WO2023171852A1 - 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물 - Google Patents

등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2023171852A1
WO2023171852A1 PCT/KR2022/006378 KR2022006378W WO2023171852A1 WO 2023171852 A1 WO2023171852 A1 WO 2023171852A1 KR 2022006378 W KR2022006378 W KR 2022006378W WO 2023171852 A1 WO2023171852 A1 WO 2023171852A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
composition
black
venom
wasp venom
concentration
Prior art date
Application number
PCT/KR2022/006378
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
김효정
박유진
정지운
김선건
이화진
Original Assignee
한국한의약진흥원
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한국한의약진흥원 filed Critical 한국한의약진흥원
Publication of WO2023171852A1 publication Critical patent/WO2023171852A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63—Arthropods
    • A61K35/64—Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/34—Alcohols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/34—Alcohols
    • A61K8/347—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/37—Esters of carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4906—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4913—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom having five membered rings, e.g. pyrrolidone carboxylic acid
    • A61K8/492—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom having five membered rings, e.g. pyrrolidone carboxylic acid having condensed rings, e.g. indol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers

Definitions

  • the present invention relates to a composition for maintaining the stability of serotonin contained in black wasp venom.
  • a composition for maintaining stability that can suppress the decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution and the same. It relates to an aqueous solution formulation of black wasp venom comprising:
  • Bee sting therapy also called bee sting or bee sting therapy, is a method of treating diseases by activating the body's immune function by injecting purified bee venom into acupuncture points.
  • the history of bengchim is very old, and it is currently established as an alternative medicine.
  • Bee needles are known to be particularly effective in treating inflammatory and painful diseases. They have excellent anti-inflammatory effects and have effects such as blood purification, hemolysis, nerve revitalization, sterilization, and tissue creation and destruction. It is known to have
  • melittin The main ingredient of bee venom extracted and purified from bees is melittin.
  • Melittin is a protein composed of 26 amino acids and makes up 40-50% of dried bee venom, and has been reported to be antibacterial, antiviral, induce hormone secretion, and stimulate enzyme secretion.
  • wasp venom Unlike bee venom, which has been actively used and studied in the treatment of diseases from ancient times to the present, wasp venom obtained from wasps is not properly used for therapeutic purposes and research is insufficient.
  • Wasp venom refers to a toxin used by wasps when looking for food or when an enemy invades their territory. It has a significant difference in composition from bee venom.
  • the components of wasp venom vary greatly depending on the type of wasp, and known ingredients include histamine, serotonin, dopamine, adrenaline, and acetylcholine.
  • the black-backed wasp ( Vespa velutina ) belongs to the Hymenoptera wasp family and is an exotic insect that was introduced into Korea from Southeast Asia in the early 2000s and is spreading nationwide.
  • Black-backed hornets are omnivorous insects that prey on a variety of insects, but they mainly hunt adult bees and prefer Western honey bees ( Apis mellifera ), causing great damage to the beekeeping industry.
  • the main ingredient with the highest content in black wasp venom is serotonin.
  • Patent Document 1 Republic of Korea Patent Publication No. 10-2019-0101980
  • Patent Document 2 Republic of Korea Patent Publication No. 10-2015-0137314
  • Patent Document 3 Republic of Korea Patent Publication No. 10-2018-0052128
  • Patent Document 4 Republic of Korea Patent Publication No. 10-2012-0029328
  • the purpose of the present invention is to provide a composition for maintaining stability that suppresses a decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution.
  • the purpose of the present invention is to provide an aqueous solution formulation of black wasp venom with improved stability that can suppress the decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution.
  • a composition for maintaining stability that inhibits the decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution
  • composition comprising one or two or more stabilizers selected from Methyl ⁇ -Hydroxybenzoate, Cresol, and Chlorocresol as an active ingredient.
  • composition preferably in an aqueous solution, inhibits the content of serotonin contained in black wasp venom from being reduced by more than 15% based on HPLC peak area for at least 4 weeks.
  • Black wasp venom can be dissolved in the composition at a predetermined concentration and used.
  • black wasp venom is dissolved and used in the composition at a concentration of 2 to 8 mg/ml.
  • aqueous solution formulation containing one or two or more stabilizers selected from Methyl ⁇ -Hydroxybenzoate, Cresol, and Chlorocresol,
  • An aqueous solution formulation of black wasp venom is provided, which is characterized in that it inhibits the content of serotonin contained in the black wasp venom from being reduced by more than 15% for at least 4 weeks based on HPLC peak area.
  • the aqueous solution formulation of black wasp venom contains black wasp venom at a concentration of 2 to 8 mg/ml.
  • composition for maintaining stability of the present invention can significantly suppress the decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution. After dissolving black wasp venom in the stability maintaining composition of the present invention, a decrease in serotonin content of more than 15% based on HPLC peak area can be suppressed for at least 4 weeks.
  • the stability-maintaining composition and the aqueous solution formulation of black wasp venom according to the present invention can be usefully applied to pharmaceutical compositions such as herbal medicine solutions and biological medicines, health foods, cosmetics, etc.
  • Figure 1 is an HPLC chromatogram showing the results of testing the stability of a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized distilled water and a stabilizer was added.
  • Figure 2 is an HPLC chromatogram showing the results of testing the stability of a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized saline and a stabilizer was added.
  • Figure 3 shows a comparison of the HPLC chromatographic changes over time of a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized distilled water without adding a stabilizer.
  • Figure 4 shows a comparison of the HPLC chromatographic changes over time of a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized saline without adding a stabilizer.
  • Figure 5 shows the results of confirming the change in serotonin content (%) over 4 weeks after preparing a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized distilled water or sterilized saline and a stabilizer was added.
  • Figure 6 shows the results of confirming the change in serotonin content (%) at 0 and 4 weeks after preparing a composition in which black wasp venom was dissolved in sterilized distilled water or sterilized saline and a stabilizer was added.
  • composition for maintaining stability provided by the present invention
  • a composition that inhibits the decrease in the content of serotonin contained in black wasp venom in an aqueous solution comprising: sterilized distilled water or sterilized physiological saline; and one or two or more stabilizers selected from Methyl ⁇ -Hydroxybenzoate, Cresol, and Chlorocresol as active ingredients.
