretil trifluormetanossulfonato foi adicionado e a agitação continuada por 18 horas. Para o processamento, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi diretamente submetido à cromatografia em uma fase de Si-NH2 usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/30 como o eluente. Foram obtidos 193 mg (77% de teoria) do composto do título como uma espuma branca; MS 418 (M+Na)+. b) 2.2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-7,8-diflúor- 4-oxo-5-(2.2,2-triflúor-etil)-2,3.4.5-tetra-hidro-benzoíblí1,41diazepina-1- carboxílico

F Quiral

F

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1c), o terc-butil éster de ácido [(S)-7,8-diflúor-2-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5- tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico foi tratado com carbona- to de césio, dióxido de carbono sólido e trifluoretil trifluormetanossulfonato a 60°C por 18 horas em um frasco vedado para dar o composto do título (83% de teoria) como uma espuma branca; MS (m/e): 522 (M+H)+.

c) Cloridrato de 2.2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-7,8-diflúor-4-oxo- 5-(2,2,2-triflúor-etin-2.3.4,5-tetra-hidro-benzo[b1í1,41diazepina-1-carboxílico

F Quiral

F

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1d), o tratamento da 2,2,2-triflúor-etila do ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-7,8- diflúor-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina- 1-carboxílico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu o composto do títu- lo como uma espuma amarelo-clara; MS (m/e): 422 (M+H)+]. d) 2,2,2-Trifluoretil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-í(R ou S)-2-hidróxi-2- (2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-5-(2.2.2-triflúor- eti0-2.3.4.5-tetra-hidro-benzofb1f1 .41diazepina-1-carboxílico e 2.2.2-triflúor- etil éster de ácido (S)-7.8-diflúor-3-í(S ou R)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3.3-pentaflúor- propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-5-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4,5-tetra- hidro-benzorblf 1.41diazepina-1 -carboxílico

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1e) a condensação de cloridrato de 2,2,2-trifiúor-etil éster de ácido (S)-3-amino- 7,8-diflúor-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2)3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4] diaze- pina-1-carboxílico e ácido (RS )-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malônico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilamino- propil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mis- tura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca: MS

15

20 (m/e): 669 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 4:1 de heptano e isopropanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (-)-(S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil- carbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-

benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico como um sólido amarelo-claro [MS (m/e): 669 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (-)-(S)-7,8-diflúor-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcar- bamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo [b][1,4]diazepina-1-carboxílico como uma espuma amarelo-clara; MS (m/e): 669 (M+H)+. Exemplo 3

N-f(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2.2,2-triflúor-etin-2,3,4.5-tetra-hidro-1 H-benzorbIH .41 diazepin-3-ilHR ou S)-2-hidróxi-2-metil-N'-(2.2,3.3,3-pentaflúor-propil)-malo- namida e N-f(S)-7-flúor-4-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etin-2.3.4,5-tetra-hidro-1 H- benzolblíl .41diazepin-3-il1-(S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N'-(2.2,3,3,3-pentaflúor- propiP-malonamida

a) terc-butil éster de ácido (S)-8-flúor-2-oxo-2,3.4,5-tetra-hidro-1H-benzofbl [1,41diazepin-3-il)-carbâmico

Em analogia ao procedimento descrito no Exemplo 1b), a con- densação intramolecular de ácido (S)-3-(2-amino-4-flúor-fenilamino)-2-terc-

o

Quiral butoxicarbonilamino-propiônico com N-etildiisopropilamina, 1-hidróxi-benzo- triazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida deu o composto do título como um sólido amarelo; MS (m/e): 296 (M+H)+.

amino propiônico foi obtido em analogia ao procedimento descrito na US 6.239.131.

b) terc-butil ester do ácido r(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2,3,4.5- tetra-hidro-1 H-benzoíblH,41diazepin-3-ill-carbâmico

2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico, 3,0 g de hidro- genocarbonato de sódio e 8,5 g de 2,2,2-trifluoretil trifluormetanossulfonato em 10 ml de Ν,Ν-dimetilformamida foi aquecida a 60°C por 6 dias em um frasco vedado. Para o processamento, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em 100 ml de solução de hidro- genocarbonato de sódio saturada e 100 ml de acetato de etila. A camada aquosa foi extraída duas vezes com 100 ml de acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, então evaporadas sob pressão reduzida. Para purificação, o óleo marrom-claro foi separado em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/30 como o eluente. Foi obtido 0,86 g (32% de teoria) do composto do títu- lo como uma espuma branca; MS (m/e): 378 (M+H)+.

c) Cloridrato de (S)-3-amino-8-flúor-5-(2.2.2-triflúor-etil)-1.3.4.5-tetra-hidro- benzofblM .41diazepin-2-ona

Ácido (S)-3-(2-amino-4-flúor-fenilamino)-2-terc-butoxicarbonil-

o

Quirai

Uma mistura de terc-butil éster de ácido (S)-8-flúor-2-oxo-

H ,O Quiral Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1d), o tratamento do terc-butil éster de ácido [(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorí- drico (37%) em dioxano deu o composto do título como uma espuma mar- rom-clara; MS (m/e): 278 (M+H)+.

d)_N-r(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2.2,2-triflúor-etil)-2.3.4,5-tetra-hidro-1H-benzofb1

Γ1.41diazepin-3-ilHR ou S)-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2.3.3.3-Dentaflúor-proDin- malonamida e N-r(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4.5-tetra-hidro- 1 H-benzoíblM .41diazepin-3-in-(S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N'-(2.2.3.3.3- pentaflúor-propiD-malonamida

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1e), a condensação do cloridrato de (S)-3-amino-8-flúor-5-(2,2,2-triflúor-etil)-1,3,4, 5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e clori- drato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e): 525 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 4:1 de heptano e etanol co- mo o eluente dando o primeiro epímero de eluição N-[(S)-7-flúor-4-oxo-1- (2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-(R ou S)- 2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como uma es- puma branca [MS (m/e): 525 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição N- [(S)-7-flúor-4-oxo-1 -(2)2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]di- azepin-3-il]-(S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N,-(2I2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malona- mida como uma espuma branca [MS (m/e): 525 (M+H)+], Exemplo 4

(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-l"(S)-4-oxo-1 -(2.2,2-triflúor-etil)-2,3.4.5-tetra- hidro-1H-benzoíb1í1,41diazepin-3-il1-N'-(2,2.3.3.3-pentaflúor-propil)-malona- mida e (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-r(S)-4-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4.5- tetra-hidro-1H-benzofb1[1.41diazepin-3-in-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)- malonamida F

F

F

a) terc-butil ester do ácido r(S)-4-oxo-1-(2,2.2-triflúor-etil)-2.3.4.5-tetra-hidro- 1 H-benzoíblíl ,41diazepin-3-il1-carbâmico

terc-butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4] diaze- pin-3-il)-carbâmico foi tratado com 2,2,2-trifIuoretiI trifluormetanossulfonato na presença de hidrogenocarbonato de sódio em Ν,Ν-dimetilformamida a 60°C por 4 dias em um frasco vedado. Após separação de principalmente material de partida não-modificado através de cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/30 como o elu- ente, o composto do título foi obtido como um sólido branco em 22% de teo- ria; MS (m/e): 360 (M+H).

