BR112020026361A2 - Composições e métodos para tratar neuropatia óptica hereditária de leber - Google Patents

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Abstract

a presente invenção refere-se a um ácido nucleico recombinante que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'utr. a presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica que compreende o ácido nucleico recombinante e um método para tratar neuropatia óptica hereditária de leber (lhon) usando a composição farmacêutica.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA TRATAR NEUROPATIA ÓPTICA HEREDITÁRIA DE LEBER".
REFERÊNCIA CRUZADA
[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido PCT Nº PCT/CN2018/095023, depositado em 9 de julho de 2018; PCT/CN2018/103937, depositado em 4 de setembro de 2018; Pedidos chineses Nº CN201810703168.7 e CN201810702492.7, ambos depositados em 29 de junho de 2018; Pedido PCT Nº PCT/CN2018/113799, depositado em 2 de novembro de 2018; Pedido chinês Nº CN201811230856.2, depositado em 22 de outubro de 2018; Pedido PCT Nº PCT/CN2018/118662, depositado em 30 de novembro de 2018; Pedido chinês Nº CN201811221305.X, depositado em 19 de outubro de 2018; Pedido PCT Nº PCT/CN2019/070461, depositado em 4 de janeiro de 2019; Pedido chinês Nº CN201810948193.1, depositado em 20 de agosto de 2018; todos os quais estão incorporados ao presente documento a título de referência em sua totalidade.
REFERÊNCIA A UMA LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS
[002] O presente pedido contém uma Listagem de Sequências que foi apresentada em formato ASCII por meio de EFS-Web e está incorporada ao presente documento a título de referência em sua totalidade. A dita cópia em ASCII, criada em 30 de junho de 2019, é nomeada como 207298476_1.txt e possui 304.914 bytes de tamanho.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[003] A neuropatia óptica hereditária de Leber (LHON) é uma degeneração herdada mitocondrialmente (transmitida da mãe para a prole) de células do gânglio retinal (RGCs) e seus axônios que leva a uma perada aguda ou subaguda da visão central; isto afeta predominantemente homens adultos jovens. LHON é apenas transmitida através da mãe, já que se deve a mutações no genoma mitocondrial (não nuclear), e apenas o óvulo fornece mitocôndrias ao embrião. LHON se deve normalmente a uma de três mutações pontuais patogênicas de DNA mitocondrial (mtDNA). Estas mutações estão nas posições de nucleotídeo 11778 G para A (G11778A), 3460 G para A (G3460A) e 14484 T para C (T14484C), respectivamente, nos genes de subunidade de proteína de subunidade 4 de NADH desidrogenase (ND4), na proteína de subunidade 1 de NADH desidrogenase (ND1) e na proteína de subunidade 6 de NADH desidrogenase (ND6) do complexo I da cadeia de fosforilação oxidante em mitocôndrias. Acredita-se que cada mutação tenha risco significativo de perda permanente da visão. Tipicamente progride dentro de várias semanas a vários meses sem dor, até a visão binocular se deteriorar até abaixo de 0,1, o que afeta seriamente a qualidade de vida do paciente. Dois mutantes de LHON, G3460A r T14484C, resultam na redução da atividade de NADH desidrogenase mitocondrial isolada das plaquetas do paciente em 80%. Noventa por cento dos pacientes chineses com LHON portam a mutação G11778A. A mutação G11778A altera a arginina em histidina na proteína ND4, resultando na disfunção e dano ao nervo óptico em pacientes de LHON. Há uma necessidade de desenvolver composições e métodos para tratar LHON com eficiência de transfecção e eficiência de tratamento mais altas.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[004] São divulgados aqui ácidos nucleicos recombinantes, composições farmacêuticas e métodos para tratar LHON. Num aspecto, é divulgado no presente documento um ácido nucleico recombinante que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 99% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10, e 12; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
[005] Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 3. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
4. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 5.
[006] Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
[007] Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
[008] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23-24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69-70, 73-76, 79-80 e 83-84.
[009] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um ácido nucleico recombinante que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 90% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2, 3, 4 e 5; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
[010] Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 3. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
5.
[011] Em alguns casos, a proteína mitocondrial é selecionada do grupo que consiste em NADH desidrogenase 4 (ND4), NADH desidrogenase 6 (ND6), NADH desidrogenase 1 (ND1) e uma variante das mesmas. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 4 (ND4) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 160. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 6, 7 ou 8. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 6 (ND6) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
161. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 9 ou 10. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 1 (ND1) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 162. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 11 ou 12.
[012] Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende a sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
[013] Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial.
[014] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-84.
[015] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um ácido nucleico recombinante que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10 e 12; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
[016] Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que codifica um polipeptídeo selecionado do grupo que consiste em hsCOX10, hsCOX8, scRPM2, lcSirt5, tbNDUS7, ncQCR2, hsATP5G2, hsLACTB, spilv1, gmCOX2, crATP6, hsOPA1, hsSDHD, hsADCK3, osP0644B06.24-2, Neurospora crassa ATP9 (ncATP9), hsGHITM, hsNDUFAB1, hsATP5G3, crATP6 _hsADCK3, ncATP9_ncATP9, zmLOC100282174, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_ncATP9, zmLOC100282174_hsADCK3_crATP6 _hsATP5G3, zmLOC100282174_hsADCK3_hsATP5G3, ncATP9_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6 _hsATP5G3, crATP6_hsADCK3_zmLOC100282174_hsATP5G3, hsADCK3_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_GNFP_ncATP9 e ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_lcSirt5_osP0644B06.24- 2_hsATP5G2_ncATP9. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99%, ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2 ou 3. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
4. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 5.
[017] Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
[018] Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende a sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
[019] Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial.
[020] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23-24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69-70, 73-76, 79-80 e 83-84.
[021] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um ácido nucleico recombinante que compreende uma sequência de direcionamento mitocondrial que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2, 3 e 4. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
3. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4.
[022] Em alguns casos, a ácido nucleico recombinante compreende, ainda, uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial. Em alguns casos, a proteína mitocondrial é selecionada do grupo que consiste em NADH desidrogenase 4 (ND4), NADH desidrogenase 6 (ND6), NADH desidrogenase 1 (ND1) e uma variante das mesmas. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 4 (ND4) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 160. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 6, 7 ou 8. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 6 (ND6) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
161. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 9 ou 10. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 1 (ND1) ou uma variante da mesma. Em alguns casos, a proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 162. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 11 ou 12.
[023] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende, ainda, uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende a sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial.
[024] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-70.
[025] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um ácido nucleico recombinante que compreende uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial, em que a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10 e
12.
[026] Em alguns casos, a ácido nucleico recombinante compreende, ainda, uma sequência de direcionamento mitocondrial. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que codifica um polipeptídeo selecionado do grupo que consiste em hsCOX10, hsCOX8, scRPM2, lcSirt5, tbNDUS7, ncQCR2, hsATP5G2, hsLACTB, spilv1, gmCOX2, crATP6, hsOPA1, hsSDHD, hsADCK3, osP0644B06.24-2, Neurospora crassa ATP9 (ncATP9), hsGHITM, hsNDUFAB1, hsATP5G3, crATP6 _hsADCK3, ncATP9_ncATP9, zmLOC100282174, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_ncATP9, zmLOC100282174_hsADCK3_crATP6 _hsATP5G3, zmLOC100282174_hsADCK3_hsATP5G3, ncATP9_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6 _hsATP5G3, crATP6_hsADCK3_zmLOC100282174_hsATP5G3, hsADCK3_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_GNFP_ncATP9 e ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_lcSirt5_osP0644B06.24- 2_hsATP5G2_ncATP9. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%,
pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
3. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
5.
[027] Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10. Em alguns casos, a sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
[028] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende, ainda, uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende a sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125. Em alguns casos, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Em alguns casos, a sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da sequência de direcionamento mitocondrial.
[029] Em alguns casos, o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23-24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69-70, 73-76, 79-80 e 83-84.
[030] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um vetor viral que compreende o ácido nucleico recombinante divulgado no presente documento. Em alguns casos, o vetor viral é um vetor de vírus adenoassociado (AAV). Em alguns casos, o vetor de AAV é selecionado do grupo que consiste em vetores de AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 e AAV16. Em alguns casos, o vetor de AAV é um vetor de AAV recombinante (rAAV). Em alguns casos, o vetor de rAAV é um vetor de rAAV2.
[031] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento uma composição farmacêutica que compreende um vírus adenoassociado (AAV) que compreende qualquer ácido nucleico recombinante divulgado no presente documento. Em alguns casos, a composição farmacêutica compreende, ainda, um excipiente farmaceuticamente aceitável da mesma. É também divulgada uma composição farmacêutica que compreende o vetor viral divulgado no presente documento, num excipiente farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o vetor viral compreende qualquer ácido nucleico recombinante divulgado no presente documento. É também divulgada uma composição farmacêutica que compreende: um vírus adenoassociado (AAV) que compreende qualquer ácido nucleico recombinante divulgado no presente documento, em que o ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15; e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[032] Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável compreende solução salinha tamponada com fosfato (PBS), α,α- trealose desidratada, monocloridrato de L-histidina mono-hidratado, polissorbato 20, NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, K2HPO4, poloxâmero 188 ou qualquer combinação dos mesmos. Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável é selecionado dentre solução salinha tamponada com fosfato (PBS), α,α-trealose desidratada, monocloridrato de L-histidina mono-hidratado, polissorbato 20, NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, K2HPO4, poloxâmero 188 e qualquer combinação dos mesmos. Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável compreende poloxâmero 188. Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável compreende 0,0001% a 0,01% de poloxâmero 188. Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável compreende 0,001% de poloxâmero 188. Em alguns casos, o excipiente farmaceuticamente aceitável compreende, ainda, um ou mais sais. Em alguns casos, os um ou mais sais compreendem NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4 e KH2PO4. Em alguns casos, os um ou mais sais compreendem NaCl 80 mM, NaH2PO4 5 mM, Na2HPO4 40 mM e KH2PO4 5 mM. Em alguns casos, a composição farmacêutica possui um pH de 6 a 8. Em alguns casos, a composição farmacêutica possui um pH de 7,2 a 7,4. Em alguns casos, a composição farmacêutica possui um pH de 7,3. Em alguns casos, a composição farmacêutica possui um título viral de pelo menos 1,0 × 1010 vg/ml. Em alguns casos, a composição farmacêutica possui um título viral de pelo menos 5,0 × 1010 vg/ml.
[033] Em alguns casos, a composição farmacêutica é submetida a cinco ciclos de congelamento/descongelamento, a composição farmacêutica mantém pelo menos 60%, 70%, 80% ou 90% de um título viral, em comparação com o título viral antes dos cinco ciclos de congelamento/descongelamento. Em alguns casos, a composição farmacêutica, quando administrada a um paciente com neuropatia óptica hereditária de Leber, gera uma recuperação de visão média mais alta que uma composição farmacêutica comparável sem o ácido nucleico recombinante. Em alguns casos, a composição farmacêutica, quando administrada a um paciente com neuropatia óptica hereditária de Leber, gera uma recuperação de visão média mais alta que uma composição farmacêutica comparável que compreende um ácido nucleico recombinante conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15.
[034] Em outro aspecto, é divulgado no presente documento um método para tratar um distúrbio ocular que compreende administrar qualquer composição farmacêutica divulgada no presente documento a um paciente que precisa da mesma. Em alguns casos, o distúrbio ocular é uma neuropatia óptica hereditária de Leber (LHON). Em alguns casos,
o método compreende administrar a composição farmacêutica a um ou ambos os olhos do paciente. Em alguns casos, a composição farmacêutica é administrada via injeção intraocular ou intravítrea. Em alguns casos, a composição farmacêutica é administrada via injeção intravítrea. Em alguns casos, cerca de 0,01 a 0,1 ml da composição farmacêutica é administrado via injeção intravítrea. Em alguns casos, cerca de 0,05 ml da composição farmacêutica é administrado via injeção intravítrea.
[035] Em alguns casos, o método compreende, ainda, administrar metilprednisolona ao paciente. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada antes da injeção intravítrea da composição farmacêutica. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada por via oral. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada diariamente por pelo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 dias antes da injeção intravítrea da composição farmacêutica. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada diariamente. Em alguns casos, uma dosagem diária de cerca de 32 mg/60 kg de metilprednisolona é administrada. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada após a injeção intravítrea da composição farmacêutica. Em alguns casos, o método compreende, ainda, administrar fosfocreatina sódica ao paciente. Em alguns casos, a fosfocreatina sódica é administrada por via intravenosa. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada por via intravenosa ou oral. Em alguns casos, o método compreende administrar metilprednisolona por via intravenosa por pelo menos um dia, que é seguida por administração de metilprednisolona por via oral por pelo menos uma semana. Em alguns casos, o método compreende administrar metilprednisolona por via intravenosa por cerca de 3 dias, que é seguida por administração de metilprednisolona por via oral por pelo menos cerca de 6 semanas. Em alguns casos, a metilprednisolona é administrada por via intravenosa a uma dose diária de cerca de 80 mg/60 kg. Em alguns casos, a administração da composição farmacêutica gera uma recuperação média mais alta da visão do que uma composição farmacêutica comparável sem o ácido nucleico recombinante. Em alguns casos, a administração da composição farmacêutica gera uma recuperação média mais alta da visão do que uma composição farmacêutica comparável que compreende um ácido nucleico recombinante conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15.
INCORPORAÇÃO A TÍTULO DE REFERÊNCIA
[036] Todas as publicações patentes e pedidos de patente mencionados neste relatório descritivo são incorporados ao presente documento a título de referência na mesma extensão como se cada publicação, patente ou pedido de patente individual estivesse específica e individualmente indicado como incorporado a título de referência.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[037] As características inovadoras da invenção são apresentadas com particularidade nas reivindicações anexas. Um entendimento melhor das características e vantagens da presente invenção será obtido por referência à descrição detalhada a seguir que apresenta modalidades ilustrativas, em que os princípios da invenção são utilizados, e os desenhos anexos dos quais:
[038] A Figura 1 mostra a verificação por eletroforese de ácido nucleico de PCR (reação em cadeia de polimerase) de ND4 (faixa A) e resultados de clonagem de ND4 otimizados (faixa B).
[039] A Figura 2 mostra a comparação de nível de expressão relativo usando qPCR entre o rAAV2-opt_ND4 (coluna preta esquerda) e rAAV2-ND4 (coluna preta direita). β-actina é o gene de referência interna (coluna branca).
[040] A Figura 3 mostra a comparação de nível de expressão relativo usando imunoblotting entre o rAAV2-opt_ND4 (coluna preta esquerda) e rAAV2-ND4 (coluna preta direita). β-actina é o gene de referência interna (coluna branca).
[041] A Figura 4 mostra os resultados fotográficos do fundus para coelhos que receberam injeção de rAAV2-opt_ND4 (direita) e rAAV2- ND4 (esquerda), respectivamente.
[042] A Figura 5 mostra os resultados fotográficos do fundus para um paciente antes (esquerda) e após (direita) a injeção com ND4 otimizado com rAAV2.
[043] A Figura 6 mostra os níveis de expressão de EGFP de rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[044] A Figura 7 mostra a expressão de ND4 em células 293T: rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[045] A Figura 8 mostra a expressão de ND4 relativa em células 293T: rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[046] A Figura 9 mostra a expressão de ND4 em células do nervo óptico de coelho: rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[047] A Figura 10 mostra a expressão de ND4 relativa em células do nervo óptico de coelho: rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[048] A Figura 11 mostra resultados fotográfico do fundus para rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[049] A Figura 12 mostra os resultados da inspeção por microscópio (manchamento com HE) para rAAV2-ND4 (esquerda) e rAAV2-opt_ND4* (direita).
[050] A Figura 13 mostra os resultados fotográfico do fundus para coelhos que receberam injeção de rAAV2-ND6 (A), rAAV-GFP (B) e PBS, respectivamente.
[051] A Figura 14 mostra os resultados fotográficos do fundus para coelhos que receberam injeção de rAAV2-opt_ND6 (A), rAAV2-ND6 (B), rAAV-EGFP (C), respectivamente.
[052] A Figura 15 mostra a expressão de ND6 relativa nas células do nervo óptico de coelho: rAAV2-opt_ND6 (A), rAAV2-ND6 (B) e rAAV- EGFP (C).
[053] A Figura 16 mostra a expressão de ND6 por western blot: rAAV2-opt_ND6 (A), rAAV2-ND6 (B) e rAAV-EGFP (C).
[054] A Figura 17 mostra a expressão de ND1 relativa nas células do nervo óptico de coelho: rAAV2-opt_ND1 (A), rAAV2-ND1 (B) e rAAV- EGFP (C).
[055] A Figura 18 mostra a expressão de ND1 relativa por western blot: rAAV2-opt_ND1 (A), rAAV2-ND1 (B) e rAAV-EGFP (C).
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES
[056] A menos que definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado conforme comumente entendido pela pessoa com habilidade comum na técnica à qual esta divulgação pertence. Embora quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos na presente invenção possam ser também usados na prática ou teste das formulações ou doses unitárias no presente documento, alguns métodos e materiais são agora descritos. A não ser que mencionado de outro modo, as técnicas empregadas ou contempladas no presente documento são metodologias-padrão. Os materiais, os métodos e os exemplos são ilustrativos apenas e não limitantes.
[057] Conforme usado no presente documento e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "uma", "o" e "a" incluem referentes plurais a menos que o contexto indique claramente de outro modo. Assim, por exemplo, a referência a "um composto" inclui uma pluralidade de tais agentes, e a referência a "o sal" inclui referência a um ou mais sais (ou a uma pluralidade de sais) e seus equivalentes conhecidos por aqueles versados na técnica, e assim por diante.
[058] Conforme usado no presente documento, a não ser que indicado de outro modo, o termo "ou" pode ser conjuntivo ou disjuntivo. Conforme usado no presente documento, a não ser que indicado de outro modo, qualquer modalidade pode ser combinada com outra modalidade.
[059] Conforme usado no presente documento, a não ser que indicado de outro modo, algumas modalidades da invenção no presente documento contemplam faixas numéricas. Quando faixas estão presentes, as faixas incluem os pontos de extremidade da faixa. Adicionalmente, cada subfaixa e valor dentro da faixa está presente como se explicitamente escritos.
[060] O termo "cerca de" e seus equivalentes gramaticais em relação a um valor numérico de referência e seus equivalentes gramaticais, conforme usado no presente documento, podem incluir uma faixa de valores mais ou menos 10% deste valor, tal como uma faixa de valores mais ou menos 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% ou 1% deste valor. Por exemplo, a quantidade "cerca de 10" inclui quantidades de 9 a 11.
[061] O termo "compreender" (e termos relacionados, tais como "compreendem" ou "compreende" ou "ter" ou "incluir") não se destina a excluir que, em outras certas modalidades, por exemplo, uma modalidade de qualquer composição de matéria, composição, método ou processo ou similar, descrito no presente documento, pode "consistir" ou "consistir essencialmente" nos recursos descritos.
[062] O termo "indivíduo" se refere a um mamífero que foi ou será objeto de tratamento, observação ou experimento. O termo "mamífero" é concebido tendo seu significado padrão e abrange seres humanos, cães, gatos, ovelhas e vacas, por exemplo. Os métodos descritos no presente documento podem ser úteis tanto em terapia humana quanto em aplicações veterinárias. Em algumas modalidades, o indivíduo é um ser humano.
[063] O termo "tratar" ou "tratamento" abrange a administração de pelo menos um composto divulgado no presente documento, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo mamífero, particularmente um indivíduo humano, que precisa de tal administração e inclui (i) interromper o desenvolvimento de sintomas clínicos da doença, tal como câncer, (ii) provocar uma regressão nos sintomas clínicos da doença, tal como câncer, e/ou (iii) tratamento profilático para impedir o início doença, tal como câncer.
[064] O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" de uma entidade química descrita no presente documento se refere a uma quantidade eficaz, quando administrada a um indivíduo humano ou não humano, para fornecer um benefício terapêutico, tal como atenuação dos sintomas, atraso da progressão da doença ou prevenção da doença.
[065] Conforme usado no presente documento, a não ser que indicado de outro modo, os termos "ácido nucleico" e "polinucleotídeo" podem ser usados de forma intercambiável.
SEQUÊNCIAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS E POLIPEPTÍDEOS
[066] A Tabela 1 divulga todas as sequências de ácidos nucleicos e polipeptídeos divulgadas no presente documento. A primeira coluna mostra a SEQ ID NO de cada sequência. A segunda coluna descreve o construto de ácido nucleico ou polipeptídeo. Por exemplo, o construto COX10-ND6-3'UTR é um ácido nucleico que combina as sequências de ácidos nucleicos de COX10 (SEQ ID Nº: 1), ND6 (SEQ ID Nº: 9) e 3'UTR (SEQ ID Nº: 13) (de 5' a 3' sem ligante entre as sequências de ácidos nucleicos.
TABELA 1 - SEQUÊNCIAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS E
POLIPEPTÍDEOS E SEQ ID NOS SEQ descrição sequência
1. COX10 ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG
TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACT
2. opt_COX10 ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG
TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACA
3. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC
GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACC
4. COX8 ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC
TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTG
5. OPA1 GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA
GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTG
6. ND4 ATGCTAAAACTAATCGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTT
TCCAAAAAACACATGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTAT TAGCATCATCCCTCTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAG CTGTTCCCCAACCTTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGC TAACTACCTGGCTCCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTA TCCAGTGAACCACTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTC CCTACAAATCTCCTTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTT TTATATCTTCTTCGAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCG ATGGGGCAACCAGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTC TACACCCTAGTAGGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCA CAACACCCTAGGCTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAG AACTATCAAACTCCTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATG GCTTTTATGGTAAAGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAA AGCCCATGTCGAAGCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTA CTCTTAAAACTAGGCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAA CCCCCTGACAAAACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGG GCATGATTATGACAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCG CTCATTGCATACTCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCAT TCTCATCCAAACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATC GCCCACGGGCTTACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTA
SEQ descrição sequência
CGAACGCACTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTC TACTCCCACTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTC GCCTTACCCCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAAC CACGTTCTCCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGC TAGTCACAGCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGC TCACTCACCCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAA CACCCTCATGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACC CCGACATCATTACCGGGTTTTCCTCTTAA
7. opt_ND4 ATGCTGAAGCTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGC
TGAGCAAGAAACACATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGAT CATCAGCATCATCCCTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGT TCAGCTGCAGCCCCACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCT GATGCTGACCACCTGGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGA CACCTGAGCAGCGAGCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATG CTGATCTCCCTGCAGATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCT GATCATGTTCTACATCTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCA TCATCACCAGATGGGGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCT ACTTTCTGTTCTACACCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCT GATCTACACCCACAACACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACA CTGACAGCCCAAGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGC TGGCCTACACAATGGCCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCA CCTGTGGCTGCCTAAAGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATG GTGCTGGCTGCAGTGCTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGG CTGACCCTGATTCTGAATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCT GGTGCTGAGCCTGTGGGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCG GCAGACCGATCTGAAGTCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATG GCCCTGGTGGTCACCGCCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAG GCGCCGTGATCCTGATGATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTT TTGTCTGGCCAACAGCAACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATC CTGTCTCAGGGCCTGCAGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGC TGCTGGCCTCTCTGGCCAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCT GGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACC CTGCTGCTCACCGGCCTGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGT ACATGTTCACCACCACACAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAA TATGAAGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTG AGCCCCATTCTGCTGCTGTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTC CAGCTGA
8. opt_ND4* ATGCTGAAGCTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGC
TGAGCAAGAAGCACATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGAT CATCAGCATCATCCCCCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGT
SEQ descrição sequência
TCAGCTGCAGCCCCACCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCT GATGCTGACCACCTGGCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCG CCACCTGAGCAGCGAGCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCAT GCTGATCAGCCTGCAGATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAG CTGATCATGTTCTACATCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGC CATCATCACCCGCTGGGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCAC CTACTTCCTGTTCTACACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCC CTGATCTACACCCACAACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGA CCCTGACCGCCCAGGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGT GGCTGGCCTACACCATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCT GCACCTGTGGCTGCCCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAG CATGGTGCTGGCCGCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGAT GCGCCTGACCCTGATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCC TTCCTGGTGCTGAGCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCC TGCGCCAGACCGACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCC ACATGGCCCTGGTGGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTT CACCGGCGCCGTGATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCT GCTGTTCTGCCTGGCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATC ATGATCCTGAGCCAGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCT GGTGGCTGCTGGCCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCA ACCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCA ACATCACCCTGCTGCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTA CAGCCTGTACATGTTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCAC ATCAACAACATGAAGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCA TGCACCTGAGCCCCATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCAC CGGCTTCAGCAGCTAA
9. ND6 ATGATGTATGCTTTGTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGT
GGGGTTTTCTTCTAAGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGT TAGCGGTGTGGTCGGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATA TGGGTTTAATGGTTTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTG GATATACTACAGCGATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTC AGGGGTTGAGGTCTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTA GGATTGGTGCTGTGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAA ACTTTAATAGTGTAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGG GTTGATTCGGGAGGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGG CGTTGGTTAGTAGTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATT GTAATTGAGATTGCTCGGGGGAATTAG
10. opt_ND6 ATGATGTACGCCCTGTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCG
TGGGCTTCAGCAGCAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGA TCGTGAGCGGCGTGGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCG
SEQ descrição sequência
GCTACATGGGCCTGATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGT GGTGTTCGGCTACACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGC CTGGGGCAGCGGCGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGG CCATGGAGGTGGGCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGG TGGTGGTGGTGAACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGG GCGAGGGCAGCGGCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCC CTGTACGACTACGGCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTG TTCGTGGGCGTGTACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAA
11. ND1 ATGGCCAACCTCCTACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATT
CCTAATGCTTACCGAACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAG GCCCCAACGTTGTAGGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGC CATAAAACTCTTCACCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCA CCCTCTACATCACCGCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTA TGGACCCCCCTCCCCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCC TCCTATTTATTCTAGCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGT CAGGGTGGGCATCAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAG CAGTAGCCCAAACAATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTA TCAACATTACTAATGAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACA CAAGAACACCTCTGGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGT GGTTTATCTCCACACTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGC CGAAGGGGAGTCCGAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCA GGCCCCTTCGCCCTATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGAT GAACACCCTCACCACTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCT CCCCTGAACTCTACACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCT CCCTGTTCTTATGGATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAA CTCATGCACCTCCTATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACT TATGTGGTATGTCTCCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAA CCTAA
12. opt_ND1 ATGGCCAACCTGCTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCT
TCCTGATGCTGACCGAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAA GGGCCCCAACGTGGTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGA CGCCATCAAGCTGTTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCAC CATCACCCTGTACATCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTG CTGCTGTGGACCCCCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACC TGGGCCTGCTGTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCAT CCTGTGGAGCGGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGC CCTGCGCGCCGTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCAT CATCCTGCTGAGCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACC CTGATCACCACCCAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCC CTGGCCATGATGTGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCC
SEQ descrição sequência
CCTTCGACCTGGCCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACA TCGAGTACGCCGCCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACAC CAACATCATCATGATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCA CCTACGACGCCCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAA GACCCTGCTGCTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCC CGCTTCCGCTACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGC CCCTGACCCTGGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCAT CAGCAGCATCCCCCCCCAGACCTAA
13. 3'UTR GAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCA
TGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACA AGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTT TTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTC AGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATC TCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGT ACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACAC GCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGT GAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAA GGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTT GGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCA ATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTT TGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACC CCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTA TAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGG GTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATT ACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACA GCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGT GTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGA AAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACA TGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAG TTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAG CTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAA AGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCA CTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACA TTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACA TCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCA GGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTA CAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
14. 3'UTR* GAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCA
TGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACA AGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTT
SEQ descrição sequência
TTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTC AGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATC TCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGT ACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACAC GCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGT GAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAA GGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTT GGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCA ATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTT TGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
15. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND4-3'UTR TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTAAAACTAATC
GTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACAT GATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCTC TACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACCT TTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCTC CTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCACT ATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCCTT AATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTCGA AACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACCAG CCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTAG GCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGGC TCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTCC TGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAAA GATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAAG CCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAGG CGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAAAC ACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGACA AGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATACTC TTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAACCC CCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTTAC ATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCACA GTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAATG GCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCCCA CTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCTCCTGG TCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACAGCCCT ATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCACCCACC ACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCATGTTC ATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATCATTAC CGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT
SEQ descrição sequência
TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCT GTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGT CACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAG TTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGG CCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAA ATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTG GGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTC CCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAG TCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
16. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND4-3'UTR* TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTAAAACTAATC
GTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACAT GATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCTC TACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACCT TTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCTC CTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCACT ATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCCTT AATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTCGA AACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACCAG CCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTAG GCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGGC TCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTCC TGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAAA
SEQ descrição sequência
GATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAAG CCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAGG CGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAAAC ACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGACA AGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATACTC TTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAACCC CCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTTAC ATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCACA GTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAATG GCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCCCA CTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCTCCTGG TCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACAGCCCT ATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCACCCACC ACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCATGTTC ATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATCATTAC CGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
17. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND4- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTGAAGCTGATC 3'UTR GTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACACA
TGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCT CTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCAC CTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCTGG CTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGAGC CCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAGAT CTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCT TTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGGGG CAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACACC CTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAACA CCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAGCT
SEQ descrição sequência
GAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGGCC TTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAAAG CTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTGCT GCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGAAT CCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTGGG GCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAGTC CCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCGCC ATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGATGA TTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGCAA CTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGCAG ACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGCCA ATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTGCT GGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCCTG AACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACACA GTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCACC CGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCTGT CCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGGGA CGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAAT TCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACG AATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACC CAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAA AAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACC CCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAG CTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACA TGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATC TGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCAC CCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCC CACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCG GCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCT CAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGA GCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAAC ATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTT AATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGA GTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAA GGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCA GCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATC CTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTA AGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGG TGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGT GCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTG ACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAG GATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCT
SEQ descrição sequência
CTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTT GCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGG AGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGC CTTCACATTTGTAGAAGCTTT
18. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND4- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTGAAGCTGATC 3'UTR* GTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACACA
TGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCT CTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCAC CTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCTGG CTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGAGC CCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAGAT CTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCT TTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGGGG CAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACACC CTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAACA CCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAGCT GAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGGCC TTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAAAG CTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTGCT GCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGAAT CCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTGGG GCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAGTC CCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCGCC ATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGATGA TTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGCAA CTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGCAG ACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGCCA ATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTGCT GGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCCTG AACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACACA GTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCACC CGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCTGT CCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGGGA CGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAAT TCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACG AATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACC CAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAA AAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACC CCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAG CTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACA
SEQ descrição sequência
TGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATC TGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCAC CCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCC CACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCG GCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCT CAAGCTGGACTGCCA
19. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND4*- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTGAAGCTGATC 3'UTR GTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCACA
TGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCC CCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCA CCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTG GCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCA GATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTG GGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTA CACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCAC AACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAG GAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACC ATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCC GCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTG ATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGA GCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCG ACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGT GGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGT GATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTG GCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCC AGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGG CCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCG AGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCT GCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATG TTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGA AGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCC CATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGC TAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGA GCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGA ACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTT TTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCA GTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATAC
SEQ descrição sequência
ATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGG GGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCA CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCAC CCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTT ATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAG GGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCAT TACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACA GCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGT GTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGA AAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACA TGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAG TTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAG CTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAA AGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCA CTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACA TTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACA TCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCA GGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTA CAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
20. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND4*- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGCTGAAGCTGATC 3'UTR* GTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCACA
TGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCC CCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCA CCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTG GCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCA GATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTG GGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTA CACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCAC AACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAG GAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACC ATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCC GCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTG
SEQ descrição sequência
ATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGA GCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCG ACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGT GGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGT GATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTG GCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCC AGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGG CCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCG AGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCT GCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATG TTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGA AGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCC CATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGC TAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGA GCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGA ACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTT TTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCA GTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATAC ATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGG GGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCA CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
21. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND6-3'UTR TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGATGTATGCTTTG
TTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTAA GCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTCG GGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGTTT TTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGCGA TGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGTCTT GGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTGTGG GTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTGTAG GAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGAGG ATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTAGTA GTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATTGCT CGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCT GCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGC TGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGA
SEQ descrição sequência
CAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATG CATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGG GTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTC CTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTAC CACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTG GCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTC AGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGG GCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTT CTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGG ATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGT CCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCA CAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTT CCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGC CCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTC CTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTA GGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGT CCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAA TTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGG GAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACG GTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCC CATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGT CTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
22. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND6-3'UTR* TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGATGTATGCTTTG
TTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTAA GCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTCG GGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGTTT TTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGCGA TGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGTCTT GGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTGTGG GTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTGTAG GAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGAGG ATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTAGTA GTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATTGCT CGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCT GCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGC TGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGA
SEQ descrição sequência
CAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATG CATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGG GTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTC CTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTAC CACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTG GCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTC AGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGG GCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTT CTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGG ATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
23. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND6- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGATGTACGCCCTG 3'UTR TTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAGC
AAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGTG GTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCTG ATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTACA CCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGGC GTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGGG CCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGAA CTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCGG CCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACGG CCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGTA CATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCCA CCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGA ACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCG GTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAAT GCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGA ATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCC TCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCT CTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCA GCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGT CTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTT CCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACAC ATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGC TGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGC TGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATT TCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATA GACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATAC CAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCAC TACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCT GTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCC
SEQ descrição sequência
CACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTG ATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGA GCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGT GGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCT CCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACA GGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATT CGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCA AAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCAC TTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAA CATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTC ACATTTGTAGAAGCTTT
24. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND6- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGATGTACGCCCTG 3'UTR* TTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAGC
AAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGTG GTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCTG ATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTACA CCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGGC GTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGGG CCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGAA CTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCGG CCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACGG CCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGTA CATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCCA CCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGA ACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCG GTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAAT GCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGA ATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCC TCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCT CTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCA GCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGT CTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTT CCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACAC ATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGC TGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGC TGGACTGCCA
25. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND1-3'UTR TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGGCCAACCTCCTA
CTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCGA
SEQ descrição sequência
ACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTAG GCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCAC CAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACC GCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCC CCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTA GCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCAT CAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAAC AATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAAT GAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCT GGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACA CTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCC GAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCC TATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCA CTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTAC ACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGG ATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCT ATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCT CCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTA TGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTT AACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGA CTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTG GAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTT CAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAA CCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTC CATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGC TTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGC CAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCT TTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAG CTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCG
SEQ descrição sequência
TAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGT TCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTG TTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGT GGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACA GCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
26. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG ND1-3'UTR* TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGGCCAACCTCCTA
CTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCGA ACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTAG GCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCAC CAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACC GCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCC CCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTA GCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCAT CAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAAC AATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAAT GAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCT GGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACA CTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCC GAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCC TATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCA CTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTAC ACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGG ATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCT ATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCT CCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCA
27. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG
SEQ descrição sequência opt_ND1- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGGCCAACCTGCT 3'UTR GCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACC
GAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTG GTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTG TTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACA TCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCTGTT CATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGCGG CTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCCGT GGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGAG CACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCACC CAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATG TGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGG CCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCG CCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCAT GATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGCC CTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTGC TGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCTA CGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCTG GCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATCC CCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCG CTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATT GCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTT GACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAA TGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAG GGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCT CCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTA CCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGT GGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCT CAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAG GGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCT TCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGG GATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTG TCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTC ACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGT TCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGG CCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAA ATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTG GGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC
SEQ descrição sequência
GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTC CCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAG TCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
28. COX10- ATGGCCGCATCTCCGCACACTCTCTCCTCACGCCTCCTGACAGGTTGCG opt_ND1- TAGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTGAAAGAAGAACTATGGCCAACCTGCT 3'UTR* GCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACC
GAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTG GTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTG TTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACA TCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCTGTT CATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGCGG CTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCCGT GGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGAG CACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCACC CAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATG TGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGG CCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCG CCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCAT GATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGCC CTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTGC TGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCTA CGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCTG GCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATCC CCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCG CTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATT GCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTT GACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAA TGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAG GGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCT CCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTA CCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGT GGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCT CAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAG GGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCT TCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGG GATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
29. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND4-3'UTR TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTAAAACTAAT
CGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACA TGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCT CTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACC TTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCT CCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCA CTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCC TTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTC GAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACC AGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTA GGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGG CTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTC CTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAA AGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAA GCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAG GCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAA ACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGA CAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATAC TCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAAC CCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTT ACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCA CAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAA TGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCC CACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCTCCT GGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACAGCC CTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCACCCA CCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCATGT TCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATCATT ACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCT CCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAA ATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCA CTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAG AAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTT GAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTT CCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCC TTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTT GGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGA GCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGC CAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGT CCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACT
SEQ descrição sequência
GGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCC CTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGA GTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGC AGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCT GGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCA CTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAA GTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTC CTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCA GAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTT CTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAA ATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAG AGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTAC TCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTA GGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGG ATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCC CTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGT CTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
30. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND4-3'UTR* TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTAAAACTAAT
CGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACA TGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCT CTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACC TTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCT CCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCA CTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCC TTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTC GAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACC AGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTA GGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGG CTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTC CTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAA AGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAA GCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAG GCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAA ACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGA CAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATAC TCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAAC CCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTT ACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCA CAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAA TGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCC
SEQ descrição sequência
CACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCTCCT GGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACAGCC CTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCACCCA CCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCATGT TCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATCATT ACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCT CCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAA ATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCA CTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAG AAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTT GAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTT CCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCC TTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTT GGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGA GCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGC CAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGT CCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACT GGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
31. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND4- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTGAAGCTGAT 3'UTR CGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACAC
ATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCC CTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCC ACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCT GGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAG ATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACAT CTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGG GGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACA CCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAA CACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAG CTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGG CCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAA AGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTG CTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGA ATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTG GGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAG TCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCG CCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGAT GATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGC AACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGC
SEQ descrição sequência
AGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGC CAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTG CTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCC TGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACA CAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCA CCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCT GTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTA TGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTT AACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGA CTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTG GAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTT CAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAA CCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTC CATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGC TTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGC CAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCT TTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAG CTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCG TAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGT TCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTG TTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGT GGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACA GCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
32. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND4- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTGAAGCTGAT 3'UTR* CGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACAC
ATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCC CTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCC
SEQ descrição sequência
ACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCT GGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAG ATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACAT CTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGG GGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACA CCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAA CACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAG CTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGG CCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAA AGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTG CTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGA ATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTG GGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAG TCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCG CCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGAT GATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGC AACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGC AGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGC CAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTG CTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCC TGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACA CAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCA CCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCT GTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCA
33. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND4*- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTGAAGCTGAT 3'UTR CGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCAC
SEQ descrição sequência
ATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCC CCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCA CCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTG GCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCA GATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTG GGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTA CACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCAC AACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAG GAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACC ATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCC GCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTG ATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGA GCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCG ACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGT GGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGT GATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTG GCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCC AGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGG CCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCG AGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCT GCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATG TTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGA AGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCC CATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGC TAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGA GCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGA ACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTT TTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCA GTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATAC ATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGG GGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCA CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCAC CCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTT ATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAG
SEQ descrição sequência
GGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCAT TACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACA GCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGT GTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGA AAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACA TGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAG TTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAG CTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAA AGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCA CTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACA TTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACA TCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCA GGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTA CAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
34. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND4*- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGCTGAAGCTGAT 3'UTR* CGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCAC
ATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCC CCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCA CCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTG GCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGA GCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCA GATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTG GGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTA CACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCAC AACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAG GAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACC ATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCC GCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTG ATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGA GCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCG ACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGT GGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGT GATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTG GCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCC AGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGG CCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCG AGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCT GCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATG
SEQ descrição sequência
TTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGA AGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCC CATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGC TAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGA GCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGA ACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTT TTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCA GTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATAC ATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGG GGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCA CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
35. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND6-3'UTR TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGATGTATGCTTT
GTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTA AGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTC GGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGT TTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGC GATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGT CTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTG TGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTG TAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGA GGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTA GTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATT GCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCT
SEQ descrição sequência
GTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGT CACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAG TTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGG CCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAA ATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTG GGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTC CCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAG TCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
36. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND6-3'UTR* TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGATGTATGCTTT
GTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTA AGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTC GGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGT TTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGC GATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGT CTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTG TGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTG TAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGA GGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTA GTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATT GCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
37. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND6- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGATGTACGCCCT 3'UTR GTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAG
CAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGT GGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCT GATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTAC ACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGG CGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGG GCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGA ACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCG GCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACG GCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGT ACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCC ACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGA ACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGG TGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGC TCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATT ATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTA TTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTT GGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGA GTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAG TTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTG ACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAAC CATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTG GGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA GCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAA GGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAA GCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCT CTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCC ACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAA GTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTC CTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAG AAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCT GGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATA CGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGT CCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCA GTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGA GAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTG TAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCT TGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTG GAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
SEQ descrição sequência
38. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND6- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGATGTACGCCCT 3'UTR* GTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAG
CAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGT GGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCT GATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTAC ACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGG CGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGG GCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGA ACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCG GCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACG GCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGT ACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCC ACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGG AACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTC GGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAA TGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGG AATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACC CTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCC TCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCC AGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTG TCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCT TCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACAC ATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGC TGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGC TGGACTGCCA
39. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND1-3'UTR TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGGCCAACCTCCT
ACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCG AACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTA GGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCA CCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACC GCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCC CCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTA GCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCAT CAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAAC AATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAAT GAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCT GGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACA CTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCC
SEQ descrição sequência
GAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCC TATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCA CTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTAC ACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGG ATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCT ATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCT CCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTA TGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTT AACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGA CTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTG GAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTT CAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAA CCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTC CATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGC TTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGC CAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCT TTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAG CTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCG TAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGT TCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTG TTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGT GGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACA GCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
40. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG ND1-3'UTR* TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGGCCAACCTCCT
ACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCG AACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTA GGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCA
SEQ descrição sequência
CCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACC GCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCC CCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTA GCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCAT CAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAAC AATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAAT GAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCT GGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACA CTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCC GAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCC TATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCA CTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTAC ACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGG ATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCT ATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCT CCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCA
41. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND1- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGGCCAACCTGCT 3'UTR GCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACC
GAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTG GTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTG TTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACA TCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCTGTT CATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGCGG CTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCCGT GGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGAG CACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCACC
SEQ descrição sequência
CAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATG TGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGG CCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCG CCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCAT GATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGCC CTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTGC TGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCTA CGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCTG GCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATCC CCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCG CTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATT GCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTT GACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAA TGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAG GGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCT CCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTA CCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGT GGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCT CAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAG GGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCT TCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGG GATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTG TCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTC ACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGT TCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGG CCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAA ATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTG GGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTC CCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAG TCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
42. opt_COX10- ATGGCCGCCTCTCCACACACACTGAGTAGCAGACTGCTGACCGGCTGTG opt_ND1- TTGGCGGCTCTGTGTGGTATCTGGAACGGCGGACAATGGCCAACCTGCT 3'UTR* GCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACC
SEQ descrição sequência
GAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTG GTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTG TTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACA TCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCTGTT CATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGCGG CTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCCGT GGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGAG CACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCACC CAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATG TGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGG CCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCG CCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCAT GATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGCC CTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTGC TGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCTA CGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCTG GCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATCC CCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCG CTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATT GCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTT GACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAA TGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAG GGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCT CCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTA CCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGT GGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCT CAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAG GGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCT TCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGG GATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
43. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -ND4-3'UTR GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGCTAAAACTA
ATCGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACA CATGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCC CTCTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAA CCTTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGG CTCCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAAC CACTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCT CCTTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCT TCGAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAA
SEQ descrição sequência
CCAGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTA GTAGGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCT AGGCTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAA ACTCCTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATG GTAAAGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGT CGAAGCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAA CTAGGCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGA CAAAACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATT ATGACAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGC ATACTCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCC AAACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGG GCTTACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCA CTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCA CTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACC CCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCT CCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACA GCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCAC CCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCA TGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATC ATTACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTC CCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGA GAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGA TCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAAT AAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCC CTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTT TCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCC ATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGC ACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCT GTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACT GAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCA TAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGG GACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA GCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCA AGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGG AAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATA CCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGT CGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAA GGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTC ACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTG AATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCA GGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTT ACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTC
SEQ descrição sequência
TACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCG ATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCG GGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTA AAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAA TCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAG GAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAG AAGCTTT
44. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -ND4-3'UTR* GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGCTAAAACTA
ATCGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACA CATGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCC CTCTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAA CCTTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGG CTCCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAAC CACTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCT CCTTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCT TCGAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAA CCAGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTA GTAGGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCT AGGCTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAA ACTCCTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATG GTAAAGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGT CGAAGCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAA CTAGGCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGA CAAAACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATT ATGACAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGC ATACTCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCC AAACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGG GCTTACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCA CTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCA CTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACC CCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCT CCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACA GCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCAC CCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCA TGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATC ATTACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTC CCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGA GAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGA TCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAAT AAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCC
SEQ descrição sequência
CTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTT TCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCC ATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGC ACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCT GTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACT GAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCA TAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGG GACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
45. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND4- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGCTGAAGCTG 3'UTR ATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAAC
ACATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATC CCTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCC CACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACC TGGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCG AGCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCA GATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGG GGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACA CCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAA CACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAG CTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGG CCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAA AGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTG CTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGA ATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTG GGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAG TCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCG CCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGAT GATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGC AACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGC AGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGC CAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTG CTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCC TGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACA CAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCA CCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCT GTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT
SEQ descrição sequência
ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTA TGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTT AACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGA CTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTG GAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTT CAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAA CCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTC CATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGC TTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGC CAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCT TTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAG CTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCG TAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGT TCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTG TTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGT GGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACA GCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
46. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND4- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGCTGAAGCTG 3'UTR* ATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAAC
ACATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATC CCTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCC CACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACC TGGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCG AGCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCA GATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACA TCTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGG GGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACA CCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAA CACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAG CTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGG CCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAA
SEQ descrição sequência
AGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTG CTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGA ATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTG GGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAG TCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCG CCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGAT GATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGC AACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGC AGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGC CAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTG CTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCC TGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACA CAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCA CCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCT GTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGG GACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGT AATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAA ACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATT ACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATAC AAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCA ACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACA CAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCC ACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATG ATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAG CACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCA CCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGAC CCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAG TCTCAAGCTGGACTGCCA
47. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND4*- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGCTGAAGCTG 3'UTR ATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGC
ACATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATC CCCCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCC CACCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACC TGGCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGC GAGCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTG CAGATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTA CATCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGC TGGGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTC TACACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCC ACAACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCA
SEQ descrição sequência
GGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACAC CATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTG CCCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCC GCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTG ATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGA GCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCG ACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGT GGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGT GATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTG GCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCC AGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGG CCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCG AGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCT GCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATG TTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGA AGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCC CATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGC TAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGA GCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGA ACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTT TTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCA GTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATAC ATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGG GGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCA CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCAC CCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTT ATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAG GGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCAT TACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACA GCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGT GTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGA AAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACA TGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAG TTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAG CTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAA AGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCA CTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACA
SEQ descrição sequência
TTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACA TCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCA GGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTA CAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
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SEQ descrição sequência
CACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGT GTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAA AGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTT TGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGT TTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
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TTGTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTC TAAGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGG TCGGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATG GTTTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACA GCGATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAG GTCTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGC TGTGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAG TGTAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGG GAGGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAG TAGTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGA TTGCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCT CCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAA ATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCA CTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAG AAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTT GAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTT CCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCC TTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTT GGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGA GCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGC CAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGT CCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACT GGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCC CTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGA GTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGC AGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCT GGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCA CTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAA GTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTC CTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCA GAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTT CTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAA ATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAG
SEQ descrição sequência
AGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTAC TCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTA GGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGG ATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCC CTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGT CTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
50. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -ND6-3'UTR* GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGATGTATGCT
TTGTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTC TAAGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGG TCGGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATG GTTTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACA GCGATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAG GTCTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGC TGTGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAG TGTAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGG GAGGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAG TAGTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGA TTGCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCT CCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAA ATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCA CTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAG AAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTT GAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTT CCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCC TTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTT GGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGA GCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGC CAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGT CCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACT GGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
51. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND6- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGATGTACGCC 3'UTR CTGTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGC
AGCAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGC GTGGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGC CTGATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCT ACACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCG GCGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTG GGCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTG
SEQ descrição sequência
AACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGC GGCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTAC GGCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTG TACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCC CACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTG GAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATT CGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAA AATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAA GGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCA CCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTT CCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGC CCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGC TGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCC CTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCAC ACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCT GCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAA GCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCA TTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATAT AGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATA CCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCA CTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGC TGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCC CACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTG ATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGA GCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGT GGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCT CCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACA GGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATT CGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCA AAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCAC TTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAA CATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTC ACATTTGTAGAAGCTTT
52. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND6- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGATGTACGCC 3'UTR* CTGTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGC
AGCAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGC GTGGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGC CTGATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCT ACACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCG GCGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTG
SEQ descrição sequência
GGCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTG AACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGC GGCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTAC GGCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTG TACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCC CACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTG GAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATT CGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAA AATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAA GGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCA CCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTT CCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGC CCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGC TGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCC CTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCAC ACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCT GCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAA GCTGGACTGCCA
53. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -ND1-3'UTR GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGGCCAACCTC
CTACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACC GAACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGT AGGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTC ACCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCAC CGCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTC CCCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCT AGCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCA TCAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAA CAATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAA TGAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTC TGGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCAC ACTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTC CGAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCC CTATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACC ACTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTA CACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATG GATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTC CTATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGT CTCCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACT GGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTG GTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTAT
SEQ descrição sequência
AAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAAT ATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAA TACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCT CCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACAT ACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACAC TCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTC ATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTC CCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTA GGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTG GGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTG CGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCA CGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCC TGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTAC CTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGC TTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGG GCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATAC ATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCA ATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCT GTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTA GTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCT TGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTG GTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAA CAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAA TCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTAT TTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACT TGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
54. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -ND1-3'UTR* GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGGCCAACCTC
CTACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACC GAACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGT AGGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTC ACCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCAC CGCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTC CCCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCT AGCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCA TCAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAA CAATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAA TGAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTC TGGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCAC ACTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTC
SEQ descrição sequência
CGAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCC CTATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACC ACTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTA CACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATG GATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTC CTATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGT CTCCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACT GGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTG GTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTAT AAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAAT ATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAA TACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCT CCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACAT ACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACAC TCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTC ATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTC CCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTA GGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTG GGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
55. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND1- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGGCCAACCTG 3'UTR CTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGA
CCGAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACG TGGTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGC TGTTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTA CATCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGAC CCCCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCT GTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGC GGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCC GTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGA GCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCAC CCAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGAT GTGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTG GCCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCC GCCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCA TGATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGC CCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTG CTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCT ACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCT GGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATC
SEQ descrição sequência
CCCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCT GTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGT CACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAG TTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGG CCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAA ATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTG GGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTC CCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAG TCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
56. opt_COX10* ATGGCCGCCAGCCCCCACACCCTGAGCAGCCGCCTGCTGACCGGCTGC -opt_ND1- GTGGGCGGCAGCGTGTGGTACCTGGAGCGCCGCACCATGGCCAACCTG 3'UTR* CTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGCTGA
CCGAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACG TGGTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGC TGTTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTA CATCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGAC CCCCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTGCT GTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGGAGC GGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGCGCC GTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTGCTGA GCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCACCAC
SEQ descrição sequência
CCAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGAT GTGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTG GCCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCC GCCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCA TGATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGACGC CCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCTGCTG CTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTCCGCT ACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGACCCT GGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAGCATC CCCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCC GCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAAT TGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACT TGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAA ATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGA GGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCC TCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTT ACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGG TGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGC TCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCA GGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCC TTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGG GGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
57. COX8-ND4- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC 3'UTR TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTAAAAC
TAATCGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAAC ACATGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATC CCTCTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCA ACCTTTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTG GCTCCTACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAA CCACTATCACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATC TCCTTAATTATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTC TTCGAAACCACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAA CCAGCCAGAACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTA GTAGGCTCCCTTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCT AGGCTCACTAAACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAA ACTCCTGGGCCAACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATG GTAAAGATGCCTCTTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGT CGAAGCCCCCATCGCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAA CTAGGCGGCTATGGTATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGA CAAAACACATGGCCTACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATT ATGACAAGCTCCATCTGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGC
SEQ descrição sequência
ATACTCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCC AAACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGG GCTTACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCA CTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCA CTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACC CCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCT CCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACA GCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCAC CCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCA TGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATC ATTACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTC CCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGA GAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGA TCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAAT AAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCC CTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTT TCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCC ATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGC ACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCT GTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACT GAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCA TAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGG GACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA GCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCA AGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGG AAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATA CCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGT CGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAA GGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTC ACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTG AATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCA GGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTT ACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTC TACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCG ATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCG GGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTA AAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAA TCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAG GAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAG AAGCTTT
SEQ descrição sequência
58. COX8-ND4- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGCT 3'UTR* CGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTAAAACTA
ATCGTCCCAACAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACAC ATGATTTGGATCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCT CTACTATTTTTTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACCT TTTCCTCCGACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCTCC TACCCCTCACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCACTAT CACGAAAAAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCCTTAAT TATGACATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTCGAAACC ACACTTATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACCAGCCAGA ACGCCTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTAGGCTCCC TTCCCCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGGCTCACTAA ACATTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTCCTGGGCCA ACAACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAAAGATGCCTC TTTACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAAGCCCCCATC GCTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAGGCGGCTATGGT ATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAAACACATGGCCTAC CCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGACAAGCTCCATCTGCC TACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATACTCTTCAATCAGCCACAT GGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAACCCCCTGGAGCTTCACCGG CGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTTACATCCTCATTACTATTCTGC CTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTC AAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAG CCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTC TGTGCTAGTAACCACGTTCTCCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGA CTCAACATGCTAGTCACAGCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACAC AATGGGGCTCACTCACCCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACAC GAGAAAACACCCTCATGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCC TCAACCCCGACATCATTACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCC CACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGG AACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCG GTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATG CTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAAT TATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCT ATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTT GGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGA GTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAG TTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTG ACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAAC CATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTG GGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
59. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND4- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTGAAG 3'UTR CTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGA
AACACATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCAT CATCCCTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCA GCCCCACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGAC CACCTGGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGC AGCGAGCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCC TGCAGATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTC TACATCTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAG ATGGGGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTC TACACCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCC ACAACACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCA AGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACA ATGGCCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CTAAAGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGC AGTGCTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATT CTGAATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCC TGTGGGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCT GAAGTCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTC ACCGCCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCC TGATGATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAA CAGCAACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGC CTGCAGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCT GGCCAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGC GTGCTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCG GCCTGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACC ACACAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCT TCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCT GCTGTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCAC TGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGT GGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTA TAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAAT ATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAA TACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCT CCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACAT ACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACAC TCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTC ATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTC CCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTA
SEQ descrição sequência
GGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTG GGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTG CGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCA CGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCC TGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTAC CTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGC TTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGG GCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATAC ATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCA ATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCT GTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTA GTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCT TGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTG GTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAA CAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAA TCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTAT TTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACT TGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
60. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND4- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTGAAG 3'UTR* CTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGA
AACACATGATCTGGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCAT CATCCCTCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCA GCCCCACCTTCAGCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGAC CACCTGGCTGCTGCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGC AGCGAGCCCCTGAGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCC TGCAGATCTCTCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTC TACATCTTTTTCGAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAG ATGGGGCAACCAGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTC TACACCCTCGTGGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCC ACAACACCCTGGGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCA AGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACA ATGGCCTTCATGGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGC CTAAAGCTCATGTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGC AGTGCTGCTGAAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATT CTGAATCCCCTGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCC TGTGGGGCATGATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCT GAAGTCCCTGATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTC ACCGCCATCCTGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCC TGATGATTGCCCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAA CAGCAACTACGAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGC
SEQ descrição sequência
CTGCAGACCCTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCT GGCCAATCTGGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGC GTGCTGGTCACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCG GCCTGAACATGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACC ACACAGTGGGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCT TCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCT GCTGTCCCTGAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCAC TGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGT GGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTA TAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAAT ATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAA TACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCT CCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACAT ACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACAC TCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTC ATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTC CCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTA GGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTG GGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
61. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND4*- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTGAAG 3'UTR CTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGA
AGCACATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCAT CATCCCCCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCA GCCCCACCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGA CCACCTGGCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGA GCAGCGAGCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCA GCCTGCAGATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCAT GTTCTACATCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCA CCCGCTGGGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCC TGTTCTACACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTA CACCCACAACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACC GCCCAGGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCC TACACCATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGT GGCTGCCCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTG CTGGCCGCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTG ACCCTGATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGG TGCTGAGCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCA GACCGACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGC CCTGGTGGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGG
SEQ descrição sequência
CGCCGTGATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTC TGCCTGGCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCC TGAGCCAGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGC TGCTGGCCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGC TGGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCA CCCTGCTGCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCT GTACATGTTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAAC AACATGAAGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACC TGAGCCCCATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTT CAGCAGCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGC CAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTG GGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACA GTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCA TCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGT CTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCT CACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCA CCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGG CCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCA GGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGG GCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTT CTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGG ATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGT CCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCA CAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTT CCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGC CCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTC CTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTA GGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGT CCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAA TTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGG GAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACG GTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCC CATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGT CTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAG AGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGT AGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTT GGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGG AAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
62. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND4*- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGCTGAAG 3'UTR* CTGATCGTGCCCACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGA
SEQ descrição sequência
AGCACATGATCTGGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCAT CATCCCCCTGCTGTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCA GCCCCACCTTCAGCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGA CCACCTGGCTGCTGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGA GCAGCGAGCCCCTGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCA GCCTGCAGATCAGCCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCAT GTTCTACATCTTCTTCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCA CCCGCTGGGGCAACCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCC TGTTCTACACCCTGGTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTA CACCCACAACACCCTGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACC GCCCAGGAGCTGAGCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCC TACACCATGGCCTTCATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGT GGCTGCCCAAGGCCCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTG CTGGCCGCCGTGCTGCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTG ACCCTGATCCTGAACCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGG TGCTGAGCCTGTGGGGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCA GACCGACCTGAAGAGCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGC CCTGGTGGTGACCGCCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGG CGCCGTGATCCTGATGATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTC TGCCTGGCCAACAGCAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCC TGAGCCAGGGCCTGCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGC TGCTGGCCAGCCTGGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGC TGGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCA CCCTGCTGCTGACCGGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCT GTACATGTTCACCACCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAAC AACATGAAGCCCAGCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACC TGAGCCCCATCCTGCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTT CAGCAGCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGC CAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTG GGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACA GTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCA TCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGT CTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCT CACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCA CCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGG CCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCA GGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGG GCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTT CTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGG ATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
63. COX8-ND6- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC 3'UTR TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGATGTATG
CTTTGTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCT TCTAAGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGT GGTCGGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAA TGGTTTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTA CAGCGATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTG AGGTCTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGT GCTGTGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAAT AGTGTAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTC GGGAGGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTT AGTAGTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGA GATTGCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCC CTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAG AAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGAT CACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATA AGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCT TTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTC TTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCAT CCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCAC TTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGT GAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGA GCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATA GTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGAC TGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCC CTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGA GTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCA GTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTG GCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACT CCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTT AGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTG TCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAA TTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGG AATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGT TACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCA TCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCT CCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAG TTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAG GTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGG CTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAA AAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
SEQ descrição sequência
64. COX8-ND6- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC 3'UTR* TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGATGTATG
CTTTGTTTCTGTTGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCT TCTAAGCCTTCTCCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGT GGTCGGGTGTGTTATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAA TGGTTTTTTTAATTTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTA CAGCGATGGCTATTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTG AGGTCTTGGTGAGTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGT GCTGTGGGTGAAAGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAAT AGTGTAGGAAGCTGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTC GGGAGGATCCTATTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTT AGTAGTAGTTACTGGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGA GATTGCTCGGGGGAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCC CTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAG AAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGAT CACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATA AGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCT TTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTC TTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCAT CCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCAC TTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGT GAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGA GCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATA GTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGA CTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
65. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND6- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGATGTACG 3'UTR CCCTGTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCA
GCAGCAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCG GCGTGGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGG GCCTGATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGG CTACACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAG CGGCGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGG TGGGCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGG TGAACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCA GCGGCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACT ACGGCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCG TGTACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACG CCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTC TGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAA
SEQ descrição sequência
TTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCA AAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAA AGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCC ACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCT TCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATG CCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTG CTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCC CCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCA CACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGC TGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCA AGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGC ATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACAT ATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAA TACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGT CACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAG GCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAG CCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCC TGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAA GAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGT GTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTG CTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGA CAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGG ATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTC TCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTG CACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGA GAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCC TTCACATTTGTAGAAGCTTT
66. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND6- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGATGTACG 3'UTR* CCCTGTTCCTGCTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCA
GCAGCAAGCCCAGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCG GCGTGGTGGGCTGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGG GCCTGATGGTGTTCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGG CTACACCACCGCCATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAG CGGCGTGGAGGTGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGG TGGGCCTGGTGCTGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGG TGAACTTCAACAGCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCA GCGGCCTGATCCGCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACT ACGGCCGCTGGCTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCG TGTACATCGTGATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACG CCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTC
SEQ descrição sequência
TGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAA TTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCA AAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAA AGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCC ACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCT TCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATG CCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTG CTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCC CCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCA CACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGC TGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCA AGCTGGACTGCCA
67. COX8-ND1- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC 3'UTR TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGGCCAAC
CTCCTACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTT ACCGAACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACG TTGTAGGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACT CTTCACCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACA TCACCGCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCC CCTCCCCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTA TTCTAGCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGG GCATCAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCC AAACAATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTAC TAATGAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACAC CTCTGGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTC CACACTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGA GTCCGAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTC GCCCTATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCT CACCACTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAAC TCTACACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCT TATGGATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCA CCTCCTATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGT ATGTCTCCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAG CACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGT TGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGA TTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTA AATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGT GAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCT CCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACA CATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCA CACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAG
SEQ descrição sequência
CCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGC CTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGT TTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAG CTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCC TTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCA TTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGT TCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAG CCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTG TACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCAC GGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGC TGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAA TACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGT GCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTA CCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTT TTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAG GTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACT ACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATT TAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACAT CCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAG GTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTAC AACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
68. COX8-ND1- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC 3'UTR* TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGGCCAAC
CTCCTACTCCTCATTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTT ACCGAACGAAAAATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACG TTGTAGGCCCCTACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACT CTTCACCAAAGAGCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACA TCACCGCCCCGACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCC CCTCCCCATGCCCAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTA TTCTAGCCACCTCTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGG GCATCAAACTCAAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCC AAACAATCTCATATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTAC TAATGAGTGGCTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACAC CTCTGGTTACTCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTC CACACTAGCAGAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGA GTCCGAACTAGTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTC GCCCTATTCTTCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCT CACCACTACAATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAAC TCTACACAACATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCT TATGGATTCGAACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCA CCTCCTATGGAAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGT
SEQ descrição sequência
ATGTCTCCATGCCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAG CACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGT TGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGA TTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTA AATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGT GAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCT CCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACA CATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCA CACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAG CCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGC CTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGT TTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAG CTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCC TTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
69. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND1- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGGCCAAC 3'UTR CTGCTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGC
TGACCGAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCA ACGTGGTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCA AGCTGTTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCT GTACATCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTG GACCCCCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCT GCTGTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGG AGCGGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGC GCCGTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTG CTGAGCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCA CCACCCAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCA TGATGTGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGA CCTGGCCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTA CGCCGCCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATC ATCATGATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACG ACGCCCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCT GCTGCTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTC CGCTACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGA CCCTGGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAG CATCCCCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCC CTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAG AAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGAT CACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATA AGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCT TTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTC
SEQ descrição sequência
TTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCAT CCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCAC TTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGT GAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGA GCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATA GTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGA CTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGC CCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAG GAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAA GCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACC TCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCG CCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGG GAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCAC ATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAA TTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAG GGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTA CCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCT ACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGA TTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGG GGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAA AGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAAT CTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGG AATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAA GCTTT
70. COX8- ATGTCCGTCCTGACGCGCCTGCTGCTGCGGGGCTTGACACGGCTCGGC opt_ND1- TCGGCGGCTCCAGTGCGGCGCGCCAGAATCCATTCGTTGATGGCCAAC 3'UTR* CTGCTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGATCGCCATGGCCTTCCTGATGC
TGACCGAGCGCAAGATCCTGGGCTACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCA ACGTGGTGGGCCCCTACGGCCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCA AGCTGTTCACCAAGGAGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCT GTACATCACCGCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTG GACCCCCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCT GCTGTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCTGTGG AGCGGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGCGCCCTGCGC GCCGTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCCTGGCCATCATCCTG CTGAGCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTCAACCTGAGCACCCTGATCA CCACCCAGGAGCACCTGTGGCTGCTGCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCA TGATGTGGTTCATCAGCACCCTGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGA CCTGGCCGAGGGCGAGAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTA CGCCGCCGGCCCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATC ATCATGATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACG
SEQ descrição sequência
ACGCCCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGACCCT GCTGCTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTACCCCCGCTTC CGCTACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAACTTCCTGCCCCTGA CCCTGGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCATGCCCATCACCATCAGCAG CATCCCCCCCCAGACCTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCC CTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAG AAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGAT CACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATA AGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCT TTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTC TTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCAT CCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCAC TTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGT GAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGA GCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATA GTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGA CTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
71. OPA1-ND4- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA 3'UTR GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG
GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTAAAACTAATCGTCCCAA CAATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACATGATTTGGA TCAACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCTCTACTATTTT TTAACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACCTTTTCCTCCG ACCCCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCTCCTACCCCTC ACAATCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCACTATCACGAAA AAAACTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCCTTAATTATGAC ATTCACAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTCGAAACCACACT TATCCCCACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACCAGCCAGAACGC CTGAACGCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTAGGCTCCCTTCC CCTACTCATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGGCTCACTAAACA TTCTACTACTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTCCTGGGCCAAC AACTTAATGTGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAAAGATGCCTCTT TACGGACTCCACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAAGCCCCCATCG CTGGGTCAATGGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAGGCGGCTATGG TATGATGCGCCTCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAAACACATGGCCT ACCCCTTCCTTGTACTATCCCTATGGGGCATGATTATGACAAGCTCCATC TGCCTACGACAAACAGACCTAAAATCGCTCATTGCATACTCTTCAATCAG CCACATGGCCCTCGTAGTAACAGCCATTCTCATCCAAACCCCCTGGAGC
SEQ descrição sequência
