BRPI0618328A2 - método para melhorar caracterìsticas de crescimento de planta em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, construção, célula hospedeira, método para produzir uma planta transgênnica, parte de planta ou célula de planta tendo caracterìsticas de crescimento de planta melhoradas em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, e, usos de uma construção e de um ácido nucleico - Google Patents

Abstract

MéTODO PARA MELHORAR CARACTERìSTICAS DE CRESCIMENTO DE PLANTA EM RELAçãO àS PLANTAS DO TIPO SELVAGEM CORRESPONDENTES, CONSTRUçãO, CéLULA HOSPEDEIRA, MéTODO PARA PRODUZIR UMA PLANTA TRANSGêMCA, PARTE DE PLANTA OU CéLULA DE PLANTA TENDO CARACTERìSTICAS DE CRESCIMENTO DE PLANTA MELHORADAS EM RELAçãO àS PLANTAS DO TIPO SELVAGEM CORRESPONDENTES, E, USOS DE UMA CONTRUçãO E DE UM áCIDO NUCLEICO A presente invenção no geral diz respeito ao campo da biologia molecular e diz respeito a um método para melhorar as características de crescimento vegetal em relação à plantas do tipo selvagem correspondentes. Mais especificamente, a presente invenção diz respeito a um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica uma classe de polipeptídeo hox5 de zíper de leucina de homeodomínio I (HIDZip) ou um homólogo do mesmo; ou que compreende modular a expressao em uma planta de um ácido nucleico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo do mesmo; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo denotado Proteína Realçadora de Rendimento 16 (aludida como YEP16); ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma glicogênio sintase quinase do Grupo I (quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo do mesmo. A presente invenção também diz respeito a plantas tendo a expressão modulada de um ácido nucleico que codifica uma polipeptídeo hox5 de zíper de leucina de homeodomínio classe 1 (HIDZip) ou um homólogo do mesmo; ou tendo a expressão modulada de um ácido nucleico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo do mesmo; ou tendo a expressão modulada de um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo denotado Proteína Realçadora de Rendimento 16 (daqui em diante aludida como YEP 16); ou tendo expressão modulada de um glicogênio sintase quinase do Grupo I (quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo do mesmo, plantas estas que têm características de crescimento melhoradas em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes. A invenção também fornece construções úteis nos métodos da invenção.

Description

"MÉTODO PARA MELHORAR CARACTERÍSTICAS DE CRESCIMENTO DE PLANTA EM RELAÇÃO ÀS PLANTAS DO TIPO SELVAGEM CORRESPONDENTES, CONSTRUÇÃO, CÉLULA HOSPEDEIRA, MÉTODO PARA PRODUZIR UMA PLANTA TRANSGÊNICA, PARTE DE PLANTA OU CÉLULA DE PLANTA TENDO CARACTERÍSTICAS DE CRESCIMENTO DE PLANTA MELHORADAS EM RELAÇÃO ÀS PLANTAS DO TIPO SELVAGEM CORRESPONDENTES, E, USOS DE UMA CONTRUÇÃO E DE UM ÁCIDO NUCLEICO"

A presente invenção no geral diz respeito ao campo da biologia molecular e diz respeito a um método para melhorar as características de crescimento vegetal em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes ou outra plantas de controle. Mais especificamente, a presente invenção diz respeito a um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo hox5 do zíper de leucina classe I de homeodomínio (HDZip) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo denotado Proteína Realçadora de Rendimento 16 (daqui em diante aludida como YEP16) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucleico que codifica uma glicogênio sintase quinase do Grupo I (quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo deste. A presente invenção também diz respeito plantas tendo expressão modulada de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou tendo expressão modulada de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste; ou tendo expressão modulada de um ácido nucléico que codifica um YEP16; ou tendo expressão modulada de um ácido nucléico que codifica um quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo deste, plantas estas que têm características de crescimento melhoradas em relação ao do tipo selvagem correspondente ou outras plantas de controle. A invenção também fornece construções úteis nos métodos da invenção.

A população mundial sempre crescente e a oferta que se torna menor de terra arável disponível para a agricultura estimula a pesquisa voltada para o aumento da eficiência da agricultura. Os meios convencionais para as melhoras de safra e horticulturais utilizam técnicas de cruzamento seletivo para identificar plantas tendo características desejáveis. Entretanto, tais técnicas de cruzamento seletivo têm diversas desvantagens, a saber que estas técnicas são tipicamente intensivas em trabalho e resultam em plantas que freqüentemente contêm componentes genéticos heterogêneos que podem nem sempre resultar no traço desejável que é passado adiante a partir das plantas precursoras. Avanços na biologia molecular têm permitido que o gênero humano modifique o germoplasma de animais e plantas. O engendramento genético de plantas acarreta a isolação e manipulação de material genético (tipicamente na forma de DNA ou RNA) e a introdução subsequente deste material genético em uma planta. Tal tecnologia tem a capacidade para liberar safras ou plantas tendo vários traços econômicos, agronômicos ou horticulturais melhorados.

Um traço de interesse econômico particular é o rendimento. O rendimento é normalmente definido como a produção mensurávelde valor econômico de uma safra. Isto pode ser definido em termos de quantidade e/ou qualidade. O rendimento é diretamente dependente de diversos fatores, por exemplo, o número e tamanho dos órgãos, arquitetura da planta (por exemplo, o número de ramos), produção de semente, senescência de folha e mais. Desenvolvimento de raiz, captação de nutriente e tolerância a estresse e vigor inicial também podem ser fatores importantes na determinação do rendimento. A otimização de um dos fatores supracitados pode portanto contribuir para aumentar o rendimento de safra.

O rendimento de semente é um traço particularmente importante, visto que as sementes de muitas plantas são importantes para a nutrição humana e animal. As safras tais como, milho, arroz, trigo, canola e soja são responsáveis por mais da metade da ingestão calórica humana total, seja através do consumo direto das próprias sementes ou através do consumo de produtos de carne edificado sobre sementes processadas. Estas também são uma fonte de açúcares, óleos e muitos tipos de metabólitos usados nos processos industriais. As sementes contêm um embrião (a fonte de novos brotos e raízes) e um endosperma (a fonte de nutrientes para o crescimento de embrião durante a germinação e durante o crescimento iniciai das mudas). O desenvolvimento de uma semente envolve muitos genes e requer a transferência de metabólitos das raízes, folhas e hastes na semente em crescimento. O endosperma, em particular, assimila os precursores metabólicos de carboidratos, óleos e proteínas e os sintetizam em macromoléculas de armazenagem para o enchimento do grão.

Um outro traço de interesse econômico particular é aquele de tolerância melhorada ao estresse abiótico. O estresse abiótico é uma causa primária de perda de safra mundial, reduzindo os rendimentos médios para a maioria das plantas de safra principais em mais do que 50 % (Wang et ai., Planta (2003) 218: 1-14). Os estresses abióticos podem ser causados por seca, salinidade, extremos de temperatura, toxicidade química e estresse oxidativo. A capacidade para melhorar a tolerância da planta ao estresse abiótico seria de enorme vantagem econômica para os agricultores pelo mundo inteiro e permitiria o cultivo de safras durante condições adversas e em territórios onde o cultivo de safras de outro modo pode não ser possível.

A capacidade para aumentar o rendimento vegetal teria muitas aplicações em áreas tais como agricultura, incluindo na produção de plantas ornamentais, arboricultura, horticultura e silvicultura. O aumento de rendimento também pode encontrar uso na produção de alga para o uso em biorreatores (para a produção biotecnológica de substâncias tais como produtos farmacêuticos, anticorpos ou vacinas ou para a bioconversão de resíduos orgânicos) e outra de tais áreas.

FUNDAMENTOS

Proteínas de zíper de leucina de homeodomínio (HDZip)

As proteínas de zíper de leucina de homeodomínio (HDZip) constituem um família de fatores de transcrição caracterizada pela presença de um domínio de ligação de DNA (HD) e um motivo de zíper de leucina (Zip) adjacente. O homeodomínio usualmente consiste de 60 resíduos de arninoácido conservados que formam uma héiicel-alça-héiice2-voita-hélice3 que liga DNA. Este sítio de ligação de DNA é usualmente pseudopalindrômico. O zíper de leucina, adjacente à extremidade do terminal C do homeodomínio, consiste de diversas repetições de septeto (pelo menos quatro) em que usualmente uma leucina (ocasionalmente uma valina ou uma isoleucina) aparece a cada sétimo arninoácido. O zíper de leucina é importante para a dimerização da proteína. Esta dimerização é um pré requisito para a ligação de DNA (Sessa et al. (1993) EMBO J 12(9): 3507-3517) e pode ocorrer entre duas proteínas HDZip idênticas (homodímero) ou entre duas proteínas HDZip diferentes (heterodímeros).

Os genes de homeodomínio estão presentes em todos eucariotas e constituem uma família de gene de pelo menos 89 membros em Arabidopsis thaliana. O zíper de leucina também é encontrado sozinho em eucariotas outros que não plantas, entretanto, a presença tanto de um homeodomínio quanto de um zíper de leucina é específico de planta (encontrado em pelo menos 47 das 89 proteínas na Arabidopsis) e foi encontrada em musgo além de plantas vasculares (Sakakibara et al. (2001) Mol Biol Evol 18(4): 491-502). O zíper de leucina é depois localizado na extremidade de terminal C do homeodomínio, estas duas características se sobrepõem em três aminoácidos.

Os genes HDZip de Arabidopsis foram classificados em quatro classes diferentes, HDZip I a IV, com base nos critérios de similaridade de seqüência (Sessa et al. (1994) Em Plant Molec Biol, pp412-426). Como as proteínas HD-Zip das três outras classes, as proteínas HDZip de classe I são muito divergentes em sua estrutura de aminoácido primária fora do homeodomínio e do zíper de leucina. Dentro tanto do homeodomínio quanto do zíper de leucina, as proteínas HDZip de classe I são ainda caracterizadas por duas características específicas:

1) no homeodomínio, além dos aminoácidos invariantes Leu16Trp48Phe49Asn51Arg53, posição 46 está ocupada por um Ala (A) e a posição 56 por um Try (W) (ou ocasionalmente por um Phe (F)) (Sessa et al. (1997) J Mol Biol 274(3): 303-309; ver a Figura 1), aludida como um homeodomínio classe I, e

2) O zíper de leucina compreende seis heptetos, exceto para a samambaia Ceratopteris richardii que apresenta sete heptetos (dentro de cada hepteto, as posições são chamadas de a, b, c, d, e, f e g, a leucina conservada estando na posição d; Sakakibara et al. (2001) Mol Biol Evol 18(4): 491-502; ver a Figura 2). HDZip II, III e IV apresentam um zíper de leucina com apenas cinco heptetos.

Concernente às suas propriedades de ligação de DNA, as proteínas HDZip de classe I preferivelmente se ligam a 5 hemi-sítios de pares de base que se sobrepõem em uma posição central, CAA(A/T)ATTG (Sessa et al. (1993) EMBO J 12(9): 3507-3517). Proteínas HDZip diferentes foram mostradas ativar ou reprimir a transcrição. Em Arabidopsis, a HDZip ATHBl classe I, -5, -6 e -16 foram mostradas atuar como ativadores transcricionais em ensaios de expressão transitória em folhas de Arabidopsis usando um gene repórter (luciferase; Henriksson et ai. (2005) Plant Phys 139: 509-518). Duas proteínas HDZip de classe I do arroz, Oshox4 e Oshox5, funcionaram como ativadores em ensaios de expressão transitória em culturas de suspensão de célula de arroz usando um outro gene repórter (glicuronidase; Meijer et ai. (2000) Mol Gen Genet 263: 12-21). Ao contrário, duas proteínas HDZip classe II do arroz, Oshoxl e Oshox3, funcionaram como repressores transcricionais nos mesmos experimentos (Meijer et ai. (1997) Plant J 11: 263-276; Meijer et ai. (2000) supra).

Diversas proteínas HDZip de classe I mostraram estar envolvidas na resposta à luz e em ácido abscísico (ABA)/ resposta relacionada com o déficit de água (Hjellstrõm et al. (2003) Pant Cell Environ 26: 1127-1136). A HDZip ATHBl de ciasse I, -3, -13, -20 e -23 que superexpressam Arabidopsis transgênica sugerem que estes genes estejam envolvidos na regulagem de cotilédone e desenvolvimento de folha (Aoyama et al. (1995) Plant Cell 7: 1773-1785; Hanson (2000) In Comprehensive summaries of Uppsala Dissertations from the Faculty of Science and Technology, Uppsala). Os genes ATHB3, -13, -20 e -23 são similares e formam uma subclasse distinta dentro da HDZip de classe I. Visto que estes genes causam alterações similares na forma do cotilédone quando constitutivamente expressados, eles são aludidos como os genes de HDZip dirigido ao cotilédone (POC). Hanson conclui que as proteínas HDZip de classe I que são intimamente relacionadas filogeneticamente também são funcionalmente relacionadas, na maioria dos casos.

Proteínas Transportadoras de Nitrato (NRT)

As plantas levam uma vida séssil e têm que contar com os recursos no solo para a sua nutrição. O nitrogênio no solo está principalmente presente como amônio ou nitrato. A captação de nitrato pelas plantas pode ocorre por intermédio de sistemas de captação de NO3": um sistema de transporte de baixa afinidade que seja ativo quando a concentração de NO3 for mais do que 1 mM, um sistema de transporte de alta afinidade constitutivo e um indutível, ambos para as concentrações de NO3" entre 1 μΜ e 1 mM. Os três sistemas de captação são regulados em uma maneira complexa. Uma vez captado, o nitrato é transportado no vacúolo ou reduzido a nitrito, que por sua vez é ainda metabolizado no cloroplasto. O nitrato também pode ser secretado mais uma vez no apoplasma ou no xilema para transportar para o broto. As proteínas para a captação de nitrato nas células de raiz (NRT, proteínas transportadoras de nitrato) pertencem à chamada Superfamília de Facilitador Principal, que abrange proteínas envolvidas no transporte de solutos pequenos e que são no geral de 450 a 600 aminoácidos no comprimento com 12 domínios de transmembrana. As proteínas NRT situam-se em duas famílias, NRTl e NRT2 (Crawford & Giass, Trends Plant Sei. 3, 389-395, 1998) e são codificadas por uma família de multigene. As proteínas NRT são altamente conservadas em sua seqüência, por exemplo, proteínas NRT2 de musgos compartilham 60 % de identidade de seqüência com a proteína NRT2 de plantas dicotiledôneas, dentro do grupo de plantas dicotiledôneas a identidade de seqüência entre as proteínas NRT2 está em torno de 81 %, que pode atingir até 89 % para as proteínas NRT2 monocotiledôneas. A família NRT2 de proteínas em Arabidopsis foi extensivamente estudada por Orsel et ai. (Plant Physiol. 129, 886-896, 2002). A família compreende 7 membros, distribuídos em três cromossomas. A estrutura da proteína é conservada e cinco das sete proteínas NRT2 são preferencialmente expressadas nas raízes de plantas jovens. Estruturalmente, as proteínas NRT2 compreendem um domínio MFS_1 que transpõem cerca de 90 % da proteína e um domínio de transmembrana de terminal C. O próprio domínio MFS_1 é prognosticado compreender de 10 ou 11 domínios de transmembrana.

As proteínas NRT2 são propostas estar principalmente envolvidas no sistema de transporte de alta afinidade. Nas plantas superiores, este sistema de captação de alta afinidade é postulado ser controlado por um complexo de duas proteínas, consistindo de NRT2 e NAR, uma proteína com uma função incerta (Zhou et al. FEBS Letters 466, 225-227; Tong et al. Plant J. 41, 442-450, 2005). A super expressão de NRT2 aumentou a capacidade do sistema de captação de alta afinidade (Fraisier et ai. Plant J. 23, 489-496). NRT2 possivelmente também funciona como um sensor de nitrato (Little et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 102, 13693-13698, 2005).

Mori et al. estudaram plantas de arroz transgênicas que super expressam o gene NRT2 do arroz e mostraram que as mudas privadas de nitrato tiveram uma captação de NCV melhor comparadas com as plantas do tipo selvagem. Good et al. (US 20050044585) divulgam plantas transgênicas com níveis elevados de proteínas de utilização de nitrogênio e em particular arninotransferases, sob o controle de um promotor específico de raiz que pode ser ou não indutível por estresse. Estas plantas mostraram eficiência de captação de nitrogênio melhorada, mas nenhum efeito sobre o rendimento de semente foi relatado. Além disso, este documento também divulga que a super expressão das proteínas transportadoras de nitrato em plantas não resultam em propriedades de crescimento vantajosas para estas plantas. Além disso, as proteínas de NRT ainda não foram estudadas em condições de crescimento normais ou para um ciclo de vida vegetal completo.

Proteína Realçadora de Rendimento 16 (ΎΕΡ16)

Um polipeptídeo de YEP16 compartilha alguma similaridade com o domínio de terminal N da subunidade delta do domínio FlFO-ATP sintase ATPase delta (ver InterPro IPR000711 para detalhes da subunidade delta).

Quinases equivalentes a Shassy As quinases equivalentes a shaggy vegetal são codificadas por uma família de multigene. O genoma da Arabidopsis foi descoberto conter dez genes que codificam quinase tipo felpuda que se situam em quatro subfamílias distintas. As seqüências de proteína de membros de família distinta são altamente conservadas por todo o domínio da quinase, entretanto as regiões de terminal NeC diferem consideravelmente indicando que as várias quinases equivalentes à shaggy vegetal estão envolvidas em diversos processos biológicos, tais como a sinalização de hormônio, respostas de desenvolvimento e estresse. Com base na homologia de seqüência de proteína, as quinases equivalentes a shaggy pode ser classificadas em quatro grupos (I-IV), com cada um dos quatro grupos estando envolvidos em processos diferentes (ver a Figura 13). Além das seqüências de cDNA de tamanho natural disponíveis para as quinases equivalentes a shaggy de Arabidopsis thaliana, as seqüências de cDNA de tamanho natural também estão disponíveis em bases de dados públicas para quinases equivalentes a shaggy de Brassica napus, Meaicago sativa, Nieotiana tabaeum, oryza sativa e Petunia hybrida e Zea mays, entre outras. A1GSK1, um gene que codifica uma quinase tipo felpuda de Arabidopsis grupo II, foi relatado complementar o fenótipo sensível ao sal da levedura ealeineurin mutants. Em mudas, a produção da mesma quinase tipo felpuda foi mostrada ser induzida pelo NaCl e ácido abscísico. A super produção do gene AtGSKl foi relatado induzir genes responsivos ao estresse salino e o acúmulo de antocianina e alterar os níveis de cátion intracelular, que resulta na tolerância ao sal e à seca realçada.

Dado que as quinases equivalentes a shaggy de grupos diferentes são conhecidas estar envolvidas em diversos processos biológicos, foi surpreendente descobrir que quinases equivalentes a shaggy de dois grupos diferentes estivessem envolvidas no mesmo processo biológico, isto é, em respostas ao estresse. Foi inesperado descobrir que uma quinase tipo felpuda de um grupo outro que não o Grupo II fosse capaz de conferir tolerância aumentada em plantas ao estresse abiótico.

Foi agora descoberto que modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo deste; ou modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16; ou modular a expressão em uma planta de uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta dá plantas tendo características de crescimento melhoradas em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle.

A presente invenção portanto fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta.

A escolha de plantas de controle adequadas é uma parte de rotina de um arranjo experimental e pode incluir plantas do tipo selvagem correspondentes ou que correspondam a plantas sem o gene de interesse. A planta de controle é tipicamente da mesma espécie vegetal ou ainda da mesma variedade como a planta a ser avaliada. A planta de controle também pode ser um nulizigoto da planta a ser avaliada. Uma "planta de controle" como aqui usado refere-se não apenas a plantas inteiras, mas também a partes de plantas, incluindo sementes e partes de semente.

Vantajosamente, o desempenho dos métodos de acordo com a presente invenção resulta em plantas tendo características de crescimento melhoradas, particularmente um ou mais de rendimento aumentado, crescimento melhorado, biomassa melhorada, arquitetura melhorada, divisão de célula melhorada e tolerância melhorada ao estresse abiótico em relação à do tipo selvagem correspondente ou outras plantas de controle.

O termo "rendimento aumentado" como aqui definido é considerado significar um aumento em qualquer um ou mais dos seguintes, cada um em relação à do tipo selvagem correspondente ou outras plantas de controle: (i) biomassa aumentada (peso) de uma ou mais partes de uma planta, particularmente as partes acima do solo (colhíveis) ou biomassa de raiz aumentada, volume de raiz aumentado, número de raiz aumentado, diâmetro de raiz aumentado ou comprimento de raiz aumentado (de raízes espessas ou finas) ou biomassa aumentada de qualquer outra parte colhível; (ii) rendimento de semente total aumentado, que inclui um aumento na biomassa de semente (peso de semente) e que pode ser um aumento no peso da semente por planta ou em uma base de semente individual e/ou por hectare ou acre; (iii) número aumentado de flores (fióscuios) por panícuio, que é expressado como uma razão do número de sementes cheias em relação ao número de panículos primários; (iv) taxa de enchimento de semente aumentada (expressada em termos de porcentagem como a proporção do número de sementes cheias em relação ao número de fióscuios); (v) número aumentado de sementes (cheias); (vi) tamanho de semente aumentado, que também pode influenciar a composição de sementes; (vii) volume de semente aumentado, que também pode influenciar a composição de sementes (incluindo teor e composição totais de óleo, proteína e carboidrato); (viii) área de semente aumentada (individual ou em média); (ix) comprimento de semente aumentado (individual ou em média); (x) largura de semente aumentada (individual ou em média); (xi) perímetro de semente aumentado (individual ou em média); (xii) índice de colheita aumentado (HI), que é expressado como uma razão do rendimento de partes colhíveis, tais como sementes, em relação à biomassa total; e (xiii) peso de mil grãos aumentado (TKW), que é extrapolado do número de sementes cheias contadas e seu peso total. Um TKW aumentado pode resultar de um tamanho de semente e/ou peso de semente aumentado. Um TKW aumentado pode resultar de um aumento no tamanho do embrião e/ou tamanho do endosperma.

Tomando-se o milho como um exemplo, um aumento de rendimento pode ser manifestado como um ou mais dos seguintes: aumento no número de plantas estabelecidas por hectare ou acre, um aumento no número de espigas por planta, um aumento no número de fileiras, número de grãos por fileira, peso do grão, peso de mil grãos, comprimento/diâmetro da espiga, aumento na taxa de enchimento da semente (que é o número de sementes cheias dividido pelo número total de sementes e multiplicado por 100), entre outros. Tomando-se o arroz como um exemplo, um aumento de rendimento pode manifestar-se por si só como um aumento em um ou mais dos seguintes: número de plantas por hectare ou acre, número de panículos por planta, número de espiguetas por panículo, número de flores (flóscuios) por panículo (que é expressado como uma razão do número de sementes cheias em relação ao número de panículos primários), aumento na taxa de enchimento da semente (que é o número de sementes cheias dividido pelo número total de sementes e multiplicado por 100), aumento no peso de mil grãos, entre outros.

Visto que as plantas transgênicas de acordo com a presente invenção têm rendimento aumentado, é provável que estas plantas exibam uma taxa de crescimento aumentada (durante pelo menos parte de seu ciclo de vida), em relação à taxa de crescimento de plantas de controle em um estágio correspondente no seu ciclo de vida. A taxa de crescimento aumentada pode ser específica a uma ou mais partes de uma planta (incluindo sementes) ou pode ser substancialmente por toda a planta inteira. As plantas tendo uma taxa de crescimento aumentada pode ter um ciclo de vida mais curto. O ciclo de vida de uma planta pode ser considerado significar o tempo necessário para crescer a partir de uma semente madura seca até o estágio onde a planta produziu sementes maduras secas, similares ao material de partida. Este ciclo de vida pode ser influenciado por fatores tais como vigor inicial, taxa de crescimento, índice de verdor, tempo de florescimento e velocidade de maturação da semente. O aumento na taxa de crescimento pode ocorrer em um ou mais estágios no ciclo de vida de uma planta ou durante substancialmente o ciclo de vida da planta inteira. A taxa de crescimento aumentada durante os estágios iniciais no ciclo de vida de uma planta pode refletir em vigor realçado. O aumento na taxa de crescimento pode alterar o ciclo de colheita de uma planta para permitir que as plantas sejam semeadas mais tarde e/ou colhida mais cedo do que de outro modo seria possível (um efeito similar pode ser obtido com o tempo de florescimento mais cedo). Se a taxa de crescimento é suficientemente aumentada, isto pode permitir a semeadura adicional de sementes da mesma espécie vegetal (por exemplo semeadura e colheita de plantas de arroz seguida pela semeadura e colheita de mais plantas de arroz todas dentro de um período de crescimento convencional). Similarmente, se a taxa de crescimento é suficientemente aumentada, isto pode permitir a semeadura adicional de sementes de espécies vegetais diferentes (por exemplo a semeadura e colheita de plantas de arroz seguido, por exemplo, pela semeadura e colheita opcional de soja, batata ou qualquer outra planta adequada). Os tempos de colheita adicionais do mesmo rizoma no caso de algumas plantas de safra também podem ser possíveis. Alterar o ciclo de colheita de uma planta pode levar a um aumento na produção de biomassa anual por acre (devido a um aumento no número de vezes (digamos em um ano) que qualquer planta particular pode ser cultivada e colhida). Um aumento na taxa de crescimento também pode permitir o cultivo de plantas transgênicas em uma área geográfica mais ampla do que as suas contrapartes do tipo selvagem, visto que as limitações territoriais para o cultivo de uma safra são freqüentemente determinadas pelas condições ambientais adversas no tempo de plantio (estação inicial) ou no tempo de colheita (estação tardia). Tais condições adversas podem ser evitadas se o ciclo de colheita for encurtado. A taxa de crescimento pode ser determinada pela derivação de vários parâmetros a partir de curvas de crescimento, tais parâmetros podem ser: T-Mid (o tempo levado para as plantas atingirem 50 % do seu tamanho máximo) e T-90 (time levado para as plantas atingirem 90 % do seu tamanho máximo), entre outros.

O desempenho dos métodos da invenção dá plantas tendo uma taxa de crescimento aumentada. Portanto, de acordo com a presente invenção, é fornecido um método para aumentar a taxa de crescimento de plantas método este que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta.

Um aumento no rendimento e/ou taxa de crescimento ocorre se a planta está sob condições de não estresse ou se a planta é exposta a vários estresses comparada com plantas de controle. As plantas tipicamente respondem à exposição ao estresse crescendo mais lentamente. Em condições de estresse grave, a planta pode mesmo parar de crescer completamente. O estresse brando por outro lado é aqui definido como sendo qualquer estresse ao qual uma planta é exposta que não resulta na planta cessando de crescer completamente sem a capacidade para retomar o crescimento. O estresse brando no sentido da invenção leva a uma redução no crescimento das plantas estressadas de menos do que 40 %, 35 % ou 30 %, preferivelmente menos do que 25 %, 20 % ou 15 %, mais preferivelmente menos do que 14 %, 13 %, 12 %, 11 % ou 10 % ou menos em comparação com a planta de controle sob condições de não estresse. Devido aos avanços nas práticas agrícolas (irrigação, fertilização, tratamentos com pesticidas) estresses graves não são freqüentemente encontrados em plantas de safra cultivadas. Como uma conseqüência, o crescimento comprometido induzido pelo estresse brando é freqüentemente uma característica indesejável para a agricultura. Estresses brandos são os estresses bióticos e/ou abióticos (ambientais) diários aos quais uma planta é exposta. Os estresses abióticos podem ser devido à seca ou água em excesso, estresse anaeróbico, estresse do sal, toxicidade química, estresse oxidativo e temperaturas quentes, frias ou de congelamento. O estresse abiótico pode ser um estresse osmótico causado por um estresse da água (particularmente devido à seca), estresse do sal, estresse oxidativo ou um estresse iônico. Os estresses bióticos são tipicamente aqueles estresses causados pelos patógenos, tais como bactérias, vírus, fungos e insetos.

O desempenho dos métodos de acordo com a presente invenção resulta em plantas tendo tolerância aumentado ao estresse abiótico. Como relatado em Wang et ai. (Planta (2003) 218: 1-14), o estresse abiótico leva a uma série de mudanças morfológicas, fisiológicas, bioquímicas e moleculares que afetam adversamente o crescimento e a produtividade vegetais. A seca, salinidade, temperaturas extremas e estresse oxidativo são conhecidos ser interconectados e podem induzir o crescimento e o dano celular através de mecanismos similares. Por exemplo, a seca e/ou salinização são manifestados primariamente como estresse osmótico, resultando no rompimento da homeostase e distribuição iônica na célula. O estresse oxidativo, que freqüentemente acompanha as temperaturas altas ou baixas, salinidade ou estresse da seca podem causar a desnaturação de proteínas funcionais e estruturais. Como uma conseqüência, estes diversos estresses ambientais freqüentemente ativam caminhos de sinalização celular similares e respostas celulares, tais como a produção de proteínas de estresse, super- regulagem de anti-oxidantes, acúmulo de solutos compatíveis e parada de crescimento.

Visto que diversos estresses ambientais ativam caminhos similares, a exemplificação da presente invenção com o estresse da seca (na medida em que a invenção diz respeito ao uso de polipeptídeos hox5 HDZip classe I e seus ácido nucléicos codificadores) não deve ser vista como uma limitação ao estresse da seca, mas mais como uma triagem para indicar o envolvimento dos polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou um homólogos destes nos estresse abióticos no geral. Além disso, os métodos da presente invenção podem ser realizados sob condições não estressantes ou sob condições de seca branda para dar plantas tendo características de crescimento melhoradas (particularmente rendimento aumentado) em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle. O termo condições "não estressantes" como aqui usado são preferivelmente aquelas condições ambientais que não vão significantemente além das condições climáticas e outros abióticos que as plantas pode encontrar o mais preferivelmente aquelas condições que permitem o crescimento ótimo de plantas. As pessoas habilitadas na técnica estão cientes das condições de solo e condições climáticas normais para um dado local.

Um grau particularmente alto de "conversação cruzada" é relatado entre o estresse da seca e o estresse da salinidade alta (Rabbani et al. (2003) Plant Physiol 133: 1755-1767). Portanto, estará evidente que um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste, junto com a sua utilidade em conferir tolerância à seca em plantas, encontraria também uso na proteção da planta contra vários outros estresses abióticos. Similarmente, estaria evidente que uma quinase tipo felpuda do Grupo I (como aqui definida), junto com a sua utilidade em conferir tolerância ao sal em plantas, encontraria também uso na proteção da planta contra vários outros estresses abióticos. Além disso, Rabbani et al. (2003, Plant Physiol 133: 1755-1767) relatam que mecanismos moleculares similares de tolerância e respostas ao estresse existem entre dicotiledôneas e monocotiledôneas. Os métodos da invenção são portanto vantajosamente aplicáveis a qualquer planta.

O termo "estresse abiótico" como aqui definido é considerado significar qualquer um ou mais de: estresse da água (devido à seca ou água em excesso), estresse anaeróbico, estresse do sal, estresse da temperatura (devido às temperaturas quentes, frias ou congelantes), estresse da toxicidade química e estresse oxidativo. De acordo com um aspecto da invenção, o estresse abiótico é um estresse osmótico, selecionado de estresse da água, estresse do sal, estresse oxidativo e estresse iônico. Preferivelmente, o estresse da água é o estresse da seca. O termo estresse do sal não é restrito ao sal comum (NaCl), mas pode ser qualquer um ou mais de: NaCl, KCl, LiCl, MgCl2, CaCl2, entre outros.

A tolerância aumentada ao estresse abiótico é manifestada pelo rendimento vegetal aumentado em condições de estresse abiótico. Particularmente, na medida em que a invenção diz respeito ao uso de polipeptídeos hox5 HDZip classe I e seus ácidos nucléicos codificadores, tal rendimento aumentado pode incluir um ou mais dos seguintes: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, HI aumentado, TKW aumentado, comprimento de raiz aumentado ou diâmetro de raiz aumentado, cada um em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes.

O desempenho dos métodos da invenção dá plantas tendo tolerância aumentada ao estresse abiótico. O desempenho dos métodos da invenção dá plantas cultivadas sob condições de não estresse ou sob condições de seca branda características de crescimento melhoradas (particularmente rendimento aumentado) em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle cultivadas sob condições comparáveis.

De acordo com a presente invenção, é fornecido um método para aumentar a tolerância ao estresse abiótico em plantas método este que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste. De acordo com um aspecto da invenção, o estresse abiótico é um estresse osmótico, selecionado de um ou mais dos seguintes: estresse da água, estresse do sal, estresse oxidativo e estresse iônico. Preferivelmente, o estresse da água é o estresse da seca.

A presente invenção também fornece um método para melhorar a tolerância ao estresse abiótico em plantas, que compreende aumentar a atividade em uma planta de uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta, quinase tipo felpuda do Grupo I esta que tem: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido.

A presente invenção também fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal (particularmente rendimento aumentado) em plantas cultivadas sob condições de não estresse ou sob condições secas brandas, método este que compreende modular a expressão (preferivelmente aumentar a expressão) em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste. Em uma forma de realização preferida da invenção, o aumento no rendimento e/ou taxa de crescimento ocorre de acordo com os métodos da presente invenção sob condições de não estresse.

Particularmente, à medida em que a invenção diz respeito ao uso de polipeptídeos hox5 HDZip classe I e seus ácidos nucléicos codificadores, o desempenho dos métodos da invenção dá um índice de verdor aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes. O índice de verdor como aqui definido é a proporção (expressada como %) de pixéis amarelos em imagens de planta registradas por uma câmara digital. Um índice de verdor aumentado pode indicar senescência reduzida ou retardada que por sua vez permite a prolongação da atividade fotossintética de uma planta, que por sua vez leva a vários efeitos benéficos bem conhecidos na técnica.

A invenção portanto fornece um método para aumentar o índice de verdor em plantas método este que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste. Preferivelmente, o índice de verdor é aumentado em condições de estresse abiótico, mais preferivelmente em condições de estresse da água, mais preferivelmente em condições de estresse da seca.

Preferivelmente, onde o método da invenção compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste, o rendimento aumentado inclui um ou mais dos seguintes: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, HI aumentado, TKW aumentado, comprimento de raiz aumentado ou diâmetro de raiz aumentado, cada um em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle.

De acordo com uma característica preferida da presente invenção, é fornecido um método para aumentar o rendimento vegetal em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle, método este que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste.

Preferivelmente, onde o método da invenção compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um NRT ou um homólogo deste, a plantas resultantes têm rendimento aumentado e mais particularmente, biomassa aumentada e/ou rendimento de semente aumentado. Preferivelmente, o rendimento de semente aumentado compreende um aumento em um ou mais de número de sementes (cheias), peso de semente total, tamanho de semente, peso de mil grãos e índice de colheita, cada um em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle.

De acordo com uma outra característica preferida da presente invenção, é fornecido um método para aumentar o rendimento vegetal, método este que compreende modular a expressão (preferivelmente aumentar a atividade e/ou expressão) em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste.

Preferivelmente, onde o método da invenção compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP ló, o rendimento aumentado ou melhorado é o rendimento de semente melhorado em relação ao rendimento de semente de plantas do tipo selvagem correspondentes.

Portanto, de acordo com uma outra característica preferida da presente invenção, é fornecido um método para aumentar o rendimento de semente em uma planta em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle, que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo deste.

Preferivelmente, onde o método da invenção compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta, a característica de crescimento melhorada é a tolerância melhorada ao estresse abiótico.

De acordo com uma outra característica preferida da presente invenção, é fornecido um método para melhorar a tolerância ao estresse abiótico em plantas, que compreende modular a expressão (preferivelmente aumentar a atividade e/ou expressão) em uma planta de uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta, quinase tipo felpuda do Grupo I esta que tem: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido.

Os métodos da invenção são portanto vantajosamente aplicáveis a qualquer planta.

O termo "planta" como aqui usado abrange plantas inteiras, progenitores e progênie das plantas e partes de planta, incluindo sementes, brotos, hastes, folhas, raízes (incluindo tubérculos), flores e tecidos e órgãos, em que cada um dos anteriormente mencionados compreendem o gene/ácido nucléico de interesse. O termo "planta" também abrange células vegetais, culturas em suspensão, tecido de caio, embriões, regiões meristemáticas, gametófitos, esporófitos, pólen e microesporos, mais uma vez em que cada um dos anteriormente mencionados compreendem o gene/ácido nucléico de interesse.

As plantas que são particularmente úteis nos métodos da invenção incluem todas as plantas que pertencem à superfamília Viridiplantae, em particular plantas monocotiledôneas e dicotiledôneas incluindo forragem ou legumes forrageiros, plantas ornamentais, safras de alimento, árvores ou arbustos selecionados da lista que compreende Acacia spp., Aeer spp., Aetinidia spp., Aesculus spp., Agathis australis, Albizia amara, Alsophila tricolor, Andropogon spp., Arachis spp, Areca eateehu, Astelia fragrans, Astragalus cicer, Baikiaea plurijuga, Betula spp., Brassica spp., Bruguiera gymnorrhiza, Burkea africana, Butea frondosa, Cadaba farinosa, Calliandra spp, Camellia sinensis, Canna indica, Capsieum spp., Cassia spp., Centroema pubescens, Chaenomeles spp., Cinnamomum cassia, Cojfea arabica, Colophospermum mopane, Coronillia varia, Cotoneaster serotina, Crataegus spp., Cucumis spp., Cupressus spp., Cyathea dealbata, Cydonia oblonga, Cryptomeria japonica, Cymbopogon spp., Cynthea dealbata, Cydonia oblonga, Dalbergia monetaria, Davallia divaricata, Desmodium spp., Dicksonia squarosa, Diheteropogon amplectens, Dioclea spp, Dolichos spp., Dorycnium reetum, Echinoehloa piramidalis, Ehrartia spp., Eleusine coraeana, Eragrestis spp., Erythrina spp., Eucalyptus spp., Euelea schimperi, Eulalia villosa, Fagopirum spp., Feijoa sellowiana, Fragaria spp., Flemingia spp, Freycinetia banksii, Geranium thunbergii, Ginkgo biloba, Glyeine javaniea, Glirieidia spp, Gossypium hirsutum, Grevillea spp., Guibourtia eoleosperma, Hedysarum spp., Hemarthia altíssima, Heteropogon contortus, Hordeum vulgare, Hyparrhenia rufa, Hyperieum ereetum, Hyperthelia dissoluta, índigo incarnata, Iris spp., Leptarrhena pirolifolia, Lespediza spp., Lettuea spp., Leueaena leueoeephala, Loudetia simplex, Lotonus bainesii, Lotus spp., Macrotiloma axillare, Malus spp., Manihot eseulenta, Medieago sativa, Metasequoia glyptostroboides, Musa sapientum, Nieotianum spp., Onobryehis spp., Ornithopus spp., Oryza spp., Peltophorum afrieanum, Pennisetum spp., Persea gratíssima, Petunia spp., Phaseolus spp., Phoenix canariensis, Phormium cookianum, Photinia spp., Picea glauca, Pinus spp., Pisum sativum, Podocarpus totara, Pogonarthria fleekii, Pogonarthria squarrosa, Populus spp., Prosopis eineraria, Pseudotsuga menziesii, Pterolobium stellatum, Pirus eommunis, Quereus spp., Rhaphiolepsis umbellata, Rhopalostilis sapida, Rhus natalensis, Ribes grossularia, Ribes spp., Robinia pseudoaeaeia, Rosa spp., Rubus spp., Salix spp., Schyzachyrium sanguineum, Seiadopitys vertieillata, Sequoia sempervirens, Sequoiadendron giganteum, Sorgo bieolor, Spinaeia spp., Sporobolus fimbriatus, Stiburus alopeeuroides, Stilosanthos humilis, Tadehagi spp, Taxodium distiehum, Themeda triandra, Trifolium spp., Triticum spp., Tsuga heterophilla, Vaccinium spp., Vicia spp., Vitis vinifera, Watsonia piramidata, Zantedesehia aetiopiea, Zea mays, amaranto, alcachofra, asparago, brócoli, couve de bruxelas, repolho, canola, cenoura, couve-flor, aipo, couve manteiga, linho, couve galega, lentilha, semente oleaginosa de colza, quiabo, cebola, batata, arroz, soja, morango, beterraba açucareira, cana de açúcar, girassol, tomate, abóbora, chá e alga, entre outras.

De acordo com uma forma de realização preferida da presente invenção, a planta é uma planta de safra tal como soja, girassol, canola, alfafa, semente de colza, algodão, tomate, batata ou tabaco. Mais preferivelmente, a planta é uma planta monocotiledônea, tal como cana de açúcar. Mais preferivelmente a planta é um cereal, tal como arroz, milho, trigo, cevada, painço, centeio, sorgo ou aveia.

Polipeptídeos hox5 HDZip classe I e homólogos destes e ácidos nucléicos/genes HDZip hox5 classe I úteis nos métodos da invenção

O termo "polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste" corno aqui definido refere-se a um polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos.

Adicionalmente, o polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste pode compreender qualquer um ou ambos dos seguintes: (a) uma cauda Trp; e (b) o motivo de aminoácido de RPFF, onde R é Arg, P Pro e F Phe. Dentro deste motivo, são permitidas uma ou mais mudanças conservativas em qualquer posição, e/ou uma ou duas mudanças não conservativas em qualquer posição. O motivo de (b) precede a caixa ácida, quando da examinação da proteína do terminal N para o terminal C.

Um exemplo de um polipeptídeo hox5 HDZip classe I como aqui acima definido que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos; e adicionalmente compreendendo: (a) uma cauda Trp; e (b) o motivo de aminoácido de RPFF, onde R é Arg, P Pro e F Phe, é representado como na SEQ ID NO: 2. Outros de tais exemplos são dados na Tabela A do Exemplo 1 aqui.

Uma polipeptídeo de HDZip hox5 classe I ou homólogo deste é codificado por um ácido nucléico/gene hox5 HDZip classe I. Portanto o termo "ácido nucléico/gene HDZip hox5 classe I" como aqui definido é qualquer ácido nucléico/gene que codifique um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste como aqui acima definido.

Os polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes podem ser facilmente identificados usando técnicas de rotina bem conhecidas na técnica, tais como pelo alinhamento de seqüência. Métodos para o alinhamento de seqüências para comparação são bem conhecidos na técnica, tais métodos incluem GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA e TFASTA. GAP usa o algoritmo de Needleman e Wunsch ((1970) J Mol Biol 48: 443-453) para encontrar o alinhamento de duas seqüências completas que maximiza o número de emparelhamentos e minimiza o número de intervalos. O algoritmo BLAST (Altschul et al. (1990) J Mol Biol 215: 403-10) calcula a identidade de seqüência percentual e realiza uma análise estatística da similaridade entre as duas seqüências. O software para realizar a análise BLAST está publicamente disponível através do National Centre for Biotechnology Information. Homólogos de HDZip hox5 classe I que compreendem um homeodomínio classe I e um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos podem ser facilmente identificados usando, por exemplo, o algoritmo de alinhamento de seqüência múltiplo ClustalW (versão 1.83) disponível em http: //clustalw.genome.jp/sit-bin/nph-ClustalW, com os parâmetros de alinhamento aos pares padrão e um método de contagem em porcentagem. Correção manual menor pode ser realizada para otimizar o alinhamento entre motivos conservados, como estaria evidente a uma pessoa habilitada na técnica. Os vários domínios estruturais em uma proteína classe I HDZip hox5, tal como o homeodomínio e o zíper de leucina, pode ser identificado usando bases de dados especializadas por exemplo, SMART (Schultz et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 95, 5857-5864; Letunic et al. (2002) Nucleic Acid Res 30, 242-244; http://smart.embl-heidelberg.de/), InterPro (Mulder et al., (2003) Nucl. Acids. Res. 31, 315-318; http: //www.ebi.ac.ukyinterpro/), Prosite (Bucher e Bairoch (1994), Um syntax de perfil generalizado para motivos de seqüências biomoleculares e a sua função na interpretação de seqüência automática. (In) ISMB-94; Proceedings 2nd International Conference on Intelligent Systems for Molecular Biology. Altman R., Brutlag D., Karp P., Lathrop R., Searls D., Eds., pp53-61, AAAIPress, Menlo Park; Hulo et al., Nucl. Acids. Res. 32: D134-D137, (2004), http: //www.expasy.org/prosite/) ou Pfam (Bateman et al., Nucleic Acid Research 30(1): 276-280 (2002), http: //www.sangerac.uk/Software/ Pfam/). O prognóstico de Zíper de leucina e a identificação de hepteto pode ser feito usando software especializado tal como 2ZIP, que combina um algoritmo de prognóstico de espiral espiralada padrão com uma pesquisa aproximada quanto a repetição de leucina característica (Bornberg-Bauer et al. (1998) Computational Approaches to Identify Leucine Zippers, Nucleic Acid Res., 26(11): 2740-2746, http: //2zip.molgen.mpg.de).

Além disso, a presença de uma caixa ácida também pode ser facilmente identificados. A composição de aminoácido primária (em %) para determinar se um domínio de polipeptídeo é rico em aminoácidos específicos pode ser calculada usando programas de software do servidor ExPASy, em particular a ferramenta ProtParam (Gasteiger E et al. (2003) ExPASy: the proteomies server for in-depth protein knowledge and analysis. Nucleic Acid Res 31: 3784-3788). A composição da proteína de interesse pode ser depois comparada com a composição de aminoácido média (em %) no banco de dados de Seqüência de Proteína da Swiss-Prot. Dentro deste banco de dados, o teor de Asp (D) e Glu (E) médio são de 5,3 % e de 6,6 % respectivamente, a média combinada sendo de 11,9 %. Como um exemplo, a caixa ácida da SEQ ID NO: 2 contêm 9,1 % de D e 54,5 % de E, a média combinada sendo de 63,6 %. Como aqui definido, uma caixa rica em ácido tem um teor de Asp (D) e Glu (E) combinados (em termos de %) acima daquele encontrado na composição de aminoácido médio (em termos de %) das proteínas na base de dados de Swiss-Prot Protein Sequence. Uma caixa ácida pode ser parte de um domínio de ativação de transcrição. O domínio de ativação de transcrição eucariótico foi classificado de acordo com o seu teor de aminoácido e categorias maiores incluem o domínio de ativação ácido, rico em glutamina e rico em prolina (Rutherford et al. (2005) Plant J. 43(5): 769-88 e referências neste).

Um número selecionado de proteínas entre os polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes compreendem ainda o motivo de aminoácido de RPFF, onde R é Arg, P Pro e F Phe. Dentro deste motivo, são deixadas uma ou mais mudanças conservativas em qualquer posição, e/ou uma ou duas mudanças não conservativas em qualquer posição. Este motivo precede a caixa ácida, quando da examinação da proteína do terminal N para o terminal C (ver a Figura 2). A presença do RPFF pode ser identificada usando métodos para o alinhamento de seqüências para a comparação como aqui descrito acima. Em alguns casos, os parâmetros padrão podem ser ajustados para modificar a severidade da pesquisa. Por exemplo usando BLAST, o limiar de significância estatística (chamado de valor "esperado") para relatar emparelhamentos contra seqüências de base de dados pode ser aumentado para mostrar emparelhamentos menos severos. Deste modo, emparelhamentos quase exatos podem ser identificados.

Um número selecionado de proteínas entre os polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes pode compreender ainda uma cauda Trp. Uma cauda Trp como aqui definida são os últimos 10 aminoácidos do terminal C da proteína que compreende pelo menos um resíduo Trp (ver a Figura 2).

Os exemplos de polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes (codificados pela seqüência de polinucleotídeo número de Acesso em parêntese) são dados na Tabela A.

Deve ser entendido que as seqüências que caem sob a definição de "polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste" não devem ser limitados às seqüências dadas na Tabela A, mas que qualquer polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos, pode ser adequado para o uso no desempenho dos métodos da invenção.

Os polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes têm atividade de ligação de DNA, preferivelmente a hemi-sítios de 5 pares de base que se sobrepõem em uma posição central, CAA(A/T)ATTG, como detectado em ensaios de híbrido único de levedura (Meijer ei ai. (2000) Mol Gen Genet 263: 12-21). Em ensaios transitórios em suspensões de célula de arroz, o co-bombardeamento de um polipeptídeo hox5 HDZip classe I com o gene repórter GUS resultou em um aumento do número de pontos tingidos, que foram também mais intensos na cor (Meijer et al, supra). Este ensaio é útil para demonstrar a função de ativador de polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos.

Polipeptídeos da NRT e homólogos destes e seus ácidos nucléicos codificadores úteis nos métodos da invenção

O termo "NRT ou homólogo deste" como aqui definido refere- se a um polipeptídeo que compreende (i)um domínio MFS 1 (acesso Pfam PF07690, acesso InterPro IPROl 1701) seguido por (ii) um domínio de transmembrana. Um exemplo é dado na Figura 6. Preferivelmente, a proteína NRT ou homólogo deste tem atividade da NRT tal como o transporte de nitrato de alta afinidade e não compreendem um domínio PTR2 (acesso Pfam PF00854, acesso InterPro IPROOO109).

Preferivelmente, a proteína NRT ou homólogo desta compreendem uma seqüência de assinatura 1 (SEQ ID NO: 57):

(N/S)(Y/P)(T/G/S/A)W(I/V/L)(F/L/T)(V/A/F/L)(LAA/M/1)(L/ Τ/Ι/Α/^ΥΟ(Υ/Ρ)(8/0/Τ)(Μ/ΡΑΓ)0(ν/Ι)ΕΕ(Τ/8)(Τ/^)(ϋ/0/Ν)Ν(ν/Ι/Ν)(Ι^ )(A/S/H/V)(E/Q/G)Y.

Mais preferivelmente, a proteína NRT ou homólogo desta compreendem um ou mais de:

seqüência de assinatura 2 (SEQ ID NO: 58): LG(P/A)RYG(C/T)AF(L/S); seqüência de assinatura 3 (SEQ ID NO: 59): STFAA(A/R)PL(V/I)(P/V)(I/LA^)IR(D/E)NL(N/D)(L/P); seqüência de assinatura 4 (SEQ ID NO: 60): VRF(L/M)IGF(S/C)LA; seqüência de assinatura 5 (SEQ ID NO: 61): FVSC(Q/R)YW(M/T)S(T/V)(M/S)(F/M). Mais preferivelmente, a proteína NRT ou homólogo desta compreendem um ou mais de:

seqüência de assinatura 6 (SEQ ID NO: 62): K(A/Q/S/M/H/T)D(W)GNAGVASV(S/T)G(S/A)I(F/L)SR(L/

G);

seqüência de assinatura 7 (SEQ ID NO: 63): NG(L/T/C)A(A/G)GWG; seqüência de assinatura 8 (SEQ ID NO: 64): G(A/S)G(L/V/Q)TQ(L/P)(L/V/I)(F/E)F(T/S/D)(S/T)(S/A/T). O mais preferivelmente, a proteína NRT é como representada na SEQ ID NO: 53.

Os domínios de transmembrana são de cerca de 15 a 30 aminoácidos de comprimento e são usualmente compostos de resíduos hidrofóbicos que formam uma hélice alfa. Estes são usualmente prognosticados com base na hidrofobicidade (por exemplo Klein et al., Biochim. Biophys. Acta 815, 468, 1985; ou Sonnhammer et al., Em J.

Glasgow, T. Littlejohn, F. Major, R. Lathrop, D. Sankoff e C. Sensen, editores, Proceedings of the Sixth International Conference on Intelligent Systems for Molecular Biology, páginas 175-182, Menlo Park, CA, 1998. AAAI Press).

Alternativamente, o homólogo de uma proteína NRT tem em ordem crescente de preferência 50 %, 55 %, 56 %, 57 %, 58 %, 59 %, 60 %, 61 %, 62 %, 63 %, 64 %, 65 %, 66 %, 67 %, 68 %, 69 %, 70 %, 71 %, 72 %, 73 %, 74 %, 75 %, 76 %, 77 %, 78 %, 79 %, 80 %, 81 %, 82 %, 83 %, 84 %, 85 %, 86 %, 87 %, 88 %, 89 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % de identidade de seqüência global em relação ao aminoácido representado pela SEQ ID NO: 53. A identidade de seqüência global é determinada usando um algoritmo de alinhamento global, tal como o algoritmo de Needleman Wunsch no programa GAP (GCG Wisconsin Package, Accelrys), preferivelmente com parâmetros padrão.

Os vários domínios estruturais em uma proteína NRT podem ser identificados usando bases de dados especializadas por exemplo, SMART (Schultz et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 95, 5857-5864; Letunic et al. (2002) Nucleic Acid Res 30, 242-244; http: //smart.embl-heidelberg.de/), InterPro (Mulder et al., (2003) Nucl. Acids. Res. 31, 315-318; http: //www.ebi.ac.uk/interpro/), Prosite (Bucher e Bairoch (1994), Um syntax de perfil generalizado para motivos de seqüência biomolecular e a sua função na interpretação de seqüência automática. (Em) ISMB-94; Proceedings 2nd International Conference on Intelligent Systems for Molecular Biology. Altman R., Brutlag D., Karp P., Lathrop R., Searls D., Eds., pp 53-61, AAAI Press, Menlo Park; Hulo et al., Nucl. Acids. Res. 32: D134-D137, (2004), http: //www.expasy.org/prosite/) ou Pfam (Bateman et al., Nucleic Aeid Research 30(1): 276-280 (2002), http: //www.sanger.ae.uk/Software/ Pfam/).

Os métodos para a pesquisa e identificação de homólogos de NRT estão bem dentro do domínio de pessoas habilitadas na técnica. Tais métodos compreendem a comparação das seqüências representadas pelas SEQ ID NO: 1 ou 2, em um formato legível por computador, com seqüências que estão disponíveis em bases de dados públicas tais como MIPS (http: //mips.gsf.de/), GenBank (http: //www.ncbi.nlm.nih.gov/ Genbank/index.html) ou EMBL Nucleotide Sequence Database (http: //www.ebi.ac.uk/embl/index.html), usando algoritmos bem conhecidos na técnica para o alinhamento ou comparação de seqüências, tais como GAP (Needleman e Wunsch, J. Mol. Biol. 48; 443-453 (1970)), BESTFIT (usando o algoritmo de homologia local de Smith e Waterman (Advances in Applied Mathematics 2; 482-489 (1981))), BLAST (Altschul, S. F., Gish, W., Miller, W., Myers, E. W. & Lipman, D. J., J. Mol. Biol. 215: 403-410 (1990)), FASTA e TFASTA (W. R. Pearson e D. J. Lipman Proc. Nati. Acad. Sei. USA 85: 2444-2448 (1988)). O software para realizar a análise BLAST está publicamente disponível através do National Centre for Biotechnology Information (NCBI).

Os exemplos de proteínas que caem sob a definição de "polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste" incluem proteínas do arroz e proteínas de outras espécies tais como Zea mays, Phragmites australis, Hordeum vulgare, Triticum aestivum, Brassica napus, Lycopersicon eseulentum, Nieotiana tabaeum, Daueus earota, Populus tremulus, Lotus japoniea, Prunus pérsica, Glyeine max e Arabidopsis thaliana, entre outras. Uma lista não limitante de exemplos de proteínas NRT é dada na Tabela I do Exemplo 14 aqui.

E entretanto considerado que as proteínas NRT de outros táxons vegetais, tais como musgos ou samambaias, podem ser igualmente úteis nos métodos da presente invenção. Por exemplo, o musgo Physcomitrella patens possuem pelo menos 5 proteínas NRT (Números de Acesso no GenBank BAD00097, BAD00098, BAD00099, BADOO100, BAD00101).

Deve ser entendido que o termo "polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste" não deve ser limitado à seqüência representada pela SEQ ID NO: 53 ou às seqüências dadas na Tabela I, mas que qualquer polipeptídeo que atinja os critérios de compreender um domínio funcional MFS_1 e uma ou mais das seqüências de assinatura conservadas das SEQ ID NOs: 57 a 64 e um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio MFS_1 como definido acima; ou tendo pelo menos 50 % de identidade de seqüência com a seqüência da SEQ ID NO: 53, pode ser adequado para o uso nos métodos da invenção.

Para determinar a atividade de transportador de NRT, o ensaio de captação de nitrato como descrito por Tong et al. (Plant J. 41, 442-450, 2005). Em resumo, a proteína NRT de interesse é expressada em Xenopus oocytes e a captação de nitrato enriquecido em 15N é medido. Se requerido, um gene nar2 pode ser co-expressado para aumentar o transporte de nitrato.

Alternativamente, a atividade de uma proteína NRT ou homólogo deste pode ser ensaiado pela expressão da proteína NRT ou homólogo deste sob controle de um promotor GOS2 no Oryza sativa cultivar Nipponbare, que resulta em plantas com biomassa acima do solo aumentado e/ou rendimento de semente aumentado comparado com plantas do tipo selvagem correspondentes. Este aumento no rendimento de semente pode ser medido em diversos modos, por exemplo como um aumento de peso de semente total, número de sementes cheias ou número de sementes totais, como um aumento do índice de colheita ou como um aumento de flores por panículo.

Uma proteína NRT ou homólogo deste é codificada por um ácido nucléico/gene da NRT. Portanto o termo "ácido nucléico/gene da NRT" como aqui definido é qualquer ácido nucléico/gene que codifica uma proteína NRT ou um homólogo deste como definido acima.

Polipeptídeos de YEP16 e homólogos e seus ácidos nucléicos codificadores úteis nos métodos da invenção

O termo "polipeptídeo de YEP16" refere-se à seqüência da SEQ ID NO: 128. UM homólogo de um polipeptídeo de YEP16 refere-se a qualquer seqüência de aminoácido que compartilha, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: 128. Referência aqui a "um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo deste" portanto refere-se a qualquer seqüência de ácido nucléico que codifique um polipeptídeo de YEP16 como aqui acima definido ou qualquer ácido nucléico que codifique um homólogo de um polipeptídeo de YEP16 como aqui acima definido.

Quinases equivalentes a shaggy do Grupo I e homólogos destes e seus ácidos nucléicos codificadores úteis nos métodos da invenção

O termo "quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo deste" como aqui definido refere-se a um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido. Um polipeptídeo que atinge as exigências anteriormente mencionadas permite que uma quinase tipo felpuda do Grupo I seja distinguida daquela de outros grupos.

Uma "quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta" que caem dentro da definição acima podem ser facilmente identificados usando técnicas de rotina bem conhecidas pelas pessoas habilitadas na técnica. Por exemplo, um polipeptídeo tendo pelo menos 77 % de identidade com o aminoácido representado pela SEQ ID NO: 147 pode ser facilmente estabelecido pelo alinhamento de seqüência. Métodos para o alinhamento de seqüências para comparação são bem conhecidos na técnica, tais métodos incluem GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA e TFASTA. GAP usa o algoritmo de Needleman e Wunsch (J. Mol. Biol. 48: 443-453, 1970) para descobrir o alinhamento de duas seqüências completas que maximizam o número de emparelhamentos e minimiza o número de intervalos. O algoritmo BLAST calcula a identidade de seqüência percentual e realiza uma análise estatística da similaridade entre as duas seqüências. O software para realizar a análise de BLAST está publicamente disponível através do National Centre for Biotechnology Information. Uma quinase tipo felpuda ou um homólogo desta tendo pelo menos 77 % identidade com o aminoácido representado pela SEQ ID NO: 147 pode ser facilmente identificado pelo alinhamento de uma seqüência de aminoácido dúvida com seqüências da quinase tipo felpuda do Grupo I conhecidas (ver por exemplo o alinhamento mostrado na Figura 14) usando, por exemplo, o programa de alinhamento múltiplo VNTI AlignX, com base em um algoritmo clustal W modificado (InforMax, Bethesda, MD, http: //www.informaxinc.com), com ajustes de referência quanto a penalidade de abertura de intervalo de 10 e uma extensão de intervalo de 0,05.

Uma pessoa habilitada na técnica também será facilmente capaz de identificar seqüências tendo o motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e o motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido. Isto pode ser obtido fazendo-se um alinhamento e pesquisando quanto a regiões homólogas.

A Tabela 1 abaixo mostra o motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e o motivo II: K Q/N CXXX G/A/S (onde X pode ser qualquer aminoácido) como encontrado na seqüência da SEQ ID NO: 147 e nos motivos correspondentes em seqüências homólogas. A identidade percentual global mostrada na Tabela 1 é quando da comparação da SEQ ID NO: 147 com os números de Acesso mostrados na Tabela (seqüência de tamanho natural com seqüência de tamanho natural).

Tabela 1: Motivos conservados encontrados em quinases equivalentes a shaggy do Grupo I e em homólogos destas

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Os exemplos de polipeptídeos que caem sob a definição de uma "quinase tipo felpuda ou um homólogo desta" incluem as seguintes seqüências: SEQ ID NO: 147, uma gama quinase tipo felpuda de arroz (NCBI Número de Acesso AB059621); SEQ ID NO: 149 (NCBI Número de Acesso AK058276) uma quinase tipo felpuda de arroz; SEQ ID NO: 151 (NCBI Número de Acesso AK099599) uma quinase tipo felpuda do arroz; SEQ ID NO: 153, uma alfa quinase tipo felpuda de Arabidopsis thaliana (NCBI Número de Acesso At5g26750); SEQ ID NO: 155, uma gama quinase tipo felpuda de Arabidopsis thaliana (Número de Acesso NCBI At3g05840); SEQ ID NO: 157, uma alfa quinase tipo felpuda de Arabidopsis thaliana (Número de Acesso NCBI CAA48538.1); SEQ ID NO: 159, uma épsilon quinase tipo felpuda de Arabidopsis thaliana (Número de Acesso NCBI At5g14640); SEQ ID NO: 161, uma gama quinase tipo felpuda de Arabidopsis thaliana (Número de Acesso NCBI CAA73247.1); SEQ ID NO: 163 de milho (Número de Acesso NCBI AYl03545); SEQ ID NO: 165 de milho (Número de Acesso NCBI AY108486.1); SEQ ID NO: 167 de Medicago (Número de Acesso NCBI CAA48472.1); SEQ ID NO: 169 de Medicago (Número de Acesso NCBI CAA48474.1); SEQ ID NO: 171 de Medicago (Número de Acesso NCBI CAA48473.1); SEQ ID NO: 173 de tabaco (Número de Acesso NCBI CAA54803.1); SEQ ID NO: 175 um prognóstico de proteína de uma quinase tipo felpuda de Triticum aestivum (Número de Acesso NCBI AAM77397.1); SEQ ID NO: 177 de Petunia híbrida (Número de Acesso NCBI CAA58594.1).

O "termo quinase tipo felpuda ou um homólogo deste" não deve ser limitado às seqüências representadas pelas SEQ ID Nus mencionadas no parágrafo anteriormente mencionado, mas que qualquer polipeptídeo que atinge os critérios de ter: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX GINS, onde X pode ser qualquer aminoácido, seria adequado para o uso nos métodos da invenção.

As quinases equivalentes a shaggy, como o nome sugere, têm atividade de quinase. Um ensaio quanto a glicogênio sintase quinase-3 (GSK- 3), o animal homólogo, é relatado no The Biochemical Journal, Vol. 303 (Pt3), 1 de Nov. de 1994, pp 701-704 (Stambolic e Woodgett).

As seqüências úteis nos métodos da invenção não são limitadas aos ácido nucléicos e polipeptídeos do homeodomínio de class I do zíper de leucina (HDZip) hox5 anteriormente mencionados; ou aos polipeptídeos de NRT anteriormente mencionados e seus ácidos nucléicos codificadores; ou aos polipeptídeos de YEP16 anteriormente mencionados e seus ácidos nucléicos codificadores; ou às quinases equivalentes a shaggy do Grupo I anteriormente mencionadas e seus polipeptídeos codificadores. Os métodos de acordo com a presente invenção também podem ser realizados usando variantes de ácidos nucléicos que codificam os polipeptídeos hox5 do homeodomínio de zíper de leucina (HDZip) classe I ou homólogos destes; ou usando variantes de ácido nucléicos que codificam polipeptídeos da NRT ou homólogos destes; ou usando variantes de ácidos nucléicos que codificam polipeptídeos de YEP16 e homólogos destes; ou usando variantes de ácidos nucléicos que codificam quinases equivalentes a shaggy do Grupo I e homólogos destes.

Os exemplos de tais variantes incluem porções, seqüências de hibridização, variantes alélicas, variantes de junção e variantes obtidas pelo embaralhamento de gene.

Urna porção pode ser preparada, por exemplo, fabricando-se uma ou mais deleções para um ácido nucléico. As porções podem ser usadas na forma isolada ou elas podem ser fundidas a outras seqüências codificadoras (ou não codificadoras) de modo a produzir, por exemplo, uma proteína que combine diversas atividades. Quando fundido a outras seqüências codificadoras, o polipeptídeo de resultante produzido na transdução pode ser maior do que aquele prognosticado para a porção.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um hox5 de HDZip classe I, a porção que codifica um polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos. Preferivelmente, a porção é uma porção de um dos ácidos nucléicos dados na Tabela A. O mais preferivelmente a porção é uma porção de um ácido nucléico como representado pela SEQ ID NO: 1. Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica um NRT, a porção refere-se a um pedaço de DNA que codifica um polipeptídeo que compreende um domínio MFS_1 e um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio MFSl.

Preferivelmente, a porção compreende uma ou mais das seqüências de assinatura definidas acima. Preferivelmente, a porção é uma porção de um dos ácidos nucléicos dados na Tabela I. O mais preferivelmente a porção de um ácido nucléico é como representada pela SEQ ID NO: 52.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica YEP16, a porção refere-se a um pedaço de DNA que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo deste tendo, em ordem crescente de preferência, pelo menos 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575 nucleotídeos consecutivos da seqüência de ácido nucléico representado pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129 ou em que uma porção tem em ordem crescente de preierenuia, pelo menos 100, 125, 150, l75, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575 nucleotídeos consecutivos de uma seqüência de ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo deste. Preferivelmente, a porção é uma porção de um ácido nucléico como representado pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção em uma quinase tipo felpuda do Grupo I, a porção refere-se a uma quinase equivalente ao pedaço que codifica shaggy de DNA de pelo menos 1.200 nucleotídeos no comprimento e porção esta que codifica um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) tendo o motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e o motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido. Preferivelmente, a porção é uma porção de um ácido nucléico como representado por qualquer uma da SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174 e SEQ ID NO: 176.

A invenção portanto fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de uma porção de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 do homeodomínio classe I de zíper de leucina (HDZip) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma porção de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma porção de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma porção de um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta.

Uma outra variante de ácido nucléico é um ácido nucléico capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas, com um ácido nucléico que codifica um ácido nucléico/gene hox5 HDZip classe I ou homólogo deste; ou com um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou homólogo deste; ou com um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste; ou com um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo deste.

O termo "hibridização" como aqui definido é um processo em que as seqüências de nucleotídeo complementares substancialmente homólogas recozem-se entre si. O processo de hibridização pode ocorrer totalmente em solução, isto é, ambos os ácidos nucléicos complementares estão em solução. O processo de hibridização também pode ocorrer com um dos ácidos nucléicos complementares imobilizados a uma matriz tais como pérolas magnéticas, pérolas de Sefarose ou qualquer outra resina. O processo de hibridização além disso pode ocorrer com um dos ácidos nucléicos complementares imobilizados a um suporte sólido tal como uma membrana de nitro-celulose ou náilon ou imobilizado por exemplo, pela fotolitografia, por exemplo, a um suporte de vidro silicoso (o último conhecido como séries ou microsséries de ácido nucléico ou como chips de ácido nucléico). De modo a permitir que a hibridização ocorra, as moléculas de ácido nucléico são no geral térmica ou quimicamente desnaturadas para fundir um filamento duplo em dois filamentos simples e/ou para remover grampos de cabelo ou outras estruturas secundárias de ácido nucléicos de filamento único. A severidade de hibridização é influenciada por condições tais como temperatura, concentração salina, força iônica e composição do tampão de hibridização.

"Condições de hibridização severas" e "condições de lavagem de hibridização severas" no contexto de experimentos de hibridização de ácido nucléico tais como hibridizações de Southern e Northern são dependentes de seqüência e são diferentes sob parâmetros ambientais diferentes. O técnico habilitado está ciente de vários parâmetros que podem ser alterados durante a hibridização e lavagem e que manterão ou mudarão as condições de severidade.

A Tm é a temperatura sob força iônica e pH definidos, em que 50 % da seqüência alvo hibridiza com uma sonda perfeitamente emparelhada. A Tm é dependente das condições de solução e a composição de base e o comprimento da sonda. Por exemplo, seqüências mais longas hibridizam especificamente em temperaturas mais altas. A taxa de hibridização máxima é obtida de cerca de 16° C até 32° C abaixo da Tm. A presença de cátions monovalentes na solução de hibridização reduz a repulsão eletrostática entre os dois filamentos de ácido nucléico promovendo deste modo a formação de híbrido; este efeito é visível para as concentrações de sódio de até 0,4 Μ. A formamida reduz a temperatura de fusão de duplexes de DNA-DNA e DNA- RNA com 0,6 a 0,7°C para cada percentual de formamida e a adição de 50 % de formamida permite que a hibridização seja realizada de 30 a 45° C, embora a taxa de hibridização seja diminuída. Os desempearelhamento de par de base reduz a taxa de hibridização e a estabilidade térmica dos duplexes. Em média e para sondas maiores, a Tm diminui de cerca de Io C por % de desemparelhamento de base. A Tm pode ser calculada usando as seguintes equações, dependendo dos tipos de híbridos:

1. Híbridos de DNA-DNA (Meinkoth e Wahl, Anal. Biochem., 138: 267-284, 1984): Tm = 81,5° C + 16,6xlog[Na+]a + 0,41x%[G/C] - SOOxtLc]"1 - 0,6lx% de formamida

2. Híbridos de DNA-RNA ou RNA-RNA: Tm = 79,8 + 18,5 (logio[Na+]a) + 0,58 (%G/Cb) + 11,8 (%G/Cb)2 - 820/Lc

3. Híbridos de oligo-DNA ou oligo-RNAd:

Para <20 nucleotídeos: Tm = 2 (/n)

Para 20 a 35 nucleotídeos: Tm = 22 + 1,46 (In)

a ou para outro cátion monovalente, mas apenas preciso na faixa de 0,01 a 0,4 M.

b apenas preciso para %GC na faixa de 30 % a 75 %.

cL = comprimento de duplex em pares de base.

d Oligo, oligonucleotídeo; In, comprimento efetivo do iniciador = 2x(na de G/C)+( n° de A/T).

Nota: para cada 1 % de formamida, a Tm é reduzida em cerca de 0,6 a 0,7°C, enquanto que a presença de uréia 6 M reduz a Tm em cerca de 30°C

A especificidade de hibridização é tipicamente a função de lavagens de pós hibridização. Para remover o fundo que resulta da hibridização não específica, amostras são lavadas com soluções salinas diluídas. Os fatores críticos de tais lavagens incluem a força iônica e temperatura da solução de lavagem final: quanto mais baixa a concentração salina e quanto mais alta a temperatura de lavagem, mais alta a severidade da lavagem. As condições de lavagem são tipicamente realizadas na ou abaixo da severidade de hibridização. No geral, condições severas adequadas para os ensaios de hibridização de ácido nucléico ou procedimentos de detecção da amplificação de gene são como apresentados acima. As condições de severidade maior ou menor também podem ser selecionadas. No geral, as condições de baixa severidade são selecionadas para serem de cerca de 50° C mais baixas do que o ponto de fusão térmica (Tm) para a seqüência específica em uma força iônica definida e pH. As condições de severidade média são quando a temperatura está 20° C abaixo da Tm e as condições de severidade alta são quando a temperatura está 10° C abaixo da Tm. Por exemplo, condições severas são aquelas que são pelo menos tão severas quanto, por exemplo, as condições de A a L; e as condições de severidade reduzida são pelo menos tão severas quanto, por exemplo, as condições de M a R. a ligação não específica pode ser controlada usando qualquer uma de várias técnicas conhecidas tais como, por exemplo, bloqueio da membrana com soluções contendo proteína, adições de RNA, DNA e SDS heterólogos ao tampão de hibridização e tratamento com RNase. Os exemplos de condições de hibridização e lavagem são listados na Tabela 2 abaixo. Tabela 2: Exemplos de hibridização e condições de lavagem

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* O "comprimento de híbrido" é o comprimento previsto para o ácido nucléico hibridizador. Quando ácidos nucléicos de seqüência conhecida são hibridizados, o comprimento do híbrido pode ser determinado alinhando- se as seqüências e identificando as regiões conservadas aqui descritas.

SSPE (IxSSPE é 0,15 M de NaCl, 10 mM de NaH2PO4 e 1,25 mM de EDTA, pH 7,4) pode ser substituído no lugar de SSC (lxSSC é 0,15 M de NaCl e 15 mM de citrato de sódio) nos tampões de hibridização e lavagem; as lavagens são realizadas por 15 minutos depois que a hibridização está completa. As hibridizações e lavagens podem adicionalmente incluir 5 χ reagente de Denhardt, 0,5 a 1,0 % de SDS, 100 μg/ml de DNA de esperma de salmão desnaturado, fragmentado, 0,5 % de pirofosfato de sódio e até 50 % de formamida.

Tb-Tr: A temperatura de hibridização para híbridos previstos serem menores do que 50 pares de base no comprimento devem ser 5 a 10° C menores do que a temperatura de fusão Tm dos híbridos; a Tm é determinada de acordo com as equações mencionadas acima.

± A presente invenção também abrange a substituição de qualquer um dos ou mais parceiros híbridos de DNA ou RNA com um PNA ou um ácido nucléico modificado.

Para os propósitos de definir o nível de severidade, referência pode ser feita a Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: a laboratory manual, 3a Edição Cold Spring Harbor Laboratory Press, CSH, Nova Iorque ou a Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989).

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um HDZip hox5 de classe I, a seqüência hibridizadora codifica um polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos. Preferivelmente, a seqüência de hibridização é capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas, com um dos ácidos nucléicos dados na Tabela A ou uma porção destes como aqui definido. O mais preferivelmente a porção é uma porção de um ácido nucléico como representado pela SEQ ID NO: 1.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou homólogo deste, a seqüência hibridizadora é um ácido nucléico/gene capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas, com um ácido nucléico/gene da NRT que codifica um polipeptídeo que compreende um domínio MF Sl e um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio MF S_1 e preferivelmente também uma ou mais das seqüências de assinatura definidas acima. Preferivelmente, a seqüência hibridizadora é uma que é capaz de hibridizar a um ácido nucléico dado na Tabela I do Exemplo 14 ou a uma porção de qualquer um dos ácidos nucléicos dados na Tabela I, uma porção sendo como definida acima. O mais preferivelmente a seqüência hibridizadora é capaz de hibridizar com a SEQ ID NO: 52.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste, a seqüência hibridizadora é uma seqüência de ácido nucléico capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas, com uma seqüência de ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo deste. Preferivelmente, a seqüência hibridizadora é capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida com um ácido nucléico como representado pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129.

Onde o ácido nucléico útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I, a seqüência hibridizadora é um ácido nucléico capaz de hibridizar sob condições de severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas, com um ácido nucléico/gene que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I como mais acima definido, seqüência de hibridização esta que codifica um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido. a seqüência hibridizadora tem pelo menos 1.200 nucleotídeos no comprimento. Preferivelmente, a seqüência hibridizadora é capaz de hibridizar com um ácido nucléico como representado por qualquer uma das SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQID NO: 174 e SEQ ID NO: 176. A invenção portanto fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico capaz de hibridizar sob severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas com um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 do homeodomínio classe I de zíper de leucina (HDZip) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico capaz de hibridizar sob severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas com um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico capaz de hibridizar sob severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas a um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de um ácido nucléico capaz de hibridizar sob severidade reduzida, preferivelmente sob condições severas a um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta.

Os ácidos nucléicos ou variante deste podem ser derivados de qualquer fonte natural ou artificial. O ácido nucléico/gene ou variante deste podem ser isolados de uma fonte microbiana, tal como levedura ou fungos ou de uma folte vegetal, alga ou animal (incluindo o ser humano). Este ácido nucléico pode ser modificado a partir da sua forma nativa na composição e/ou ambiente genômico através da manipulação humana deliberada. O ácido nucléico é preferivelmente de origem vegetal, seja da mesma espécie vegetal (por exemplo àquele em que o mesmo deva ser introduzido) ou seja de uma espécie vegetal diferente. O ácido nucléico pode ser isolado a partir de uma espécie monocotiledônea, preferivelmente da família Poaceae, mais preferivelmente do gênero Oryza, o mais preferivelmente de Oryza sativa. O ácido nucléico pode ser isolado a partir de uma espécie dicotiledônea, preferivelmente da família Brassicaceae, mais preferivelmente de Arabidopsis thaliana.

A expressão de um ácido nucléico pode ser modulada pela introdução de uma modificação genética (preferivelmente no local do gene em questão). O local de um gene como aqui definido é considerado significar uma região genômica, que inclui o gene de interesse e 10 kb a montante ou a jusante da região codificadora.

A modificação genética pode ser introduzida, por exemplo, por qualquer um (ou mais) dos seguintes métodos: ativação de T-DNA, TILLING, mutagênese direcionada ao sítio, evolução dirigida e recombinação homóloga ou pela introdução e expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou pela introdução e expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um NRT ou um homólogo deste; ou pela introdução e expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica um YEP16 ou homólogo deste; ou pela introdução e expressão em uma planta de um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo i ou um homólogo desta. A seguir da introdução da modificação genética, segue uma etapa de selecionar quanto a expressão modulada do ácido nucléico, modulação esta que na expressão dá plantas tendo características de crescimento melhoradas, particularmente rendimento aumentado.

A ativação da rotulação de T-DNA (Hayashi et ai. Science (1992) 1350-1353) envolve a inserção de T-DNA, usualmente contendo um promotor (também pode ser um realçador de tradução ou um intron), na região genômica do gene de interesse ou 10 kb a montante ou a jusante da região codificadora de um gene em uma configuração tal que o promotor direcione a expressão do gene alvejado. Tipicamente, a regulagem da expressão do gene alvejado pelo seu promotor natural é rompido e o gene cai sob o controle do promotor recém introduzido. O promotor é tipicamente embutido em um T-DNA. Este T-DNA é aleatoriamente inserido no genoma vegetal, por exemplo, através da infecção por Agrobacterium e leva à super expressão de genes próximos ao T-DNA inserido. As plantas transgênicas resultantes mostram fenótipos dominantes devido à super expressão de genes próximos ao promotor introduzido. O promotor a ser introduzido pode ser qualquer promotor capaz de conduzir a expressão de um gene no organismo desejado, neste caso uma planta. Por exemplo, os promotores constitutivos, preferidos de tecido, preferidos do tipo de célula e indutíveis são todos adequados para o uso na ativação de T-DNA.

Uma modificação genética também pode ser introduzida no local do gene em questão usando a técnica de TILLING (Lesões Locais Induzidas Alvejadas Nos Genomas). Esta é uma tecnologia de mutagênese útil para gerar e/ou identificar e isolar variantes mutagenizadas. TILLING também permite a seleção de plantas que carregam tais variantes mutantes. Estas variantes mutantes podem mesmo exibir atividade mais alta do que aquela exibida pelo gene na sua forma natural. TILLING combina mutagênese de alta densidade com métodos de triagem de alto rendimento. As etapas tipicamente seguidas em TILLING são: (a) mutagênese EMS (Redei GP e Koncz C (1992) Em Methods in Arabidopsis Research, Koncz C, Chua NH, Schell J, eds. Singapura, World Scientific Publishing Co, pp. 16-82; Feldmann et al., (1994) Em Meyerowitz EM, Somerville CR, eds, Arabidopsis. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp 137-172; Lightner J e Caspar T (1998) Em J Martinez-Zapater, J Salinas, eds, Methods on Molecular Biology, Vol. 82. Humana Press, Totowa, NJ, pp 91-104); (b) preparação de DNA e reunião de indivíduos; (c) amplificação pela PCR de uma região de interesse; (d) desnaturação e recozimento para permitir a formação de heteroduplexes; (e) DHPLC, onde a presença de um heteroduplex em uma reunião é detectada como um pico extra no cromatograma; (f) identificação do indivíduo mutante; e (g) seqüenciamento do produto de PCR mutante. Os métodos para TILLING são bem conhecidos na técnica (McCallum et al., (2000) Nat Biotechnol 18: 455-457; revisado por Stemple (2004) Nat Rev Genet 5(2): 145-50).

