BR112017005518B1

BR112017005518B1 - Derivados de 7-(morfolinil)-2-(n-piperazinil) metil-tieno [2, 3-c] piridina como drogas anticancerígenas

Info

Publication number: BR112017005518B1
Application number: BR112017005518-0A
Authority: BR
Inventors: Durga Prasad Konakanchi; Subba Rao Pula; Rama Krishna Pilli; Lakshmana Viswa Venkata Pavan Kumar Maddula; Srinivasa Krishna Murthy Konduri; Janaki Rama Rao Ravi; Naga Vasanta Srinivasu Vuppalapati; Sandeep Kumar Thoota; Pulla Reddy Muddasani; Kali Satya Bhujanga Rao Adibhatla; Venkaiah Chowdary Nannapaneni
Original assignee: Natco Pharma Limited
Priority date: 2014-12-11
Filing date: 2014-12-11
Publication date: 2022-11-29
Also published as: HRP20192041T1; AU2014413483B2; KR20170090434A; CN107074873A; SI3230289T1; WO2016092556A1; NZ729078A; DK3230289T3; ZA201701036B; MX2017004782A; BR112017005518A2; PH12017500342A1; MA40110A1; AU2014413483A1; AP2017009749A0; CY1122080T1; IL252254B; JP2017537139A; US20170320891A1; PL3230289T3

Abstract

DERIVADOS DE 7-(MORFOLINIL)-2-(N-PIPERAZINIL) METIL-TIENO [2, 3-C] PIRIDINA COMO DROGAS ANTICANCERÍGENAS. A presente invenção refere-se a novas séries de 7-(morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metil tieno [2,3-c] piridinas substituídas com a seguinte estrutura de fórmula I. Em que R1, R2, R3 e R4 são definidos.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a uma série de novas 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metiltieno [2,3-c] piridinas substituídas que são úteis no tratamento de vários cânceres do cérebro, mama, pulmão, pâncreas e próstata e semelhantes. A presente invenção proporciona uma série de novas 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metiltieno [2,3-c] piridinas substituídas de fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável,

em que R1 pode ser -H, alquil C1-C6, cicloalquil C3-C6, -C(O)R5, -S(O)2R5, -C(O)2R5, alquil C1-C6 substituído com R6, cicloalquil C3-C6 substituído com R6, -aril, -aril substituído com R6, -heteroaril substituído com R6, etc. R2, R3 e R4 podem ser independentemente -H, -OH, -SH, -halo, -amino, -ciano, nitro, alquil -C1-C6, cicloalquil -C1-C6, -aril, -alcoxi inferior, -C(O)R5, -S(O)2R5, -C(O)2R5, -C=C-R6, -aminocarbonil substituído com R6, -alquilamino substituído com R6 ou opcionalmente contendo cicloalquil C3-C6, alquilaminocarbonil, arilaminocarbonil, heteroaril, heteroaril substituído opcionalmente substituído com H, amino, aminoalquil ou aminocicloalquil contendo átomos de carbono C3-C6, heteroaril bicíclico ou tricíclico fundido contendo 1,2 ou 3 heteroátomos tais como N, O, S, grupo aril substituído opcionalmente substituído com hidroxil, hidroxil alquil, amino, aminoalquil, amino carbonil, alcinil, ciano, halogênio, alcoxil inferior ou ariloxi, ou opcionalmente substituído com R6, etc. R5 pode ser -H, -alquil, amino, -aminoalquil, -N(alq)2, -aril substituído com R6, heteroaril substituído com R6, -heteroaril fundido substituído com R6, -trifluorometil, etc. R6 pode ser selecionado a partir de -H, hidroxil, halogênio, ciano, nitro, amino, alquil C1-C6, N(alq)2, alquil(CH)0-6 substituído, aril opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, um aralquiloxi opcionalmente substituído, um aril (hidroxil) alquil, um acil amino aromático, um arilsulfonilamino, um alcoxilalquil aril sulfonilamino inferior, um hidroxil alcoxil estiril inferior, um ariloxil alcoxil inferior, um arilalcenil opcionalmente substituído, -heteroarilalquenil, -heteroarilalcinil, acil alcinil aromático, alquilinferior opcionalmente N-substituído, -arilamino, - arilalquilamino, etc.

ESTADO DA TÉCNICA

[002] O Pedido PCT WO 2007/122410 certos compostos de tieno [2,3-c] pirimidina funcionando pelo mecanismo de PI3 quinase e úteis no tratamento de vários distúrbios proliferativos do cérebro, mama, pulmão, etc. A estrutura do composto de chumbo GDC-0941, chamado como Pictilisib, é dada abaixo:

Determinadas tieno [2, 3-c] piridinas como PI3 cinases

[003] O documento WO2009071901A1 descreve uma classe de derivados triazol e tiofeno tricíclicos condensados como inibidores de PI3 quinase, os quais são benéficos no tratamento de desordens inflamatórios, autoimunes, cardiovasculares, neurodegenerativos, metabólicos, oncológicos, nociceptivos ou oftálmicos.

[004] O pedido de patente US n. 20090247567A1, descreve determinadas tieno [2,3-c] piridinas, benzopirano fundido e benzoxipeno fundido como inibidores de PI3 quinase.

[005] O documento US8653089 descreve como uma preparação de compostos heterocíclicos como inibidores seletivos das isoformas p110 delta da PI3 quinase para o tratamento de inflamação, doenças imunológicas e certas formas de câncer.

Tieno [2,3-c] piridinas para outras aplicações

[006] O documento US 3579526A descreve uma série de compostos de tienopiridinas como intermediários úteis, inseticidas, herbicidas, pesticidas e aditivos de óleo lubrificante.

[007] O documento GB2010249A descreve certas tieno [2,3-c] - [3,2-c] piridinas e as suas aplicações terapêuticas como inibidores da inflamação.

[008] O documento GB2031428A descreve novos derivados de tieno [2,3-c] piridina e as suas aplicações terapêuticas como compostos anti-inflamatórios.

[009] O documento EP0292051A2 descreve a preparação de 2 - [(tienopiridinilmetil) tio] benzimidazóis como agentes antiulcerosos. Estes derivados de benzimidazóis e tienopiridinas são excelentes agentes antiulcerosos.

[0010] Os documentos WO2000075145A1 e US6232320 descrevem a preparação de tienopiridinas e tienopirimidinas como compostos anti-inflamatórios inibidores de adesão celular.

[0011] O documento WO2005110410A2 descreve a preparação de heterocíclicos fundidos como inibidores de cinase. Esta invenção proporciona compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis como inibidores de quinases, particularmente cinases COT ou MK2.

PRESENTE INVENÇÃO

[0012] O objetivo principal da presente invenção é proporcionar uma série de novas 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metiltieno [2,3-c] piridinas de fórmula geral I acima definida, ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0013] Outro objetivo da presente invenção é proporcionar uma série de novas 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metiltieno [2,3-c] piridinas de fórmula geral I, acima definida e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis que são potentes e inibidores seletivos da PI3 quinase e são, portanto, benéficos no tratamento e prevenção de várias doenças humanas tais como câncer.

[0014] Ainda outro objetivo da presente invenção é proporcionar uma nova série de 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) -metiltieno [2,3- c] piridinas substituídas de fórmula geral I, acima definida, e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis tendo excelente atividade in vivo contra tumores sólidos tais como pulmão, pâncreas, etc.

[0015] Outro objetivo da presente invenção é proporcionar um processo para preparação de uma série de 7- (morfolinil) -2-(N-piperazinil) -metiltieno [2,3-c] piridinas substituídas de fórmula geral I, acima definida, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0016] Os compostos de acordo com a presente invenção, que são inibidores potentes e seletivos da PI3 quinase são, portanto, benéficos no tratamento e na prevenção de várias doenças humanas tais como câncer.

[0017] A presente invenção refere-se a compostos de fórmula I e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem ser preparados por qualquer processo conhecido por ser aplicável aos compostos quimicamente relacionados.

[0018] A invenção refere-se a novas 7- (morfolinil) -2- (N-piperazinil) metil tieno [2,3-c] piridinas de fórmula I,

em que R1 pode ser -H, alquil C1-C6, cicloalquil C3-C6, -C(O)R5, -S(O)2R5, -C(O)2R5, alquil C1-C6 substituído com R6, cicloalquil C3-C6 substituído com R6, -aril, -aril substituído com R6, -heteroaril substituído com R6, etc R2, R3 e R4 podem ser independentemente -H, -OH, -SH, -halo, -amino, -ciano, nitro, alquil -C1-C6, cicloalquil -C1-C6, -aril, -alcoxi inferior, -C(O)R5, -S(O)2R5, -C(O)2R5, -C=C-R6, -aminocarbonil substituído com R6, -alquilamino substituído com R6 ou opcionalmente contendo cicloalquil C3-C6, alquilaminocarbonil, arilaminocarbonil, heteroaril, heteroaril substituído opcionalmente substituído com H, amino, aminoalquil ou aminocicloalquil contendo átomos de carbono C3-C6, heteroaril bicíclico ou tricíclico fundido contendo 1,2 ou 3 heteroátomos tais como N, O, S, grupo aril substituído opcionalmente substituído com hidroxil, hidroxil alquil, amino, aminoalquil, amino carbonil, alcinil, ciano, halogênio, alcoxil inferior ou ariloxi, ou opcionalmente substituído com R6, etc. R5 pode ser -H, -alquil, amino, -aminoalquil, -N(alq)2, -aril substituído com R6, heteroaril substituído com R6, -heteroaril fundido substituído com R6, -trifluorometil, etc. R6 pode ser selecionado a partir de -H, hidroxil, halogênio, ciano, nitro, amino, alquil C1-C6, N(alq)2, alquil(CH)0-6 substituído, aril opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, um aralquiloxi opcionalmente substituído, um aril (hidroxil) alquil, um acil amino aromático, um arilsulfonilamino, um alcoxilalquil aril sulfonilamino inferior, um hidroxil alcoxil estiril inferior, um ariloxil alcoxil inferior, um arilalcenil opcionalmente substituído, -heteroarilalquenil, -heteroarilalcinil, acil alcinil aromático, alquilinferior opcionalmente N-substituído, -arilamino, - arilalquilamino, etc.

