BRPI0620278A2 - inibidores da atividade de ccr9 - Google Patents

Abstract

INIBIDORES DA ATIVIDADE DE CCR9. A presente invenção refere-se a ompostos da fórmula 1, sendo que um de R~ 1~ e R~ 2~ é tienila, que está substituida por halogenio, e o outro de R~ 1~ e R~ 2~ está substituído por fenila, em que os substituintes são tais como definidos nas reivindicações, com a condição de que o grupo fenila seja substituído por pelo menos um grupo ciano, carbóxi ou (C~ 1-4~)- alcoxicarbonila, que são inibidores de atividade de CCR9 e úteis para tratamento terapeutico.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INIBIDORES DA ATIVIDADE DE CCR9".

A presente invenção refere-se a inibidores da atividade de C- CR9.

O ligante de quimiocina CC 25 (CCL25), originalmente descrito como quimiocina expressa no timo (TECK), desempenha um papel crítico no alojamento das células T no intestino delgado por meio de sinalização atra- vés do receptor de quimiocina CC9 (CCR9). CCL25 está expresso constitu- tivamente dentro do intestino delgado, especialmente, em criptas epiteliais, enquanto não está expresso, ou apenas expresso fracamente, no cólon e em outras superfícies mucosas. CCR9 é o único receptor conhecido para TECK/CCL25. A expressão de CCR9 está fortemente correlacionada à ca- pacidade de linfócitos T periféricos alojaremno intestino delgado. A maioria dos linfócitos intraepiteliais intestinais (IEL) e linfócitos T de lâmina própria (LPL) é de CCR9*, enquanto uma percentagem muito mais baixa de células T que circulam no sangue é CCR9*. As células T de CCR9* encontradas no sangue periférico apresentam, quase que exclusivamente, o receptor resi- dente intestinal α4β7. O bloqueio de CCR9 com anticorpo contra TECK/CCL25 inibe, significativamente, o alojamento de linfócitos T no intes- tino delgado. Além disso, existe uma localização estrita de TECK/CCL25 e CCR9* no intestino delgado, em vez de no intestino grosso, sugerindo um mecanismo diferente de recrutamento de linfócitos em segmentos diferentes do trato gastrointestinal.

Estudos também sugeriram um papel de TECK/CCL25 na intera- ção de linfócitos T-endotélio na mucosa intestinal inflamada. Há um aumento de expressão de TECK/CCL25 e uma adesão de LPL aumentada na mucosa do intestino delgado, após estimulação de TNFα. A dessensibilização de CCR9 ou anti-TECK/CCL25 pode atenuar o recrutamento de linfócitos para os microva- sos do intestino delgado. Desse modo, o bloqueio dirigido de interações de CCL25-CCR9 pode proporcionar um tratamento terapêutico eficaz em doenças imune mediadas, por exemplo, distúrbios intestinais, tais como doenças ou condições auto-imunes e inflamatórias. A infiltração de linfócitos T (células T) no intestino delgado e no cólon tem sido ligada, especificamente, à patogênese de doenças celíacas, alergias alimentares, artrite reumatoide, doenças intestinais inflamatórias humanas (IBD), que incluem mal de Crohn e colite ulcerativa, por exemplo, incluindo proctite ulcerativa. Doenças que também são descritas co- mo sendo mediadas por CCR9 incluem, por exemplo, doenças alérgicas, psorí- ase, dermatite atópica, asma, doenças fibróticas, distúrbios e doenças que são causadas ou mediadas por transplante, por exemplo, rejeição de enxertos, e câncer, tais como leucemia (leucemia linfocítica aguda), tumor sólido, timoma, carcinoma tímico.

Foram encontrados novos compostos, que mostram uma ativi- dade surpreendente como inibidores de CCR9.

Em um aspecto, a presente invenção põe à disposição um com- posto da fórmula

<formula>formula see original document page 3</formula>

na qual

um de R1 e R2 é tienila, que está substituída por haiogênio, e o outro de R1 e R2 é fenila,, sendo que fenila é substituída por um ou mais de

- alquila, tal como (C1-6)-alquila, por exemplo, metila, terc-butila,

- haloalquila, tal como halo (C1-4)-alquila, por exemplo, CF3,

- alcóxi, tal como (C1-4)-alcóxi,

- arilalcóxi, tal como (C6-12)-arila(C1-4), tal como benzilóxi,

- arilóxi, tal como (C6-12)-arilóxi, tal como fenóxi,

- haloalcóxi, tal como halo(C1-4)-alcóxi, por exemplo OCF3, alcoxicarbonila, tal como (C1-4)-alcoxicarbonila, por exemplo, me- toxicarbonila,

- carbóxi,

- ciano,

- haiogênio, por exemplo, flúor, cloro, bromo, por exemplo, com a condição de que fenila seja substituída por pelo menos ciano, carbóxi ou alquiloxicarbonila, por exemplo, (C1-4)-alquiloxicarbonila, tal como metoxicarbonila, por exemplo, fenila seja substituída por ciano. Tienila inclui tien-2-ila, tien-3-ila.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um composto da fórmula I, onde um de R1 e R2 é tienila halogenada e o outro de R1 e R2 é fenila, sendo que R1 e R2, independentemente um do outro, são

- (metila)(ciano)fenila, por exemplo, 2-metila-4-cianofenila,

-(trifluormetóxi)(ciano)fenila, por exemplo, 2-trifluormetóxi-4- cianofenila,

(cloro)(ciano)fenila, por exemplo, 2-ciano-5-clorofenila, 3-cloro-4- cianofenila,

-clorotienila, por exemplo, incluindo diclorotienila, por exemplo, 5-clorotien-2-ila, 4, 5-diclorotien-2-ila, 2, 5-diclorotien-3-ila,

(cloro)_(bromo)tienila, por exemplo, incluindo (dicloro)(bromo)tie- nila, tal como 2, 4-dicloro-4-bromo-tien-3-ila.

De preferência, R4 é fenila. De preferência, R2 é tienila halogenada. De preferência, fenila seja substituída tal como definido acima e tienila seja substituída por halogênio, por exemplo, incluindo F, Cl, Br, tal como Cl, Br.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um composto da fórmula I, na qual R1 é

-(metila)(ciano)fenila, por exemplo, 2-metila-4-cianofenila,

-(trifluormetóxi)(ciano)fenila, por exemplo, 2-trifluormetóxi-4- cianofenila,

- (cloro)(ciano)fenila, por exemplo, 2-ciano-5-clorofenila, 3-cloro- 4-cianofenila, e R2 é

-clorotienila, por exemplo, incluindo diclorotienila, por exemplo, 5-clorotien-2-ila, 4, 5-diclorotien-2-ila, 2, 5-diclorotien-3-ila,

- (cloro)(bromo)tienila, por exemplo, incluindo (dicloro)(bromo)tie- nila, tal como 2, 5-dicloro-4-bromo-tien-3-ila.

Em um composto da fórmula I, cada substituinte individual defi- 30 nido pode ser um substituinte preferido, por exemplo, independentemente de qualquer outro substituinte definido.

Em um outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um composto selecionado do grupo que consiste em

1. (4-ciano-2-metila-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno-2- sulfônico

2. (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro-tiofeno-2- sulfônico

3. (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro- tiofeno-2-sulfônico

4. (3-cloro-4-ciano-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro-tiofeno-2- sulfônico

5. o(5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno-2- sulfônic

6. (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 4-bromo-2, 5- dicloro-tiofeno-3-sulfônico

7. (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 4-bromo-2, 5-dicloro- tiofeno-3-sulfônico

8. (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno- 2-sulfônico

9. (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 2, 5-dicloro- tiofeno-3-sulfônico, e

10. (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 2, 5-dicloro-tiofeno-3- suffônico.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição uma N- (ciano-fenila)-halotienila-sulfonamida, por exemplo, sendo que halotienila é tienila substituída exemplo, uma ou mais vezes por halogênio.

Compostos postos à disposição pela presente invenção são do- ravante designados como "composto(s) da (de acordo com a) presente in- venção". Um composto da presente invenção inclui um composto em qual- quer forma, por exemplo, em forma livre, na forma de um sal, na forma de um solvato e na forma de um sal e um solvato.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um composto da presente invenção na forma de um sal.

Esses sais incluem, de preferência, sais farmaceuticamente a- ceitáveis, embora estejam incluídos sais farmaceuticamente inaceitáveis, por exemplo, para fins de preparação/isolamento/purificação.

A presente invenção inclui um composto da presente invenção em qualquer forma isomérica e em qualquer mistura isomérica. A presente invenção também inclui tautômeros de um composto posto à disposição pela presente invenção, onde tautômeros podem existir.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um processo para a produção de um composto da fórmula I, que compreende as etapas de>

a) reagir um composto da fórmula

RrNH2 II

onde R1 é tal como definido acima,

com um composto da fórmula

CI-SO2-R2 III

onde R2 é tal como definido acima, e

b) isolar um composto da fórmula i obtido da mistura de reação.

Em um intermediário da fórmula II ou da fórmula III (materiais de partida), grupos funcionais, quando presentes, opcionalmente, podem estar em forma protegida ou na forma de um sal, se um grupo formador de sal estiver presente. Grupos de proteção, opcionalmente presentes, podem ser removidos em um estágio apropriado, por exemplo, de acordo com, por e- xemplo, analogamente a um método, tal como convencional.

Um composto da presente invenção, obtido desse modo, pode ser convertido em outro composto da presente invenção, por exemplo, um composto da presente invenção obtido em forma livre pode ser convertido em um sal de um composto da presente invenção e vice-versa.

A reação acima é uma reação de sulfonilação de amina e pode ser realizada, opcionalmente, por exemplo, analogamente a um método, tal como convencional, ou tal como descrito no presente. Intermediários (mate- riais básicos) da fórmula II e da fórmula III são conhecidos ou podem ser preparados de acordo com, por exemplo, analogamente a, um método, tal como convencional ou tal como descrito no presente. Qualquer composto descrito no presente, por exemplo, um composto da presente invenção e intermediários da fórmula Il e Ill podem ser preparados, opcionalmente, por exemplo, de acordo com, por exemplo, analogamente, a um método, tal co- mo convencional, por exemplo, ou como especificado no presente.

N-(ciano-fenila)-tienilsulfoamidas podem ser, por exemplo, obti- das reagindo uma cianoanilina com um tienila-cloreto de sulfonila.

Por exemplo, no caso de fenila ser substituída em um composto da fórmula I por carbóxi, a proteção do referido grupo carbóxi em um com- posto da fórmula II, por exemplo, por esterificação para obter um derivado de alcoxicarbonila correspondente, pode ser uma opção. O composto da formu- la II, na qual arila é substituída por alquilcarbonilóxi pode ser reagido com um composto da fórmula Ill para obter um composto da fórmula I, na qual arila é substituída por alcoxicarbonila e o éster de ácido carboxílico obtido desse modo pode ser saponificado, para obter um composto correspondente da fórmula I, na qual arila é substituída por carbóxi.

Os compostos da presente invenção, por exemplo, incluindo um composto da fórmula I, apresentam atividade farmacológica e são, protanto, úteis como agentes farmacêuticos. Compostos da presente invenção mos- tram inibição dependente de dose no

- Teste de proximidade de cintilação (TESTE DE SPA)

- TESTE DE LIGAÇÃO de Eu-GTP

- Teste de mobilização de cálcio (TESTE DE FLIPR) por exemplo, sob condições tais como convencionais, por exem- pio, sob condições tais como descritas no presente, por exemplo, na faixa nanomolar de IC5o até a faixa micromolar baixa.

A atividade no tratamento de doença intestinal inflamatória é de- terminada, por exemplo, em um modelo de camundongo de SCID de doença intestinal inflamatória.

Teste de proximidade de cintilacão (SPA)

O princípio de SPA

Quimiocinas realizam suas ações por intermédio de sete recep- tores transmembranas ligados à proteína G (GPCR) nas células-alvo. O Ii- gante ligado aos GPCRs estimula a troca de GTP/GDP nas proteínas G he- terotrimétricas, compostos das subunidades α, β e γ. O GPCR ligado ao a- gonista inicia o ciclo de nucleotídeo de guanina por catalisação da dissocia- ção de GDP da subunidade a, possibilitanto a ligação de GTP endógeno, e a dissociação do complexo βγ. As subunidades de Ga-GTP e ΰβγ, em cada caso, podem ativar ativadores, tais como adenilil ciclase, fosfolipase C e ca- nais de íons (veja, por exemplo, Neer EJ1 Cell; 80:249-57 (1995)). O Gaa- GTP é inativado por uma atividade de GTPase intrínseca, que hidrolisa GTP para GDP; subseqüentemente, a proteína G que contém GDP está pronta para o próximo ciclo de ativação. Esse processo pode ser monitorado in vitro medindo a ligação de análogos de GTP resistentes à hidrólise, tais como 5'- 0-(3-[35S]tiofosfato([35S]-GTPyS), a membranas de células, que contêm o receptor de interesse. Um teste de proximidade de cintilação (SPA) de GTPyS mostrou ser um teste funcional útila para monitorar a ativação de CCR9 por TECK.

SPA é uma tecnologia de teste homogênea e versátiia para o teste rápido e sensível de uma ampla variedade de processos biológicos. O formato do teste não requer etapas de separação e é receptivo para auto- mação. As membranas que sustentam o receptor estão ligadas por meio da porção de glicoproteína aos glóbulos fluorescentes revestidos com aglutinina de germe de trigo (Amersham Bioscience n°RNPQ 0001). Quando imobiliza- do, o receptor está suficientemente próximo do glóbulo para que, quando o GPCR ligado ao agonista inicia o ciclo de nucleotídeo, o [35SJ-GTPyS (Amer- sham Biosience, n°SJ1308) liga-se na membrana. A molécula radiativa será mantida em proximidade suficiente próxima, de modo que as partículas de decomposição estimulem o agente de cintilação dentro do glóbulo para emi- tir luz, que é depois detectada por um contador de cintilação baseado em PMT. Radioligante não ligado está distante demais do glóbulo para transferir energia e, portanto, não é detectado. Células e cultura celular

Células de pré-B de camundongo 300-19, transfectadas com receptor de CCR9 humano, são cultivadas em suspensão em frascos de cul- tura de células (100 ml de suspensão de células em um frasco de cultura de células de 162 cm2) a 37°C, em uma atmosfera umidificada, que contém 5% de C02 em meio de RPM 1640 suplementado com penicilina (100 IU/ml), estreptomicina (0, 1 mg/ml), L-glutamina (para uma concentração final de 4, 5 mM), 10% de FBS1 1 mM de piruvato de sódio, μΜ 2-mercaptoetanol a 0, 05, 1,5 μg/ml de puromicina e HEPES a 20 mM. As células são utilizáveis para -12 passagens para a preparação de membrana (isto é, a densidade do receptor de CCR9 é, aceitavelmente, suficientemente alta. A expressão de CCR9 é monitorada por análise de FACS usando anticorpo de CCR9 A- lexa Flúor 647 conjugado murino anti-humano. A expressão de CCR9 não deve ser menos do que 50% de células positivas por meio de FACS em re- lação ao controle de isótipo Alexa Flúor. Como aproximação, pode-se dividir uma cultura de 10x10^5 células/ml usando uma diluição de 1:30-1:50, e atingir a densidade celular inicial após 2-3 dias (~4-5 dias, para uma cultura em frasco giratório). As células são colhidas a uma densidade de 8-10 x 105 cé- iuias/ml por centrifugação a 300-1000 g por 10 minutos. Em gerai, as células são cultivadas e expandidas, para resultar em aproximadamente 1 x 1010 células. O pélete de célula combinado é lavado uma vez em PBS frio (sem cálcio e magnésio), ressuspenso por meio de pipetagem em tampão de membrana frio, a, aproximadamente, 2 x 10^8 células/ml, congelado sobre gelo seco e armazenado a -80°C. Tampão de membrana

Tampão de membrana pH = 7, 5 (1000 ml); Tris 7, 5 mM, MgCI2 a 12, 5 mM, EDTA a 0, 3 mM, EGTA a 1 mM, sacarose a 250 mM, filtrado de modo estérila e armazenado a + 4°C.

