WO2023022616A1 - Method of preventing or treating coronavirus infection - Google Patents

Method of preventing or treating coronavirus infection Download PDF

Info

Publication number
WO2023022616A1
WO2023022616A1 PCT/RU2021/000354 RU2021000354W WO2023022616A1 WO 2023022616 A1 WO2023022616 A1 WO 2023022616A1 RU 2021000354 W RU2021000354 W RU 2021000354W WO 2023022616 A1 WO2023022616 A1 WO 2023022616A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
visit
group
ifn
treatment
cov
Prior art date
Application number
PCT/RU2021/000354
Other languages
French (fr)
Russian (ru)
Inventor
Борис Игоревич КРУГЛЫЙ
Original Assignee
Борис Игоревич КРУГЛЫЙ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Борис Игоревич КРУГЛЫЙ filed Critical Борис Игоревич КРУГЛЫЙ
Priority to PCT/RU2021/000354 priority Critical patent/WO2023022616A1/en
Publication of WO2023022616A1 publication Critical patent/WO2023022616A1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals

Definitions

  • the invention relates to medicine and biology, and is intended for the prevention or treatment of coronavirus infections by using the drug "TRIAVIR”.
  • Coronaviruses are a large family of viruses that cause illness ranging from the common cold to more serious illnesses such as Middle East Respiratory Syndrome (MERS-CoV) and Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS-CoV).
  • MERS-CoV Middle East Respiratory Syndrome
  • SARS-CoV Severe Acute Respiratory Syndrome
  • a novel coronavirus nCoV, COVID-19, SARS-CoV-2 is a new strain that has not been previously identified in humans [10].
  • coronavirus The first coronavirus known to centuries was IBV, an avian infectious bronchitis virus that still causes a lot of trouble for poultry farmers. This virus was registered in 1937. At the moment, 39 types of coronavirus are known, each of which can include tens and hundreds of strains, in addition, there are 10 more candidates for coronaviruses [16].
  • SARS-CoV Severe acute respiratory syndrome coronavirus
  • MERS-CoV Middle East respiratory syndrome
  • SARS-CoV-2 receptor on pneumocytes.
  • Antibody-dependent enhancement is caused not only by neutralizing antibodies, but also by non-neutralizing antibodies.
  • SARS-CoV-2 SARS-CoV-2, AZU is provided by cells with the CD32 phenotype, which include monocytes and macrophages, alveolar macrophages.
  • 2019-nCoV is a virus that has a major impact on public health, economics, and socio-political issues.
  • the containment of COVID-19 should be the top priority for all countries [13].
  • coronaviruses are characterized by the following.
  • protrusions are club-shaped molecules of the S protein, which the virus needs to enter the cell.
  • Another group of viruses has a "crown" of the S protein - toroviruses, relatives of coronaviruses that usually infect animals and rarely humans.
  • Some coronaviruses have a "subcrown” - an additional layer of protruding from the shell of proteins smaller than S. This smaller protein is called HE, hemagglutinin esterase. NOT is also needed for interaction with the cell, and in addition to coronaviruses, toroviruses and some influenza viruses have it.
  • RNA-containing viruses whose genome is a single plus-strand RNA.
  • the coronavirus approaches the cell and touches it with spikes of the S protein, the same one that forms the “crown”.
  • the surface of the cell is seated with many proteins; among them there are protease enzymes, that is, capable of cutting other protein molecules.
  • the cell first absorbs the virus, pushing the membrane into itself in the place where it interacted with it, and the virus is inside the membrane vesicle in the cell cytoplasm.
  • protease enzymes with which the S protein is connected, cut it, and as a result, the part of the S protein remaining in the virus changes its spatial shape.
  • the altered S helps bring the virus membrane and the membrane of the vesicle into which the cell has placed it closer — the two membranes merge, the viral membrane envelope diverges, and the viral RNA enters the cell cytoplasm [16].
  • the prior art describes the following approaches to the treatment of coronavirus infection.
  • RNA-synthesizing enzyme is added to ordinary ribonucleotides with some analogue molecule similar to a ribonucleotide, then RNA synthesis will deteriorate: the enzyme will stop, will not finish the RNA thread it has started, or will continue to synthesize it, but now incorrect letters will often come across in RNA, which will enter into different chemical reactions and thereby provoke numerous mutations.