A mutagênese direcionada ao sítio pode ser usada para gerar ácidos nucléicos variantes. Diversos métodos são disponíveis para se obter a mutagênese direcionada ao sítio, o mais comum sendo métodos com base na PCR (Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Eds http: //www,4ulr.comyproducts/currentprotocols/index.html).

A evolução direcionada ou embaralhamento de gene também pode ser usado para gerar variantes de ácido nucléico. Estes consistem de iterações de embaralhamento de DNA seguido pela triagem e/ou seleção apropriadas para gerar variantes tendo uma atividade biológica modificada (Castle et al, (2004) Science 304(5674): 1151-4; patentes US 5.811.238 e 6.395.547).

A ativação de T-DNA, TILLING, mutagênese direcionada ao sítio e evolução dirigida são exemplos de tecnologias que possibilitam a geração de novos aieios e variantes.

A recombinação homóloga permite a introdução em um genoma de um ácido nucléico selecionados em uma posição selecionada definida. A recombinação homóloga é uma tecnologia padrão usada rotineiramente em ciências biológicas para organismos inferiores tais como levedura ou o musgo Physcomitrella. Os métodos para realizar a recombinação homóloga em plantas foram descritos não apenas para as plantas modelo (Offringa et al. (1990) EMBO J9(10): 3077-84) mas também para plantas de safra, por exemplo arroz (Terada et al. (2002) Nat Biotech (10): 1030-4; lida e Terada (2004) Curr Opin Biotech 15(2): 132-8). O ácido nucléico a ser alvejado não necessita ser alvejado ao local do gene em questão, mas pode ser introduzido, por exemplo, em regiões de alta expressão. O ácido nucléico a ser alvejado pode ser um alelo melhorado usado para substituir o gene endógeno ou pode ser introduzido além do gene endógeno. Um método preferido para introduzir uma modificação genética é introduzir e expressar em uma planta um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou introduzir e expressar em uma planta um ácido nucléico que codifica um NRT ou um homólogo deste; ou introduzir e expressar em uma planta um ácido nucléico que codifica um YEP16 ou homólogo deste; ou introduzir e expressar em uma planta um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta. O ácido nucléico a ser introduzido em uma planta pode ser um ácido nucléico de tamanho natural ou pode ser uma porção ou uma seqüência hibridizadora como mais acima definidas.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste, o alvejamento a um plastídeo é preferido; os métodos para tal alvejamento de proteínas aos plastídeos são bem conhecidos na técnica, como é o uso de peptídeos de trânsito para tal alvejamento. A Tabela 3 abaixo mostra exemplos de peptídeos de trânsito adequado para alvejar qualquer polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste a um plastídeo, preferivelmente a um cloroplasto. Preferido é o uso do peptídeo de trânsito nativo à seqüência de polipeptídeo de YEP16 da SEQ ID NO: 128, peptídeo de trânsito nativo este que é mostrado na SEQ ID NO: 131. A SEQ ID NO: 130 representa o polipeptídeo de YEP16 junto com o seu peptídeo de trânsito nativo para alvejar ao cloroplasto (a SEQ ID NO: 129 representa a seqüência de ácido nucléico que codifica a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: 130). O mais preferido é o uso do peptídeo de trânsito nativo como mostrado na SEQ ID NO: 131 para alvejar um polipeptídeo de YEP16 como representado pela SEQ ID NO: 128, embora qualquer peptídeo de trânsito possa ser usado com qualquer polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste. Tabela 3: Exemplos de seqüências de peptídeo de trânsito úteis no alvejamento de aminoácidos aos plastídeos

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"Homólogos" de uma proteína abrangem peptídeos, oligopeptídeos, polipeptídeos, proteínas e enzimas tendo substituições, deleções e/ou inserções de aminoácido em relação à proteína não modificada em questão e tendo atividade biológica e funcional similares como a proteína não modificada a partir da qual os mesmos são derivados. Para produzir tais homólogos, os aminoácidos da proteína podem ser substituídos por outros aminoácidos tendo propriedades similares (tais como hidrofobicidade, hidrofilicidade, antigenicidade, propensão para formar ou romper estruturas helicoidais α ou estruturas de folha β similares). As tabelas de substituição conservativas são bem conhecidas na técnica (ver por exemplo Creighton (1984) Proteins. W. H. Freeman and Company e Tabela 4 abaixo). Os homólogos úteis nos métodos de acordo com a invenção são preferivelmente polipeptídeos que têm em ordem crescente de preferência pelo menos 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % ou mais identidade ou similaridade de seqüência (identidade funcional) às seqüências aqui mencionadas como sendo úteis nos métodos da invenção, por exemplo as seqüências dadas na Tabela AeI aqui.

Também abrangidos pelo termo "homólogos" estão duas formas especiais de homologia, que incluem seqüências ortólogas e seqüências parálogas, que abrangem conceitos evolucionários usados para descrever relações hereditárias de genes. O termo "parálogo" diz respeito a duplicações de gene dentro do genoma de uma espécie que leva aos genes parálogos. O termo "ortólogo" diz respeito a genes homólogos em organismos diferentes devido à especiação.

Ortólogos, por exemplo, na espécie vegetal monocotiledônea podem ser facilmente encontrados realizando-se uma chamada pesquisa de blast recíproca. Tomando o exemplo de encontrar um ortólogo ou parálogo de um ácido nucléico hox5 HDZip classe I ou polipeptídeo hox5 HDZip classe I, isto pode ser feito por um primeiro blast envolvendo submeter a blast a seqüência em questão (por exemplo, a SEQ ID NO: 1 ou SEQ ID NO: 2) contra qualquer seqüência de base de dados, tal como a base de dados NCBI publicamente disponível que pode ser encontrada em: http://www.ncbi.nlm.nih.gov. BLASTN ou TBLASTX pode ser usado quando da partida da seqüência de nucleotídeo ou BLASTP ou TBLASTN quando da partida da proteína, com valores padrão. Os resultados de BLAST podem ser filtrados. As seqüências de tamanho natural dos resultados filtrados ou dos resultados não filtrados são depois submetidos ao rretro BLAST (segundo BLAST) contra as seqüências do organismo a partir do qual a seqüência em questão é derivada. Os resultados do primeiro e segundo BLASTs são depois comparados. Quando os resultados do segundo BLAST dão como acertos com a similaridade mais alta de um ácido nucléico hox5 HDZip classe I ou polipeptídeo hox5 HDZip classe I, então um parálogo foi descoberto, se o mesmo origina do mesmo organismo como para a seqüência usada no primeiro BLAST. No caso em que o mesmo origina de um organismo outro que não aquele da seqüência usada no primeiro BLAST, então um ortólogo foi descoberto. No caso de famílias grandes, ClustalW pode ser usado, seguido por uma árvore de junção vizinha, para ajudar a visualizar o agrupamento.

O mesmo procedimento também pode ser usado para encontrar ortólogos e parálogos de ácidos nucléicos que codificam um NRT e polipeptídeos de NRT; e para encontrar ortólogos e parálogos de ácido nucléicos que codificam YEP16 e polipetídeos de YEP16; e para encontrar ortólogos e parálogos de ácidos nucléicos que codificam quinases equivalentes a shaggy do Grupo I e quinases equivalentes ao polipeptídeo de shaggy do Grupo I.

Um homólogo pode estar na forma de uma "variante de substituição" de uma proteína, isto é, onde pelo menos um resíduo em uma seqüência de aminoácido foi removida e um resíduo diferente inserido no seu lugar. As substituições de aminoácido são tipicamente de resíduos únicos, mas podem ser formadas em cacho dependendo das restrições funcionais colocadas no polipeptídeo; as inserções usualmente serão da ordem de cerca de 1 a 10 resíduos de aminoácido. Preferivelmente, as substituições de aminoácido compreendem substituições de aminoácido conservativas. As tabelas de substituição conservativas são facilmente disponíveis na técnica. A tabela abaixo dá exemplos de substituições de aminoácido conservadas. Tabela 4: Exemplos de substituições de aminoácido conservadas

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Um homólogo também pode estar na forma de uma "variante de inserção" de uma proteína, isto é, onde um ou mais resíduos de aminoácido são introduzidos em um sítio pré determinado em uma proteína. As inserções podem compreender fusões de terminal N e/ou terminal C assim como inserções intra-seqüência de aminoácidos únicos ou múltiplos. No geral, as inserções dentro da seqüência de aminoácido serão menores do que as fusões de terminal N ou C, da ordem de cerca de 1 a 10 resíduos. Os exemplos de proteínas ou peptídeos de fusão de terminal N ou C incluem o domínio de ligação ou domínio de ativação de um ativador transcricional como usado no sistema de híbrido duplo de levedura, proteínas de revestimento de fago, rótulo de (histidina)-ó, rótulo de glutationa S-transferase, proteína A, proteína de ligação de maltose, diidrofoliato redutase, epítopo de Rótulo. 100, epítopo c-myc, epítopo FLAG®, IacZ, CMP (peptídeo de ligação de calmodulina), epítopo de HA, epítopo de proteína C e epítopo de VSV.

Homólogos na forma de "variantes de deleção" de uma proteína são caracterizados pela remoção de um ou mais aminoácidos de uma proteína.

As variantes de aminoácido de uma proteína podem ser facilmente fabricadas usando técnicas sintéticas de peptídeo bem conhecidas no ramo, tais como a síntese de peptídeo de fase sólida e outras ou pelas manipulações de DNA recombinantes. Os métodos para a manipulação de seqüências de DNA para produzir as variantes de substituição, inserção ou deleção de uma proteína são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, as técnicas para fabricar as mutações de substituição nos sítios pré determinados no DNA são bem conhecidos por aqueles habilitados na técnica e incluem a mutagênese Ml3, mutagênese in vitro T7-Gen (USB, Cleveland, OH), Mutagênese Direcionada ao Sítio QuickChange (Stratagene, San Diego, CA), mutagênese direcionada ao sítio mediada pela PCR ou outros protocolos de mutagênese direcionada ao sítio.

O polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste; o ácido nucléico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo deste; o ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16; e o ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta podem ser um derivado. "Derivados" incluem peptídeos, oligopeptídeos, polipeptídeos, proteínas e enzimas que podem compreender substituições, deleções ou adições de resíduos de aminoácido que ocorrem naturalmente e não naturalmente comparados com a seqüência de aminoácido de uma forma que ocorre naturalmente da proteína. Os Derivados podem compreender resíduos de aminoácido que ocorrem naturalmente alterados, glicosilados, acilados, prenilados ou que não ocorrem naturalmente comparados com a seqüência de aminoácido de uma forma que ocorre naturalmente do polipeptídeo. Um derivado também pode compreender um ou mais substituintes que não aminoácido comparados com a seqüência de aminoácido da qual o mesmo é derivado, por exemplo uma molécula repórter ou outro ligando, covalentemente ou não covalentemente ligados com a seqüência de aminoácido, tal como uma molécula repórter que é ligada para facilitar a sua detecção e resíduos de aminoácido que não ocorrem naturalmente em relação à seqüência de aminoácido de uma proteína que ocorre naturalmente.

O polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste podem ser codificados por uma variante de junção alternativa; o polipeptídeo da NRT ou homólogo deste podem ser codificados por uma variante de junção alternativa; o polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste pode ser codificado por uma variante de junção alternativa; e a quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo deste pode ser codificado por uma variante de junção alternativa.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste, a variante de junção codifica um polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos. Adicionalmente, o polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste pode compreender um ou ambos dos seguintes: (a) uma cauda Trp; e (b) o motivo de aminoácido de RPFF, onde R é Arg, P é Pro e F é Phe. Dentro deste motivo, são deixadas uma ou mais mudanças conservativas em qualquer posição, e/ou uma ou duas mudanças não conservativas em qualquer posição. O motivo de (b) precede a caixa ácida, quando se examina a proteína do terminal N para o terminal C. Mais preferidas são as variantes de junção de seqüências de ácido nucléico dadas na Tabela A. O mais preferido é uma variante de junção de uma seqüência de ácido nucléico como representada pela SEQ ID NO: 1.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um polipeptídeo da NRT ou homólogo deste ou ácido nucléico que codifica a mesma, a variante de junção codifica um polipeptídeo que compreende o domínio MF S l e um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio MFS_1 e preferivelmente também uma ou mais das seqüências de assinatura conservadas da SEQ ID NO: 57 até a SEQ ID NO: 64 como definido acima. Mais preferidas são variantes de junção de qualquer um dos ácidos nucléicos dados na Tabela Β. A mais preferida é uma variante de junção do ácido nucléico da SEQ ID NO: 52. Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica YEP16, a variante de junção é de uma seqüência de ácido nucléico representada pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo deste, as variantes de junção alternativas são variantes de junção do ácido nucléico representado por qualquer uma das SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174 e SEQ ID NO: 176. Mais preferidas são variantes de junção que codificam um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido.

A presente invenção portanto fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante de junção alternativa de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 do homeodomínio classe I de zíper de leucina (HDZip) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante de junção alternativa de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante de junção alternativa de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante de junção alternativa de um ácido nucléico que codifica uma glicogênio sintase quinase do Grupo I (quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo desta.

O termo "variante de junção alternativa" como aqui usado abrange variantes de uma seqüência de ácido nucléico em que introns e/ou exons selecionados foram excisados, substituídos ou adicionados ou em que introns foram encurtados ou alongados. Tais variantes serão aquelas em que a atividade biológica da proteína é retida, que pode ser obtida retendo-se seletivamente segmentos funcionais da proteína. Tais variantes de junção podem ser encontradas na natureza ou podem ser feitas pelo homem. Os métodos para fabricar tais variantes de junção são bem conhecidos na técnica.

O homólogo também pode ser codificado por uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste; ou codificado por uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica uma proteína transportadora de nitrato (NRT) ou um homólogo deste; ou codificado por uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16; ou codificado por uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou um homólogo desta.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou homólogo deste, a variante alélica codifica um polipeptídeo que compreende do terminal N para o terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptetos. Adicionalmente, o polipeptídeo hox5 HDZip classe I ou um homólogo deste podem compreender um ou ambos dos seguintes: (a) uma cauda Trp; e (b) o motivo de aminoácido de RPFF, onde R é Arg, P é Pro e F é Phe. Dentro deste motivo, são deixadas uma ou mais mudanças conservativas em qualquer posição, e/ou uma ou duas mudanças não conservativas em qualquer posição. O motivo de (b) precede a caixa ácida, quando da examinação da proteína do terminal N para o terminal C. Mais preferidas são as variantes alélicas de seqüências de ácido nucléico dadas na Tabela A. O mais preferido é uma variante alélica de uma seqüência de ácido nucléico como representada pela SEQ ID NO: 1. Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um polipeptídeo da NRT ou homólogo deste ou ácido nucléico que codifica o mesmo, a variante alélica codifica um polipeptídeo que compreende o domínio MF S l e um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio AlF S_1 e preferivelmente também uma ou mais das seqüências conservadas de assinatura da SEQ ID NO: 57 até a SEQ ID NO: 64 como definido acima. Mais preferidas são as variantes alélicas de qualquer um dos ácidos nucléicos dados na Tabela I. O mais preferido é uma variante alélica do ácido nucléico da SEQ ID NO: 52.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um Ácido nucléico que codifica YEP16, a variante alélica é de uma seqüência de ácido nucléico representada pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129.

Onde a seqüência útil nos métodos da invenção é um ácido nucléico que codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo deste, as variantes alélicas são variantes alélicas do ácido nucléico representado por qualquer uma das SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174 e SEQ ID NO: 176. Mais preferidas são variantes alélicas que codificam um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido.

A presente invenção portanto fornece um método para melhorar as características de crescimento vegetal que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 do homeodomínio classe I de zíper de leucina (HDZip) ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo da NRT ou um homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste; ou que compreende modular a expressão em uma planta de uma variante alélica de um ácido nucléico que codifica uma glicogênio sintase quinase do Grupo I (quinase tipo felpuda do Grupo I) ou um homólogo desta.

Variantes alélicas existem na natureza e abrangidas dentro dos métodos da presente invenção está o uso destes alelos naturais. As variantes alélicas abrangem polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs)5 assim como Polimorfismos de Inserção/Deleção Pequenos (INDELs). O tamanho de INDELs é usualmente menor do que 100 pares de base. SNPs e INDELs formam o maior conjunto de variantes de seqüência em que ocorrem naturalmente cepas polimórficas da maioria dos organismos.

De acordo com a presente invenção, a expressão modulada do ácido nucléico ou variante deste é considerada. Métodos para modular a expressão de genes ou produtos de gene são bem documentados na técnica e incluem, por exemplo, a super expressão direcionada pelos promotores apropriados, o uso de realçadores de transcrição ou realçadores de tradução. Ácidos nucléicos isolados que servem como elementos promotores ou realçadores podem ser introduzidos em uma posição apropriada (tipicamente a montante) de uma forma não heteróloga de um polinucleotídeo de modo a super regular a expressão do ácido nucléico ou variante deste. Por exemplo, promotores endógenos podem ser alterados in vivo pela mutação, deleção e/ou substituição (ver, Kmiec, Pat. U.S. N2 5.565.350; Zarling et ai., PCT/US93/03868) ou promotores isolados podem ser introduzidos em uma célula vegetal na orientação e distância apropriadas de um gene da presente invenção de modo a controlar a expressão do gene.

Métodos para reduzir a expressão de genes ou produtos de gene são bem documentados na técnica.

Se a expressão de polipeptídeo é desejada, é no geral desejável incluir uma região de poliadenilação na extremidade 3' de uma região codificadora de polinucleotídeo. A região de poliadenilação pode ser derivada do gene natural, de uma variedade de outros genes vegetais ou de T-DNA. A seqüência de extremidade 3' a ser adicionada pode ser derivada, por exemplo, dos genes da nopalina sintase ou octopina sintase ou alternativamente de um outro gene vegetal ou de qualquer outro gene eucariótico.

Uma seqüência de intron também pode ser adicionada à região não traduzida ou à seqüência codificadora da seqüência codificadora parcial para aumentar a quantidade da mensagem madura que acumula no citosol. A inclusão de um intron passível de união na unidade de transcrição tanto em construções de expressão vegetal e animal foi mostrado aumentar a expressão de gene tanto ao nível do mRNA quanto de proteína até 1000 vezes (Buchman e Berg (1988) Mol. Cell Biol. 8: 4395-4405; Callis et ai. (1987) Genes Dev 1: 1183-1200). Tal realce de intron da expressão de gene é tipicamente o maior quando colocado próximo da extremidade 5' da unidade de transcrição. O uso dos introns do milho Adhl-S intron 1, 2 e 6, o intron Bronze-I é conhecidos na técnica. Ver no geral, The Maize Handbook, 20 Capítulo 116, Freeling e Walbot, Eds., Springer, N.Y. (1994).

A invenção também fornece construções genéticas e vetores para facilitar a introdução e/ou expressão das seqüências de nucleotídeo úteis nos métodos de acordo com a invenção.

Portanto, é fornecida uma construção de gene que compreende:

(i) Um ácido nucléico HDZip hox5 classe I ou variante deste; ou um ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; ou um ácido nucléico que codifica YEP16 ou variante deste; ou um ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste; (ii) Uma ou mais seqüências de controle capazes de conduzir a expressão da seqüência de ácido nucléico de (i); e opcionalmente

(iii) Uma seqüência de terminação de transcrição.

As construções úteis nos métodos de acordo com a presente invenção podem ser construídas usando a tecnologia de DNA recombinante bem conhecida pelas pessoas habilitadas na técnica. As construções de gene podem ser inseridas em vetores, que podem ser comercialmente disponíveis, adequadas para transformar em plantas e adequadas para a expressão do gene de interesse nas células transformadas. A invenção portanto fornece o uso de uma construção de gene como aqui acima definido nos métodos da invenção.

As plantas são transformadas com um vetor que compreende a seqüência de interesse, a seqüência de interesse é operavelmente ligada a uma ou mais seqüências de controle (pelo menos a um promotor). Os termos "elemento regulador", "seqüência de controle" e "promotor" são todos usados intercambiavelmente aqui e devem ser consideradas em um contexto amplo para se referir às seqüências de ácido nucléico reguladoras capazes de efeuar a expressão das seqüências às quais os mesmos são ligados. Abrangidas pelos termos anteriormente mencionados estão as seqüências reguladoras transcricionais derivadas de um gene genômico eucariótico clássico (incluindo a TATA box que é requerida para o início de transcrição preciso, com ou sem uma seqüência de CCAAT box) e reguladores de elemento adicionais (isto é, seqüências ativadoras a montante, realçadores e silenciadores) que alteram a expressão de gene em resposta aos estímulos de desenvolvimento e/ou externos ou em uma maneira específica de tecido. Também incluída dentro do termo está uma seqüência reguladora transcricional de um gene procariótico clássico, caso este em que o mesmo pode incluir uma seqüência de -35 box e/ou seqüências reguladoras transcricionais -10 box. O termo "elemento regulador" também abrange uma molécula de fusão sintética ou derivado que confere, ativa ou realça a expressão de uma molécula de ácido nucléico em uma célula, tecido ou órgão. O termo "operavelmente ligado" como aqui usado refere-se a uma ligação funcional entre a seqüência promotora e o gene de interesse, tal que a seqüência promotora seja capaz de iniciar a transcrição do gene de interesse.

Vantajosamente, qualquer tipo de promotor pode ser usado para conduzir a expressão da seqüência de ácido nucléico. O promotor pode ser um promotor indutível, isto é tendo início de transcrição induzido ou aumentado em resposta a um estímulo de desenvolvimento, químico, ambiental ou físico. Um exemplo de um promotor indutível que é um promotor indutível pelo estresse, isto é um promotor ativado quando uma planta é exposta a várias condições de estresse. Adicional ou alternativamente, o promotor pode ser um promotor preferido por tecido, isto é um que é capaz de preferencialmente iniciar a transcrição em certos tecidos, tais como as folhas, raízes, tecido de semente etc. os promotores capazes de iniciar a transcrição em certos tecidos são aqui aludidos apenas como "específicos de tecido".

Preferivelmente, o ácido nucléico HDZip hox5 classe I ou variante deste; o ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; o ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste são operavelmente ligados a um promotor constitutivo. Um promotor constitutivo é transcricionalmente ativo durante a maioria mas não necessariamente em todas as fases de crescimento e desenvolvimento e é substancialmente ubiqüitariamente expressado. O promotor constitutivo é preferivelmente um promotor GOS2, mais preferivelmente o promotor constitutivo é um promotor GOS2 do arroz, mais preferivelmente o promotor constitutivo é representado por uma seqüência de ácido nucléico substancialmente similar à SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178, o mais preferivelmente o promotor constitutivo é como representado pela SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178. Deve estar claro que a aplicabilidade da presente invenção não é restrita ao ácido nucléico HDZip hox5 classe I ou variante deste; ao ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; ou ao ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste quando direcionado por um promotor GOS2. Os exemplos de outros promotores constitutivos que também podem ser usados para realizar os métodos da invenção são mostrados na Tabela 5 abaixo.

Tabela 5: Exemplos de promotor constitutivos

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Preferivelmente, a seqüência de ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste é operavelmente ligado a um promotor específico de semente. Um promotor específico de semente é um que é transcricionalmente ativo predominantemente em tecido de semente. Um promotor específico de semente também pode ter alguma atividade residual em outras partes. Preferivelmente, o promotor específico de semente é um promotor específico de endosperma e/ou um específico de aleurona significando que o promotor é transcricionalmente ativo predominantemente no tecido do endosperma e/ou nas camadas de aleurona de uma semente, embora possa haver alguma atividade residual ou expressão avariada em outra parte. Preferivelmente, o promotor é um promotor da oleosina, tal como do arroz (SEQ ID NO: 143). Deve estar claro que a aplicabilidade da presente invenção não é restrita a um ácido nucléico que codifica YEP16 representado pela SEQ ID NO: 127 ou SEQ ID NO: 129, nem é a aplicabilidade da invenção restrita à expressão de um ácido nucléico que codifica YEP16 quando direcionado por um promotor da oleosina. Os exemplos de outros promotores específicos de semente que também podem ser usados para conduzir a expressão de um ácido nucléico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou homólogo deste são mostrados na Tabela 6 abaixo.

Tabela 6: Exemplos de promotores específicos de semente

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Para a identificação de promotores funcionalmente

equivalentes, a força do promotor e/ou padrão de expressão de um promotor candidato podem ser analisadas por exemplo ligando-se operavelmente o promotor a um gene repórter e ensaiando-se o nível de expressão e padrão do gene repórter em vários tecidos da planta. Os genes repórteres bem conhecidos adequados incluem por exemplo beta-glicuronidase ou beta galactosidase. A atividade promotora é ensaiada medindo-se a atividade enzimática da beta-glicuronidase ou beta-galactosidase. A força do promotor e/ou padrão de expressão podem ser depois comparados com aqueles de um promotor de referência (tais como aquele usado nos métodos da presente invenção). Alternativamente, a força do promotor pode ser ensaiada quantificando-se os níveis de mRNA ou comparando-se os níveis de mRNA do ácido nucléico usado nos métodos da presente invenção, com os níveis de mRNA de genes de manutenção doméstica tais como o rRNA 18S, usando métodos conhecidos na técnica, tais como Northern blotting com análise densitométrica de autorradiogramas, PCR em tempo real quantitativa ou RT- PCR (Heid et al., 1996 Genome Methods 6: 986-994). No geral por "promotor fraco" é intencionado um promotor que conduza a expressão de uma seqüência codificadora em um nível baixo. Por "nível baixo" é intencionado os níveis de cerca de 1/10.000 transcritos a cerca de 1/100.000 transcritos, a cerca de 1/500.0000 transcritos por célula. Ao contrário, um "promotor forte" conduz a expressão de uma seqüência codificadora em nível alto ou a cerca de 1/10 transcritos a cerca de 1/100 transcritos a cerca de 1/1.000 transcritos por célula.

Opcionalmente, uma ou mais seqüências terminadoras também podem ser usadas na construção introduzida em uma planta. O termo "terminador" abrange uma seqüência de controle que é uma seqüência de DNA no final de uma unidade transcricional que sinaliza o processamento 3' e a poliadenilação de um transcrito primário e a terminação de transcrição. Elementos reguladores adicionais podem incluir realçadores transcricionais assim como traducionais. Aqueles habilitados na técnica estarão cientes de seqüências terminadoras e realçadoras que podem ser adequadas para o uso na realização da invenção. Tais seqüências seriam conhecidas ou podem ser facilmente obtidas por uma pessoa habilitada na técnica.

As construções genéticas da invenção pode incluir ainda uma seqüência de origem de replicação que é requerida para a manutenção e/ou replicação em um tipo de célula específico, um exemplo é quando uma construção genética é requerida ser mantida em uma célula bacteriana como um elemento genético epissômico (por exemplo, molécula plasmídica ou cosmídica). As origens preferidas de replicação incluem, mas não são limitadas à fl-ori e colEl.

A construção genética pode opcionalmente compreender um gene marcador selecionável. Como aqui usado, o termo "gene marcador selecionável" inclui qualquer gene que confere um fenótipo em uma célula em que o mesmo é expressado para facilitar a identificação e/ou seleção de células que são transfectadas ou transformadas com uma construção de ácido nucléico da invenção.

Para a detecção da transferência bem sucedida das seqüências de ácido nucléico como usadas nos métodos da invenção e/ou seleção de plantas transgênicas que compreendem estes ácidos nucléicos, é vantajoso usar genes marcadores (ou genes repórteres). Portanto, a construção genética pode opcionalmente compreender um gene marcador selecionável. Como aqui usado, o termo "marcador selecionável", "gene marcador selecionável" ou "gene repórter" inclui qualquer gene que confere um fenótipo em uma célula em que o mesmo é expressado para facilitar a identificação e/ou seleção de células que são transfectadas ou transformadas com uma construção de ácido nucléico da invenção. Estes genes marcadores possibilitam a identificação de uma transferência bem sucedida das moléculas de ácido nucléico por intermédio de uma série de princípios diferentes, os marcadores adequados podem ser selecionados de marcadores que conferem resistência a antibióticos ou herbicida, que introduzem um novo traço metabólico ou que possibilitam a seleção visual. Os exemplos de marcadores selecionáveis de gene incluem genes que conferem resistência aos antibióticos (tais como nptll que fosforila a neomicina e canamicina ou hpt, que fosforila a higromicina ou genes que conferem resistência, por exemplo, à bleomicina, estreptomicina, tetraciclina, cloranfenicol, ampicilina, gentamicina, geneticina (G418), espectinomicina ou blasticidina), a herbicidas (por exemplo bar que fornece resistência a Basta; aroA ou gox que fornecem resistência contra glifosato ou os genes que conferem resistência, por exemplo, à imidazolinona, fosfinotricina ou sulfoniluréia) ou genes que fornecem um traço metabólico (tais como manA que possibilita que as plantas usem a manose como a única fonte de carbono ou a xilose isomerase para a utilização de xilose ou marcadores antinutritivos tais como a resistência à 2-desoxiglicose). A expressão de genes marcadores visuais resulta na formação de cor (por exemplo β-glicuronidase, GUS ou β- galactosidase com seus substratos coloridos, por exemplo X-Gal), luminescência (tal como o sistema luciferina/luciferase) ou fluorescência (Proteína Fluorescente Verde, GFP e derivados destes). Esta lista representa apenas um número pequeno de marcadores possíveis. O trabalhador habilitado está familiarizado com tais marcadores. Os marcadores diferentes são preferidos, dependendo do organismo e do método de seleção.

E conhecido que na integração estável ou transitória de ácidos nucléicos em células vegetais, apenas uma minoria das células captam DNA estranho e, se desejado, o integra dentro do seu genoma, dependendo do vetor de expressão usado e da técnica de transfecção usada. Para identificar e selecionar estes integrantes, um gene que codifica um marcador selecionável (tal como aqueles descritos acima) é usualmente introduzido nas células hospedeiras junto com o gene de interesse. Estes marcadores por exemplo podem ser usados em mutantes em que estes genes não são funcionais, por exemplo, pela deleção por métodos convencionais. Além disso, as moléculas de ácido nucléico que codificam um marcador selecionável podem ser introduzidas em uma célula hospedeira no mesmo vetor que compreende a seqüência que codifica o polipeptídeos da invenção ou usado nos métodos da invenção ou ainda em um vetor separado. As células que foram estaveimente transfectadas com o ácido nucléico introduzido podem ser identificadas por exemplo pela seleção (por exemplo, as células que integraram o marcador selecionável sobrevivem ao passo que as outras células morrem).

Visto que os genes marcadores, particularmente os genes para a resistência aos antibióticos e herbicidas, não são mais requeridos ou são indesejados na célula hospedeira transgênica uma vez que os ácidos nucléicos foram introduzidos com êxito, o processo de acordo com a invenção para introduzir os ácidos nucléicos vantajosamente utiliza técnicas que possibilitam a remoção ou excisão destes genes marcadores. Um tal método é o que é conhecido como co-transformação. O método de co-transformação utiliza dois vetores simultaneamente para a transformação, um vetor carregando o ácido nucléico de acordo com a invenção e um segundo carregando o(s) gene(s) marcador(es). Uma proporção maior de transformantes recebe ou, no caso de plantas, compreende (até 40 % ou mais dos transformantes), ambos os vetores. No caso de transformação com Agrobactérias, os transformantes usualmente recebem apenas uma parte do vetor, isto é a seqüência flanqueada pelo T-DNA, que usualmente representa o cassete de expressão. Os genes marcadores podem ser subseqüentemente removidos da planta transformada realizando-se cruzamentos. Em um outro método, os genes marcadores integrados em um transposon são usados para a transformação junto com o ácido nucléico desejado (conhecido como a tecnologia Ac/Ds). Os transformantes podem ser cruzados com uma fonte de transposase ou os transformantes são transformados com uma construção de ácido nucléico que confere a expressão de uma transposase, de modo transitório ou estável. Em alguns casos (aprox. 10 %), o transposon pula para fora do genoma da célula hospedeira uma vez que a transformação tenha ocorrido com êxito e é perdido. Em um outro número de casos, o transposon pula para uma localização diferente. Nestes casos o gene marcador deve ser eliminado realizando-se cruzamentos. Em microbiologia, técnicas foram desenvolvidas que tornam possível ou facilitam, a detecção de tais eventos. Um outro método vantajoso conta com o que é conhecido como sistemas de recombinação; cuja vantagem é que a eliminação pelo cruzamento pode ser dispensada. O sistema melhor conhecido deste tipo é aquele que é conhecido como o sistema Cre/lox. Crel é uma recombinase que remove as seqüências localizadas entre as seqüências IoxP. Se o gene marcador é integrado entre as seqüências IoxP, o mesmo é removido uma vez que a transformação tenha ocorrido com êxito, pela expressão da recombinase. Outros sistemas de recombinação são os sistemas HIN/HIX, FLP/FRT e REP/STB (Tribble et al., J. Biol. Chem., 275, 2000: 22255-22267; Velmurugan et al., J. Cell Biol., 149, 2000: 553-566). Uma integração específica de sítio no genoma vegetal das seqüências de ácido nucléico de acordo com a invenção é possível. Naturalmente, estes métodos também podem ser aplicados a microorganismos tais como levedura, fungos ou bactérias.

Em uma forma de realização preferida, é fornecido uma construção de gene que compreende:

(i) Um ácido nucléico de HDZip hox5 classe I ou variante deste; ou um ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; ou um ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste;

(ii) Um promotor constitutivo capaz de conduzir a expressão da seqüência de ácido nucléico de (i); e opcionalmente

(iii) Uma seqüência de terminação de transcrição.

O promotor constitutivo é preferivelmente um promotor GOS2, mais preferivelmente o promotor constitutivo é o promotor GOS2 do arroz, mais preferivelmente o promotor constitutivo é representado por uma seqüência de ácido nucléico substancialmente similar à SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178, o mais preferivelmente o promotor constitutivo é como representado pela SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178. A invenção fornece ainda o uso de urna construção como aqui acima definida nos métodos da invenção.

Em uma outra forma de realização preferida, é fornecido uma construção de gene que compreende:

(i) Um ácido nucléico que codifica YEP16 ou variante deste;

(ii) Um promotor específico de semente capaz de conduzir a expressão da seqüência de ácido nucléico de (i); e opcionalmente

(iii) Uma seqüência de terminação de transcrição.

A presente invenção também abrange plantas obteníveis pelos métodos de acordo com a presente invenção. A presente invenção portanto fornece plantas, parte de plantas (incluindo células vegetais) obteníveis pelos métodos de acordo com a presente invenção, plantas ou partes estas que (incluindo células) compreendem um transgene de ácido nucléico HDZip hox5 classe I ou variante deste; um transgene de ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; um transgene de ácido nucléico que codifica YEP16 ou variante deste; ou um transgene de ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste.

A invenção também fornece um método para a produção de plantas transgênicas tendo características de crescimento melhoradas, particularmente rendimento aumentado, em relação às do tipo selvagem correspondentes ou outras plantas de controle, que compreende a introdução e expressão em uma planta de qualquer um dos ácidos nucléicos aqui descritos como sendo úteis nos métodos da invenção.

Para os propósitos da invenção, "transgênica", "transgene" ou "recombinante" significam com respeito, por exemplo, a uma seqüência de ácido nucléico, um cassete de expressão, construção de gene ou um vetor que compreende a seqüência de ácido nucléico ou um organismo transformado com as seqüências de ácido nucléico, cassetes de expressão ou vetores de acordo com a invenção, todas estas construções realizadas pelos métodos recombinantes em que

a) as seqüências de ácido nucléico que codificam proteínas úteis nos métodos da invenção, ou

b) seqüência(s) de controle genético que é/são operavelmente ligada(s) com a seqüência de ácido nucléico de acordo com a invenção, por exemplo um promotor, ou

c) a) e b)

não são localizadas no seu ambiente genético natural ou foram modificadas pelos métodos recombinantes, sendo possível para a modificação tomar a forma, por exemplo, de uma substituição, adição, deleção, inversão ou inserção de um ou mais resíduos de nucleotídeo. O ambiente genético natural é entendido como significando o local genômico ou cromossômico natural na planta original ou a presença em uma biblioteca genômica. No caso de uma biblioteca genômica, o ambiente genético natural da seqüência de ácido nucléico é preferivelmente retido, pelo menos em parte. O ambiente flanqueia a seqüência de ácido nucléico pelo menos em um lado e tem um comprimento de seqüência de pelo menos 50 pares de base, preferivelmente pelo menos 500 pares de base, de modo especialmente preferível pelo menos 1000 pares de base, o mais preferivelmente pelo menos 5000 pares de base. Um cassete de expressão que ocorre naturalmente - por exemplo a combinação que ocorre naturalmente do promotor natural das seqüências de ácido nucléico com a seqüência de ácido nucléico correspondente que codifica um polipeptídeo útil nos métodos da presente invenção, como definido acima - torna-se um cassete de expressão transgênico quando este cassete de expressão é modificado pelos métodos não naturais, sintéticos ("artificiais") tais como, por exemplo, tratamento mutagênico. Os métodos adequados são descritos, por exemplo, na US 5.565.350 ou WO 00/15815.

Mais especificamente, a presente invenção fornece um método para a produção de plantas transgênicas tendo características de crescimento melhoradas (particularmente rendimento aumentado) método este que compreende:

(i) introduzir e expressar em uma planta, parte de planta ou célula vegetal um ácido nucléico HDZip hox5 classe I ou variante deste; um ácido nucléico que codifica NRT ou variante deste; um ácido nucléico que codifica YEP16 ou variante deste; um ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste; e

(ii) cultivar a célula vegetal sob condições que promovam o crescimento e desenvolvimento vegetais.

O ácido nucléico pode ser introduzido diretamente em uma célula vegetal ou na própria planta (incluindo a introdução em um tecido, órgão ou qualquer outra parte de uma planta). De acordo com uma característica preferida da presente invenção, o ácido nucléico é preferivelmente introduzido em uma planta pela transformação. O termo "transformação" como aqui aludido abrange a transferência de um polinucleotídeo exógeno em uma célula hospedeira, independente do método usado para a transferência. O tecido vegetal capaz da propagação clonal subseqüente, seja pela organogênese ou embriogênese, pode ser transformado com uma construção genética da presente invenção e uma planta inteira regenerada a partir desta. O tecido particular escolhido variará dependendo dos sistemas de propagação clonal disponíveis para e melhor adaptados para, a espécie particular que é transformada. Os alvos de tecido exemplares incluem discos de folha, pólen, embriões, cotilédones, hipocótilos, megagametófitos, tecido de calo, tecido meristemático existente (por exemplo, meristema apical, brotos axilares e meristemas de raiz) e tecido de meristema induzido (por exemplo, meristema de cotilédone e meristema de hipocótilo). O polinucleotídeo pode ser transitória ou estavelmente introduzido em uma célula hospedeira e pode ser mantida não integrada, por exemplo, como um plasmídeo. Alternativamente, o mesmo pode ser integrado no genoma hospedeiro. A célula vegetai transformada resultante pode ser depois usada para regenerar uma planta transformada em uma maneira conhecida pelas pessoas habilitadas na técnica.

A transformação de espécie vegetal é agora uma técnica de razoavelmente de rotina. Vantajosamente, qualquer um de diversos métodos de transformação pode ser usado para introduzir o gene de interesse em uma célula progenitora adequada. Os métodos de transformação incluem o uso de lipossomas, eletroporação, produtos químicos que aumentam a captação de DNA livre, injeção do DNA diretamente na planta, bombardeamento de pistola de partícula, transformação usando vírus ou pólen e microprojeção. Os métodos podem ser selecionados do método do cálcio/polietileno glicol para protoplastos (Krens, F. A. et al. (1982) Nature 296, 72-74; Negrutiu I et al. (1987) Plant Mol Biol 8: 363-373); eletroporação de protoplastos (Shillito R. D. et ai. (1985) Bio/Technol 3, 1099-1102); microinjeção em material vegetal (Crossway A et al. (1986) Mol. Gen Genet 202: 179-185); bombardeamento de partícula revestida com DNA ou RNA (Klein TM et al. (1987) Nature 327: 70) infecção (não integrativa) com vírus e outros. As plantas de arroz transgênicas são preferivelmente produzidas por intermédio da transformação mediada por Agrobacterium usando qualquer um dos métodos bem conhecidos para a transformação de arroz, tal como descrito em qualquer um dos seguintes: Pedido de patente européia publicado EP 1198985 Al, Aldemita e Hodges (Planta 199: 612-617, 1996); Chan et al. (Plant Mol Biol 22 (3): 491-506, 1993), Hiei et al. (Plant J 6 (2): 271-282, 1994), divulgações estas que são incorporadas aqui por referência como se completamente apresentadas. No caso da transformação de milho, o método preferido é como descrito em Ishida et al. (Nat. Biotechnol 14(6): 745-50, 1996) ou Frame et al. (Plant Physiol 129(1): 13-22, 2002), divulgações estas que são aqui incorporadas por referência como se completamente apresentadas.

No geral depois da transformação, as células vegetais ou agrupamentos de célula são selecionados quanto a presença de um ou mais marcadores que são codificados pelos genes expressáveis em planta co- transferidos com o gene de interesse, a seguir do que o material transformado é regenerado em uma planta inteira.

A seguir da transferência e regeneração de DNA, as plantas putativamente transformadas podem ser avaliadas, por exemplo, usando a análise de Southern, quanto a presença do gene de interesse, número de cópia e/ou organização genômica. Alternativa ou adicionalmente, os níveis de expressão do DNA recém introduzido podem ser monitorados usando a análise de Northern e/ou Western ou a PCR quantitativa, todas as técnicas sendo bem conhecidas pelas pessoas tendo habilidade comum na técnica.

As plantas transformadas geradas podem ser propagadas por uma variedade de meios, tais como pela propagação clonal ou técnicas de cruzamento clássicas. Por exemplo, uma planta transformada de geração primária (ou Tl) pode ser auto-polinizada para dar transformantes homozigotos de segunda geração (ou T2) e as plantas T2 propagadas ainda através das técnicas de cruzamento clássicas.

Os organismos transformados gerados podem tomar uma variedade de formas. Por exemplo, estes podem ser quimeras de células transformadas e células não transformadas; transformantes clonais (por exemplo, todas as células transformadas contendo o cassete de expressão); enxertos de tecidos transformados e não transformados (por exemplo, em plantas, um rizoma transformado enxertado em um enxerto não transformado).

A presente invenção claramente estende-se a qualquer célula vegetal ou planta produzida por qualquer um dos métodos aqui descritos e a todas as partes de plantas e seus propágulos. A presente invenção estende-se ainda a abranger a progênie de uma célula primária transformada ou transfectada, tecido, órgão ou planta inteira que foi produzida por qualquer um dos métodos anteriormente mencionados, a única exigência sendo que a progênie exiba a(s) mesma(s) característica(s) genotípica(s) e/ou fenotípica(s) como aquelas produzidas pelo precursor nos métodos de acordo com a invenção.

A invenção também inclui células hospedeiras que compreendem um ácido nucléico HDZip hox5 classe I isolado ou variante deste; células hospedeiras que compreendem um ácido nucléico que codifica NRT isolado ou variante deste; células hospedeiras que compreendem um ácido nucléico que codifica YEP16 isolado ou variante deste; células hospedeiras que compreendem um ácido nucléico que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante deste. As células hospedeiras preferidas são as células vegetais.

A invenção também estende-se às partes colhíveis de uma planta tais como, mas não limitadas às sementes, folhas, frutos, flores, hastes, rizomas, tubérculos e bulbos. A invenção além disso diz respeito a produtos derivados de uma parte colhível de uma tal planta, tais como pelotas e pós secos, óleo, gordura e ácidos graxos, amido ou proteínas.

A presente invenção também abrange o uso de ácidos nucléicos HDZip hox5 classe I e variantes destes e o uso de polipeptídeos hox5 HDZip classe I e homólogos destes; uso de ácidos nucléicos que codificam NRT e variantes destes e uso de polipeptídeos da NRT e homólogos destes; uso de ácidos nucléicos que codificam YEP16 e variantes destes e uso de polipetídeos de YEP16 e homólogos destes; uso de ácidos nucléicos que codificam a quinase tipo felpuda do Grupo I e variantes destes e uso de polipeptídeos da quinase tipo felpuda do Grupo I e homólogos destes. Tais usos dizem respeito à melhora de qualquer uma das características de crescimento vegetal como aqui acima definidas.

Os ácidos nucléicos HDZip hox5 classe I ou variantes destes ou polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes; ácidos nucléicos que codificam NRT e variantes destes ou polipeptídeos da NRT e homólogos destes; ácidos nucléicos que codificam YEP16 e variantes destes ou polipeptídeos de YEP16 e homólogos destes; ácidos nucléicos que codificam a quinase tipo felpuda do Grupo I e variantes destes ou polipeptídeos da quinase tipo felpuda do Grupo I e homólogos destes podem encontrar uso em programas de cruzamento em que um marcador de DNA é identificado que pode ser geneticamente ligado a um dos ácidos nucléicos ou variantes anteriormente mencionados. Os ácidos nucléicos ou variantes ou polipeptídeos ou homólogos destes podem ser usados para definir um marcador molecular. Este marcador de DNA ou proteína pode ser depois usado em programas de cruzamento para selecionar plantas tendo características de crescimento melhoradas (tais como rendimento aumentado). Os ácidos nucléicos ou variantes são como aqui acima definidos.

As variantes alélicas de um ácido nucléico/gene hox5 HDZip classe I; um ácido nucléico/gene que codificam NRT; um ácido nucléico/gene que codificam YEP16; um ácido nucléico/gene que codificam a quinase tipo felpuda do Grupo I também podem encontrar uso em programas de cruzamento auxiliados por marcador. Tais programas de cruzamento algumas vezes requerem a introdução de variação alélica pelo tratamento mutagênico das plantas, usando por exemplo a mutagênese de EMS; alternativamente, o programa pode começar com uma coleção de variantes alélicas da chamada de origem "natural" não intencionalmente causada. A identificação de variantes alélicas depois ocorre, por exemplo, pela PCR. Isto é seguido por uma etapa para a seleção de variantes alélicas superiores da seqüência em questão e que dá características de crescimento melhoradas, tais como rendimento aumentado. A seleção é tipicamente realizada monitorando-se o desempenho de crescimento de plantas contendo variantes alélicas diferentes da seqüência em questão, por exemplo, variantes alélicas diferentes de qualquer um dos ácidos nucléicos/genes aqui descritos como sendo úteis nos métodos da invenção. O desempenho de crescimento pode ser monitorado em uma estufa ou no campo. Outras etapas opcionais incluem cruzar plantas em que a variante alélica superior foi identificada com uma outra planta. Isto poderia ser usado, por exemplo, para fabricar uma combinação de características fenotípicas interessantes.

O ácido nucléico e variantes anteriormente mencionados também podem ser usados como sondas para mapear genética e fisicamente os genes que eles são uma parte e como marcadores para traços ligados a estes genes. Tal informação pode ser útil no cruzamento vegetal de modo a desenvolver linhagens com fenótipos desejados. Tal uso dos ácidos nucléicos ou variantes requer apenas uma seqüência de ácido nucléico de pelo menos 15 nucleotídeos no comprimento. Os ácidos nucléicos ou variantes podem ser usados como marcadores de polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição (RFLP). Southern blots (Sambrook J, Fritsch EF e Maniatis T (1989) Molecular Cloning, A Laboratory Manual) de DNA genômico vegetal digerido com restrição podem ser sondados com os ácidos nucléicos ou variantes. Os padrões de formação de faixa resultantes podem ser depois submetidos às análises genéticas usando programas de computador tais como MapMaker (Lander et al. (1987) Genomics 1: 174-181) de modo a construir um mapa genético. Além disso, os ácidos nucléicos podem ser usados para sondar Southern blots contendo DNAs genômicos tratados com endonuclease de restrição de um conjunto de indivíduos que representam precursor e progênie de um cruzamento genético definido. A segregação dos polimorfismos de DNA é mencionada e usada para calcular a posição do ácido nucléico ou variante no mapa genético anteriormente obtido usando esta população (Botstein et ai. (1980) Am. J. Hum. Genet. 32: 314-331).

A produção e uso de sondas derivadas de gene vegetal para o uso no mapeamento genético estão descritos em Bematzky e Tanksley (1986) Plant Mol. Biol. Repórter 4: 37-41. Numerosas publicações descrevem o mapeamento genético de clones de cDNA específicos usando a metodologia esboçada acima ou variações desta. Por exemplo, populações de intercruzamento F2, populações de retrocruzamento, populações aleatoriamente acasaladas, linhagens quase isogênicas e outros conjuntos de indivíduos podem ser usados para o mapeamento. Tais metodologias são bem conhecidas por aqueles habilitados na técnica.

As sondas de ácido nucléico também podem ser usadas para o mapeamento físico (isto é, a colocação de seqüências nos mapas físicos; ver Hoheisel et ai. Em: Non-mammalian Genomic Analysis: A Practical Guide, Academic press 1996, pp. 319-346 e referências citadas nesta).

Em uma outra forma de realização, as sondas de ácido nucléico podem ser usadas no mapeamento pela hibridização in situ de fluorescência direta (FISH) (Trask (1991) Trends Genet. 7: 149-154). Embora métodos correntes de mapeamento de FISH favoreçam o uso de clones grandes (diversos kb a diversas centenas de kb; ver Laan et al. (1995) Genome Res. 5: 13-20), melhoras na sensibilidade pode permitir o desempenho do mapeamento por FISH usando sondas curtas.

Uma variedade de métodos com base na amplificação de ácido nucléico para o mapeamento genético e físico pode ser realizada usando os ácidos nucléicos. Os exemplos incluem a amplificação específica de alelo (Kazazian (1989) J. Lab. Clin. Med 11: 95-96), polimorfismo de fragmentos amplificados pela PCR (CAPS; Sheffield et ai. (1993) Genomics 16: 325- 332), ligação específica de alelo (Landegren et al. (1988) Science 241: 1077- 1080), reações de extensão de nucleotídeo (Sokolov (1990) Nucleic Acid Res. 18: 3671), Mapeamento Híbrido por Radiação (Walter et al. (1997) Nat. Genet. 7: 22-28) e Mapeamento Favorável (Dear e Cook (1989) Nucleic Acid Res. 17: 6795-6807). Para estes métodos, a seqüência de um ácido nucléico é usado para planejar e produzir pares de iniciador para o uso na reação de amplificação ou em reações de extensão de iniciador. O planejamento de tais iniciadores é bem conhecido por aqueles habilitados na técnica. Em métodos que utilizam o mapeamento genético com base na PCR, pode ser necessário identificar diferenças de seqüência de DNA entre os precursores do cruzamento de mapeamento na região que corresponde à seqüência de ácido nucléico iminente. Isto, entretanto, no geral não é necessário para os métodos de mapeamento.

Os métodos de acordo com a presente invenção resultam em plantas tendo características de crescimento melhoradas, como descrito mais acima. Estas características de crescimento melhoradas também podem ser combinadas com outros traços economicamente vantajosos, tais como outros traços que realçam o rendimento, a tolerância a outros estresses abióticos e bióticos, traços que modificam várias características arquitetônicas e/ou bioquímicas e/ou fisiológicas.

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A presente invenção será agora descrita com referência às seguintes figuras em que:

A Fig. 1 mostra um alinhamento múltiplo de homeodomínios de HDZip de classe I de fontes vegetais diferentes, usando programa de alinhamento múltiplo VNTI AlignX5 com base em um algoritmo ClustalW modificado (InforMax, Bethesda, MD, http: //www.informaxinc.com), com ajustes de referência quanto a penalidade de abertura de intervalo de 10 e uma extensão de intervalo de 0,05). Os aminoácidos de homeodomínio invariantes Li6, W48, F49, N51 e R53 são verticalmente colocados em caixas. Os aminoácidos de HDZip Classe I preferidos A46 e W56 são igualmente dispostos verticalmente em caixas. As três hélices necessárias para a ligação de DNA são marcadas como caixas pretas acima do alinhamento. Os seis heptetos são separados por uma linha vertical. As sete posições dentro de cada hepteto são nomeadas a, b, c, d, e, f e g. O Leu ocupa a posição d dentro de cada hepteto e é disposto verticalmente em caixa.

A Fig. 2 mostra um alinhamento múltiplo de diversos polipeptídeos hox5 HDZip classe I vegetais, usando o programa de alinhamento múltiplo VNTI AlignX, com base em um algoritmo ClustalW modificado (InforMax, Bethesda, MD, http: //www.informaxinc.com), com ajustes de referência quanto a penalidade de abertura de intervalo de 10 e uma extensão de intervalo de 0,05). Os três domínios caracterizados principais, do terminal N para o terminal C, são pesadamente dispostos em caixa e identificados como a caixa ácida, o homeodomínio da classe I e os seis heptetos-zíper de leucina. Adicionalmente, a cauda Trp e o motivo de aminoácido de RPFF são levemente dispostos em caixa.

A Fig. 3 mostra um vetor binário para a expressão em Oryza sativa de um HDZip hox5 classe I de Oryza sativa sob o controle de um promotor GOS2.

A Fig. 4 detalha exemplos de seqüências de (HDZip) hox5 de homeodomínio de leucina ziper da classe I úteis na realização dos métodos de acordo com a presente invenção. Diversas seqüências resultam de montagens de EST públicas (ver a Tabela A), com menos qualidade de seqüenciamento. Como uma conseqüência, umas poucas substituições de ácido nucléico podem ser esperadas. Os códons de início (ATG) e parada delimitam as seqüências de ácido nucléico.

A Fig. 5 mostra a estrutura de domínio típica de uma proteína de NRT útil nos métodos da presente invenção, aqui exemplificada com a SEQ ID NO: 53. A proteína da SEQ ID NO: 53 compreende um domínio MFS_1 partindo em S69 e terminando com F432, indicada em negrito no terminal C deste domínio MFS_1, um domínio de transmembrana putativo (T441 a P463, sublinhado) está presente.

A Fig. 6 (a) mostra uma árvore filogenética, em que a SEQ ID NO: 126 representa a seqüência de proteína NRTl do arroz, que compreende um domínio PTR2 e (b) um alinhamento múltiplo das seqüências listadas na Tabela I do Exemplo 14. Os asteriscos no alinhamento múltiplo indicam os aminoácidos que são idênticos entre as seqüências alinhadas, os pontos e vírgula indicam substituições conservativas e os pontos representam substituições menos conservadas.

A Fig. 7 mostra o vetor binário para a expressão aumentada em Oryza sativa de um ácido nucléico que codifica a proteína NRT do arroz sob o controle de um promotor GOS2.

A Fig. 8 detalha exemplos de seqüências de NRT úteis (com a exceção da SEQ ID NO: 125 e SEQ ID NO: 126) na realização dos métodos de acordo com a presente invenção. As seqüências SEQ ID NO: 123 e 124 provavelmente não são seqüências de tamanho natural.

A Fig. 9 mostra um vetor binário para a expressão em Oryza sativa de um ácido nucléico que codifica YEP16 de Arabidopsis thaliana sob o controle de um promotor da oleosina. A Fig. 10 mostra seqüências de YEP16 úteis nos métodos da invenção.

A Fig. 11 tirada de Planta (2003) 218: 1-14 (Wang et al.), mostra a resposta vegetal ao estresse abiótico. Os estresses primários, tais como seca, salinidade, frio, calor e poluição química são freqüentemente interconectados e causam dano celular e estresses secundários, tais como estresse osmótico e oxidativo. Os sinais de estresse inicial (por exemplo, efeitos osmóticos e iônicos ou temperatura, mudanças na fluidez da membrana) deflagram o processo de sinalização a jusante e os controles de transcrição que ativam o mecanismo responsivo ao estresse para restabelecer a homeostase e proteger e reparar proteínas e membranas danificadas. A resposta inadequada a uma ou diversas etapas na sinalização e ativação de gene pode por fim resultar em mudanças irreversíveis de homeostase celular e na destruição de proteínas e membranas funcionais e estruturais, levando à morte celular.

A Fig. 12 tirada de TRENDS em Plant Science VoL 7, N2 10, Out. 2002 (Claudia Jonak e Heribert Hirt) mostra possíveis caminhos da quinase tipo felpuda em plantas. AlGSKl é um regulador positivo da resposta ao sal alto. WIG (GSK induzido por ferimento) está implicado na sinalização de ferimento. AtSKll e AtSK 12 estão envolvidos na padronização de flor correta. As análises genéticas e bioquímicas indicam que a sinalização de brassinoesteróide (BR) mediada pelo BIN2 (insensível ao brassinoesteróide 1), que controla o acúmulo nuclear de BESl (supressor de BRll-EMS 1) e BRZl (resistente a brassinazol 1).

A Fig. 13 tirada de TRENDS em Plant Science VoL 7, N- 10, Out. 2002 (Claudia Jonak e Heribert Hirt) mostra: (a) Análise filogenética das dez quinases de proteína equivalentes à glicogênio sintase quinase 3/SHAGGY (GSKs) de Arabidopsis. As GSKs de Arabidopsis podem ser classificadas em quatro subgrupos, (b) Árvore filogenética de cDNAs de GSK de tamanho natural de espécie vegetal diferente obtida de várias pesquisas de BLAST. Brassica napus, BSKO (Y12674); Medicago sativa, MSKl (X68411), MSK2 (X68410), MSK3 (X68409), MSK4 (AF432225), WIG (AJ295939); Nieotiana tabaeum, NSK6 (Y08607), NSK59 (AJ002315), NSK91 (AJ224163), NSKlll (AJ002314), NTK-I (X77763); Oryza sativa, OSKy (AB59612), OSKri (Y13437); Petunia hybrida, PSK4 (X83619), PSK6 (AJ224164), PSK7 (AJ224165), SPK6 (X83620). Os alinhamentos foram realizados com Clustal X pelo método da união de vizinho usando MPKl de Arabidopsis (Q39021) como um grupo de fora; as árvores foram planejadas pelo programa TreeView.

A Fig. 14 mostra um alinhamento múltiplo CLUSTAL de quinases equivalentes a shaggy do Grupo I vegetal. Os motivos I e II são colocados em caixas.

A Fig. 15 mostra um vetor binário para a expressão em Oryza sativa de uma quinase tipo felpuda do Grupo I de Oryza sativa sob o controle de um promotor GOS2

A Fig. 16 detalha exemplos de seqüências de quinase tipo felpuda do Grupo I úteis na realização dos métodos de acordo com a presente invenção.

Exemplos

A presente invenção será agora descrita com referência aos seguintes exemplos, que são apenas por via de ilustração e não são intencionados a definir completamente ou para de outro modo limitar o escopo da invenção.

A menos que de outro modo estabelecido, as técnicas de DNA recombinantes foram realizadas de acordo com protocolos padrão descritos em (Sambrook (2001) Molecular Cloning: a laboratory manual, 3a Edição Cold Spring Harbor Laboratory Press, CSH, Nova Iorque) ou nos Volumes 1 e 2 de Ausubel et al. (1994), Current Protocols in Molecular Biology, Current Protocols. O materiais e métodos padrão para o trabalho molecular vegetal são descritos em Plant Biology Molecular Labfase (1993) por R.D.D. Croy, publicado por BIOS Scientific Publications Ltd (UK) e Blackwell Scientific Publieations (UK).

EXEMPLOS Polipeptídeos hox5 HDZip classe I e seqüências codificadoras

Exemplo 1: Identificação de seqüências relacionadas com a SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NO: 2

As seqüências (cDNA de tamanho natural, ESTs ou genômicas) foram identificadas entre aquelas mantidas na base de dados Entrez Nucleotides no National Center for Biotechnology Information (NCBI) usando as ferramentas de pesquisa de seqüência de base de dados, tais como a Ferramenta de Alinhamento Local Básico (BLAST) (Altschul et ai. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410; e Altschul et ai. (1997) Nucleic Acid Res. 25: 3389- 3402). O programa foi usado para descobrir regiões de similaridade local entre as seqüências comparando-se as seqüências de ácido nuciéico ou polipeptídeo com as bases de dados de seqüência e calculando-se a significância de emparelhamentos. Por exemplo, o polipeptídeo codificado pelo ácido nuciéico da SEQ ID NO: 1 foi usado para o algoritmo TBLASTN, com ajustes de referência e o filtro para ignorar seqüências de complexidade baixa realçadas. O resultado da análise foi visualizado pela comparação aos pares e classificadas de acordo com a contagem de probabilidade (valor E), onde a contagem reflete a probabilidade de que um alinhamento particular ocorra por acaso (quanto mais baixo o valor E, mais significante o acerto). Além dos valores E, comparações também foram marcadas pela identidade percentual. A identidade percentual refere-se ao número de nucleotídeos (ou aminoácidos) idênticos entre as duas seqüências de ácido nuciéico (ou polipeptídeo) comparadas em um comprimento particular. Em alguns casos, os parâmetros de padrão podem ser ajustados para modificar a severidade da pesquisa. Por exemplo o valor E pode ser aumentado para mostrar emparelhamentos menos severos. Deste modo, emparelhamentos curtos quase exatos podem ser identificados.

A Tabela A abaixo fornece uma lista de seqüências de ácido nucléico relacionadas com a seqüência de ácido nucléico da SEQ ID NO: 1.

Tabela A: Exemplos de seqüências relacionadas com a seqüência de ácido nucléico da SEQ ID NO: 1

<table>table see original document page 86</column></row><table> <table>table see original document page 87</column></row><table>

* Contíguo compilado de diversos acessos EST

(principalmente aqueles mostrados); a qualidade de seqüenciamento EST sendo usualmente mais baixa, umas poucas substituições de ácido nucléico podem ser esperados.

** Seqüências de Daucus carota e Glycine max foram corrigidas comparadas com o seu número de Acesso.

Exemplo 2: Alinhamento de seqüências de polipeptídeo hox5

HDZip classe I

AlignX do Vetor NTI (Invitrogen) com base no algoritmo Clustal popular de alinhamento progressivo (Thompson et al. (1997) Nucleic Acid Res 25: 4876-4882; Chenna et al. (2003). Nucleic Acid Res 31: 3497- 3500) foi usado. Uma árvore filogenética pode ser construída usando um algoritmo de agrupamento de junção de vizinho. Os valores básicos são para a penalidade de abertura de intervalo de 10, para a penalidade de extensão de intervalo de 0,1 e a matriz ponderada selecionada é Blosum 62 (se polipeptídeos são alinhados).

O resultado do alinhamento de seqüência múltiplo é mostrado na Figura 2. Os três domínios caracterizados principais, do terminal N para o terminal C, são pesadamente dispostos em caixa e identificados como a caixa ácida, o homeodomínio de classe I e os seis hepteto- zíper de leucina. O "Domínio Conservado" compreende estes três domínios. Adicionalmente, a cauda Trp e o motivo de aminoácido de RPFF são levemente dispostos em caixa.

Exemplo 3: Cálculo da identidade percentual global entre as seqüências de polipeptídeos hox5 HDZip classe I

As porcentagens globais de similaridade e identidade entre as seqüências de polipeptídeo hox5 HDZip classe I de tamanho natural foram determinadas usando o software Matrix Global Alignment Tool (MatGAT) (BMC Bioinformatics. 2003 4: 29. MatGAT: a application that generates similarity/identity matrices using protein or DNA sequences. Campanella JJ5 Bitincka L, Smalley J; software hospedado por Ledion Bitincka). O software MatGAT gera matrizes de similaridade/identidade para seqüências de DNA ou proteína sem necessitar pré-alinhamento dos dados. O programa realiza uma série de alinhamentos aos pares usando o algoritmo de alinhamento global de Myers e Miller (com uma penalidade de abertura de intervalo de 12 e uma penalidade de extensão de intervalo de 2), calcula similaridade e identidade usando por exemplo Blosum 62 (para polipeptídeos) e depois coloca os resultados em uma matriz de distância. A similaridade de seqüência é mostrada na metade inferior da linha divisória e a identidade de seqüência é mostrada na metade superior da linha divisora diagonal.

Os parâmetros usados na comparação foram:

Matriz de contagem: Blosum62

Primeiro Intervalo: 12

Intervalo de extensão: 2

Os resultados da análise pelo software são mostrados na Tabela B1 para a similaridade e identidade globais nas seqüências de polipeptídeo de tamanho natural (excluindo as seqüências de polipeptídeo parciais). A identidade percentual é dada acima da diagonal e a porcentagem de similaridade é dada abaixo da diagonal.

A identidade percentual entre as seqüências de polipeptídeo mostradas pode ser tão baixo quanto 29 % de identidade de aminoácido comparada com a SEQ ID NO: 2.

Tabela BI: Resultados de MatGAT para a similaridade e identidade globais nas seqüências de polipeptídeo de tamanho natural.

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O "Domínio Conservado" das seqüências de polipeptídeo hox5 HDZip classe I compreende do terminal N para o terminal C, uma caixa ácida, um homeodomínio classe I e os seis heptetos-zíper de leucina (ver a Figura 2), como aqui acima definidos. Quando a análise da identidade percentual é realizada nos domínios conservados ao invés de nas seqüências de polipeptídeo de tamanho natural, um aumento na identidade percentual é observado, como mostrado na Tabela B2. Os valores mais baixos estão agora acima de 50 % de identidade de aminoácido comparados com a SEQ ID NO: 2.

Tabela B2: Resultados de MatGAT para a similaridade e identidade globais nas seqüências de polipeptídeo do "Domínio Conservado".

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Exemplo 4: Identificação de domínios compreendidos nas seqüências de polipeptídeo hox5 HDZip classe I

A base de dados Integrated Resource of Protein Families, Domains and Sites (InterPro) é uma interface integrada para as bases de dados de assinatura habitualmente usadas para as procuras com base em texto e seqüência. A base de dados InterPro combina estas bases de dados, que usam metodologias diferentes e graus variáveis de informação biológica a cerca de proteínas bem caracterizadas para derivar assinaturas de proteína. As bases de dados colaboradoras incluem SWISS-PROT, PROSITE, TrEMBL, PRINTS, ProDom e Pfam, Smart e TIGRFAMs. A Interpro é hospedada no European Bioinformatics Institute no Reino Unido.

Os resultados da varredura InterPro da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 2 são apresentados na Tabela C.

Tabela C: Resultados da varredura InterPro da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 2

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A composição de aminoácido primária (em %) para determinar se um domínio de polipeptídeo é rico em aminoácidos específicos (por exemplo em uma caixa ácida) pode ser calculada usando programas de software do servidor ExPASy5 em particular a ferramenta ProtParam (Gasteiger E et al (2003) ExPASy: the proteomics server for in-depth protein knowledge and analysis. Nucleic Acid Res 31: 3784 3788). A composição da seqüência de polipeptídeo de interesse pode ser depois comparada com a composição de aminoácido média (em %) no banco de dados de Swiss-Prot Protein Sequence.

Na Tabela abaixo (Tabela D), são comparadas a % de Asp (D), % de Glu (E) e seu conteúdo combinado na caixa ácida da SEQ ID NO: 2 com a média no banco de dados de Swiss-Prot Protein Sequence.

Tabela D

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Uma caixa ácida pode ser parte de um domínio de ativação de transcrição. O domínio de ativação da transcrição de eucariótico foi classificado de acordo com o seu conteúdo de aminoácido e as categorias principais incluem domínio de ativação ácido, rico em glutamina e rico em prolina (Rutherford et al. (2005) Plant J. 43(5): 769-88 e referências neste).

O Gene Ontology (GO) Consortium é uma colaboração internacional entre cientistas em várias bases de dados biológicas, com um Editorial Office com base no European Bioinformatics Institute. O objetivo do GO é fornecer vocabulários controlados para a descrição da função molecular, processo biológico e componente celular de produtos de gene. Quando da realização de uma varredura InterPro como descrito acima, a base de dados GO também é pesquisada. As seqüências do polipeptídeo hox5 HDZip classe I têm como função molecular o fator de transcrição e a atividade de ligação de DNA específica de seqüência e localizada no núcleo da célula vegetal (ver a Tabela abaixo (Tabela E)).

Tabela E

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Exemplo 5: Prognóstico de topologia de seqüências de polipeptídeo hox5 HDZip classe I

O prognóstico de zíper de leucina e a identificação de hepteto foi realizada usando software especializado tal como 2ZIP, que combina um algoritmo de prognóstico de espiral espiralada padrão com uma pesquisa aproximada quanto a repetição de leucina característica (Bornberg-Bauer et ai. (1998) Nucleic Acid Res 26(11): 2740-2746; hospedado no Max Planck Institut, GoIm na Alemanha). Um zíper de leucina potencial, uma repetição de leucinas ou uma espiral espiralada pode ser identificada usando este software.

As seqüências do polipeptídeo hox5 HDZip classe I compreendem um prognóstico de zíper de leucina, com pelo menos 5, preferivelmente 6 heptetos. Quando o polipeptídeo da SEQ ID NO: 2 é submetido a este algoritmo, um zíper de leucina potencial está entre as posições 143 e 178, como mostrado no produto abaixo (os números refletem a posição de aminoácido, C a região de espiral espiralada e L a leucina dentro do hepteto):

1---------11--------21-—-----31------—41----------51---—---

MDPGRVVFDSGVARRACPGGAQMLLFGGGGSANSGGFFRGVPAAVLGMDESRSSSSAAGA

61——-—71-----------81----—----91------—101——-----111—-------

GAKRPFFTTHEELLEEEYYDEQAPEKKRRLTAEQVQMLERSFEEENKLEPERKTELARRL

121------—131--------141 —--->151—---ígi—-------171---------

GMAP RQVAVWFQNRRARWKTKQLEHDFDRLKAAYDALAADH HALLSDI1TD RLRAQVISLXE

cccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccccc

Xj XJ Jj XJ LJ JL*

LZL2LZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZLZ

181--------191---------201--------211-------221---------231-------

KLQDKETSPSSATITTAAQEVDQPDEHTEAASTTGFATVDGALAAPPPGHQQPPHKDDLV

cccccccc

241-------251-------261-------271-------281-------291-------

ssggtnddgdggaawvfdvtegandrlscesayfadaaeayerdcaghyalsseeedgg

301-------311-------321--------331-------341------

AV S D EGC S FDLP DAAAAAAAMF GAAG WttHDAADDEEAQL GSWTAWFWS

Exemplo 6: Ensaio para seqüências de polipeptídeo hox5

HDZip classe I Os polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos destes têm atividade de ligação de DNA, preferivelmente a semi-sítios de 5 pares de base que se sobrepõem em uma posição central, CAA(A/T)ATTG, como detectado em ensaios de híbrido único de levedura (Meijer et ai. (2000) Mol Gen Genet 263: 12-21). Em ensaios transitórios em suspensões de célula de arroz, o co-bombardeamento de um polipeptídeo hox5 HDZip classe I com o gene repórter GUS segundo notícias resultou em um número aumentado de pontos tingidos, que foram também mais intensos na cor (Meijer et al, supra). Este ensaio é útil para demonstrar a função ativadora de polipeptídeos hox5 HDZip classe I ou homólogos.

Exemplo 7: Clonagem de seqüência de ácido nucléico HDZip hox5 classe I de Oryza sativa

A seqüência de ácido nucléico HDZip hox5 classe I de Oryza sativa foi amplificada pela PCR usando como padrão uma biblioteca de cDNA de muda de Oryza sativa (Invitrogen, Paisley, UK). Depois da transcrição reversa de RNA extraído das mudas, os cDNAs foram clonados em pCMV Sport 6.0. O tamanho do inserto médio do banco foi de 1,6 kb e o número original de clones foi da ordem de 1,67 χ 107 cfu. O título original foi determinado ser 3,34 χ IO6 cfu/ml depois da primeira amplificação de 6 χ IO10 cfü/ml. Depois da extração de plasmídeo, 200 ng de padrão foram usados em uma mistura de PCR de 50 μΐ. Os iniciadores prm06000 (SEQ ID NO: 34; sentido, códon de partida em negrito, sítio AttBl em itálicos: 5 GGGGACAAGTTTGTA CAAAAAAGCAGGCTTAAACAATGGATCCCGGCCG 3') e prm06001 (SEQ ID NO: 35; reverso, complementar, sítio AttB2 em itálicos: 5' GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTGATCAGC TCCAGAACCAGG 3'), que incluem os sítios AttB para a recombinação Gateway, foram usados para a amplificação pela PCR. A PCR foi realizada usando Hifi Taq DNA polimerase em condições padrão. Um fragmento de PCR de 1116 pares de base (incluindo os sítios attB; do início até a parada 1050 pares de base) foi amplificado e purificado também usando métodos padrão. A primeira etapa do procedimento Gateway, a reação BP5 foi depois realizada, durante a qual o fragmento de PCR recombina in vivo com o plasmídeo pDONR201 para produzir, de acordo com a terminologia Gateway, um "clone de entrada". O plasmídeo pDC)NR201 foi adquirido da Invitrogen, como parte da tecnologia Gateway®.

Exemplo 8: Construção de Vetor

O clone de entrada que compreende as seqüências de ácido nucléico foi subseqüentemente usado em uma reação de LR com um vetor de "destinação" usado para a transformação de Oryza sativa. Este vetor conteve como elementos funcionais dentro das bordas de T-DNA: um marcador vegetal selecionável; um cassete de expressão de marcador triável; e um cassete Gateway intencionado para a recombinação LR in vivo com a seqüência de interesse já clonada no clone de entrada. Um promotor GOS2 do arroz (SEQ ID NO: 33 OU SEQ ID NO: 178) para a expressão constitutiva foi localizado a montante deste cassete Gateway.

Depois da etapa de recombinação LR, o vetor de expressão resultante (Figura 3) foi transformada na cepa de Agrobacterium LBA4044 de acordo com métodos bem conhecidos na técnica.

Exemplo 9: Transformação de Planta

Transformação de Arroz

A Agrobacterium contendo o vetor de expressão foi usada para transformar plantas de Oryza sativa. As sementes secas maduras do cultivar japonica de arroz Nipponbare foram descascadas. A esterilização foi realizada pela incubação por um minuto em 70 % de etanol, seguido por 30 minutos em 0,2 % de HgCl2, seguido por uma lavagem de 6 vezes 15 minutos com água destilada estéril. As sementes estéreis foram depois germinadas em um meio contendo 2,4-D (meio de indução de calo). Depois da incubação no escuro por quatro semanas, os calos embriogênicos, derivados de scutellum foram excisados e propagados no mesmo meio. Depois de duas semanas, os calos foram multiplicados ou propagados pela subcultura no mesmo meio por mais 2 semanas. Os pedaços de calo embriogênico foram sub cultivados em meio fresco 3 dias antes do co-cultivo (para reforçar a atividade de divisão celular).

A cepa de Agrobacterium LBA4404 contendo o vetor de expressão foi usado para o co-cultivo. A Agrobaeterium foi inoculada em meio AB com os antibióticos apropriados e cultivada por 3 dias a 28° C. As bactérias foram depois coletadas e colocadas em suspensão em meio de co- cultivo líquido a uma densidade (ODóOO) de cerca de 1. A suspensão foi depois transferida a uma placa de Petri e os calos imersos na suspensão por 15 minutos. Os tecidos de calo foram depois manchados secos em um papel de filtro e transferidos ao meio de co-cultivo solidificado e incubados por 3 dias no escuro a 25° C. os calos co-cultivados foram cultivados em meio contendo 2,4-D por 4 semanas no escuro a 28° C na presença de um agente de seleção. Durante este período, ilhas de calo resistentes que se desenvolvem rapidamente desenvolveram. Depois da transferência deste material a um meio de regeneração e incubação na luz, o potencial embriogênico foi liberado e os brotos se desenvolveram nas quatro a cinco semanas seguintes. Os brotos foram excisados dos calos e incubados por 2 a 3 semanas em um meio contendo auxina dos quais os mesmos foram transferidos para o solo. Os brotos endurecidos foram cultivados sob alta umidade e dias curtos em uma estufa.

Aproximadamente 35 transformantes do arroz TO independentes foram gerados para uma construção. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa. Depois de uma análise de PCR quantitativa para verificar o número de cópia do inserto de T-DNA, apenas plantas transgênicas de cópia única que exibem tolerância ao agente de seleção foram mantidos para a colheita da semente T1. As sementes foram depois colhidas de três a cinco meses depois do transplante. O método produziu transformantes de local único a uma taxa de mais de 50 % (Aldemita e Hodges 1996, Chan et al. 1993, Hiei et al. 1994).

Exemplo 10: Procedimento de avaliação fenotípica

10.1 Configuração da Avaliação

Aproximadamente 35 transformantes do arroz TO independentes foram gerados. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa para crescimento e colheita de semente TI. Sete eventos, dos quais a progênie T1 segregou 3:1 quanto a presença/ausência do transgene, foram retidos. Para cada um destes eventos, aproximadamente 10 mudas T1 contendo o transgene (hetero- e homo-zigotos) e aproximadamente 10 mudas T1 que carecem do transgene (nulizigotos) foram selecionadas monitorando-se a expressão de marcador visual. As plantas transgênicas e os nulizigotos correspondentes foram cultivados lado a lado em posições aleatórias. As condições de estufa foram de dias curtos (12 horas de luz), 28° C na luz e 22° C no escuro e uma umidade relativa de 70 %.

Todos os eventos T1 foram ainda avaliados na geração T2 a seguir do mesmo procedimento de avaliação como para a geração T1. A partir do estágio de semeadura até o estágio de maturidade as plantas foram passadas diversas vezes através de um gabinete de formação de imagem digital. Em cada ponto de tempo, imagens digitais (2048 χ 1536 pixéis, 16 milhões de cores) foram tiradas de cada planta de pelo menos 6 ângulos diferentes.

Triagem do estresse salino

As plantas de 4 eventos (sementes T2) foram cultivadas em um substrato fabricado de fibras de coco e argex (razão 3 para 1). Uma solução de nutriente normal foi usada durante as primeiras duas semanas depois do transplante das mudas na estufa. Depois das duas primeiras semanas, 25 mM de sal (NaCl) foram adicionados à solução nutriente, até que as plantas fossem colhidas.

Triagem seca

As plantas de cinco eventos (sementes T2) foram cultivadas em solo de envasamento sob condições normais até que se aproximem do estágio de formação de cabeça. As mesmas foram depois transferidas a uma seção "seca" onde a irrigação foi impedida. As sondas de umidade foram inseridas em vasos escolhidos aleatoriamente para monitorar o teor de água do solo (SWC). Quando SWC foi abaixo de certos limiares, as plantas foram automaticamente regadas continuamente até que um nível normal fosse novamente atingido. As plantas foram depois re-transferidas mais uma vez para as condições normais. O resto do cultivo (maturação da planta, colheita da semente) foi a mesma como para as plantas não cultivadas sob condições de estresse abiótico. Uma rodada de confirmação foi realizada consistindo da repetição da triagem com sementes T2 não colhidas das plantas da primeira triagem seca, mas de plantas cultivadas sob condições normais.

Triagem da disponibilidade de nutriente (nitrogênio) reduzida

As plantas de arroz são cultivadas em solo de envazamento sob condições normais exceto quanto a solução nutriente. Os vasos são regados do transplante até a maturação com uma solução nutriente específica contendo teor de nitrogênio (N) reduzido, usualmente entre 7 a 8 vezes menos. O resto do cultivo (maturação da planta, colheita da semente) é o mesmo como para as plantas não cultivadas sob estresse abiótico. Os parâmetros relacionados com semente são depois medidos.