  • black-backed wasp venom is defined as a toxin used by the black-backed wasp (Vespa velutina) when looking for food or when an enemy invades its territory, and contains serotonin as its main ingredient. It is obtained by separating and purifying the venom from the venom sac of the black-backed wasp.
  • stabilizer is defined as an additive for suppressing the decrease in serotonin content in black wasp venom.
  • the black wasp venom is produced by separating the venom from the venom sac of the black wasp. It can be purified and used, and to increase preservability, it can also be dried and powdered using a method such as freeze-drying.
  • the solvent forming the aqueous solution phase is sterilized distilled water or sterilized physiological saline solution.
  • the stabilizer one or two or more types selected from Methyl ⁇ -Hydroxybenzoate, Cresol, and Chlorocresol are used.
  • cresol and chlorocresol can be used more preferably because the increase in by-product peaks is relatively small.
  • Methyl paraoxybenzoate is preferably included in the composition at a concentration of 0.05-0.18% (w/v), and more preferably at a concentration of 0.1-0.18% (w/v).
  • Cresol is preferably included in the composition at a concentration of 0.15-0.4% (w/v), and more preferably at a concentration of 0.3-0.4% (w/v).
  • Chlorocresol is preferably included in the composition at a concentration of 0.1-0.2% (w/v), and more preferably at a concentration of 0.15-0.2% (w/v).
  • the serotonin content contained in black wasp venom is maintained at the highest level when sterilized saline solution is used as a solvent and chlorocresol at a concentration of 0.2% (w/v) is added.
  • Black wasp venom is used by dissolving it in the stability-maintaining composition at a desired concentration.
  • black wasp venom may be included in the composition at a concentration of 2 to 8 mg/ml, and is more preferably included at a concentration of 4 to 6 mg/ml. If black wasp venom is dissolved in a composition for maintaining stability to form an aqueous solution, the serotonin content can be stably maintained at a very high level even after 4 weeks of dissolution.
  • the content of serotonin in the black wasp venom contained in the composition for maintaining stability can be maintained at 85% or more for at least 4 weeks based on HPLC peak area, and more preferably at 90% or more.
  • Black-backed wasp venom Sterile distilled water or sterile saline solution; and one or two or more stabilizers selected from Methyl ⁇ -Hydroxybenzoate, Cresol, and Chlorocresol, and the content of serotonin contained in the black wasp venom is determined by HPLC. Suppress a decrease of more than 15% based on peak area for at least 4 weeks.
  • the stability-maintaining composition and the aqueous solution formulation of black wasp venom can be usefully applied to pharmaceutical compositions, health foods, cosmetics, etc. containing black wasp venom as an active ingredient.
  • An aqueous solution formulation of black wasp venom was prepared by dissolving black wasp venom powder in sterilized distilled water at a concentration of 5.0 mg/ml and adding methyl paraoxybenzoate at a concentration of 0.18% (w/v).
  • Black wasp venom powder was dissolved in sterilized distilled water at a concentration of 5.0 mg/ml and cresol was added at a concentration of 0.4% (w/v) to prepare an aqueous solution formulation of black wasp venom.
  • Black wasp venom powder was dissolved in sterilized distilled water at a concentration of 5.0 mg/ml and chlorocresol was added at a concentration of 0.2% (w/v) to prepare an aqueous solution formulation of black wasp venom.
  • Black wasp venom powder was dissolved in sterile saline solution (0.9% NaCl) at a concentration of 5.0 mg/ml and methyl paraoxybenzoate was added at a concentration of 0.18% (w/v) to prepare an aqueous solution formulation of black wasp venom.
  • Black wasp venom powder was dissolved in sterile saline solution (0.9% NaCl) at a concentration of 5.0 mg/ml and cresol was added at a concentration of 0.4% (w/v) to prepare an aqueous solution formulation of black wasp venom.
  • Black wasp venom powder was dissolved in sterile saline solution (0.9% NaCl) at a concentration of 5.0 mg/ml and chlorocresol was added at a concentration of 0.2% (w/v) to prepare an aqueous solution formulation of black wasp venom.
  • a composition for maintaining stability under experimental conditions was prepared using the following allowable additives.
  • the test subjects were first methyl paraoxybenzoate, A total of 9 types of additives were initially selected: propyl paraoxybenzoate, butyl paraoxybenzoate, chlorobutanol, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cresol, chlorocresol, and benzyl alcohol.
  • the first selected methyl paraoxybenzoate, propyl paraoxybenzoate, butyl paraoxybenzoate, chlorobutanol, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, cresol, chlorocresol and benzyl alcohol were purchased from Sigma-aldrich (St. Louis, MO, USA). Purchased and used from .
  • Each additive was dissolved in sterilized distilled water or sterilized saline solution within the maximum concentration range permitted by the Ministry of Food and Drug Safety, then stored in a refrigerator, protected from light.
  • wasp venom powder extracted from black wasps in June 2020 and dried and powdered was used.
  • HPLC analysis was performed using a Waters ALLIANCE e2695 HPLC and 2998 PDA detector.
  • a YMC C 18 column (4.6 ⁇ 150 mm, 5 ⁇ m) was used as the stationary phase, and the column temperature was maintained at 30°C.
  • the sample temperature was maintained at 4°C to minimize the effect of temperature on the analysis sample.
  • the detection wavelength was set to 215 nm, which is the optimal detection wavelength for detection with the highest sensitivity by comparing chromatograms according to UV wavelengths of 190 to 400 nm.
  • HPLC analysis conditions including solvent gradient composition, are shown in Table 2 below.
  • the HPLC chromatogram resulting from testing the stability of a composition obtained by dissolving black wasp venom in sterilized distilled water and adding a stabilizer is shown in Figure 1, and shows the results of testing the stability of a composition obtained by dissolving black wasp venom in sterilized distilled water and adding a stabilizer.
  • the HPLC chromatogram resulting from the stability test is shown in Figure 2.
  • methyl paraoxybenzoate, cresol, and chlorocresol could be selected as stabilizers that inhibit the decrease of serotonin contained in black wasp venom.
  • cresol and chlorocresol were found to be more preferable as they showed a relatively small increase in by-product peaks ( Figures 1 and 2).
  • the stability-maintaining composition of the present invention and the aqueous solution formulation of black wasp venom containing the same described above are exemplary, and those skilled in the art will be able to make various modifications and other equivalent implementations thereof. You can see that an example is possible. Therefore, it will be well understood that the present invention is not limited to the forms mentioned in the description of the invention above.
  • the true technical protection scope of the present invention shall be determined by the technical spirit of the claims, and is understood to include all modifications, equivalents and substitutes within the spirit and scope of the present invention defined by the claims of the present invention. It has to be.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Birds (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제할 수 있는 안정성 유지용 조성물과 이를 포함하는 등검은말벌독의 수용액 제형에 관한 것이다. 본 발명의 안정성 유지용 조성물은, 멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및 파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 유효성분으로 포함하며, 수용액상에서 등검은말벌독 중에 함유된 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제할 수 있다. 본 발명의 안정성 유지용 조성물과 수용액 제형은 약침액, 생물의약품 등의 약학적 조성물, 건강식품, 화장품 등에 유용하게 적용될 수 있다.