  • Coronaviruses and other RNA viruses use a special enzyme for synthesis - RNA-dependent RNA polymerase. There is no such enzyme in the cell itself, the cell does not synthesize RNA molecules on the RNA template, so you can try to act on the viral polymerase without interfering with the cell. Molecules-analogues of ribonucleotides have been synthesized for a long time, and some of them were created just to fight viruses. For example, the drug remdesivir was developed against Ebola viruses, but later it turned out that remdesivir suppresses the reproduction of MERS-CoV and SARS-CoV. Remdesivir is known to block SARS-CoV-2 infection in human and monkey cell culture. Clinical trials with sick people are underway in China and the United States, and at least one patient who took remdesivir has already recovered - although it is not yet clear how much he owes his recovery to this particular drug.
  • EIDD-2801 Another ribonucleotide analog called EIDD-2801 has been developed against the influenza virus and, according to a recent article in Science Translational Medicine, also inhibits SARS-CoV and MERS-CoV infection in mice and the replication of the new SARS-CoV-2 in mice. human lung cells. EIDD-2801 provokes many mutations in viral RNA, while cellular RNA is not damaged. It remains to wait for the results of clinical trials.
  • chloroquine is used against the malaria parasite, sometimes against pathogenic amoebas. As it turned out, it also suppresses the activity of the viral polymerase: chloroquine greatly increases the level of zinc ions in the cell, which just interfere with the work of the enzyme. In addition, chloroquine prevents the invading virus from releasing its genome into the cell cytoplasm.
  • chloroquine has a serious disadvantage - because of it, abnormalities in the heart rhythm occur, and the higher the dose of the drug, the higher the risk of cardiac abnormalities. In the meantime, it cannot be said whether small doses of chloroquine can stop SARS-CoV-2 infection.
  • the S-protein plays the role of a master key that breaks the cell: in order for the virus to enter the cell, its S-protein interacts with the ACE2 protein, which sits on the surface of the cell membrane.
  • the viral S protein can be given a snag similar to ACE2 to distract it from the cells.
  • ACE2 itself, only freely floating around the virus, and not sitting on the cell. So, in the April article in the journal Cell, it is said about a human modified ACE2 grown in bacterial cells. Its action was tested on organoids - tiny models of the kidney and blood vessels grown from human stem cells, and such a protein really did not allow the virus to penetrate into human cells [17].
  • the doses used in the formulation can be selected from the following range: lopinavir 0.1-32 mg/100 ml, interferon alfa 50,000 - 1,000,000 IU/100 ml, interferon gamma 5,000 - 500,000 IU/100 ml.
  • Interferons are a multigene family of inducible cytokines with a variety of functions, including antiviral, antiproliferative, antitumor, and immunomodulatory.
  • IFN is divided into three types:
  • Type I - known as viral interferon includes IFN-a (leukocyte, synthesized by activated monocytes and B- lymphocytes), IFN-b (fibroblast, synthesized by fibroblasts and epithelial cells, macrophages), IFN-w, IFN-k;
  • Type II - known as immune includes IFN-y (synthesized by activated T-lymphocytes and NK-cells);
  • Type III - was discovered later than type I and type II, information about it indicates the importance of type III IFN in some types of viral infections.
  • the first type (IFN-a) is mainly characterized by antiviral and antiproliferative effects, to a lesser extent immunomodulatory. They are produced immediately after a meeting with a pathogen, their action is aimed at localizing the pathogen and preventing its spread in the body. These interferons carry out early and non-specific protection of the body from an infectious agent.
  • interferons of the second type IFN-y
  • IFN-y interferons of the second type
  • Viral interferons are induced during viral infection, and the synthesis of type II interferons (IFN- ⁇ ) is activated by mitogenic or antigenic stimuli. Most types of virus-infected cells are able to synthesize IFN a/b in cell culture. In contrast, IFN-y is synthesized only by some cells of the immune system, including natural killer (NK) cells, CD4 T cells, and CDS cytotoxic suppressor cells [18].
  • NK natural killer
  • CD4 T cells CD4 T cells
  • CDS cytotoxic suppressor cells CDS cytotoxic suppressor cells
  • IFN-a2b interferon inhalation is recommended in all COV1D-19 treatment protocols.
  • IFN-a2b inhalations are included in the treatment protocols for different periods, as well as the severity of the disease, and are used in children older than 5 years [25].
  • inhalation administration of IFN-a2b is a significantly more effective agent than its intranasal administration, especially in COVID-19, where the lower respiratory system is predominantly affected [25,20-23,29].
