BE1025316B1 - Microbieel consortium voor het onderdrukken van niet-gras micro-organismen op een oppervlak - Google Patents

Abstract

De onderhavige uitvinding biedt een microbieel consortium dat bestaat uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die algemeen erkend worden als veilig (GRAS) en die gekozen zijn uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus, Caldiarchaeum; en één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die gekozen zijn uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus.

Description

MICROBIEEL CONSORTIUM VOOR HET ONDERDRUKKEN VAN NIET-GRAS MICRO-ORGANISMEN OP EEN OPPERVLAK

TECHNISCH TOEPASSINGSGEBIED

De uitvinding betreft een nieuw microbieel consortium. Het microbieel consortium bestaat uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen met de status GRAS (Generally Recognized As Safe, oftewel: algemeen erkend als veilig) en één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen.

ACHTERGROND

Op oppervlakken kunnen gemakkelijk organische residuen achterblijven die een geschikte omgeving kunnen vormen voor de groei van micro-organismen. Gewoonlijk, maar niet altijd, zijn de micro-organismen niet schadelijk voor de gezondheid van de mens. De aanwezigheid van dergelijke micro-organismen maakt het moeiiijker voor andere micro-organismen, waaronder meer schadelijke microorganismen, om het oppervlak te bevolken. Wanneer dergelijke oppervlakken echter worden behandeld, kan de populatie van de micro-organismen op het oppervlak worden verlaagd. Dit biedt andere micro-organismen een kans om op dergelijke behandelde oppervlakkers te groeiers.

Als een hoge mate van hygiëne gewenst is, zoals in keukens, toiletten, badkamers en op oppervlakken waarmee kleine kinderen in aanraking kunnen komen, kan het oppervlak worden behandeld met samenstellingen die een antibacterieel middel bevatters. De werkzaamheid van dergelijke antibacteriële middelen vermindert echter in de loop van de tijd. Derhalve blijft er behoefte aan een aanpak die resulteert in verminderde mogelijkheden voor schadelijke micro-organismen om te groeien en het behandelde oppervlak te bevolken.

Micro-organismen zijn alom aanwezig in onze dagelijkse omgeving. De meeste van deze micro-organismen zijn niet schadelijk voor hogere organissmen en kunnen zelfs gunstig zijn voor de gezondheid van hogere organismen, zoals die van de mens. Sommige micro-organismen zijn echter pathogeen, en infectie met dergelijke pathogenen kan schadelijk zijn voor de gezondheid. Het is derhalve belangrijk om het risico op dergeiijke infecties te minimaliseren door de aanwezigheid van deze pathogenen zoveel mogelijk te beperken.

Hoewel een goed reinigingsprotocoi - zoals vaak wordt toegepast in ziekenhuizen resulteert in een verminderde aanwezigheid van pathogenen en een verlaging van

BE2017/5431 het aantal infecties, blijft een groot deel van de pathogenen onaangetast. Meer in het bijzonder is het bekend dat op elk oppervlak een biofilm aanwezig is. Biofilms zijn accumulaties van micro-organismen die bijeen worden gehouden door een zeer persistente matrix van organische verbindingen, vooral eiwitten en polysacchariden.

Dergelijke biofilms vormen een ideale omgeving voor de groei van ongewenste microorganismen, waarbij ze de micro-organismen afschermen van en beschermen tegen de buitenwereld. Het gevolg hiervan is dat het reinigen en ontsmetten van oppervlakken niet resulteert in de verwijdering of depletie van micro-organismen die aanwezig zijn in biofilms. Bovendien is het reinigen en ontsmetten van oppervlakken 10 slechts lijdelijk van aard omdat micro-organismen, en dus ook pathogenen, zonder belemmering opnieuw kunnen verschijnen op ontsmette en/of gereinigde oppervlakken.

Hoewel chemische benaderingen en methoden voorde ontsmetting van oppervlakken al bekend zijn in de techniek, omvatten deze benaderingen vaak het gebruik van 15 schadelijke gechloreerde verbindingen, de afgifte van onaangename geuren, verkleuring van vezels en oppervlakken, beschadiging van vloerafwerkingen en mogelijke interactie van verbindingen met andere chemicaliën.

Bovendien kunnen dergelijke chemische benaderingen de biofilms die aanwezig zijn op oppervlakken lijdelijk aantasten en de betreffende oppervlakken tijdelijk 20 ontsmetten, maar bieden zij geen langdurige oplossing om de levensvatbaarheid en aanwezigheid van pathogenen te verminderen en zodoende het risico op infecties te verlagen. Een bijkomend probleem in de huidige stand van de techniek is het onvermogen van de momenteel beschikbare methoden en/of producten voor de ontsmetting van oppervlakken om effectief te zijn in een breed temperatuur-, pH- en 25 vochtigheidsbereik.

Het gebruik van micro-organismen en enzymen voor het reinigen van oppervlakken is bekend. Zo heeft WO 2016/170479 Al betrekking op producten voor reiniging, schoonmaak en hygiënisatie, bestaande uit een basisoplossing die is vermengd met probiotische bacteriën en bacteriofaagelementen; de probiotische bacteriën behoren 30 bij voorkeur tot de geslachten Bacillus subtilis, Bacillus megaterium en Bacillus pumilus, terwijl de bacteriofaagelementen, als alternatief of in combinatie, bestaan uit bacteriofagen van de families Caudavirales, Microviridae, Leviviridae, inoviridae, Tactiviridae of Corticoviridae. CN 103122327 B heeft betrekking op een bacteriecultuur en samenstellingen die deze bevatten, en het gebruik hiervan voor .35 het wassen van kleding. US7951767 B2 en US 7795199 B2 hebben betrekking op antimicrobiëie en reinigingssamensteilingen die een antimicrobieel middel op basis

BE2017/5431 van amine bevatten; een boraatzout; en (bacterie- of schimmel-)sporen, vegetatieve bacteriën, schimmels of' enzymen, en op methoden voor het gebruik van de samenstelling. EP 287372.3 Al heeft betrekking op een samenstelling die te gebruiken is als reinigingsmiddel, bestaande uit een anoiiet en een melkzuurbacterie 5 die behoort tot het geslacht Lactobacillus, evenals een methode voor het reinigen van oppervlakken en een methode voor het vertragen van de hergroei van microben, en een methode voor het verlagen van het aantal resistente microben op een oppervlak. WO 2015/000812 Al heeft betrekking op een proces voor het reinigen van oppervlakken waarbij het betreffende oppervlak wordt behandeld met ten minste 10 één cultuur van ten minste één organisme of een formulering die de cultuur bevat.

EP 2759590 Al heeft betrekking op samenstellingen voor deodorisatie en reiniging, waarbij de samenstellingen één of meerdere stammen van Bacillus subtilis en/of extracten daarvan bevatten, evenals één of meerdere oppervlakteactieve stoffen, één of meerdere geurstoffen, één of meerdere ontkaikingsmiddelen en één of 15 meerdere bruismiddelen. EP2705140 Al heeft betrekking op een micro-organisme, behorende tot de orde van de melkzuurbacteriën of een analoog, fragment, derivaat, mutant of combinatie daarvan, die kan co-aggregeren met in ieder geval Staphylococcus aureus of Pseudomonas aeruginosa. WO 2010/130541 Al heeft betrekking op een reinigingsmiddel voor harde oppervlakken, met name een sanitaire 20 reiniger die micro-organismen bevat voor het ontleden en/of verwijderen van anorganische vlekken en/of residuen, en op het gebruik daarvan voor het reinigen en/of afwerken van harde oppervlakken, met name voor het reinigen en/of afwerken van keramische oppervlakken in en rond toiletten en urinoirs. WO 2008021761 A3 heeft betrekking op bacteriecuituren en een samenstelling die één of meerdere 2.5 culturen bevat, evenals op methoden voor het wassen of reinigen van wasgoed of stoffen en oppervlakken. WO 2002/033035 Al heeft betrekking op een waterige reinigingssamenstelling voor harde oppervlakken die bestaat uit anionogene en nietionogene oppervlakteactieve stoffen, een enzymmengsel zoals lipase/alfa-amylase voor het afbreken van organische verbindingen; een activator om de activiteit van .30 het enzym te verhogen; water; en een cultuur van Bacillus subtilis en Bacillus amyloliquefaciens voor het afbreken en assimileren van organische verbindingen. US 6387874 BI heeft betrekking op een waterige reinigingssamenstelling die bestaat uit: een organisch zuur dat ten minste 5% op gewichtsbasis van de reinigingssamenstelling vormt; een sporenvormende microbiële samenstelling; een 35 mengsel van bevochtigingsmiddelen; een verdikkingsmiddel en water. WO

2000/063338 Al heeft betrekking op een waterig ontsmettingsmiddel en reinigingssamenstelling voor harde oppervlakken die bestaat uit: een quaternaire

BE2017/5431 ammoniumverbinding; een sporenvormende microbiële samenstelling; en een oppervlakteactieve stof. De samenstelling wordt gebruikt voor het reinigen van harde oppervlakken met een uiteenlopende microbiële flora, waarbij reiniging en ontsmetting plaatsvindt door het doden van ongewenste micro-organismen en Bacillus-sporen worden achtergelaten die vervolgens ontkiemen en alle nog achtergebleven residuen afbreken. US 2.0130184196 Al heeft betrekking op waterige samenstellingen die bestaan uit bacteriële sporen van ten minste één stam van Bacillus klasse f, gekozen uit Bacillus cirulans, Bacillus megaterium, Bacillus lichenforms, Bacillus pumilus, Bacillus sphaericus, Bacillus subtilis ondersoort 10144 en Bacillus subtilis ondersoort 8646, een terpeen en één of meerdere oppervlakteactieve stoffen.

Micro-organismen en met name microbiële consortia zijn eerder besproken als geschikte middelen voor het opnieuw bevolken van oppervlakken of gebieden met gunstige micro-organismen, of voor het uitroeien van schadelijke organismen. Het blijft echter moeilijk om oppervlakken opnieuw te bevolken met de gewenste microbiële consortia, omdat het een uitdaging is om een oppervlak te bevolken met duurzame consortia van de gewenste microben.

De onderhavige uitvinding beoogt een oplossing te bieden voor ten minste één van de bovengenoemde problemen door het bieden van een microbieei consortium dat geschikt is om ongewenste en/of schadelijke micro-organismen effectief te verwijderen van oppervlakken en deze hiertegen langdurig te beschermen.

SAMENVATTING VAN DE UITVINDING

De onderhavige uitvinding biedteen microbieei consortium volgens conclusie 1. Meer in het bijzonder biedt deze uitvinding een microbieei consortium waarbij het betreffende consortium bestaat uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die algemeen erkend worden als veilig (GRAS), gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus, en Caldiarchaeum; en één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die gekozen zijn uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus.

Een dergelijk microbieei consortium is veilig voor hogere organismen en beter bestand tegen diverse externe schokken, zoals temperatuur, pH-veranderingen, osmotische druk en de beschikbaarheid van voedingsstoffen. Bovendien vertoont een

BE2017/5431 dergelijk microbieei consortium een synergetische toename van de nitrificerende activiteit en zuurstofopname, en maakt deze het mogeiijk voor één of meerdere commensale stammen om te floreren. De toepassing van een dergelijk microbieei consortium zorgt voor een efficiënte herkolonisatie van oppervlakken en maakt het 5 mogeiijk om oppervlakken op een veilige, onschadelijke manier langdurig te beschermen tegen ongewenste of schadelijke micro-organismen.

GEDETAILLEERDE BESCHRIJVING VAN DE UITVINDING

De onderhavige uitvinding biedt een microbieei consortium waarbij het betreffende consortium bestaat uit: één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die 10 algemeen erkend worden als veilig (GRAS), gekozen uit de groep van Nitrosomonas,

Nitrosospira, Nitrosopumiius, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum: en één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die gekozen zijn uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, 15 Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium,

Rhizobium, Serratia en Deinococcus. De toepassing van een dergelijke microbieei consortium helpt de verspreiding van niet algemeen als veilig erkende microben (niet-GRAS) op het behandelde oppervlak te voorkomen.