b) Cloridrato de (S)-3-amino-5-(2.2,2-triflúor-etil)-1,3,4,5-tetra-hidro-benzorbl Γ1.41diazepin-2-ona

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1 d), o tratamento do terc-butil éster de ácido [(S)-4-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5- tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorídrico

o

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 3b), o

o

Ouiral (37%) em dioxano deu o composto do título como um sólido amarelo-claro; MS (m/e): 260 (M+H)+.

c) (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-f(S)-4-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4.5-tetra- hidro-1H-benzofb1f1,41diazepin-3-in-N'-(2,2,3.3.3-pentaflúor-propil)-malona- mida e (S e R)-2-hidróxi-2-metil-N-f(S)-4-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4.5- tetra-hidro-1H-benzo[b1í1.41diazepin-3-in-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)- malonamida

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo, 1e), a condensação de cloridrato de (S)-3-amino-5-(2,2,2-triflúor-etil)-1,3,4,5- tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e clori- drato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e): 507 (M+H)+. Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma

fase quiral (ChiraIpakAD) usando uma mistura 4:1 de heptano e isopropanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição (R ou S)-2-hidróxi-2- metil-N-[(S)-4-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4] diazepin-3-il]-N,-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamidas como um sólido amarelo-claro [MS (m/e): 507 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H- benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como um sólido amarelo-claro [MS (m/e): 507 (M+H)+]. Exemplo 5

(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-f(S)-4-oxo-1-(3.3.3-triflúor-propil)-2.3.4.5-tetra- hidro-1H-benzo[blf1.4ldiazepin-3-in-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)-malona- mida e (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-r(S)-4-oxo-1-(3.3.3-triflúor-propil)-2.3.4.5- tetra-hidro-1H-benzo[b1[1.41diazeDin-3-il1-N'-(2.2.3.3,3-pentaflúor-propil)-

malonamida Quiral

a) terc-butil éster de ácido f(S)-4-oxo-1-(3.3,3-triflúor-propiO-2.3.4.5-tetra- hidro-1 H-benzoíblM .41diazepin-3-il1-carbâmico

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 3b, terc-butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4] diaze- pin-3-il)-carbâmico foi tratado com 1,1,1-triflúor-3-iodopropano e iodeto de lítio na presença de hidrogenocarbonato de sódio em Ν,Ν-dimetilformamida a 60°C por 10 dias em um frasco vedado. Após separação principalmente de material de partida não-mudado através de cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/30 com o elu- ente, o composto do título foi obtido como uma espuma branca [rendimento 26% de teoria; MS (m/e): 374 (M+H)+],

b) (S)-3-amino-5-(3,3,3-triflúor-propil)-1.3.4,5-tetra-hidro-benzorbl[1,41 diaze- pin-2-ona: Cloridrato

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1d), o tratamento do terc-butil éster de ácido [(S)-4-oxo-1-(3,3,3-triflúor-propil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorí- drico (37%) em dioxano deu o composto do título como um sólido esbranqui- çado; MS (m/e): 274 (M+H)+.

c) (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(3,3,3-triflúor-propil)-2.3,4.5-tetra- hidro-1H-benzofb1í1.41diazepin-3-il1-N'-(2.2.3.3,3-pentaflúor-propin-malona- mida e (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-r(S)-4-oxo-1-(3.3.3-triflúor-propil)-2.3,4.5- tetra-hidro-1 H-benzoíblM ,41diazepin-3-il1-N'-(2.2.3.3,3-pentaflúor-propil)- malonamida

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de (S)-3-amino-5-(3,3,3-triflúor-propil)-1,3,4,5- tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e clori- drato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e): 521 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados em sílica-gel usando um gradiente de heptano e acetato de etila 100/0 a 50/50 como o eluente dando o primeiro epímero de eluição (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1- (3,3,3-triflúor-propil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida [MS (m/e): 521 (M+H)+] e o segun- do epímero de eluição (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(3,3,3- triflúor-propil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonamida [MS (m/e): 507 (M+H)+], ambos como espuma branca. Exemplo 6

(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-f(S)-4-oxo-1 -(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra- hidro-IH-benzolMI .41diazepin-3-il1-N'-(2.2.3.3,3-pentaflúor-propin-malona- mida e (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-r(S)-4-oxo-1-(4.4.4-triflúor-butin-2.3.4.5- tetra-hidro-1 H-benzofblH.41diazepin-3-il1-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)- malonamida

a) terc-butil éster de ácido r(S)-4-oxo-1-(4.4.4-triflúor-butil)-2.3.4.5-tetra- hidro-1 H-benzofb1f1.41diazepin-3-il1-carbâmico ο

Quiral

F

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 3b), o

10

terc-butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4] diaze- pin-3-il)-carbâmico foi tratado com 4-bromo-1,1,1-triflúor-butano e iodeto de lítio na presença de hidrogenocarbonato de sódio em N,N-dimetilformamida a 60°C durante o final de semana em um frasco vedado. Após cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/30 como o eluente, o composto do título foi obtido como uma espuma branca [rendimento 84% de teoria; MS (m/e): 388 (M+H)+], b) Cloridrato de (S)-3-amino-5-(4.4.4-triflúor-butil)-1,3.4.5-tetra-hidro-benzo íblM ,41diazepin-2-ona

tratamento do terc-butil éster de ácido [(S)-4-oxo-1-(4,4,4-triflúor-butil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorí- drico (37%) em dioxano deu o composto do título como um sólido amarelo- claro; MS (m/e): 288 (M+H)+.

c) (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(4.4.4-triflúor-butin-2.3.4.5-tetra- hidro-1H-benzorb1H .41diazepin-3-in-N'-(2.2.3,3.3-pentaflúor-propil)-malona- mida e (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-f(S)-4-oxo-1-(4.4.4-triflúor-butin-2.3.4.5- tetra-hidro-1H-benzoíblf1.41diazepin-3-ill-N'-(2.2.3.3.3-Dentaflúor-propin-

O Quiral

N

Cl

F

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1d), o malonamida

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de (S)-3-amino-5-(4,4,4-triflúor-butil)-1,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N- (3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma esbranquiçada; MS (m/e): 535 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 4:1 de heptano e etanol co- mo o eluente dando o primeiro epímero de eluição (R ou S)-2-hidróxi-2-metil- N-[(S)-4-oxo-1 -(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4] diaze- pin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como uma espuma ama- relo-clara [MS (m/e): 535 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição (S ou R)-

2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H- benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N,-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como um sólido amarelo-claro [MS (m/e): 535 (M+H)+], Exemplo 7