  • the extremely high level of safety of this method of drug administration is noteworthy.
  • a single dose of IFN-a2b for adults ranged from 1.0 to 120 million IU.
  • IFN-a2b in blood plasma was not determined at inhalation doses of 1-18 million IU, but at doses of 60 million IU, trace doses of IFN-a2b were determined in plasma.
  • IFN-a2b In patients who received 120 million IU of IFN-a2b by inhalation, from 11 to 35 IU of IFN-a2b were determined in plasma. No systemic and local side effects from inhaled IFN-a2b at doses of 1-18 million IU were observed, however, doses from 60 to 120 million IU led to hyperthermia, headache and general malaise. These symptoms began after 3-6 hours, reached a maximum severity after 8-10 hours and ended 12-24 hours after inhalation [26]. Thus, the use of IFN-a2b is a traditional method of treating COVID-19, with proven efficacy and safety.
  • Interferon gamma in addition to the intramuscular and subcutaneous route of administration, is used intranasally and in the form of inhalations, including in children [29-31, 32,28,27].
  • IFN- ⁇ increases the expression of major histocompatibility complex (MCHC) antigens of both the 1st and 2nd classes on different cells, and induces the expression of these molecules even on those cells that do not express them constitutively. This increases the efficiency of antigen presentation and the ability of their recognition by T-lymphocytes.
  • IFN-y blocks the replication of viral DNA and RNA, the synthesis of viral proteins and the assembly of mature viral particles.
  • Interferon gamma has a cytotoxic effect on virus-infected cells.
  • the use of IFN-y in a new coronavirus infection is due to the fact that only this type of IFN blocks the synthesis of 0-TGF, which is responsible for the development of pulmonary fibrosis, which is a frequent long-term complication of C0VID-19 [32,33].
  • IFN- ⁇ In clinical pulmonology, interest is currently growing in the potential role of IFN- ⁇ in the treatment of respiratory tract diseases, with preference given to direct delivery of the drug directly to the target organ by inhalation administration, as the most effective and safe method [34,35].
  • IFN- ⁇ is administered to a patient.
  • Studies in healthy volunteers comparing inhaled and subcutaneous administration of IFN- ⁇ have shown that, unlike inhalation, with parenteral administration of the drug, a clear increase in the level of IFN- ⁇ in blood plasma is determined, but not in pulmonary washings [32]. Numerous clinical data have demonstrated a significantly greater efficacy and safety of the aerosol route of administration of IFN-y for the treatment of respiratory viral infections [32,34,35].
  • Effective therapeutic doses of IFN- ⁇ are thousands of times lower than possible toxic, and amount to an adult with dosed inhalation administration of 125-500 pg / ml (31250-125000 IU / ml).
  • Lopinavir is an inhibitor of the SARS 3C-like protease and has been actively studied in vitro in SARS and MERS pathogens, showing some results in terms of inhibiting the replication of these viruses [29-30,35].
  • comparative genetic analysis showed almost complete identity of the structure of the SARS 3C-like protease in the SARS-CoV-2 virus, compared with those in SARS and MERS [36].
  • the technical result achieved by the implementation of the proposed solution is the effective prevention or treatment of patients with coronavirus infection.
  • the total duration of the study for each patient was no more than 14 days, divided into 3 periods:
  • Visit V0 (day -1)
  • the research doctor collects an epidemiological history, demographic data, complaints and anamnesis, a physical examination, an assessment of the clinical manifestations of the disease, prescribes computed tomography (MSCT) of the lungs, ECG, pulse oximetry with SpO2 measurement, swabs from the nasopharynx and oropharynx for the presence of SARS-RNA CoV-2 by PCR, general (clinical) blood test with the determination of the level of leukocytes, leukocyte formula, absolute and percentage of lymphocytes, biochemical blood tests, general urinalysis, examination of the level of C-reactive protein (CPV) in blood serum.
  • MSCT computed tomography
  • control group received standard therapy in accordance with the interim guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation for the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020).
  • the second group in addition to standard therapy in accordance with the temporary guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation for prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed a combined inhalation mixture No. 1 through a nebulizer for 10 minutes 4 times a day for 14 days.