Tenzij anders gedefinieerd, hebben alle termen die worden gebruikt in de 2.0 bekendmaking van de uitvinding, met inbegrip van technische en wetenschappelijke termen, de betekenis zoals deze algemeen wordt begrepen door iemand met gebruikelijke kennis van de stand van de techniek waartoe deze uitvinding behoort. Ter verdere begeleiding zijn definities van termen opgenomen voor een beter begrip van de uitleg van de onderhavige uitvinding.

Zoals zij in dit document worden gebruikt, hebben de volgende termen de volgende betekenissen:

Een en de, zoals hier gebruikt, verwijzen naar zowel de enkelvoudige als meervoudige vorm van het woord waarop zij betrekking hebben, tenzij de context duidelijk anders aangeeft. Een compartiment verwijst bijvoorbeeld naar één of .30 meer dan één compartiment.

Ongeveer en circa, zoals hier gebruikt ter verwijzing naar een meetbare waarde zoals een parameter, een hoeveelheid, een tijdsduur en dergelijke, is bedoeld om variaties van +/-20% of minder te omvatten, bij voorkeur +/-10 % of minder, liever +/- 5% of minder, nog liever +/-1% of minder, en zelfs nog liever +/-0,1% of minder 35 van en ten opzichte van de gespecificeerde waarde, voor zover dergelijke variaties

BE2017/5431 geschikt zijn voor uitvoering in de geopenbaarde uitvinding. Er dient echter te worden begrepen dat de waarde waarnaar de modificatoren ongeveer and circa verwijzen, ook zelf specifiek wordt weergegeven.

Omvatten, omvattend en omvat, zoals hier gebruikt, zijn synoniem met bestaan uit, bestaand uit, bestaat uit of bevatten, bevattend of bevat en zijn inclusieve of onbeperkte termen die de aanwezigheid specificeren van hetgeen volgt, bijv, een bestanddeel, en vormen geen uitsluiting van de aanwezigheid van aanvullende, niet-genoemde bestanddelen, kenmerken, elementen, leden of stappers die bekend zijn in de techniek of daarin worden beschreven.

Het aanduiden van numerieke reeksen door hun eindpunten omvat alle getallen en fracties die binnen dat bereik vallen, evenals de aangeduide eindpunten.

De uitdrukking % op basis van gewicht, gewichtspercentage, % gew. of' gew.%, hier en in de gehele beschrijving tenzij anders gedefinieerd, verwijst naar het relatieve gewicht van het betreffende bestanddeel op basis van het totale gewicht van een samenstelling.

Zoals hier gebruikt, worden de termen micro-organismen, microbiële organismen en microben synoniem gebruikt en dienen deze in de ruime betekenis te worden opgevat. De termen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, de twee prokaryote domeinen, bacteriën en archaebacteriën, evenals eukaryote schimmels en protisten.

2.0 In eerste instantie omvat de onderhavige uitvinding een microbieel consortium waarbij het betreffende consortium bestaat uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die algemeen erkend worden ais veilig (GRAS), gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum; en één of meerdere GRAS25 stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die gekozen zijn uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus.

De term microbieel consortium, zoals hier gebruikt, verwijst naar een microbiële 30 gemeenschap die bestaat uit twee of meerdere soorten of stammen die samen als een eenheid fungeren.

Zoals hier gebruikt, verwijst de term stam naar micro-organismen van een bepaalde soort die gemeenschappelijke kenmerken hebben. Tenzij anders aangegeven, worden de termen stam en cel hier uitwisselbaar gebruikt. Zoals een deskundige in het vakgebied zou erkennen, zijn stammen van micro-organismen

BE2017/5431 samengesteld uit afzonderlijke cellen. Bovendien hebben afzonderlijke cellen van een micro-organisme specifieke kenmerken die hen identificeren als lid van hun specifieke stam.

De term GRAS wordt hier gebruikt als een acroniem voor generally recognized as safe (algemeen erkend ais veilig) en verwijst naar de aanduiding van de

Amerikaanse Food and Drug Administration (FDA) dat een microbieei organisme door deskundigen als veilig wordt beschouwd.

Een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding bestaat uitsluitend uit GRAS-stammen. Van GRAS-stammen is door deskundigen aangetoond dat zij veilig 10 zijn voor toevoeging aan voedsel onder omstandigheden van het beoogde gebruik ervan. Een microbieei consortium dat uitsluitend uit GRAS-stammen bestaat, wordt derhalve als veilig beschouwd en vormt geen risico of nadeel voor hogere organismen.

Een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding bestaat uit één of 15 meerdere ammoniumoxiderende stammen en één of meerdere stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze ammoniumoxiderende stammen. Zoals hierboven vermeld, zijn de stammen die aanwezig zijn in het betreffende microbieei consortium GRAS-stammen en vormen ze derhalve geen risico of nadeel voor hogere organismen. Ammoniumoxiderende stammen zijn aerobe en chemoiithotrofe 20 microben die in staat zijn om ammonium of ammoniak als energiebron te gebruiken, en die in staat zijn om complexe organische verbindingen bijvoorbeeld koolhydraten, vetten en eiwitten - te produceren uit eenvoudige stoffen die in de omgeving aanwezig zijn - bijvoorbeeld kooldioxide. Het vermogen van stammen om ammonium (of ammoniak) tot nitriet te oxideren is afhankelijk van de aanwezigheid 25 van ammoniakmono-oxygenase en hydroxylamine-oxidoreductase. Deze beide enzymen zijn essentieel voor het nitrificatieproces, en meer in het bijzonder voor de oxidatie van ammonium (of ammoniak) tot nitriet.

In de onderhavige uitvinding leven ammoniumoxiderende stammen samen met heterotrofen in een commensaal microbieei consortium. In een dergelijk commensaal 30 microbieei consortium produceren ammoniumoxiderende stammen complexe organische verbindingen en scheiden ze deze verbindingen uit, die kunnen worden opgenomen en als voedingsstoffen worden gebruikt door heterotrofen voor hun groei en overleving. Uit de literatuur is bekend dat koolstoffixatie - meestal in de vorm van kooldioxide - in chemolithotrofen relatief inefficiënt is in vergelijking met de opname 35 van organische koolstof in heterotrofen. Ten gevolge hiervan hebben ammoniumoxiderende stammen het moeilijk om te floreren in de aanwezigheid van

BE2017/5431 heterotrofen, terwijl de verhoogde beschikbaarheid van complexe koolstofverbindingen de groei, verspreiding en overleving van heterotrofen in een dergelijk microbieel consortium stimuleert. Het resultaat hiervan is dat heterotrofe stammen in het microbieel consortium zullen floreren als gevolg van de aanwezigheid van de ammoniumoxiderende stammen zonder de ammoniumoxiderende stammen direct op een negatieve wijze te beïnvloeden. Een dergelijke relatie wordt gedefinieerd als commensaal. De heterotrofe stammen in het microbieel consortium worden daarom commensale stammen genoemd in de onderhavige uitvinding.

Een microbieel consortium omvat bij voorkeur één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die zich voeden met en overleven op mineralen.

Bij voorkeur omvat een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding één of meerdere ammoniumoxiderende GRAS-stammen die zijn gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum.

De uitvinders van de onderhavige uitvinding hebben geconstateerd dat stammen die worden gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum zowel ammoniakmono-oxygenase als hydroxylamine-oxideoreductase bevatten en afdoende nitrificerende activiteit vertonen om voldoende hoeveelheden complexe organische verbindingen te leveren die als voedingsstoffen voor commensale stammen kunnen dienen. Bij voorkeur worden uitsluitend stammen gekozen die de aanduiding GRAS hebben gekregen. Op deze wijze wordt het risico dat hogere organismen negatief worden beïnvloed tot een minimum beperkt, en nog liever worden uitsluitend stammen gebruikt die geen risico op negatieve effecten vormen voor hogere organismen.

Een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding omvat verder één of meerdere heterotrofe GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van de ammoniumoxiderende stammen. De desbetreffende één of meerdere commensale stammen worden gekozen uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus.

De uitvinders hebben geconstateerd dat commensale stammen die worden gekozen uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus in staat zijn om zich te voeden met, en efficient te groeien op, complexe organische verbindingen die worden geproduceerd door de ammoniumoxiderende

BE2017/5431 stammen. Bij voorkeur worden alleen stammen die zijn aangeduid als GRAS geselecteerd, om het risico te beperken dat hogere organismen negatief worden beïnvloed. Het verdient nog meer de voorkeur dat uitsluitend stammen worden gebruikt die geen risico vormen voor hogere organismen of deze negatief beïnvloeden.

De stammen die in de uitvinding worden vermeld, zullen bekend zijn bij een deskundige in het vakgebied en kunnen worden verkregen bij officiële deponeringsorganisaties zoals, maar niet beperkt tot, de Belgische Gecoördineerde Verzamelingen van Micro-organismen (BCCM), ATCC en NCIMB Ltd.

De uitvinders van de onderhavige uitvinding hebben geconstateerd dat een microbieel consortium dat bestaat uit één of meerdere van dergelijke ammoniumoxiderende stammen en één of meerdere van dergeiijke commensale stammen, een synergetisch effect vertonen vergeleken met de overeenkomstige afzonderlijke stammen waaruit het microbieel consortium is samengesteld. Meer in het bijzonder werd gevonden dat een microbieel consortium dat bestaat uit één of meerdere van dergelijke ammoniumoxiderende stammen en één of meerdere van dergelijke commensale stammen (a) een hogere nitrificerende activiteit vertoont vergeleken met de afzonderlijke één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, (b) een hogere zuurstofopname vertoont vergeleken met de afzonderlijke één of meerdere commensale stammen, en (c) een lager sterftecijfer en hogere weerbaarheid vertoont vergeleken met afzonderlijke stammen van het microbieel consortium. Er bestaat derhalve een opvallende synergie tussen de twee groepen organismen in de uitvinding.

De term weerbaarheid, zoals hier gebruikt, beschrijft het vermogen van een cel om veranderingen in de omgeving het hoofd te bieden.

Het microbieel consortium kan bestaan uit twee of meer ammoniumoxiderende GRAS-stammen die zijn gekozen uit de hierboven genoemde groep en twee of meer GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van de twee of meer ammoniumoxiderende GRAS-stammen en die gekozen zijn uit de hierboven genoemde groep. Het verdient nog meer de voorkeur dat het microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding bestaat uit twee ammoniumoxiderende GRASstammen en drie GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van de desbetreffende twee ammoniumoxiderende stammen en die gekozen zijn uit de hierboven genoemde groep.

Zoals hierboven is uitgelegd, is het koolstoffixatieproces van ammoniumoxiderende stammen minder efficiënt in vergelijking met de organische koolstofopname door de

BE2017/5431 heterotrofe commensale stammen. Bij een langdurige cultivering van een microbieel consortium zoals hierboven beschreven, is het daarom waarschijnlijk dat - na een bepaalde tijd - de commensale stammen zullen floreren, waardoor de ammoniumoxiderende stammen worden onderdrukt. De desbetreffende ammoniumoxiderende stammen zijn echter essentieel om het floreren van de genoemde commensale stammen mogeiijk te maken, aangezien de laatste als voedingsbron gebruik maken van de complexe organische verbindingen die worden geproduceerd door de desbetreffende ammoniumoxiderende stammen. De onderhavige uitvinding kan derhalve een optimale verhouding bieden van de hoeveelheid ammoniumoxiderende cellen ten opzichte van de hoeveelheid commensale cellen.

In een uitvoeringsvorm bevat een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding cellen van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen in een verhouding van tussen 100:10 en 100:0,1 ten opzichte van het aantal cellen van de één of meerdere commensale stammen.

De uitvinders hebben geconstateerd dat een dergelijke verhouding de cultivering mogelijk maakt van een microbieel consortium zoals hierboven genoemd zonder onderdrukking en/of depletie van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen of commensale stammen gedurende een tijdsperiode die varieert van verscheidene maanden tot een jaar.