TTCACCGGCGCAGTCATTCTCATGATCGCCCACGGGCTTACATCCTCATT ACTATTCTGCCTAGCAAACTCAAACTACGAACGCACTCACAGTCGCATCA TGATCCTCTCTCAAGGACTTCAAACTCTACTCCCACTAATGGCTTTTTGGT GGCTTCTAGCAAGCCTCGCTAACCTCGCCTTACCCCCCACTATTAACCTA CTGGGAGAACTCTCTGTGCTAGTAACCACGTTCTCCTGGTCAAATATCAC TCTCCTACTTACAGGACTCAACATGCTAGTCACAGCCCTATACTCCCTCT ACATGTTTACCACAACACAATGGGGCTCACTCACCCACCACATTAACAAC ATGAAACCCTCATTCACACGAGAAAACACCCTCATGTTCATGCACCTATC CCCCATTCTCCTCCTATCCCTCAACCCCGACATCATTACCGGGTTTTCCT CTTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGC GAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTA GAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTT TTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCT CAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTAT ACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATG GGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACAC CACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAA GTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCT CAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCAT TTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATA CCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACAT GTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTC ACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATC TTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAA AGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCC ATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACA CAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGG GTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGT GAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCA CATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCA AGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGC AGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCC AAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGG CACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAA CATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAA CATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCC CAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTC TACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
72. OPA1-ND4- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA 3'UTR* GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG
GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
SEQ descrição sequência
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTAAAACTAATCGTCCCAAC AATTATGTTACTACCACTGACATGGCTTTCCAAAAAACACATGATTTGGATC AACACAACCACCCACAGCCTAATTATTAGCATCATCCCTCTACTATTTTTTA ACCAAATCAACAACAACCTATTTAGCTGTTCCCCAACCTTTTCCTCCGACC CCCTAACAACCCCCCTCCTAATGCTAACTACCTGGCTCCTACCCCTCACAA TCATGGCAAGCCAACGCCACTTATCCAGTGAACCACTATCACGAAAAAAA CTCTACCTCTCTATGCTAATCTCCCTACAAATCTCCTTAATTATGACATTCA CAGCCACAGAACTAATCATGTTTTATATCTTCTTCGAAACCACACTTATCCC CACCTTGGCTATCATCACCCGATGGGGCAACCAGCCAGAACGCCTGAAC GCAGGCACATACTTCCTATTCTACACCCTAGTAGGCTCCCTTCCCCTACTC ATCGCACTAATTTACACTCACAACACCCTAGGCTCACTAAACATTCTACTA CTCACTCTCACTGCCCAAGAACTATCAAACTCCTGGGCCAACAACTTAATG TGGCTAGCTTACACAATGGCTTTTATGGTAAAGATGCCTCTTTACGGACTC CACTTATGGCTCCCTAAAGCCCATGTCGAAGCCCCCATCGCTGGGTCAAT GGTACTTGCCGCAGTACTCTTAAAACTAGGCGGCTATGGTATGATGCGCC TCACACTCATTCTCAACCCCCTGACAAAACACATGGCCTACCCCTTCCTTG TACTATCCCTATGGGGCATGATTATGACAAGCTCCATCTGCCTACGACAAA CAGACCTAAAATCGCTCATTGCATACTCTTCAATCAGCCACATGGCCCTCG TAGTAACAGCCATTCTCATCCAAACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCAGTC ATTCTCATGATCGCCCACGGGCTTACATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCA AACTCAAACTACGAACGCACTCACAGTCGCATCATGATCCTCTCTCAAGGA CTTCAAACTCTACTCCCACTAATGGCTTTTTGGTGGCTTCTAGCAAGCCTC GCTAACCTCGCCTTACCCCCCACTATTAACCTACTGGGAGAACTCTCTGTG CTAGTAACCACGTTCTCCTGGTCAAATATCACTCTCCTACTTACAGGACTC AACATGCTAGTCACAGCCCTATACTCCCTCTACATGTTTACCACAACACAA TGGGGCTCACTCACCCACCACATTAACAACATGAAACCCTCATTCACACG AGAAAACACCCTCATGTTCATGCACCTATCCCCCATTCTCCTCCTATCCCT CAACCCCGACATCATTACCGGGTTTTCCTCTTAAGAGCACTGGGACGCCC ACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGA ACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGG TGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGC TCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATT ATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTA TTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTT GGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGA GTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAG TTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTG ACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAAC CATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTG GGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
73. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND4- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTGAAGCTGATCGTGCCC ACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACACATGATCT GGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCTCTGCT GTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCACCTTCA GCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCTGGCTGCT GCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGAGCCCCTG AGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAGATCTCTC TGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCTTTTTC GAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGGGGCAACC AGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACACCCTCGT GGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAACACCCTG GGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAGCTGAGCA ACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGGCCTTCAT GGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAAAGCTCAT GTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTGCTGCTG AAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGAATCCCC TGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTGGGGCAT GATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAGTCCCTG ATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCGCCATCC TGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGATGATTGC CCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGCAACTAC GAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGCAGACC CTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGCCAATCT GGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTC ACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCCTGAACA TGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACACAGTG GGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCACCCGC GAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCTGTCCCT GAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGGGACGCC CACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTG GAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATT CGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAA AATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAA GGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCA CCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTT CCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGC
SEQ descrição sequência
CCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGC TGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCC CTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCAC ACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCT GCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAA GCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCA TTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATAT AGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATA CCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCA CTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGC TGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCC CACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTG ATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGA GCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGT GGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCT CCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACA GGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATT CGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCA AAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCAC TTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAA CATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTC ACATTTGTAGAAGCTTT
74. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND4- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR* GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTGAAGCTGATCGTGCCC ACCATCATGCTGCTGCCTCTGACCTGGCTGAGCAAGAAACACATGATCT GGATCAACACCACCACGCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCTCTGCT GTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCACCTTCA GCAGCGACCCTCTGACAACACCTCTGCTGATGCTGACCACCTGGCTGCT GCCCCTCACAATCATGGCCTCTCAGAGACACCTGAGCAGCGAGCCCCTG AGCCGGAAGAAACTGTACCTGAGCATGCTGATCTCCCTGCAGATCTCTC TGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCTTTTTC GAGACAACGCTGATCCCCACACTGGCCATCATCACCAGATGGGGCAACC AGCCTGAGAGACTGAACGCCGGCACCTACTTTCTGTTCTACACCCTCGT GGGCAGCCTGCCACTGCTGATTGCCCTGATCTACACCCACAACACCCTG GGCTCCCTGAACATCCTGCTGCTGACACTGACAGCCCAAGAGCTGAGCA ACAGCTGGGCCAACAATCTGATGTGGCTGGCCTACACAATGGCCTTCAT GGTCAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCTAAAGCTCAT
SEQ descrição sequência
GTGGAAGCCCCTATCGCCGGCTCTATGGTGCTGGCTGCAGTGCTGCTG AAACTCGGCGGCTACGGCATGATGCGGCTGACCCTGATTCTGAATCCCC TGACCAAGCACATGGCCTATCCATTTCTGGTGCTGAGCCTGTGGGGCAT GATTATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGGCAGACCGATCTGAAGTCCCTG ATCGCCTACAGCTCCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTCACCGCCATCC TGATTCAGACCCCTTGGAGCTTTACAGGCGCCGTGATCCTGATGATTGC CCACGGCCTGACAAGCAGCCTGCTGTTTTGTCTGGCCAACAGCAACTAC GAGCGGACCCACAGCAGAATCATGATCCTGTCTCAGGGCCTGCAGACC CTCCTGCCTCTTATGGCTTTTTGGTGGCTGCTGGCCTCTCTGGCCAATCT GGCACTGCCTCCTACCATCAATCTGCTGGGCGAGCTGAGCGTGCTGGTC ACCACATTCAGCTGGTCCAATATCACCCTGCTGCTCACCGGCCTGAACA TGCTGGTTACAGCCCTGTACTCCCTGTACATGTTCACCACCACACAGTG GGGAAGCCTGACACACCACATCAACAATATGAAGCCCAGCTTCACCCGC GAGAACACCCTGATGTTCATGCATCTGAGCCCCATTCTGCTGCTGTCCCT GAATCCTGATATCATCACCGGCTTCTCCAGCTGAGAGCACTGGGACGCC CACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTG GAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATT CGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAA AATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAA GGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCA CCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTT CCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGC CCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGC TGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCC CTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCAC ACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCT GCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAA GCTGGACTGCCA
75. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND4*- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTGAAGCTGATCGTGCCC ACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCACATGATCT GGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCCCTGCT GTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCACCTTCA GCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTGGCTGC TGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGAGCCCC TGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCAGATCAG CCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCTTCT
SEQ descrição sequência
TCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTGGGGCAA CCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTACACCCTG GTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCACAACACCC TGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAGGAGCTGA GCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACCATGGCCTT CATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCCAAGGC CCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCCGCCGTGCT GCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTGATCCTGAA CCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGAGCCTGTGG GGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCGACCTGAAGA GCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTGACCG CCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGTGATCCTGAT GATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTGGCCAACAG CAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCCAGGGCCT GCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGGCCAGCCT GGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCGAGCTGAG CGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCTGCTGACC GGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATGTTCACCA CCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGAAGCCCA GCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCCCATCCT GCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGCTAAGAG CACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGT TGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGA TTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTA AATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGT GAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCT CCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACA CATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCA CACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAG CCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGC CTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGT TTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAG CTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCC TTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCA TTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGT TCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAG CCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTG TACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCAC GGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGC TGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAA TACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGT GCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTA
SEQ descrição sequência
CCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTT TTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAG GTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACT ACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATT TAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACAT CCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAG GTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTAC AACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
76. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND4*- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR* GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGCTGAAGCTGATCGTGCCC ACCATCATGCTGCTGCCCCTGACCTGGCTGAGCAAGAAGCACATGATCT GGATCAACACCACCACCCACAGCCTGATCATCAGCATCATCCCCCTGCT GTTCTTCAACCAGATCAACAACAACCTGTTCAGCTGCAGCCCCACCTTCA GCAGCGACCCCCTGACCACCCCCCTGCTGATGCTGACCACCTGGCTGC TGCCCCTGACCATCATGGCCAGCCAGCGCCACCTGAGCAGCGAGCCCC TGAGCCGCAAGAAGCTGTACCTGAGCATGCTGATCAGCCTGCAGATCAG CCTGATCATGACCTTCACCGCCACCGAGCTGATCATGTTCTACATCTTCT TCGAGACCACCCTGATCCCCACCCTGGCCATCATCACCCGCTGGGGCAA CCAGCCCGAGCGCCTGAACGCCGGCACCTACTTCCTGTTCTACACCCTG GTGGGCAGCCTGCCCCTGCTGATCGCCCTGATCTACACCCACAACACCC TGGGCAGCCTGAACATCCTGCTGCTGACCCTGACCGCCCAGGAGCTGA GCAACAGCTGGGCCAACAACCTGATGTGGCTGGCCTACACCATGGCCTT CATGGTGAAGATGCCCCTGTACGGCCTGCACCTGTGGCTGCCCAAGGC CCACGTGGAGGCCCCCATCGCCGGCAGCATGGTGCTGGCCGCCGTGCT GCTGAAGCTGGGCGGCTACGGCATGATGCGCCTGACCCTGATCCTGAA CCCCCTGACCAAGCACATGGCCTACCCCTTCCTGGTGCTGAGCCTGTGG GGCATGATCATGACCAGCAGCATCTGCCTGCGCCAGACCGACCTGAAGA GCCTGATCGCCTACAGCAGCATCAGCCACATGGCCCTGGTGGTGACCG CCATCCTGATCCAGACCCCCTGGAGCTTCACCGGCGCCGTGATCCTGAT GATCGCCCACGGCCTGACCAGCAGCCTGCTGTTCTGCCTGGCCAACAG CAACTACGAGCGCACCCACAGCCGCATCATGATCCTGAGCCAGGGCCT GCAGACCCTGCTGCCCCTGATGGCCTTCTGGTGGCTGCTGGCCAGCCT GGCCAACCTGGCCCTGCCCCCCACCATCAACCTGCTGGGCGAGCTGAG CGTGCTGGTGACCACCTTCAGCTGGAGCAACATCACCCTGCTGCTGACC GGCCTGAACATGCTGGTGACCGCCCTGTACAGCCTGTACATGTTCACCA CCACCCAGTGGGGCAGCCTGACCCACCACATCAACAACATGAAGCCCA GCTTCACCCGCGAGAACACCCTGATGTTCATGCACCTGAGCCCCATCCT
SEQ descrição sequência
GCTGCTGAGCCTGAACCCCGACATCATCACCGGCTTCAGCAGCTAAGAG CACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGT TGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGA TTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTA AATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGT GAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCT CCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACA CATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCA CACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAG CCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGC CTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGT TTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAG CTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCC TTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
77. OPA1-ND6- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA 3'UTR GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG
GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGATGTATGCTTTGTTTCTGT TGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTAAGCCTTCT CCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTCGGGTGTGT TATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGTTTTTTTAAT TTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGCGATGGCTA TTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGTCTTGGTGA GTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTGTGGGTGAA AGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTGTAGGAAGC TGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGAGGATCCTA TTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTAGTAGTTACT GGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATTGCTCGGGG GAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAG GCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGT TTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTT TTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCA GCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTT TATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACA TGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCAC ACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAG AAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCC CTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTG CATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACA
SEQ descrição sequência
ATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCA CATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCC TTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGC ATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCT AAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCAC CCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCT ACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGA AGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTG GGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCC TCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTT GCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACC TGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTG CCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCA GGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAA CAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAG ATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGC CCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGC TTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
78. OPA1-ND6- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA 3'UTR* GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG
GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGATGTATGCTTTGTTTCTGT TGAGTGTGGGTTTAGTAATGGGGTTTGTGGGGTTTTCTTCTAAGCCTTCT CCTATTTATGGGGGTTTAGTATTGATTGTTAGCGGTGTGGTCGGGTGTGT TATTATTCTGAATTTTGGGGGAGGTTATATGGGTTTAATGGTTTTTTTAAT TTATTTAGGGGGAATGATGGTTGTCTTTGGATATACTACAGCGATGGCTA TTGAGGAGTATCCTGAGGCATGGGGGTCAGGGGTTGAGGTCTTGGTGA GTGTTTTAGTGGGGTTAGCGATGGAGGTAGGATTGGTGCTGTGGGTGAA AGAGTATGATGGGGTGGTGGTTGTGGTAAACTTTAATAGTGTAGGAAGC TGGATGATTTATGAAGGAGAGGGGTCAGGGTTGATTCGGGAGGATCCTA TTGGTGCGGGGGCTTTGTATGATTATGGGCGTTGGTTAGTAGTAGTTACT GGTTGGACATTGTTTGTTGGTGTATATATTGTAATTGAGATTGCTCGGGG GAATTAGGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAG GCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGT TTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTT TTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCA GCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTT TATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACA TGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCAC
SEQ descrição sequência
ACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAG AAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCC CTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTG CATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACA ATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCA CATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
79. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND6- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGATGTACGCCCTGTTCCTG CTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAGCAAGCCC AGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGTGGTGGGC TGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCTGATGGTGT TCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTACACCACCGC CATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGGCGTGGAGG TGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGGGCCTGGTGC TGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGAACTTCAACA GCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCGGCCTGATCC GCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACGGCCGCTGG CTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGTACATCGTG ATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCC TTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAG AAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCA GTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCC AAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTT TCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCT GTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGT TCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGT GGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGT TCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTG ACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAA CCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACT GGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGC CAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTC CAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTT GGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGGA TACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTACTGTGG GTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGCTGTATTGAGA AGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAGCCCACAGAGCT
SEQ descrição sequência
CACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCCTGATATCTCCT GAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGC AGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGT TACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGT CTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTC GATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATTGGTC GGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCT AAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATCTGAA ATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAACATTGCATA GGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCCTTCACATTTGTA GAAGCTTT
80. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA opt_ND6- GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG 3'UTR* GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG
GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGATGTACGCCCTGTTCCTG CTGAGCGTGGGCCTGGTGATGGGCTTCGTGGGCTTCAGCAGCAAGCCC AGCCCCATCTACGGCGGCCTGGTGCTGATCGTGAGCGGCGTGGTGGGC TGCGTGATCATCCTGAACTTCGGCGGCGGCTACATGGGCCTGATGGTGT TCCTGATCTACCTGGGCGGCATGATGGTGGTGTTCGGCTACACCACCGC CATGGCCATCGAGGAGTACCCCGAGGCCTGGGGCAGCGGCGTGGAGG TGCTGGTGAGCGTGCTGGTGGGCCTGGCCATGGAGGTGGGCCTGGTGC TGTGGGTGAAGGAGTACGACGGCGTGGTGGTGGTGGTGAACTTCAACA GCGTGGGCAGCTGGATGATCTACGAGGGCGAGGGCAGCGGCCTGATCC GCGAGGACCCCATCGGCGCCGGCGCCCTGTACGACTACGGCCGCTGG CTGGTGGTGGTGACCGGCTGGACCCTGTTCGTGGGCGTGTACATCGTG ATCGAGATCGCCCGCGGCAACTAAGAGCACTGGGACGCCCACCGCCCC TTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAG AAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCA GTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCC AAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTT TCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCT GTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTTTTGGT TCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCCCAGCAGAGT GGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTGCTGTCTGTAGT TCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCCCCTTCCTTGTG ACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCACACATTCTCAA CCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACT GGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGC CA
SEQ descrição sequência
81. OPA1-ND1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGGACTGA 3'UTR GTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGCCATTGGGAG
GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGGCCAACCTCCTACTCCTCA TTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCGAACGAAAA ATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTAGGCCCCT ACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCACCAAAGA GCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACCGCCCCG ACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCCCCATGCC CAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTAGCCACCT CTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCATCAAACTC AAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAACAATCTCA TATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAATGAGTGG CTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCTGGTTAC TCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACACTAGCA GAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCCGAACTA GTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCCTATTCT TCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCACTACA ATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTACACAAC ATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGGATTCG AACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCTATGG AAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCTCCATG CCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGGGACG CCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTC TGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAA TTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCA AAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAA AGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCC ACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCT TCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATG CCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTG CTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCC CCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCA CACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGC TGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCA AGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGC ATTTCAGAACTCCAAGGAGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACAT ATAGACACTGTTGGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAA TACCAGCCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGT
SEQ descrição sequência
CACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAG GCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAACCAG CCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACATGTCCATCC TGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTGCAATGGCTTTAA GAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGT GTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTG CTCCCACGGGTCTACAGAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGA CAGGATGTTTTCGATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGG ATTCGATTGGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTC TCAAAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTG CACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGA GAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAACTTGTTACAGCC TTCACATTTGTAGAAGCTTT
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GGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGAGGGCCACTTCCTGG GTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGGGCTCACACGGGGGCTCCC GCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTGACCTCCCCGCCGGCGGGATGTG GCGACTACGTCGGGCCGCTGTGGCCTGATGGCCAACCTCCTACTCCTCA TTGTACCCATTCTAATCGCAATGGCATTCCTAATGCTTACCGAACGAAAA ATTCTAGGCTATATGCAACTACGCAAAGGCCCCAACGTTGTAGGCCCCT ACGGGCTACTACAACCCTTCGCTGACGCCATAAAACTCTTCACCAAAGA GCCCCTAAAACCCGCCACATCTACCATCACCCTCTACATCACCGCCCCG ACCTTAGCTCTCACCATCGCTCTTCTACTATGGACCCCCCTCCCCATGCC CAACCCCCTGGTCAACCTCAACCTAGGCCTCCTATTTATTCTAGCCACCT CTAGCCTAGCCGTTTACTCAATCCTCTGGTCAGGGTGGGCATCAAACTC AAACTACGCCCTGATCGGCGCACTGCGAGCAGTAGCCCAAACAATCTCA TATGAAGTCACCCTAGCCATCATTCTACTATCAACATTACTAATGAGTGG CTCCTTTAACCTCTCCACCCTTATCACAACACAAGAACACCTCTGGTTAC TCCTGCCATCATGGCCCTTGGCCATGATGTGGTTTATCTCCACACTAGCA GAGACCAACCGAACCCCCTTCGACCTTGCCGAAGGGGAGTCCGAACTA GTCTCAGGCTTCAACATCGAATACGCCGCAGGCCCCTTCGCCCTATTCT TCATGGCCGAATACACAAACATTATTATGATGAACACCCTCACCACTACA ATCTTCCTAGGAACAACATATGACGCACTCTCCCCTGAACTCTACACAAC ATATTTTGTCACCAAGACCCTACTTCTAACCTCCCTGTTCTTATGGATTCG AACAGCATACCCCCGATTCCGCTACGACCAACTCATGCACCTCCTATGG AAAAACTTCCTACCACTCACCCTAGCATTACTTATGTGGTATGTCTCCATG CCCATTACAATCTCCAGCATTCCCCCTCAAACCTAAGAGCACTGGGACG CCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCATGTTGTGGTAATTC TGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAGAACAAGATTATAAACGAA TTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCA
SEQ descrição sequência
AAATGCTCCCCAAATAAGAAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAA AGGAATTATTTTTCCCTTTGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCC ACCCTCTATTCTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCT TCCTCTTTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATG CCCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGATCTG CTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCGGAGCACCC CCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGTTTTCCCCACCCCA CACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACCAATAGCTAGGACCCGGC TGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCA AGCTGGACTGCCA
83. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGG opt_ND1- ACTGAGTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGC 3'UTR CATTGGGAGGGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGA
GGGCCACTTCCTGGGTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGG GCTCACACGGGGGCTCCCGCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTG ACCTCCCCGCCGGCGGGATGTGGCGACTACGTCGGGCCGCTGT GGCCTGATGGCCAACCTGCTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGAT CGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACCGAGCGCAAGATCCTGGGCT ACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTGGTGGGCCCCTACGG CCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTGTTCACCAAGG AGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACATCACC GCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTG CTGTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCT GTGGAGCGGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGC GCCCTGCGCGCCGTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCC TGGCCATCATCCTGCTGAGCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTC AACCTGAGCACCCTGATCACCACCCAGGAGCACCTGTGGCTGCT GCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATGTGGTTCATCAGCACCC TGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGGCCGAGGGCGA GAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCGCCGGC CCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCATG ATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGA CGCCCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGA CCCTGCTGCTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTAC CCCCGCTTCCGCTACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAA CTTCCTGCCCCTGACCCTGGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCA TGCCCATCACCATCAGCAGCATCCCCCCCCAGACCTAAGAGCAC
SEQ descrição sequência
TGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCAT GTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAG AACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGT TTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAAT GCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTT TGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCT GTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTT TTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCC CAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGAT CTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGG TTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATAC CAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCC ACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGT CCTCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGG AGTCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTT GGAAGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAG CCGGATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTC ACTACTGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTC AAGGCTGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGG CTAACCAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAA ATACATGTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCA CATGTGCAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATT TTGCAAGTTACCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATAC GGTTACCTGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTACA GAGTCCCATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTC GATTACTCAGTCTCCCAGGGCACTACTGGTCCGTAGGATTCGATT GGTCGGGGTAGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCA AAAATGTCTAAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTT TGCACTTATCTGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTA CTGTGGAGAACATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCTTCTACAA CTTGTTACAGCCTTCACATTTGTAGAAGCTTT
84. OPA1- GTGCTGCCCGCCTAGAAAGGGTGAAGTGGTTGTTTCCGTGACGG opt_ND1- ACTGAGTACGGGTGCCTGTCAGGCTCTTGCGGAAGTCCATGCGC 3'UTR* CATTGGGAGGGCCTCGGCCGCGGCTCTGTGCCCTTGCTGCTGA
GGGCCACTTCCTGGGTCATTCCTGGACCGGGAGCCGGGCTGGG GCTCACACGGGGGCTCCCGCGTGGCCGTCTCGGCGCCTGCGTG
SEQ descrição sequência
ACCTCCCCGCCGGCGGGATGTGGCGACTACGTCGGGCCGCTGT GGCCTGATGGCCAACCTGCTGCTGCTGATCGTGCCCATCCTGAT CGCCATGGCCTTCCTGATGCTGACCGAGCGCAAGATCCTGGGCT ACATGCAGCTGCGCAAGGGCCCCAACGTGGTGGGCCCCTACGG CCTGCTGCAGCCCTTCGCCGACGCCATCAAGCTGTTCACCAAGG AGCCCCTGAAGCCCGCCACCAGCACCATCACCCTGTACATCACC GCCCCCACCCTGGCCCTGACCATCGCCCTGCTGCTGTGGACCC CCCTGCCCATGCCCAACCCCCTGGTGAACCTGAACCTGGGCCTG CTGTTCATCCTGGCCACCAGCAGCCTGGCCGTGTACAGCATCCT GTGGAGCGGCTGGGCCAGCAACAGCAACTACGCCCTGATCGGC GCCCTGCGCGCCGTGGCCCAGACCATCAGCTACGAGGTGACCC TGGCCATCATCCTGCTGAGCACCCTGCTGATGAGCGGCAGCTTC AACCTGAGCACCCTGATCACCACCCAGGAGCACCTGTGGCTGCT GCTGCCCAGCTGGCCCCTGGCCATGATGTGGTTCATCAGCACCC TGGCCGAGACCAACCGCACCCCCTTCGACCTGGCCGAGGGCGA GAGCGAGCTGGTGAGCGGCTTCAACATCGAGTACGCCGCCGGC CCCTTCGCCCTGTTCTTCATGGCCGAGTACACCAACATCATCATG ATGAACACCCTGACCACCACCATCTTCCTGGGCACCACCTACGA CGCCCTGAGCCCCGAGCTGTACACCACCTACTTCGTGACCAAGA CCCTGCTGCTGACCAGCCTGTTCCTGTGGATCCGCACCGCCTAC CCCCGCTTCCGCTACGACCAGCTGATGCACCTGCTGTGGAAGAA CTTCCTGCCCCTGACCCTGGCCCTGCTGATGTGGTACGTGAGCA TGCCCATCACCATCAGCAGCATCCCCCCCCAGACCTAAGAGCAC TGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCGAGCAT GTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGGTTTAG AACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGACAGT TTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAGAAAT GCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTCCCTT TGAGGGTCTTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATTCT GTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCTT TTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGCC CAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGAT CTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTTGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGG TTTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATAC CAATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCC ACATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCA
SEQ descrição sequência
85. iniciador β-actina-S CGAGATCGTGCGGGACAT
86. iniciador β-actina-A CAGGAAGGAGGGCTGGAAC
87. iniciador ND4-S CTGCCTACGACAAACAGAC
88. iniciador ND4-A AGTGCGTTCGTAGTTTGAG
89. iniciador ND6-F ATGATGTATGCTTTGTTTCTG
90. iniciador ND6-R CTAATTCCCCCGAGCAATCTC
91. iniciador ND6-S AGTGTGGGTTTAGTAATG
92. iniciador ND6-A TGCCTCAGGATACTCCTC
93. iniciador β-actina-F CTCCATCCTGGCCTCGCTGT
94. iniciador β-actina-R GCTGTCACCTTCACCGTTCC
95. iniciador ND6-F GGGTTTTCTTCTAAGCCTTCTCC
96. iniciador ND6-R CCATCATACTCTTTCACCCACAG
97. iniciador opt_ND6-F CGCCTGCTGACCGGCTGCGT
98. opt_ND6-R CCAGGCCTCGGGGTACTCCT
99. iniciador ND1-F ATGGCCGCATCTCCGCACACT
100. iniciador ND1-R TTAGGTTTGAGGGGGAATGCT
101. iniciador ND1-F AACCTCAACCTAGGCCTCCTA
102. iniciador ND1-R TGGCAGGAGTAACCAGAGGTG
103. iniciador ND1-F AGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTG
104. iniciador ND1-R TTTTAGGGGCTCTTTGGTGAA
105. iniciador opt-ND1-F GCCGCCTGCTGACCGGCTGCGT
106. iniciador opt-ND1-R TGATGTACAGGGTGATGGTGCTGG
107. iniciador ND4-S GCCAACAGCAACTACGAGC
108. iniciador ND4-A TGATGTTGCTCCAGCTGAAG
SEQ descrição sequência
109. iniciador opt-ND4-S GCCTGACCCTGATCCTGAAC
110. iniciador opt-ND4-A GTGCGCTCGTAGTTGCTGTT
111. hsACO2 GGGCAGTGCCTCCCCGCCCCGCCGCTGGCGTCAAGTTCAGCTCC
ACGTGTGCCATCAGTGGATCCGATCCGTCCAGCCATGGCTTCCTA TTCCAAGATGGTGTGACCAGACATGCTTCCTGCTCCCCGCTTAGC CCACGGAGTGACTGTGGTTGTGGTGGGGGGGTTCTTAAAATAACT TTTTAGCCCCCGTCTTCCTATTTTGAGTTTGGTTCAGATCTTAAGC AGCTCCATGCAACTGTATTTATTTTTGATGACAAGACTCCCATCTA AAGTTTTTCTCCTGCCTGATCATTTCATTGGTGGCTGAAGGATTCT AGAGAACCTTTTGTTCTTGCAAGGAAAACAAGAATCCAAAACCAGT GACTGTTCTGTGA
112. hsATP5B GGGGTCTTTGTCCTCTGTACTGTCTCTCTCCTTGCCCCTAACCCAA
AAAGCTTCATTTTTCTGTGTAGGCTGCACAAGAGCCTTGATTGAAG ATATATTCTTTCTGAACAGTATTTAAGGTTTCCAATAAAATGTACAC CCCTCAG
113. hsAK2 TGTTGGGTCCAAGAAGGAATTTCTTTCCATCCCTGTGAGGCAATG
GGTGGGAATGATAGGACAGGCAAAGAGAAGCTTCCTCAGGCTAG CAAAAATATCATTTGATGTATTGATTAAAAAAGCACTTGCTTGATGT ATCTTTGGCGTGTGTGCTACTCTCATCTGTGTGTATGTGTGTTGTG TGTGTGTGTGTGTGCATGCACATATGTGTTCACTCTGCTACTTTGT AAGTTTTAGGCTAGGTTGCTTTACCAGCTGTTTACTTCTTTTTTGTT GTTGTTTTGAGACAAGGTTTCGCTCTGCCACCCTGGCTGGAGTGC AGTGGCGTGATCTTGGCTCACGGCAACCTCTGCCTCCTGGGGCT CAAGCAATTATCCCACCTCAGCCTCCTGAGCAGCTGGGACTACAG GTGCATGCCACAACACCTGGCTGATATTTGTATTTTTTGTAGAGAC AGGATTTTGCCAAGTTGCCCAGGCTGGTCTTGAACTCCTAGGCTT AAGCAATCCACCCACCTTGGCCTCCTGAAGTGCCAGGATCACAGA CGTGAGCCACTACACCCAGCCCAGCTGTTTACTTCTTTAACCATAC TTTTGATTTTATTTTTTGACCAAAATGAACTAACCCAGGTAATCTTC CAGGGACCGCAATTCCAGAACCTCATAGTATTTCTTCCATTTCCAG CAGCTGATTAGAAGTCCAGGATCATGTGAAGTCAGGCAGGGTCAC AGTTCCTGATGGCACATTATGGACAGAGAATTCCATTTTGTTTTCT AACCCATGATGAAAACCCACGTGAGTCAGTGTGTGAACAGGGATC ATTAATTTTTTCCCCCTAGGTGGAAGGAAAAAGGCACTTACTTTGC AGGTTACAGAAATTACTGGGAGAGGATATCGTCATAAAAAGAGCC AGGCCAAATTGGAATATTTTTGTGATCTGCATCATGATGCTGAAAA TAGCAATTATTTGGGAATTGGGTTTGAAAACTGAATTGTTGCCAGA GAATTAAACCAGGTGAAAGGTCCTTTTGAATTCAGATTGTCTTCTG
SEQ descrição sequência
AACATCCAGGCTGATCATCTGAGAGCAGTCAAATCTACTTCCCCA AAAAGAGACCAGGGTAGGTTTATTTGCTTTTATTTTTAATGTTTGCC TGTGTTTCCAAGTGTGAACAAAACAGTGTGTGATCTATTCTTGGAT TCATTTTGATCAGTATTTATTCAAACCCAGTCTCTCTCCAGGACATA AAACTGAAATCAGATATGTTCTTTTTAAGCCCAAACCCTCTCCTTTC TAGATCCAACCCTTCACCCCTAATTTTATGATGGCTATAGCCATGG ACTTCCCCAAGAAAAGATCACCCAGAAATAAGACCACCTGTGACA GTTACCAGCTTTTATTCATAACCTTAGCTTCCCAACTATTGAGCATT TTCTAAGGTCCCTGCTGTCTTTTGGTCTCTGGTTTGATTTGTGGCA AACAGATGAAGTAACAGACTGCTATGAAGGACCACAAAAACGGCA GCCTCTGGAAAAACCATTAGAAAGTCAGTGGCAGATCCAGTAAAT AATATCGCCAGCCTCAGCATAATCTGCTGCTGACTCGATTCAGTG GACTCTAAAGTGCCCAGCCTCCTGACCTGAGCTCTCCTGCCATCT GTGAGACTACCAGAGGTCTTATCTGCTGTCCACATGGCAACTGGG CATGAGTACCTGGCCACCTTGCTTCCCTCTTTGCCTGGTCCAAGT GAGTGTCTGCTGCCTCTGTCCTGCCTTGTTTTCCTGGCTCTAAAC CAACTCCACCCACTCTTAATGGAAACTCAGTCTGGCTTTGTGTGTT TCTGGGAAGCACATGACTTCTGGGAATGGGCAAGGAAGAGGAGT GAAACAAAAACTGTCAGCTATGTGTGCCTGGTCTGGGATCCTTCT CTGGGTGACAGTGGCATCATGAATCTTAGAATCAGCTCCCC
114. hsALDH2 GAATCATGCAAGCTTCCTCCCTCAGCCATTGATGGAAAGTTCAGC
AAGATCAGCAACAAAACCAAGAAAAATGATCCTTGCGTGCTGAATA TCTGAAAAGAGAAATTTTTCCTACAAAATCTCTTGGGTCAAGAAAG TTCTAGAATTTGAATTGATAAACATGGTGGGTTGGCTGAGGGTAA GAGTATATGAGGAACCTTTTAAACGACAACAATACTGCTAGCTTTC AGGATGATTTTTAAAAAATAGATTCAAATGTGTTATCCTCTCTCTGA AACGCTTCCTATAACTCGAGTTTATAGGGGAAGAAAAAGCTATTGT TTACAATTATATCACCATTAAGGCAACTGCTACACCCTGCTTTGTA TTCTGGGCTAAGATTCATTAAAAACTAGCTGCTCTTAACTTACA
115. hsCOX10 GAGCACTGGGACGCCCACCGCCCCTTTCCCTCCGCTGCCAGGCG
AGCATGTTGTGGTAATTCTGGAACACAAGAAGAGAAATTGCTGGG TTTAGAACAAGATTATAAACGAATTCGGTGCTCAGTGATCACTTGA CAGTTTTTTTTTTTTTTAAATATTACCCAAAATGCTCCCCAAATAAG AAATGCATCAGCTCAGTCAGTGAATACAAAAAAGGAATTATTTTTC CCTTTGAGGGTCTTTATACATCTCTCCTCCAACCCCACCCTCTATT CTGTTTCTTCCTCCTCACATGGGGGTACACATACACAGCTTCCTCT TTTGGTTCCATCCTTACCACCACACCACACGCACACTCCACATGC CCAGCAGAGTGGCACTTGGTGGCCAGAAAGTGTGAGCCTCATGA TCTGCTGTCTGTAGTTCTGTGAGCTCAGGTCCCTCAAAGGCCTCG GAGCACCCCCTTCCTGGTGACTGAGCCAGGGCCTGCATTTTTGGT
SEQ descrição sequência
TTTCCCCACCCCACACATTCTCAACCATAGTCCTTCTAACAATACC AATAGCTAGGACCCGGCTGCTGTGCACTGGGACTGGGGATTCCA CATGTTTGCCTTGGGAGTCTCAAGCTGGACTGCCAGCCCCTGTCC TCCCTTCACCCCCATTGCGTATGAGCATTTCAGAACTCCAAGGAG TCACAGGCATCTTTATAGTTCACGTTAACATATAGACACTGTTGGA AGCAGTTCCTTCTAAAAGGGTAGCCCTGGACTTAATACCAGCCGG ATACCTCTGGCCCCCACCCCATTACTGTACCTCTGGAGTCACTAC TGTGGGTCGCCACTCCTCTGCTACACAGCACGGCTTTTTCAAGGC TGTATTGAGAAGGGAAGTTAGGAAGAAGGGTGTGCTGGGCTAAC CAGCCCACAGAGCTCACATTCCTGTCCCTTGGGTGAAAAATACAT GTCCATCCTGATATCTCCTGAATTCAGAAATTAGCCTCCACATGTG CAATGGCTTTAAGAGCCAGAAGCAGGGTTCTGGGAATTTTGCAAG TTATCCTGTGGCCAGGTGTGGTCTCGGTTACCAAATACGGTTACC TGCAGCTTTTTAGTCCTTTGTGCTCCCACGGGTCTGCAGAGTCCC ATCTGCCCAAAGGTCTTGAAGCTTGACAGGATGTTTTCATTACTCA GTCTCCCAGGGCACTGCTGGTCCGTAGGGATTCATTGGTCGGGG TGGGAGAGTTAAACAACATTTAAACAGAGTTCTCTCAAAAATGTCT AAAGGGATTGTAGGTAGATAACATCCAATCACTGTTTGCACTTATC TGAAATCTTCCCTCTTGGCTGCCCCCAGGTATTTACTGTGGAGAA CATTGCATAGGAATGTCTGGAAAAAGCCTCTACAACTTGTTACAGC CTTCACATTTGTACAATTCATTGATTCTCTTTTCCTTCCACAATAAA ATGGTATACAAGAAC
116. hsUQCRFS1 GAGACTTGGACTCAAGTCATAGGCTTCTTTCAGTCTTTATGTCACC
TCAGGAGACTTATTTGAGAGGAAGCCTTCTGTACTTGAAGTTGATT TGAAATATGTAAGAATTGATGATGTATTTGCAAACATTAATGTGAAA TAAATTGAATTTAATGTTGAATACTTTCAGGCATTCACTTAATAAAG ACACTGTTAAGCACTGTTATGCTCAGTCATACACGCGAAAGGTAC AATGTCTTTTAGCTAATTCTAATTAAAAATTACAGACTGGTGTACAA GATACTTGTG
117. hsNDUFV1 CCCACCACCCTGGCCTGCTGTCCTGCGTCTATCCATGTGGAATGC
TGGACAATAAAGCGAGTGCTGCCCACCCTCCAGCTGCC
118. hsNDUFV2 TTTATATTGAACTGTAAATATGTCACTAGAGAAATAAAATATGGACT
TCCAATCTACGTAAACTTA
119. hsSOD2 ACCACGATCGTTATGCTGAGTATGTTAAGCTCTTTATGACTGTTTT
TGTAGTGGTATAGAGTACTGCAGAATACAGTAAGCTGCTCTATTGT AGCATTTCTTGATGTTGCTTAGTCACTTATTTCATAAACAACTTAAT GTTCTGAATAATTTCTTACTAAACATTTTGTTATTGGGCAAGTGATT GAAAATAGTAAATGCTTTGTGTGATTGA
SEQ descrição sequência
120. hsCOX6c TCTTGGAATATAAAGAATTTCTTCAGGTTGAATTACCTAGAAGTTTG
TCACTGACTTGTGTTCCTGAACTATGACACATGAATATGTGGGCTA AGAAATAGTTCCTCTTGATAAATAAACAATTAACAAATACTTTGGAC AGTAAGTCTTTCTCAGTTCTTAATGATAATGCAGGGCACTTACTAG CATAAGAATTGGTTTGGGATTTAACTGTTTATGAAGCTAACTTGATT TCCGTGTTTTGTTAAAATTTCATTGTTCTAGCACATCTTTAACTGTG ATAGTT
121. hsIRP1 GAGACGTGCACTTGGTCGTGCGCCCAGGGAGGAAGCCGCACCAC
CAGCCAGCGCAGGCCCTGGTGGAGAGGCCTCCCTGGCTGCCTCT GGGAGGGGTGCTGCCTTGTAGATGGAGCAAGTGAGCACTGAGGG TCTGGTGCCAATCCTGTAGGCACAAAACCAGAAGTTTCTACATTCT CTATTTTTGTTAATCATCTTCTCTTTTTCCAGAATTTGGAAGCTAGA ATGGTGGGAATGTCAGTAGTGCCAGAAAGAGAGAACCAAGCTTGT CTTTAAAGTTACTGATCACAGGACGTTGCTTTTTCACTGTTTCCTAT TAATCTTCAGCTGAACACAAGCAAACCTTCTCAGGAGGTGTCTCCT ACCCTCTTATTGTTCCTCTTACGCTCTGCTCAATGAAACCTTCCTC TTGAGGGTCATTTTCCTTTCTGTATTAATTATACCAGTGTTAAGTGA CATAGATAAGAACTTTGCACACTTCAAATCAGAGCAGTGATTCTCT CTTCTCTCCCCTTTTCCTTCAGAGTGAATCATCCAGACTCCTCATG GATAGGTCGGGTGTTAAAGTTGTTTTGATTATGTACCTTTTGATAG ATCCACATAAAAAGAAATGTGAAGTTTTCTTTTACTATCTTTTCATT TATCAAGCAGAGACCTTTGTTGGGAGGCGGTTTGGGAGAACACAT TTCTAATTTGAATGAAATGAAATCTATTTTCAGTG
122. hsMRPS12 CAGAAGAAGTGACGGCTGGGGGCACAGTGGGCTGGGCGCCCCT
GCAGAACATGAACCTTCCGCTCCTGGCTGCCACAGGGTCCTCCG ATGCTGGCCTTTGCGCCTCTAGAGGCAGCCACTCATGGATTCAAG TCCTGGCTCCGCCTCTTCCATCAGGACCACT
123. hsATP5J2 AGAGGACACACTCTGCACCCCCCCACCCCACGACCTTGGCCCGA
GCCCCTCCGTGAGGAA
124. rnSOD2 AGCCCTTCCGCCAGGCTGTGTGTCAGGCCCGTGGTGGGTGTTTT
GTAGTAGTGTAGAGCATTGCA
125. hsOXA1L CTTATGTTCTGTGCGCATTCTGGCAGGAATTCTGTCTCTTCAGAGA
CTCATCCTCAAAACAAGACTTGACACTGTGTCCTTGCCCCAGTCCT AGGAACTGTGGCACACAGAGATGTTCATTTTAAAAACGGATTTCAT GAAACACTCTTGTACTTATGTTTATAAGAGAGCACTGGGTAGCCAA GTGATCTTCCCATTCACAGAGTTAGTAAACCTCTGTACTACATGCT G
SEQ descrição sequência
126. MTS-COX10 MAASPHTLSSRLLTGCVGGSVWYLERRT
127. MTS-COX8 MSVLTRLLLRGLTRLGSAAPVRRARIHSL
128. MTS-OPA1 MWRLRRAAVA
129. hsCOX10 MAASPHTLSSRLLTGCVGGSVWYLERRT
130. scRPM2 MAFKSFIYSKGYHRSAAQKKTATSFFDSSYQYLRQNQGLVNSDPVLH
ASHLHPHPVVVANVNYNNVDDILHPHDLDSSINNTNNPLTHEELLYNQ NVSLRSLKQQQSTNYVNNNNNNQHRYY
131. lcSirt5 MRKRSLRCHLWSANASLSPRKDEVTSRKESENLVKGKKNKKSHLHL
LLFTASKIGTDSVFDVQKSKECCKELGLLFTSLIHSIGSFPFDEEPKAA AVFLPGSLPQLTVLVLAPGSGSCPTGKSTPHLAASGRNAELLRPQNS MIVRQFTCRGTISSHLCAHLRKPHDSRNMARP
132. tbNDUS7 MLRRTSFNFTGRAMISRGSPEWSHRLDLKKGKKTTMMHKLGTSKPN
NALQYAQMTL
133. ncQCR2 MISRSALSRGSQLALRRPAAAKTAQRGFAAAAASPAASYEPTTIAG
134. hsATP5G2 MPELILYVAITLSVAERLVGPGHACAEPSFRSSRCSAPLCLLCSGSSS
PATAPHPLKMFACSKFVSTPSLVKSTSQLLSRPLSAVVLKRPEILTDE SLSSLAVSCPLTSLVSSRSFQTSAISRDIDTA
135. hsLACTB MYRLMSAVTARAAAPGGLASSCGRRGVHQRAGLPPLGHGWVGGL
GLGLGLALGVKLAGGLRGAAPAQSPAAPDPEASPLAEPPQEQSLAP WSPQTPAPPCSRCFARAIESSRDLL
136. spilv1 MTVLAPLRRLHTRAAFSSYGREIALQKRFLNLNSCSAVRRYGTGFSN
NLRIKKLKNAFGVVRANSTKSTSTVTTASPIKYDSSFVGKTGGEIFHD MMLKHNVKHVFGYPGGAILPVFDAIYRSPHFEFILPRHEQAAGHA
137. gmCOX2 MILCPLEAFIVQHILTISVMGLLSCFRSTVLRKCSKGSSGMSRFLYTNN
FQRNLISSGGNESYYGYFNRRSYTSLYMGTGTVGGITSARIRVPNVG CEGFMCSSHLSITQRNSRLIHSTSKIVPN
138. crATP6 MALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGSLQSVE
NHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKSRSGLR TGSMVPFAAQQAMNM
139. hsOPA1 MWRLRRAAVACEVCQSLVKHSSGIKGSLPLQKLHLVSRSIYHSHHPT
LKLQRPQLRTSFQQFSSLTNLPLRKLKFSPIKYGYQPRRN
SEQ descrição sequência
140. hsSDHD MAVLWRLSAVCGALGGRALLLRTPVVRPAHISAFLQDRPIPEWCGVQ
HIHLSPSHH
141. hsADCK3 MAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAV
EQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFS SASAPDQSAPPSLGHAHSEGPAPAYVASGPFREAGFPGQASSPLGR ANGRLFANPRDSFSAMGFQRRF
142. osP0644B06.24-2 MALLLRHSPKLRRAHAILGCERGTVVRHFSSSTCSSLVKEDTVSSSN
LHPEYAKKIGGSDFSHDRQSGKELQNFKVSPQEASRASNFMRASKY GMPITANGVHSLFSCGQVVPSRCF
143. Neurospora crassa MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR ATP9 (ncATP9) TQMTSIVNATTRQAFQKRA
144. hsGHITM MLAARLVCLRTLPSRVFHPAFTKASPVVKNSITKNQWLLTPSRE
145. hsNDUFAB1 MASRVLSAYVSRLPAAFAPLPRVRMLAVARPLSTALCSAGTQTRLGT
LQPALVLAQVPGRVTQLCRQY
146. hsATP5G3 MFACAKLACTPSLIRAGSRVAYRPISASVLSRPEASRTGEGSTVFNG
AQNGVSQLIQREFQTSAISR
147. crATP6 _hsADCK3 MALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGSLQSVE
NHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKSRSGLR TGSMVPFAAQQAMNMGGMAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQH LGIGGELIMAARALQSTAVEQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPE GEFHFSVPHAAGASTDFSSASAPDQSAPPSLGHAHSEGPAPAYVAS GPFREAGFPGQASSPLGRANGRLFANPRDSFSAMGFQRRFGG
148. ncATP9_ncATP9 MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR
TQMTSIVNATTRQAFQKRAMASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVR VAQVSKRTIQTGSPLQTLKRTQMTSIVNATTRQAFQKRA
149. zmLOC100282174 MALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNP
HADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHARGLLPRHWSHASPLSTSS SSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPY
150. ncATP9_zmLOC10 MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR 0282174_spilv1_nc TQMTSIVNATTRQAFQKRAMALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSL ATP9 LSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHA
RGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPYMTV LAPLRRLHTRAAFSSYGREIALQKRFLNLNSCSAVRRYGTGFSNNLRI KKLKNAFGVVRANSTKSTSTVTTASPIKYDSSFVGKTGGEIFHDMMLK
SEQ descrição sequência
HNVKHVFGYPGGAILPVFDAIYRSPHFEFILPRHEQAAGHAMASTRVL ASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKRTQMTSIV NATTRQAFQKRA
151. zmLOC100282174_ MALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNP hsADCK3_crATP6 HADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHARGLLPRHWSHASPLSTSS _hsATP5G3 SSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPYMAAILGDTIMVAKGLVKLTQAA
VETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAVEQIGMFLGKVQGQDKHEEYFA ENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFSSASAPDQSAPPSLGHAHSEGP APAYVASGPFREAGFPGQASSPLGRANGRLFANPRDSFSAMGFQR RFMALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGSLQS VENHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKSRSG LRTGSMVPFAAQQAMNMMFACAKLACTPSLIRAGSRVAYRPISASVL SRPEASRTGEGSTVFNGAQNGVSQLIQREFQTSAISR
152. zmLOC100282174_ MALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNP hsADCK3_hsATP5 HADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHARGLLPRHWSHASPLSTSS G3 SSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPYMAAILGDTIMVAKGLVKLTQAA
VETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAVEQIGMFLGKVQGQDKHEEYFA ENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFSSASAPDQSAPPSLGHAHSEGP APAYVASGPFREAGFPGQASSPLGRANGRLFANPRDSFSAMGFQR RFMFACAKLACTPSLIRAGSRVAYRPISASVLSRPEASRTGEGSTVFN GAQNGVSQLIQREFQTSAISR
153. ncATP9_zmLOC10 MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR 0282174 TQMTSIVNATTRQAFQKRAMALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSL
LSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHA RGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPY
154. hsADCK3_zmLOC1 MAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAV 00282174_crATP6 EQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFS _hsATP5G3 SASAPDQSAPPSLGHAHSEGPAPAYVASGPFREAGFPGQASSPLGR
ANGRLFANPRDSFSAMGFQRRFMALLRAAVSELRRRGRGALTPLPA LSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPE LLHARGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARP YMALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGSLQSV ENHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKSRSGL RTGSMVPFAAQQAMNMMFACAKLACTPSLIRAGSRVAYRPISASVLS RPEASRTGEGSTVFNGAQNGVSQLIQREFQTSAISR
155. crATP6 MALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGSLQSVE _hsADCK3_zmLOC NHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKSRSGLR 100282174_hsATP TGSMVPFAAQQAMNMMAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQHLGI
SEQ descrição sequência 5G3 GGELIMAARALQSTAVEQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPEGE
FHFSVPHAAGASTDFSSASAPDQSAPPSLGHAHSEGPAPAYVASGP FREAGFPGQASSPLGRANGRLFANPRDSFSAMGFQRRFMALLRAAV SELRRRGRGALTPLPALSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVI ALRRCPPLPASAVLAPELLHARGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADK AQLTWVDKWIPEAARPYMFACAKLACTPSLIRAGSRVAYRPISASVLS RPEASRTGEGSTVFNGAQNGVSQLIQREFQTSAISR
156. hsADCK3_zmLOC1 MAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAV 00282174 EQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFS
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157. hsADCK3_zmLOC1 MAAILGDTIMVAKGLVKLTQAAVETHLQHLGIGGELIMAARALQSTAV 00282174_crATP6 EQIGMFLGKVQGQDKHEEYFAENFGGPEGEFHFSVPHAAGASTDFS
SASAPDQSAPPSLGHAHSEGPAPAYVASGPFREAGFPGQASSPLGR ANGRLFANPRDSFSAMGFQRRFGGMALLRAAVSELRRRGRGALTPL PALSSLLSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLA PELLHARGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAA RPYGGMALQQAAPRVFGLLGRAPVALGQSGILTGSSGFKNQGFNGS LQSVENHVYAQAFSTSSQEEQAAPSIQGASGMKLPGMAGSMLLGKS RSGLRTGSMVPFAAQQAMNMGG
158. ncATP9_zmLOC10 MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR 0282174_spilv1_G TQMTSIVNATTRQAFQKRAMALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSL NFP_ncATP9 LSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHA
RGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPYMTV LAPLRRLHTRAAFSSYGREIALQKRFLNLNSCSAVRRYGTGFSNNLRI KKLKNAFGVVRANSTKSTSTVTTASPIKYDSSFVGKTGGEIFHDMMLK HNVKHVFGYPGGAILPVFDAIYRSPHFEFILPRHEQAAGHAVSGEGD ATYGKLTLKFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDF FKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFK EDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIKVNFKIRHNIEDGSVQLA DHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEMASTRVLASRLAS QMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKRTQMTSIVNATTRQ AFQKRA
159. ncATP9_zmLOC10 MASTRVLASRLASQMAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKR 0282174_spilv1_lcS TQMTSIVNATTRQAFQKRAMALLRAAVSELRRRGRGALTPLPALSSL
SEQ descrição sequência irt5_osP0644B06.2 LSSLSPRSPASTRPEPNNPHADRRHVIALRRCPPLPASAVLAPELLHA 4- RGLLPRHWSHASPLSTSSSSSRPADKAQLTWVDKWIPEAARPYMTV 2_hsATP5G2_ncAT LAPLRRLHTRAAFSSYGREIALQKRFLNLNSCSAVRRYGTGFSNNLRI P9 KKLKNAFGVVRANSTKSTSTVTTASPIKYDSSFVGKTGGEIFHDMMLK
HNVKHVFGYPGGAILPVFDAIYRSPHFEFILPRHEQAAGHAMRKRSL RCHLWSANASLSPRKDEVTSRKESENLVKGKKNKKSHLHLLLFTASK IGTDSVFDVQKSKECCKELGLLFTSLIHSIGSFPFDEEPKAAAVFLPGS LPQLTVLVLAPGSGSCPTGKSTPHLAASGRNAELLRPQNSMIVRQFT CRGTISSHLCAHLRKPHDSRNMARPMALLLRHSPKLRRAHAILGCER GTVVRHFSSSTCSSLVKEDTVSSSNLHPEYAKKIGGSDFSHDRQSGK ELQNFKVSPQEASRASNFMRASKYGMPITANGVHSLFSCGQVVPSR CFMPELILYVAITLSVAERLVGPGHACAEPSFRSSRCSAPLCLLCSGS SSPATAPHPLKMFACSKFVSTPSLVKSTSQLLSRPLSAVVLKRPEILT DESLSSLAVSCPLTSLVSSRSFQTSAISRDIDTAMASTRVLASRLASQ MAASAKVARPAVRVAQVSKRTIQTGSPLQTLKRTQMTSIVNATTRQA FQKRA
160. ND4 MLKLIVPTIMLLPLTWLSKKHMIWINTTTHSLIISIIPLLFFNQINNNLFSC
SPTFSSDPLTTPLLMLTTWLLPLTIMASQRHLSSEPLSRKKLYLSMLIS LQISLIMTFTATELIMFYIFFETTLIPTLAIITRWGNQPERLNAGTYFLFYT LVGSLPLLIALIYTHNTLGSLNILLLTLTAQELSNSWANNLMWLAYTMA FMVKMPLYGLHLWLPKAHVEAPIAGSMVLAAVLLKLGGYGMMRLTLI LNPLTKHMAYPFLVLSLWGMIMTSSICLRQTDLKSLIAYSSISHMALVV TAILIQTPWSFTGAVILMIAHGLTSSLLFCLANSNYERTHSRIMILSQGL QTLLPLMAFWWLLASLANLALPPTINLLGELSVLVTTFSWSNITLLLTG LNMLVTALYSLYMFTTTQWGSLTHHINNMKPSFTRENTLMFMHLSPIL LLSLNPDIITGFSS
161. ND6 MMYALFLLSVGLVMGFVGFSSKPSPIYGGLVLIVSGVVGCVIILNFGG
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162. ND1 MANLLLLIVPILIAMAFLMLTERKILGYMQLRKGPNVVGPYGLLQPFAD
AIKLFTKEPLKPATSTITLYITAPTLALTIALLLWTPLPMPNPLVNLNLGL LFILATSSLAVYSILWSGWASNSNYALIGALRAVAQTISYEVTLAIILLST LLMSGSFNLSTLITTQEHLWLLLPSWPLAMMWFISTLAETNRTPFDLA EGESELVSGFNIEYAAGPFALFFMAEYTNIIMMNTLTTTIFLGTTYDAL SPELYTTYFVTKTLLLTSLFLWIRTAYPRFRYDQLMHLLWKNFLPLTLA LLMWYVSMPITISSIPPQT VÍRUS ADENOASSOCIADO (AAV)
[067] Vírus adenoassociado (AAV) é um vírus pequeno que infecta seres humanos e algumas outras espécies de primata. As composições divulgadas no presente documento compreendem primeiramente um genoma de vírus adenoassociado (AAV) ou um derivado do mesmo.
[068] Um genoma de AAV é uma sequência de polinucleotídeos que codifica funções necessárias para a produção de uma partícula viral AAV. Estas funções incluem aquelas que operam no ciclo de replicação e encapsulamento para AAV numa célula hospedeira, incluindo encapsidação do genoma de AAV numa partícula viral AAV. Os vírus AAV de ocorrência natural são deficientes em replicação e se baseiam na provisão de funções auxiliares em para conclusão de um ciclo de replicação e encapsulamento. Consequentemente, o genoma de AAV do vetor da invenção é tipicamente deficiente em replicação.
[069] O genoma de AAV pode ser uma forma de fita simples, sentido positivo ou negativo, ou, alternativamente, na forma de fita dupla. O uso de uma forma de fita dupla permite pular a etapa de replicação de DNA na célula-alvo e, assim, pode acelerar a expressão de transgene.
[070] O genoma de AAV pode ser de qualquer serotipo ou isolado ou Clado de derivação natural de AAV. Assim, o genoma de AAV pode ser o genoma completo de um vírus AAV de ocorrência natural. Conforme é conhecido pela pessoa versada, os vírus AAV que ocorrem na natureza podem ser classificados de acordo com os vários sistemas biológicos.
[071] Comumente, os vírus AAV são referidos em termos de seu serotipo. Um serotipo corresponde a uma subespécie variante de AAV que, devido a seu perfil de expressão de antígenos de superfície de capsídeo, possui uma reatividade distintiva que pode ser usada para distinguir a mesma de outra subespécie variante. Tipicamente, um vírus que possui um serotipo de AAV particular não reage eficazmente com anticorpos neutralizantes específicos para qualquer outro serotipo de AAV. Os serotipos de AAV incluem AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 e AAV16, também serotipos recombinantes, tal como Rec2 e Rec3, recentemente identificado a partir do cérebro de primata.
[072] Um serotipo preferencial de AAV para uso na invenção é AAV2. Outros serotipos de interesse particular para uso na invenção incluem AAV4, AAV5 e AAV8, que transduzem eficazmente o tecido no olho, tal como o epitélio pigmentado da retina. O serotipo de AAV que é usado pode ser um serotipo de AAV que não é AAV4. Análises de serotipos de AAV podem ser encontradas em Choi et al (Curr Gene Ther. 2005; 5(3); 299-310) e Wu et al (Molecular Therapy. 2006; 14(3), 316-327). As sequências de genomas de AAV ou de elementos de genomas de AAV, incluindo sequências de ITR, genes de rep ou cap para uso na invenção podem ser derivadas dos seguintes números de aceso para sequências de genoma inteiro de AAV: vírus adenoassociado 1 NC_002077, AF063497; vírus adenoassociado 2 NC_001401; vírus adenoassociado 3 NC_001729; vírus adenoassociado 3B NC_001863; vírus adenoassociado 4 NC_001829; vírus adenoassociado 5 Y18065, AF085716; vírus adenoassociado 6 NC_001862; AAV Aviário ATCC VR-865 AY186198, AY629583, NC_004828; AAV Aviário cepa DA-1 NC_006263, AY629583; AAV Bovino NC_005889, AY388617.
[073] Os vírus AAV podem ser também referidos em termos de clados ou clones. Isto se refere à relação filogenética de vírus AAV de derivação natural e tipicamente a um grupo filogenético de vírus AAV que podem ser rastreados de volta a um ancestral comum, e inclui todos os descendentes do mesmo. Adicionalmente, os vírus AAV podem ser também referidos em termos de um isolado específico, isto é, um isolado genético de um vírus AAV específico encontrado na natureza. O termo Isolado genético descreve uma população de vírus AAV que passou por mistura genética limitada com outros vírus de ocorrência natural, definindo, assim, uma população reconhecidamente distinta num nível genético.