10.2 Análise Estatística: teste F

Um ANOVA de dois fatores (análise de variantes) foi usado como um modelo estatístico para a avaliação global de características fenotípicas vegetais. Um teste F foi realizado em todos os parâmetros medidos de todas as plantas de todos os eventos transformados com o gene da presente invenção. O teste F foi realizado para checar quanto a um efeito do gene em relação a todos os eventos de transformação e para verificar quanto a um efeito global do gene, também conhecido como um efeito de gene global.

O limiar para significância quanto a um efeito de gene global verdadeiro foi ajustada a um nível de probabilidade de 5 % para o teste F. Um valor de teste F significante indica um efeito de gene, significando que não é apenas a mera presença ou posição do gene que está causando as diferenças no fenótipo.

10.3 Parâmetros medidos

10.3.1 Medição de parâmetro relacionado com a biomassa

Do estágio de semeadura até o estágio de maturidade as plantas foram passadas diversas vezes através de um gabinete de formação de imagem digital. Em cada ponto de tempo imagens digital (2048 χ 1536 pixéis, 16 milhões de cores) foram tiradas de cada planta de pelo menos 6 ângulos diferentes.

A área da planta acima do solo (ou biomassa frondosa) foi determinada contando-se o número total de pixéis nas imagens digitais da parte de plantas acima do solo discriminada do fundo, este valor foi calculado em média para os quadros tirados no mesmo ponto de tempo dos ângulos diferentes e foi convertido a um valor de superfície física expressada em mm quadrado pela calibração. Os experimentos mostraram que a área de planta acima do solo medido deste modo correlaciona-se com a biomassa da parte de plantas acima do solo. A área acima do solo é o ponto de tempo no qual a planta atingiu a sua biomassa frondosa máxima. O vigor inicial é a área de planta (muda) acima do solo três semanas após a germinação.

Um parâmetro adicional foi usado para medir a tolerância ao estresse abiótico quando necessário: o índice de verdor depois da seca, que dá uma indicação da senescência da planta. É a proporção (expressada como %) de pixéis amarelos na primeira formação de imagem depois da seca. Para medir parâmetros relacionados com a raiz, plantas foram cultivadas em vasos especialmente planejados com fundos transparentes para permitir a visualização das raízes. Uma câmara digital registrou as imagens através do fundo do vaso durante o crescimento vegetal. As características de raiz tais como área projetada total (que pode estar correlacionada com o volume de raiz total), diâmetro médio e comprimento de raízes acima de um certo limiar de espessura (comprimento de raízes espessas ou comprimento de raiz espessa) foram deduzidas do quadro usando de software apropriados. Aumento na biomassa de raiz é expressada como um aumento na biomassa de raiz total (medido como biomassa máxima de raízes observada durante o tempo de vida de uma planta); ou como um aumento no índice de raiz/broto (medido como a razão entre a massa de raiz e a massa de broto no período de crescimento ativo de raiz e broto).

10.3.2 Medições de parâmetros relacionados com semente

Os panículos primários maduros foram colhidos, contados, ensacados, rotulados com código de barra e depois secado por três dias em uma estufa a 37° C. Os panículos foram depois debulhados e todas as sementes foram coletadas e contadas. As cascas cheias foram separadas das vazias usando um dispositivo de sopro de ar. As cascas vazias foram descartadas e a fração remanescente foi contada mais uma vez. As cascas cheias foram pesadas em uma balança analítica. O número de sementes cheias foi determinado contando-se o número de cascas cheias que permaneceram depois da etapa de separação. O rendimento de semente total foi medido pesando-se todas as cascas cheias colhidas de uma planta. O número de semente total por planta foi medido contando-se o número de cascas colhidas de uma planta. O peso de mil grãos (TKW) é extrapolado do número de sementes cheias contadas e seu peso total. O índice de colheita (HI) na presente invenção é definido como a razão entre o rendimento de semente total e a área acima do solo (mm2), multiplicado por um fator de 10"6. O número de flores total por panículo como definido na presente invenção é a razão entre o número de sementes total e o número de panículos primários maduros. A taxa de enchimento de semente como definido na presente invenção é a proporção (expressada como uma %) do número de sementes cheias em relação ao número de sementes total (ou flósculos).

Exemplo 11: Resultados de plantas de arroz transgênicas que expressam um ácido nucléico hox5 HDZip classe I sob condições de crescimento normal

Os resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam o ácido nucléico HDZip hox5 classe I sob condições de crescimento normais são apresentados na Tabela F. A diferença de porcentagem entre as transgênicas e as nulizigotas correspondentes é mostrada, com um valor P do teste F abaixo de 0,05.

Tabela F: Resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam um ácido nucléico hox5 HDZip classe I sob condições de crescimento normais.

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Exemplo 12: Resultados de plantas de arroz transgênicas que expressam a seqüência de ácido nucléico útil na realização dos métodos da invenção, sob condições de crescimento de estresse salino

Os resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam a seqüência de ácido nucléico que codifica um polipeptídeo hox5 HDZip classe I sob condições de crescimento do estresse salino são apresentados na Tabela G. A diferença de porcentagem entre as transgênicas e as nulizigotas correspondentes é mostrado, com um valor P do teste F abaixo de 0,05.

Tabela G: Resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam o ácido nucléico HDZip hox5 classe I sob condições de crescimento do estresse salino.

<table>table see original document page 102</column></row><table>

Exemplo 13: Resultados de plantas de arroz transgênicas que expressam o ácido nucléico HDZip hox5 classe I sob condições de crescimento do estresse da seca

Os resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam a seqüência de ácido nucléico útil na realização dos métodos da invenção sob condições de crescimento do estresse da seca são apresentados na Tabela Η. A diferença de porcentagem entre as transgênicas e as nulizigotas correspondentes é mostrado, com um valor P do teste F abaixo de 0,05.

Tabela H: Resultados da avaliação de plantas de arroz transgênicas que expressam a seqüência de ácido nucléico útil na realização dos métodos da invenção, sob condições de crescimento do estresse da seca.

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EXEMPLOS de polipeptídeos da NRT e ácido nucléico codificadores Exemplo 14: Identificação de seqüências relacionadas com a SEQ ID NO: 52 e SEQ ID NO: 53

As seqüências (cDNA de tamanho natural, ESTs ou genômicas) relacionadas com a SEQ ID NO: 52 e/ou seqüências de proteína relacionadas com a SEQ ID NO: 53 foram identificadas entre aquelas mantidas na base de dados da Entrez Nucleotides no National Center for Biotechnology Information (NCBI) usando as ferramentas de pesquisa de seqüência da base de dados, tais como o Basic Local Alignment Tool (BLAST) (Altschul et ai (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410; e Altschul et al (1997) Nucleic Acid Res. 25: 3389-3402). O programa é usado para descobrir regiões de similaridade local entre seqüências comparando-se as seqüências de ácido nucléico ou polipeptídeo com as seqüências de bases de dados e calculando-se a significância estatística dos emparelhamentos. O polipeptídeo codificado pela SEQ ID NO: 52 foi usado para o algoritmo TBLASTN, com ajustes de referência e o filtro para ignorar seqüências de complexidade baixa realçadas. O rendimento da análise foi visualizada pela comparação aos pares e classificada de acordo com a contagem de probabilidade (valor E), onde a contagem reflete a probabilidade de que um alinhamento particular ocorra ao acaso (quanto mais baixo o valor E, mais significante o acerto). Além dos valores E, as comparações também foram contadas pela identidade percentual. A identidade percentual refere-se ao número de nucleotídeos (ou aminoácidos) idênticos entre as duas seqüências de ácido nucléico (ou polipeptídeo) comparadas em um comprimento particular. Em alguns casos, os parâmetros padrão podem ser ajustados para modificar a severidade da procura.

Além das seqüências de ácido nucléico publicamente disponíveis nas bases de dados da NCBI, as seqüências patenteadas também são procuradas seguindo o mesmo procedimento como aqui descrito acima.

A Tabela I fornece uma lista de seqüências de ácido nucléico e proteína relacionadas com a seqüência de ácido nucléico como representada pela SEQ ID NO: Iea seqüência de proteína representada pela SEQ ID NO: 2.

Tabela I: Seqüência de ácidos nucléicos relacionados com a seqüência de ácido nucléico (SEQ ID NO: 1) útil nos métodos da presente invenção e os polipeptídeos deduzidos correspondentes.

<table>table see original document page 104</column></row><table> <table>table see original document page 105</column></row><table>

Exemplo 15: Alinhamento de seqüências de polipeptídeo relevantes

AlignX do Vetor NTI (Invitrogen) está fundamentado no algoritmo Clustal popular de alinhamento progressivo (Thompson et ai. (1997) Nucleic Acid Res 25: 4876-4882; Chenna et ai. (2003). Nucleic Acid Res 31: 3497-3500). Uma árvore filogenétiea pode ser construída usando um algoritmo de agrupamento de junção de vizinho. Os valores básicos são para a penalidade de abertura de intervalo de 10, para a penalidade de extensão de intervalo de 0,1 e a matriz ponderada selecionada é Blosum 62 (se polipeptídeos são alinhados).

O resultado do alinhamento de seqüência múltiplo usando polipeptídeos relevantes na identificação daqueles úteis na realização dos métodos da invenção é mostrado na Figura 6 do presente pedido. O alinhamento múltiplo mostra a alta conservação de seqüência entre as proteínas NRT das várias espécies. As proteínas que compreendem um domínio PTR2 (exemplificados pela SEQ ID NO: 126) claramente não caem dentro do grupo de proteínas NRT como aqui definido.

Exemplo 16: Cálculo da identidade percentual global entre as seqüências de polipeptídeo da NRT

As porcentagem globais de similaridade e identidade entre seqüências de polipeptídeo de tamanho natural úteis na realização dos métodos da invenção foram determinados usando o software MatGAT (Matrix Global Alignment Tool) (BMC Bioinformatics. 2003 4: 29. MatGAT: a application that generates similarity/identity matrices using protein or DNA sequences. Campanella JJ, Bitincka L, Smalley J; software hospedado pela Ledion Bitincka). O software MatGAT gera matrizes de similaridade/identidade para as seqüências de DNA ou proteína sem necessitar de pré-alinhamento dos dados. O programa realiza uma série de alinhamentos aos pares usando o algoritmo de alinhamento global de Myers e Miller (com uma penalidade de abertura de intervalo de 12 e uma penalidade de extensão de intervalo de 2), calcula a similaridade e identidade usando por exemplo Blosum 62 (para polipeptídeos) e depois coloca os resultados em uma matriz de distância. A similaridade de seqüência é mostrada na metade inferior da linha divisória e a identidade de seqüência é mostrada na metade superior da linha divisória diagonal.

Os parâmetros usados na comparação foram:

Matriz de contagem: Blosum62

Primeiro Intervalo: 12

Intervalo de Extensão: 2

Os resultados da análise pelo software são mostrados na Tabela I para a similaridade e identidade globais em relação às seqüências de polipeptídeo de tamanho natural (excluindo as seqüências de polipeptídeo parciais). A identidade percentual é dada acima da diagonal e a similaridade percentual é dada abaixo da diagonal.

A identidade percentual entre as seqüências de polipeptídeo úteis na realização dos métodos da invenção está usualmente acima de 60 % da identidade de aminoácido comparada com a SEQ ID NO: 53 (embora exceções possam ocorrer); ao passo que as proteínas que compreendem um domínio PTR2 (tal como o transportador de nitrato do arroz representado pela SEQ ID NO: 126, linha 31 na tabela abaixo) mostra apenas identidade de seqüência muito limitada com as proteínas NRT (17 % ou mais baixa). Tabela J

<table>table see original document page 108</column></row><table> Exemplo 17: Identificação de domínios compreendidos nas seqüências de polipeptídeo úteis na realização dos métodos da invenção

A base de dados Integrated Resource of Protein Families, Domains and Sites (InterPro) é uma interface integrada para as bases de dados de assinatura habitualmente usadas para as procuras com base em texto e seqüência. A base de dados InterPro combina estas bases de dados, que usam metodologias diferentes e graus variáveis de informação biológica a cerca de proteínas bem caracterizadas para derivar assinaturas de proteína. As bases de dados colaboradoras incluem SWISS-PROT, PROSITE, TrEMBL5 PRINTS, ProDom e Pfam, Smart e TIGRFAMs. A Interpro é hospedada no European Bioinformatics Institute no Reino Unido.

Os resultados da varredura InterPro da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 53 são apresentados na Tabela K.

Tabela K: Resultados da varredura InterPro da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 53

<table>table see original document page 109</column></row><table>

Exemplo 18: Prognóstico de topologia dos polipeptídeos da NRT (localização subcelular, transmembrana...)

TargetP 1.1 prognostica a localização subcelular de proteínas eucarióticas. A designação de localização está fundamentada na presença prognosticada de qualquer uma das pré-seqüências de terminal N: peptídeo de trânsito de cloroplasto (cTP), peptídeo de alvejamento mitocondrial (mTP) ou peptídeo de sinal do caminho secretor (SP). As contagens sobre as quais o prognóstico final está fundamentado não são verdadeiramente probabilidades e elas necessariamente não contribuem com nada. Entretanto, a localização com a contagem mais alta é o mais provável de acordo com TargetP e as relações entre as contagens (a classe de confiabilidade) pode ser uma indicação de quão certo o prognóstico é. A classe de confiabilidade (RC) varia de 1 a 5, onde 1 indica o prognóstico mais forte. O TargetP é mantido no servidor do Center for Biological Sequence Analysis, Technical University of Denmark.

Para as seqüências prognosticadas conter uma pré seqüência de terminal N um sítio de clivagem potencial também pode ser prognosticado.

Vários parâmetros foram selecionados, tais como grupo de organismo (não vegetal ou vegetal), conjuntos de corte (nenhum, conjunto pré definido de cortes ou conjunto especificado pelo usuário de cortes) e o cálculo de prognósticos de sítios de clivagem (sim ou não).

Os resultados da análise de TargetP 1.1 da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 53 são apresentados na Tabela L. O grupo de organismo "vegetal" foi selecionado, nenhum corte definido e o comprimento prognosticado do peptídeo de trânsito requerido. Nenhuma localização subcelular pôde ser prognosticada.

Tabela L: Análise TargetP 1.1 da seqüência de polipeptídeo como representado pela SEQ ID NO: 53

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Muitos outros algoritmos podem ser usados para realizar tais análises, incluindo:

• ChloroP 1.1 hospedado no servidor da Technical University of Denmark;

• Protein Prowler Subcellular Localisation Predictor versão 1.2 hospedado no servidor do Institute for Molecular Bioscience, University of Queensland, Brisbane, Austrália;

• PENCE Proteome Analyst PA-GOSUB 2.5 hospedado no servidor da University of Alberta, Edmonton, Alberta, Canadá;

Usando o programa TMHMM (Center for Biological Sequence Analisis, Technieal University of Denmark) o número de hélices de transmembrana foi prognosticado ser 11, ver a Tabela M abaixo.

Tabela M:

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O número esperado de aminoácidos nas hélices de transmembrana foi prognosticado ser pelo menos 242 (se mais do que 18, a proteína é muito provavelmente uma proteína de transmembrana). Além disso, a presença de um sinal de secreção não é muito provável, visto que não existe nenhuma hélice de transmembrana prognosticada dentro dos primeiros 60 aminoácidos, nem uma seqüência de sinal de terminal N (Exp número, primeiros 60 AAs: 0,00085).

Exemplo 19: EnsaioparaNRT

Para determinar a atividade de transportador de NRT, o ensaio de captação de nitrato como descrito por Tong et al. (Plant J. 41, 442-450, 2005). Em resumo, o mRNA é preparado a partir de construções em que a ORF que codifica a proteína NRT de interesse é precedida pela 5'-UTR do gene da β-globina de Xenopus e seguido pela 3'-UTR do mesmo gene. Este mRNA é injetado no estágio V de Xenopus e oócitos VI a partir do que a proteína NRT de interesse é expressada. Os oócitos são incubados em uma solução com 15NO3" durante 3 a 12 horas a 18° C. Em seguida, os oócitos são lavados e secados a 60° C. A captação de nitrato enriquecido com 15N é medida medindo-se a razão 15N/14N com um espectrômetro de massa. Outros ensaios adequados para medir a captação de NO3 são conhecidos pelas pessoas habilitadas na técnica, ver por exemplo Filleur et al (15N3s" uptake in roots, FEBS Letters 489, 220-224, 2001) ou Zhou et al (measurement of anion-elicited currents with the two-electrode voltage-clamp method, J. Biol. Chem. 275, 39894-39899, 2000). Se requerido, um gene nar2 pode ser co- expressado para aumentar o transporte de nitrato.

Alternativamente, a atividade de uma proteína NRT ou homólogo desta pode ser ensaiada expressando-se a proteína NRT ou homólogo desta sob o controle de um promotor GOS2 no cultivar Nipponbare de Oryza sativa, que resulta em plantas com biomassa acima do solo aumentada e/ou rendimento de semente aumentada comparadas com as plantas do tipo selvagem correspondentes. Este aumento no rendimento de semente pode ser medido de diversos modos, por exemplo como um aumento do peso de semente total, número de sementes cheias ou número de sementes total, como um aumento do índice de colheita ou como um aumento de flores por panículo.

Exemplo 20: Clonagem de seqüência de ácido nucléico como representada pela SEQ ID NO: 52

O gene NRT de Oryza sativa foi amplificado pela PCR usando como padrão uma biblioteca de cDNA de muda de Oryza sativa (Invitrogen, Paisley, UK). Depois da transcrição reversa de RNA extraído das mudas, os cDNAs foram clonados em pCMV Sport 6.0. O tamanho do inserto médio do banco foi 1,5 kb e o número original de clones foi da ordem de 1,59 χ 10 cfii.

O título original foi determinado ser 9,6 χ IO5 cfu/ml depois da primeira amplificação de 6 χ IO11 cfu/ml. Depois da extração de plasmídeo, 200 ng de padrão foram usados em uma mistura de PCR de 50 μΐ. Os iniciadores prm07061 (SEQ ID NO: 54; sentido, códon de partida em negrito, sítio AttBl em itálico: 5' -ggggacaagtttgtacaaaaaagcaggettaaacaatggactcgtcgacggtg-3') e prm07062 (SEQ ID NO: 55 reversa, complementar, códon de parada em negrito, sítio AttB2 em itálico: S^ggggaccactttgtacaagaaagetgggt ctcggtcgcagaattgtttac-3'), que incluem os sítios AttB para a recombinação de Gateway, foram usados para a amplificação pela PCR. A PCR foi realizada usando Hifi Taq DNA polimerase em condições padrões. Um fragmento de PCR de 1683 pares de base (incluindo os sítios attB) foi amplificado e purificado também usando métodos padrão. A primeira etapa do procedimento Gateway, a reação BP, foi depois realizada, durante o que o fragmento de PCR recombina in vivo com o plasmídeo pDONR201 para produzir, de acordo com a terminologia Gateway, um "clone de entrada". O plasmídeo pDONR201 foi adquirido da Invitrogen, como parte da tecnologia Gateway®.

Exemplo 21: Construção de vetor de expressão usando a seqüência de ácido nucléico como representada pela SEQ ID NO: 52

O clone de entrada foi subseqüentemente usado em uma reação LR com um vetor de destinação usado para a transformação de Oryza sativa. Este vetor contém como elementos funcionais dentro das bordas de T- DNA: um marcador vegetal selecionável; um cassete de expressão de marcador triável; e um cassete Gateway intencionado para a recombinação LR in vivo com a seqüência de interesse já clonada no clone de entrada. Um promotor GOS2 do arroz (nucleotídeos de 1 a 2188 da SEQ ID NO: 56, a combinação de promotor-gene) para a expressão constitutiva foi localizado a montante deste cassete Gateway.

Depois da etapa de recombinação LR, o vetor de expressão resultante para NRT (Figura 7) foi transformado na cepa LBA4044 de Agrobacterium e subseqüente em plantas de Oryza sativa.

Exemplo 22: Transformação Vegetal

Transformação de Arroz

A Agrobacterium contendo o vetor de expressão foi usada para transformar plantas de Oryza sativa. As sementes secas maduras do arroz japônica cultivar Nipponbare foram descascadas. A esterilização foi realizada incubando-se por um minuto em 70 % de etanol, seguido por 30 minutos em 0,2 % de HgCl2, seguido por uma lavagem de 6 vezes 15 minutos com água destilada estéril. As sementes estéreis foram depois germinadas em um meio contendo 2,4-D (meio de indução de calo). Depois da incubação no escuro por quatro semanas, os calos embriogênicos, derivados de scutellum foram excisados e propagados no mesmo meio. Depois de duas semanas, os calos foram multiplicados ou propagados pela subcultura no mesmo meio por mais 2 semanas. Os pedaços de calo embriogênico foram sub cultivados em meio fresco 3 dias antes do co-cultivo (para reforçar a atividade de divisão celular).

A cepa LBA4404 de Agrobaeterium contendo o vetor de expressão foi usada para o co-cultivo.

A Agrobaeterium foi inoculada em meio AB com os antibióticos apropriados e cultivados por 3 dias a 28° C. As bactérias foram depois coletadas e colocadas em suspensão em meio de co-cultivo líquido a uma densidade (ODóOO) de cerca de 1. A suspensão foi depois transferida a uma placa de Petri e os calos imersos na suspensão por 15 minutos. Os tecidos de calo foram depois manchados secos sobre um papel de filtro e transferidos para meio de co-cultivo solidificado e incubados por 3 dias no escuro a 25° C. os calos co-cultivados foram cultivados em meio contendo 2,4-D por 4 semanas no escuro a 28° C na presença de um agente de seleção. Durante este período, ilhas de calo resistentes que se desenvolvem rapidamente se desenvolveram. Depois da transferência deste material a um meio de regeneração e incubação na luz, o potencial embriogênico foi liberado e brotos desenvolveram nas quatro a cinco semanas seguintes. Os brotos foram excisados dos calos e incubados por 2 a 3 semanas em um meio contendo auxina do qual os mesmos foram transferidos para o solo. Os brotos endurecidos foram cultivados sob alta umidade e dias curtos em uma estufa.

Aproximadamente 35 transformantes do arroz TO independentes foram gerados para uma construção. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa. Depois uma análise de PCR quantitativa para verificar o número de cópia do inserto de T-DNA, apenas plantas transgênicas de cópia única que exibem tolerância ao agente de seleção foram mantidos para a colheita da semente T1. As sementes foram depois colhidas três a quatro meses depois do transplante. O método produziu transformantes de local único a uma taxa de mais de 50 % (Aldemita e Hodges 1996, Chan et al 1993, Hiei et ai. 1994).

Exemplo 23: Procedimento de avaliação fenotípica

23.1 Configuração da Avaliação

Aproximadamente 35 transformantes do arroz TO independentes foram gerados. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa para crescer e colheita de semente TI. Cinco eventos, dos quais a progênie T1 segregou 3:1 quanto a presença/ ausência do transgene, foram retidos. Para cada um destes eventos, aproximadamente 10 mudas T1 contendo o transgene (hetero- e homo- zigotos) e aproximadamente 10 mudas T1 que carecem do transgene (nulizigotos) foram selecionados monitorando-se a expressão do marcador visual. As plantas transgênicas e os nulizigotos correspondentes foram cultivados lado a lado nas posições aleatórias sob os seguintes ajustes ambientais: fotoperíodo = 11,5 h, intensidade da luz do dia = 30.000 lux ou mais, temperatura diurna = 28°C ou mais alta, temperatura noturna = 22°C, umidade relativa = 60 a 70 %.

Quatro eventos Tl foram ainda avaliados na geração T2 seguindo o mesmo procedimento de avaliação como para a geração Tl mas com mais indivíduos por evento. Do estágio de semeadura até o estágio de maturidade as plantas foram passadas diversas vezes através de um gabinete de formação de imagem digital. Em cada ponto de tempo imagens digitais (2048 χ 1536 pixéis, 16 milhões de cores) foram tiradas de cada planta de pelo menos 6 ângulos diferentes.

23.2 Análise Estatística:

Um ANOVA de dois fatores (análise de variantes) foi usado como um modelo estatístico para a avaliação global de características fenotípicas vegetais. Um teste F foi realizado em todos os parâmetros medidos de todas as plantas de todos os eventos transformados com o gene da presente invenção. O teste F foi realizado para checar quanto a um efeito do gene sobre todos os eventos da transformação e para verificar quanto a um efeito global do gene, também conhecido como um efeito de gene global. O limiar para significância para um efeito de gene global verdadeiro foi ajustado a um nível de probabilidade de 5% para o teste F. Um valor de teste F significante indica um efeito de gene, significando que o mesmo não é apenas a mera presença ou posição do gene que está causando as diferenças no fenótipo.

Para checar quanto a um efeito dos genes dentro de um evento, isto é, para um efeito específico de linhagem, um teste t foi realizado dentro de cada evento usando conjuntos de dados das plantas transgênicas e das plantas nulas correspondentes. "Plantas nulas" ou "segregantes nulos" ou "nulizigotos" são as plantas tratadas do mesmo modo como a planta transgênica, mas das quais o transgene segregou. As plantas nulas também podem ser descritas como as plantas transformadas homozigotas negativas. O limiar para significância para o teste t é ajustado a 10 % do nível de probabilidade. Os resultados para alguns eventos podem estar acima ou abaixo deste limiar. Isto está fundamentado na hipótese de que um gene teria apenas um efeito em certas posições no genoma e que a ocorrência deste efeito dependente da posição não é incomum. Este tipo de efeito de gene também é chamado aqui de um "efeito de linhagem do gene". O valor ρ é obtido comparando-se o valor t com a distribuição t ou alternativamente, comparando-se o valor F com a distribuição F. O valor ρ depois dá a probabilidade de que a hipótese nula (isto é, que não existe nenhum efeito do transgene) está correta.

Porque dois experimentos com eventos de sobreposição foram realizados, uma análise combinada foi realizada. Isto é útil para checar a consistência dos efeitos em relação aos dois experimentos e se este é o caso, acumular evidência de ambos os experimentos de modo a aumentar a confidência na conclusão. O método usado foi um método de modelo misto que leva em conta a estrutura de nível múltiplo dos dados (isto é experimento - evento - segregantes). Os valores ρ são obtidos comparando-se o teste de razão de probabilidade com as distribuições de qui quadrado.

23.3 Parâmetros medidos

Medição de parâmetro relacionado com a biomassa Do estágio de semeadura até o estágio de maturidade as plantas foram passadas diversas vezes através de um gabinete de formação de imagem digital. Em cada ponto de tempo imagens digitais (2048 χ 1536 pixéis, 16 milhões de cores) foram tiradas de cada planta de pelo menos 6 ângulos diferentes.

A área de planta acima do solo (ou biomassa frondosa) foi determinada contando-se o número total de pixéis nas imagens digitais da parte acima do solo das plantas discriminadas do fundo. Este valor foi calculado em média para os quadros tirados no mesmo ponto de tempo dos ângulos diferentes e foi convertida a um valor de superfície física expressado em mm quadrados pela calibração. Os experimentos mostram que a área de planta acima do solo medida deste modo correlaciona-se com a biomassa de partes de planta acima do solo. A área acima do solo é o ponto de tempo no qual a planta atingiu a sua biomassa frondosa máxima. O vigor inicial é a área de planta (muda) acima do solo três semanas após a germinação.

Medições de parâmetro relacionado com a semente

Os panículos primários maduros foram colhidos, contados, ensacados, rotulados com código de barra e depois secados por três dias em uma estufa a 37°C. Os panículos foram depois debulhados e todas as sementes foram coletadas e contadas. As cascas cheias foram separadas das vazias usando um dispositivo de sopro de ar. As cascas vazias foram descartadas e a fração remanescente foi novamente contada. As cascas cheias foram pesadas em uma balança analítica. O número de sementes cheias foi determinado contando-se o número de cascas cheias que permaneceram depois da etapa de separação. O rendimento de semente total foi medido pesando-se todas as cascas cheias colhidas de uma planta. O número de semente total por planta foi medido contando-se o número de cascas colhidas de uma planta. O peso de mil grãos (TKW) é extrapolado do número de sementes cheias contadas e seu peso total. O índice de colheita (HI) na presente invenção é definido como a razão entre o rendimento de semente total e a área acima do solo (mm2), multiplicado por um fator 10^6 . O número total de flores por panículo como definido na presente invenção é a razão entre o número total de sementes e o número de panículos primários maduros.

A taxa de enchimento de semente como definido na presente invenção é a proporção (expressada como uma %) do número de sementes cheias em relação ao número total de sementes (ou flósculos). As flores por panículo é um parâmetro que estima o número médio de flósculos por panículo em uma planta, derivado do número de sementes totais dividido pelo número de panículos primários. O panículo mais alto e todos os panículos que se sobrepuseram com o panículo mais alto quando alinhados verticalmente, foram considerados como panículos primários e foram contados manualmente.

Exemplo 24: Resultados da avaliação fenotípica das plantas transgênicas

Na análise das sementes como descrita acima, os inventores descobriram que as plantas transformadas com a construção de gene de NRT tiveram um rendimento de semente mais alto, expressado como número de sementes cheias (que pode ser pelo menos em parte o resultado de uma taxa de enchimento aumentada), peso total de sementes e índice de colheita, comparadas com as plantas que carecem do transgene NRT.

Os resultados obtidos quanto às plantas na geração Tl estão resumidos na Tabela N:

Tabela N:

<table>table see original document page 119</column></row><table>

Estes resultados positivos de rendimento de semente foram mais uma vez obtidos na geração T2. Na Tabela O, os dados mostram a % de aumento global para o número de sementes cheias, peso total de sementes e índice de colheita, calculados a partir dos dados das linhagens individuais da geração T2 e dos respectivos valores p. Estes dados de T2 foram re-avaliados em uma análise combinada com os resultados para a geração Tl e os valores ρ obtidos mostram que os efeitos observados foram altamente significantes.

Tabela O:

<table>table see original document page 119</column></row><table> <table>table see original document page 120</column></row><table>

Além disso, as plantas transgênicas também mostraram um aumento na biomassa (áreamax: +7 % na geração Tl e +4 % na T2) aumento este que foi significante (valor ρ da análise combinada: 0,0001).

Exemplos de polipeptídeos e ácido nucléico codificador de YEP16

Exemplo 25: Clonagem de Gene de ácido nucléico que codifica YEP16 de Arabidopsis thaliana O gene que codifica YEP16 de Arabidopsis thaliana foi amplificado pela PCR usando como padrão uma biblioteca de cDNA de muda de Oryza sativa (Invitrogen, Paisley, UK). Depois da transcrição reversa do RNA extraído das mudas, os cDNAs foram clonados em pCMV Sport 6.0. O tamanho do inserto médio do banco foi de 1,6 kb e o número original de clones foi da ordem de 1,67 χ 10 cfu. O título original foi determinado ser 3,34 χ IO6 cfu/ml depois da primeira amplificação de 6xl010 cfu/ml. Depois da extração de plasmídeo, 200 ng de padrão foram usados em uma mistura de PCR de 50 μΐ. Os iniciadores prm00735 (SEQ ID NO: 144; sentido, códon de início em negrito, sítio AttBl em itálico: S^ggggaeaagtttgtaeaaaaaage aggcíícacaatggatactctctcagcatcc-3') e prm00736 (SEQ ID NO: 145; reverso, complementar, sítio AttB2 em itálico: S^ggggaccactttgtacaagaaagctgggttgta tcatcaagaaacccaga 3'), que incluem os sítios AttB para a recombinação de Gateway, foram usados para a amplificação pela PCR. A PCR foi realizada usando Hifi Taq DNA polimerase em condições padrão. Um fragmento de PCR de 12173 pares de base (incluindo os sítios attB; do início para a parada 1050 pares de base) foi amplificado e purificado também usando métodos padrão. A primeira etapa do procedimento Gateway, a reação BP, foi depois realizada, durante a qual o fragmento de PCR recombina in vivo com o plasmídeo pDONR201 para produzir, de acordo com a terminologia Gateway, um "clone de entrada". O plasmídeo pDONR201 foi adquirido da Invitrogen, como parte da tecnologia Gateway®.

Exemplo 26: Construção de Vetor

O clone de entrada foi subseqüentemente usado em uma reação LR com p00640, um vetor de destinação usado para a transformação de Oryza sativa. Este vetor contém como elementos funcionais dentro das bordas de T-DNA: um marcador selecionável vegetal; um cassete de expressão de marcador triável; e um cassete Gateway intencionado para a recombinação LR in vivo com a seqüência de interesse já clonada no clone de entrada. Um promotor da oleosina do arroz (SEQ ID NO: 143) para a expressão específica de semente foi localizado a montante deste cassete Gateway.

Depois da etapa de recombinação LR, o vetor de expressão resultante (Figura 9) foi transformado na cepa LBA4044 de Agrobacterium e subseqüentemente nas plantas de Oryza sativa. As plantas de arroz transformadas foram deixadas crescer e foram depois examinadas quanto aos parâmetros descritos no Exemplo 27.

Exemplo 27: Avaliação e Resultados de ácido nucléico que codifica YEP16 de Oryza sativa sob o controle do promotor da oleosina do arroz em condições de crescimento normais

Aproximadamente 15 a 20 transformantes do arroz TO independentes foram gerados. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa para crescimento e colheita de semente TI. Sete eventos, dos quais a progênie Tl segregaram 3:1 quanto a presença/ausência do transgene, foram retidos. Para cada um destes eventos, aproximadamente 10 mudas Tl contendo o transgene (hetero- e homo-zigotos) e aproximadamente 10 mudas Tl que carecem do transgene (nulizigotos) foram selecionados monitorando-se a expressão do marcador visual. 4 eventos Tl foram ainda avaliados na geração T2 seguindo o mesmo procedimento de avaliação como para a geração Tl mas com mais indivíduos por evento.

27.1 Análise estatística: Teste F

Um ANOVA de dois fatores (análise de variantes) foi usado como um modelo estatístico para a avaliação global de características fenotípicas vegetais. Um teste F foi realizada em todos os parâmetros medidos de todas as plantas de todos os eventos transformadas com o gene da presente invenção. O teste F foi realizado para checar quanto a um efeito do gene em relação a todos os eventos de transformação e para um efeito global do gene, também conhecido como um efeito de gene global. O limiar para a significância para um efeito de gene global verdadeiro foi ajustado a um nível de probabilidade de 5 % para o teste F. Um valor de teste F significante indica um efeito de gene, significando que não é apenas a presença ou posição do gene que está causando as diferenças no fenótipo.

Medições de parâmetro relacionado com semente

Os panículos primários maduros foram colhidos, contados, ensacados, rotulados com código de barra e depois secados por três dias em uma estufa a 37° C. Os panículos foram depois debulhados e todas as sementes foram coletadas e contadas. As cascas cheias foram separadas das vazias usando um dispositivo de sopragem de ar. As cascas vazias foram descartadas e a fração remanescente foi mais uma vez contada. As cascas cheias foram pesadas em uma balança analítica. O número de sementes cheias foi determinado contando-se o número de cascas cheias que permaneceram depois da etapa de separação. O rendimento total de semente foi medido pesando-se todas as cascas cheias colhidas de uma planta. O Número de semente total por planta foi medido contando-se o número de cascas colhidas de uma planta. O peso de mil grãos (TKW) foi extrapolado do número de sementes cheias contadas e seu peso total. O índice de colheita (HI) na presente invenção é definido como a razão entre o rendimento de semente total e a área acima do solo (mm ), multiplicado por um

fator de 10°. O

número total de flores por panículo como definido na presente invenção é a razão entre o número total de sementes e o número de panículos primários maduros.

O número de sementes cheias, o rendimento total de semente (peso total de sementes), taxa de enchimento de sementes (que é o número de sementes cheias dividido pelo número total de sementes e multiplicado por 100) e o índice de colheita de plantas transgênicas transformadas com um ácido nucléico que codifica YEP16 são mostrados na Tabela P. Estes parâmetros foram significantemente aumentados na geração Tl comparado com as plantas de controle correspondentes. Aumentos médios nos mesmos parâmetros também foram observados na geração T2.

Tabela P: Resultados de número de sementes cheias, peso de semente total, taxa de enchimento e índice de colheita na geração Tl de plantas transgênicas transformadas com um ácido nucléico que codifica

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Exemplos: Quinase tipo felpuda do Grupo I e ácido nucléico codificador

Exemplo 28: Clonagem de Gene

O gene que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I de Oryza sativa foi amplificado pela PCR usando como um padrão uma muda da biblioteca de cDNA de muda de Arabidopsis thaliana (Invitrogen, Paisley, UK). Depois da transcrição reversa de RNA extraído das mudas, os cDNAs foram clonado no pCMV Sport 6.0. O tamanho de inserto médio do banco foi 1,5 kb e o número original de clones foi da ordem de 1,59 χ 10"7 cfu. Os títulos originais foram determinados ser 9,6 χ 10"5 cfu/ml depois da primeira amplificação de 6 χ 10"5 cfu/ml. Depois da extração de plasmídeo, 200 ng de padrão foram usados em uma mistura de PCR de 50 μl. Os iniciadores prm5797 (SEQ ID NO: 179; sentido, códon de partida em negrito, sítio AttBl em itálico: 5' -ggggacaagtttgtacaaaaaagcaggcttaaacaatgggttcagíaggggttg-3') e prm5798 (SEQ ID NO: 180; reverso, complementar, códon de parada em negrito, sítio AttB2 em itálico: 5'-ggggaccactttgtacaaga aagcígggtgaagctgtct catactcctgc-3'), que incluem os sítios AttB para a recombinação de Gateway, foram usados para a amplificação pela PCR. A PCR foi realizada usando Hifi Taq DNA polimerase em condições padrão. Um fragmento PCR de 1328 pares de base foi amplificado e purificado também usando métodos padrão. A primeira etapa do procedimento Gateway, a reação BP, foi depois realizada, durante o que o fragmento de PCR recombina in vivo com o plasmídeo pDONR201 para produzir, de acordo com a terminologia Gateway, um "clone de entrada". O plasmídeo pDONR201 foi adquirido da Invitrogen, como parte da tecnologia Gateway®.

Exemplo 29: Construção de Vetor

O clone de entrada foi subseqüentemente usado em uma reação LR com um vetor de destinação usado para a transformação de Oryza sativa. Este vetor contém como elementos funcionais dentro das bordas de T- DNA: um marcador vegetal selecionável; um cassete de expressão de marcador triável; e um cassete Gateway intencionado para a recombinação LR in vivo com a seqüência de interesse já clonada no clone de entrada. Um promotor GOS2 do arroz, para a expressão constitutiva, foi a montante deste cassete Gateway (De Pater et al., Plant J. Nov 1992; 2(6): 837-44).

Depois da etapa de recombinação LR, o vetor de expressão resultante (Figura 15) foi transformado na cepa de Agrobacterium LBA4044 e subseqüentemente às plantas de Oryza sativa como descrito no Exemplo 30.

Exemplo 30: Transformação de Arroz

As sementes secas maduras de um arroz cultivar japonica foram descascadas. A esterilização foi realizada incubando-se por um minuto em 70 % de etanol, seguido por 30 minutos em 0,2 % de HgCl2, seguido por uma lavagem 6X15 minutos com água destilada estéril. As sementes estéreis foram depois germinadas em um meio contendo 2,4-D (meio de indução de calo). Depois de incubar no escuro por quatro semanas, os calos embriogênicos, derivados de escutelo foram excisados e propagados no mesmo meio. Depois de duas semanas, os calos foram multiplicados ou propagados pela subcultura no mesmo meio por mais 2 semanas. Os pedaços de calo embriogênico foram sub-cultivados em meio fresco 3 dias antes do co-cultivo (para reforçar a atividade de divisão celular). A cepa de Agrobacterium LBA4404 que abriga vetores de T-DNA binários foram usados para o co-cultivo. A Agrobacterium foi inoculada em meio AB com os antibióticos apropriados e cultivados por 3 dias a 28° C. As bactérias foram depois coletadas e colocadas em suspensão em meio de co-cultivo líquido a uma densidade (ODóOO) de cerca de 1. A suspensão foi depois transferida a uma placa de petri e os calos imersos na suspensão por 15 minutos. Os tecidos de calo foram depois manchados a seco em um papel de filtro e transferidos ao meio de co-cultivo, solidificado e incubados por 3 dias no escuro a 25° C. Os calos co-cultivados foram cultivados em meio contendo 2,4-D por 4 semanas no escuro a 28° C na presença de uma concentração adequada do agente seletivo. Durante este período, ilhas de calo resistentes que crescem rapidamente desenvolveram.

Depois da transferência deste material para um meio de regeneração e incubação na luz, o potencial embriogênico foi liberado e os brotos desenvolveram nas quatro a cinco semanas seguintes. Os brotos foram excisados dos calos e incubados por 2 a 3 semanas em um meio contendo auxina do qual os mesmos foram transferidos para o solo. Os brotos endurecidos foram cultivados sob alta umidade e dias curtos em uma estufa. Sementes foram depois colhidas três a quatro meses depois do transplante. O método produziu transformantes de local único a uma taxa de mais de 50 (Aldemita e Hodges, Planta, 199 612-617, 1996; Chan et al., Plant Mol. Biol. 22 (3) 491-506, 1993, Hiei et al., Plant J., 6 (2) 271-282, 1994). Exemplo 31: Triagem de Estresse Salino

As sementes foram semeadas e as mudas selecionadas monitorando-se a expressão do marcador visual. Dez dias depois da semeadura, as mudas foram transplantadas para vasos plásticos, 12 cm no diâmetro, enchido com uma mistura 1:1 de areia úmida e vermiculita. Os vasos foram embebidos em água fresca antes do transplante. As mudas foram depois transplantadas da câmara de cultura de tecidos para uma estufa para crescimento e colheita da semente T1. Os vasos foram submetidos às condições salinas um dia depois do transplante. Os vasos foram regados 4 vezes ao dia às 8 am, 12 pm, 4 pm e 9 pm com uma solução nutriente de estresse salino contendo 25 mM de NaCl e os componentes listados abaixo.

• Mistura Nutriente NPK, 20-20-20 Peters professional (Scotts, Marysville, OH, USA) a uma concentração de 1 kg/m3.

• Quelato de magnésio, Chelal Mg (BMS, Bornem, Bélgica) a 333,33 ml/m3

• Quelato de ferro, Libfer (CIBA, Bradford, UK) a 21,67 g / m3

• NaCl 1,425 kg/m3

A concentração salina foi monitorada em uma base semanal e as adições foram feitas onde necessárias. As plantas foram cultivadas sob estas condições até o início do enchimento do grão. As mesmas foram depois transferidas a um compartimento diferente da estufa onde as mesmas foram irrigadas diariamente com água fresca até a colheita da semente. Os parâmetros de crescimento e rendimento foram registrados como detalhado no Exemplo 32.

Exemplo 32: Avaliação e Resultados

Aproximadamente 15 a 20 transformantes do arroz TO independentes foram gerados. Os transformantes primários foram transferidos de uma câmara de cultura de tecido para uma estufa para crescimento e colheita de semente TI. Pelo menos 5 eventos para os quais a progênie Tl segregou 3:1 quanto a presença/ausência do transgene foram retidos. Para cada um destes eventos, aproximadamente 10 mudas Tl contendo o transgene (hetero- e homo-zigotos) e aproximadamente 10 mudas Tl carecendo do transgene (nulizigotos) foram selecionados monitorando-se a expressão de marcador visual. 4 dos eventos Tl de melhor desempenho foram ainda avaliados na geração T2 seguindo o mesmo procedimento de avaliação como para a geração Tl mas com mais indivíduos por evento.

Análise estatística: teste F

Um ANOVA de dois fatores (análise de variantes) foi usado como um modelo estatístico para a avaliação global de características fenotípicas vegetais. Um teste F foi realizado em todos os parâmetros medidos de todas as plantas de todos os eventos transformados com o gene da presente invenção. O teste F foi realizado para checar quanto a um efeito do gene em todos os eventos de transformação e para um efeito global do gene, também conhecido como um efeito de gene global. O limiar para significância para um efeito de gene global verdadeiro foi ajustado em um nível de probabilidade de 5 %. Um valor de teste F significante indica um efeito de gene, significando que não é apenas a presença ou posição do gene que está causando as diferenças no fenótipo.

32.1 Medições de parâmetro relacionado com semente

Os panículos primários maduros foram colhidos, ensacados, rotulados com código de barra e depois secados por três dias na estufa a 37° C. Os panículos foram depois debulhados e todas as sementes foram coletadas e contadas. As cascas cheias foram separadas das vazias usando um dispositivo de sopragem de ar. As cascas vazias foram descartadas e a fração remanescente foi mais uma vez contada. As cascas cheias foram pesadas em uma balança analítica.

O rendimento total de semente foi medido pesando-se todas as cascas cheias colhidas de uma planta. O índice de colheita na presente invenção é definido como uma razão de rendimento total de semente e a área acima do solo (mm ) multiplicada por um fator de 106.

A tabela de resultados abaixo mostra os valores ρ do teste F para as avaliações de T1 e T2. A diferença de porcentagem entre as transgênicas e os nulizigotos correspondentes (ou plantas sem o transgene) também é mostrada. Por exemplo, para o peso de semente total na geração T1, 2 eventos foram positivos para o peso de semente total (isto é, apresentaram um aumento no peso de semente total (de > 54 %, com um valor ρ do teste F de < 0,1938) comparado com o peso da semente das plantas nulizigotas correspondentes em condições de estresse do sal). Na geração T2, 1 evento foi positivo quanto ao peso de semente total (isto é, apresentou um aumento no peso de semente total (de 65 %, com um valor p do teste F de 0,0252) comparado com o peso de semente das plantas nulizigotas correspondentes em condições de estresse do sal).

Tabela Q: Geração T1 e T2 de plantas transgênicas de quinase tipo felpuda e plantas não transgênicas correspondentes sob estresse salino

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Transformação de milho, trigo, soja, canola, alfafa com seqüências úteis nos métodos da invenção

Transformação de Milho

A transformação de milho (Zea mays) é realizada com uma modificação do método descrito por Ishida et al. (1996) Nature Biotech 14(6): 745-50. A transformação é dependente de genótipo no milho e apenas genótipos específicos são passíveis de transformação e regeneração. A linhagem congênita Al 88 (University of Minnesota) ou híbridos com Al 88 como um precursor são boas fontes de material doador para a transformação, mas outros genótipos também podem ser usados com êxito. As espigas são colhidas de planta do milho aproximadamente 11 dias depois da polinização (DAP) quando o comprimento do embrião imaturo é de cerca de 1 a 1,2 mm. Os embriões imaturos são co-cultivados com Agrobacterium tumefaciens contendo o vetor de expressão e as plantas transgênicas são recuperadas através da organogênese. Os embriões excisados são cultivados no meio de indução de calo, depois o meio de regeneração de milho, contendo o agente de seleção (por exemplo imidazolinona mas vários marcadores de seleção podem ser usados). As placas de Petri são incubadas na luz a 25°C por 2 a 3 semanas ou até que os brotos se desenvolvam. Os brotos verdes são transferidos de cada embrião para o meio de enraizamento do milho e incubados a 25° C por 2 a 3 semanas, até que as raízes de desenvolvam. Os brotos enraizados são transplantados para o solo na estufa. As sementes Tl são produzidas a partir das plantas que exibem tolerância ao agente de seleção e que contém uma única cópia do inserto de T-DNA.

Transformação de Trigo

A transformação de trigo é realizada com o método descrito por Ishida et al. (1996) Nature Biotech 14(6): 745-50. O cultivar Bobwhite (disponível da CEMMYT, México) é habitualmente usado na transformação. Os embriões imaturos são co-cultivados com Agrobacterium tumefaciens contendo o vetor de expressão e as plantas transgêriicas são recuperadas através da organogênese. Depois da incubação com Agrobacterium, os embriões são cultivados in vitro no meio de indução de calo, depois meio de regeneração, contendo o agente de seleção (por exemplo imidazolinona mas vários marcadores de seleção podem ser usados). As placas de Petri são incubadas na luz a 25° C por 2 a 3 semanas ou até que os brotos se desenvolvam. Os brotos verdes são transferidos de cada embrião para o meio de enraizamento e incubados a 25° C por 2 a 3 semanas, até que as raízes se desenvolvam. Os brotos enraizados são transplantados para o solo na estufa. As sementes Tl são produzidas a partir de plantas que exibem tolerância ao agente de seleção e que contém uma única cópia do inserto de T-DNA.

Transformação de Soja

A soja é transformada de acordo com uma modificação do método descrito na patente US 5.164.310 da Texas A&M. Diversas variedades de soja comerciais são passíveis de transformação por este método. O cultivar Jack (disponível da Illinois Seed Foundation) é habitualmente usado para a transformação. As sementes de soja são esterilizadas para a semeadura in vitro. O hipocótilo, o radículo e um cotilédone são excisados de mudas jovens de sete dias de idade. O epicótilo e o cotilédone remanescente são ainda cultivados para desenvolver nodos axilares. Estes nodos axilares são excisados e incubados com Agrobacterium tumefaciens contendo o vetor de expressão. Depois do tratamento de co- cultivo, os explantes são lavados e transferidos para meio de seleção. Os brotos regenerados são excisados e colocados em um meio de alongamento de broto. Os brotos não mais longos do que 1 cm são colocados em meio de enraizamento até que as raízes se desenvolvam. Os brotos enraizados são transplantados para o solo na estufa. As sementes Tl são produzidas a partir de plantas que exibem tolerância ao agente de seleção e que contêm uma cópia única do inserto de T-DNA.

Transformação de semente de colza/canola

Os pecíolos cotiledonários e hipocótilos de mudas jovens de 5 a 6 dias de idade são usados como explantes para a cultura de tecido e transformada de acordo com Babic et ai. (1998, Plant Cell Rep 17: 183-188). O cultivar comercial Westar (Agriculture Canadá) é a variedade padrão usada para a transformação, mas outras variedades também podem ser usadas, as sementes de canola são esterilizadas na superfície para a semeadura in vitro. Os explantes de pecíolo de cotilédone com o cotilédone ligado são excisados das mudas in vitro e inoculados com Agrobacterium (contendo o vetor de expressão) imergindo-se a extremidade do corte do explante de pecíolo na suspensão bacteriana. Os explantes são depois cultivados por 2 dias em meio MSBAP-3 contendo 3 mg/l de BAP, 3 % de sacarose, 0,7 % de Phytagar a 23° C, 16 horas de luz. Depois de dois dias de co-cultivo com Agrobaeterium, os explantes de pecíolo são transferidos ao meio MSBAP-3 contendo 3 mg/l de BAP, cefotaxima, carbenicilina ou timentina (300 mg/l) por 7 dias e depois cultivados em meio MSBAP-3 com cefotaxima, carbenicilina ou timentina e agente de seleção até a regeneração de broto. Quando os brotos estiverem com 5 a 10 mm no comprimento, eles são cortados e transferidos para o meio de alongamento de broto (MSBAP-0,5, contendo 0,5 mg/l de BAP). Os brotos de cerca de 2 cm no comprimento são transferidos para o meio de enraizamento (MSO) para a indução de raiz. Os brotos enraizados são transplantados para o solo na estufa. As sementes Tl são produzidas a partir de plantas que exibem tolerância ao agente de seleção e que contém uma cópia única do inserto de T-DNA.

Transformação de Alfafa

Um clone de regeneração de alfafa (Medieago sativa) é transformado usando o método de (McKersie et ai., 1999 Plant Physiol 119: 839-847). A regeneração e transformação de alfafa é dependente de genótipo e portanto uma planta de regeneração é requerida. Os métodos para se obter plantas de regeneração foram descritas. Por exemplo, estas podem ser selecionadas do cultivar Rangelander (Agriculture Canada) ou qualquer outra variedade de alfafa comercial como descrito por Brown DCW e A Atanassov (1985. Plant Cell Tissue Organ Culture 4: 111-112). Alternativamente, a variedade RA3 (University of Wisconsin) foi selecionada para o uso em cultura de tecido (Walker et ai, 1978 Am J Bot 65: 654-659). Os explantes de pecíolo são co-cultivados com uma cultura durante a noite de Agrobacterium tumefaciens C58C1 pMP90 (McKersie et ai., 1999 Plant Physiol 119: 839- 847) ou LBA4404 contendo o vetor de expressão. Os explantes são co- cultivados por 3 dias no escuro em meio de indução SH contendo 288 mg/L de Pro5 53 mg/L de tioprolina, 4,35 g/L de K2SO4 e 100 μπι de acetosseringuinona. Os explantes são lavados em metade da concentração de meio de Murashige-Skoog (Murashige e Skoog, 1962) e plaqueado no mesmo meio de indução SH sem acetosseringuinona mas com um agente de seleção adequado e antibióticos adequados para inibir o crescimento de Agrobacterium. Depois de várias semanas, os embriões somáticos são transferidos para o meio de desenvolvimento BOÍ2Y não contendo nenhum regulador de crescimento, nenhum antibiótico e 50 g/L de sacarose. Os embriões somáticos são subseqüentemente germinados em metade da concentração de meio de Murashige-Skoog. As mudas enraizadas foram transplantadas em vasos e cultivadas em uma estufa. As sementes Tl são produzidas a partir das plantas que exibem tolerância ao agente de seleção e que contêm uma única cópia do inserto de T-DNA. LISTAGEM DE SEQÜÊNCIA

<110> CropDesign N.V.

<120> plantas tendo características de crescimento melhoradas e um

método para fabricar as mesmas

<130> PF57967

<150> EP 05110413.1 <151> 2005-11-07

<150> EP 05110429.7 <151> 2005-11-07

<150> US 60/736,194 <151> 2005-11-14

<150> EP 05110900.7 <151> 2005-11-17

<150> US 60/739,686 <151> 2005-11-23

<150> EP 05111260.5 <151> 2005-11-24

<150> US 60/742,287 <151> 2005-12-05

<160> 181

<170> PatentIn versão 3.3

<210> 1

<211> 1050

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 1

atggatcccg gccgcgtcgt gcgcagatgc ttctcttcgg gtgccggcgg cggtgctggg ggggcgaagc ggccgttctt gagcaggcgc cggagaagaa agcttcgagg aggagaacaa ggcatggccc cccggcaggt aagcagctcg agcacgactt caccatgccc tcctctccga aagctgcaag acaaggagac gtcgaccagc cggacgaaca ggcgcattgg cggcgccacc agcagcggcg gcaccaacga accgagggcg ccaacgaccg

gttcgactcc ggcgtggcgc ggcgggcgtg ccccggcggc 60

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<210> 2

<211> 349

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 2

Met Asp Pro Gly Arg Val Val Phe Asp Ser Gly Val Ala Arg Arg Ala 1 5 10 15 Cys Pro Gly Gly Ala Gln Met Leu Leu Phe Gly Gly Gly Gly Ser Ala 20 25 30 Asn Ser Gly Gly Phe Phe Arg Gly Val Pro Ala Ala Val Leu Gly Met 35 40- 45 Asp Glu Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ala Ala Gly Ala Gly Ala Lys Arg 50 55 60 Pro Phe Phe Thr Thr His Glu Glu Leu Leu Glu Glu Glu Tyr Tyr Asp 65 70 75 80 Glu Gln Ala Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ala Glu Gln Val Gln 85 90 95 Met Leu Glu Arg Ser Phe Glu Glu Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg 100 105 110 Lys Thr Glu Leu Ala Arg Arg Leu Gly Met Ala Pro Arg Gln Val Ala 115 120 125 Val Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu 130 135 140 His Asp Phe Asp Arg Leu Lys Ala Ala Tyr Asp Ala Leu Ala Ala Asp 145 150 155 160 His His Ala Leu Leu Ser Asp Asn Asp Arg Leu Arg Ala Gln Val Ile 165 170 175 Ser Leu Thr Glu Lys Leu Gln Asp Lys Glu Thr Ser Pro Ser Ser Ala 180 185 190 Thr Xle Thr Thr Ala Ala Gln Glu Val Asp Gln Pro Asp Glu His Thr 195 200 205 Glu Ala Ala Ser Thr Thr Gly Phe Ala Thr Val Asp Gly Ala Leu Ala 210 215 220 Ala Pro Pro Pro Gly His Gln Gln Pro Pro His Lys Asp Asp Leu Val 225 230 235 240 Ser Ser Gly Gly Thr Asn Asp Asp Gly Asp Gly Gly Ala Ala Val Val 245 250 255 Val Phe Asp Val Thr Glu Gly Ala Asn Asp Arg Leu Ser Cys Glu Ser 260 265 270 Ala Tyr Phe Ala Asp Ala Ala Glu Ala Tyr Glu Arg Asp Cys Ala Gly 275 280 285 His Tyr Ala Leu Ser Ser Glu Glu Glu Asp Gly Gly Ala Val Ser Asp 290 295 300 Glu Gly Cys Ser Phe Asp Leu Pro Asp Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 305 310 315 320 Met Phe Gly Ala Ala Gly Val Val His His Asp Ala Ala Asp Asp Glu 325 330 335 Glu Ala Gln Leu Gly Ser Trp Thr Ala Trp Phe Trp Ser 340 345

<210> 3

<211> 1197

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 3

atggagtccg

ttggactgcg

agaccggtgc

cccgacgagc

ctcacgccgg

ccggagcgga

tggttccaga

ctcaaggçgt

cgcctccâct

gagggcagcg

gtcgccgtcc

cagcaggagc

gtggtggaca

ggacagcagc

ccccatggac

cgagggctgc

ccaccaccac

gatgtggaac

aaatcgttct

atgagaagga

gccggctcat gcgctggcgg tcggcatgga tcctcgaaga agcaggtgca agacggagct accgccgcgc cgttcgacgc ctcaggtcat ccggcgcggc cggacgccga agcaggtgaa cggacgcgca gtggagtcgt cacgccgcgg agctactacg caacacgcgg tagatttctc ctttttcatt aggaggtgta

cttcagcacg cggcggcgtc ggaaggaggg ggagtactac tctgctggag ggcgcggaag gcgctggaag cctccgcgcc gtcgttgacc cgttgacgtc ggaaccggcg ggccgaggac actggtggtc acttcccggg ggggcatcca ccgacgacgc acgacgacga gcgcgcgcgc tttccgcttc tgcatgtgca

gcgggctccg ggcggcgggg cgcggcgtca gacgagcagc aggagcttcg ctagggctgc accaagcagc gaccacgacg gagaagctgc ccgggcttgc ctggaggagg aggctgagca gggtgcggcc cggcgacgag gtcggaggag cggcgtcctc ggaggacggc gtcgtcgtgc tttgtctgta tggtatggta

gcgccgggca ccatgttcca agcggccctt tcccggagaa aggaggagaa agccgcggca tcgagcgcga ccctcctcca aagagaagga ctgcggcggc cggcggcggc cgggcagcgg ggcaagcatc taccacgact gacgacggcg ttcgccgacc cagcagatca attcaattct atgttgagtt gggtaacaca

gatgctcttc tcgaggggcg cttcaccacc gaagcggcgc caagctggag ggtcgccgtg cttcgaccgc ggacaaccac gacgacgacc cgacgtgaag gttcgaggag cgggagcgcg tcgccgccgt gcgtgatggg ccggcagcga acggccacca gctgctggtg cgtgttaaaa tcgatcggct tcggtga

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<210> 4

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<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 4

Met Glu Ser Gly Arg Leu Ile Phe Ser Thr Ala Gly Ser Gly Ala Gly 1 5 10 15 Gln Met Leu Phe 20 Leu Asp Cys Gly Ala 25 Gly Gly Gly Gly Val 30 Gly Gly Gly Ala Met 35 Phe His Arg Gly Ala 40 Arg Pro Val Leu Gly 45 Met Glu Glu Gly Gly Arg Gly Val Lys Arg Pro Phe Phe Thr Thr Pro Asp Glu Leu 50 55 60 Leu Glu Glu Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Leu Pro Glu Lys Lys Arg Arg 65 70 75 80 Leu Thr Pro Glu Gln 85 Val His Leu Leu Glu 90 Arg Ser Phe Glu Glu 95 Glu Asn Lys Leu Glu 100 Pro Glu Arg Lys Thr 105 Glu Leu Ala Arg Lys 110 Leu Gly Leu Gln Pro 115 Arg Gln Val Ala Val 120 Trp Phe Gln Asn Arg 125 Arg Ala Arg Trp Lys 130 Thr Lys Gln Leu Glu 135 Arg Asp Phe Asp Arg 140 Leu Lys Ala Ser Phe Asp Ala Leu Arg Ala Asp His Asp Ala Leu Leu Gln Asp Asn His 145 150 155 160

Arg Leu His Ser Gln Val Met Ser Leu Thr Glu Lys Leu Gln Glu Lys

165 170 175

Glu Thr Thr Thr Glu Gly Ser Ala Gly Ala Ala Val Asp Val Pro Gly

180 185 190

Leu Pro Ala Ala Ala Asp Val Lys Val Ala Val Pro Asp Ala Glu Glu

195 200 205

Pro Ala Leu Glu Glu Ala Ala Ala Ala Phe Glu Glu Gln Gln Glu Gln

210 215 220

Gln Val Lys Ala Glu Asp Arg Leu Ser Thr Gly Ser Gly Gly Ser Ala 225 230 235 · 240

Val Val Asp Thr Asp Ala Gln Leu Val Val Gly Cys Gly Arg Gln His

245 250 255

Leu Ala Ala Val Asp Ser Ser Val Glu Ser Tyr Phe Pro Gly Gly Asp

260 265 270

Glu Tyr His Asp Cys Val Met Gly Pro Met Asp His Ala Ala Gly Gly

275 280 285

Ile Gln Ser Glu Glu Asp Asp Gly Ala Gly Ser Asp Glu Gly Cys Ser

290 295 300

Tyr Tyr Ala Asp Asp Ala Gly Val Leu Phe Ala Asp His Gly His His 305 310 315 320

His His His Gln His Ala Asp Asp Asp Glu Glu Asp Gly Gln Gln Ile

325 330 335

Ser Cys Trp Trp Met Trp Asn 340

<210> 5 <211> 819 <212> DNA <213> Zea mays

<400> 5

atggatccga gcgcggtcag tttcgactct ggcggcgcgc ggcggggcgg cggcgcgcag 60

atgctgctct tcggcggcgg aggcagcgcc aacagcaacg gcttcttccg aggtgttccg 120

atggcggtcc tgggcatgga cgacgcgacg cgcgtgggca agcggccctt cttcacgaca 180

cacgaggagc tcctagagga ggagtactac gacgagcagg cgccggagaa gaagcgccga 240

ctgacggcgg agcaggtgca gctgctggag cggagcttcg aagaagagaa caagctggag 300

ccggagcgca agaccgagct ggctcgccgc ctggggatgg cgccccgcca ggtagctgtt 360

tggttccaga accgccgcgc gcgctggaag accaagcaac tcgagaccga ctatgaccgc 420

ctcaaggctg cttacgacgc actcgccgcc gaccaccagg gcctcctggc cgacaacgat 480

aacctccggg cacaggtgat ctccctgacg gagaagctgc aaggcaagga gacatccccg 540

tcggcaacca ctgctgccca agaggtcgac cagccagacg aacácaccgc tgtgtcaggc 600

acggaagaac tgctggcgca gcagctcaag gacaacctcc acagcagcgg cgactgcact 660

ggccatggca ccctctcttc ggaagaagac gacggtggcg tggtcagtga cgagggctgc 720

agcttcgctc tcccggatgc catgttcgct gccgggttca cccaccatgg cgccgaggag 780

gtgcagctgg ccaactggac atccatgttc tggaactga 819

<210> 6

<211> 272

<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 6

Met Asp Pro Ser Ala Val Ser Phe Asp Ser Gly Gly Ala Arg Arg Gly 1 5 10 15 Gly Gly Ala Gln Met Leu Leu Phe Gly Gly Gly Gly Ser Ala Asn Ser 20 25 30 Asn Gly Phe Phe Arg Gly Val Pro Met Ala Val Leu Gly Met Asp Asp 35 40 45 Ala Thr Arg Val Gly Lys Arg Pro Phe Phe Thr Thr His Glu Glu Leu 50 55 60 Leu Glu Glu Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Ala Pro Glu Lys Lys Arg Arg 65 70 75 80 Leu Thr Ala Glu Gln Val Gln Leu Leu Glu Arg Ser Phe Glu Glu Glu 85 90 95 Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Thr Glu Leu Ala Arg Arg Leu Gly 100 105 110 Met Ala Pro Arg Gln Val Ala Val Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg 115 120 125 Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Thr Asp Tyr Asp Arg Leu Lys Ala Ala 130 135 140 Tyr Asp Ala Leu Ala Ala Asp His Gln Gly Leu Leu Ala Asp Asn Asp 145 150 155 160 Asn Leu Arg Ala Gln Val Ile Ser Leu Thr Glu Lys Leu Gln Gly Lys 165 170 175 Glu Thr Ser Pro Ser Ala Thr Thr Ala Ala Gln Glu Val Asp Gln Pro 180 185 190 Asp Glu His Thr Ala Val Ser Gly Thr Glu Glu Leu Leu Ala Gln Gln 195 200 205 Leu Lys Asp Asn Leu His Ser Ser Gly Asp Cys Thr Gly His Gly Thr 210 215 220 Leu Ser Ser Glu Glu Asp Asp Gly Gly Val Val Ser Asp Glu Gly Cys 225 230 235 240 Ser Phe Ala Leu Pro Asp Ala Met Phe Ala Ala Gly Phe Thr His His

245 250 255

Ala Glu Glu Val Gln Leu Ala Asn Trp Thr Ser Met Phe Trp Asn

265 270

cttcaacgcg ccgggctctg gcgccgggca gatgctcttc 60

cggtcccggc ggcggcttgt tccatcgagg cgggagaccg 120

gcgcggcgta aaacggccct tcttcacctc gcccgacgag 180

cgacgagcag ctgccggaga agaagcgccg cctcacccca 240

gaggagcttc gaggaggaga acaagctgga gccggagcgc 300

gctgggcctg cagcctcgcc aggtggccgt ctggttccag 360

gaccaagcag ctcgagcgcg acttcgaccg cctcaaggcc 420

ggaccacgac gccctcctcc aggacaacaa ccgcctccgc 480

cgagaagctg caagagaagg aggatgcgac ggagggcggc 540

gccggcggtg gacgtcgagg cttccctggc cgacgacgtc 600

ggcgacgttc gaggtgctgc aggaggtgaa gtccgaggac 660

cgggagcgcg gtggtggacg cggacgcgct gctgtacggc 720

tagcagcgtg gagtcgtact tccccggcgg cgaggaccac 780

gggccccgtg aatcatggcg ccggaggagg catccagtcg 840

260

<210> 7 <211> 993 <212> DNA <213> Zea mays

<400> 7

atggagtctg gacggctcat ctcgactgcg gcgcaggcgg atgcttggcc ttgaagaagg ctcctcgagg aagagtacta gagcaggtgc ttctgctgga aagacggagc tggcgcgcaa aaccgccgcg cccggtggaa tccttcgacg ctctccgagc tcacaggttg tgtcgttgac gccaccgctg acaccgccgc gaggagccag cagagcctgc aggctgagca ccggcagcgg aggttcgccg cggcagttga taccacgact gcgggacgat gacgacgacg gcgccggcag cgacgagggg tgcagctact acgccgacga agccgccgcc 900 gccgccgccg cgttcttcgc cggacacgcc acccaccacc acgcggacga ggacgaggac 960 gccggccaga tcagctggtg gatgtggaac tag 993

<210> 8

<211> 330

<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 8

Met Glu Ser Gly Arg Leu Ile Phe Asn Ala Pro Gly Ser Gly Ala Gly 1 5 10 15

Gln Met Leu Phe Leu Asp Cys Gly Ala Gly Gly Gly Pro Gly Gly Gly

20 25 30

Leu Phe His Arg Gly Gly Arg Pro Met Leu Gly Leu Glu Glu Gly Arg

35 40 45

Gly Val Lys Arg Pro Phe Phe Thr Ser Pro Asp Glu Leu Leu Glu Glu

50 55 60

Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Leu Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Pro 65 70 75 80

Glu Gln Val Leu Leu Leu Glu Arg Ser Phe Glu Glu Glu Asn Lys Leu

85 90 95

Glu Pro Glu Arg Lys Thr Glu Leu Ala Arg Lys Leu Gly Leu Gln Pro

100 105 110

Arg Gln Val Ala Val Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr

115 120 125

Lys Gln Leu Glu Arg Asp Phe Asp Arg Leu Lys Ala Ser Phe Asp Ala

130 135 140

Leu Arg Ala Asp His Asp Ala Leu Leu Gln Asp Asn Asn Arg Leu Arg 145 150 155 160

Ser Gln Val Val Ser Leu Thr Glu Lys Leu Gln Glu Lys Glu Asp Ala

165 170 175

Thr Glu Gly Gly Ala Thr Ala Asp Thr Ala Ala Pro Ala Val Asp Val

180 185 190

Glu Ala Ser Leu Ala Asp Asp Val Glu Glu Pro Ala Glu Pro Ala Ala

195 200 205

Thr Phe Glu Val Leu Gln Glu Val Lys Ser Glu Asp Arg Leu Ser Thr

210 215 220

Gly Ser Gly Gly Ser Ala Val Val Asp Ala Asp Ala Leu Leu Tyr Gly 225 230 235 240

Arg Phe Ala Ala Ala Val Asp Ser Ser Val Glu Ser. Tyr Phe Pro Gly

245 250 255

Gly Glu Asp His Tyr His Asp Cys Gly Thr Met Gly Pro Val Asn His

260 265 270

Gly Ala Gly Gly Gly Ile Gln Ser Asp Asp Asp Gly Ala Gly Ser Asp

275 280 285

Glu Gly Cys Ser Tyr Tyr Ala Asp Glu Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala

290 295 300

Phe Phe Ala Gly His Ala Thr His His His Ala Asp Glu Asp Glu Asp 305 310 315 320

Ala Gly Gln Ile Ser Trp Trp Met Trp Asn 325 330

<210> 9 <211> 825 <212> DNA

<213> Saccharum officinarum

<400> 9

atggatccga gcgcggtcag tttcaactcc ggcggcgcgc ggcggggcgg cggcggcacg cagatgctgc tcttcggcgg cggaggcagc gccaacagca acggcttctt ccgaggtgtt ccgatggcgg tcctgggcat ggacgacgcg acgcgcgtgg gcaagcggcc cttcttcacc acacacgagg agctcctgga ggaggagtac tacgacgagc aggcgcccga gaagaagcgc cgtctgacgg cggagcaggt gcagctgctg gagcggagct tcgaggaaga gaacaagctg gagcccgagc gcaagaccga gctggctcgc cgcctcggga tggcgccccg ccaggtggcc gtctggttcc agaaccgccg cgcgcgctgg aagaccaagc agctcgagac cgactatgac cacctcaagg ctgcctacga cgcgctcgcc gccgaccacc agggcctcct ggccgacaac gatagcctcc gggcacaggt ggtctcccta acagagaagc tgcaaggcaa ggagacatcc ccgtcggcca ccactgctgc ccaagaggtc gaccagccag acgaacacac cgcggcgtca ggcactgaga aactgctggc gcagcagctc aaggacgacc tccacagcag cggcgactgc actggccatg gtgccctctc ctcagaggaa gaagatggtg gtgtggtcag tgacgagggc agctttgatc tcccggatgc catgtttgct gccggggtca cccaccatgg cgccgacgcc gaggaggcac agctggccaa ctggacatcc tggttctgga actga

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 825

<210> 10 <211> 274 <212> PRT

<213> Saccharum officinarum <400> 10

Met Asp Pro Ser Ala Val Ser Phe Asn Ser Gly Gly Ala Arg Arg Gly 15 10 15

Gly Gly Gly Thr Gln Met Leu Leu Phe Gly Gly Gly Gly Ser Ala Asn

20 25 30

Ser Asn Gly Phe Phe Arg Gly Val Pro Met Ala Val Leu Gly Met Asp

35 40 45

Asp Ala Thr Arg Val Gly Lys Arg Pro Phe Phe Thr Thr His Glu Glu

50 55 60

Leu Leu Glu Glu Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Ala Pro Glu Lys Lys Arg 65 70 75 80

Arg Leu Thr Ala Glu Gln Val Gln Leu Leu Glu Arg Ser Phe Glu Glu

85 90 95

Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Thr Glu Leu Ala Arg Arg Leu

100 105 110

Gly Met Ala Pro Arg Gln Val Ala Val Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala

115 120 125

Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Thr Asp Tyr Asp His Leu Lys Ala

130 135 140

Ala Tyr Asp Ala Leu Ala Ala Asp His Gln Gly Leu Leu Ala Asp Asn 145 150 155 160

Asp Ser Leu Arg Ala Gln Val Val Ser Leu Thr Glu Lys Leu Gln Gly

165 170 175

Lys Glu Thr Ser Pro Ser Ala Thr Thr Ala Ala Gln Glu Val Asp Gln

180 185 190

Pro Asp Glu His Thr Ala Ala Ser Gly Thr Glu Lys Leu Leu Ala Gln

195 200 205

Gln Leu Lys Asp Asp Leu His Ser Ser Gly Asp Cys Thr Gly His Gly 210 215 220 Ala Leu Ser Ser Glu Glu Glu Asp Gly Gly Val Val Ser Asp Glu Gly 225 230 235 240

Ser Phe Asp Leu Pro Asp Ala Met Phe Ala Ala Gly Val Thr His His

245 250 255

Gly Ala Asp Ala Glu Glu Ala Gln Leu Ala Asn Trp Thr Ser Trp Phe 260 265 270

Trp Asn

<210> 11 <211> 828 <212> DNA

<213> Sorghum bicolor <400> 11

atggatccga gcgcggtcag tttcgactcc ggcgcgcaga tgctgctctt cggcggcgga ggtgttccga tggcggtcct gggcatggac ttcaccacgc acgaggagct cctggaggag aagcgccgtc tgacggcgga gcaggtgcag aagctggagc cggagcgcaa gaccgagctg gtggccgtct ggttccagaa ccgccgcgcg tatgaccgcc tcaaggctgc ctacgacgcg gacaacgata gcctccgggc acaggtgatc acatccccgt cggcgaccac tgctgcccaa gcgtcaggca ctgagaaact gctggtgcag gacttcactg gccatggtgc cctctcttca gagggctgca gctttgatct cccggatgcc gccgaggagg cgcagctggc caactggaca

<210> 12

<211> 275

<212> PRT

<213> Sorghum bicolor

<400> 12

Met Asp Pro Ser Ala Val Ser Phe 1 5 Gly Gly Gly Gly 20 Gly Ala Gln Met Ala Asn Ser 35 Asn Gly Phe Phe Arg 40 Met Asp 50 Asp Ala Thr Arg Val 55 Gly Glu Glu Leu Leu Glu Glu Glu Tyr 65 70 Lys Arg Arg Leu Thr 85 Ala Glu Gln Glu Glu Glu Asn 100 Lys Leu Glu Pro Arg Leu Gly 115 Met Ala Pro Arg Gln 120 Arg Ala 130 Arg Trp Lys Thr Lys 135 Gln

ggcggcgcgc ggcggggcgg cggcggcggc 60 ggcagcgcca acagcaacgg cttcttccga 120 gacgcgacgc gcgtgggcaa gcggcctttc 180 gagtactacg acgagcaggc gcccgagaag 240 ctgctggagc ggagcttcga ggaagagaac 300 gctcgccgcc tcgggatggc gcctcgccag 360 cgctggaaga ctaagcagct cgagaccgac 420 ctcgccgcog accaccaggg cctcctggcc 480 tccctaacgg ataagctgca acgcaaggag 540 gaggtcgacc agccagacga acacaccgct 600 cagctcaagg acgacctcca cagcagcggc 660 gaggaagagg atggtggtgt ggtcagcgac 720 atgttcgctg ccggggtcac ccaccatggc 780 tcctggttct ggaactga 828

Asp Ser 10 Gly Gly Ala Arg Arg 15 Gly Leu Leu Phe Gly Gly Gly Gly Ser 25 30 Gly Val Pro Met Ala 45 Val Leu Gly Lys Arg Pro Phe 60 Phe Thr Thr His Tyr Asp Glu 75 Gln Ala Pro Glu Lys 80 Val Gln 90 Leu Leu Glu Arg Ser 95 Phe Glu Arg Lys Thr Glu Leu Ala Arg 105 110 Val Ala Val Trp Phe 125 Gln Asn Arg Leu Glu Thr Asp 140 Tyr Asp Arg Leu Lys 145 Asp

Gln

Asp

Val

His 225 Glu

Thr

Phe

Ala Ala Tyr Asp Asn Asp Arg Lys

Gln Pro 195 Gln Gln 210

Gly Ala

Gly Cys

His His

Trp Asn 275

Ser Leu 165 Glu Thr 180

Asp Glu

Leu Lys

Leu Ser

Ser Phe 245 Gly Ala 260

Ala Leu 150

Arg Ala

Ser Pro

His Thr

Asp Asp 215 Ser Glu 230

Asp Leu Glu Glu

Ala Ala Asp

Gln Val Ile 170

Ser Ala Thr

185 Ala Ala Ser 200

Leu His Ser

Glu Glu Asp

Pro Asp Ala 250

Ala Gln Leu 265

His Gln 155

Ser Leu

Thr Ala

Gly Thr

Ser Gly 220 Gly Gly 235

Met Phe Ala Asn

Gly Leu

Thr Asp

Ala Gln 190 Glu Lys 205

Asp Phe

Val Val

Ala Ala

Trp Thr 270

Leu Ala 160 Lys Leu 175

Glu Val

Leu Leu

Thr Gly

Ser Asp 240 Gly Val 255

Ser Trp

<210> 13

<211> 1023

<212> DNA

<213> Triticum aestivum

<400> 13

atggagcccg gccggctcat cttcaacacg atggactgcg gcgcgggcgg catcgccggc ccggtcctcg gcggcatgga agaagggcgc gatgacatgc tcgaggagga gtactacgac accccggagc aggtccacct gctggagagg gagaggaaga cggagctggc ccgcaagctc ttccagaacc gccgcgcccg gtggaagaca aaggcgtcct tcgacgccct ccgggccgac ctccggtcac aggtggtaac gttgaccgag agcttcggtg cagccgccga cgcctcggag tccttggccg acgccgagga gcaggccgcg cagctgcacg tgaaggacga ggagaggctg gacgcgaggg acgcgctgct cgggagcgga gtggactcgt actgcttccc ggggggcgcc ggccccgtgg cgggcggcat ccagtcggag tgcagctact accccgacga cgccgccgtc catcgcacgg acgacgacga tcagcaggac tag

tcgggctccg gcaacggaca gatgctcttc 60 gcggccggca tgttccatcg aggggtgaga 120 ggcgtgaagc ggcccttctt cacctcgccg 180 gagcagctcc cggagaagaa gcggcgcctc 240 agcttcgagg aggagaacaa gctggagccg 300 gggctgcagc cacgccaggt ggccgtctgg 360 aagacgctgg agcgcgactt cgaccgcctc 420 cacgacgccc tcctccagga caaccaccgg 480 aagatgcaag ataaggaggc gccggaaggc 540 ccggagcagg cggcggcgga ggcgaaggct 600 gcagcggagg cgttcgaggt ggtgcagcag 660 agcccgggga gcggcgggag cgcggtgctg 720 tgcggcctcg ccggcgtggt ggacagcagc 780 ggcggcgacg agtaccacga gtgcgtggtg 840 gaggacgacg gcgcgggcag cgacgagggc 900 ttcttcgccg ccgcgcaagg gcacggccac 960 gacggccaga tcagctactg gatgtggaac 1020 1023