Een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan bestaan uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die zijn gekozen uit de groep van Nitrosomonas marina, Nitrosomonas nitrosa, Nitrosomonas eutropha, Nitrosomonas europaea, Nitrosomonas cryotolerans, Nitrosospira multiformis, Nitrosospira lacus, Nitrosopumilus maritimus, Cenarchaeum symbiosum, Nitrosoarchaeum limnia, Nitrosocaldus yeilowstonii en Caldiarchaeum subterraneum.

De genoemde stammen zijn GRAS-stammen en bevatten zowel ammoniakmonooxygenase als hydroxylamine-oxidoreductase, wat cellen in staat stelt tot oxidatie van ammonium (of ammoniak) tot nitriet om energie te genereren. Op zijn beurt wordt deze energie gebruikt voor het fixeren van koolstof in complexe organische verbindingen, die als voedingsstoffen kunnen dienen voor één of meerdere commensale stammen.

Het microbieel consortium kan bestaan uit één of meerdere commensale stammen die zijn gekozen uit de groep van Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus polymyxa, Bacillus arnyloliquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus japonicum en uit de groep van Deinococcus. Voor het doel van de onderhavige uitvinding wordt de groep

BE2017/5431 van Deinococciis geacht te bestaan uit Deinococcus-bacteriën zoals, maar niet beperkt tot, D. geothermalis, D. cellulolysiticus, D. radiodurans, D. proteolyticus, D. radiopugnans, D. radiophiius, D. grandis, D. indicus, D. frigens, D. saxicola, D. maricopensis, D. marmoris, D. deserti, D. murrayi, D. aerius, D. aeroiatus, D. aerophiius, D. aetherius, D. alpinitundrae, D. altitudinis, D. apachensis, D. aquaticus, D. aquatilis, D. aquiradiocola, D. aquivivus, D. caeni, D. claudionis, D. ficus, D. gobiensis, D. hohokamensis, D. hopiensis, D. misasensis, D. navajonensis, D. papagonensis, D. peraridilitoris, D. pimensis, D. piscis, D. radiomoliis, D. roseus, D. sonorensis, D. wuiumuqiensis, D. xibeiensis, D. xinjiangensis, D. yavapaiensis of D. yunweiensis. Deinococcus-bacteriën die de voorkeur verdienen, zijn D. geothermalis, D. celiulolysiticus, D. deserti, D. murrayi en D. radiodurans.

De genoemde stammen zijn aangeduid ais GRAS-stammen door de Amerikaanse Food and Drug Administration (FDA), en zijn commensaal ten opzichte van één of meerdere van de hierboven genoemde ammoniumoxiderende stammen. Meer in het bijzonder kunnen de desbetreffende commensale stammen één of meerdere complexe organische verbindingen als voedingsbron gebruiken die worden geproduceerd door één of meerdere van de ammoniumoxiderende stammen, wat een verhoogde groei en overleving van de genoemde commensale stammen mogelijk maakt. Bovendien kunnen de desbetreffende commensale stammen in relatief dichte opeenhopingen groeien, wat een compacte bezetting van oppervlakken, voorwerpen en/of gebieden mogelijk maakt.

Verder hebben de uitvinders van de onderhavige uitvinding geconstateerd dat een microbieel consortium bestaande uit één of meerdere van de desbetreffende ammoniumoxiderende stammen en één of meerdere van de desbetreffende comensaie stammen, een aanzienlijk synergetisch effect vertoonde op de nitrificerende activiteit, zuurstofopname en weerbaarheid in vergelijking met een microbiële populatie die alleen bestaat uit de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die aanwezig zijn in het microbieel consortium of de één of meerdere commensale stammen die aanwezig zijn in het microbieel consortium.

Het microbieel consortium toont een verbeterde weerbaarheid in vergelijking met een afzonderlijke populatie van de één of' meerdere ammoniumoxiderende stammen en in vergelijking met een afzonderlijke populatie van de één of meerdere commensale stammen.

Er werd gevonden dat een microbieel consortium volgens de uitvinding een hoger overlevingspercentage en een grotere weerbaarheid vertoont in vergelijking met afzonderlijke populaties van zowel de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen als de één of meerdere commensale stammen die aanwezig zijn in het microbieei consortium. Dit illustreert een synergetisch effect van een microbieei consortium volgens de uitvinding ten opzichte van de stammen waaruit het microbieei consortium is samengesteld.

De organismen die aanwezig zijn in het microbieei consortium zullen zich bij voorkeur in een slaaptoestand bevinden, wat betekent dat de microbiële activiteit minimaal en verwaarloosbaar zal zijn, wanneer zij zijn opgeslagen en dus niet zijn aangebracht op een oppervlak of voor gebruik bij het opnieuw koloniseren van een oppervlak. Bij het aanbrengen van het microbieei consortium op oppervlakken onder optimale 10 omstandigheden wordt de biologische activiteit van het microbieei consortium geactiveerd en gemaximaliseerd. Deze optimale omstandigheden worden bepaald door kamertemperaturen in het mesofiele bereik (tussen 15 en 28 °C), een pH rond neutrale waarden (7 ± 0,5) en een partiële zuurstof druk die stabiel is rond standaardwaarden voor lucht (21% 02), in combinatie met de aanwezigheid van 15 voedingsstoffen (die inherent aanwezig zijn op de oppervlakken waarop zij worden aangebracht). Onder deze omstandigheden worden de slapende organismen in het consortium geactiveerd, totdat zij hun maximale activiteit bereiken. Tijdens de slaaptoestand zijn één of meerdere essentiële factoren voor de biologische activiteit afwezig, vaak zijn dit de benodigde voedingsstoffen (zouten en substraten) en 20 zuurstofniveaus.

Het microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding kan onder optimale omstandigheden en in geactiveerde toestand een nitrificerende activiteit vertonen van ten minste 0,16 gram stikstof per gram VSS per dag, liever ten minste 0,18 gram stikstof per gram VSS per dag, en het liefst ten minste 0,2.0 gram stikstof per gram 25 VSS per dag. Er kan een nitrificerende activiteit van tussen 0,8 gram en 0,5 gram stikstof per gram VSS per dag worden waargenomen.

De term VSS, zoals hier gebruikt, heeft betrekking op de vluchtige gesuspendeerde vaste stoffen (volatile suspended solids), en meer in het bijzonder op de organische inhoud van gesuspendeerde vaste stoffen.

Methoden voor het bepalen van de nitrificerende activiteit van een microbiële populatie, zoals een microbieei consortium, zijn bekend bij een deskundige. De nitrificerende activiteit van een microbiële populatie kan bijvoorbeeld, maar niet uitsluitend, worden bepaald door een nitrificerende activiteitstest (NAT), uitgevoerd door het meten van de productie van nitriet respectievelijk nitraat per tijdseenheid 35 en per eenheid microbiële biomassa in een goed beluchte waterige omgeving bij neutrale pH en normale kamertemperatuur.

BE2017/5431

BE2017/5431

Een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan onder optimale omstandigheden en in geactiveerde toestand een zuurstofopnamesnelheid vertonen van ten minste 8 mg zuurstof per gram VSS per uur, liever ten minste 2.00 mg zuurstof per gram VSS per uur, en het liefst ten minste 10 gram zuurstof per gram VSS per uur. In een verdere geprefereerde uitvoeringsvorm wordt een zuurstofopnamesnelheid van tussen 4 mg en 2.5 mg zuurstof per gram VSS per uur waargenomen. Methoden voor het bepalen van de zuurstofopnamesnelheid van een microbiële populatie, zoals een microbieel consortium, zijn bekend bij een deskundige. De zuurstofopnamesnelheid van een microbiële populatie kan bijvoorbeeld, maar niet uitsluitend, bepaald worden door met behulp van een elektrode de hoeveelheid opgeloste zuurstof in water en de afname daarvan te meten wanneer de waterige oplossing wordt voorzien van levende micro-organismen en een substraat dat zij kunnen oxideren.

Micro-organismen zijn afhankelijk van vocht of water om te kunnen groeien en zich te kunnen vermeerderen, en dus om te kunnen overleven in een bepaalde omgeving.

Het microbieel consortium volgens de uitvinding kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling, zoals een waterige suspensie. Het microbieel consortium kan worden geformuleerd als een waterige suspensie die een wateractiviteit (aw) heeft van ten minste 0,91 en bij voorkeur ten minste 0,95.

Formulering als een waterige suspensie maakt een meer gelijkmatige verdeling van de cellen van het microbieel consortium mogelijk, voor een betere toegankelijkheid van voedingsstoffen tot stammen van het microbieel consortium en een sterkere groei en overleving van stammen in het microbieel consortium.

Het microbieel consortium volgens de uitvinding kan geformuleerd worden als een suspensie die bestaat uit een totale populatiedichtheid van tussen 1000 en 100 000 000 micro-organismen per ml, liever 10 000 tot 10 000 000 micro-organismen per ml, en het liefst 100 000 tot 1 000 000 micro-organismen per mi.

De uitvinders van de onderhavige uitvinding hebben geconstateerd dat een dergelijke populatiedichtheid optimaal is voor groei en verspreiding van de stammen van het microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding. Meer in het bijzonder kunnen van het microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding, ai dan niet geleverd ais een formulering of suspensie, subculturen worden gemaakt om de levensduur van het microbieel consortium te verlengen.

Een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan gecombineerd worden met één of meerdere geschikte additieven die bekend zijn bij een deskundige

BE2017/5431 in dit vakgebied. Bij voorkeur wordt het microbieei consortium geleverd met één of meerdere geschikte additieven. Nog liever wordt een microbieei consortium geleverd met één of meerdere geschikte additieven die zijn gekozen uit de groep van conserveermiddelen, osmolieten, pH-buffers, reductiepotentiaalregelaars, oppervlakteactieve stoffen, geurbestrijdende middelen en oppervlakteverbeterende verbindingen.

Het microbieei consortium kan worden geleverd met één of meerdere conserveermiddelen. Bij voorkeur worden de één of meerdere conserveermiddelen gekozen uit de groep van stikstofverbindingen met een langzame afgifte om de nitrificeerders van een voedingsbron te voorzien, lichtafvangingsmiddelen om de nitrificeerders te beschermen tegen lichtschade en bicarbonaat om hydroxylradicalen onschadelijk te maken.

Zoals hier gebruikt, wordt de term conserveermiddel niet gebruikt in zijn nauwe betekenis om middelen te beschrijven die de groei van micro-organismen absoluut verhinderen, maar wordt deze term daarentegen in algemene zin gebruikt om middelen te omvatten die de groei van bepaalde groepen micro-organismen, bij voorkeur ongewenste groepen micro-organismen, vertragen, remmen of verhinderen.

De toevoeging van één of meerdere conserveermiddelen aan het microbieei consortium zorgt voor vertraging, remming en/of verhindering van de groei van ongewenste micro-organismen in het microbieei consortium. Op deze manier wordt het microbieei consortium minimaal beïnvloed en/of verontreinigd door de groei of aanwezigheid van ongewenste micro-organismen.

Een microbieei consortium kan worden geleverd als een samenstelling die tussen 0,5 en 2 mg/ml van één of meerdere conserveermiddelen bevat, zoais 1 mg/ml.

Het microbieei consortium kan worden geleverd in een samenstelling die één of meerdere osmolieten omvat. Bij voorkeur zijn deze één of meerdere osmolieten zouten. Nog liever worden de één of meerdere osmolieten gekozen uit de groep natriumchloride of -sulfaat of -fosfaat, calciumchloride of -sulfaat of -fosfaat en magnesiumchloride of -sulfaat of -fosfaat.

De term osmoliet verwijst naar een middel dat of' een verbinding die osmolaiiteit verleent aan een waterige samenstelling zonder dat een microbieei consortium dat is opgenomen in de samenstelling negatief wordt beïnvloed.

De toevoeging van één of meerdere osmolieten aan een samenstelling die een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding bevat, maakt het mogelijk

BE2017/5431 om voor een osmotische druk te zorgen die optimaal is voor de cellen van het microbieel consortium. Osmolieten, en een optimale osmotische druk, zijn belangrijk voor cellulaire functies en overleving van de cellen. Meer in het bijzonder handhaven osmolieten, en een optimale osmotische druk, het celvolume en de vloeistofbalans in cellen, en dragen osmolieten bij aan het vouwen van eiwitten. De toevoeging van één of meerdere osmolieten aan een samenstelling die het microbieel consortium bevat, maakt het derhalve mogelijk om voor een optimale osmotische druk te zorgen voor de stammen van een microbieel consortium.