[0019] Compostos de Fórmula I e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados por qualquer processo conhecido por ser aplicável aos compostos quimicamente relacionados.

[0020] Em geral, os compostos activos podem ser preparados a partir dos compostos de 7- (morfolinil) -2 (N-piperazinil) metil- tieno [2,3-c] piridina substituídos derivados dos derivados de tieno [2,3 -c] piridinas.

[0021] Os compostos ativos da presente invenção podem ser preparados pelo seguinte esquema sintético -I.

em que R1, R2, R3 e R4 são definidos como acima.

[0022] Vários compostos de fórmula I são preparados pelos seguintes métodos a) Preparação de fórmula – III

[0023] Tratou-se o composto II com solução de nitrito de sódio, na presença de ácido bromídrico e adicionou-se lentamente uma solução diazotada ao brometo de cobre (I) obtido para a fórmula III. Em que R2 é definido como acima. O agente de halogenação pode ser ácido bromídrico aquoso, ácido bromídrico em ácido acético, ácido clorídrico. A reação pode ser efetuada de um modo puro, sem qualquer solvente ou com ácido bromídrico, água DM, etc. A temperatura da reação mantida entre -5°C e 110°C, de preferência a temperatura de refluxo do reagente halogenante.b) Preparação da fórmula – IV

[0024] O grupo éster dos compostos de fórmula III foi hidrolisado a derivados de ácido carboxílico de compostos de fórmula III. Os compostos de fórmula III foram tratados com solução de hidróxido de sódio na presença de tetrahidrofurano, metanol e água. Finalmente acidificada com ácido clorídrico para se obter a fórmula IV (em que R2 é definido como acima). A temperatura da reação foi mantida entre 5°C e 110°C, de preferência entre 25°C e 35°C.c) Preparação de fórmula VI

[0025] Com agentes cianantes tais como benzoilacetonitrilo substituído na presença de alcóxido de sódio e álcool inferior como solvente, ou na presença de água, ácido clorídrico, etc. e os compostos de fórmula IV foram convertidos em derivados cianometilo de tiofeno de fórmula VI (em que R2 é definido como acima). A temperatura da reação foi mantida entre 5°C e 110°C, de preferência a temperatura de refluxo do solvente.d) Preparação de fórmula – VII

[0026] Os compostos de fórmula VI foram tratados com tri-haleto de fósforo, com quantidade catalítica de dimetilformamida, de forma clara ou em presença de solventes tais como arilo ou alcanos halogenados para obter compostos de fórmula VII (em que R2, R3 e X são definidos como acima). A temperatura da reação foi mantida entre 25°C e 180°C, de preferência 120°C a 125°C.Preparação de fórmula – VIII

[0027] Os compostos de fórmula VII foram tratados com morfolina e etanol para obter compostos de fórmula VIII (em que R2, R3 e X são definidos como acima). A temperatura da reação foi mantida entre 25°C e 140°C, de preferência entre 105°C e 110°C.f) Preparação da fórmula – IX

[0028] Os compostos de fórmula VIII foram tratados com n-butil-lítio em hexano e dimetilformamida para se obter compostos de fórmula IX (em que R2, R3 e X são definidos como acima). A temperatura da reação foi mantida entre -80°C a 0°C, de preferência -60°C a -70°C.g) Preparação de fórmula – XI

[0029] Os compostos de fórmula IX foram tratados com a fórmula X e ortoformato de trimetilo, triacetoxiboro-hidreto de sódio para se obter compostos de fórmula XI (em que R1, R2, R3 e X são definidos como acima). A temperatura da reação foi mantida entre 0°C e 110°C, de preferência h) Preparação de fórmula – I

[0030] Os compostos de fórmula XI foram tratados com a fórmula XII de ésteres borônicos ou ácidos borônicos em presença de dicloreto de bis trifenilfosfina (II), solução aquosa de carbonato de sódio e tolueno e etanol para obter compostos de fórmula I (em que R1, R2, R3 e R4 são definido acima). A temperatura da reação foi mantida entre 0°C e 160°C, de preferência entre 115°C e 120°C.

[0031] Alternativamente, os compostos de formula XVII podem ser preparados pelo Esquema II seguinte:Esquema – II

i) Preparação de compostos de Fórmula –XIV

[0032] Trataram-se os ácidos 3-metil-2-tiofeno carboxílicos substituídos (de fórmula -XIII) com sulfato de dimetil e carbonato de potássio em solvente acetona para se obter compostos de fórmula -XIV. A temperatura da reação foi mantida entre 15°C e 55°C, de preferência entre 25°C e 30°C. j) Preparação de compostos de fórmula XV

[0033] Os compostos de fórmula XIV foram tratados com N-bromossuccinimida e peróxido de benzoíla em solvente de tetracloreto de carbono para se obter compostos de fórmula XV. A temperatura da reação foi mantida entre 25°C e 110°C, de preferência entre 40ºC e 80ºC e mais preferencialmente entre 75ºC e 80ºC. k) Preparação de compostos de fórmula-XVI

[0034] Os compostos de fórmula XV foram tratados com cianeto de sódio em água para se obter compostos de fórmula XVI. A temperatura da reação manteve-se entre 25°C e 90°C, de preferência entre 50°C e 55°C.l) Preparação de compostos de fórmula –XVII

[0035] Os compostos de fórmula XVI foram tratados com solução de hidróxido de sódio em presença de tetra-hidrofurano e metanol e finalmente acidificados com solução de ácido clorídrico obtida para a Fórmula -XVII. A temperatura da reação foi mantida entre 25°C e 60°C, de preferência entre 25°C e 30°C.

[0036] A invenção mais particularmente refere-se a novos derivados de piridina fundidos sintetizados como fármacos anticâncer.

[0037] Os detalhes da invenção são dados nos exemplos dados a seguir que são fornecidos apenas para ilustração e, portanto, estes exemplos não devem ser interpretados como limitativos do âmbito da invenção.Exemplo 1: Preparação de 3-bromo-4-metil-2- tiofenocarboxilato de metil

[0038] A uma solução agitada de 50 g (0,292 mol) de 3-amino-4-metiltiofeno-2-carboxilato de metil em 110 ml de ácido bromídrico adicionou-se gota a gota 21,17 g (0,306 mol) de nitrito de sódio em 50 ml de água, Enquanto se mantinha a temperatura da mistura reacional a 0-50°C por arrefecimento em banho de gelo-água. Quando a adição estava completa, a solução foi agitada a 0-5°C durante 60 min. A solução diazotizada foi adicionada gota a gota a uma solução de 44,0 g (0,306 mol) de brometo de cobre (I) em 130 ml de ácido bromídrico, enquanto a temperatura da mistura reacional é mantinha a 0-50°C por arrefecimento em banho de gelo-água. Quando a adição estava completa, a solução foi agitada a 0-50°C durante 30 min e depois a mistura reacional foi aquecida num banho de temperatura constante a 650°C durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com 600 ml de água enquanto se mantinha a 25-300°C por arrefecimento e extraída com duas porções de 400 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados duas vezes com porções de 400 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar 3-bromo-4-metil-2-tiofenocarboxilato de metil, 65,5 g (95,3%) como um sólido amarelo, ponto de fusão 73°C a 76,5°C com 86% de pureza por HPLC.1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 2.21 (d, CH3, 3H), 3.82 (s, O-CH3, 3H), 7.759-7.761 (d, 1H). 13 CNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm):15.80(1C), 52.13(1C), 119.21(1C), 126.37(1C), 128.38 (1C), 138.98 (1C), 160.38(1C). Mass: 237.0 [M+2], 235.0 [M].Exemplo 2: Preparação de ácido carboxílico 3-bromo- 4-metiltiofeno-2