Description

등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물
본 발명은 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물에 관한 것으로, 특히 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제할 수 있는 안정성 유지용 조성물과 이를 포함하는 등검은말벌독의 수용액 제형에 관한 것이다.
봉침요법은 벌침, 벌침요법이라고도 하는데, 정제한 벌의 독을 경혈에 주입함으로써 인체의 면역기능을 활성화시켜 질병을 치료하는 방법이다. 봉침의 역사는 매우 오래되었으며, 현재는 대체의학의 하나로 자리잡고 있다. 봉침은 특히 염증성 계통의 질병과 통증성 계통의 질병에 탁월한 효과를 보이는 것으로 알려져 있으며, 뛰어난 소염작용을 하고 청혈작용, 용혈작용, 신경부활 작용, 살균작용, 조직의 생성 및 파괴 작용 등의 효능을 지닌 것으로 알려져 있다.
꿀벌로부터 추출 정제하여 이용하는 봉독은 주성분이 멜리틴(Melittin)이다. 멜리틴은 26개의 아미노산으로 구성된 단백질로 건조봉독의 40-50%를 구성하며, 항균, 항바이러스, 호르몬 분비 유도, 효소 분비 자극 등이 보고되어 있다.
이렇게 봉독이 오래전부터 현대에 이르기까지 질병치료에 활발하게 이용되고 연구되고 있는 것과 달리, 말벌로부터 얻은 말벌독은 치료목적으로 제대로 이용되지 못하고 있으며 연구도 많이 부족한 실정이다. 말벌독은 말벌이 먹이를 찾을 때, 혹은 자기영역에 적이 침입했을 때 사용하는 독소를 말하는데, 봉독과는 성분에도 큰 차이가 있다. 말벌독의 성분은 말벌의 종류에 따라 크게 다르며, 히스타민, 세로토닌, 도파민, 아드레날린, 아세틸콜린 등이 알려져있다.
등검은말벌(Vespa velutina)은 벌목 말벌과에 속하며 2000년대 초반 동남아에서 국내로 유입되어 전국적으로 확산되고 있는 외래종 곤충이다. 등검은말벌은 다양한 곤충을 먹이로 포식하는 잡식성 곤충이지만, 꿀벌류의 성충을 주로 사냥하고 서양종꿀벌(Apis mellifera)을 가장 선호하여 양봉산업에 큰 피해를 주고 있다. 등검은말벌독의 성분 중 가장 함량이 높은 주요 성분은 세로토닌(Serotonin)이다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
(특허문헌 1) 대한민국 특허공개 제10-2019-0101980호
(특허문헌 2) 대한민국 특허공개 제10-2015-0137314호
(특허문헌 3) 대한민국 특허공개 제10-2018-0052128호
(특허문헌 4) 대한민국 특허공개 제10-2012-0029328호
등검은말벌독은 그대로 또는 수용액 상태로 상온에 둘 경우 주성분인 세로토닌이 빠르게 감소되어 4주 정도면 50% 내외 또는 그 이상이 감소하게 된다. 이러한 문제 때문에 그동안 등검은말벌독을 수용액 제형으로 개발하기 어려웠다. 또, 등검은말벌독을 건조 분말화한 후 냉동 보관하면서 이용하는 경우에도 이용 시마다 용제에 용해시켜 수용액으로 만든 후 즉각 사용하여야 하는 어려움이 있었고, 수용액으로 만들 경우 기온과 습도에도 예민하게 반응하므로 경우에 따라서는 수용액 상태에서 수일 내에 유의성 있는 세로토닌의 감소가 시작될 수 있다. 이러한 문제는 등검은말벌독을 다양한 용도로 개발하거나 활용하는데 큰 장애가 되었다.
본 발명은, 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제하는 안정성 유지용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은, 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제할 수 있는 안정성이 향상된 등검은말벌독의 수용액 제형을 제공하는 것을 목적으로 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 한정되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는,
수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제하는 안정성 유지용 조성물로서,
멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및
파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
상기 조성물은, 바람직하게는 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 함량이 HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 15% 이상 감소되는 것을 억제한다.
상기 조성물에 등검은말벌독을 소정의 농도로 용해시켜서 사용할 수 있다. 바람직한 구현예에서는, 상기 조성물에 등검은말벌독을 2~8mg/㎖의 농도로 용해시켜서 사용한다.
또한, 본 발명에서는,
등검은말벌독;
멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및
파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 포함하는 수용액 제형으로서,
상기 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 15% 이상 감소되는 것을 억제하는 것을 특징으로 하는, 등검은말벌독의 수용액 제형을 제공한다.