Het microbieel consortium kan worden geleverd ais een samenstelling die tussen 0,5 en 2 mg/ml van één of meerdere osmolieten bevat, zoals 1 mg/ml.

Het is reeds bekend dat de pH een groot effect heeft op de groei en overleving van micro-organismen. Elke stam heeft een pH bereik waarbinnen groei mogelijk is, en gewoonlijk heeft elke stam een duidelijk gedefinieerd pH-optimum. Dit pH-optimum is de pH waarbij een bepaalde stam optimale groei en overleving vertoont. Het is derhalve voordelig om het microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding een omgeving, zoals een samenstelling, te bieden die overeenstemt met het pHoptimum van de stammen waaruit het microbieel consortium bestaat. Op deze manier zijn optimale groei- en overlevingsomstandigheden mogelijk. De toevoeging van één of meerdere pH-buffers aan een samenstelling die een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding bevat, maakt het mogelijk om de samenstelling op een optimale pH te bufferen.

Bij voorkeur zai een optimale pH 5 tot 10 zijn, liever 6 tot 8, nog liever 6,5 tot 7,5.

Het microbieel consortium wordt bij voorkeur geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere pH-buffers bevat. Dergelijke samenstellingen kunnen één of meerdere pH-buffers bevatten die zijn gekozen uit de groep van fosfaatbuffers, bicarbonaatbuffers, trisbuffers of een combinatie van deze laatste buffers.

Het microbieel consortium kan worden geleverd ais een samenstelling die een zodanige hoeveelheid van één of meerdere pH-buffers bevat dat de pH van een dergelijke samenstelling optimaal is voor één of meerdere stammen waaruit het microbieel consortium bestaat.

Enzymatische reacties zijn vaak oxidatie-reductiereacties. Bij dergelijke reacties wordt één verbinding geoxideerd terwijl een andere verbinding wordt gereduceerd.

BE2017/5431

Het vermogen van een organisme om oxidatie-reductiereacties uit te voeren, hangt voornamelijk af van de reductiepotentiaal van de omgeving.

Zoals hier gebruikt, verwijst de term redoxpotentiaal naar de neiging van een chemische stof om elektronen op te nemen en zodoende te worden gereduceerd.

De redoxpotentiaa! van de omgeving is een belangrijke parameter voor de groei, ontwikkeling en overleving van microbiële stammen, aangezien het de redoxpotentiaal van de omgeving is die bepaalt of enzymatische reacties door cellen kunnen worden uitgevoerd. In het algemeen zijn aerobe micro-organismen actief in omgevingen met een positieve redoxpotentiaal - een sterke neiging van de omgeving om elektronen op te nemen - terwijl strikt anaerobe micro-organismen actief zijn in omgevingen met een negatieve redoxpotentiaal - een sterke neiging van de omgeving om elektronen af te staan. Daarnaast bepaalt de redoxpotentiaal van een omgeving de oplosbaarheid van voedingsstoffen.

De redoxpotentiaal van een omgeving - zoals een samenstelling die een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding bevat - kan worden aangepast en zodoende 'worden geoptimaliseerd door toevoeging van één of meerdere redoxpotentiaalregelaars aan de omgeving. Meer in het bijzonder kan de redoxpotentiaal van een omgeving worden verlaagd door toevoeging van één of meerdere reducerende verbindingen, terwijl de redoxpotentiaal van een omgeving kan worden verhoogd door toevoeging van één of meerdere oxiderende verbindingen.

De toevoeging van één of meerdere redoxpotentiaalregelaars aan een samenstelling die een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding bevat, maakt het mogelijk om een optimale redoxpotentiaal in de samenstelling in te stellen en/of te handhaven. Bij voorkeur wordt de redoxpotentiaal van een dergelijke samenstelling ingesteld en/of gehandhaafd op de redoxpotentiaal die optimaal is voor stammen van het microbieel consortium die aanwezig zijn in de samenstelling.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere redoxpotentiaalregelaars bevat. Het microbieel consortium kan worden geleverd ais onderdeel van een samenstelling die bestaat uit één of meerdere redoxpotentiaalregelaars die zijn gekozen uit de groep van nitraat-nitriet, het redoxkoppel mangaanoxide-mangaanion, en peroxide.

Het microbieel consortium volgens de uitvinding kan worden geleverd ais onderdeel van een samenstelling die één of meerdere oppervlakteactieve stoffen bevat. De samenstelling kan worden geleverd met één of meerdere oppervlakteactieve stoffen die zijn gekozen uit de groep van oppervlakteactieve stoffen en emulgatoren.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere oppervlakteactieve stoffen bevat. Bij voorkeur omvat de 5 samenstelling één of meerdere oppervlakteactieve stoffen die zijn gekozen uit de groep van alkylsulfaten en -sulfonaten, alkylethoxylaten en zwitterionische moleculen.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere niet-ionogene oppervlakteactieve stoffen bevat. De niet10 ionogene oppervlakteactieve stoffen kunnen gealkoxyleerde oppen/lakteactieve stoffen, alkylpolysacchariden, blokcopolymeren van ethyleenoxide en propyleenoxide, gefluorideerde oppervlakteactieve stoffen en oppervlakteactieve stoffen op basis van siliconen, amineoxide-oppervlakteactieve stoffen en mengsels daarvan omvatten.

Een voorkeursklasse van niet-ionogene oppervlakteactieve stoffen zijn gealkoxyleerde niet-ionogene oppervlakteactieve stoffen. De gealkoxyleerde nietionogene oppervlakteactieve stoffen van de onderhavige uitvinding zijn ofwel lineair of vertakt, en bevatten minimaal 8 koolstofatomen en maximaal 16 koolstofatomen in de hydrofobe staart, en minimaal 3 ethyleenoxide-eenheden en maximaal 25 ethyleenoxide-eenheden in de hydrofiele kopgroep. Voorbeelden van alkylethoxylaten zijn Neodol 91-6® en Neodol 91-8®, geleverd door de Shell Corporation (P.O. Box 2.463, 1 Shell Plaza, Houston, Texas), en Alfonic 810-60®, geleverd door de Condea Corporation, (900 Threadneedle P.O. Box 19029, Houston, TX). Alkylethoxylaten die nog meer de voorkeur verdienen, omvatten 9 tot 12 koolstofatomen in de hydrofobe staart en 4 tot 9 oxide-eenheden in de hydrofiele kopgroep. De aikyiethoxylaat die de meeste voorkeur verdient, is C9-11 EO5, verkrijgbaar bij de Shell Chemical Company onder de handelsnaam Neodol 91-5®. Alkylethoxylaten kunnen ook worden afgeleid van vertakte alcoholen. Alcoholen kunnen bijvoorbeeld gemaakt zijn van vertakte olefines als grondstof, zoals propyleen of butyleen.

De niet-ionogene oppervlakteactieve stoffen kunnen alkylpolysacchariden omvatten. Dergelijke oppervlakteactieve stoffen zijn beschreven in de Amerikaanse octrooinummers 4,565,647, 5,776,872, 5,883,062. en 5,906,973. De alkylpolysacchariden kunnen bestaan uit alkylpolyglycosiden die suikerringen met vijf 35 en/of zes koolstofatomen bevatten, zoals de zes-koolstofsuikerring afgeleid van glucose, d.w.z. alkylpoiyglucosiden (APG). De alkylsubstituent in de APG-keten is

BE2017/5431

BE2017/5431 bij voorkeur een verzadigde of onverzadigde aikyigroep die 8 tot 16 kooistofatomen bevat, met een gemiddelde ketenlengte van 10 koolstofatomen. Cg-Cis alkylpolyglucosiden zijn commercieel verkrijgbaar bij diverse leveranciers (bijv. Simusol® oppervlakteactieve stoffen bij de Seppic Corporation, 75 Quai d'Orsay, 75321 Parijs, Cedex 7, Frankrijk, en Glucopon 220®, Glucopon 225®, Glucopon 425®, Plantaren 2000 N®, en Plantaren 2000 N UP®, bij de Cognis Corporation, Postfach 13 01 64, D 40551, Düsseldorf, Duitsland).

De niet-ionogene oppervlakteactieve stof kan een HLB-waarde hebben die tussen 10 en 19,5 ligt, of tussen 11 en 19, of tussen 12 en 18,5. Bij voorkeur is de niet-ionogene oppervlakteactieve stof vloeibaar bij 25 °C.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die 0,01% tot 15% op gewichtsbasis aan niet-ionogene oppervlakteactieve stof kan bevatten, bijvoorbeeld 0,02% tot 10% of 0,05% tot 5%. Voor onderhoudssamenstellingen voor het bieden van lage reinigingsniveaus kan de samenstelling minder dan 2% of minder dan 1% of minder dan 0,5% of minder dan 0,2% niet-ionogene oppervlakteactieve stof bevatten.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die 0,01% tot 15% op gewichtsbasis aan gealkoxyleerde niet-ionogene oppervlakteactieve stof kan bevatten, bijvoorbeeld 0,02% tot 10% of 0,05% tot 5%. De samenstelling kan minder dan 2% of minder dan 1% of minder dan 0,5% of minder dan 0,2% gealkoxyleerde oppervlakteactieve stof bevatten.

Het microbieel consortium kan bij voorkeur worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere amineoxide-oppervlakteactieve stoffen bevat. Geschikte amineoxiden hebben de volgende formule: R1R2R3NO waarbij elke Ri, R₂ en R₃ onafhankelijk een verzadigde of onverzadigde, gesubstitueerde of nietgesubstitueerde, lineaire of vertakte koolwaterstofketen met 1 tot 30 koolstofatomen is. Bij voorkeur gebruikte amineoxide-oppervlakteactieve stoffen volgens de onderhavige uitvinding zijn amineoxiden met de volgende formule: RiR₂R₃NO waarbij Ri een koolwaterstofketen is die 1 tot 30 koolstofatomen bevat, liefst 6 tot 20, nog liever 8 tot 16, en waarbij R₂ en R₃ onafhankelijk verzadigde of onverzadigde, gesubstitueerde of niet-gesubstitueerde, lineaire of vertakte koolwaterstofketens zijn die uit 1 tot 4 koolstofatomen bestaan, bij voorkeur 1 tot 3 koolstofatomen, en nog liever methylgroepen zijn. Ri kan een verzadigde of onverzadigde, gesubstitueerde of niet-gesubstitueerde, lineaire of vertakte koolwaterstofketen zijn.

Geschikte amineoxiden voor gebruik hierin zijn bijvoorbeeld bij voorkeur C12-C14 dimethylamineoxide, commercieel verkrijgbaar bij Albright & Wilson, C12-C14 amineoxiden, commercieel verkrijgbaar onder de handelsnaam Genaminox® LA, van Clariant of AROMOX® DMC van AKZO Nobel, van Huntsman Amine, C12-14 alkyldimethyl, N-Oxide, EMPIGEN® OB / EG.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die 0,02% tot 30% op gewichtsbasis aan amineoxide-opperviakteactieve stof kan bevatten, bijvoorbeeld 0,05% tot 20%, of 0,1% tot 10%, of 0,2% tot 5%, of 0,3% tot 2%, of 0,4% tot 1%.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere anlonogene oppervlakteactieve stoffen kan bevatten. De 10 anionogene oppervlakteactieve stoffen kunnen gesulfateerde anionogene oppervlakteactieve stoffen, gesulfoneerde anlonogene oppervlakteactieve stoffen en mengsels daarvan omvatten.

Geschikte gesulfateerde anlonogene oppervlakteactieve stoffen voor gebruik hierin zijn alle dergelijke stoffen die algemeen bekend zijn bij deskundigen in het vakgebied.

Bij voorkeur worden de gesulfateerde anlonogene oppervlakteactieve stoffen voor gebruik hierin gekozen uit de groep die bestaat uit: alkylsulfaten; en alkylgealkoxyieerde sulfaten; en mengsels daarvan.