<210> 14

<211> 340

<212> PRT

<213> Triticum aestivum

<400> 14

Met Glu Pro Gly Arg Leu Ile Phe Asn Thr Ser Gly Ser Gly Asn Gly 15 10 15

Gln Met Leu Phe Met Asp Cys Gly Ala Gly Gly Ile Ala Gly Ala Ala 20 25 30 Gly Met Phe 35 His Arg Gly Val Arg 40 Pro Val Leu Gly Gly 45 Met Glu Glu Gly Arg Gly Val Lys Arg Pro Phe Phe Thr Ser Pro Asp Asp Met Leu 50 55 60 Glu Glu Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Leu Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu 65 70 75 80 Thr Pro Glu Gln Val 85 His Leu Leu Glu Arg 90 Ser Phe Glu Glu Glu 95 Asn Lys Leu Glu Pro 100 Glu Arg Lys Thr Glu 105 Leu Ala Arg Lys Leu 110 Gly Leu Gln Pro Arg 115 Gln Val Ala Val Trp 120 Phe Gln Asn Arg Arg 125 Ala Arg Trp Lys Thr Lys Thr Leu Glu Arg Asp Phe Asp Arg Leu Lys Ala Ser Phe 130 135 140 Asp Ala Leu Arg Ala Asp His Asp Ala Leu Leu Gln Asp Asn His Arg 145 150 155 160 Leu Arg Ser Gln Val 165 Val Thr Leu Thr Glu 170 Lys Met Gln Asp Lys 175 Glu Ala Pro Glu Gly 180 Ser Phe Gly Ala Ala 185 Ala Asp Ala Ser Glu 190 Pro Glu Gln Ala Ala 195 Ala Glu Ala Lys Ala 200 Ser Leu Ala Asp Ala 205 Glu Glu Gln Ala Ala 210 Ala Ala Glu Ala Phe 215 Glu Val Val Gln Gln 220 Gln Leu HiS Val Lys Asp Glu Glu Arg Leu Ser Pro Gly Ser Gly Gly Ser Ala Val Leu 225 230 235 240 Asp Ala Arg Asp Ala Leu Leu Gly Ser Gly Cys Gly Leu Ala Gly Val 245 250 255 Val Asp Ser Ser 260 Val Asp Ser Tyr Cys 265 Phe Pro Gly Gly Ala 270 Gly Gly Asp Glu Tyr 275 His Glu Cys Val Val 280 Gly Pro Val Ala Gly 285 Gly Ile Gln Ser Glu Glu Asp Asp Gly Ala Gly Ser Asp Glu Gly Cys Ser Tyr Tyr 290 295 300 Pro Asp Asp Ala Ala Val Phe Phe Ala Ala Ala Gln Gly His Gly His 305 310 315 320 His Arg Thr Asp Asp 325 Asp Asp Gln Gln Asp 330 Asp Gly Gln Ile Ser 335 Tyr

Trp Met Trp Asn 340

<210> 15 <211> 819 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 15

atggaatcca attcgttttt cttcgatcca tctgcttcac acggcaacag catgttcttc 60

cttgggaatc tcaatcccgt cgtccaagga ggaggagcaa gatcgatgat gaacatggag 120 gaaacttcga agcgaaggcc cttctttagc tcccctgagg atctctacga cgatgacttt 180 tacgacgacc agttgcctga aaagaagcgt cgcctcacta ccgaacaagt gcatctgctg 240 gagaaaagct tcgagacaga gaacaagcta gagcctgaac gcaagactca gcttgccaag 300 aagcttggtc tacagccaag gcaagtggct gtctggtttc agaatcgccg agctcgttgg 360 aaaacaaaac agcttgagag agactacgat cttctcaagt ccacttacga ccaacttctt 420 tctaactacg actccatcgt catggacaac gataagctca gatccgaggt tacttccctg 480

accgaaaagc ttcagggcaa acaagagaca gctaatgaac cacctggtca agtgcccgaa 540

ccaaaccaac ttgatccggt ttacattaat gcggcagcaa tcaaaaccga ggaccggtta 600

agttcaggga gcgttgggag cgcggtacta gacgacgacg cacctcaact actagacagc 660

tgtgactctt acttcccaag catcgtaccc atccaagaca acagcaacgc cagtgatcat 720

gacaatgacc ggagctgttt cgccgacgtc tttgtgccca ccacttcacc gtcgcacgat 780

catcacggtg aatcattggc tttctgggga tggccttag 819

<210> 16

<211> 272

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 16

Met Glu Ser Asn Ser Phe Phe Phe Asp Pro Ser Ala Ser His Gly Asn 1 5 10 15 Ser Met Phe Phe Leu Gly Asn Leu Asn Pro Val Val Gln Gly Gly Gly 20 25 30 Ala Arg Ser Met Met Asn Met Glu Glu Thr Ser Lys Arg Arg Pro Phe 35 40 45 Phe Ser Ser Pro Glu Asp Leu Tyr Asp Asp Asp Phe Tyr Asp Asp Gln 50 55 60 Leu Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Thr Glu Gln Val His Leu Leu 65 70 75 80 Glu Lys Ser Phe Glu Thr Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Thr 85 90 95 Gln Leu Ala Lys Lys Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Val Trp 100 105 110 Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Arg Asp 115 120 125 Tyr Asp Leu Leu Lys Ser Thr Tyr Asp Gln Leu Leu Ser Asn Tyr Asp 130 135 140 Ser Ile Val Met Asp Asn Asp Lys Leu Arg Ser Glu Val Thr Ser Leu 145 150 155 160 Thr Glu Lys Leu Gln Gly Lys Gln Glu Thr Ala Asn Glu Pro Pro Gly 165 170 175 Gln Val Pro Glu Pro Asn Gln Leu Asp Pro Val Tyr Ile Asn Ala Ala 180 185 190 Ala Ile Lys Thr Glu Asp Arg Leu Ser Ser Gly Ser Val Gly Ser Ala 195 200 205 Val Leu Asp Asp Asp Ala Pro Gln Leu Leu Asp Ser Cys Asp Ser Tyr 210 215 220 Phe Pro Ser Ile Val Pro Ile Gln Asp Asn Ser Asn Ala Ser Asp His 225 230 235 240 Asp Asn Asp Arg Ser Cys Phe Ala Asp Val Phe Val Pro Thr Thr Ser 245 250 255 Pro Ser His Asp His His Gly Glu Ser Leu Ala Phe Trp Gly Trp Pro 260 265 270

<210> 17

<211> 969

<212> DNA

<213> Daucus carota <400> 17

atggcgggtc ggagggtgtt ctatggggag ggagccaata cgacgtcggc tagcctgttg tttcatagtc aaagacctga gcctttcttt ctttctgcac cttctccttc tctaattggt tcaaaatcca tggttagctt tcaagatgct aagcgaaaaa atccctacga tgggttcttt atgcggtcat atgatgaaga agaaattggg gatgaagaat atgatgaata ctttcagcag cctgagaaga agaggaggct caaggctgat caaatccagt ttcttgagaa aagttttgag actgataaca agcttgagcc tgaaagaaaa gttcagcttg caaaagaact cggcttgcag ccaagacagg ttgcgatatg gtttcagaac cgtcgagcac ggtggaagac caaaacacta gaaaaagatt atgatgtatt gcaaaatagc tacaacagcc tcaaggctga ctatgacaat ctacttgccg agaaagaaaa acttaaagcc gaggttctcg acctgacaga caagctactt ctcaaagaag ataaggggag caagacagta gtttttgata agcaaaaggt gtctgcagca ttccaacaag aacgtgttag taatgacata tctgtgggtg aagtactcag taactcagtt atggactgca agcaagaaga tcataactct gtgaaaagtg atgcagttga ttctgacagt ccacactaca gtgatgaagt ctactccagt tttatggagc cagtggatcg ctcttatgtt tttgaacctg ctcagtcgga tatatctcaa gatgaagaag atgacatggg gaacaactta tttctcccat catatcatgt tttctcaaag actgaagacg gtagttactc cgaccagcct tcgaactctt cgtactttgg cttcccagtt gaagatcata cgtttggctt ttggggtact gaattataa

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 SOO 960 S69

<210> 18 <211> 322 <212> PRT

<213> Daucus carota <400> 18

Met Ala Gly Arg Arg Val Phe Tyr Gly Glu Gly Ala Asn Thr Thr Ser 15 10 15

Ala Ser Leu Leu Phe His Ser Gln Arg Pro Glu Pro Phe Phe Leu Ser

20 25 30

Ala Pro Ser Pro Ser Leu Ile Gly Ser Lys Ser Met Val Ser Phe Gln

35 40 45

Asp Ala Lys Arg Lys Asn Pro Tyr Asp Gly Phe Phe Met Arg Ser Tyr

50 55 60

Asp Glu Glu Glu Ile Gly Asp Glu Glu Tyr Asp Glu Tyr Phe Gln Gln 65 70 75 80

Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Lys Ala Asp Gln Ile Gln Phe Leu Glu

85 90 95

Lys Ser Phe Glu Thr Asp Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Val Gln

100 105 110

Leu Ala Lys Glu Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Ile Trp Phe

115 120 125

Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Thr Leu Glu Lys Asp Tyr

130 135 140

Asp Val Leu Gln Asn Ser Tyr Asn Ser Leu Lys Ala Asp Tyr Asp Asn 145 150 155 160

Leu Leu Ala Glu Lys Glu Lys Leu Lys Ala Glu Val Leu Asp Leu Thr

165 170 175

Asp Lys Leu Leu Leu Lys Glu Asp Lys Gly Ser Lys Thr Val Val Phe

180 185 190

Asp Lys Gln Lys Val Ser Ala Ala Phe Gln Gln Glu Arg Val Ser Asn

195 200 205

Asp Ile Ser Val Gly Glu Val Leu Ser Asn Ser Val Met Asp Cys Lys

210 215 220

Gln Glu Asp His Asn Ser Val Lys Ser Asp Ala Val Asp Ser Asp Ser 225 230 235 240

Pro His Tyr Ser Asp Glu Val Tyr Ser Ser Phe Met Glu Pro Val Asp

245 250 255

Arg Ser Tyr Val Phe Glu Pro Ala Gln Ser Asp Ile Ser Gln Asp Glu

260 265 270

Glu Asp Asp Met Gly Asn Asn Leu Phe Leu Pro Ser Tyr His Val Phe

275 280 285

Ser Lys Thr Glu Asp Gly Ser Tyr Ser Asp Gln Pro Ser Asn Ser Ser

290 295 300

Tyr Phe Gly Phe Pro Val Glu Asp His Thr Phe Gly Phe Trp Gly Thr 305 310 315 320

Glu Leu

<210> 19

<211> 1038

<212> DNA

<213> Glycine max

<400> 19

atggcgagtg gcaagcttta tgcgggttca aacatgtcac ttctcctcca aaacgaaagg 60

ctcccttgct cctctgaagt ccttgagtct ctttgggctc agacctctaa ccctgcttcc 120

ttccaaggtt caaaacccgt ggttgatttt gagaatgtaa gtgggagcag gatgacggat 180

aggcctttct ttcaagcgtt ggagaaggaa gagaactgtg atgaggatta cgaggggtgt 240

ttccaccaac cggggaagaa aaggaggctc acaagcgaac aagttcagtt ccttgaaagg 300

aactttgagg tagagaacaa gcttgaaccc gaaaggaaag tccaacttgc aaaagagctt 360

ggcttgcagc caaggcaagt tgctatatgg ttccaaaacc gaagggcaag gttcaagacc 420

aagcagctag aaaaagacta tggcgtgttg aaagctagtt atgacagact caaaagtgac 480

tatgaaagtc ttgttcaaga gaatgacaag ttaaaagcag aggtgaattc tctggagagc 540

aaattgattc ttagagataa agagaaggag gagaattcgg atgacaagtc atctcctgat 600

gatgctgtca attcttcttc accccacaac aacaaggagc ctatggattt attaattatt 660

tcaaaaaatg caacaacaac aacaacatct gaaaatggga ccaaagtgtt gtcaccactc 720

ccactcccta ttatggtaac atgctgcaag caagaagatg ccaactcagc caaaagtgat 780

gtccttgatt cggatagccc acattgcact tcattcgtgg agcctgctga ttcctctcat 840

gcctttgaac cagaagacca ctcagaagac ttctcccaag atgaagagga taaccttagt 900

gaaaaccttt tgatgacctt cccttcttct tgttgcttac ctaaggttga agaacactgc 960

tatgacggcc ctcctgaaaa ctcttgtaat tttggcttcc aggttgagga tcaaaccttc 1020

tgtttctggc cctattga 1038

<210> 20

<211> 345

<212> PRT

<213> Glycine max

<400> 20

Met Ala Ser Gly Lys Leu Tyr Ala Gly Ser Asn Met Ser Leu Leu Leu 1 5 10 15

Gln Asn Glu Arg Leu Pro Cys Ser Ser Glu Val Leu Glu Ser Leu Trp

20 25 30

Ala Gln Thr Ser Asn Pro Ala Ser Phe Gln Gly Ser Lys Pro Val Val

35 40 45

Asp Phe Glu Asn Val Ser Gly Ser Arg Met Thr Asp Arg Pro Phe Phe

50 55 60

Gln Ala Leu Glu Lys Glu Glu Asn Cys Asp Glu Asp Tyr Glu Gly Cys 65 70 75 80 Phe His Gln Pro Gly Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ser Glu Gln Val Gln 85 90 95 Phe Leu Glu Arg Asn Phe Glu Val Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg 100 105 110 Lys Val Gln Leu Ala Lys Glu Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala 115 120 125 Ile Trp 130 Phe Gln Asn Arg Arg 135 Ala Arg Phe Lys Thr 140 Lys Gln Leu Glu Lys Asp Tyr Gly Val Leu Lys Ala Ser Tyr Asp Arg Leu Lys Ser Asp 145 150 155 16.0 Tyr Glu Ser Leu Val 165 Gln Glu Asn Asp Lys 170 Leu Lys Ala Glu Val 175 Asn Ser Leu Glu Ser 180 Lys Leu Ile Leu Arg 185 Asp Lys Glu Lys Glu 190 Glu Asn Ser Asp Asp 195 Lys Ser Ser Pro Asp 200 Asp Ala Val Asn Ser 205 Ser Ser Pro His Asn 210 Asn Lys Glu Pro Met 215 Asp Leu Leu Ile Ile 220 Ser Lys Asn Ala Thr Thr Thr Thr Thr Ser Glu Asn Gly Thr Lys Val Leu Ser Pro Leu 225 230 235 240 Pro Leu Pro Ile Met 245 Val Thr Cys Cys Lys 250 Gln Glu Asp Ala Asn 255 Ser Ala Lys Ser Asp Val Leu Asp Ser Asp Ser Pro His Cys Thr Ser Phe 260 265 270 Val Glu Pro 275 Ala Asp Ser Ser His 280 Ala Phe Glu Pro Glu 285 Asp His Ser Glu Asp 290 Phe Ser Gln Asp Glu 295 Glu Asp Asn Leu Ser 300 Glu Asn Leu Leu Met Thr Phe Pro Ser Ser Cys Cys Leu Pro Lys Val Glu Glu His Cys 305 310 315 320 Tyr Asp Gly Pro Pro Glu Asn Ser Cys Asn Phe Gly Phe Gln Val Glu 325 330 335 Asp Gln Thr Phe 340 Cys Phe Trp Pro Tyr 34 5

<210> 21

<211> 858

<212> DNA

<213> Craterostigma plantagineum

<400> 21

atgaactctg ctcggatttt cttcgaccca gggaacgccg gcggcgattc atccgttttc atggaggaga gctcgttaaa acgacagatt gacgaggaat actacgacga gcagttgttg caggttcact tgcttgagaa gagcttcgag gctgagctgg cgaagaagct cggattgcag cgccgagcac ggtggaagac taagcagtta tatgattctc ttctctcaac ctacgactct gagctccttt ccctgaacga gaaattgcaa ataggtcgaa atctcagttc atcgtcgccg aagctgacgg tgaaggtgga ggaccgcctg gacggcgacg gacctcagca gctcctcgac

tcttcccacg gcaacatgct gcagtttctt 60

cgaggaacaa gatcgtcgtc ggtgctgaac 120

ttcagcggcg gcggcggcga tgaattctac 180

cctgagaaga agcgccgact caccgccgag 240

gctgagaaca agcttgagcc tgagcgaaag 300

ccgaggcaag tcgccatttg gttccaaaac 360

gagagggact acgacaagct taagtcttcc 420

attcgccagg aaaacgacaa gctcaaagcc 480

cccaaagacg acgacgaccc atcggccgaa 540

cctgtcgacg cggctgagcc gccgtgcctg 600

agcacgggga gcaacggcag cgcagtaatg 660

gacagcggcg actcgtactt cgagaacgac 720 gaggaatacg actgcgccgc cgcaagtttg gctgctgcga aggaggacga cggcagcgat 780 gagggcgggt gttacttcac cgaggctctc gcggcggagg aggaggaggc gccgtttgct 840 tggtgtattt ggtcttaa 858

<210> 22 <211> 285 <212> PRT

<213> Craterostigma plantagineum <400> 22

Met Asn Ser Ala Arg Ile Phe Phe Asp Pro Ser Ser His Gly Asn Met 15 10 15

Leu Gln Phe Leu Gly Asn Ala Gly Gly Asp Ser Ser Val Phe Arg Gly

20 25 30

Thr Arg Ser Ser Ser Val Leu Asn Met Glu Glu Ser Ser Leu Lys Arg

35 40 45

Gln Ile Phe Ser Gly Gly Gly Gly Asp Glu Phe Tyr Asp Glu Glu Tyr

50 55 60

Tyr Asp Glu Gln Leu Leu Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ala Glu 65 70 75 80

Gln Val His Leu Leu Glu Lys Ser Phe Glu Ala Glu Asn Lys Leu Glu

85 90 95

Pro Glu Arg Lys Ala Glu Leu Ala Lys Lys Leu Gly Leu Gln Pro Arg

100 105 110

Gln Val Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys

115 120 125

Gln Leu Glu Arg Asp Tyr Asp Lys Leu Lys Ser Ser Tyr Asp Ser Leu

130 135 140

Leu Ser Thr Tyr Asp Ser Ile Arg Gln Glu Asn Asp Lys Leu Lys Ala 145 150 155 160

Glu Leu Leu Ser Leu Asn Glu Lys Leu Gln Pro Lys Asp Asp Asp Asp

165 170 175

Pro Ser Ala Glu Ile Gly Arg Asn Leu Ser Ser Ser Ser Pro Pro Val

180 185 190

Asp Ala Ala Glu Pro Pro Cys Leu Lys Leu Thr Val Lys Val Glu Asp

195 200 205

Arg Leu Ser Thr Gly Ser Asn Gly Ser Ala Val Met Asp Gly Asp Gly

210 215 220

Pro Gln Gln Leu Leu Asp Asp Ser Gly Asp Ser Tyr Phe Glu Asn Asp 225 230 235 240

Glu Glu Tyr Asp Cys Ala Ala Ala Ser Leu Ala Ala Ala Lys Glu Asp

245 250 255

Asp Gly Ser Asp Glu Gly Gly Cys Tyr Phe Thr Glu Ala Leu Ala Ala

260 265 270

Glu Glu Glu Glu Ala Pro Phe Ala Trp Cys Ile Trp Ser 275 280 285

<210> 23

<211> 813

<212> DNA

<213> Gossypium hirsutum <220>

<221> variação <222> (808)..(808)

<223> /substituir="c" /substituir=ng" /substituir="t"

<400> 23

atggagtctg gccgtctttt tttcaatccc tccactaccc gggaacactg aacccatctt tcgaggggca agaacaatgg aagaagcgac tgttcttcag ctcgccggag gatttgtacg cagttgcccg agaaaaagcg tcgccttacg tcggagcagg tttgaggcag agaacaagct ggagccggag aggaagagcc ctgcaaccaa ggcaggtggc ggtatggttc cagaaccgcc cagcttgaaa gggactatga cctcctcaaa tcttcctttg

gctgagatgg cctccgccct ccaattcagt atge agtgtcggaa gcgcggtggt ggatgaggat gccc tactttccaa gcgatgaata ctccagaggc attc gatgaggatg gcagtgataa ttgcgggagt tact cagggagcat taggattgtg ggcctggatc taa

<210> 24

<211> 270

<212> PRT

<213> Gossypium hirsutum <220>

<221> Inseguro

accgcaacat gttgcttctc 60 ttagcatgga ggaaaaccca 120 acgaagagta ctacgacgag 180 tgtatctgct agagaagagc 240 agttggccaa gaagttagga 300 gtgcaaggtg gaagacaaag 360 attcccttca gtccaattat 420 tagcttcctt gactgaaaaa 480 aaaaggatga agggttagca 540 aggaccgtct tagtagcggc 600 tggtggacag cggcaattcc 660 tcgatggggt tcagtcggaa 720 atgtgttcgc aaccacagag 780 813

<222> (270) . . (270) <223> Xaa pode ser qualquer , aminoácido ocorrendo <400> 24 Met Glu Ser Gly Arg Leu Phe Phe Asn Pro Ser Thr Thr His Arg Asn 1 5 10 15 Met Leu Leu Leu Gly Asn Thr Glu Pro Ile Phe Arg Gly Ala Arg Thr 20 25 30 Met Val Ser Met Glu Glu Asn Pro Lys Lys Arg Leu Phe Phe Ser Ser 35 40 45 Pro Glu Asp Leu Tyr Asp Glu Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Leu Pro Glu 50 55 60 Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ser Glu Gln Val Tyr Leu Leu Glu Lys Ser 65 70 75 80 Phe Glu Ala Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Ser Gln Leu Ala 85 90 95 Lys Lys Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Val Trp Phe Gln Asn 100 105 110 Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Arg Asp Tyr Asp Leu 115 120 125 Leu Lys Ser Ser Phe Asp Ser Leu Gln Ser Asn Tyr Asp Thr Ile Leu 130 135 140 Lys Glu Asn Glu Lys Leu Lys Ser Glu Val Ala Ser Leu Thr Glu Lys 145 150 155 160 Leu Gln Ala Lys Asp Val Ala Thr Glu Ala Ile Ala Gly Glu Lys Asp 165 170 175 Glu Gly Leu Ala Ala Glu Met Ala Ser Ala Leu Gln Phe Ser Met Lys 180 185 190 Val Glu Asp 195 Arg Leu Ser Ser Gly 200 Ser Val Gly Ser Ala 205 Val Val Asp Glu Asp 210 Ala Pro Gln Leu Val 215 Asp Ser Gly Asn Ser 220 Tyr Phe Pro Ser Asp Glu Tyr Ser Arg Gly Ile Gly Pro Phe Asp Gly Val Gln Ser Glu 225 230 235 240 Asp Glu Asp Gly Ser 245 Asp Asn Cys Gly Ser 250 Tyr Phe Ser Asp Val 255 Phe Ala Thr Thr Glu 260 Gln Gly Ala Leu Gly 265 Leu Trp Ala Trp Xaa 270

<210> 25

<211> 858

<212> DNA

<213> Lycopersicon

esculentum

<220>

<221> variação

<222> (294)..(294)

<223> /substituir=nc" /substituir=ng" /substituir=ntn

<400> 25

atgggatctg ggcatatatt tttcgacccg tcgtcgtgtc acggcaacat gctgttcctt 60

gggagcggag atcctgtttt ccgaggacca agatcgacga tgatgaagat ggaggactcc 120

tcgaagaggc gacccttctt tagctcgccg gaggatctat atgacgagga atactacgac 180

gagcagtcac cggagaagaa gcgccgtctc actcctgagc aggtgcactt gttggagaag 240

agctttgaga cagaaaacaa gctggagccc gagcgcaaaa cccagctggc ctaaaagctg 300

gggctgcagc ccagacaggt ggctgtatgg ttccaaaacc gccgtgcccg gtggaagacc 360

aagcagctcg agagggatta tgatcagctc aaatcctctt atgactccct tctctctgat 420

tttgactccg ttcgcaaaga taacgataag ctcaaatctg aggttgtttc attgatggaa 480

aagttacagg ggaaagtggt tggaggagca gggggaaatg aaaaatctga catcttggag 540

gtggatgcta tgacgatcct tcaagtgaag gtgaaggctg gggaccggtt gagcagtggc 600

agtggtggga gcgcggtggt agatgagcat agttcacagc tggtggacag tggggactca 660

tattttcaca ctgatcatga ggagtatcca gggcctggag gatgcaatgt tcctccaccc 720

atggatggtt tacaatcgga ggaagatgat ggtagtgatg atcatggcag ttgccatggc 780

tacttctcta acgtctttgt ggcagaagag cagcaccatg aacaaggaga agagcctatt 840

ggatggttct ggtcttaa 858

<210> 26 <211> 285 <212> PRT

<213> Lycopersicon esculentum

<220>

<221> Inseguro

<222> (98)..(98)

<223> Xaa pode ser qualquer aminoácido ocorrendo naturalmente

<400> 26

Met Gly Ser Gly His Ile Phe Phe 1 5

Met Leu Phe Leu Gly Ser Gly Asp 20

Thr Met Met Lys Met Glu Asp Ser

Asp Pro Ser Ser Cys His Gly Asn

10 15

Pro Val Phe Arg Gly Pro Arg Ser 25 30

Ser Lys Arg Arg Pro Phe Phe Ser 35 40 Ser Pro 50 Glu Asp Leu Tyr Asp 55 Glu Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Pro 65 70 Ser Phe Glu Thr Glu 85 Asn Lys Leu Ala Xaa Lys Leu 100 Gly Leu Gln Pro Asn Arg Arg 115 Ala Arg Trp Lys Thr 120 Gln Leu 130 Lys Ser Ser Tyr Asp 135 Ser Arg Lys Asp Asn Asp Lys Leu Lys 145 150 Lys Leu Gln Gly Lys 165 Val Val Gly Asp Ile Leu Glu 180 Val Asp Ala Met Ala Gly Asp Arg Leu Ser Ser Gly 195 200 Glu His 210 Ser Ser Gln Leu Val 215 Asp Asp His Glu Glu Tyr Pro Gly Pro 225 230 Met Asp Gly Leu Gln 245 Ser Glu Glu Ser Cys His Gly 260 Tyr Phe Ser Asn His Glu Gln 275 Gly Glu Glu Pro Ile 280

<210> 27 <211> 972 <212> DNA

<213> Lycopersicon esculentum <400> 27

atggctccag ggattctcta tggtggttet cagagagacg tgttttcttc atctactgca cctgcctctt cttcttctaa tttcttggga aatggaggga agagatcatt ctttgattcg ttgggggaat atcttcatca agcggagaag tttcttgaga agagttttgg ggaagagaac gctaaagaac ttggtctgca gcctcgccaa cgatggaaga ctaagcagct cgagaaagat ctgaaatcaa attacaataa tcttctcaag cgtctcaccg gtaagctgtt tatcaaagag gaacacaaac actccaatgc attggcaaaa ccagctctgg ttgttaagca ccagcaggaa gactcagaaa gcccacgtta caccagtaga tctgctcgcg catttgaaac tgatcagtcg agcaagaata tgctttctac tgccaaccta gcgacatcat caaatttgag ttactttgga

45 Glu Tyr Tyr Asp Glu Gln Ser Pro 60 Glu Gln Val His Leu Leu Glu Lys 75 80 Glu Pro Glu Arg Lys Thr Gln Leu 90 95 Arg Gln Val Ala Val Trp Phe Gln 105 110 Lys Gln Leu Glu Arg Asp Tyr Asp 125 Leu Leu Ser Asp Phe Asp Ser Val 140 Ser Glu Val Val Ser Leu Met Glu 155 160 Gly Ala Gly Gly Asn Glu Lys Ser 170 175 Thr Ile Leu Gln Val Lys Val Lys 185 190 Ser Gly Gly Ser Ala Val Val Asp 205 Ser Gly Asp Ser Tyr Phe His Thr 220 Gly Gly Cys Asn Val Pro Pro Pro 235 240 Asp Asp Gly Ser Asp Asp His Gly 250 255 Val Phe Val Ala Glu Glu Gln His 265 270 Gly Trp Phe Trp Ser

285

tctaatttcg atggcgtttt tactcaaaaa 60

ccgaaagggc atcttggttc cctttttgcc 120

tccagttcta tggtgagttt tcgcggtgtt 180

ttcgatcagg atgacaatga agctgatgaa 240

aagaggcgac ttactgacaa ccaagttcag 300

aaacttgaac cagaaagaaa agttcagctt 360

attgcaattt ggtttcagaa tcgtcgtgcg 420

tatgatgaat tgaggaatag atacgatact 480

gaaaaagaag atcttcgaac tgaagttttc 540

aaaggaaatg ggcaattgga tttgcgcgat 600

gaaaccgtgg ttgatccaat gtccaatgta 660

gatttaagct ctgctaagag tgatgttttc 720

atgcattcct cagtcgtaga tcaggatgat 780

gattcatctc aggatgatga tgaaaacttc 840

cttggcaaag acgcggatga tgattatccc 300

tttccagttg aagaccaagg ttttggtttc 960 tggacttatt aa

<210> 28

<211> 323

<212> PRT

<213> Lycopersicon esculentum

<400> 28

Met Ala Pro Gly Ile Leu Tyr Gly Gly Ser Ser Asn Phe Asp Gly Val 1 5 10 15 Phe Thr Gln Lys Gln Arg Asp Val Phe Ser Ser Ser Thr Ala Pro Lys 20 25 30 Gly His Leu Gly Ser Leu Phe Ala Pro Ala Ser Ser Ser Ser Asn Phe 35 40 45 Leu Gly Ser Ser Ser Met Val Ser Phe Arg Gly Val Asn Gly Gly Lys 50 55 60 Arg Ser Phe Phe Asp Ser Phe Asp Gln Asp Asp Asn Glu Ala Asp Glu 65 70 75 80 Leu Gly Glu Tyr Leu His Gln Ala Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Asp 85 90 95 Asn Gln Val Gln Phe Leu Glu Lys Ser Phe Gly Glu Glu Asn Lys Leu 100 105 110 Glu Pro Glu Arg Lys Val Gln Leu Ala Lys Glu Leu Gly Leu Gln Pro 115 120 125 Arg Gln Ile Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr 130 135 140 Lys Gln Leu Glu Lys Asp Tyr Asp Glu Leu Arg Asn Arg Tyr Asp Thr 145 150 155 160 Leu Lys Ser Asn Tyr Asn Asn Leu Leu Lys Glu Lys Glu Asp Leu Arg 165 170 175 Thr Glu Val Phe Arg Leu Thr Gly Lys Leu Phe Ile Lys Glu Lys Gly 180 185 190 Asn Gly Gln Leu Asp Leu Arg Asp Glu His Lys His Ser Asn Ala Leu 195 200 205 Ala Lys Glu Thr Val Val Asp Pro Met Ser Asn Val Pro Ala Leu Val 210 215 220 Val Lys His Gln Gln Glu Asp Leu Ser Ser Ala Lys Ser Asp Val Phe 225 230 235 240 Asp Ser Glu Ser Pro Arg Tyr Thr Ser Arg Met His Ser Ser Val Val 245 250 255 Asp Gln Asp Asp Ser Ala Arg Ala Phe Glu Thr Asp Gln Ser Asp Ser 260 265 270 Ser Gln Asp Asp Asp Glu Asn Phe Ser Lys Asn Met Leu Ser Thr Ala 275 280 285 Asn Leu Leu Gly Lys Asp Ala Asp Asp Asp Tyr Pro Ala Thr Ser Ser 290 295 300 Asn Leu Ser Tyr Phe Gly Phe Pro Val Glu Asp Gln Gly Phe Gly Phe 305 310 315 320 Trp Thr Tyr

<210> 29 <211> 1014 <212> DNA <213> Medicago sativa <400> 29

atggcgggtg ggagagtttt ttcaaatggt cctgcaaata tttcaaatat aaatatgaat 60

attttgcttc agaatcaaca acaaactcct cgtggaaact cttctcaaca acctcttgat 120

tctcttttcc tttcttcttc tgcttctttc tttggttcaa gatctatggt gagttttgaa 180

gatgttcaag gaaggaaaag gcgcaacagg tctttctttg gaggatttga tcttgacgaa 240

aacggagagg atgagatgga tgagtacttt catcaatccg agaagaaacg gcgtctctca 300

gtggatcaag ttcagtttct tgagaaaagc tttgaggagg acaacaaact tgaaccagag 360

aggaaaacca agctagctaa agaccttggt ttgcagccac ggcaagttgc tatttggttt 420

caaaaccgtc gtgcaaggtg gaagactaaa cagcttgaga aggattatga ttctcttaat 480

gatggttatg agtctcttaa gacagagtat gacaaccttc tcaaagagaa agataggtta 540

caatctgagg tggcaagcct aactgaaaag gtacttgaaa gagagaaaca agagggaaaa 600

ttcaaacaag gtgaaagtga aacaaaggaa ttcttgaagg aaccaacaat taataagcct 660

ttggttgatt cagtttctga gggtgaagga tccaaattgt caattgttga ggcttctaat "720

aataataata ataataacaa acttgaagat attagttcag caaggagtga catattggat 780

tgtgaaagtc cácgctacac tgatggagtg ttagagacat gtgattcttc ctatgtattt 840

gaacctgaat atcaatcgga cctatcacaa gatgaagaag atcacaattt attgcctcct 900

tacatcttta caaaacttga agatgtgaat tactccgacc cgccacataa ttcaacaagt 960

tatggatttc aagaggaaga tcatcatcaa gctctttggc cttggtctta ttag 1014

<210> 30 <211> 337 <212> PRT

<213> Medicago sativa

<400> 30

Met Ala Gly Gly Arg Val Phe Ser Asn Gly Pro Ala Asn Ile Ser Asn 1 5 10 15 Ile Asn Met Asn Ile Leu Leu Gln Asn Gln Gln Gln Thr Pro Arg Gly 20 25 30 Asn Ser Ser Gln Gln Pro Leu Asp Ser Leu Phe Leu Ser Ser Ser Ala 35 40 45 Ser Phe Phe Gly Ser Arg Ser Met Val Ser Phe Glu Asp Val Gln Gly 50 55 60 Arg Lys Arg Arg Asn Arg Ser Phe Phe Gly Gly Phe Asp Leu Asp Glu 65 70 75 80 Asn Gly Glu Asp Glu Met Asp Glu Tyr Phe His Gln Ser Glu Lys Lys 85 90 95 Arg Arg Leu Ser Val Asp Gln Val Gln Phe Leu Glu Lys Ser Phe Glu 100 105 110 Glu Asp Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Thr Lys Leu Ala Lys Asp 115 120 125 Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg 130 135 140 Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Lys Asp Tyr Asp Ser Leu Asn 145 150 155 160 Asp Gly Tyr Glu Ser Leu Lys Thr Glu Tyr Asp Asn Leu Leu Lys Glu 165 170 175 Lys Asp Arg Leu Gln Ser Glu Val Ala Ser Leu Thr Glu Lys Val Leu 180 185 190 Glu Arg Glu Lys Gln Glu Gly Lys Phe Lys Gln Gly Glu Ser Glu Thr 195 200 205 Lys Glu Phe Leu Lys Glu Pro Thr Ile Asn Lys Pro Leu Val Asp Ser 210 Val Ser 225

Asn Asn

Asp Ile

Thr Cys

Ser Gln 290 Lys Leu 305

Tyr Gly Tyr

Glu Gly Glu

Asn Asn Asn 245

Leu Asp Cys 260 Asp Ser Ser 275

Asp Glu Glu

Glu Asp Val

Phe Gln Glu 325

215 Gly Ser 230

Asn Lys

Glu Ser

Tyr Val

Asp His 295 Asn Tyr 310

Glu Asp

Lys Leu Ser

Leu Glu Asp 250

Pro Arg Tyr

265 Phe Glu Pro 280

Asn Leu Leu

Ser Asp Pro

His His Gln 330

220 Ile Val Glu 235

Ile Ser Ser

Thr Asp Gly

Glu Tyr Gln 285

Pro Pro Tyr

300 Pro His Asn 315

Ala Leu Trp

Ala Ser Asn 240

Ala Arg Ser

255 Val Leu Glu 270

Ser Asp Leu

Ile Phe Thr

Ser Thr Ser 320

Pro Trp Ser 335

<210>. 31 <211> 843 <212> DNA

<213> Aquilegia formosa χ Aquilegia pubescens <400> 31

atggattcaa caacaagccg ttagggagtg gagatcccgt ttgaaaagac gtccttttta gaacagctac ctgaaaagaa agctttgaga cagagaacaa gggttgcaac cgagacaagt aagcaactag agagagatta tacgatgaca ttgttaaaga aagttgcagg tcaaggaggg tccactgaag aaaatgttga ttgagctctg gcagtggggt agtgttgatt cctatttccc gtccagtcag aagaagatga ccagctgcac cagagcagaa taa

<210> 32 <211> 280 <212> PRT

<213> Aquilegia formosa χ Aquilegia pubescens <400> 32

Met Asp Ser Thr Thr Ser Arg Leu Phe Phe Asp Gly Ser Cys His Gly 1 5 10 15 Asn Met Leu Leu Leu Gly Ser Gly Asp Pro Val Leu Arg Gly Ser Arg 20 25 30 Ser Phe Ile Asn Met Glu Asp Ser Leu Lys Arg Arg Pro Phe Tyr Ser 35 40 45 Ser Thr Asp Glu Leu Ile Glu Glu Glu Phe Tyr Asp Glu Gln Leu Pro

50 55 60

tcttttcttt gatggttcct gccatgggaa catgttgctt 60

tcttcgaggt tcaagatcat tcattaatat ggaagattct 120

tagttcaaca gatgaactaa ttgaagagga gttttatgat 180

acgtcgtctt acttctgagc aggttcatct attggagaag 240

gctggaacca gatcgtaaga cccagcttgc taagaagctt 300

tgcagtttgg tttcagaata gacgagctcg ttggaagact 360

tgatcttctt aaagcttctt atgattccct tcgttctgat 420

gaatgagaag ctcaaatctg aggtggtttc cttaactggg 480

agctgggatg gagttaaatc agatatctga cccaccactc 540

tgtaactacg atgcaattta atgttaaggt tgaggatcgc 600

aagtgctgtg gttgatgagg aatgtcgaca gcttgttgac 660

tggcgatgac tatggtcaat gcataggccc agtagatgga 720

cattagtgac gacagccgga gctatttctc agatgtcttt 780

ccaccaggag agtgagacat tgggttggtg ggactgggct 840 Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ser Glu Gln Val His Leu Leu Glu Lys 65 70 75 80 Ser Phe Glu Thr Glu 85 Asn Lys Leu Glu Pro 90 Asp Arg Lys Thr Gln 95 Leu Ala Lys Lys Leu 100 Gly Leu Gln Pro Arg 105 Gln Val Ala Val Trp 110 Phe Gln Asn Arg Arg 115 Ala Arg Trp Lys Thr 120 Lys Gln Leu Glu Arg 125 Asp Tyr Asp Leu Leu 130 Lys Ala Ser Tyr Asp 135 Ser Leu Arg Ser Asp 140 Tyr Asp Asp Ile Val Lys Glu Asn Glu Lys Leu Lys Ser Glu Val Val Ser Leu Thr Gly 145 150 155 160 Lys Leu Gln Val Lys 165 Glu Gly Ala Gly Met 170 Glu Leu Asn Gln Ile 175 Ser Asp Pro Pro Leu 180 Ser Thr Glu Glu Asn 185 Val Asp Val Thr Thr 190 Met Gln Phe Asn Val 195 Lys Val Glu Asp Arg 200 Leu Ser Ser Gly Ser 205 Gly Val Ser Ala Val 210 Val Asp Glu Glu Cys 215 Arg Gln Leu Val Asp 220 Ser Val Asp Ser Tyr Phe Pro Gly Asp Asp Tyr Gly Gln Cys Ile Gly Pro Val Asp Gly 225 230 235 240 Val Gln Ser Glu Glu 245 Asp Asp Ile Ser Asp 250 Asp Ser Arg Ser Tyr 255 Phe Ser Asp Val Phe 260 Pro Ala Ala Pro Glu 265 Gln Asn His Gln Glu 270 Ser Glu Thr Leu Gly 275 Trp Trp Asp Trp Ala 280

<210> 33

<211> 2193

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 33

aatccgaaaa gtttctgcac cgttttcacc ccctaactaa caatataggg aacgtgtgct 60

aaatataaaa tgagacctta tatatgtagc gctgataact agaactatgc aagaaaaact 120

catccaccta ctttagtggc aatcgggcta aataaaaaag agtcgctaca ctagtttcgt 180

tttccttagt aattaagtgg gaaaatgaaa tcattattgc ttagaatata cgttcacatc 240

tctgtcatga agttaaatta ttcgaggtag ccataattgt catcaaactc ttcttgaata 300 aaaaaatctt tctagctgaa ctcaatgggt aaagagagag atttttttta aaaaaataga 360

atgaagatat tctgaacgta ttggcaaaga tttaaacata taattatata attttatagt 420

ttgtgcattc gtcatatcgc acatcattaa ggacatgtct tactccatcc caatttttat 480 ttagtaatta aagacaattg acttattttt attatttatc ttttttcgat tagatgcaag 540

gtacttacgc acacactttg tgctcatgtg catgtgtgag tgcacctcct caatacacgt 600

tcaactagca acacatctct aatatcactc gcctatttaa tacatttagg tagcaatatc 660

tgaattcaag cactccacca tcaccagacc acttttaata atatctaaaa tacaaaaaat 720

aattttacag aatagcatga aaagtatgaa acgaactatt taggtttttc acatacaaaa 780

aaaaaaagaa ttttgctcgt gcgcgagcgc caatctccca tattgggcac acaggcaaca 840 acagagtggc tgcccacaga acaacccaca aaaaacgatg atctaacgga ggacagcaag 900

tccgcaacaa ccttttaaca gcaggctttg cggccaggag agaggaggag aggcaaagaa 960

aaccaagcat cctcctcctc ccatctataa attcctcccc ccttttcccc tctctatata 1020

ggaggcatcc aagccaagaa gagggagagc accaaggaca cgcgactagc agaagccgag 1080

cgaccgcctt cttcgatcca tatcttccgg tcgagttctt ggtcgatctc ttccctcctc 1140 cacctcctcc tgtagtacgg gatttgggat ggttttcaat gattttgtga aataaaagta ctatcctttg atgagattga acagtagtcc cctgttcttc ctttctggtt gctgtagttc tttctgatct attatttttt tgtcctcaat cctgtagaag agctgtaatc tggtgt.agct

tcacagggta gcgttgatgt agaggggttc cgtctggaga gtaccttttg cggttgtttg tttattccct atgattgatt ccatcacgaa cgatttgctt cagttcaatg agttaatagg ccatttttaa ttattagctc tttgttttca tttctttttg gggatagtta tgccactttc

tgtgcccttc taggaaaggg ttgatgttgc gctctatgga tttgaggtaa gtcctcgatt attgaacaaa cttaagcctg attcatggaa tagtcccaga aattgattgc taatacccct ttatatgaaa tcaccccttc aattcacatc gttattcctt tactgcttgt accagcaaag

ggttgttctt gatctgtatc atgttatcgg aatgaaatgg aatcagagca ctggtagtga aataatccaa tccaaaattt acagttataa attttttttc tacaaataat atagtttagt tgaactgtag attattctga gattatctat gactgcttga tcttatgatt ttc

ggatttattg tgtgatgatt ttcggtttga tttagggtac ccggtgattt tgcttctcga ctttgaagac cgcagctggc tcctcaggaa ccaaatatct gcttttatag caggagaaga cataagcagt gctgaaagtc gcattatcct ttacagaaag catttccttt

ttctaggttg cctgttcttg ttagtagtat ggaatcttgc tgcttggtgt tttgacgaag ggtcccgttg ttgtttagat caggggattc taaaaagtca cgttatccta acttatccga attcatttgg tggcatgaac cttgtatcta aaatttatga gtgcagttct

1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2193

<210> 34

<211> 49

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Iniciador: prm6000

<400> 34

ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctt aaacaatgga tcccggccg

<210> 35

<211> 48

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

49

<220>

<223> ' Iniciador: prm6001

<400> 35

ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtg atcagctcca gaaccagg

48

<210> 36

<211> 834

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 36

atgaagcgac

aattctagtg

gagatgatgg

cgcgcgctgg

ctggcgcgcg

gcgcggtgga

tccctgcgcc

ccggcggtgc atgatggata cgtgcggcgg agcggagctt acctcggcct agaccaagca tcgatcacga

cggcggcggc tggaggggtt cggcggggag cgaggtggag gcagccgcgc gctcgagcgc cgcgctccgc

ggaggcagcc gggatggagg aagaagcggc aacaagcttg caggtcgccg gactacgccg cgcgacaagg

catcgctcgt cggaggggga ggctgagcgt agcctgagcg tctggttcca cgctccgcca acgccctcct

cacgatggct cgtggaggag ggagcaggtt gaaggcgcgg gaaccgccgc ttcctacgac cgccgagatc

60 120 180 240 300 360 420 aaggagctga aggcgaagct cggggacgag gaggcggcgg cgagcttcac gtcggtgaag gaggagccgg cggcctccga cgggccaccg gcggcgggat ttgggtcgtc cgacagcgac tcaagcgcgg tgctgaacga cgtggacgcg gccggcgccg cgcccgcggc gacggacgcg ctggctccgg aggcgtgcac gtttctcggt gcgccgcccg ccgcgggcgc gggcgcgggc gcagcggcgg cggcgagcca cgaggaggtg ttcttccacg gcaatttcct caaggtggag gaggacgaga cggggttcct cgacgacgac gagccgtgcg gcgggttctt cgccgacgat cagcccccgc cgctctcgtc gtggtgggcc gaacccacgg agcactggaa ctga

480 540 600 660 720 780 834

<210> 37

<211> 277

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 37

Met Lys Arg Pro Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ser Leu 15 10 15

Val Thr Met Ala Asn Ser Ser Asp Asp Gly Tyr Gly Gly Val Gly Met

20 25 30

Glu Ala Glu Gly Asp Val Glu Glu Glu Met Met Ala Cys Gly Gly Gly

35 40 45

Gly Glu Lys Lys Arg Arg Leu Ser Val Glu Gln Val Arg Ala Leu Glu

50 55 60

Arg Ser Phe Glu Val Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Ala Arg 65 70 75 80

Leu Ala Arg Asp Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Val Trp Phe

85 90 95

Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Arg Asp Tyr

100 105 110

Ala Ala Leu Arg His Ser Tyr Asp Ser Leu Arg Leu Asp His Asp Ala

115 120 125

Leu Arg Arg Asp Lys Asp Ala Leu Leu Ala Glu Ile Lys Glu Leu Lys

130 135 140

Ala Lys Leu Gly Asp Glu Glu Ala Ala Ala Ser Phe Thr Ser Val Lys 145 150 155 160

Glu Glu Pro Ala Ala Ser Asp Gly Pro Pro Ala Ala Gly Phe Gly Ser

165 170 175

Ser Asp Ser Asp Ser Ser Ala Val Leu Asn Asp Val Asp Ala Ala Gly

180 185 190

Ala Ala Pro Ala Ala Thr Asp Ala Leu Ala Pro Glu Ala Cys Thr Phe

195 200 205

Leu Gly Ala Pro Pro Ala Ala Gly Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala

210 215 220

Ala Ser His Glu Glu Val Phe Phe His Gly Asn Phe Leu Lys Val Glu 225 230 235 240

Glu Asp Glu Thr Gly Phe Leu Asp Asp Asp Glu Pro Cys Gly Gly Phe

245 250 255

Phe Ala Asp Asp Gln Pro Pro Pro Leu Ser Ser Trp Trp Ala Glu Pro

260 265 270

Thr Glu His Trp Asn 275

<210> 38 <211> 750 <212> DNA <213> Oryza sativa

<400> 38

atggatgggg aggaggacag cgagtggatg atgatggacg ttggagggaa gggcgggaag ggcggcggcg gcggcggcgc ggcggacagg aagaagcggt tcagcgagga gcagatcaag tcgctggagt ccatgttcgc gacgcagacc aagctggagc cgaggcagaa gctgcagctc gccagggagc tcggcctgca gcctcgccag gtcgccatct ggttccagaa caagcgcgcg cggtggaagt ccaagcagct cgagcgcgag tactccgccc tccgcgacga ctacgacgcc ctcctctgca gctacgagtc cctcaagaag gagaagctcg ccctcatcaa gcagctggag aagctggcgg agatgctgca ggagccacgg gggaagtacg gcgataatgc cggggacgac gcgcggtcgg gcggcgtcgc cggcatgaag aaggaggagt tcgtcggcgc gggcggcgcc gccacgctct actcgtcggc cgagggtggc gggacgacga cgacgacgac ggccaagttg atgccccact tcggcagcga cgacgtcgac gcggggctct tcctccggcc gtcgtcgcag catcatccgc cgccgccgca cgccggtgcc ggcttcacgt cctccgagcc ggccgccgac caccagtcct tcaacttcca ctcgagctgg ccgtcgtcca cggagcagac ctgcagcagc acgccatggt gggaattcga gagcgagtga

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 750

<210> 39

<211> 249

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 39

Met Asp Gly Glu Glu Asp Ser Glu Trp Met Met Met Asp Val Gly Gly 15 10 15

Lys Gly Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ala Ala Asp Arg Lys Lys

20 25 30

Arg Phe Ser Glu Glu Gln Ile Lys Ser Leu Glu Ser Met Phe Ala Thr

35 40 45

Gln Thr Lys Leu Glu Pro Arg Gln Lys Leu Gln Leu Ala Arg Glu Leu

50 55 60

Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Ile Trp Phe Gln Asn Lys Arg Ala 65 70 75 80

Arg Trp Lys Ser Lys Gln Leu Glu Arg Glu Tyr Ser Ala Leu Arg Asp

85 90 95

Asp Tyr Asp Ala Leu Leu Cys Ser Tyr Glu Ser Leu Lys Lys Glu Lys

100 105 110

Leu Ala Leu Ile Lys Gln Leu Glu Lys Leu Ala Glu Met Leu Gln Glu

115 120 125

Pro Arg Gly Lys Tyr Gly Asp Asn Ala Gly Asp Asp Ala Arg Ser Gly

130 135 140

Gly Val Ala Gly Met Lys Lys Glu Glu Phe Val Gly Ala Gly Gly Ala 145 150 155 160

Ala Thr Leu Tyr Ser Ser Ala Glu Gly Gly Gly Thr Thr Thr Thr Thr

165 170 175

Thr Ala Lys Leu Met Pro His Phe Gly Ser Asp Asp Val Asp Ala Gly

180 185 190

Leu Phe Leu Arg Pro Ser Ser Gln His His Pro Pro Pro Pro His Ala

195 200 205

Gly Ala Gly Phe Thr Ser Ser Glu Pro Ala Ala Asp His Gln Ser Phe

210 215 220

Asn Phe His Ser Ser Trp Pro Ser Ser Thr Glu Gln Thr Cys Ser Ser 225 230 235 240

Thr Pro Trp Trp Glu Phe Glu Ser Glu <210> 40

<211> 945

<212> DNA

<213> Populus

tremuloides

<400> 40

atggcgggtg gtaccggtgg ttctaattcc ggcccttgtg ctgcttcaca acctcttgaa tttcttggtt caagatccat gatgagtttt aggccttttt tccgctcgtt tgatcacgaa tttcatcaac ctgaaaagaa gaggagactt agttttgagc ttgagaacaa gcttgaacct ggccttcagc cgcgtcaggt tgctatatgg aaacagctgg aaaaggatta tgacgttttg tatgacaacc tcctcaagga gaaggagaaa aagttgctcc tcaaagagaa agagaaggga tcgcaagagc cacctaaaag ggctatagct atctcaacag tggcctgtaa gcaggaagat tcagacagcc cacattacgc tgatggggtg tcatatgttt tcgaacccga tcaatcagat aagagcttat tgcctccata cgtctttccg cctgcaagtt ttgaagatca tgccttttgg

aatttgtctg ttttgcttca aagccaaaga 60

tcttttttcc tttctggctc ttctccttct 120

gaagatgttc atcaagcaaa cggatcaacc 180

gacaatggag acgatgatct ggatgaatat 240

actgttgatc aagttcagtt tcttgaaaag 300

gaaaggaaaa tccagcttgc aaaggatctt 360

tttcaaaacc gccgagcaag atggaagact 420

caatctagct acaatagcct taaggctgac 480

ctaaaagctg aggttaatct tctcaccgac 540

atctcagaat tgtctgataa agatgcatta 600

gattcagctt ccgagggtga agtgtcgaaa 660

atcagctcag ccaaaagcga catatttgat 720

cattcctcac tcttagaggc aggagattct 7 80

ttgtcacaag atgaagaaga taactttagc 840

aagcttgaag atgacgatta ctctgacccg 900

tcctggtcat actaa 945

<210> 41

<211> 314

<212> PRT

<213> Populus tremuloides

<400> 41

Met Ala Gly Gly Thr Gly Gly Ser Asn Ser Asn Leu Ser Val Leu Leu 15 10 15

Gln Ser Gln Arg Gly Pro Cys Ala Ala Ser Gln Pro Leu Glu Ser Phe

20 25 30

Phe Leu Ser Gly Ser Ser Pro Ser Phe Leu Gly Ser Arg Ser Met Met

35 40 45

Ser Phe Glu Asp Val His Gln Ala Asn Gly Ser Thr Arg Pro Phe Phe

50 55 60

Arg Ser Phe Asp His Glu Asp Asn Gly Asp Asp Asp Leu Asp Glu Tyr 65 70 75 80

Phe His Gln Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Val Asp Gln Val Gln

85 90 95

Phe Leu Glu Lys Ser Phe Glu Leu Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg

100 105 110

Lys Ile Gln Leu Ala Lys Asp Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala

115 120 125

Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu

130 135 140

Lys Asp Tyr Asp Val Leu Gln Ser Ser Tyr Asn Ser Leu Lys Ala Asp 145 150 155 160

Tyr Asp Asn Leu Leu Lys Glu Lys Glu Lys Leu Lys Ala Glu Val Asn

165 170 175

Leu Leu Thr Asp Lys Leu Leu Leu Lys Glu Lys Glu Lys Gly Ile Ser 180 185 190 Glu Leu Ser Asp Lys Asp Ala Leu Ser Gln Glu Pro Pro Lys Arg Ala 195 200 205 Ile Ala Asp Ser Ala Ser Glu Gly Glu Val Ser Lys Ile Ser Thr Val 210 215 220 Ala Cys Lys Gln Glu Asp Ile Ser Ser Ala Lys Ser Asp Ile Phe Asp 225 230 235 240 Ser Asp Ser Pro His Tyr Ala Asp Gly Val His Ser Ser Leu Leu Glu 245 250 255 Ala Gly Asp Ser Ser Tyr Val Phe Glu Pro Asp Gln Ser Asp Leu Ser 260 265 270 Gln Asp Glu Glu Asp Asn Phe Ser Lys Ser Leu Leu Pro Pro Tyr Val 275 280 285 Phe Pro Lys Leu Glu Asp Asp Asp Tyr Ser Asp Pro Pro Ala Ser Phe 290 295 300 Glu Asp His Ala Phe Trp Ser Trp Ser Tyr 305 310

<210> 42

<211> 954

<212> DNA

<213> Populus tremuloides

<400> 42

atggcggctt

agccaaagag

tCtCCttCtt

ggatcaacta

gatgaatatt

cttgaaagaa

aaggatcttg

tggaagacga

aaggctgact

ctcaccaacg

gatgcattat

gtgtcgaaaa

atgtttgatt

ggtgattctt

aacttgagca

tctgacccgc

gtggtggtgg gcccttgtgc ttcttggttc gaccgttttt ttcatcaacc gttttgaggt gcttgcagcc aacagcttga acgacaacct agttgctcct ctcaagagcc cttcaaccgt cagacagccc cacatgtctt agagtctttt cagcaagttt

tggtggtggt tgcttctcaa aagatccatg ccgcccatat tgaaaagaag tgagaacaag tcggcaggtt aaaagattat cttcaaggag taaagagaaa acccaaaaag ggcctgccag acattttgcg cgagcccgac gcctccgtac tgaagatcat

tctaatccca cctcttgaag atgagttttg gatcacgaag aggagactta cttgaacccg gccatatggt gaggttctgc aaggagaaac gagaaaggaa gcaatagccg caggaagata gatggggtac caatcggatt gtctttccaa gccttttggt

atttgtctgt

CttttttCCt

cagatgttca acaacggcga ctgttgatca aaaggaaaat ttcaaaaccg aatctagcta taaaagctga gctcagaatt attcagcttc ttagctcagc attcctcact tatcacaaga agcttgaaga gctggtcata

tttagttcaa ttctggctct ccaagcaaat cgatgatttg agttcagttt ccagctggcg ccgggcaaga caatggcctt ggttaatctt gtctgataaa agagggtgaa caaaagtgat cttagaggca tgaagaagat tggtgattac ctaa

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 954

<210> 43 <211> 317 <212> PRT

<213> Populus tremuloides <400> 43

Met Ala Ala Cys Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser Asn Pro Asn Leu Ser 15 10 15

Val Leu Val Gln Ser Gln Arg Gly Pro Cys Ala Ala Ser Gln Pro Leu

20 25 30

Glu Ala Phe Phe Leu Ser Gly Ser Ser Pro Ser Phe Leu Gly Ser Arg

35 40 45

Ser Met Met Ser Phe Ala Asp Val His Gln Ala Asn Gly Ser Thr Arg 50 55 60 Pro Phe Phe Arg Pro Tyr Asp His Glu Asp Asn Gly Asp Asp Asp Leu 65 70 75 80 Asp Glu Tyr Phe His Gln Pro Glu Lys Lys Arg Arg Leu Thr Val Asp 85 90 95 Gln Val Gln Phe Leu Glu Arg Ser Phe Glu Val Glu Asn Lys Leu Glu 100 105 110 Pro Glu Arg Lys Ile Gln Leu Ala Lys Asp Leu Gly Leu Gln Pro Arg 115 120 125 Gln Val Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys 130 135 140 Gln Leu Glu Lys Asp Tyr Glu Val Leu Gln Ser Ser Tyr Asn Gly Leu 145 150 155 160 Lys Ala Asp Tyr Asp Asn Leu Phe Lys Glu Lys Glu Lys Leu Lys Ala 165 170 175 Glu Val Asn Leu Leu Thr Asn Glu Leu Leu Leu Lys Glu Lys Glu Lys 180 185 190 Gly Ser Ser Glu Leu Ser Asp Lys Asp Ala Leu Ser Gln Glu Pro Pro 195 200 205 Lys Lys Ala Ile Ala Asp Ser Ala Ser Glu Gly Glu Val Ser Lys Thr 210 215 220 Ser Thr Val Ala Cys Gln Gln Glu Asp Ile Ser Ser Ala Lys Ser Asp 225 230 235 240 Met Phe Asp Ser Asp Ser Pro His Phe Ala Asp Gly Val His Ser Ser 245 250 255 Leu Leu Glu Ala Gly Asp Ser Ser His Val Phe Glu Pro Asp Gln Ser 260 265 270 Asp Leu Ser Gln Asp Glu Glu Asp Asn Leu Ser Lys Ser Leu Leu Pro 275 280 285 Pro Tyr Val Phe Pro Lys Leu Glu Asp Gly Asp Tyr Ser Asp Pro Pro 290 295 300 Ala Ser Phe Glu Asp His Ala Phe Trp Cys Trp Ser Tyr 305 310 315 <210> 44

<211> 909 <212> DNA

<213> Populus tremuloides <400> 44

atggcgggtg ataaagactg tggcagttct aaaatgacca tttttcttcg aaacggcagg 60

ctccctcctt gtgaatctct ctgtattctc acctctttta gcactcttca tggtgcaaaa 120

tctatggtta attttaggaa tgatggagga gacactgtag acatgtcttt tttccaacca 180 catgtcaaag aagaaagtag cgatgaggat tatgatgcgc accttaagcc atctgaaaag 240

aaaaggcggc ttacagctgc tcaagtccag tttcttgaga agagctttga ggcggagaat 300 aagcttgaac cagagaggaa gatgcagctt gctaaagaac tcggcttgca gcctcgccag 360

gttgcaatat ggtttcaaaa ccgtagagct cggttcaaga acaagcagct ggaaagggac 420

tacgactcct tgagaatcag ctttgacaaa ctcaaggctg attatgacaa actcctcctc 480 gagaagcaga atttgaaaaa cgagcttctt tcactgaaag aaaaattgct tagcagagag 540 gaaagtatgg aaagttcaga accatttgat gtcatccatt caccggatgc agaacttgag 600

cctattcctg atacagtgtc tgaaaatgtt tccgccattg tgccaatggt gacacccaaa 660

caagaagaaa gttcagctaa aaatgatgtt ttcaactcag acagcccacg ttcatttttg 720

gagccccgtg attgttatcg tgttttcgag tcagaccaac cagatttttc ccaagttgaa 780 gaagataatc tcaccaggag ctttctaccc cctccgtact ttccaaaact ctaccgagag 840 ccacctgcaa gttcacgtaa ttttgaattc tcagcggaag atcagccctt ttggtcctgg 900 atttactga 909

<210> 45

<211> 302

<212> PRT

<213> Populus tremuloides

<400> 45 Met Ala Gly Asp Lys Asp Cys Gly Ser Ser Lys Met Thr Ile Phe Leu 1 5 10 15 Arg Asn Gly Arg Leu Pro Pro Cys Glu Ser Leu Cys Ile Leu Thr Ser 20 25 30 Phe Ser Thr Leu His Gly Ala Lys Ser Met Val Asn Phe Arg Asn Asp 35 40 45 Gly Gly Asp Thr Val Asp Met Ser Phe Phe Gln Pro His Val Lys Glu 50 55 60 Glu Ser Ser Asp Glu Asp Tyr Asp Ala His Leu Lys Pro Ser Glu Lys 65 70 75 80 Lys Arg Arg Leu Thr Ala Ala Gln Val Gln Phe Leu Glu Lys Ser Phe 85 90 95 Glu Ala Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg Lys Met Gln Leu Ala Lys 100 105 110 Glu Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg 115 120 125 Arg Ala Arg Phe Lys Asn Lys Gln Leu Glu Arg Asp Tyr Asp Ser Leu 130 135 140 Arg Ile Ser Phe Asp Lys Leu Lys Ala Asp Tyr Asp Lys Leu Leu Leu 145 150 155 160 Glu Lys Gln Asn Leu Lys Asn Glu Leu Leu Ser Leu Lys Glu Lys Leu 165 170 175 Leu Ser Arg Glu Glu Ser Met Glu Ser Ser Glu Pro Phe Asp Val Ile 180 185 190 His Ser Pro Asp Ala Glu Leu Glu Pro Ile Pro Asp Thr Val Ser Glu 195 200 205 Asn Val Ser Ala Ile Val Pro Met Val Thr Pro Lys Gln Glu Glu Ser 210 215 220 Ser Ala Lys Asn Asp Val Phe Asn Ser Asp Ser Pro Arg Ser Phe Leu 225 230 235 240 Glu Pro Arg Asp Cys Tyr Arg Val Phe Glu Ser Asp Gln Pro Asp Phe 245 250 255 Ser Gln Val Glu Glu Asp Asn Leu Thr Arg Ser Phe Leu Pro Pro Pro 260 265 270 Tyr Phe Pro Lys Leu Tyr Arg Glu Pro Pro Ala Ser Ser Arg Asn Phe 275 280 285 Glu Phe Ser Ala Glu Asp Gln Pro Phe Trp Ser Trp Ile Tyr 290 295 300 <210> 46 <211> 975

<212> DNA

<213> Medicago truncatula

<400> 46 atggcaggtg gcaagctttt tggtggttct aatatgtcac ttttgcttca aaatgaaaga ctcccttgta cttctgaagt ccttgaatct ctttgggttc acacccctgc ttcttttcaa ggttcaaatt cagtggttaa ttttgagaat ggtggtggta gcaacagagt ggtaacagat agacccttct ttcaacaact tgagaaagaa gagaattgtg gtgatgaaga ttatgaagca tgctaccatc aacaaggaaa gaaaaggagg ctttcaagtg aacaagttca atttcttgaa aagagttttg aggtagaaaa caagcttgaa cctgatagga aagttcaact tgcaaaagag cttggtttgc aaccaagaca agttgctata tggtttcaaa acagaagggc aaggttcaaa actaaacagc ttgaaaaaga ttatggcaca ttgaaagcta gctttgatag tctcaaagat gattatgata atcttcttca agagaatgac aagttaaaag aagaggtgaa ttctctcaag aacaaattga tcccaagaga taaagaaaaa gtgaattcag aagacaaatc atcaccagaa gcaatcaatt cacctcataa caacatagat ccaatggata taatttcaat tacaaattca gaaaatgggt ccaaaatgtc actccctaat atggtactaa aatgtaagca agaagatgcc aattcagcta aaagtgatgt gcttgattct gatagcccac attgcaatga tgggaacaat ctttcttctt tcatagagcc tacagattca gatttctcac aagatgaaga ggataatgat aacttgagtc ataatctttt gactcttcct tgcttaccaa aagttgaaga tgtttgctat gatgacccac atgaaaattc ttgtaatttt gggttccctg ttgaagatca aaccttttgt ttctggcctt attga

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 975

<210> 47

<211> 324

<212> PRT

<213> Medicago truncatula

<400> 47

Met Ala Gly Gly Lys Leu Phe Gly Gly Ser Asn Met Ser Leu Leu Leu 15 10 15

Gln Asn Glu Arg Leu Pro Cys Thr Ser Glu Val Leu Glu Ser Leu Trp

20 25 30

Val His Thr Pro Ala Ser Phe Gln Gly Ser Asn Ser Val Val Asn Phe

35 40 45

Glu Asn Gly Gly Gly Ser Asn Arg Val Val Thr Asp Arg Pro Phe Phe

50 55 60

Gln Gln Leu Glu Lys Glu Glu Asn Cys Gly Asp Glu Asp Tyr Glu Ala 65 70 75 80

Cys Tyr His Gln Gln Gly Lys Lys Arg Arg Leu Ser Ser Glu Gln Val

85 90 95

Gln Phe Leu Glu Lys Ser Phe Glu Val Glu Asn Lys Leu Glu Pro Asp

100 105 110

Arg Lys Val Gln Leu Ala Lys Glu Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val

115 120 125

Ala Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Phe Lys Thr Lys Gln Leu

130 135 140

Glu Lys Asp Tyr Gly Thr Leu Lys Ala Ser Phe Asp Ser Leu Lys Asp 145 150 155 160

Asp Tyr Asp Asn Leu Leu Gln Glu Asn Asp Lys Leu Lys Glu Glu Val

165 170 175

Asn Ser Leu Lys Asn Lys Leu Ile Pro Arg Asp Lys Glu Lys Val Asn

180 185 190

Ser Glu Asp Lys Ser Ser Pro Glu Ala Ile Asn Ser Pro His Asn Asn

195 200 205

Ile Asp Pro Met Asp Ile Ile Ser Ile Thr Asn Ser Glu Asn Gly Ser

210 215 220

Lys Met Ser Leu Pro Asn Met Val Leu Lys Cys Lys Gln Glu Asp Ala 225 230 235 240 Asn Ser Ala Lys Ser 245 Asp Val Leu Asp Ser 250 Asp Ser Pro His Cys 255 Asn Asp Gly Asn Asn 260 Leu Ser Ser Phe Ile 265 Glu Pro Thr Asp Ser 270 Asp Phe Ser Gln Asp 275 Glu Glu Asp Asn Asp 280 Asn Leu Ser His Asn 285 Leu Leu Thr Leu Pro 290 Cys Leu Pro Lys Val 295 Glu Asp Val Cys Tyr 300 Asp Asp Pro His Glu Asn Ser Cys Asn Phe Gly Phe Pro Val Glu Asp Gln Thr Phe Cys 305 310 315 320 Phe Trp Pro Tyr

<210> 48 <211> 984 <212> DNA

<213> Phaseolus vulgaris <400> 48

atggcgggtg gcaagcttca ctcccttgct cctctgaagt ttccaaggtt caaaatctat aggccctttt ttcaagcgtt ttccatcaac cgggtaagaa aactttgagg tcgagaacaa ggcttgcagc caaggcaagt aagcagctag aaaaagatta tatgaaagtc ttcttcaaga aaattgattc ttagagataa gtcaattcac cccacaaaga accaaagtgt cactccctat agtgatgtgc ttgattcgga gtggagcctg ctgattcctc gaagaggata atcttagtga gcctgctatg atgaccctcc accttctgtt tctggcccta

<210> 49

<211> 327

<212> PRX

<213> Phaseolus vulgaris

<400> 49 Met Ala Gly Gly Lys Leu His Pro Gly Ser Asn Met Ser Leu Leu Leu 1 5 10 15 Gln Asn Asp Arg Leu Pro Cys Ser Ser Glu Val Leu Glu Ser Leu Trp 20 25 30 Ala His Thr 35 Ser Asn Ala Ala Ser 40 Phe Gln Gly Ser Lys 45 Ser Met Val Asp Phe 50 Glu Asn Val Ser Gly 55 Gly Arg Val Thr Asp 60 Arg Pro Phe Phe Gln Ala Leu Glu Lys Glu Asp Asn Cys Asp Asp Asp Tyr Glu Gly Cys 65 70 75 80 Phe His Gln Pro Gly Lys Lys Arg Arg Leu Thr Ser Glu Gln Val Gln

tcctggttca aacatgtcac ttctcctcca aaacgacagg 60

ccttgagtct ctttgggctc acacctctaa cgctgcttcc 120

ggttgatttt gagaatgtta gtgggggcag ggtgacggat 180

ggagaaggaa gataactgtg atgatgatta tgagggttgc 240

aaggaggctc acaagcgaac aagttcagtt ccttgaaagg 300

gcttgaacct gaaaggaagg tccaacttgc aaaggagctt 360

ggctatatgg ttccaaaacc gaagggcaag gttcaagacc 420

tggcacattg aaagctagct atgacagact caaaggtgac 480

gaatgacaag ttaaaagcag aggtgaattc tctggagagc 540

agagaaggag aattcggacg acaagtcatc tcctgatgct 600

gcctatggat ttaatttcaa attcaacatc tgaaaatggg 660

tatggtaaca tgcaagcaag aagatgccaa ttcagccaaa 720

cagcccacat tgcactgatg ggaaccatcc ctcttcattc 780

ccatgctttt gaaccagacc actccgactt ctcccaagat 840

aagccttttg accctccctt gcttaccaaa ggttgaagaa 900

tgaaaaccct tgtaattttg gcttccatgt cgaggatcaa 960

ttga 984 85 90 95

Phe Leu Glu Arg Asn Phe Glu Val Glu Asn Lys Leu Glu Pro Glu Arg

100 105 110

Lys Val Gln Leu Ala Lys Glu Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala

115 120 125

Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Phe Lys Thr Lys Gln Leu Glu

130 135 140

Lys Asp Tyr Gly Thr Leu Lys Ala Ser Tyr Asp Arg Leu Lys Gly Asp 145 150 155 160

Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Glu Asn Asp Lys Leu Lys Ala Glu Val Asn

165 170 175

Ser Leu Glu Ser Lys Leu Ile Leu Arg Asp Lys Glu Lys Glu Asn Ser

180 185 190

Asp Asp Lys Ser Ser Pro Asp Ala Val Asn Ser Pro His Lys Glu Pro

195 200 205

Met Asp Leu Ile Ser Asn Ser Thr Ser Glu Asn Gly Thr Lys Val Ser

210 215 220

Leu Pro Ile Met Val Thr Cys Lys Gln Glu Asp Ala- Asn Ser Ala Lys 225 230 235 240

Ser Asp Val Leu Asp Ser Asp Ser Pro His Cys Thr Asp Gly Asn His

245 250 255

Pro Ser Ser Phe Val Glu Pro Ala Asp Ser Ser His Ala Phe Glu Pro

260 265 270

Asp His Ser Asp Phe Ser Gln Asp Glu Glu Asp Asn Leu Ser Glu Ser

275 280 285

Leu Leu Thr Leu Pro Cys Leu Pro Lys Val Glu Glu Ala Cys Tyr Asp

290 295 300

Asp Pro Pro Glu Asn Pro Cys Asn Phe Gly Phe His Val Glu Asp Gln 305 310 315 320

Thr Phe Cys Phe Trp Pro Tyr 325

<210> 50 <211> 957 <212> DNA

<213> Lotus corniculatus <400> 50

atggcgggag ggagggtctt tagcggcggt agtcttttgc ttcagaatca acctcctgat tttctcggtt caagatccat ggtgagcttc ttcttctccg cgtttgacct cgatgagaac caatcggaga agaagcgccg tctctctgtt gaggtggata acaagctcga acctgacagg cagccacgcc aagtcgcaat ctggttccag cttgagaagg attatgattc tctgcatagt aatcttctca aggagaaaga catgttaaaa cttgcaagag agaatttgaa acaagttgaa caaaggcctt tacttgattc agtttcagag tgtaaacatg aggatatcag ttcagccagg tacagggatg gatatggagt taactcagca gttgaacctg atcaatcgga tatgtcacag ttgcctccat acatgttttc caaacttgga tcatgtaatt tcggatttcc ggaggaagat

tctgctgctc ctgcaaatgt ttccgatacc 60

tcttctctct tcctctctac ctctgcttct 120

gcagataata aattagggca aacgcggtcg 180

ggcgatgagg tcatggacga gtactttcac 240

gaccaagttc agtttctgga gaagagcttc 300

aaaaccaaga ttgccaagga ccttggtttg 360

aaccgccgtg cacggtggaa gacgaaacag 420

agctttgaga gtctcaaatc caactatgat 4 80

gctgaggtgg caagtctcac tgagaaggtg 540

agtgaaacaa agggattggt tgaaccaccc 600

ggtgaagaat ctaaagtctc tgttggggct 660

agtgagagtt tggattctga tagcccacgt 720

gtgctagaga catgtgattc ttcttatgtg 780

gatgaggaag acaacctgac caagaccctg 840

gatatggatt actccgaccc gcctgaaagt 900

catgcccttt ggtcatggtc ttactga 957 <210> 51 <211> 318 <212> PRT

<213> Lotus corniculatus <400> 51

Met Ala Gly Gly Arg Val Phe Ser Gly Gly Ser Ala Ala Pro Ala Asn 15 10 15

Val Ser Asp Thr Ser Leu Leu Leu Gln Asn Gln Pro Pro Asp Ser Ser

20 25 30

Leu Phe Leu Ser Thr Ser Ala Ser Phe Leu Gly Ser Arg Ser Met Val

35 40 45

Ser Phe Ala Asp Asn Lys Leu Gly Gln Thr Arg Ser Phe Phe Ser Ala

50 55 60

Phe Asp Leu Asp Glu Asn Gly Asp Glu Val Met Asp Glu Tyr Phe His 65 70 75 80

Gln Ser Glu Lys Lys Arg Arg Leu Ser Val Asp Gln Val Gln Phe Leu

85 90 95

Glu Lys Ser Phe Glu Val Asp Asn Lys Leu Glu Pro Asp Arg Lys Thr

100 105 110

Lys Ile Ala Lys Asp Leu Gly Leu Gln Pro Arg Gln Val Ala Ile Trp

115 120 125

Phe Gln Asn Arg Arg Ala Arg Trp Lys Thr Lys Gln Leu Glu Lys Asp

130 135 140

Tyr Asp Ser Leu His Ser Ser Phe Glu Ser Leu Lys Ser Asn Tyr Asp 145 150 155 160

Asn Leu Leu Lys Glu Lys Asp Met Leu Lys Ala Glu Val Ala Ser Leu

165 170 175

Thr Glu Lys Val Leu Ala Arg Glu Asn Leu Lys Gln Val Glu Ser Glu

180 185 190

Thr Lys Gly Leu Val Glu Pro Pro Gln Arg Pro Leu Leu Asp Ser Val

195 200 205

Ser Glu Gly Glu Glu Ser Lys Val Ser Val Gly Ala Cys Lys His Glu

210 215 220

Asp Ile Ser Ser Ala Arg Ser Glu Ser Leu Asp Ser Asp Ser Pro Arg 225 230 235 240

Tyr Arg Asp Gly Tyr Gly Val Asn Ser Ala Val Leu Glu Thr Cys Asp

245 250 255

Ser Ser Tyr Val Val Glu Pro Asp Gln Ser Asp Met Ser Gln Asp Glu

260 265 270

Glu Asp Asn Leu Thr Lys Thr Leu Leu Pro Pro Tyr Met Phe Ser Lys

275 280 285

Leu Gly Asp Met Asp Tyr Ser Asp Pro Pro Glu Ser Ser Cys Asn Phe

290 295 300

Gly Phe Pro Glu Glu Asp His Ala Leu Trp Ser Trp Ser Tyr 305 310 315

<210> 52

<211> 1602

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 52

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081 οβββθβθ33β 03β30β33ββ Β03Ββ0ΒβΒΒ βοββΒΒΟΒΟβ Βββθ30Βββ3 66θθ6'

021 ο336εβο6β6 οββοββοββο 6οε66ε6ο66 o666366b66 οβ60303360 60336:

09 βΒβοβοββββ 0Ββ3&0ββ0Β 0&30β030βΒ 56ββ0030β0 βββ3ββθββθ 3βθ301 Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met 165 170 175 Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Leu Ala 180 185 190 Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro 195 200 205 Leu Val Tyr Asp Val Ile Arg Lys Cys Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala 210 215 220 Trp Arg Leu Ala Tyr Phe Val Pro Gly Thr Leu His Val Val Met Gly 225 230 235 240 Val Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Arg 245 250 255 Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Asn Arg Asp Ser Phe Ser Arg Val 260 265 270 Leu Trp Tyr Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu 275 280 285 Tyr Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala 290 2 95 300 Glu Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe Asp Leu Asp Leu Arg Val Ala Gly Ile 305 310 315 320 Ile Ala Ala Ser Phe Gly Met Ala Asn Ile Val Ala Arg Pro Thr Gly 325 330 335 Gly Leu Leu Ser Asp Leu Gly Ala Arg Tyr Phe Gly Met Arg Ala Arg 340 345 350 Leu Trp Asn Ile Trp Ile Leu Gln Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Leu 355 360 365 Leu Leu Gly Arg Ala Ser Thr Leu Pro Thr Ser Val Val Cys Met Val 370 375 380 Leu Phe Ser Phe Cys Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val 385 390 395 400 Ile Pro Phe Val Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr 405 410 415 Gly Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ala Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe 420 425 430 Thr Ser Ser Arg Tyr Ser Thr Gly Thr Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile 435 440 445 Met Ile Met Ala Cys Thr Leu Pro Val Val Leu Val His Phe Pro Gln 450 455 460 Trp Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Asn Ala Gly Ala Glu Glu Glu His 4 65 470 475 480 Tyr Tyr Gly Ser Glu Trp Ser Glu Gln Glu Lys Ser Lys Gly Leu His 485 490 495 Gly Ala Ser Leu Lys Phe Ala Glu Asn Ser Arg Ser Glu Arg Gly Arg 500 505 510 Arg Asn Val Ile Asn Ala Ala Ala Ala Ala Ala Thr Pro Pro Asn Asn 515 520 525 Ser Pro Glu His Ala 530 <210> 54

<211> 53 <212> DNA

<213> Seqüência artificial <220>

<223> Iniciador: prm07061

<400> 54

ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctt aaacaatgga ctcgtcgacg gtg 53

<210> 55

<211> 50

<212> DNA

<213> Artificial sequence <220>

<223> Iniciador: prm07062

<400> 55

ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtc tcggtcgcag aattgtttac 50

<210> 56 <211> 3848 <212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Cassete de expressão