(RS)-2-hidróxi-N-r(S)-1-(2-hidróxi-etin-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-1H-benzofbl [1 l41diazeDin-3-il1-2-metil-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)-malonamida

a) terc-butil éster de ácido r(S)-1-(2-benzilóxi-etilM-oxo-2.3A5-tetra-hidro- 1 H-benzo[b1f1.41diazepin-3-in-carbâmico Uma mistura de 500 mg de terc-butil éster de ácido (S)-2-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico, 303 mg de hi- drogenocarbonato de sódio, 271 mg de iodeto de lítio e 0,59 ml de 2-bromo- etiléter de benzila em 0,5 ml de Ν,Ν-dimetilformamida foi agitada a 60°C em um tubo vedado durante o final de semana. Para o processamento, a mistu- ra de reação foi tratada com 20 ml de solução de hidrogenocarbonato de sódio saturada e com 40 ml de acetato de etila. A camada aquosa foi sepa- rada e extraída duas vezes com 40 ml de acetato de etila. As camadas or- gânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e, em seguida, evapo- radas sob pressão reduzida. Após separação de material de partida não- modificado através de cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 60/40 como o eluente, 223 mg (30% de teoria) do composto do título foram obtidos como uma espuma branca; MS (m/e): 412 (M+H)+.

b) Cloridrato de (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi-etin-1,3,4.5-tetra-hidro-benzorb1 í1,41diazepin-2-ona

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- tamento do terc-butil éster de ácido [(S)-1-(2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5- tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu o composto do título como uma espuma amarelo- clara; MS (m/e): 312 (M+H)+.

c) N-r(S)-1-(2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2.3,4.5-tetra-hidro-1 H-benzoíblM,41 diaze- pin-3-in-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2.3.3.3-Dentaflúor-DroDin-malonamida

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi-etil)-1,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N- (3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como um sólido amarelo-claro; MS (m/e): 559 (M+H)+.

d) (RS)-2-hidróxi-N-í(S)-1 -(2-hidróxi-etil)-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-1 H-benzo rbin .41diazepin-3-in-2-metil-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil)-malonamida

Uma solução de 26 mg de N-[(S)-1-(2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2,3,4, 5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonamida em 2,0 ml de metanol foi tratada com 10 mg de paládio sobre carbono (10%) e agitada por 3 dias sob uma atmosfera de hidrogênio. Durante este período de tempo, o catalisador foi substituído três vezes após filtragem da mistura de reação em Dicalit. Para o processamento final, a mistura de reação foi filtrada em Dicalit e o solvente evaporado sob pressão reduzida. Após separação principalmente de material de partida não-modificado através de cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 20/80 como o eluente, 6 mg (29% de teoria) do composto do título foram obtidos como uma espuma branca; MS (m/e): 469 (M+H)+. Exemplo 8

(R ou S)-2-hidróxi-N-í(S)-5-(2-hidróxi-etil)-2-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etin-2,3.4,5-

tetra-hidro-1H-benzorbin.4ldiazepin-3-in-2-metil-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-

propiD-malonamida

a) terc-butil éster de ácido [(S)-5-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-1-(2.2.2-triflúor-etil)- 2.3.4.5-tetra-hidro-1 H-benzofb1f1.41diazepin-3-in-carbâmico

quilação do terc-butil éster de ácido [(S)-1-(2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5- tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com 2,2,2-trifluoretil tri- fluormetanossulfonato usando bis(trimetilsilil)amida de lítio (solução 1M em tetra-hidrofurano) como a base deu composto do título como uma espuma branca (rendimento 86% de teoria); MS (m/e): 494 (M+H)+. b^ Cloridrato de (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi-etin-1-(2.2.2-triflúor-etil)-1.3.4.5- tetra-hidro-benzoíblfl .41diazepin-2-ona

F

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 2a), a al- De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1 d), o tra- tamento do terc-butil éster de ácido [(S)-5-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-1-(2,2,2- triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu o composto do título como uma es- puma amarelo-clara: MS (m/e): 394 (M+H)+.

c) (R ou S)-N-í(S)-5-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-1-(2.2,2-triflúor-etil)-2.3.4.5-tetra- hidro-1H-benzorbiri^ldiazeDin-3-ill-2-hidróxi-2-metil-NW2,2.3.3.3-pentaflúor- propiD-malonamida e (S ou R)-N-f(S)-5-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-1 -(2.2.2- triflúor-etil)-2.3.4.5-tetra-hidro-1H-benzoíb1f1,41diazepin-3-il1-2-hidróxi-2-metil- N'-(2,2.3.3.3-pentaflúor-propiD-malonamida

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi-etil)-1-(2,2,2-triflúor- etil)-1,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2- metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com cloridrato de 1-hidroxi- benzotriazol e N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e): 641 (M+H)+. Os dois epímero separados através de HPLC em uma fase qui- ral (Chiralpak AD) usando uma mistura 85:15 de heptano e isopropanol co- mo o eluente dando o primeiro epímero de eluição (R ou S)-N-[(S)-5-(2- benzilóxi-etil)-2-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4] diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como um óleo viscoso amarelo-claro [MS (m/e): 639 (M-H)"] e o segundo epímero de eluição (S ou R)-N-[(S)-5-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-1-(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N'- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida como uma espuma amarelo-clara [MS (m/e): 639 (M-H)·].

d) (R ou SV2-hidróxi-N-f(S)-5-(2-hidróxi-etil)-2-oxo-1-(2.2,2-triflúor-etil)- 2,3.4,5-tetra-hidro-1 H-benzoíblf 1,41diazepin-3-il1-2-metil-N'-(2.2.3.3.3- pentaflúor-propiO-malonamida

Uma solução de 72 mg do primeiro epímero de eluição (R ou S)- N-[(S )-5-(2-benzi lóxi-eti I )-2-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H- benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)- malonamida em 3,0 ml de metanol foi tratada com 24 mg de paládio sobre carbono (10%) e agitada por 24 horas sob uma atmosfera de hidrogênio. Para o processamento, a mistura de reação foi filtrada em Dicalit e o solven- te evaporado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado através de cromatografia em sílica-gel usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 30/60 como o eluente e 46 mg (79%) de teoria do composto do título foram obtidos como uma espuma branca; MS (m/e): 551 (M+H)+. Exemplo 9

(R ou S)-2-hidróxi-N-í(S)-1 -(2-hidróxi-etin-2-oxo-5-(2.2.2-triflúor-etin-2.3.4.5- tetra-hidro-1 H-benzo[b1[1,41diazepin-3-il1-2-metil-N'-(2,2.3,3.3-pentaflúor-pro- pil)-malonamida ο

Quiral

F

F

5

10

a) terc-butil éster de ácido ri-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2.2-triflúor-etin- 2,3 A5-tetra-hidro-1 H-benzoíblM .41diazepin-3-in-carbâmico

quilação do terc-butil éster de ácido [(S)-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5- tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico [Exemplo 4a] com 2- bromoetiléter de benzila na presença de iodeto de lítio e usando bis (trimetil- silil)amida de lítio (solução a 1M em tetra-hidrofurano) como a base deu o composto do título isomerizado (55,4:44,6) como um óleo viscoso incolor (rendimento 75% de teoria); MS (m/e): 494 (M+H)+. b) Cloridrato de 3-amino-1-(2-benzilóxi-etil)-5-(2,2,2-triflúor-etil)-1.3.4.5-tetra- hidro-benzoíbin.41diazepin-2-ona

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 2a), a al- De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- tamento do terc-butil éster de ácido [1-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor- etiI)-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu quantitativamente o composto do título co- mo um sólido amarelo-claro; MS (m/e): 294 (M+H)+. c) Ν-Γ1 -(2-benzilóxi-etin-2-oxo-5-(2.2.2-triflúor-etin-2,3,4.5-tetra-hidro-1 H- benzorbiri.41diazepin-3-ill-2-hidróxi-2-metil-N'-(2.2.3.3.3-pentaflúor-DroDin- malonamida (racemato diast.)