Geschikte alkylsulfaten voor gebruik hierin omvatten in water oplosbare zouten of zuren met de formule ROSO3M waarbij R een Cs-Cis lineaire of vertakte, verzadigde 20 of onverzadigde alkylgroep is, bij voorkeur een Cg-Ciè alkylgroep en nog liever een

C10-C16 alkylgroep, en M staat voor H of een kation, bijvoorbeeld een alkalimetaaikation (bijv, natrium, kalium, lithium) of ammonium of gesubstitueerde ammonium (bijv, methyl-, dimethyl- en trimethylammoniumkationen en quaternaire ammoniumkationen, zoals tétraméthylammonium- en dimethylpiperdiniumkationen 25 en quaternaire ammoniumkationen afgeleid van alkylaminen zoals ethylamine, dlethyiamine, tri-ethylamine en mengsels daarvan, en dergelijke).

In het bijzonder geschikte lineaire alkylsulfaten omvatten C12-14 alkylsulfaat zoals EMPICOL® 0298/, EMPICOL® 0298/F of EMPICOL® XLB, commercieel verkrijgbaar bij ALBRIGHT & WILSON.

Met lineair alkylsulfaat wordt hier een niet-gesubstitueerd alkylsulfaat bedoeld waarbij de lineaire alkylketen uit 6 tot 16 koolstofatomen bestaat, bij voorkeur 8 tot 14 koolstofatomen en nog liever 10 tot 14 koolstofatomen, en waarbij deze alkylketen aan één uiteinde is gesulfateerd.

BE2017/5431

BE2017/5431

Geschikte gesulfoneerde anionogene oppervlakteactieve stoffen voor gebruik hierin zijn alle dergelijke stoffen die algemeen bekend zijn bij deskundigen in het vakgebied. Bij voorkeur worden de gesulfoneerde anionogene oppervlakteactieve stoffen voor gebruik hierin gekozen uit de groep die bestaat uit: alkylsulfonaten; alkylarylsulfonaten; naftaleensulfonaten; alkylgealkoxyleerde sulfonaten; en Cs-Cis alkylgealkoxyleerde lineaire of vertakte difenyloxidedisulfonaten; en mengsels daarvan.

Geschikte alkylsulfonaten voor gebruik hierin omvatten in water oplosbare zouten of zuren met de formule RSO3M waarbij R een Ce-Cis lineaire of vertakte, verzadigde of onverzadigde alkylgroep is, bij voorkeur een Cs-Cis alkylgroep en nog liever een C10C16 alkylgroep, en M staat voor H of een kation, bijvoorbeeld een alkalimetaalkation (bijv, natrium, kalium, lithium) of ammonium of gesubstitueerde ammonium (bijv, methyl-, dimethyl- en trimethylammoniumkationen en quaternaire ammoniumkationen, zoals tétraméthylammonium- en dimethyipiperdiniumkationen en quaternaire ammoniumkationen afgeleid van alkylaminen zoals ethylamine, diethylamine, tri-ethylamine en mengsels daarvan, en dergelijke).

Geschikte alkylarylsulfonaten voor gebruik hierin omvatten in wateroplosbare zouten of zuren met de formule RSO3M waarbij R een aryl is, bij voorkeur een benzyl, gesubstitueerd door een C&-C18 lineaire of vertakte, verzadigde of onverzadigde alkylgroep, bij voorkeur een Cs-Cis alkylgroep en nog liever een Cio-Cis alkylgroep, en M staat voor H of een kation, bijvoorbeeld een alkalimetaalkation (bijv, natrium, kalium, lithium, calcium, magnesium en dergelijke) of ammonium of gesubstitueerde ammonium (bijv, methyl-, dimethyl- en trimethylammoniumkationen en quaternaire ammoniumkationen, zoals tétraméthylammonium- en dimethyipiperdiniumkationen en quaternaire ammoniumkationen afgeleid van alkylaminen zoals ethylamine, diethvlamine, tri-ethylamine en mengsels daarvan, en dergeiijke).

In het bijzonder geschikte lineaire alkylsulfonaten omvatten C12-C16 paraffinesulfonaat, zoals Hostapur ® SAS dat commercieel verkrijgbaar is bij Hoechst. Alkylarylsulfonaten die in het bijzonder de voorkeur verdienen zijn aikyibenzeensulfonaten die commercieel verkrijgbaar zijn onder de handelsnaam Nansa®, verkrijgbaar bij Albright & Wilson.

Met lineair alkylsulfonaat wordt hier een niet-gesubstitueerd alkylsulfonaat bedoeld waarbij de alkylketen uit 6 tot 18 koolstofatomen bestaat, bij voorkeur 8 tot 16 koolstofatomen en nog liever 10 tot 16 koolstofatomen, en waarbij deze alkylketen aan één uiteinde is gesulfoneerd.

BE2017/5431

Geschikte gealkoxyleerd sulfonaat-oppervlakteactieve stoffen voor gebruik hierin hebben de formule R(A)_mSO3M, waarbij R een niet-gesubstitueerde Ce-Cis alkyl·, hydroxyaikyl· of alkylarylgroep is met een lineaire of vertakte Ce-Cie alkylcomponent, bij voorkeur een C₈-Ci₆ alkyl of hydroxyaikyl, nog liever Ci2“Ci6 alkyl of hydroxyaikyl, en A een ethoxy- of propoxy- of butoxy-een heid is, en m groter is dan nul, gewoonlijk tussen 0,5 en 6, liever tussen 0,5 en 3, en M staat voor H of een kation, hetgeen bijvoorbeeld een metaalkation (bijv, natrium, kalium, lithium, calcium, magnesium, enz.), ammonium of gesubstitueerd ammoniumkation kan zijn. Alkylgeëthoxyleerde sulfonaten, alkylgebutoxyleerde sulfonaten evenals alkylgepropoxyleerde sulfonaten worden hierin overwogen. Specifieke voorbeelden van gesubstitueerde ammoniumkationen omvatten methyl-, dimethyl-, trimethylammonium- en quaternaire ammoniumkationen, zoals tétraméthylammonium, dimethyipiperdinium en kationen die zijn afgeleid van alkanolaminen zoals ethylamine, di-ethyiamine, triethylamine, mengsels daarvan, en dergelijke.

Voorbeelden van oppervlakteactieve stoffen zijn C12-C18 alkylpolyethoxylaat (1.0) sulfonaat (Ci2-Ci₈E(1.0)SM), C12-C18 alkylpolyethoxylaat (2.25) sulfonaat (C12Ci₈E(2.25)SM), C12-C18 alkylpolyethoxylaat (3.0) sulfonaat (Ci₂-Ci₈E(3.0)SM), en C12-C18 alkylpolyethoxylaat (4.0) sulfonaat (Ci2-Ci₈E(4.0)SM), waarbij M naar behoefte wordt gekozen uit natrium en kalium. In het bijzonder geschikte gealkoxyleerde sulfonaten omvatten alkylarylpolyethersulfonaten, zoals Triton X200®, commercieel verkrijgbaar bij Dow Chemical.

Bij voorkeur wordt de betreffende gesulfateerde of gesulfoneerde anionogene oppervlakteactief stof voor gebruik hierin gekozen uit de groep die bestaat uit alkylsulfaten (AS), het liefst C12, C13, C« en Cis AS, het natriumzout van lineair alkylsulfonaat (NaLAS), natriumparaffinesulfonaat NaPCi2-ieS, en mengsels hiervan. Het geniet de meeste voorkeur dat de gesulfateerde of gesulfoneerde anionogene oppervlakteactief stof voor gebruik hierin wordt gekozen uit de groep die bestaat uit alkylsulfaten (AS), het liefst C12, C13, C14 en Cis AS, het natriumzout van lineair alkylsulfonaat (NaLAS), natriumparaffinesulfonaat NaPC^-ieS, en mengsels hiervan.

Gewoonlijk kan het microbieel consortium worden geleverd als onderdeel van een vloeibare samenstelling die 0,5% tot 9,5% op gewichtsbasis van de totale samenstelling kan bevatten van de betreffende gesulfateerde of gesulfoneerde anionogene oppervlakteactieve stof, bij voorkeur 1,0% tot 5,0%, liever 1,5% tot 3,5% en het liefst 2,0% tot 3,0%.

BE2017/5431

Het microbieei consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die 0,02% tot 10% op gewichtsbasis aan anionogene oppervlakteactieve stof kan bevatten, bijvoorbeeld 0,05% tot 5% of 0,2% tot 5%, of 0,3% tot 2%, of 0,4% tot 1%.

Het microbieei consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere vetzuren als antischuimmiddelen kan bevatten. Geschikte vetzuren omvatten de alkalizouten van een C8-C24 vetzuur. Dergelijke alkalizouten omvatten de volledig verzadigde metaalzouten zoals natrium-, kalium- en/of lithiumzouten evenals de ammonium- en/of alkylammoniumzouten van vetzuren, bij 10 voorkeur het natriumzout. Het vetzuur kan lineair of vertakt zijn. Geschikte lineaire vetzuren voor gebruik hierin bevatten 8 tot 22, bij voorkeur 8 tot 20 en nog liever 8 tot 18 koolstofatomen. Geschikte vetzuren kunnen worden gekozen uit caprylzuur, caprinezuur, laurinezuur, myristinezuur, palmitinezuur, stearinezuur, oleïnezuur en mengsels van vetzuren die voldoende zijn gehard, afgeleid van natuurlijke bronnen 15 zoals plantaardige of dierlijke esters (bijv, palmolie, olijfolie, kokosnootolie, sojaolie, ricinusolie, talg, aardolie, walvis- en visolie en/of babassu-olie). Zo is bijvoorbeeld kokosnootvetzuur commercieel verkrijgbaar bij KLK OLEA onder de naam PALMERAB1211.

Het microbieei consortium kan worden geleverd ais een samenstelling die tot 6,0% op gewichtsbasis van de totale samenstelling aan genoemd vetzuur kan bevatten, bij voorkeur 0,1% tot 3,0%, nog liever 0,1% tot 2,0% en het liefst 0,15% tot 1,5% op gewichtsbasis van de totale samenstelling van het genoemde vetzuur.

Het microbieei consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die kan bestaan uit één of meerdere emuigatoren die zijn gekozen uit de groep van natuurlijke verbindingen, zoals alginaten, carrageenangommen, glycerolen en wassen; alcoholen, esters van elke oorsprong of diverse chemische stoffen die zijn gerelateerd aan galzouten. De aanwezigheid van micro-organismen gaat vaak gepaard met een onaangename en/of ongewenste geur. Het microbieei consortium 30 kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere geurbestrijdende middelen kan bevatten. Dergelijke geurbestrijdende middelen kunnen middelen omvatten die dergelijke onaangename en/of ongewenste geuren neutraliseren en/of de geurbestrijdende middelen kunnen middelen omvatten die een meer gewenste geur veroorzaken of geven aan de samenstelling die het microbieei 35 consortium omvat.

BE2017/5431

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere geurbestrijdende middelen kan omvatten die kunnen worden gekozen uit de groep van natuurlijke oliën en parfums en geuren, chemicaliën die geurverbindingen adsorberen of afvangen, zoals zeolieten, cyclodextrlnes, synthetische esters of ethers en andere configuraties die geuren kunnen maskeren.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere verdikkingsmiddelen bevat. Een verhoogde viscositeit, in combinatie met een detersieve oppervlakteactieve stof, zorgt voor een langere contacttijd en daardoor een verbeterde doordringing van vettige grond en/of deeltjesachtige vettige grond om de reinigingseffectiviteit te verbeteren, vooral bij onverdund aanbrengen op het te behandelen oppervlak. Bovendien verbetert een verhoogde viscositeit, en in het bijzonder een hoge viscositeit met lage afschuifkrachten, de f'asestabiliteit van de vloeibare samenstelling. Derhalve kan de samenstelling die een verdikkingsmiddel bevat een viscositeit hebben van 50 Pa.s tot 650 Pa.s, liever 100 Pa.s tot 550 Pa.s en het liefst 150 Pa.s tot 450 Pa.s, bij 20 °C, zoals gemeten met een AD1000 Advanced Rheometer van Atlas® bij een afschuifsnelheid van 10 s’¹ met een kegelas van 40 mm met een kegelhoek van 2° en een afkapping van ± 60pm.

