BR112019008415B1 - Composto de piridona e inibidor de c-met, composição farmacêutica e uso dos mesmos - Google Patents

Composto de piridona e inibidor de c-met, composição farmacêutica e uso dos mesmos Download PDF

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Abstract

é revelado na presente invenção um tipo de compostos de piridona como inibidores de c-met, e é especificamente revelado um composto como mostrado na fórmula (i) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Description

Campo da invenção
[0001] A presente invenção refere-se a uma classe de compostos de piridona como inibidor de c-Met, especificamente, a invenção é um composto representado pela fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Antecedentes da invenção
[0002] O c-Met codificado por proto-oncogene Met é um receptor tirosina cinase com alta ligação que pertence ao subgrupo RON. É o único receptor conhecido para fator de dispersão ou fator de crescimento de hepatócito (HGF). A proteína c-Met é um heterodímero ligado por dissulfeto composto de subunidade de 50kD oc e uma subunidade 145kD β, que pode ser dividida em domínio extracelular e domínio intracelular. O domínio extracelular contém três domínios estruturais com funcionalidades diferentes: domínio de ligação de ligante N-terminal (região SEMA) cobrindo a cadeia oc inteira e parcialmente a cadeia β, domínio de enriquecimento de cistina com quatro ligações de dissulfeto conservadas, e domínio semelhante a imunoglobulina. O domínio intracelular também consiste em três domínios reguladores: domínio justamembrana com sítio de fosforilação TyrlOO3, domínio catalítico de tirosina cinase com sítios de fosforilação Tyrl234 e Tyrl235, e domínio de ligação multifuncional C-terminal com tirosina de ligação Tyrl349 e Tyrl356.
[0003] HGF induz a fosforilação de c-Met por ligar a seu domínio extracelular e recruta uma variedade de fatores intersticiais como GAB1 (proteína-1 de ligação de receptor de fator de crescimento) e GAB2 (proteína-2 de ligação de receptor de fator de crescimento) no domínio multifuncional C- terminal que atrai adicionalmente moléculas como SHP2, PI3K e outras para ligar aqui, consequentemente ativando vias RAS/MAPK, PI3K/AKT, JAK/STAT etc., desse modo regulando o crescimento, migração, proliferação e sobrevivência das células. A ação anormal da via c-Met levaria a tumorigênese e metástase, visto que expressão alta anormal de c-Met foi encontrada em várias malignidades humanas como câncer de bexiga, câncer gástrico, câncer de pulmão e câncer de mama. Além disso, c-Met também é associado à resistência de tumor a fármacos a múltiplos inibidores de cinase.
[0004] A interação entre c-Met e vários receptores de membrana (interferência) constitui um sistema de rede complexo. Interferência entre c-Met e receptor de adesão CD44 amplifica a resposta de peptídeo de sinal; interferência entre c-Met e o receptor de proteína do cérebro ativa o nível de c- Met de ligante independente HGF, e então aumenta o efeito de invasão; interferência entre c-Met e o receptor pro-apoptótico FAS acelera apoptose; interferência entre c-Met e vários receptores de tirosina cinase como EGFR, VEGFR regulam a ativação entre si, desse modo o processos de angiogênese é afetado. Interferência entre c-Met e esses receptores de membrana promove tumorigênese, metástase e induz resistência à fármacos.
[0005] O fator de transcrição HIF-loc é um regulador principal de células de tumor, que se adaptam a stress ambiental hipóxico. Inibidores de VEGFR causam hipóxia de tumor no estágio inicial de tratamento. Sob ambiente hipóxico, HIF- loc regula de modo ascendente o nível de c-Met, o aumento de concentração de c-Met promove desse modo a metástase de células de tumor, gera expansão regional ou metástase dos tumores, leva os tumores a escaparem do ambiente deficiente em oxigênio e então constrói um sistema de clonagem que é mais invasivo e com capacidade de crescimento mais intensa. A resistência à fármacos de tumores a inibidores de EGFR pode estar relacionada a regulação ascendente de níveis de ligante HGF. O aumento de c-Met foi detectado em 4% - 20% dos pacientes com câncer de pulmão de célula não pequena resistente a Gefitinib e Erlotinib, HGF desenvolve resistência a inibidores de cinase EGFR usando GABI para regular a via PI3K/AKT e ERK. Em linhagens mutantes de células de melanoma BRAF, os pesquisadores verificaram que o aumento de HGF resistiria ao efeito de inibidor de BFRAF Ramurafenib. Desse modo, interferência entre c- Met e receptores de membrana induz resistência à terapia alvo de cinase.
[0006] Atualmente, há uma grande quantidade de fármacos antitumor no mercado, como fármacos de agente de alquilação, fármacos antimetabólito, antibióticos antitumor, imunomoduladores etc., porém a maioria deles é intolerante devido a sua alta toxicidade. Com o estudo aprofundado em biologia molecular de tumor, o mecanismo molecular de tumorigênese e desenvolvimento foram revelados cada vez mais claramente e a terapia de alvo molecular para uma variedade de tumores malignos atraiu muita atenção. Fármacos de alvo molecular são altamente seletivos e eficazes em amplo espectro, são mais seguros em comparação com fármacos quimioterapêuticos citotóxicos, desse modo indicando uma nova direção para o desenvolvimento no campo de tratamento de câncer.
[0007] Há atualmente dois tipos de fármacos antitumor que direcionam em via c-Met: um é anticorpo monoclonal contra HGF ou c-Met; a outra é inibidor de molécula pequena contra c-Met. Os inibidores de molécula pequena que já entraram em pesquisa clínica ou sob pesquisa incluem PF-2341066, EMD- 1214063, XL-184 e ARQ-197, etc.
[0008] Entre as mesmas, Tepotinib (EMD1214063) (W02009006959, data de publicação 15/01/2009) tem a melhor atividade antineoplásica, tem grande efeito inibidor em uma variedade de células de tumor superexpresso de c-Met (atividade de enzima c-Met ICso = 3.67 nM, célula MHCC97H ICso = 6.2nM), que entrou no estágio de pesquisa clínica fase II.
[0009] Entretanto, embora Tepotinib (EMD1214063) tenha alta seletividade, tem desvantagem de baixa estabilidade metabólica e alta taxa de clearance in vivo. Portanto, inibidores de c-Met metabolicamente estáveis são urgentemente necessários para compensar a deficiência.
Teor da presente invenção
[0010] A presente invenção se refere a um composto representado pela fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
Figure img0001
R1 é selecionado de H ou F; R2 é selecionado de H ou CH3; quando R2 não é H, a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é R ou S; A é selecionado do grupo que consiste em fenila, piridila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila ou tiazolila, cada um dos quais é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 R3; R3 é selecionado de CN, halogênio, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo que consiste em C1-6 alquila, C1-6 heteroalquila, e C3-6 cicloalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 Ro; Ro é selecionado de F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo que consiste em C1-3 alquila ou C1-3 heteroalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 R'; R' é selecionado entre F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2 ou CH2F.
[0011] O "hetero"na C1-3 heteroalquila ou C1-6 heteroalquila é selecionado do grupo que consiste em -O-, -C(=O)NR'-, -C(=O)NH-, -NR'-, e -NH-; em qualquer um dos casos acima, o número do heteroátomo ou do grupoeheteroatômico é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3.
[0012] Em algumas modalidades da presente invenção, Ro é selecionado de F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, C(=O)NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, NH2CH2, (NH2)2CH, CH3O, CH3CH2O,CH3OCH2, CH3NH OU (CH3)2N.
[0013] Em algumas modalidades da presente invenção, Ri é H.
[0014] Em algumas modalidades da presente invenção, Ri é F.
[0015] Em algumas modalidades da presente invenção, R2 é H.
[0016] Em algumas modalidades da presente invenção, R2 é CH3.
[0017] Em algumas modalidades da presente invenção, a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é R.
[0018] Em algumas modalidades da presente invenção, a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é S.
[0019] Em algumas modalidades da presente invenção, R3 é selecionado entre CN, halogênio, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo consistindo em C1-3 alquila ou C1-3 heteroalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 Ro.
[0020] Em algumas modalidades da presente invenção, R3 é selecionado de CN, F, Cl, Br, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, CH3O ou C(=O)NH2.
[0021] Em algumas modalidades da presente invenção, A é selecionado do e grupo que consiste em
Figure img0002
e
Figure img0003
cada um dos quais é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 R3.
[0022] Em algumas modalidades da presente invenção, A é selecionado do grupo que consiste em
Figure img0004
e
Figure img0005
[0023] Em algumas modalidades da presente invenção, A é selecionado do grupo que consiste em
Figure img0006
e
Figure img0007
[0024] Em algumas modalidades da presente invenção, A é selecionado do grupo que consiste em
Figure img0008
[0025] Em algumas modalidades da presente invenção, o composto acima é selecionado do grupo que consiste em
Figure img0009
Figure img0010
[0026] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto descrito acima ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, bem como um veículo farmaceuticamente aceitável.
[0027] A presente invenção também se refere a um uso do composto do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou a composição farmacêutica descrita acima na fabricação de um medicamento para tratar tumor.
Efeito técnico
[0028] A presente invenção focou na modificação estrutural precisa do sítio metabólico, de modo que a estabilidade metabólica do composto alvo tenha sido muito melhorada. Além disso, uma nova estrutura de núcleo de piridona foi projetada e sintetizada para tornar a força de ligação entre os compostos alvo e a enzima C-Met significativamente aperfeiçoada, desse modo obtendo uma atividade mais excelente para inibir crescimento de tumor. Enquanto isso, resultados farmacodinâmicos in vivo mostraram que a taxa de crescimento de tumor dos camundongos que tinham recebido o composto da presente invenção foi significativamente mais baixa que aquela de Tepotinib (EMD1214063) na mesma dose, demonstrando adicionalmente que o composto da presente invenção tem melhor atividade de inibição de tumor. O composto da presente invenção tem um tempo de meia-vida mais longo, um tempo de ação prolongado sobre o alvo, uma estabilidade metabólica mais estável e uma atividade inibidora mais excelente.
Definição e descrição
[0029] A menos que de outro modo indicado, os seguintes termos e frases usadas aqui pretendem ter os seguintes significados. Um termo ou frase específica não deve ser considerada indefinida ou pouco clara na ausência de uma definição específica, porém deve ser entendido no sentido convencional. Quando um nome comercial aparece neste documento, pretende-se referir a seu produto ou ingrediente ativo correspondente do mesmo.
[0030] O termo "farmaceuticamente aceitável" é usado neste documento em termos desses compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem, que são adequados para uso em contato com tecidos humanos e de animais compreendidos no escopo da decisão médica segura, sem toxicidade excessiva, irritação, reação alérgica ou outros problemas ou complicações, comensuráveis com uma razão de risco/benefício razoável.