바람직한 구현예에서, 상기 등검은말벌독의 수용액 제형은 등검은말벌독을 2~8mg/㎖의 농도로 포함한다.
본 발명의 안정성 유지용 조성물은, 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 상당히 억제할 수 있다. 본 발명의 안정성 유지용 조성물에 등검은말벌독을 용해시킨 이후 최소 4주간 HPLC 피크 면적 기준으로 세로토닌의 함량이 15% 이상 감소되는 것을 억제할 수 있다.
본 발명에 따른 안정성 유지용 조성물과 등검은말벌독의 수용액 제형은 약침액, 생물의약품 등의 약학적 조성물, 건강식품, 화장품 등에 유용하게 적용될 수 있다.
도 1은 등검은말벌독을 멸균증류수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물의 안정성을 시험한 결과를 나타낸 HPLC 크로마토그램이다.
도 2는 등검은말벌독을 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물의 안정성을 시험한 결과를 나타낸 HPLC 크로마토그램이다.
도 3은 안정화제를 첨가하지 않고 멸균증류수에 등검은말벌독을 용해시킨 조성물의 시간에 따른 HPLC 크로마토그래피 변화양상을 비교하여 나타낸 것이다.
도 4는 안정화제를 첨가하지 않고 멸균생리식염수에 등검은말벌독을 용해시킨 조성물의 시간에 따른 HPLC 크로마토그래피 변화양상을 비교하여 나타낸 것이다.
도 5는 등검은말벌독을 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물을 제조한 후 4주 동안의 세로토닌 함량변화(%)를 확인한 결과이다.
도 6은 등검은말벌독을 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물을 제조한 후 0주차와 4주차의 세로토닌 함량변화(%)를 확인한 결과이다.
본 발명에서 제공하는 안정성 유지용 조성물은,
수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제하는 조성물로서, 멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및 파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 유효성분으로 포함한다.
본 발명에서 "등검은말벌독"은 등검은말벌(Vespa velutina)이 먹이를 찾을 때 혹은 자기영역에 적이 침입했을 때 사용하는 독소로서 주요 성분으로 세로토닌을 함유하는 것으로 정의된다. 등검은말벌의 독낭으로부터 독액을 분리 및 정제하여 얻는다.
본 발명에서 "안정화제"는 등검은말벌독 중 세로토닌의 함량이 감소하는 것을 억제하기 위한 첨가제로 정의된다.
본 발명에서 등검은말벌독은 등검은말벌의 독낭으로부터 독액을 분리한 후 정제하여 사용할 수 있으며, 보존성을 높이기 위해 동결건조 등의 방법으로 건조시켜 분말화한 것을 사용할 수도 있다.
상기 수용액상을 이루는 용매로는 멸균증류수 또는 멸균생리식염수를 사용한다.
상기 안정화제로는, 파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상을 사용한다. 3가지 안정화제 중 보다 바람직하게는 크레졸과 클로로크레졸을 사용할 수 있는데, 이는 부산물 피크의 증가가 비교적 적기 때문이다.
파라옥시벤조산메틸은 상기 조성물 내에 0.05~0.18%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 바람직하고, 0.1~0.18%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 보다 바람직하다.
크레졸은 상기 조성물 내에 0.15~0.4%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 바람직하고, 0.3~0.4%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 보다 바람직하다.
클로로크레졸은 상기 조성물 내에 0.1~0.2%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 바람직하고, 0.15~0.2%(w/v)의 농도로 포함되는 것이 보다 바람직하다.
가장 바람직하게는, 용매로 멸균생리식염수를 사용하고 0.2%(w/v) 농도의 클로로크레졸을 첨가할 때 등검은말벌독 내 함유된 세로토닌 함량이 가장 높게 유지된다.
상기 안정성 유지용 조성물에 등검은말벌독을 원하는 소정의 농도로 용해시켜서 사용한다. 바람직한 구현예에서 등검은말벌독은 조성물 중에 2~8mg/㎖ 농도로 포함될 수 있으며, 4~6mg/㎖의 농도로 포함되는 것이 보다 바람직하다. 이렇게 안정성 유지용 조성물에 등검은말벌독을 용해시켜 수용액 제형을 만들면, 용해시키고 4주가 경과한 후에도 세로토닌의 함량이 매우 높은 수준으로 안정적으로 유지될 수 있다. 바람직하게는, 상기 안정성 유지용 조성물에 포함된 등검은말벌독 중 세로토닌의 함량은, HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 85% 이상을 유지할 수 있으며, 보다 바람직하게는 90% 이상을 유지할 수 있다. 즉, HPLC 피크 면적 기준으로 15% 이상 바람직하게는 10% 이상 감소하는 것을 억제할 수 있다. 이는 일반적으로 상온에서 4주 정도 경과시 등검은말벌독 중 세로토닌의 함량이 50% 내외 또는 그 이상으로 감소하는 것에 비해 매우 높은 수준으로 안정성을 유지하는 것이다.