[074] Os exemplos de clados e isolados de AAV que podem ser usados na invenção incluem: Clado A: AAV1 NC_002077, AF063497, AAV6 NC_001862, Hu. 48 AY530611, Hu 43 AY530606, Hu 44 AY530607, Hu 46 AY530609; Clado B: Hu. 19 AY530584, Hu. 20 AY530586, Hu 23 AY530589, Hu22 AY530588, Hu24 AY530590, Hu21 AY530587, Hu27 AY530592, Hu28 AY530593, Hu 29 AY530594, Hu63 AY530624, Hu64 AY530625, Hu13 AY530578, Hu56 AY530618, Hu57 AY530619, Hu49 AY530612, Hu58 AY530620, Hu34 AY530598, Hu35 AY530599, AAV2 NC_001401, Hu45 AY530608, Hu47 AY530610, Hu51 AY530613, Hu52 AY530614, Hu T41 AY695378, Hu S17 AY695376, Hu T88 AY695375, Hu T71 AY695374, Hu T70 AY695373, Hu T40 AY695372, Hu T32 AY695371, Hu T17 AY695370, Hu LG15 AY695377; Clado C: Hu9 AY530629, Hu10 AY530576, Hu11 AY530577, Hu53 AY530615, Hu55 AY530617, Hu54 AY530616, Hu7 AY530628, Hu18 AY530583, Hu15 AY530580, Hu16 AY530581, Hu25 AY530591, Hu60 AY530622, Ch5 AY243021, Hu3 AY530595, Hu1 AY530575, Hu4 AY530602 Hu2, AY530585, Hu61 AY530623; Clado D: Rh62 AY530573, Rh48 AY530561, Rh54 AY530567, Rh55 AY530568, Cy2 AY243020, AAV7 AF513851, Rh35 AY243000, Rh37 AY242998, Rh36 AY242999, Cy6 AY243016, Cy4 AY243018, Cy3 AY243019, Cy5 AY243017, Rh13 AY243013; Clado E: Rh38 AY530558, Hu66 AY530626, Hu42 AY530605, Hu67 AY530627, Hu40 AY530603, Hu41 AY530604, Hu37 AY530600, Rh40 AY530559, Rh2 AY243007, Bb1 AY243023, Bb2 AY243022, Rh10 AY243015, Hu17 AY530582, Hu6 AY530621, Rh25 AY530557, Pi2 AY530554, Pi1 AY530553, Pi3
AY530555, Rh57 AY530569, Rh50 AY530563, Rh49 AY530562, Hu39 AY530601, Rh58 AY530570, Rh61 AY530572, Rh52 AY530565, Rh53 AY530566, Rh51 AY530564, Rh64 AY530574, Rh43 AY530560, AAV8 AF513852, Rh8 AY242997, Rh1 AY530556; Clado F: Hu14 (AAV9) AY530579, Hu31 AY530596, Hu32 AY530597, Isolado Clonal AAV5 Y18065, AF085716, AAV 3 NC_001729, AAV 3B NC_001863, AAV4 NC_001829, Rh34 AY243001, Rh33 AY243002, Rh32 AY243003.
[075] O versado na técnica pode selecionar um serotipo, Clado, clone ou isolado adequado de AAV para uso na presente invenção com base em seu conhecimento geral comum. Por exemplo, foi demonstrado que o capsídeo de AAV5 transduz fotorreceptores de cone de primata eficazmente conforme evidenciado pela correção bem-sucedida de um defeito de visão de cor herdado (Mancuso et al., Nature 2009, 461:784- 7).
[076] Deve-se compreender, entretanto, que a invenção também abrange o uso de um genoma de AAV de outros serotipos que podem não ter sido ainda identificados ou caracterizados. O serotipo de AAV determina a especificidade quanto ao tecido da infecção (ou tropismo) de um vírus AAV. Consequentemente, os serotipos de AAV preferenciais para uso em vírus AAV administrados a pacientes em conformidade com a invenção são aqueles que têm tropismo natural para ou uma alta eficiência de células-alvo dentro do olho em LHON. Assim, serotipos de AAV para uso em vírus AAV administrados a pacientes podem ser aqueles que infectam células da retina neurossensorial e epitélio pigmentas de retina.
[077] Tipicamente, o genoma de AAV de um serotipo ou isolado ou Clado de derivação natural de AAV compreende pelo menos uma sequência de repetição terminal invertida (ITR). Uma sequência de ITR atua em cis para fornecer uma origem funcional e permite a integração e excisão do vetor do genoma de uma célula. Nas modalidades preferenciais, uma ou mais sequências de ITR flanqueiam a sequência de polinucleotídeos que codifica ND4, ND6 ou ND1 ou uma variante da mesma. As sequências de ITR preferenciais são aquelas de AAV2 e variantes do mesmo. O genoma de AAV tipicamente também compreende genes de encapsulamento, tais como genes de rep e/ou cap, que codificam as funções de encapsulamento para uma partícula viral AAV. O gene de rep codifica uma ou mais das proteínas Rep78, Rep68, Rep52 e Rep40 ou variantes das mesmas. O gene de cap codifica uma ou mais proteínas de capsídeo, tal como VP1, VP2 e VP3 ou variantes dos mesmos. Estas proteínas constituem o capsídeo de uma partícula viral AAV. As variantes de capsídeo são discutidas abaixo.
[078] Um promotor será ligado de maneira funcional a cada um dos genes de encapsulamento. Os exemplos específicos de tais promotores incluem os promotores de p5, p19 e p40 (Laughlin et al., 1979, PNAS, 76:5567-5571). Por exemplo, os promotores de p5 e p19 são, de modo geral, usados para expressar o gene de rep, enquanto o promotor de p40 é, de modo geral, usado para expressar o gene de cap.
[079] Conforme discutido acima, o genoma de AAV usada no vetor da invenção pode, portanto, ser o genoma completo de um vírus AAV de ocorrência natural. Por exemplo, um vetor que compreende um genoma de AAV completo pode ser usado para preparar vírus AAV in vitro. Entretanto, embora tal vetor possa, a princípio, ser administrado aos pacientes, isto será feito raramente na prática. De preferência, o genoma de AAV será derivatizado para o propósito de administração aos pacientes. Tal derivatização é padrão na técnica e a presente invenção abrange o uso de qualquer derivado conhecido de um genoma de AAV e derivados que poderiam ser gerados aplicando-se técnicas conhecidas no campo. A derivatização do genoma de AAV e do capsídeo de AAV são analisadas em Coura e Nardi (Virology Journal, 2007, 4:99) e em Choi et al e Wu et al, mencionados acima.
[080] Os derivados de um genoma de AAV incluem quaisquer formas truncadas ou modificadas de um genoma de AAV que permita a expressão de um transgene de ND4, ND6 ou ND1 de um vetor da invenção in vivo. Tipicamente, é possível truncar o genoma de AAV significativamente para incluir sequência viral mínima e ainda manter a função acima. Isto é preferencial por razões de segurança para reduzir o risco de recombinação do vetor com vírus do tipo selvagem e também para evitar disparo de uma resposta imunológica celular pela presença de proteínas de gene viral na célula-alvo.
[081] Tipicamente, um derivado incluirá pelo menos uma sequência de repetição terminal invertida (ITR), de preferência, mais de uma ITR, tal como duas ITRs ou mais. Uma ou mais das ITRs podem ser derivadas de genomas de AAV que têm diferentes serotipos ou podem ser uma ITR quimérica ou mutante. Uma ITR mutante preferencial é aquela que possui uma deleção de um trs (sítio de resolução terminal). Esta deleção permite a replicação continuada do genoma para gerar um genoma de fita simples que contém tanto sequências de codificação quanto complementares, isto é, um genoma autocomplementar de AAV. Isto permite pular a replicação de DNA na célula-alvo e assim possibilita a expressão de transgene acelerada.
[082] A uma ou mais ITRs flanquearão, de preferência, a sequência de polinucleotídeos que codifica ND4, ND6, ND1 ou uma variante da mesma em qualquer extremidade. A inclusão de uma ou mais ITRs é preferencial para auxiliar a formação de concatâmero do vetor da invenção no núcleo de uma célula hospedeira, por exemplo, após a conversão de DNA de vetor de fita simples em DNA de fita dupla pela ação de DNA polimerases de célula hospedeira. A formação de tais concatâmeros epissômicos protege o construto de vetor durante a vida da célula hospedeira, permitindo, assim, a expressão prolongada do transgene in vivo.
[083] Nas modalidades preferenciais, os elementos de ITR serão as únicas sequências mantidas do genoma de AAV nativo no derivado. Assim, um derivado não incluirá os genes de rep e/ou cap do genoma ativo e quaisquer outras sequências do genoma nativo. Isto é preferencial pelas razões descritas acima e também para reduzir a possibilidade de integração do vetor no genoma da célula hospedeira. Adicionalmente, reduzir o tamanho do genoma de AAV permite flexibilidade aumentada na incorporação de outros elementos de sequência (tais como elementos reguladores) dentro do vetor adicionalmente ao transgene.
[084] Em relação ao genoma de AAV2, as seguintes porções poderiam, portanto, ser removidas num derivado da invenção: Uma sequência de repetição de terminal invertida (ITR), os genes de replicação (rep) e capsídeo (cap) (NB: o gene de rep no genoma de AAV do tipo selvagem não deve ser confundido com ND4, ND6 ou ND1, o gene humano afetado em LHON). Entretanto, em algumas modalidades, incluindo modalidades in vitro, os derivados podem incluir adicionalmente um ou mais genes de rep e/ou cap ou outras sequências virais de um genoma de AAV. O vírus AAV de ocorrência natural se integra com uma alta frequência a um sítio específico no cromossomo humano 19 e mostra uma frequência desprezível de integração aleatória, de modo que a manutenção de uma capacidade integrativa no vetor possa ser tolerada num ambiente terapêutico.
[085] Quando um genoma derivado compreende genes que codificam proteínas de capsídeo, isto é, VP1, VP2 e/ou VP3, o derivado pode ser um derivado quimérico, embaralhado ou modificado com capsídeo de um ou mais vírus AAV de ocorrência natural. Em particular, a invenção abrange a provisão de sequências de proteínas de capsídeo de diferentes serotipos, clados, clones ou isolados de AAV dentro do mesmo vetor, isto é, pseudotipagem.
[086] Derivados quiméricos, embaralhados ou modificados com capsídeo serão tipicamente selecionados para fornecer uma ou mais funcionalidades desejadas do vetor viral. Assim, estes derivados podem exibir eficiência aumentada de distribuição de gene, imunogenecidade diminuída (humoral ou celular), uma faixa de tropismo alterada e/ou direcionamento melhorado de um tipo de célula particular em comparação com um vetor viral AAV que compreende um genoma de AAV de ocorrência natural, tal como aquele de AAV2. A eficiência aumentada de distribuição de gene pode ser efetuada por ligação melhorada de receptor ou correceptor na superfície celular, internalização melhorada, tráfego melhorado dentro da célula e no núcleo, desenvelopamento melhorado da partícula viral e conversão melhorada de um genoma de fita simples na forma de fita dupla. A eficiência aumentada pode também se relacionar a uma região de tropismo alterado ou direcionamento de uma população de células específica, de modo que a dose de vetor não seja diluída pela administração a tecidos quando não é mais necessária.
[087] As proteínas de capsídeo quiméricas incluem aquelas geradas por recombinação entre duas ou mais sequências de codificação de capsídeo de serotipos de AAV de ocorrência natural. Isto pode ser realizado, por exemplo, por uma abordagem de resgate de marcador em que sequências de capsídeo não infecciosas de um serotipo são cotransfectadas com sequências de capsídeo de um serotipo diferente, e seleção direcionada é usada para selecionar sequências de capsídeo que têm as propriedades desejadas. As sequências de capsídeo dos diferentes serotipos podem ser alteradas por recombinação homóloga dentro da célula para produzir proteínas de capsídeo quiméricas inovadoras.
[088] As proteínas de capsídeo quiméricas também incluem aquelas geradas por modificação genética de sequências de proteínas de capsídeo para transferir domínios de proteína de capsídeo específicos, alças de superfície ou resíduos de aminoácido específicos entre duas ou mais proteínas de capsídeo, por exemplo, entre duas ou mais proteínas de capsídeo de diferentes serotipos.
[089] As proteínas de capsídeo embaralhadas ou quiméricas podem ser também geradas por embaralhamento de DNA ou por PCR propensa a erro. Os genes de capsídeo de AAV híbridos podem ser criados fragmentando-se aleatoriamente as sequências de genes de AAV relacionados, por exemplo, aqueles que codificam proteínas de capsídeo de múltiplos serotipos diferentes e, então, remontando-se subsequentemente os fragmentos numa reação de polimerase autoiniciada, que pode também causar entrecruzamentos nas regiões de homologia de sequência. Uma biblioteca de genes de AAV híbridos criados nesta forma embaralhando-se os genes de capsídeo de diversos serotipos pode ser triada para identificar clones virais que têm uma funcionalidade desejada. Similarmente, PCR propensa a erro pode ser usada para causar mutação aleatória de genes de capsídeo de AAV para criar uma biblioteca diversa de variantes que podem ser, então, selecionadas para uma propriedade desejada.
[090] As sequências dos genes de capsídeo podem ser também geneticamente modificadas para introduzir deleções, substituições ou inserções específicas em relação à sequência do tipo selvagem nativa. Em particular, os genes de capsídeo podem ser modificados pela inserção de uma sequência de uma proteína ou peptídeo não relacionado dentro de um quadro de leitura aberto de uma sequência de codificação de capsídeo ou na terminação N e/ou C de uma sequência de codificação de capsídeo.
[091] A proteína ou peptídeo não relacionado pode ser vantajosamente aquele que atua como um ligante de um tipo de célula particular, conferindo, assim, ligação melhorada a uma célula-alvo ou melhorando a especificidade de direcionamento do vetor a uma população de células particular. Um exemplo pode incluir o uso de peptídeo RGD para bloquear a absorção no epitélio pigmentar da retina e, assim, intensificar a transdução de tecidos retinais circundantes (Cronin et al., 2008 ARVO Abstract: D1048). A proteína não relacionada pode ser também aquela que auxilia a purificação da partícula viral como parte do processo de produção, isto é, um epítopo ou etiqueta de afinidade. O sítio de inserção será tipicamente selecionado de modo a não interferir em outras funções da partícula viral, por exemplo, internalização, tráfego da partícula viral. O versado na técnica pode identificar sítios adequados para inserção com base em seu conhecimento geral comum. Os sítios particulares são divulgados em Choi et al, mencionado acima.
[092] A invenção abrange adicionalmente a provisão de sequências de um genoma de AAV numa ordem e configuração diferentes daquelas de um genoma de AAV nativo. A invenção também abrange a substituição de uma ou mais sequências ou genes de AAV por sequências de outro vírus ou por genes quiméricos compostos por sequências de mais de um vírus. Tais genes quiméricos podem ser compostos por sequências de duas ou mais proteínas virais relacionadas de diferentes espécies virais.
[093] O vetor da invenção toma a forma de uma sequência de polinucleotídeos que compreende um genoma de AAV ou derivado do mesmo e uma sequência que codifica ND4, ND6, ND1 ou uma variante da mesma.
[094] Para evitar dúvidas, a invenção também fornece uma partícula viral AAV que compreende um vetor da invenção. As partículas de AAV da invenção incluem formas transcapsidadas, em que um genoma de AAV ou derivado que possui uma ITR de um serotipo é encapsulado no capsídeo de um serotipo diferente. As partículas de
AAV da invenção também incluem formas de mosaico, em que uma mistura de proteínas de capsídeo não modificadas de dois ou mais serotipos diferentes constitui o envelope viral. A partícula de AAV também inclui formas quimicamente modificadas que portam ligantes adsorvidos à superfície do capsídeo. Por exemplo, tais ligantes podem incluir anticorpos para direcionar um receptor de superfície celular particular.
[095] A invenção fornece adicionalmente uma célula hospedeira que compreende um vetor ou partícula viral AAV da invenção.
SEQUÊNCIAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS RECOMBINANTES
[096] São também divulgadas no presente documento sequências de ácidos nucleicos recombinantes que compreendem uma sequência de polinucleotídeos que codifica um polipeptídeo de subunidade de NADH desidrogenase 4 (ND4), subunidade de NADH desidrogenase 1 (ND1) e subunidade de NADH desidrogenase 6 (ND6) ou uma variante das mesmas.
[097] A sequência de polinucleotídeos para ND4 é mostrada na SEQ ID Nº: 6 e codifica a proteína mostrada na SEQ ID Nº: 160. Outras sequências de ácidos nucleicos para ND4 são as SEQ ID Nº: 7 e 8. A sequência de polinucleotídeos para ND6 é mostrada na SEQ ID Nº: 9 e codifica a proteína mostrada na SEQ ID Nº: 161. Outra sequência de ácidos nucleicos para ND6 é a SEQ ID Nº: 10. A sequência de polinucleotídeos para ND1 é mostrada na SEQ ID Nº: 11 e codifica a proteína mostrada na SEQ ID Nº: 162. Outra sequência de ácidos nucleicos para ND1 é a SEQ ID Nº: 12.
[098] Uma variante de qualquer uma das SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162 pode compreender truncamentos, mutantes ou homólogos das mesmas, e quaisquer variantes de transcrito das mesmas que codificam um polipeptídeo de ND4, ND6 ou ND1 funcional. Quaisquer homólogos mencionados no presente documento são tipicamente pelo menos 70%
homólogos a uma região relevante de ND4, ND6 ou ND1 e podem compensar funcionalmente a deficiência de polipeptídeo.
[099] A homologia pode ser medida usando métodos conhecidos. Por exemplo, o Pacote UWGCG fornece o programa BESTFIT que pode ser usado para calcular a homologia (por exemplo, usado em suas configurações padrão) (Devereux et at (1984) Nucleic Acids Research 12, 387-395). Os algoritmos PILEUP e BLAST podem ser usados para calcular a homologia ou alinhar sequências (tipicamente em suas configurações padrão), por exemplo, conforme descrito em Altschul S. F. (1993) J Mol Evol 36:290-300; Altschul, S, F et at (1990) J Mol Biol 215:403-10. O software para realizar análises BLAST está publicamente disponível através do National Center for Biotechnology Information (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/).
[100] Nas modalidades preferenciais, uma sequência de ácidos nucleicos recombinantes pode codificar um polipeptídeo que é pelo menos 55%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 97%, 99%, 99,5% ou 100% homólogo a uma região relevante de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162) ao longo dos pelo menos 20, de preferência, pelo menos 30, por exemplo, pelo menos 40, 60, 100, 200, 300, 400 ou mais aminoácidos contíguos ou mesmo ao longo de toda a sequência do ácido nucleico recombinante. A região relevante será aquela que fornece a atividade funcional de ND4, ND6 ou ND1.
[101] Alternativamente, e de preferência, a sequência de ácidos nucleicos recombinantes pode codificar um polipeptídeo que possui menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 97%, 99%, 99,5% ou 100% homologia com ND4, ND6 ou ND1 de comprimento completo (SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162) ao longo de sua sequência inteira. A sequência de ácidos nucleicos recombinantes difere da região relevante de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID
Nº: 160, 161 ou 162) em pelo menos, ou menos de, 2, 5, 10, 20, 40, 50 ou 60 mutações (cada uma das quais pode ser substituições, inserções ou deleções).
[102] Um polipeptídeo de ND4, ND6 ou ND1 de ácido nucleico recombinante pode ter uma identidade percentual com uma região particular de SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162, que é igual a qualquer um dos valores de homologia percentuais específicos (isto é. pode ter pelo menos 70%, 80% ou 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 97%, 99% de identidade) ao longo de qualquer um dos comprimentos de sequência mencionados acima.
[103] As variantes de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162) também incluem truncamentos. Qualquer truncamento pode ser usado contanto que a variante ainda seja funcional. Os truncamentos serão tipicamente criados para remover sequências que não são essenciais para a atividade de proteína e/ou não afetam a conformação da proteína enovelada, no enovelamento particular do sítio ativo. Os truncamentos adequados podem ser rotineiramente identificados por truncamento sistemático de sequências de comprimento variável da terminação N ou C. Os truncamentos preferenciais são N-terminais e podem remover todas as outras sequências exceto pelo domínio catalítico.
[104] As variantes de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162) incluem, ainda, mutantes que têm uma ou mais, por exemplo, 2, 3, 4, 5 a 10, 10 a 20, 20 a 40 ou mais, inserções, substituições ou deleções de aminoácido em relação a uma região particular de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 160, 161 ou 162). As deleções e inserções são produzidas, de preferência, fora do domínio catalítico, conforme descrito abaixo. As substituições são também tipicamente produzidas em regiões que não são essenciais para atividade de protease e/ou não afetam a conformação da proteína enovelada.
[105] As substituições, de preferência, introduzem uma ou mais alterações conservadoras, que substituem aminoácidos por outros aminoácidos de estrutura química similar, propriedades químicas similares ou volume de cadeia lateral similar. Os aminoácidos introduzidos podem ter polaridade, hidrofilicidade, hidrofobicidade, basicidade, acides, neutralidade ou carga similares aos aminoácidos que substituem. Alternativamente, a alteração conservadora pode introduzir outro aminoácido que é aromático ou alifático no lugar de um aminoácido aromático ou alifático pré-existente. As alterações de aminoácido conservadoras bem conhecidas na técnica podem ser selecionadas em conformidade com as propriedades dos aminoácidos.
[106] Similarmente, as variantes preferenciais da sequência de polinucleotídeos de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 6, 9 ou 11) incluem polinucleotídeos que têm pelo menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou 99,5% de homologia a uma região relevante de ND4, ND6 ou ND1 (SEQ ID Nº: 6, 9 ou 11). De preferência, a variante exibe estes níveis de homologia a ND4, ND6 ou ND1 de comprimento completo (SEQ ID Nº: 6, 9 ou 11) ao longo de sua sequência inteira.
[107] As sequências de direcionamento mitocondrial (MTSs) e três regiões não traduzidas iniciais (3'UTRs) podem ser usadas para direcionar proteínas-alvo ou mRNA à mitocôndria. A carga, comprimento e estrutura do MTS podem ser importantes para importação de proteína na mitocôndria. As 3'UTRs particulares podem conduzir a localização de mRNA para a superfície mitocondrial e, assim, facilitar a importação de proteína cotraducional para a mitocôndria.
[108] A sequência de polinucleotídeos para uma sequência de direcionamento mitocondrial pode codificar um polipeptídeo selecionado dentre hsCOX10, hsCOX8, scRPM2, lcSirt5, tbNDUS7, ncQCR2, hsATP5G2, hsLACTB, spilv1, gmCOX2, crATP6, hsOPA1, hsSDHD,
hsADCK3, osP0644B06.24-2, Neurospora crassa ATP9 (ncATP9), hsGHITM, hsNDUFAB1, hsATP5G3, crATP6 _hsADCK3, ncATP9_ncATP9, zmLOC100282174, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_ncATP9, zmLOC100282174_hsADCK3_crATP6 _hsATP5G3, zmLOC100282174_hsADCK3_hsATP5G3, ncATP9_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6 _hsATP5G3, crATP6_hsADCK3_zmLOC100282174_hsATP5G3, hsADCK3_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_GNFP_ncATP9 e ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_lcSirt5_osP0644B06.24- 2_hsATP5G2_ncATP9 (consultar a Tabela 1 para a SEQ ID NO). Num exemplo, a sequência de polinucleotídeos, COX10 (SEQ ID Nº: 1, 2 ou 3) pode codificar a sequência de direcionamento mitocondrial, MTS- COX10 (SEQ ID Nº: 126). Em outro exemplo, a sequência de polinucleotídeos, COX8 (SEQ ID Nº: 4) pode codificar a sequência de direcionamento mitocondrial, MTS-COX8 (SEQ ID Nº: 127). Em outro exemplo, a sequência de polinucleotídeos, OPA1 (SEQ ID Nº: 5) pode codificar a sequência de direcionamento mitocondrial, MTS-OPA1 (SEQ ID Nº: 128).
[109] A sequência de ácidos nucleicos 3'UTR pode ser selecionada dentre hsACO2 (SEQ ID Nº: 111), hsATP5B (SEQ ID Nº: 112), hsAK2 (SEQ ID Nº: 113), hsALDH2 (SEQ ID Nº: 114), hsCOX10 (SEQ ID Nº: 115), hsUQCRFS1 (SEQ ID Nº: 116), hsNDUFV1 (SEQ ID Nº: 117), hsNDUFV2 (SEQ ID Nº: 118), hsSOD2 (SEQ ID Nº: 119), hsCOX6c (SEQ ID Nº: 120), hsIRP1 (SEQ ID Nº: 121), hsMRPS12 (SEQ ID Nº: 122), hsATP5J2 (SEQ ID Nº: 123), rnSOD2 (SEQ ID Nº: 124) e hsOXA1L (SEQ ID Nº: 125). A sequência de ácidos nucleicos 3'UTR pode ser também uma variante que possui pelo menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 96%, 97%, 98%,
99%, 99,5% ou 100% homóloga a qualquer sequência de ácidos nucleicos 3'UTR listada aqui. Por exemplo, a sequência de ácidos nucleicos 3'UTR pode ser a SEQ ID Nº: 13 ou 14.
[110] São também divulgadas no presente documento sequências de ácidos nucleicos recombinantes que compreendem uma sequência de direcionamento mitocondrial, uma sequência de codificação de proteína mitocondrial e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR. Por exemplo, a sequência de ácidos nucleicos recombinantes pode ser selecionada dentre as SEQ ID Nº: 15-84. A sequência de ácidos nucleicos recombinantes pode ser também uma variante que possui pelo menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90% e, mais preferencialmente, pelo menos 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5% ou 100% homóloga a qualquer sequência de ácidos nucleicos recombinantes listada aqui.
PROMOTORES E SEQUÊNCIAS REGULADORAS
[111] O vetor da invenção também inclui elementos que permitem a expressão do transgene divulgado in vitro ou in vivo. Assim, o vetor tipicamente compreende uma sequência promotora ligada de maneira funcional à sequência de polinucleotídeos que codifica o transgene de ND4, ND6 ou ND1 ou uma variante do mesmo.
[112] Qualquer promotor adequado pode ser usado. A sequência promotora pode ser constitutivamente ativa, isto é, operacional em qualquer plano de fundo de célula hospedeira ou, alternativamente, pode ser ativa apenas num ambiente de célula hospedeira específico, permitindo, assim, a expressão direcionada do transgene num tipo de célula particular. O promotor pode mostrar expressão induzível em resposta à presença de outro fator, por exemplo, um fator presente numa célula hospedeira. Em qualquer caso, quando o vetor é administrado para terapia, o promotor precisa ser funcional num plano de fundo de célula da retina.
[113] Em algumas modalidades, é preferencial que o promotor mostre expressão específica para célula da retina a fim de permitir que o transgene seja apenas expresso em populações de células da retina. Assim, a expressão do promotor pode ser específica para célula da retina, por exemplo, confinada apenas a células da retina neurossensorial e epitélio pigmentar da retina.
[114] Os promotores preferenciais para o transgene de ND4, ND6 ou ND1 incluem o promotor de beta-actina de galinha (CBA), opcionalmente em combinação com um elemento intensificador de citomegalovírus (CME). Em alguns casos, os promotores preferenciais para o transgene de ND4, ND6 ou ND1 compreende o promotor de CAG. Um promotor particularmente preferencial é um promotor híbrido de CBA/CAG, por exemplo, o promotor usado no cassete de expressão de rAVE. Os exemplos de promotores baseados em sequências humanas que induziriam a expressão gênica específica incluem rodopsina quinase para hastes e cones (Allocca et al., 2007, J Viol 81:11372-80), PR2.1 para cones apenas (Mancuso et al. 2009, Nature) e/ou RPE65 para o epitélio pigmentar da retina (Bainbridge et al., 2008, N Eng J Med).
[115] O vetor da invenção pode também compreender uma ou mais sequências reguladoras adicionais que podem atuar pré ou pós- transcricionalmente. A sequência reguladora pode ser parte do locus do gene de ND4, ND6 ou ND1 nativo ou pode ser uma sequência reguladora heteróloga. O vetor da invenção pode compreender porções da 5′UTR ou 3′UTR do transcrito de ND4, ND6 ou ND1 nativo.
[116] As sequências reguladoras são quaisquer sequências que facilitem a expressão do transgene, isto é, atuem para aumentar a expressão de um transcrito, melhorar a exportação nuclear de mRNA ou aumentar sua estabilidade. Tais sequências reguladoras incluem, por exemplo, elementos intensificadores, elementos pós-reguladores e sítios de poliadenilação. um sítio de poliadenilação é o sinal poli-A do
Hormônio do Crescimento Bovino. No contexto do vetor da invenção, tais sequências reguladoras serão de atuação cis. Entretanto, a invenção também abrange o uso de sequências reguladoras de atuação trans localizadas em construtos genéticos adicionais.
[117] Um elemento pós-regulador preferencial para uso num vetor da invenção é o elemento pós-regulador de hepatite de marmota (WPRE) ou uma variante do mesmo. Outra sequência reguladora que pode ser usada num vetor da presente invenção é a região de fixação de arcabouço (SAR). As sequências reguladoras adicionais podem ser selecionadas pelo versado na técnica com base em seu conhecimento geral comum.
PREPARAÇÃO DE VETOR
[118] O vetor da invenção pode ser preparado pelos meios-padrão conhecidos na técnica para provisão de vetores para terapia gênica. Assim, métodos de purificação, encapsulamento e transfecção de domínio público bem estabelecidos podem ser usados para preparar uma preparação de vetor adequada.
[119] Conforme discutido acima, um vetor da invenção pode compreender o genoma completo de um vírus AAV de ocorrência natural adicionalmente a uma sequência de polinucleotídeos que codifica ND4, ND6 ou ND1 ou uma variante dos mesmos. Entretanto, comumente um genoma derivatizado será usado, por exemplo, um derivado que possui pelo menos uma sequência de repetição terminal invertida (ITR), mas que pode não ter quaisquer genes de AAV, tal como rep ou cap.
[120] Em tais modalidades, a fim de fornecer montagem do genoma derivatizado numa partícula viral AAV, construtos genéticos adicionais que fornecem AAV e/ou funções de vírus auxiliar serão fornecidos numa célula hospedeira em combinação com o genoma derivatizado. Estes construtos adicionais conterão tipicamente genes que codificam proteínas de capsídeos de AAV estruturais, isto é, cap, VP1, VP2, VP3, e genes que codificam outras funções necessárias para o ciclo de vida de AAV, tal como rep. A seleção de proteínas de capsídeo estruturais fornecidas no construto adicional determinará o serotipo do vetor viral encapsulado.
[121] Um vetor viral encapsulado particularmente preferencial para uso na invenção compreende um genoma derivatizado de AAV2 em combinação com proteínas de capsídeo de AAV5 ou AAV8. Este vetor viral encapsulado tipicamente compreende uma ou mais ITRs de AAV2.
[122] Conforme mencionado acima, os vírus AAV são incompetentes em replicação e assim as funções de vírus auxiliar, de preferência, funções auxiliares de adenovírus, tipicamente também serão fornecidas num ou mais construtos adicionais para permitir a replicação de AAV.
[123] Todos os construtos adicionais acima podem ser fornecidos como plasmídeos ou outros elementos epissômicos na célula hospedeira ou, alternativamente, um ou mais construtos podem ser integrados no genoma da célula hospedeira.
[124] Nestes aspectos, a invenção fornece um método para produção de um vetor da invenção. O método compreende fornecer um vetor que compreende um genoma de vírus adenoassociado (AAV) ou um derivado do mesmo e uma sequência de polinucleotídeos que codifica ND4, ND6 ou ND1 ou uma variante do mesmo numa célula hospedeira e fornecer meios para replicação e montagem do vetor numa partícula viral AAV. De preferência, o método compreende fornecer um vetor que compreende um derivado de um genoma de AAV e uma sequência de polinucleotídeos que codifica ND4, ND6 ou ND1 ou uma variante dos mesmos, juntamente com um ou mais construtos genéticos adicionais que codificam funções de AAV e/ou vírus auxiliar. Tipicamente, o derivado de um genoma de AAV compreende pelo menos uma ITR. Opcionalmente, o método compreende, ainda, uma etapa de purificar as partículas virais montadas. Adicionalmente, o método pode compreender uma etapa de formular as partículas virais para uso terapêutico.
MÉTODOS DE TERAPIA E USOS MÉDICOS
[125] Conforme discutido acima, os presentes inventores demonstraram surpreendentemente que um vetor da invenção pode ser usado para solucionar a disfunção celular subjacente à LHON. Em particular, mostraram que o uso do vetor pode corrigir o defeito associado a LHON. Isto fornece um meio segundo o qual o processo degenerativo da doença pode ser tratado, interrompido, atenuado ou prevenido.
[126] A invenção, portanto, fornece um método para tratar ou prevenir LHON num paciente que precisa do mesmo que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um vetor da invenção ao paciente por injeção retinal, subretinal ou intravítrea direta. Consequentemente, a LHON é assim tratada ou prevenida no paciente.
[127] Num aspecto relacionado, a invenção fornece o uso de um vetor da invenção num método para tratar ou prevenir LHON administrando o referido vetor a um paciente por injeção retinal, subretinal ou intravítrea direta. Adicionalmente, a invenção fornece o uso de um vetor da invenção na fabricação de um medicamento. para tratar ou prevenir LHON por injeção retinal, subretinal ou intravítrea direta.
[128] Em todas estas modalidades, o vetor da invenção pode ser administrado a fim de prevenir o início de um ou mais sintomas de LHON. O paciente pode ser assintomático. O indivíduo pode ter uma predisposição à doença. O método ou uso pode compreender uma etapa de identificar se ou não um indivíduo está em riso de desenvolver ou possui LHON. Uma quantidade profilaticamente eficaz do vetor é administrada a tal indivíduo. Uma quantidade profilaticamente eficaz é uma quantidade que previne o início de um ou mais sintomas da doença.