[0031] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" se refere a um sal do composto da presente invenção que é preparado ao reagir o composto tendo um substituinte específico da presente invenção com uma base ou ácido relativamente não toxico. Quando o composto da presente invenção contém um grupo funcional relativamente ácido, um sal de adição de base pode ser obtido ao colocar a forma neutra do composto em contato com uma quantidade suficiente de base em uma solução pura ou um solvente inerte adequado. O sal de adição de base farmaceuticamente aceitável inclui um sal de sódio, potássio, cálcio, amónio, amina orgânica ou magnésio ou sais similares. Quando o composto da presente invenção contém um grupo funcional relativamente básico, um sal de adição de ácido pode ser obtido ao colocar a forma neutra do composto em contato com uma quantidade suficiente de ácido em uma solução pura ou um solvente inerte adequado. Os exemplos do sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável incluem um sal de ácido inorgânico, em que o ácido inorgânico inclui, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido carbônico, bicarbonato, ácido fosfórico, fosfato de monohidrogênio, fosfato de diidrogênio, ácido sulfúrico, sulfato de hidrogênio, ácido iodídrico, ácido fosforoso e similares; e um sal de ácido orgânico, em que o ácido orgânico inclui, por exemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido isobutírico, ácido maleico, ácido malonico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido benzenosulfônico, ácido p-toluenosulfônico, ácido cítrico, ácido tartárico, e ácido metanossulfônico, e similares e um sal de aminoácido (como arginina e similar) e um sal de um ácido orgânico como ácido glucurônico e similar (consulte Berge et al, "Pharmaceutical salts”, Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977). Certos compostos específicos da presente invenção contêm grupos funcionais básicos e ácidos e podem ser convertidos em qualquer sal de adição de ácido ou base.
[0032] Preferivelmente, ao colocar o sal em contato com uma base ou um ácido em um modo convencional e então separar o composto original, a forma neutra do composto é desse modo regenerada. A diferença entre a forma original do composto e suas várias formas de sal situa-se em propriedades físicas específicas, como solubilidade diferente em um solvente polar.
[0033] "Sal farmaceuticamente aceitável" aqui usado pertence a um derivado do composto da presente invenção, em que, o composto de origem é modificado pela formação de um sal com um ácido ou uma base. Os exemplos do sal farmaceuticamente aceitável incluem, mas não estão limitados a um ácido inorgânico ou um sal de ácido orgânico de uma fração básica tal como a amina, um sal de metal alcalino ou um sal orgânico de uma fração ácida tal como ácido carboxílico, e similares. O sal farmaceuticamente aceitável inclui sal não-tóxico convencional ou sal de amónio quaternário do composto original, como um sal formado por um ácido inorgânico não-tóxico ou um ácido orgânico. O sal não tóxico convencional inclui, mas não está limitado ao sal derivado de um ácido inorgânico e um ácido orgânico, em que o ácido inorgânico ou ácido inorgânico ou ácido orgânico é selecionado do grupo consistindo em ácido 2-acetoxibenzóico, ácido 2-hidroxietanossulfônico, ácido acético, ácido ascórbico, ácido benzenossulfônico, ácido benzóico, bicarbonato, ácido carbônico, ácido cítrico, ácido edético, ácido etanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido fumárico, glicoheptose, ácido glicônico, ácido glutâmico, ácido glicólico, ácido bromídrico, ácido clorídrico, hidroiodeto, hidroxila, hidroxinaftaleno, ácido isetiônico, ácido láctico, lactose, ácido dodecil sulfônico, ácido maleico, ácido málico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido nítrico, ácido oxálico, ácido pamóico, ácido pantotênico, ácido fenilacético, ácido fosfórico, ácido poligalactanal, ácido propiônico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido subacético, ácido succínico, ácido sulfâmico, ácido sulfanílico, ácido sulfúrico, tanino, ácido tartárico e ácido p- toluenossulfônico.
[0034] O sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção pode ser preparado do composto original que contém uma fração ácida ou básica por métodos químicos convencionais. Em geral, tal sal pode ser preparado ao reagir a forma de base ou ácido livre do composto com uma quantidade estequiométrica de uma base ou ácido apropriado em água ou um solvente orgânico ou uma mistura dos mesmos. Em geral, meios não aquosos como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila são preferidos.
[0035] Além da forma de sal, o composto referido na presente invenção também existe em forma de pró-fármaco. O pró-fármaco do composto descrito neste documento é o composto que prontamente é submetido à alteração química sob condição fisiológica a ser convertida no composto da presente invenção. Adicionalmente, o pró-fármaco pode ser convertido no composto da presente invenção por um método químico ou bioquímico em ambiente in vitro.
[0036] Certos compostos da presente invenção podem existir em uma forma não solvatada ou uma forma solvatada, incluindo uma forma hidratada. Em geral, a forma solvatada é equivalente à forma não solvatada, e ambas são abrangidas no escopo da presente invenção.
[0037] Certos compostos da presente invenção podem ter um átomo de carbono assimétrico (centro óptico) ou uma ligação dupla. A mistura racêmica, diastereômero, isômero geométrico e isômero individual estão todos abrangidos no escopo da presente invenção.
[0038] A menos que especificado de outro modo, uma ligação cunhada e uma ligação tracejada são usadas para indicar a configuração absoluta de um centro estereogênico, θ ''são usados para indicar a configuração relativa de um centro estereogênico. Quando o composto descrito aqui contém uma ligação dupla olefínica ou outros centros assimétricos geométricos, isômeros geométricos EeZsão incluídos a menos que de outro modo especificado. De modo semelhante, todas as formas tautoméricas são abrangidas no escopo da presente invenção.
[0039] O composto da presente invenção pode apresentar em uma forma geométrica ou estereoisomérica específica. A presente invenção contempla todos esses compostos, incluindo isômeros cise trans,enantiômeros (-) e (+) , enantiômeros (R) e (S), diastereoisômero, (D)-isômero, (/.)-isômero e mistura racêmica e outras misturas, por exemplo, uma mistura enriquecida com enantiômero ou diastereoisômero, todos os quais são abrangidos no escopo da presente invenção. O substituinte como alquila pode ter um átomo de carbono assimétrico adicional. Todos esses isômeros e misturas dos mesmos são abrangidos no escopo da presente invenção.
[0040] Isômeros oticamente ativos (/?) e (S), ou isômeros D e L podem ser preparados usando síntese quiral ou reagentes quirais ou outras técnicas convencionais. Se um tipo de enantiômero de certo composto da presente invenção é pra ser obtido, o enantiômero desejado puro pode ser obtido por síntese assimétrica ou ação derivada de auxiliar quiral seguido por separar a mistura diastereomérica resultante e clivar o grupo auxiliar. Alternativamente, quando a molécula contém um grupo funcional básico (como amino) ou um grupo funcional ácido (como carboxila), o composto reage com um ácido ou base oticamente ativo apropriado para formar um sal do isômero diastereomérico que é então submetido à resolução diastereomérica através do método convencional na técnica para fornecer o enantiômero puro. Além disso, o enantiômero e o diastereoisômeoro são em geral isolados através de cromatografia que usa uma fase estacionária quiral e opcionalmente combina com um método de derivado químico (por exemplo, carbamato gerado de amina).
[0041] O composto da presente invenção pode conter uma proporção não natural de isótopo atômico em um ou mais de um átomo(s) que constituem o composto. Por exemplo, o composto pode ser radiorrotulado com um isótopo radioativo, como trítio (3H), iodo-125 (125l) ou C-14 (14C). Todas as variações isotópicas do composto da presente invenção, quer radioativas ou não, são abrangidas no escopo da presente invenção.
[0042] O termo "veículo farmaceuticamente aceitável" se refere a qualquer agente ou meio de veículo que é capaz de fornecer uma quantidade eficaz da substância ativa da presente invenção, não interfere na atividade biológica da substância ativa e não tem efeito colateral tóxico sobre o hospedeiro ou paciente. O veículo representante inclui água, óleo, vegetal e mineral, base de creme, base de loção, base de pomada e similar. A base inclui um agente de suspensão, um espessante, um intensificador de penetração e similar. Suas formulações são bem conhecidas por técnicos no campo cosmético ou no campo farmacêutico tópico. As informações adicionais sobre o veículo podem ser mencionadas em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21- ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005),cuja publicação o é incorporada aqui por referência.
[0043] Para um medicamento ou um agente farmacologicamente ativo, o termo "quantidade eficaz" ou "quantidade terapeuticamente eficaz" se refere a uma quantidade não toxica, porém suficiente para obter um efeito desejado do medicamento ou agente. Para a forma de dosagem oral da presente invenção, uma "quantidade eficaz" da substância ativa na composição se refere a uma quantidade necessária para obter efeito desejado ao combinar com outra substância ativa na composição. A quantidade eficaz varia de pessoa para pessoa e é determinada dependendo da idade e condição geral do receptor bem como a substância ativa específica. A quantidade eficaz apropriada em um caso individual pode ser determinada pelo técnico no assunto com base em experimento de rotina.
[0044] O termo "ingrediente ativo", "agente terapêutico", "substância ativa" ou "agente ativo" se refere a uma entidade química que pode eficazmente tratar o distúrbio, doença ou condição alvo.
[0045] "Opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento ou condição subsequente pode ocorrer, porém não é requisito, o termo inclui o caso no qual o evento ou condição ocorre e o caso no qual o evento ou condição não ocorre.
[0046] O termo "substituído" significa um ou mais de um átomo(s) de hidrogênio em um átomo específico são substituídos por um substituinte, incluindo variações de hidrogênio e deutério, desde que a valência do átomo específico seja normal e o composto substituído seja estável. Quando o substituinte é um grupo ceto (isto é, =0) significa que dois átomos de hidrogênio são substituídos. Posições em um anel aromático não podem ser substituídas por um grupo ceto. O termo "opcionalmente substituído" significa que um átomo pode ser substituído por um substituinte ou não, a menos que de outro modo especificado, a espécie e número do substituinte pode ser arbitrário desde que seja quimicamente obtenível.
[0047] Quando qualquer variável (como R) ocorre na constituição ou estrutura do composto mais de uma vez, a definição da variável em cada ocorrência é independente. Desse modo, por exemplo, se um grupo é substituído por 0-2 R, o grupo pode ser opcionalmente substituído por até 2, em que a definição de R em cada ocorrência é independente. Além disso, uma combinação do substituinte e/ou variante do mesmo é permitida somente quando a combinação resulta em um composto estável.