Tampão de homogeneização (50 ml):

Tampão de membrana 45 ml + 10% de glicerol

Preparação de membranas

Pipetar a solução de suspensão de células em tubos resistentes e homogeneizar cada solução. Transferir os produtos de homogeneização para tubos de centrifugação e centrifugar por 10 min a 1000 g. Coletar os materiais sobrenadantes. Adicionar 20 ml de tampão de membrana novo a cada pélete, transferir para os tubos resistentes originais e homogeneizar e centrifugar mais uma vez. Coletar os materiais sobrenadantes. Centrifugar os materiais sobre- nadantes combinados a 40000g por 30 minutos. Ressuspender cada pélete em 3 ml de tampão de homogeneização frio com um homogeneizador Dounce. Determinar a concentração de proteínas na suspensão homogênea (teste BIO RAD, referência BSA). Método de Bradford (Procedimento de Microteste). Em aproximação, 1 x 1010 células resultam em um rendimento de membrana de 10- 20 mg de proteína. Armazenar as alíquotas a -80°C. Tampões e soluções otimizados para testar compostos

Tampão de HEPES/BSA: HEPES a 50 mM (pH 7, 4), 50 ng/ml de BSA

Tampão de teste 2, 5 X: HEPES a 50 mM pH 7, 4, 50 μg/ml de BSA, MgCI2 a 25 mM, GDP a 25 μΜ, NaCI a 250 mM, 375 ng/ml de saponi- na

TECK: Diluições de TECK são preparadas com 0, 1% de BSA em PBS, para dar uma solução de TECK de 20 vezes para o teste de liga- ção de GTP. Para testar o composto, é usada uma concentração de 7, 4 μΜ de TECK, para dar uma concentração final de 0, 37 μΜ na reação.

Diluição do composto: Os compostos de teste são dissolvidos em DMSO a uma concentração final mais alta de 100 vezes no teste. Diluições em série dessas soluções de composto concentradas são feitas em DMSO, que são diluídas 5 vezes em tampão de HEPES/BSA, para gerar soluções de com- posto concentradas 20x, contendo uma concentração de DMSO de 20% (v/v). A concentração final de DMSO nos testes é de 1% (v/v).

Diluição das membranas: Antes do uso, as membranas (2, 4 mg/ml de matéria-prima; lote de CCR9-1) são diluídas em tampão de HE- PES-BSA, para dar 60 μg/ml. 50 μΙ dessa membrana são adicionados a ca- da cavidade. (3 μg/cavidade de concentração de teste final para lote de C- CR9-1 de membrana).

Condição de teste final para testar os compostos: HEPES a 50 mM pH 7, 4, 50 μg/ml de BSA, NaCI a 100 mM, MgCI2 a 10 mM, GDP a 10 mM, 150 |j.g/ml de saponina, TECK a 0, 37 μΜ e 3 μς/οβνϊάβάθ de membra- na.

Protocolo de teste

O teste é realizado no formato de tempo zero, que envolve a a- dição seqüencial de amostras de teste, membrana, radioligante e glóbulos como adições separadas, sem qualquer pré-incubação.

Em resumo, as membranas são incubadas na presença de agonsi- ta e composto com [35SjGPTyS e glóbulos de cintilação por 1 hora, à tempera- tura ambiente, em um misturador de vibração. Usando um robô de manuseio de líquido, os seguintes reagentes são carregados em uma placa White&Clear Isoplate de 96 cavidades (Wallac, n°1450-515) na seguinte seqüência:

40 μΙ de tampão de teste (20 mM de HEPES pH 7, 5, 100 mM de NaCI, 10 mM de MgCI2, 1 μ de MGDP, 10 μg/ml de saponina, 50 μg/ml de BS A).

10 μl de agonista TECK humano/CCL25, 25 μg/ml (R&D Sys- tems, n° 334-TK-025)

10 μl de amostra em 50% de DMSO 50 μl de membranas, 60μg/ml em tampão de teste 50 μg/ml de [35S]GPTyS, 1 nM em tampão de teste 40 μl de suspensão de glóbulos 18, 75 mg/ml de tampão de teste. Depois de as placas de incubação serem centrifugadas por 5 minutos a 1000xg e contadas no Contador MicroBeta (EG&G Wallac) em modo de contagem Paralux SPA.

Análise dos dados

A análise dos dados é realizada com pacote de software Excel fit 4.0 (Microsoft). A fim de determinar a qualidade da janela experimental do teste, o fator Z' é calculado usando apenas dados de controle (valores ba- sais e valores estimulados). Para esse teste,Z' é estimado em 0,73, que indica uma banda de separação grande e uma qualidade de teste excelente, no total.

Teste de liaacão de Eu-GTP

O princípio do teste de ligação de Eu-GTP Um método fluorométrico com resolução de tempo, para medir a ativação da proteína G, que usa um análogo de GTP marcado com európio, não radiativo, não hidrolisável, Eu-GTP.

Materiais

Meio de RPMI 1640 com (feito de pó, Gibco n°074-01800) solução de penicilina/estreptomicina, líquida (Gibco n°15140-

122)

FBS (certificado, obtido de Gibco [n°16000] e depois inativado termicamente

piruvato de sódio (Gibco n°11360-039) puromicina (usado como marcador de seleção; Sigma n°P-8833) inibidor de protease completo (Roche n° 1697498)

Alexa Flúor 647 - anticorpo de CCR9 conjugado murino anti- humano (Pharmingen n° 557975)

Alexa Flúor - controle de isótipo conjugado lgG2a (BD Pharmin- gen n°557715)

TECK (AA24-150-HIS6, BMP Tooi Protein Data base n°BTP04- 005213, alíquotas de solução de matéria-prima de TECK (5 mg/ml; -350 μΜ) armazenadas a -80°C

BSA (Roche Diagnostics GmbH n° 775827)

Unit EU-GTP (Perkin-Elmer Life Sciences, Wallac, Turku, Fin- land, Códogo do produto: AD0260) contém os seguintes componentes:

Eu-GTP (1, 65 nmol). O Eu-GTP liofilizado foi reconstituído com água destilada, para dar uma concentração de Eu-GTP de 10 μΜ. Alíquotas de Eu-GTP reconstituído foram armazenadas a -20°C.

GDP (2, 3 μmols)

O GDP liofilizado é reconstituído com água destilada, para dar uma concentração de GDP de 2 mM. Alíquotas do GDP reconstituído são armazenadas a -20°C.

VICTOR2® V, Multilabel Counter (Perkin-Elmer Life Sciences, Wallac, Turku, Finlândia)

MultiScreen Vacuum Manifold (Millipore n°MAVM 0960R) Células e cultura de células

A ser realizado tal como descrito sob "Células e culturas de célu- las" no "Teste de proximidade de cintilação (SPA)"

Tampão de membrana e Tampão de homogeneização

A ser realizado tal como descrito sob "Tampão de membrana e Tampão de homogeneização" no "Teste de proximidade de cintilação (SPA)

Preparação de membranas

A ser realizada tal como descrito no presente sob "Preparação de membranas" no "Teste de proximidade de cintilação (SPA)"

Tampões e soluções otimizados para testar compostos

A serem realizados tal como descrito no presente sob "Tampões e soluções otimizados para testar compostos" no "Teste de proximidade de cintilação (SPA)"

Para Eu-GTP: diluir solução de matéria-prima de Eu-GTP para 100 nM em tampão de HEPES/BSA, antes do uso. Solução de lavagem de GTP: a solução de lavagem de 10 χ GTP é diluída 1:10 com água destilada e refrigerada sobre gelo.

Protocolo de teste de ligação de Eu-GTP para testar compostos

O teste de ligação de Eu-GTP é realizado em um volume final de 100 μl em placas de filtro Acro-Well. Os componentes de teste são adiciona- dos às cavidades na seguinte ordem:

Adicionar 40 μl de tampão de teste (2, 5 X) a cada cavidade (ca- vidades B2 a G12). Adicionar 5 μΙ de TECK (7, 4 μΜ) às cavidades das colu- nas 2-11 e a concentração final de TECK no teste é de 0, 37 μΜ. Adicionar 5 μl de 0, 1% de BSA às cavidades da coluna 12, que servem como controle basal. Adicionar 5 μl de cada concentração de composto (20 vezes da con- centração final em 20% de DMSO) em triplicata às colunas 3-11 (isto é, 3 cavidades por concentração). Adicionar 5 μl de 20% de DMSO às cavidades das colunas 2 e 12, que são, em cada caso, os controles estimulados e ba- sais. A concentração final de DMSO em todas as cavidades é de 1% (v/v). Adicionar 50 μl de membranas (3 μg/amostra) a todas as cavidades e mistu- rar brevemente a 800 rpm em um agitador de placa de microtítulo [MS1 Mi- nishaker). A placa é incubada por 30 min com agitação lenta a 300 rpm em um agitador de placa orbital (MTS 2/4 agitador digital de microtítulo). Adicio- nar 10 μl dos 100 nM de Eu-GTP por cavidade, para dar uma concentração final de 10 nM. A placa é incubada por outros 30 min com agitação lenta a 300 rpm no agitador de placa orbital. A reação é terminada por filtração a vácuo e a placa de filtro é lavada duas vezes por meio de filtração a vácuo com 300 μl de tampão de lavagem de GTP gelado por cavidade. Eu-GTP retido sobre o filtro é medido com um contador VICTOR2® V Multilabel Coun- ter (340 nm de excitação/615 nm de emissão, 0, 4 ms de retardamento, jane- la de 0, 4 ms) no espaço de 30 min depois da etapa de lavagem.

Tabela A (disposição da placa)

<table>table see original document page 14</column></row><table>

Análise dos dados

O sinal de ligação de Eu-GTP efetivo causado por estimulação do agonista (=a) é comparado com a ligação basal (=b) e o resultado final é calculado como uma percentagem sobre a ligação basal (por cento sobre basal = (a/b χ 100)- 100].

As curvas de resposta à dose para a estimulação percentual cal- culada sobre a ligação basal para cada composto de teste são ajustadas usando o programa de adição Excel XLfit® (ID Business Solutions, Guilford, Surrey, UK) à equação logística de 4 parâmetros (Modelo 205):

y = A+((B-A)/(1+((C/x)d)))

na qual χ são valores de concentração, y estimulação percentual sobre a ligação basal correspondente aos valores de x. Os parâmetros ajustados são:

A: platô inferior da curva, B: platô superior da curva, C: valor de χ no centro da curva (isto é, entre o platô superior e o platô inferior), D: fator de inclinação (também conhecido como coeficiente de Hill). O ICso para o teste é definido como o ponto do meio entre o con- trole de solvente que contém TECK e o controle de solvente sem estímulo.

O valor de Z' é calculado usando apenas dados de controle (6 valores basais e 6 valores estimulados) para cada experiência. O Z' varia entre 0, 56 e O1 79 em todos os testes.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição o uso do teste de SPA ou o uso do teste de ligação de Eu-GTP no método para a identificação de inibidores de CCR9.

O SPA e o teste de ligação de Eu-GTP são usados tais como descritos no presente. Inibidores de CCR9, que podem ser identificados pelo uso desses testes, incluem anticorpos e compostos químicos, por exemplo, compostos de baixo peso molecular. Teste de mobilização de cálcio

a) O princípio do teste de mobilização de cálcio

Receptores de quiocina são receptores de sete transmembranas ligados à proteína Gai, sensíveis à toxina da coqueluche (PTX). Diversos estudos demonstraram a ativação de diversos caminhos de sinalização para a maioria das quimiocinas e em múltiplos tipos de células, incluindo a eleva- ção da concentração de cálcio intracelular citosólica [([Ca2+1j). Esse processo pode ser monitorado in vitro medindo níveis de ([CA2+]j) por meio de corantes fluorescentes sensíveis a cálcio, u- sando uma leitora de placas de imagens fluorométricas (FLIPR). A mobiliza- ção de cálcio intracelular em células de MOLT-4, tal como medida usando a tecnologia de FLIPR, mostrou ser um teste funcional útila para monitorar a ativação de CCR9 por TECK.

b) Células e cultura de células

A linhagem de leucemia de células T humanas MOLT-4 foi obti- da da American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, Va). Células de MOLT-4 são cultivadas em um meio, que é RPMI-1640, suplementado com 10% FCS, de L-glutamina a 2 mM, 100 U/ml de penicilina e 100 μg/ml de estreptomicina, a 37°C, com 5% de CO2. Albumina de soro humano (HSA) é obtida de ZLB Behring (Viena, Áustria) como uma solução de 20%. c) Protocolo do teste de mobilização de cálcio

São preparadas as seguintes soluções:

• HPSS: 7, 01 g de NaCI, O1 4 g de KCI1 0, 2 g de MgS04.7H20, 4, 76 g de HEPES, 2 g de glicose, H2O (em 1 I)

• Tampão de trabalho (WB): 600 ml de HPSS + 0, 9 ml de CaCI2 de 1 M, 12 ml de HEPES de 1 M.

.% BSA/WB: 60 ml de WB + 0, 06 g de Albumina de Soro Bovino (BSA; Sigma A7906)

• Solução de matéria-prima de probenicida: 356 mg de probeni- cida + 2, 5 ml de NaOH de 1 N + 2, 5 ml de WB

• Tampão de probenicida: 300 ml de WB + 3, 5 ml de solução de matéria-prima de probenicida

• Solução de Fluo-4: 50 μg de Fluo-4, AM + 0, 025 ml de DMSO + 0, 025 ml de Pluronic F-127 (Invitrogen/Molecular Probles n°P3000MP; fornecido como 20% em DMSO)

• Solução de corante: 105 ml de meio + 1, 05 ml de solução de matéria-prima de probenicida + 2, 1 ml de HEPES de 1M + 0, 21 mi de solu- ção de Fluo-4

• TECK: preparado em 0, 1% de BSA/WB

Células MOLT-4 são coletadas e carregadas com Fluo-4/éster de acetoximetílico (Fluo-4/ΑΜ), de acordo com as instruções do fabricante (Invitrogen/Molecular Probes, Eugene, OR). As células são incubadas bre- vemente (1 χ 107 células por 3 ml) em solução de corante por 60 min, a 37°C e 5% de CO2. Subseqüentemente, as células são lavadas duas vezes com tampão de probenicida e adicionadas por pipeta a placas de teste de 96 ca- vidades (placas de poliestireno preto, de fundo transparente; Corning Costar n°3603) a 2 χ 105 células e 0, 075 ml por cavidade e depois centrifugadas a 1200 revoluções por minuto por 3-4 min, para distribuir as células uniforme- mente no fundo das placas. As placas são incubadas por 60 min no escuro, à temperatura ambiente (RT), para permitir a desesterificação de ésteres de AM intracelulares. Compostos de teste são primeiramente dissolvidos em DMSO, e 0, 006 ml dessas soluções de matéria-prima de DMSO são diluí- das em O, 194 ml de WB (+HSA), antes da injeção nas placas de células (0, 025 ml/cavidade). Após uma incubação de 30 minutos, no escuro a RT1 a mobilização de Ca2+ intracelular é monitorada após injeção de TECK (para dar uma concentração de eficiência próxima ao máximo, de pelo menos ECeo), usando um instrumento FLIPR (Molecular Devices, Isma- ning/Munique, Alemanha). Leituras da linha de base são coletadas (a inter- valos de 3, 5 s) por 25 s, antes da injeção de TECK (0, 025 ml/cavidade), seguidos de intervalos de 1 s, pelos 80 s após a injeção de TECK. Leituras de fluorescência são realizadas usando configurações normais, e todos os dados são normalizados usando a fórmula:

d) Cálculo

Resposta de cálcio=[Fmax-Fmin]/Fmin onde Fmax representa a resposta de fluorescência máxima e Fmin, a fluo- rescência mínima, de linha de base. As curvas de dose-resposta para os dados de resposta de cálcio para cada composto de teste são ajustadas, usando o programa adicionado da Excel, XLfit® (ID Business Solutions, Guil- ford, Surrey, UK), à equação de logística de 4 parâmetros (Modelo 205), pa- ra determinar os valores de IC50.