<400> 56

aatccgaaaa gtttctgcac cgttttcacc ccctaactaa caatataggg aacgtgtgct 60

aaatataaaa tgagacctta tatatgtagc gctgataact agaactatgc aagaaaaact 120

catccaccta ctttagtggc aatcgggcta aataaaaaag agtcgctaca ctagtttcgt 180

tttccttagt aattaagtgg gaaaatgaaa tcattattgc ttagaatata cgttcacatc 240

tctgtcatga agttaaatta ttcgaggtag ccataattgt catcaaactc ttcttgaata 300

aaaaaatctt tctagctgaa ctcaatgggt aaagagagag atttttttta aaaaaataga 360

atgaagatat tctgaacgta ttggcaaaga tttaaacata taattatata attttatagt 420

ttgtgcattc gtcatatcgc acatcattaa ggacatgtct tactccatcc caatttttat 480

ttagtaatta aagacaattg acttattttt attatttatc ttttttcgat tagatgcaag 540

gtacttacgc acacactttg tgctcatgtg catgtgtgag tgcacctcct caatacacgt 600

tcaactagca acacatctct aatatcactc gcctatttaa tacatttagg tagcaatatc 660

tgaattcaag cactccacca tcaccagacc acttttaata atatctaaaa tacaaaaaat 720

aattttacag aatagcatga aaagtatgaa acgaactatt taggtttttc acatacaaaa 780

aaaaaaagaa ttttgctcgt gcgcgagcgc caatctccca tattgggcac acaggcaaca 840

acagagtggc tgcccacaga acaacccaca aaaaacgatg atctaacgga ggacagcaag 900

tccgcaacaa ccttttaaca gcaggctttg cggccaggag agaggaggag aggcaaagaa S60

aaccaagcat cctcctcctc ccatctataa attcctcccc ccttttcccc tctctatata 1020

ggaggcatcc aagccaagaa gagggagagc accaaggaca cgcgactagc agaagccgag 1080

cgaccgcctt cttcgatcca tatcttccgg tcgagttctt ggtcgatctc ttccctcctc 1140

cacctcctcc tcacagggta tgtgcccttc ggttgttctt ggatttattg ttctaggttg 1200

tgtagtacgg gcgttgatgt taggaaaggg gatctgtatc tgtgatgatt cctgttcttg 1260

gatttgggat agaggggttc ttgatgttgc atgttatcgg ttcggtttga ttagtagtat 1320

ggttttcaat cgtctggaga gctctatgga aatgaaatgg tttagggtac ggaatcttgc 1380

gattttgtga gtaccttttg tttgaggtaa aatcagagca ccggtgattt tgcttggtgt 1440

aataaaagta cggttgtttg gtcctcgatt ctggtagtga tgcttctcga tttgacgaag 1500

ctatcctttg tttattccct attgaacaaa aataatccaa ctttgaagac ggtcccgttg 1560

atgagattga atgattgatt cttaagcctg tccaaaattt cgcagctggc ttgtttagat 1620

acagtagtcc ccatcacgaa attcatggaa acagttataa tcctcaggaa caggggattc 1680 cctgttcttc cgatttgctt tagtcccaga attttttttc ccaaatatct taaaaagtca 1740

ctttctggtt cagttcaatg aattgattgc tacaaataat gcttttatag cgttatccta 1800

gctgtagttc agttaatagg taatacccct atagtttagt caggagaaga acttatccga 1860

tttctgatct ccatttttaa ttatatgaaa tgaactgtag cataagcagt attcatttgg 1920

attatttttt ttattagctc tcaccccttc attattctga gctgaaagtc tggcatgaac 1980

tgtcctcaat tttgttttca aattcacatc gattatctat gcattatcct cttgtatcta 2040

cctgtagaag tttctttttg gttattcctt gactgcttga ttacagaaag aaatttatga 2100

agctgtaatc gggatagtta tactgcttgt tcttatgatt catttccttt gtgcagttct 2160

tggtgtagct tgccactttc accagcaaag ttcatttaaa tcaactaggg atatcacaag 2220

tttgtacaaa aaagcaggct taaacaatgg actcgtcgac ggtgggcgct ccggggagct 2280

cgctgcacgg cgtgacgggg cgcgagccgg cgttcgcgtt ctcgacggag gtgggcggcg 2340

aggacgcggc ggcggcgagc aagttcgact tgccggtgga ctcggagcac aaggcgaaga 2400

cgatcaggtt gctgtcgttc gcgaacccgc atatgaggac gttccaccta tcatggatct 2460

ccttcttctc ctgcttcgtc tccaccttcg ccgccgcccc tctcgtcccc atcatccgcg 2520

acaacctcaa cctcaccaag gccgacatcg gcaacgccgg cgtcgcctcc gtctccggct 2580

ccatcttctc caggctcgcc atgggcgcca tctgcgacat gctcggcccg cgctacggct 2640

gcgccttcct catcatgctc gccgcgccca ccgtcttctg catgtcgctc atcgactccg 2700

ccgcggggta catcgccgtg cgcttcctca tcggcttctc cctcgccacc ttcgtgtcat 2760

gccagtactg gatgagcacc atgttcaaca gcaagatcat cggcctcgtc aacggcctcg 2820

ccgccgggtg gggaaacatg ggcggcggcg cgacgcagct catcatgccg ctcgtctacg 2880

acgtgatccg caagtgcggc gcgacgccgt tcacggcgtg gaggctggcc tacttcgtgc 2940

cggggacgct gcacgtggtg atgggcgtgc tggtgctgac gctggggcag gacctccccg 3000

acggcaacct gcgcagcctg cagaagaagg gtgacgtcaa cagggacagc ttctccaggg 3060

tgctctggta cgccgtcacc aactaccgca cctggatctt cgtcctcctc tacggctact 3120

ccatgggcgt cgagctcacc accgacaacg tcatcgccga gtacttctac gatcgcttcg 3180

acctcgacct ccgcgtcgcc ggcatcatcg ccgcatcctt cggcatggcc aacatcgtcg 3240

cgcgccccac cggcggcctc ctctcggacc tcggcgcgcg ctacttcggc atgcgcgccc 3300

gcctctggaa catttggatc ctccagaccg ccggcggcgc gttctgcctc ctgctcggcc 3360

gcgcatccac cctccccacc tccgtcgtct gcatggtcct cttctccttc tgcgcgcagg 3420

ccgcctgcgg cgccatcttc ggcgtcatcc ccttcgtctc ccgccgctcg ctcggcatca 3480

tctccggcat gaccggcgcc ggcggcaact tcggcgccgg gctcacgcag ctgctcttct 3540

tcacgtcgtc gaggtactcc acgggcacgg ggctggagta catgggcatc atgatcatgg 3600

cgtgcacgct gccggtggtg ctcgtccatt tcccgcagtg gggctccatg ttcctcccgc 3660

ccaacgccgg cgccgaggag gagcactact acggctccga gtggagcgaa caggagaaga 3720

gcaagggcct ccacggtgca agtctcaagt tcgccgagaa ctcccgctcc gagcgtggcc 3780

gccgcaacgt catcaacgcc gccgccgccg ccgccacgcc gcccaacaac tcgccggagc 3840

acgcctaa 3848

<210> 57

<211> 27

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 1

<220>

<221> VARIANTE

<222> (1)..(1)

<223> /Substituir=nSern

<220>

<221> VARIANTE

<222> (2)..(2) <223> /substituir="Pro"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (3) .. (3)

<223> /Substituir="Gly" /substituir="Ser" /substituir="Ala"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (5) .. (5)

<223> /substituir="Val" /substituir="Leu"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (6)..(6)

<223> /substituir="Leu" /substituir="Thr"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (7) .. (7)

<223> /Substituir="Ala" /substituir="Phe" /substituir="Leu"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (8) .. (8)

<223> /substituir="Val" /substituir="Met" /substituir="Ile"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (9)..(9)

<223> /substituir="Thr"/substituir="Ile"/substituir="Ala"/substituir="Asn"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (12) .. (12)

<223> /substituir="Phe"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (13).. (13)

<223> /substituir="Cys" /substituir="Thr"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (14)..(14)

<223> /substituir="Phe" /substituir="Tyr"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (16).. (16)

<223> /substituir="Ile"

<220>

<221> VARIANTE <222> (19)..(19)

<223> /substituir="Ser"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (20)..(20)

<223> /substituir=nIle" /substituir=nVal"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (21)..(21)

<223> /Substituir=nIlen /substituir=nAsnn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (23)..(23)

<223> /substituir=nSern /substituir=nHisn /substituir=nValη

<220>

<221> VARIANTE

<222> (24)..(24)

<223> /Substituir=nValn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (25)..(25)

<223> /substituir=nSern /substituir=nHisn /substituir="Valη

<220>

<221> VARIANTE

<222> (26)..(26)

<223> /Substituir=nGlnn /substituir=nGlyn

<400> 57

Asn Tyr Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Ser Met Gly Val 1 5 10 15

Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr 20 25

<210> 58

<211> 10

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 2

<220>

<221> VARIANTE

<222> (3).. (3)

<223> /SubStituir=nAlan

<220>

<221> VARIANTE <222> (7) . . (7)

<223> /substituir="Thr"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (10) .. (10)

<223> /substituir=nSern

<400> 58

Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu 15 10

<210> 59

<211> 18

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 3

<220>

<221> VARIANTE

<222> (6)..(6)

<223> /substituir=nArg"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (9)..(9)

<223> /Substituir=nIlen

<220>

<221> VARIANTE

<222> (10) .. (10)

<223> /substituir=nValn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (11)..(11)

<223> /substituir=nLeun /substituir=nValn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (14) . . (14)

<223> /substituir=nGlun

<220>

<221> VARIANTE

<222> (17) .. (17)

<223> /substituir=nAspn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (18) . . (18)

<223> /substituir=nPron <400> 59

Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu 1 5 10 15

Asn Leu

<210> 60 <211> 10 <212> PRT <213> Seqüência artificial <220> <223> Seqüência de assinatura <220> <221> VARIANTE <222> (4) . . (4) <223> /substituir=nMet" <220> <221> VARIANTE <222> (8) . .(8) <223> /substituir=nCysn <400> 60

Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala 1 5 10

<210> 61

<211> 12

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 5

<220>

<221> VARIANTE

<222> (5)..(5)

<223> /substituir=nArg"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (8) . . (8)

<223> /substituir=nThrn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (10).. (10)

<223> /substituir=nValn

<220>

<221> VARIANTE <222> (11)..(11)

<223> /substituir=nSern

<220>

<221> VARIANTE

<222> (12) .. (12)

<223> /substituir="Ser"

<400> 61

Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe 15 10

<210> 62

<211> 20

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 6

<220>

<221> VARIANTE

<222> (2)..(2)

<223> /Substituir=nGlnnZsubstituir=nSernZsubstituir=nMetn/ Zsubstituir=nMetnZsubstituir=nThrn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (4)..(4)

<223> /substituir=nValn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (13)..(13)

<223> /substituir=nThrn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (15)..(15)

<223> /Substituir=nAlan

<220>

<221> VARIANTE

<222> (17)..(17)

<223> Zsubstituir=nLeun

<220>

<221> VARIANTE

<222> (20)..(20)

<223> Zsubstituir=nGlyn

<400> 62

Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 15 10 15 Phe Ser Arg Leu 20

<210> 63

<211> 8

<212> PRT

<213> Seqüência artificial <220>

<223> Seqüência de assinatura 7

<220>

<221> VARIANTE

<222> (3)..(3)

<223> /Substituir=nThrn /substituir="Cysn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (5) .. (5)

<223> /substituir=nGlyn

<400> 63

Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly 1 5

<210> 64

<211> 13

<212> PRT

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Seqüência de assinatura 8

<220>

<221> VARIANTE

<222> (2)..(2)

<223> /substituir=nSern

<220>

<221> VARIANTE

<222> (4) . . (4)

<223> /substituir=nValn /substituir=nGlnn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (7)..(7)

<223> /substituir=nPron

<220>

<221> VARIANTE

<222> (8)..(8)

<223> /substituir=nValn /substituir=nIlen

<220> <221> VARIANTE

<222> (9)..(9)

<223> /substituir=nGlu"

<220>

<221> VARIANTE

<222> (11) .. (11)

<223> /substituir=nSern /substituir=nAspn

<220>

<221> VARIANTE

<222> (12). . (12)

<223> /substituir=nThr"

<220>

<221> VARIANTE <222> (13).. (13)

<223> /substituir=nAlan /substituir=nThr"

<400> 64

Gly Ala Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser 15 10

<210> 65 <211> 1858 <212> DNA

<213> Phragmites australis <400> 65

acaacagctc agatcaagca cctgcatttg cataagagct agcaagcaag caagtccaag 60

aaagaagcta gctagcttgt atcagatcaa gactcgagag gccagctatg gaggttggcg 120

cgccggggag ctcgctgcac ggcgtcacgg ggcgcgagcc ggcgttcgcc ttctcgacgt 180

ctgcggtgcc cgacgacgat gcagcgagca agttcgacct gccggtggac tcggagcaca 240

aggccaagag catccggctc ttctccttcg ccaacccgca catgcgcacc ttccatctct 300

cgtggatctc cttcttcacc tgcttcgtct ccaccttcgc cgccgcgccg ctcgtcccca 360

tcatccgcga caacctcaac ctcaccaagg ccgacatcgg caacgccggc gtggcctccg 420

tctcgggatc catcttctcc cgtctcgcca tgggcgccat ctgcgacctc ctcggcccgc 480

gctacggctg cgccttcctc atcatgctca cggcgcccac cgtcttctgc atgtccctca 540

tcgacgacgc agccggctac atcgtcgtca ggttcttgat cggcttctct ctggccacgt 600

tcgtgtcgtg ccagtactgg atgagcacca tgttcaatag caagatcatc gggacggtga 660

acgggctggc ggctgggtgg gggaacatgg gcggcggcgc cacgcagctc cccatgccgc 720

tcgtctacga cgtcatccgc aagtgcggcg cgacgccctt cacggcgtgg cgcatcgcct 780

acttcgtgcc ggggctaatg cacgtggtga tgggcatcct ggtgctcacg ctggggcagg 840

acctccccga cggcaacctg aggagcctcc agaagaaggg cgacgccaac aaggacaagt 900

tctccaaggt gctctggtac gccgtcacca actatcgcac ctggatcttc gtgctgctct 960

acggctactg catgggcgtg gagctgacca ccgacaacgt catcgccgag tactactacg 1020

accacttcga cctagacctc cgcgtcgccg gcatcatcgc cgcttgcttc ggaatggcca 1080

acatcgtggc acggcccttg ggcggcatcc tctccgacat cggcgcgcgc tactggggca 1140

tgcgcgcgcg cctctggaac atctggatcc tccagactgc tggcggcgcc ttctgcctct 12 00

ggctcggccg cgccagcacg cttcctgcct ccattaccgc catggtgctc ttctccttct 1260

gcgcccaggc cgcctgcggc gccattttcg gcgtcacccc tttcgtcacc cgccgctccc 1320

tcggcatcat gtccgggatg acgggggctg gcggcaactt cggcgcgggg ctcacgcagc 1380

tgctcttctt cacctcgtcc aagtactcca cgggcatggg gctggagtac atgggcatca 1440

tgatcatggc gtgcacgctg cccgtggtgt tcgtgcactt cccgcaatgg ggatccatgc 1500 tcctcccgcc cagcgccggc gccgtcgagg agcactacta cagctcggag tggagtgagg 1560

aggagaagag caaggggctc cacagctcca gcctcaagtt ttcagagaac tgccgttcag 1620

agcgcggcaa ccgcaacgtc atcctcgcgg caccaaacag cacgcccgag cacgtataag 1680

acgcacgtat atgtccgcat tcgtacccct gtgcgcgtat acgcatacgc cagcggtttg 1740

tttaataagg tgcgcatata tatatatgta actagctata atgcgtatca ccgttatgcg 1800

cacgcacacg aaatatatat aattcgatgt tgacgcatat acaaaaaaaa aaaaaaaa 1858

<210> 66 <211> 523 <212> PRT

<213> Phragmites australis <400> 66

Met Glu Val Gly Ala Pro Gly Ser Ser Leu His Gly Val Thr Gly Arg 15 10 15

Glu Pro Ala Phe Ala Phe Ser Thr Ser Ala Val Pro Asp Asp Asp Ala

20 25 30

Ala Ser Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser

35 40 45

Ile Arg Leu Phe Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu

50 55 60

Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala 65 70 75 80

Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr Lys Ala Asp

85 90 95

Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg

100 105 110

Leu Ala Met Gly Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys

115 120 125

Ala Phe Leu Ile Met Leu Thr Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ser Leu

130 135 140

Ile Asp Asp Ala Ala Gly Tyr Ile Val Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe 145 150 155 160

Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe

165 170 175

Asn Ser Lys Ile Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly

180 185 190

Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Pro Met Pro Leu Val Tyr Asp

195 200 205

Val Ile Arg Lys Cys Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Ile Ala

210 215 220

Tyr Phe Val Pro Gly Leu Met His Val Val Met Gly Ile Leu Val Leu 225 230 235 240

Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Arg Ser Leu Gln Lys

245 250 255

Lys Gly Asp Ala Asn Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu Trp Tyr Ala

260 265 270

Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Cys

275 280 285

Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Tyr Tyr

290 295 300

Asp His Phe Asp Leu Asp Leu Arg Val Ala Gly Ile Ile Ala Ala Cys 305 310 315 320

Phe Gly Met Ala Asn Ile Val Ala Arg Pro Leu Gly Gly Ile Leu Ser 325 330 335 Asp Ile Gly Ala Arg Tyr Trp Gly Met Arg Ala Arg Leu Trp Asn Ile 340 34 5 350 Trp Ile Leu Gln Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Leu Trp Leu Gly Arg 355 360 365 Ala Ser Thr Leu Pro Ala Ser Ile Thr Ala Met Val Leu Phe Ser Phe 370 375 380 Cys Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val Thr Pro Phe Val 385 390 395 400 Thr Arg Arg Ser Leu Gly Ile Met Ser Gly Met Thr Gly Ala Gly Gly 405 410 415 Asn Phe Gly Ala Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser Lys 420 425 430 Tyr Ser Thr Gly Met Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile Met Ile Met Ala 435 440 445 Cys Thr Leu Pro Val Val Phe Val His Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met 450 455 460 Leu Leu Pro Pro Ser Ala Gly Ala Val Glu Glu His Tyr Tyr Ser Ser 465 470 475 480 Glu Trp Ser Glu Glu Glu Lys Ser Lys Gly Leu His Ser Ser Ser Leu 485 490 495 Lys Phe Ser Glu Asn Cys Arg Ser Glu Arg Gly Asn Arg Asn Val Ile 500 505 510 Leu Ala Ala Pro Asn Ser Thr Pro Glu His Val 515 520 ι Í7

<211> 1691 <212> DNA <213> Zea mays

<400> 67

ccaagggaaa gggatacatc acctgctgct ctagctctgc tatagcgcta gcagcaatat 60

aatggcggcc gtcggcgctc cggggagctc tctgcacgga gtcacggggc gcgagccggc 120

gttcgcattc tccacggagc acgaggaggc ggcgagcaat ggcggcaagt tcgacctgcc 180

ggtggactcg gagcacaagg cgaagagcgt ccggctcttc tccgtggcga acccgcacat 240

gcgcaccttc cacctctcct ggatctcctt cttcacctgc ttcgtgtcca ccttcgccgc 300

cgcgccgctg gtccccatca tccgcgacaa cctcaacctc accaaggccg acatcggcaa 360

cgcgggcgtg gcctccgtgt cgggctccat cttctcccgc ctcaccatgg gcgccgtctg 420

cgacctgctg ggcccgcgct acggctgcgc cttcctcatc atgctgtccg cgcccaccgt 480

gttctgcatg tcgctcatcg acgacgccgc gggctacatc accgtcaggt tcctcatcgg 540

cttctccctc gccaccttcg tctcctgcca gtactggatg agcaccatgt tcagcagcaa 6Ó0

gatcatcggc accgtcaacg ggctcgccgc cggatggggc aacatgggag gcggcgccac 660

gcagctcatc atgccgctcg tctacgacgt catccgcaag tgcggcgcca cgcccttcac 720

ggcgtggcgc ctcgcctact tcgtgccggg cctcatgcac gtcgtcatgg gcgtcctggt 780

gctcacgctg gggcaggacc tccccgacgg caacctcagg tcgctgcaga agaagggcaa 840

cgtcaacaag gacagcttct ccaaggtcat gtggtacgcc gtcatcaact accgcacctg S00

gatcttcgtc ctcctctacg gctactgcat gggcgtcgag ctcaccaccg acaacgtcat S60

cgccgagtac atgtacgacc gcttcgacct cgacctccgc gtcgccggga ccatcgccgc 1020

ctgcttcggc atggccaaca tcgtcgcgcg ccccatgggc ggcatcatgt ccgacatggg 1080

cgcgcgctac tggggcatgc gcgctcgcct ctggaacatc tggatcctcc agaccgccgg 1140

cggcgccttc tgcctctggc tgggacgcgc cagcaccctc cccgtctccg tcgtcgccat 1200

ggtgctcttc tccttctgcg cgcaggcggc ctgcggcgcc atcttcgggg tcatcccctt 12 60

cgtctcccgc cgctccctcg gcatcatctc cggcatgacg ggcgccggcg gcaacttcgg 1320 cgcggggctc acgcagctgc tcttcttcac ctcctcaacc tactccacgg gcagggggct 1380

agagtacatg ggcatcatga tcatggcgtg cacgctacct gtggtgttcg tgcacttccc 1440

gcagtggggg tccatgttct tcccgcccag cgccaccgcc gacgaggagg gctactacgc 1500

ctccgagtgg aacgacgacg agaagagcaa gggactccat agcgccagcc tcaagtttgc 1560

cgagaacagc cgctcagagc gcggcaagcg aaacgtcatc caggccgatg ccgccgccac 1620

gccggagcat gtctaagtct actactaata agatggatcg atccatcatc catgttcacc 1680

tgctacctac c 1691

<210> 68

<211> 524

<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 68 Met Ala Ala Val Gly Ala Pro Gly Ser Ser Leu His Gly Val Thr Gly 1 5 10 15 Arg Glu Pro Ala Phe Ala Phe Ser Thr Glu His Glu Glu Ala Ala Ser 20 25 30 Asn Gly Gly Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys 35 40 45 Ser Val Arg Leu Phe Ser Val Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His 50 55 60 Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala 65 70 75 80 Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr Lys Ala 85 90 95 Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser 100 105 110 Arg Leu Thr Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly 115 120 125 Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ser 130 135 140 Leu Ile Asp Asp Ala Ala Gly Tyr Ile Thr Val Arg Phe Leu Ile Gly 145 150 155 160 Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met 165 170 175 Phe Ser Ser Lys Ile Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp 180 185 190 Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Tyr 195 200 205 Asp Val Ile Arg Lys Cys Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Leu 210 215 220 Ala Tyr Phe Val Pro Gly Leu Met His Val Val Met Gly Val Leu Val 225 230 235 240 Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Arg Ser Leu Gln 245 250 255 Lys Lys Gly Asn Val Asn Lys Asp Ser Phe Ser Lys Val Met Trp Tyr 260 265 270 Ala Val Ile Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr 275 280 285 Cys Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Met 290 295 300 Tyr Asp Arg Phe Asp Leu Asp Leu Arg Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala 305 310 315 320 Cys Phe Gly Met Ala 325 Asn Ile Val Ala Arg 330 Pro Met Gly Gly Ile 335 Met Ser Asp Met Gly 340 Ala Arg Tyr Trp Gly 34 5 Met Arg Ala Arg Leu 350 Trp Asn Ile Trp Ile 355 Leu Gln Thr Ala Gly 360 Gly Ala Phe Cys Leu 365 Trp Leu Gly Arg Ala 370 Ser Thr Leu Pro Val 375 Ser Val Val Ala Met 380 Val Leu Phe Ser Phe Cys Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val Ile Pro Phe 385 390 395 400 Val Ser Arg Arg Ser 405 Leu Gly Ile Ile Ser 410 Gly Met Thr Gly Ala 415 Gly Gly Asn Phe Gly 420 Ala Gly Leu Thr Gln 425 Leu Leu Phe Phe Thr 430 Ser Ser Thr Tyr Ser 435 Thr Gly Arg Gly Leu 440 Glu Tyr Met Gly Ile 445 Met Ile Met Ala Cys 450 Thr Leu Pro Val Val 4 55 Phe Val His Phe Pro 460 Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Ser Ala Thr Ala Asp Glu Glu Gly Tyr Tyr Ala 465 470 475 480 Ser Glu Trp Asn Asp 485 Asp Glu Lys Ser Lys 490 Gly Leu His Ser Ala 495 Ser Leu Lys Phe Ala 500 Glu Asn Ser Arg Ser 505 Glu Arg Gly Lys Arg 510 Asn Val Ile Gln Ala 515 Asp Ala Ala Ala Thr 520 Pro Glu His Val

<210> 69 <211> 1789 <212> DNA <213> Zea mays

<400> 69

acgcggggaa gcacaagcaa ccagccagct agtttccaag ggatcacctg ctctctagca 60

ctagcagcaa tggcggccgt cggcgctccg ggcagctctc tgcacggagt cacggggcgc 120

gagccggcgt tcgccttctc cacggagcac gaggaggcgg cgagcaatgg tggcaagttc 180

gacctgccgg tggactcaga gcacaaggcg aagagcgtcc gtctcttctc cgtggcgaac 240

ccacacatgc gcaccttcca cctctcctgg atctccttct tcacctgctt cgtgtccacc 300

ttcgccgccg cgccgctggt ccccatcatc cgcgacaacc tcaacctcac caaggccgac 360

atcggcaacg cgggcgtggc ctcggtgtcg ggctccatct tctcccgcct caccatgggc 420

gccgtctgcg acctgctggg cccgcgctac ggctgcgcct tcctcatcat gctgtccgcg 480

cccaccgtgt tctgcatgtc gctcatcgac gacgccgcgg gctacatcac cgtcaggttc 540

ctcatcggct tctccctcgc caccttcgtc tcctgccagt actggatgag caccatgttc 600

agcagcaaga tcatcggcac cgtcaacggg ctcgccgccg gatggggcac aatgggaagg 660

cggcgccacg cagctcatat gccgctcgtc tacgacgtca tccgcaagtg cggcgccacg 720

ccattcacgg cctggcgcct cgcctacttc gtgccgggcc tcatgcacgt cgtcatgggc 780

gtcctggtgc tcacgctggg gcaggacctc cccgacggca acctcaggtc gctgcagaag 840

aagggcaacg tcaacaagga cagcttctcc aaggtcatgt ggtacgccgt catcaactac S00

cgtacctgga tctttgtcct cctctacggc tactgcatgg gcgtcgagct caccaccgac 960

aacgtcatcg ccgagtacat gtacgaccgc ttcgacctcg acctccgcgt cgctgggacc 1020

atcgccgcct gcttcggcat ggccaacatc gtcgcacgcc ccatgggcgg catcatgtcc 1080

gacatgggcg cgcgctactg gggcatgcgc gctcgcctct ggaacatctg gatcctccag 1140

accgccggcg gcgccttctg cctctggctg gggcgcgcca gcaccctccc cgtctccgtc 1200

gtcgccatgg tgctcttctc cttctgcgcg caggcggcat gcggcgccat cttcggggtt 1260 atcccctttg tctcccgccg ctccctcggc atcatctccg gcatgacggg cgccggcggc 1320

aacttcggcg ccgggctcac gcagctgctc ttctttacct cctcgaccta ctccacgggc 1380

agggggctgg agtacatggg catcatgatc atggcgtgca cgctgcccgt ggtgttcgtg 1440

cacttccctc agtgggggtc catgttcttt ccgcccagcg ccaccgccga cgaggagggc 1500

tactacgcct ccgagtggaa cgacgacgag aagagcaagg gactccatag cgccagcctc 1560

aagttcgccg agaacagccg ctcagagcgc ggcaagcgaa acgtcatcca ggccgacgcc 1620

gccgccacgc cggagcatgt ctaagtctac tactaagatg gatcgatcga cgatcaccta 1680

tacctctttg tatgtacgaa tatgccttgt tattactgcg cgcgcgcata tacaatacac 1740

gtgtgctccg ttgacatgag ttagaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 1789

<210> 70 <211> 524 <212> PRT

<213> Zea mays <400> 70 Met Ala Ala Val Gly Ala Pro Gly Ser Ser Leu His Gly Val Thr Gly 1 5 10 15 Arg Glu Pro Ala Phe Ala Phe Ser Thr Glu His Glu Glu Ala Ala Ser 20 25 30 Asn Gly Gly Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys 35 40 45 Ser Val Arg Leu Phe Ser Val Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His 50 55 60 Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala 65 70 75 80 Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr Lys Ala 85 90 95 Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser 100 105 110 Arg Leu Thr Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly 115 120 125 Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ser 130 135 140 Leu Ile Asp Asp Ala Ala Gly Tyr Ile Thr Val Arg Phe Leu Ile Gly 145 150 155 160 Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met 165 170 175 Phe Ser Ser Lys Ile Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp 180 185 190 Gly Thr Met Gly Arg Arg Arg His Ala Ala His Met Pro Leu Val Tyr 195 200 205 Asp Val Ile Arg Lys Cys GIy Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Leu 210 215 220 Ala Tyr Phe Val Pro Gly Leu Met His Val Val Met Gly Val Leu Val 225 230 235 240 Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Arg Ser Leu Gln 245 250 255 Lys Lys Gly Asn Val Asn Lys Asp Ser Phe Ser Lys Val Met Trp Tyr 260 265 270 Ala Val Ile Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr 275 280 285 Cys Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Met 290 295 300 Tyr Asp Arg Phe Asp Leu Asp Leu Arg Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala 305 310 315 320 Cys Phe Gly Met Ala 325 Asn Ile Val Ala Arg 330 Pro Met Gly Gly Ile 335 Met Ser Asp Met Gly 340 Ala Arg Tyr Trp Gly 34 5 Met Arg Ala Arg Leu 350 Trp Asn Ile Trp Ile 355 Leu Gln Thr Ala Gly 360 Gly Ala Phe Cys Leu 365 Trp Leu Gly Arg Ala 370 Ser Thr Leu Pro Val 375 Ser Val Val Ala Met 380 Val Leu Phe Ser Phe Cys Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val Ile Pro Phe 385 390 395 400 Val Ser Arg Arg Ser 405 Leu Gly Ile Ile Ser 410 Gly Met Thr Gly Ala 415 Gly Gly Asn Phe Gly 420 Ala Gly Leu Thr Gln 425 Leu Leu Phe Phe Thr 430 Ser Ser Thr Tyr Ser 435 Thr Gly Arg Gly Leu 440 Glu Tyr Met Gly Ile 445 Met Ile Met Ala Cys 450 Thr Leu Pro Val Val 4 55 Phe Val His Phe Pro 460 Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Ser Ala Thr Ala Asp Glu Glu Gly Tyr Tyr Ala 465 470 475 480 Ser Glu Trp Asn Asp 485 Asp Glu Lys Ser Lys 490 Gly Leu His Ser Ala 495 Ser Leu Lys Phe Ala 500 Glu Asn Ser Arg Ser 505 Glu Arg Gly Lys Arg 510 Asn Val Ile Gln Ala 515 Asp Ala Ala Ala Thr 520 Pro Glu His Val

<210> 71 <211> 1837 <212> DNA

<213> Hordeum vulgare <400> 71

gaattcgcgg ccgctccctt actacattgc aagccaagct caagagcagc agcaacagcc 60

accattagct gcttctagtt gttggcaaag atggaggtcg aggcgggcgc ccatggcgac 120

actgccgcga gcaagttcac gctgccggta gactccgagc acaaggccaa gtccttcagg 180

ctcttctcct tcgccaaccc gcacatgcgc accttccatc tctcgtggat ctccttcttc 240

acttgcttca tctccacctt cgccgcagcg ccccttgtcc ccatcattcg tgataacctc 300

aaccttgcca aggccgacat cggcaatgcc ggtgtggcat ccgtttctgg gtccatcttc 360

tccaggcttg ccatgggtgc catctgcgat ctcctcgggc cgcggtatgg atgtgcattc 420

ctcgtcatgc tctcggcacc gaccgttttc tgcatggccg ttatcgatga tgcctcaggg 4 80

tacatcgccg tccgctttct cattggcttc tcgcttgcta cgttcgtgtc atgccaatat 540

tggatgagca ccatgtttaa tagcaagatc atcggcacag tcaacggcct cgctgctgga 600

tggggcaaca tgggtggtgg cgccacgcag ctcatcatgc cgctcgtctt ccatgcaatc 660

cagaagtgtg gtgccacgcc cttcgtagcg tggcgtattg cctacttcgt gcccggaatg 720

atgcacatcg tgatgggctt gttggtactc accatggggc aagatctccc tgatgggaac 780

ctcgcaagtc tccagaagaa gggagacatg gccaaggaca agttctccaa ggtcctttgg 840

ggcgccgtta ccaactaccg aacatggatc tttgtcctcc tctatggcta ctgcatgggt 900

gtcgagctca ccaccgacaa tgtcattgcc gagtactact tcgaccactt ccacctagac 960

ctccgtgccg ccggtaccat cgctgcctgc ttcggcatgg ccaacatcgt cgcacgtcct 1020

acgggtggct acctctctga ccttggcgcc cgctatttcg gcatgcgtgc tcgcctctgg 1080

aatatctgga tcctccaaac cgctggtggc gctttctgca tctggctcgg tcgtgcatcg 1140 gccctccctg cctcggtgac cgccatggtc ggtgctatct ttggtgtcgc acccttcgtc ttgaccggtg ctggtggaaa cgtgggcgca tcgcaatact ccactggtag gggtctcgag ctgcccgtcg ctcttgtgca cttcccacaa gacgccacgg aggaggagta ctacgcctcg ctccatatcg ccggccaaaa atttgctgag gtcatccttg ccacgtccgc cacaccaccc attgtttttc atacctatgt acaagtactg cctgcaacat cggctgtaat aaggcgtatg tgcgtttctt acgcacgaaa tgtttggtct tctgaattta caacagcttt gaggcggccg

ctcttctcca tctgcgccca ggctgcgtgt 1200

tccaggcgtt cccttggcat catttccggg 1260

gggctcacac agcttctctt cttcacgtca 1320

tacatgggca tcatgatcat ggcatgcacg 1380

tggggatcca tgttcttccc tgccagcgcc 1440

gagtggtccg aagaggagaa agccaagggt 1500

aattcccgct cggagcgcgg taggcgcaac 1560

aacaatacgc cccagcacgt atgagactgg 1620

aactacagtg cacgttcgta tatatatacg 1680

aatttacatt tgtagtgtag gcctgtgtaa 1740

gtgcatgcac gcatgcgagg gtacctgtgc 1800

cgaattc 1837

<210> 72

<211> 507

<212> PRT

<213> Hordeum vulgare

<400> 72

Met Glu Val Glu Ala Gly Ala His Gly Asp Thr Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15

Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe

20 25 30

Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser

35 40 45

Phe Phe Thr Cys Phe Ile Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro

50 55 60

Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80

Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly

85 90 95

Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val

100 105 110

Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Val Ile Asp Asp Ala

115 120 125

Ser Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr

130 135 140

Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160

Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly

165 170 175

Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys

180 185 190

Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro

195 200 205

Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln

210 215 220

Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Met 225 230 235 240

Ala Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu Trp Gly Ala Val Thr Asn Tyr

245 250 255

Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Cys Met Gly Val Glu

260 265 270

Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Tyr Phe Asp His Phe His 275 280 285 Leu Asp Leu Arg Ala Ala Gly Thr Ile Ala Ala Cys Phe Gly Met Ala 290 295 300 Asn Ile Val Ala Arg Pro Thr Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu Gly Ala 305 310 315 320 Arg Tyr Phe Gly Met Arg Ala Arg Leu Trp Asn Ile Trp Ile Leu Gln 325 330 335 Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Ile Trp Leu Gly Arg Ala Ser Ala Leu 340 34 5 350 Pro Ala Ser Val Thr Ala Met Val Leu Phe Ser Ile Cys Ala Gln Ala 355 360 365 Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val Ala Pro Phe Val Ser Arg Arg Ser 370 375 380 Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly Gly Asn Val Gly Ala 385 390 395 400 Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser Gln Tyr Ser Thr Gly 405 410 415 Arg Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile Met Ile Met Ala Cys Thr Leu Pro 420 425 430 Val Ala Leu Val HiS Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Ala 435 440 445 Ser Ala Asp Ala Thr Glu Glu Glu Tyr Tyr Ala Ser Glu Trp Ser Glu 450 455 460 Glu Glu Lys Ala Lys Gly Leu His Ile Ala Gly Gln Lys Phe Ala Glu 4 65 470 475 480 Asn Ser Arg Ser Glu Arg Gly Arg Arg Asn Val Ile Leu Ala Thr Ser 485 490 495 Ala Thr Pro Pro Asn Asn Thr Pro Gln His Val 500 505 <210> 73

<211> 1750 <212> DNA

<213> Triticum aestivum <220>

<221> variação

<222> (1201)..(1201)

<223> /Substituir=nCn /substituir=ngn /substituir="t"

<400> 73

tagttttgag tgcaactagg ctagctcaag aaagatggag gtgcaggccg gctctcatgc 60

cgacgccgcg gcgagcaagt tcacgctgcc ggtggactcc gagcacaagg ccaagtcctt 120 caggctcttc tccttcgcca acccccacat gcgcaccttt cacctctcgt ggatctcctt 180 cttcacctgc ttcgtctcca cctttgctgc ggcgcccctc gtgcccatca tccgcgacaa 240 cctcaacctt gccaaggctg acatcggcaa tgccggtgtc gcgtccgtgt ctgggtccat 300 cttctccagg ctggccatgg gcgctatctg tgacttgctt ggcccacggt atggttgtgc 360 cttcctcgtc atgctctcgg caccgaccgt cttctgcatg gccgtcatcg atgatgcctc 420 agggtacatc gccgtccggt tcctcattgg cttctccctc gccaccttcg tgtcatgcca 480 atactggatg agcaccatgt tcaatagcaa gatcattggc acggtcaatg gcttggctgc 540 aggctggggc aacatgggtg gcggcgccac gcagctcatc atgccgcttg tcttccacgc 600 aatccagaag tgtggcgcca cgcccttcgt ggcatggcgt attgcctact tcgtgccggg 660 aatgatgcac atcgtgatgg gcttgctggt cctcaccatg gggcaagatc tccctgacgg 720 gaaccttgcg agcctccara agaagggaga catggccaag gacaagttct ccaaggtcct 780 ttggggcgcy gtcaccaact accggacatg gatcttcgtc ctcctctacg gctactgcat 840

gggygtcgag ctcaccacsg acaatgtcat cgccgagtac tactacgacc acttccacct SOO

agacctccgc gcygcwggca ccattgcygc ttgyttyggc atggcaaaca tygtcgcgcg 960

tcctatgggk ggctacctct cygaccttgg tgcccgctac tttggcatgc gtgctcgcct 1020

ttggaacatc tggatcctmc aaacygccgg tggcgctttc tgcatctggc tcggtcgtgc 1080

gtcagccctc cctgcctcag tgactgccat ggttctcttc tccatctgcg cccaagccgc 1140

gtgtggtgct gtatttggcg tcgcaccctt cgtttctaga cgttcccttg gcatcatctc 1200

agggctgacc ggtgctggtg gaaacgtggg tgcrgggctc acgcagcttc tcttctttac 1260

ttcatcacaa tactccacyg gaaggggtct cgagtacatg ggcatcatga tcatggcatg 1320

cacgctgcct gtcgctcttg tgcacttccc acagtggggc tcgatgttct tcccggccag 1380

cgccgacgcc acagaggagg aatactatgc ctctgagtgg tcggaggagg agaagaacaa 1440

gggtctccat attgctggcc aaaagtttgc cgagaactca cgatcggagc gtggaaggcg 1500

caacgtcatc cttgccacgt ccgccacgcc acccaacaat acgccccagc acgtataaga 1560

ccggattgtt tttcatatac tatgtacaag tactgaacat cggctgtaat aaggtgtacg 1620

catttatatt tccagtgtag acttgtgtaa tgcgtttctt acgcacgaaa tgttttggtg 1680

tgtgcatgca cgcatgcgag gtacctgtgg tctgaattta cagcaacttt gagactaaaa 1740

aaaaaaaaaa 1750

<210> 74 <211> 507 <212> PRT <213> Triticum aestivum <400> 74 Met Glu Val Gln Ala Gly Ser His Ala Asp Ala Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15 Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe 20 25 30 Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser 35 40 45 Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro 50 55 60 Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80 Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly 85 90 95 Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val 100 105 110 Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Val Ile Asp Asp Ala 115 120 125 Ser Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr 130 135 140 Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160 Xle Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly 165 170 175 Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys 180 185 190 Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro 195 200 205 Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln 210 215 220 Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Met 225 230 235 240 Ala Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu Trp Gly Ala Val Thr Asn Tyr

245 250 255

Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Cys Met Gly Val Glu

260 265 270

Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Tyr Tyr Asp His Phe His

275 280 285

Leu Asp Leu Arg Ala Ala Gly Thr Ile Ala Ala Cys Phe Gly Met Ala

290 295 300

Asn Ile Val Ala Arg Pro Met Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu Gly Ala 305 310 315 320

Arg Tyr Phe Gly Met Arg Ala Arg Leu Trp Asn Ile Trp Ile Leu Gln

325 330 335

Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Ile Trp Leu Gly Arg Ala Ser Ala Leu

340 345 350

Pro Ala Ser Val Thr Ala Met Val Leu Phe Ser Ile Cys Ala Gln Ala

355 360 365

Ala Cys Gly Ala Val Phe Gly Val Ala Pro Phe Val Ser Arg Arg Ser

370 375 380

Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly Gly Asn Val Gly Ala 385 390 395 400

Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser Gln Tyr Ser Thr Gly

405 410 415

Arg Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile Met Ile Met Ala Cys Thr Leu Pro

420 425 430

Val Ala Leu Val His Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Ala

435 440 445

Ser Ala Asp Ala Thr Glu Glu Glu Tyr Tyr Ala Ser Glu Trp Ser Glu

450 455 460

Glu Glu Lys Asn Lys Gly Leu His Ile Ala Gly Gln Lys Phe Ala Glu 465 470 475 480

Asn Ser Arg Ser Glu Arg Gly Arg Arg Asn Val Ile Leu Ala Thr Ser

485 490 495

Ala Thr Pro Pro Asn Asn Thr Pro Gln His Val 500 505

<210> 75 <211> 1741 <212> DMA

<213> Hordeum vulgare <400> 75

ttacaagctc catctgagag cagcagcaac caccattaga gacacactta gttgccagtg 60

cgactaagct agctagctcg aggaagatgg aggtggagtc gagctcgcat ggcgccggcg 120 acgaggctgc gagcaagttc tcgctgcccg tggactcgga gcacaaggcc aagtccatca 180 ggctcttctc cttcgccaac ccccacatgc gcaccttcca cctctcctgg atctccttct 240 tcacctgctt cgtctccacc ttcgctgccg cgcccctcgt ccctatcatc cgcgacaacc 300 taaacctcgc caaggccgac atcggcaacg ccggtgtggc gtccgtgtcc gggtctatct 360 tctcgaggct cgccatgggg gccatctgcg atctccttgg ccctcgatat ggatgcgcct 420 tcctcgtcat gctcgcagca cccaccgtct tctgcatgtc cctcatcgat gatgcggcgg 480 gctacatcac ggtccgcttc ctcatcggct tctccctcgc gacgtttgtg tcgtgccagt 540 attggatgag caccatgttc aacagcaaga tcatcggcac cgtcaacggc ctggcggccg 600 gctggggcaa catgggtggt ggtgccaccc agctcattat gccactcgtc ttccacgcca 660 tccagaagtg tggtgccacg cccttcgtcg catggcgcat cgcctacttc gtgccaggaa 720 tgatgcacgt ggtgatgggc ttgctcgtgc tcaccatggg acaggatctc cccgatggta 780 accttgcaag cctccagaag aagggggaga ggggtgctgt tacaaactac cgtacatgga gtgttgagct caccaccgac aacgtcatcg accttcgaac atccggcacc attgccgcct ctgcgggtgg ctacctctcc gacctcggtg ggaacatctg gatcctccag accgctggtg aagccctccc cgaatccatc actgccatgg gtggtgcagt ctttggtgtc atccccttcg gcttgagtgg agccggtggg aactttggcg cgtcgaagta tggcaccggc agggggcttg cgctccctgt ggcgcttgtg cacttcccac ccaacgccac cgaggaggag ttctatgccg gtctccatat ccctggccaa aagtttgccg acgtcatcct tgccacagcc gccacacccc cgagcttttc tttacctgtg tacacgtaca atatacgcct ggaatccgca agcagtatgt c

tggccaagga caagttctcc aaggttgtgt 840

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tttttgaaaa aaaaaaagcg gccgcgaatt 1740

1741

<210> 76

<211> 509

<212> PRT

<213> Hordeum vulgare

<400> 76

Met Glu Val Glu Ser Ser Ser His Gly Ala Gly Asp Glu Ala Ala Ser 15 10 15

Lys Phe Ser Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Ile Arg

20 25 30

Leu Phe Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp

35 40 45

Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu 50 55 60

Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly 65 70 75 80 Asn Ala Gly Val Ala 85 Ser Val Ser Gly Ser 90 Ile Phe Ser Arg Leu 95 Ala Met Gly Ala Ile 100 Cys Asp Leu Leu Gly 105 Pro Arg Tyr Gly Cys 110 Ala Phe Leu Val Met 115 Leu Ala Ala Pro Thr 120 Val Phe Cys Met Ser 125 Leu Ile Asp Asp Ala 130 Ala Gly Tyr Ile Thr 135 Val Arg Phe Leu Ile 140 Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser 145 150 155 160 Lys Ile Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met 165 170 175 Gly Gly Gly Ala 180 Thr Gln Leu Ile Met 185 Pro Leu Val Phe His 190 Ala Ile Gln Lys Cys 195 Gly Ala Thr Pro Phe 200 Val Ala Trp Arg Ile 205 Ala Tyr Phe Val Pro 210 Gly Met Met His Val 215 Val Met Gly Leu Leu 220 Val Leu Thr Met

Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly 225 230 235 240 Glu Met Ala Lys Asp 245 Lys Phe Ser Lys Val 250 Val Trp Gly Ala Val 255 Thr Asn Tyr Arg Thr 260 Trp Ile Phe Val Leu 265 Leu Tyr Gly Tyr Cys 270 Met Gly Val Glu Leu 275 Thr Thr Asp Asn Val 280 Ile Ala Glu Tyr Tyr 285 Phe Asp His Phe His 290 Leu Asp Leu Arg Thr 295 Ser Gly Thr Ile Ala 300 Ala Cys Phe Gly Met Ala Asn Xle Val Ala Arg Pro Ala Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu 305 310 315 320 Gly Ala Arg Tyr Phe 325 Gly Met Arg Ala Arg 330 Leu Trp Asn Ile Trp 335 Ile Leu Gln Thr Ala 340 Gly Gly Ala Phe Cys 34 5 Leu Trp Leu Gly Arg 350 Ala Lys Ala Leu Pro 355 Glu Ser Ile Thr Ala 360 Met Val Leu Phe Ser 365 Ile Cys Ala Gln Ala 370 Ala Cys Gly Ala Val 375 Phe Gly Val Ile Pro 380 Phe Val Ser Arg Arg Ser Leu Gly Xle Ile Ser Gly Leu Ser Gly Ala Gly Gly Asn Phe 385 390 395 400 Gly Ala Gly Leu Thr 405 Gln Leu Leu Phe Phe 410 Thr Ser Ser Lys Tyr 415 Gly Xhr Gly Arg Gly 420 Leu Glu Tyr Met Gly 425 Ile Met Ile Met Ala 430 Cys Thr Leu Pro Val 435 Ala Leu Val His Phe 440 Pro Gln Trp Gly Ser 445 Met Leu Leu Pro Pro 450 Asn Ala Asn Ala Thr 455 Glu Glu Glu Phe Tyr 460 Ala Ala Glu Trp Ser Glu Glu Glu Lys Lys Lys Gly Leu His Ile Pro Gly Gln Lys Phe 465 470 475 480 Ala Glu Asn Ser Arg 485 Ser Glu Arg Gly Arg 490 Arg Asn Val Ile Leu 495 Ala Thr Ala Ala Thr 500 Pro Pro Asn Asn Thr 505 Pro Gln His Ala

<210> 77

<211> 1796

<212> DNA

<213> Triticum aestivum

<400> 77

aagctagcac caagcctcca aggagcaaga tcgaaatgga ggtggaggcc agcgcccatg ccgtggactc cgagcacaag gccaagtcct tgcgtacctt ccacctctcc tggatatcct cggcaccgtt ggtgcccatc atccgtgaca atgccggtgt ggcatctgtg tctgggtcca gcgacctttt agggccgcgg tatggctgcg tgttttgcat ggctgctatc gacgatgcgt gcttctccct cgccaccttc gtgtcatgcc agatcattgg cacggtgaat ggcctcgcgg cacaactcat catgccgctt gttttccatg tggcatggcg tattgcctat ttcgtgccgg tgctcactat gggccaagat ctccccgacg

agagaagaag ccttgctcga tcaagcaagg 60

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gaatgatgca catcgtcatg gggttgcttg 720

gcaaccttgc gagtctccag aagaaggggg 780 acatggccaa ggacaaattc tcgaaggtcc tttggggtgc ggtcaccaac taccggacat 840

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tcgtttccag gcgttccctt ggcatcatct ccgggctgac cggcgctggt ggcaatgttg 1260

gcgcagggct aacgcaactt cttttcttca catcgtcgca atactccacc gggaggggtc 1320

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cttctgagtg gtcggaggag gagaagggca agggtctcca tattacaggc caaaagttcg 1500

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ttgtatgggg atttatgttt ctactagtaa acttaaggaa acgctgcttt tgcgttcctg 1740

ctctgtacgc atgaaatgta atatcaattt gagtccgaaa ttactacaaa aaaaaa 1796

<210> 78 <211> 507 <212> PRT

<213> Triticum aestivum <400> 78

Met Glu Val Glu Ala Ser Ala His Gly Asp Thr Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15

Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe

20 25 30

Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser

35 40 45

Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro

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Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80

Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly

85 90 95

Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val

100 105 110

Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Ala Ile Asp Asp Ala

115 120 125

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130 135 140

Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160

Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly

165 170 175

Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys

180 185 190

Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro

195 200 205

Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln

210 215 220

Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Met 225 230 235 240 Ala Lys Asp Lys Phe 245 Ser Lys Val Leu Trp 250 Gly Ala Val Thr Asn 255 Tyr Arg Thr Trp Ile 260 Phe Val Leu Leu Tyr 265 Gly Tyr Cys Met Gly 270 Val Glu Leu Thr Thr 275 Asp Asn Val Ile Ala 280 Glu Tyr Tyr Tyr Asp 285 His Phe His Leu Asp 290 Leu Arg Ala Ala Gly 295 Thr Ile Ala Ala Cys 300 Phe Gly Met Ala Asn Ile Val Ala Arg Pro Met Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu Gly Ala 305 310 315 320 Arg Tyr Phe Gly Met 325 Arg Ala Arg Leu Trp 330 Asn Ile Trp Ile Leu 335 Gln Thr Ala Gly Gly 340 Ala Phe Cys Ile Trp 345 Leu Gly Arg Ala Ser 350 Ala Leu Pro Ala Ser 355 Val Thr Ala Met Val 360 Leu Phe Ser Ile Cys 365 Ala Gln Ala Ala Cys 370 Gly Ala Val Phe Gly 375 Val Ala Pro Phe Val 380 Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly Gly Asn Val Gly Ala 385 390 395 400 Gly Leu Thr Gln Leu 405 Leu Phe Phe Thr Ser 410 Ser Gln Tyr Ser Thr 415 Gly Arg Gly Leu Glu 420 Tyr Met Gly Ile Met 425 Ile Met Ala Cys Thr 430 Leu Pro Val Ala Leu 435 Val His Phe Pro Gln 440 Trp Gly Ser Met Phe 445 Phe Pro Ala Ser Ala 450 Asp Ala Thr Glu Glu 4 55 Glu Tyr Tyr Ala Ser 460 Glu Trp Ser Glu Glu Glu Lys Gly Lys Gly Leu His Ile Thr Gly Gln Lys Phe Ala Glu 465 470 475 480 Asn Ser Arg Ser Glu 485 Arg Gly Arg Arg Asn 490 Val Ile Leu Ala Thr 495 Ser Ala Thr Pro Pro 500 Asn Asn Thr Pro Gln 505 His Val

<210> 79 <211> 1744 <212> DNA

<213> Triticum aestivum <400> 79

gcagtataat caagcaagct agctgcaagc cgaggagcct agctcgatca agcaaggtcg 60

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tggactccga gcacaaggcc aagtccttca ggctcttctc cttcgccaac ccccacatgc 180

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aatggggctc catgttcttc ccggccagtg ctgatgctac ggaggaggag tactacgctt 1440

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gtac 1744

<210> 80

<211> 507

<212> PRT

<213> Triticum aestivum

<400> 80 Met Glu Val Glu Ser Ser Ala His Gly Asp Ala Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15 Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe 20 25 30 Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser 35 40 45 Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro 50 55 60 Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80 Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly 85 90 95 Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val 100 105 110 Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Val Ile Asp Asp Ala 115 120 125 Ser Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Ala 130 135 140 Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160 Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly 165 170 175 Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys 180 185 190 Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro 195 200 205 Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln 210 215 220 Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Met 225 230 235 240 Ala Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu Trp Gly Ala Val Thr Asn Tyr 245 250 255 Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Cys Met Gly Val Glu 260 265 270 Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Tyr Tyr Asp His Phe His 275 280 285 Leu His Leu Arg Ala Ala Gly Thr Ile Ala Ala Cys Phe Gly Met Ala 290 295 300 Asn Ile Val Ala Arg Pro Met Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu Gly Ala 305 310 315 320 Arg Tyr Phe Gly Met Arg Ala Arg Leu Trp Asn Ile Trp Ile Leu Gln 325 330 335 Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Ile Trp Leu Gly Arg Ala Ser Ala Leu 340 345 350 Pro Ala Ser Val Thr Ala Met Val Leu Phe Ser Ile Cys Ala Gln Ala 355 360 365 Ala Cys Gly Ala Val Phe Gly Val Ala Pro Phe Val Ser Arg Arg Ser 370 375 380 Leu Gly Ile He Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly Gly Asn Val Gly Ala 385 390 395 400 Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser Gln Tyr Ser Thr Gly 405 410 415 Arg Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile Met Ile Met Ala Cys Thr Leu Pro 420 425 430 Ile Thr Leu Val His Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Ala 435 440 445 Ser Ala Asp Ala Thr Glu Glu Glu Tyr Tyr Ala Ser Glu Trp Ser Glu 450 455 460 Glu Glu Lys Gly Lys Gly Leu His Ile Ala Gly Gln Lys Phe Ala Glu 4 65 470 475 480 Asn Ser Arg Ser Glu Arg Gly Arg Arg Asn Val Ile Leu Ala Thr Ser 485 490 495 Ala Thr Pro Pro Asn Asn Thr Pro Gln His Val 500 505 <210> í 31

<211> 1704 <212> DNA

<213> Hordeum vulgare <400> 81

caccactgca agcatattta ggcttagtta gctccaagga gcaaagctaa aaagaaccta 60 gctaggctag ctcgatccag ctagctcagt agatatggag gtggaggccg gagctcatgg 120

cgatgcggcg gcgagcaagt tcacgctgcc cgtggactcc gagcacaagg ccaagtcctt 180

caggctcttc tccttcgcca acccgcacat gcgcaccttc cacctctcgt ggatctcctt 240

cttcacctgc ttcgtctcca cctttgccgc tgctccgttg gtgcccatca tccgcgacaa 300

cctcaacctc gccaaggccg acatcggcaa tgccggtgtg gcgtccgtgt ccggctccat 360

cttctcgagg ctcgccatgg gcgccatttg tgacctgctt ggcccgcggt acggttgtgc 420

ctttctcgtc atgctatcgg cgccaaccgt cttctgcatg gccgtcatcg acgacgcgtc 480

gggatacatc gcagtccgct tcctcatcgg cttctccctc gcaaccttcg tgtcatgcca 540

gtactggatg agcacaatgt tcaacagtaa aatcatcggc acggttaatg gcctcgcagc 600

cgggtggggc aacatgggtg gcggggccac acagctcatc atgcccctcg tcttccatgc 660

catccaaaag tgtggtgcca caccctttgt ggcatggcgt atcgcctact tcgtgccggg 720

gatgatgcac atcgtgatgg gcctactcgt gctcaccatg ggacaagacc tccctgatgg 7 80 gaacctcgca agcctgcaga agaagggaga catggccaag gacaagttct ccaaggtcct 840

ttggggcgcc gttaccaact accggacatg gatctttgtc ctcctctatg gctactgcat SOO

gggtgtcgag ctcaccactg gcaatgtcat tgccgagtac tacttcgatc acttccacct 960

aaacctccgt gccgccggta ccatcgccgc ttgcttcggc atggccaaca tcgtcgcacg 1020

tcctatgggc ggctacctct ccgaccttgg tgctcgctac ttcggtatgc gtgctcgcct 1080

ttggaacatc tggatccttc agacagctgg cggcgccttt tgcatctggc ttgggcgcgc 1140

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gtgtggtgct atctttggtg tcgaaccctt cgtctccagg cgttcccttg gcatcatttc 1260

cgggttgacc ggtgctggtg gaaacgtggg cgcagggctc acacagcttc tcttcttcac 1320

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caccttaccc gtcgctctcg ttcacttccc tcagtggggc tctatgttct tggctgccag 1440

tgccgacgcc acggaggagg agtactacgc ctcagagtgg tcagaggagg agaagagcaa 1500

gggtctccat atcgcaggac aaaagtttgc tgagaactcc cgctcggaac gcggcaggcg 1560

caacgtcatc cttgccacat ccgccacacc acccaacaac acgcccctac acgtataagt 1620

ttcaaatttt gtgttacaca agaaatgtac atcttgctga gtatatatac acatcgtata 1680

ttttagtaaa aaaaaaaaaa aaaa 1704

<210> 82 <211> 507

<212> PRT <213> Hordeum vulgare <400> 82 Met Glu Val Glu Ala Gly Ala His Gly Asp Ala Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15 Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe 20 25 30 Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser 35 40 45 Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro 50 55 60 Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80 Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly 85 90 95 Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val 100 105 110 Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Val Ile Asp Asp Ala 115 120 125 Ser Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr 130 135 140 Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160 Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly 165 170 175 Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys 180 185 190 Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro 195 200 205 Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln 210 215 220 Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Lys Gly Asp Met 225 230 235 240 Ala Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu Trp Gly Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr

Leu Thr

Leu Asn 290 Asn Ile 305

Arg Tyr

Thr Ala

Pro Ala

Ala Cys 370 Leu Gly 385

Gly Leu

Arg Gly

Val Ala

Ser Ala 450 Glu Glu 4 65

Asn Ser Ala Thr

245

Trp Ile Phe 260 Thr Gly Asn 275

Leu Arg Ala

Val Ala Arg

Phe Gly Met 325

Gly Gly Ala

340 Ser Val Thr 355

Gly Ala Ile

Ile Ile Ser

Thr Gln Leu 405

Leu Glu Tyr

420 Leu Val His 435

Asp Ala Thr

Lys Ser Lys

Arg Ser Glu 485

Pro Pro Asn 500

Val Leu

Val Ile

Ala Gly 295 Pro Met 310

Arg Ala

Phe Cys

Ala Met

Phe Gly 375 Gly Leu 390

Leu Phe

Met Gly

Phe Pro

Glu Glu 455 Gly Leu 470

Arg Gly Asn Thr

250

Leu Tyr Gly

265 Ala Glu Tyr 280

Thr Ile Ala

Gly Gly Tyr

Arg Leu Trp 330

Ile Trp Leu

34 5 Val Leu Phe 360

Val Glu Pro

Thr Gly Ala

Phe Thr Ser 410

Ile Met Ile

425 Gln Trp Gly 440

Glu Tyr Tyr

His Ile Ala

Arg Arg Asn 490

Pro Leu His 505

Tyr Cys

Tyr Phe

Ala Cys 300 Leu Ser 315

Asn Ile

Gly Arg

Ser Ile

Phe Val 380 Gly Gly 395

Ser Gln

Met Ala

Ser Met

Ala Ser 460 Gly Gln 475

Val Ile Val

Met Gly 270 Asp His 285

Phe Gly

Asp Leu

Trp Ile

Ala Ser 350 Cys Ala 365

Ser Arg

Asn Val

Tyr Ser

Cys Thr 430 Phe Leu 445

Glu Trp Lys Phe Leu Ala

255

Val Glu

Phe His

Met Ala

Gly Ala 320 Leu Gln 335

Ala Leu

Gln Ala

Arg Ser

Gly Ala 400 Thr Gly 415

Leu Pro

Ala Ala

Ser Glu

Ala Glu 480 Thr Ser 495

<210> 83

<211> 1825

<212> DNA

<213> Hordeum vulgare

<400> 83

tctcagttgc cactgcagct gatcaagcaa agaaggagac tagctcgatc aagcaaggtc gacacggcgg cgagcaagtt cacgttgccc aggctcttct ccttcgccaa cccacacatg ttcacatgct tcgtctccac ctttgccgcg ctgaacctcg ccaaggccga catagggaat ttctcgaggc ttgccatggg cgccatctgc ttcctcgtca tgctctcagc gccaaccgtc gggtacatcg ccgtacgctt cctcatcggc tactggatga gcaccatgtt caacagtaaa ggctggggca acatgggcgg tggtgccaca atccaaaaat gtggtgccac accatttgtg atgatgcaca tcgtgatggg cttgctggta aacctcgcga gcctccagaa gagaggagac

gctagctcca aacctccaag gaggaagcag 60

caaatggagg tggaggctgg tgcccatggc 120

gtggactccg agcacaaggc caagtccttc 180

cgcacctttc acctatcgtg gatatccttc 240

gcgcccctgg tgcccatcat ccgcgacaac 300

gccggtgtgg catctgtgtc tgggtctatc 360

gaccttttgg ggccgcggta tgggtgtgcc 420

ttctgcatgg ccgtcatcga tgacgcctca 480

ttctcccttg ccacctttgt gtcgtgccaa 540

atcatcggca cggtcaatgg cctcgcggcc 600

caactcatca tgccgcttgt tttccacgcc 660

gcatggcgta ttgcctactt cgtgcccgga 720

ctcaccatgg ggcaagatct ccctgatggg 780

atggccaagg acaagttctc caaggtcctt 840 tggggcgccg tcaccaacta ccggacatgg atctttgtcc tcctatatgg ctactgcatg 900

ggtgtcgaac tcaccactga caatgtcatt gccgagtact acttcgacca cttccaccta 960

gaccttcgcg ccgctggtac catcgccgcc tgcttcggta tggccaacat agtcgcacgt 1020

cctatgggcg gctacctctc tgaccttggc gcccgctatt tcggcatgcg tgccctttgg 1080

aacatctgga tcctccaaac cgctggtggc gctttctgca tctggctcgg tcgtgcatcg 1140

gccctccctg cctcggtgac cgccatggtc ctcttctcca tctgtgccca ggctgcctgt 1200

ggtgctatct ttggtgtcgc acccttcgtc tccaggcgtt cccttggcat catttccggg 1260

ttgaccggtg ccggtggaaa cgtgggcgca ggactcacac aacttctatt cttcacctca 1320

tcgcaatact ccactggtag gggtctcgag tacatgggca tcatgatcat ggcatgcacg 1380

ctgcccgtcg ctcttgtgca ctttccgcaa tggggatcca tgttcttccc ggccagcgct 1440

gatgccactg aggaggagta ctatgcttcc gagtggtcgg aggaggagaa gggcaagggt 1500

ctccatatcg caggccaaaa gttcgccgag aactcccgct cggagcgcgg caggcgcaac 1560

gtcatctttg ccacatccgc cacgccgccc aacaacacac cccagcaggt ataaggcatt 1620

tttttttgtt acctatgaat tttacagctc atggcgtata tatacaaaca gtatatttac 1680

gtttgcagcc ccagcgtaat aagttgtatg ggggtttatc tttttactat ggtaaaccta 1740

aggacatgta ttgtcaaatt gagtccgaaa ttaatacatg aacagtgttg atgtttgtgt 1800

atgcttgaaa aaaaaaaaaa aaaaa 1825

<210> 84 <211> 506 <212> PRT

<213> Hordeum vulgare

<400> 84

Met Glu Val Glu Ala Gly Ala His Gly Asp Thr Ala Ala Ser Lys Phe 1 5 10 15 Thr Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Ser Phe Arg Leu Phe 20 25 30 Ser Phe Ala Asn Pro His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser 35 40 45 Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro 50 55 60 Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Ala Lys Ala Asp Ile Gly Asn Ala 65 70 75 80 Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly 85 90 95 Ala Ile Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val 100 105 110 Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys Met Ala Val Ile Asp Asp Ala 115 120 125 Ser Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr 130 135 140 Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile 145 150 155 160 Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly 165 170 175 Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Phe His Ala Ile Gln Lys 180 185 190 Cys Gly Ala Thr Pro Phe Val Ala Trp Arg Ile Ala Tyr Phe Val Pro 195 200 205 Gly Met Met His Ile Val Met Gly Leu Leu Val Leu Thr Met Gly Gln 210 215 220 Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Arg Gly Asp Met 225 230 235 240 Ala Lys Asp Lys Phe 245 Ser Lys Val Leu Trp 250 Gly Ala Val Thr Asn 255 Tyr Arg Thr Trp Ile 260 Phe Val Leu Leu Tyr 265 Gly Tyr Cys Met Gly 270 Val Glu Leu Thr Thr 275 Asp Asn Val Ile Ala 280 Glu Tyr Tyr Phe Asp 285 His Phe His Leu Asp 290 Leu Arg Ala Ala Gly 2 95 Thr Ile Ala Ala Cys 300 Phe Gly Met Ala Asn Xle Val Ala Arg Pro Met Gly Gly Tyr Leu Ser Asp Leu Gly Ala 305 310 315 320 Arg Tyr Phe Gly Met 325 Arg Ala Leu Trp Asn 330 Ile Trp Ile Leu Gln 335 Thr Ala Gly Gly Ala 340 Phe Cys Ile Trp Leu 345 Gly Arg Ala Ser Ala 350 Leu Pro Ala Ser Val 355 Thr Ala Met Val Leu 360 Phe Ser Ile Cys Ala 365 Gln Ala Ala Cys Gly 370 Ala Ile Phe Gly Val 375 Ala Pro Phe Val Ser 380 Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly Gly Asn Val Gly Ala Gly 385 390 395 400 Leu Thr Gln Leu Leu 405 Phe Phe Thr Ser Ser 410 Gln Tyr Ser Thr Gly 415 Arg Gly Leu Glu Tyr 420 Met Gly Ile Met Ile 425 Met Ala Cys Thr Leu 430 Pro Val Ala Leu Val 435 His Phe Pro Gln Trp 440 Gly Ser Met Phe Phe 445 Pro Ala Ser Ala Asp 450 Ala Thr Glu Glu Glu 4 55 Tyr Tyr Ala Ser Glu 460 Trp Ser Glu Glu Glu Lys Gly Lys Gly Leu His Ile Ala Gly Gln Lys Phe Ala Glu Asn 465 470 475 480 Ser Arg Ser Glu Arg 485 Gly Arg Arg Asn Val 490 Ile Phe Ala Thr Ser 495 Ala Thr Pro Pro Asn 500 Asn Thr Pro Gln Gln 505 Val

<210> 85 <211> 1885 <212> DNA

<213> Prunus pérsica <400> 85

catttagtct aagtagtttc taaattcgaa acttgagtgc tgaaactcga gattcaaaat 60

ccaaactcca aaccccaaat tcaaaacccc aaaaacatgg ccgaagtcga aggtgaaccc 120

ggaagctcca tgcatggagt gacaggcaga gagcaaacct ttgcgttctc ggtagcttcc 180

cccatcgtcc caacagaccc aacagccaaa tttgacctac cagttgattc agagcacaag 240

gccaaagttt tcaaaatctt ctctttggcc aaccctcaca tgagaacttt ccacttgtct 300

tggatctctt tcttcacttg ctttgtctca acttttgcag cggccccact tgtccctata 360

atccgagaca acctcaacct cacaaagcaa gacattggaa atgctggggt tgcctctgtc 420

tcaggcagca tattctcaag acttgtaatg ggtgcagtgt gtgatttgct agggccacga 480

tatgggtgtg cctttctcat aatgctcagc gcacccactg tgttttgcat gtcatttgta 540

tctgatgctg ggggctactt ggcagtgaga ttcatgattg gtttttcgct tgctacattc 600

gtgtcatgcc agtattggat gagtaccatg tttaacagta agattattgg gctggttaat 660

gggacagctg ctgggtgggg aaacatgggt ggtggggcca cccagctctt gatgccattg 720

gtgtttgata taattggaag agttggtgca actcctttca ctgcttggag aattgccttt 780 ttcattcctg gctggcttca tgtcattatg ggaataatgg tcttgaccct tggccaagac 840

ttgcctgatg ggaatcttgc tgccctgcaa aagaagggtg atgttgccaa agatcaattc 900

tccaaggtat tgtggcatgc tgtaacaaat tacaggacat ggatctttgt ccttctctat 960

ggctactcca tgggtgttga attgtccact gataatgtca ttgctgaata cttctatgac 1020

aggttcaatc tcaagcttca cacagctgga atcattgctg caacatttgg catggccaac 1080

ctagtagccc gtccctttgg aggatttgcg tctgatcgag cagccaggta ctttggcatg 1140

aggggcaggc tatggactct ttggatcctc caaacactag gaggagtctt ctgcatctgg 1200

ctcggccgag caaactcact ccccattgcg gtctttgcca tgatcctctt ctctgtagga 1260

gcccaagctg catgcggagc cacctttggc gtcatcccct tcatctcccg gcgatccctc 1320

ggcatcatat cgggcctcac tggagcgggt gggaacttcg ggtccgggct gacccaacta 1380

gtgttcttct caagctcagc attctcaact gcgacagggt tgtctctgat gggggtaatg 1440

atcgtgtgct gcacacttcc agtgactttg gtgcacttcc ctcagtgggg gagcatgttc 1500

cttccgcctt caaaagatgt cgtgaaatcg acggaagagt tttactatgg agctgagtgg 1560

aatgaggagg agaagcagaa ggggctacac cagcagagtt tgaggtttgc agagaatagt 1620

aggtctgagc gtggtaggcg tgttgcctca gctccaaccc cacccaacac cacaccttcc 1680

catgtttagg ttatgttatg atctcatgag aattgtttct ttgaaatgct ttgcaaactc 1740

ctcatgcgcc caattattct ccttaagttg accgagaagc ttacttctct cttggggaaa 1800

ttttttcttt attattatca gttttttccc aagcatataa gtgaactgat gattattttt 1860

atttcagaaa aaaaaaaaaa aaaaa 1885

<210> 86 <211> 530 <212> PRT

<213> Prunus pérsica

<400> 86 Met Ala Glu Val Glu Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Gln 20 Thr Phe Ala Phe Ser 25 Val Ala Ser Pro Ile 30 Val Pro Thr Asp Pro 35 Thr Ala Lys Phe Asp 40 Leu Pro Val Asp Ser 45 Glu His Lys Ala Lys 50 Val Phe Lys Ile Phe 55 Ser Leu Ala Asn Pro 60 His Met Arg Thr Phe His Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu 85 Val Pro Ile Ile Arg 90 Asp Asn Leu Asn Leu 95 Thr Lys Gln Asp Ile 100 Gly Asn Ala Gly Val 105 Ala Ser Val Ser Gly 110 Ser Ile Phe Ser Arg 115 Leu Val Met Gly Ala 120 Val Cys Asp Leu Leu 125 Gly Pro Arg Tyr Gly 130 Cys Ala Phe Leu Ile 135 Met Leu Ser Ala Pro 140 Thr Val Phe Cys Met Ser Phe Val Ser Asp Ala Gly Gly Tyr Leu Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu 165 Ala Thr Phe Val Ser 170 Cys Gln Tyr Trp Met 175 Ser Thr Met Phe Asn 180 Ser Lys Ile Ile Gly 185 Leu Val Asn Gly Thr 190 Ala Ala Gly Trp Gly 195 Asn Met Gly Gly Gly 200 Ala Thr Gln Leu Leu 205 Met Pro Leu Val Phe 210 Asp Ile Ile Gly Arg 215 Val Gly Ala Thr Pro 220 Phe Thr Ala Trp 66 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Met Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ala 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Ala Lys Asp Gln Phe Ser Lys Val Leu 260 265 270 Trp His Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 2 95 300 Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe Asn Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Val Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Phe Ala Ser Asp Arg Ala Ala Arg Tyr Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 345 350 Trp Thr Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Ile Trp 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Asn Ser Leu Pro Ile Ala Val Phe Ala Met Ile Leu 370 375 380 Phe Ser Val Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Val Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Val Phe Phe Ser 420 425 430 Ser Ser Ala Phe Ser Thr Ala Thr Gly Leu Ser Leu Met Gly Val Met 435 440 445 Ile Val Cys Cys Thr Leu Pro Val Thr Leu Val His Phe Pro Gln Trp 450 455 460 Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Lys Asp Val Val Lys Ser Thr Glu 465 470 475 480 Glu Phe Tyr Tyr Gly Ala Glu Trp Asn Glu Glu Glu Lys Gln Lys Gly 485 490 495 Leu His Gln Gln Ser Leu Arg Phe Ala Glu Asn Ser Arg Ser Glu Arg 500 505 510 Gly Arg Arg Val Ala Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Thr Thr Pro Ser 515 520 525

His Val 530

<210> 87 <211> 1962 <212> DMA

<213> Prunus pérsica <400> 87

gcttcattta gtctaagtag tttctaaatt cgaaactcga gttttgaaac tcgagattca 60 aaatccaaac tccaaacccc aaataatggc cgaagtcgaa ggtgaacccg gaagctccat 120 gcatggagtg acaggcagag agcaaacctt tgcgttctca gtagcttccc ccatcgtccc 180 aacagaccca acagctaaat ttgacctacc tgttgattca gagcacaagg ccaaagtttt 240 caaaatcttc tctttggcca acccgcacat gagaaccttc cacttgtctt ggatctcctt 300 cttcacttgc tttgtctcaa cttttgcagc ggccccactt gtccctataa tccgagacaa 360 cctcaacctc acaaagcaag acattggaaa tgctggggtt gcctctgtct caggcagcat 420 attctcaaga cttgtaatgg gtgcagtgtg tgatttgcta gggccacgat atgggtgtgc 480

ctttctcata atgctcagcg cacccactgt gttttgcatg tcatttgtat ctgatgctgg 540

gggctacttg gcagtgagat tcatgattgg tttttcgctt gctacattcg tgtcatgcca 600

gtattggatg agtaccatgt ttaacagtaa gattattggg ctggttaatg ggacagctgc 660

tgggtgggga aacatgggtg gtggggccac ccagctcttg atgccattgg tgtttgatat 720

aattggaaga gttggtgcaa ctcctttcac tgcttggaga attgcctttt tcatccctgg 780

ctggcttcat gtcattatgg gaataatggt cttgaccctt ggccaagact tgcctgatgg 840

aaatcttgct gccctgcaaa agaagggtga tgttgccaaa gatcaattct ccaaggtatt SOO

gtggcatgct ataacaaact acaggacatg gatctttgtc cttctctatg gctactccat 360

gggtgttgaa ttgtccattg ataatgtcat tgctgaatac ttctatgaca ggttcaatct 1020

caagcttcac acagctggaa tcattgctgc agcatttggc atggccaaca tagtggcccg 1080

tccctttgga ggatttgcgt ctgatcgagc agccaggtac tttggcatga ggggcaggct 1140

atggactctt tggatcctcc aaacactagg aggagtcttt tgcatctggc tcggccgagc 1200

aaactcactc cccattgcgg tctttgccat gatcctcttc tctgtaggag cccaagctgc 1260

atgcggagcc acctttggcg tcatcccctt catctcccgg cgatccctcg gcatcatatc 1320

gggcctcact ggagcgggtg ggaacttcgg atccgggctg acccaactag tgttcttctc 1380

aagcgcagca ttctcaactg cgacagggtt gtctctgatg ggggtaatga tcgtgtgctg 1440

cacacttcca gtgactttgg tgcacttccc tcagtggggg agcatgttcc ttccgccttc 1500

aaaagatgtc gtgaaatcaa cggaagagtt ttactatgga gctgagtgga atgaggagga 1560

gaagcagaag gggctacacc agcagagttt gaggtttgca gagaatagta ggtctgagcg 1620

tggtaggcgt gttgcctcag ctccaacccc acccaacacc acaccttccc atgtttagtc 1680

aaacaaggga aaaaggtcaa catgcaccaa ggtgcatatg tggtgtggaa caaaccaata 1740

atcagagaag tgctattttg tatcatctca atcaatcata tgtgtactgt atttctatta 1800

gaaatacaag agatgatcag ttgagttgat acaagtagtt ttatttgtaa tgaaaataga 18 60

gttgccatat agcgtgtgcc tctatatatg tatcttgtac acaaatgttt ttactttcaa 1920

ggtttaaact tatgataatt ttcaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 1962

<210> 88 <211> 530 <212> PRT

<213> Prunus pérsica <400> 88 Met Ala Glu Val Glu Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Gln Thr Phe Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Ile Val Pro 20 25 30 Thr Asp Pro Thr Ala Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys 35 40 45 Ala Lys Val Phe Lys Ile Phe Ser Leu Ala Asn Pro His Met Arg Thr 50 55 60 Phe His Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Gln Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Phe Ser Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Asp Ala Gly Gly Tyr Leu Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Leu Met Pro Leu 195 200 205 Val Phe Asp Ile Ile Gly Arg Val Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Met Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ala 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Ala Lys Asp Gln Phe Ser Lys Val Leu 260 265 270 Trp His Ala Ile Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Ile Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 2 95 300 Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe Asn Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Ala Phe Gly Met Ala Asn Ile Val Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Phe Ala Ser Asp Arg Ala Ala Arg Tyr Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 345 350 Trp Thr Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Ile Trp 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Asn Ser Leu Pro Ile Ala Val Phe Ala Met Ile Leu 370 375 380 Phe Ser Val Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Val Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Val Phe Phe Ser 420 425 430 Ser Ala Ala Phe Ser Thr Ala Thr Gly Leu Ser Leu Met Gly Val Met 435 440 445 Ile Val Cys Cys Thr Leu Pro Val Thr Leu Val His Phe Pro Gln Trp 450 455 460 Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Lys Asp Val Val Lys Ser Thr Glu 465 470 475 480 Glu Phe Tyr Tyr Gly Ala Glu Trp Asn Glu Glu Glu Lys Gln Lys Gly 485 490 495 Leu His Gln Gln Ser Leu Arg Phe Ala Glu Asn Ser Arg Ser Glu Arg 500 505 510 Gly Arg Arg Val Ala Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Thr Thr Pro Ser 515 520 525 His Val 530

<210> 89

<211> 1890

<212> DNA

<213> Glycine max

<400> 89 tcacactttc ttccttaatt ttctagctct tgctacgtac ttgaattcaa ttagttatta 60 atggctgaga ttgagggttc tcccggaagc tccatgcatg gagtaacagg aagagaacaa 120

acatttgtag cctcagttgc ttctccaatt gtccctacag acaccacagc caaatttgct 180

ctcccagtgg attcagaaca caaggccaag gttttcaaac tcttctccct ggccaatccc 240

cacatgagaa ccttccacct ttcttggatc tccttcttca cctgcttcgt ctcgacattc 300

gcagcagcac ctcttgtgcc catcatccgc gacaacctta acctcaccaa aagcgacatt 360

ggaaacgccg gggttgcttc tgtctccgga agcatcttct caaggctcgc aatgggtgca 420

gtctgtgaca tgttgggtcc acgctatggc tgcgccttcc tcatcatgct ttcggcccct 4 80

acggtgttct gcatgtcctt tgtgaaagat gctgcggggt acatagcggt tcggttcttg 540

attgggttct cgttggcgac gtttgtgtcg tgccagtact ggatgagcac gatgttcaac 600

agtaagatta tagggcttgc gaatgggact gctgcggggt gggggaacat gggtggtgga 660

gccactcagc tcataatgcc tttggtgtat gagcttatca gaagagctgg ggctactccc 720

ttcactgctt ggaggattgc cttctttgtt ccgggtttca tgcatgtcat catggggatt 780

cttgtcctca ctctaggcca ggacttgcct gatggaaacc tcggggcctt gcggaagaag 840

ggtgatgtag ctaaagacaa gttttccaag gtgctatggt atgccataac aaattacagg SOO

acatggattt ttgctctcct ctatgggtac tccatgggag ttgaattaac aactgacaat 960

gtcattgctg agtatttcta tgacagattt aatctcaagc tacacactgc tggaatcatt 1020.