[0048] Quando uma ligação de um substituinte pode ser reticulada com dois átomos em um anel, tal substituinte pode ser ligado a qualquer átomo no anel. Quando um substituinte enumerativo não indica por qual átomo é fixado em um composto incluído na fórmula química geral, porém não especificamente mencionado, tal substituinte pode ser ligado por quaisquer de seus átomos. Uma combinação de substituintes e/ou variantes dos mesmos é permitida somente quando tal combinação pode resultar em um composto estável. Por exemplo, a unidade estrutural
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significa que pode ser substituída em qualquer posição em cicloexila ou cicloexadieno.
[0049] A menos que de outro modo especificado, o termo "hetero"representa um heteroátomo ou um grupo de heteroátomo (por exemplo, um grupo de átomos contendo um heteroátomo), incluindo o átomo exceto carbono (C) e hidrogênio (H) e o grupo de átomo contendo o heteroátomo acima, por exemplo, incluindo, oxigênio (O), nitrogênio (N), enxofre (S), silício (Si), germânio (Ge), alumínio (Al), boro (B), -O-, -S-, =0=8, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), - S(=O)2-, e o grupo que consiste em -C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2N(H)- e - S(=O)N(H)-, cada um dos quais é opcionalmente substituído.
[0050] A menos que de outro modo especificado, o termo "heteroidrocarbila" ou seus hipônimos (como heteroalquila, heteroalquenila, heteroalquinila, e heteroarila, etc.), por si só ou como parte de outro substituinte, se refere a um grupo de hidrocarboneto linear, ramificado ou cíclico estável ou qualquer combinação dos mesmos, que tem um número especificado de átomos de carbono e pelo menos um heteroátomo. Em algumas modalidades, o termo "heteroalquila" por si só ou em combinação com outro termo se refere a uma cadeia linear estável, radical de hidrocarboneto ramificado ou uma combinação do mesmo que tem um número especificado de átomos de carbono e pelo um heteroátomo. Em uma modalidade específica, um heteroátomo é selecionado de B, O, N e S em que átomos de nitrogênio e enxofre são opcionalmente oxidados e o átomo de nitrogênio é opcionalmente quaternizado. O heteroátomo ou grupo heteroátomo pode ser localizado em qualquer posição interior de um heteroidrocarbila, incluindo a posição onde o hidrocarbila se liga à parte restante da molécula. Porém os termos "alcoxi", "alquilamino" e "alquiltio" (ou tioalquila) são usados pelo significado convencional e se referem a um grupo alquila conectado à parte restante da molécula através de um átomo de oxigênio, um amino ou um átomo de enxofre, respectivamente. Os exemplos incluem, porém não são limitados a, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2- S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -CH2-CH=N- OCH3 e -CH=CH-N(CH3)-CH3. até dois heteroátomos consecutivos podem estar presentes, como, -CH2-NH-OCH3.
[0051] A menos que de outro modo especificado, o termo "alquila"se refere a um grupo de hidrocarboneto saturado ramificado ou de cadeia linear, pode ser mono-substituído (por exemplo, -CH2F) ou um polissubstituído (por exemplo, -CF3), pode ser monovalente (por exemplo, metila), divalente (por exemplo, metileno) ou multivalente ( por exemplo, metenila). Os exemplos de alquila incluem metila (Me), etila (Et), propila (como n-propila e isopropila), butila (como n-butila, isobutila, s-butila, t-butila, pentila (como n-pentila, isopentila, neopentila) e similar.
[0052] A menos que de outro modo especificado, cicloalquila inclui qualquer hidrocarbila cíclica ou policíclica estável, e qualquer átomo de carbono é saturado, pode ser mono-substituído ou poli-substituído, e pode ser monovalente, divalente ou multivalente. Os exemplos de cicloalquila incluem, porém não são limitados a, ciclopropila, norbornanila, [2.2.2]biciclooctano, [4.4.0] biciclodecanila e similar.
[0053] A menos que de outro modo especificado, o termo "halo" ou "halogênio" por si próprio ou como parte de outro substituinte se refere a átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo. Além disso, o termo "haloalquila" pretende incluir monoaloalquila e polialoalquila. Por exemplo, o termo "halo(Cl-C4)alquila" pretende incluir, porém não limitado a trifluorometila, 2,2,2-trifluoroetila, 4- clorobutila, 3-bromopropila e similar. Os exemplos de haloalquila incluem, porém não são limitados a trifluorometila, triclorometila, pentafluoroetila e pentacloroetila.
[0054] O composto da presente invenção pode ser preparado por uma variedade de métodos sintéticos bem conhecidos por técnicos no assunto, incluindo a modalidade enumerativa que se segue, a modalidade formada pela seguinte modalidade enumerativa em combinação com outros métodos de síntese químicos e a substituição equivalente bem conhecida por técnicos no assunto. A modalidade preferida inclui, porém não é limitado à modalidade da presente invenção.
[0055] Todos os solventes usados na presente invenção são comercialmente disponíveis. A presente invenção emprega as seguintes abreviaturas: aq representa água; HATU representa O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio hexafluorofosfato; EDC representa cloridrato de N-(3- dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida; m-CPBA representa ácido 3- cloroperoxibenzoico; eq representa equivalente ou equivalência; CDI representa diimidazol de carbonila; DCM representa diclorometano; PE representa éter de petróleo; DIAD representa azodicarboxilato de diisopropila; DMF representa N,N- dimetilformamida; DMSO representa sulfóxido de dimetila; EtOAc representa acetato de etila; EtOH representa etanol; MeOH representa metanol; CBz representa benziloxicarbonila, que é um grupo de proteção amino; BOC representa terc-butilcarbonila, que é um grupo de proteção amino; HOAc representa ácido acético;NaCNBH3 representa cianoboroidreto de sódio; rt representa temperatura ambiente; O/N representa durante a noite; THF representa tetrahidrofurano; BOC2O representa di-terc-butildicarbonato; TFA representa ácido trifluoroacético; DIPEA representa diisopropiletilamina; SOCI2 representa cloreto de tionila; CS2 representa dissulfeto de carbono; TsOH representa ácido p-toluenossulfônico; NFSI representa N-fluoro-N-(benzenossulfonila) benzenossulfonamida; NCS representa N-clorosuccinimida; n-Bu4NF representa fluoreto de tetrabutil amónio; iPrOH representa 2-propanol; mp representa ponto de fusão; LDA representa diisopropil amina de lítio.
[0056] Compostos são nomeados manualmente ou por software ChemDraw®, os compostos comercialmente disponíveis usam seus nomes de diretório de fornecedor.
Descrição detalhada da modalidade preferida
[0057] As seguintes modalidades ilustram adicionalmente a presente invenção, porém a invenção não é de modo algum limitada às mesmas. Embora a presente invenção tenha sido descrita em detalhe e com referência a suas modalidades específicas, será evidente para técnicos no assunto que várias alterações e modificações podem ser feitas nas mesmas sem se afastar do espírito e escopo das mesmas. Modalidade 1 (1-1 e 1-2)
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Etapa A:
[0058] A solução do intermediário 7C (método sintético vide a modalidade 7) (20,4 g, 50,88 mmol) e dióxido de manganês (44,23 g, 508,7 mmol) em DCM (300 ml_) foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. Após término da reação, a mistura foi filtrada e concentrada para fornecer o intermediário IA (18,4 g) que foi usado diretamente na etapa seguinte. LCMS (ESI) m/z: 398 (M+l).
Etapa B:
[0059] Brometo de metilmagnésio (3 M, 38,58 mL) foi adicionado em uma solução de intermediário IA (23,0 g, 57,87 mmol) em THF (200 mL) a 0°C. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Após conclusão da reação, a mistura foi resfriada bruscamente por solução de cloreto de sódio saturada (300 mL), extraída por acetato de etila (200 mL*2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para fornecer intermediário 1B (22,76 g, rendimento 95,11%). LCMS (ESI) m/z: 414(M+1). HNMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ =8,46 (s, H), 8,38-8,33 (m,lH), 8,26 (td, J=l,9, 6,9 Hz, 1H), 7,53 - 7,44 (m, 2H), 5.02 (q, J=6,4 Hz, 1H), 4,31 - 4,12 (m, 2H), 3,95 (d, J=6,4 Hz, 2H), 2,78 (br t, J=12,l Hz, 2H), 2,13 (br s, 1H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1.86 (br d, J=12,9 Hz, 2H), 1,58 (d, J=6,5 Hz, 3H), 1,49 (s, 9H), 1,39 - 1,29 (m, 2H).
Etapa C
[0060] Diisopropiletilamina (21,34 g, 165,12 mmol) e cloreto de metanossulfonila (9,12 g, 79,62 mmol) foram adicionados em uma solução de intermediário 1B (22,7 g, 55,04 mmol) em DCM (300 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente durante lh. Após conclusão da reação como monitorado por TLC, a mistura foi lavada com solução de cloreto de amónio saturado (200 mL) duas vezes, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para fornecer o intermediário 1C (30 g, produto bruto) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
Etapa D:
[0061] Carbonato de potássio (10,68 g, 77,30 mmol), iodeto de potássio (641,58 mg, 3,86 mmol) e 5-bromo-3-fluoro-lH-piridin-2-ona (11,13 g, 57,97 mmol) foram adicionados em uma solução de intermediário 1C (19 g, 3,86 mmol) em DMF (100 mL) em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 90°C durante 3 horas. Após conclusão da reação, acetato de etila (300 mL) foi adicionado na solução e a solução foi lavada com salmoura (300mL) três vezes. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para fornecer o intermediário 1D (5,8 g, rendimento 25,54%). HNMR (400MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 8,47 (s, 2H), 8,41 - 8.32 (m, 2H), 7,55 - 7,47 (m, 1H), 7,39 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=2,4,8,4 Hz, 1H), 7.11 - 7,07 (m, 1H), 6,52 (q, J=7,0 Hz, 1H), 4,31-4,12 (m, 2H), 4,01-3,93 (m, 2H), 2,87-2,72 (m, 2H), 2,09-1,98 (m, 1H), 1,89 -1,80 (m, 5H), 1,49 (s, 9H), 1,39 - 1,30 (m,2H).
Etapa E:
[0062] Sob atmosfera de nitrogênio, intermediário 1D (2,0 g, 3,4mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-ila))-l,3,2- dioxaborolano (1,04 g, 4,09 mmol), acetato potássio (668,21 mg, 6,81 mmol) e Pd(dppf)Ch (498,20 mg, 680,87 pmol) foram dissolvidos em dioxano (30 mL) em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 90°C durante 2 horas. Após conclusão da reação, uma solução (30 mL) de intermediário 1E em dioxano foi obtida e usada diretamente na etapa seguinte.