Os compostos da presente invenção mostram atividade em tes- tes, tais como descritos no presente, e um composto da presente invenção é propenso a mostrar atividade terapêutica no tratamento de distúrbios, que são mediados por atividade de CCR9.

Distúrbios que são mediados por CCR9 e que podem ser tratados com sucesso com um inibidor de CCR9, incluem, por exemplo, distúrbios, nos quais a atividade de CCR9 desempenha um papel causai ou cooperante, tais como distúrbios associados à ligação de CCR9 em CCL25, por exemplo, distúrbios mediados por alojamento de Ieu- cócitos, mediado por CCR9, em um indivíduo. Distúrbios, tais como usados no presente, incluem doenças.

Distúrbios que podem ser mediados por atividade de CCR9 in- cluem, por exemplo,

- distúrbios associados à inflamação por exemplo, incluindo distúrbios inflamatórios (crônicos,. dis- túrbios relacionados à inflamação dos brônquios, por exemplo, incluindo bronquite, cerviz, por exemplo, incluindo cervicite, conjuntiva, por exemplo, conjuntivite, esôfago, por exemplo, esofagite, músculo cardíaco, por exem- plo, miocardite, reto, por exemplo, proctite, esclera, por exemplo, esclerite, gengivas, envolvendo o osso, inflamação pulmonar (alveolite), vias respirató- rias, por exemplo, asma, tal como asma brônquica, síndrome do distúrbio respiratório agudo (ARDS), distúrbios da pele inflamatórios, tais como hiper- sensibilidade de contato, dermatite atópica; doença fibrótica (por exemplo, fibrose pulmonar), encefalite, osteólise inflamatória,

- distúrbios associados a condições do sistema imune,

tais como distúrbios autoimunes, por exemplo, incluindo doença de Graves, doença de Hashimoto (tireoidite crônica), esclerose múltipla, ar- trite reumatoide, artrite, gota, oesteoartrite, escleroderma, síndromes de lú- pus, lúpus eritomatoso sistêmico, síndrome de Sjoegren, psoríase, doença intestinal inflamatória, incluindo doença de Crohn, colite, por exemplo, colite ulcerativa, sepse, choque séptico, anemia hemolítica autoimune (AHA), urti- cária causada por autoanticorpos, pênfigo, nefrite, glomerulonefrite, síndro- me de Goodpastur, espondilite anquilosante, síndrome de Reiter, polimiosite, dermatomiosite, toxicidade mediada por citocina, toxicidade de interleucina- 2, alopecia areata, uveíte, líquen plano, pentigoide bolhoso, miastenia gravis, diabetes mellitus do tipo I, infertilidade imunomediada, tal como falha ovaria- na prematura, falha poliglandular, hipotiroidismo, pênfigo vulgar, pênfigo I- oleáceo, pênfigo paraneoplásico, hepatite autoimune, incluindo a associada com o vírus de hepatite B (HBV) e vpirus de hepatite C (HCV), mal de Addi- son, doenças da pele autoimunes, tais como psoríase, dermatitw herpetifor- me, epidermólise bolhosa, dermatose bulhosa de IgA linear, epidermolise bulhosa adquirida, doença bulhosa crônica da infância, anemia perniciosa, anemia hemolítica, vitiligo, síndromes poliglandulares autoimunes do tipo I, tipo II e tipo III, hipoparatiroidismo autoimune, hipofisite autoimune, ooforite autoimune, orquite autoimune, penfigoide gestacional, penfigoide cicatricial, crioglobulinemia essencial mista, púrpura trombocitopênica imune, síndrome de Goodpasture1 neutropenia autoimune, síndrome miastênica de Eaton- Lambert, síndrome do homem rígido, encefalomielite, encefalomielite disse- minada aguda, síndrome de Guillain-Barre, degeneração cerebral, retinopa- tia, esclarose biliar primária, hepatite autoimune de colangite esclerosante, enteropatia sensível a glúten, artritide reativa, polimiosite/dermatomiosite, doença do tecido conectivo misto, síndrome de Bechet, anguite alérgica no- dosa de poliarterite e granulomatose (doença de Churg-Strauss), vasculite de síndrome de sobreposição de poliangite (hipersensibilidade), granuloma- tose de Wegener, doença de Kawasaki de arterite temporal, sarcoidose, cri- opatias, doença celíaca,

- distúrbios associados à toxicidade mediada por citocina, por exemplo, incluindo toxidade de interleucina-2,

- distúrbios associados aos ossos, por exemplo, incluindo osteoporose, oesteoartrite,

- distúrbios associados ao cérebro e aos nervos, distúrbios neurodegenerativos, por exemplo, incluindo distúrbios do sistema nervoso central, bem como distúrbios do sistema nervoso perifé- rico, por exemplo, distúrbios de CNS, incluindo infecções nervosas centrais, lesões cerebrais, distúrbios cerebrovasculares e suas conseqüências, mal de Parkinson, degeneração corticobasal, doença neuromotora, demência, incluindo ALS, esclerose múltipla, distúrbios traumáticos, incluindo traumas e conseqüências inflamatórias de traumas, lesão cerebral traumática, derrame, pós-derrame, pós-lesão cerebral traumática,

doença cerebrovascular dos vasos pequenos, distúrbios de ali- mentação; outras demências, por exemplo, incluindo mal de Alzheimer, de- mência vascular, demência com corpos de Lewy, demência frontotemporal e Parkinsonismo ligado ao cromossoma 17, demências frontotemporais, inclu- indo mal de Pick, paralisia nuclear progressiva, degeneração corticobasal, mal de Huntington, degeneração talâmica, demência de Creutzfeld Jakob, demência de HIV, esquizofrenia com demência, psicose de Korsakoff,

distúrbios cognitivos, tais como deterioração cognitiva leve, dete- rioração da memória associada à idade, declínio cognitivo associado à ida- de, deterioração cognitiva vascular, distúrbios de déficit de atenção, distúr- bios de hiperatividade de déficit de atenção e distúrbios de memória em cri- anças com inapacidade de aprendizagem; estados associados ao eixo hipo- talâmico-pituitário-adrenal, distúrbios neuronais, por exemplo, incluindo dis- túrbios de migração neuronal, hipotonia (tônus muscular reduzido), fraqueza muscular, ataques apopléticos, retardamento de desenvolvimento (dificulda- de de desenvolvimento físico ou mental), retardamento mental, falha de crescimento, dificuldades de alimentação, linfedema, microcefalia, sintomas que afetam a cabeça e o cérebro, disfunção motora;

- distúrbios associados aos olhos, por exemplo, incluindo uveorritinite, vitreorretinopatia, doença córnea, irite, iridociclite, cataratas, uveíte, retinopatia diabética, retinitis pig- mentosa, conjuntivite, ceratite,

- distúrbios associados ao trato gastrointestinal por exemplo, incluindo colite, doença intestinal inflamatória, do- ença de Crohn, colite ulcerativa, ulceração péptica, gastrite, oseofagite,

- distúrbios associados ao coração e condições vasculares

por exemplo, incluindo distúrbios cardiovasculares, por exemplo, incluindo falência cardíaca, infarto cardíaco, hipertrofia cardíaca, falha do coração, por exemplo, incluindo todas as formas de falhas de bombeamento do coração, tais como de alta e baixa produtividade, agudas e crônicas, do lado direito ou do lado esquerdo, sistólicas ou diastólicas, independentemen- te da causa subjacente; infarto do miocárdio (Ml), profilaxia de Ml (preven- ção primária e secundária), tratamento agudo de Ml, prevenção de compli- cações; distúrbios cardíacos, distúrbios vasculares proliferativos, vasculiti- des, poliarterite nodosa, conseqüências inflamatórias da isquemia, doença cardíaca isquêmica, infarto do miocárdio, insulto, doença vascular periférica, hipertensão pulmonar,

distúrbios isquêmicos, por exemplo, incluindo isquema miocardi- al, por exemplo, angina estável, angina instável, angina pectoris, bronquite; arritmias assintomáticas, tais como todas as formas de taquiarritmias atrais e ventriculares, taquicardia atrial, palpitação atrial, fibrilação atrial, taquicardia reentrante átrio-ventricular, síndrome de pré-excitação, taquicardia ventricu- lar, palpitação ventricular, fíbrilação ventricular, formas bradicárdicas de ar- ritmias; arritmia, doença pulmonar obstrutiva crônica,

hipertensão, tal como pressão sangüínea alta sistólica ou diastó- lica, por exemplo, hipertensão essencial ou secundária, por exemplo, inclu- indo distúrbios vasculares hipertensivos, tais como hipertensão arterial pri- mária, bem como todos os tipos de hipertensão arterial secundária, renal, endócrina, neurogênica e outras; distúrbios vasculares periféricos, nos quais a corrente arterial e/ou venosa está reduzida, resultando em desequilíbrio entre fornecimento de sangue e necessidade de oxigênio dos tecidos, por exemplo, incluindo aterosclerose, doença oclusiva arterial periférica crônica (PAOD), trombose arterial aguda e embolismo, distúrbios vasculares infla- matórios, fenômeno de Raynaud e distúrbios venosos; aterosclerose, uma doença, na qual a parede do vaso é remodelada, por exemplo, incluindo a- cumulação de células, tanto células de músculo liso como células inflamató- rias monócitas/macrófagas, na íntima da parede do vaso;

hipotensão,

- distúrbios associados ao fígado e aos rins,

por exemplo, incluindo distúrbios renais, distúrbios dos rins, por exemplo, falha aguda dos rins, doença renal aguda, distúrbios do fígado, por exemplo, cirrose, hepatite, falha do fígado, colestase, hepatite aguda/crô- nica, colangite esclerosante, cirrose biliar primária, glomuerlonefrite instersti- cial aguda/crônica, , doenças granulomatosas,

- doenças associadas a estados do estômago ou pâncreas,

por exemplo, incluindo distúrbios do estômago, por exemplo, úlcera gástrica, úlcera gastrointestinal, distúrbios pancreáticos, fadiga pan- creática,

- distúrbios associados ao trato respiratório e pulmão

por exemplo, incluindo distúrbios pulmonares, doença pulmonar crônica, síndrome de insuficiência respiratória aguda (adulta) (ARDS), asma, asma brônquica, bronquiectase, distúrbios pulmonares intersticiais difusos, pneumoconioses, alveolite fibrosante, fibrose pulmonar, - distúrbios associados a condições da pele e tecido conectivo por exemplo, incluindo eczema, dermatite atópica, dermatite de contato, psoríase, acne, dermatomiosite, síndrome de Sjõrgen, síndrome de Churg-Strauss, queimadura solar, câncer de pele, cura de feridas, urticária, necrólise epidérmica tóxica,

- distúrbios associados a condições alérgicas, por exemplo, incluindo hipersensibilidade do tipo retardado, con- juntivite alérgica, alergias o fármacos, rinite, rinite alérgica, vasculite, derma- tite de contato;

- distúrbios associado às angiogênese, por exemplo, capacidade insuficiente de obter abastecimento de sangue, distúrbios caracterizados por angiogênese modificada, angiogênese associada a tumores,

- distúrbios associados a câncer e proliferação excessiva de cé- lulas

por exemplo, incluindo estados pré-malignos, distúrbios hiper- proliferativos, cânceres, quer primários quer metastáticos, câncer cervicai e metastático, câncer originário de proliferação celular descontrolada, tumores sólidos, tais como descritos no documento WO 02066019, incluindo câncer pulmonar de células não pequenas, câncer cervicai; crescimento de tumor, linfoma, Iinfoma de células B ou células T1 tumores benignos, distúrbios dis- poliferativos benignos, carcinoma renal, câncer do esôfago, câncer do estô- mago, carcinoma renal, câncer da bexiga, câncer de mama, câncer do cólon, câncer de pulmão, melanoma, câncer nasofaríngeo, osteocarcinoma, câncer ovariano, câncer uterino; câncer da próstata, câncer de pele, leucemia, neo- vascularizaçâo de tumores, angiomas, distúrbios mielodisplásicos, que não respondem a sinais indutores de morte normais (imortalização), motilidade celular aumentada e invasividade, instabilidade genética, expressão de ge- nes desregulada, câncer (neuro)endócrino (carcinoides), câncer do sangue, Ieucemias linfocíticas, neuroblastoma; câncer de tecido mole, prevenção de metástase,

- distúrbios associados a condições diabéticas por exemplo, incluindo diabetes (diabetes do tipo 1, diabetes do tipo II), retinopatia diabética, diabetes dependentes de insulina, diabetes mellitus, diabetes gestacional), hipossecreção de insulina, obesidade;

- distúrbios associados à endiometriose, a disfunções testicula- res

- distúrbios associados a distúrbios infecciosos, por exemplo, com estados infecciosos crônicos, por exemplo, incluindo distúrbios bacteri- anos, otite média, doença de Lyme, tiroidite, distúrbios virais, distúrbios pa- rasíticos, distúrbios fúngicos, malária, por exemplo, anemia de malária, sep- se, sepse grave, choque séptico, por exemplo, choque séptico induzido por endotoxina, choque tóxico induzido por exotoxina, choque infectivo (verda- deiramente séptico), choque séptico causado por bactérias gram-negativas, doença inflamatória pélvica, AIDS, enterite, pneumonia; meningite, encefali- te, infecção filarial linfática,

- distúrbios associados a miastenia gravis

- distúrbios associados à nefrite

por exemplo, incluindo glomerulonefrite, nefrite intersticiai, gra- nulomatose de Wegener, fibrose,

- distúrbios associados à dor

por exemplo, associados a distúrbios do CNS, tais como escle- rose múltipla, lesão da medula espinhal, ciática, síndrome de cirurgia das costas malsucedida, lesão cerebral traumática, epilepsia, mal de Parkinson, pós-insulto e lesões vasculares no cérebro e na medula espinhal (por exem- plo, infarto, hemorragia, malformação vascular);

dor neuropática não central, por exemplo, incluindo aquela asso- ciada com dor pós-mastectomia, sensação fantasma, distrofia simpatética reflexa (RSD), neuralgia-radioculopatia trigeminal, dor pós-cirúrgica, dor re- lacionada a HIV/AIDS, dor de câncer, neuropatias metabólicas (por exemplo, neuropatia diabética, neuropatia vasculítica secundária à doença de tecido conectivo), polineuropatia paraneoplásica associada, por exemplo, a carci- noma do pulmão ou leucemia, ou linfoma, ou carcinoma da próstata, cólon ou estômago, neuralgia trigeminal, neuralgias cranianas e neuralgia pós- herpética;

dor associada a danos dos nervos periféricos, dor central (isto é, devido à isquemia cerebral) e diversas dores crônicas, isto é, lumbago, dor de costas (dor na parte inferior das costas), dor inflamatória e/ou reumática;

dor de cabeça (por exemplo, enxaqueca com aura, enxaqueca sem aura, e outros distúrbios de enxaqueca) dor de cabeça episódica e crô- nica do tipo de tensão, dor de cabeça do tipo de tensão, sefaléia em salvas cluster, e hemicrânia paroximal crônica;

dor visceral, tal como pancreatite, cistite intestinal, dismenorréia, síndrome do intestino irritado, doença de Crohn, cólica biliar, cólica uretral, infarto do miocárdio e sindromes de dor da cavidade pélvica, por exemplo, vulvodinia, orquialgia, síndrome uretral 15 e protatodinia;

dor aguda, por exemplo, dor pós-operativa, e dor após trauma;

- distúrbios associados a distúrbios reumáticos, por exemplo, incluindo artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, artrite psoriática, artropatias de cristal, gota, pseudogota, doença de depósito de pirofosfato de cálcio, sídroromes de lúpus, Iupos eritematoso sistêmico, esclerose, esclerodema, esclerose múltipla, aterosclerose, arteriosclerose, espondiloartropatias, esclerose sistêmica, artrite reativa, síndrome de Reiter, espondilite anquilosante, polimiosite,

- distúrbios associados à sarcoidose,

- distúrbios associados a transplante, por exemplo, incluindo crises de rejeição e outros distúrbios a- pós o transplante, tais como rejeição de (xeno)transplante de órgão ou teci- do, por exemplo, para o tratamento de receptores de, por exemplo, coração, pulmão, coração-pulmão combinados, fígado, rim, pâncreas, pele, transplan- tes de córnea, doença de enxerto versus hospedeiro, tal como a que se se- gue a um transplante de medula óssea, lesão de reperfusão isquêmica,

controle de natalidade (por meio de inibição da ovulação).