gctgcttcat ttggaatggc aaacttagtt gctcgacctt ttggtggata tgcttcagat 1080

gttgcagcca ggctgtttgg catgagggga agactctgga ccctttggat cctccaaacc 1140

ttaggagggg ttttctgtat ttggcttggc cgtgccaatt ctcttcctat tgctgtattg 1200

gccatgatcc tgttctctat aggagctcaa gctgcatgtg gtgcaacttt tggcatcatt 1260

i. cctttcatct caagaaggtc tttggggatc atatcaggtc taactggtgc aggtggaaac 1320

tttgggtctg gcctcaccca attggtcttc ttttcaacct ccaaattctc tactgccaca 1380

ggtctctcct tgatgggtgt aatgatagtg gcttgcactc taccagtgag tgttgttcac 14 40

ttcccacagt ggggtagcat gtttctacca ccctcaaaag atgtcagcaa atccactgaa 1500

gaattctatt acacctctga atggaatgag gaagagaagc agaagggttt gcaccagcaa 1560

agtctcaaat ttgctgagaa tagccgatct gagagaggaa agcgagtggc ttcagcacca 1620

acacctccaa atgcaactcc cactcatgtc tagccatagc acttcaatca aagaagatca 1680

tgaaacataa ttactgagca gtattgggaa tgaagaacca tgagttgaag aattttctaa 1740

taagaaatct tgtaacatgt agacatagaa tgttctggtt ctggtttgcg tgtggtgtaa 1800

gagttgtcta cttgtggtaa gtcataagta tcataatcag tatgtcaatg cagatcttga 1860

tgctgagtat caatagtatc aaaaaaaaaa 18 90

<210> 90

<211> 530

<212> PRT

<213> Glycine max

<400> 90

Met Ala Glu Ile Glu Gly Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 15 10 15

Gly Arg Glu Gln Thr Phe Val Ala Ser Val Ala Ser Pro Ile Val Pro

20 25 30

Thr Asp Thr Thr Ala Lys Phe Ala Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys

35 40 45

Ala Lys Val Phe Lys Leu Phe Ser Leu Ala Asn Pro His Met Arg Thr

50 55 60

Phe His Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80

Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr

85 90 95

Lys Ser Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile

100 105 110

Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly Ala Val Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Lys Asp Ala Ala Gly Tyr Ile Ala Val Arg Phe Leu 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile Ile Gly Leu Ala Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu 195 200 205 Val Tyr Glu Leu Ile Arg Arg Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Val Pro Gly Phe Met His Val Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Gly Ala 245 250 255 Leu Arg Lys Lys Gly Asp Val Ala Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Ile Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Ala Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe Asn Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Ser Phe Gly Met Ala Asn Leu Val Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Tyr Ala Ser Asp Val Ala Ala Arg Leu Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 34 5 350 Trp Thr Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Ile Trp 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Asn Ser Leu Pro Ile Ala Val Leu Ala Met Ile Leu 370 375 380 Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Val Phe Phe Ser 420 425 430 Thr Ser Lys Phe Ser Thr Ala Thr Gly Leu Ser Leu Met Gly Val Met 435 440 445 Ile Val Ala Cys Thr Leu Pro Val Ser Val Val His Phe Pro Gln Trp 450 455 460 Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Lys Asp Val Ser Lys Ser Thr Glu 465 470 475 480 Glu Phe Tyr Tyr Thr Ser Glu Trp Asn Glu Glu Glu Lys Gln Lys Gly 485 490 495 Leu His Gln Gln Ser Leu Lys Phe Ala Glu Asn Ser Arg Ser Glu Arg 500 505 510 Gly Lys Arg Val Ala Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Ala Thr Pro Thr 515 520 525

His Val 530 <210> 91 <211> 1990 <212> DNA

<213> Lotus japonicus <400> 91

gcacaagttt ttctctgttg catgttctgt ttctgaatta ctttaattac ttcacacaac 60

aacattcaac aatggttgaa attgaaggat ctccaggaac ctccatgcat ggagtaacag 120

ggagggaaca aaccttcata tcctcagttt cttccccaat ggtcccaaca gacaccacag 180

ccaaattcga tttaccagtt gattcacagc acaaagccaa agttttcaaa ctgttctcat 240

tagctaatcc tcacatgaca accttccact tatcatggat ttccttcttc acctgctttg 300

tctctacctt tgcagcagct cctcttgtcc ccatcatccg agacaacctc aatctcacca 360

aaagcgacat tggcaacgcc ggtgtcgcgt ctgtctccgg cagcattttc tccaggctca 420

ccatgggtgt aatttgtgac ctcttaggcc cacgttacgg gtgtgccttc ctgatcatgc 480

tgtctgcacc aactgtgttc tgcatgtcgt ttgtgaatga tgctgcaggc tacattgtgg 540

ttcggttcat gatcgggttc tcattggcca cgtttgtttc gtgccagtac tggatgagta 600

ccatgtttaa cagtaagatt attgggcttg ttaatggaac tgcagctggt tggggtaaca 660

tgggtggtgg agccactcag ctcatcatgc ctattgtcta tgaattgatc aggagagcgg 720

ggtccactgg gttcactgct tggaggattg ccttcttcat ccctggtttc atgcatgttt 780

tcatggggat ccttgtctta acccttggcc aagacttgcc tgatggcaac ctcagtgccc 840

tccagaagaa gggtgatgtt gctaaagaca aattctccaa ggtgttatgg tatgccataa 900

caaattacag gacatggatc tttgcacttc tctatggata ctctatggga gtcgaattaa 960

ccactgacaa tgtcattgct gagtattttt atgacagatt taatctgaag ttgcacacag 1020

ttggaatcat tgctgcttct tttggaatgg caaatcttgt tgctcgcccc tttggcggat 1080

atgtatctga tgttgcagcc cggttgtttg gtatgagagg aagactgtgg actctgtgga 1140

tcctccaaac acttggagga gtgttctgta tatggcttgg gcgtgcgaat tcacttccaa 1200

ttgcggtgtt ggcgatgatc cttttctcag ttggagctca agctgcttgt ggtgcaacat 1260

ttggaatcat tcctttcatc tcaaaaaggt ctttggggat catttcaggt ctaactggtg 1320

caggtggcaa ctttggttct ggattgacac agttggtatt cttttctact tcaagattct 1380

ccacaggtgc aggattgtca tggatgggtg tgatgattgt tggttgcact cttccggtga 1440

ctcttgttca cttcccacag tggggtagca tgttccttcc tccttcaaaa gacatcaaca 1500

agtccagtga ggaacactat tacactgctg aatgggatga ggaagagagg aagaaggggt 1560

tgcactctca aagtcttaag tttgcagaga atagtcgctc tgagagagga aaacgtgttt 1620

cctctgctcc aactcctcca aacacaaccc ctacccatgt ctaagatgga tggatgatca 1680

ccacagtgga aagctaatga ggaaaagagt atatggatcc cttgattgaa taatttatcc 1740

ttaagccttt aaagatactt tggcatccag aaatttggtg tttgcccttc aaattctact 1800

tgttatagaa atttggtgtg attttctata agggactttg gtgtctgtgg gagtgtgggt 1860

ctatcagtta attatacaaa caggtggtgt acaaaaataa tatattgagt tttttaattt 1920

tggtgtgata tatattaatg aatgttactc aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa actcgagggg 1980

gggcccggta 1990

<210> 92 <211> 530 <212> PRT

<213> Lotus japonicus <400> 92

Met Val Glu Ile Glu Gly Ser Pro Gly Thr Ser Met His Gly Val Thr 15 10 15

Gly Arg Glu Gln Thr Phe Ile Ser Ser Val Ser Ser Pro Met Val Pro

20 25 30

Thr Asp Thr Thr Ala Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Gln His Lys

35 40 45

Ala Lys Val Phe Lys Leu Phe Ser Leu Ala Asn Pro His Met Thr Thr 50 Phe His 65

Ala Ala

Lys Ser

Phe Ser

Tyr Gly 130 Met Ser 145

Ile Gly

Thr Met

Gly Trp

Val Tyr 210 Arg Ile 225

Leu Val

Leu Gln

Trp Tyr

Gly Tyr 290 Tyr Phe 305

Ala Ala

Tyr Val

Trp Thr

Leu Gly 370 Phe Ser 385

Pro Phe

Ala Gly

Thr Ser

Ile Val 450 Gly Ser 4 65

Glu His

Leu Ser

Ala Pro

Asp Ile 100 Arg Leu 115

Cys Ala

Phe Val

Phe Ser

Phe Asn 180 Gly Asn 195

Glu Leu

Ala Phe

Leu Thr

Lys Lys 260 Ala Ile 275

Ser Met

Tyr Asp

Ser Phe

Ser Asp 340 Leu Trp 355

Arg Ala

Val Gly

Ile Ser

Gly Asn 420 Arg Phe 435

Gly Cys Met Phe Tyr Tyr

Trp Ile

70 Leu Val 85

Gly Asn

Thr Met

Phe Leu

Asn Asp 150 Leu Ala 165

Ser Lys

Met Gly

Ile Arg

Phe Ile 230 Leu Gly 245

Gly Asp

Thr Asn

Gly Val

Arg Phe 310 Gly Met 325

Val Ala

Ile Leu

Asn Ser

Ala Gln 390 Lys Arg 405

Phe Gly

Ser Thr

Thr Leu

Leu Pro 470 Thr Ala

55

Ser Phe

Pro Ile

Ala Gly

Gly Val 120 Ile Met 135

Ala Ala

Thr Phe

Ile Ile

Gly Gly 200 Arg Ala 215

Pro Gly

Gln Asp

Val Ala

Tyr Arg 280 Glu Leu 2 95

Asn Leu

Ala Asn

Ala Arg

Gln Thr 360 Leu Pro 375

Ala Ala

Ser Leu

Ser Gly

Gly Ala 440 Pro Val 455

Pro Ser

Phe Thr

Ile Arg 90

Val Ala 105

Ile Cys

Leu Ser

Gly Tyr

Val Ser 170 Gly Leu 185

Ala Thr

Gly Ser

Phe Met

Leu Pro 250 Lys Asp 265

Thr Trp

Thr Thr

Lys Leu

Leu Val 330 Leu Phe 34 5

Leu Gly

Ile Ala

Cys Gly

Gly Ile 410 Leu Thr 425

Gly Leu

Thr Leu Lys Asp Glu Trp Asp Glu

60

Cys Phe Val 75

Asp Asn Leu

Ser Val Ser

Asp Leu Leu 125

Ala Pro Thr

140 Ile Val Val 155

Cys Gln Tyr

Val Asn Gly

Gln Leu Ile 205

Thr Gly Phe 220 His Val Phe 235

Asp Gly Asn

Lys Phe Ser

Ile Phe Ala 285

Asp Asn Val

300 His Thr Val 315

Ala Arg Pro

Gly Met Arg

Gly Val Phe 365

Val Leu Ala

380 Ala Thr Phe 395

Ile Ser Gly

Gln Leu Val

Ser Trp Met 445

Val His Phe

460 Ile Asn Lys 475

Glu Glu Arg

Ser Thr Phe 80

Asn Leu Thr 95

Gly Ser Ile 110

Gly Pro Arg

Val Phe Cys

Arg Phe Met 160

Trp Met Ser

17 5 Thr Ala Ala 190

Met Pro Ile

Thr Ala Trp

Met Gly Ile 240

Leu Ser Ala

255 Lys Val Leu 270

Leu Leu Tyr

Ile Ala Glu

Gly Ile Ile 320

Phe Gly Gly

335 Gly Arg Leu 350

Cys Ile Trp

Met Ile Leu

Gly Ile Ile 400

Leu Thr Gly

415 Phe Phe Ser 430

Gly Val Met

Pro Gln Trp

Ser Ser Glu 480

Lys Lys Gly

k 485

490

495

Arg Ser Glu Arg 510

Leu His Ser Gln Ser Leu Lys Phe Ala Glu Asn Ser

500

505

Gly Lys Arg Val Ser Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn

Thr Thr Pro Thr 525

515

520

His Val 530

<210> 93 <211> 1838 <212> DNA

<213> Nicotiana tabacum <400> 93

ttaaagaaga aattaaaaat ggttgatatt gaaggatcac caggtagttc tatgcatgga 60

gttacaggta gagaaccagt tcttgctttc tctgttgcat ctccaatggt acaaactgat 120

accactgcac attttaaagt tccggtcgat tctgaacaca aggccaaggt tttcaaattc 180

tactcatttt caaaacctca cggtctaact tttcaacttt cttggatttc tttctttact 240

tgttttgttt ctacttttgc tgctgcccct ttagttccta ttattagaga caaccttaac 300

ttgaccaaaa tggacgttgg taatgctggg gttgcctctg tttccggaag tattctatct 360

aggcttgcaa tgggtgcgat ttgtgacatg ttgggaccaa gatatggatg cgcgtttctt 420

atcatgttat cagctccgac tgttttttgc atgtctttcg tgtcttcggc tggtggctac 480

gttgctgtga gattcatgat tggattctca ctcgcgacgt ttgtgtcgtg tcaatattgg 540

atgagtacga tgtttaatag tcagattatt ggacttgtta atggaacagc agcaggatgg 600

ggaaatatgg ggggtggagc tactcagctt attatgccta ttctctatga tattattaga 660

agagcaggag ccaccccttt tactgcttgg agaattgctt tctttattcc tggttggctt 720

catgttatta tgggaatttt agtgttaact cttggccaag atttgcctga tggtaacctt 780

gcttccctac agaagaaagg cgatgtttct aaagataagt tctctaagat attgtggtat 840

gctgcaacaa attacaggac atggatcttt gtcctgctct atggttactc catgggagtt 900

gaattgacta cagataatgt gattgctgag tacttctttg atagatttga tctaaagctt 960

cacacggctg gaatcattgc tgccacattt ggtatggcta atctcttagc tcgacctttt 1020

ggaggatggt catcagatat tgcagccaaa cattttggaa tgagaggcag attatggaac 1080

ttatggattt tacaaacact tggtggtgtt ttctgtttct tacttggaaa agcaaacaca 1140

cttcctatgg ctatagcttg gatgatcata ttctccttag gtgctcaagc agcatgtgga 1200

gctacatttg gtattattcc tttcatttcg cgtcgatcgt taggtataat ctcaggtatg 1260

acaggagctg gaggaaattt tggttctgga ttgacacaac tcttgttttt cacaactaca 1320

aaatggtcaa cagaaacagg attgagttat atggggatta tgattatagc ttgtacactt 1380

cctgtatctt tggttcattt cccacaatgg ggaagtatgt ttttgcctcc aactaaagat 1440

cctgttaaga gtactgaaga gcattacttc acgtctgagt acactgaggc tgagaagcaa 1500

aagggtatgc accaaaacag catcaagttt gctgaaaact gtcggtcgga gcgtggtaág 1560

cgtgtgggtt cagctcttac tccgcctaat gtaacgccaa accgtgtctg agcttgagtc 1620

tcacggatca gtacggagaa atagtgattt tgaaaagctt acttgcttaa ttggtgtttg 1680

tatcaacaca ataaacgtgt gatatgtgtc ttttaatgag ctttatatta cccaagtgtg 1740

agtagttaat ttgtattatc actttgtgtt gtgagactga tcttaatatt aaaacagttg 1800

atttggtgta aactttcatt aaaaaaaaaa aaaaaaaa 1838

<210> 94 <211> 530 <212> PRT

<213> Nicotiana tabacum

<400> 94

Met Val Asp Ile Glu Gly Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Pro Val Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Met Val Gln 20 25 30 Thr Asp Thr Thr Ala His Phe Lys Val Pro Val Asp Ser Glu His Lys 35 40 45 Ala Lys Val Phe Lys Phe Tyr Ser Phe Ser Lys Pro His Gly Leu Thr 50 55 60 Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Met Asp Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Leu Ser Arg Leu Ala Met Gly Ala Ile Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Ile 195 200 205 Leu Tyr Asp Ile Ile Arg Arg Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Ser Lys Asp Lys Phe Ser Lys Ile Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Leu Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Trp Ser Ser Asp Ile Ala Ala Lys His Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 34 5 350 Trp Asn Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Phe Leu 355 360 365 Leu Gly Lys Ala Asn Thr Leu Pro Met Ala Ile Ala Trp Met Ile Ile 370 375 380 Phe Ser Leu Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr 420 425 430 Thr Thr Lys Trp Ser Thr Glu Thr Gly Leu Ser Tyr Met Gly Ile Met 435 440 445 Ile Ile Ala Cys 450

Thr Leu Pro Val Ser 455

Leu Pro Pro Thr Lys 470

Leu Val His Phe 460

Asp Pro Val Lys 475

Pro Gln Trp

Gly Ser Met Phe 465

Ser Thr Glu 480

Gln Lys Gly 495

Glu His Tyr Phe

Thr Ser Glu Tyr Thr 485

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Met His Gln Asn 500

Gly Lys Arg Val

515

Ser Ile Lys Phe Ala 505

Gly Ser Ala Leu Thr 520

Glu Asn Cys Arg

Pro Pro Asn Val Thr Pro Asn 525

Ser Glu Arg 510

Arg Val 530

<210> 95 <211> 1646 <212> DNA

<213> Lycopersicon esculentum <400> 95

gcctaaaatg ggtgatattg aaggatcacc aggaagttca atgcatggtg ttactggtag 60

agagccagtt cttgcatttt cagttgcttc actaattgta ccaactgata catcagccaa 120

tttcaaagtc cctgttgatt ctgaacataa agctaaagtt tttaaatttt attcgttttc 180

gaaacctcat ggactaacgt ttcaactctc atggatttca ttttgtactt gtttcgtatc 240

gacttttgct gcagcccctt tagtccctat tattagggac aatcttaatc taactaaaat 300

ggatgttggt aatgctggag ttgcctctgt ttcgggtagt atcttgtcta ggctagctat 360

gggcgcgatt tgtgacatgt taggtcctag atatggttgc gcgttcctta taatgttatc 420

agccccaact gttttatgta tgtcttttgt gtcatcggct ggagggtacg ttgctgtgag 480

gtttatgatt gggttttcac tagcaacgtt tgtgtcatgt cagtattgga tgagtacgat 540

gtttaatagt caaatcattg gacttgtgaa tggtacagct gctggatggg gtaatatggg 600

tggtggtgct actcaactta ttatgccttt gctctacgat ataatacgta gagcaggggc 660

aaccccgttc actgcttgga gaatcgcatt ttttattcct ggatggcttc atgttattat 720

gggaatttta gttttaactc ttggacaaga tttacctgat ggtaacctcg cttctttaca 780

gaagaaaggc gatgtttcta aagataaatt ctcaaagata ttatggtatg ctgcaacaaa 840

ttacagaaca tggatccttg ttctgctcta tggatactca atgggagttg aattaactac 900

agataacgtg attgctgagt atttcttcga tagatttgat ttgaagcttc atacggctgg 960

aatcatcgct gcaacatttg gcatggctaa cttattagcg cgaccatttg gaggatggtc 1020

atcagatgtt gcagctaaac atttcgggat gagaggcaga ttatggaatt catggatttt 1080

acaaacactt ggtggtgtgt tctgtttact acttggaagg gctactacac ttcctctggc 1140

tattacttgg atgatcatat tctcaatagg tgcacaagca gcatgtggtg taacgtttgg 1200

aattattccc tttatttcgc gaagatcatt aggtataata tcaggtatga caggagctgg 1260

aggcaatttt ggttccggat tgacacaact actgtttttc acgagtacaa agtactcgac 1320

aggaacagga ctaacgtata tggggatgat gatcatcgcg tgtacacttc cagtaatgtt 1380

agttcgtttt ccacagtggg gtagtatgtt tttgcctcca tctaaagatc ctattaaggg 1440

tactgaagaa cattattttg gttctgagta tactgaggat gagaaacaaa agggaatgca 1500

ccagaacagc atcaagttcg cggaaaacag caggacagag cgtgggaaga agcgcgttgg 1560

ttcagcacct actccgccta atgtaacacc aaatcgcgtc tgatggggaa aaaaattaaa 1620

atacttactt cgcagttcat gctcgt 1646

<210> 96 <211> 531 <212> PRT

<213> Lycopersicon esculentum

<400> 96 Met Gly Asp Ile Glu Gly Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Pro Val Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Leu Ile Val Pro 20 25 30 Thr Asp Thr Ser Ala Asn Phe Lys Val Pro Val Asp Ser Glu His Lys 35 40 45 Ala Lys Val Phe Lys Phe Tyr Ser Phe Ser Lys Pro His Gly Leu Thr 50 55 60 Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Cys Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Met Asp Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Leu Ser Arg Leu Ala Met Gly Ala Ile Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Leu Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu 195 200 205 Leu Tyr Asp Ile Ile Arg Arg Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ala Ser 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Ser Lys Asp Lys Phe Ser Lys Ile Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Leu Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Leu Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Trp Ser Ser Asp Val Ala Ala Lys His Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 345 350 Trp Asn Ser Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Leu Leu 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Thr Thr Leu Pro Leu Ala Ile Thr Trp Met Ile Ile 370 375 380 Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Val Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr

420 425 430 Ser Thr Lys Tyr Ser Thr Gly Thr Gly Leu Thr Tyr Met Gly Met Met

435 440 445

Ile Ile Ala Cys Thr Leu Pro Val Met Leu Val Arg Phe Pro Gln Trp

450 455 460

Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Lys Asp Pro Ile Lys Gly Thr Glu 465 470 475 480

Glu His Tyr Phe Gly Ser Glu Tyr Thr Glu Asp Glu Lys Gln Lys Gly

485 490 495

Met His Gln Asn Ser Ile Lys Phe Ala Glu Asn Ser Arg Thr Glu Arg

500 505 510

Gly Lys Lys Arg Val Gly Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Val Thr Pro

515 520 525

Asn Arg Val 530

<210> 97 <211> 1680 <212> DNA

<213> Populus tremula χ Populus <400> 97

cttccctagt ctgaaactcc tatcacaatc gctgacgttg agggttcccc gggtagttcc tttgcctttt cggttgcctc tcctacagtc ccagttgatt ctgagcacaa ggccaaagtg atgagaacat ttcacctttc ttggatatca gcagcacccc ttgttcctat cattcgggac aatgctggtg ttgcttctgt ctctggaagc tgtgacctct tggggccgcg atatgggtgt gtgttttgca tgtcgtttgt ggactcagct ggattctctc ttgcaacgtt cgtgtcatgc aagattatcg gactcgtcaa tggaaccgca actcagctcg taatgccctt ggtctacgag agtgcttgga ggatagcatt ttttgtccca gtcttgaatc taggccaaga cttgcctgat gatgttgcta aagataagtt ctccaaggta tggatctttg tccttctcta tggctactcc atcgccgagt acttctataa caggttcgat gctacctttg gtatggctaa ccttgtagct gcagcaaggt acttcgggat gagaggcagg ggaggagttt tctgtacttg gctcggtcga atgattctct tctctattgg agcgcaagcc tttatttctc gacgatcatt gggcatcata gggtccggat tgacacaact agtattcttt ctatcctgga tgggtgtcat gatttgcggc ccacaatggg gcggcatgtt ctttccgcct tcctattatg catcagagtg ggatgaggac ctcaagtttg cggagaacag ccgatctgaa ccaccaagta ccacaccaaa ccgtgtgtag

<210> 98

<211> 529

<212> PRT

<213> Populus tremula χ Populus

tremuloides

cggtttggaa gagaatagag gaagggaatg 60

atgcatggag tgacaggcag agaacaaagc 120

ccgacggata caacagcaaa atttgccttg 180

ttcaagattt tctcttttgc taaccctcat 240

ttcttcactt gttttgtctc cacttttgct 300

aacctcaatt taaccaaaag tgacatcggt 360

atcttctcta ggcttgtaat gggtgcagtt 420

gcgtttctga tcatgctctc agccccaact 480

ggaggatacc tagcagtccg tttcatgatt 540

cagtactgga tgagcacaat gtttaacagc 600

gccggttggg gcaatatggg tggaggtgca 660

ctcattaagc gagctggttc aacttcattc 720

ggatggcttc atgttatcat gggaatcttg 780

gggaatctcg gtgccctaaa gaagaagggt 840

ctctggtatg ctgttacaaa ctataggacc 900

atgggagttg aattatccac cgacaatgtt 960

ctaaagcttc acacagcagg tgtcattgct 1020

cgtccctttg gtggatattt ttctgatgta 1080

ttatgggtgc tctggatttt acagacactt 1140

gctaattcac ttccccttgc tgtcaccgct 1200

gcatgtggag caacttttgg tatcattccc 1260

tccggcctaa ctggtgcagg tggaaatttt 1320

tcgagctcaa gtttgtccac agctgcaggt 1380

tgcactctcc ctgtgacatt ggtttacttc 1440

tctaaagacg tagtgaagtc aacagaagaa 1500

gagaagcaaa ggggcatgca ccagaaaagc 1560

cgtggcaagc gcattgcctc tgcaccaaca 1620

atcaaagcgt tggccatgct tctatagtgc 1680

tremuloides <400> 98 Met Ala Asp 1

Gly Arg Glu

Thr Asp Thr 35

Ala Lys Val 50

Phe His Leu 65

Ala Ala Ala

Lys Ser Asp

Phe Ser Arg 115

Tyr Gly Cys 130

Met Ser Phe 145

Ile Gly Phe

Thr Met Phe

Gly Trp Gly 195

Val Tyr Glu 210 Arg Ile Ala 225

Leu Val Leu

Leu Lys Lys

Trp Tyr Ala 275

Gly Tyr Ser

290 Tyr Phe Tyr 305

Ala Ala Thr

Tyr Phe Ser

Trp Val Leu 355

Leu Gly Arg

370 Phe Ser Ile 385

Pro Phe Ile

Val Glu 5

Gln Ser 20

Thr Ala

Phe Lys

Ser Trp

Pro Leu

85 Ile Gly 100

Leu Val

Ala Phe

Val Asp

Ser Leu 165 Asn Ser 180

Asn Met

Leu Ile

Phe Phe

Asn Leu 245 Lys Gly 260

Val Thr

Met Gly

Asn Arg

Phe Gly 325 Asp Val 340

Trp Ile

Ala Asn

Gly Ala

Ser Arg 405

Gly Ser Pro

Phe Ala Phe

Lys Phe Ala 40

Ile Phe Ser 55

Ile Ser Phe 70

Val Pro Ile

Asn Ala Gly

Met Gly Ala 120

Leu Ile Met

135 Ser Ala Gly 150

Ala Thr Phe

Lys Ile Ile

Gly Gly Gly 200

Lys Arg Ala

215 Val Pro Gly 230

Gly Gln Asp

Asp Val Ala

Asn Tyr Arg 280

Val Glu Leu

295 Phe Asp Leu 310

Met Ala Asn

Ala Ala Arg

Leu Gln Thr 360

Ser Leu Pro

375 Gln Ala Ala 390

Arg Ser Leu

Gly Ser 10 Ser Val 25

Leu Pro

Phe Ala

Phe Thr

Ile Arg

90 Val Ala 105

Val Cys

Leu Ser

Gly Tyr

Val Ser 170 Gly Leu 185

Ala Thr

Gly Ser

Trp Leu

Leu Pro 250 Lys Asp 265

Thr Trp

Ser Thr

Lys Leu

Leu Val 330 Tyr Phe 34 5

Leu Gly

Leu Ala

Cys Gly

Gly Ile 410

Ser Met His

Ala Ser Pro

Val Asp Ser 45

Asn Pro His 60

Cys Phe Val 75

Asp Asn Leu

Ser Val Ser

Asp Leu Leu 125

Ala Pro Thr 140

Leu Ala Val 155

Cys Gln Tyr

Val Asn Gly

Gln Leu Val 205

Thr Ser Phe 220 His Val Ile 235

Asp Gly Asn

Lys Phe Ser

Ile Phe Val 285

Asp Asn Val

300 His Thr Ala 315

Ala Arg Pro

Gly Met Arg

Gly Val Phe 365

Val Thr Ala

380 Ala Thr Phe 395

Ile Ser Gly

Gly Val Thr 15

Thr Val Pro 30

Glu His Lys

Met Arg Thr

Ser Thr Phe 80

Asn Leu Thr 95

Gly Ser Ile 110

Gly Pro Arg

Val Phe Cys

Arg Phe Met 160

Trp Met Ser

175 Thr Ala Ala 190

Met Pro Leu

Ser Ala Trp

Met Gly Ile 240

Leu Gly Ala

255 Lys Val Leu 270

Leu Leu Tyr

Ile Ala Glu

Gly Val Ile 320

Phe Gly Gly

335 Gly Arg Leu 350

Cys Thr Trp

Met Ile Leu

Gly Ile Ile 400

Leu Thr Gly 415 Ala Gly Gly Asn 420 Phe Gly Ser Gly Leu 425 Thr Gln Leu Val Phe 430 Phe Ser Ser Ser Ser 435 Leu Ser Thr Ala Ala 440 Gly Leu Ser Trp Met 445 Gly Val Met Ils Cys 450 Gly Cys Thr Leu Pro 455 Val Thr Leu Val Tyr 460 Phe Pro Gln Trp Gly Gly Met Phe Phe Pro Pro Ser Lys Asp Val Val Lys Ser Thr Glu 465 470 475 480 Glu Ser Tyr Tyr Ala 485 Ser Glu Trp Asp Glu 490 Asp Glu Lys Gln Arg 495 Gly Met His Gln Lys 500 Ser Leu Lys Phe Ala 505 Glu Asn Ser Arg Ser 510 Glu Arg Gly Lys Arg 515 Ile Ala Ser Ala Pro 520 Thr Pro Pro Ser Thr 525 Thr Pro Asn

Arg

<210> 99 <211> 1611 <212> DNA

<213> Nicotiana tabacum <400> 99

ttaaaaaaaa aatgggtgat attgagggcg aaccagggag ttccatgcat ggagtcactg 60

gtagagagcc agttcttgct ttctcagtgg cttctccgat ggtgccaact gataccactg 120

caaaattttc agtaccagtt gatactgaac acaaagccaa gatttttaag ttctattcat 180

tttcaaagcc acatggtctt actttccagc tctcctggat ttctttcttc acttgttttg 240

tttcaacttt tgccgctgcc cctttagttc ctatcattag ggacaacctt aatttaacca 300

aaatggatgt tggtaatgcc ggagttgctt ccgtttccgg aagtatttta tctaggcttg 360

ttatgggtgc agtttgtgat atgttagggc caagatatgg ctgtgcattt ctgattatgt 420

tgtcagcccc aactgtattt tgcatgtcat ttgtgtcgtc ggctggagga tatgttgctg 4 80

tccggttcat gatcggattc tcgctagcaa catttgtgtc gtgccaatat tggatgagta 540

ctatgtttaa tagtcagatt ataggacttg tcaatgggac agctgcagga tggggaaata 600

tgggtggtgg tgcgactcaa cttattatgc caattgtgta tgatataata agaagagcag 660

gagcaactcc attcactgct tggagaattg catttttcat tcctggctgg cttcatattg 720

tgatgggtat tttggtgttg actcttggcc aagatttgcc tgatgggaac cgtggtgatt 780

tacagaagaa gggtgatgtt tctaaagata aattctccaa catattgtgg tacgctgcaa 840

caaactacag gacgtggatc tttgttcttc tctacggata ctctatggga gttgaactgt 900

ctacagacaa cgtaattgcg gagtacttct tcgacagatt tgatctaaag cttcacacag 960

cgggaattat tgcagcgacc tttggtatgg ctaatttatt agctcgtcca ttcggaggat 1020

tttcttcaga ttacgcagcc aaaagattcg gcatgagagg cagactttgg gtcctttgga 1080

tattacaaac actgggagga gtattctgcg tcctgttggg ccgttcaaat cctctgccca 1140

tagccgtcac attcatgatc cttttctcta ttggtgctca agctgcatgt ggtgcaacat 1200

tcggtattat tccattcatt tctcgccgat ccttaggtat aatctcagga atgactgggg 1260

ctggaggaaa tttcggttct ggattgacac aactgttgtt cttcacgagc tcaaaatact 1320

cgacagcaac agggctaact tacatgggac taatgatcat aggatgcact cttccagtga 1380

ctttctgtca tttcccacaa tggggaagta tgtttttccc accaacgaaa gaccctgtta 14 40

agggaagtga ggaacattat tatgccgcag agtataccga agctgagagg cagaaaggta 1500

tgcaccaaaa cagcttgaag ttcgccgaga actgccgatc ggagcgtggc aagcgcgtgg 1560

gatcggcacc tactcctcca aatttaacgc ctaatcgtgt ctgagatccc g 1611

<210> 100 <211> 530 <212> PRT <213> Nicotiana tabacum <400> 100

Met Gly Asp Ile Glu Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Pro Val Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Met Val Pro 20 25 30 Thr Asp Thr Thr Ala Lys Phe Ser Val Pro Val Asp Thr Glu His Lys 35 40 45 Ala Lys Ile Phe Lys Phe Tyr Ser Phe Ser Lys Pro His Gly Leu Thr 50 55 60 Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Met Asp Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Leu Ser Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 11ε Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Ile 195 200 205 Val Tyr Asp Ile Ile Arg Arg Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Ile Val Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Gly Asp 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Asp Val Ser Lys Asp Lys Phe Ser Asn Ile Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Leu Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Phe Ser Ser Asp Tyr Ala Ala Lys Arg Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 345 350 Trp Val Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Val Leu 355 360 365 Leu Gly Arg Ser Asn Pro Leu Pro Ile Ala Val Thr Phe Met Ile Leu 370 375 380 Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr Gly Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Lsu Phe Phe Thr

420 425 430

Ser Ser Lys Tyr Ser Thr Ala Thr Gly Leu Thr Tyr Met Gly Leu Met

435 440 445

Ile Ile Gly Cys Thr Leu Pro Val Thr Phe Cys His Phe Pro Gln Trp

450 455 460

Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Thr Lys Asp Pro Val Lys Gly Ser Glu 465 470 475 480

Glu His Tyr Tyr Ala Ala Glu Tyr Thr Glu Ala Glu Arg Gln Lys Gly

485 490 495

Met His Gln Asn Ser Leu Lys Phe Ala Glu Asn Cys Arg Ser Glu Arg

500 505 510

Gly Lys Arg Val Gly Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Leu Thr Pro Asn 515 520 525

Arg Val 530

<210> 101 <211> 1992 <212> DNA

<213> Nicotiana plumbaginifolia <400> 101

ttcactttca acatttaatc aatcttagtg ctatcagttt attttcctta agaaaaaaaa 60

tggctgatat tgagggagaa ccagggagtt ctatgcatgg agtcactggt agagagccag 120

ttcttgcttt ctcagtggct tctccaatgg tgccaactga taccactgct aaattttcag 180

taccagttga tactgaacac aaagccaagg tttttaaatt ttattcattt tcaaagcctc 240

atggacttac tttccagctc tcctggattt ctttcttcac ttgttttgta tcaacttttg 300

ctgctgctcc tttagttcct ctcattaggg acaaccttaa tttaaccaaa atggatgttg 360

gtaatgccgg agttgcttcc gtttctggaa gtattttatc taggcttgtt atgggtgcag 420

tttgtgatat gttagggcca agatacggct gtgcatttct gattatgttg tcagccccaa 480

ctgtattttg tatgtcgttc gtgtcgtcgg ctggaggata tgttgctgtc cggttcatga 540

tcggattctc gctcgcaaca tttgtgtcgt gccaatattg gatgagtact atgtttaata 600

gtcagattat aggacttgtc aatggaacag ctgctgggtg gggaaatatg ggtggtggtg 660

cgactcaact tattatgcca attctgtatg atataataag aaaagcagga gcaactccat 720

tcactgcttg gagaattgca tttttcattc ctggctggct tcatgttgta atgggtattt 780

tggtgttgac tcttggtcaa gatttgcctg atggaaaccg tggtgattta cagaagaagg 840

gtggtgtttc taaagataaa ttcaccaaca tattgtggta cgctgcaaca aactacagga 900

cgtggatctt tgtccttctc tacggatact ctatgggagt tgaactgtct accgacaacg 960

taattgcaga gtacttcttc gacagatttg atctaaagct tcacacagcg ggaatcatcg 1020

cagccacatt tggtatggca aatttattag ctcgtccatt cggagggttt tcttcagatt 1080

tcgcagccaa aagattcggc atgaggggta gactttgggt cctttggata ttacaaacac 1140

ttggaggagt attctgtgtc ctgttgggcc gttcaaattc tctgcccata gctgtcacat 1200

tcatgatcct tttctcagtt ggtgctcaag ctgcatgtgg tgcaacattc ggtattattc 1260

ccttcatatc tcgtcgatca ttaggtataa tctcgggaat gactggagct ggaggcaatt 1320

tcggttctgg attgacacaa ctgctgtttt tcacaagctc aaaatactcg acagcaacag 1380

ggctaactta tatggggatg atgatcattg gatgcactct tcctgtgaca ctatgtcatt 1440

tcccacaatg gggaagcatg tttttcccac caacaaaaga tccagttaag ggaagtgagg 1500

aacattatta tgccgcagag tatacagaag ctgagaggca gaaaggtatg catcaaaaca 1560

gcttgaaatt cgccgagaac tgtcgatcgg agcgtggcaa gcgcgtggga tcggcaccta 1620

ctcctccaaa tttaacgcct aaccgtgtct gagtttctca gatttgataa ttttctctaa 1680

ggggatggat cattgtcaat ctctgattgg atgaagattc aatgagctga gtctcaataa 1740

gcatattatt tttaaagaat gtatctttat ttttcttgtc ctttcttctt cttcttcttc 1800 tttttcttgg aatctactta taagttttat gttttttttt ttaaatgaag tatatatatg 1860

acgcattgtg tatctttcct cttgcttttt acatctgaat attcgtatga gccaatgggt 1920

tgttgtagaa tcaaaagtaa tattaataaa acttttgact tccaaaaaaa aaaaaaaaaa 1980

aaaaaaaaaa aa 1992

<210> 102

<211> 530

<212> PRT

<213> Nicotiana plumbaginifolia

<400> 102

Met Ala Asp Ile Glu Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Pro Val Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Met Val Pro 20 25 30 Thr Asp Thr Thr Ala Lys Phe Ser Val Pro Val Asp Thr Glu His Lys 35 40 45 Ala Lys Val Phe Lys Phe Tyr Ser Phe Ser Lys Pro His Gly Leu Thr 50 55 60 Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Leu Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Met Asp Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Leu Ser Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Ile 195 200 205 Leu Tyr Asp Ile Ile Arg Lys Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Val Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Gly Asp 245 250 255 Leu Gln Lys Lys Gly Gly Val Ser Lys Asp Lys Phe Thr Asn Ile Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 2 95 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Leu Ala Arg Pro Phe Gly Gly 325 330 335 Phe Ser Ser Asp Phe Ala Ala Lys Arg Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 34 5 350 Trp Val Leu 355 Trp Ile Leu Gln Thr 360 Leu Gly Gly Val Phe 365 Cys Val Leu Leu Gly 370 Arg Ser Asn Ser Leu 375 Pro Ile Ala Val Thr 380 Phe Met Ile Leu Phe Ser Val Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg 405 Arg Ser Leu Gly Ile 410 Ile Ser Gly Met Thr 415 Gly Ala Gly Gly Asn 420 Phe Gly Ser Gly Leu 425 Thr Gln Leu Leu Phe 430 Phe Thr Ser Ser Lys 435 Tyr Ser Thr Ala Thr 440 Gly Leu Thr Tyr Met 445 Gly Met Met Ile Ile 4 50 Gly Cys Thr Leu Pro 455 Val Thr Leu Cys His 460 Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Thr Lys Asp Pro Val Lys Gly Ser Glu 465 470 475 480 Glu His Tyr Tyr Ala 485 Ala Glu Tyr Thr Glu 490 Ala Glu Arg Gln Lys 495 Gly Met His Gln Asn 500 Ser Leu Lys Phe Ala 505 Glu Asn Cys Arg Ser 510 Glu Arg Gly Lys Arg 515 Val Gly Ser Ala Pro 520 Thr Pro Pro Asn Leu 525 Thr Pro Asn

Arg Val 530

<210> 103 <211> 2060 <212> DNA

<213> Lycopersicon esculentum <400> 103

tattctcaat acatttcaaa tcaatcattt ataaaattaa ccagttattt cctcaattga 60

agaaatggct gatgtagaag gatcaccggg gagttctatg catggagtca ccggaagaga 120

acctgttctc gctttctccg tggcttctcc aatggtgcct acggatacct ccgccaaatt 180

ttcagtaccg gtggacactg aacacaaggc taaacaattt aagttttatt cgttttcgaa 240

gcctcatgga cttacgttcc agctctcctg gatctccttt ttcacttgtt tcgtttcgac 300

ttttgctgct gcacctttag ttcctattat tagggacaat cttaatttga caaaaatgga 360

tgttggtaac gctggggttg cttccgtatc cggaagtatt ttatctaggc ttacgatggg 420

tgcggtttgt gatttgttgg gtccaaggta tgggtgcgct tttcttatca tgttgtcagc 4 80

gccaactgtt ttttgtatgt cttttgtttc ãtccgctggt ggctacgtag ctgtccggtt 540

catgattggg ttttcgctcg caacgtttgt gtcttgtcaa tattggatga gtactatgtt 600

taatagtaag atcatagggc tagtgaacgg aacggctgct ggatggggta atatgggtgg 660

aggtgcaact caactcatta tgccactttt gtatgatata attcgaaggg cgggtgcaac 720

tccgttcact gcttggagaa ttgcattttt tattcctgga tggcttcatg tggtgatggg 780

tattttagtg ttgactcttg gccaagattt acccgacgga aatcgtggca ctttacagaa 840

gacgggtact gttgctaaag ataaattcgg taacatattg tggtatgctg caacaaacta 900

caggacatgg atctttgttc ttctctatgg atactctatg ggagttgaac tgtcaacaga S60

caacgtcatt gctgagtact tcttcgacag atttgatcta aagcttagca cagcggggat 1020

cattgctgcc acatttggta tggctaacct tttggctcga ccatttggag gattttcttc 1080

tgattacgca gcaaagaaat tcggtatgag agggagactt tgggttttgt ggattttaca 1140

aacacttgga ggagtatttt gtgttctttt gggtcgttcg aattctctac cacttgcggt 1200

aacctttatg atccttttct caatcggagc tcaagctgct tgtggtgcaa cttttggtat 1260

tattccattc atttctcgac gatcgttagg aattataagc ggaatgacag gggcaggtgg 1320 aaattttggt tctggattga ctcaattgtt gacagggtta acttacatgg gattcatgat tcatttccca caatggggaa gcatgttttt ggaagaacat tattatactt cagagtacac aaacagcttg aaattcgctg aaaattgccg accaacccca ccaaatttga caccaaatcg tcttgaatct gtgatttaaa tttaaggttc ctatcttgat ttttcttctt tgtttttttt gacaaatacc ttgaatccac gaaggtgtat attactcatt gtgtatgttt tctattgctt ggttgtgttt tactctgtag attcaaaagt aggggactga tcatttattc cagttgattt aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

gtttttcacg agctcaaagt actcgacagc 1380

cataggatgc actcttcctg ttacattttg 1440

gccaccaaca aaagatccag tcaagggaac 1500

agaggccgag aggcaaaaag ggatgcacca 1560

atcagagcgt ggtaagcgtg ttggttccgc 1620

tgtttgatga tctttatgag gaatggatag 1680

aatgtgctga gtcgtctcaa taagcaaaat 1740

ttataatgat attgcttgtt gatctttcca 1800

gctttttttt taatgaagta tatataatat 1860

ttttcaaaag aatattctat ggccaatggt 1920

gtattataat aaaactcttg acttgtaaga 1S80

atagaaagtt cgtgaaaaaa aaaaaaaaaa 2040

2060

<210> 104

<211> 530

<212> PRT

<213> Lycopersicon esculentum

<400> 104

Met Ala Asp Val Glu Gly Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 15 10 15

Gly Arg Glu Pro Val Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Met Val Pro

20 25 30

Thr Asp Thr Ser Ala Lys Phe Ser Val Pro Val Asp Thr Glu His Lys

35 40 45

Ala Lys Gln Phe Lys Phe Tyr Ser Phe Ser Lys Pro His Gly Leu Thr

50 55 60

Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80

Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Leu Thr

85 90 95

Lys Met Asp Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile

100 105 110

Leu Ser Arg Leu Thr Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg

115 120 125

Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Cys

130 135 140

Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160

Ile Gly Phe Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser

165 170 175

Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala

180 185 190

Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu

195 200 205

Leu Tyr Asp Ile Ile Arg Arg Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp

210 215 220

Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Val Met Gly Ile 225 230 235 240

Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Gly Thr

245 250 255

Leu Gln Lys Thr Gly Thr Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Asn Ile Leu 260 265 270 Xrp Tyr Ala 275 Ala Thr Asn Tyr Arg 280 Thr Trp Ile Phe Val 285 Leu Leu Tyr Gly Tyr 290 Ser Met Gly Val Glu 295 Leu Ser Thr Asp Asn 300 Val Ile Ala Glu Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu Ser Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly 325 Met Ala Asn Leu Leu 330 Ala Arg Pro Phe Gly 335 Gly Phe Ser Ser Asp 340 Tyr Ala Ala Lys Lys 345 Phe Gly Met Arg Gly 350 Arg Leu Xrp Val Leu 355 Trp Ile Leu Gln Thr 360 Leu Gly Gly Val Phe 365 Cys Val Leu Leu Gly 370 Arg Ser Asn Ser Leu 375 Pro Leu Ala Val Thr 380 Phe Met Ile Leu Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400 Pro Phe Ile Ser Arg 405 Arg Ser Leu Gly Ile 410 Ile Ser Gly Met Thr 415 Gly Ala Gly Gly Asn 420 Phe Gly Ser Gly Leu 425 Thr Gln Leu Leu Phe 430 Phe Thr Ser Ser Lys 435 Tyr Ser Thr Ala Thr 440 Gly Leu Thr Tyr Met 445 Gly Phe Met Ile Ile 450 Gly Cys Thr Leu Pro 4 55 Val Thr Phe Cys His 460 Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Thr Lys Asp Pro Val Lys Gly Thr Glu 465 470 475 480 Glu His Tyr Tyr Thr 485 Ser Glu Tyr Thr Glu 490 Ala Glu Arg Gln Lys 495 Gly Met His Gln Asn 500 Ser Leu Lys Phe Ala 505 Glu Asn Cys Arg Ser 510 Glu Arg Gly Lys Arg 515 Val Gly Ser Ala Pro 520 Thr Pro Pro Asn Leu 525 Thr Pro Asn

Arg Val 530

<210> 105 <211> 1902 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 105

agtgtgagta atttagcttg aatcaaatct caaacttgca aagaaacttg aaatatttta 60

taacaatggg tgattctact ggtgagccgg ggagctccat gcatggagtc accggtagag 120

aacaaagctt tgcattctcg gtgcaatcac caattgtgca taccgacaag acggccaagt 180

tcgaccttcc ggtggacaca gagcataagg caacggtttt caagctcttc tccttcgcca 240

aacctcacat gagaacgttc catctctcgt ggatctcttt ctccacatgt tttgtctcga 300

ctttcgcagc tgcaccactt gtccctatca tccgggagaa tctcaacctc accaaacaag 360

acattggaaa cgccggagtt gcctctgtct ctgggagtat cttctctagg ctcgtgatgg 420

gagccgtgtg tgatcttttg ggtccccgtt acggttgtgc cttccttgtg atgttgtctg 480

ccccaacggt gttctccatg agcttcgtga gtgacgcagc aggcttcata acggtgaggt 540

tcatgattgg tttttgcctg gcgacgtttg tgtcttgtca atactggatg agcactatgt 600

tcaacagtca gatcattggt ctggtgaatg ggacagcagc cggatgggga aacatgggtg 660

gcggcataac gcagttgctc atgcccattg tgtatgaaat cattaggcgc tgcggttcca 720

cagccttcac ggcctggagg atcgccttct ttgtacccgg ttggttgcac atcatcatgg 780 gaatcttggt gctcaatcta ggtcaagatc tgccagatgg aaatcgagct accttggaga 840

aagcgggaga agttgccaaa gacaaattcg gaaagattct gtggtatgcc gttacaaact 900

acaggacttg gatcttcgtt cttctctacg gatactccat gggagttgag ttgagcactg 960

ataatgttat cgccgagtac ttctttgaca ggtttcactt gaagctccac acagcagggc 1020

tcatagcagc atgtttcgga atggccaatt tctttgctcg tccagcagga ggctacgcat 1080

ctgactttgc agccaagtac ttcgggatga gagggaggtt gtggacgttg tggatcatac 1140

agacggctgg tggcctcttc tgtgtgtggc tcggccgcgc caacaccctt gtaactgccg 1200

ttgtggctat ggtgctcttc tctatggggg cacaagctgc ttgcggagcc acctttgcaa 12 60

ttgtgccctt tgtctcccgg cgagctctag gcatcatctc gggtttaacc ggggctggag 1320

ggaactttgg atcagggctc acacaactcc tcttcttctc gacctcacac ttcacaactg 1380

aacaagggct aacgtggatg ggagtgatga tagtcgcttg cacgttacct gtgaccttag 1440

ttcactttcc tcaatgggga agcatgttct tgcctccttc cacagatcca gtgaaaggta 1500

cagaggctca ttattatggt tctgagtgga atgagcagga gaagcagaag aacatgcatc 1560

aaggaagcct ccggtttgcc gagaacgcca agtcagaggg tggacgccgc gtccgctctg 1620

ctgctacgcc gcctgagaac acacccaaca atgtttgatc atacattcca cccacggtgg 1680

aatggtgaag gatgatcgca tataagaata tgtcacacag tgaaaaaaaa aaatgcaaat 1740

gttatcaatg cttgcataac attactatct atctttcatt tactaaacaa accttttgct 1800

ttttgccttg aaatcttttt attatatatc aaaatatatc tctatgtctt gaggtttgat 1860

tattttgcat atatcattaa tgatttgata atattggaac tg 1902

<210> 106 <211> 530 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 106 Met Gly Asp Ser Thr Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Gln Ser Phe Ala Phe Ser Val Gln Ser Pro Ile Val His 20 25 30 Thr Asp Lys Thr Ala Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Thr Glu His Lys 35 40 45 Ala Thr Val Phe Lys Leu Phe Ser Phe Ala Lys Pro His Met Arg Thr 50 55 60 Phe His Leu Ser Trp Ile Ser Phe Ser Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Glu Asn Leu Asn Leu Thr 85 90 95 Lys Gln Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile 100 105 110 Phe Ser Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg 115 120 125 Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Ser 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Asp Ala Ala Gly Phe Ile Thr Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ile Thr Gln Leu Leu Met Pro Ile 195 200 205 Val Tyr Glu Ile Ile Arg Arg Cys Gly Ser Thr Ala Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Ile Ala Phe Phe Val Pro Gly Trp Leu His Ile Ile Met Gly Ile 225 230 235 240 Leu Val Leu Asn Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Ala Thr 245 250 255 Leu Glu Lys Ala Gly Glu Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Lys Ile Leu 260 265 270 Trp Tyr Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe His Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Leu Ile 305 310 315 320 Ala Ala Cys Phe Gly Met Ala Asn Phe Phe Ala Arg Pro Ala Gly Gly 325 330 335 Tyr Ala Ser Asp Phe Ala Ala Lys Tyr Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 34 5 350 Trp Thr Leu Trp Ile Ile Gln Thr Ala Gly Gly Leu Phe Cys Val Trp 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Asn Thr Leu Val Thr Ala Val Val Ala Met Val Leu 370 375 380 Phe Ser Met Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Ala Ile Val 385 390 395 400 Pro Phe Val Ser Arg Arg Ala Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Ser 420 425 430 Thr Ser His Phe Thr Thr Glu Gln Gly Leu Thr Trp Met Gly Val Met 435 440 445 Ile Val Ala Cys Thr Leu Pro Val Thr Leu Val His Phe Pro Gln Trp 450 455 460 Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Thr Asp Pro Val Lys Gly Thr Glu 465 470 475 480 Ala His Tyr Tyr Gly Ser Glu Trp Asn Glu Gln Glu Lys Gln Lys Asn 485 490 495 Met His Gln Gly Ser Leu Arg Phe Ala Glu Asn Ala Lys Ser Glu Gly 500 505 510 Gly Arg Arg Val Arg Ser Ala Ala Thr Pro Pro Glu Asn Thr Pro Asn 515 520 525 Asn Val

530

<210> 107 <211> 1870 <212> DNA

<213> Lycopersicon esculentum <400> 107

tttcaaatca atcatttata aaattaacca gttatttcct caattgaaga aatgactgat 60

gtagaaggat caccggggag ttctatgcat ggagtcaccg gaagagaacc tgttctcgct 120 ttctccgtgg cttctccaat ggtgcctacg gatacctccg ccaagttttc agtaccggtg 180 gatactgaac acaaggctaa acaatttaag ttttattcgt tttcgaagcc tcatggactt 240 acgttccagc tctcctggat ctcctttttc acttgtttcg tttcgacttt tgctgctgca 300 cctttagttc ctattattag ggacaatctt aatttgacaa aaatggatgt cggtaacgct 360 ggggttgctt ccgtatccgg aagtatttta tctaggctta cgatgggtgc ggtttgtgat 420 ttgttgggtc caaggtatgg gtgcgctttt cttatcatgt tgtcggcccc aactgttttt 480

tgtatgtcct ttgtttcatc cgctggtggc tacgtagccg tccggttcat gattgggttt 540

tccctcgcaa cgtttgtgtc gtgtcaatat tggatgagta ctatgtttaa tagtaagatc 600

atagggctag tgaacggaac ggctgctgga tggggtaata tgggtggagg tgcaactcaa 660

ctcattatgc cacttttgta tgatataatt cggagggcgg gtgcaattcc gttcactgct 720

tggagaattg cattttttat tcctggatgg cttcatgtgg tgatgggtat tttagtgttg 780

actcttggcc aagatttacc cgacggaaat cgtggcactt tacagaagac gggtactgtt 840

gctaaagata aattcggtaa catattgtgg tatgctgcaa caaactacag gacatggatc 900

tttgttcttc tctatggata ctctatggga gttgaactgt caacagacaa cgtcattgct 960

gagtacttct tcgacagatt tgatctaaag cttagcacag cggggatcat tgctgccaca 1020

tttggtatgg ctaacctttt ggctcgacca tttggaggat tttcttctga ttacgcagca 1080

aagaaattcg gtatgagagg gagactttgg gttttgtgga ttttacaaac acttggagga 1140

gtattttgtg ttcttttggg tcgttcgaat tctctaccac ttgctgtaac ctttatgatc 1200

cttttctcaa tcggagctca agctgcttgt ggtgcaactt ttggtattat tccattcatt 1260

tctcgacgat cgttaggaat tataagcgga atgacagggg caggtggaaa ttttggttct 1320

ggattgactc aattgttgtt tttcacgagc tcaaagtact cgacagcgac agggttaact 1380

tacatgggat tc.atgatcat aggatgcact cttcctgtta cattttgtca tttcccacaa 1440 tggggaagca tgtttctccc accaacaaaa gatccagtca agggaacgga agaacattat 1500

tatacttcag agtacacaga ggcagagagg caaaaaggga tgcaccaaaa cagcttgaaa 1560

ttcgctgaaa attgccgatc ggagcgtggt aagcgcgttg gttccgcacc cactccacca 1620

aatttgacac caaaccgtgt ctgatcggat tgatgatcgt caatctttag ttcaatgagc 1680

tgagttgttt caataagcaa aataagtcct gatttttttt tcttctttct tttttgtttt 1740

tttcttaaat gatgttgctt gtcaatacgc tggaatctac taaggtgtat gtggttttaa 1800

atttacgtat atataatata tatatatata tatattacac attttaatgt taaaaaaaaa 1860

aaaaaaaaaa 1870

<210> 108 <211> 530 <212> PRT

<213> Lycopersicon esculentum

<400> 108

Met Thr Asp Val Glu Gly Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 .5 10 15 Gly Arg Glu Pro 20 Val Leu Ala Phe Ser 25 Val Ala Ser Pro Met 30 Val Pro Thr Asp Thr 35 Ser Ala Lys Phe Ser 40 Val Pro Val Asp Thr 45 Glu His Lys Ala Lys 50 Gln Phe Lys Phe Tyr 55 Ser Phe Ser Lys Pro 60 His Gly Leu Thr Phe Gln Leu Ser Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu 85 Val Pro Ile Ile Arg 90 Asp Asn Leu Asn Leu 95 Thr Lys Met Asp Val 100 Gly Asn Ala Gly Val 105 Ala Ser Val Ser Gly 110 Ser Ile Leu Ser Arg 115 Leu Thr Met Gly Ala 120 Val Cys Asp Leu Lsu 125 Gly Pro Arg Tyr Gly 130 Cys Ala Phe Leu Ile 135 Met Leu Ser Ala Pro 140 Thr Val Phe Cys Met Ser Phe Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Ser Leu 165 Ala Thr Phe Val Ser 170 Cys Gln Tyr Trp Met 175 Ser Thr Met Phe Asn Ser Lys Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala

180 185 190

Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu

195 200 205

Leu Tyr Asp Ile Ile Arg Arg Ala Gly Ala Ile Pro Phe Thr Ala Trp

210 215 220

Arg Ile Ala Phe Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Val Met Gly Ile 225 230 235 240

Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Gly Thr

245 250 255

Leu Gln Lys Thr Gly Thr Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Asn Ile Leu

260 265 270

Trp Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr

275 280 285

Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu

290 295 300

Tyr Phe Phe Asp Arg Phé Asp Leu Lys Leu Ser Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320

Ala Ala Thr Phe Gly Met Ala Asn Leu Leu Ala Arg Pro Phe Gly Gly

325 330 335

Phe Ser Ser Asp Tyr Ala Ala Lys Lys Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu

340 345 350

Trp Val Leu Trp Ile Leu Gln Thr Leu Gly Gly Val Phe Cys Val Leu

355 360 365

Leu Gly Arg Ser Asn Ser Leu Pro Leu Ala Val Thr Phe Met Ile Leu

370 375 380

Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Gly Ile Ile 385 390 395 400

Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr Gly

405 410 415

Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr

420 425 430

Ser Ser Lys Tyr Ser Thr Ala Thr Gly Leu Thr Tyr Met Gly Phe Met

435 440 445

Ile Ile Gly Cys Thr Leu Pro Val Thr Phe Cys His Phe Pro Gln Trp

450 455 460

Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Thr Lys Asp Pro Val Lys Gly Thr Glu 465 470 475 480

Glu His Tyr Tyr Thr Ser Glu Tyr Thr Glu Ala Glu Arg Gln Lys Gly

485 490 495

Met His Gln Asn Ser Leu Lys Phe Ala Glu Asn Cys Arg Ser Glu Arg

500 505 510

Gly Lys Arg Val Gly Ser Ala Pro Thr Pro Pro Asn Leu Thr Pro Asn 515 520 525

Arg Val 530

<2l0> 109

<211> 1832

<212> DNA

<213> Brassica napus

<400> 109

cacattcttg tgaaagaact taaacatttt gcatcaatgg gtgattctac tggcgagccg ggaagctcca tgcatggagt gaccggtaga gaacaaacat ttgctttctc ggtggcttca 120

ccgattgtcc caaccgacaa gacagcaaag ttcgacctgc cggtggactc ggagcataag 180

gcaacggttt tcaagctctt ctccttcgcc aaacctcaca tgcgaacgtt ccatctctcg 240

tggatctctt tctccacgtg ttttgtctcg acgtttgcgg ctgcaccact tgtccccatc 300

atccgagaga atctcaacct cacgaaacaa gacatcggta acgcaggagt tgcgtccgtc 360

tcggggagta tcttctctag gctggtgatg ggagcagtgt gtgatcttct cggtccacgt 420

tacggctgtg ccttccttgt tatgctttcc gcaccaacgg tgttctcaat gagcttcgtg 480

agtggagccg caggattcat aacggtgagg ttcatgattg ggttctgtct agcaacgttt 540

gtgtcttgtc aatatggaat gagtactatg ttcaatagtc agatcatcgg tctggtgaac 600

ggtacagccg ccgggtgggg aaacatgggt ggtggcataa cgcagttgct catgccggtt 660

gtctatgaga tcataaggcg ctgtggtgca acagcgttca cggcctggag gcttgccttc 720

ttcgtccctg gttggttgca catcatcatg ggagtcttgg tgctcaatct aggtcaagat 780

ttgccagatg gtaaccgaag tgccttggag aaaaagggag aagttgccaa agacaaattc 840

ggaaagatta tgtggtacgc cgtcacaaac tacaggactt ggatctttgt tcttctctat 900

ggatactcca tgggagttga gctgagcact gacaatgtta tcgccgaata cttctttgac 960

aggttccact tgaagcttca cacagctgga atcatagcag catgtttcgg aatggccaac 1020

ttctttgctc gtccagcagg aggctatgca tctgaccttg cagccaaata cttcgggatg 1080

agagggaggt tatgggcgtt gtggatcatt cagacagcag gtggtgtctt ctgcgtgtgg 1140

ctcggccgtg ccaacaccct cgttactgcc gttgtagcta tggtcctctt ctctttagga 1200

gcacaagccg cttgtggagc caccttcgca atcgttccct ttgtttctcg gcgagccctt 12 60

ggtatcatct caggtttaac cggtgctgga ggaaactttg ggtcagggct cacacagctc 1320

atcttcttct cgacctcaag gttcacaacc gaacaagggc taacatggat gggagtgatg 1380

atagttgcct gcacgttgcc tgtgacttta atccacttcc ctcagtgggg aagcatgttc 1440

ttgcctcctt ctaccgatcc agtcaaaggt ccgaaggagc actattatgc ttcagagtgg 1500

aatgagcagg agaaggagaa gaacatgcat cagggaagcc tcaggtttgc taagaacgcc 1560

aagtctgagg gcggccgccg tgtccgttct gctgctaccc cgcctgagaa cacaccaaac 1620

aatgtttgat cataccagcc acaaggaaag tgtgaaggat ggtcgcagat aagaatttat 1680

atgtcccaca gtgaaaacaa atgcgtatgt tatcaatgct tgctggacgt tatttgttgt 1740

gtatctttct ttttttcact gaagaaacat ttgttttgtt tacggcttca agaaatattt 1800

ttctaatcaa aatgtctacc tcttgcgaca tt 1832

<210> 110

<211> 530

<212> PRT

<213> Brassica napus

<400> 110

Met Gly Asp Ser Thr Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 15 10 15

Gly Arg Glu Gln Thr Phe Ala Phe Ser Val Ala Ser Pro Ile Val Pro

20 25 30

Thr Asp Lys Thr Ala Lys Phe Asp Leu Pro Val Asp Ser Glu His Lys

35 40 45

Ala Thr Val Phe Lys Leu Phe Ser Phe Ala Lys Pro His Met Arg Thr

50 55 60

Phe His Leu Ser Trp Ile Ser Phe Ser Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe 65 70 75 80

Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile Arg Glu Asn Leu Asn Leu Thr

85 90 95

Lys Gln Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile

100 105 110

Phe Ser Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg

115 120 125

Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Ser 130 135 140 Met Ser Phe Val Ser Gly Ala Ala Gly Phe Ile Thr Val Arg Phe Met 145 150 155 160 Ile Gly Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Gly Met Ser 165 170 175 Thr Met Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala 180 185 190 Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Ile Thr Gln Leu Leu Met Pro Val 195 200 205 Val Tyr Glu Ile Ile Arg Arg Cys Gly Ala Thr Ala Phe Thr Ala Trp 210 215 220 Arg Leu Ala Phe Phe Val Pro Gly Trp Leu His Ile Ile Met Gly Val 225 230 235 240 Leu Val Leu Asn Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Ser Ala 24.5 250 255 Leu Glu Lys Lys Gly Glu Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Lys Ile Met 260 265 270 Trp Tyr Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe His Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Cys Phe Gly Met Ala Asn Phe Phe Ala Arg Pro Ala Gly Gly 325 330 335 Tyr Ala Ser Asp Leu Ala Ala Lys Tyr Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu 340 345 350 Trp Ala Leu Trp Ile Ile Gln Thr Ala Gly Gly Val Phe Cys Val Trp 355 360 365 Leu Gly Arg Ala Asn Thr Leu Val Thr Ala Val Val Ala Met Val Leu 370 375 380 Phs Ser Leu Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Ala Ile Val 385 390 395 400 Pro Phe Val Ser Arg Arg Ala Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly 405 410 415 Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Ile Phe Phe Ser 420 425 430 Thr Ser Arg Phe Thr Thr Glu Gln Gly Leu Thr Trp Met Gly Val Met 435 440 445 Ile Val Ala Cys Thr Leu Pro Val Thr Leu Ile His Phe Pro Gln Trp 4 50 4 55 460 Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Thr Asp Pro Val Lys Gly Pro Lys 465 470 475 4 80 Glu His Tyr Tyr Ala Ser Glu Trp Asn Glu Gln Glu Lys Glu Lys Asn 485 490 495 Met His Gln Gly Ser Leu Arg Phe Ala Lys Asn Ala Lys Ser Glu Gly 500 505 510 Gly Arg Arg Val Arg Ser Ala Ala Thr Pro Pro Glu Asn Thr Pro Asn

515 520 525

Asn Val 530

<210> 111 <211> 1584 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 111

atggccgatg gttttggtga accgggaagc tcaatgcatg gagtcaccgg cagagaacaa 60

agctatgcat tctctgtcga gtctccggca gttccttccg actcatcagc aaaattttct 120

ctccccgtgg acaccgaaca caaagccaaa gtcttcaaac tcttatcctt tgaagctcca 180

catatgagaa ctttccatct tgcttggatc tcattcttca cttgcttcat ttccactttc 240

gctgctgctc ctcttgtccc catcattaga gataacctta atctcacaag acaagatgtc 300

ggaaatgctg gtgttgcttc tgtctctggc agtatcttct ctaggcttgt tatgggagca 360

gtttgtgatc tccttgggcc acgttatggc tgtgctttcc tcgtcatgct ctctgctcca 420

accgtcttct ccatgtcttt cgttggtggt gccggagggt acataacggt gaggttcatg 480

atcgggttct gcctggcgac tttcgtgtca tgccagtatt ggatgagcac aatgttcaat 540

ggtcagatca taggtctagt gaacgggaca gcggcagggt gggggaacat gggcggtggg 600

gtcactcagt tgctcatgcc aatggtctat gagatcatcc gacggttagg gtccacgtcc 660

ttcaccgcat ggaggatggc tttcttcgtc cccgggtgga tgcacatcat catggggatc 720

ttggtcttga ctctagggca agacctccct gatggtaata gaagcacact cgagaagaaa 780

ggtgcagtta ctaaagacaa gttctcaaag gttttatggt acgcgatcac gaactatagg 840

acatgggttt tcgtgctgct atatggatac tccatgggag tagagctcac aaccgataac S00

gtcatcgctg agtacttttt cgacaggttc catcttaagc ttcataccgc cggtataatc 960

gcggcaagct ttggtatggc aaacttcttt gcccgtccta ttggtggttg ggcctcagat 1020

attgcggcta gacgcttcgg catgagaggc cgtctctgga ccctatggat catccaaacc 1080

ttaggcggtt tcttctgcct atggctaggc cgagccacca cgctcccgac cgcggttgtc 1140

ttcatgatcc tcttctctct cggcgctcaa gccgcttgtg gagctacctt tgctatcata 1200

cctttcatct cacgccgctc cttagggatc atctctggtc ttactggagc tggtggaaac 1260

ttcggctctg gtttgaccca actcgtattc ttctcgacct caacgttctc cacggaacaa 1320

gggctgacat ggatgggggt gatgattatg gcgtgtacat tacccgtcac tttagtgcac 1380

ttcccgcaat ggggaagcat gtttttgcct tccacggaag atgaagtgaa gtctacggag 1440

gagtattatt acatgaaaga gtggacagag accgagaagc gaaagggtat gcatgaaggg 1500

agtttgaagt tcgccgtgaa tagtagatcg gagcgtggac ggcgcgtggc ttctgcaccg 1560

tctcctccgc cggaacacgt ttaa 1584

<210> 112 <211> 527 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 112 Met Ala Asp Gly Phe Gly Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Gln 20 Ser Tyr Ala Phe Ser 25 Val Glu Ser Pro Ala 30 Val Pro Ser Asp Ser 35 Ser Ala Lys Phe Ser 40 Leu Pro Val Asp Thr 45 Glu His Lys Ala Lys 50 Val Phe Lys Leu Leu 55 Ser Phe Glu Ala Pro 60 His Met Arg Thr Phe His Leu Ala Trp Ile Ser Phe Phe Thr Cys Phe Ile Ser Thr Phe 65 70 75 80 Ala Ala Ala Pro Leu 85 Val Pro Ile Ile Arg 90 Asp Asn Leu Asn Leu 95 Thr Arg Gln Asp Val 100 Gly Asn Ala Gly Val 105 Ala Ser Val Ser Gly 110 Ser Ile Phe Ser Arg 115 Leu Val Met Gly Ala 120 Val Cys Asp Leu Leu 125 Gly Pro Arg Tyr Gly Cys Ala Phe Leu Val Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Ser

130 135 140

Met Ser Phe Val Gly Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Thr Val Arg Phe Met 145 150 155 160

Ile Gly Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser

165 170 175

Thr Met Phe Asn Gly Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala

180 185 190

Gly Trp Gly Asn Met Gly Gly Gly Val Thr Gln Leu Leu Met Pro Met

195 200 205

Val Tyr Glu Ile Ile Arg Arg Leu Gly Ser Thr Ser Phe Thr Ala Trp

210 215 220

Arg Met Ala Phe Phe Val Pro Gly Trp Met His Ile Ile Met Gly Ile 225 230 235 240

Leu Val Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Arg Ser Thr

245 250 255

Leu Glu Lys Lys Gly Ala Val Thr Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Leu

260 265 270

Trp Tyr Ala Ile Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Val Phe Val Leu Leu Tyr

275 280 285

Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu

290 295 300

Tyr Phe Phe Asp Arg Phe His Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile 305 310 315 320

Ala Ala Ser Phe Gly Met Ala Asn Phe Phe Ala Arg Pro Ile Gly Gly

325 330 335

Trp Ala Ser Asp Ile Ala Ala Arg Arg Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu

340 345 350

Trp Thr Leu Trp Ile Ile Gln Thr Leu Gly Gly Phe Phe Cys Leu Trp

355 360 365

Leu Gly Arg Ala Thr Thr Leu Pro Thr Ala Val Val Phe Met Ile Leu

370 375 380

Phe Ser Leu Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Ala Ile Ile 385 390 395 400

Pro Phe Ile Ser Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly

405 410 415

Ala Gly Gly Asn Phe Gly Ser Gly Leu Thr Gln Leu Val Phe Phe Ser

420 425 430

Thr Ser Thr Phe Ser Thr Glu Gln Gly Leu Thr Trp Met Gly Val Met

435 440 445

Ile Met Ala Cys Thr Leu Pro Val Thr Leu Val His Phe Pro Gln Trp

450 455 460

Gly Ser Met Phe Leu Pro Ser Thr Glu Asp Glu Val Lys Ser Thr Glu 465 470 475 480

Glu Tyr Tyr Tyr Met Lys Glu Trp Thr Glu Thr Glu Lys Arg Lys Gly

485 490 495

Met His Glu Gly Ser Leu Lys Phe Ala Val Asn Ser Arg Ser Glu Arg

500 505 510

Gly Arg Arg Val Ala Ser Ala Pro Ser Pro Pro Pro Glu His Val 515 520 525

<210> 113 <211> 1709 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana

<400> 113 Ala Ala Ala Cys Thr Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Thr Cys Thr Cys 1 5 10 15 Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala Cys Thr Thr Gly Ala Thr Ala Cys Gly 20 25 30 Thr Thr Thr Ala Ala Ala Ala Thr Ala Cys Ala Thr Gly Gly Gly Thr 35 40 45 Thr Cys Thr Ala Cys Thr Gly Ala Thr Gly Ala Gly Cys Cys Cys Gly 50 55 60 Gly Ala Ala Gly Thr Thr Cys Cys Ala Thr Gly Cys Ala Thr Gly Gly 65 70 75 80 Ala Gly Thr Thr Ala Cys Cys Gly Gly Thr Ala Gly Ala Gly Ala Ala 85 90 95 Cys Ala Gly Ala Gly Cys Thr Ala Thr Gly Cys Thr Thr Thr Cys Thr 100 105 110 Cys Gly Gly Thr Ala Gly Ala Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr Gly Ala 115 120 125 Gly Cys Cys Gly Ala Cys Cys Ala Ala Cys Ala Cys Ala Ala Ala Gly 130 135 140 Ala Ala Ala Ala Ala Gly Thr Ala Cys Ala Ala Thr Cys Thr Gly Cys 145 150 155 160 Cys Gly Gly Thr Gly Gly Ala Cys Gly Cys Gly Gly Ala Gly Gly Ala 165 170 175 Thr Ala Ala Gly Gly Cys Ala Ala Cys Gly Gly Thr Thr Thr Thr Cys 180 185 190 Ala Ala Gly Cys Thr Cys Thr Thr Cys Thr Cys Cys Thr Thr Cys Gly 195 200 205 Cys Cys Ala Ala Ala Cys Cys Thr Cys Ala Cys Ala Thr Gly Ala Gly 210 215 220 Ala Ala Cys Gly Thr Thr Cys Cys Ala Cys Cys Thr Cys Thr Cys Gly 225 230 235 240 Thr Gly Gly Ala Thr Cys Thr Cys Thr Thr Thr Cys Thr Cys Cys Ala 245 250 255 Cys Ala Thr Gly Thr Thr Thr Thr Gly Thr Thr Thr Cys Gly Ala Cys 260 265 270 Gly Thr Thr Cys Gly Cys Ala Gly Cys Thr Gly Cys Ala Cys Cys Ala 275 280 285 Cys Thr Thr Ala Thr Cys Cys Cys Gly Ala Thr Cys Ala Thr Cys Ala 290 295 300 Gly Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Cys Thr Thr Ala Ala Cys Cys Thr 305 310 315 320 Cys Ala Cys Cys Ala Ala Ala Cys Ala Thr Gly Ala Cys Ala Thr Thr 325 330 335 Gly Gly Ala Ala Ala Cys Gly Cys Thr Gly Gly Ala Gly Thr Thr Gly 340 34 5 350 Cys Cys Thr Cys Cys Gly Thr Cys Thr Cys Gly Gly Gly Gly Ala Gly 355 360 365 Thr Ala Thr Cys Thr Thr Cys Thr Cys Thr Ala Gly Gly Cys Thr Cys 370 375 380 Gly Thr Gly Ala Thr Gly Gly Gly Ala Gly Cys Cys Gly Thr Gly Thr 385 390 395 400 Gly Thr Gly Ala Thr Cys Thr Thr Thr Thr Gly Gly Gly Thr Cys Cys 405 410 415 Thr Cys Gly Thr Thr Ala Cys Gly Gly Thr Thr Gly Thr Gly Cys Cys 420 425 430 Thr Thr Cys Cys Thr Thr Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Gly Thr 435 440 445 Cys Thr Gly Cys Cys Cys Cys Ala Ala Cys Gly Gly Thr Gly Thr Thr 450 4 55 460 Cys Thr Cys Cys Ala Thr Gly Ala Gly Cys Thr Thr Cys Gly Thr Gly 4 65 470 475 480 Ala Gly Thr Gly Ala Cys Gly Cys Ala Gly Cys Ala Gly Gly Cys Thr 485 490 495 Thr Cys Ala Thr Ala Ala Cys Gly Gly Thr Gly Ala Gly Gly Thr Thr 500 505 510 Cys Ala Thr Gly Ala Thr Thr Gly Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Cys 515 520 525 Cys Thr Gly Gly Cys Gly Ala Cys Gly Thr Thr Thr Gly Thr Gly Thr 530 535 540 Cys Thr Thr Gly Thr Cys Ala Ala Thr Ala Cys Thr Gly Gly Ala Thr 545 550 555 560 Gly Ala Gly Cys Ala Cys Thr Ala Thr Gly Thr Thr Cys Ala Ala Cys 565 570 575 Ala Gly Thr Cys Ala Gly Ala Thr Cys Ala Thr Cys Gly Gly Thr Cys 580 585 590 Thr Gly Gly Thr Gly Ala Ala Cys Gly Gly Gly Ala Cys Ala Gly Cys 595 600 605 Ala Gly Cys Cys Gly Gly Ala Thr Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Cys 610 615 620 Ala Thr Gly Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Gly Cys Ala Thr Ala Ala 625 630 635 640 Cys Gly Cys Ala Gly Thr Thr Gly Cys Thr Cys Ala Thr Gly Cys Cys 645 650 655 Cys Ala Thr Thr Gly Thr Gly Thr Ala Thr Gly Ala Ala Ala Thr Cys 660 665 670 Ala Thr Thr Ala Gly Gly Cys Gly Cys Thr Gly Cys Gly Gly Ala Thr 675 680 685 Cys Ala Ala Cys Ala Gly Cys Gly Thr Thr Cys Ala Cys Gly Gly Cys 690 695 700 Cys Thr Gly Gly Ala Gly Gly Ala Thr Cys Gly Cys Cys Thr Thr Cys 705 710 715 720 Thr Thr Thr Gly Thr Cys Cys Cys Cys Gly Gly Thr Thr Gly Gly Thr 725 730 735 Thr Gly Cys Ala Cys Ala Thr Cys Ala Thr Cys Ala Thr Gly Gly Gly 740 745 750 Ala Ala Thr Cys Thr Thr Gly Gly Thr Gly Cys Thr Cys Ala Cys Gly 755 760 765 Cys Thr Ala Gly Gly Thr Cys Ala Ala Gly Ala Thr Cys Thr Gly Cys 770 775 780 Cys Ala Gly Gly Thr Gly Gly Ala Ala Ala Cys Ala Gly Ala Gly Cys 785 790 795 800 Thr Gly Cys Cys Ala Thr Gly Gly Ala Gly Ala Ala Ala Gly Cys Gly 805 810 815 Gly Gly Ala Gly Ala Ala Gly Thr Thr Gly Cys Cys Ala Ala Ala Gly 820 825 830 Ala Cys Ala Ala Ala Thr Thr Cys Gly Gly Ala Ala Ala Gly Ala Thr

<r* 835 840 845 Thr Cys 850 Thr Ala Thr Gly Gly 855 Thr Ala Cys Gly Cys 860 Cys Gly Thr Thr Ala Cys Ala Ala Ala Thr Thr Ala Cys Ala Gly Gly Ala Cys Thr Thr 865 870 875 880 Gly Gly Ala Thr Thr 885 Thr Thr Cys Gly Thr 890 Thr Cys Thr Thr Cys 895 Thr Gly Thr Ala Thr 900 Gly Gly Ala Thr Ala 905 Thr Thr Cys Cys Ala 910 Thr Gly Gly Gly Ala 915 Gly Thr Thr Gly Ala 920 Gly Thr Thr Ala Ala 925 Gly Cys Ala Cys Ala 930 Gly Ala Cys Ala Ala 935 Thr Gly Thr Thr Ala 940 Thr Cys Gly Cys Cys Gly Ala Gly Thr Ala Cys Thr Thr Cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr 945 950 955 960 Ala Gly Gly Thr Thr 965 Thr Cys Ala Cys Thr 970 Thr Gly Ala Ala Gly 975 Cys Thr Thr Cys Ala 980 Cys Ala Cys Ala Gly 985 Cys Gly Gly Gly Gly 990 Ala Thr