[0039] tiofenocarboxilato de metil (64,0 g, 0,272 mol) numa mistura de metanol (288 mL) e tetrahidrofurano (288 mL) e adicionou-se hidróxido de sódio aquoso IN (420 mL). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 h. E acidificou- se com ácido clorídrico 1 N para se obter 35,5 g (59,0%) de ácido 3-bromo-4- metiltiofeno-2-carboxílico sob a forma de um sólido branco incolor, ponto de fusão 227°C a 229°C com 97,3% de pureza por HPLC.1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 2.21 (d, CH3, 3H), 7.692-7.794 (d, 1H), 13.30 (s, OH, 1H) (ppm):15.98(1C), 118.45(1C), 161.54(1C). Massa: 221.0 [M]. Exemplo 3: Síntese de ácido carboxílico 3-(cianometil) -4-metiltiofeno-2

[0040] Adicionou-se acetonitrilo de benzoilo (73,8 g, 0,508 mol) a uma solução arrefecida de etóxido de sódio (preparada por dissolução de 19,5 g de metal sódico 0,847 mol em etanol 1125 ml). Foi adicionado ácido 3-bromo-4-metil-tiofeno-2-carboxílico (75,0 g, 0,339 mol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Foram adicionados 4,5 g (0,0247 mol, 0,07 meq) de acetato de cobre (II) anidro e a mistura foi fervida e acetato de cobre (II) anidro e a mistura foi fervida sob refluxo durante 8 h. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e filtrou-se a massa. O etanol foi removido por destilação sob vácuo a uma temperatura de 600°C. A mistura reacional foi diluída com 750 ml de água enquanto se mantinha a 25- 300°C por arrefecimento e a solução foi acidificada com ácido clorídrico e extraída com duas porções de 750 mL de acetato de etil. Os extratos de acetato de etilo foram combinados e extraídos duas vezes com porções de 750 ml de solução de carbonato de sódio a 5%. Os extratos aquosos de carbonato de sódio foram combinados, a solução foi acidificada com ácido clorídrico e extraída com duas porções de 325 ml de acetato de etilo. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo, para dar um produto em bruto e recristalização de produto em bruto a partir de éter isopropílico para dar 35,10 g (57,14%) de sólido amarelo, ponto de fusão 1400C a 1430C com 94,1% de pureza por HPLC. 1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) - Valor (ppm): 2.24 (s, CH3, 3H), 4.25 (s, CH2, 2H), 7.58 (d, 1H), 13.65 (s, OH, 1H). 13 CNMR (400 MHz, DMSO-d6) - Valor (ppm):14.05(1C), 117.46 (1C), 128.10(1C), 130.18 (2C), 135.58 (1C), 138.55 (1C), 163.02 (1C). Massa: 180.1 [M-1] Exemplo 4: Preparação de 5, 7-dibromo-3-metiltieno [2, 3-c] piridina

[0041] O ácido 3- (cianometil) -4-metil-2-tiofenocarboxílico foi reagido (56,0 g, 0,309 mol) em tribrometo de fósforo (371 mL) e dimetilformamida (35 mL) a 120-1250C, durante 4h. Arrefeceu-se a mistura reacional até à temperatura ambiente. Sob arrefecimento, a mistura reacional foi adicionada à água gelada (3920 ml) para dar um produto bruto sólido. O produto em bruto foi dissolvido em cloreto de metileno (560 ml), lavado com 560 ml de água e seco sobre sulfato de sódio anidro. O cloreto de metileno foi removido por destilação sob vácuo e o sólido foi triturado com hexano para dar 67,7 g (71,2%) como um sólido castanho claro, ponto de fusão 1480C a 1500C, com 94,3% de pureza por HPLC.1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm):2.41(d, 3H), 7.41 (d, 1H), 7.76 (s, 1H) 13 CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm):13.78 (1C), 119.46(1C), 130.03 (1C), 132.37(1C), 133.31(1C), 134.06 (1C), 138.68 (1C), 148.18 (1C). Massa: 308.12[M+1].Exemplo 5: Preparação de 4- (5-bromo-3-metiltieno-[2,3-c] piridina-7-il) –morfolina

[0042] Uma solução de 100 g (0,325 mol) de 5,7- dibromo-3-metiltieno [2,3-c] piridina dissolvida em 275 ml de etanol e 284,4 g (3,271 mol) de morfolina foi aquecida num tubo selado, temperatura constante a 105-1100°C durante 4 h. O etanol e o excesso de morfolina foram removidos por destilação sob vácuo, o produto em bruto foi dissolvido em cloreto de metileno (2000 ml), lavado com quatro porções de 600 ml de água e seco sobre sulfato de sódio anidro. O cloreto de metileno foi removido por destilação sob vácuo e o sólido foi triturado com éter di-isopropílico para dar 61,17 g (60,0%) de sólido castanho claro, com 97,4% de pureza por HPLC. 1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) - Valor (ppm): 2.36 (d, CH3, 3H), 3.71-3.73 (t, 4H, 2 CH2), 3.86-3.88 (t, 4H, 2 CH2), 7.19-7.20 (d, 1H), 7.27 (s, 1H). 13 CNMR (400 MHz, CDCl3) - Valor (ppm): 13.65 (1C), 48.08 (2C), 66.82 (2C), 112.11 (2C), 122.07(1C), 126.13(1C), 130.78 (1C), 133.93 (1C), 149.74 (1C), 154.95 (1C). Massa: 313.21 [M] Exemplo 6: Preparação de 1- Metanossulfonilpiperazina

[0043] A uma solução agitada de 100,0 g (1,16 mol) de piperazina dissolvida em 2000 ml de cloreto de metileno, adicionou-se gota a gota 133,2 g (1,16 mol) de cloreto de metanossulfonilo a 25-300°C. Quando a adição estava completa, a mistura reacional foi agitada durante 16 horas. E a massa foi basificada com hidróxido de sódio aquoso a 25% p/v. A massa reacional foi filtrada e lavada com 800 ml de água, e seca sobre sulfato de sódio anidro. O cloreto de metileno foi removido por destilação sob vácuo para dar 81,2 g (42,5%) como um sólido esbranquiçado com 98,3% de pureza por ensaio químico. 1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 1.64 (s, NH, 1H), 2.77 (s, CH3, 3H), 2.95-2.98 (t, 4H, 2 CH2), 3.18-3.21 (t, 4H, 2 CH2). 13 CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm): 33.85 (1C), 45.34 (2C), 46.54 (2C). Massa: 165.1 [M+1] Exemplo 7: Preparação de 5-bromo-3-metil-7- morfolino-tieno [2,3-c] piridina

[0044] A uma solução agitada de 50 g (0,1597 mol) de 4- (5-bromo-3-metiltieno- [2,3-c] piridina-7-il) -morfolina num tetrahidrofurano seco (750 ml) a -60°C A -700C adicionou-se 120 ml (0,192 mol) de n-butil-lítio 1,6 M em hexano. Após agitação durante 1 hora e meia, foram adicionados 29,0 g (0,39 mol) de dimetilformamida seca. A mistura reacional foi agitada durante 1 h. A -60°C a -700°C e depois aqueceu-se lentamente até à temperatura ambiente. Após mais 2 horas de manutenção à temperatura ambiente a mistura reacional foi vertida em gelo/água (2250 ml) e extraída com duas porções de 1000 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar 35,30 g (64,7%) como um sólido amarelo, ponto de fusão 1700C a 182, 50C com 96,4% de pureza por HPLC. 1 HNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm): 2.41(s, 3H, CH3), 3.63 (t, 4H, 2 CH2), 3.73 (t, 4H, 2CH2), 8.16 (s, 1H), 10.34 (s, 1H). 13 CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm): 11.9 (1C), 48.7 (2C), 66.6 (2C), 112.4 (1C), 123.2(1C), 132.4(1C), 134.5(1C), 147.3(1C), 150.0 (1C), 155.1(1C), 183.8 (1C, C=O). Massa: 340.9 [M] Exemplo 8: Preparação de 4- [5-bromo-3-metil-2 - [(4- metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina

[0045] A uma solução agitada de 107,0 g (0,3137 mol) de 5-bromo-3-metil-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina, 82,0 g (0,50 mol) de 1- metanossulfonilpiperazina e 700 g de ortoformato de trimetilo em 3210 ml de 1,2-dicloroetano durante 4 horas. Adicionou-se 700 g de ortoformato de trimetilo e agitou-se a mistura reacional durante 16 horas. Temperatura ambiente. A isto foram adicionados 205,5 g (0,9693 mol) de triacetoxi boro- hidreto de sódio e 1070 ml de 1, 2-dicloroetano. A mistura reacional foi agitada durante 4 horas à temperatura ambiente. A mistura foi então desativada com 5350 ml de água, extraída com extraído com duas porções de 1750 ml de cloreto de metileno. Os extratos de cloreto de metileno foram combinados e secos sobre sulfato de sódio anidro. Os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi duas vezes recristalizado a partir de acetonitrilo (640 mL) para dar 84,2 g (54,87%) como um sólido castanho, ponto de fusão de 212°C a 2150°C com 94,7% de pureza por HPLC.1HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 2.27(s, 3H, CH3), 2.64 (t, 4H, 2 CH2), 2.8 (s, 3H, CH3), 3.27 (t, 4H, 2 CH2), 3.67 (t, 4H, 2 CH2), 3.79 (s, 2H, 1CH2), 3.85 (t, 4H, 2 CH2), 7.20(s, 1H). 13CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor ppm) 11.7(1C), 34.4(1C), 45.7(2C), 48.1(2C), 52.5(2C), 54.9 (2C), 66.8(1C), 112.0(1C), 120.7(1C), 128.5(1C), 134.0 (1C), 141.3 (1C), 150.9 (1C), 154.6(1C). Massa: 491.1[M+2], 489.1[M] Exemplo 9 Preparação de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina (Composto-1).