F

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 3-amino-1-(2-benzilóxi-etil)-5-(2,2,2-triflúor- etil)-1,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepin-2-ona e ácido (RS)-2-hidróxi-2- metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura dos quatro compostos do título epiméricos como uma espuma branca: MS (m/e): 641 (M+H)+.

Os quatro epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 80:20 de heptano e isopro- panol como o eluente e foram obtidos na ordem que segue:

(R ou S)-(-)-N-[(S)-1 -(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)- 2,3,4>5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3 ,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida; [>99,5% d.e.; MS (m/e): 641 (M+H)+];

(R ou S)-(+)-N-[(R)-1 -(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N'- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida[99,3% d.e.; MS (m/e): 641 (M+H)+];

(S ou R)-(+)-N-[(R)-1 -(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etiI)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2,3,3I 3-pentaflúor-propil)-malonamida[87,2% d.e.; MS (m/e): 641 (M+H)+];

(S ou R)-(-)-N-[(S)-1 -(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)- 2>3^,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N,-(2,2,3, 3,3-pentaflúor-propil)-malonamida; [>99,5% d.e.; MS (m/e): 641 (M+H)+] co- mo uma espuma branca cada.

d) (R ou S)-2-hidróxi-N-f(S)-1-(2-hidróxi-etin-2-oxo-5-(2.2.2-triflúor-etin-2.3,4. 5-tetra-hidro-1 H-benzoíb1í1.41diazepin-3-in-2-metil-N'-(2.2,3,3,3-pentaflúor- propiD-malonamida

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 8d), a hidrogenólise do primeiro epímero de eluição (R ou S)-(-)-N-[(S)-1-(2-benzi- lóxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diaze- pin-3-il]-2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonamida usando paládio sobre carbono (10%) como catalisador deu o composto do título co- mo uma espuma branca (rendimento 75% de teoria); MS (m/e): 551 (M+H)+. Exemplo 10

2,2.2-triflúor-etil éster de ácido (SK3-KR ou S)-2-hidróxi-2-(2,2.3,3.3-penta- flúor-propilcarbamoil)-propionilaminol-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzorbin.41 diazepina-1-carboxílico e 2.2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-í(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2.3,3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2.3.4. 5-tetra-hidro-benzorblH ,41diazepina-1 -carboxílico

a) 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4-oxo- 2.3,4,5-tetra-hidro-benzo[bin ,41diazepina-1-carboxílico e 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-

2,3,4,5-tetra-hidro-benzofblfl ,41diazepina-1 -carboxílico Quiral

Quiral

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1c), o terc-

butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3- il)-carbâmico foi tratado com trifluormetanossulfonato de 2,2,2-trifluormetila, carbonato de césio e dióxido de carbono sólido em DMF para dar após cro- matografia o 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino- 4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico como uma es- puma branca [rendimento 68% de teoria; MS (m/e): 404 (M++H)+ e o 2,2,2- triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4-oxo-5-(2,2,2- triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico como um sólido branco [rendimento 18% de teoria; MS (m/e): 486 (M+H)+]. b) Cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-4-oxo-2,3,4.5- tetra-hidro-benzofbin ,41diazepina-1 -carboxílico

tamento do 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4- oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico com ácido clorí- drico (37%) em dioxano deu (98% de teoria) o composto do título como um sólido esbranquiçado; MS (m/e): 304 (M+H)+.

c) 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-í(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2.3,3,3- pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo [blf1,41diazepina-1-carboxílico e 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-

ClH

F

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- 2.3,4.5-tetra-hidro-benzoíbin ,41diazepina-1-carboxílico

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-4- oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico e ácido (RS)-2- hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi- benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodiimida co- mo os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 de compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e): 551 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 85:15 de heptano e etanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)- propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxíli- co como uma espuma amarela [MS (m/e): 551 (M+H)+] e o segundo epíme- ro de eluição 2,2,2-triluor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico como uma espuma branca [MS (m/e): 551 (M+H)+], Exemplo 11

2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-f(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2.3.3.3-penta- flúor-propilcarbamoin-propionilaminol-4-oxo-5-(2.2,2-triflúor-etil)-2,3.4,5-tetra- hidro-benzoíb1f1,41diazepina-1-carboxilico e 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionil- amino1-4-oxo-5-(2.2,2-triflúor-etil)-2,3.4,5-tetra-hidro-benzofblf1,41diazepina- 1-carboxílico

f f Quiral

a) Cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-4-oxo-5-(2.2.2- triflúor-etil)-2,3.4.5-tetra-hidro-benzorb1f1,41diazeDina-1-carboxílico

F

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- tamento do 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4- oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico [Exemplo 10a)] com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu (93% de teoria) o composto do título como um sólido amarelo-claro; MS (m/e): 386 (M+H)+.

b) 2.2.2-triflúor-etil ester do ácido (S)-3-í(R ou S)-2-hidróxi-2-(2.2,3.3.3-pen- taflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2.3,4.5- tetra-hidro-benzofbin.41diazepina-1-carboxílico e 2,2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-í(S ou R)-2-hidróxi-2-(2.2,3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoin- propionilaminol-4-oxo-5-(2.2.2-triflúor-etil)-2,3.4.5-tetra-hidro-benzoíb1í1.41 diazepina-1 -carboxílico

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-4- oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxí- Iico e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidroxibenzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil- carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 dos compostos do título epiméricos como uma espuma branca; MS (m/e); 633 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralcel OD) usando uma mistura 90:10 de heptano e isopropa- nol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarba- moil)^ropionilamino]-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b]

[1,4]diazepina-1-carboxílico como uma espuma amarelo-clara [MS (m/e): 633 (M+H)+ e o segundo epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionil- amino]-4-oxo-5-(2,2)2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-

1-carboxílico como uma espuma branca [MS (m/e): 633 (M+H)+], Exemplo 12

2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etin-3-r(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2.3,3,3-pentaflúor-proDilcarbamoin-Dropionilamino1-4-oxo-2.3,4.5-tetra-

hidro-benzorblH .4ldiazepina-1 -carboxílico

F

a) terc-butil éster de ácido í(S)-1-(2-benzilóxi-etil)-2-oxo-2.3.4,5-tetra-hidro- 1 H-benzoíbin .41diazepin-3-in-carbâmico