Embora a inibição da ovulação não seja um distúrbio, o controle de natalidade (por meio de inibição da ovulação) também pretende estar a- brangido pela definição de "distúrbios que podem ser mediados por atividade de CCR9" de acordo com a presente invenção.

Distúrbios que podem ser mediados por atividade de CCR9, in- cluem, de preferência

- distúrbios autoimunes,

- distúrbios inflamatórios,

- distúrbios alérgicos,

- distúrbios após transplantes,

- câncer;

de modo particularmente preferido, distúrbios autoimunes, dis- túrbios inflamatórios, distúrbios após transplantes; tais como doença celíaca, alergia alimentar, artrite reumatoide, doenças intestinais inflamatórias (IBD), doença de Crohn, colite ulcerativa, psoríase, dermatite atópica, asma, doenças fibróticas, doenças após transplantes, re- jeição de GVH, câncer, leucemia (leucemia linfocítica aguda), tumores sóli- dos, carcinoides, timoma, carcinoma tímico, de preferência, IBD, tal como doença de Crohn, colite ulcerativa, por exemplo, incluindo proctite ulcerativa.

Em outro aspecto, a invenção põe à disposição:

- um composto da presente invenção para uso como um agente farmacêutico,

- o uso de um composto da presente invenção como agente far- macêutico,

- o uso de um composto da presente invenção para a produção de um medicamento, por exemplo, para o tratamento de distúrbios mediados por atividade de CCR9;

por exemplo, um composto da presente invenção para o trata- mento de distúrbios mediados por atividade de CCR9, tais como distúrbios associados à interrupção da ligação de CCR9 a CCL25, tais como distúrbios mediados por alojamento de leucócitos mediado por CCR9 em um indivíduo, para o tratamento de distúrbios mediados por atividade de CCR9.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um composto da presente invenção para a produção de um medicamento para o tratamento de doença intestinal inflamatória, Para uso farmacêutico, podem ser usados um ou mais compos- tos da presente invenção, por exemplo, é usada uma combinação de dois ou mais compostos da presente invenção, de preferência, um composto da pre- sente invenção.

Um composto da presente invenção pode ser usado como um agente farmacêutico, na forma de uma composição farmacêutica.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição uma composição farmacêutica que compreende um composto da presente inven- ção, em associação com pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitá- vel, por exemplo, um veículo e/ou diluente apropriado, por exemplo, incluin- do materiais de enchimento, aglutinantes, agentes de desintegração, condi- cionadores de fluência, lubrificantes, açúcares ou adoçantes, fragrâncias, conservantes, estabilizadores, umectantes e/ou emulsificantes, agentes de solubilidade, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição:

- uma composição farmacêutica da presente invenção, para uso no tratamento de distúrbios que são mediados por atividade de CCR9;

- o uso de uma composição farmacêutica da presente invenção para tratamento de distúrbios que são mediados por atividade de CCR9;

- o uso de uma composição farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção, para o tratamento de doença intestinal in- flamatória;

- o uso de uma composição farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção, para tratamento de distúrbios que são me- diados por atividade de CCR9.

Tratamento de distúrbios (doenças), tal como usado no presen- te, inclui profilaxia (prevenção). Para esse tratamento, a dosagem apropria- da, naturalmente, dependerá, por exemplo, da natureza química e dos dados farmacocinéticos de um composto da presente invenção usado, do hospe- deiro individual, do modo de administração e da natureza e gravidade das doenças que estão sendo tratadas. Mas, em geral, para resultados satisfató- rios em mamíferos grandes, por exemplo, seres humanos, uma dosagem diária indicada inclui um âmbito

- de cerca de O1 0001 g a cerca de 1, 5 g, tal como 0, 001 g a 1, 5 9.

- de cerca de O1 001 mg/kg de peso corporal a cerca de 20 mg/kg de peso corporal, tal como 0, 01 mg/kg de peso corporal a 20 mg/kg

de peso corporal, de um composto da presente invenção, administrado, por exemplo, em doses divididas em até quatro vezes ao dia.

Um composto da presente invenção pode ser administrado a mamíferos grandes, por exemplo, seres humanos, por modos de administra- ção similares aos usados convencionalmente com outros mediadores, por exemplo, inibidores de baixo peso molecular, de atividade de CCR9.

Em um outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um método para tratar distúrbios, que são mediados por atividade de CCR9, por exemplo, incluindo distúrbios tais como especificados acima, sendo que esse 15 tratamento compreende administrar a um indivíduo que necessite desse trata- mento uma quantidade terapeuticamente eficientemente de um composto da presente invenção; por exemplo, na forma de uma composição farmacêutica.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição:

- um composto da presente invenção para a produção de um medicamento,

- o uso de um composto da presente invenção pra a produção de um medicamento, por exemplo, uma composição farmacêutica, para o tratamento de distúrbios que são mediados por atividade de CCR9.

Em um outro aspecto, a presente invenção põe à disposição um método pra tratar uma doença intestinal inflamatória, sendo que esse tratamen- to compreende administrar a um indivíduo que necessite desse tratamento, uma quantidade terapeuticamente eficientemente de um composto da presente invenção; por exemplo, na forma de uma composição farmacêutica.

Um composto da presente invenção pode ser administrado por qualquer via convencional, por exemplo, por via enteral, por exemplo, inclu- indo administração nasal, bucal, retal, oral; por via parenteral, por exemplo, incluindo administração intravenosa, intra-arterial, intramuscular, intracardía- ca, subcutânea, infusão intraóssea, transdérmica (difusão através da pele intacta), transmucosal (difusão através de uma membrana mucosa), inalati- va; por via tópica, por exemplo, incluindo administração epicutânea, intrana- sal, intratraqueal; intraperitoneal (injeção ou infusão na cavidade peritoneal); epidural (peridural) (injeção ou infusão no espaço epidural); intratecal (inje- ção ou infusão no fluido cerebroespinhal); intravitreal (administração por meio do olho); ou por meio de dispositivos médicos; por exemplo, para dis- tribuição local, por exemplo, stents, por exemplo, na forma de comprimidos revestidos ou não revestidos, cápsulas, soluções (injetáveis), soluções de infusão, soluções sólidas, suspensões, dispersões, dispersões sólidas; por exemplo, na forma de ampolas, frascos, na forma de cremes, géis, pastas, pó de inalação, espumas, tinturas, batons para lábios, gotas, pulverização, ou na forma de supositórios.

Para uso tópico, por exemplo, incluindo administração no olho, resultados satisfatórios podem ser obtidos com a administração local de 0, 5- 10%, tal como 1-3%, de concentração da substância ativa várias vezes ao dia, por exemplo, 2 a 5 vezes ao dia.

Um composto da presente invenção pode ser administrado na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um sal de adi- ção de ácido ou sal metálico; ou em forma livre; opcionalmente, na forma de um solvato. Um composto da presente invenção na forma de um sal apre- senta a mesma ordem de atividade como um composto da presente inven- ção em forma livre; opcionalmente, na forma de um solvato.

Um composto da presente invenção pode ser usado para qualquer método ou uso, como descrito no presente, sozinho ou em combinação com uma ou mais, pelo menos uma, outra, segunda, substância farmacêutica.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição:

- uma combinação de um composto da presente invenção com pelo menos uma segunda substância farmacêutica;

- uma combinação farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção, em combinação com pelo menos uma segunda subs- tância farmacêutica; - uma combinação farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção, em combinação com pelo menos uma segunda substân- cia farmacêutica e um ou mais veículo(s) farmaceuticamente aceitável(aceitá- veis);

- um composto da presente invenção, em combinação com pelo menos uma segunda substância farmacêutica, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica, para uso em qualquer méto- do, tal como definido no presente, por exemplo,

- uma combinação, uma combinação farmacêutica ou uma com- posição farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância farmacêutica, para uso como um agente farmacêutico;

- o uso como um agente farmacêutico de um composto da pre- sente invenção, em combinação com pelo menos uma segunda substância farmacêutica, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica;

- o uso de um composto da presente invenção para a produção de um medicamento para uso em combinação com uma segunda substância farmacêutica, por exemplo, para qualquer tratamento terapêutico, tal como indicado no presente;

- um método para tratar distúrbios mediados por atividade de CCR9 em um indivíduo que necessite do mesmo, que compreende coadmi- nistrar, concomitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeutica- mente eficiente de um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância farmacêutica, por exemplo, na forma de uma combina- ção ou composição farmacêutica;

- um composto da presente invenção, em combinação com pelo menos uma segunda substância farmacêutica, por exemplo, na forma de uma combinação ou composição farmacêutica, para uso na preparação de um medicamento, para uso em distúrbios mediados por atividade de CCR9.

Combinações incluem combinação fixas, nas quais um compos- to da presente invenção e pelo menos uma segunda substância farmacêuti- ca estão na mesma formulação; kits, nos quais um composto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância farmacêutica em formula- ções separadas são fornecidos na mesma embalagem, por exemplo, com instruções para coadministração; e combinações livres, nas quais um com- posto da presente invenção e pelo menos uma segunda substância farma- cêutica estão embalados separadamente, mas são dadas instruções para administração concomitante ou seqüencial.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição:

- uma embalagem farmacêutica, que compreende uma primeira substância farmacêutica, que é um composto da presente invenção, e pelo menos uma segunda substância farmacêutica, além de instruções para a administração combinada;

- uma embalagem farmacêutica, que compreende um composto da presente invenção, além de instruções para administração combinada com pelo menos uma segunda substância farmacêutica;

- uma embalagem farmacêutica, que compreende pelo menos uma segunda substância farmacêutica, além de instruções para a adminis- tração combinada com um composto da presente invenção.

Um tratamento com combinações de acordo com a presente in- venção pode oferecer aperfeiçoamentos, em comparação com tratamento único.

Em outro aspecto, a presente invenção põe à disposição:

- uma combinação farmacêutica, que compreende uma quanti- dade de um composto da presente invenção e uma quantidade de uma se- gunda substância farmacêutica, sendo que as quantidades são apropriadas para produzir um efeito terapêutico sinérgico;

- um método para aperfeiçoar a utilidade terapêutica do compos- to da presente invenção, que compreende coadministrar, por exemplo, con- comitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeuticamente eficien- te do composto da presente invenção e uma segunda substância farmacêu- tica;

- um método para aperfeiçoar a utilidade terapêutica de uma se- gunda substância farmacêutica, que compreende coadministrar, por exem- plo, concomitantemente ou em seqüência, uma quantidade terapeuticamente eficiente do composto da presente invenção e uma segunda substância far- macêutica.

Uma combinação da presente invenção e uma segunda substância farmacêutica como componente de combinação podem ser administradas por qualquer via convencional, por exemplo, tal como mencionado acima para um composto da presente invenção. Uma segundo fármaco pode ser administrada em dosagens tais como apropriadas, por exemplo, em âmbitos de dosagem que são similares aos usados para tratamento único ou, por exemplo, no caso de sinergia, mesmo abaixo de âmbitos de dosagem convencionais.

Composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção podem ser produzidas de acordo com, por exemplo, analogamente a, um método, tal como convencional, por exemplo, por processos de mistura, gra- nulação, revestimento, dissolução ou liofilização. Formas de dosagem unitá- rias podem conter, por exemplo, de cerca de 0, 1 mg a cerca de 1500 mg, tal como 1 mg a cerca de 1000 mg. Composições farmacêuticas, que compre- endem uma combinação da presente invenção, e composições farmacêuti- cas, que compreendem uma segundo fármaco, tal como descrito no presen- te, podem ser obtidos, opcionalmente, por exemplo, de acordo com, por e- xemplo, analogamente a, um método tal como convencional, ou como des- crito no presente para uma composição da preente invenção.

Pelo termo "segunda substância farmacêutica" é designado um fármaco quimioterapêutico, especialmente, qualquer agente quimioterapêuti- co, diferente de um agente da presente invenção. Por exemplo, uma segun- da substância farmacêutica, tal como usada no presente inclui:

- outros inibidores de CCR9 do que um composto da presente invenção, por exemplo, incluindo anticorpos e compostos de baixo peso mo- lecular,

- fármacos anti-inflamatórios e/ou imunomoduladores,

- fármacos antialérgicos,

- fármacos anticâncer, - fármacos anestésicos,

- fármacos antidiarréicos.

Para tratamento de IBD1 o termo "segunda substância farmacêu- tica" significa que inclui um fármaco anti-inflamatório e/ou imunomodulador, por exemplo, que inclui um fármaco que é ativo na prevenção ou tratamento de IBD e/ou que é ativo no tratamento de manifestações de IBD1 por exem- plo, sintomas de IBD1 taais como um fármaco anestésico ou fármaco antidi- arréico.