본 발명에서 제공하는 등검은말벌독의 수용액 제형은,
등검은말벌독; 멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및 파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 포함하며, 상기 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 15% 이상 감소되는 것을 억제한다.
각 구성 성분에 대한 설명은 상기 안정성 유지용 조성물에 대한 설명과 동일하다.
상기 안정성 유지용 조성물과 등검은말벌독의 수용액 제형은 등검은말벌독을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물, 건강식품, 화장품 등에 유용하게 적용될 수 있다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하는 것으로서 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
등검은말벌독 분말을 멸균증류수에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 파라옥시벤조산메틸을 0.18%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실시예 2>
등검은말벌독 분말을 멸균증류수에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 크레졸을 0.4%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실시예 3>
등검은말벌독 분말을 멸균증류수에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 클로로크레졸을 0.2%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실시예 4>
등검은말벌독 분말을 멸균생리식염수(0.9% NaCl)에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 파라옥시벤조산메틸을 0.18%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실시예 5>
등검은말벌독 분말을 멸균생리식염수(0.9% NaCl)에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 크레졸을 0.4%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실시예 6>
등검은말벌독 분말을 멸균생리식염수(0.9% NaCl)에 5.0mg/㎖ 농도로 용해시키고 클로로크레졸을 0.2%(w/v) 농도로 첨가하여 등검은말벌독의 수용액 제형을 제조하였다.
<실험예 1>
안정화제의 선정 및 안정성 유지용 조성물의 제조
등검은말벌독을 안정화시킬 수 있는 안정화제를 선정하기 위하여 다음과 같이 허용 가능한 첨가제를 대상으로 실험 조건의 안정성 유지용 조성물을 제조하였다.
1. 허용 가능한 첨가제의 선정
식품의약품안전처(식약처)에서 제시하는 의약품 첨가제 가이드라인에 따라 식약처에서 허용하는 첨가제와 그 사용가능범위 내에서 본 발명이 목적하는 안정화제를 선정하고자, 먼저 시험 대상으로 파라옥시벤조산메틸, 파라옥시벤조산프로필, 파라옥시벤조산부틸, 클로로부탄올, 염화벤잘코늄, 염화벤제토늄, 크레졸, 클로로크레졸 및 벤질알코올의 총 9종의 첨가제를 1차 선정하였다.
2. 안정성 유지용 조성물의 제조
1차 선정된 파라옥시벤조산메틸, 파라옥시벤조산프로필, 파라옥시벤조산부틸, 클로로부탄올, 염화벤잘코늄, 염화벤제토늄, 크레졸, 클로로크레졸 및 벤질알코올은 Sigma-aldrich(St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.
각 첨가제는 식약처에서 허용하는 최대 농도범위에 맞추어 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 용해시킨 후 차광하여 냉장보관하였다.
사용한 각 첨가제의 종류, 농도 및 사용조건을 하기 표 1에 나타내었다.
No. 첨가제 농도(%) 사용조건
등검은말벌독 멸균증류수(DW) / 멸균생리식염수(0.9% NaCl) 　 5 mg/mL
1 파라옥시안식향산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate) 0.18 pH3~7
2 파라옥시안식향산프로필(Propyl ρ-Hydroxybenzoate) 0.02 pH3~7
3 파라옥시안식향산부틸(Butyl ρ-Hydroxybenzoate) 0.01 pH3~7
4 클로로부탄올(Chlorobutanol) 0.5 　
5 염화벤잘코늄(Benzalkonium chloride) 0.02 pH9
6 염화벤제토늄(Benzethonium chloride) 0.02 pH9
7 크레졸(Cresol) 0.4 중성~산성
8 클로로크레졸(Chlorocresol) 0.2 중성~산성
9 벤질알코올(Benzyl alcohol) 0.1
<실험예 2>
안정성 시험
1. 안정성시험 시료의 제조
등검은말벌독은 등검은말벌에서 2020년 6월에 추출하여 건조 분말화한 말벌독 분말을 사용하였다.
*말벌독 분말을 5.0mg씩 정밀하게 계량하여 5.0mg/㎖ 농도가 되도록 멸균증류수, 멸균생리식염수 및 실험예 1에서 제조된 안정성 유지용 조성물에 각각 완전히 용해시켜 3로트(Lot)씩 제조하였다.