[0046] Uma mistura de 44,0 g (0,0899 mol) de 4-[5- bromo-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina, 21,80 g (0,0986 mol, 1,10 meq) de éster de pinacol de ácido 2- aminopirimidino-5-borónico, 4,0 g (0,0056 mol, 0,06 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), 300 ml de tolueno, água (100 ml) e 33,30 g (0,3146 mol, 3,50 meq) de carbonato de sódio foi aquecida a 125-1300°C no tubo de vidro selado durante 5 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi purificado por meio de um processo de purificação ácido- base para dar 35,10 g (77,65%) como um sólido castanho claro com pureza HPLC 99,7%.1HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 2.36(s,3H,CH3),2.58 (t, 4H, 2-CH2), 2.89(s, 3H), 3.13(t, 4H, 2-CH2), 3.59 (t, 4H, 2-CH2), 3.79 (t, 4H,2-CH2), 3.83 (s, 2H,CH2), 5.24(s,2H,NH2), 7.70 (s,1H), 9.00 (s,2H). 13CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor ppm): 11.5(1C), 33.7(1C), 45.3 (2C), 47.9 (2C), 51.8 (2C), 53.9 (2C), 66.1(1C), 103.6 (1C), 119.6 (1C), 121.4 (1C), 129.1(1C), 140.7 (1C), 145.4 (1C), 149.5(1C), 154.4 (1C), 156.1(2C), 163.2(1C). Massa: 504.1[M+1]Exemplo 10: Preparação de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina (Composto-1. 2HC1).

[0047] A uma solução agitada de 15,0 g de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina em 75,0 ml de ácido clorídrico concentrado adicionou-se 600 ml de água. A mistura reacional foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente durante esse período sob a forma de um precipitado amarelo gradualmente esmagado. O sólido foi filtrado e lavado com ácido clorídrico 1 N, seco sob vácuo a 80-850°C para dar 15,10 g (88,0%) como um sólido amarelo com pureza HPLC 99,4% e teor de dicloridrato 99,13% por teoria. Exemplo 11: Preparação de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina (Composto-1. di-tosilato)

[0048] A uma solução agitada de 10,0 g (0,01985 mol) de 5- [3-metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina num cloreto de metileno (500 mL) e metanol (100 mL) foi adicionado um mono-hidrato de ácido p-toluenossulfônico (8,30 g, 0,04367 mol, 2,20 meq). Em seguida, os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar como um sólido amarelo. Em seguida, o sólido foi triturado com 300 ml de acetona, seco sob vácuo a 40-450°C para dar 15,10 g (89,97%) como um sólido amarelo com pureza HPLC 99,7% e teor de ditosilato foi de 100,5% p/p por teoria.Exemplo 12: Preparação de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina (Composto-1 dimesilato)

[0049] A uma solução agitada de 12,0 g (0,02382 mol) de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina num cloreto de metileno (600 mL) e metanol (120 mL) adicionou-se 9,40 g (0,0952 mol, 4,0 meq) de ácido metanossulfônico. A mistura reacional foi agitada durante 3 h. À temperatura ambiente durante esse tempo sob a forma de um precipitado amarelo gradualmente esmagado. O sólido foi filtrado e lixiviado com acetona (180 ml), seco sob vácuo a 50-550°C para dar 16,10 g (97,16%) de sólido amarelo com pureza HPLC 99,8% e teor de dimesilato 99,6% p/p por teoria.Exemplo 13: Preparação de 4- [5- (1H-indazol-4-il) -3- metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7 -il] morfolina (Composto-6)

[0050] Uma mistura de 200 mg (0,40 mmol) de 4-[5- bromo-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina, 200 mg (0,80 mmol, 2,0 meq) de 4-(4, 4, 5, 5-tetrametil-[1,3,2] dioxoborolan-2-il) -1H- indazol, 50,0 mg (0,07 mmol, 0,17 meq ) Bis (trifenilfosfina) paládio (II), etanol (4 ml), tolueno 4 ml), água (1 ml), 200 mg de carbonato de sódio foi aquecida a 115-1200°C num tubo de vidro selado durante 3 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna utilizando hexano e acetato de etilo para dar 120 mg (55,8%) como um sólido castanho claro.1 HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm):2.37(s,3H,CH3),2.59(t, 4H, 2-CH2), 2.90(s, 3H), 3.15(t, 4H, 2-CH2), 3.64(t, 4H, 2-CH2),3.84(t, 4H, 2- CH2),3.92(2H,CH2),7.45(s,1H),7.94(s,1H), 7.56(d,1H),7.58(d,1H),7.69(d,1H), 13.1(s,1H). Massa: 527.2[M+1] Exemplo 14: Preparação de [3- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] fenil] metanol (Composto-7)

[0051] Uma mistura de 200 mg (0,40 mmol) de 4- [5- bromo-3-metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina, 124 mg (0,8 mmol, 2,0 meq) de ácido 3- (hidroximetil) fenilborÔnico, 50,0 mg (0,142 mmol, 0,17 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), etanol (4 mL), tolueno 4 mL), água (1 ml) e 200 mg de carbonato de sódio foi aquecida a 115-1200°C no tubo de vidro selado durante 3 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi purificado por cromatografia em coluna utilizando hexano e acetato de etilo para dar 95 mg (45,2%) de um sólido amarelo.1 HNMR (400 MHz, DMSO) δ- Valor (ppm): 2.40(s,3H,CH3),2.59(t, 4H,2-CH2), 2.90(s, 3H,CH3), 3.14(t, 4H, 2-CH2),3.60(t, 4H, 2-CH2),3.82(t, 4H, 2- CH2),3.85(s,2H, CH2), 4.58(d,2H),5.24(t,1H,), 7.33(d,1H),7.41(t,1H), 7.76(s,1H),8.0(d,1H), 8.10(s,1H). 13 CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor ppm):11.7(1C), 33.9(1C), 45.4(2C), 48.2(2C), 51.9(2C), 54.0(1C), 63.0(1C), 66.2(2C), 105.7(1C), 120.6 (1C), 124.6(1C), 125.0(1C),126.6(1C), 128.4(1C), 129.5(1C), 139.2 (1C), 140.9(1C),142.7(1C),149.0(1C),149.6(1C),154.5(1C). Massa: 517.3[M+1]Exemplo 15: Preparação de 3-bromo-2- tiofenocarboxilato de metilo

[0052] Ácido metil ester 3-amino-2- tiofenocarboxílico(100 g, 0,6369 mol) foi suspenso em ácido brômico (220 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 min. Arrefeceu-se a mistura até 0-50°C e adicionou-se nitrito de sódio (46,0 g, 0,666 mol) em água (100 ml) gota a gota abaixo de 50°C. Agitou-se a mistura durante 1 hora e depois adicionou-se a um brometo de cobre (I) (96,0 g, 0,6692 mol) em ácido bromídrico (260 ml) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a 60-650C durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com 1200 ml de água enquanto se mantinha a 25-300°C por arrefecimento e extraída com duas porções de 600 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados duas vezes com porções de 600 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar 129,0 g (91,6%) como um sólido amarelo, ponto de fusão 47°C a 480°C, com 96% de pureza por HPLC.1 HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 3.90(s, O-CH3, 3H), 7.09 (d, 1H), 7.46 (d, 1H). 13CNMR (400 MHz, CDCfe) δ- Valor (ppm): 52.10(1C), 116.96(1C), 127.12(1C), 130.61 (1C), 133.63 (1C), 161.0 (1C). Massa: 222.8 [M+1].16: Preparação de ácido carboxílico 3- bromo-2-tiofeno

[0053] 3-bromo-2-tiofenocarboxilato de metil 128,0 g (0,5791 mol) foi dissolvido numa mistura de metanol (576 mL) e tetrahidrofurano (576 mL) e foi adicionado hidróxido de sódio aquoso IN (876 mL). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas e acidificou- se com ácido clorídrico IN e extraiu-se com duas porções de 740 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados com 740 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O produto obtido era um sólido esbranquiçado, ponto de fusão 1920C a 198, 50°C, com 98,1% de pureza por HPLC.1 HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 7.25-7.26 (d, 1H), 7.91-7.93 (d, 1H), 13.43 (s, OH, 1H). 13 CNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 116.02(1C), 128.35(1C), 133.19(2C), 161. 66 (1C). Massa: 207 [M].Exemplo 17: Preparação de ácido 3-cianometil-2- tiofenocarboxílico