Geschikte verdikkingsmiddelen omvatten polymeren op basis van polyacrylaat, bij voorkeur hydrofoob gemodificeerde polyacrylaatpolymeren; hydroxylethylcellulose, bij voorkeur hydrofoob gemodificeerde hydroxylethylcellulose, xanthaangom, gehydrogeneerde ricinusolie (HCO) en mengsels daarvan.

Verdikkingsmiddelen die de voorkeur hebben zijn polymeren op basis van polyacrylaat, bij voorkeur hydrofoob gemodificeerde polyacrylaatpolymeren. Het betreft bij voorkeur een wateroplosbaar copolymeer dat gebaseerd is op de hoofdmonomeren acrylzuur, acrylzuuresters, vinylacetaat, methacrylzuur, acrylonitriI en mengsels daarvan, en nog liever een copolymeer dat is gebaseerd op methacrylzuur- en acrylzuuresters met het voorkomen van melkachtige dispersies met een lage viscositeit. Het hydrologisch gemodificeerde polyacrylaatpolymeer dat de meeste voorkeur verdient, is Rheovis® AT 120, dat commercieel verkrijgbaar is bij BASF.

Andere geschikte verdikkingsmiddelen zijn hydroxylcelluloses (HM-HEC), bij voorkeur hydrofoob gemodificeerde hydroxyethylcellulose. Geschikte hydroxethylcelluloses (HM-HEC) zijn commercieel verkrijgbaar bij Aqualon/Hercules onder de productnaam Polysurf 76® en W301 van 3V Sigma.

BE2017/5431

Xanthaangom is een geschikt verdikkingsmiddel dat hierin wordt gebruikt. Xanthaangom is een polysaccharide en wordt veel gebruikt ais modifcator van stromingseigenschappen en als stabilisator. Xanthaangom wordt geproduceerd door fermentatie van glucose of sucrose door de bacterie Xanthomonas campestris. Geschikte xanthaangom is commercieel verkrijgbaar onder de handelsnaam Kelzan T® bij CP Kelco.

Gehydrogeneerde ricinusolie is een geschikt verdikkingsmiddel dat hierin wordt gebruikt. Geschikte gehydrogeneerde ricinusolie is verkrijgbaar onder de handelsnaam THIXCÎN R bij Elementis.

Bij gebruik kan de vloeibare samenstelling 0,1% tot 10,0% op gewichtsbasis van de totale samenstelling bevatten van het betreffende verdikkingsmiddel, bij voorkeur 0,2% tot 5,0%, liever 0,2% tot 2,5% en het liefst 0,2% tot 2,0%.

Het microbieei consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die één of meerdere chelaatvormers of één of meerdere kristalgroeiremmers kan bevatten. Geschikte chelaatvormers, in combinatie met het systeem aan oppervlakteactieve stoffen, verbeteren de glans. Een chelaatvormer kan in de samenstellingen worden opgenomen in hoeveelheden die variëren van 0,05% tot 5,0% van de samenstelling op basis van gewicht, bij voorkeur van 0,1% tot 3,0%, nog liever van 0,2% tot 2,0% en het liefst van 0,2% tot 0,4%.

Geschikte chelaatvormers op basis van fosfonaat omvatten ethyleendiaminetetramethyleenfosfonaten en diethyleentriaminepentamethyleenfosfonaten (DTPMP). De fosfonaatverbindingen kunnen aanwezig zijn in hun zuurvorm of als zouten van verschillende Rationen op sommige of alle van hun zuurgroepen. De chelaatvormer op basis van fosfonaat die de voorkeur verdient voor gebruik hierin, is dl·· ethyleentriaminepentamethyieenfosfonaat (DTPMP). Dergelijke chelaatvormers op basis van fosfonaat zijn commercieel verkrijgbaar bij Monsanto onder de handelsnaam DEQUEST®.

Een geprefereerde biologisch afbreekbare chelaatvormer voor gebruik hierin, is ethyleendiamine-N,N'-disuccinezuur, of alkalimetaal-, of aardalkalimetaal··, ammonium- of gesubstitueerde ammoniumzouten daarvan of mengsels daarvan. Ethyleendiamine-N,N'-disuccinezuren, in het bijzonder het (S,S)-isomeer, zijn uitvoerig beschreven in het Amerikaanse octrooi 4, 704, 233 van 3 november 1987, toegekend aan Hartman en Perkins. Ethyleendiamine-N,N'-disuccinezuur is bijvoorbeeld commercieel verkrijgbaar onder de handelsnaam (S,S)EDDS® bij Palmer Research Laboratories. De biologisch afbreekbare chelaatvormer die de

BE2017/5431 meeste voorkeur verdient, is L-giutaminezuur-N,N-diazijnzuur (GLDA), commercieel verkrijgbaar onder de handelsnaam Dissoivine 47S bij Akzo Nobel.

Geschikte aminocarboxylaten voor gebruik hierin omvatten ethyleendiaminetetraacetaten, di-ethyleentriaminepenta-acetaten, di-ethyieentriaminepenta-acetaat 5 (DTPA), N-hydroxyethylethyleendiaminetriacetaten, nitrilotriacetaten, ethyleendiaminetetrapropionaten, tri-ethyleentetra-aminehexa-acetaten, ethanoldigiyclnes en methylglycinediazijnzuur (MGDA), zowei in hun zure vorm als in de vorm van hun alkalimetaai-, ammonium- en gesubstitueerde ammoniumzouten.

Een aminocarboxylaat dat in het bijzonder geschikt is voor gebruik hierin is 10 propyieendiaminetetra-azijnzuur (PDTA), dat bijvoorbeeld commercieel verkrijgbaar is bij BASF onder de handelsnaam Trilon FS® en methylglycinedi-azijnzuur (MGDA).

Het aminocarboxylaat dat de meeste voorkeur verdient voor gebruik hierin, is diethyleentriaminepenta-acetaat (DTPA) van BASF. Andere chelaatvormers op basis van carboxylaat voor gebruik hierin omvatten salicylzuur, asparaginezuur, 15 glutaminezuur, glycine, malonzuur of mengsels daarvan.

Het microbieel consortium kan worden geleverd ais onderdeel van een formulering die één of meerdere verbindingen kan omvatten die het uiterlijk van een oppervlak waarop de formulering wordt aangebracht kunnen verbeteren. Nog liever wordt een microbieel consortium geleverd ais een formulering die één of meerdere verbindingen 20 bevat die gekozen zijn uit de groep van metaalcomplexvormers zoals polyfosfaten, EDTA, EDDS, NTA, hydroxycarbonzuren en fosfonaten.

Het microbieel consortium kan worden geleverd ais onderdeel van een samenstelling die een polymeer kan bevatten. Er is gebleken dat de toevoeging van een specifiek polymeer zoals hier beschreven, wanneer aanwezig, een verdere verbetering van de 25 prestaties van het microbieel consortium op het gebied van vetverwijdering mogelijk maakt, vanwege de specifieke schuimeigenschappen die zij aan de samenstelling verlenen. Geschikte polymeren voor gebruik hierin worden beschreven in de met elkaar samenhangende EP-octrooiaanvraag EP2272942 (09164872.5) en het verleende Europese octrooi EP2025743 (07113156.9).

Het polymeer kan worden gekozen uit de groep die bestaat uit: een vinylpyrrolldonhomopoiymeer (PVP); een polyethyleenglycoldimethylether (DMPEG); een vinylpyrrolidon/dialkylaminoalkylacrylaat of methacrylaatcopolymeren; een polystyreensulfonaatpolymeer (PSS); een polyvinylpyridine-N-oxide (PVNO); een polyvinylpyrrolidon/vinylimidazoolcopolymeer (PVP-VI); een polyvinylpyrrolidon/polyacrylzuurcopolymeer (PVP-AA); een polyvinylpyrrolidon/vinylacetaatcopolymeer (PVP-VA); een polyacrylpolymeer of

BE2017/5431 poiyacrylmaleïnecopolymeer; en een copoiymeer met een polyacryl- of polyacrylmaleïnefosfono-eindgroep; een copoiymeer dat EO- en PO-groepen omvat; en mengsels daarvan.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die 0,005% tot 5,0% op gewichtsbasis van de totale samenstelling kan bevatten aan het betreffende polymeer, bij voorkeur 0,10% tot 4,0%, liever 0,1% tot 3,0% en het liefst 0,20% tot 1,0%.

Het microbieel consortium kan worden geleverd met een oplosmiddel. Geschikte oplosmiddelen kunnen worden gekozen uit de groep die bestaat uit: ethers en diethers met 4 tot 14 koolstofatomen; glycolen of gealkoxyleerde glycolen; geaikoxyleerde aromatische alcoholen; aromatische alcoholen; gealkoxyleerde alifatische alcoholen; alifatische alcoholen; Cg-C« alkyl·· en cycloalkylkool waterstoffen en halogeenkool waterstoffen; Cg-Cis glycolethers; terpenen; en mengsels daarvan.

Het microbieel consortium wordt bij voorkeur geleverd als onderdeel van een samenstelling die een parfum kan bevatten. Geschikte parfums bieden een olfactorisch esthetisch voordeel en/of maskeren een chemische geur die het product kan hebben.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die kan bestaan uit een verscheidenheid aan andere optionele stoffen, afhankelijk van het beoogde technische voordeel en het behandelde oppervlak. Geschikte optionele stoffen voor gebruik hierin omvatten buffers, bactericiden, hydrotropen, kleurstoffen, stabilisatoren, radicaalvangers, schuurmiddelen, vlekoplossers, witmakers, stofwerende middelen, dispergeermiddelen, kleurafgifteremmers, pigmenten, siliconen en/of kleurstoffen.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een waterige samenstelling, die derhalve water bevat. Een dergelijke samenstelling kan 50% tot 98% op gewichtsbasis aan water bevatten, nog liever 75% tot 97%, en het liefst 80% tot 97%.

De selectie van één of meerdere specifieke additieven, zoals hierboven genoemd, kan gebaseerd zijn op de samenstelling van het microbieel consortium, en meer in het bijzonder op de identiteit van de stammen die aanwezig zijn in het microbieel consortium, en nog meer in het bijzonder op de optimale en/of minimale groeivoorwaarden van stammen waaruit het genoemde microbieel consortium is samengesteld.

BE2017/5431

Het microbieel consortium kan worden geleverd als een samenstelling die geschikt kan zijn voor het reinigen van harde oppervlakken of textiel.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van samenstellingen voor harde oppervlaktebehandeling die worden gebruikt voor het reinigen en 5 behandelen van harde oppervlakken. Bij voorkeur kan een dergelijke samenstelling voor harde oppervlaktebehandeling geformuleerd worden als een samenstelling voor harde oppervlaktebehandeling voor alle doeleinden. Dat wil zeggen dat de samenstelling voor harde oppervlaktebehandeling is geformuleerd om geschikt te zijn voor het reinigen van zoveel mogelijk verschillende soorten oppervlakken. 10 Samenstellingen voor harde oppervlaktebehandeling worden gewoonlijk voorafgaand aan het gebruik verdund in een emmer voordat ze worden aangebracht op het te behandelen oppervlak met behulp van een dweil, spons, doek of een vergelijkbaar hulpmiddel. Als alternatief kunnen ze in onverdunde vorm direct op het oppervlak aangebracht worden, bijvoorbeeld door gebruik te maken van een spons of een 15 spuitapparaat.