각 시료는 시료를 제조한 직후 0.2㎛ PVDF 실린지 필터로 1회 걸러내어 0주차의 안정성 데이터를 HPLC로 확보하였다. 이후 안정성시험 시료는 앰버 바이알(amber vial)에 넣어 밀봉한 후 냉장보관(약 4℃)하였으며, 2주 간격으로 4주까지 말벌독 내 성분 함량 및 조성을 HPLC 크로마토그램으로 비교하여 안정성을 평가하였다.
2. HPLC 분석 조건
워터스(Waters) ALLIANCE e2695 HPLC 및 2998 PDA 검출기(detector)를 사용하여 HPLC 분석을 수행하였다.
고정상은 YMC C18 칼럼(4.6×150mm, 5㎛)을 사용하였고 컬럼온도는 30℃를 유지하였다.
시료의 개수가 많아 분석시간이 길어지는 만큼 분석시료에 미치는 온도의 영향을 최소화하기 위하여 시료온도를 4℃로 유지하였다.
이동상은 분리능을 높이기 위하여 0.1% TFA(Trifluoroacetic acid)를 첨가한 물(Solvent A)과 0.1% TFA를 첨가한 아세토니트릴(Acetonitrile)(Solvent B)을 사용하였다.
검출파장은 190~400nm의 UV 파장에 따른 크로마토그램을 비교하여 가장 높은 감도로 검출되는 최적 검출파장인 215nm로 설정하였다. 용매의 기울기 조성을 포함하여 HPLC 분석조건을 하기 표 2에 나타내었다.
Figure PCTKR2022006378-appb-img-000001
3. 안정성 시험 결과
등검은말벌독의 0일차 HPLC 크로마토그램 상에서 가장 큰 피크인 세로토닌의 함량변화를 평가하였다.
등검은말벌독을 멸균증류수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물의 안정성을 시험한 결과인 HPLC 크로마토그램을 도 1에 나타내고, 등검은말벌독을 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가한 조성물의 안정성을 시험한 결과인 HPLC 크로마토그램를 도 2에 나타내었다.
또한, 등검은말벌독을 멸균증류수에 용해시키고 안정화제를 첨가하지 않은 조성물의 안정성을 시험한 결과인 HPLC 크로마토그램를 도 3에 나타내고, 등검은말벌독을 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가하지 않은 조성물의 안정성을 시험한 결과인 HPLC 크로마토그램을 도 4에 나타내었다.
도 1과 2의 결과에서, 등검은말벌독을 멸균생리식염수에 용해시키고 파라옥시벤조산메틸, 크레졸 또는 클로로크레졸을 첨가한 경우 0주, 2주 및 4주간 성분변화가 큰 차이없이 유지되는 것으로 확인되었고, 등검은말벌독을 멸균증류수에 용해시키고 파라옥시벤조산메틸, 크레졸 또는 클로로크레졸을 첨가한 경우에도 성분변화가 적었다.
반면, 도 3과 4의 결과에서, 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 등검은말벌독을 용해시키고 안정화제를 첨가하지 않은 경우에는, 4주가 경과한 후 세로토닌이 현저하게 감소한 것을 확인할 수 있었다.
등검은말벌독을 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가하지 않거나 첨가한 조성물을 제조한 후 4주 동안의 세로토닌 함량변화(%)를 확인한 결과를 도 5에 나타내었고, 등검은말벌독을 멸균증류수 또는 멸균생리식염수에 용해시키고 안정화제를 첨가하지 않거나 첨가한 조성물을 제조한 후 0주차와 4주차의 세로토닌 함량변화(%)를 확인한 결과를 도 6에 나타내었다.
도 5과 6의 결과에서, 안정화제를 사용하지 않은 수용액 제형의 등검은말벌독은 제조하고 4주가 경과한 후 멸균생리식염수에 용해시킨 등검은말벌독의 세로토닌 피크는 평균 43.9%, 멸균증류수에 용해시킨 등검은말벌독의 세로토닌 피크는 평균 28.7% 감소하였으며, 부산물 피크도 정성적 및 정량적으로 증가하는 경향이 확인되었다. 반면, 안정화제로 파라옥시벤조산메틸, 크레졸 또는 클로로크레졸을 첨가한 경우에는 4주가 경과한 후에도 세로토닌의 함량이 피크 면적 기준으로 최소 85% 이상으로 세로토닌의 감소 정도가 매우 낮은 것을 확인할 수 있었다.
이상의 결과로부터 파라옥시벤조산메틸, 크레졸 및 클로로크레졸을 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 감소를 억제하는 안정화제로 선정할 수 있었다. 또한, 3가지 안정화제 중에는 부산물 피크의 증가가 비교적 적은 크레졸과 클로로크레졸이 보다 바람직한 것으로 확인되었다(도 1과 2).
이상에서 설명된 본 발명의 안정성 유지용 조성물과 이를 포함하는 등검은말벌독의 수용액 제형은 예시적인 것이며, 본 발명이 속한 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시예가 가능하다는 점을 잘 알 수 있을 것이다. 그러므로 본 발명은 상기 발명의 설명에서 언급되는 형태로만 한정되는 것은 아님을 잘 이해할 수 있을 것이다. 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 청구범위의 기술적 사상에 의해 정해져야 할 것이고, 본 발명의 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 정신과 그 범위 내에 있는 모든 변형물과 균등물 및 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야 한다.