[0054] Adicionou-se acetonitrilo de benzoila (73,8 g, 0,508 mol) a uma solução arrefecida de etóxido de sódio (preparada a partir de 19,5 g, 0,847 mol e etanol, 1125 ml). Adicionou-se ácido 3-bromo-2-tiofeno-2- carboxílico (75,0 g, 0,362 mol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Foram adicionados 4,5 g (0,0247 mol) de acetato de cobre (II) anidro e a mistura foi fervida sob refluxo durante 2 horas. Foram adicionados 4,5 g (0,0247 mol) de acetato de cobre (II) anidro e a mistura foi fervida sob refluxo durante 8 h. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e filtrou-se a massa. O etanol foi removido por destilação sob vácuo a uma temperatura de 600°C. A mistura reacional foi diluída com 750 ml de água enquanto se mantinha a 25-300°C por arrefecimento e a solução foi acidificada com ácido clorídrico e extraída com duas porções de 750 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados e extraídos com duas vezes com porções de 750 ml de solução de carbonato de sódio a 5%. Os extratos aquosos de carbonato de sódio foram combinados, a solução foi acidificada com ácido clorídrico e extraída com duas porções de 325 ml de acetato de etilo. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo, para dar um produto bruto e recristalização de um produto em bruto a partir de éter isopropílico para dar 34,8 g (56,65%) como um sólido amarelo, ponto de fusão 1020C a 1060C, com 97,1% de pureza por HPLC.1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ- Valor (ppm): 4.25 [s, CH2 (2H)], 7.24 (d, 1H), 7.88(d, 1H), 13.44[s, (alargamento), OH, 1H]. 13CNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ-Valor (ppm):17.72 (1C), 118.5 (1C), 129.5(1C), 130.6 (1C), 132.46(1C), 137.0 (1C), 162.9 (1C). Massa: 167.0 [M], 166.0 [M-1]Exemplo 18: Preparação de 5, 7-dibromotieno [2, 3-c] piridina

[0055] Fez-se reagir ácido 3- (cianometil) -2- tiofenocarboxílico (56,0 g, 0,335 mol) em tribrometo de fósforo (371 ml) e dimetilformamida (35 ml) a 120-1250°C durante 4 h. Arrefeceu-se a mistura reacional até à temperatura ambiente. Sob arrefecimento, a mistura reacional foi adicionada à água gelada (3920 ml) para dar um produto bruto sólido. O produto em bruto foi dissolvido em cloreto de metileno (560 ml), lavado com 560 ml de água e seco sobre sulfato de sódio anidro. O cloreto de metileno foi removido por destilação sob vácuo e o sólido foi triturado com hexano (400 mL) para dar 67,7 g (71,2%) sob a forma de um sólido castanho claro, ponto de fusão 1140C a 126,80C.1 HNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm): 7.42 (d, 1H), 7.80(d, 1H), 7.87(s, 1H) 13CNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 121.0(1C), 123.31(1C), 133.49(1C), 133.9 (1C), 134.9(1C), 138.4(1C), 147.8 (1C). Massa: 295.9 [M+2], 293.9 [M]Exemplo 19: Preparação de 4- (5-bromotieno [2,3-c] piridin-7-il) morfolina

[0056] Uma solução de 50 g (0,1706 mol) de 5,7- dibromotieno [2,3-c] piridina dissolvida em 230 ml de etanol e 230 g de morfolina foi aquecida num tubo selado a temperatura constante a 105-1 100°C durante 4h. O etanol e o excesso de morfolina foram removidos por destilação sob vácuo, o produto em bruto foi dissolvido em cloreto de metileno (1200 ml), lavado com quatro porções de 400 ml de água e seco sobre sulfato de sódio anidro. O cloreto de metileno foi removido por destilação sob vácuo para dar 45,7 g (89,5%) como um sólido castanho claro.1 HNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor (ppm): 3.62 (t, 4H, 2 CH2), 3.76 (t, 4H, 2 CH2), 7.43 (d, 1H), 7.37(s, 1H) 8.05 (d, 1H). 13CNMR (400 MHz, CDCl3) δ-Valor (ppm): 47.50 (2C), 65.90 (2C), 113.0 (1C), 120.89 (1C), 123.19 (1C), 132.80 (1C), 133.0 (1C), 149.7(1C), 154.2(1C).Massa: 299.15 [M], 297.2 [M-2]Exemplo 20: Preparação de 5-bromo-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído

[0057] A uma solução agitada de 42 g (0,1404 mol) de 4- (5-bromotieno [2,3-c] piridin-7-il) morfolina num tetrahidrofurano seco (750 ml) a -60 0 a -700C adicionou-se 105 ml (0,168 mol) de n-butil lítio 1,6 M em hexano. Após agitação durante 1 hora e meia. Foram adicionados 20,5 g (0,28 mol) de dimetil formamida seca. A mistura reacional foi agitada durante 1 h. A - 60°C a -700°C e depois aqueceu-se lentamente até à temperatura ambiente. Após mais 2 horas à temperatura ambiente, a mistura reacional foi vertida em gelo/água (1000 ml) e extraída com duas porções de 420 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar 38,40 g (83,7%) como um sólido amarelo, ponto de fusão 1400C a 153,5°C, com 95,0% de pureza por HPLC.1HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 3.75 (t, 4H, 2 CH2), 3.86 (t, 4H, 2 CH2), 7.43 (s, 1H), 7.88(s, 1H), 10.13 (s, 1H). 13CNMR (400 MHz, CDCfe) δ- Valor (ppm): 48.0 (2C), 66.6 (2C), 114.3 (1C), 123.7(1C), 131.54(1C), 134.6(1C), 146.2(1C), 148.2(1C), 155.0(1C), 184.3 (1C). Massa: 328.0 [M+1]Exemplo 21: Preparação de 4- [5-bromo-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina

[0058] A uma solução agitada de 50,0 g (0,1529 mol) de 5-bromo-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído, 40,0 g (0,2439 mol, 1,60 meq) de 1-metanossulfonilpiperazina e 325 g de ortoformato de trimetilo em 1500 ml de 1,2-dicloroetano durante 4 horas. Foram adicionados 325 g de ortoformato de trimetilo e a mistura reacional foi agitada durante 16 horas. Temperatura ambiente. A isto foram adicionados 100 g (0,4716 mol, 3 meq) de triacetoxiboro-hidreto de sódio e 1000 ml de 1, 2-dicloroetano. A mistura reacional foi agitada durante 4 h. Temperatura ambiente. A mistura foi então desactivada com 2500 ml de água, extraída com duas porções de 2000 ml de cloreto de metileno. Os extratos de cloreto de metileno foram combinados e secos sobre sulfato de sódio anidro. Os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi duas vezes recristalizado a partir de acetonitrilo (300 mL) para dar 45,1 g (62,1%) como um sólido castanho, ponto de fusão 2180C a 2240C, com 95,4% de pureza por HPLC.1 HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm): 2.64 (t, 4H, 2 CH2), 2.79 (s, 3H, CH3), 3.27 (t, 4H, 2 CH2), 3.68 (t, 4H, 2 CH2), 3.83 (s, 2H, 1CH2), 3.85 (t, 4H, 2 CH2), 7.0 (s, 1H), 7.2(s, 1H) , Massa: 477.01[M+2]Exemplo 22: Preparação de 5-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina (composto -2)

[0059] Uma mistura 40,0 g (0,08421 mol) de 4- [5-bromo-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina, 20,4 g (0,0923 Mol, 1,10 meq) de éster de pinacol de ácido 2- aminopirimidina-5-borônico, 3,54 g (0,0056 mol, 0,06 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), 300 mL de etanol, 300 mL de tolueno, Ml), 31,20 g de carbonato de sódio (0,2943 mol, 3,50 meq) foi aquecida a 125-1300°C no tubo de vidro selado durante 5 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi purificado por um método de purificação ácido-base para dar 33,150 g (80,15%) como um sólido castanho claro com pureza por HPLC de 99,6%.Exemplo 23: Preparação de 4- [5- (1H-indazol-4-il) -2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina (Composto 3)

[0060] Uma mistura de 1,0 g (2,1 mmol) de 4- [5- bromo-2- [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina, 1,02 g 4,2 mmol, 2,0 meq) de 4- (4, 4, 5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxoborolan-2-il) - 1H-indazol, 200,0 mg (0,28 mmol, 0,13 meq) bis (trifenilfosfina ), Dicloreto de paládio (II), etanol (20 ml), tolueno 40 ml), água (4 ml), 800 mg de carbonato de sódio foi aquecida a 115-1200°C no tubo de vidro selado durante 3 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido bruto foi purificado por cromatografia em coluna utilizando hexano e acetato de etilo para dar 0,8 g (74,7%) como um sólido castanho claro.1 HNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor (ppm):2.59(t, 4H, 2-CH2), 2.90(s, 3H), 3.15(t, 4H, 2-CH2), 3.64(t, 4H, 2-CH2),3.84(t, 4H, 2-CH2),3.92(2H,CH2),7.45(s,1H),7.94(s,1H),7.56(d,1H),7.58(d,1H),7.69(d,1H),7.4 3(d,1H),13.1(s,1H). Massa: 514.0[M+2], 513.0[M+1]Exemplo 24: Preparação de [3-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] fenil] metanol (composto 4 )