Etapa F (1F-1,1F-2):
[0063] Sob atmosfera de nitrogênio, uma solução (30 ml_) de intermediário 1E (1,92 g, 3,03 mmol) em dioxano, carbonato de sódio (642,30 mg, 6,06 mmol), 2- bromo-5-cianopiridina (665,42 mg, 3,64 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (443,43 mg, 606,0 pmol) foram dissolvidos em dioxano (40 ml_) e água (6 ml_) em temperatura ambiente. A reação foi agitada a 90°C durante 3 horas. Após conclusão da reação, a mistura foi filtrada e água (100 ml_) foi adicionada no filtrado e extraída com acetato de etila (60 ml_*3). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e então filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por placa preparativa, e o intermediário 1F-1 (t=2,819, 490 mg, 26,04% rendimento) e intermediário 1F-2 (t=3,933, 480 mg, 25,95% rendimento) foram isolados por SFC (tipo de coluna: AS (250 mm*30 mm,10 um); fase móvel: [B: 0.1% NH3H2O EtOH]; B%: 55%-55%, 10 min; 200 minmin).
[0064] LCMS (ESI) m/z: 611 (M+l).
[0065] HNMR (intermediário 1F-1) (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,73 (dd, J=0,9, 5,0 Hz, 1H), 8,55 (s, 2H), 8.39 (s, 1H), 8,34 - 8,26 (m, 2H), 8,17 - 8,08 (m, 2H), 7,58 - 7,49 (m, 3H), 6,50 (q, J=7,2 Hz, 1H), 4,15 (br d, J=13.3 Hz, 2H), 4,06 (d, J=6.3 Hz, 2H), 2,84 (br s, 2H), 2,14 - 2,01 (m, 1H), 1,97 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1,87 (br d, J=11.9 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,35 -1,28 (m, 2H).
[0066] HNMR (intermediário 1F-2) (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,73 (dd, J=0,8, 5,0 Hz, 1H), 8,55 (s, 2H), 8,39 (s, 1H), 8,34- 8,26 (m, 2H), 8,16 - 8,09 (m, 2H), 7,61 - 7,49 (m, 3H), 6,50 (q, J=7,2 Hz, 1H), 4,15 (br d, J=13,2 Hz, 2H), 4,06 (d, J=6,3 Hz, 2H), 2,84 (br s, 2H), 2,12 - 2,01 (m, 1H), 1,99 - 1,95 (m, 3H), 1,87 (br d, J=10,9 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,35 -1,29 (m, 2H).
Etapa G (1G-1,1G-2)
[0067] Ácido Trifluoroacético (3 ml_) foi adicionado em uma solução de intermediário ÍF-I (490 mg, 786,01 pmol) em DCM (10 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Após conclusão da reação, a mistura foi evaporada até secura para fornecer intermediário 1G-1 (502 mg, produto bruto) que foi diretamente usado na etapa seguinte. Intermediário 1G- 2 (491 mg, produto bruto) foi obtido com o mesmo método do intermediário 1G-1.
Etapa H:
[0068] Formalina (326,27 mg, 4,02 mmol, 37% de pureza) ou triacetoxiboroidreto de sódio (511,03 mg, 2,41 mmol) foram adicionados em uma solução de intermediário 1G-1 (502,00 mg, 803,74 mmol) em DCM (10 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. Após conclusão da reação, a mistura foi resfriada bruscamente com água (50 mL) e DCM (30 mL*2). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada. O produto bruto obtido foi purificado por HPLC preparativo para resultar na modalidade 1-1 (150 mg, 35,41% rendimento).
[0069] Modalidade 1-2 (100,6 mg, 23,91% rendimento) foi obtido com o mesmo método da modalidade 1-1, iniciado do intermediário 1G-2.
Modalidade 1-1:
[0070] LCMS (ESI) m/z: 525 (M+l).
[0071] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,73 (d, J=4,9 Hz, 1H), 8,56 (s, 2H), 8,49 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,34 - 8,26 (m, 2H), 8,18 - 8,09 (m, 2H), 7,61 - 7,49 (m, 3H), 6,50 (q, J=7,2 Hz, 1H), 4,13 (d, J=5,8 Hz, 2H), 3.53 (br d, J=12.4 Hz, 2H), 3.03 (br t, J=12,4 Hz, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,27 - 2,08 (m, 3H), 1,97 (d, J=7,2 Hz, 3H), 1,81 -1,63 (m, 2H).
Modalidade 1-2:
[0072] LCMS (ESI) m/z: 525 (M+l).
[0073] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,72 (dd, J=0,8, 5,0 Hz, 1H), 8,61 - 8,46 (m, 3H), 8,38 (s, 1H), 8,33 - 8,25 (m, 2H), 8,16 - 8,08 (m, 2H), 7,58 - 7,47 (m, 3H), 6,49 (q, J=7,l Hz, 1H), 4,12 (d, J=5,9 Hz, 2H), 3,50 (br d, J=12,2 Hz, 2H), 3,05 - 2,93 (m, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,22 -2,06 (m, 3H), 1,96 (d, J=7,2 Hz, 3H), 1,80-1,62 (m, 2H). Modalidade 2 (2-1 e 2-2)
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Etapa A:
[0074] Sob atmosfera de nitrogênio, intermediário ID (1,0 g*2, 1,70 mmol), 3-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano-2-ila))isotiazol (1,15 g, 5,10 mmol), fosfato de potássio (1 M, 3,4 mL) e dicloreto de paládio l,l-(terc- butilfosfino)ferroceno (110,80 mg, 170,00 nmol) foram dissolvidos em THF (10 mL) em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 70°C durante 16 horas. A solução de reação foi então filtrada e água (50 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída por acetato de etila (30 mL*3). A fase orgânica foi então seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada. O produto bruto foi então purificado por HPLC preparativo. O intermediário 2A-1 (t=2,529, 560 mg, 24,28% rendimento) ou intermediário 2A-2 (t=3,494, 500 mg, 27,19% rendimento) foram isolados por SFC (tipo de coluna: AS (250 mm*30 mm,10 um); fase móvel: [B: 0,1% NH3H2O EtOH]; B%: 35%-35%, 7,2 min; 200 minmin).
[0075] LCMS (ESI) m/z: 605 (M+l)
[0076] HNMR (intermediário 2A-1) (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,61-8,50 (m, 2H), 8,41 - 8,26 (m, 2H), 7,76 (d, J=2,l Hz, 1H), 7,70 (dd, J=2.1, 10,0 Hz, 1H), 7,57 - 7,50 (m, 2H), 7,29 (s, 1H), 6.45 (q, J=7,l Hz, 1H), 4,16 (br d, J=13,3 Hz, 2H), 4.07 (d, J=6.1 Hz, 2H), 2,85 (br s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,08 (br s, 1H), 1,96 - 1,84 (m, 5H), 1,48 (s, 9H), 1,37 -1,29 (m, 2H).
[0077] HNMR (intermediário 2A-2) (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,59 - 8,53 (m, 2H), 8,41 - 8,27 (m, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,73 - 7,66 (m, 1H), 7,58 - 7,49 (m, 2H), 7,28 (d, J=2,8 Hz, 1H), 6.45 (q, J=6,9 Hz, 1H), 4,16 (br d, J=13,6 Hz, 2H), 4,06 (dd, J=3,9, 6,1 Hz, 2H), 2,94 - 2,78 (m, 2H), 2,44 (d, J=2,l Hz, 3H), 2,07 (td, J=3.7, 9,6 Hz, 1H), 1,96 -1,84 (m, 5H), 1,48 (s, 9H), 1,36 -1,27 (m, 2H). Etapa B: intermediário 2B-1 ou intermediário 2B-2 foi preparado de acordo com o método de preparação do intermediário ÍG-I. Etapa C: a modalidade 2-1 ou 2-2 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1.
Modalidade 2-1:
[0078] LCMS (ESI) m/z: 520 (M+l).
[0079] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,73 (s, 2H), 8,35 (s, 1H), 8,29 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,86 - 7,81 (m, 1H), 7,72 (dd, J=2,3,10,0 Hz, 1H), 7,64 - 7,58 (m, 2H), 7,36 (s, 1H), 6,45 (q, J=7,l Hz, 1H), 4,21 (d, J=5,9 Hz, 2H), 3,63 (br d, J=12,4 Hz, 2H), 3,15 (br t, J=ll,9 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,33 - 2,06 (m, 3H), 1,99 (d, J=7,2 Hz, 3H), 1,86 -1,73 (m,2H).
Modalidade 2-2:
[0080] LCMS (ESI) m/z: 520 (M+l).
[0081] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,75 (s, 2H), 8,37 (s, 1H), 8,28 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,88 - 7,81 (m, 1H), 7,70 (dd, J=2,3,10,0 Hz, 1H), 7,65 - 7,56 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 6,42 (q, J=7,1 Hz, 1H), 4,20 (d, J=5,9 Hz, 2H), 3,62 (br d, J=12,4 Hz, 2H), 3,12 (br t, J=ll,9 Hz, 2H), 2,91 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,33 - 2,08 (m, 3H), 1,96 (d, J=7,2 Hz, 3H), 1,87 -1,70 (m,2H).Modalidade 3
Figure img0015
Etapa A:
[0082] O intermediário 3D foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1D.
Etapa B:
[0083] O intermediário 3E foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1F. O intermediário 3E-1 (t=2,805, 33 mg, 33,0% rendimento) e intermediário 3E-2 (t=3,255,33 mg, 33% rendimento) foram isolados por SFC (tipo de coluna: AS (250 mm*30 mm, 10 um); fase móvel: [B: 0.1% NH3H2O EtOH]; B%: 40%-40%, 5 min; 80 minmin). LCMS (ESI) m/z: 588 (M+l).
Etapa C:
[0084] O Intermediário 3F-1 (580 mg, produto bruto) e 3F-2 (520 mg, produto bruto) foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa D:
[0085] A Modalidade 3-1 e 3-2 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1.
Modalidade 3-1 :
[0086] LCMS (ESI) m/z: 502 (M+l).
[0087] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,62 - 8,49 (m, 3H), 8,36 (s, 1H), 8,31 (br d, J=6,8 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,77 (br d, J=9,4 Hz, 1H), 7,57 - 7,49 (m, 2H), 7,26 (s, 1H), 6,71 (d, J=9,4 Hz, 1H), 6,42 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,13 (br d, J=5,l Hz, 2H), 3,50 (br d, J=ll,9 Hz, 2H), 2,97 (br t, J=12,2 Hz, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,24 - 2,06 (m, 3H), 1,91 (br d, J=7,l Hz, 3H), 1,80 - 1,61 (m, 2H).
Modalidade 3-2 :
[0088] LCMS (ESI) m/z: 502 (M+l).