Claims (8)

  1. 수용액상에서 등검은말벌독 내에 함유된 세로토닌의 함량이 감소되는 것을 억제하는 안정성 유지용 조성물로서,
    멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및
    파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 유효성분으로 포함하는 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 파라옥시벤조산메틸은 상기 조성물 내에 0.05~0.18%(w/v)의 농도로 포함되며,
    상기 크레졸은 상기 조성물 내에 0.15~0.4%(w/v)의 농도로 포함되며,
    상기 클로로크레졸은 상기 조성물 내에 0.1~0.2%(w/v)의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 세로토닌의 함량이 HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 15% 이상 감소되는 것을 억제하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물에 등검은말벌독을 소정의 농도로 용해시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 조성물에 등검은말벌독을 2~8mg/㎖의 농도로 용해시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 등검은말벌독;
    멸균증류수 또는 멸균생리식염수; 및
    파라옥시벤조산메틸(Methyl ρ-Hydroxybenzoate), 크레졸(Cresol) 및 클로로크레졸(Chlorocresol) 중에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 안정화제를 포함하는 수용액 제형으로서,
    상기 등검은말벌독 내에 함유되어 있는 세로토닌의 함량이 HPLC 피크 면적 기준으로 최소 4주간 15% 이상 감소되는 것을 억제하는 것을 특징으로 하는, 등검은말벌독의 수용액 제형.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 파라옥시벤조산메틸은 상기 제형 내에 0.05~0.18%(w/v)의 농도로 포함되며,
    상기 크레졸은 상기 제형 내에 0.15~0.4%(w/v)의 농도로 포함되며,
    상기 클로로크레졸은 상기 제형 내에 0.1~0.2%(w/v)의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 등검은말벌독의 수용액 제형.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서,
    상기 등검은말벌독은 상기 제형 내에 2~8mg/㎖의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 등검은말벌독의 수용액 제형.
PCT/KR2022/006378 2022-03-11 2022-05-04 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물 WO2023171852A1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220030770A KR20230133595A (ko) 2022-03-11 2022-03-11 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물
KR10-2022-0030770 2022-03-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2023171852A1 true WO2023171852A1 (ko) 2023-09-14

Family

ID=87935541

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2022/006378 WO2023171852A1 (ko) 2022-03-11 2022-05-04 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR20230133595A (ko)
WO (1) WO2023171852A1 (ko)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000015224A1 (en) * 1998-09-17 2000-03-23 Eli Lilly And Company Protein formulations
WO2011104557A1 (en) * 2010-02-24 2011-09-01 Arecor Limited Protein formulations
KR20110139486A (ko) * 2010-06-23 2011-12-29 대한민국(농촌진흥청장) 꿀 및 봉독을 유효성분으로 함유하는 상처 치유용 피부외용제 조성물
KR20120029328A (ko) * 2010-09-16 2012-03-26 주식회사 엘지생명과학 높은 방부력을 제공하는 오일 주사 제형
KR20120120255A (ko) * 2009-12-22 2012-11-01 비씨엔 펩티드즈, 에스.에이. 국소적 안과용 펩티드 제제
KR20130098110A (ko) * 2012-02-27 2013-09-04 경희대학교 산학협력단 봉독-ｐｌａ2를 포함하는 이상 조절 ｔ 세포 활성 저하 관련 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물
KR20160042120A (ko) * 2013-08-13 2016-04-18 상하이 베네마에 파머수티컬 코포레이션 안정한 인슐린 분비 촉진 펩티드의 하이드로 인젝션 약제학적 조성물
KR20190009589A (ko) * 2017-07-19 2019-01-29 대한민국(농촌진흥청장) 장수말벌의 일벌로부터 분리된 봉독을 함유하는 통풍의 예방 또는 치료용 조성물
WO2020190591A1 (en) * 2019-03-15 2020-09-24 Eli Lilly And Company Preserved formulations