[0061] Uma mistura de 0,5 g (1,05 mmol) de 4- [5- bromo-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina, 0,32 g 2,10 mmol, 2,0 meq) de ácido 3- (hidroximetil) fenilborônico, 100,0 mg (0,142 mmol, 0,13 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), etanol (20 mL), tolueno 20 mL), água (2 mL) , 400 mg de carbonato de sódio foram aquecidos a 115-1200°C no tubo de vidro selado durante 3 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi purificado por cromatografia em coluna utilizando hexano e acetato de etilo para dar 450 mg (86,5%) como um sólido amarelo.1HNMR (400 MHz, DMSO) δ- Valor (ppm): 2.57(t, 4H,2-CH2), 2.89(s, 3H,CH3), 3.14(t, 4H, 2-CH2),3.60(t, 4H, 2-CH2),3.82(t, 4H, 2-CH2),3.89(s,2H, CH2), 4.47(d,1H),4.57(d,2H), 7.29(t,2H),7.42(t,2H), 7.99(s,1H),8.0(s,1H). 13CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor ppm):33.8 (1C), 45.4(2C), 48.3(2C), 51.8(2C), 56.2(1C), 59.8(1C), 63.1(1C), 66.2(2C), 107.1(1C), 121.4 (1C), 122.8(1C), 124.8(1C), 126.6(1C), 127.2(1C), 132.5(1C), 139.0 (1C), 141.2(1C),142.8(1C),147.7(1C),154.4(1C). Massa: 504.1[M+2], 503.1[M+1]Exemplo 25: Preparação de 3-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] anilina (composto 5)

[0062] Uma mistura de 1,0 g (2,1 mmol) de 4- [5- bromo-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina, 0,65 g 2,2 mmol, 2,0 meq) de monohidrato de ácido 3-aminofenilborónico, 200,0 mg (0,28 mmol, 0,13 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), etanol (20 mL), tolueno (40 mL), água (4 mL) Mg de carbonato de sódio foi aquecida a 125-1300°C no tubo de vidro selado durante 5 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto sólido em bruto foi purificado por recristalização utilizando hexano e acetato de etilo para dar 0,78 g (76,4%) como um sólido castanho claro.1 HNMR (400 MHz, DMSO) δ- Valor (ppm): 2.57(t, 4H,2-CH2), 2.89(s, 3H,CH3), 3.14(t, 4H, 2-CH2),3.61(t, 4H, 2-CH2),3.80(t, 4H, 2-CH2),3.87(s,2H, CH2), 5.13(s,2H,NH2),6.57(d, 1H),7.0(t,1H),7.21(d,1H), 7.38(s,1H),7.68(1H). 13 CNMR (400 MHz, CDCI3) δ- Valor ppm):33.8 (1C), 45.4(2C), 48.1(2C), 51.8(2C), 56.3(1C),66.2(2C),106.9(1C), 112.1(1C),114.2(1C),114.3(1C),121.1(1C),122.9(1C),129.1(1C),139.9(1C),147. 5(1C),148.6(1C),148.7(1C),149.7(1C),154.3(1C). Massa: 488.3[M+1] Exemplo 26: Preparação de 3-[3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] anilina (composto 8)

[0063] Uma mistura de 1,0 g (2,1 mmol) de 4- [5- bromo-3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina, 0,92 g (4,2 mmol, 2,0 meq) de éster de pinacol de ácido 3-aminofenil borônico, 200,0 mg (0,28 mmol, 0,13 meq) de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (II), 20 mL de etanol, 40 mL de tolueno, Água (4 ml), 800 mg de carbonato de sódio foi aquecida a 125-1300°C no tubo de vidro selado durante 5 h. A mistura reacional foi arrefecida e os solventes foram removidos por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. Purificou-se o produto sólido em bruto utilizando hexano e acetato de etilo para se obter 0,82 g (80%) sob a forma de um sólido castanho claro.1 HNMR (400 MHz, DMSO) δ- Valor (ppm): 2.57(t, 4H,2-CH2), 2.89(s, 3H,CH3), 3.14(t, 4H, 2-CH2),3.60(t, 4H, 2-CH2),3.79(t, 4H, 2-CH2),3.88(s,2H, CH2), 6.87(s, 2H,NH2),7.32(s,1H),7.73(s,1H), 8.93(s,2H).13 CNMR (400 MHz, CDCl3) δ- Valor ppm):33.8 (1C), 45.4(2C), 48.0(2C), 51.8(2C), 56.2(1C), 66.2(2C), 105.1(1C), 120.6(1C), 121.5(1C), 121.5(1C), 122.7(1C), 145.5(1C), 147.8(1C), 148.6(1C), 154.5(1C), 156.2(1C), 163.2(1C).Massa: 491.3[M+2], 490.3[M+1] Exemplo 27: Preparação de 3-metiltiofeno-2-carboxilato de metil

[0064] A uma solução agitada de 100 g (0,7023 mol) de ácido 3-metil-2-tiofeno carboxílico em 1000 ml de acetona adicionou-se 122,0 g (0,8827 mol) de carbonato de potássio em 500 ml de acetona e adicionou-se gota a gota 89,0 g (0,7056 mol) de sulfato de dimetil, enquanto se mantém a temperatura da mistura reacional a 25-300°C. Quando a adição estava completa, a solução foi agitada a 25-300°C durante 4 h. A acetona foi removida por destilação sob vácuo e a mistura reacional foi diluída com 3000 ml de água enquanto se mantinha a 25-300°C por arrefecimento e extraída com três porções de 1000 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados duas vezes com porções de 1000 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar 105,2 g (95,6%) como uma massa oleosa amarelo claro com 99,8% de pureza por HPLC.Exemplo 28: Preparação de 3- (bromometil) tiofeno-2- carboxilato de metilo

[0065] A uma solução agitada de 200 g (1,2805 mol) de 3-metiltiofeno-2-carboxilato de metilo em 1220 ml de tetracloreto de carbono foram adicionados 228,0 g (1,2805 mol) de N-bromossuccinimida e foram adicionados 12,40 g (0,0512 mol) de peróxido de benzoíla Enquanto se mantinha a temperatura da mistura reacional a 25-300°C. Quando a adição estava completa, a mistura reacional foi aquecida a 75-800°C e foi agitada durante 4 h. A mistura reacional foi filtrada e lavada com 100 ml de tetracloreto de carbono. A massa do filtrado foi misturada com duas porções de 1660 ml de carbonato de sódio a 5% e duas vezes com porções de 1660 ml de água, e seca sobre sulfato de sódio anidro. O tetracloreto de carbono foi removido por destilação sob vácuo a 650°C para dar o produto em bruto. Em seguida, o produto em bruto foi triturado com hexano (540 ml) para dar 190,0 g (63,0%) como um sólido com 97,4% de pureza por HPLC.Exemplo 29: Preparação de 3-cianometil-2-tiofeno-2- carboxilato

[0066] A uma solução agitada de 51,50 g (1,05 mol) de cianeto de sódio em 220 ml de água adicionou-se 185,0 g (0,7868 mol) de 3- (bromometil) tiofeno-2-carboxilato e 500 ml de metanol. Quando a adição estava completa, a mistura reacional foi aquecida a 50-55 0 C e foi agitada durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com 4800 ml de água enquanto se mantinha a 25-300°C por arrefecimento e extraída com duas porções de 1800 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados duas vezes com porções de 1800 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar o produto em bruto. Em seguida, o produto em bruto foi triturado com hexano (680 ml) para dar 119,0 g (83,0%) como um sólido castanho claro com 88,8% de pureza por HPLC.Exemplo 30: Preparação de ácido 3-cianometil-2-tiofenocarboxílico

[0067] Dissolveu-se 115,0 g (0,6352 mol) de 3-cianometil-2-tiof eno-2-carboxilato de terc-butil numa mistura de metanol ml) e tetrahidrofurano (575 ml) e adicionou-se hidróxido de sódio aquoso 1 N (900 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 h. E diluiu-se a mistura reacional com 3450 ml de água e acidificou-se com ácido clorídrico IN e extraiu-se com duas porções de 1725 ml de acetato de etilo. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados com 3450 ml de água e secos sobre sulfato de sódio anidro. O acetato de etilo foi removido por destilação sob vácuo a 600°C para dar o produto em bruto. Em seguida, o produto em bruto foi triturado com hexano (1150 ml) para dar 95,2 g (89,7%) como um sólido esbranquiçado com 89,4% de pureza por HPLC.Exemplo 31: Preparação de 5-bromo-3-metil-7- morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído:

[0068] Fez-se reagir uma mistura de 13 g (38 mmol) de 5-bromo-3-metil-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído com 11,2 mL (95 mmol, 2,3 meq) de ácido nítrico a 70% em ácido acético (200 mL) a 5-10°C num balão de fundo redondo de 4 tubuladuras durante 1h. A mistura reacional foi desativada em gelo triturado e filtrada para dar 12,5 g de 5-bromo-3-metil-7- morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído como um sólido de cor verde amarelada.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.58 (s, 3H, CH3); 3.89 (m, 8H, 4 X CH2);10.34 (s, 1H, CHO). Massa: 388.1 [M+2]Exemplo 32: Preparação de 4- [5-bromo-3-metil-2-[(4- metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina

[0069] Fez-se reagir 500 mg (1,3 mmol) de 5-bromo-3- metil-7-morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeío com 366 mg (2,2 mmol, 1,6 meq) de 1-metilsulfonilpiperazina na presença de 5,92 g (55,8 mmol, 40 meq) de ortoformato de trimetilo (TMOF) seguido de redução utilizando 1,37 g (6,5 mmol, 5,0 meq) de triacetoxiboro-hidreto de sódio (STAB) em cloreto de metileno à temperatura ambiente. Extinguiu-se a mistura reacional em água e extraiu-se com cloreto de metileno. O solvente foi removido por destilação e o produto em bruto resultante foi purificado por cromatografia em coluna utilizando acetato de etilo e hexano para dar 600 mg de 4- [5-bromo-3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil]-4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina sob a forma de um sólido de cor amarela.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.07 (s, 3H, CH3); 2.60-2.62 (m, 4H, 2 X CH2); 2.90 (s, 3H, CH3); 3.12-3.13 (m, 4H, 2 X CH2), 3.76 (s, 8H, 4 X CH2); 3.89 (s, 2H, CH2).Exemplo 33: Preparação de 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-4-nitro- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina-2-amina (composto 9)

[0070] Uma mistura de 750 mg (14,4 mmol) de 4-[5- bromo-3-metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -4-nitro- tieno [2,3-c] piridin-7 -il] morfolina, 640 mg (28,9 mmol, 2,0 meq) de 5- (4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il) pirimidin-2-amina, tolueno (30 mL), etanol (15 ml), aq. Carbonato de sódio (3 ml) e 132 mg (0,13 meq) de PdCl2 (TPP) 2 foi aquecida a 115-120°C num tubo de vidro selado durante 2,5 h. A mistura reacional foi arrefecida e o solvente foi removido por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. Purificou-se o produto bruto por cromatografia em coluna utilizando uma mistura de acetato de etilo, hexano e metanol para se obter 500 mg de 5- [3-metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino- -nitro- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina como um pó de cor amarela.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.11 (s, 3H, CH3); 2.60-2.62 (m, 4H, 2 X CH2); 2.90 (s, 3H, CH3); 3.13-3.14 (m, 4H, 2 X CH2), 3.74-3.78 (s, 8H, 4 X CH2); 3.90 (s, 2H, CH2); 8.41 (s, 2H, Ar-H).Exemplo 34: Preparação de 5- (2-amino-pirimidin-5-il) - 3-metil-2 - [(4-metil sulfonil piperazin-1-il) metil] -7- morfolino- tieno [2,3-c ] piridin-4-amina (composto 10)

[0071] Uma mistura de 50 mg (0,09 mmol) de 5- [3- metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-4-nitro- tieno [2,3-c] piridin-5 -il] pirimidin-2-amina foi reduzida utilizando 120 mg (0,9 mmol, 10,0 meq) de complexo zinco-cobre e hidrato de hidrazina a 80% (2,4 mL) em metanol (5 mL) a 50-55°C sob atmosfera de azoto para 7h. A mistura reacional foi arrefecida e o solvente foi removido por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto foi extraído com clorofórmio (200 mL) e lavado com água. A solução foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O solvente foi removido por destilação utilizando vácuo para dar 20 mg de 5- (2- amino-pirimidin-5-il) -3-metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino- tieno [2,3-c] piridin-4-amina sob a forma de um sólido de cor amarela pálida. A pureza por HPLC é > 95%.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.64 (s, 3H, CH3); 2.66-2.68 (m, 4H, 2 X CH2,); 2.81 (s, 3H, CH3); 3.28-3.30 (m, 4H, 2 X CH2), 3.36-3.38 (m, 4H, 2 X CH2); 3.78 (s, 2H, CH2); 3.88-3.90 (m, 4H, 2 X CH2); 4.00 (bs, 2H, NH2, D2O permutável); 5.18 (s, 2H, NH2, D2O permutável); 8.69 (s, 2H, Ar-H). Massa: 519.6 [M+1]Exemplo 35: Preparação de 5-[3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina-2,4-diamina (Composto 11)

[0072] Uma mistura de 55 mg (0,106 mmol) de 4- [5- bromo-3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] -4-nitro- tieno [2,3-c] piridin-7 -il] morfolina foi condensada com 5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il) pirimidina-2,4-diamina em bruto (preparada por reação de 0,5 g (2 , 4-diamino-5-bromopirimidina e 1,34 g de bis (pinacalato) diboro na presença de PdCl2 (TPP) 2 e acetato de potássio em 1,4-dioxano), tolueno (4 ml), etanol (4 ml), aq. Carbonato de sódio (0,4 ml) e 10 mg de PdCl2 (TPP) 2 foi aquecida a 115-120°C num tubo de vidro selado durante 2,5 horas. A mistura reacional foi arrefecida e o solvente foi removido por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna utilizando uma mistura de acetato de etilo, hexano e metanol para dar 10 mg de 5- [3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] - 7- morfolino- 4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina-2,4-diamina como um sólido de cor amarela.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.18 (s, 3H, CH3); 2.67-2.69 (m, 4H, 2 X CH2); 2.82 (s, 3H, CH3); 3.29-3.30 (m, 4H, 2 X CH2); 3.72-3.74 (m, 4H, 2 X CH2); 3.82 (s, 2H, CH2); 3.88-3.89 (m, 4H, 2 X CH2); 5.12 (bs, 2H, NH2, D2O permutável); 5.50 (bs, 2H, NH2, D2O permutável); 7.94 (s, 1H, Ar-H). Massa: 564.06 [M+1]; DSC: 249-252° C.Exemplo 36: Preparação de 5- [4-amino-3-metil-2- [(4- metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina-2,4-diamina (composto 12)

[0073] Uma mistura de 110 mg (0,19 mmol) de 5- [3- metil-2 - [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7-morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-5 -il] pirimidina-2,4-diamina foi reduzida utilizando 300 mg (1,95 mmol, 10,0 meq) de complexo zinco-cobre e hidrato de hidrazina a 80% (6,0 mL) em metanol (20 mL) a 50-55°C sob azoto Atmosfera para 7h. A mistura reacional foi arrefecida e o solvente foi removido por destilação sob vácuo para dar o produto em bruto. O produto foi extraído com clorofórmio (200 mL) e lavado com água. A solução foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O solvente foi removido por destilação utilizando vácuo seguido de purificação em coluna para dar 57 mg de 5- [4-amino-3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino- tieno [2,3 -c] piridin-5-il] pirimidina-2,4-diamina sob a forma de um sólido de cor amarela pálida. A pureza por HPLC é > 95%.1HNMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm): 2.63 (s, 3H, CH3); 2.67-2.68 (m, 4H, 2 X CH2,); 2.81 (s, 3H, CH3); 3.30-3.32 (m, 8H, 4 X CH2); 3.78 (s, 2H, CH2); 3.893.90 (m, 4H, 2 X CH2); 4.03 (s, 2H, NH2, D2O permutável); 4.84 (s, 2H, NH2, D2O permutável); 5.55 (s, 2H, NH2, D2O permutável); 8.17 (s, 1H, Ar-H). Massa: 534.2 [M+1]

Testes biológicos:

[0074] A: Estudos in vitro: Os Compostos 1 e 2 são dissolvidos em meio de cultura celular e DMSO a uma concentração de 10 mM para estudos in vitro. A solução-mãe é ainda diluída com o mesmo meio de cultura celular e utilizada em concentrações de 0,01 μm a 10 μm. Para o estudo, os resultados dos quais são revelados aqui as linhas de células de tumor sólido pulmão, mama, pancreático, próstata e glioma.

[0075] A proliferação celular pelo ensaio de MTT foi feita como se segue: foram semeadas 1000 a 10.000 células por poço em placa de 96 poços e foram adicionadas em triplicatas diferentes concentrações de composto 1 e 2 variando de 10μm a 0,1μm. Após incubar as células com o composto 1 e 2 durante o período de tempo requerido de 24 a 72 horas, adicionou-se 15 μL de MTF a 5 mg/mL e incubou-se durante mais 4 h a 37°C e 5% de CO2. Após 4 h, os cristais de formazano foram dissolvidos em tampão de solubilização durante a noite a 37°C. A absorvância foi medida num leitor Elisa a um comprimento de onda duplo de 570-630 nm. Por ensaio de MTT os valores de IC50 do composto 1 e 2 são calculados. Os valores de IC50 obtidos por ensaio de MTT foram tabulados na tabela mostrada na Figura 1.