[0089] HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,56 (s, 2H), 8,49 (br s, 1H), 8,6 (s, 1H), 8,30 (br d, J=6,7 Hz, 1H), 7,91 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,77 (dd, J=2,4,9,4 Hz, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 2H), 7,26 (s, 1H), 6,70 (d, J=9,4 Hz, 1H), 6,41 (q, J=7,l Hz, 1H), 4,13 (d, J=5,7 Hz, 2H), 3,54 (br d, J=12,3 Hz, 2H), 3,05 (br t, J=ll,9 Hz, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,21 - 2,08 (m, 3H), 1,91 (d, J=7,l Hz, 3H), 1,79 - 1,67 (m, 2H).Modalidade 4
Figure img0016
Etapa A:
[0090] O intermediário 4A foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1D.
Etapa B:
[0091] O intermediário 4B foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1E.
Etapa C:
[0092] O intermediário 4C foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1F.
Etapa D:
[0093] O intermediário 4D foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa E:
[0094] A modalidade 4 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 510 (M+l). HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,59 - 8,47 (m, 3H), 8,37 (s, 1H), 8,32 - 8,24 (m, 1H), 8,17 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,95 (dd, J=2,0, 7,3 Hz, 1H), 7,85 - 7,73 (m, 2H), 7,51 - 7,46 (m, 2H), 7,41 (dd, J=8,6,10,5 Hz, 1H), 6,70 (d, J=9,5 Hz, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,12 (d, J=5,8 Hz, 2H), 3,52 (br d, J=12,8 Hz, 2H), 3,08 - 2,96 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,26 - 2,09 (m, 3H), 1,79 - 1,63 (m, 2H).Modalidade 5
Figure img0017
Etapa A:
[0095] O intermediário 5A foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1D.
Etapa B:
[0096] O Intermediário 5B foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1F.
Etapa C:
[0097] O intermediário 5C foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa D:
[0098] A Modalidade 5 foi preparada de acordo com o método de preparação da Modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 506 (M+l). HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,58 - 8,49 (m, 3H), 8,37 - 8,26 (m, 2H), 8,16 (dd, J=l,3, 2,1 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=2.2,10.2 Hz, 1H), 7,50 (d, J=5.3 Hz, 2H), 7,34 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,12 (d, J=5,8 Hz, 2H), 3,51 (br d, J=12,4 Hz, 2H), 3,06 - 2,94 (m, 2H), 2,84 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,23 - 2,07 (m, 3H), 1,80-1,62 (m, 2H).Modalidade 6
Figure img0018
Figure img0019
Etapa A:
[0099] O intermediário 6A foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1E.
Etapa B:
[0100] O intermediário 6B foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1F.
Etapa C:
[0101] O intermediário 6C foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa D:
[0102] A Modalidade 6 foi preparada de acordo com o método de preparação da Modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 493 (M+l). HNMR (400MHz, METANOL-d4) δ = 8,75 (d, J=5,0 Hz, 1H), 8,69 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,58 -8,43 (m, 3H), 8,34 (s, 1H), 8,30 - 8,22 (m, 2H), 8,13 (s, 1H), 7,55 (dd, J=l,l, 5,0 Hz, 1H), 7.51 - 7,44 (m, 2H), 6,71 (d, J=9,5 Hz, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,10 (d, J=5,9 Hz, 2H), 3,54 (br d, J=12,0 Hz, 2H), 3,04 (br t, J=12,0 Hz, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,23 - 2,07 (m, 3H), 1,79 -1,65 (m, 2H).Modalidade 7
Figure img0020
Etapa A:
[0103] Sob atmosfera de nitrogênio, cloreto de dissulfonil metano (45,15 g, 394,15 mmol) foi adicionado gota a gota em uma solução de terc-butil-4- (hidróximetil)piperidina-l-carbamato (68,00 g, 315,85 mmol) ou di- isopropiletilamina (81,64 g, 631,71 mmol) em diclorometano (800 mL) durante agitação. Após término da adição gota a gota, a solução de reação foi agitada a 252C durante 2 horas. Cromatografia em camada fina foi usada para assegurar que a reação foi concluída. A solução de reação foi lavada com solução de cloreto de amónio saturado (500 mL*2) ou salmoura (300 mL *2) e seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada ou concentrada para fornecer intermediário 7A (líquido vermelho oleoso, 95,00 g, 100% de rendimento) que foi usado diretamente durante a etapa seguinte sem purificação adicional.
Etapa B
[0104] Sob atmosfera de nitrogênio, carbonato de potássio (74,12 g, 536,28 mmol) foi adicionado em uma solução de intermediário 7A (94,40 g, 321,77 mmol) ou 2-cloropirimidin-5-ol (35,00 g, 268,14 mmol) em DMF (1,00 L). A solução de reação foi deixada a 802C durante 16 horas, e cromatografia em camada fina foi usada para detectar o término da reação. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada, então água (500 mL) foi adicionada no resíduo e extraída com acetato de etila (300 mL*3). A fase orgânica foi lavada com salmoura (400 mL*2) e seca sobre sulfato de sódio anidro, então filtrada e concentrada. Então o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o intermediário 7B (sólido amarelo pálido, 84,00 g, 95,05% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 327,7 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,08 - 1,25 (m, 2 H) 1,40 (s, 9 H) 1,69 -1,78 (m, 2 H) 1,88 - 2,03 (m, 1 H) 2,58 - 2,88 (m, 2 H) 3,89 - 4,05 (m, 4 H) 8,50 - 8,57 (m, 2 H)
Etapa C:
[0105] Sob atmosfera de nitrogênio, a solução misturada do intermediário 7B (84,00 g, 254,85 mmol), ácido borônico [3-(hidróximetil)fenila] (42,60 g, 280,34 mmol), PdfPPhshCb (17,89 g, 25,49 mmol) ou carbonato de potássio (70,45 g, 509,71 mmol) em 1,4-dioxano (1,00 L) e água (200,00 mL) foi agitada a 80°C durante 16 horas. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente então filtrada, seguido por extração com diclorometano (500 mL*3), então as camadas orgânicas foram combinadas juntas, lavadas com salmoura (500 mL *2) e secas sobre sulfato de sódio anidro, então filtradas e concentradas. O resíduo foi recristalizado com metanol para fornecer intermediário 7C (sólido branco, 77,60 g, 76,22% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 400,1 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,14 -1,31 (m, 2 H) 1,45 (s, 9 H) 1,75 -1,87 (m, 2 H) 1,95 - 2,10 (m, 1 H) 2,66 - 2,93 (m, 2 H) 3,94 - 4,22 (m, 4 H) 4,63 (d, J=5,62 Hz, 2 H) 5,34 (t, J=5,81 Hz, 1 H) 7,41 - 7,54 (m, 2 H) 8,21 (d, J=7,46 Hz, 1 H) 8,35 (s, 1 H) 8,68 (s, 2 H)
Etapa D:
[0106] Sob atmosfera de nitrogênio, cloreto de dissulfonil metano (3,44 g, 30,04 mmol) foi adicionado gota a gota em uma solução do intermediário 7C (10,00 g, 25,03 mmol) e di-isopropiletilamina (6,47 g, 50,06 mmol) em diclorometano (100,00 mL) durante agitação. Após término da adição, a solução de reação foi agitada a 25°C durante 2 horas. A cromatografia em camada fina foi usada para detectar o término da reação. A solução de reação foi lavada com solução de cloreto de amónio saturado (500 mL*2) ou salmoura (300 mL*2), seca sobre cloreto de sódio anidro, filtrada e concentrada para fornecer intermediário 7D (sólido cinza, 14,00 g, 100% de rendimento) que foi usado diretamente durante a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS (ESI) m/z: 478,1 (M+l).
Etapa E:
[0107] Sob atmosfera de nitrogênio, carbonato de potássio (6,95 g, 50,26 mmol) foi adicionado em uma solução do intermediário 7D (12,00 g, 25,13 mmol) ou 5-bromo-3-fluoro-l-H-piridin-2-ona (5,79 g, 30,16 mmol) em DMF (100,00 mL) a 25°C. A solução de reação foi deixada a 90°C durante 3 horas, então a reação foi concluída como monitorado por cromatografia em camada fina. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi lavado por água (100 mL), extraído com acetato de etila (100 mL *3) e então a fase orgânica foi lavada por salmoura (200 mL*2) e seca sobre sulfato de sódio anidro, então filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer intermediário 7E (sólido amarelo, 9,60 g 66,62% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 574,9 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,09 -1,27 (m, 2 H) 1,41 (s, 9 H) 1,77 (br d, J=ll,13 Hz, 2 H) 1,90 - 2,10 (m, 1 H) 2,62 - 2,91 (m, 2 H) 3,87 - 4,14 (m, 4 H) 5,16 - 5,30 (m, 2 H) 7,39 - 7,52 (m, 2 H) 7,76 (dd, J=9,66, 2,45 Hz, 1 H) 8,14 - 8,19 (m, 1 H) 8,24 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 8,28 (s, 1 H) 8,65 (s, 2 H)
Etapa F:
[0108] Sob atmosfera de nitrogênio, a solução misturada do intermediário 7F (200,00 mg, 348,77 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2- dioxaborolano-2-ila))-l,3,2-dioxaborolano (92,99 mg, 366,21 mmol), Pd(dppf)Cl2 (25,52 mg, 34,88 |imol) ou acetato de potássio (102,68 mg ,1,05 mmol) em 1,4- dioxano (10,00 mL) foi agitada a 70°C durante 2 horas para fornecer uma solução do intermediário 7F em dioxano, que foi usado diretamente durante a etapa seguinte sem purificação adicional.
Etapa G:
[0109] Sob atmosfera de nitrogênio, a solução misturada do intermediário 7F em solução de dioxano (210,00 mg, 338,43 |imol), 2-bromopiridin-4-carbonitrila (185,81 mg, 1,02 mmol), Pd(dppf)CI2-CH2CI2 (55,28 mg, 67,69 jimol) e carbonato de potássio (93,55 mg, 676,86 |imol) em 1,4-dioxano (10,00 mL) e água (2,00 mL) foi agitada a 80°C durante 3 horas. A solução de reação foi então resfriada até a temperatura ambiente, filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido por adicionar água (50 mL) e extraído com acetato de etila (30 mL *3). Então fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (30 ml *2), secas sobre sulfato de sódio anidro, seguido por filtração e concentração. O resíduo foi purificado por cromatografia preparativa em camada fina para fornecer intermediário 7G (sólido amarelo, 50,00 mg, 24,76% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 619,2 (M+23).