Fármacos anti-inflamatórios e/ou imunomoduladores, que podem ser úteis em combinação com um composto da presente invenção, incluem, por exemplo,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de mTOR, incluindo rapamicina da fórmula

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e derivados de rapamicina, por exemplo, incluindo

derivados de 40-0-alquila-rapamicina, tais como derivados de 40-0-hidroxialquila-rapamicina, tal como 40-0-(2-hidróxi)-etila- rapamicina(everolimus),

derivados de 32-deoxo-rapamicina e derivados de 32-hidróxi- rapamicina, tais como 32-deoxo-rapamicina,

derivados de rapamicina substituídos com 16-0, tais como 16-pent- 2-inilóxi-32-deoxo-rapamicina, 16-pent-2-inilóxi-32 (S ou R)-di-hidro-rapamicina, 16-pent-2-inilóxi-32 (S ou R)-di-hidro-40-0-(2-hidroxietila)-rapamicina,

derivados de rapamicina, que estão acilados no grupo oxigênio na posição 40, por exemplo, 40-[3-hidróxi-2-(hidróxi-metila)-2-metilpropanoa- to]-rapamicina (também conhecida como CCI779),

derivados de rapamicina, que estão substituídos na posição 40 por uma heterociclila, por exemplo, 40-epi-(tetrazolila)-rapamicina (também conhecida como ABT578), os chamados "rapalogs", por exemplo, tais como descritos nos documentos W09802441, W00114387 e W00364383, tal como AP23573, e

compostos descritos sob o nome de TAFA-93, AP23464, AP23675, AP23841 e biolimus (por exemplo, biolimus A9),

- mediadores, por exemplo, inibidores, de calcineurina, por e- xemplo, ciclosporina A, FK 506,

- ascomicinas, com propriedades imunossupressoras, por exem- plo, ABT-281, ASM981,

- corticoesteroides; ciclofosfamida; azatiopreno; leflunomida; mi- zorribina,

- ácido ou sal micofenólico, por exemplo, sódio, micofenolato de mofetila,

- 15-deoxiespergualina ou um homólogo imunossupressor, aná- logo ou derivado do mesmo,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de bcr-abl tirosina quinase de,

- mediadores, por exempio, inibidores, de atividade de tirosina quinase de receptor de c-kit,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de tirosina quinase de receptor de PDGF, por exemplo, Glevec (imatinib),

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de p38 MAP quinase,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de tirosina quinase de receptor de VEGF1

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de PKC, por exemplo, tal como descrito nos documentos W00238561 ou W00382859, por exemplo, o composto do Exemplo 56 ou 70,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade JAK3 quina- se de, por exemplo, N-benzila-3, 4-di-hidróxi-benzilideno-cianoacetamida a- ciano-(3,4-di-hidróxi)-]N-benzilcinamamida (Tyrphostin AG 490), prodigiosi- na 25-C (PNU156804),[4-(4'-hidroxifenila)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-p131),[4-(3'-bromo-4'-hidroxifenila)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] WHI-P97, KRX-211, 3-{(3R, 4R)-4-metila-3-[metila(7H-pirrolo[2, 3- d]piridimidin^-ila)-amino]-piperidin-1-ila}-3-oxo-propionitrila, em forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, monoci- trato (também chamado de CP-690, 550), ou um composto, tal como descri- to em W02004052359 ou W02005066156,

- mediadores, por exemplo, agonistas ou moduladores da atividade do receptor de S1P, por exemplo, FTY720, opcionalmente fosforilado ou um análogo do mesmo, por exemplo, 2-amino-2-[4-(3-benziloxifeniltio)-2- clorofenila]etila-1, 3-propanodiol, opcionalmente fosforilado ou ácido 1-{4-[1-(4- cido-hexila-3-trifluormetila-benziloxiimino)-etila]-2-etila-benzila}-azetidina-3- car- boxílico ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis,

- anticorpos monoclonais imunossupressores, por exemplo, anti- corpos monoclonais para receptores de leucócitos, por exemplo, receptor de Blys/BAFF, MHC1 CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD40, CD45, CD52, CD58, CD80, CD86, receptor de IL-12, receptor de IL-17, receptor de IL-23 ou seus ligantes,

- outros compostos imunomoauiadores, por exemplo, uma molé- cula de ligação recombinante, com pelo menos parte do domínio extracelular de CTLA4 ou um mutante do mesmo, por exemplo, pelo menos uma parte extracelular de CTLA4 ou um mutante do mesmo, ligada a uma seqüência de proteína não de CTLA4, por exemplo, CTLA4lg (por exemplo, designada como ATCC 68629) ou um mutante do mesmo, por exemplo, LEA29Y,

- mediadores, por exemplo, inibidores de atividades de molécu- las de adesão, por exemplo, antagonistas de LFA-1, antagonistas de ICAM-1 ou -3, antagonistas de VCAM-4 ou antagonistas de VLA-4,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de MIF,

- agentes de 5-aminossalicilato(5-ASA), tais como sulfassalazi- na, Azulfidine®, Asacol®, Dipentum®, Pentasa®, Rowasa®, Canasa®, Co- lazal®, por exemplo, fármacos contendo mesalamina; por exemplo, mesala- mina em combinação com heparina,

- mediadores, por exemplo, inibidores de atividade de TNF-alfa, por exemplo, incluindo anticorpos, que se ligam em T-alfa, por exemplo, infli- ximab (Remicade®), talidomida, Ienalidomida1

- óxido nítrico, que libero fármacos anti-inflamatórios, não este- roidais (NSAIDs)1 por exemplo, incluindo fármacos doadores de NO, que inibem COX (CINOD),

- fosfodiesterase, por exemplo, mediadores, tais como inibidores da atividade de PDE4B,

- mediadores, por exemplo, inibidores, de atividade de caspase,

- mediadores, por exemplo, agonistas, do receptor ligado à pro- teína G GPBAR1,

- mediadores, por exemplo, inibidores, da atividade de ceramida quinase,

- fármacos 'anti-inflamatórios multifuncionais' (MFAIDs)1 por exemplo, inibidores de fosfolipase citosólica A2 (cPLA2), tais como inibidores de fosfolipase A2, ancorados em membrana, ligados a glicosaminoglicanos,

- antibióticos, tais como penicilinas, cefalosporinas, eritromicinas, tetraciclinas, sulfonamidas, tais como sulfadiazina, sulfisoxazol; solfonas, tais como dapsona; pieuromutilinas, fiuorquinolonas, por exemplo, metronidazol, quinolonas, tais como cirpofloxacina, levofloxacina, probióticos e bactérias comensais, por exemplo, Lactobacillus, Lactobacillus reuteri,

- fármacos antivirais, tais como ribivirina, vidarabina, aciclovir, ganciclovir, zanamivir, fosfato de oseltamivir, fanciclovir, atazanavir, amanta- dina, didanosina, efavirenze, foscarnet, indinavir, lamivudine, nelfinavir, rito- navir, saquinavir, estavudina, valaciclovir, valganciclovir, zidovudina.

Fármacos anti-inflamatórios, que podem ser úteis em combina- ção com um composto da presente invenção, incluem, por exemplo, agentes anti-inflamatórios não-esteroidais (NSAIDs), tais como derivados de ácido propiônico (alminoprofen, benoxaprofen, ácido buclóxico, carprofen, fenbu- fen, fenoprofen, fluprofen, flurbiprofen, ibuprofen, indoprofen, cetoprofen, miroprofen, naproxen, oxaprozin, pirprofen, pranoprofen, suprofen, ácido tiaprofênico e tioxaprofen), derivados de ácido acético (indometacina, ace- metacina, alclofenac, clidanac, diclofenac, fenclofenac, ácido fencózico, fen- tiazac, furofenac, ibufenac, isoxepac, oxpinac, solindac, tiopinac, tolmetina, zidometacina e zomepirac), derivados de ácido fenâmico (ácido flufenâmico, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, ácido niflúmico e ácido tolfenâmi- co), derivados de ácido bifenilcarboxílico (diflunisal e flufenisal), oxicamos (isoxicamo, piroxicamo, dusoxicamo e tenoxican), salicilatos (ácido acetila salicílico, sulfasalazina) e as pirazolonas (apazona, bezpiperilona, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona, fenilbutazona), inibidores de ciclo-oxigenase- 2 (COX-2), tal como celecoxib; inibidores de fosfodiesterase tipo IV (PDE- IV); antagonistas dos receptores de quimiocina, especialmente, CCR1, C- CR2 e CCR3; agentes redutores de colesterol, tais como inibidores de redu- tase de HMG-CoA (lovastatina, sinvastatina e pravastatina, fluvastatina, a- torvastatina e outras estatinas), sequestrantes (colestiramina e colestipol), ácido nicotínico, derivados de ácido fenofíbrico (genfibrozila, clofibrat, fenofi- brat e benzafibrat) e probucol; agentes anticolinérigos, tais como antagonis- tas muscarínicos (brometo de ipratróprio); outros compostos, tais como teofi- linas, sulfassalazinas e aminossalicilatos, por exemplo, ácido 5- aminossalicílico e profármacos do mesmo, agentes antirreumáticos.

Fármacos antialérgicos, que podem ser úteis em combinação com um composto da presente invenção incluem, por exemplo, anti- histamínicos (antagonistas de H1-histamina), por exemplo, bromofeniramina, clorofeniramina, dexclorofeniramina, triprolidina, clemastina, difenidramina, difenilpiralina, tripelennamina, hidroxizina, metdilazina, prometazina, trime- prazina, azatadina, ciproheptadina, antazolina, feniramina, pirilamina, aste- mizol, terfenadina, loratadina, cetirizina, fexofenadina, descarboetoxiloratadi- na e agentes antiasmáticos não-esteroidais, tais como agonsitas de β-2 (ter- butalina, metaproterenol, fenoterol, isoetarina, albuterol, bitolterol, salmeterol e pirbuterol), teofilina, cromolina sódica, atropina, brometo de ipratrópio, an- tagonistas de Ieucotrieno (zafirlucast, montelucast, pranlucast, iralucast, po- bilucast, SKB-106, 203), inibidores de biossíntese de Ieucotrieno (zileuton, BAY-1005); broncodilatadores, agentes antiasmáticos (estabilizadores mas- tócitos).

Fármacos anticâncer, que podem ser úteis como componente de combinação com um composto da presente invenção, incluem, por exemplo: i. um esteroide, por exemplo, prednisona;

ii. um inibidor de adenosina de quinase, que seleciona, diminui ou inibe metabolismo de nucleobase, nucleosídio, nucleotídio e ácido nucléi- co, tais como 5-iodotubercidina, que também é conhecida como 7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-4-amina, 5-iodo-7-p-D-ribofuranosila;

iii. um adjuvante, que intensifica a ligação de 5-FU-TS, bem co- mo um composto que seleciona, diminui ou inibe a fosfatase alcalina, tal co- mo leucovorina, levamisol;

iv. um antagonista de córtex adrenal, que seleciona, diminui ou inibe a atividade do córtex adrenal e modifica o metabolismo periférico de corticoesteroides, resultando em uma diminuição em 17-hidroxicorticoeste- roides, tais como mitotano;

v. um inibidor de caminho de AKT, tal como um composto que se- leciona, diminui ou inibe Akt, também conhecido como proteína de quinase B (PKB, tal como deguelina, que também é conhecida como 3H- bis[1]benzopirnol[3, 4-b:6', 5'-e]piran-7-(7aH)-ona, 13, 13a-di-hidro-9, 10- dimetóxi-3, 3-dimetila-, (7aS, 13aS) e triciribina, que também é conhecida como 1, 4, 5, 6, 8-penta-aza-acenaftilen-3-amina, 1, 5-di-hidro-5-metila-1-p-D- ribofuranosila,

vi. um agente de alquilação, que causa a alquilação de DNA e re- sulta em rupturas nas moléculas de DNA, bem como na reticulação das duas espirais, desse modo, interferindo na replicação e transcrição de RNA, tais co- mo mostardas de nitrogênio, por exemplo, clorambucila, clorometina, ciclofos- famida, ifosfamida, melfalano, estramustina (Emcyt®), nitroureias, tais como carmustina, fotemustina, lomustina, estreptozocina (estreptozotocina, STZ, Za- nosar®), BCNU, gliadel, dacarbazina, mecloroetamina, por exemplo, na forma de um hidrocloreto, procarbazina, por exemplo, na forma de um hidroclroeto, tiotepa, temozolomida (TEMODAR®), mitomicina, altretamina, bussulfano, es- tramustina, uramustina. Ciclofosfamida pode ser administrada, por exemplo, na forma tal como é comercializada, por exemplo, sob a marca comercial CY- CLOSTIN®, e ifosfamida como HOLOXAN®, um inibidor de angiogênese, que seleciona, diminui ou inibe a produção de novos vasos sangüíneos, por exem- pio, que seleciona metionina de aminopeptidase-2 (MetAP-2), proteína 1 infla- matória macrófaga (MlP-lalfa), CCL5, TGF-beta, Iipoxigenase1 ciclo-oxigenase e topoisomerase, ou que seleciona, indiretamente, a síntese de p21, p53, CDK2 e colágeno, por exemplo, incluindo fumagilina, que é conhecida como ácido 2, 4, 6, 8-decatetraenodióico, mono[(3R, 4S, 5S, 6R)-5-métóxi-4-[(2R, 3R)-2- metila-3-(3-metila-2-butenila)oxiranila]-1-oxaespiro[2, 5]oct-6-ila]éster, (2E, 4E, 6E, 8E)-(9CL), chiconina, que também é conhecida como 1, 4-naftalenodiona, 5, 8-di-hidróxi-2-[(1R)-1-hidróxi-4-metila-3-pentenila]-(9CL), tranilast, que tam- bém é conhecido como ácido benzóico, 2-[[3-(3, 4-dimetoxifenila)-1-oxo-2- propenila]amino], ácido ursólico, suramina, bengamida ou um derivado da mesma, talidomida, TNP-470;

viii. um antiandrógeno, que bloqueia a ação de androgênio e ori- gem adrenal e testicular, que estimulam o crescimento de tecido prostático normal e maligno, tal como nilutamida, bicalutamida (CASODEX®), que pode ser formada, por exemplo, tal como descrito no documento US4636505;

ix. um antiestrógeno, que antagoniza o efeito de estrogênios no nível de receptor de estrogênio, por exemplo, incluindo um inibidor de aro- matase, que inibe a produção de estrogênio, isto é, a conversão dos substra- tos androestenodiona e testosterona, em cada caso, em estrona e estradiol, por exemplo, incluindo atamestano, exemestano, formestano, aminogluteti- mida, rogletimida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, cetoconal, vora- zol, fadrozol, anastrozol, letrozol, toremifeno; bicalutamid, flutamida, tamoxi- feno, citrato de tamoxifeno; tamoxifeno, fulvestrant, raloxifeno, cloridrato de raloxifeno. Tamoxifeno pode ser administrado, por exemplo, na forma tal como é comercializado, por exemplo, NOLVADEX®, e hidroclroeto de raloxi- feno é comercializado como EVISTA®, Fulvestrant pode ser formulado tal como descrito em US4659516 e é comercializado como FASLODEX®;

x. um agente anti-hipercalcemia, que é usado para tratar hipercal- cemia, tal como hidrato de nitrato de gálio (III) e pamidronato dissódico,

xi. um antimetabólito, que inibe ou desintegra a síntese de DNA1 resultando em morte celular, tais como ácidos fólicos, por exemplo, metotre- xato, pemetrexed, raltitrexeda; purinas, por exemplo, 6-mercaptopurina, cia- dribina, clofarabina, fludarabina, tioguanina (tioguanina), 6-tioguanina, pen- tostatina (deoxicoformicina), citarabina, flexuridina, fluoruracila, 5-fluoruracila (5-FU), floxuridina (5-FUdR), capecitabina, gencitabina, cloridrato de genci- tabina, hidroxiureia (por exemplo, Hydrea®); agentes de desmetilação de DNA, tais como 5-azacitidiria e decitabina, edatraxato. Capecitabina e genci- tabina podem ser administradas, por exemplo, na forma comercializada, tais como XELODA® e GEMZAR®;

xii. um indutor de apoptose, que induz a série de eventos normais em uma célula, que leva à sua morte, por exemplo, induzindo seletivamente o inibidor de mamífero ligado a X da proteína de apoptose XIAP, ou, por exemplo, regulando BCL-xL, tal como etanol, 2-[[3-(2, 3-diclorofenóxi)propila]amino], áci- do gambógico, embelina, que também é conhecida como 2, 5-ciclo-hexadieno- 1,4-diona, 2, 5-di-hidróxi-3-undecila-(9CL), trióxido arsênico;

xiii. um inibidor de aurora quinase, que seleciona, diminui ou ini- be estágios avançados do ciclo celular do ponto de controle G2/M, em toda a extensão através do ponto de controle mitótico e mitose avançada, tal como binucleína 2, que também é conhecida como metanimidamida, N'-[1-(3-cloro- 4-fluorfenila)-4-ciano-1 H-pirazol-5-ila]-N, N-dimetila-(9CL);

xiv. um inibidor de tirosina quinase de Bruton (BTK), que sele- ciona, diminui que inibe o desenvolvimento de células B humanas e murinas, tal como ácido terreico;