[0076] B: Estudos in vivo:a. MTD (estudo de dose máxima tolerada em ratinhos)

[0077] O método foi realizado de acordo com o procedimento da OCDE. O estudo foi realizado utilizando murganhos suíços albinos 5 (2 machos + 3 fêmeas) pesando entre 18-30 g. Todos os animais foram jejuados durante 3 horas antes da administração oral do fármaco. Após a preparação da amostra administrar imediatamente ao seu corpo todos os animais de acordo com o peso. Após administração do fármaco todos os animais foram observados durante % h, 1h, 2h, 4h e a mortalidade foi observada durante 14 dias. Ao fim de 14 dias todos os animais sobreviventes foram autopsiados e o estômago foi cortado aberto e observado para a absorção do fármaco através do GIT. O resultado é dado na Figura 1. - COMPOSTO 2: MTD> 2000 mg.kg, p.o (dose única observação de 14 dias) - COMPOSTO 1: MTD = 500 mg/kg, p.o (observação de dose única de 14 dias) b. Antagonismo do tumor induzido por MIAPaca - 2 em ratinhos pelados:

[0078] Este estudo foi realizado com 20 ratos machos nus. Pesagem de ratinhos pelados foi tomado inicialmente antes da inoculação da linha celular e transformados em quatro grupos. Grupo I: Controle positivo (5 Machos) Grupo II: COMPOSTO 2 (5 Machos) (200 mg/kg, p.o) Grupo III: COMPOSTO 1 (5 Machos) (50 mg/kg, p.o) Grupo IV: Padrão (5 Machos) (cloridrato de erlotiniba - 50 mg/kg, p.o e cloridrato de gemcitabina - 120 mg/kg, i.p.)

[0079] A linha celular foi inoculada a ratinhos nus sub cutaneamente ao flanco do membro traseiro direito a uma força de 1 x IO7 células/0,2 ml. Os animais foram observados para o aparecimento de tumor diariamente. O volume tumoral foi medido utilizando a fórmula % l X w2 (l = comprimento do tumor e w = largura do tumor). Quando o volume médio do tumor foi registado acima de 400 mm3, iniciou-se o tratamento com os fármacos acima. Os fármacos acima foram administrados oralmente diariamente durante 30 dias, exceto que o cloridrato de gemcitabina foi administrado no 1° e 3° dia de cada semana. O peso dos ratinhos nus foi tomado diariamente antes da dosagem e a medição do tumor foi feita em dias alternativos usando o calibre vernier digital. Os animais sobreviventes foram sacrificados após a administração estar completa durante 30 dias e foram recolhidos órgãos (tumor com pele e pâncreas).

[0080] Os murganhos mortos durante o programa experimental, o tumor com pele e pâncreas foram recolhidos e o tumor com pele foi armazenado em formalina tamponada a 10% e o pâncreas foi armazenado na solução de Bouin. Todos os órgãos após a coleta foram enviados para histopatologia. Os resultados observados são explicados abaixo.

[0081] Controle: Observou-se que a área média do tumor era de 33,13mm2. Dois dos 5 (40%) tumores não mostraram qualquer invasão ao tecido circundante enquanto um número igual (40%) apresentou invasão vascular. Um tumor mostrou se espalhar para a derme.

[0082] COMPOSTO 2 (200 mg/kg, p.o): A área média do tumor foi de 10,90 mm2. Três dos 5 (60%) tumores foram localizados e nenhuma invasão tumoral foi observada, enquanto que restante (40%) apresentou invasão vascular.

[0083] COMPOSTO 1 (50 mg/kg, p.o): A área média do tumor foi de 8,60 mm2 e apenas 1/5 (20%) apresentaram invasão no músculo subjacente, enquanto 80% restantes não demonstraram muita atividade.

[0084] Os resultados são mostrados na figura 2.

[0085] Padrão [Erlotiniba (50 mg/kg, p.o) + Gemcitabina (120 mg/kg, i.p)]: A área tumoral média foi de 11,10 mm2. 1 amostra não tem presença tumoral enquanto 60% do tumor não apresentou invasão e apenas 1 (20%) apresentaram invasão vascular. c. Antagonismo do tumor induzido por NCI-H292 em ratinhos nus:

[0086] O estudo foi realizado com 15 ratinhos nus (8 machos + 7 fêmeas). A pesagem de ratinhos nus foi inicialmente tomada antes da inoculação da linha celular e transformada em grupos. Agrupamento da seguinte forma: d. upo - I: Controle positivo (4 machos + 1 fêmea) Grupo II: COMPOSTO 2 (2 machos + 3 fêmeas) (200 mg/kg, p.o) (ilustrado na figura 4) Grupo III: COMPOSTO 1 (2 machos + 3 fêmeas) (50 mg/kg, p.o) (ilustrado na figura 3)

[0087] A linha celular foi inoculada a ratos Nude subcutaneamente ao flanco do membro traseiro direito a uma força de 6,25 x IO5 células/0,2 ml. Os animais foram observados para o aparecimento de tumor diariamente. O volume tumoral foi medido utilizando a fórmula % l X w2 (l = comprimento do tumor e w = largura do tumor). Quando o volume tumoral médio foi registado acima de 400 mm3, o tratamento com os fármacos acima será iniciado. Os fármacos acima foram administrados oralmente diariamente durante 40 dias. O peso dos ratinhos nus foi tomado diariamente antes da dosagem e a medição do tumor foi feita em dias alternativos usando o calibre Vernier digital. Os animais sobreviventes foram sacrificados após a administração estar completa durante 40 dias e foram recolhidos órgãos (tumor com pele e fígado). Ratinhos mortos durante o programa experimental, o tumor com pele e fígado foram coletados e armazenados em formalina tamponada a 10%. Todos os órgãos após a coleta foram enviados para histopatologia.

[0088] Observações histopatológicas:

[0089] O relatório histopatológico sugere que, em controlo positivo, o tumor subcutâneo com invasão muscular estava presente em todos os animais (5 animais).

[0090] O Composto 2 ao nível de dose de 200 mg/kg durante 7 dias de tratamento mostrou a depuração do tumor em todos os animais (5/5).

[0091] O Composto 1 na dose de 50 mg/kg durante 15 dias mostrou a depuração do tumor em 80% de animais (4/5). Assim, sugerindo a atividade antitumoral contra o NCI-H292 (resistente ao Erlotiniba câncer de pulmão).

[0092] Vantagens: a. Novos compostos de 7- (morfolinil) -2- (N- piperazinil) -metil tieno [2,3-c] piridinas de fórmula geral I que são úteis no tratamento de doenças cancerosas em espécies de sangue quente. b. O processo resulta no fornecimento de novos intermediários. c. O processo também resulta na preparação de derivados de tieno [2,3-c] piridina de grau puro de fórmula geral I conveniente para qualquer escala de operação

Claims

1. Composto caracterizado por ser 7-(morfolinil) -2- (N- piperazinil) metiltieno [2,3-c] piridina de fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma,

em que: R1 é -S(O)2R5, R2 e R3 são cada um independentemente -H, -halogênio, - amino, -ciano, nitro, alquil -C1-C6, ou cicloalquil -C3-C6, e R4 é fenil opcionalmente substituído com hidroxil hidroximetil ou amino, ou heteroaril substituído opcionalmente com amino, o heteroaril contendo 2 N átomos; e R5 é C1-C6 -alquil,

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser: i. 5-[3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin- 2-amina; ii. 5-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina; iii. 4- [5-(1H-indazol-4-il) -2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1- il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-il] morfolina; iv. [3-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] fenil] metanol; v. 3-[2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino- tieno [2,3-c] piridin-5-il] anilina; vi. 4-[5-(1H-indazol-4-il)-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7-ilo ] morfolina; vii. [3- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] fenil] metanol; viii. 3- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] anilina; ix. 5-[3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino-4-nitro-tieno[2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2-amina; x. 5-(2-amino-pirimidin-5-il)-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino- tieno [2,3-c] piridin- 4-amina ; xi. 5- [3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7- morfolino-4-nitro- tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidin-2,4-diamina; ou xii. 5- [4-amino-3-metil-2 [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil]-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina-2,4-diamina, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser 5- [3-metil-2 - [(4-metilsulfonilpiperazin-1-il) metil] -7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5 -il] pirimidin-2-amina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser 5- [2 - [(4-metilsulfonil piperazin-1-il) metil] -7- morfolino-tieno [2,3-c] piridin-5-il] pirimidina -2-amina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto, caracterizado por ser um composto de Fórmula II,

em que R1, R2 e R3 são como definidos na reivindicação 1 e X é um halogênio.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por ser: i. 4-[5-bromo-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] -4-nitro-tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina; ii. 4- [5-bromo-2- [(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina; ou iii. 4- [5-bromo-3-metil-2-[(4-metil sulfonilpiperazin-1-il) metil] tieno [2,3-c] piridin-7- il] morfolina.

7. Composto de Fórmula III:

caracterizado pelo fato de que: R2 e R3 são cada um independentemente -H, halogênio, amino, ciano, nitro, alquil C1-C6, ou cicloalquil C3-C6, e X é um halogênio.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 5 caracterizado por ser: i. 5-bromo-3-metil-7-morfolino-4-nitro-tieno [2,3-c] piridina-2-carbaldeído; ii. 5-bromo-3-metil-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina-2- carbaldeído; ou iii. 5-bromo-7-morfolino-tieno [2,3-c] piridina-2- carbaldeído.

9. Composição farmacêutica caracterizada por compreender: (A) uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto conforme definido na reivindicação 1 ou 2 ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e (B) um carreador, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.