Etapa H:
[0110] Sob atmosfera de nitrogênio, ácido trifluoroacético (4,62 g, 40,52 mmol, 3,00 mL) foi adicionado em uma solução do intermediário 7G (50,00 mg, 83,80 |imol) em diclorometano (10,00 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada a 25 °C durante 1 hora, então concentrada para obter intermediário 7H (líquido preto amarronzado oleoso, 60,00 mg, 100% de rendimento, trifluoroacetato), que foi usado durante a etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. LCMS (ESI) m/z: 497,2 (M+l).
Etapa I:
[0111] Sob atmosfera de nitrogênio, formaldeído (40,87 mg, 503,50 |imol, 37,50 |iL, 37% solução aquosa) e triacetóxiborohidreto de sódio (64,03 mg, 302,10 Limol) foram adicionados em uma solução do intermediário 7H (50,00 mg, 100,70 Limol) em diclorometano (5,00 mL) a 0°C. A solução de reação foi deixada a 25 °C durante 16 horas, então concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativo para obter modalidade 7 (21,70 mg, 38,48% de rendimento, formato). LCMS (ESI) m/z: 511,1 (M+l). 1HNMR(4OO MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,27 - 1,43 (m, 2 H) 1,77 (br d, J=9,78 Hz, 3 H) 1,99 (br t, J=ll,43 Hz, 2 H) 2,22 (s, 3 H) 2,85 (br d, J=ll,37 Hz, 2 H) 4,05 (d, J=5,99 Hz, 2 H) 5,39 (s, 2 H) 7,50 (d, J=5,01 Hz, 2 H) 7,75 (dd, J=5,01,1,22 Hz, 1 H) 8,18 - 8,26 (m, 2 H) 8,28 (s, 1 H) 8,33 (s, 1 H) 8,40 (s, 1 H) 8,64 (s, 2 H) 8,78 (d, J=l,34 Hz, 1 H) 8,82 (d, J=5,01 Hz, 1 H) Modalidades (8-1 e 8-2)
Figure img0021
Etapa A:
[0112] Sob atmosfera de nitrogênio, uma solução do intermediário 1D (1,50 g, 2,55 pmol), tributil(l-etóxietileno)tin (1,14 g, 3,16 mmol, 1,07 mL) e Pd(dppf)Ü2 (358,43 mg, 510,66 nmol) em tolueno (10,00 mL) foi agitada a 100°C durante 3 horas. Ácido clorídrico (10,21 mL, 1 N solução aquosa) foi adicionado na solução de reação após a solução ser resfriada até a temperatura ambiente e então a solução foi agitada a 25°C durante 1 hora, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer intermediário 8A (líquido amarelo oleoso, 1,13 g, 80,48% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 573,1 (M+23). 1HNMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,50 (s, 9 H) 1,89 (d, J=7,03 Hz, 6 H) 1,98 - 2,10 (m, 2 H) 2,31 (s, 3 H) 2,72 - 2,86 (m, 2 H) 3,98 (d, J=6,27 Hz, 2 H) 4,12 - 4,31 (m, 2 H) 6,54 (q, J=7,28 Hz, 1 H) 7,42 (br d, J=7,65 Hz, 1 H) 7,61 (dd, J=9,66, 2,26 Hz, 1 H) 7,65 - 7,74 (m, 1 H) 7,84 (d, J=l,38 Hz, 1 H) 8,38 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 8,42 (s, 1 H) 8,47 (s, 2 H)
Etapa B:
[0113] Sob atmosfera de nitrogênio, uma solução do intermediário 8A (1,13 g, 2,05 mmol) em l,l-dimetóxi-N,N-dimetiletano (5,00 mL) foi agitada a 120°C durante 3 horas. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada até secura para obter o intermediário 8B (líquido preto amarronzado oleoso, 1,27 g, 100% de rendimento), que foi usado diretamente durante a etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS (ESI) m/z: 620,1 (M+l).
Etapa C:
[0114] Sob atmosfera de nitrogênio, hidróxilamina (213,61 mg, 3,08 mmol, sal de cloridrato) foi adicionado em uma solução do intermediário 8B (1,27 g, 2,05 mmol) em etanol (20,00 mL). A mistura foi deixada a 80°C durante 16 horas, então concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativo, os racematos foram separados por SFC preparativo (coluna : AS (250 mm*30 mm,10 um); fase móvel: [0,1% NH3-H2O EtOH]; B%: 0%-55%, 5,2 min; 150 minmin) ao intermediário 8C-1 (sólido branco, 380,00 mg, 31,44% de rendimento, 100% valor ee, Rt=2,431 min) e intermediário 8C-2 (sólido branco, 350,00mg, 38,95% de rendimento, 100% valor ee, Rt=3,299 min). LCMS (ESI) m/z: 590,4 (M+l). 1HNMR (intermediário 8C-1) (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,31 - 1,38 (m, 2 H) 1,50 (s, 9 H) 1,82 -1,94 (m, 5 H) 1,97 - 2,12 (m, 1 H) 2,29 (s, 3 H) 2,79 (br t, J=12,23 Hz, 2 H) 3,98 (d, J=6,36 Hz, 2 H) 4,21 (br s, 2 H) 6,06 (s, 1 H) 6,59 (d, J=6,97 Hz, 1 H) 7,33 (dd, J=9,41, 2,20 Hz, 1 H) 7,40 - 7,46 (m, 1 H) 7,48 - 7,55 (m, 1 H) 7,56 - 7,62 (m, 1 H) 8,36 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 8,43 (s, 1 H) 8,47 (s, 2 H ).
[0115] 1HNMR (intermediário 8C-2) (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,30 - 1,37 (m, 2 H) 1,49 (s, 9 H) 1,81 -1,94 (m, 5 H) 1,96 - 2,10 (m, 1 H) 2,29 (s, 3 H) 2,79 (br t, J=12,10 Hz, 2 H) 3,98 (d, J=6,24 Hz, 2 H) 4,20 (br s, 2 H) 6,06 (s, 1 H) 6,59 (q, J=7,05 Hz, 1 H) 7,33 (dd, J=9,29, 2,20 Hz, 1 H) 7,41 - 7,46 (m, 1 H) 7,48 - 7,54 (m, 1 H) 7,59 (d, J=l,59 Hz, 1 H) 8,36 (d, J=7,82 Hz, 1 H) 8,42 (s, 1 H) 8,47 (s, 2 H)
Etapa D:
[0116] Os Intermediários 8D-1, 8D-2 foram preparados de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa E:
[0117] As Modalidades 8-1, 8-2 foram preparadas de acordo com o método de preparação da modalidade 1.
Modalidade 8-1:
[0118] LCMS (ESI) m/z: 504,1 (M+l).
[0119] 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,54 -1,72 (m, 2 H) 1,85 - 2,13 (m, 6 H) 2,24 (s, 3 H) 2,69 - 2,80 (m, 3 H) 2,86 - 3,16 (m, 2 H) 3,19 - 3,52 (m, 2 H) 4,09 (d, J=6,27 Hz, 2 H) 6,29 (q, J=7,07 Hz, 1 H) 6,78 (s, 1 H) 7,47 - 7,60 (m, 2 H) 7,92 (dd, J=10,42, 2,13 Hz, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 8,21 - 8,35 (m, 2 H) 8,62 - 8,75 (m, 2 H) 10,37 - 10,80 (m, 1 H)
Modalidades 8-2
[0120] LCMS (ESI) m/z: 504,1 (M+l).
[0121] 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,57 -1,74 (m, 2 H) 1,81 - 2,12 (m, 6 H) 2,23 (s, 3 H) 2,62 - 2,79 (m, 3 H) 2,86 - 3,05 (m, 2 H) 3,41 (br d, J=ll,92 Hz, 2 H) 4,09 (d, J=6,27 Hz, 2 H) 6,29 (q, J=6,99 Hz, 1 H) 6,79 (s, 1 H) 7,53 (d, J=5,02 Hz, 2 H) 7,92 (dd, J=10,48, 2,07 Hz, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 8,20 - 8,34 (m, 2 H) 8,61 - 8,73 (m, 2 H) 10,75 (br s, 1 H) Modalidade 9
Figure img0022
Etapa A:
[0122] Sob atmosfera de nitrogênio, uma mistura do intermediário 3D (1,00 g, 1,76 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano-2-ila)- 1,3,2-dioxaborolano (469,28 mg, 1,85 mmol), Pd(dppf)CI2 (128,78 mg, 176,00 pmol) e acetato de potássio (518,17 mg, 5,28 mmol) em 1,4-dioxano (15,00 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas, então intermediário 9A em dioxano foi obtido e foi usado diretamente durante a etapa seguinte sem tratamento adicional.
Etapa B:
[0123] Sob atmosfera de nitrogênio, uma mistura do intermediário 9A (1,09 g, 1,77 mmol) em dioxano, 2-bromopiridina-4-carbonitrila (485,89 mg, 2,66 mmol), Pd(dppf)CI2CH2CI2 (289,09 mg, 354,00 pmol) e carbonato de potássio (489,26 mg, 3,54 mmol) em 1,4-dioxano (20,00 mL) e água (4,00 mL) em solução foi agitada a 80°C durante 3 horas. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia preparativa em camada fina, os racematos foram separados por SFC preparativo (coluna: AS (250 mm*30 mm,10 um); fase móvel: [0,1% NH3-H2O EtOH]; B%: 55%- 55%, 8,2 min; 100 minmin) ao intermediário 9B-1 (líquido amarelo oleoso, 200,00 mg, 100% valor ee, 19,06% de rendimento, Rt=2,973 min) e intermediário 9B-2 (líquido amarelo oleoso, 200,00 mg, 100% valor ee, 19,06% de rendimento, Rt=3,605min). LCMS (ESI) m/z: 593,1 (M+l).
Etapa C
[0124] O intermediário 9C-1,9C-2 foi preparado de acordo com o método de preparação de 1G.
Etapa D:
[0125] A modalidade 9-1, 9-2 foi preparado de acordo com o método de preparação da modalidade 1.