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20150137314A (ko) 2014-05-29 2015-12-09 대한민국(농촌진흥청장) 봉독, 멜리틴 또는 아파민 성분을 포함하는 신장질환 예방 또는 치료용 약학조성물
BR112018003455A2 (pt) 2015-09-17 2018-09-25 Glycotope Gmbh composição ou composição farmacêutica e uso da composição
SG11201906132UA (en) 2017-03-27 2019-10-30 Fruithy Holdings Ltd Insoluble complex or solvate thereof, pharmaceutical composition and use thereof

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000015224A1 (en) * 1998-09-17 2000-03-23 Eli Lilly And Company Protein formulations
KR20120120255A (ko) * 2009-12-22 2012-11-01 비씨엔 펩티드즈, 에스.에이. 국소적 안과용 펩티드 제제
WO2011104557A1 (en) * 2010-02-24 2011-09-01 Arecor Limited Protein formulations
KR20110139486A (ko) * 2010-06-23 2011-12-29 대한민국(농촌진흥청장) 꿀 및 봉독을 유효성분으로 함유하는 상처 치유용 피부외용제 조성물
KR20120029328A (ko) * 2010-09-16 2012-03-26 주식회사 엘지생명과학 높은 방부력을 제공하는 오일 주사 제형
KR20130098110A (ko) * 2012-02-27 2013-09-04 경희대학교 산학협력단 봉독-ｐｌａ2를 포함하는 이상 조절 ｔ 세포 활성 저하 관련 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물
KR20160042120A (ko) * 2013-08-13 2016-04-18 상하이 베네마에 파머수티컬 코포레이션 안정한 인슐린 분비 촉진 펩티드의 하이드로 인젝션 약제학적 조성물
KR20190009589A (ko) * 2017-07-19 2019-01-29 대한민국(농촌진흥청장) 장수말벌의 일벌로부터 분리된 봉독을 함유하는 통풍의 예방 또는 치료용 조성물
WO2020190591A1 (en) * 2019-03-15 2020-09-24 Eli Lilly And Company Preserved formulations

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAN SANG MI, KIM SE GUN, HONG IN PHYO, WOO SOON OK, JANG HYE RI, LEE KYUNG WOO: "Experimental studies of homogeneity and stability honeybee venom using ultra-high performance liquid chromatography", KOREAN JOURNAL OF VETERINARY SERVICE, vol. 39, no. 2, 30 June 2016 (2016-06-30), pages 81 - 86, XP093090238, ISSN: 1225-6552, DOI: 10.7853/kjvs.2016.39.2.81 *

Also Published As

Publication number Publication date
KR20230133595A (ko) 2023-09-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021040337A1 (ko) 니클로사마이드 지연방출 조성물 및 이의 항바이러스 용도
WO2011120281A1 (zh) 左旋奥拉西坦在制备预防或治疗认知功能障碍药物中的应用
Monahan et al. Dose titration of moxidectin oral gel against gastrointestinal parasites of ponies
de Koning et al. Combination therapy for dendritic keratitis with acyclovir and α-interferon
WO2021049864A1 (ko) 두릅나무 추출물을 함유하는 안구건조증 개선용 조성물
WO2022124777A1 (ko) 면역활성을 유도하는 장기 안정성을 가지는 알로페론 복합체
WO2023171852A1 (ko) 등검은말벌독에 함유된 세로토닌의 안정성을 유지하기 위한 조성물
DE2250032C3 (de) Arzneimittel auf der Basis von Lysinderivaten zur Bekämpfung der Leukopenie und zur Normalisierung der prozentualen Zusammensetzung des Leukocytenbildes
US20050171169A1 (en) Combination chemotherapy for helminth infections
KR20060127839A (ko) 펠라르고니엄 종으로부터 추출한 추출물의 용도
WO2012008697A2 (ko) 정자수 증가용 경구 투여제
WO2012046922A1 (en) Novel use of antimicrobial peptides in regeneration of skin cells
WO2020166773A1 (ko) 생약추출물을 유효성분으로 포함하는 국소 지방 분해용 조성물
WO2023043219A1 (ko) 아토피 피부염 예방 또는 치료용 겔 조성물
WO2001047535A2 (en) Pharmaceutical composition comprising snake venom and method for its manufacture
KR20110085841A (ko) 정자수 증가용 경구 투여제
WO2014185607A1 (ko) 폐섬유화증 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2016032153A1 (ko) 미녹시딜 수용액 제조방법
WO2020235952A1 (en) Pharmaceutical composition comprising a fraction of melissa officinalis leaf extract
WO2010067953A2 (ko) 유럽종 포도의 씨 추출물을 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2017061663A1 (ko) 티모신 베타 4를 포함하는 안약의 제조방법
WO2022177054A1 (ko) 제2형 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2022255848A1 (ko) Agkistrodon piscivorus piscivorus 또는 naja melanoleuca로부터 유래된 신규한 펩타이드, 및 이를 포함하는 베체트병 또는 류마티스 관절염의 치료용 조성물
WO2016208926A1 (ko) 애엽의 이소프로판올 추출물을 포함하는 약제학적 조성물
AU2019395549B2 (en) Composition comprising dutasteride

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 22931099

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1