Uma solução de 2,0 g de terc-butil éster de ácido (S)-2-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il)-carbâmico em 70 ml de te- tra-hidrofurano foi esfriada para -78°C sob uma atmosfera inerte e tratada com 10,1 ml de uma solução a 1M de bis(trimetilsilil)amida de lítio em tetra- hidrofurano. Agitação a -78°C foi continuada por 30 minutos antes da mistura de reação ser aquecida para temperatura ambiente. Após a adição de 2,24 ml de 2-bromoetiléter de benzila e 1,38 g de iodeto de lítio, a mistura de rea- ção foi agitada em temperatura ambiente por 5 dias. Para o processamento, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi dire- tamente submetido à purificação através de cromatografia em uma fase de Si-NH2 (ISOLUTE®) usando um gradiente de heptano/acetato de etila=100/0 a 50/50 como o eluente. Foi obtido 0,716 g (24% de teoria) do composto do título como uma espuma branca; MS (m/e): 412 (M+H)+. b) 2.2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-terc-butoxicarbo- nilamino-4-oxo-2,3.4.5-tetra-hidro-benzorbiri .41diazepina-1-carboxílico

benzilóxi-etil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâ- mico em 6 ml de Ν,Ν-dimetilformamida foi tratada com 477 mg de carbonato de césio, 350 mg de trifluormetanossulfonato de 2,2,2-trifluoretila e cerca de 300 mg de dióxido de carbono sólido. A mistura de reação foi agitada em um tubo vedado a 60°C por 18 horas. Para o processamento, o solvente foi e- vaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi distribuído entre 10 ml de uma solução de hidrogenocarbonato de sódio saturada e 30 ml de acetato de etila. A camada aquosa foi separada e extraída duas vezes com 30 ml de acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e evaporadas sob pressão reduzida. Para purificação, o óleo mar- rom-claro foi separado em sílica-gel usando um gradiente de hepta- no/acetato de etila=100/0 a 60/20 como o eluente. Foram obtidos 325 mg (83% de teoria) do composto do título como uma espuma branca [MS (m/e): 538 (M+H)+],

Uma solução de 301 mg de terc-butil éster de ácido [(RS)-I-(2- c) Cloridrato de 2.2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi- etil)-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-benzorb1í1.4ldiazeDina-1-carboxílico

^ yr.

1 \ CIH

Uro^p

O nF

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- tamento do 2,2,2-trifIúor-etiI éster de ácido (RS)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-terc- butoxicarbonilamino-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu quantitativamente o composto do título como uma espuma amarelo-clara; MS (m/e): 438 (M+H)+.

d) 2,2.2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-r(R ou S)-2-hidró- xi-2-(2.2.3,3.3-pentaflúor-propilcarbamoin-propionilamino1-4-oxo-2.3.4.5- tetra-hidro-benzolM1.41diazepina-1 -carboxílico e 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-í(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3.3.3-pentaflúor- propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2,3.4.5-tetra-hidro-benzoíbin.41 dia- zepina-1 -carboxílico

q

O

; o

nJ<T f

' vF

F

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-amino-5- (2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxíli- co e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil- carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 45,5: 5,1:

5

10 43,6 dos compostos do título parcialmente epimerizados como uma espuma branca; MS (m/e): 685 (M+H)+.

Os dois epímeros principais foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralcel OD) usando uma mistura 95:5 de heptano e etanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pen- taflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b] [1,4]diazepina-1-carboxílico [rendimento: 35% de teoria; MS (m/e): 685 (M+H)+] e o último epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5- (2-benzilóxi-etil)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarba- moil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico como uma espuma branca [rendimento: 40% de teoria; MS (m/e): 685 (M+H)+] ambos como uma espuma esbranquiçada. e) 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-KS ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoin-propionilamino1-4-oxo-2.3.4.5-tetra- hidro-benzo[biri .41diazepina-1 -carboxílico

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 8d), a hidrogenólise do último epímero de eluição 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcar- bamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico usando paládio sobre carbono (10%) como o catalisador deu o composto do título como uma espuma branca (rendimento 79% de teoria); MS (m/e): 595 (M+H)+. Exemplo 13

4.4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-f(R ou S)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3.3- pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-5-(4.4,4-triflúor-butil)-2,3,4. 5-tetra-hidro-benzo[biri.41diazepina-1 -carboxílico e 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-KS ou R)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)- propionilamino1-4-oxo-5-(4.4,4-triflúor-butin-2.3,4,5-tetra-hidro-benzo[biri,41 diazepina-1 -carboxílico Quiral

F,

F

a) 4.4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4-oxo-5- (4,4,4-triflúor-butin-2.3.4,5-tetra-hidro-benzofb1f1,41diazepina-1-carboxílico

butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3- il)-carbâmico foi tratado com 4-bromo-1,1,1-triflúor-butano, iodeto de lítio, carbonato de césio e dióxido de carbono sólido em DMF para dar após cro- matografia o 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino- 4-oxo-5-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico como uma espuma branca [rendimento 26% de teoria; MS (m/e): 542 (M+H)+] e o terc-butil éster de ácido [(S)-4-oxo-1-(4,4,4-triflúor-butil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-carbâmico [rendimento 17% de teoria; MS (m/e): 388 (M+H)+],

b) Cloridrato de 4.4.4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-amino-4-oxo-5-(4.4,4- triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[bl[1,4ldiazepina-1-carboxílico

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra- tamento do 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1c), o terc-

F

HniraI

F 4-oxo-5-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1- carboxílico com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu quantitativamente o composto do título como uma espuma branca; MS (m/e): 442 (M+H)+. c) 4.4.4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-f(R ou S)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3,3r pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilaminoM-oxo-5-(4.4,4-triflúor-butil)-

2,3A5-tetra-hidro-benzofb1f1,4ldiazepina-1-carboxílico e (S)-3-KS ou R)-2_r hidróxi-2-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoin-propionilamino1-4-oxo-5- (4.4.4-triflúor-butin-2.3.4.5-tetra-hidro-benzorb1f1.41diazepina-1-carboxílico

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-amino-4- oxo-5-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3)4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carbo- xílico e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2I2,3)3,3-pentaflúor-propil)-malonâ- mico com 1-hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'- etil-carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 do composto do título como uma espuma branca; MS (m/e): 689 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 70:30 de heptano e isopro- panol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarba- moil)-propionilamino]-4-oxo-5-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b] [1,4]diazepina-1-carboxílico [rendimento: 42% de teoria; MS (m/e): 689 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propílcarbamoil)-propionil- amino]-4-oxo-5-(4,4,4-triflúor-butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina- 1-carboxílico [rendimento: 42% de teoria; MS (m/e): 689 (M+H)+] ambos co- mo uma espuma amarelo-clara. Exemplo 14

2-hidróxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-f(S ou R)-2-hidróxí-2- (2.2.3.3.3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzofbin ,41diazepina-1 -carboxílico ο