[129] Alternativamente, o vetor pode ser administrado uma vez que os sintomas da doença tenham aparecido num indivíduo, isto é, para curar sintomas existentes da doença. Uma quantidade terapeuticamente eficaz do antagonista é administrada a tal indivíduo. Uma quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade que é eficaz para atenuar ou mais sintomas da doença. Tal quantidade pode também interromper, retardar ou reverter alguma perda de visão periférica associada à LHON. Tal quantidade pode interromper, retardar ou reverter o início da LHON.
[130] Uma dose única típica está entre 1010 e 1012 partículas de genoma, dependendo da quantidade de tecido retinal remanescente que exige transdução. Uma partícula de genoma é definida no presente documento como um capsídeo de AAV que contém uma molécula de DNA de fita simples que pode ser quantificada com um método específico para sequência (tal como PCR em tempo real). Esta dose pode ser fornecida como uma dose única, mas pode ser repetida para o outro olho ou em casos em que o vetor pode não ter sido direcionado para a região correta da retina por qualquer que seja a razão (tal como complicação cirúrgica). O tratamento é, de preferência, um tratamento permanente único para cada olho, mas injeções repetidas, por exemplo, em anos futuros e/ou com diferentes serotipos de AAV podem ser consideradas.
[131] A invenção também fornece um método para monitorar o tratamento ou prevenção de LHON num paciente que compreende medir a atividade ex vivo em células retinais obtidas do referido paciente após a administração do vetor de AAV da invenção por injeção retinal, subretinal ou intravítrea direta. Este método pode permitir a determinação da eficácia de tratamento.
COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
[132] O vetor da invenção pode ser formulado em composições farmacêuticas. Estas composições podem compreender, adicionalmente ao vetor, um excipiente farmaceuticamente aceitável, carreador, tampão, estabilizador ou outros materiais conhecidos por aqueles versados na técnica. Tais materiais devem ser não tóxicos e não devem interferir na eficácia do ingrediente ativo. A natureza exata do carreador ou outro material pode ser determinada pelo versado na técnica de acordo com a via de administração, isto é, aqui injeção retinal, subretinal ou intravítrea direta.
[133] A composição farmacêutica está tipicamente na forma líquida. As composições farmacêuticas líquidas, de modo geral, incluem um carreador líquido, tal como água, petróleo, óleos animais ou vegetais, óleo mineral ou óleo sintético. Solução salina fisiológica, cloreto de magnésio, dextrose ou outra solução de sacarídeos ou glicóis, tal como etilenoglicol, propilenoglicol ou polietilenoglicol podem ser incluídos. Em alguns casos, um tensoativo, tal como ácido plurônico (PF68), 0,001% pode ser usado.
[134] Para injeção no sítio de aflição, o ingrediente ativo estará na forma de uma solução aquosa que é isenta de pirógeno e possui pH, isotonicidade e estabilidade adequados. Aqueles de habilidade relevante na técnica são bem capazes de preparar soluções adequadas usando, por exemplo, veículos isotônicos, tal como Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Ringer Lactada. Conservantes, estabilizantes, tampões, antioxidantes e/ou outros aditivos podem ser incluídos, conforme necessário.
[135] Para liberação retardada, o vetor pode ser incluído numa composição farmacêutica que é formulada para liberação lenta, tal como em microcápsulas formadas a partir de polímeros biocompatíveis ou em sistemas carreadores lipossômicos de acordo com os métodos conhecidos na técnica.
AMOSTRAS
[136] As amostras que são adequadas para uso nos métodos descritos no presente documento podem ser amostras de ácido nucleico de um indivíduo. Uma "amostra de ácido nucleico", conforme usado no presente documento, pode incluir RNA ou DNA, ou uma combinação dos mesmos. Em outra modalidade, uma "amostra de polipeptídeo" (por exemplo, peptídeos ou proteínas, ou fragmentos dos mesmos) pode ser usada para avaliar as informações de que uma alteração de aminoácido ocorreu, que é o resultado de uma variante genética. Ácidos nucleicos e polipeptídeos podem ser extraídos de uma ou mais amostras, incluindo, porém sem limitação, sangue, saliva, urina, raspagens mucosais do revestimento da boca, expectorante, soro, lágrimas, pele, tecido ou cabelo. Uma amostra de ácido nucleico pode ser avaliada quanto às informações de ácido nucleico. "Informações de ácido nucleico", conforme usado no presente documento, incluem a própria sequência de ácidos nucleicos, a presença/ausência de variação genética na sequência de ácidos nucleicos, uma propriedade física que varia dependendo da sequência de ácidos nucleicos (por exemplo, Tm) e a quantidade do ácido nucleico (por exemplo, número de cópias de mRNA). Um "ácido nucleico" significa qualquer um dentre DNA, RNA, DNA, incluindo nucleotídeos artificiais, ou RNA, incluindo nucleotídeos artificiais. Conforme usado no presente documento, um "ácido nucleico purificado" inclui cDNAs, fragmentos de ácidos nucleicos genômicos, ácidos nucleicos produzidos usando a reação em cadeia de polimerase (PCR), ácidos nucleicos formados por tratamento com enzima de restrição de ácidos nucleicos genômicos, ácidos nucleicos recombinantes e moléculas de ácido nucleico quimicamente sintetizados. Uma molécula de ácido nucleico "recombinante" inclui uma molécula de ácido nucleico produzida por uma combinação artificial de dois segmentos de outro modo separados de sequência, por exemplo,
por síntese química ou pela manipulação de segmentos isolados de ácidos nucleicos por técnica de engenharia genética. Conforme usado no presente documento, um "polipeptídeo" inclui proteínas, fragmentos de proteínas e peptídeos, sejam isolados de fontes naturais, produzidos por técnicas recombinantes ou quimicamente sintetizados. Um polipeptídeo pode ter uma ou mais modificações, tal como modificação pós-traducional (por exemplo, glicosilação, fosforilação, etc.) ou qualquer outra modificação (por exemplo, peguilação, etc.). O polipeptídeo pode conter um ou mais aminoácidos de ocorrência natural (por exemplo, tal como um aminoácido com uma modificação de cadeia lateral).
[137] Em algumas modalidades, a amostra de ácido nucleico pode compreender células ou tecido, por exemplo, linhagens celulares. Os tipos de célula exemplificativos dos quais os ácidos nucleicos podem ser obtidos usando os métodos descritos no presente documento incluem, porém sem limitação, o seguinte: uma célula sanguínea, tal como um linfócito B, linfócito T, leucócito, eritrócito, macrófago ou neutrófilo; uma célula muscular, tal como uma célula esquelética, célula muscular lisa ou célula muscular cardíaca; uma célula germinativa, tal como um esperma ou óvulo; uma célula epitelial; uma célula de tecido conjuntivo, tal como um adipócito, condrócito; fibroblasto ou osteoblasto; um neurônio; um astrócito; uma célula estromal; uma célula específica quanto ao órgão, tal como uma célula renal, célula pancreática, célula hepática ou um queratinócito; uma célula-tronco; ou qualquer célula que se desenvolva a partir das mesmas. Uma célula a partir da qual ácidos nucleicos podem ser obtidos pode ser uma célula sanguínea ou um tipo particular de célula sanguínea, por exemplo, uma célula-tronco hematopoiética ou uma célula que surge a partir de uma célula-tronco hematopoiética, tal como um glóbulo vermelho, linfócito B, linfócito T, célula exterminadora natural, neutrófilo, basófilo, eosinófilo,
monócito, macrófago ou plaqueta. De modo geral, qualquer tipo de célula-tronco pode ser usado, incluindo, sem limitação, uma célula- tronco embrionária, célula-tronco adulta ou célula-tronco pluripotente.
[138] Em algumas modalidades, uma amostra de ácido nucleico pode ser processada para isolamento de RNA ou DNA, por exemplo, RNA ou DNA numa amostra de célula ou tecido pode ser separado de outros componentes da amostra de ácido nucleico. As células podem ser coletadas de uma amostra de ácido nucleico usando técnicas- padrão, por exemplo, centrifugando-se uma amostra de célula e ressuspendendo-se as células peletizadas, por exemplo, na solução tamponada, por exemplo, solução salina tamponada com fosfato (PBS). Em algumas modalidades, após centrifugar a suspensão de células para obter um pélete celular, as células podem ser lisadas para extrair DNA. Em algumas modalidades, a amostra de ácido nucleico pode ser concentrada e/ou purificada para isolar DNA. Todas as amostras de ácido nucleico obtidas de um indivíduo, incluindo aquelas submetidas a qualquer tipo de processamento adicional, são consideradas como sendo obtidas do indivíduo. Em algumas modalidades, as técnicas- padrão e kits conhecidos no campo podem ser usados para extrair RNA ou DNA de uma amostra de ácido nucleico, incluindo, por exemplo, extração de fenol, um Kit de Tecido QIAAMP® (Qiagen, Chatsworth, Calif.), um kit de purificação de DNA Genômico WIZARD® (Promega) ou um método Qiagen Autopure usando química Puregene, que pode possibilitar a purificação de DNA altamente estável bem adequado para arquivamento.
[139] Em algumas modalidades, determinar a identidade de um alelo ou determinar o número de cópias pode, mas não precisa, incluir obter uma amostra de ácido nucleico que compreende RNA e/ou DNA de um indivíduo e/ou avaliar a identidade, número de cópias, presença ou ausência de uma ou mais variações genéticas e suas localizações cromossômicas dentro do DNA genômico (isto é, genoma do indivíduo) derivado da amostra de ácido nucleico.
[140] O indivíduo ou organização que realiza a determinação não precisa realmente executar análise física de uma amostra de ácido nucleico de um indivíduo. Em algumas modalidades, os métodos podem incluir usar informações obtidas por análise da amostra de ácido nucleico por uma terceira parte. Em algumas modalidades, os métodos podem incluir etapas que ocorrem em mais de um sítio. Por exemplo, uma amostra de ácido nucleico pode ser obtida de um indivíduo num primeiro sítio, tal como num fornecedor de cuidados com a saúde ou na casa do indivíduo no caso de um kit de autotestagem. A amostra de ácido nucleico pode ser analisada no mesmo sítio ou num segundo sítio, por exemplo, num laboratório ou outra instalação de testagem.
ÁCIDOS NUCLEICOS
[141] Os ácidos nucleicos e polipeptídeos descritos no presente documento podem ser usados em métodos e kits da presente divulgação. Em algumas modalidades, aptâmeros que se ligam especificamente aos ácidos nucleicos e polipeptídeos descritos no presente documento podem ser usados em métodos e kits da presente divulgação. Conforme usado no presente documento, um ácido nucleico pode compreender um desoxirribonucleotídeo (DNA) ou ribonucleotídeo (RNA), seja singular ou em polímeros, de ocorrência natural ou de ocorrência não natural, de fita simples ou de fita dupla, de codificação, por exemplo, um gene traduzido, ou de não codificação, por exemplo, uma região reguladora, ou quaisquer fragmentos, derivados, miméticos ou complementos dos mesmos. Em algumas modalidades, os ácidos nucleicos podem compreender oligonucleotídeos, nucleotídeos, polinucleotídeos, sequências de ácidos nucleicos, sequências genômicas, DNA complementar (cDNA), ácidos nucleicos antissenso, regiões de DNA, sondas, iniciadores, genes, regiões reguladoras,
íntrons, éxons, quatros de leitura abertos, sítios de ligação, ácidos nucleicos alto e ácidos nucleicos específicos para alelo.
[142] Uma "sonda", conforme usado no presente documento, inclui um fragmento de ácido nucleico para examinar um ácido nucleico num espécime usando a reação de hibridização com base na complementaridade de ácido nucleico.
[143] Um "híbrido", conforme usado no presente documento, inclui uma fita dupla formada entre qualquer um dos ácidos nucleicos mencionados acima, dentro do mesmo tipo ou através de tipos diferentes, incluindo DNA-DNA, DNA-RNA, RNA-RNA ou similares.
[144] Ácidos nucleicos "isolados", conforme usado no presente documento, são separados de ácidos nucleicos que flanqueiam normalmente o gene ou sequência de nucleotídeos (como em sequências genômicas) e/ou foram completa ou parcialmente purificados de outras sequências transcritas (por exemplo, como uma biblioteca de RNA). Por exemplo, ácidos nucleicos isolados da divulgação podem ser substancialmente isolados em relação ao meio celular complexo em que ocorrem naturalmente, ou meio de cultura quando produzidos por técnicas recombinantes, ou precursores químicos ou outros produtos químicos quando quimicamente sintetizados. Em alguns casos, o material isolado pode formar parte de uma composição, por exemplo, um extrato cru contendo outras substâncias, sistema de tampão ou mistura de reagente. Em algumas modalidades, o material pode ser purificado para homogeneidade essencial usando métodos conhecidos na técnica, por exemplo, por eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) ou cromatografia em coluna (por exemplo, HPLC). Em relação ao DNA genômico (gDNA), o termo "isolado" também pode se referir a ácidos nucleicos que são separados do cromossomo com o qual o DNA genômico está naturalmente associado. Por exemplo, a molécula de ácido nucleico isolada pode conter menos que cerca de 250 kb, 200 kb, 150 kb, 100 kb, 75 kb, 50 kb, 25 kb, 10 kb, 5 kb, 4 kb, 3 kb, 2 kb, 1 kb, 0,5 kb ou 0,1 kb dos nucleotídeos que flanqueiam a molécula de ácido nucleico no gDNA da célula da qual a molécula de ácido nucleico é derivada.
[145] Os ácidos nucleicos fundidos a outras sequências reguladoras ou de codificação podem ser considerados isolados. Por exemplo, DNA recombinante contido num vetor está incluído na definição de "isolado", conforme usado no presente documento. Em algumas modalidades, os ácidos nucleicos isolados podem incluir moléculas de DNA recombinante em células hospedeiras heterólogas ou organismos heterólogos, assim como moléculas de DNA parcial ou substancialmente purificadas em solução. Os ácidos nucleicos isolados também abrangem transcritos de RNA in vivo e in vitro das moléculas de DNA da presente divulgação. Uma molécula de ácido nucleico ou sequência de nucleotídeos isolada pode ser sintetizada quimicamente ou por meios recombinantes. Tais sequências de nucleotídeos isoladas podem ser úteis, por exemplo, na fabricação do polipeptídeo codificado, como sondas para isolar as sequências homólogas (por exemplo, de outras espécies de mamífero), para mapeamento de gene (por exemplo, por hibridização in situ com cromossomos) ou para detectar a expressão do gene, em tecido (por exemplo, tecido humano), tal como por análise por Northern blot ou outras técnicas de hibridização divulgadas no presente documento. A divulgação também se refere a sequências de ácidos nucleicos que se hibridizam sob condições de hibridização de alta estringência, tal como hibridização seletiva, a uma sequência de nucleotídeos descrita no presente documento. Tais sequências de ácidos nucleicos podem ser detectadas e/ou isoladas por hibridização específica para alelo ou sequência (por exemplo, sob condições de estringência alta). As condições de estringência e métodos para hibridizações de ácido nucleico são bem conhecidas pela pessoa versada (consultar, por exemplo, Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel, F. et al., John Wiley & Sons, (1998), e Kraus, M. and Aaronson, S., Methods Enzymol., 200:546-556 (1991), cujos ensinamentos inteiros estão incorporados a título de referência ao presente documento.
[146] Os cálculos de "identidade" ou "identidade percentual" entre duas ou mais sequências de nucleotídeos ou aminoácidos podem ser determinados alinhando-se as sequências para propósitos de comparação ideal (por exemplo, lacunas podem ser introduzidas na sequência de uma primeira sequência). Os nucleotídeos em posições correspondentes são, então, comparados, e a identidade percentual entre as duas sequências é uma função do número de posições ideais compartilhadas pelas sequências (isto é, % de identidade = número de posições idênticas/número total de posições x 100). Por exemplo, uma posição na primeira sequência está ocupada pelo mesmo nucleotídeo que a posição correspondente na segunda sequência, então, as moléculas são idênticas nesta posição. A identidade percentual entre as duas sequências é uma função do número de posições idênticas compartilhadas pelas sequências, considerando-se o número de lacunas, e o comprimento de cada lacuna, que precisa ser introduzido para alinhamento ideal das duas sequências.
[147] Em algumas modalidades, o comprimento de uma sequência alinhada com propósitos de comparação é pelo menos 30%, pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 90% ou pelo menos 95% do comprimento da sequência de referência. A comparação real das duas sequências pode ser realizada por métodos bem conhecidos, por exemplo, usando um algoritmo matemático. Um exemplo não limitante de tal algoritmo matemático é descrito em Karlin, S. e Altschul, S., Proc. Natl. Acad. Sci. EUA, 90- 5873-5877 (1993). Tal algoritmo está incorporado nos programas NBLAST e XBLAST (versão 2.0), conforme descrito em
Altschul, S. et al., Nucleic Acids Res., 25:3389-3402 (1997). Quando se usa os programas BLAST e BLAST com lacuna, quaisquer parâmetros relevantes dos respectivos programas (por exemplo, NBLAST) podem ser usados. Por exemplo, os parâmetros para comparação de sequências podem ser definidos em pontuação = 100, comprimento de palavra = 12, ou podem ser variados (por exemplo, W=5 ou W=20). Outros exemplos incluem o algoritmo de Myers e Miller, CABIOS (1989), ADVANCE, ADAM, BLAT e FASTA. Em algumas modalidades, a identidade percentual entre duas sequências de aminoácidos pode ser realizada usando, por exemplo, p programa GAP no pacote de sequência GCG (Accelrys, Cambridge, RU).
[148] "Sondas" ou "iniciadores" podem ser oligonucleotídeos que se hibridizam de uma maneira específica para base e uma fita complementar de uma molécula de ácido nucleico. As sondas podem incluir iniciadores, que podem ser uma sonda de oligonucleotídeo de fita simples que pode atuar como um ponto de iniciação de síntese de DNA direcionada para modelo usando métodos, incluindo, porém sem limitação, reação em cadeia de polimerase (PCR) e reação em cadeia de ligase (LCR) para amplificação de uma sequências-alvo. Os oligonucleotídeos, conforme descrito no presente documento, podem incluir segmentos ou fragmentos de sequência de ácidos nucleicos, ou seus complementos. Em algumas modalidades, os segmentos de DNA podem ter entre 5 e 10000 bases contíguas e podem variar de 5, 10, 12, 15, 20 ou 25 nucleotídeos a 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 100, 200, 500, 1000 ou 10000 nucleotídeos. Adicionalmente a DNA e RNA, as sondas e iniciadores podem incluir ácidos nucleicos de polipeptídeo (PNA), conforme descrito em Nielsen, P. et al., Science 254: 1497-1500 (1991). Uma sonda ou iniciador pode compreender uma região de sequências de nucleotídeos que se hibridiza a pelo menos cerca de 15, tipicamente cerca de 20 a 25 e, em certas modalidades, cerca de 40, 50, 60 ou 75 nucleotídeos consecutivos de uma molécula de ácido nucleico.
[149] A presente divulgação também fornece ácidos nucleicos isolados, por exemplo, sondas ou iniciadores, que contêm um fragmento ou porção que se hibridiza seletivamente a um ácido nucleico que compreende, ou consiste em, uma sequência de nucleotídeos, em que a sequência de nucleotídeos pode compreender pelo menos um polimorfismo ou alelo polimórfico contido nas variações genéticas descritas no presente documento ou o nucleotídeo do tipo selvagem que está localizado na mesma posição, ou os complementos do mesmo. Em algumas modalidades, a sonda ou iniciador pode ser pelo menos 70% idêntico, pelo menos 80% idêntico, pelo menos 85% idêntico, pelo menos 90% idêntico ou pelo menos 95% idêntico, à sequência de nucleotídeos contígua ou ao complemento da sequência de nucleotídeos contígua.
[150] Em algumas modalidades, uma sonda de ácido nucleico pode ser um oligonucleotídeo capaz de se hibridizar a uma região complementar de um gene associado a uma afecção (por exemplo, LHON) contendo uma variação genética descrita no presente documento. Os fragmentos de ácido nucleico da divulgação podem ser usados como sondas ou iniciadores em ensaios tais como aqueles descritos no presente documento.
[151] Os ácidos nucleicos da divulgação, tais como aqueles descritos acima, podem ser identificados e isolados usando técnicas de biologia molecular padrão bem conhecidos pelo versado na técnica. Em algumas modalidades, DNA pode ser amplificado e/ou pode ser identificado (por exemplo, radiomarcado, marcado fluorescentemente) e usado como uma sonda para triar, por exemplo, uma biblioteca de cDNA derivada de um organismo. cDNA pode ser derivado de mRNA e pode estar contido num vetor adequado. Por exemplo, clones correspondentes podem ser isolados, o DNA obtido em pousio em excisão in vivo e o inserto clonado pode ser sequenciado em qualquer uma ou ambas as orientações por métodos reconhecidos na técnica para identificar o quadro de leitura correto que codifica um polipeptídeo do peso molecular adequado. Usando estes métodos ou métodos similares, o polipeptídeo e o DNA que codifica o polipeptídeo pode ser isolado, sequenciado e adicionalmente caracterizado.
[152] Em algumas modalidades, o ácido nucleico pode compreender um ou mais polimorfismos, variações ou mutações, por exemplo, polimorfismo de nucleotídeo único (SNPs), variações de nucleotídeo único (SNVs), variações de número de cópias (CNVs), por exemplo, inserções, deleções, inversões e translocações. Em algumas modalidades, os ácidos nucleicos podem compreender análogos, por exemplo, fosforotioatos, fosforamidatos, fosfonato de metila, fosfonatos de quiralmetila, 2-0-metil ribonucleotídeos ou ácidos nucleicos modificados, por exemplo, resíduos ou ligações de cadeia principal modificados, ou ácidos nucleicos combinados com carboidratos, lipídios, polipeptídeo ou outros materiais, ou ácidos nucleicos de peptídeo (PNAs), por exemplo, cromatina, ribossomos e transcriptossomos. Em algumas modalidades, os ácidos nucleicos podem compreender ácidos nucleicos em várias estruturas, por exemplo, DNA A, DNA B, DNA em forma Z, siRNA, tRNA e ribozimas. Em algumas modalidades, o ácido nucleico pode ser naturalmente ou não naturalmente polimórfico, por exemplo, tendo um ou mais diferenças de sequência, por exemplo, adições, deleções e/ou substituições, em comparação com uma sequência de referência. Em algumas modalidades, uma sequência de referência pode ser baseada em informações publicamente disponíveis, por exemplo, o U.C. Santa Cruz Human Genome Browser Gateway (genome.ucsc.edu/cgi- bin/hgGateway) ou o site da web do NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov). Em algumas modalidades, uma sequência de referência pode ser determinada por um praticante da presente divulgação usando métodos bem conhecidos na técnica, por exemplo, sequenciando um ácido nucleico de referência.
[153] Em algumas modalidades, uma sonda pode se hibridizar a um alelo, SNP, SNV ou CNV conforme descrito no presente documento. Em algumas modalidades, a sonda pode se ligar a outra sequência marcadora associada a LHON conforme descrito no presente documento.
[154] Um versado na técnica poderia saber como projetar uma sonda de modo que a hibridização específica para sequência possa ocorrer apenas se um alelo particular estiver presente numa sequência genômica de uma amostra de ácido nucleico de teste. A divulgação pode ser também reduzida à prática usando qualquer método de genotipagem conveniente, incluindo tecnologias e métodos comercialmente disponíveis para genotipar variações genéticas particulares.
[155] Sondas de controle podem ser usadas, por exemplo, uma sonda que se liga a uma sequência menos variável, por exemplo, um DNA repetitivo associado a um centrômero de um cromossomo pode ser usado como um controle. Em algumas modalidades, as sondas podem ser obtidas a partir de fontes comerciais. Em algumas modalidades, as sondas podem ser sintetizadas, por exemplo, quimicamente ou in vitro, ou produzida a partir de DNA cromossômico ou genômico através de técnicas-padrão. Em algumas modalidades, as fontes de DNA que podem ser usadas incluem DNA genômico, sequências de DNA clonadas, híbridos de célula somática que contêm um, ou uma parte de um, cromossomo humano juntamente com o complemento de cromossomo normal do hospedeiro, e cromossomos purificados por citometria de fluxo ou microdissecção. A região de interesse pode ser isolada através de clonagem ou por amplificação específica para sítio usando PCR.
[156] Um ou mais ácidos nucleicos, por exemplo, uma sonda ou iniciador, podem ser também identificados, por exemplo, por identificação direta, para compreender uma identificação detectável. Uma identificação detectável pode compreender qualquer identificação capaz de detecção por um processo físico, químico ou biológico, por exemplo, uma identificação radioativa, tal como 32P ou 3H, uma identificação fluorescente, tal como FITC, uma identificação de cromóforo, uma identificação de ligante por afinidade, uma identificação de enzima, tal como fosfatase alcalina, peroxidase de raiz-forte ou I2 galactosidase, uma identificação de cofator enzimático, uma identificação de conjugado de hapteno, tal como digoxigenina ou dinitrofenila, uma identificação de geração de sinal de Raman, uma identificação magnética, uma identificação spin, uma identificação de epítopo, tal como o epítopo FLAG ou HA, uma identificação luminescente, uma identificação de átomo pesado, uma identificação de nanopartícula, uma identificação eletroquímica, uma identificação por dispersão de luz, uma identificação de carcaça esférica, identificação de nanocristal semicondutor, tais como pontos quânticos (descritos na Patente U.S. Nº 6.207.392), e sondas identificadas com qualquer outra identificação de geração de sinal conhecida por aqueles versados na técnica, em que uma identificação pode permitir que a sonda seja visualizada com ou sem uma molécula de detecção secundária. Um nucleotídeo pode ser diretamente incorporado numa sonda com técnicas-padrão, por exemplo, tradução nick, iniciação aleatória e identificação por PCR. Um "sinal", conforme usado no presente documento, inclui um sinal adequadamente detectável e mensurável por meios adequados, incluindo fluorescência, radioatividade, quimioluminescência e similares.
[157] Os exemplos não limitantes de porções químicas de identificação úteis para detecção incluem, sem limitação, enzimas adequadas, tal como peroxidase de raiz-forte, fosfatase alcalina, beta- galactosidase ou acetilcolinaesterase; membros de um par de ligação que são capazes de formar complexos, tal como estreptavidina/biotina, avidina/biotina ou um complexo de antígeno/anticorpo, incluindo, por exemplo, IgG de coelho e IgG anticoelho; fluoróforos, tal como umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, tetrametil rodamina, eosina, proteína verde fluorescente, eritrosina, cumarina, metil cumarina, pireno, verde de malaquita, estilbeno, amarelo lúcifer, Azul Cascata, Vermelho Texas, diclorotriazinilamina fluoresceína, cloreto de dansila, ficoeritrina, complexos de lantanídeo fluorescente, tais como aqueles que incluem Európio e Térbio, membros da família de corante de cianina, tal como Cy3 e Cy5, sinalizadores moleculares e derivados fluorescentes dos mesmos, assim como outros conhecidos na técnica, conforme descrito, por exemplo, em Principles of Fluorescence Spectroscopy, Joseph R. Lakowicz (Editor), Plenum Pub Corp, 2ª edição (julho de 1999) e a 6ª Edição de Molecular Probes Handbook por Richard P. Hoagland; um material luminescente, tal como luminol; dispersão de luz ou materiais ressonantes plasônicos, tal como partículas de ouro ou prata ou pontos quânticos; ou material radioativo inclui 14C, 123I, 124I, 125I, Tc99m, 32P, 33P, 35S ou 3H.
[158] Outras identificações podem ser também usadas nos métodos da presente divulgação, por exemplo, identificações de cadeia principal. As identificações de cadeia principal compreendem manchas de ácido nucleico que se ligam a ácidos nucleicos de uma maneira independente de sequência. Os exemplos não limitantes incluem corantes intercalados, tais como fenantridinas e acridinas (por exemplo, brometo de etídio, iodeto de propídio, iodeto de hexídio, di-hidroetídio, homodímero 1 e 2 de etídio, monoazida de etídio e ACMA); alguns aglutinantes de sulco menor, tais como indóis e imidazóis (por exemplo, Hoechst 33258, Hoechst 33342, Hoechst 34580 e DAPI); e manchas de ácido nucleico diversas, tal como laranja de acridina (também capaz de intercalamento), 7-AAD, actinomicina D, LDS751 e hidroxiestilbamidina. Todas as manchas de ácido nucleico mencionadas anteriormente estão comercialmente disponíveis junto a fornecedores, tal como Molecular Probes, Inc. Ainda outros exemplos de manchas de ácido nucleico incluem os seguintes corante da Molecular Probes: corantes de cianina, tal como Azul SYTOX, Verde SYTOX, Laranja SYTOX, POPO-1, POPO- 3, YOYO-1, YOYO-3, TOTO-1, TOTO-3, JOJO-1, LOLO-1, BOBO-1, BOBO-3, PO-PRO-1, PO-PRO-3, BO-PRO-1, BO-PRO-3, TO-PRO-1, TO-PRO-3, TO-PRO-5, JO-PRO-1, LO-PRO-1, YO-PRO-1, YO-PRO-3, PicoGreen, OliGreen, RiboGreen, Dourado SYBR, Verde SYBR I, Verde SYBR II, SYBR DX, SYTO-40, -41, -42, -43, -44, -45 (azul), SYTO-13, -16, -24, -21, -23, -12, -11, -20, -22, -15, -14, -25 (verde), SYTO-81, -80, -82, -83, -84, -85 (laranja), SYTO-64, -17, -59, -61, -62, -60, -63 (vermelho).
[159] Em algumas modalidades, fluoróforos de diferentes cores podem ser escolhidos, por exemplo, ácido 7-amino-4-metilcumarin-3- acético (AMCA), 5-(e-6)-carbóxi-X-rodamina, lissamina B, 5-(e-6)- carboxifluoresceína, fluoresceína-5-isotiocianato (FITC), ácido 7- dietilaminocumarin-3-carboxílico, tetrametilrodamina-5-(e-6)- isotiocianato, 5-(e-6)-carboxitetrametilrodamina, ácido 7- hidroxicumarin-3-carboxílico, ácido 6-[fluoresceína 5-(e-6)- carboxamido]hexanoico, ácido N-(4,4-difluoro-5,7-dimetil-4-bora-3a,4a diaza-3-indacenopropiônico, eosina-5-isotiocianato, eritrosina-5- isotiocianato , TRITC, rodamina, tetrametilrodamina, R-ficoeritrina, Cy- 3, Cy-5, Cy-7, Vermelho Texas, Phar-Red, aloficocianina (APC) e acetilazida azul CASCADETM, de modo que cada sonda num ou não num conjunto possa ser visualizada distintamente. Em algumas modalidades, sondas identificadas fluorescentemente podem ser visualizadas com um microscópio fluorescente e um filtro adequado para cada fluoróforo ou usando conjuntos de filtros passa-faixa duplo ou triplo para observar múltiplos fluoróforos. Em algumas modalidades, técnicas, tal como citometria de fluxo, podem ser usadas para examinar o padrão de hibridização das sondas.
[160] Em outras modalidades, as sondas podem ser identificadas indiretamente, por exemplo, com biotina ou digoxigenina, ou identificadas com isótopos radioativos, tal como 32P e/ou 3H. Como um exemplo não limitante, uma sonda identificada indiretamente com biotina pode ser detectada por avidina conjugada a um marcador detectável. Por exemplo, avidina pode ser conjugada a um marcador enzimático, tal como fosfatase alcalina ou peroxidase de raiz-forte. Em algumas modalidades, os marcadores enzimáticos podem ser detectados usando reações colorimétricas usando um substrato e/ou um catalisador para a enzima. Em algumas modalidades, catalisadores para fosfatase alcalina podem ser usados, por exemplo, 5-bromo-4- cloro-3-indolilfosfato e nitro azul tetrazólio. Em algumas modalidades, um catalisador pode ser usado para peroxidase de raiz-forte, por exemplo, diaminobenzoato. FORMULAÇÕES, VIAS DE ADMINISTRAÇÃO E DOSES EFICAZES
[161] Ainda outro aspecto da presente divulgação se refere a formulações, vias de administração e doses eficazes para composições farmacêuticas que compreendem um agente ou combinação de agentes da presente divulgação. Tais composições farmacêuticas podem ser usadas para tratar uma afecção (por exemplo, LHON) conforme descrito acima.
[162] Os compostos da divulgação podem ser administrados como formulações farmacêuticas, incluindo aqueles adequados para administração oral (incluindo bucal e sublingual), retal, nasal, tópica, emplastro transdérmico, pulmonar, vaginal, supositório ou parenteral (incluindo intraocular, intravítreo, intramuscular, intra-arterial, intratecal,
intradérmico, intraperitoneal, subcutâneo e intravenoso) ou numa forma adequada para administração por aerossolização, inalação ou insuflação. Informações gerais sobre sistemas de distribuição de fármaco podem ser encontradas em Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (Lippencott Williams & Wilkins, Baltimore Md. (1999).