Met samenstelling voor harde oppervlaktebehandeling wordt hier een samenstelling bedoeld voor het behandelen van harde oppervlakken die in het huishouden worden aangetroffen, in het bijzonder in particuliere huishoudens. Te behandelen oppervlakken omvatten keukens en badkamers, bijv, vloeren, muren, tegels, ramen, 20 kasten, aanrechten, douches, plastic douchegordijnen, wastafels, WC's, armaturen en dergelijke, gemaakt van verschillende materialen zoals keramiek, vinyl, 'no-wax'vinyl, linoleum, melamine, glas, staal, keukenwerkoppervlakken, elke kunststof, geplastificeerd hout, metaal of elk geverfd of gelakt of afgedicht oppervlak en dergelijke. Harde huishoudelijke oppervlakken omvatten ook huishoudelijke 25 apparaten waaronder, maar niet beperkt tot, koelkasten, diepvriezers, wasmachines, automatische drogers, ovens, magnetronovens, vaatwassers, enzovoort. Dergelijke harde oppervlakken kunnen zowel in particuliere huishoudens als in commerciële, institutionele en industriële omgevingen worden aangetroffen. Samenstellingen voor harde oppervlaktebehandeling worden gewoonlijk geformuleerd om ook voor 30 reiniging te zorgen. Als zodanig bevatten zij gewoonlijk een detersieve oppervlakteactieve stof of oplosmiddel.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling voor textielbehandeling. Samenstellingen voor textielbehandeling verwijzen naar elke textielbehandelingssamenstelling die in staat is om textiel te behandelen, zoals 35 stof, bekleding en dergelijke. Textiel kan geweven of niet-geweven zijn en is gewoonlijk flexibel. Geweven textiel omvat stoffen die uit natuurlijke vezels zoals

BE2017/5431 katoen bestaan, stoffen die uit synthetische vezels zoals polyester bestaan, en stoffen die uit een combinatie van natuurlijke en synthetische vezels bestaan. Niet-geweven textiel omvat stoffen die zijn gemaakt van korte en lange vezels (continu lang), gebonden door chemische, mechanische, hitte- of oplosmiddelbehandeiing, evenals 5 andere textieistoffen zoals degene die afgeleid zijn van natuurlijk ieder en/of kunstleer, sponsen en dergelijke. Dergelijke samenstellingen kunnen op het textiel worden aangebracht in een wasmachine (bijvoorbeeld tijdens de wascyclus, maar bij voorkeur gedurende een spoelcydus), tijdens de handwas of door direct aanbrengers op het textiel, zoals door het gebruik van een spray. Samenstellingen voor 10 textielbehandeiing worden gewoonlijk geformuleerd om ook voor reiniging te zorgen.

Als zodanig bevatten zij gewoonlijk een detersieve oppervlakteactieve stof of oplosmiddel.

Het microbieel consortium kan ook worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die geschikt is voor het reinigen van zowel harde oppervlakkers als 15 textiel.

Het microbieel consortium or een samenstelling omvattende het microbieel consortium kan worden geformuleerd voor gebruik als een spray.

Het microbieel consortium kan worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die verpakt kan zijn in een verscheidenheid aan geschikte verpakkingen die bekend 2.0 zijn bij een deskundige in dit vakgebied. De houder kan van kunststofmaterialen zijn gesTsaakt. De samenstelling kan verpakt worden in conventionele kunststofflessen voor wasmiddelen. De samenstelling kan in geconcentreerde vorm zijn en kan geschikt zijn om verdund te worden, bijvoorbeeld 15 keer voor gebruik. Bij voorkeur wordt de samenstelling verpakt in een spraydispenser, zoals een sproeiflacon of 25 pompspraydispenser. Het microbieel consortium dat wordt geleverd als onderdeel van samenstellingen hierin, kan verpakt worden in handmatig of elektrisch bediende spraydispenserhouders.

Dienovereenkomstig kan het microbieel consortium van de onderhavige uitvinding worden geleverd als onderdeel van een samenstelling die is opgenomen in een 30 spraydispenser, bij voorkeur in een sproeiflacon of pompspraydispenser.

De genoemde spraydispensers makers een gelijkmatige aanbrenging mogelijk op eers relatief groot gebied van het oppervlak dat met het microbieel consortium moet worden behandeld. Dergelijke spraydispensers zijn in het bijzonder geschikt orsi schuine of' verticale oppervlakken te reinigen. Spraydispensers zorgen voor eers 35 gemakkelijke, veilige en nauwkeurige hantering, toepassing en gebruik van het

BE2017/5431 microbieel consortium. Bovendien maakt een microbieel consortium dat wordt geleverd als een samenstelling voor gebruik als een spray het mogelijk om het microbieel consortium goed belucht en gelijkmatig verdeeld aan te brengen op een oppervlak, object en/of gebied. Daarnaast zijn spraydispensers bijzonder geschikt 5 voor de behandeling van stoffen.

Geschikte spraydispensers voor gebruik volgens de onderhavige uitvinding omvatten handmatig bediende sproeiflacontype schuimdispensers die bijvoorbeeld verkocht worden door Specialty Packaging Products, Inc. of Continental Sprayers, Inc. Deze typen dispensers zijn bijvoorbeeld beschreven in US-4,701,.311, toegekend aan 10 Dunnining et al., en US-4,646,973 en US-4,538,745, beide toegekend aan Focarracci.

Voor gebruik hierin wordt in het bijzonder de voorkeur gegeven aan spraydispensers zoals de T 8500®, commercieel verkrijgbaar bij Continental Spray International, of de T 8100®, commercieel verkrijgbaar bij Canyon, Noord-Ierland. In een dergelijke dispenser wordt de vloeibare samenstelling verdeeld in fijne vloeistofdruppels, wat 15 resulteert in een spray die op het te behandelen oppervlak wordt gericht. In een dergelijke spraydispenser wordt een samenstelling die in de houder van de genoemde dispenser aanwezig is door de spraydispenserkop geleid via energie die door de gebruiker aan een pompmechanisme wordt gecommuniceerd, wanneer de gebruiker het betreffende pompmechanisme activeert. Meer in het bijzonder wordt een 20 samenstelling in deze spraydispenserkop tegen een obstakel geduwd, bijv, een rooster of een kegel of iets dergelijks, waardoor stoten worden gegeven om te helpen om een microbieel consortium dat kan worden geleverd ais een samenstelling te atomiseren, d.w.z. om te helpen vloeistofdruppels te vormen.

De onderhavige uitvinding heeft ook betrekking op het gebruik van een microbieel 25 consortium volgens de uitvinding om de groei, verspreiding en overleving van één of meerdere ongewenste microbiële organismen op een oppervlak te onderdrukken. De onderhavige uitvinding heeft bijvoorbeeld betrekking op het gebruik van een microbieel consortium om de groei en overleving van microbiële organismen die nietGRAS zijn op een oppervlak te onderdrukken.

In veel situaties is de aanwezigheid van bepaalde micro-organismen nadelig of ongewenst. Vooral de aanwezigheid van microbiële organismen die niet-GRAS zijn is ongewenst, aangezien deze micro-organismen een negatief effect kunnen hebben op hogere organismen. Als gevolg daarvan zijn verschillende methoden en toepassingen ontwikkeld om ongewenste organismen en/of organismen die niet-GRAS zijn .35 afdoende te verwijderen, bijvoorbeeld van oppervlakken. De methoden en/of toepassingen die momenteel in de techniek beschreven worden, slagen er echter niet

BE2017/5431 in om vooreen efficiënte en langdurige verwijdering van dergelijke micro-organismen te zorgen. Een eerste probleem in de huidige techniek heeft betrekking op het onvermogen van de momenteel beschikbare benaderingen om biofilms, die aanwezige ongewenste microbiële organismen beschermen, adequaat en efficiënt te 5 verbreken. Een tweede aspect is dat de huidige benaderingen er onvoldoende in slagen om sporen die worden geproduceerd door de desbetreffende ongewenste micro-organismen te inactiveren en/of verwijderen. Bovendien zorgen de huidige benaderingen slechts voor een tijdelijke verwijdering van dergelijke ongewenste micro-organismen. Meer in het bijzonder omvatten de huidige benaderingen 10 ontsmetting van een oppervlak, maar omvatten zij geen preventie of' behandeling van verontreiniging door ongewenste micro-organismen na ontsmetting van het behandelde oppervlak.

Bovendien bevatten chemische benaderingen vaak giftige of schadelijke bestanddelen, geven ze onaangename geuren af en kunnen ze zorgen voor ont- of 15 verkleuring van een oppervlak of voorwerp waarop ze worden aangebracht. In plaats daarvan voorziet de onderhavige uitvinding in een efficiënte aanpak zonder dergelijke negatieve effecten.

Het gebruik van een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding biedt een langdurige en efficiënte onderdrukking van de groei en overleving van 20 ongewenste micro-organismen, zoals bijvoorbeeld micro-organismen die niet-GRAS zijn.

Meer in het bijzonder maakt de toepassing van een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding het mogelijk om een oppervlak te bevolken met het microbieel consortium. Het microbieel consortium bestaat bij voorkeur uit GRAS25 stammen die - ten eerste - in staat zijn tot het verbreken van een biofiim die aanwezig is op het betreffende oppervlak, bij voorkeur door middel van enzymen. Op die manier worden ongewenste micro-organismen die zijn ingesloten en worden beschermd door een dergelijke biofiim meer blootgesteld en kwetsbaar. Ten tweede maakt het gebruik of aanbrengen van een microbieel consortium volgens de 30 onderhavige uitvinding het mogelijk om een oppervlak te bevolken met een microbieel consortium. Zoals hierboven vermeld, bestaat het betreffende microbieel consortium uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die GRAS zijn en één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van deze één of meerdere ammoniumoxiderende stammen. De betreffende één of meerdere .35 ammoniumoxiderende stammen produceren complexe organische verbindingen die kunnen dienen als voedingsstoffen voor de betreffende één of meerdere commensale

BE2017/5431 stammen. Als gevolg hiervan zullen de betreffende één of meerdere commensale stammen snel groeien, en zuilen na verloop van tijd één of meerdere commensale stammen op het oppervlak floreren. Het floreren van de één of meerdere commensale stammen ontneemt ruimte en voedingsstoffen op het oppervlak aan andere stammen 5 en zorgt zodoende voor verhongering van andere - ongewenste - stammen die aanwezig zijn op het oppervlak. Derhalve veroorzaakt het gebruik of aanbrengen van een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding voor het floreren van de één of meerdere commensale stammen, wat op zijn beurt resulteert in de competitieve uitsluiting van andere, ongewenste microbiële stammen van het 10 oppervlak.

Uiteraard zit er enige tijd tussen het toepassen van een microbieei consortium, het floreren van de één of meerdere commensale stammen en/of de depletie van ongewenste stammen op het oppervlak.

Bij voorkeur zorgt het gebruik of aanbrengen van een microbieei consortium volgens 15 de onderhavige uitvinding voor het floreren van de één of meerdere commensale stammen die aanwezig zijn in het microbieei consortium binnen twee dagen, bij voorkeur binnen één dag, liever binnen 12 uur, nog liever binnen 6 uur en het liefst één uur na gebruik of toepassing van het betreffende consortium. De lengte van deze periode is afhankelijk van de samenstelling van het microbieei consortium en/of de 20 samenstelling van een formulering daarvan. Bij voorkeur hangt de lengte van genoemde periode voornamelijk af van de populatiedichtheid en -verhouding van het microbieei consortium.

Het floreren van de één of meerdere commensale stammen op een oppervlak houdt aan gedurende een langere periode. Ten gevolge hiervan wordt een oppervlak 25 waarop een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding is aangebracht, gedurende een langere tijdsperiode beschermd tegen ongewenste groei en aanzienlijke overleving van ongewenste micro-organismen. Het gebruik of aanbrengen van een microbieei consortium volgens de uitvinding op een oppervlak onderdrukt zelfs de groei en overleving van ongewenste micro-organismen die na het 30 aanbrengen van het microbieei consortium in contact komen met het oppervlak of dit verontreinigen. Op deze manier maakt het gebruik of aanbrengen van een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding het mogelijk om gedurende langere tijd ongewenste micro-organismen te voorkomen. De periode waarin een oppervlak beschermd is, hangt af van de beschikbaarheid van voedingsstoffen en .35 ruimte op dat oppervlak, van de omgevingsomstandigheden en de aanwezigheid van concurrerende stammen in de omgeving, en van de verhouding, samenstelling en

BE2017/5431 dichtheid van het microbieel consortium, dat kan worden geleverd ais een formulering.