Quiral

O

F

a) 2-benzilóxi-etil éster de ácido (SV5-(2-benzilóxi-etilV3-tero-butoxicar- bonilamino-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-benzorb1í1.41diazepina-1-carboxílico

butil éster de ácido (S)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3- il)-carbâmico foi tratado com (2-bromo-etoximetil)-benzeno, iodeto de lítio, carbonato de césio e dióxido de carbono sólido em DMF para dar após cro- matografia o 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-terc-buto- xicarbonilamino-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxíli-

co como um óleo viscoso incolor [rendimento 31% de teoria; MS (m/e): 590 (M+H)+ e o 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-3-terc-butoxicarbonilamino-4- oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico [rendimento 19% de teoria; MS (m/e): 456 (M+H)+como uma espuma branca. b) Cloridrato de 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-3-amino-5-(2-benzilóxi- etil)-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-benzofb1f1.41diazepina-1-carboxílico

Quiral

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1c), o terc- Quiral

q

teaC

o

o

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1d), o tra-

tamento do 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-terc-buto- xicarbonilamino-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxíli- co com ácido clorídrico (37%) em dioxano deu quantitativamente o composto do título como um óleo amarelo-claro viscoso; MS (m/e): 490 (M+H)+.

c) 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etiO-3-r(R ou S)-2-hidróxi- 2-(2.2.3,3.3-pentaflúor-propilcarbamoin-propionilamino1-4-oxo-2.3,4.5-tetra- hidro-benzorbin.41diazepina-1-carboxílico e 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-í(S ou R)-2-hidróxi-2-(2.2.3.3.3-pentaflúor-propil- carbamoil)-propionilamino1-4-oxo-2.3.4.5-tetra-hidro-benzoíb1f1.41diazepina- 1-carboxílico

De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 1e), a condensação de cloridrato de 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-3-amino-5- (2-benzilóxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxí-

o Iico e ácido (RS)-2-hidróxi-2-metil-N-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)-malonâmico com 1 -hidróxi-benzotriazol e cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil- carbodiimida como os agentes de condensação deu uma mistura 1:1 do composto do título como um óleo viscoso incolor; MS (m/e): 737 (M+H)+.

Os dois epímeros foram separados através de HPLC em uma

fase quiral (Chiralpak AD) usando uma mistura 80:20 de heptano e etanol como o eluente dando o primeiro epímero de eluição 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi-etil)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4] dia- zepina-1-carboxílico [rendimento: 35% de teoria; MS (m/e): 737 (M+H)+] e o segundo epímero de eluição 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi- etil)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionil- amino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico [rendi- mento: 42% de teoria; MS (m/e): 737 (M+H)+] ambos como um sólido branco. d) 2-hidróxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-r(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilaminol-4-oxo-2.3,4.5-tetra- hidro-benzofblH ,41diazepina-1 -carboxílico

Em um procedimento análogo àquele descrito no Exemplo 7d), o segundo epímero de eluição 2-benzilóxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-benzilóxi- etil)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionil- amino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico foi tra- tado com paládio sobre carbono (10%) como o catalisador e agitado por 7 dias sob uma atmosfera de hidrogênio. Durante este período de tempo, o catalisador foi substituído três vezes após filtragem da mistura de reação em Dicalit. O composto do título foi obtido como uma espuma branca (rendimen- to 66% de teoria); MS (m/e): 557 (M+H)+.

Os compostos de fórmula I e seus sais de adição farmaceutica- mente úteis possuem propriedades farmacológicas valiosas. Especificamen- te, foi constatado que os compostos da presente invenção podem inibir a γ- secretase.

Os compostos foram investigados de acordo com o teste dado a

seguir. Descrição do ensaio de γ-secretase

A atividade dos compostos de teste pode ser avaliada em ensai- os que medem a clivagem proteolítica de substratos adequados pela ativida- de de γ-secretase. Esses podem ser ensaios celulares em que, por exemplo, um substrato da γ-secretase é fundido em seu domínio citoplásmico a um fator de transcrição. Células são transfectadas com este gene de fusão e um gene-repórter, por exemplo, Iuciferase de vaga-lume, cuja expressão é au- mentada pelo fator de transcrição. Clivagem do substrato fundido pela γ- secretase levará à expressão do gene repórter que pode ser monitorada em ensaios apropriados. A atividade de γ-secretase pode ser também determi- nada em ensaios in vitro livres de célula em que, por exemplo, um Iisato de célula contendo o complexo de γ-secretase é incubado com um substrato derivado de APP adequado que é clivado para os peptídeos Abeta. A quan- tidade de peptídeos produzida pode ser determinada com ensaios ELISA específicos. As linhagens de célula de origem neuronal secretam peptídeos Abeta que podem ser medidos com ensaio ELISA específico. Tratamentos com compostos que inibem γ-secretase levam a uma redução de Abeta se- cretado então provendo uma medida de inibição.

O ensaio in vitro de atividade de γ-secretase usa uma fração de membrana HEK293 como uma fonte de γ-secretase e um substrato de APP recombinante. O último consiste nos 100 aminoácidos C-terminais de APP humana fundidos a um filamento de 6xHistidina para purificação que é ex- presso em E. coli em um vetor de expressão regulável, por exemplo, pEtl5. Esta proteína recombinante corresponde ao fragmento de APP truncada que resulta após a clivagem de γ-secretase do domínio extracelular e que consti- tui o substrato de γ-secretase. O princípio do ensaio é descrito em Li, Y.M. e outros, PNAS 97(11), 6138-6143 (2000). Células Hek293 foram mecanica- mente rompidas e a fração microssomal é isolada através de centrifugação diferencial. As membranas são solubilizadas em detergente (CHAPSO 0,25%) e incubadas com substrato de APP. Os peptídeos beta que são pro- duzidos pela clivagem de γ-secretase do substrato são detectados através de ensaios ELISA específicos conforme descrito (Brockhaus, M. e outros, Neuroreport 9(7), 1481-1486 (1998).

Os compostos preferidos mostram uma IC50<100 (nM). Na lista abaixo são descritos os dados para a inibição de γ-secretase:

N0 do Exemplo IC50 in vitro (nM) N0 do Exemplo IC5O in vitro (nM) 1 81 8 24 2 14 9 6 3 8 10 6 4 16 11 9 2 12 11 6 2 13 15 7 29 14 16

Ainda, os compostos da presente invenção foram testados em um ensaio THESA para determinação da solubilidade termodinâmica. Ensaio THESA:

Aproximadamente 2 mg de cada composto foram adicionados em excesso a um tampão de fosfato a 50 mM, em temperatura ambiente (22,5 ±1°C). Cada amostra foi posta em um tubo de microanálise, que foi sonificado por 1 hora e agitado por 2 horas. Todas as suspensões foram deixadas da noite para o dia. No dia seguinte todos os pHs foram medidos com um medidor de pH e as amostras filtradas com uma placa de filtro mi- cronic (MSGVN2250) para separar o material sólido da solução. Então, to- das as soluções foram analisadas através de HPLC. A linha de calibragem foi estabelecida através de concentrações diferentes do composto em DM- SO. A partir desta equação de regressão, a solubilidade do composto foi de- terminada.