xv. um inibidor de calcineurina, que seleciona, diminui ou inibe o caminho de ativação de células T, tal como cipermetrina, que é conhecido também como ácido ciclopropanocarboxílico, 3-(2, 2-dicloroetenila)-2, 2- dimetila-ciano(3-fenoxifenila)metila éter,detalmetrin, que é também conheci- do como ácido ciclopropanocarboxílico,3-(2,2-dibromoetenila)-2, 2-dimetila- (S)-ciano(3-fenoxifenila)metila éster,(1R, 3R), fenvalerato, que é também conhecido como ácido benzenoacético,4-cloro-a-(1-metiletila)-ciano(3- fenoxifenila)metila éster, e tirfostin 8, mas excluindo ciclosporina ou FK506,

xvi. um inibidor de CaM quinase, que seleciona, diminui ou inibe quinases de CaM, consistindo uma família de enzimas estruturalmente relacio- nadas, que incluem fosforilase quinase, quinase de cadeia leve de miosina, e CaM quinas I-IV1 tais como ácido 5-isoquinolinssulfônico, 4-[(2S)-2-[(5- isoquinolinilsulfonila)metilamino]-3-oxo-3-(4-fenila-1-piperazinila)propila]fenila éster (9CL), benzenossulfonamida, N-[2-[[[3-(4-clorofenila)-2- propenila]metila]amino]metila]fenila]-N-(2-hidroxietila)-4-metóxi,

xvii. um inibidor de CD45 tirosinafosfatase, que seleciona, dimi- nui ou inibe a desfosforilação reguladora de radicais de pTyr em proteína tirosina quinase da família Srcl que ajuda no tratamento de uma pluralidade de distúrbios inflamatórios e imunes, tais como ácido fosfônico, [[2-(4- bromofenóxi)-5-nitrofenila]hidroximetila];

xviii. um inibidor de CDC25 fosfatase, que seleciona, diminui ou inibe a superexpressão de quinases dependentes de ciclina desfosforiladas em tumores, tal como 1, 4-naftalenodiona, 2, 3-bis[(2-hidroetila)tio];

xix. um inibidor de CHK quinase, que seleciona, diminui ou inibe a superexpressão da proteína antiapoptótica Bcl-2, tal como debromohime- nialdisina. Os alvos de um inibidor de CHK quinase são CHK1 e/ou CHK2;

xx. agente de controle para regular genisteína, olomucina e/ou tirfostinas, tai como daidzeína, que também é conhecida como 4H-1- benzopiran-4-ona, 7-hidróxi-3-(4-hidroxifenila), iso-olomoucina etirfostina 1;

xxi. um inibidor de ciclo-oxigenase, por exemplo, incluindo inibi- dores de Cox-2, que selecionam, diminuem ou inibem a enzima Cox-2 (ciclo- oxigenase-2), tal como 1H-indol-3-acetamida, 1-(4-clorobenzoila)-5-metóxi-2- metila-N-(2-feniletila), ácido 2-arilaminofenilacético substituído com 5-alquila e derivados, por exemplo, celecoxib (CELEBREX®), rofecoxib (VIOXX®), etoricoxib, valdecoxib, ou um ácido 5-alquila- 2-arilaminofenilacético, por e- xemplo, ácido 5-metila-2-(2'-cloro-6'-fluoranilino) fenilacético, Iumiracoxib e celecoxib,

xxii. um inibidor de cRAF quinase, que seleciona, diminui ou ini- be a regulação para cima de E-selectina e molécula de adesão vascular-1 induzida por TNF, tal como 3-(3, 5-dibromo-4-hidroxibenzilideno)-5-iodo-1, 3- di-hidroindol-2-ona, e benzamida, 3-(dimetilamino)-N-[3-[(4- hidroxibenzoila)amino]-4-metilfenila]. Raf quinases desempenham um papel importante como quinases reguladoras de sinais extracelulares na diferenci- ação, proliferação e apoptose de células. Um alvo de um inibidor de cRAF quinase inclui, mas não está limitado a, RAF1;

xxiii. um inibidor de quinase dependente de ciclina, que selecio- na, diminui ou inibe quinases dependentes de ciclina, importantes na regula- ção do ciclo celular de mamíferos, tais como N9-isopropila-olomoucina, olo- moucina, purvalanol B, que é também conhecido como ácido benzóico, 2- cloro-4-[[2-[[(1R)-1-(hidroximetila)-2-metilpropila]amino]-9-(1-metiletila)-9H- purin-6-ila]amino]-(9CL), roascovitina, indirrubina, que é também conhecida como 2H-indol-2-ona, 3-(1, 2-di-hidro-3-oxo-2H-indol-2-ilideno)-1, 3-di-hidro- (9CL), cenpaulona, que é também conhecida como indolo[3, 2- d][1]benzazepin-6(5H)-ona, 9-bromo-7, 12-di-hidro-(9CL), purvalanol A, que é também conhecido como 1-butanol-2-[[6-[(3-clorofenila)amino]-9-(1- metiletila)-9H-purin-2-ila]amino]-3-metila-(2R)-(9CL), indirrubin-3'-mono- oxima. A progressão do ciclo celular é regulada por uma série de eventos seqüenciais, que incluem e ativação e subsequente inativação de quinases dependentes de ciclina (Cdks) e ciclinas. Cdks são um grupo de seri- na/treonina quinases, que formam complexos heterodiméricos ativos por ligação em suas subunidades reguladoras, ciclinas. Exemplos de alvos de um inibidor de quinase dependnete de ciclina incluem, mas não estão Iimita- dos a, CDK1 AHR, CDK1, CDK2, CDK5, CDK4/6, GSK3beta e ERK,

xxiv. um inibidor de cisteína de protease, que seleciona, diminui ou inibe a cisteína de protease, que desempenha um papel vital na renova- ção e apoptose celular de mamíferos, tal como 4-morfolinacarboxamida, N- [(1S)-3-flúor-2-oxo-1-2-feniletila)propila]amino]-2-oxo-1-(fenilmetila) etila],

xxv. um intercalador de DNA, que liga DNA e inibe a síntese de

DNA1 RNA e proteínas, tais como plicamicina, dactinomicina,

xxvi. um desintegrador de espiral de DNA, que causa separação das fitas de DNA e resulta na inibição da síntese de DNA, inibição da síntese de RNA e proteínas, tal como bleomicina,

xxvii. um inibidor de Iigase de E3, que seleciona, diminui ou inibe a ligase de E3, ou inibe a transferência de cadeias de ubiquitina para as pro- teínas, marcando as mesmas pra degradação do proteassomo, tal como N- ((3, 3, 3-trifluor-2-triflurometila)propionila)sulfanilamida,

xxviii. um hormônio endócrino, que por agir, principalmente, so- bre a glândula pituitária, causa a supressão de hormônios em machos, sen- do o efeito líquido é a redução de testosterona a níveis de castração, sendo que em fêmeas, é inibida tanta a síntese de estrogênio como de androgênio ovariano, tal como leuprolida, megestrol, acetato de megestrol;

xxix. compostos que selecionam, diminuem ou inibem a família das quinases dos receptores do fator de crescimento epidérmico (EFGR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 como homo- ou heterodímeros), tais como compostos, proteínas ou anticorpos que inibem membros da família de quinases de tirosina do recep- tor de EGF, por exemplo, receptor de EGF, ErbBI, ErbB2, ErbB3 e ErbB4, ou se ligam em EGF ou Iigantes relacionados a EGF, e são, particularmente, os compostos, proteínas ou anticorpos monoclonais, descritos genericamente e especificamente no documento W09702266, por exemplo, o composto de ex. 39, EP0564409, W09903854, EP0520722, EP0566226, EP0787722, EP0837063, US5747498, W09810767, W09730034, W09749688, W09738983 e, especialmente, W09630347, por exemplo, um composto co- nhecido como CP 358774, W09633980, por exemplo, um composto conhecido como ZD 1839, e W09503283, por exemplo, um composto conhecido como ZM105180, por exemplo, incluindo o inibidor de tirosina quinase de ação dupla (ErbB1 e ErbB2) Iapatinib (GSK572016), por exemplo ditossilato de lapatinib, panituzumab, trastuzumab (HERCEPTIN®), cetuximab, iressa, OSI-774, Cl- 1033, EKB-569, GW-2016, E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E2.11, E6.3 ou E7.6.3, deri- vados de 7H-pirrolo-[2, 3-d]pirimidina, que estão descritos, por exemplo, em W0030013541, erlotinib, gefitinib. Erlotinib pode ser administrado na forma tal como é comercializado, por exemplo, TARCEVA®, e genfitinib, como IRES- SA®, anticorpos monoclonais contra o receptor do fator de crescimento epi- dérmico, incluindo ABS-EGFR;

xxx. um inibidor de tirosina quinase de EGFR, PDGFR, tais como inibidores de quinase de EGFR, que incluem tirfostina 23, tirfostina 25, tirfostina 47, tirfostina 51 e tirfostina AG825, 2-propenamida, 2-ciano-3-(3, 4-di- hidroxifenila)-N-fenila-(2E), tirfostina Ag1478, Iavendustina A, 3- piridinacetonitrila, α-[(3, 5-diclorofenila)metileno]-, (αΖ), um exemplo de um ini- bidor de tirosina quinase de EGFR1 PDGFR inclui, por exemplo, tirfostina 46. O inibidor de tirosina quinase de PDGFR incluir tirfostina 46. Alvos de um inibidor de quinase de EGFR incluem guanilila ciclase (GC-C)HER2, EGFR1 PTK e tu- bulina;

xxxi. um inibidor de farnesila transferase, que seleciona, diminui ou inibe a proteína de Ras, tal ácido como a-hidroxifarnesila-ácido fosfônico, buta- nóico, 2-[[(2S)-[[(2S, 3S)-2-[[(2R)-2-amino-3-mercaptopropila]amino]-3-metil- pentila]óxi]-1-oxo-3-fenilpropila]amino]-4-(metilsulfonila)-, 2-metiletila éster, (2S), manumicina A, L-744, 832 ou DK8G557, tipifarnib (R115777), SCH66336 (lona- farnib), BMS-214662,

xxxii. um inibidor de Flk-1 quinase de, que seleciona, diminui ou inibe a atividade da tirosina Flk-1 quinase, tal como 2-propenamida, 2-ciano- 3-[4-hidróxi-3, 5-bis(1-metiletila)fenila]-N-(3-fenilpropila)-(2E). Um alvo de um inibidor de qinase de Flk-1 inclui, mas não está limitado a, KDR;

xxxiii. um inibidor de quinase de sintase de glicogênio, que selecio- na, diminui ou inibe a quinase de sintase de glicogênio 3 (GSK3), tal como indir- rubin-3'-monooxima. A Glicogênio sintase quinase -3 (GSK-3; proteína de qui- nase de tau I), uma proteína serina/treonina de quinase, altamente conservada, expressada ubiquamente, está envolvida nas cascatas de transdução de sinais de múltiplos processos celulares, que é uma proteína de quinase que se mos- trou estar envolvida na regulação de uma série diversa de funções celulares, incluindo síntese de proteínas, proliferação celular, diferenciação celular, forma- ção/separação de microtúbulos, e apoptose;

xxxiv. um inibidor de histona deacetilsase (HDAC), que inibe a his- toria deacetilase e que possui atividade antiproliferativa, tal como compostos descritos em W00222577, especialmente, N-hidróxi-3-[4-[[(2-hidroxietila)[2-( 1H- indol-3-ila)etila]-amino]metila]fenila]-2E-2-propenamida e N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metila-1 H-indol-3-ila)-etila]amino]metila]fenila]-2E-2-propenamida e sais farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos, ácido suberoilanilida hidroxâmico (SA- HA), éster piridina-3-il-metílico de ácido (4-(2-amino-fenilcarbomoil)- benziljcarbâmico e derivados do mesmo piroxamida, tricostatina A, oxanflatina, apicidina, depsipeptídio, depudecina, trapoxina, toxina HC1 que também é conhecida como ciclo(L-alanila-D-alanila-(DS, 2S)-D-amino-D- oxooxiranoctanoila-D-prolila](9CL), fenilbutirato de sódio, ácido suberoilbis- hidroxâmico, tricostatina A, BMS-27275, piroxamida, FR-901228, ácido valpróico, xxxv. um inibidor de HSP 90, que seleciona, diminui ou inibe a atividade de ATPase intrínseca de HSP90, degrada, seleciona, diminui ou inibe as proteínas clientes de HSP90 por meio da via da ubiguitina- proteassoma compostos alvos, diminuidores ou inibidores da atividade de ATPase intrínseca de HSP90, são, especialmente, compostos, proteínas ou anticorpos que inibem a atividade de ATPase de HSP90, por exemplo, 17- alilamino, 17-demetoxigeldanamicina (17AAG), um derivado de geldanamici- na, outros compostos relacionados a geldanamicina, inibidores de radicicol e HDAC. Outros exemplos de inibidores de HSP90 incluem geldanamicina, 17- demetóxi-17-(2-propenilamino). Alvos indiretos potenciais de um inibidor de HSP90 incluem FLT3, BCR-ABL, CHK1, CYP3A5*3 e/ou NQ01*2. Nilotinib é um exemplo de um inibidor de tirosina quinase de BCR-ABL.

xxxvi. um inibidor de quinase de i-kapa B-alfa (IKK), que selecio- na, diminui ou inibe NF-kapaB, tal como 2-propenonitrila, 3-[(4-metilfe- nila)sulfonila]-(2E),

xxxvii. um inibidor de tirosina quinase de receptor de insulina, que modula as atividades da fosfatidilinositol quinase-3, proteína associada a microtúbulos e quinases de S6, tais como ácido hidroxila-2-naftaenilmetila- fosfônico, LY294002,

xxxviii. um inibidor de quinase quinase de terminal N de c-Jun (JNK), que seleciona, diminui ou inibe a quinase de terminal N de Jun, tal como pirazolantrona e/ou gaiato de epigalocatequina. A quinase de terminal N de Jun (JNK), uma proteína de quinase de dirigida por serina, está envol- vida na fosforilação e ativação de c-Jun e ATF2 e desempenha um papel significativo no metabolismo, crescimento, diferenciação celular e apoptose. Um alvo para um inibidor de quinase de JNK inclui, mas não está limitado a, DNMT;

xxxix. um agente de ligação de microtúbulos, que age por desin- tegração da rede microtubular, que é essencial para a função celular mitótica e de interfase, tais como alcalóides de vinca, por exemplo, vinblastina, sulfa- to de vinblastina, vincristina, sulfato de vincristina, vindesina, vinorrelbina, taxanos, tais como taxanos, por exemplo, docetaxel, paclitaxel, discodermo- lídeos, coquicina, epotilonas e derivados das mesmas, por exemplo, epotilo- na B ou um derivado da mesma. Paclitaxel é comercializado como TAXOL®, docetaxel, como TAXOTERE®, sulfato de vinblastina, como VINBLASTIN R.P®, e sulfato de vincristina, como FARMISTIN®. Também estão incluídas as formas genéricas de paclitaxel, bem como várias formas de dosagem de paclitaxel. Formas genéricas de paclitaxel incluem, mas não estão limitadas a, cloridrato de betaxolol. Diversas formas de dosagem de paclitaxel inclu- em, mas não estão limitadas a, paclitaxel de nanpartículas de albumina, co- mercializado como ABRAXANE®, ONXOL® CYTOTAX®. Discodermolídeos podem ser obtidos, por exemplo, tal como descrito em US5010099. Também estão incluídos derivados de epotolina, que estão descritos em US6194181, W098/0121, W09825929, W09808849, W09943653, W09822461 W00031247. São especialmente preferidas epotilona A e/ou B,