Modalidade 9-1:
[0126] LCMS (ESI) m/z: 507,1 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,29 - 1,45 (m, 2 H) 1,80 (br d, J=10,54 Hz, 3 H) 1,88 (d, J=7,28 Hz, 3 H) 2,14 (br t, J=ll,17 Hz, 2 H) 2,30 (s, 3 H) 2,94 (br d, J=ll,29 Hz, 2 H) 4,05 (d, J=6,02 Hz, 2 H) 6,32 (d, J=7,15 Hz, 1 H) 6,62 (d, J=9,66 Hz, 1 H) 7,46 - 7,55 (m, 2 H) 7,69 (dd, J=5,02, 1,25 Hz, 1 H) 8,19 - 8,26 (m, 3 H) 8,27 (s, 1 H) 8,43 (t, J=l,07 Hz, 1 H) 8,49 (d, J=2,38 Hz, 1 H) 8,64 (s, 2 H) 8,77 (dd, J=5,02, 0,88 Hz, 1 H)
Modalidade 9-2
[0127] LCMS (ESI) m/z: 507,1 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,27 -1,46 (m, 2 H) 1,81 (br d, J=10,54 Hz, 3 H) 1,89 (d, J=7,28 Hz, 3 H) 2,17 (br t, J=ll,17 Hz, 2 H) 2,31 (s, 3 H) 2,96 (br d, J=ll,29 Hz, 2 H) 4,09 (d, J=6,02 Hz, 2 H) 6,35 (d, J=7,15 Hz, 1 H) 6,65 (d, J=9,66 Hz, 1 H) 7.42 - 7.57 (m, 2 H) 7.66 (dd, J=5,02, 1,25 Hz, 1 H) 8,21 - 8,27 (m, 3 H) 8,29 (s, 1 H) 8,45 (t, J=l,07 Hz, 1 H) 8,51 (d, J=2,38 Hz, 1 H) 8,67 (s, 2 H) 8,79 (dd, J=5,02, 0,88 Hz, 1 H) Modalidade 10
Figure img0023
Etapa A:
[0128] Sob atmosfera de nitrogênio, uma mistura do intermediário 4A (200,00 mg, 346,53 pmol), l-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano-2- ila)pirazol (108,15 mg, 519,80 pimol), Pd(dppf)CI2 (25,36 mg, 34,65 nmol) e carbonato de sódio (110,19 mg, 1,04 mmol) em 1,4-dioxano (10,00 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas, então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido por adicionar água (60 mL) e então extraído com acetato de etila (50 mL*3). Então fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (80 mL *2), e secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia preparativa em camada fina para fornecer intermediário 10B (líquido amarelo oleoso, 200,00 mg, 95,45% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 557,3 (M+l).
Etapa B:
[0129] O intermediário IOC foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G.
Etapa C:
[0130] A modalidade 10 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 471,2 (M+l). 1HNMR (400 MHz, METANOL-d4): 1,63 -1,80 (m, 2 H) 2,09 - 2,25 (m, 3 H) 2,88 (s, 3 H) 3,05 (t, J=12,17 Hz, 2 H) 3,55 (d, J=12,67 Hz, 2 H) 3,91 (s, 3 H) 4,12 (d, J=5,90 Hz, 2 H) 5,34 (s, 2 H) 6,67 (d, J=9,41 Hz, 1 H) 7,42 - 7,51 (m, 2 H) 7,75 (s, 1 H) 7,81 (dd, J=9,35,2,57 Hz, 1 H) 7,88 (s, 1 H) 8,05 (d, J=2,38 Hz, 1 H) 8,25 - 8,29 (m, 1 H) 8,33 (s, 1 H) 8,47 (s, 1 H) 8,55 (s, 2 H).Modalidade 11
Figure img0024
Figure img0025
Etapa A:
[0131] Sob atmosfera de nitrogênio, uma solução de nitrito de sódio (2,52 g, 36,54 mmol) em água (50 mL) foi adicionada gota a gota em uma solução misturada de 3-meti-isotiazol-5-amina (5,00 g, 33,19 mmol, sal cloridrato) em água (14,00 mL) e ácido sulfúrico (10,00 mL, 98% de pureza) a 0°C. A solução de reação foi agitada a 0°C durante 1 hora, então uma solução de iodeto de potássio (6,06 g, 36,51 mmol) em água (35 mL) foi adicionada e a solução foi deixada a 80°C durante 1 hora durante reação. A solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com água (100 mL) e extraída com diclorometano (50 mL*2). Então as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (25 mL*2), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer intermediário 11A (sólido amarelo, 4,00 g, 53,55% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 225,9 (M+l). 1HNMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 2,39 - 2,48 (m, 3 H) 7,04 - 7,13 (m, 1 H).
Etapa B:
[0132] Sob atmosfera de nitrogênio, complexo de cloreto de isopropil- magnésio - cloreto de lítio (3,66 mL, 1,3 M solução de tetrahidrofurano) foi adicionado gota a gota em uma solução de intermediário 11A (1,00 g, 4,44 mmol) e 2-isopropoxi-4,4,5,5-l,3,2-dioxaborolano (850 mg, 4,57 mmol) em tetrahidrofurano (5,00 mL) a -25°C. A solução de reação foi agitada a -25°C durante 0,5 hora. Após a reação, a solução foi resfriada bruscamente por gotejar em uma solução de ácido acético (0,24 mL) em tetrahidrofurano (0,67 mL), então éter de petróleo (48 mL) e éter metil-terc-butílico (24 mL) foram adicionados na solução de reação. Após filtração, éter metil-terc-butílico (32 mL) foi adicionado no filtrado, então o filtrado foi novamente filtrado e concentrado para fornecer intermediário 11B (líquido amarelo oleoso, 512 mg, 51,22% de rendimento) que foi usado durante a etapa seguinte diretamente sem purificação adicional. 1HNMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,28 (s, 12 H) 2,46 - 2,48 (m, 3 H) 7,31 (s, 1 H).
Etapa C:
[0133] Sob atmosfera de nitrogênio, uma mistura do intermediário 11B (283,69 mg, 1,26 mmol), intermediário 4A (500,00 mg, 900,15 |imol), cloreto de paládio l,l-di(terc-butilfosfino)ferroceno (58,67 mg, 90,02 umol) e fosfato de potássio trihidratado (479,44 mg, 1,80 mmol) em tetrahidrofurano (5,00 mL) e água (1,00 mL) foi agitada a 65°C durante 12 horas. Então a solução de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, filtrada e concentrada. Após o resíduo foi dissolvido em água (50 mL) e extraído com acetato de etila (100 mL*2), a fase orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (50 mL*2), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia preparativa em camada fina para fornecer intermediário 11C (sólido amarelo, 266,00 mg, 51,51% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 574,2 (M+l). 1HNMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,27 -1,34 (m, 6 H) 1,60 -1,64 (m, 10 H) 1,60 -1,65 (m, 10 H) 1,83 -1,91 (m, 2 H) 1,95 (s, 1 H) 2,46 - 2,52 (m, 3 H) 3,95 - 4,01 (m, 2 H) 5,28 - 5,31 (m, 2 H) 6,71 - 6,77 (m, 1 H) 6,94 - 6,97 (m, 1 H) 7,39 - 7,56 (m, 3 H) 7,63 - 7,68 (m, lH)8,37(s, 2 H) 8,47 (s, 2 H).
Etapa D:
[0134] O intermediário 11D foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1F. LCMS (ESI) m/z: 474,2 (M+l).
Etapa E:
[0135] A modalidade 11 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 488,2 (M+l). 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,37 (br d, J=10,54 Hz, 2 H) 1,79 (br d, J=10,04 Hz, 3 H) 2,11 (br s, 2 H) 2,26 - 2,31 (m, 3 H) 2,40 - 2,44 (m, 3 H) 2,89 - 2,97 (m, 2 H) 4,01 - 4,09 (m, 2 H) 5,25 (s, 2 H) 6,57 (d, J=9,41 Hz, 1 H) 7,45 (d, J=ll,80 Hz, 3 H) 7,79 (dd, J=9,41, 2,64 Hz, 1 H) 8,20 - 8,26 (m, 2 H) 8,29 (s, 1 H) 8,53 - 8,56 (m, 1 H) 8,62 - 8,66 (m, 2 H). Modalidade 12
Figure img0026
Etapa A:
[0136] Trietilamina (32,08 mg, 317,00 |imol, 43,94 pl) foi adicionado em uma solução de isocianato de fenila (830,74 mg, 6,97 mmol) em nitroetano (261,77 mg, 3,49 mmol, 249,30 JLLL) e a solução de reação foi agitada a 50°C durante 30 minutos, então uma solução de tributil(etinil)estanano (1,00 g, 3,17 mmol) em tolueno (8,00 mL) foi adicionada na solução de reação, seguido por agitação a 50°C durante 5 horas. Cromatografia em camada fina foi usada para detectar o término da reação. Então água (100 mL) foi adicionada na solução, que então foi extraída com acetato de etila (100 mL). A fase orgânica foi então lavada com salmoura (50 mL) e seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada com um evaporador rotativo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer intermediário 12A (líquido amarelo oleoso, 700,00 mg, 42,13% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 373,14 (M+l). 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,82 - 0,85 (m, 9 H) 0,97 - 1,11 (m, 6 H) 1,20 -1,34 (m, 12 H) 1,49 - 1,52 (m, 3 H) 7,18 - 7,20 (m, 1 H).
Etapa B:
[0137] O intermediário 12A (200 mg, 348,77 p.mol) e PdíPPhshCL (25,27 mg, 36,01 (irnol) foi adicionado em uma solução de intermediário 4A (200,00 mg, 360,06 |imol) em dioxano (4,00 mL) a 20°C, então aquecido a 1002C e agitado por 12 horas sob atmosfera de nitrogênio. Cromatografia em camada fina foi usada para detectar a conclusão da reação. Então água (50 mL) foi adicionada na solução de reação e a solução foi extraída com acetato de etila (50 mL *2). A fase orgânica foi lavada com salmoura (50 mL), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada com evaporador rotativo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer intermediário 12B (sólido amarelo, 110,00 mg, 42,18% de rendimento). LCMS (ESI) m/z: 557,26 (M+l). 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,21 -1,31 (m, 4 H) 1,40 (s, 9 H) 1,72 -1,81 (m, 2 H) 1,89 - 1,98 (m, 1 H) 2,22 (s, 3 H) 2,70 (br s, 2 H) 3,88 (d, J=6,36 Hz, 2 H) 5,21 (s, 2 H) 6,02 (s, 1 H) 6,63 (d, J=9,54 Hz, 1 H) 7,33 - 7,37 (m, 1 H) 7,50 (dd, J=9,54, 2,57 Hz, 1 H) 7,57 - 7,64 (m, 1 H) 7,83 (d, J=2,32 Hz, 1 H) 8,23 - 8,31 (m, 2 H) 8,38 (s, 2 H).
Etapa C:
[0138] O intermediário 12C foi preparado de acordo com o método de preparação de intermediário 1G. LCMS (ESI) m/z: 457,21 (M+l).