Bij voorkeur wordt een oppervlak waarop een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding is aangebracht, beschermd tegen ongewenste micro5 organismen totdat de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen ook competitief uitgesloten worden van het oppervlak, zodat er niet voldoende hoeveelheden voedingsstoffen meer zijn om het floreren van de één of meerdere commensale micro-organismen te handhaven. Bij voorkeur wordt een oppervlak waarop een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding wordt gebruikt, 10 voldoende beschermd tegen ongewenste micro-organismen gedurende ten minste 1 dag, bij voorkeur tenminste 2 dagen, liever ten minste 7 dagen, en het liefst tenminste 14 dagen.

Het zal voor een deskundig persoon duidelijk zijn dat een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan worden geleverd als een formulering, zoals 15 een reinigingsformulering.

De toepassing of het gebruik van een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan de groei en overleving onderdrukken van één of meerdere microorganismen die niet-GRAS zijn, geselecteerd uit de groep van Escherichia coli, Enterococcus faecalis en Pseudomonas aeruginosa.

Het microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding kan worden gebruikt voor het onderdrukken van de groei en overleving van ongewenste microorganismen, bij voorkeur micro-organismen die niet-GRAS zijn, op zowel harde als zachte oppervlakken. Als zodanig kan microbiële herkolonisatie van een oppervlak worden bereikt, door het behandelen van de oppervlakte met het microbieel 25 consortium, bijvoorbeeld door het leveren van een samenstelling voor oppervlaktebehandeling die het microbieei consortium bevat en het aanbrengen van de betreffende samenstelling op een oppervlak. Ais zodanig wordt hierin een methode gegeven, waarbij deze methode bestaat uit de volgende stap: het aanbrengen van het microbieel consortium, bijvoorbeeld ais deel van een samenstelling voor 30 oppervlaktebehandeling, op een hard oppervlak of textiel, waarbij het microbieel consortium bestaat uit:

a) één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die algemeen erkend als veilig (GRAS) zijn, gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum;

en

b) één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die zijn gekozen uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus.

Het resultaat van deze methode is dat het oppervlak wordt bevolkt door het microbieel consortium. Het microbieel consortium of de samenstelling die het microbieel consortium bevat kan in onverdunde of verdunde vorm worden aangebracht. Bij voorkeur wordt de samenstelling voor oppervlaktebehandeling toegepast als een spray, om voor een gelijkmatige verdeling over het harde oppervlak of textiel te zorgen. Het microbieel consortium of de samenstelling die het microbieel consortium bevat wordt bij voorkeur gedurende ten minste 1 uur op het harde oppervlak of' textiel achtergelaten, bij voorkeur ten minste 4 uur, liever ten minste 12 uur, het liefst ten minste 24 uur. Optioneel kan het microbieel consortium of de samenstelling die het microbieel consortium bevat vervolgens opnieuw worden aangebracht en op het harde oppervlak of textiel worden achtergelaten gedurende een extra periode van ten minste 1 uur, bij voorkeur ten minste 4 uur, nog liever ten minste 12 uur, en het liefst ten minste 24 uur, om populatie van het behandelde harde oppervlak of textiel door het microbieel consortium te bevorderen.

Voordat de samenstelling voor oppervlaktebehandeling wordt aangebracht, kan het harde oppervlak of textiel worden voorbehandeld. Een geschikte voorbehandeling van het harde oppervlak of textiel omvat: afvegen, bijvoorbeeld met een schone doek; bevochtigen; reinigen; en combinaties daarvan. Bevochten, reinigen en combinaties daarvan hebben in het bijzonder de voorkeur.

Er is gebleken dat het bevochtigen van het oppervlak of textiel voordat het microbieel consortium of de samenstelling die het microbieel consortium bevat wordt aangebracht de verdeling en verspreiding van het microbioom op het behandelde harde oppervlak of textiel verbetert.

Er is gebleken dat het reinigen van het oppervlak of textiel voordat het microbieel consortium of de samenstelling die het microbieel consortium bevat wordt aangebracht de groei, verspreiding en overleving van het microbieel consortium op het behandelde oppervlak of textiel verbetert. Er wordt aangenomen dat het reinigen van het oppervlak of textiel zorgt voor vermindering of eliminatie van de aanwezige microben op het oppervlak voorafgaand aan het aanbrengen van de samenstelling voor oppervlaktebehandeling die de microbiële consortia omvat. Als gevolg hiervan is er minder concurrentie voor de microbiële consortia na het aanbrengen van het

BE2017/5431

BE2017/5431 microbieel consortium of de samenstelling, waardoor het makkelijker is voor de microbiële consortia om zich te vestigen op het behandelde harde oppervlak of textiel. Zelfs reiniging met water (zoals het afvegen met een vochtige schone doek) kan de microbiële populatie op het te behandelen oppervlak of textiel verminderen. Het gebruik van een reinigingssamenstelling die een detersieve oppervlakteactieve stof bevat, is effectiever om de microbiële populatie op het te behandelen oppervlak of textiel te verminderen. De meeste voorkeur verdient het om een antimicrobiële samenstelling, zoals een antimicrobiële reinigingssamenstelling voor harde oppervlakken of bleekmiddel te gebruiken, aangezien deze vrijwel alle microben verwijderen van het te behandelen harde oppervlak of textiel.

Als derde aspect wordt een methode voor microbiële herkolonisatie van een oppervlak verschaft, waarbij de methode bestaat uit de stappen van het leveren van een microbieel consortium volgens de onderhavige uitvinding en het aanbrengen van het desbetreffende microbieel consortium op een oppervlak.

Het zal voor een deskundig persoon duidelijk zijn dat het microbieel consortium kan worden geleverd als een formulering, zoals een waterige samenstelling of een waterige suspensie.

Het aanbrengen van het geleverde microbieel consortium op een oppervlak maakt het mogelijk voor de één of meerdere commensale stammen om op het oppervlak te floreren, zoals hierboven vermeld. Op zijn beurt zorgt dit voor verhongering en competitieve uitsluiting van andere micro-organismen die aanwezig zijn op het oppervlak. Als gevolg hiervan vindt herkolonisatie van het oppervlak door het microbieel consortium plaats.

Vanwege de minder efficiënte koolstoffixatie van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen in vergelijking met de één of meerdere commensale stammen zullen de ammoniumoxiderende stammen - na verloop van tijd competitief uitgesloten worden van groei op het oppervlak door de één of meerdere commensale stammen. Op zijn beurt zal dit resulteren in depletie van de complexe organische verbindingen die worden geproduceerd door de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen en die als voedingsstoffen dienen voor de één of meerdere commensale stammen.

In een andere geprefereerde uitvoeringsvorm zijn één of meerdere van de commensale stammen van een microbieel consortium in staat om te groeien en overleven op vuil en bestanddelen die het oppervlak verontreinigen. Op deze wijze zorgt een methode volgens de onderhavige uitvinding voor herkolonisatie van een oppervlak gedurende een langere periode.

In een andere geprefereerde uitvoeringsvorm kunnen één of meerdere ammoniumoxiderende stammen worden aangebracht op het geherkoloniseerde oppervlak om voedingsstoffen te verschaffen aan de één of meerdere commensale stammen en derhalve om de herkolonisatie van het betreffende oppervlak te continueren.

In een andere uitvoeringsvorm wordt een microbieei consortium volgens de onderhavige uitvinding met regelmatige intervallen aangebracht op het oppervlak voor herkolonisatie van het betreffende oppervlak.

Een methode voor herkolonisatie van een oppervlak volgens de hier verstrekte informatie maakt het onderdrukken, de depletie en/of verwijdering van één of meerdere ongewenste micro-organismen mogeiijk, zoals micro-organismen die nietGRAS zijn. Derhalve kan een methode volgens de onderhavige uitvinding worden uitgevoerd als een reinigingsmethode.

In een geprefereerde uitvoeringsvorm wordt de hoeveelheid van het microbieei consortium die op een oppervlak moet worden aangebracht bepaald op basis van de samenstelling van het geleverde microbieei consortium - in het bijzonder de populatiedichtheid, de eigenschappen van het microbieei consortium en de verhouding van de hoeveelheid cellen van ammoniumoxiderende stammen ten opzichte van de hoeveelheid cellen van één of meerdere commensale stammen - en de omgeving waarin het oppervlak zich bevindt. Vooreen oppervlak in meer vijandige of competitieve omgevingen of omgevingen die een zeer strikt hygiëneprotocol vereisen, kunnen grotere hoeveelheden microbieei consortium per oppervlaktegebied nodig zijn om herkolonisatie van een oppervlak te bereiken.

Bij voorkeur wordt een hoeveelheid of volume equivalent aan 10 000 000 tot 100 000 000 micro-organismen van het bacterieel consortium per vierkante meter oppervlak aangebracht.

In een geprefereerde uitvoeringsvorm van een methode volgens de hier verstrekte informatie wordt het geleverde microbieei consortium op het oppervlak aangebracht door middel van een spray.

Het aanbrengen van het geleverde microbieei consortium door middel van een spray maakt het mogelijk om het consortium op een veilige manier aan te brengen, aangezien er geen direct contact met het oppervlak nodig is. Dit is met name belangrijk wanneer schadelijke micro-organismen en/of micro-organismen die nietGRAS zijn aanwezig zijn op het betreffende oppervlak. Verdere voordelen van het aanbrengen van het microbieei consortium op een oppervlak door middel van een

BE2017/5431

BE2017/5431 spray zijn onder meer het eenvoudig, nauwkeurig en gelijkmatig verdeeld aanbrengen van de microbiële cellen, en het zorgen voor voldoende beluchting van de cellen van het microbieei consortium. Dit laatste is met name relevant voor aerobe stammen.

In een geprefereerde uitvoeringsvorm kan het geleverde microbieei consortium op zowel harde als zachte oppervlakken worden aangebracht.

Claims (5)

CONCLUSIES

1. Een microbieel consortium dat bestaat uit:

- één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die algemeen erkend als veilig (GRAS) zijn, gekozen uit de groep van Nitrosomonas, Nitrosospira, Nitrosopumilus, Cenarchaeum, Nitrosoarchaeum, Nitrosocaldus en Caldiarchaeum; en

- één of meerdere GRAS-stammen die commensaal zijn ten opzichte van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen, en die zijn gekozen uit de groep van Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Beijerinckia, Enterobacter, Erwinia, Flavobacterium, Rhizobium, Serratia en Deinococcus en waarbij de verhouding tussen de cellen van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen ten opzichte van het aantal cellen van de één of meerdere commensale stammen gelegen is tussen 100:10 en 100:0,1.

2. Een microbieel consortium volgens conclusie 1, met het kenmerk dat het betreffende consortium ten minste twee ammoniumoxiderende stammen bevat, en ten minste drie commensale stammen.

3. Een microbieel consortium volgens één der conclusies 1 tot 2, met het kenmerk dat het microbieel consortium bestaat uit één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die zijn gekozen uit de groep van Nitrosomonas manna, Nitrosomonas nitrosa, Nitrosomonas eutropha, Nitrosomonas europaea, Nitrosomonas cryotolerans, Nitrosospira multiformis, Nitrosospira lacus, Nitrosopumilus maritimus, Cenarchaeum symbiosum, Nitrosoarchaeum limnia, Nitrosocaldus yellowstonii en Caldiarchaeum subterraneum.

4. Een microbieel consortium volgens één der conclusies 1 tot 3, met het kenmerk dat het microbieel consortium bestaat uit één of meerdere commensale stammen die zijn gekozen uit de groep van Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus polymyxa, Bacillus amyloiiquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus japonicum of uit de groep van Deinococcus.

5. Een microbieel consortium volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk dat het microbieel consortium een verbeterde weerstand vertoont in vergelijking met een afzonderlijke populatie van de één of meerdere ammoniumoxiderende stammen die aanwezig zijn in het betreffende microbieel consortium en in vergelijking met een afzonderlijke populatie van de één of meerdere commensale stammen die aanwezig zijn in het betreffende microbieel consortium.

6. Een microbieei consortium volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk dat de nitrificerende activiteit van het microbieei consortium ten minste 0,16 g stikstof/g VSS per dag bedraagt.

7. Een microbieei consortium volgens één der voorgaande conclusies, met het

5 kenmerk dat de zuurstofopname van het microbieei consortium ten minste 8 mg

Oz/g VSS per uur bedraagt.