xl. um inibidor de proteína de quinase ativada por mitogênio (MAP), que seleciona, diminui ou inibe proteína ativada por mitogênio, tal como benzenossulfonamida, N-[2-[[[3-(4-clorofenila)-2-propenila]metila]ami- no]metila]fenila]-N-(2-hidroxietila)-4-metóxi. As proteína de quinase ativadas por mitogênio (MAP) são um grupo de serina /treonina proteínaa de quinase, que são ativadas em resposta a uma pluralidade de estímulos extracelulares e medeiam transdução de sinais da superfície da célula para o núcleo. Elas regulam diversos fenômenos celulares fisiológicos e patológicos, incluindo inflamação, morte celular apoptótica, transformação oncogênica, invasão de células tumorais e metástase;

xli. um inibidor de MDM2, que seleciona, diminui ou inibe a inte- ração de MDM2 e do supressor de tumor p53, tal como trans-4-iodo, 4'- boranila-calcona;

xlii. um inibidor de MEK, que seleciona, diminui ou inibe a ativi- dade da quinase de MAP, MEK, tal como sorafenib, por exemplo, NexavarO (tosilato de sorafenib), butanodinitrila, bis[amino[2-aminofenila]tio]metileno]. Um alvo do inibidor de MEK inclui, mas não está limitado a, ERK. Um alvo indireto de um inibidor de MEK inclui, mas não está limitado a, ciclina D1,

xliii. um inibidor de metaloproteinase de matriz (MMP), que sele- ciona, diminui ou inibe uma classe de enzimas de protease, que catalisam, seletivamente, a hidrólise das ligações de polipeptídio, incluindo as enzimas MMP-2 e MMP-9, que estão envolvidas na promoção da perda de estrutura de tecido em torno de tumores e facilitam o crescimento de tumores, angio- gênese e metástase, tais como actinonina, que também é conhecida como butanodiamida, N-4-hidróxi-N1-[(1S)-2-(hidroximetila)-1-pirrolidinila) carboni- la]-2-metilpropila]-2-pentila-, (2E)-(9CL), gaiato de epigalocatequina, inibido- res peptidomiméticos e não peptidomiméticos de colágeno, derivados de tetraciclina, por exemplo, inibidor peptidomimético de hidroxamato batimas- tato, e seus análogos biodisponíveis oralmente, marimastato, prinomastato, metastato, neovastato, tanomastato, TAA211, BMS-279251, BAY 12-9566, MMI270B ou AAJ996. Um alvo de um inibidor de MMP inclui, mas não está limitado a, deformiiase de polipeptídio,

xliv. um inibidor de tirosina quinase de NGFR, que seleciona, diminui ou inibe o fator de crescimento de nervos dependente de fosforilação de tirosina de p140c-trk, tal como tirfostina AG 879. Alvos do inibidor da tirosi- na quinase de NGFR incluem, mas não estão limitados a, HER2, FLK1, FAK1 TrkA e/ou TrkC. Um alvo indireto inibe a expressão de RAF1,

xlv. um inibidor de quinase de MAP de p38, incluindo um inibidor de quinase de SAPK2/p38, que seleciona, diminui ou inibe MAPK de p38, que é um membro da família de MAPK, tal como fenol, 4-[4-(4-fluorfenila)-5- (4-piridinila)-1 H-imidazol-2-ila]. Um exemplo de um inibidor de quinase de SAPK2/p38 inclui, mas não está limitado a, benzamida, 3-(dimetilamino)-N- [3-[(4-hidroxibenzoila)amino]-4-metilfenila], Um membro da família de MAPK é uma serina/treonina quinase ativada por fosforilação de radicais de tirosina e treonina. Essa quinase é fosforilada e ativada por muitas cargas e estímu- los inflamatórios, e acredita-se que esteja envolvida na regulação de impor- tantes respostas celulares, tais como apoptose e reações inflamatórias, xlvi. um inibidor de tirosina quinase de p56, que seleciona, dimi- nui ou inibe a tirosina quinase de p56, que é uma enzima que é uma tirosina quinase de da família de src, específica de linfoide, crítica para o desenvol- vimento e ativação das células T, tal como damnacantal, que também é co- nhecido como 2-antracenocarboxaldeído, 9, 10-di-hidro-3-hidróxi-1-metóxi-9, 10-dioxo, tirfostina 46. Um alvo de um inibidor de tirosina quinase de p56 inclui, mas não está limitado a, Lck. Lck está associado com os domínios citoplasmáticos de CD4, CD8 e a cadeia beta do receptor de IL-2, e acredita- se que esteja envolvida nos estágios iniciais da ativação de células T, medi- ada por TCR;

xlvii. um inibidor de tirosina quinase de PDGFR1 que seleciona, diminui ou inibe a atividade das tirosina de quinase de receptor de C-kit (par- te da família de PDGFR), tal como seleciona, diminui ou inibe a atividade da família de quinases de tirosina de receptor de c-Kit, especialmente, inibe o receptor de c-Kit. Exemplos de alvos de um inibidor de tirosina quinase de PDGFR incluem, mas não estão limitados a, PDGFR, FLT3 e/ou c-KIT, tal como tirfostina AG 1296, tirfostina 9, 1, 3-butadieno-1, 1, 3-tricarbonitrila-2- amino-4-(1H-indol-5-ila), derivado de N-fenila-2-pirimidin-amina, por exem- plo, imatinib, IRESSA®. PDGF desempenha um papel central na regulação da proliferação celular, quimiotaxia e sobrevivência em células normais, bem como em diversos estados de doença, tais como câncer, ateroesclerose e doença fibrótica. A família de PDGF está composta de isoformas diméricas (PDGF-AA, PDGF-BB1 PDGF-AB, PDGF-CC e PDGF-dd), que exercem seus efeitos celulares por ligação difeencial às duas tirosina de quinase de receptor. PDGFR-α e PDGFR-β têm, em cada caso, massas moleculares de -170 e 180 kDa,

Xlviii. um inibidor de fosfatidilinositol quinase 3, que seleciona, di- minui ou inibe a quinase de Pl 3, tal como wortmannin, que é também conheci- da como 3H-furo[4, 3, 2-de]indeno[4, 5-h]-2-benzopiran-3, 6, 9-triona, 22- (acetilóxi)-1, 6b, 7, 8, 9a, 10, 11, 11b-ocata-hidro-1-(metoximetila)-9a, 11b- dimetila-, (1S, 6bR, 9aS, 11R, 11bR)-(9CL), 8-fenila-2-(mofolin~4-ila)-cromen-4- ona, quercetina, di-hidrato de quercetina. A atividade da quinase de Pl 3 au- menta em resposta a diversos estímulos hormonais e de fator de crescimento, incluindo insulina, fator de crescimento derivado de plaquetas, fator de cresci- mento semelhante à insulina, fator de crescimento epidérmico, fator estimulador de colônias e fator de crescimento de heptócitos, e tem sido implicado em pro- cessos relacionados ao crescimento e à transformação celular. Um exemplo de um alvo de um inibidor de fosfatidilinositol quinase 3 inclui, mas não está limita- do a, Pi3K,

xlix. um inibidor de fosfatase, que seleciona, diminui ou inibe a fosfatase, tal como ácido cantarídico, cantaridina e L-leucinamida, N-[4-(2- carboxietenila)benzoila]glicila-L-a-glutamila-(E). As fosfatases removem o grupo fosforila e restauram a proteína ao seu estado desfosforilado original. Portanto, o ciclo de fosforilação-desforsforilação pode ser considerado como um interruptor de "liga-desliga" molecular;

I. agente de platina, que contém platina e inibe a síntese de DNA, por formação de ligação cruzada interfitas e interfitas de moléculas de DNA, tal como carboplatina, cisplatina, oxalilplatina, cisplatina, satraplatina e agentes de platina, tais como ZD0473, BBR3464. Carboplatina pode ser administrada, por exemplo, na forma tal como é comercializada, por exem- plo, CARBOPLAT® e oxaliplatina, como ELOXATIN®,

Ii. um inibidor de proteína fosfatase, incluindo um inibidor de PP1 e PP2 e um inibidor de tirosina fosfatase, que seleciona, diminui ou inibe a fosfa- tase de proteína. Exemplos de um inibidor de PP1 e PPA2A incluem ácido can- tarídico e/ou cantaridina. Exemplos de um inibidor de tirosina fosfatase incluem, mas não estão limitados a, L-P-bromotetramisol oxalato, 2(5H)-furanona, A- hidróxi-5-(hidroximetila)-3-(1-oxo-hexadecila)-, (5R), e ácido benzilfosfônico. O termo "um inibidor de PP1 ou PP2", tal como usado no represente, refere-se a um composto que seleciona, diminui ou inibe fosfatases de proteína de Ser/Thr. Fosfatases do tipo I, que incluem PP1, podem ser inibidas por duas proteínas termicamente estáveis, conhecidas como Inibidor-I-(M) e lnibidor-2-(l-2). Eles, de preferência, desfosforilam uma subunidade da quinase de fosforilase. As fosfatases do tipo Ii estão subdiviiddas em classes de fosfatases espontanea- mente ativas (PP2A), dependentes de CA2+ (PP2B) e dependentes de Mg2+ (PP2C). O termo "inibidor de fosfatase detirosina", tal como usado no rpesente, refere-se a compostos queselecionam, diminuem ou inibem a fosfatase de tiro- sina. Fosfatase detirosina de proteína (PTPs) são adições relativamente recen- tes à família das fosfatases. Elas removem grupos de fosfato de radicais de tirosina fosforilados de proteínas. PTPs apresentam características estruturais diversas e desempenham papéis importantes na regulação da proliferação ce- lular, diferenciação, adesão de células em utilidade, e função citoesqueletal. Exemplos de alvos de um inibidor de tirosina fosfatase incluem, mas não estão limitados a, fosfatase alcalina (ALP), heparanase, PTPase e/ou fosfatase de ácido prostático,

liii. um inibidor de PKC e um inibidor de quinase de PKC delta: O termo "um inibidor de PKC", tal como usado no presente, refere-se a um com- posto que seleciona, diminui ou inibe a proteína de quinase C, bem como suas isozimas. A quitase de proteína C (PKC), uma enzima ubíqua, dependente de fosfolipídio, está envolvida na transdução de sinal associada à proliferação, di- ferenciação e apoptose de células. Exemplos de um alvo de um inibidor de PKC incluem, mas não estão limitados a, MAPK e/ou NF-kapaB. Exemplos de um inibidor de PKC incluem, mas não estão limitados a, 1-H-pirrolo-2, 5-diona, 3-[1 -[3-(dimetilamino)propila]-1 H-indol-3-ila]-4-(1H-indol-3-ila), bisindolilmaleimi- da IX, esfingosina, que é conhecida como 4-octadeceno-1, 3-diol, 2-amino-, (2S, 3R, 4E)-(9CL), estaurosporina, eu é conhecida como 9, 13-epóxi-1H, 9H- diindolo[1, 2, 3-gh:3', 2', 1'-lm]pirrolo[3, 4-j][1, 7]benzodiazonin-1-ona, derivados de estaurosporina, tais como descritos em EP0296110, por exemplo, midostau- rina, 2, 3, 10, 11, 12, 13-hexaidro-10-metóxi-9-metila-11-(metilamino)-, (9S, 10R, 11R, 13R)-(9CL), tirfostina 51, e hipericina, que também é conhecida co- mo fenantro[1, 10, 9, 8-opqra]perileno-7, 14-diona, 1, 3, 4, 6, 8, 13-hexaidróxi- 10, 11-dimetila-, estereoisômero(6CI, 7CI, 8CI, 9CL), UCN-01, safingol, BAY 43-9006, briostatina 1, perofosina, limofosina, R0318220 e R0320432, G06976, Isis 3521, LY333531/LY379196. O termo "um inibidor de quinase de PKC delta", tal como usado no reprsente, refere-se a um composto queselecio- na, diminui ou inibe as isozimas delta de PKC. A isozima delta é uma isozima de PKC convencional e é dependente de Ca2+. Um exemplo de um inibidor de quinase de PKC delta inclui, mas não está limitado a, Rottlerin1 que também é conhecido como 2-propen-1-ona, 1-[6-[(3-acetila-2, 4, 6-triidróxi-5- metilfenila)metila]-5, 7-di-hidróxi-2, 2-dimetila-2H-1-benzopiran-8-ila]-3-fenila-, (2EH9CL),

liii. um inibidor de síntese de poliamina, queseleciona, diminui ou inibe espermidina de poliamina, tal como DMFO, que também é conhecido como (-)-2-difluormetilornitina;N1, N12-dietilespermina 4HCI. As espermidi- nas e esperminas de poliaminas são de importância vital para a proliferação celular, embora seu mecanismo de ação preciso não seja claro. Células tu- morais têm uma homeostase de poliamina alterada, refletida por aumento de atividade de enzimas biossintéticas e elevadas combinações de poliamina,

liv. um inibidor de proteossoma, que seleciona, diminui ou inibe proteassomas, tais como aclacinomicina A, gliotoxina, OS-341, MLN 341, bortezomib, velcade. Exemplos de alvos de um inibidor de proteossoma in- cluem, mas não estão limitados a, oxidase de NADPH geradora de 0(2)(-), kapaB de NF e/ou farnesila transferase, geranil transferase I;

Iv. um inibidor de PTPIB, que seleciona, diminui ou inibe PTP1B, um inibidor de proteína tirosina quinase, tal como L-leucinamida, N- [4-(2-carboxietenila)benzoila]glicila-L-a-glutamila-, (E),

Ivi. um inibidor de proteína cinase tirosina de, incluindo um inibi- dor de tirosina quinase da família de SRC, um inibidor de tirosina quinase de Syk, e um inibidor de tirosina quinase de JAK-2 e/ou JAK-3. O termo "um inibidor de proteína tirosina quinase", tal como usado no presente, refere-se a um composto que seleciona, diminui ou inibe quinases de tirosina de prote- ína. Quinases (PTKs) desempenham um papel essencial na regulação de proliferação, diferenciação, metabolismo, migração e sobrevivência celular. Os mesmos são classificados como PTKs receptores e PTKs não recepto- res. PTKs receptores contêm uma única cadeia de polipeptídio com um segmento de transmembrana. A extremidade extracelular desse segmento contém um domínio de ligação de ligante de alta afinidde, enquanto a extre- midade citoplasmática compreende o núcleo catalítico e as seqüências regu- ladoras. Exemplos de alvos de um inibidor de tirosina quinase incluem, mas não estão limitados a, ERK1, ERK2, tirosina quinase de Bruton (Btk), JAK2, ERK1/2, PDGFR e/ou FLT3. Exemplos de alvos indiretos incluem, mas não estão limitados a, TNF-alfa, NO, PGE2, IRAK, iNOS, IÇAM-1 e/ou E- selectina. Exemplos de inibidor de tirosina quinase incluem, mas não estão limitados a, tirfostin AG 126, tirfostin Ag 1288, tirfostin Ag 1295, geldanamici- na e genisteína.

Quinases de tirosina não receptoras incluem membros das famí- lias de Src, Tec, JAK, Fes, Abi, FAK, Csk e Syk. As mesmas estão localiza- Das no citoplasma, bem como no núcleo. Elas apresentam uma regulação de quinase, fosforilação de substato e função distintas. A desregulação des- sas quinases também tem sido associada a diversas doenças humanas. O termo "um inibidor de tirosina quinase da família de SRC", tal como usado no presente, refere-se a um composto que seleciona, diminui ou inibe SRC. E- xemplos de um inibidor de tirosina quinase da família de SRC incluem, mas não estão limitados a, PP1, que também é conhecido como 1H-pirazolo[3, 4- d)pirimidin-4-amina, 1-(1, 1-dimetiletila)-3-(1-naftalenila)-(9CL), e PP2, que também é conhecido como 1H-pirazoio[3, 4-d]pirimidin-4-amina, 3-(4- clorofenila)-1-(1, 1-diemtiletila)-(9CL).