Thr Ala Thr Ala Gly Cys Ala Gly Cys Ala Thr Gly Thr Thr Thr Cys 995 1000 1005

Gly Gly 1010 Ala Ala Thr Gly Gly 1015 Cys Cys Ala Ala Thr 1020 Thr Thr Cys Thr Thr 1025 Thr Gly Cys Thr Cys 1030 Gly Thr Cys Cys Ala 1035 Gly Cys Ala Gly Gly 1040 Ala Gly Gly Cys Thr 1045 Gly Gly Gly Cys Ala 1050 Thr Cys Thr Gly Ala 1055 Cys Ala Thr Thr Gly 1060 Cys Ala Gly Cys Cys 1065 Ala Ala Gly Cys Gly 1070 Cys Thr Thr Cys Gly 1075 Gly Ala Ala Thr Gly 1080 Cys Gly Ala Gly Gly 1085 Gly Ala Gly Gly Thr 1090 Thr Gly Thr Gly Gly 1095 Ala Cys Thr Thr Thr 1100 Gly Thr Gly Gly Ala 1105 Thr Cys Ala Thr Thr 1110 Cys Ala Gly Ala Cys 1115 Gly Thr Cys Cys Gly 1120 Gly Thr Gly Gly Thr 1125 Cys Thr Cys Thr Thr 1130 Thr Thr Gly Thr Gly 1135 Thr Gly Thr Gly Gly 1140 Cys Thr Cys Gly Gly 1145 Ala Cys Gly Thr Gly 1150 Cys Cys Ala Ala Cys 1155 Ala Cys Cys Cys Thr 1160 Cys Gly Thr Cys Ala 1165 Cys Thr Gly Cys Cys 1170 Gly Thr Thr Gly Thr 1175 Ala Thr Cys Thr Ala 1180 Thr Gly Gly Thr Cys 1185 Cys Thr Cys Thr Thr 1190 Cys Thr Cys Thr Thr 1195 Thr Ala Gly Gly Ala 1200 Gly Cys Ala Cys Ala 1205 Ala Gly Cys Cys Gly 1210 Cys Thr Thr Gly Cys 1215 Gly Gly Ala Gly Cys 1220 Cys Ala Cys Cys Thr 1225 Thr Thr Gly Cys Thr 1230 Ala Thr Cys Gly Thr 1235 Gly Cys Cys Cys Thr 1240 Thr Thr Gly Thr Cys 1245 Thr Cys Cys Cys Gly Gly Cys Gly Ala Gly Cys Thr Cys Thr Ala Gly Gly Cys 1250 Ala Thr 1265 Thr Ala Thr Ala Cys 1280 Cys Gly Gly Ala Ala 1295 Cys Thr Thr Cys Thr 1310 Cys Ala Cys Thr Thr 1325 Thr Thr Thr Cys Gly 1340 Cys Thr Thr Gly Ala 1355 Ala Gly Gly Ala Thr 1370 Gly Gly Gly Gly Thr 1385 Thr Gly Cys Cys Cys 1400 Thr Gly Thr Cys Ala 1415 Cys Thr Thr Gly Gly 1430 Ala Ala Gly Cys Cys 1445 Thr Cys Cys Thr Cys 1460 Gly Gly Thr Gly Ala 1475 Gly Cys Ala Gly Gly 1490 Cys Gly Ala Gly Ala 1505 Gly Gly Ala Gly Gly 1520 Cys Ala Thr Ala Gly 1535 Cys Ala Ala Gly Ala 1550 Thr Gly Gly Gly Ala 1565 Gly Gly Gly Gly Thr 1580 Cys Cys Ala Gly Cys 1595 Ala Ala Cys Thr Gly 1610 Ala Thr Cys Gly Ala 1625 Thr Ala Thr Ala Thr 1640 Ala Ala Thr Thr Gly Ala Ala Ala

1255 Cys Thr 1270 Cys Gly Gly Gly Gly 1285 Cys Thr Gly Thr Gly 1300 Gly Gly Thr Ala Cys 1315 Ala Gly Cys Cys Thr 1330 Cys Gly Ala Cys Ala 1345 Cys Ala Ala Gly Cys 1360 Thr Ala Ala Ala Gly Thr Gly Ala 1375 Thr Thr 1390 Gly Cys Ala Thr Ala 1405 Cys Cys Thr Thr Cys 1420 Cys Thr Cys Cys Ala 1435 Thr Gly Thr Thr Thr 1450 Cys Cys Ala Cys Gly 1465 Ala Cys Gly Cys Thr 1480 Ala Thr Thr Ala Thr 1495 Ala Thr Ala Gly Cys 1510 Ala Gly Cys Gly Cys 1525 Ala Thr Thr Ala Cys 1540 Thr Gly Thr Ala Gly 1555 Cys Cys Ala Ala Gly 1570 Gly Cys Ala Cys Ala 1585 Ala Ala Gly Cys Ala 1600 Ala Cys Ala Ala Thr 1615 Gly Thr Gly Cys Ala Ala Gly Ala 1630 Thr Thr 1645 Cys Ala Cys Thr Gly Gly Ala Cys

1260 Gly Thr 1275 Thr Thr Ala Gly Ala 1290 Gly Gly Gly Cys Ala 1305 Gly Gly Ala Thr Cys 1320 Gly Thr Cys Cys Thr 1335 Thr Cys Gly Cys Thr 1350 Gly Ala Ala Cys Gly 1365 Thr Gly Gly Thr Gly 1380 Ala Thr Ala Cys Gly 1395 Thr Thr Gly Thr Ala 1410 Ala Thr Cys Ala Gly 1425 Thr Gly Gly Thr Cys 1440 Thr Thr Cys Ala Cys 1455 Gly Ala Thr Cys Thr 1470 Ala Cys Gly Ala Thr 1485 Gly Thr Thr Gly Thr 1500 Ala Ala Gly Ala Gly 1515 Ala Thr Thr Thr Ala 1530 Ala Ala Ala Thr Thr 1545 Gly Cys Thr Ala Gly 1560 Ala Cys Cys Gly Cys 1575 Ala Gly Cys Gly Gly 1590 Ala Ala Cys Ala Thr 1605 Gly Cys Thr Thr Cys 1620 Ala Thr Thr Ala Ala 1635 Thr Thr Ala Thr Thr 1650 Ala Thr Gly Ala Thr Ala Ala Ala 1655 1660 1665

Cys Thr Gly Thr Thr Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr Ala Ala Ala

1670 1675 1680

Gly Ala Ala Cys Cys Ala Thr Thr Thr Cys Thr Thr Thr Cys Ala

1685 1690 1695

Thr Cys Ala Thr Thr Thr Gly Cys Thr Thr Thr 1700 1705

<210> 114 <211> 522 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 114 Met Gly Ser Thr Asp Glu Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr Gly 1 5 10 15 Arg Glu Gln Ser Tyr Ala Phe Ser Val Asp Gly Ser Glu Pro Thr Asn 20 25 30 Thr Lys Lys Lys Tyr Asn Leu Pro Val Asp Ala Glu Asp Lys Ala Thr 35 40 45 Val Phe Lys Leu Phe Ser Phe Ala Lys Pro His Met Arg Thr Phe His 50 55 60 Leu Ser Trp Ile Ser Phe Ser Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala 65 70 75 80 Ala Pro Leu Ile Pro Ile Ile Arg Glu Asn Leu Asn Leu Thr Lys His 85 90 95 Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser 100 105 110 Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly 115 120 125 Cys Ala Phe Leu Val Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Ser Met Ser 130 135 140 Phe Val Ser Asp Ala Ala Gly Phe Ile Thr Val Arg Phe Met Ile Gly 145 150 155 160 Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met 165 170 175 Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala Gly Trp 180 185 190 Gly Asn Met Gly Gly Gly Ile Thr Gln Leu Leu Met Pro Ile Val Tyr 195 200 205 Glu Ile Ile Arg Arg Cys Gly Ser Thr Ala Phe Thr Ala Trp Arg Ile 210 215 220 Ala Phe Phe Val Pro Gly Trp Leu His Ile Ile Met Gly Ile Leu Val 225 230 235 240 Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Gly Gly Asn Arg Ala Ala Met Glu 245 250 255 Lys Ala Gly Glu Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Lys Ile Leu Trp Tyr 260 265 270 Ala vai Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr 275 280 285 Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Phe 290 2 95 300 Phe Asp Arg Phe His Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile Ala Ala 305 310 315 320 Cys Phe Gly Met Ala 325 Asn Phe Phe Ala Arg 330 Pro Ala Gly Gly Trp 335 Ala Ser Asp Ile Ala 340 Ala Lys Arg Phe Gly 34 5 Met Arg Gly Arg Leu 350 Trp Thr Leu Trp Ile 355 Ile Gln Thr Ser Gly 360 Gly Leu Phe Cys Val 365 Trp Leu Gly Arg Ala 370 Asn Thr Leu Val Thr 375 Ala Val Val Ser Met 380 Val Leu Phe Ser Leu Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Ala Ile Val Pro Phe 385 390 395 400 Val Ser Arg Arg Ala Leu Gly Ile Ile Ser Gly Leu Thr Gly Ala Gly 405 410 415 Gly Asn Phe Gly 420 Ser Gly Leu Thr Gln 425 Leu Val Phe Phe Ser 430 Thr Ser Arg Phe Thr 435 Thr Glu Glu Gly Leu 440 Thr Trp Met Gly Val 445 Met Ile Val Ala Cys 450 Thr Leu Pro Val Thr 455 Leu Ile His Phe Pro 460 Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Ser Asn Asp Ser Val Asp Ala Thr Glu His Tyr 465 470 475 480 Xyr Val Gly Glu Tyr 485 Ser Lys Glu Glu Gln 490 Gln Ile Gly Met His 495 Leu Lys Ser Lys Leu 500 Phe Ala Asp Gly Ala 505 Lys Thr Glu Gly Gly 510 Ser Ser Val His Lys 515 Gly Asn Ala Thr Asn 520 Asn Ala

<210> 115

<211> 1709

<212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 115

aaacttgaat tttctcaaag gaacttgata cccagaagtt ccatgcatgg agttaccggt ggtagtgagc cgaccaacac aaagaaaaag gcaacggttt tcaagctctt ctccttcgcc tggatctctt tctccacatg ttttgtttcg atcagggaga atcttaacct caccaaacat tcggggagta tcttctctag gctcgtgatg tacggttgtg ccttccttgt gatgttgtct agtgacgcag caggcttcat aacggtgagg gtgtcttgtc aatactggat gagcactatg gggacagcag ccggatgggg aaacatgggt gtgtatgaaa tcattaggcg ctgcggatca tttgtccccg gttggttgca catcatcatg ctgccaggtg gaaacagagc tgccatggag ggaaagattc tatggtacgc cgttacaaat ggatattcca tgggagttga gttaagcaca aggtttcact tgaagcttca cacagcgggg ttctttgctc gtccagcagg aggctgggca cgagggaggt tgtggacttt gtggatcatt ctcggacgtg ccaacaccct cgtcactgcc gcacaagccg cttgcggagc cacctttgct

cgtttaaaat acatgggttc tactgatgag 60

agagaacaga gctatgcttt ctcggtagat 120

tacaatctgc cggtggacgc ggaggataag 180

aaacctcaca tgagaacgtt ccacctctcg 240

acgttcgcag ctgcaccact tatcccgatc 300

gacattggaa acgctggagt tgcctccgtc 360

ggagccgtgt gtgatctttt gggtcctcgt 420

gccccaacgg tgttctccat gagcttcgtg 480

ttcatgattg gtttttgcct ggcgacgttt 540

ttcaacagtc agatcatcgg tctggtgaac 600

ggcggcataa cgcagttgct catgcccatt 660

acagcgttca cggcctggag gatcgccttc 720

ggaatcttgg tgctcacgct aggtcaagat 7 80

aaagcgggag aagttgccaa agacaaattc 840

tacaggactt ggattttcgt tcttctgtat S00

gacaatgtta tcgccgagta cttctttgac 960

attatagcag catgtttcgg aatggccaat 1020

tctgacattg cagccaagcg cttcggaatg 1080

cagacgtccg gtggtctctt ttgtgtgtgg 1140

gttgtatcta tggtcctctt ctctttagga 1200

atcgtgccct ttgtctcccg gcgagctcta 1260 ggcattatct gtctttttct atagttgctt ttccctcctt aaggaggagc accgagggag attgatatca aaagaaccat

<210> 116

<211> 522

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 116

Met Gly Ser Thr Asp Glu Pro Arg Ser Ser Met His Gly Val Thr Gly 1 5 10 15 Arg Glu Gln Ser Tyr Ala Phe Ser Val Asp Gly Ser Glu Pro Thr Asn 20 25 30 Thr Lys Lys Lys Tyr Asn Leu Pro Val Asp Ala Glu Asp Lys Ala Thr 35 40 45 Val Phe Lys Leu Phe Ser Phe Ala Lys Pro His Met Arg Thr Phe His 50 55 60 Leu Ser Trp Ile Ser Phe Ser Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala 65 70 75 80 Ala Pro Leu Ile Pro Ile Ile Arg Glu Asn Leu Asn Leu Thr Lys His 85 90 95 Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ser Ile Phe Ser 100 105 110 Arg Leu Val Met Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Pro Arg Tyr Gly 115 120 125 Cys Ala Phe Leu Val Met Leu Ser Ala Pro Thr Val Phe Ser Met Ser 130 135 140 Phe Val Ser Asp Ala Ala Gly Phe Ile Thr Val Arg Phe Met Ile Gly 145 150 155 160 Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Met Ser Thr Met 165 170 175 Phe Asn Ser Gln Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala Gly Trp 180 185 190 Gly Asn Met Gly Gly Gly Ile Thr Gln Leu Leu Met Pro Ile Val Tyr 195 200 205 Glu Ile Ile Arg Arg Cys Gly Ser Thr Ala Phe Thr Ala Trp Arg Ile 210 215 220 Ala Phe Phe Val Pro Gly Trp Leu His Ile Ile Met Gly Ile Leu Val 225 230 235 240 Leu Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Gly Gly Asn Arg Ala Ala Met Glu 245 250 255 Lys Ala Gly Glu Val Ala Lys Asp Lys Phe Gly Lys Ile Leu Trp Tyr 260 265 270 Ala Val Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr 275 280 285 Ser Met Gly Val Glu Leu Ser Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Phe 290 295 300 Phe Asp Arg Phe His Leu Lys Leu His Thr Ala Gly Ile Ile Ala Ala

cgggtttaac cggggctgga gggaactttg cgacttcgcg cttcacaact gaagaagggc gcacgttgcc tgttacctta atccactttc ccaacgattc ggtcgacgct acggagcact agcagattgg catgcattta aaaagcaaac gcagcagcgt ccacaaaggg aacgcaacca agaaattaat aatttcactt atgtgaaatg ttctttcatc atttgcttt

ggtcaggact cacacagctc 1320 taacgtggat gggagtgatg 1380 ctcagtgggg aagcatgttc 1440 attatgttgg cgaatatagt 1500 tgtttgctga tggagccaag 1560 acaatgcttg atcatgtgtc 1620 gacataaact gttggaaaat 1680 1709 305 310 315 320 Cys Phe Gly Met Ala 325 Asn Phe Phe Ala Arg 330 Pro Ala Gly Gly Trp 335 Ala Ser Asp Ile Ala 340 Ala Lys Arg Phe Gly 34 5 Met Arg Gly Arg Leu 350 Trp Thr Leu Trp Ile 355 Ile Gln Thr Ser Gly 360 Gly Leu Phe Cys Val 365 Trp Leu Gly Arg ALa 370 Asn Thr Leu Val Thr 375 Ala Val Val Ser Met 380 Val Leu Phe Ser Leu Gly Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Thr Phe Ala Ile Val Pro Phe 385 390 395 400 Val Ser Arg Arg Ala 405 Leu Gly Ile Ile Ser 410 Gly Leu Thr Gly Ala 415 Gly Gly Asn Phe Gly 420 Ser Gly Leu Thr Gln 425 Leu Val Phe Phe Ser 430 Thr Ser Arg Phe Thr 435 Thr Glu Glu Gly Leu 440 Thr Trp Met Gly Val 445 Met Ile Val Ala Cys 450 Thr Leu Pro Val Thr 455 Leu Ile His Phe Pro 460 Gln Trp Gly Ser Met Phe Phe Pro Pro Ser Asn Asp Ser Val Asp Ala Thr Glu His Tyr 465 470 475 480 Tyr Val Gly Glu Tyr 485 Ser Lys Glu Glu Gln 490 Gln Ile Gly Met His 495 Leu Lys Ser Lys Leu 500 Phe Ala Asp Gly Ala 505 Lys Thr Glu Gly Gly 510 Ser Ser Val His Lys 515 Gly Asn Ala Thr Asn 520 Asn Ala

<210> 117 <211> 1620 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 117

atgactcaca accattctaa tgaagaaggc tccattggaa cctccttgca tggagttaca 60

gcaagagaac aagtcttctc tttctccgtc gatgcttcgt ctcaaacagt ccaatcagac 120

gatccaacag ctaaattcgc ccttccggtt gattccgaac atcgagccaa agtgttcaac 180

ccactctctt ttgctaaacc tcacatgaga gccttccact taggatggct ctcattcttc 240

acatgcttca tctccacctt cgcggcagca ccattagtcc ccatcatccg cgacaacctc 300

gacctcacta aaaccgacat tggaaacgcc ggagtcgcat ccgtctctgg tgccattttc 360

tcaaggttag ccatgggagc ggtttgtgat ctcctcggtg cacgatatgg gactgccttc 420

tccctcatgc taaccgcccc aaccgtcttc tcaatgtcgt ttgtgggtgg ccctagcgga 480

tacttaggcg tccggttcat gatcggattc tgtctcgcca cgtttgtatc atgccagtat 540

tggaccagcg ttatgttcaa cggtaagatc ataggactag tgaacggctg tgcaggcggg 600

tggggtgata tgggcggtgg agtgactcaa ctcctaatgc cgatggtctt ccacgtcatc 660

aaacttgccg gagccactcc gttcatggcc tggcggatag ctttcttcgt tcccggattt 720

cttcaagttg ttatgggcat tctcgtcctc agtctcggcc aagatctccc tgacggtaac 780

ctaagtaccc ttcagaagag tggtcaagtc tctaaagaca aattctccaa ggttttctgg 840

tttgctgtga agaactacag aacatggatt ttattcgttc tttatggatc ttccatggga 900

attgaattaa ctatcaacaa cgttatctcc ggatattttt acgacaggtt taaccttaag 960

cttcaaacag ctggtatagt agcagccagc tttggaatgg ctaacttcat cgcccgtccc 1020

ttcggtggtt acgcttctga tgtagcggct cgggtttttg gcatgagagg ccggttatgg 1080

accttatgga tctttcaaac cgtaggagct cttttctgta tctggctagg tcgagctagt 1140

tcacttccca tagcaatcct agcaatgatg ctcttctcaa tcggtacaca agcagcttgc 1200 ggagccctct tcggagttgc accttttgtc tcgcgccgct ctctagggct catatcggga 1260

ctaaccggcg caggaggaaa cttcgggtcc ggtttgactc aactgctttt cttctcatca 1320

gcgaggttta gtacagctga gggactctca ttgatgggcg ttatggcggt tttgtgcaca 1380

ctcccagttg cgtttataca ttttccgcaa tggggaagca tgtttttaag accgtcgacc 1440

gatggagaaa gatcacagga ggaatattat tacggttctg agtggacgga gaatgagaaa 1500

caacaaggat tgcacgaagg aagcatcaaa tttgcagaga atagtaggtc agagagaggc 1560

cggaaagtag ctttggctaa cattccaacg ccggagaacg gaactccaag tcatgtttga 1620

<210> 118 <211> 539 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 118

Met Thr His Asn His Ser Asn Glu Glu Gly Ser Ile Gly Thr Ser Leu 1 5 10 15

His Gly Val Thr Ala Arg Glu Gln Val Phe Ser Phe Ssr Val Asp Ala

20 25 30

Ser Ser Gln Thr Val Gln Ser Asp Asp Pro Thr Ala Lys Phe Ala Leu

35 40 45

Pro Val Asp Ser Glu His Arg Ala Lys Val Phe Asn Pro Leu Ser Phe

50 55 60

Ala Lys Pro His Met Arg Ala Phe His Leu Gly Trp Leu Ser Phe Phe 65 70 75 80

Thr Cys Phe Ile Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val Pro Ile Ile

85 90 95

Arg Asp Asn Leu Asp Leu Thr Lys Thr Asp Ile Gly Asn Ala Gly Val

100 105 110

Ala Ser Val Ser Gly Ala Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met Gly Ala Val

115 120 125

Cys Asp Leu Leu Gly Ala Arg Tyr Gly Thr Ala Phe Ser Leu Met Leu

130 135 140

Thr Ala Pro Thr Val Phe Ser Met Ser Phe Val Gly Gly Pro Ser Gly 145 150 155 160

Tyr Leu Gly Val Arg Phe Met Ile Gly Phe Cys Leu Ala Thr Phe Val

165 170 175

Ser Cys Gln Tyr Trp Thr Ser Val Met Phe Asn Gly Lys Ile Ile Gly

180 185 190

Leu Val Asn Gly Cys Ala Gly Gly Trp Gly Asp Met Gly Gly Gly Val

195 200 205

Thr Gln Leu Leu Met Pro Met Val Phe His Val Ile Lys Leu Ala Gly

210 215 220

Ala Thr Pro Phe Met Ala Trp Arg Ile Ala Phe Phe Val Pro Gly Phe 225 230 235 240

Leu Gln Val Val Met Gly Ile Leu Val Leu Ser Leu Gly Gln Asp Leu

245 250 255

Pro Asp Gly Asn Leu Ser Thr Leu Gln Lys Ser Gly Gln Val Ser Lys

260 265 270

Asp Lys Phe Ser Lys Val Phe Trp Phe Ala Val Lys Asn Tyr Arg Thr

275 280 285

Trp Ile Leu Phe Val Leu Tyr Gly Ser Ser Met Gly Ile Glu Leu Thr

290 295 300

Ile Asn Asn Val Ile Ser Gly Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe Asn Leu Lys 305 310 315 320 Leu Gln Thr Ala Ile Ala Phs Gly

Gly Ala 370 Ala Ile 385

Gly Ala

Leu Ile

Thr Gln

Leu Ser 4 50 Phe Ile 465

Asp Gly

Glu Asn

Glu Asn

Pro Thr 530

Arg Pro 340 Met Arg 355

Leu Phe

Leu Ala

Leu Phe

Ser Gly 420 Leu Leu 435

Leu Met

His Phe

Glu Arg

Glu Lys 500 Ser Arg 515

Pro Glu

Gly Ile Val 325

Phe Gly Gly

Gly Arg Leu

Cys Ile Trp 375

Met Met Leu

390 Gly Val Ala 405

Leu Thr Gly

Phe Phe Ser

Gly Val Met 455

Pro Gln Trp

470 Ser Gln Glu 485

Gln Gln Gly

Ser Glu Arg

Asn Gly Thr 535

Ala Ala Ser 330

Tyr Ala Ser

345 Trp Thr Leu 360

Leu Gly Arg

Phe Ser Ile

Pro Phe Val 410

Ala Gly Gly

425 Ser Ala Arg 440

Ala Val Leu

Gly Ser Met

Glu Tyr Tyr 490

Leu His Glu

505 Gly Arg Lys 520

Pro Ser His

Phe Gly Met Ala Asp Val Trp Ile

Ala Ser 380 Gly Thr 395

Ser Arg

Asn Phe

Phe Ser

Cys Thr 460 Phe Leu 475

Tyr Gly Gly Ser Val Ala Val

Ala Ala 350 Phe Gln 365

Ser Leu

Gln Ala

Arg Ser

Gly Ser 430 Thr Ala 445

Leu Pro

Arg Pro

Ser Glu

Ile Lys 510 Leu Ala 525

Asn Phe 335

Arg Val

Thr Val

Pro Ile

Ala Cys 400 Leu Gly 415

Gly Leu

Glu Gly

Val Ala

Ser Thr 480 Trp Thr 495

Phe Ala Asn Ile

<210> 119

<211> 1629

<212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 119

atggctcaca accattctaa tgaagacggc gcaagggagc aagtcttctc cttctccgtc cgaacaaacg atccaacggc taagtttgcc gtgttcaaac cactatcatt cgctaaacca tctttcttca cttgcttcat ctccaccttc gacaatctcg acctgaccaa aaccgacatc gccattttct cgagactcgc tatgggtgct accgccttct cacttatgct tacagctcca gcgggaagct acttagccgt aaggttcatg tgtcagtact ggacgagtgt tatgttcact gctggagggt ggggagatat gggaggagga cacgtcatca aactcaccgg agccactccc cccggcattc ttcagatagt tatgggtatt gatggtaacc tcagtactct ccaaaagagt gtcttttggt tcgctgtgaa aaactataga tctatgggag ttgaattaac gatcaacaac aaccttacgc ttcacacagc tggtattata gcccgtcctt ttggtggcta cgcttcagat cggttatgga tcttgtggat cttacaaact

tctattggaa cctccttgca tggagtcacg 60

caagaagatg tcccttcatc tcaagccgtc 120

ctaccagtgg actccgaaca tagggcaaaa 180

catatgagag ccttccactt aggatggatc 240

gcagccgcac ctctagtccc cgtcattcgc 300

ggaaatgctg gagttgcatc agtttccggc 360

gtatgtgacc ttctaggggc acgttatgga 420

gcagttttct ccatgtcgtt cgtagctgac 480

atcggttttt gcttagcaac gttcgtatca 540

ggaaagatta tcggactcgt taacggatgt 600

gtgactcagc tactaatgcc aatggtcttc 660

ttcacggctt ggaggttcgc cttcttcatc 720

ctcgttctca ctctcggcca agatcttccc 780

ggtcaagttt ctaaagacaa attctccaag 840

acatggatct tattcatgct ctatggattt SOO

gttatatctg gatacttcta cgataggttt 960

gcagccagct ttggtatggc aaacttcttt 1020

gtagctgcac ggctcttcgg tatgagggga 1080

gttggagctc tcttttgcat ctggcttggt 1140 cgtgctagtt cactacctat agctatctta gctgcttgtg gagctctctt tggtgttgct atctcgggat taactggtgc tggtggaaat ttctcttcct cgaggtttag tacggcggaa gtgtgctctc ttccggttgc gtttatacat ccatcacaag atggagagaa atcaaaggaa gaagagaaga gcttaggact acacgaagga gagagaggcc gcaaggcgat gttggctgat catgtctag

gccatgatgc ttttttccat gggcacacaa 1200

ccttttgttt cccgccgttc tcttggactt 1260

tttgggtcgg gagttactca acttcttttc 1320

ggactatcgt tgatgggcgt tatggctgtt 1380

tttccgcagt ggggaagcat gttcttgagg 1440

gagcattact atggagcgga atggacagag 1500

agcattaaat ttgctgaaaa cagccggtca 1560

attccaacgc cggaaaccgg atctccggct 1620

1629

<210> 120

<211> 542

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 120 Met Ala His Asn His Ser Asn Glu Asp Gly Ser Ile Gly Thr Ser Leu 1 5 10 15 His Gly Val Thr Ala Arg Glu Gln Val Phe Ser Phe Ser Val Gln Glu 20 25 30 Asp Val Pro Ser Ser Gln Ala Val Arg Thr Asn Asp Pro Thr Ala Lys 35 40 45 Phe Ala Leu Pro Val Asp Ser Glu His Arg Ala Lys Val Phe Lys Pro 50 55 60 Leu Ser Phe Ala Lys Pro His Met Arg Ala Phe His Leu Gly Trp Ile 65 70 75 80 Ser Phe Phe Thr Cys Phe Ile Ser Thr Phe Ala Ala Ala Pro Leu Val 85 90 95 Pro Val Ile Arg Asp Asn Leu Asp Leu Thr Lys Thr Asp Ile Gly Asn 100 105 110 Ala Gly Val Ala Ser Val Ser Gly Ala Ile Phe Ser Arg Leu Ala Met 115 120 125 Gly Ala Val Cys Asp Leu Leu Gly Ala Arg Tyr Gly Thr Ala Phe Ser 130 135 140 Leu Met Leu Thr Ala Pro Ala Val Phe Ser Met Ser Phe Val Ala Asp 145 150 155 160 Ala Gly Ser Tyr Leu Ala Val Arg Phe Met Ile Gly Phe Cys Leu Ala 165 170 175 Thr Phe Val Ser Cys Gln Tyr Trp Thr Ser Val Met Phe Thr Gly Lys 180 185 190 Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Cys Ala Gly Gly Trp Gly Asp Met Gly 195 200 205 Gly Gly Val Thr Gln Leu Leu Met Pro Met Val Phe His Val Ile Lys 210 215 220 Leu Thr Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Phe Ala Phe Phe Ile 225 230 235 240 Pro Gly Ile Leu Gln Ile Val Met Gly Ile Leu Val Leu Thr Leu Gly 245 250 255 Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Ser Thr Leu Gln Lys Ser Gly Gln 260 265 270 Val Ser Lys Asp Lys Phe Ser Lys Val Phe Trp Phe Ala Val Lys Asn 275 280 285 Tyr Arg Thr Trp Ile Leu Phe Met Leu Tyr Gly Phe Ser Met Gly Val 290 2 95 300 lu Leu Thr Ile Asn Asn Val Ile Ser Gly Tyr Phe Tyr Asp Arg Phe 305 310 315 320

Asn Leu Thr Leu His 325 Thr Ala Gly Ile Ile 330 Ala Ala Ser Phe Gly 335 Met Ala Asn Phe Phe 340 Ala Arg Pro Phe Gly 345 Gly Tyr Ala Ser Asp 350 Val Ala Ala Arg Leu Phe Gly Met Arg Gly Arg Leu Trp Ile Leu Trp Ile Leu 355 360 365 Gln Thr 370 Val Gly Ala Leu Phe 375 Cys Ile Trp Leu Gly 380 Arg Ala Ser Ser Leu Pro Ile Ala Ile Leu Ala Met Met Leu Phe Ser Met Gly Thr Gln 385 390 395 400 Ala Ala Cys Gly Ala Leu Phe Gly Val Ala Pro Phe Val Ser Arg Arg 405 410 415 Ser Leu Gly Leu 420 Ile Ser Gly Leu Thr 425 Gly Ala Gly Gly Asn 430 Phe Gly Ser Gly Val 435 Thr Gln Leu Leu Phe 440 Phe Ser Ser Ser Arg 445 Phe Ser Thr Ala Glu 450 Gly Leu Ser Leu Met 4 55 Gly Val Met Ala Val 460 Val Cys Ser Leu Pro Val Ala Phe Ile His Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe Leu Arg 4 65 470 475 480 Pro Ser Gln Asp Gly 485 Glu Lys Ser Lys Glu 490 Glu His Tyr Tyr Gly 495 Ala Glu Trp Thr Glu 500 Glu Glu Lys Ser Leu 505 Gly Leu His Glu Gly 510 Ser Ile Lys Phe Ala 515 Glu Asn Ser Arg Ser 520 Glu Arg Gly Arg Lys 525 Ala Met Leu Ala Asp 530 Ile Pro Thr Pro Glu 535 Thr Gly Ser Pro Ala 540 His Val

<210> 121

<211> 1605

<212> DMA

<213> Daucus carota

<400> 121

atgggtgaca tggaaggttc cccgggttcc tccatgcacg gtgttaccgg tcgtgaaccg 60

tccctggctt tctccgttgc ttcccgtatc gacacctccg ctgaattcca cgttccggtt 120

gactccgaac acaaagctaa agttttcaaa ttcaaatcct tctccccgcc gcacggtctg 180

cagttccagc tgacctggat ctccttcccg acctgcttcg tttccacctt cgctgctcgt 240

ccgctggttg ttatcatccg tgacaacctg aacccgacca aaatggacgt tggtaacgct 300

ggtgttgctt ccgttaccgg ttccatcctg tcccgtggtg ctatgggtgc tatctgcgac 360

atgctgggtc cgcgttacgg ttgcgctttc ctgatcatgc tgtccgctcc gaaagttctg 420

tgcatgtcct tcgtttcctc cgctggtggt tacgttgctg ttcgtttcat gatcggtttc 480

tccctggcta ccttcgtttc ctgccgttac tggatgtcca cctccatgca ctccgacatc 540

atcggtctgg ttaacggtac cgctgctggt tggggtaaca tgaccggtgg tgctacccag 600

ctgatcatgc cgctgctgta cgacatcatc cgtgaagctg gtgctacccc gttcaccgct 660

tggcgtatcg ctctgttcat cccgggttgg ctgcacgtta tctccggtat cctggttctg 720

accctgggtc aggacctgcc ggacggtaac gctcagaacg aagcttccct gcgtaaaaaa 780

ggtcgtgttc acaaagacaa attctccaaa atcctgcgtt acgctgctac caactaccgt 840

acctggatcc tggttctgct gtacggttac tccatgggtg ttgaactgac caccgacaac 900

gttatcgctg aatacttctt cgaccgtttc gacctgaaac tgcacacccc gggtatcatc 960

gctgctacct tcggtatggc taacctgctg gctcgtccgt tcggtggttg gtcctccgac 1020 gttgctgcta aacacttcgg tatgcgtggt cgtcactgga actcctggga cctgcagacc 1080

ctgggtggtg ttttctgcct gctgctggtt cgtgctacca cctccccgat cgacgctctg 1140

gctatcacct ggatgatcat cttctccatc ggtgctcagg ctgctaccgg tgttaccttc 1200

ggtatcatcc cgttcatctc ccgtcgttac ctgggtatca tctcccagat gaccggtgct 1260

aacggtaact tcggttccgg tcagacccag ccgctggaat tcgactccac caaatacaac 1320

accggtctgg gtctgaccta catgggtatg atgatcatcg cttgcaccct gccgccgatg 1380

ctggtttggt tctggcagga cggttccatg ttcctgccgc cgtccaaaga cccgatcaaa 14 40

ggtaccgaac cggaacacta cttcggttcc gaatacaccg aagacgaaaa agttaaaggt 1500

atgcaccaga actccatcaa attcgctgaa aactcccgta ccgaattcgg taaaaaacgt 1560

gttggttccg ctccgacccc gccgaacgtt taccccaacc gtgtt 1605

<210> 122 <211> 535 <212> PRT

<213> Daucus carota

<400> 122

Met Gly Asp Met Glu Gly. Ser Pro Gly Ser Ser Met His Gly Val Thr 1 5 10 15 Gly Arg Glu Pro Ser Leu Ala Phe Ser Val Ala Ser Arg Ile Asp Thr 20 25 30 Ser Ala Glu Phe His Val Pro Val Asp Ser Glu His Lys Ala Lys Val 35 40 45 Phe Lys Phe Lys Ser Phe Ser Pro Pro His Gly Leu Gln Phe Gln Leu 50 55 60 Thr Trp Ile Ser Phe Pro Thr Cys Phe Val Ser Thr Phe Ala Ala Arg 65 70 75 80 Pro Leu Val Val Ile Ile Arg Asp Asn Leu Asn Pro Thr Lys Met Asp 85 90 95 Val Gly Asn Ala Gly Val Ala Ser Val Thr Gly Ser Ile Leu Ser Arg 100 105 110 Gly Ala Met Gly Ala Ile Cys Asp Met Leu Gly Pro Arg Tyr Gly Cys 115 120 125 Ala Phe Leu Ile Met Leu Ser Ala Pro Lys Val Leu Cys Met Ser Phe 130 135 140 Val Ser Ser Ala Gly Gly Tyr Val Ala Val Arg Phe Met Ile Gly Phe 145 150 155 160 Ser Leu Ala Thr Phe Val Ser Cys Arg Tyr Trp Met Ser Thr Ser Met 165 170 175 His Ser Asp Ile Ile Gly Leu Val Asn Gly Thr Ala Ala Gly Trp Gly 180 185 190 Asn Met Thr Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Leu Tyr Asp 195 200 205 Ile Ile Arg Glu Ala Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Ile Ala 210 215 220 Leu Phe Ile Pro Gly Trp Leu His Val Ile Ser Gly Ile Leu Val Leu 225 230 235 240 Thr Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Ala Gln Asn Glu Ala Ser 245 250 255 Leu Arg Lys Lys Gly Arg Val His Lys Asp Lys Phe Ser Lys Ile Leu 260 265 270 Arg Tyr Ala Ala Thr Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Leu Val Leu Leu Tyr 275 280 285 Gly Tyr Ser Met Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu 290 295 300 Tyr Phe Phe Asp Arg Phe Asp Leu Lys Leu His Thr Pro Gly Ile Ile 305 310 315 320 Ala Ala Thr Phe Gly 325 Met Ala Asn Leu Leu 330 Ala Arg Pro Phe Gly 335 Gly Trp Ser Ser Asp 340 Val Ala Ala Lys His 345 Phe Gly Met Arg Gly 350 Arg His Trp Asn Ser 355 Trp Asp Leu Gln Thr 360 Leu Gly Gly Val Phe 365 Cys Leu Leu Leu Val 370 Arg Ala Thr Thr Ser 375 Pro Ile Asp Ala Leu 380 Ala Ile Thr Trp Met Ile Ile Phe Ser Ile Gly Ala Gln Ala Ala Thr Gly Val Thr Phe 385 390 395 400 Gly Ile Ile Pro Phe 405 Ile Ser Arg Arg Tyr 410 Leu Gly Ile Ile Ser 415 Gln Met Thr Gly Ala 420 Asn Gly Asn Phe Gly 425 Ser Gly Gln Thr Gln 430 Pro Leu Glu Phe Asp 435 Ser Thr Lys Tyr Asn 440 Thr Gly Leu Gly Leu 445 Thr Tyr Met Gly Met 450 Met Ile Ile Ala Cys 4 55 Thr Leu Pro Pro Met 460 Leu Val Trp Phe Trp Gln Asp Gly Ser Met Phe Leu Pro Pro Ser Lys Asp Pro Ile Lys 465 470 475 480 Gly Thr Glu Pro Glu 485 His Tyr Phe Gly Ser 490 Glu Tyr Thr Glu Asp 495 Glu Lys Val Lys Gly 500 Met His Gln Asn Ser 505 Ile Lys Phe Ala Glu 510 Asn Ser Arg Thr Glu 515 Phe Gly Lys Lys Arg 520 Val Gly Ser Ala Pro 525 Thr Pro Pro Asn Val 530 Tyr Pro Asn Arg Val 535

<210> 123

<211> 1200

<212> DNA

<213> Zea mays

<400> 123

cagcaagatc atcggcaccg tcaacgggct cgccacgcag ctcatcatgc cgctcgtcta attcacggcc tggcgcctcg cctacttcgt cctggtgctc acgctggggc aggacctccc gggcaacgtc aacaaggaca gcttctccaa tacctggatc ttcgtcctcc tctacggcta cgtcatcgcc gagtacatgt acgaccgctt cgccgcctgc ttcggcatgg ccaacatcgt catgggcgcg cgctactggg gcatgcgcgc cgccggcggc gccttctgcc tctggctggg cgccatggtg ctcttctcct tctgcgcgca ccccttcgtc tcccgccgct ccctcggcat cttcggcgcc gggctcacgc agctgctctt ggggctggag tacatgggca tcatgatcat cttcccgcag tgggggtcca tgttcttccc ctacgcctcc gagtggaacg acgacgagaa

cgccgccgga tggggcaaca tgggaggcgg 60

cgacgtcatc cgcaagtgcg gcgccacgcc 120

gccgggcctc atgcacgtcg tcatgggcgt 180

cgacggcaac ctcaggtcgc tgcagaagaa 240

ggtcatgtgg tacgccgtca tcaactaccg 300

ctgcatgggc gtcgagctca ccaccgacaa 360

cgacctcgac ctccgcgtcg ccgggaccat 420

cgcacgccct atgggcggca tcatgtcgga 480

tcgcctctgg aacatctgga tcctccagac 540

acgcgccagc accctccccg tctccgtcgt 600

ggcggcctgc ggcgccatct tcggggtcat 660

catctccggc atgacgggcg ccggcggcaa 720

ctttacctcc tcgacctact ccacgggcag 780

ggcgtgcacg ctgccggtgg tgttcgtgca 840

gcccagcgcc accgccgacg aggagggcta 900

gagcaaggga ctccatagcg ctagcctcaa 960 gttcgccgag aacagccgct cagagcgcgg caagcgcaac gtcatccagg ccgacgccgc 1020

cgccacgccg gagcatgtct aagttcacta ctaagatgga tcgatcgacg atcacctata 1080

cctctttgta tgtacgaata tgccttgtta ttactgtgcg cgcgcatata caatacacgt 1140

gtgctccgtt gacatgagtt atatagcact aaaaacttct tttgaaaaaa aaaaaaaaaa 1200

<210> 124

<211> 345

<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 124 Ser Lys Ile Ile Gly Thr Val Asn Gly Leu Ala Ala Gly Trp Gly Asn 1 5 10 15 Met Gly Gly Gly Ala Thr Gln Leu Ile Met Pro Leu Val Tyr Asp Val 20 25 30 Ile Arg Lys Cys Gly Ala Thr Pro Phe Thr Ala Trp Arg Leu Ala Tyr 35 40 45 Phe Val Pro Gly Leu Met His Val Val Met Gly Val Leu Val Leu Thr 50 55 60 Leu Gly Gln Asp Leu Pro Asp Gly Asn Leu Arg Ser Leu Gln Lys Lys 65 70 75 80 Gly Asn Val Asn Lys Asp Ser Phe Ser Lys Val Met Trp Tyr Ala Val 85 90 95 Ile Asn Tyr Arg Thr Trp Ile Phe Val Leu Leu Tyr Gly Tyr Cys Met 100 105 110 Gly Val Glu Leu Thr Thr Asp Asn Val Ile Ala Glu Tyr Met Tyr Asp 115 120 125 Arg Phe Asp Leu Asp Leu Arg Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Cys Phe 130 135 140 Gly Met Ala Asn Ile Val Ala Arg Pro Met Gly Gly Ile Met Ser Asp 145 150 155 160 Met Gly Ala Arg Tyr Trp Gly Mét Arg Ala Arg Leu Trp Asn Ile Trp 165 170 175 Ile Leu Gln Thr Ala Gly Gly Ala Phe Cys Leu Trp Leu Gly Arg Ala 180 185 190 Ser Thr Leu Pro Val Ser Val Val Ala Met Val Leu Phe Ser Phe Cys 195 200 205 Ala Gln Ala Ala Cys Gly Ala Ile Phe Gly Val Ile Pro Phe Val Ser 210 215 220 Arg Arg Ser Leu Gly Ile Ile Ser Gly Met Thr Gly Ala Gly Gly Asn 225 230 235 240 Phe Gly Ala Gly Leu Thr Gln Leu Leu Phe Phe Thr Ser Ser Thr Tyr 245 250 255 Ser Thr Gly Arg Gly Leu Glu Tyr Met Gly Ile Met Ile Met Ala Cys 260 265 270 Thr Leu Pro Val Val Phe Val His Phe Pro Gln Trp Gly Ser Met Phe 275 280 285 Phe Pro Pro Ser Ala Thr Ala Asp Glu Glu Gly Tyr Tyr Ala Ser Glu 290 295 300 Trp Asn Asp Asp Glu Lys Ser Lys Gly Leu His Ser Ala Ser Leu Lys 305 310 315 320 Phe Ala Glu Asn Ser Arg Ser Glu Arg Gly Lys Arg Asn Val Ile Gln 325 330 335 Ala Asp Ala Ala Ala Thr Pro Glu His Val <210> 125

<211> 1965

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 125

ggtggaggag agtgaggacg gcccacgcgg acgagcagag agtggcgggc tcagtgtcgg 60

gctcgccgga gtccgcgcaa tccggccgtt catgcttcat tctctcggac attaacctgg 120

tttacttgta agaaagtaga gccatggact cctcatacca gcatgacaag cctctgctgg 180

atgaagagaa ctcctcgcaa gtgacccttg aatatacagg tgatggatct gtttgcatcc 240

gtgggcatcc tgctttaagg aaacatacag ggaactggaa gggttcctca ttagccatcg 300

ttttttcatt ctgctcttat ctggccttta cttcaattgt aaaaaaccta gtcagttatc 360

tcacaaaagt tctacatgaa acaaacgtgg ccgctgcaag agatgttgca acttggtcag 420

gaacaagtta tcttgcacct ctggttggag ccttcttagç tgattcatat ctggggaagt 480

actgtacaat tctgatcttc tgcacgatct tcattatcgg attgatgatg ttgcttctgt 540

cagcagcagt tccattaatc tctactggtc ctcactcatg gatcatatgg acagatccag 600

tctcttctca gaacatcata ttctttgtcg gtttgtacat ggttgcttta gggtatggtg 660

cacagtgccc ctgcatatca tcatttggtg ctgatcaatt tgatgacact gatgaaaatg 720

agagaacaaa aaagagttct tttttcaatt ggacctattt cgtagccaat gcgggctcat 7 80

tgatctcggg gactgttatt gtgtgggtgc aagatcacaa aggttggatc tggggtttta 840

ccatttctgc actatttgtg tatttaggtt ttggtacttt tatctttggc tcctctatgt 900

atgatttcag aaacctggag gaagcccctc ttgcgagaat atgccaggtt gttgttgctg 960

ctattcacaa acgcgataaa gatttgccat gtgattcctc agttctttat gagtttctgg 1020

ggcagagttc agcaatcgaa ggcagccgaa aattggagca tacaactgga cttaagttct 1080

ttgatagagc tgcaatggtg acaccatctg attttgaatc tgatggccta ctaaacacat 1140

ggaagatttg cacagtcact caagtggagg aactgaagat tttgatcagg atgttccccg 1200

tttgggcaac gatgatatta tttgctgcag ttctggacaa catgttttcg acattcatag 1260

aacaggggat ggtgatggag aaacacatcg gctctttcga aatacctgcg gcgtccttcc 1320

aatccattga tgtcattgct gtccttatac tagttccagt ctatgaaaga gtccttgttc 1380

cagtgttcag aaaattcact ggcagagcaa atggcattac tccactgcag cgaatgggga 1440

tcggcctgtt cttttccatg ctctccatgg tatcagcagc attggtggag agtaatcggt 1500

tgcggattgc gcaggatgaa ggtttggtgc acaggaaggt ggctgttcca atgagcatcc 1560

tgtggcaggg accccagtac ttcctgatag gcgtgggaga ggtgttctca aacattgggt 1620

taactgaatt tttctaccag gaatcaccgg acgccatgag aagcttatgt ctcgcattct 1680

cacttgctaa cgtttcggca ggaagttacc tcagctcgtt tatcgtttct cttgtgccag 1740

tgttcacagc cagagaaggc agtcctggat ggatacctga taacttgaac gaagggcatt 1800

tggatcggtt cttctggatg atggctggct tgtgtttctt gaatatgctg gcctttgtgt 18 60

tctgtgccat gaggtacaaa tgtaagaagg cttcctgaac cttgttaaca ttagcaatat 1920

aatggtggtg gaaaaggaca attgtgttgc aaaaaaaaaa aaaaa 1965

<210> 126 <211> 584 <212> PRT <213> Oryza sativa

<400> 126

Met Asp Ser Ser Tyr Gln His Asp Lys Pro Leu Leu Asp Glu Glu Asn 15 10 15

Ser Ser Gln Val Thr Leu Glu Tyr Thr Gly Asp Gly Ser Val Cys Ile

20 25 30

Arg Gly His Pro Ala Leu Arg Lys His Thr Gly Asn Trp Lys Gly Ser Ser Leu Ala Ile Val Phe Ser Phe Cys Ser Tyr Leu Ala Phe Thr Ser 50 55 60 Ile Val Lys Asn Leu Val Ser Tyr Leu Thr Lys Val Leu His Glu Thr 65 70 75 80 Asn Val Ala Ala Ala Arg Asp Val Ala Thr Trp Ser Gly Thr Ser Tyr 85 90 95 Leu Ala Pro Leu Val Gly Ala Phe Leu Ala Asp Ser Tyr Leu Gly Lys 100 105 110 Tyr Cys Thr Ile Leu Ile Phe Cys Thr Ile Phe Ile Ile Gly Leu Met 115 120 125 Met Leu Leu Leu Ser Ala Ala Val Pro Leu Ile Ser Thr Gly Pro His 130 135 140 Ser Trp Ile Ile Trp Thr Asp Pro Val Ser Ser Gln Asn Ile Ile Phe 145 150 155 160 Phe Val Gly Leu Tyr Met Val Ala Leu Gly Tyr Gly Ala Gln Cys Pro 165 170 175 Cys Ile Ser Ser Phe Gly Ala Asp Gln Phe Asp Asp Thr Asp Glu Asn 180 185 190 Glu Arg Thr Lys Lys Ser Ser Phe Phe Asn Trp Thr Tyr Phe Val Ala 195 200 205 Asn Ala Gly Ser Leu Ile Ser Gly Thr Val Ile Val Trp Val Gln Asp 210 215 220 HiS Lys Gly Trp Ile Trp Gly Phe Thr Ile Ser Ala Leu Phe Val Tyr 225 230 235 240 Leu Gly Phe Gly Thr Phe Ile Phe Gly Ser Ser Met Tyr Asp Phe Arg 245 250 255 Asn Leu Glu Glu Ala Pro Leu Ala Arg Ile Cys Gln Val Val Val Ala 260 265 270 Ala Ile His Lys Arg Asp Lys Asp Leu Pro Cys Asp Ser Ser Val Leu 275 280 285 Tyr Glu Phe Leu Gly Gln Ser Ser Ala Ile Glu Gly Ser Arg Lys Leu 290 295 300 Glu His Thr Thr Gly Leu Lys Phe Phe Asp Arg Ala Ala Met Val Thr 305 310 315 320 Pro Ser Asp Phe Glu Ser Asp Gly Leu Leu Asn Thr Trp Lys Ile Cys 325 330 335 Thr Val Thr Gln Val Glu Glu Leu Lys Ile Leu Ile Arg Met Phe Pro 340 345 350 Val Trp Ala Thr Met Ile Leu Phe Ala Ala Val Leu Asp Asn Met Phe 355 360 365 Ser Thr Phe Ile Glu Gln Gly Met Val Met Glu Lys His Ile Gly Ser 370 375 380 Phe Glu Ile Pro Ala Ala Ser Phe Gln Ser Ile Asp Val Ile Ala Val 385 390 395 400 Leu Ile Leu Val Pro Val Tyr Glu Arg Val Leu Val Pro Val Phe Arg 405 410 415 Lys Phe Thr Gly Arg Ala Asn Gly Ile Thr Pro Leu Gln Arg Met Gly 420 425 430 Ile Gly Leu Phe Phe Ser Met Leu Ser Met Val Ser Ala Ala Leu Val 435 440 445 Glu Ser Asn Arg Leu Arg Ile Ala Gln Asp Glu Gly Leu Val His Arg 450 455 460 Lys Val Ala Val Pro Met Ser Ile Leu Trp Gln Gly Pro Gln Tyr Phe 465 470 475 480 Leu Ile Gly Val Gly 485 Glu Val Phe Ser Asn 490 Ile Gly Leu Thr Glu 495 Phe Phe Tyr Gln Glu 500 Ser Pro Asp Ala Met 505 Arg Ser Leu Cys Leu 510 Ala Phe Ser Leu Ala 515 Asn Val Ser Ala Gly 520 Ser Tyr Leu Ser Ser 525 Phe Ile Val Ser Leu 530 Val Pro Val Phe Thr 535 Ala Arg Glu Gly Ser 540 Pro Gly Trp Ile Pro Asp Asn Leu Asn Glu Gly His Leu Asp Arg Phe Phe Trp Met Met 545 550 555 560 Ala Gly Leu Cys Phe 565 Leu Asn Met Leu Ala 570 Phe Val Phe Cys Ala 575 Met

Arg Tyr Lys Cys Lys Lys Ala Ser 580

<210> 127 <211> 405 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 127

tcatactcac agaacagaaa ccctaatttc ctcaaagcaa tctcgtttca tcttccgcaa 60

acgaaaccct cgagagttgt tactcctcct cctcctctgg tgcatgataa agcggcctca 120 gggtttgctg cggcgctcgt tagcgtttgt caatcgaaga attgtcttgg tcggactcaa 180 gaagatgtca gaagattgat ggagtttctt gtgggagaag aaaagaagag gaacaaggtc 2 40 ttagtcaatg atgttgttga gagaggtaaa tttggtaaac acttcaaggg cttggtcaag 300 atgttgattg caagaggtaa atctgggatt ctggtggatg ttttaatgga atttgagaga 360 atctgtaatg aattggtctc aaaaaaactt gtctgggttt cttga 4 05

<210> 128 <211> 135 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 128

Ala Ser Tyr Ser Gln Asn Arg Asn Pro Asn Phe Leu Lys Ala Ile Ser 1 5 10 15

Phe His Leu Pro Gln Thr Lys Pro Ser Arg Val Val Thr Pro Pro Pro

20 25 30

Pro Leu Val His Asp Lys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Ala Ala Leu Val

35 40 45

Ser Val Cys Gln Ser Lys Asn Cys Leu Gly Arg Thr Gln Glu Asp Val

50 55 60

Arg Arg Leu Met Glu Phe Leu Val Gly Glu Glu Lys Lys Arg Asn Lys 65 70 75 80

Val Leu Val Asn Asp Val Val Glu Arg Gly Lys Phe Gly Lys His Phe

85 90 95

Lys Gly Leu Val Lys Met Leu Ile Ala Arg Gly Lys Ser Gly Ile Leu

100 105 110

Val Asp Val Leu Met Glu Phe Glu Arg Ile Cys Asn Glu Leu Val Ser

115 120 125

Lys Lys Leu Val Trp Val Ser 130 135 <210> 129 <211> 576 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana <400> 129

atggatactc tctcagcatc cgtttcatcc ttgaacctcc cttctcttcc tccaccaccg 60

cagccaccgt tgagatccat ctccagccgc tttaaatcca ccgtaaacgc caccacttct 120

gcttcatcta ccaatctttc aaaaccaaca tcgtcttcac cttcttcagc atcatactca 180

cagaacagaa accctaattt cctcaaagca atctcgtttc atcttccgca aacgaaaccc 240

tcgagagttg ttactcctcc tcctcctctg gtgcatgata aagcggcctc agggtttgct 300

gcggcgctcg ttagcgtttg tcaatcgaag aattgtcttg gtcggactca agaagatgtc 360

agaagattga tggagtttct tgtgggagaa gaaaagaaga ggaacaaggt cttagtcaat 420

gatgttgttg agagaggtaa atttggtaaa cacttcaagg gcttggtcaa gatgttgatt 480

gcaagaggta aatctgggat tctggtggat gttttaatgg aatttgagag aatctgtaat 540

gaattggtct caaaaaaact tgtctgggtt tcttga 576

<210> 130 <211> 191 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 130

Met Asp Thr Leu Ser Ala Ser Val Ser Ser Leu Asn Leu Pro Ser Leu 1 5 10 15

Pro Pro Pro Pro Gln Pro Pro Leu Arg Ser Ile Ser Ser Arg Phe Lys

20 25 30

Ser Thr Val Asn Ala Thr Thr Ser Ala Ser Ser Thr Asn Leu Ser Lys

35 40 45

Pro Thr Ser Ser Ser Pro Ser Ser Ala Ser Tyr Ser Gln Asn Arg Asn

50 55 60

Pro Asn Phe Leu Lys Ala Ile Ser Phe His Leu Pro Gln Thr Lys Pro 65 70 75 80

Ser Arg Val Val Thr Pro Pro Pro Pro Leu Val His Asp Lys Ala Ala

85 90 95

Ser Gly Phe Ala Ala Ala Leu Val Ser Val Cys Gln Ser Lys Asn Cys

100 105 110

Leu Gly Arg Thr Gln Glu Asp Val Arg Arg Leu Met Glu Phe Leu Val

115 120 125

Gly Glu Glu Lys Lys Arg Asn Lys Val Leu Val Asn Asp Val Val Glu

130 135 140

Arg Gly Lys Phe Gly Lys His Phe Lys Gly Leu Val Lys Met Leu Ile 145 150 155 160

Ala Arg Gly Lys Ser Gly Ile Leu Val Asp Val Leu Met Glu Phe Glu

165 170 175

Arg Ile Cys Asn Glu Leu Val Ser Lys Lys Leu Val Trp Val Ser 180 185 190

<210> 131 <211> 57 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 131 Met Asp Thr Leu Ser Ala Ser Val Ser Ser Leu Asn Leu Pro Ser Leu 1 5 10 15 Pro Pro Pro Pro Gln Pro Pro Leu Arg Ser Ile Ser Ser Arg Phe Lys 20 25 30 Ser Thr Val Asn Ala Thr Thr Ser Ala Ser Ser Thr Asn Leu Ser Lys

35 40 45

Pro Thr Ser Ser Ser Pro Ser Ser Ser 50 55

<210> 132 <211> 32 <212> PRT

<213> Chlamydomonas <400> 132

Met Ala Met Ala Met Arg Ser Thr Phe Ala Ala Arg Val Gly Ala Lys 15 10 15

Pro Ala Val Arg Gly Ala Arg Pro Ala Ser Arg Met Ser Cys Met Ala 20 25 30

<210> 133 <211> 32 <212> PRT <213> Chlamydomonas <400> 133

Met Gln Val Thr Met Lys Ser Ser Ala Val Ser Gly Gln Arg Val Gly 15 10 15

Gly Ala Arg Val Ala Thr Arg Ser Val Arg Arg Ala Gln Leu Gln Val 20 25 30

<210> 134 <211> 52 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 134

Met Ala Ser Leu Met Leu Ser Leu Gly Ser Thr Ser Leu Leu Pro Arg 1 5 10 15 Glu Ile Asn Lys Asp Lys Leu Lys Leu Gly Thr Ser Ala Ser Asn Pro 20 25 30 Phe Leu Lys Ala Lys Ser Phe Ser Arg Val Thr Met Thr Val Ala Val 35 40 45 Lys Pro Ser Arg

50

<210> 135 <2ll> 54 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 135

Met Ala Thr Gln Phe Ser Ala Ser Val Ser Leu Gln Thr Ser Cys Leu 15 10 15 Ala Thr Thr Arg Ile Ser Phe Gln 20

Gly Lys Thr Asn Leu Ser Phe Asn

35 40

Arg Leu Ser Val Ser Cys 50

Lys Pro Ala Leu Ile Ser Asn His

25 30

Leu Arg Arg Ser Ile Pro Ser Arg 45

<210> 136

<211> 70

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 136

Met Ala Ser Ile Ala Ala Ser Ala Ser Ile Ser Leu Gln Ala Arg Pro 15 10 15

Arg Gln Leu Ala Ile Ala Ala Ser Gln Val Lys Ser Phe Ser Asn Gly

20 25 30

Arg Arg Ser Ser Leu Ser Phe Asn Leu Arg Gln Leu Pro Thr Arg Leu

35 40 45

Thr Val Ser Cys Ala Ala Lys Pro Glu Thr Val Asp Lys Val Cys Ala

50 55 60

Val Val Arg Lys Gln Leu 65 70

<210> 137

<211> 74

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 137

Met Ala Ser Ile Ala Thr Ser Ala Ser Thr Ser Leu Gln Ala Arg Pro 1 5 10 15 Arg Gln Leu Val Ile Gly Ala Lys Gln Val Lys Ser Phe Ser Tyr Gly 20 25 30 Ser Arg Ser Asn Leu Ser Phe Asn Leu Arg Gln Leu Pro Thr Arg Leu 35 40 45 Thr Val Tyr Cys Ala Ala Lys Pro Glu Thr Val Asp Lys Val Cys Ala 50 55 60 Val Val Arg Lys Gln Leu Ser Leu Lys Glu 65 70

<210> 138 <211> 51 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 138

Met Ala Ser Ser Ala Ala Ala Ile Val Ser Gly Ser Pro Phe Arg Ser 15 10 15

Ser Pro Leu Ile His Asn His His Ala Ser Arg Tyr Ala Pro Gly Ser

20 25 30

Ile Ser Val Val Ser Leu Pro Arg Gln Val Ser Arg Arg Gly Leu Ser

35 40 45

Val Lys Ser 50

<210> 139 <211> 100 <212> PRT

<213> Brassica napus <400> 139

Met Ala Thr Ala Asn Ala Leu Ser Ser Pro Ser Val Leu Cys Ser Ser 1 5 10 15 Arg Gln Gly Lys Leu Ser Gly Gly Ser Gln Gln Lys Gly Gln Arg Val 20 25 30 Ser Tyr Arg Lys Ala Asn Arg Arg Phe Ser Leu Arg Ala Asn Val Lys 35 40 45 Glu Ile Ala Phe Asp Gln Ser Ser Arg Ala Ala Leu Gln Ala Gly Ile 50 55 60 Asp Lys Leu Ala Asp Ala Val Gly Leu Thr Leu Gly Pro Arg Gly Arg 65 70 75 80 Asn Val Val Leu Asp Glu Phe Gly Ser Pro Lys Val Val Asn Asp Gly 85 90 95 Val Thr Ile Ala 100 <210> 140 <211> 100 <212> PRT <213> Hordeum vulgare <400> 140 Met Ala Pro Thr Val Met Ala Ser Ser Ala Thr Ser Val Ala Pro Phe 1 5 10 15 Gln Gly Leu Lys Ser Thr Ala Gly Leu Pro Val Ser Arg Arg Ser Asn 20 25 30 Ala Ser Ser Ala Ser Val Ser Asn Gly Gly Arg Ile Arg Cys Met Gln 35 40 45 Val Trp Pro Ile Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Thr Leu Ser Tyr Leu 50 55 60 Pro Pro Leu Ser Thr Glu Ala Leu Leu Lys Gln Val Asp Tyr Leu Ile 65 70 75 80 Arg Ser Lys Trp Val Pro Cys Leu Glu Phe Ser Lys Val Gly Phe Ile 85 90 '95 Phe Arg Glu His 100 <210> 141 <211> 100 <212> PRT <213> Medicago truncatula <400> 141 Met Thr Thr Ile Phe Arg Leu Ala Ser Ser Ser Ser Pro Ser Leu Arg 1 5 10 15 His Asp Ala Thr Pro His Asn Phe His Ile Arg Lys Thr Ser Ile Ser 20 25 30 Asn Thr Phe Ser Phe Ser Ser Lys Asn Ser Leu Ser Phe Lys Arg Ile

35 40' 45

Leu Thr Ser Gly Gly Ser Arg Arg Phe Xle Val Ala Ala Ser Pro Pro

50 55 60

Thr Glu Asp Ala Val Val Ala Thr Glu Pro Leu Thr Lys Gln Asp Leu 65 70 75 80

Ile Asp Tyr Leu Ala Ser Gly Cys Lys Thr Lys Asp Lys Trp Arg Ile 85 90 95

Gly Thr Glu His 100

<210> 142 <211> 100 <212> PRT

<213> Spinacia oleracea <400> 142

Met Glu Thr Ser Met Ala Cys Cys Ser Arg Ser Ile Val Leu Pro Arg 1 5 10 15

Val Ser Pro Gln His Ser Ser Ala Leu Val Pro Ser Ser Ile Asn Leu

20 25 30

Lys Ser Leu Lys Ser Ser Ser Leu Phe Gly Glu Ser Leu Arg Met Thr

35 40 45

Thr Lys Ser Ser Val Arg Val Asn Lys Ala Lys Asn Ser Ser Leu Val

50 55 60

Thr Lys Cys Glu Leu Gly Asp Ser Leu Glu Glu Phe Leu Ala Lys Ala 65 70 75 80

Thr Thr Asp Lys Gly Leu Ile Arg Leu Met Met Cys Met Gly Glu Ala 85 90 95

Leu Arg Thr Ile 100

<210> 143

<211> 1236

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 143

ggtcagccaa tacattgatc cgttgccaat ccggaattga taattgtgtt ctgactaaat tatccgaaac ctggattaaa caatcctgtt ttgttttttt gacatgtttt cttgactgag ttttaacttt ttcatcacat cagaactttt acatcgttcc aatttcaatc aaactttcaa ttttattgct cctccgtacg ggttggctgg tagatattgg gaggaacttg gcatgaatgg tgaggaggta ccatgaggta ccaaaatttt ggtattatga ggtaccaaat ttacaataga taccgtaaaa ttgctcctat atttaagggg attttgataa gaaaaaatgt gagcacacca actcgtcaac tgtgaagaac ctcaaaaatg aactttaaag ttttgaacat cgatttcact tgatagttta gaactctaga atcattgtcg tccagctatg aaaaaaccct caccaaacac

catgcaaagt attttggctg tggccgagtg 60

taaatgacca gaagtcgcta tcttccaatg 120

ctgttctcta gcccctcctg catggccgga 180

gcctgtttgt tctaaacttt ttcttcaaac 240

ctacacatat aaacttttaa cttttccgtc 300

ttttggcgtg aactaaacac accctgagtc 360

ttgagaatag gtattttcag agagaaaatc 420

ccactatatt tagagcaatt ctacggtcct 480

agtgtaaatt ttagtatctc attataacta 540

aaaaatagta cttcatggta ctttcttaag 600

atgtttatat ctatccatat ccataatttg 660

agcatgtcca tgaccttgca ctcttggctc 720

ctcaatatag ctacaggtgc ctgaaaaaat 780

aaacaacaat tattatctcc ctctgaaaga 840

gcggagaaag taaattattt tccccaaatt SOO

catcaaacaa gagttcacca aaccgcccat 960 gcggccatgc tgtcacgcaa cgcaccgcat tgcctgatgg ccgctcgatg catgcatgct 1020

tccccgtgca catatccgac agacgcgccg tgtcagcgag ctcctcgacc gacctgtgta 1080

gcccatgcaa gcatccaccc ccgccacgta caccccctcc tcctccctac gtgtcaccgc 1140

tctctccacc tatatatgcc cacctggccc ctctcctccc atctccactt cacccgatcg 1200

cttcttcttc ttcttcgttg cattcatctt gctagc 1236

<210> 144

<211> 55

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> iiliciador: prm00735

<400> 144

ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctt cacaatggat actctctcag catcc 55

<210> 145

<211> 50

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> iniciador: prm00736

<400> 145

ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtt gtatcatcaa gaaacccaga 50

<210> 146

<211> 1592

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 146

caaaagcaag aggaggaggc cgcggctagc gagcgagcga gagagagggg agaagaagag 60

gtgggacagc cgggagatcc atccctgtgg agaggaggga gggaggaagg aggcgttgga 120

ggaggagagg ttgaccgata gatccattgc ggagttgagt gttgatgcaa agctgattcg 180

ccatcgttta gctttttata agagatgggt tcagtagggg ttgcgccgtc tgggttaaag 240

aacagcagta gcaccagcat gggtgctgag aagttgcctg atcagatgca tgatctgaag 300

ataagggacg ataaggaagt tgaagcgact attattaacg gcaagggaac agaaaccggc 360

cacataattg tcacaactac tggtggcaga aatggtcagc cgaaacagac agttagctac 420

atggctgagc gtattgtagg gcaaggttca tttgggattg tcttccaggc aaaatgtctg 4 80

gagacaggtg agacagttgc tatcaagaag gttcttcagg ataagcgcta caagaaccgt 540

gagcttcaga ccatgcgcct tcttgaccac ccaaatgttg tagctctgaa gcactgtttc 600

ttctctacaa ctgagaagga tgaactgtat ctaaacttgg ttcttgagta tgtgcctgaa 660

actgttcatc gtgttgtgaa gcattacaac aagatgaacc agcgtatgcc acttatctat 720

gtgaagctgt atatgtacca gatttgtagg gcattagctt acatccataa tagcatcgga 780

gtttgccaca gagatatcaa gccacagaat cttctggtaa acccacatac ccatcaactc 840

aagctatgtg actttgggag tgcaaaagtt ctggtcaagg gagaaccgaa catatcgtac 900

atttgctccc gatactatag ggctccggag ctcatatttg gtgccaccga atacactaca S60

gctattgaca tctggtctgc tggatgtgtt cttgctgaac ttatgttagg gcagcctctg 1020

tttcctggtg aaagtggtgt agaccaactt gtggaaatca tcaaggtcct tggaacacct 1080

acaagggagg aaattaaatg catgaatcca aactataccg agttcaagtt tccacagatt 1140

aaagcacacc catggcacaa ggtattccat aaaaggttgc ctccagaagc tgttgatctt 1200 gtctctaggc tgctccagta ctcacccaac ctaagatgca ctgctgtgga agcacttgtt 1260

cacccattct ttgatgagct tcgagaccct aatgctcgcc ttccgaatgg ccgctttttg 1320

cctcctctct tcaacttcaa gcctcatgaa ctgaaaggaa tcccatcaga tattatggcg 1380

aaattgatcc cagaacatgt gaagaagcaa tgctcctatg caggagtatg agacagcttc 1440

cgcacgaccc ccctggaaat ttccatgaca agtgcccatt tcctcccccc tggacgacga 1500

tggatcgtca gcatatgcgt gcatgatggt tggtgaggat gtgaagttac gttgttgttg 1560

tgtgaccacc tagagcttga acagaaggaa aa 1592

<210> 147

<211> 408

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 147

Met Gly Ser Val Gly Val Ala Pro Ser Gly Leu Lys Asn Ser Ser Ser 15 10 15

Thr Ser Met Gly Ala Glu Lys Leu Pro Asp Gln Met His Asp Leu Lys

20 25 30

Ile Arg Asp Asp Lys Glu Val Glu Ala Thr Ile Ile Asn Gly Lys Gly

35 40 45

Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Thr Gly Gly Arg Asn Gly

50 55 60

Gln Pro Lys Gln Thr Val Ser Tyr Met Ala Glu Arg Ile Val Gly Gln 65 70 75 80

Gly Ser Phe Gly Ile Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly Glu

85 90 95

Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr Lys Asn Arg

100 105 110

Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Ala Leu

115 120 125

Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr Leu Asn

130 135 140

Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Val Lys His 145 150 155 160

Tyr Asn Lys Met Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Val Lys Leu Tyr

165 170 175

Met Tyr Gln Ile Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Asn Ser Ile Gly

180 185 190

Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro His

195 200 205

Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu Val

210 215 220

Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg Ala 225 230 235 240

Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile Asp Ile

245 250 255

Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Met Leu Gly Gln Pro Leu

260 265 270

Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile Lys Val

275 280 285

Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn Pro Asn Tyr

290 295 300

Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His Lys Val 305 310 315 320 Phs His Lys Arg Leu 325 Pro Pro Glu Ala Val 330 Asp Leu Val Ser Arg 335 Leu Leu Gln Tyr Ser 340 Pro Asn Leu Arg Cys 34 5 Thr Ala Val Glu Ala 350 Leu Val His Pro Phe 355 Phe Asp Glu Leu Arg 360 Asp Pro Asn Ala Arg 365 Leu Pro Asn Gly Arg 370 Phe Leu Pro Pro Leu 375 Phe Asn Phe Lys Pro 380 His Glu Leu Lys Gly Ile Pro Ser Asp Ile Met Ala Lys Leu Ile Pro Glu His Val Lys

385 390 395 400

Lys Gln Cys Ser Tyr Ala Gly Val 405

<210> 148 <211> 1800 <212> DNA <213> Oryza sativa

<400> 148

ctctccgaat cctcccccgc attccgcgcc ggagctgagg agggacagcg agccagcgag 60

ggaggtgggg caatccagcg agcgccagat cgtgccgcca gccccgctcc gtcctctctc 120

cggcgaccct ccgccccgcc tgatcccgtg gtggatcaac tacaactcat ctttaggaaa 180

gcctcttgaa cattagcctt gtgtgccttt caacagtatg gcctcggtag gtgtggtgcg 240

ttcttccttg gggtttcaga acgaaacaag tacaagtggc gatgccgacc gacttccgaa 300

tgagatgagc aatatgagta taagggatga taataaggac attgacgaca tagttgtcaa 360

tggcaatggg acagaacctg gtcatgttat tgtgacaagc attgatggaa gaaatggaca 420

ggctaaacag accattagct acatggccga gcgtgtcgta ggtcatggat cctttggaac 480

tgttttccag gccaagtgcc tggaaaccgg tgagactgtg gctataaaga aggttcttca 540

agacaagaga tataagaacc gtgagctgca aacaatgcga gttcttgacc acccaaatgt 600

ggtgtcacta aagcattgtt ttttctcaaa gactgagaag gaggagcttt acctcaattt 660

ggtgcttgag tatgtgccag agactgctca ccgtgtaatt aaacattaca acaagatgaa 720

ccaacgcatg ccattgatat atgcaaaact atacatgtat cagatatgca gagctttggc 780

gtacattcac aacaccattg gcgtgtgtca cagggatatc aagccacaaa atcttctggt 840

gaacccacat actcatcagc tgaaattatg tgacttcggc agcgcgaaag tcttggtaaa 900

aggagaacca aatatttctt acatctgttc aaggtactac agagctccag agctcatatt 960

tggtgctact gaatacacaa cagcgattga tgtttggtct gccggttgtg tgcttgctga 1020

actcctcctg gggcagcctc tattccctgg cgacagtggc gttgatcagc ttgttgaaat 1080

catcaaggtt ctgggtaccc ctacacgaga ggagattaag tgcatgaacc caaattacac 1140

cgagtttaaa tttccgcaaa tcaaagctca cccatggcac aagatcttcc ataaaagaat 1200

gcctgctgaa gcagtcgatc tcgtctccag gcttttgcag tattcaccat. acctccggtc 1260

cactgcttcg gaagcattga tccatccctt cttcgatgaa ctccgtgatc caaacacccg 1320

cttaccgaac ggccgtttcc ttcctcctct cttcaacttc aagccccatg aactgaaggg 1380

tatgccaatg gaattcctgg tgaagcttat ccccgaacat gctcgaaagc aatgcgcgtt 1440

tgtaggatgg tgatttctga ggtcagcatg aaaactagtt cagaatttct tcaccgtcct 1500

ccattagaaa gcagagatga accctgtgtg cagccatttg ggaaagctgg tgcatatgga 1560

agtggaacta catttttttg tccgagattc tgacgccgcg tattcttttc ccccctccca 1620

ctttgctgct gccggtgtaa ccaaaaaatc atccacggtt ctgtaaagtt gatgaagaag 1680

agtgtaaaat caggttgaaa actgaattcg atcggtttgt caagattgta gcaacatgca 17 40

aggaaggatg ttgcacactt tgtatggcaa tgttcgttcg gtccaaatat ttggacatgg 1800

<210> 149 <211> 411 <212> PRT <213> Oryza sativa <400> 149 Met Ala Ser Val Gly Val Val Arg Ser Ser Leu Gly Phe Gln Asn Glu 1 5 10 15 Thr Ser Thr Ser Gly Asp Ala Asp Arg Leu Pro Asn Glu Met Ser Asn 20 25 30 Met Ser Ile Arg Asp Asp Asn Lys Asp Ile Asp Asp Ile Val Val Asn 35 40 45 Gly Asn Gly Thr Glu Pro Gly His Val Ile Val Thr Ser Ile Asp Gly 50 55 60 Arg Asn Gly Gln Ala Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val 65 70 75 80 Val Gly His Gly Ser Phe Gly Thr Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu 85 90 95 Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr 100 105 110 Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Val Leu Asp His Pro Asn Val 115 120 125 Val Ser Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Lys Thr Glu Lys Glu Glu Leu 130 135 140 Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Ala His Arg Val 145 150 155 160 Ile Lys His Tyr Asn Lys Met Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Ala 165 170 175 Lys Leu Tyr Met Tyr Gln Ile Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Asn 180 185 190 Thr Ile Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val 195 200 205 Asn Pro His Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys 210 215 220 Val Leu Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr 225 230 235 240 Tyr Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala 245 250 255 Ile Asp Val Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly 260 265 270 Gln Pro Leu Phe Pro Gly Asp Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile 275 280 285 Ile Lys Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn 290 295 300 Pro Asn Tyr Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp 305 310 315 320 His Lys Ile Phe His Lys Arg Met Pro Ala Glu Ala Val Asp Leu Val 325 330 335 Ser Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Tyr Leu Arg Ser Thr Ala Ser Glu 340 345 350 Ala Leu Ile His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Thr Arg 355 360 365 Leu Pro Asn Gly Arg Phe Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Pro His 370 375 380 Glu Leu Lys Gly Met Pro Met Glu Phe Leu Val Lys Leu Ile Pro Glu 385 390 395 400 His Ala Arg Lys Gln Cys Ala Phe Val Gly Trp 405 410 <210> 150 <211> 2261 <212> DNA <213> Oryza sativa

<400> 150

ttggggcgga gagacgggag agagaggaga ggagtcgaac tagggttagt gaggtgaagg 60

ggggcgattt tgctcatcgc cctccgccta gatcgaatcc gaatcccgcc tcctcctcct 120

cctcctcctc cccccgcgcc gatcttgccc cgctccctcg ccgcagctgc gggcttgccc 180

tagcccgccg catcgccgac gtactacgcc cgctcggctc caggctccag atccggcctc 240

cagggcgtgc ccgctgctgg acggcgctct cccgcgtccg tggctacctc ctcctccggg 300

tttgcgttgc cgtcgccgaa gcgatccgtt ggtggattgt gtgtagctct gtaacaaagg 360

atcttggtcc ataggagtga accagaaggt acaaaacttc ttggctatta tgacatcggt 420

gggtctagta gattcttcat caggtttccc ggaaacgagt actagtggag ccactgatcg 480

tctgacagat gatatcagcg agatgagcat aagagataag gaagttgaag ctgtagtggt 540

cagtggcaat agtatggaca taggtcacac tattgtgaca actgttggtg gaagaaatgg 600

gcagccaaag cagacaatta gttacatcgc agagcgtgct gttgggcgtg gttcatttgg 660

agttgtcttc caggctaagt gtctagaaac tggtgagaga gttgctgtaa agaaagttct 720

tcaagatgcg agatacaaga accgggagct gcaaacgatg caagttctcg atcacccaaa 780

tgttgcatgc ttgaagcatt acttttgctc gactactgcg aaggaggagc tatacctcaa 840

cttggttctt gaatatgtgc cagaaactgt tcatcgtgtt attagacatt acaataagat 900

gagccaacgc atgccattga tttatgttaa actttatatg taccagattt gtagggcttt 960

ggcatacatt cataactgtg tgggagtatg ccacagagat ataaagccac agaatatatt 1020

ggtgaatcca cataatcatc agttgaaatt gtgtgacttt ggcagtgcaa aagtcctggt 1080

gaaaggggaa ccaaatattt catatatctg ttctagatac tacagagccc cagcactcat 1140

atttggggct acagagtaca cgacagctat tgatgtgtgg tctgctggct gtgttcttgc 1200

tgaactactt ctagggcagc ctgtttttcc tggtgacagt ggcgtcgacc aacttgttga 1260

aattatcaag gtactgggta ctccaacaag ggaagaaatc aaacatatga atccgaacta 1320

cactgagttt aagttccccc aaatcaaagc tcacccatgg cacaagatct ttcataaaag 1380

aatgccatct gaagctgtag atcttgtgtc tcggcttctg cagtactcac cacacctccg 1440

gtgcagtgca ttggaggtgt taattcatcc attcttcgat gaactacgag atccaaatgc 1500

tcgcttacca aatggccgta ctcttccccc actattcaat ttcaagcctc gtgagctgaa 1560

aggagcatca atggaatttc ttgtgaagtt ggttccacag catgctaaga agcaatgtgc 1620

cttcttagga ttatgagcag acagttcata cactaatcgg gtattacgtt ggtctacttg 1680

gttccgtaga acagcatggc ctgcagtatt attgaatggg ccctaatttt gttctacgtg 1740

caccctgctt gggcatgcct tctaccatca tattctgtaa agcagatgaa gacatggagt 1800

gagtggttat tgattggggc ttgtatattg gtctgccctt gacttgagaa ctttattcac 1860

tctgctgtat caagcaagaa agaacacgta tgtatgcttg agccatattt cattccagag 1920

cctctatcag gtttcaccga ccatcagatt taagtcttcc agtttgtagg gctaagccaa 1980

aaaagttcta tgtgtgaaga gttggagaca tctgtttggt tacaagctat ttgattgtat 2040

ttgatcattc ttttgtatta acactctgat aaacttacat gagttaattc tattgttatg 2100

tgatatagtt gtgtgccact tttaaacacc taaacaactc tgttcaatgt tgaaatgttt 2160

ggcatgtatc aacatatcac ctcattattt cgaggttgat tttgtacacc tgatatctgt 2220

tagcttgaat gcttgattac aagcaaatga ttaaatatttt 2261

<210> 151 <211> 408 <212> PRT <213> Oryza sativa

<400> 151

Met Thr Ser Val Gly Leu Val Asp Ser Ser Ser Gly Phe Pro Glu Thr 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Ala Thr Asp Arg Leu Thr Asp Asp Ile Ser Glu Met