N0 do THESA N0 do THESA Exemplo (Mg/ml) Exemplo (Mg/ml) 1 77 9 1781 67 10 74 6 124 12 3226 8 2671 14 5184 Os compostos de fórmula I da presente invenção são caracteri- zados mais pela alta estabilidade metabólica. Este parâmetro é um pré- requisito para boa disponibilidade, que é necessária para se obter medica- mentos com atividade in vivo aceitável. A estabilidade metabólica foi testada através do método que segue: Incubação de microssoma

Misturas de incubação consistiam em microssomos de fígado (rato 1,0 mg prot/mL ou ser humano 2,0 mg prot/mL), composto de teste a μΜ, MgCI2 (3,3 mM) e um sistema de regeneração NADPH consistindo em glicose-6-fosfato desidrogenase, NADPH e glicose-6-fosfato (equivalente a NADPH a 1 mM) em um volume total de 1,0 mL de tampão de fosfato de potássio a 100 mM, pH 7,4. As reações foram iniciadas através da adição do sistema de regeneração NADPH a 37°C. No tempo de 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25 e 29 minutos uma alíquota de 5 μΙ_ foi diretamente analisada em um sistema HPLC-MS/MS consistindo em uma bomba quaternária HP 1100 com desga- seificador e um espectrômetro MS/MS PE-Sciex API-2000. A coluna analíti- ca era uma Waters Symmetry Shield RP8 (2,1 *50 mm com um tamanho de partícula de 3,5 μΜ). Um gradiente não-linear de polaridade da fase A (Me- OH/Ac. Form.1 % 20/80) para fase B (MeOH) foi aplicado por um tempo total de atividade de 2 minutos em uma taxa de fluxo de 0,25 mL/min. O espec- trômetro MS/MS PE-Sciex API-2000 foi usado para detecção do composto de origem. Liberação metabólica in vivo foi prevista de acordo com procedi- mentos publicados [Houston, Biochem. Pharmacoi 47:1469-1479 (1994)]. Resumindo, a liberação intrínseca (Liberação, vide tabela abaixo) é calcula- da a partir da meia-vida in vitro medida levando em consideração volume de incubação e proteína microssomal usada para a incubação in vitro. A libera- ção intrínseca é expressa em termos de μΙ/min/mg de proteína microssomal. Para extrapolações in vivo, a razão de extração hepática (E) foi calculada. Aqui é relatado o valor de % de MAB que é igual a 1-E. Os valores de MAB (biodisponibilidade máxima que pode ser atingida) expressam a biodisponibi- Iidade máxima que alguém pode conseguir com os valores de liberação da- dos. Exemplo Liberação Intrínseca (camundongo) (μΙ/min/mg) MAB (camun- dongo) Liberação intrínseca (humano) (μΙ/min/mg) MAB (humano) 1 22,4 58,5% 0,05 99,7% 2 6,5 83,0% 13,1 54,3% 3 125,7 20,1% 11,9 56,7% 4 129,6 19,6% 12,5 55,5% 261,6 10,8% 18,6 45,5% 6 94,9 25,0% 15,9 49,4% 7 32,5 49,3% 5,2 74,9% 8 52,7 37,5% 0 100,0% 9 65,2 32,7% 2,1 88,2% 5,4 85,5% 0 100,0% 11 10,6 74,9% 0 100,0% 12 0,9 97,2% 2,9 84,3% 13 0 100 2,2 87,4% 14 12,3 72,1 13,6 53,3%

A vantagem de compostos descritos pela fórmula I da presente invenção é sua atividade muito boa para inibição de γ-secretase, uma boa atividade in vivo, uma boa solubilidade termodinâmica e biodisponibili- dade se comparado com compostos com estruturas similares ou estruturas conhecidas na técnica (W02005/023772), conforme mostrado na tabela abaixo:

Estrutura Livre de célula IC50 (nM) THESA (Mg/ml) MAB (camun- dongo) MAB (humano) cPV- J O V-N c oo o Scp V fcf· Exemplo 109 da W02005/023772 48 n.t. 47,6 % 26,8 % Estrutura Livre de célula IC50 (nM) THESA (Mg/ml) MAB (camun- dongo) MAB (humano) CF3 cPh- Á ° F < F CF3 CF3 Composto relacionado à estrutura para Exemplo 11 37 16 28,4 % 19,6% H o OO-1U. J ° F F3C O F CF3 Composto relacionado à estrutura para Exemplo 4 114 <1 21,8% 43,1 % J O >-N F3C 0 ^f F CF3 Exemplo 4 da presente invenção 16 n.t. 19,6% 55,5 % A 0 λ-Ν P ° ,o 0 ^ < F CF3 CF3 Exemplo 11 da presente invenção 9 37 74,9 % 100,0%

Os compostos de fórmula I e os sais farmaceuticamente aceitá-

veis dos compostos de fórmula I podem ser usados como medicamentos, por exemplo, na forma de preparações farmacêuticas. As preparações far- macêuticas podem ser administradas oralmente, por exemplo, na forma de comprimidos, comprimidos revestidos, drágeas, cápsulas de gelatina dura e mole, soluções, emulsões ou suspensões. A administração pode, no entan- to, ser também realizada retalmente, por exemplo, na forma de supositórios, parenteralmente, por exemplo, na forma de soluções de injeção.

Os compostos de fórmula I podem ser processados com veícu- los farmaceuticamente inertes, inorgânicos ou orgânicos para a produção de preparações farmacêuticas. Lactose, amido de milho ou derivados dos mesmos, talco, ácidos esteáricos ou seus sais e similares podem ser usa- dos. Por exemplo, como tais veículos para comprimidos, comprimidos reves- tidos, drágeas e cápsulas de gelatina dura. Veículos adequados para cápsu- las de gelatina mole são, por exemplo, óleos vegetais, ceras, gorduras, poli- óis semi-sólidos e líquidos e similar. Dependendo da natureza da substância ativa quaisquer veículos são, no entanto, geralmente requeridos no caso de cápsulas de gelatina mole. Veículos adequados para a produção de solu- ções e xaropes são, por exemplo, água, polióis, glicerol, óleo vegetal e simi- lares. Veículos adequados para supositórios são, por exemplo, óleos natu- rais ou endurecidos, ceras, gorduras, polióis semi-líquidos ou líquidos e simi- lares.

As preparações farmacêuticas podem, além disso, conter con- servantes, solubilizantes, estabilizantes, agentes umectantes, emulsificantes, adoçantes, corantes, aromatizantes, sais para variação da pressão osmóti- ca, tampões, agentes de mascaramento ou antioxidantes. Eles podem tam- bém conter ainda outras substâncias terapeuticamente valiosas.

Medicamentos contendo um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo terapeuticamente iner- te são também um objeto da presente invenção, assim como um processo para sua produção, que compreende trazer um ou mais compostos de fór- mula I e/ou sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis e, se de- sejado, uma ou mais outras substâncias terapeuticamente valiosas em uma forma de administração galênica junto com um ou mais veículos terapeuti- camente inertes.