O termo "um inibidor de tirosina quinase de Syk", tal como usado no presente, refere-se a um composto que seleciona, diminui ou inibe Syk. Exemplos de alvos para um inibidor de tirosina quinase de Syk incluem, mas não estão limitados a, Syk, STAT3 e/ou STAT5. Um exemplo de um inibidor de tirosina quinase de Syk inclui, mas não está limitado a, piceatanol, que também é conhecido como 1, 2-benzenodiol, 4-[(1 E)-2-(3, 5-di- hidroxifenila)etenila]-(9CL).

O termo um "inibidor de tirosina quinase de Janus (JAK-2 E/ou JAK-3)", tal como usado no presente, refere-se a um composto que selecio- na, diminui ou inibe a tirosina quinase de Janus. Os inibidores de tirosina quinase de Janus mostram agentes antileucêmicos, com propriedades anti- trombóticas, antialérgicas e imunossupressoras. Alvos de um inibidor de tiro- sina quinase de JAK-2 e/ou JAK-3 incluem, mas não estão limitados a, JAK2, JAK3, STAT3. Um alvo indireto de um inibidor de tirosina quinase de JAK-2 e/ou JAK-3 inclui, mas não está limitado a, CDK2. Exemplos de um inibidor de tirosina quinase de JAK-2 e/ou JAK-3 incluem, mas não estão limitados a, tirfostina AG 490 e 2-naftila vinila cetona.

Compostos que selecionam, diminuem ou inibem a atividade de membros da família de c-Abl e seus produtos de fusão de genes incluem, por exemplo, PD180970, AG957 ou NSC 680410;

Ivii. um retinoide, que seleciona, diminui ou inibe receptores de- pendentes de retinoide, tais como isotretinoína, tretinoína, alitretinoína, bexa- roteno,

Iviii. um inibidor de alongamento de polimerase Il de RNA, que seleciona, diminui ou inibe a quinase de p70S6 nuclear e cistosólica, estimu- lada por insulina em células de CHO; que seleciona, diminui ou inibe a transcrição da polimerase Il de RNA, que pode ser dependente da quinase de caseina II; e seleciona, diminui ou inibe a quebra da vesícula germinativa em oócitos bovinos, tal como 5, 6-dicloro-1-beta-D-ribofuranosilbenzimidazol, Ivix. um inibidor de serina/treonina quinase, que inibe quinases de serina/treonina, tal como 2-aminopurina. Um exemplo de um alvo de um inibidor de serina/treonina quinase inclui, mas não está limitado a, proteína de quinase dependente de dsRNA (PKR). Exemplos de alvos indiretos de um inibidor de serina/treonina quinase incluem, mas não estão limitados a, MCP-1, NF-kapaB, elF2alfa, COX2, RANTES, IL8, CYP2A5, IGF-1, CYP2B1, CYP2B2, CYP2H1, ALAS-1, HIF-1, eritropoietina e/ou CYP1A1,

Ix. um inibidor de biossíntese de esterol, que inibe a biossíntese de esteróis, tal como colesterol, tal como terbinadina. Exemplos de alvos para um inibidor de biossíntese de esterol incluem, mas não estão limitados a, esqualeno epoxidase e CYP2D6,

Ixi. um inibidor de topoisomerase, incluindo um inibidor de topoi- somerase I e um inibidor de topoisomerase II. Exemplos de um inibidor de topoisomerase I incluem, mas não estão limitados a, topotecano, gimateca- no, irinotecano, canftotecano e sesu análogos, 9-nitrocanptotecina e o con- jugado de canptotecin macromolecular PNU-166148 (composto A1 em W09917804), 10-hidroxicamptotecina, por exemplo, o sal de acetato, idarru- bicina, por exemplo, o cloridrato, irinotecano, por exemplo, o cloridrato, eto- posídeo, teniposídeo, topotecano, cloridrato de topotecano, doxorrubicina, epirrubicina, cloridrato de epirrubicina, mitoxantrona, mitoxantrona, por e- xemplo, o cloridrato, daunorrubicina, cloridrato de daunorrubicina, valrubici- na, dasatiniba (BMS-354825). Irinotecano pode ser administrado, por exem- plo, na forma tal como é comercializado, por exemplo, sob a mrca comercial HYCAMTIΝ®. O termo "inibidor de topoisomerase II", tal como usado no presente, inclui, mas não está limitado a, antraciclinas, tais como doxorubici- na, incluindo a formulação lipossomal, por exemplo, CAELYX®, daunorrobi- cina, incluindo a formulação lipossomal, por exemplo, DAUNOSOME®, epir- rubicina, idarrubicina e nemorrubicina; as antraquinonas mitoxantrona e Io- soxantrona; e as podofilotoxinas etoposídeo e teniposídeo. Etoposídeo é comercializado como ETOPOPHOS®, teniposídeo, como VM 26- BRISTOL®, doxorrubicina, como ADRIBLASTIN® ou ADRIAMYCIN®, epir- rubicina, como FARMORUBICIN®, idarrubicina como ZAVEDOS®m e mito- xantrona, como NOVATRON®M

Ixii. inibidor de tirosina quinase de VEGFR, que seleciona, dimi- nui e/ou inibe os fatores de crescimento angiogêncios e citoquinas implica- das na modulação de angiogênese normal e patológica. A família VEGF (VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D) e suas quinases de tirosina de recep- tor correspondentes [VEGFR-1 (Flt-1), VEGFR-2 (Flk-1, KDR) e VEGFR-3 (Flt-4)] desempenham um papel superior e indispensável na regulação das múltiplas facetas dos processos angiogênicos e linfangiogênicos. Um exem- plo de um inibidor de tirosina quinase de VEGFR inclui 3-(4- dimetilaminobenzilidenila)-2-indolinona. Compostos que selecionam, diminu- em ou inibem a atividade de VEGFR são, especialmente, compostos, proteí- nas ou anticorpos que inibem a tirosina quinase de receptor de VEGF, ini- bem um receptor de VEGF ou se ligam em VEGF, e são, particularmente, os compostos, proteínas ou anticorpos monoclonais, descritos genericamente e especificamente em W09835958, por exemplo, 1-(4-cloroanilino)-4-(4- piridilmetila)ftalazina ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, por exemplo, o succinato, ou, em WO0009495, WO0027820, WO0059509, W09811223, W00027819 e ΕΡ0769947, por exemplo, aqueles descritos por M. Prewett et al em Câncer Research 59 (1999) 5209-5218, por F. Yuan et al em Proc. Natl. Acad. Sei. USA, vol. 93, pp. 14765-14770, Dec. 1996, por Z. Zhu et al em Câncer Res. 58, 1998, 3209-3214, e por J. Mordenti et tal. em Toxicologic Pathology, vol. 27, No. 1, pp. 14-21, 1999; em W00037502 e W09410202; angiostatina, descrita por M.S. 0'Reilly et al, Cell 79, 1994, 315-328; endostatina, descrita por M.S. O1ReiIIy et al, Cell 88, 1997, 277- 285; amidas de ácido antranílico; ZD4190, ZD6474 (vandetaniba), SU5416, SU6668, ou anticorpos de anti-VEGF ou anticorpos de receptor de anti- VEGF, por exemplo, RhuMab (bevacizumab). Por anticorpo são designados anticorpos monoclonais intactos, anticorpos policlonais, anticorpos multies- pecíficos, formados de pelo menos 2 anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpo, desde que apresentem a ativiade biológica desejada. Um exemplo de um inibidor de VEGF-R2 inclui, por exemplo, axitinib, Ixiii. um agonista de gonadorrelina, tal como abarelix, goserelina, acetato de goserelina,

Ixiv. um composto que induz processos de diferenciação celular, tal como ácido retinóico, alfa-, gama- ou 8-tocoferol ou alfa-, gama- ou 8- tocotrienol,

Ixv. um bisfosfonato, que inclui, por exemplo, ácido etridônico, clodrônico, tiludrônico, pamidrônico, alendrônico, ibandrônico, risedrônico e zoledrônico,

Ixvi. um inibidor de heparanase, que evita a degradação de sul- fato de heparano, por exemplo, PI-88,

Ixvii. um modificador de resposta biológica, de preferência, alin- focinas ou interferonas, por exemplo, interferon alfa,

Ixviii. um inibidor de telomerase, por exemplo, telomestatina,

Ixix. mediadores, tais como inibidores de catecol-O-metiltransfe- rase, por exemplo, entacapona,

Ixx. ispinesib, permetrexed (Alimta®), sunitib (SU11248), dietiles- tilbestrol (DES), BMS224818 (LEA29Y),

Ixxi. somatostatina ou um análogo de somatostatina, tal como octreotídio (Sandostatin® ou Sandostatin LAR®),

Ixxii. Antagonistas de Receptor de Hormônio de Crescimento, tais como pegvisomant, filgrastima ou pegfilgrastima ou interferona alfa,

Ixxiii. anticorpos monoclonais, por exemplo, úteis para tratamen- to de leucemia (AML)1 tal como alentuzumab (CampathA)1 rituxi- mab/Rituxan®), gentuzumab, (oxogamicina, Mylotarg®), epratuzumab,

Ixxiv. altetramina, ansacrina, asparaginase (Elspar®), denileuci- na difitox, masoprocol, pegaspargase,

Ixxv. um inibidor de fosfodiesterase, por exemplo, anagrelida (Agrylin®, Xagrid®),

Ixxvi. uma vacina contra câncer, tal como MDX-1379. O tratamento de câncer com um composto da presente inven- ção, opcionalmente, em combinação com um fármaco anti-cancer, tal como indicado no presente, pode ser associado com radioterapia. O tratamento de câncer com um composto da presente invenção, opcionalmente, em combi- nação com um fármaco anticâncer, pode ser uma segunda linha de trata- mento, por exemplo, após trstamento com outro fármaco anticâncer ou outra terapia de câncer.

Anestésicos, que podem ser úteis como componente de combi- nação com um composto da presente invenção, incluem, por exemplo, eta- nol, bupivacaína, cloroprocaína, levobupivacaína, lidocaína, mepivacaína, procaína, ropivacaína, tetracaína, deslurano, isoflurano, cetamina, propofol, sevoflurano, codeína, fentanila, hidromorfona, marcaína, meperidina, metan- dona, morfina, oxicodona, remifentanila, sufentanila, butorfanol, nalbufina, tramadol, benzocaína, dibucaína, cloreto etílico, xilocaína e fenazopiridina.

Substâncias de fármaco antidiarréicas, que podem ser úteis co- mo componente de combinação com um agente ou um agente de IBD da presente invenção, incluem, por exemplo, difenoxilato, loperamida, codeína.

Se um composto da presente invenção for administrado em combinação com outras substâncias de fármaco, as dosagens da segunda substância farmacêutica coadministrada, naturalmente, variam, dependendo do tipo de co-fármaco usado, do fármaco específico usado, do estado que está sendo tratado, tal como no caso de um composto da presente invenção. Em geral, podem ser apropriadas dosagens similares às fornecidas pelo for- necedor do segundo fármaco.

Os nomes químicos dos compostos da presente invenção, tais como indicados no presente, são copiados de ISIS, versão 2.5 (AutoNom 2000 Name). Nomes químicos de segundas substâncias de fármaco e outras substâncias podem ser obtidos da Internet, por exemplo, por meio de um programa de busca, tal como o SCI FINDER.

Nos Exemplos abaixo, todas as temperaturas são em "Celsius".

São usadas as seguintes ABREVIATURAS:

EtAc acetato etílico RT temperatura ambiente

Exemplo 1

4-terc-Butila-N-(4-cloro-2-ciano-fenila)-benzenossulfonamida

Uma solução de 0, 15 g de 2-amino-5-cloro-benzonitrila e 0, 23 g de cloreto de 4-terc-butila-benzenossulfonila é dissolvida em 2 ml de NMP (N-metila-2-pirroiidona) e refrigerada em um banho de gelo para 5o. 2, 5 mi de uma solução de terc-butilato de potássio (1 N em THF) são adicionados, a mistura obtida é agitada por 30 minutos, esfriada com água e da mistura obtida o solvente é evaporado. O resíduo de evaporação é dissolvido em EtAc, lavado com solução de NaHCO3 saturada e secado. O solvente é eva- porado e o resíduo de evaporação é submetido à cromatografia em uma co- luna de fase inversa. É obtido 4-terc-butila-N-(4-cloro-2-ciano-fenila)- benzenossulfonamida.

1H RMN (DMSO): 1, 27 (s, 9H), 7, 06 (d, J=8, 5 Hz, 1H), 7, 57-7, 70 (m, 5H), 7, 99 (d, J=2 Hz, 1H), 10, 6 (s largo, 1H, NH).

Analogamente aos métodos tais como descritos nos exemplos 1 a 3, mas usando materiais básicos apropriados (intermediários), são obtidos compostos da fórmula

<formula>formula see original document page 56</formula>

na qual Ri e R2 são tais como mostrados na TABELA 1 abaixo, com um pon- <table>table see original document page 57</column></row><table> <table>table see original document page 58</column></row><table>

"CP" na TABELA 1 significa "número do composto"

Claims (10)

1. Composto da fórmula <formula>formula see original document page 59</formula> na qual um de R1 e R2 é tienila, que é subsituída por halogênio, e o outro de R1 e R2 é fenila, sendo que fenila é substituída por um ou mais de - (C1-6)-alquila, - halo (C1-4)-alquila, - (C1-4)-alcóxi, - (C6-12)-arila(C1-4), - (C6-12)-arilóxi, - halo(C1-4)-alcóxi, - (C1-4)-alcoxicarbonila, por exemplo, - carbóxi (-COOH), - ciano, ou -halogênio, com a condição de que fenila seja substituída por pelo menos ciano, carbóxi ou (C1-4)-alquiloxicarbonila.

2. Composto de acordo com a reiivndicação 1, em que Ri é (me- tila)(ciano)fenila, (trifluormetóxi)(ciano)fenila, ou (cloro)(ciano)fenila, e R2 é clorotienila, bis-clorotienila ou (cloro)(bromo)tienila.

3. Compostos de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, selecionados do grupo que consiste em: (4-ciano-2-metila-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno-2- sulfônico (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro-tiofeno-2- sulfônico (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro- tiofeno-2-sulfônico (3-cloro-4-ciano-fenila)-amida de ácido 4, 5-dicloro-tiofeno-2- sulfônico (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno-2- sulfônico -3-sulfônico(4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 4- bromo-2, 5-dicloro-tiofeno-3-sulfônico (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 4-bromo-2, 5-dicloro- tiofeno-3-sulfônico (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 5-cloro-tiofeno-2- sulfônico, (4-ciano-2-trifluormetóxi-fenila)-amida de ácido 2, 5-dicloro- tiofeno-3-sulfônico, e (5-cloro-2-ciano-fenila)-amida de ácido 2, 5-dicloro-tiofeno-3- sulfônico.

4. N-(cianofenila)-halotienilsulfonamida.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, na forma de um sal.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, para uso como um agente farmacêutico.

7. Composição farmacêutica que compreende um composto co- mo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em associação a pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.

8. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, para a produção de um medicamento para o tratamento de distúrbios que são mediados por atividade de CCR9.

9. Combinação farmacêutica, que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou uma composi- ção farmacêutica como definida na reivindicação 7, e que compreende, ain- da, uma segunda substância farmacêutica.

10. Método para o tratamento de distúrbios que são mediados por atividade de CCR9, cujo o tratamento compreende administrar a um in- divíduo em necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente eficiente de um composto como definido em qualquer uma das reivindica- ções 1 a 5 ou uma composição farmacêutica como definida na reivindicação -7, opcionalmente, em combinação com uma segunda substância farmacêuti- ca.