20 25 30

Ser Ile Arg Asp Lys Glu Val Glu Ala Val Val Val Ser Gly Asn Ser

35 40 45

Met Asp Ile Gly His Thr Ile Val Thr Thr Val Gly Gly Arg Asn Gly

50 55 60

Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Ile Ala Glu Arg Ala Val Gly Arg 65 70 75 80

Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly Glu

85 90 95

Arg Val Ala Val Lys Lys Val Leu Gln Asp Ala Arg Tyr Lys Asn Arg

100 105 110

Glu Leu Gln Thr Met Gln Val Leu Asp His Pro Asn Val Ala Cys Leu

115 120 125

Lys His Tyr Phe Cys Ser Thr Thr Ala Lys Glu Glu Leu Tyr Leu Asn

130 135 140

Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile Arg His 145 150 155 160

Tyr Asn Lys Met Ser Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Val Lys Leu Tyr

165 170 175

Met Tyr Gln Ile Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Asn Cys Val Gly

180 185 190

Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Ile Leu Val Asn Pro His

195 200 205

Asn His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu Val

210 215 220

Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg Ala 225 230 235 240

Pro Ala Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile Asp Val

245 250 255

Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly Gln Pro Val

260 265 270

Phe Pro Gly Asp Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile Lys Val

275 280 285

Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys His Met Asn Pro Asn Tyr

290 295 300

Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His Lys Ile 305 310 315 320

Phe His Lys Arg Met Pro Ser Glu Ala Val Asp Leu Val Ser Arg Leu

325 330 335

Leu Gln Tyr Ser Pro His Leu Arg Cys Ser Ala Leu Glu Val Leu Ile

340 345 350

His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Ala Arg Leu Pro Asn

355 360 365

Gly Arg Thr Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Pro Arg Glu Leu Lys

370 375 380

Gly Ala Ser Met Glu Phe Leu Val Lys Leu Val Pro Gln His Ala Lys 385 390 395 400

Lys Gln Cys Ala Phe Leu Gly Leu 405

<210> 152 <211> 1634 <212> DNA <213> Arabidopsis thaliana

<400> 152 acaaaataat gttagagaga aacccacaaa atcgatctga aaaatggcgt aaattgcctg gtggtagatg aatggccaac tttggtgttg gttttacaag cctaatgttg ctcaatcttg aaactgaatc gccttatctt ttgttggtaa ttggtaaaag cttatttttg ctagctgaac gtagagatta aactacacgg aaacgcatgc ctacgaagtg aacgcacgtc ctgaaaggtg tgtccttggc ataaattacc atgagtagag caagattttt

ataaagtaaa gagattcata tccttactcg gatttttacg cagtgggtat aagaaatgaa gaaatggaac caaaacagac tgttccaagc ataggaggta tgtctctgaa ttcttgagta agagaatgcc acattcaccg atccgcacac gagaaccaaa gagcaaccga tattgcttgg tcaaggtctt aattcaaatt ctccagaagc ccgctctcga tacctaatgg taccattgga tcggtttgtg tctctatgta aaaaaaagag tatc

aatatttcat atcatcaaac tacggatctc ttttcatcgg agctcctaat tgacatgaaa agagactgga aattagctac gaaatgtctt caagaaccgt acattgtttc cgttccagaa tcttatatac atgcattggt tcatcaagta catttcctac gtatacgaca acagcccttg gggaacgcct ccctcagatt tgttgatttg cacattagtc acgtttcctt gatggtagct atttcctctt tcaatatgtc ttattactat

aattcgtctc ccacaaatcc tctctcttta cttgaaagtt cctggagcaa attcgtgacg catatcattg atggctgagc gagacaggag gagcttcaaa ttctcaacca actgttcatc gtcaaacttt gtgtgtcatc aagctatgtg atctgctcga gccattgatg ttccctggtg actagagaag aaagctcatc gtctcaagac cacccattct ccaccgcttt aagttagtac aatgtagcat acaaactgat ggttggttgg

tcaccggaaa tttttttttt atatcctaat tgaagagttt gagactctac ataaagaaat tgactactat gtgttgttgg aaactgttgc ccatgaggct ctgaaaaaga gtgttatcaa acacttatca gtgacataaa attttggaag ggtattacag tctggtctgc agagcggtgt aaatcaagtg catggcacaa ttcttcaata ttgatgagtt tcaacttcaa ctgagcatgc gaacacaaca atgcaccctt ttcataatgt

aataaataaa tttttgttaa tcttctcttc tgtagcctga tggtgttgat ggaagcgaca tggtggtaga tcacggatct gataaagaaa acttgaccat tgagctttac acactacaac gatttttaga acctcaaaac tgcaaaagta agcacctgaa aggatgtgtt tgatcaactt catgaaccca gattttccac ctctcctaat aagagaccca gcctcacgag aaggaagcag aacacttctt tgtttgttgt aaaagcccac

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 SOO 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1634

<210> 153

<211> 405

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 153

Met Ala Ser Val Gly Ile Ala Pro Asn Pro Gly Ala Arg Asp Ser Thr 1 5 10 15 Gly Val Asp Lys 20 Leu Pro Glu Glu Met 25 Asn Asp Met Lys Ile 30 Arg Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala Thr Val Val Asp Gly Asn Gly Thr Glu Thr 35 40 45 Gly His 50 Ile Ile Val Thr Thr 55 Ile Gly Gly Arg Asn 60 Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val Val Gly His Gly Ser Phe 65 70 75 80 Gly Val Val Phe Gln 85 Ala Lys Cys Leu Glu 90 Thr Gly Glu Thr Val 95 Ala Ile Lys Lys Val 100 Leu Gln Asp Arg Arg 105 Tyr Lys Asn Arg Glu 110 Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Ser Leu Lys His Cys

115 120 125 Phe Phe 130 Glu Tyr 145

Leu Asn

Ile Phe

Arg Asp

Val Lys 210 Pro Asn 225

Ile Phe

Gly Cys

Glu Ser

Pro Thr 290 Lys Phe 305

Arg Met

Ser Pro

Phe Asp

Leu Pro 370 Leu Glu 385

Pro Trp

Ser Thr Thr

Val Pro Glu

Gln Arg Met 165

Arg Ala Leu 180 Ile Lys Pro 195

Leu Cys Asp

Ile Ser Tyr

Gly Ala Thr 245

Val Leu Ala 260 Gly Val Asp 275

Arg Glu Glu

Pro Gln Ile

Pro Pro Glu 325

Asn Leu Arg

340 Glu Leu Arg 355

Pro Leu Phe

Met Val Ala

Leu Gly Leu 405

Glu Lys Asp

135 Thr vai His 150

Pro Leu Ile

Ser Tyr Ile

Gln Asn Leu 200

Phe Gly Ser

215 Ile Cys Ser 230

Glu Tyr Thr

Glu Leu Leu

Gln Leu Val 280

Ile Lys Cys

295 Lys Ala His 310

Ala Val Asp

Ser Ala Ala

Asp Pro Asn 360

Asn Phe Lys

375 Lys Leu Val 390

Glu Leu

Arg Val

Tyr Val 170 His Arg 185

Leu Val

Ala Lys

Arg Tyr

Thr Ala 250 Leu Gly 265

Glu Ile

Met Asn

Pro Trp

Leu Val 330 Leu Asp 345

Ala Arg Pro His Pro Glu

Tyr Leu Asn

140 Ile Lys His 155

Lys Leu Tyr

Cys Ile Gly

Asn Pro His 205

Val Leu Val 220 Tyr Arg Ala 235

Ile Asp Val

Gln Pro Leu

Ile Lys Val 285

Pro Asn Tyr

300 His Lys Ile 315

Ser Arg Leu

Thr Leu Val

Leu Pro Asn 365

Glu Leu Lys

380 His Ala Arg 395

Leu Val Leu

Tyr Asn Lys 160

Thr Tyr Gln 175

Val Cys His 190

Thr His Gln

Lys Gly Glu

Pro Glu Leu 240

Trp Ser Ala

255 Phe Pro Gly 270

Leu Gly Thr

Thr Glu Phe

Phe His Lys 320

Leu Gln Tyr

335 His Pro Phe 350

Gly Arg Phe

Gly Val Pro

Lys Gln Cys 400

<210> 154

<211> 1669

<212> DNA

<213> Arabidop,

is thaliana

<400> 154

cagaccaaca acaaaaagga gataaagaga attttatgga tctactcata tcttgattct tttttctctg ggtttccccg atttgaagag aaattcttct gttttaatct tgggatggcc agagaatcta ctggaaacgt tactgatgct aaaattcaag atgataaaga aatggaagct ggccatataa tagtaactac tataggagga tacatggcgg agcgagttgt tggacatggc ttagaaacag gagaaactgt tgctataaag cgtgagcttc aaacaatgag gctacttgac ttcttctcta caaccgaaaa agatgagctt

agaggattca tcatcatcaa tcaatccttc 60

tccttctatc tctccctttt cttccatctc 120

cgtgacaaag gaagaatctt ttattaaaac 180

tcggtgggca tagagcctag tgccgcggtt 240

gatagattac ccgaggagat gaaggacatg 300

acgattgtta atggcaatgt gactgagact 360

agaaatggcc agccaaaaca gacaatcagt 420

tcctttggtg ttgtgtttca ggccaaatgt 480

aaagttctac aagatcggag gtacaagaat 540

catccaaatg ttgtgtcttt gaaacattgt 600

tatctcaact tggttctgga atacgttccg 660 gaaactgtgc accgcgtcat caaacactac aacaaactta accaacgaat gcctctcgtt 720

tacgtcaaac tttacactta tcagattttt aggtccttat cctacattca ccgatgtatc 780

ggcgtatgtc atcgagacat caaacctcaa aacttgttgg taaatccaca cactcatcaa 840

gtgaaactat gcgattttgg aagtgcgaaa gtattggtta aaggagagcc aaacatttca SOO

tacatttgct cgaggtatta cagagcacct gagctcattt ttggagccac cgagtatact 960

acagccattg atgtctggtc tgcaggatgt gttctcgccg agcttcttct cgggcagcca 1020

ttgttcccgg gtgagagcgg tgttgatcaa cttgtagaga ttataaaggt tttgggaaca 1080

ccaacaaggg aagaaatcaa atgcatgaac ccgaattaca cagagttcaa atttcctcag 1140

attaaagctc atccatggca taagattttc cacaagagaa tgcctccaga agctgttgat 1200

ttggtctcaa ggcttcttca atactctccc aatctccgtt gtgctgctct tgattcattg 1260

gtccacccat tctttgacga gctaagagat ccgaatgcgc gattacccaa cggacgtttc 1320

cttccaccgc tctttaactt taagcctcat gaacttaaag gtgtgcctgt ggagatggtg 1380

gcgaagttag ttccagaaca tgcgaggaag caatgtccgt ggctcagttt gtgatttgtt 14 40

ctcacctgca aacacgaaaa ctagagcaaa gcagtcgaga tattcatctc ttctcttctc 1500

tctccttctc tgtattaata ttattataat gatcatatct caatctgatg atttagtaac 1560

cctttgtttg ttgtatgagt agagaaagag tgaatcattt gtgggggtta tgatattgta 1620

taagccaaca aagattattt tttaaagaga gtttcgtgtt ttctgtctc 1669

<210> 155 <211> 409 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 155 Met Ala Ser Val Gly Ile Glu Pro Ser Ala Ala Val Arg Glu Ser Thr 1 5 10 15 Gly Asn Val Thr Asp Ala Asp Arg Leu Pro Glu Glu Met Lys Asp Met 20 25 30 Lys Ile Gln Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala Thr Ile Val Asn Gly Asn 35 40 45 Val Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Arg Asn 50 55 60 Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val Val Gly 65 70 75 80 HiS Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly 85 90 95 Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Arg Arg Tyr Lys Asn 100 105 110 Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Ser 115 120 125 Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr Leu 130 135 140 Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile Lys 145 150 155 160 His Tyr Asn Lys Leu Asn Gln Arg Met Pro Leu Val Tyr Val Lys Leu 165 170 175 Tyr Thr Tyr Gln Ile Phe Arg Ser Leu Ser Tyr Ile His Arg Cys Ile 180 185 190 Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro 195 200 205 His Thr His Gln Val Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu 210 215 220 Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg 225 230 235 240 Ala Pro Glu Leu Val Trp Leu Phe

Val Leu 290 Tyr Thr 305

Ile Phe

Leu Leu

Val His

Asn Gly 370 Lys Gly 385

Arg Lys

Ser Ala 260 Pro Gly 275

Gly Thr

Glu Phe

His Lys

Gln Tyr 340 Pro Phe 355

Arg Phe Val Pro Gln Cys

Ile Phe 245

Gly Cys

Glu Ser

Pro Thr

Lys Phe 310 Arg Met 325

Ser Pro

Phe Asp

Leu Pro

Val Glu 390 Pro Trp 405

Gly Ala

Val Leu

Gly Val 280 Arg Glu 295

Pro Gln

Pro Pro

Asn Leu

Glu Leu 360 Pro Leu 375

Met Val

Thr Glu 250 Ala Glu 265

Asp Gln

Glu Ile

Ile Lys

Glu Ala 330 Arg Cys 345

Arg Asp

Phe Asn Ala Lys Leu Ser Leu

Tyr Thr Thr

Leu Leu Leu

Leu Val Glu 285

Lys Cys Met 300

Ala His Pro 315

Val Asp Leu

Ala Ala Leu

Pro Asn Ala 365

Phe Lys Pro

380 Leu Val Pro 395

Ala Ile Asp

255 Gly Gln Pro 270

Ile Ile Lys

Asn Pro Asn

Trp His Lys 320

Val Ser Arg

335 Asp Ser Leu 350

Arg Leu Pro

His Glu Leu

Glu His Ala 400

<210> 156

<211> 1496

<212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 156

ctcagatcga tgaagagaag aattaggatt gagttttgta gcctgaaaaa tggcgtcagt ctctactggt gttgataaat tgcctgaaga agaaatggaa gcgacagtgg tagatggaaa tactattggt ggtagaaatg gccaaccaaa tgttggtcac ggatcttttg gtgttgtgtt tgttgcgata aagaaagttt tacaagatag gaggctactt gaccatccta atgttgtgtc aaaagatgag ctttacctca atcttgttct tatcaaacac tacaacaaac tgaatcagag ttatcagatt tttagagcct tatcttacat cataaaacct caaaacttgt tggtaaatcc tggaagtgca aaagtattgg taaaaggaga ttacagagca cctgaactta tttttggagc gtctgcagga tgtgttctag ctgaactatt cggtgttgat caacttgtac acattatcaa caagtgcatg aacccaaact acacggaatt gcacaagatt ttccacaaac gcatgcctcc tcaatactct cctaatctac gaagtgccgc tgagttaaga gacccaaacg cacgtctacc cttcaagcct cacgagctga aaggtgtacc gcatgcaagg aagcagtgtc cttggctcgg acaacaaaca cttcttataa attacctctc accctttgtt tgttgtatga gtagagaaaa taatgtaaaa gcccaccaag attttttatc

tttacgtttt catcggcttg aaagtttgaa 60

gggtatagct cctaatcctg gagcaagaga 120

aatgaatgac atgaaaattc gtgacgataa 180

tggaacagag actggacata tcattgtgac 240

acagacaatt agctacatgg ctgagcgtgt 300

ccaagcgaaa tgtcttgaga caggagaaac 360

gaggtacaag aaccgtgagc ttcaaaccat 420

tctgaaacat tgtttcttct caaccactga 480

tgagtacgtt ccagaaactg ttcatcgtgt 540

aatgcctctt atatacgtca aactttacac 600

tcaccgatgc attggtgtgt gtcatcgtga 660

gcacactcat caagtaaagc tatgtgattt 720

accaaacatt tcctacatct gctcgaggta 780

aaccgagtat acgacagcca ttgatgtctg 840

gcttggacag cccttgttcc ctggtgagag 900

ggtcttggga acgcctacta gagaagaaat 960

caaattccct cagattaaag ctcatccatg 1020

agaagctgtt gatttggtct caagacttct 1080

tctcgacaca ttagtccacc cattctttga 1140

taatggacgt ttccttccac cggcttttca 1200

attggagatg gtagctaagt tagtacctga 1260

tttgtgattt cctcttaatg tagcatgaac 1320

tatgtatcaa tatgtcacaa actgatatgc 1380

aaagagttat tactatggtt ggttggttca 1440

tagataaaga gtttgctaaa aaaaaa 1496 <210> 157 <211> 405 <212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana <400> 157 Met Ala Ser Val Gly Ile Ala Pro Asn Pro Gly Ala Arg Asp Ser Thr 1 5 10 15 Gly Val Asp Lys Leu Pro Glu Glu Met Asn Asp Met Lys Ile Arg Asp 20 25 30 Asp Lys Glu Met Glu Ala Thr Val Val Asp Gly Asn Gly Thr Glu Thr 35 40 45 Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Arg Asn Gly Gln Pro Lys 50 55 60 Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val Val Gly His Gly Ser Phe 65 70 75 80 Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly Glu Thr Val Ala 85 90 95 Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Arg Arg Tyr Lys Asn Arg Glu Leu Gln 100 105 110 Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Ser Leu Lys His Cys 115 120 125 Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr Leu Asn Leu Val Leu 130 135 140 Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile Lys His Tyr Asn Lys 145 150 155 160 Leu Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Val Lys Leu Tyr Thr Tyr Gln 165 170 175 Ile Phe Arg Ala Leu Ser Tyr Ile His Arg Cys Ile Gly Val Cys His 180 185 190 Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro His Thr His Gln 195 200 205 Val Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu Val Lys Gly Glu 210 215 220 Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg Ala Pro Glu Leu 225 230 235 240 Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile Asp Val Trp Ser Ala 245 250 255 Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly Gln Pro Leu Phe Pro Gly 260 265 270 Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val His Ile Ile Lys Val Leu Gly Thr 275 280 285 Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn Pro Asn Tyr Thr Glu Phe 290 295 300 Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp HiS Lys Ile Phe His Lys 305 310 315 320 Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu Val Ser Arg Leu Leu Gln Tyr 325 330 335 Ser Pro Asn Leu Arg Ser Ala Ala Leu Asp Thr Leu Val His Pro Phe 340 34 5 350 Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Ala Arg Leu Pro Asn Gly Arg Phe 355 360 365 Leu Pro Pro Ala Phe His Phe Lys Pro His Glu Leu Lys Gly Val Pro 370 375 380

Leu Glu Met Val Ala Lys Leu Val Pro Glu His Ala Arg Lys Gln Cys 385 390 395 400

Pro Trp Leu Gly Leu 405

<210> 158 <211> 1712 <212> DNA

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 158 attggggtcc aacacatcac gcttctctag attgacaaat tcttctatgg attaatgaga ggaactgaaa cagaccataa caggccaagt agatacaaga ctcaagcatt gaatacgttc atgcccatta catggtggag catacgcatc ccaaacatct acagaatata ctgggacagc gttcttggaa aaattcccgc gaagctgtag atggaggcga aatggtcgtg ttagagttgt ctctaaatct ataatatgct atctttcatg aatgattagt tactaaatta

gctctctctc gaagaagaga ttgctgcgta tgaattaaag ctacaaaaca tgaagataaa caggtcacat gttatatggc gtttagaaac atcgggagct gttttttctc ctgagactgt tatatgttaa taggagtctg aggtcaaact catacatctg caacaacaat ctctatttcc caccaacacg aaataaaggc accttgtctc tagttcaccc ccttgcctcc tgtccaagct cttcctctct tatcgtttct tatctttgtt gtaatgtatg taaaataaac

tctctctgcc gagatttgcc gacaagatgg atcttgaata aagcaatgct agatgataag tattgttaca agagcgcatc gggggaaact gcagacaatg aacgactgaa ctatcgcgtc actctatact ccacagagac atgcgatttt ctcccgttac tgacatatgg aggtgagagt ggaggaaatc tcatccttgg aagacttctc gttcttcgat tctcttcaac tatacctgac ctctatatat aagtaatgga gtttattgtc tgacggtctt ttctcgctcg

atcagaagaa attttcggca tggagtgaaa catatggctt tctatatgcg gaaatggaag actattggtg gttggacaag gttgcaatca cgtcttcttg aaagatgagc tcaaagcact tatcagattt ataaaaccac ggtagcgcaa tatcgagcac tctgcaggct ggagttgacc aaatgcatga cacaaaatat cagtattctc gagctacgtg tttaaacctc cacgcccgaa atgtgtgtgt gatagcttct ttatcacaac tgactcgccg tc

aaaaccaaac aggaagtgtt ttgcggcggt ctgtgggaac ctgaaaaatt cagctgtggt gtaaaaatgg gttcttttgg agaaagtttt atcaccctaa tctatctcaa atagtcgggc gcagagcttt agaatcttct aagttctggt ctgaacttat gtgttcttgc agctagttga atccaaacta tccataagcg caaacctcag atcccaatac aagagctaaa aacaatgttc gtgtgtatgt caggattatc ctttgtactt gtcgctacag

accgagacaa ttattctagg gacttttcag attaccagct acctgaaggg tgatgggaat tcagcctaaa aatcgttttt gcaagacaag tgttgtatcc tctggtcctt aaaccagagg ggcttatatt ggttaatcct taaaggcgag atttggagct tgaattgctt gataataaag cacagaattc tacacctcca atcaaccgct acgtcttcct aggagcaagt cttcctcgct acacatgcat attagctttc tattacatac ttatgttgga

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 S 60 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1712

<210> 159

<211> 410

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 159

Met Ala Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Ser Ser Met Ala Thr Lys Gln 15 10 15

Ser Asn Ala Ser Ile Cys Ala Glu Lys Leu Pro Glu Gly Ile Asn Glu

20 25 30

Met Lys Ile Lys Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala Ala Val Val Asp Gly 35 40 45 Asn Gly Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Lys

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115 120 125

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Leu Lys Gly Ala Ser Leu Glu Leu Leu Ser Lys Leu Ile Pro Asp His 385 390 395 400

Ala Arg Lys Gln Cys Ser Phe Leu Ala Leu 405 410

<210> 160 <211> 1230 <212> DMA

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 160

atggcctcgg tgggcataga gcctagtgcc gcggttagag aatctactgg aaacgttact gatgctgata gattacccga ggagatgaag gaagctacga ttgttaatgg caatgtgact ggaggaagaa atggccagcc aaaacagaca catggctcct ttggtgttgt gtttcaggcc ataaagaaag ttctacaaga tcggaggtac cttgaccatc caaatgttgt gtctttgaaa gagctttatc tcaacttggt tctggaatac cactacaaca aacttaacca acgaatgcct atttttaggt ccttatccta cattcaccgà cctcaaaact tgttggtaaa tccacacact gcgaaagtat tggttaaagg agagccaaac gcacctgagc tcatttttgg agccaccgag ggatgtgttc tcgccgagct tcttctcggg gatcaacttg tagagattat aaaggttttg atgaacccga attacacaga gttcaaattt attttccaca agagaatgcc tccagaagct tctcccaatc tccgttgtgc tgctcttgat agagatccga atgcgcgatt acccaacgga cctcatgaac ttaaaggtgt gcctgtggag aggaagcaat gtccgtggct cagtttatga

gacatgaaaa ttcaagatga taaagaaatg 120

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1230

<210> 161

<211> 409

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 161 Met Ala Ser Val Gly Ile Glu Pro Ser Ala Ala Val Arg Glu Ser Thr 1 5 10 15 Gly Asn Val Thr 20 Asp Ala Asp Arg Leu 25 Pro Glu Glu Met Lys 30 Asp Met Lys Ile Gln Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala Thr Ile Val Asn Gly Asn 35 40 45 Val Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Arg Asn 50 55 60 Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val Val Gly 65 70 75 80 His Gly Ser Phe Gly 85 Val Val Phe Gln Ala 90 Lys Cys Leu Glu Thr 95 Gly Glu Thr Val Ala 100 Ile Lys Lys Val Leu 105 Gln Asp Arg Arg Tyr 110 Lys Asn Arg Glu Leu 115 Gln Thr Met Arg Leu 120 Leu Asp His Pro Asn 125 Val Val Ser Leu Lys 130 His Cys Phe Phe Ser 135 Thr Thr Glu Lys Asp 140 Glu Leu Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile Lys 145 150 155 160 His Tyr Asn Lys Leu 165 Asn Gln Arg Met Pro 170 Leu Val Tyr Val Lys 175 Leu Tyr Thr Tyr Gln 180 Ile Phe Arg Ser Leu 185 Ser Tyr Ile His Arg 190 Cys Ile Gly Val Cys 195 His Arg Asp Ile Lys 200 Pro Gln Asn Leu Leu 205 Val Asn Pro His Thr His Gln Val Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu 210 215 220

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<210> 162

<211> 1967

<212> DNA

<213> Zea mays

<400> 162

ttgactgcag gcctcggcac ggtaggcaca gcagtattct actgtgcctg cgtcccgaca gaacggatac cgaaaggggt aggagagtga gaggaggtag aaggcgaaag aaggggaacc tggtggagga aggaggaggg caacaagagg tgttgaggga gttgatgcaa agctgagttg cagctggtgt tgccccttct gggtacaaga agttgcaaga tcacatgaac gagctaaaga taattaatgg gaaagggact gaaactgggc atggtcaacc aaaacagaca gtgagctaca ttgggatcgt cttccaggcc aagtgtttgg ttcttcaaga caagcgttac aagaaccgcg ctaatgttgt tgctttgaag cattgcttct tgaacttggt ccttgagtat gttccggaga agatgcacca acgcatgcca cttatttatg cattggctta cattcatggt actatcggtg ttctggtgaa cccacacacc caccagctta tggtcaaggg ggaaccaaac atatcataca tcatatttgg tgccactgag tataccacag ttgctgagct tatgctaggg cagcctttgt ttgaaatcat caaggtcctc ggtacgccaa attacacaga gtttaagttc ccacaaatca

aatcattttg gccgctgcgt cgcgttggga 60

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aaatatgtga ctttggtagt gcaaaagttc 1020

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ttccgggtga aagtggtgtg gaccaacttg 1200

caagggaaga aattaaatgc atgaacccaa 12 60

aagcacaccc atggcacaag gtattccaca 1320 aaggatgcc gccagaagct gttgatctgg tgagatgcac tgctatggag gcacttgttc atactcgcct tccaaatggt cgctttttgc ttaaaggagt cccatcagac attgttgcga gctcttatgt tggattgtga aatgaccgcg tgcatttccc ctgggatgtt ggatgatctt aggttacgta cttgtacgac aatgtgacct atgtaacggc accccccttc ctactaactg tgtaatttgt tatagagcag tatgaatgta cacttcgttt ttccatgttt ccttgtctcc attcctagct acctgttgcc taaaaaaaaa

tctctcggct actccagtac tccccaaatc 1380

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<210> 163

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<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 163 Met Ala Ser Ala Gly Val Ala Pro Ser Gly Tyr Lys Asn Ser Ser Ser 1 5 10 15 Thr Ser Ile Gly Ala Glu Lys Leu Gln Asp His Met Asn Glu Leu Lys 20 25 30 Ils Arg Asp Asp Lys Glu Val Glu Ala Thr Ile Ile Asn Gly Lys Gly 35 40 45 Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Thr Gly Gly Lys Asn Gly 50 55 60 Gln Pro Lys Gln Thr Val Ser Tyr Met Ala Glu Arg Ile Val Gly Gln 65 70 75 80 Gly Ser Phe Gly Ile Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly Glu 85 90 95 Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr Lys Asn Arg 100 105 110 Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Ala Leu 115 120 125 Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr Leu Asn 130 135 140 Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Val Lys His 145 150 155 160 HiS Asn Lys Met His Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Val Lys Leu Tyr 165 170 175 Met Tyr Gln Ile Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Gly Thr Ile Gly 180 185 190 Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro His 195 200 205 Thr His Gln Leu Lys Ile Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu Val 210 215 220 Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile Asp Ile 245 250 255 Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Met Leu Gly Gln Pro Leu 260 265 270 Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile Lys Val

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Gly Arg Phe Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Pro His Glu Leu Lys

370 375 380

Gly Val Pro Ser Asp Ile Val Ala Lys Leu Val Pro Glu His Ala Lys 385 390 395 400

Lys Gln Cys Ser Tyr Val Gly Leu 405

<210> 164 <211> 1752 <212> DNA <213> Zea mays

<400> 164

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ctcctggtta atcctcatac ccatcagcta aaattgtgtg actttggcag cgcgaaagtt 840

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gttgaaatca tcaaggttct gggcacaccc acacgtgaag aaattaagtg catgaatcca 1080

aattataccg agtttaaatt cccgcaaatc aaagctcacc catggcataa gatattccat 1140

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cttcggtcga ctgctttgga agcattggtc catccgttct ttgatgaact tcgggatcca 1260

aacacccgct taccgaatgg tcgttttctt ccgcctctct tcaattttaa gccccatgag 1320

ctgaagaacg tgccggcgga tttcatggtg aaattggtcc ctgagcatgc acggaagcaa 1380

tgtgccttcg tagggtggtg atctctggat aagaggatga cgactcgatg attagctgag 1440

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ctgcatgccc cctgggtaca tgtatcggtt tgagcagaat tctgtttgcc tgaatcgtgc 1680

catcaccacg cagggatcca tcccttgtgt gacgatgttc agcccaaaaa aaaaaaaaaa 17 40

aaaaaaaaaa aa 1752 <210> 165

<21l> 410

<212> PRT

<213> Zea mays

<400> 165

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Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Ala His Arg Val Ile 145 150 155 160

Lys His Tyr Asn Lys Met Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Ala Lys

165 170 175

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180 185 190

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195 200 205

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210 215 220

Leu Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr 225 230 235 240

Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile

245 250 255

Asp Val Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly Gln

260 265 270

Pro Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile

275 280 285

Lys Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn Pro

290 295 300

Asn Tyr Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His 305 310 315 320

Lys Ile Phe His Lys Arg Met Pro Ala Glu Ala Val Asp Leu Val Ser

325 330 335

Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Lys Leu Arg Ser Thr Ala Leu Glu Ala

340 345 350

Leu Val His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Thr Arg Leu

355 360 365

Pro Asn Gly Arg Phe Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Pro His Glu 370 375 380 Leu Lys Asn Val Pro Ala Asp Phe Met Val Lys Leu Val Pro Glu His 385 390 395 400

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<210> 166

<211> 1800

<212> DNA

<213> Medicago sativa

<400> 166

tttttttttt tttttttttt tcaaaatatt ttccatttgt ctcttctttc ttctttccta 60

attccgaatc ccacggattt cacttccatt caaagtcata gctagatcca atccattcca 120

ttcctctgtt tgagttgaag agttgatttg ggggttggat gttcagtttt gaagctgtgt 180

atgatctgaa aggaaataat taagtaaagt gttttgcact ttttttaaga agatatgatg 240

gcatcaggtg gtgttgcacc tgcttctgga tttatagata agaatgcaag ttcagttggt 300

gttgaaaagt tgcctgagga gatgaatgac atgaaaatta gggatgataa ggaaatggaa 360

gccgctacca ttgtagatgg aaatgggacc gaaaccggac atataattgt cacaaccatt 420

ggtggtaaaa atggccagcc aaagcagaca ataagttaca tggccgagcg tgttgttgga 480

catggatctt ttggtgtagt ttttcaggca aagtgtttgg agactggaga aactgtggct 540

ataaagaagg ttcttcaaga taagaggtac aagaaccggg aattgcaaac tatgcgcctt 600

ctggaccacc ctaatgttgt atctttgaag cactgcttct tctcaacgac tgaaaaggac 660

gagctttatc ttaacctggt gcttgaatat gttcctgaga ctgtcagccg tgtgattaga 720

cactacaaca aaatgaatca aagaatgcct atgatatatg tcaaacttta ttcttaccag 780

atttgcaggg cacttgctta tattcacaac agtattggag tatgtcacag ggatattaaa 840

cctcaaaatt tactggtcaa tcctcacacc caccaactga agatatgcga ctttggaagt 900

gctaaagtct tggtaaaagg tgaaccaaac atatcttaca tctgttctag gtactataga 960

gctcctgagc ttatattcgg tgcaactgag tacaccacag ccattgacat ctggtcagct 1020

ggttgcgtac ttggtgaact tttgcttggc cagccactgt ttcctggtga gagtggagta 1080

gaccaacttg tggaaattat caaggtttta ggcaccccaa caagggaaga aatcaagtgc 1140

atgaatccta attatacaga gtttaaattt cctcaaatca aagctcatcc atggcataag 1200

atttttcaca agagaatgcc tcctgaagct gtggatcttg tctcaagact attgcaatac 1260

tctccaaatc ttcgaagcac agctttggag gctttggttc atccattcta tgatgacgtg 1320

cgcgatccaa acactcggtt gccaaatggg cgtttccttc caccattatt taacttcaaa 1380

gtcaatgagc tcaagggagt acctgcagag atgctggtga aactggttcc acctcatgca 1440

agaaagcaat gtgccttgtt cgggtcatca tgaagcagcc ttgtgtagtt attaagtact 1500

ttcttctacc tatgtaaagg tgtatctagt caaatttcaa gtggttaaat aggttatttc 1560

tattttcttt ctgtttgatt tgttctcacc caacctacca tccaatttat tattattttt 1620

cttcctcgat gtagaagaaa gctgtgctgt ttaagaagca acttcagctt gattattact 1680

ttgtaggatc tgatgtgttc actcacctta acatgaacca ttgtttattg aagtgataga 1740

cttgatcaca acctcactga actagtagga gatgtttcaa atcttgaaaa aaaaaaaaaa 1800

<210> 167 <211> 412 <212> PRT

<213> Medicago sativa <400> 167

Met Met Ala Ser Gly Gly Val Ala Pro Ala Ser Gly Phe Ile Asp Lys 1 5 10 15

Asn Ala Ser Ser Val Gly Val Glu Lys Leu Pro Glu Glu Met Asn Asp

20 25 30

Met Lys Ile Arg Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala Ala Thr Ile Val Asp 35 40 45 Gly Asn Gly Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly

50 55 60

Lys Asn Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val 65 70 75 80

Val Gly His Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu

85 90 95

Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr

100 105 110

Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val

115 120 125

Val Ser Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu

130 135 140

Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val Ser Arg Val 145 150 155 160

Ile Arg His Tyr Asn Lys Met Asn Gln Arg Met Pro Met Ile Tyr. Val

165 170 175

Lys Leu Tyr Ser Tyr Gln Ile Cys Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Asn

180 185 190

Ser Ile Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val

195 200 205

Asn Pro His Thr His Gln Leu Lys Ile Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys

210 215 220

Val Leu Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr 225 230 235 240

Tyr Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala

245 250 255

Ile Asp Ile Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Gly Glu Leu Leu Leu Gly

260 265 270

Gln Pro Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile

275 280 285

Ile Lys Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn

290 295 300

Pro Asn Tyr Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp 305 310 315 320

His Lys Ile Phe His Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu Val

325 330 335

Ser Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Ser Thr Ala Leu Glu

340 345 350

Ala Leu Val His Pro Phe Tyr Asp Asp Val Arg Asp Pro Asn Thr Arg

355 360 365

Leu Pro Asn Gly Arg Phe Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Val Asn

370 375 380

Glu Leu Lys Gly Val Pro Ala Glu Met Leu Val Lys Leu Val Pro Pro 385 390 395 400

His Ala Arg Lys Gln Cys Ala Leu Phe Gly Ser Ser 405 410

<210> 168 <211> 1613 <212> DNA

<213> Medicago sativa

<400> 168

gagcacatgc tttggtttcg tttcgttggt ggatgagtgg ttaaaattga aagggtttca gtggcaatgg cgtcggttgg tgttgcacca acttcaggtt ttagagaagt ccttggtgat 120

ggtgaaattg gtgttgatga tatattgcca gaggaaatga gtgatatgaa aattagggat 180

gatagagaaa tggaagccac cgttgttgac ggcaatggaa cggagacagg acatatcatt 240

gtcactacta ttggtggtag aaatggtcag ccaaagcaga ctataagcta tatggcagag 300

cgtgttgtag gacatggatc atttggagtt gtcttccagg ctaagtgctt ggaaactggt 360

gaaaccgtgg ctatcaaaaa ggttcttcaa gacaagaggt acaagaaccg ggaattgcaa 420

acaatgcgac tgcttgatca cccgaatgtc gtctctttaa agcattgttt cttttcaacc 480

accgaaaagg atgaactata cctgaatttg gtacttgagt atgttcctga aacagttcat 540

cgcgtgatta agcattacag caagttgaac caaaggatgc caatgattta tgtgaagctc 600

tatacatacc agatctttag agcattatct tatattcatc gttgcattgg agtctgtcat 660

cgggatatca agccccaaaa tctattggtc aatccacaca cccaccaggt taaattatgc 720

gactttggaa gtgcgaaagt cttggttaaa ggcgaaccaa atatatcgta tatatgttct 780

agatactaca gagcacccga gcttattttt ggagcaactg aatatactac tgctattgat 840

gtatggtctg ttggttgtgt tttggctgag ctgctgcttg gacagccatt gttcccaggt SOO

gagagaggag ttgatcagct tgttgagatc atcaaggttc tgggaactcc gacaagagaa S60

gaaattaaat gcatgaatcc taattatacc gaatttaaat tccctcaaat caaagcacat 1020

ccatggcaca agatcttcca taagcgcatg cctgcagaag,ctgttgattt ggtatcaaga 1080

ttattacaat actccccaaa cctgcggtgc caagctttag attgcttgac ccatcctttc 1140

ttcgatgagc ttcgtgaccc aaatgctcgc ttgccaactg gccgtttcct cccaccactg 1200

tttaacttca aacctcacga actgaaagga gttccagtcg agaccttgat gaaactggtt 12 60

ccagagcatg cgaggaagca atgcccgttt cttggcttgt aatatgtcgt aaaatgtaac 1320

aaaactgcaa gtgttgtttc catatgaacg ttctatttga tgatatgata tttattagta 1380

tctttgttgt attcggttgc ctgtgataga aaatttagag atatatgcta cccaatatta 1440

cccaaaccct tatatgggta ttcagaatac ccttttcctg tatcacagca gattgtaaca 1500

tgcaatagaa gacaagtgtc tacaattatc taaatgttgt atcagtattt gtacttgtat 1560

ttgtatttgt ggagataatg acggattatt gcgtaaaaaa aaaaaaaaaa aaa 1613

<210> 169 <211> 411 <212> PRT

<213> 1 Medicago sativa <400> 169 Met Ala Ser Val Gly Val Ala Pro Thr Ser Gly Phe Arg Glu Val Leu 1 5 10 15 Gly Asp Gly Glu Ile Gly Val Asp Asp Ile Leu Pro Glu Glu Met Ser 20 25 30 Asp Met Lys Ile Arg Asp Asp Arg Glu Met Glu Ala Thr Val Val Asp 35 40 45 Gly Asn Gly Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly 50 55 60 Arg Asn Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val 65 70 75 80 Val Gly His Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu 85 90 95 Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr 100 105 110 Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val 115 120 125 Val Ser Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu 130 135 140 Tyr Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val 145 150 155 160 Ile Lys His Tyr Ser Lys Leu Asn Gln Arg Met Pro Met Ile Tyr Val 165 Lys Leu Tyr Thr Tyr Gln Ile Phe 180 Cys Ile Gly Val Cys His Arg Asp 195 200 Asn Pro His Thr His Gln Val Lys 210 215 Val Leu Val Lys Gly Glu Pro Asn 225 230 Tyr Arg Ala Pro Glu Leu Ile Phe 245 Ile Asp Val Trp Ser Val Gly Cys 260 Gln Pro Leu Phe Pro Gly Glu Arg 275 280 Ile Lys Val Leu Gly Thr Pro Thr 290 295 Pro Asn Tyr Thr Glu Phe Lys Phe 305 310 His Lys Ile Phe His Lys Arg Met 325 Ser Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro 340 Cys Leu Thr His Pro Phe Phe Asp 355 360 Leu Pro Thr Gly Arg Phe Leu Pro 370 375 Glu Leu Lys Gly Val Pro Val Glu 385 390 His Ala Arg Lys Gln Cys Pro Phe 405 <210> 170

<211> 1543 <212> DNA

<213> Medicago sativa <400> 170

gttcaattga agctgcaaaa aaaaaaaaaa acagcgggtg tagcacctgc ttctggaata gttgataagt tacctgatga gattcttggc gcacatgtgg tagatggaaa tagtactgaa ggtaaaaatg gccagccaaa gcagacaata ggatcatttg gtgtagtttt ccaggctaag aaaaaggttc ttcaagacaa gaggtataag gaccacccca atgttgtaac tttgaagcat ctctatctta acttggtact tgagtttgtt tacagcaaaa tgaatcagag gatgccattg tgtagatcac tagcttatat tcataactgt caaaatttac tggtcaatcc tcacacccat aaagtcttgg tcaagggtga accaaacata cctgagctta tatttggtgc aactgaatac tgtgtgcttg gcgaactatt gcttggccag cagctcgttg aaattatcaa ggttttaggt

170 175 Arg Ala Leu Ser Tyr Ile His Arg 185 190 Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val 205 Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys 220 Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr 235 240 Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala 250 255 Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly 265 270 Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile 285 Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn 300 Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp 315 320 Pro Ala Glu Ala Val Asp Leu Val 330 335 Asn Leu Arg Cys Gln Ala Leu Asp 34 5 350 Glu Leu Arg Asp Pro Asn Ala Arg 365 Pro Leu Phe Asn Phe Lys Pro His 380 Thr Leu Met Lys Leu Val Pro Glu 395 400

Leu Gly Leu 410

tcttgatcta ctttggttgt gataatggca 60

gtagatgtaa atgcaagttc agctattgct 120

atgagaatta aggatgataa ggaaatggaa 180

gcaggacatg taattgtcac taccattggt 240

agctacatgg ctgagcgtgc tgttggacag 300

tgcttggaga caggtgaaac tgtggctata 360

aaccgggaat tgcaaacaat gcgccttctg 420

tgtttctttt caacaactga aaaagacgag 4 80

cctgagactg tccatcgtgt gatcagacac 540

atatacgtaa aactttattc ttaccagata 600

gttggagtgt ctcataggga cataaaacct 660

cagctgaagc tgtgtgactt tgggagtgca 720

tcttacatct gttcgaggta ttatagagct 7 80

acctcagcca ttgacatttg gtcagctggc 840

cctctctttc ccggtgcgag tggagtagac SOO

accccaacaa gggaagaaat aaagtgtatg 960 aatcctaatt acactgagtt caaattccca caaatcaaag ctcatccatg gcacaagatc 1020

tttcgcaagc gtatgccacc ggaagctgtg gatctcgtct caagactact tcaatactct 1080

ccaaatcttc gaagcacagc tttggaggct ctggttcatc ccttctttga tgaattgcgt 1140

gatccaaata cccgcttacc aaatgggcga catcttcctc ctttatttaa cttcaaagcc 1200

aacgagctta agggagtgcc tgctgaaatg ctggtgaagt tggttccgtc tcacgcaaga 1260

aagcagtgtt ctttgtttgc gtcgtcatag acttagaatg ctgtcttgtg taaatattat 1320

ggactccctg tttgtagaat tgtatgtagc ctgtttcatg ttgttaatag tctctctttt 1380

gttatttgtt ccattaattt gtttctacca aagaaaacca cctcagttta ttataagttt 1440

caagttgatc tctcttcacg atttaattgt tctcctgatc ttcaattatt aacagattgt 1500

attaactatt aactattaac tagaacaatt gtttattcta gcg 1543

<210> 171 <211> 411 <212> PRT

<213> Medicago sativa

<400> 171 Met Ala Thr Ala Gly Val Ala Pro Ala Ser Gly Ile Val Asp Val Asn 1 5 10 15 Ala Ser Ser Ala Ile Ala Val Asp Lys Leu Pro Asp Glu Ile Leu Gly 20 25 30 Met Arg Ile Lys Asp Asp Lys Glu Met Glu Ala His Val Val Asp Gly 35 40 45 Asn Ser Thr Glu Ala Gly His Val Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Lys 50 55 60 Asn Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Ala Val 65 70 75 80 Gly GLn Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr 85 90 95 Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr Lys 100 105 110 Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val 115 120 125 Thr Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr 130 135 140 Leu Asn Leu Val Leu Glu Phe Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile 145 150 155 160 Arg His Tyr Ser Lys Met Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Tyr Val Lys 165 170 175 Leu Tyr Ser Tyr Gln Ile Cys Arg Ser Leu Ala Tyr Ile His Asn Cys 180 185 190 Val Gly Val Ser His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn 195 200 205 Pro His Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val 210 215 220 Leu Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr 225 230 235 240 Arg Ala Pro Glu Leu He Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Ser Ala Ile 245 250 255 Asp Ile Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Gly Glu Leu Leu Leu Gly Gln 260 265 270 Pro Leu Phe Pro Gly Ala Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile 275 280 285 Lys Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn Pro Asn Tyr Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His 305 310 315 320

Lys Ile Phe Arg Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu Val Ser

325 330 335

Arg Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Ser Thr Ala Leu Glu Ala

340 345 350

Leu Val His Pro Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Thr Arg Leu

355 360 365

Pro Asn Gly Arg His Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Ala Asn Glu

370 375 380

Leu Lys Gly Val Pro Ala Glu Met Leu Val Lys Leu Val Pro Ser His 385 390 395 400

Ala Arg Lys Gln Cys Ser Leu Phe Ala Ser Ser 405 410

<210> 172 <211> 1724 <212> DNA

<213> Nicotiana tabacum <400> 172

tctctctcat cttccctgcg attctctctc tcaatttcag gttttctctg tttctgtgcg 60 agcctctaat gatcggtgta ttctcaatat cctgaagatt ttctgatttc atcggtgaat 120 gactttttga ggtgataata gttcgcaaaa tttcaggaaa tgacttcagt aggcttagca 180 cctgtatccg gtttgagaga atccagtagc catagtgttg gtgtagatag gctgcctgag 240 gagatgaatg acatgagaat cagggatgat aaggaaatcg aagcagctat tgtggatggt 300 aatgggactg agacaggcca tataatagtg acaactattg gtggtagaca tggtcagcca 360 aaacagacta tcagttatat ggctgaacgt attgttggac aaggatcatt tggagtggtt 420 ttccaggcaa aatgcttaga gactggtgaa actgttgcta ttaaaaaggt tcttcaagac 4 80 aagagatata agaacaggga gctgcagacc atgcgtcttc ttgatcaccc aaatgttgtg 540 tgcctgaagc actgcttctt ttcaacaact gagaaggatg aagtatatct taatttggtt 600 cttgaatacg tccctgaaac tgtccatcgt gttattaaac actacaataa gttgaatcaa 660 aggatgccat tgatactagt gaagctttat acatatcaga ttttcagggc attgtcttac 720 atccatcaca caattggagt gtgccacagg gacataaagc ctcagaatct tttggtgaat 7 80 ccacatactc accaggttaa attgtgtgac tttggaagtg ctaaagttct ggttaaagga 840 gaaccaaata tttcttacat ctgctctagg tattatagag cgcctgaact tatatttgga 900 gcaacagagt acactaccgc tattgacatc tggtctgctg gctgtgttct agccgagcta 960 cttcttgggc agcctttgtt tccgggtgaa agtggagttg atcagcttgt tgagattatt 1020 aaggtcttgg gtactcctac cagggaagaa attaaatgca tgaatccaaa ttataacgag 1080 ttcaaattcc cccaaattaa agctcatccg tggcacaaga tatttcacaa gcgcatgcct 1140 ccagaagctg ttgatctggt ttcaagacta ctgcagtact cacctaactt gcgttgcact 12 00 gctttagagg cagtgaccca tgccttcttc gatgagcttc gtgatcctaa tacacgcctc 1260 ccaaatggcc gcgtccttcc ccccttgttt aactttaagg cccatgagtt aaagggtgtg 1320 tctgcagaga atctattgaa gttggttccg gagcatgcca ggaaacagtg cccgtccctt 1380 ggtttatgag ttcccactgt acggtagata taatttaagt gtaagctatg ttatttctct 1440 gtatccattt ttcccccttt gctccccaca tgtaccagtt gtctctttgt attattatcc 1500 tagtttgtaa aagcagaggt aggatgtggt ctttaacatt ccttacctcc aacactttcc 1560 tttcaccctg ttccttttat gtcctactgt tgtaactttt atgtggttaa gggtggactg 1620 ctttctatat gaactattat tttatgatga aatttcaaag tgatttttag tgaaaaaaaa 1680 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa 1724

<210> 173 <211> 409 <212> PRT

<213> Nicotiana tabacum

<400> L73 Met Thr Ser Val Gly Leu Ala Pro Val Ser Gly Leu Arg Glu Ser Ser 1 5 10 15 Ser His Ser Val Gly Val Asp Arg Leu Pro Glu Glu Met Asn Asp Met 20 25 30 Arg Ile Arg Asp Asp Lys Glu Ile Glu Ala Ala Ile Val Asp Gly Asn 35 40 45 Gly Thr Glu Thr Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Arg His 50 55 60 Gly Gln Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Ile Val Gly 65 70 75 80 Gln Gly Ser Phe Gly Val Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr Gly 85 90 95 Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr Lys Asn 100 105 110 Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val Cys 115 120 125 Leu Lys His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Val Tyr Leu 130 135 140 Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val His Arg Val Ile Lys 145 150 155 160 His Tyr Asn Lys Leu Asn Gln Arg Met Pro Leu Ile Leu Val Lys Leu 165 170 175 Tyr Thr Tyr Gln Ile Phe Arg Ala Leu Ser Tyr Ile His His Thr Ile 180 185 190 Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro 195 200 205 His Thr His Gln Val Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu 210 215 220 Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg 225 230 235 240 Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Thr Ala Ile Asp 245 250 255 Ile Trp Ser Ala Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly Gln Pro 260 265 270 Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile Lys 275 280 285 Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Cys Met Asn Pro Asn 290 295 300 Tyr Asn Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His Lys 305 310 315 320 Ile Phe His Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu Val Ser Arg 325 330 335 Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Cys Thr Ala Leu Glu Ala Val 340 345 350 Thr His Ala Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Asn Thr Arg Leu Pro 355 360 365 Asn Gly Arg Val Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Lys Ala His Glu Leu 370 375 380 Lys Gly Val Ser Ala Glu Asn Leu Leu Lys Leu Val Pro Glu His Ala 385 390 395 400 Arg Lys Gln Cys Pro Ser Leu Gly Leu 405

<210> 174 <211> 1573 <212> DNA

<213> Triticum aestivum

<400> 174 gttggtgtgg gaccgacttc atagtagtca agaaatgggc tcatttggaa aaggttcttc cacccaaatg tacctcaacc aacaagatga agatctttgg aatcttctgg gtgttggtaa gagctcatat gttcttgctg cttgttgaaa ccaaattata cataaaagaa agcctgcgtt ccaaacaccc gagttgaagg aactgtgcct aatccagttg tataggcgat attctttccc tgtttcgacc cgccaatatt aaaaaaaaaa

tgcgtccttc cgaacgagat acggcaatgg aagcaaaaca ctgttttcca aagacaagag ttgtggcttt tggtgcttga accaacgcat catacattca tgaatccaca aaggagaacc ttggtgctac aactccttct tcatcaaggt cggagtttaa tgcctgctga caactgcttt gtttgccgaa gtgtgccgat ttgtaggatg ttgtctacta gacacatgtg cctactgccg gttttcccct tggtccagta aaa

ctcgcgcttt gggcaatatg gacggaacca gaccattagc ggctaagtgt atataagaac aaagcattgt gtatgtgccg gccattgata caacagcatt tacgcaccaa aaatatttcc tgaatacaca aggacagcct tttaggtacc attcccacaa agcagtagat ggaagcatta cggccgtttt ggacatcctg gtgatccgcc gaaaccccag attattattc atgtaacaaa gagctcatgt tttgttcatg

cagaacgaca agcataaggg ggccatatta tacatggctg cttgaaactg cgtgagctgc tttttctcaa gagactgctc tatgcaaaac ggagtatgcc ttgaaattat tatatctgtt acggcaattg atattccctg cctacaagag atcaaagctc cttgtctcca attcatccat cttcctcccc gtgaagctca agacggctgc gagtttgaga cttttctcgt ccacccatga gctatgcaat gatcgaggcc

cgagtactag atgacaggga tagtcacaag agcgtgtggt gcgagacggt aaacgatgcg agactgagaa atcgtgtcat tgtacatgta acagagacat gtgacttcgg caaggtacta acgtttggtc gcgacagtgg aagaaattaa acccatggca gactcttgca tcttcgatga tctttaactt tccctgaaca ttgaagttta ttgtctgcag ccgagacctc tactgtaagt gaaggatgca cccaaaaaaa

tggtgatgcc ccctgaggat cattgaggga tggtaatggg ggctataaag agttcttgac agaggagctt taagcattat tcagatatgt caagcctcaa aagtgcgaaa tagagcccca tgctggctgt tgttgatcag gtgcatgaat caagatcttc atattcacca actccgggac taagccccat tgctcggaag gttcagaaca ccacacggga gatgccatgt agatgagaag ccctatgtac aaaaaaaaaa

60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1573

<210> 175

<211> 381

<212> PRT

<213> Triticum aestivum

<400> 175

Met Gly Asn Met Ser Ile Arg Asp Asp Arg Asp Pro Glu Asp Ile Val 15 10 15

Val Asn Gly Asn Gly Thr Glu Pro Gly His Ile Ile Val Thr Ser Ile

20 25 30

Glu Gly Arg Asn Gly Gln Ala Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu

35 40 45

Arg Val Val Gly Asn Gly Ser Phe Gly Thr Val Phe Gln Ala Lys Cys

50 55 60

Leu Glu Thr Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys 65 70 75 80

Arg Tyr Lys Asn Arg Glu Leu Gln Thr Met Arg Val Leu Asp His Pro Asn Val

Glu Leu

Arg Val 130 Tyr Ala 145

His Asn

Leu Val

Ala Lys

Arg Tyr 210 Thr Ala 225

Leu GLy

Glu Ile

Met Asn

Pro Trp 290 Leu Val 305

Leu Glu

Thr Arg

Pro His

Pro Glu 370

85

Val Ala Leu 100 Tyr Leu Asn 115

Ile Lys His

Lys Leu Tyr

Ser Ile Gly 165

Asn Pro His 180

Val Leu Val 195

Tyr Arg Ala

Ile Asp Val

Gln Pro Ile 245

Ile Lys Val 260 Pro Asn Tyr 275

His Lys Ile

Ser Arg Leu

Ala Leu Ile 325

Leu Pro Asn

340 Glu Leu Lys 355

His Ala Arg

Lys His

Leu Val

Tyr Asn 135 Met Tyr 150

Val Cys

Thr His

Lys Gly

Pro Glu 215 Trp Ser 230

Phe Pro

Leu Gly

Thr Glu

Phe His 295 Leu Gln 310

His Pro

Gly Arg

Gly Val

Lys Asn 375

Cys Phe 105 Leu Glu 120

Lys Met

Gln Ile

His Arg

Gln Leu 185 Glu Pro 200

Leu Ile

Ala Gly

Gly Asp

Thr Pro 265 Phe Lys 280

Lys Arg

Tyr Ser

Phe Phe

Phe Leu 34 5 Pro Met 360

Cys Ala

90

Phe Ser

Tyr Val

Asn Gln

Cys Arg 155 Asp Ile 170

Lys Leu

Asn Ile

Phe Gly

Cys Val 235 Ser Gly 250

Thr Arg

Phe Pro

Met Pro

Pro Ser 315 Asp Glu 330

Pro Pro Asp Ile Phe Val

Lys Thr

Pro Glu 125 Arg Met 140

Ser Leu

Lys Pro

Cys Asp

Ser Tyr 205 Ala Thr 220

Leu Ala

Val Asp

Glu Glu

Gln Ile 285 Ala Glu 300

Leu Arg

Leu Arg

Leu Phe

Leu Val 365 Gly Trp 380

95

Glu Lys Glu 110

Thr Ala His

Pro Leu Ile

Ala Tyr Ile 160

Gln Asn Leu

175 Phe Gly Ser 190

Ile Cys Ser

Glu Tyr Thr

Glu Leu Leu 240

Gln Leu Val

255 Ile Lys Cys 270

Lys Ala His

Ala Val Asp

Ser Thr Ala 320

Asp Pro Asn

335 Asn Phe Lys 350

Lys Leu Ile

<210> 176

<211> 1581

<212> DMA

<213> Petunia hybrida

<400> 176

tctctcaggt ttagggtttc gtattgtccg ctgttttgtg tttttgtaaa atgtgagctg ctgtcatttg agttgtgccc attactcagt atggcgtctg gtataatgcc ttcggctggt gacaaacttc ccgaagaaat aaatgaaatg atggaagcag ctgtagtgga tggaaatgga attgggggca aaaatggtga gcctaagcag ggacagggtt cgtttggaat agtgttccag gcaataaaaa aggttttaca ggataagaga cttctagatc atcctaatgt tgttgcactg

atcgctatac tttgaagctc tttccgatca 60

ttctttagct acaggtttga agctgttaat 120

agtataagta agtttatttt tgttgctgat 180

ggaaaacatc gaactgatgc catgcttgtt 240

aagatcagag atgataaagc agaaaaggaa 300

actgaaaaag gccacatcat cgtgacaact 360

accattagtt acatggccga gcgtgttgtt 420

gccaaatgcc ttgaaactgg agaaactgtt 480

tacaagaatc gggaattgca aacaatacgc 540

aggcactgct tcttttcaac cacagaaaag 600 gatgagcttt atctgaattt ggtccttgaa tatgtaccag agactgtcta ccgtgtcttg 660

agacattaca gcaaagcaaa ccaacagatg cctatgattt atgtcaagct ctacacatat 720

cagattttca gagctttggc ctacatacac ggcataggag tctgccacag ggacatcaag 780

cctcagaatc tactggtcaa cccccacacc caccagctta agctctgcga ctttgggagt 840

gcaaaagttc tggtcaaagg cgaaccaaat atttcatata tttgttctcg ttactatcgt 900

gcacccgaac ttatattcgg agcaactgaa tacacttttg caattgacat ttggtctgtg 960

ggttgcgtcc ttgccgaact gcttctgggg cagcccctct ttcctggtga gagtggagtt 1020

gatcagcttg ttgaaataat caaggttctt ggaacaccaa ctcgggagga aatcaagagt 1080

atgaatccaa attacactga gttcaaattc ccacaaatca aagctcaccc ttggcacaaa 1140

atttttcata agcggatgcc tccagaagct gtggaccttg tgtcaaggct tctccaatat 1200

tctccaaatt tgaggtccac tgcgttggag gcttgcactc acactttctt tgatgaactc 1260

cgtgatccta agactcgcct ccctaatggt cggccattgc cacctctttt caacttcagg 1320

cctcaagagc tgaaaggagc gtcggcagac ctcttaaaca agctgatacc agaacatgct 1380

aagaagcagt gtacctttct tggtgtctag gtttatgaat gttgtgtatc tattgtatac 1440

ttgaaatatt ttgcaaccac tggttaattc tctactttgg ctaaacctgt ttgacatgtc 1500

ttcctttcca tgaaaactta taactgaaac cacattgtgt aagttgttcc tagtagtgca 1560

aatgctattt acttgaactt g 1581

<210> 177

<211> 409

<212> PRT

<213> Petunia hybrida

<400> 177

Met Ala Ser Gly Ile Met Pro Ser Ala Gly Gly Lys His Arg Thr Asp 1 5 10 15 Ala Met Leu Val Asp Lys Leu Pro Glu Glu Ile Asn Glu Met Lys Ile 20 25 30 Arg Asp Asp Lys Ala Glu Lys Glu Met Glu Ala Ala Val Val Asp Gly 35 40 45 Asn Gly Thr Glu Lys Gly His Ile Ile Val Thr Thr Ile Gly Gly Lys 50 55 60 Asn Gly Glu Pro Lys Gln Thr Ile Ser Tyr Met Ala Glu Arg Val Val 65 70 75 80 Gly Gln Gly Ser Phe Gly Ile Val Phe Gln Ala Lys Cys Leu Glu Thr 85 90 95 Gly Glu Thr Val Ala Ile Lys Lys Val Leu Gln Asp Lys Arg Tyr Lys 100 105 110 Asn Arg Glu Leu Gln Thr Ile Arg Leu Leu Asp His Pro Asn Val Val 115 120 125 Ala Leu Arg His Cys Phe Phe Ser Thr Thr Glu Lys Asp Glu Leu Tyr 130 135 140 Leu Asn Leu Val Leu Glu Tyr Val Pro Glu Thr Val Tyr Arg Val Leu 145 150 155 160 Arg His Tyr Ser Lys Ala Asn Gln Gln Met Pro Met Ile Tyr Val Lys 165 170 175 Leu Tyr Thr Tyr Gln Ile Phe Arg Ala Leu Ala Tyr Ile His Gly Ile 180 185 190 Gly Val Cys His Arg Asp Ile Lys Pro Gln Asn Leu Leu Val Asn Pro 195 200 205 HiS Thr His Gln Leu Lys Leu Cys Asp Phe Gly Ser Ala Lys Val Leu 210 215 220 Val Lys Gly Glu Pro Asn Ile Ser Tyr Ile Cys Ser Arg Tyr Tyr Arg 225 230 235 240 Ala Pro Glu Leu Ile Phe Gly Ala Thr Glu Tyr Thr Phe Ala Ile Asp

245 250 255

Ile Trp Ser Val Gly Cys Val Leu Ala Glu Leu Leu Leu Gly Gln Pro

260 265 270

Leu Phe Pro Gly Glu Ser Gly Val Asp Gln Leu Val Glu Ile Ile Lys

275 280 285

Val Leu Gly Thr Pro Thr Arg Glu Glu Ile Lys Ser Met Asn Pro Asn

290 295 300

Tyr Thr Glu Phe Lys Phe Pro Gln Ile Lys Ala His Pro Trp His Lys 305 310 315 320

Ile Phe His Lys Arg Met Pro Pro Glu Ala Val Asp Leu Val Ser Arg

325 330 335

Leu Leu Gln Tyr Ser Pro Asn Leu Arg Ser Thr Ala Leu Glu Ala Cys

340 345 350

Thr His Thr Phe Phe Asp Glu Leu Arg Asp Pro Lys Thr Arg Leu Pro

355 360 365

Asn Gly Arg Pro Leu Pro Pro Leu Phe Asn Phe Arg Pro Gln Glu Leu

370 375 380

Lys Gly Ala Ser Ala Asp Leu Leu Asn Lys Leu Ile Pro Glu His Ala 385 390 395 400

Lys Lys Gln Cys Thr Phe Leu Gly Val 405

<210> 178 <211> 2193 <212> DNA <213> Oryza sativa

<400> 178

aatccgaaaa gtttctgcac cgttttcacc ccctaactaa caatataggg aacgtgtgct 60

aaatataaaa tgagacctta tatatgtagc gctgataact agaactatgc aagaaaaact 120

catccaccta ctttagtggc aatcgggcta aataaaaaag agtcgctaca ctagtttcgt 180

tttccttagt aattaagtgg gaaaatgaaa tcattattgc ttagaatata cgttcacatc 240

tctgtcatga agttaaatta ttcgaggtag ccataattgt catcaaactc ttcttgaata 300

aaaaaatctt tctagctgaa ctcaatgggt aaagagagag atttttttta aaaaaataga 360

atgaagatat tctgaacgta ttggcaaaga tttaaacata taattatata attttatagt 420

ttgtgcattc gtcatatcgc acatcattaa ggacatgtct tactccatcc caatttttat 480

ttagtaatta aagacaattg acttattttt attatttatc ttttttcgat tagatgcaag 540

gtacttacgc acacactttg tgctcatgtg catgtgtgag tgcacctcct caatacacgt 600

tcaactagca acacatctct aatatcactc gcctatttaa tacatttagg tagcaatatc 660

tgaattcaag cactccacca tcaccagacc acttttaata atatctaaaa tacaaaaaat 720

aattttacag aatagcatga aaagtatgaa acgaactatt taggtttttc acatacaaaa 780

aaaaaaagaa ttttgctcgt gcgcgagcgc caatctccca tattgggcac acaggcaaca 840

acagagtggc tgcccacaga acaacccaca aaaaacgatg atctaacgga ggacagcaag 900

tccgcaacaa ccttttaaca gcaggctttg cggccaggag agaggaggag aggcaaagaa 960

aaccaagcat cctcctcctc ccatctataa attcctcccc ccttttcccc tctctatata 1020

ggaggcatcc aagccaagaa gagggagagc accaaggaca cgcgactagc agaagccgag 1080

cgaccgcctt cttcgatcca tatcttccgg tcgagttctt ggtcgatctc ttccctcctc 1140

cacctcctcc tcacagggta tgtgcccttc ggttgttctt ggatttattg ttctaggttg 1200

tgtagtacgg gcgttgatgt taggaaaggg gatctgtatc tgtgatgatt cctgttcttg 1260

gatttgggat agaggggttc ttgatgttgc atgttatcgg ttcggtttga ttagtagtat 1320

ggttttcaat cgtctggaga gctctatgga aatgaaatgg tttagggtac ggaatcttgc 1380

gattttgtga gtaccttttg tttgaggtaa aatcagagca ccggtgattt tgcttggtgt 14 40

aataaaagta cggttgtttg gtcctcgatt ctggtagtga tgcttctcga tttgacgaag 1500 ctatcctttg tttattccct attgaacaaa aataatccaa ctttgaagac ggtcccgttg 1560

atgagattga atgattgatt cttaagcctg tccaaaattt cgcagctggc ttgtttagat 1620

acagtagtcc ccatcacgaa attcatggaa acagttataa tcctcaggaa caggggattc 1680

cctgttcttc cgatttgctt tagtcccaga attttttttc ccaaatatct taaaaagtca 1740

ctttctggtt cagttcaatg aattgattgc tacaaataat gcttttatag cgttatccta 1800

gctgtagttc agttaatagg taatacccct atagtttagt caggagaaga acttatccga 1860 tttctgatct ccatttttaa ttatatgaaa tgaactgtag cataagcagt attcatttgg 1920

attatttttt ttattagctc tcaccccttc attattctga gctgaaagtc tggcatgaac 1980

tgtcctcaat tttgttttca aattcacatc gattatctat gcattatcct cttgtatcta 2040

cctgtagaag tttctttttg gttattcctt gactgcttga ttacagaaag aaatttatga 2100

agctgtaatc gggatagtta tactgcttgt tcttatgatt catttccttt gtgcagttct 2160

tggtgtagct tgccactttc accagcaaag ttc 2193

<210> 179 <211> 54

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Iniciador: prm579 7

<400> 179

ggggacaagt ttgtacaaaa aagcaggctt aaacaatggg ttcagtaggg gttg 54

<210> 180

<211> 50

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Iniciador: prm5798

<400> 180

ggggaccact ttgtacaaga aagctgggtg aagctgtctc atactcctgc 50

<210> 181

<211> 1243

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 181

aaaaccaccg agggacctga tctgcaccgg ttttgatagt tgagggaccc gttgtgtctg 60

gttttccgat cgagggacga aaatcggatt cggtgtaaag ttaagggacc tcagatgaac 120

ttattccgga gcatgattgg gaagggagga cataaggccc atgtcgcatg tgtttggacg 180

gtccagatct ccagatcact cagcaggatc ggccgcgttc gcgtagcacc cgcggtttga 240

ttcggcttcc cgcaaggcgg cggccggtgg ccgtgccgcc gtagcttccg ccggaagcga 300

gcacgccgcc gccgccgacc cggctctgcg tttgcaccgc cttgcacgcg atacatcggg 360

atagatagct actactctct ccgtttcaca atgtaaatca ttctactatt ttccacattc 420

atattgatgt taatgaatat agacatatat atctatttag attcattaac atcaatatga 480

atgtaggaaa tgctagaatg acttacattg tgaattgtga aatggacgaa gtacctacga 540

tggatggatg caggatcatg aaagaattaa tgcaagatcg tatctgccgc atgcaaaatc 600

ttactaattg cgctgcatat atgcatgaca gcctgcatgc gggcgtgtaa gcgtgttcat 660

ccattaggaa gtaaccttgt cattacttat accagtacta catactatat agtattgatt 720

tcatgagcaa atctacaaaa ctggaaagca ataaggaata cgggactgga aaagactcaa 780 cattaatcac caaatatttc gccttctcca gcagaatata tatctctcca tcttgatcac 840

tgtacacact gacagtgtac gcataaacgc agcagccagc ttaactgtcg tctcaccgtc SOO

gcacactggc cttccatctc aggctagctt tctcagccac ccatcgtaca tgtcaactcg 960

gcgcgcgcac aggcacaaat tacgtacaaa acgcatgacc aaatcaaaac caccggagaa 1020

gaatcgctcc cgcgcgcggc ggcggcgcgc acgtacgaat gcacgcacgc acgcccaacc 1080

ccacgacacg atcgcgcgcg acgccggcga caccggccat ccacccgcgc cctcacctcg 1140

ccgactataa atacgtaggc atctgcttga tcttgtcatc catctcacca ccaaaaaaaa 1200

aggaaaaaaa aacaaaacac accaagccaa ataaaagcga caa 1243

Claims (19)

1. Método para melhorar características de crescimento de planta em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, caracterizado pelo fato de que compreende introduzir e expressar um ácido nucleico isolado selecionado de: (a) ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo; (b) um ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo; (c) ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo; e (d) um gene/ ácido nucleico que codifica quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante do mesmo.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que (a) um ácido nucleico da parte (a) codifica um polipeptídeo compreendendo do terminal N para extremidade de terminal C: (i) uma caixa ácida; e (ii) um homeodomínio classe I; e (iii) um zíper de leucina com mais do que 5 heptads; (b) o ácido nucleico da parte (b) codifica um homólogo da proteína da NRT representada pela SEQ ID NO: 53 ou codifica um polipeptídeo compreendendo (i) um domínio MFS_1, (ii) um domínio de transmembrana localizado no terminal C do domínio MFS_1 e preferivelmente também tendo atividade da NRT; (c) o ácido nucleico da parte (c) que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo compreendendo, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: 128, ou codifica um ortólogo ou parálogo do polipeptídeo de YEP16 da SEQ ID NO: 128 ou SEQ ID NO: 130; (d) o ácido nucleico da parte (d) que codifica um polipeptídeo tendo: (i) pelo menos 77 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido representada pela SEQ ID NO: 147; e (ii) tendo motivo I: R/H/V/N/Q E/G LK G/N e motivo II: K Q/N CXXX G/A/S, onde X pode ser qualquer aminoácido.

3. Método de acordo com a reivindicação l(c) ou 2(c), caracterizado pelo fato de que dito polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo é alvejado a um plastídeo, preferivelmente ao cloroplasto.

4. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que (a) dito ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou variante do mesmo é de origem vegetal, preferivelmente de uma planta monocotiledônea, mais preferivelmente da família Poaceae, mais preferivelmente do gênero Oryza, o mais preferivelmente de Oryza sativa; (b) dito ácido nucleico da NRT ou variante do mesmo é de origem vegetal, preferivelmente de uma planta monocotiledônea, mais preferivelmente da família Poaceae, o mais preferivelmente o ácido nucleico é de Oryza sativa. (c) dito ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo é de origem vegetal, preferivelmente de uma espécie dicotiledônea, mais preferivelmente da família Brassicaceae, mais preferivelmente de Arabidopsis thaliana·, e (d) dito ácido nucleico/gene que codifica a quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante dos mesmos é de origem vegetal, preferivelmente de uma planta monocotiledônea, mais preferivelmente da família Poaceae, mais preferivelmente do gênero Oryza, o mais preferivelmente de Oryza sativa.

5. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que ditas características de crescimento melhoradas são rendimento aumentado durante a expressão de um ácido nucleico de partes (a) a (c) e resistência a estresse abiótico aumentada durante a expressão de um ácido nucleico de parte (d).

6. Método de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que (a) dito rendimento aumentado durante a expressão de um ácido nucleico isolado codificando um ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo, é selecionado de um ou mais dentre: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, índice de colheita aumentado (HI), peso de mil grãos aumentado (TKW), comprimento de raiz aumentado ou diâmetro de raiz aumentado, cada um em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes; (b) dito rendimento aumentado durante a expressão de um ácido nucleico da NRT isolado ou uma variante do mesmo, é rendimento de semente aumentado, preferivelmente selecionado de: peso total aumentado de sementes, número total aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, número aumentado de flores por panículo ou índice de colheita aumentado; (c) dito rendimento aumentado durante a expressão de ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo é rendimento de semente aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, preferivelmente selecionado de qualquer um ou mais dentre: peso aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, taxa de enchimento de semente aumentada e índice de colheita aumentado; (d) dita resistência ao estresse abiótico durante a expressão de um gene/ácido nucleico que codifica quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante do mesmo, é qualquer um ou mais dentre: estresse anaeróbico, estresse da temperatura, estresse da toxicidade química, estresse oxidativo e estresse osmótico, cujo estresse osmótico é preferivelmente selecionado de estresse do sal, estresse da água, estresse oxidativo e estresse iônico.

7. Método de acordo com a reivindicação l(a), caracterizado pelo fato de que ditas características de crescimento de planta melhoradas são resistência a estresse abiótico, preferivelmente resistência a estresse osmótico, selecionado de um ou mais dentre: estresse da água, estresse do sal, estresse oxidativo e estresse iônico e em que dito estresse da água é preferivelmente estresse da seca.

8. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que dita resistência a estresse abiótico aumentado é manifestada como rendimento aumentado selecionado de um ou mais dentre: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, índice de colheita aumentado (HI), peso de mil grãos aumentado (TKW), comprimento de raiz aumentado, diâmetro de raiz aumentado e índice de verdor aumentado, cada um em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes.

9. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que (a) o ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo é operacionalmente ligado a um promotor constitutivo; (b) o ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo é operacionalmente ligado a um promotor constitutivo; (c) o ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo é operacionalmente ligado a um promotor específico de semente; e (d) o ácido nucleico que codifica um gene/ ácido nucleico que codifica quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante do mesmo é operacionalmente ligado a um promotor constitutivo.

10. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que dito ácido nucleico é superexpressado.

11. Construção, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) um ácido nucleico compreendendo (a) um ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo; (b) um ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo; (c) um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo, em que o dito polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo compreende, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, -85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: 128; ou (d) um gene/ ácido nucleico que codifica quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante do mesmo; (ii) uma ou mais seqüências de controle capazes de direcionar a expressão da seqüência de ácido nucleico de (i); em que as seqüências de controle de (i) a, (i) b, e (i) d compreendem um promotor constitutivo e em que as seqüências de controle de (i) c compreende um promotor específico de semente; e opcionalmente (iii) uma seqüência de terminação de transcrição.

12. Célula hospedeira, caracterizada pelo fato de que compreende uma construção como definida na reivindicação 11, em que dita célula hospedeira é um microorganismo.

13. Método de acordo com a reivindicação 9 ou a construção de acordo com a reivindicação 11, caracterizado(a) pelo fato de que o dito promotor constitutivo é um promotor GOS2, mais preferivelmente o promotor constitutivo é um promotor GOS2 do arroz, mais preferivelmente o promotor constitutivo é representado por uma seqüência de ácido nucleico substancialmente similar à SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178, o mais preferivelmente o promotor constitutivo é como representado pela SEQ ID NO: 33 ou SEQ ID NO: 178 ou em que o dito promotor G0S2 é como representado pelos nucleotídeos de 1 a 2193 na SEQ ID NO: 56; e em que o dito promotor específico de semente é um promotor da oleosina, preferivelmente o promotor da oleosina do arroz, mais preferivelmente como representado pela SEQ ID NO: 143.

14. Método para produzir uma planta transgênica, parte de planta ou célula de planta tendo características de crescimento de planta melhoradas em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, caracterizado pelo fato de que compreende: (i) introduzir e expressar em uma planta ou célula de planta (a) um ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo; (b) um ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo; (c) um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo, em que o dito polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo compreende, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: 128; ou (d) um ácido nucleico que codifica quinase tipo felpuda do Grupo I ou variante do mesmo; (ii) cultivar a célula de planta sob condições que promovam o crescimento e desenvolvimento de planta.

15. Uso de uma construção como definida na reivindicação 11, caracterizado pelo fato de ser para melhorar características de crescimento de planta, em que as ditas características de crescimento melhoradas são (a) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um ou mais dentre: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, índice de colheita aumentado (HI), peso de mil grãos aumentado (TKW), comprimento de raiz aumentado ou diâmetro de raiz aumentado, cada um em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico é um ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo; (b) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um rendimento de semente aumentado, mais preferivelmente um ou mais dentre: peso total aumentado de sementes, número total aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, número aumentado de flores por panículo ou índice de colheita aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico é um ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo; (c) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um rendimento de semente aumentado, mais preferivelmente um ou mais dentre: peso aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, taxa de enchimento de semente aumentada e índice de colheita aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo compreendendo, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, -40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: -128; (d) tolerância aumentada ao estresse abiótico, preferivelmente ao estresse osmótico, selecionado de estresse do sal, estresse da água, estresse oxidativo e estresse iônico, onde dito onde dito ácido nucleico codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo do mesmo.

16. Uso de um ácido nucleico como definido na reivindicação -1, caracterizado pelo fato de ser para melhorar características de crescimento de planta, em que as ditas características de crescimento melhoradas são (a) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um ou mais dentre: número aumentado de sementes cheias, rendimento de semente total aumentado, número aumentado de flores por panículo, taxa de enchimento de semente aumentada, índice de colheita aumentado (HI), peso de mil grãos aumentado (TKW), comprimento de raiz aumentado ou diâmetro de raiz aumentado, cada um em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico é um ácido nucleico hox5 HDZip classe I ou uma variante do mesmo; (b) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um rendimento de semente aumentado, mais preferivelmente um ou mais dentre: peso total aumentado de sementes, número total aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, número aumentado de flores por panículo ou índice de colheita aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico é um ácido nucleico da NRT ou uma variante do mesmo; (c) rendimento de planta aumentado, preferivelmente um rendimento de semente aumentado, mais preferivelmente um ou mais dentre: peso aumentado de sementes, número aumentado de sementes cheias, taxa de enchimento de semente aumentada e índice de colheita aumentado em relação às plantas do tipo selvagem correspondentes, onde dito ácido nucleico codifica um polipeptídeo de YEP16 ou um homólogo do mesmo compreendendo, em ordem crescente de preferência, pelo menos 30 %, 35 %, -40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de identidade de seqüência com a seqüência de aminoácido da SEQ ID NO: -128; (d) tolerância aumentada ao estresse abiótico, preferivelmente ao estresse osmótico, selecionado de estresse do sal, estresse da água, estresse oxidativo e estresse iônico, onde dito onde dito ácido nucleico codifica uma quinase tipo felpuda do Grupo I ou homólogo do mesmo.

17. Uso de acordo com a reivindicação 16(a), caracterizado pelo fato de que dito rendimento de planta aumentado ocorre sob estresse abiótico.

18. Uso de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que dito rendimento de planta aumentado compreende índice de verdor aumentado.

19. Uso de um ácido nucleico como definido na reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de ser como um marcador molecular.