Etapa D:
[0139] A modalidade 12 foi preparada de acordo com o método de preparação da modalidade 1. LCMS (ESI) m/z: 471,23 (M+l). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,14 -1,21 (m, 2 H) 1,49 (br s, 2 H) 1,79 -1,95 (m, 3 H) 1,99 (s, 2 H) 2,24 (s, 3 H) 2,38 - 2,38 (m, 1 H) 2,46 (s, 3 H) 3,12 (br d, J=10,92 Hz, 2 H) 5,29 (s, 2 H) 6,65 (s, 1 H) 7,47 (br s, 1 H) 7,82 - 7,90 (m, 1 H) 8,29 (br s, 2 H) 8,63 (s, 2 H) Ensaio 1: Atividade de ligação de ensaio de enzima c-MET Reagentes e consumíveis: cMET (invitrogen PV3143) Marcador 236 (Número do lote: 10815978) Eu-Anti-His AB (MAb Anti 6HIS-K) PerkinElmer corporation Envision detecção 665 nm e 615 nm 384-well plate-Checkerboard (PerkinElmer #6007299)
Princípio experimental:
[0140] O presente experimento utilizou o Ensaio de Ligação de Cinase Eu LanthaScreenTM, como mostrado na figura 1, detecção de conjugados AlexaFluor ou agente marcador de combinação de cinase foi feito por adicionar anticorpo rotulado como Eu. A ligação do agente marcador e anticorpo e cinase levou ao padrão FRET alto, enquanto usando inibidor de cinase ao invés do agente marcador levaria à perda de FRET.
Método experimental:
[0141] 1) O anticorpo Eu-Anti-His AB, enzima cMET, agente marcador Tracer236 foram diluídos.
[0142] 2) Preparação do composto: 10 mM do composto de teste e composto de referência foram diluídos por 100% DMSO a 0,667 mM, então sistema de pré- tratamento de microplaca totalmente automatizado ECHO foi usado para uma diluição de 3 vezes com 8 gradientes de concentração. Cavidades duplicatas duplas foram ajustadas e cada uma delas 75 nL
[0143] 3) A mistura de 7,5 pL de anticorpo (1/375 nM) e cinase (10 nM) foi adicionada à placa de composto, seguido por adição de 7,5 pL de marcador (60 nM). Concentração final: cMET: 5 nM, marcador 236: 30 nM, Eu-Anti-His AB (MAb Anti 6HIS-K): 1/750 nM.
[0144] 4) Após 60 min de incubação a 4°C, leituras Envision foram realizadas com um leitor de microplaca multi-rotulado (análise de dados de 665 nm/615 mm valores de sinal com Prism 5; luz de excitação Ex: espelho Laser 446, luz de excitação Em; 615 e 665 nM.
Resultado experimental: Vide a Tabela 1.
[0145] Conclusão: os compostos da presente invenção têm um efeito inibidor relativamente forte sobre a enzima de c-MET. Tabela 1
Figure img0027
Ensaio 2: Ensaio de efeito inibidor sobre proliferação Reagentes e consumíveis: 1) Cultura de células: meio de célula DMEM, soro fetal bovino, DPBS 2) Linhagem de célula: MHCC97-H 3) Reagente de detecção: kit de detecção de célula viva CelITiter-Glo 4) Outros consumíveis e reagentes principais: placa de diluição de composto, placa intermediária, placa deteste, DMSO
Princípio experimental:
[0146] A quantidade de ATP reflete diretamente o número de células e o estado das células, desse modo o número de células vivas pode ser diretamente detectado por medir quantitativamente ATP. O kit de ensaio de células vivas contém luciferase e seu substrato. Com a presença de ATP, um sinal ótico estável seria emitido pelo substrato catalisado por luciferase. Desse modo, a quantidade de ATP na célula pode ser determinada por detectar a intensidade do sinal. O sinal de luz foi proporcional à quantidade de ATP na célula, enquanto o ATP foi positivamente correlacionado com o número de células vivas, de modo que a proliferação na célula pode ser detectada. A placa de ensaio usada foi analisada por Envision da PE Corporation.
Método experimental: 1. Preparação das placas de célula
[0147] Células MHCC97-H foram semeadas separadamente em placas de 384 cavidades, cada uma das cavidades contém 500 células. As placas de células foram colocadas e incubadas em um incubador de dióxido de carbono durante a noite.
2. Preparação do composto
[0148] Echo foi usado para diluição de 4 vezes e 9 concentrações foram preparadas, prontas para ensaio de cavidades duplicatas duplas.
3. Tratamento de composto das células
[0149] Os compostos foram transferidos para placas de célula em uma concentração de partida de 10 |iM. as placas de células foram incubadas em um incubador de dióxido de carbono por 3 dias.
4. Detecção
[0150] O reagente Promegaer-Glo foi adicionado nas placas de célula e a placa foi incubada em temperatura ambiente por 10 min para estabilizar o sinal de luminescência. O analisador de multi-rótulos PerkinElmer Envision foi usado para leituras.
Resultados experimentais: vide a Tabela 2.
[0151] Conclusão: os compostos da presente invenção apresentam boa atividade inibidora contra células MHCC97H. Tabela 2
Figure img0028
Ensaio 3: Ensaio de farmacodinâmica de modelo de tumor xenoenxerto subcutâneo de célula de câncer de fígado MHCC97H Cultura de células:
[0152] Células MHCC97H foram cultivadas em uma camada única in vitro. A condição de cultura foi meio RPMI1640 suplementado com soro fetal bovino inativado por calor a 10%, anticorpo duplo de penicilina-estreptomicina a 1% sob 37^c, dióxido de carbono a 5%. Digestão e tratamento de passagem com tripsina-EDTA foi feita duas vezes por semana. Quando as células estão na fase de crescimento exponencial, as células foram coletadas, contadas e inoculadas. Animal: Camundongos sem pelo BALB/c, machos. 6-8 semanas de idade, pesando 18-22 g.
Inoculação de tumor:
[0153] 0,2 mL de uma suspensão de células contendo 5xl06 MHCC97H foi inoculado por via subcutânea no dorso direito de cada camundongo. Os fármacos foram administrados por grupo após o volume médio do tumor atingir aproximadamente 172 mm3. O agrupamento experimental e programa de administração são mostrados na tabela abaixo.
[0154] Objetivo do ensaio: investigação de se o crescimento do tumor foi inibido, retardado ou curado. Os diâmetros do tumor foram medidos duas vezes por semana usando paquímetros. A fórmula para calcular o volume de tumor é V = 0,5axb2, e a e b representam os diâmetros longo e curto do tumor respectivamente. O efeito antitumoral (TGI) dos compostos foi avaliado por T-C (dias) e T/C (%).
Resultados experimentais vide na Tabela 3.
[0155] Conclusão: os compostos da presente invenção apresentam melhor atividade inibitória de tumor do que Tepotinib nos ensaios farmacodinâmicos do modelo de tumor xenoenxerto subcutâneo de células de hepatoma MHC97H.Tabela 3: Avaliação da eficácia antitumoral de fármacos testados em modelo de xenoenxerto de célula MHCC97H de câncer de fígado humano (cálculos baseados no volume de tumor no 24^ dia após administração do fármaco)
Figure img0029
Comentários :a. média ± SEM. b. o valor p foi calculado com base no volume do tumor.
[0156] Os compostos da persente invenção têm melhor estabilidade metabólica do que tepotinib. Por exemplo, o ti/2 de metabolismo de partícula de fígado nas três espécies de humano, rato e camundongo da modalidade 1-2 são 62,1 min, 36,4 min e 49,1 min, respectivamente. Enquanto sob as mesmas condições para Teponitib nas três espécies de humano, rato e camundongo, o ti/2 de metabolismo de partícula de fígado são 48,3 min, 10,5 min e 12,4 min respectivamente. Os compostos da presente invenção têm uma meia-vida estendida e tempo de ação sobre o alvo, uma estabilidade metabólica aumentada e atividade inibitória mais excelente. O prolongamento de meia-vida manteria a concentração no sangue por um tempo mais longo. Desse modo comparando com outro medicamento no tratamento de tumor, os compostos reduziriam a dose e intervalo entre doses de modo que a aderência do paciente seria significativamente melhorada.
[0157] Uma vez que quando c-MET combinado com HGF, ativou o MAPK, PI3K/AKT, CDc42/Racl e outras vias, levando à sobrevivência e proliferação de células tumorais, desse modo acelerou a taxa de crescimento de tumor. Desse modo, o composto de piridona como inibidor c-Met tem grandes perspectivas de aplicação em fármacos terapêuticos alvo como câncer de fígado, câncer de pulmão de célula não pequena e câncer gástrico. Especialmente no tratamento de câncer de fígado, esse composto tem um efeito terapêutico preciso no câncer de fígado com alta expressão de c-Met. Portanto, o composto de piridona como inibidor de c-Met na presente invenção é esperado ser um fármaco novo mais terapeuticamente eficaz do que outros produtos similares em vista de sua atividade inibidora notável in vivoe in vitro,bem como sua boa estabilidade metabólica.

Claims (15)

1. Composto, caracterizado pelo fato de apresentar a fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável,
Figure img0030
R1 é selecionado de H ou F; R2 é CH3; a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é R ou S; A é selecionado do grupo que consiste em fenila, piridila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila e tiazolila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 R3; R3 é selecionado de CN, halogênio, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo que consiste em Ci-6 alquila, Ci-6 heteroalquila, e C3-6 cicloalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 Ro; Ro é selecionado de F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo que consiste em Ci-3alquila e Ci-3 heteroalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 R'; R' é selecionado de F, Cl, Br, I, CN, OH, NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2 ou CH2F; o "hetero"em Ci-3 heteroalquila ou Ci-6 heteroalquila é selecionado do grupo que consiste em -O-, -C(=O)NR'-, -C(=O)NH-, -NR'-, e -NH-; em qualquer um dos casos acima, o número do heteroátomo ou do grupo heteroatômico é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3.
2. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Ro é selecionado de F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, C(=O)NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, NH2CH2, (NH2)2CH, CH3O, CH3CH2O, CH3OCH2, CH3NH OU (CH3)2N.
3. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que Ri é H.
4. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que Ri é F.
5. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é R.
6. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a configuração do átomo de carbono ligado a R2 é S.
7. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado de CN, halogênio, C(=O)NH2, ou é selecionado do grupo que consiste em Ci-3 alquila e Ci-3 heteroalquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 Ro.
8. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado de CN, F, Cl, Br, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, CH3O OU C(=O)NH2.
9. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que A é selecionado do grupo que consiste em
Figure img0031
cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 R3.
10. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que A é selecionado do grupo que
Figure img0032
11. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que A é selecionado do grupo que
Figure img0033
12. Composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 8 ou 11, caracterizado pelo fato de que A é selecionado do grupo
Figure img0034
Figure img0035
13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo que consiste em
Figure img0036
14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, bem como um carreador farmaceuticamente aceitável.
15. Uso do composto ou sal farmaceuticamente aceitável definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13 ou da composição farmacêutica definida na reivindicação 14, caracterizado pelo fato de ser para fabricação de um medicamento para tratar tumor.
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