De acordo com a invenção, compostos de fórmula I bem como seus sais farmaceuticamente aceitáveis são úteis no controle ou prevenção de doenças com base ria inibição das γ-secretases, tal como doença de Al- zheimer.

A dosagem pode variar dentro de limites amplos e vai, com cer- teza, ter que ser ajustada para as necessidades individuais em cada caso particular. No caso de administração oral, a dosagem para adultos pode va- riar de a partir de cerca de 0,01 mg a cerca de 1000 mg por dia de um com- posto de fórmula geral I ou da quantidade correspondente de um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo. A dosagem diária pode ser administrada como dose única ou em doses divididas e, ainda, o limite superior pode ser também excedido quando isto for verificado ser indicado.

Formulação de Comprimido (Granulacão a Úmido) Item Ingredientes mg/comprimido

5 mg 25 mg 100 mg 500 mg 1. Composto de fórmula I 5 25 100 500 2. Lactose Anidra DTG 125 105 30 150 3. Sta-Rx 1500 6 6 6 30 4. Celulose Microcristalina 30 30 30 150 5. Estearato de Magnésio 1 1 1 1 Total 167 167 167 831

Procedimento de Fabricação

1. Misturar os itens 1, 2, 3 e 4 e granular com água purificada.

2. Secar os grânulos a 50°C.

3. Passar os grânulos por equipamento de moagem adequado.

4. Adicionar o item 5 e misturar por três minutos; comprimir em uma

prensa adequada.

Formulação de Cápsula Item Ingredientes mg/cápsula

5 mg 25 mg 100 mg 500 mg 1. Composto de fórmula I 5 25 100 500 2. Lactose Anidra 159 123 148 — 3. Amido de Milho 25 35 40 70 4. Talco 10 15 10 25 Item Ingredientes mg/cápsula

5. Estearato de Magnésio 12 2 5

Total 200 200 300 600

Procedimento de Fabricação 1. Misturar os itens 1, 2 e 3 em um misturador adequado por 30 minu- tos.

2. Adicionar os itens 4 e 5 e misturar por 3 minutos.

3. Encher em cápsulas adequadas.

Claims (13)

1. Compostos de fórmula geral <formula>formula see original document page 57</formula> em que R1 é hidrogênio, alquila inferior substituída por halogênio ou alquila infe- rior substituída por hidróxi; R2 é alquila inferior substituída por halogênio ou alquila inferior substitu- ída por hidróxi ou é -COO(CH2)nR5 e R5 é hidróxi para η = 2 ou 3 ou é alquila inferior substituída por halogê- nio para η = 1, 2 ou 3; R3/R4 são independentemente um do outro hidrogênio ou halogênio; e sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, enantiômeros opti- camente puros, racematos ou misturas diastereoméricas dos mesmos.

2. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 1, em que R2 é alquila inferior substituída por halogênio.

3. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 2, em que os compostos são N-[(S)-7-flúor-4-oxo-1-(2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H- benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-(R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1 -(2,2,2-triflúor-etil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida (S ou R)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1 -(3,3,3-triflúor-propil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida (R ou S)-2-hidróxi-2-metil-N-[(S)-4-oxo-1 -(4,4,4-triflúor-butil)- 2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-N,-(2,2,3,3,3-pentaflúor- propil)-malonamida ou (R ou S)-2-hidróxi-N-[(S)-1 -(2-hidróxi-etil)-2-oxo-5-(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,^ pentaflúor-propil)-malonamida.

4. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 1, em que R2 é alquila inferior substituída por hidróxi.

5. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 4, em que os compostos são (RS)-2-hidróxi-N-[(S)-1 -(2-hidróxi-etil)-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-1 H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-metil-N'-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propil)- malonamida ou (R ou S)-2-hidróxi-N-[(S)-5-(2-hidróxi-etil)-2-oxo-1 -(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-1H-benzo[b][1,4]diazepin-3-il]-2-metil-N'-(2,2,3,3,3- pentaflúor-propil)-malonamida.

6. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 1, em que R2 é -C(00(CH2)nR5 e R5 é hidróxi para η = 2 ou 3 ou é alquila inferior substituída por halogênio para η = 1, 2 ou 3.

7. Compostos de fórmula I de acordo com a reivindicação 6, em que os compostos são2,2,2-trifIúor-etiI éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico,2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico,2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-7,8-diflúor-3-[(R ou S)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilca rbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5- (2,2,2-triflúor-etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico, 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(R ou S)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilca rbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico, .2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2>3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-2,3,4,5-tetra- hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico, 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(2,2,2-triflúor- etil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico, 2,2,2-triflúor-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-[(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 \ -carboxílico, 4,4,4-triflúor-butil éster de ácido (S)-3-[(S ou R)-2-hidróxi-2- (2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo-5-(4,4,4-triflúor- butil)-2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1 -carboxílico ou 2-hidróxi-etil éster de ácido (S)-5-(2-hidróxi-etil)-3-[(S ou R)-2- hidróxi-2-(2,2,3,3,3-pentaflúor-propilcarbamoil)-propionilamino]-4-oxo- 2,3,4,5-tetra-hidro-benzo[b][1,4]diazepina-1-carboxílico.

8. Processo para preparação de um composto de fórmula I como definido nas reivindicações 1 a 7, processo que compreende a) reação de um composto de fórmula com um composto de fórmula<formula>formula see original document page 59</formula> em que R1a, R2a1 R3 e R4 têm o significado conforme acima descrito para R1- R41 exceto para o grupo -CH2-CH2-OH1 em que R1a e R2a têm o significado de -CH2-CH2-OP1 em que P representa um grupo de proteção hidróxi, e se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis; ou b) reação de um composto de fórmula <formula>formula see original document page 60</formula> com um composto de fórmula <formula>formula see original document page 60</formula> para um composto de fórmula <formula>formula see original document page 60</formula> em que R1a, R2a, R3 e R4 têm os significados conforme acima descrito para R1-R4, exceto para o grupo -CH2-CH2-OH, em que R1a e R2a têm o significa- do de -CH2-CH2-OP, em que P representa um grupo de proteção hidróxi, e, se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis ou c) clivagem do(s) grupo(s) de proteção hidróxi de um composto de fórmula <formula>formula see original document page 0</formula> para um composto de fórmula em que R11 R21 R3 e R4 têm o significado conforme acima descrito e, se desejado, conversão dos compostos obtidos em sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, sempre que preparado através de um processo como definido na reivin- dicação 8, ou através de um método equivalente.

10. Medicamento contendo um ou mais compostos como defini- dos em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, e excipientes farmaceutica- mente aceitáveis.

11. Medicamento de acordo com a reivindicação 10, para o tra- tamento de doença de Alzheimer.

12. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, para a fabricação de medicamentos para o tratamento de doença de Alzheimer.

13. Invenção conforme aqui descrito.