[163] Em várias modalidades, a composição farmacêutica inclui carreadores e excipientes (incluindo, porém sem limitação, tampões, carboidratos, manitol, polipeptídeos, aminoácidos, antioxidantes, bacteriostatos, agentes quelantes, agentes de suspensão, agentes espessantes e/ou conservantes), água, óleos, incluindo aqueles de origem em petróleo, animal, vegetal ou sintética, tal como óleo de amendoim, óleo de soja, óleo mineral, óleo de gergelim e similares, soluções salinas, soluções aquosas de dextrose glicerol, agentes saborizantes, agentes corantes, eliminadores de pegajosidade e outros aditivos aceitáveis, adjuvantes ou aglutinantes, outras substâncias auxiliares farmaceuticamente aceitáveis para aproximação às condições fisiológicas, tais como agentes de tamponamento de pH, agentes de ajuste de tonicidade, agentes emulsificantes, agentes umectantes e similares. Os exemplos de excipientes farmacêuticos adequados incluem amido, glicose, lactose, sacarose, gelatina, malte, arroz, farinha, giz, gel de sílica, estearato de sódio, monoestearato de glicerol, talco, cloreto de sódio, leite desnatado em pó, glicerol, propileno glicol, água, etanol e similares. Em algumas modalidades, a preparação farmacêutica é substancialmente isenta de conservantes. Em outras modalidades, a preparação farmacêutica pode conter pelo menos um conservante. A metodologia geral sobre formas de dosagem farmacêuticas é encontrada em Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (Lippencott Williams & Wilkins, Baltimore Md. (1999). Pode ser reconhecido que, embora qualquer carreador adequado conhecido por aqueles de habilidade comum na técnica possa ser empregado para administrar as composições desta divulgação, o tipo de carreador pode variar dependendo do modo de administração.
[164] Os compostos podem ser também encapsulados dentro de lipossomos usando tecnologia bem conhecida. Microesferas biodegradáveis podem ser também empregadas como carreadores para as composições farmacêuticas desta divulgação. As microesferas biodegradáveis adequadas são divulgadas, por exemplo, nas Patentes U.S. Nº 4.897.268, 5.075.109, 5.928.647, 5.811.128, 5.820.883,
5.853.763, 5.814.344 e 5.942.252.
[165] O composto pode ser administrado em lipossomos ou microesferas (ou micropartículas). Métodos para preparar lipossomos e microesferas para administração a um indivíduo são bem conhecidos por aqueles versados na técnica. A Patente U.S. Nº 4.789.734, cujo conteúdo está incorporado ao presente documento a título de referência, descreve métodos para encapsular materiais biológicos em lipossomos. Essencialmente, o material é dissolvido numa solução aquosa, os fosfolipídios e lipídios adequados adicionados, e juntamente com tensoativos se necessário, e o material dialisado ou sonicado, conforme necessário. Uma análise de métodos conhecidos é fornecida por G. Gregoriadis, Capítulo 14, "Liposomes," Drug Carriers in Biology and Medicine, páginas 2.sup.87-341 (Academic Press, 1979).
[166] As microesferas formadas de polímeros ou polipeptídeos são bem conhecidas por aqueles versados na técnica e podem ser adaptadas para passagem através do trato gastrointestinal diretamente na corrente sanguínea. Alternativamente, o composto pode ser incorporado e as microesferas, ou compósito de microesferas, implantadas para liberação lenta durante um período de tempo que varia de dias a meses. Consultar, por exemplo, as Patentes U.S. Nº
4.906.474, 4.925.673 e 3.625.214 e Jein, TIPS 19:155-157 (1998), cujo conteúdo está incorporado ao presente documento a título de referência.
[167] A concentração de fármaco pode ser ajustada, o pH da solução tamponado e a isotonicidade ajustada para ser compatível com injeção intraocular ou intravítrea.
[168] Os compostos da divulgação podem ser formulados como uma solução ou suspensão estéril, em veículos adequados. As composições farmacêuticas podem ser esterilizadas por técnicas de esterilização bem conhecidas convencionais ou podem passar por filtração estéril. As soluções aquosas resultantes podem ser embaladas para uso como estão, ou liofilizadas, em que a preparação liofilizada é combinada com uma solução estéril antes da administração. As formulações adequadas e carreadores adicionais são descritos em Remington "The Science and Practice of Pharmacy" (20ª edição, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore MD), cujos ensinamentos estão incorporados a título de referência em sua totalidade no presente documento.
[169] Os agentes e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser fornecidos sozinhos ou em combinação com um ou mais outros agentes ou com uma ou mais outras formas. Por exemplo, uma formulação pode compreender um ou mais agentes em proporções particulares, dependendo das potências relativas de cada agente e da indicação destinada. Por exemplo, em composições para direcionar dois alvos hospedeiros diferentes e quando as potências são similares, uma razão de agentes de cerca de 1:1 pode ser usada. As duas formas podem ser formuladas juntas, na mesma unidade de dosagem, por exemplo, num creme, supositório, tablete, cápsula, aspersão em aerossol ou pacote de pó a ser dissolvido numa bebida; ou cada forma pode ser formulada numa unidade separada, por exemplo, dois creme,
dois supositórios, dois tabletes, duas cápsulas, um tablete e um líquido para dissolver o tablete, duas aspersões em aerossol ou um pacote de pó e um líquido para dissolver o pó, etc.
[170] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" significa aqueles sais que mantêm a efetividade biológica e as propriedades dos agentes usados na presente divulgação e que não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis.
[171] Os sais típicos são aqueles dos íons inorgânicos, tal como, por exemplo, íons de sódio, potássio, cálcio, magnésio e similares. Tais sais incluem sais com ácidos inorgânicos ou orgânicos, tal como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido acético, ácido fumárico, ácido succínico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido málico, ácido cítrico, ácido tartárico ou ácido maleico. Adicionalmente, se o agente (ou agentes) contiver um grupo carboxila ou outro grupo ácido, o mesmo pode ser convertido num sal de adição farmaceuticamente aceitável com base inorgânicas ou orgânicas. Os exemplos de bases adequadas incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, amônia, ciclo-hexilamina, diciclo-hexil-amina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina e similares.
[172] Um éster ou amida farmaceuticamente aceitável se refere àqueles que mantêm a efetividade biológica e as propriedades dos agentes usados na presente divulgação e que não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis. Os ésteres típicos incluem etílico, metílico, isobutílico, etilenoglicol e similares. As amidas típicas incluem amidas não substituídas, alquil amidas, dialquil amidas e similares.
[173] Em algumas modalidades, um agente pode ser administrado em combinação com um ou mais outros compostos, formas, e/ou agentes, por exemplo, conforme descrito acima. As composições farmacêuticas com um ou mais outros agentes ativos podem ser formulados para compreender certas razões molares. Por exemplo, podem ser usadas razões molares de cerca de 99:1 a cerca de 1:99 entre um primeiro agente ativo e o outro agente ativo. Em alguns subconjuntos das modalidades, a faixa de razões molares entre um primeiro agente ativo: outro agente ativo é selecionada dentre cerca de 80:20 a cerca de 20:80; cerca de 75:25 a cerca de 25:75, cerca de 70:30 a cerca de 30:70, cerca de 66:33 a cerca de 33:66, cerca de 60:40 a cerca de 40:60; cerca de 50:50; e cerca de 90:10 a cerca de 10:90. A razão molar entre um primeiro agente ativo: outros agentes ativos pode ser cerca de 1:9 e, em algumas modalidades, pode ser cerca de 1:1. Os dois agentes, formas e/ou compostos podem ser formulados juntos, na mesma unidade de dosagem, por exemplo, num creme, supositório, tablete, cápsula ou pacote de pó a ser dissolvido numa bebida; ou cada agente, forma e/ou composto pode ser formulado em unidades separadas, por exemplo, dois cremes, supositórios, tabletes, duas cápsulas, um tablete e um líquido para dissolver o tablete, uma aspersão em aerossol, um pacote de pó e um líquido para dissolver o pó, etc.
[174] Se necessário ou desejável, os agentes e/ou combinações de agentes podem ser administrados com ainda outros agentes. A escolha de agentes que podem ser coadministrados com os agentes e/ou combinações de agentes da presente divulgação pode depender, pelo menos em parte, da afecção que é tratada.
[175] O agente (ou agentes) (ou amidas, ésteres ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos) pode ser administrado por si ou na forma de uma composição farmacêutica, em que o agente (ou agentes) ativo está numa mistura ou mistura com um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis. Uma composição farmacêutica, conforme usado no presente documento, pode ser qualquer composição preparada para administração a um indivíduo. As composições farmacêuticas para uso em conformidade com a presente divulgação podem ser formuladas de maneira convencional usando um ou mais carreadores fisiologicamente aceitáveis que compreendem excipientes, diluentes e/ou auxiliares, por exemplo, que facilitam o processamento dos agentes ativos em preparações que podem ser administradas. A formulação adequada pode depender pelo menos em parte da via de administração escolhida. O agente (ou agentes) útil na presente divulgação, ou amidas, ésteres ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, pode ser distribuído a um indivíduo usando diversas vias ou modos de administração, incluindo aplicações oral, bucal, tópica, retal, transdérmica, transmucosal, subcutânea, intravenosa, intraocular, intravítrea e intramuscular, assim como por inalação.
[176] Em algumas modalidades, óleos ou solventes não aquosos podem ser usados para colocar os agentes em solução, devido, por exemplo, à presença de grandes porções químicas lipofílicas. Alternativamente, emulsões, suspensões ou outras preparações, por exemplo, preparações lipossômicas, podem ser usadas. Em relação a preparações lipossômicas, quaisquer métodos conhecidos para preparar lipossomos para tratamento de uma afecção podem ser usados. Consultar, por exemplo, Bangham et al., J. Mol. Biol. 23: 238- 252 (1965) e Szoka et al., Proc. Natl Acad. Sci. EUA 75: 4194-4198 (1978), incorporados ao presente documento a título de referência. Os ligantes também podem ser ligados aos lipossomos para direcionar estas composições a sítios de ação particulares. Os agentes desta divulgação podem ser também integrados em gêneros alimentícios, por exemplo, queijo cremoso, manteiga, molho para salada ou sorvete, para facilitar a solubilização, administração e/ou adesão em certas populações de indivíduos.
[177] Os compostos da divulgação podem ser formulados para administração parenteral (por exemplo, por injeção, por exemplo, injeção intraocular ou intravítrea) e podem ser apresentados em forma de dose unitária em ampolas, seringas pré-carregadas, infusão de volume pequeno ou em recipientes de múltiplas doses com um conservante adicionado. As composições podem tomar tais formas como suspensões, soluções ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos, por exemplo, soluções em polietilenoglicol.
[178] Para formulações injetáveis, o veículo pode ser escolhido dentre aqueles conhecidos na técnica como adequados, incluindo soluções aquosas ou suspensões de óleo, ou emulsões, com óleo de gergelim, óleo de milho, óleo de semente de algodão ou óleo de amendoim, assim como elixires, manitol, dextrose ou uma solução aquosa estéril e veículos farmacêuticos similares. A formulação pode também compreender composições poliméricas que são biocompatíveis, biodegradáveis, tal como ácido poli(láctico-co-glicólico). Estes materiais podem ser transformados em micro ou nanoesferas, carregados com fármaco e adicionalmente revestidos ou derivatizados para fornecer desempenho de liberação sustentada superior. Os veículos adequados para injeção periocular ou intraocular incluem, por exemplo, suspensões de agente terapêutico em água de grau de injeção, lipossomos e veículos adequados para substâncias lipofílicas. Outros veículos para injeção periocular ou intraocular são bem conhecidos na técnica.
[179] Em algumas modalidades, a composição é formulada em conformidade com os procedimentos de rotina como uma composição farmacêutica adaptada para administração intravenosa a seres humanos. Tipicamente, as composições para administração intravenosa são soluções em tampão aquoso isotônico estéril. Quando necessário, a composição pode também incluir um agente solubilizante e um anestésico local tal como lidocaína para aliviar a dor no local da injeção. Geralmente, os ingredientes são supridos ou separadamente ou misturados em conjunto em forma de dosagem unitária, por exemplo, como um pó liofilizado seco ou concentrado livre de água num recipiente hermeticamente vedado tal como uma ampola ou sachê indicando a quantidade de agente ativo. Quando a composição deve ser administrada por infusão, pode ser dispensada com um frasco de infusão que contém água ou soro fisiológico estéril de grau farmacêutico. Nos casos em que a composição é administrada por injeção, uma ampola de água estéril para injeção ou solução salina pode ser fornecida de modo que os ingredientes possam ser misturados antes da administração.
[180] Quando a administração é por injeção, o composto ativo pode ser formulado em soluções aquosas, especificamente em tampões fisiologicamente compatíveis, tal como solução de Hanks, solução de Ringer ou tampão de solução salina fisiológica. A solução pode conter agentes formuladores, tais como agentes de suspensão, estabilização e/ou dispersão. Alternativamente, o composto ativo pode estar em forma de pó para constituição com um veículo adequado, por exemplo, água isenta de pirogênios estéril, antes do uso. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica não compreende um adjuvante ou qualquer outra substância adicionada para intensificar a resposta imunológica estimulada pelo peptídeo. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma substância que inibe a resposta imunológica ao peptídeo. Os métodos de formulação são conhecidos na técnica, por exemplo, conforme divulgado em Remington's Pharmaceutical Sciences, última edição, Mack Publishing Co., Easton P.
[181] Em algumas modalidades, os distúrbios oculares podem ser eficazmente tratados com soluções oftálmicas, suspensões, pomadas ou insertos que compreendem um agente ou combinação de agentes da presente divulgação. Colírios podem ser preparados dissolvendo-se o ingrediente ativo numa solução aquosa estéril, tal como solução salina fisiológica, solução de tamponamento, etc., ou combinando-se composições em pó a serem dissolvidas antes do uso. Outros veículos podem ser escolhidos, conforme é conhecido na técnica, incluindo, porém sem limitação: solução salina em equilíbrio, solução salina, poliéteres solúveis em água, tal como polietilenoglicol, polivinilas, tal como álcool polivinílico e povidona, derivados de celulose, tal como metilcelulose e hidroxipropil metilcelulose, derivados de petróleo, tal como óleo mineral e petrolato branco, gorduras animais, tal como lanolina, polímeros de ácido acrílico, tal como gel de carboxipolimetileno, gorduras vegetais, tal como óleo de amendoim, e polissacarídeos, tais como dextranos, e glicosaminoglicanos, tal como hialuronato de sódio. Se desejado, aditivos comumente usados nos colírios podem ser adicionados. Tais aditivos incluem agentes de isotonização (por exemplo, cloreto de sódio, etc.), agente tampão (por exemplo, ácido bórico, mono-hidrogenofosfato de sódio, di- hidrogenofosfato de sódio, etc.), conservantes (por exemplo, cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, clorobutanol, etc.), espessantes (por exemplo, sacarídeo, tal como as lactose, manitol, maltose, etc.; por exemplo, ácido hialurônico ou seu sal, tal como hialuronato de sódio, hialuronato de potássio, etc.; por exemplo, mucopolissacarídeo, tal como sulfato de condroitina, etc.; por exemplo, poliacrilato de sódio, polímero de carboxivinila, poliacrilato reticulado, álcool polivinílico, polivinil pirrolidona, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, hidroxipropilcelulose ou outros agentes conhecidos por aqueles versados na técnica).
[182] A solubilidade dos componentes das presentes composições pode ser aumentada por um tensoativo ou outro cossolvente adequado na composição. Tais cossolventes incluem polissorbato 20, 60 e 80,
Pluronic F68, F-84 e P-103, ciclodextrina ou outros agentes conhecidos por aqueles versados na técnica. Tais cossolventes podem ser empregados num nível de cerca de 0,01% a 2% em peso.
[183] As composições da divulgação podem ser embaladas na forma de multidose. Conservantes podem ser preferenciais para impedir contaminação microbiana durante o uso. Os conservantes adequados incluem: cloreto de benzalcônio, timerosal, clorobutanol, metil parabeno, propil parabeno, álcool feniletílico, edetato dissódico, ácido sórbico, Onâmero M ou outros agentes conhecidos por aqueles versados na técnica. Nos produtos oftálmicos do estado da técnica, tais conservantes podem ser empregados num nível de 0,004% a 0,02%. Nas composições do presente pedido, o conservante, de preferência, cloreto de benzalcônio, pode ser empregado num nível de 0,001% a menos que 0,01%, por exemplo, de 0,001% a 0,008%, de preferência, cerca de 0,005% em peso. Foi constatado que uma concentração de cloreto de benzalcônio de 0,005% pode ser suficiente para conservar as composições da presente divulgação contra ataque microbiano.
[184] Em algumas modalidades, os agentes da presente divulgação são distribuídos na forma solúvel em vez de suspensão, o que permite absorção mais rápida e quantitativa aos sítios de ação. Em geral, formulações, tais como gelatinas, cremes, loções, supositórios e pomadas podem fornecer a uma área mais exposição estendida aos agentes da presente divulgação, enquanto formulações em solução, por exemplo, aspersões, fornecem exposição a curto prazo, mais imediata.
[185] É contemplado adicionalmente que os compostos da divulgação podem ser fixados de modo liberável a polímero biocompatíveis para uso em formulações com liberação sustentada sobre, em ou fixados a insertos para administração tópica, intraocular, periocular ou sistêmica. A liberação controlada de um polímero biocompatível pode ser utilizada com um polímero solúvel em água para formar uma formulação instilável, também. A liberação controlada de um polímero biocompatível, tal como, por exemplo, microesferas ou nanoespeferas de PLGA, pode ser utilizada numa formulação adequada para implantação ou injeção intraocular para administração de liberação sustentada, assim como qualquer polímero biocompatível e biodegradável adequado pode ser usado.
EXEMPLOS
[186] As modalidades exemplificativas a seguir descrevem adicionalmente a presente invenção. Deve-se compreender que estes exemplos se destinam apenas a ilustrar a invenção, mas não a limitar o escopo da presente invenção. A não ser que indicado de outro modo, os métodos e condições divulgados, por exemplo, em sambrook et al, molecular cloning: a laboratory manual (New York: cold spring harbor laboratory press, 1989) ou as condições recomendadas pelo fabricante podem ser usados nos exemplos abaixo. EXEMPLO 1 – PREPARAÇÃO DE VÍRUS E PLASMÍDEO DE ND4
1.1 preparação de plasmídeo
[187] A sequência de nucleotídeos para ND4 humana (SEQ ID Nº: 6) foi obtida com base na sequência de referência do Centro Nacional para Informações de Biotecnologia yp_003024035.1. Estas sequências para a sequência de direcionamento mitocondrial não otimizada COX10 são SEQ ID Nº: 1. As sequências otimizadas para a sequência de direcionamento mitocondrial COX10 (opt_COX10, SEQ ID Nº: 2) e a sequência de codificação de ND4 humana (opt_ND4, SEQ ID Nº: 7) foram projetadas para melhorar a eficiência de transcrição e a eficiência de tradução. A sequência de COX10-ND4 otimizada, que é cerca de 75,89% homóloga à COX10-ND4 não otimizada, foi seguida por uma região não traduzida três plica (isto é, 3'UTR, SEQ ID Nº: 13) a um ácido nucleico recombinante, opt_COX10-opt_ND4-3'UTR (Conforme mostrado na SEQ ID Nº: 31).
[188] O ácido nucleico recombinante sintetizado, opt_COX10- opt_ND4-3'UTR, foi incorporado num vetor de vírus adenoassociado (AAV) por amplificação por PCR (Figura 1). O opt_COX10-opt_ND4- 3'UTR foi cortado pelas enzimas de restrição EcoRI/SalI para formar extremidades coesivas e, então, incorporado num vetor de AAV com sítios de restrição EcoRI/SalI, tal como o vetor pSNaV, para gerar o plasmídeo pSNaV/rAAV2/2-ND4 (isto é, o plasmídeo de ND4 otimizado com pAAV2). O plasmídeo pAAV2-opt_ND4 foi comparado ao plasmídeo pAAV2-ND4 não otimizado.
[189] As etapas de triagem exploratória e identificação foram similares ao CN102634527B: o plasmídeo foi cultivado a 37°C numa placa de LB. Colônias azuis e colônias brancas apareceram, em que as colônias brancas eram clones recombinantes. As colônias brancas foram coletadas, adicionadas a 100 mg/l de meio de cultura LB contendo ampicilina, cultivadas a 37°C, 200 rpm por 8 horas e, então, o plasmídeo foi extraído do meio bacteriano cultivado com base no protocolo de extração de plasmídeo Biomiga. A identificação do plasmídeo foi confirmada usando as enzimas de restrição EcoRI/SalI.
1.2 transfecção de células
[190] Um dia antes da transfecção, células HEK293 foram inoculadas a uma garrafa de cultura celular de 225 cm2: na densidade de inoculação de 3,0 × 107 células/ml, o meio de cultura foi Meio Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) com 10% de soro bovino, a 37ºC numa incubadora com 5% de CO2 de um dia para o outro. O meio de cultura foi substituído por DMEM fresco com 10% de soro bovino no dia da transfecção.
[191] Após as células terem proliferado até 80 a 90%, descartar o meio de cultura e transfectar as células com o plasmídeo pAAV2-ND4 e pAAV2-opt_ND4, usando o kit de transfecção PlasmidTrans (VGTC). O protocolo de transfecção detalhado foi descrito no documento Nº
CN102634527B exemplo 1. As células foram coletadas 48 após a transfecção.
1.3 Coleta, concentração e purificação do vírus adenoassociado recombinante
[192] Coleta de vírus: 1) banho de etanol e gelo seco (ou nitrogênio líquido) e um banho de água a 37°C foram preparados; 2) as células transfectadas juntamente com os meios foram coletadas num tubo de centrifugação de 15 ml; 3) as células foram centrifugadas por 3 minutos a 1000 rpm/min; as células e o sobrenadante foram separados; o sobrenadante foi armazenado separadamente; e as células foram ressuspensas em 1 ml de PBS; 4) a suspensão de células foi transferida entre o banho de etanol e gelo seco e banho de água a 37°C repetidamente, congelar e descongelar por quatro vezes por 10 minutos cada, agitando ligeiramente após cada descongelamento.
[193] Concentração de vírus: 1) os restos de células foram removidos com 10000 g de centrifugação; o sobrenadante centrífugo foi transferido para um novo tubo de centrifugação; 2) as impurezas foram removidas por filtração com um filtro de 0,45 μm; 3) cada 1/2 volume de NaCl 1 M e 10% de solução de PEG 8000 foram adicionados na amostra, misturados uniformemente e armazenados a 4°C de um dia para o outro; 4) o sobrenadante foi descartado após 12000 rpm de centrifugação por duas horas; após o precipitado viral ter sido completamente dissolvido numa quantidade adequada de solução de PBS, esterilizar a amostra com um filtro de 0,22 μm; 5) adicionar benzonase nuclease para remover o DNA plasmídeo residual (concentração final a 50 U/ml). O tubo foi invertido diversas vezes para misturar completamente e, então, incubado a 37°C por 30 minutos; 6) a amostra foi filtrada com uma cabeça de filtração de 0,45 μm; o filtrado é o vírus rAAV2 concentrado.
[194] Purificação de vírus: 1) CsCl foi adicionado à solução de vírus concentrada até uma densidade de 1,41 g/ml (índice de refração a 1,372); 2) a amostra foi adicionada no tubo de ultracentrifugação e o tubo foi carregado com 1,41 g/ml de solução de CsCl pré-preparada; 3) centrifugado a 175000 g por 24 horas para formar um gradiente de densidade. Coleta sequencial de diferentes densidades da amostra foi realizada. As partículas de rAAV2 enriquecidas foram coletadas; 4) repetir o processo mais uma vez. O vírus foi carregado a uma bolsa de diálise de 100 kDa e dialisado/dessalinizado a 4°C de um dia para o outro. O vírus adenoassociado recombinante concentrado e purificado era rAAV2-ND4 e ND4 otimizada com rAAV2.
[195] Similarmente, outras sequências de direcionamento mitocondrial (MTS), tal como OPA1 (SEQ ID Nº: 5), podem ser usadas para substituir COX10 no exemplo acima e criar AAV com plasmídeos recombinantes. EXEMPLO 2 – INJEÇÃO INTRAVÍTREA DE RAAV2 NOS OLHOS DE
COELHOS
[196] Doze coelhos foram divididos em 2 grupos: rAAV2-ND4 e ND4 otimizada com rAAV2. Solução de vírus (1 × 1010 vg/0,05 ml) foi perfurada na cavidade vítrea de 3 mm fora do limbo da córnea na pars plana. Após injeção intravítrea, os olhos foram examinados usando exame da lâmpada de fenda e inspeção fotográfica do fundus. Injeção por 30 dias. Detecção por RT-PCR e imunoblotting foram executados em cada grupo, respectivamente. EXEMPLO 3 – PCR EM TEMPO REAL PARA A EXPRESSÃO DE ND4
[197] Os RNAs das células do nervo óptico de coelho de rAAV2- ND4 e ND4 otimizadas com rAAV2 transfectadas foram extraídos usando o kit de extração de RNA total TRIZOL. Os modelos de cDNA foram sintetizados por transcrição reversa do RNA extraído.
[198] O software de análise de domínio estrutural conservado NCBI foi usado para analisar a estrutura conservada de ND4,
assegurando que os fragmentos amplificados com iniciadores projetados estejam localizados na região não conservada; então, iniciadores projetados de acordo com o princípio de projeto de iniciador de PCR quantitativa fluorescente: β-actina-S：CGAGATCGTGCGGGACAT (SEQ ID Nº: 85)； β-actina-A：CAGGAAGGAGGGCTGGAAC (SEQ ID Nº: 86); ND4-S：CTGCCTACGACAAACAGAC (SEQ ID Nº: 87); ND4-A：AGTGCGTTCGTAGTTTGAG (SEQ ID Nº: 88);
[199] Protocolo e reação PCR quantitativa fluorescente: PCR quantitativa fluorescente foi medida num sistema de detecção por PCR em tempo real. Num tubo de reação PCR de 0,2 ml, mistura verde SYBR 12,5 μl, ddH2O 8 μl, 1 μl de cada iniciador e a amostra de cDNA 2,5 μl foram adicionados a um volume geral de f 25 μl. Cada amostra foi usada para amplificação do gene-alvo e amplificação do gene de referência β- actina, e cada amplificação foi repetida três vezes. Os reagentes comuns foram adicionados juntamente e, então, divididos separadamente para minimizar a variação de manuseio. A PCR quantitativa fluorescente foi executada: pré-desnaturação a 95ºC por 1 s, desnaturação a 94°C por 15 s, anelamento a 55°C por 15 s, extensão a 72°C por 45 s. Um total de 40 ciclos de reação de amplificação foi realizado, e aquisição de sinal de fluorescência foi realizada na fase de extensão de cada ciclo. Após a reação, uma análise de curva de fusão a 94°C a 55°C foi realizada. Adotando-se um método quantitativo relativo, pesquisa de diferença de nível de expressão de genes para beta-actina foi usada como um gene de referência interna.
[200] Conforme mostrado na Figura 2, o nível de expressão relativo (nível de mRNA) da rAAV2-ND4 e ND4 otimizada com rAAV2 foi 0,42 ± 0,23 e 0,57 ± 0,62, respectivamente (p < 0,05, Figura 2). Os resultados, inesperadamente, mostram que a sequência de ácidos nucleicos de codificação ND4 otimizada (opt_ND4, SEQ ID Nº: 7) e o ácido nucleico recombinante correspondente (opt_COX10-opt_ND4- 3'UTR, SEQ ID Nº: 31) supreendentemente aumentaram a eficiência de transcrição, aumentando a expressão da ND4 otimizada com rAAV2 em cerca de 36%. Os resultados mostram que a eficiência de transcrição da ND4 otimizada com rAAV2 é significativamente mais alta. EXEMPLO 4 - DETECÇÃO POR IMUNOBLOTTING DE EXPRESSÃO DE ND4
[201] A proteína de ND4 foi purificada de células nervosas de coelho transfectadas por ND4 otimizada com rAAV2 e rAAV2-ND4, respectivamente. Após uma eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% e transferidas a uma membrana de difluoreto de polivinilideno (Bio-Rad, HER-hercules, CA, EUA) para detecção imunológica. β-actina foi usada como um gene de referência interna. A tira de filme foi observada num instrumento de análise de imagens automático (Li-Cor; Lincoln, NE, EUA) e analisada usando a densidade óptica integrada da banda de proteína com método de normalização integral, de modo a obter o mesmo valor de densidade óptica correspondente de amostra. O software de análise estatística SPSS 19.0 foi usado para a análise de dados.
[202] Os resultados foram mostrados na Figura 3. O nível de expressão de proteína relativo médio de ND4 para ND4 otimizada com rAAV2 (coluna preta esquerda) e rAAV2-ND4 foi 0,32 ± 0,11 e 0,68 ± 0,20, respectivamente (p < 0,01, Figura 3). Os resultados, inesperadamente, mostram que a sequência de ácidos nucleicos de codificação ND4 otimizada (opt_ND4, SEQ ID Nº: 7) e o ácido nucleico recombinante correspondente (opt_COX10-opt_ND4-3'UTR, SEQ ID Nº: 31) surpreendentemente aumentaram a eficiência de tradução, aumentando a expressão da ND4 otimizada com rAAV2 em cerca de 112%. Os resultados mostram que a eficiência de tradução da ND4 otimizada com rAAV2 é também significativamente mais alta.
EXEMPLO 5 - PRESSÃO INTRAOCULAR E FOTOGRAFIA DE
FUNDO O OLHO DE COELHOS
[203] Exame da lâmpada de fenda e medição de pressão intraocular foram realizados em ambos os grupos de coelhos em 1, 3, 7 e 30 dias após a cirurgia. Nenhuma anormalidade óbvia, congestão conjuntiva, secreções ou endoftalmite foi observada e a pressão intraocular não foi elevada em todos os coelhos.
[204] Os resultados fotográficos do fundus são mostrados na Figura 4. Nenhum dano ou complicação óbvio ao nervo óptico e vascular retinal dos coelhos, indicando que a injeção intravítrea padrão é segura sem reação de inflamação perceptível ou outras complicações. EXEMPLO 6 – TESTE CLÍNICO HUMANO
[205] Dois grupos de pacientes foram testados: 1) entre 2011 e 2012, 9 pacientes receberam injeção intravítrea de 1 × 10 10 vg/0,05 ml de rAAV2-ND4 num único olho, como um grupo de controle; e 2) entre 2017 e janeiro de 2018, 20 pacientes receberam injeção intravítrea de 1 × 1010 vg/0,05 ml de ND4 otimizada com rAAV2 num único olho, como um grupo experimental. Os resultados do teste clínico foram analisados usando a análise estatística SPSS 19.0.
[206] A comparação dos dois grupos é mostrada na Tabela 2. O tempo de melhora da visão mais rápido foi 1 mês no grupo experimental, que foi significativamente mais rápido que o grupo de controle em 3 meses (p < 0,01); a recuperação ideal da visão para o grupo experimental foi 1,0, que foi obviamente mais alto que o grupo de controle em 0,8 (p < 0,01); a recuperação média de visão no grupo experimental foi 0,582 ± 0,086, que foi obviamente mais alto do que o grupo de controle a 0,344 ± 0,062 (p < 0,01). Os resultados fotográficos do fundus são mostrados na Figura 5. Nenhum dano ou complicação óbvia do nervo óptico e vascular retinal dos pacientes nos grupos experimental e de controle, indicando a segurança da injeção intravítrea de ND4 otimizada com rAAV2 e rAAV2- ND4.
TABELA 2: A COMPARAÇÃO DE ND4 OTIMIZADA COM RAAV2 E RAAV2-ND4 EM TERAPIA GÊNICA DE LHON Tempo de Número de Número Recupera- recuperação melhora de pacientes grupo do ção ideal média da visão mais com visão paciente da visão visão rápido (mês) melhorada controle 9 3 6 (67%) 0,8 0,344±0,062 experimental 20 1 15 (75%) 1,0 0,582±0,086 Valor P < 0,01 < 0,01 < 0,01 < 0,01 EXEMPLO 7 – OPA1 COMO AS SEQUÊNCIAS DE
DIRECIONAMENTO MITOCONDRIAL
[207] As sequências COX10 e 3'UTR no ácido nucleico recombinante (opt_COX10-opt_ND4-3'UTR, SEQ ID Nº: 31) nos exemplos 1 a 6 foram substituídas por outra sequência de direcionamento mitocondrial, OPA1 (SEQ ID Nº: 5) e outra sequência 3'UTR, 3'UTR* (SEQ ID Nº: 14) respectivamente, para gerar um novo ácido nucleico recombinante, OPA1-opt_ND4-3'UTR* (SEQ ID Nº: 74).
[208] Os métodos experimentais foram iguais aos exemplos 1 a 6, em que o ácido nucleico recombinante opt_COX10-opt_ND4-3'UTR (SEQ ID Nº: 31) foi substituído por OPA1-opt_ND4-3'UTR (SEQ ID Nº: 74). Foi constatado que a sequência de ND4 otimizada possui eficiência de transcrição e tradução e níveis de expressão significativamente melhorados, assim como eficácia e segurança mais altos no tratamento de LHON em comparação com ND4 não otimizada (COX10-ND4- 3'UTR, SEQ ID Nº: 15). EXEMPLO 8 – SEQUÊNCIA DE ND4 OTIMIZADA OPT_ND4*
[209] Métodos experimentais similares aos exemplos 1 a 6 foram seguidos usando o ácido nucleico, opt_COX10*-opt_ND4*-3'UTR (SEQ ID Nº: 47). Seguindo os procedimentos similares ao exemplo 1, vírus etiquetado com uma proteína fluorescente, EGFP, foi preparado como rAAV2-ND4-EGFP e rAAV2-opt_ND4*-EGFP.
[210] A célula 293T congelada foi ressuscitada e deixada proliferar num frasco T75 a cerca de 90%. As células foram precipitadas e ressuspensas em meio completo DMEM até uma densidade celular de 5 × 104 células/ml. As células foram ressuspensas. Cerca de 100 μl da suspensão de células (cerca de 5000 células) foram adicionadas em cada poço de uma placa de 96 poços. As células foram cultivadas e proliferadas até 50% sob 37ºC e 5% de CO2. Cerca de 0,02 μl de PBS foi misturado com 2 × 1010 vg/0,02 μl do vírus rAAV2-ND4-EGFP e rAAV2-opt_ND4*-EGFP, respectivamente. Após 48 horas, microscopia fluorescente e detecção por RT-PCR e experimentos de imunoblotting foram realizados. Conforme mostrado na Figura 6, EGFP foi expresso com sucesso, indicando que rAAV que porta o gene EGFP foi transfectado com sucesso nas células 293T e rAAV2-ND4-EGFP e rAAV2-opt_ND4*-EGFP foram expressos com bem sucesso.
[211] Testes de PCR em tempo real similares ao exemplo 3 foram seguidos usado os seguintes iniciadores: β-actina-S：CGAGATCGTGCGGGACAT (SEQ ID Nº: 85)； β-actina-A：CAGGAAGGAGGGCTGGAAC (SEQ ID Nº: 86); ND4-S: GCCAACAGCAACTACGAGC (SEQ ID Nº: 107); ND4-A: TGATGTTGCTCCAGCTGAAG (SEQ ID Nº: 108);
[212] Os resultados, inesperadamente, mostram que a sequência de ácidos nucleicos de codificação ND4 otimizada (opt_ND4, SEQ ID Nº: 8) e o ácido nucleico recombinante correspondente (opt_COX10- opt_ND4-3'UTR, SEQ ID Nº: 47) supreendentemente aumentaram a eficiência de transcrição, aumentando a expressão da rAAV2-opt_ND4 em cerca de 20%. Os resultados mostram que a eficiência de transcrição da rAAV2-opt_ND4 é significativamente mais alta.
[213] A Figura 7 mostra a expressão de ND4 nas células 293T. A expressão média de proteína ND4 para rAAV2-ND4 é 0,36, enquanto a expressão média de proteína ND4 para rAAV2-opt_ND4* é 1,65, que é cerca de 4,6 vezes mais alta que o grupo rAAV2-ND4 (p < 0,01) (consultar a Figura 8).
[214] A Figura 9 mostra a expressão de ND4 em células do nervo óptico de coelho. A expressão média de proteína ND4 para rAAV2-ND4 é 0,16, enquanto a expressão média de proteína ND4 para rAAV2- opt_ND4* é 0,48, que é cerca de 3 vezes mais alta que o grupo rAAV2- ND4 (p < 0,01) (consultar a Figura 10).
[215] Similarmente ao exemplo 5, exame de lâmpada de fenda e medição de pressão intraocular foram realizados em ambos os grupos de coelhos em 1, 3, 7 e 30 dias após a cirurgia. Nenhuma anormalidade óbvia, congestão conjuntiva, secreções ou endoftalmite foi observada e a pressão intraocular não foi elevada em todos os coelhos.
[216] Os resultados fotográficos do fundus para rAAV2-ND4 e rAAV2-opt_ND4* foram mostrados na Figura 11. Nenhum dano ou complicação óbvio ao nervo óptico e vascular retinal dos coelhos, indicando que a injeção intravítrea padrão é segura sem reação de inflamação perceptível ou outras complicações.
[217] Os globos oculares de ambos os grupos de coelho foram removidos após o exame de lâmpada de fenda e medição de pressão intraocular. Os globos oculares foram fixados e desidratados usando parafina. Os tecidos foram seccionados patologicamente ao longo da direção dos nervos ópticos. Após desidratação adicional, a amostra de tecido foi colorida usando hematoxilina e eosina. O resultado da inspeção por microscópio é mencionado na Figura 12. Conforme mostrado nos resultados de manchamento com HE, a camada de fibra do gânglio retinal de coelho foi danificada e o número de células do gânglio não foi reduzido, indicando que a injeção intravítrea não produziu toxicidade retinal ou dano nervoso e pode ser usada com segurança.
[218] Os métodos experimentais foram iguais ao exemplo 8, em que o ácido nucleico recombinante opt_COX10*-opt_ND4*-3'UTR (SEQ ID Nº: 47) foi substituído por OPA1-opt_ND4*-3'UTR* (SEQ ID Nº: 76). Foi constatado que a sequência de ND4 otimizada possui eficiência de transcrição e tradução e níveis de expressão significativamente melhorados, assim como eficácia e segurança mais altos no tratamento de LHON em comparação com ND4 não otimizada (COX10-ND4- 3'UTR, SEQ ID Nº: 15). EXEMPLO 9 – SEQUÊNCIA DE ND6
[219] Métodos experimentais similares aos exemplos 1 a 6 foram seguidos usando o ácido nucleico, COX10-ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 21), que a combinação (5' a 3') de COX10 (SEQ ID Nº: 1), ND6 (SEQ ID Nº: 9) e 3'UTR (SEQ ID Nº: 13).
[220] A triagem de plasmídeo para COX10-ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 21) usou os seguintes iniciadores: ND6-F: ATGATGTATGCTTTGTTTCTG (SEQ ID Nº: 89), ND6-R: CTAATTCCCCCGAGCAATCTC (SEQ ID Nº: 90),
[221] O vírus transfectado e triado rAAV2-ND6 teve um título viral de 2,0 × 1011 vg/ml. Similarmente ao exemplo 5, exame da lâmpada de fenda e medição de pressão intraocular foram realizados nos três grupos de coelhos (A: rAAV2-ND6; B: rAAV-GFP; C: PBS) em 1, 7 e 30 dias após a cirurgia (Figura 13). Nenhuma anormalidade óbvia, congestão conjuntiva, secreções ou endoftalmite foi observada e a pressão intraocular não foi elevada em todos os coelhos.
[222] Testes de PCR em tempo real similares ao exemplo 3 foram seguidos usado os seguintes iniciadores: β-actina-S：CGAGATCGTGCGGGACAT (SEQ ID Nº: 85)； β-actina-A：CAGGAAGGAGGGCTGGAAC (SEQ ID Nº: 86); ND6-S: AGTGTGGGTTTAGTAATG (SEQ ID Nº: 91); ND4-A: TGCCTCAGGATACTCCTC (SEQ ID Nº: 92);
[223] Os resultados mostram que a expressão de ND6 para rAAV2-ND6 e controle (PBS) foi 0,59 ± 0,06 e 0,41 ± 0,03, respectivamente. Os resultados mostram que a eficiência de transcrição do rAAV2-ND6 é mais alta do que o grupo de controle (p<0,01). EXEMPLO 10 – SEQUÊNCIA OPT_ND6 OTIMIZADA
[224] Métodos experimentais similares aos exemplos 1 a 6 foram seguidos usando o ácido nucleico, opt_COX10*-opt_ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 51), que é a combinação (5' a 3') de opt_COX10* (SEQ ID Nº: 3), opt_ND6 (SEQ ID Nº: 10) e 3'UTR (SEQ ID Nº: 13).
[225] Três de coelhos receberam injeção de: A: 1010 vg/50 µl de rAAV2-opt_ND6, B: 1010 vg/50 µl de rAAV2-ND6 (exemplo 9), e C: 1010 vg/50 µl de rAAV2-EGFP. A Figura 14 mostra os resultados fotográficos do fundus para coelhos que receberam injeção de rAAV2-opt_ND6 (A), rAAV2-ND6 (B), rAAV-EGFP (C), respectivamente. Nenhuma anormalidade óbvia, congestão conjuntiva, secreções ou endoftalmite foi observada e a pressão intraocular não foi elevada em todos os coelhos.
[226] Testes de PCR em tempo real similares ao exemplo 3 foram seguidos usado os seguintes iniciadores: β-actina-F：CTCCATCCTGGCCTCGCTGT (SEQ ID Nº: 93)； β-actina-R：GCTGTCACCTTCACCGTTCC (SEQ ID Nº: 94); ND6-F: GGGTTTTCTTCTAAGCCTTCTCC (SEQ ID Nº: 95); ND6-R: CCATCATACTCTTTCACCCACAG (SEQ ID Nº: 96); opt_ND6-F: CGCCTGCTGACCGGCTGCGT (SEQ ID Nº: 97); opt_ND6-R: CCAGGCCTCGGGGTACTCCT (SEQ ID Nº: 98);
[227] Conforme mostrado na Figura 15, tanto rAAV2-opt_ND6 (A) quanto rAAV2-ND6 (B) tiveram níveis de expressão de ND6 relativos mais altos (p<0,05) do que o grupo de controle (C). rAAV2-opt_ND6 (A) teve níveis de expressão de ND6 relativos um pouco mais altos do que rAAV2-ND6 (B). Conforme mostrado no western blot na Figura 16,
rAAV2-opt_ND6 (A) teve níveis de expressão de ND6 relativos 3 vezes mais altos do que rAAV2-ND6 (B).
[228] Os métodos experimentais foram os mesmos que no exemplo 8, enquanto os ácidos nucleicos recombinantes, COX10-ND6- 3'UTR (SEQ ID Nº: 21) e opt_COX10*-opt_ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 51), foram substituídos por OPA1-ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 77) e OPA1- opt_ND6-3'UTR (SEQ ID Nº: 79). Foi constatado que a sequência de ND6 otimizada possui eficiências de transcrição e tradução e níveis de expressão significativamente melhorados, assim como eficácia e segurança mais altas no tratamento de LHON. EXEMPLO 11 – SEQUÊNCIAS ND1 E OPT_ND1
[229] Métodos experimentais similares aos exemplos 1 a 6 foram seguidos usando rAAV2-ND1, COX10-ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 25), que é a combinação (5' a 3') de COX10 (SEQ ID Nº: 1), ND1 (SEQ ID Nº: 11) e 3'UTR (SEQ ID Nº: 13); e rAAV2-opt_ND1, opt_COX10*-opt_ND1- 3'UTR (SEQ ID Nº: 55), que é a combinação (5' a 3') de opt_COX10* (SEQ ID Nº: 3), opt_ND1 (SEQ ID Nº: 12) e 3'UTR (SEQ ID Nº: 13).
[230] A triagem de plasmídeo para COX10-ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 25) usou os seguintes iniciadores: ND1-F: ATGGCCGCATCTCCGCACACT (SEQ ID Nº: 99), ND1-R: TTAGGTTTGAGGGGGAATGCT (SEQ ID Nº: 100),
[231] A triagem de plasmídeo para opt_COX10*-opt_ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 55) usou os seguintes iniciadores: ND1-F: AACCTCAACCTAGGCCTCCTA (SEQ ID Nº: 101), ND1-R: TGGCAGGAGTAACCAGAGGTG (SEQ ID Nº: 102),
[232] Três de coelhos receberam injeção de: A: 1010 vg/50 µl de rAAV2-opt_ND1, B: 1010 vg/50 µl de rAAV2-ND1 (exemplo 9), e C: 1010 vg/50 µl de rAAV2-EGFP. Nenhuma anormalidade óbvia, congestão conjuntiva, secreções ou endoftalmite foi observada e a pressão intraocular não foi elevada em todos os coelhos.
[233] Testes de PCR em tempo real similares ao exemplo 3 foram seguidos usado os seguintes iniciadores: ND1-F: AGGAGGCTCTGTCTGGTATCTTG (SEQ ID Nº: 103); ND1-R: TTTTAGGGGCTCTTTGGTGAA (SEQ ID Nº: 104); opt_ND1-F: GCCGCCTGCTGACCGGCTGCGT (SEQ ID Nº: 105); opt_ND1-R: TGATGTACAGGGTGATGGTGCTGG (SEQ ID Nº: 106);
[234] Conforme mostrado na Figura 17, tanto rAAV2-opt_ND1 (A) quanto rAAV2-ND1 (B) tiveram níveis de expressão de ND1 relativos mais altos (p<0,05) do que o grupo de controle (C). Conforme mostrado no western blot na Figura 18, rAAV2-opt_ND1 (A) teve níveis de expressão de ND6 relativos 2 vezes mais altos do que rAAV2-ND1 (B).
[235] Os métodos experimentais foram os mesmos que no exemplo 8, enquanto os ácidos nucleicos recombinantes, COX10-ND1- 3'UTR (SEQ ID Nº: 25) e opt_COX10*-opt_ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 55), foram substituídos por OPA1-ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 81) e OPA1- opt_ND1-3'UTR (SEQ ID Nº: 83). Foi constatado que a sequência de ND1 otimizada possui eficiências de transcrição e tradução e níveis de expressão significativamente melhorados, assim como eficácia e segurança mais altas no tratamento de LHON. EXEMPLO 12 – OUTRAS PROTEÍNAS DE FUSÃO
[236] Métodos experimentais similares aos exemplos 1 a 6 podem ser seguidos usando outras proteínas de fusão conforme estabelecido nas SEQ ID Nº: 15-84. E se espera que resultados similares sejam atingidos. EXEMPLO 13 – DESENVOLVIMENTO DE FORMULAÇÃO
[237] Amostras de vírus AAV2 foram usadas para triar diferentes formulações de AAV. A estabilidade das diferentes formulações de AAV foi avaliada usando o sistema de PCR em tempo real StepOnePlus. O título viral de cada formulação sob uma condição de ciclo de congelamento/descongelamento foi medido.
[238] Em primeiro lugar, três formulações diferentes foram testadas sob 1, 2, 3, 4 e 5 ciclos de congelamento/descongelamento, e os títulos virais foram medidos e sumarizados na Tabela 3. As três formulações testadas foram: A: solução salina tamponada com fosfato (PBS); B: 1% de α,α-trealose desidratada, 1% de monocloridrato de L- histidina mono-hidratado, e 1% de polissorbato 20; e C: NaCl 180 mM, NaH2PO4/Na2HPO4 10 mM e 0,001% de poloxâmero 188, pH 7,3. Conforme mostrado na Tabela 3, a formulação C possui o desvio padrão relativo mais baixo (RSD) após ciclos de congelamento/descongelamento, indicando estabilidade superior em relação a uma formulação de AAV. TABELA 3 – OS TÍTULOS VIRAIS DAS FORMULAÇÕES A, B E C títulos virais 0 ciclos 1 ciclo 2 ciclos 3 ciclos 4 ciclos 5 ciclos RSD A 1,15E+11 9,48E+10 6,16E+10 2,90E+10 1,56E+10 5,26E+09 83,18 B 4,25E+11 5,12E+11 6,66E+11 4,30E+11 4,77E+11 4,20E+11 19,30 C 4,96E+11 6,91E+11 7,69E+11 6,82E+11 6,83E+11 7,27E+11 13,90
[239] Conforme mostrado na Tabela 3, a formulação C possui o desvio padrão relativo mais baixo (RSD) após ciclos de congelamento/descongelamento, indicando estabilidade superior em relação a uma formulação de AAV.
[240] Em segundo lugar, outro grupo de três formulações diferentes foi testado sob 1, 2, 3, 4 e 5 ciclos de congelamento/descongelamento e as titulações virais foram medidas e sumarizadas na Tabela 4. As três formulações testadas foram: D: solução salinha tamponada com fosfato (PBS), pH 7,2 a 7,4; E: PBS e 0,001% de poloxâmero 188, pH 7,2 a 7,4; e F: NaCl 80 mM, NaH2PO4 5 mM, Na2HPO4 40 mM, KH2PO4 5 mM e 0,001% de poloxâmero 188, 7,2 a 7,4.
TABELA 4 – OS TÍTULOS VIRAIS DAS FORMULAÇÕES D, E E F títulos virais 0 ciclos 1 ciclo 2 ciclos 3 ciclos 4 ciclos 5 ciclos RSD D 1,13E+10 4,62E+09 2,25E+09 1,25E+09 1,01E+09 9,48E+08 113,25 E 4,72E+10 5,48E+10 5,33E+10 5,33E+10 4,94E+10 4,08E+10 10,53 F 6,61E+10 6,08E+10 6,47E+10 6,84E+10 6,52E+10 6,05E+10 4,81
[241] Conforme mostrado na Tabela 4, a formulação F possui o desvio padrão relativo mais baixo (RSD) após 5 ciclos de congelamento/descongelamento, indicando estabilidade superior em relação a uma formulação de AAV. De modo geral, a formulação F também possui o RSD mais baixo dentre todas as formulações testadas e pode ser usada como a formulação de AAV para desenvolvimento futuro.
[242] Ainda que as modalidades preferenciais da presente invenção tenham sido mostradas e descritas aqui, será óbvio para os versados na técnica que estas modalidades são apresentadas apenas a título de exemplo. Numerosas variações, alterações e substituições ocorrerão agora para os versados na técnica, sem desviar-se da invenção. Deve ser entendido que várias alternativas às modalidades da invenção descritas no presente documento podem ser empregadas na prática da invenção. Entende-se que as reivindicações a seguir definem o escopo da invenção e que os métodos e as estruturas dentro do escopo destas reivindicações e seus equivalentes podem ser convertidos assim.

Claims (139)

REIVINDICAÇÕES
1. Ácido nucleico recombinante, caracterizado pelo fato de que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 99% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10 e 12; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
2. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159.
3. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
2.
4. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
3.
5. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
4.
6. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
5.
7. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8.
8. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10.
9. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
10. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos
90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125.
11. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
12. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23- 24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69- 70, 73-76, 79-80 e 83-84.
13. Ácido nucleico recombinante, caracterizado pelo fato de que compreende: a sequência de direcionamento mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 90% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2, 3, 4 e 5; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
14. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou
100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
2.
15. Ácido nucleico recombinante, de acordo a reivindicação 13 ou 14, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
3.
16. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 15, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4.
17. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 16, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 5.
18. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial é selecionada do grupo que consiste em NADH desidrogenase 4 (ND4), NADH desidrogenase 6 (ND6), NADH desidrogenase 1 (ND1) e uma variante das mesmas.
19. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 4 (ND4) ou uma variante da mesma.
20. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 19, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 160.
21. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 20, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 6, 7 ou 8.
22. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 6 (ND6) ou uma variante da mesma.
23. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 22, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 161.
24. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 23, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 9 ou 10.
25. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 24, caracterizado pelo fato de que a dita proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 1 (ND1) ou uma variante da mesma.
26. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 25, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
162.
27. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 26, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 11 ou 12.
28. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 27, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
29. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 28, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L.
30. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 29, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125.
31. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 29, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
32. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 31, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da dita sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
33. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 32, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
34. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 33, caracterizado pelo fato de que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-84.
35. Ácido nucleico recombinante, caracterizado pelo fato de que compreende: uma sequência de direcionamento mitocondrial; uma sequência de codificação de proteína mitocondrial que compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10 e 12; e uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
36. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que codifica um polipeptídeo selecionado do grupo que consiste em hsCOX10, hsCOX8, scRPM2, lcSirt5, tbNDUS7, ncQCR2, hsATP5G2, hsLACTB, spilv1, gmCOX2, crATP6, hsOPA1, hsSDHD, hsADCK3, osP0644B06.24-2, Neurospora crassa ATP9 (ncATP9), hsGHITM, hsNDUFAB1, hsATP5G3, crATP6_hsADCK3, ncATP9_ncATP9, zmLOC100282174, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_ncATP9, zmLOC100282174_hsADCK3_crATP6_hsATP5G3, zmLOC100282174_hsADCK3_hsATP5G3, ncATP9_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6_hsATP5G3, crATP6_hsADCK3_zmLOC100282174_hsATP5G3, hsADCK3_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_GNFP_ncATP9 e ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_lcSirt5_osP0644B06.24- 2_hsATP5G2_ncATP9.
37. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 35 ou 36, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159.
38. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 37, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2 ou 3.
39. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 38, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4.
40. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 39, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 5.
41. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 40, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8.
42. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 41, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10.
43. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 42, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
44. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 43, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
45. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 44, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L.
46. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 45, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125.
47. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 46, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
48. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 47, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da dita sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
49. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 48, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
50. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 35 a 49, caracterizado pelo fato de que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23-24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69-70, 73-76, 79-80 e 83-84.
51. Ácido nucleico recombinante, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de direcionamento mitocondrial que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2, 3 e 4.
52. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
2.
53. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 ou 52, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 3.
54. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 53, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4.
55. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 54, caracterizado pelo fato de que ainda compreende uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial.
56. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 55, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial é selecionada do grupo que consiste em NADH desidrogenase 4 (ND4), NADH desidrogenase 6 (ND6), NADH desidrogenase 1 (ND1) e uma variante das mesmas.
57. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 56, caracterizado pelo fato de que a dita proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 4 (ND4) ou uma variante da mesma.
58. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 57, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 160.
59. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 58, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 6, 7 ou 8.
60. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 59, caracterizado pelo fato de que a dita proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 6 (ND6) ou uma variante da mesma.
61. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 60, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
161.
62. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 61, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 9 ou 10.
63. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 62, caracterizado pelo fato de que a dita proteína mitocondrial compreende NADH desidrogenase 1 (ND1) ou uma variante da mesma.
64. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 63, caracterizado pelo fato de que a referida proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº:
162.
65. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 64, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 11 ou 12.
66. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 65, caracterizado pelo fato de que ainda compreende uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
67. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 66, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
68. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 67, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L.
69. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 68, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125.
70. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 69, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
71. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 70, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da dita sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
72. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 71, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
73. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 51 a 72, caracterizado pelo fato de que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-70.
74. Ácido nucleico recombinante, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de codificação de proteína mitocondrial, em que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma proteína mitocondrial, em que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 7, 8, 10 e
12.
75. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 74, caracterizado pelo fato de que ainda compreende uma sequência de direcionamento mitocondrial.
76. Ácido nucleico recombinante, de acordo com a reivindicação 74 ou 75, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que codifica um polipeptídeo selecionado do grupo que consiste em hsCOX10, hsCOX8, scRPM2, lcSirt5, tbNDUS7, ncQCR2, hsATP5G2, hsLACTB, spilv1, gmCOX2, crATP6, hsOPA1, hsSDHD, hsADCK3, osP0644B06.24-2, Neurospora crassa ATP9 (ncATP9), hsGHITM, hsNDUFAB1, hsATP5G3, crATP6 _hsADCK3, ncATP9_ncATP9, zmLOC100282174, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_ncATP9, zmLOC100282174_hsADCK3_crATP6_hsATP5G3, zmLOC100282174_hsADCK3_hsATP5G3, ncATP9_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6_hsATP5G3,
crATP6_hsADCK3_zmLOC100282174_hsATP5G3, hsADCK3_zmLOC100282174, hsADCK3_zmLOC100282174_crATP6, ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_GNFP_ncATP9, e ncATP9_zmLOC100282174_spilv1_lcSirt5_osP0644B06.24- 2_hsATP5G2_ncATP9.
77. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 76, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial codifica um polipeptídeo que compreende uma sequência de peptídeos que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 129-159.
78. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 77, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 2.
79. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 78, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 3.
80. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 79, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 4.
81. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 80, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 5.
82. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 81, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 7 ou 8.
83. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 80, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 10.
84. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 83, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de codificação de proteína mitocondrial compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 12.
85. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 84, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
86. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 85, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
87. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 86, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em hsACO2, hsATP5B, hsAK2, hsALDH2, hsCOX10, hsUQCRFS1, hsNDUFV1, hsNDUFV2, hsSOD2, hsCOX6c, hsIRP1, hsMRPS12, hsATP5J2, rnSOD2 e hsOXA1L.
88. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 87, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 111-125.
89. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 88, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de ácidos nucleicos 3'UTR compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 13 ou SEQ ID Nº: 14.
90. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 89, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 5' da dita sequência de ácidos nucleicos 3'UTR.
91. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 90, caracterizado pelo fato de que a referida sequência de direcionamento mitocondrial está localizada em 3' da referida sequência de direcionamento mitocondrial.
92. Ácido nucleico recombinante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 74 a 91, caracterizado pelo fato de que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 17-20, 23-24, 27-28, 31-34, 37-38, 41-42, 45-48, 51-52, 55-56, 59-62, 65-66, 69-70, 73-76, 79-80 e 83-84.
93. Vetor viral, caracterizado pelo fato de que compreende o referido ácido nucleico recombinante, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 92.
94. Vetor viral, de acordo com a reivindicação 93, caracterizado pelo fato de que o referido vetor viral é um vetor de vírus adenoassociado (AAV).
95. Vetor viral, de acordo com a reivindicação 94, caracterizado pelo fato de que o dito vetor de AAV é selecionado do grupo que consiste em vetores de AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 e AAV16.
96. Vetor viral, de acordo com qualquer uma das reivindicações 93 a 95, caracterizado pelo fato de que o dito vetor de AAV é um vetor de AAV recombinante (rAAV).
97. Vetor viral, de acordo com a reivindicação 96, caracterizado pelo fato de que o dito vetor de rAAV é um vetor de rAAV2.
98. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um vírus adenoassociado (AAV) que compreende o referido ácido nucleico recombinante, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 92.
99. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 98, caracterizada pelo fato de que ainda compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável da mesma.
100. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o referido vetor viral, como definido em qualquer uma das reivindicações 93 a 97, e um excipiente farmaceuticamente aceitável da mesma, em que o referido vetor viral compreende o referido ácido nucleico recombinante, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 92.
101. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: um vírus adenoassociado (AAV) que compreende um ácido nucleico recombinante, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 92, em que o referido ácido nucleico recombinante compreende uma sequência que é pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 97%, pelo menos 99% ou 100% idêntica a uma sequência conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15; e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
102. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 101, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável compreende solução salina tamponada com fosfato (PBS), α,α-trealose desidratada, monocloridrato de L-histidina mono-hidratado, polissorbato 20, NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, K2HPO4, poloxâmero 188 ou qualquer combinação dos mesmos.
103. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 102, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável é selecionado dentre solução salinha tamponada com fosfato (PBS), α,α-trealose desidratada, monocloridrato de L-histidina mono-hidratado, polissorbato 20, NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4, KH2PO4, K2HPO4, poloxâmero 188 e qualquer combinação dos mesmos.
104. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 102, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável compreende poloxâmero 188.
105. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 104, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável compreende 0,0001% a 0,01% de poloxâmero 188.
106. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 105, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável compreende 0,001% de poloxâmero 188.
107. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 106, caracterizada pelo fato de que o referido excipiente farmaceuticamente aceitável ainda compreende um ou mais sais.
108. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 107, caracterizada pelo fato de que os referidos um ou mais sais compreendem NaCl, NaH2PO4, Na2HPO4 e KH2PO4.
109. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 107, caracterizada pelo fato de que os referidos um ou mais sais compreendem NaCl 80 mM, NaH2PO4 5 mM, Na2HPO4 40 mM e KH2PO4 5 mM.
110. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 109, caracterizada pelo fato de que a referida composição farmacêutica possui um pH de 6 a 8.
111. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 110, caracterizada pelo fato de que a referida composição farmacêutica possui um pH de 7,2 a 7,4.
112. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 111, caracterizada pelo fato de que a referida composição farmacêutica possui um pH de 7,3.
113. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 112, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica possui um título viral de pelo menos 1,0 × 1010 vg/ml.
114. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 113, caracterizada pelo fato de que a dita composição farmacêutica possui um título viral de pelo menos 5,0 × 1010 vg/ml.
115. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 114, caracterizada pelo fato de que, quando a referida composição farmacêutica é submetida a cinco ciclos de congelamento/descongelamento, a referida composição farmacêutica mantém pelo menos 60%, 70%, 80% ou 90% de um título viral, em comparação com o título viral antes dos cinco ciclos de congelamento/descongelamento.
116. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 115, caracterizada pelo fato de que a dita composição farmacêutica, quando administrada a um paciente com neuropatia óptica hereditária de Leber, gera uma recuperação de visão média mais alta que uma composição farmacêutica comparável sem o referido ácido nucleico recombinante.
117. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 98 a 116, caracterizada pelo fato de que a dita composição farmacêutica, quando administrada a um paciente com neuropatia óptica hereditária de Leber, gera uma recuperação de visão média mais alta que uma composição farmacêutica comparável que compreende um ácido nucleico recombinante conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15.
118. Método para tratar um distúrbio ocular, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a referida composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 98 a 117, a um paciente que precisa da mesma.
119. Método, de acordo com a reivindicação 118, caracterizado pelo fato de que o referido distúrbio ocular é neuropatia óptica hereditária de Leber (LHON).
120. Método, de acordo com a reivindicação 118 ou 119, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a referida composição farmacêutica a um ou ambos os olhos do referido paciente.
121. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 118 a 120, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica é administrada via injeção intraocular ou intravítrea.
122. Método, de acordo com a reivindicação 121, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica é administrada via injeção intravítrea.
123. Método, de acordo com a reivindicação 122, caracterizado pelo fato de que cerca de 0,01 a 0,1 ml da referida composição farmacêutica é administrado via injeção intravítrea.
124. Método, de acordo com a reivindicação 123, caracterizado pelo fato de que cerca de 0,05 ml da referida composição farmacêutica é administrado via injeção intravítrea.
125. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 118 a 124, caracterizado pelo fato de que ainda compreende administrar metilprednisolona ao referido paciente.
126. Método, de acordo com a reivindicação 125, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada antes da referida injeção intravítrea da referida composição farmacêutica.
127. Método, de acordo com a reivindicação 125 ou 126, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada por via oral.
128. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 127, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada diariamente por pelo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 dias antes da referida injeção intravítrea da referida composição farmacêutica.
129. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 128, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada diariamente.
130. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 129, caracterizado pelo fato de que uma dosagem diária de cerca de 32 mg/60 kg de metilprednisolona é administrada.
131. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 130, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada depois da referida injeção intravítrea da referida composição farmacêutica.
132. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 131, caracterizado pelo fato de que ainda compreende administrar fosfocreatina sódica ao referido paciente.
133. Método, de acordo com a reivindicação 132, caracterizado pelo fato de que a referida fosfocreatina sódica é administrada por via intravenosa.
134. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 133, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada por via intravenosa ou oral.
135. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 134, caracterizado pelo fato de que compreende administrar metilprednisolona por via intravenosa por pelo menos um dia, que é seguida por administração de metilprednisolona por via oral por pelo menos uma semana.
136. Método, de acordo com a reivindicação 135, caracterizado pelo fato de que compreende administrar metilprednisolona por via intravenosa por cerca de 3 dias, que é seguida por administração de metilprednisolona por via oral por pelo menos cerca de 6 semanas.
137. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 136, caracterizado pelo fato de que a referida metilprednisolona é administrada por via intravenosa a uma dose diária de cerca de 80 mg/60 kg.
138. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 137, caracterizado pelo fato de que a referida administração da referida composição farmacêutica gera uma recuperação de visão média mais alta do que uma composição farmacêutica comparável sem o referido ácido nucleico recombinante.
139. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 125 a 138, caracterizado pelo fato de que a referida administração da referida composição farmacêutica gera uma recuperação de visão média mais alta que uma composição farmacêutica comparável que compreende um ácido nucleico recombinante conforme estabelecido na SEQ ID Nº: 15.
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