  • the third group in addition to standard therapy in accordance with the temporary guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation on the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed a combined inhalation mixture No. 2 through a nebulizer in for 10 minutes 4 times a day for 14 days.
  • each participant in the study was assigned a randomization number by random number generation using the statistical program SPSS Statistics 19.0. This number identifies the type of therapy used (T1-T5) according to the randomization plan. This number was assigned to the study participant for the entire period of the study.
  • Visit V2 (day 4 from Visit VI).
  • Visit V3 (Day 8 from Visit VI).
  • Visit V4 (Day 14 ( ⁇ 2) from Visit VI).
  • the patient needs to take drugs of prohibited therapy
  • Severe, decompensated or unstable somatic diseases any disease or condition that threatens the patient's life or worsens the patient's prognosis, and also makes it impossible to conduct a clinical trial
  • the duration of study drug use was 14 days ( ⁇ 2 days).
  • Duration of observation of the patient is 14 days ( ⁇ 2 days). Control of safety and tolerability of drugs was carried out throughout the entire period of its use and subsequent observation.
  • Control consisted in assessing the frequency, nature and intensity of adverse events and serious adverse events.
  • composition of inhalation mixtures is a composition of inhalation mixtures:
  • IFNa2b 1000 IU/ml + IFNy, 100 IU/ml + lopinavir 80 mcg/ml
  • the drug "TRIAVIR” (IFNa2b, 1000 IU/ml + IFNu, 100 IU/ml + lopinavir 80 mcg/ml).
  • the sample of patients in the study groups is homogeneous.
  • composition of inhalation mixtures is a composition of inhalation mixtures:
  • Fig. 11 also describes visit 1.
  • the distribution can be considered normal.
  • a normal distribution diagram called a Q-Q diagram (see FIG. 11)
  • a Q-Q diagram see FIG. 11
  • each observed value is compared to the value expected under a normal distribution.
  • all points lie on a straight line.
  • Observed values are plotted on the x-axis and expected values are plotted on the y-axis, with all values being standardized (z-transformed). In this example, the observed values are quite close to a straight line.
  • Fig. 12 also describes visit 4.
  • Figure 14 shows negative and positive PCR samples by group after the end of treatment.
  • Figure 15 shows comparisons of PCR results by group during visits 1-3.
  • lymphocytes The content of lymphocytes is also reflected in Fig.16.
  • Table 36 The level of C-reactive protein (SRV) in blood serum.
  • TRIAVIR can be used both in combined prophylaxis or therapy, and as monotherapy for initial and mild forms or monoprophylaxis. Modes of administration and dosage for combined use and mono-use will be selected by a specialist, based on the patient's condition.
  • Fig.1 the age characteristics of the studied population are presented; figure 2 - weight characteristics of the study population; on fig.Z - growth characteristics of the studied population; figure 4 - characteristics of BMI; on fig.ba - CT scan results of the control group at Visit 1; Fig.56 - CT results of the comparison group at Visit 1; fig.ba - CT results of the control group at Visit 4; fig.bb - CT results of the comparison group at Visit 4; on figa - CT results of group 2 at Visit 1; on fig.7b - CT results of group 2 at Visit 4; in fig. 8a - Group 3 CT scan results at Visit 1; in fig. 86 - Group 3 CT scan results at Visit 1; in fig.
  • Izh - Normal QQ chart with removed trend Visit 1 for group 2.00; in fig. 12a - Visit 4 Stem-List Chart for Group 1.00 and 2.00; in fig. 126 - Histogram for group 1.00; in fig. 12c - Histogram for group 2.00; in fig. 12d - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 1.00; in fig. 12e - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 2.00; in fig. 12e - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 1.00; in fig. 12g - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 2.00; in fig. 13a - Summary result for SP02 based on group averages; in fig.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

The invention relates to medicine and biology and is intended for preventing or treating coronavirus infections using the drug TRIAVIR®.

Description

СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ. METHOD FOR PREVENTION OR TREATMENT OF CORONAVIRUS INFECTION.
1. Область техники, к которой относится изобретение1. Technical field to which the invention belongs
Изобретение относится к медицине и биологии, предназначено для профилактики или лечения коронавирусных инфекций путем применения препарата «ТРИАВИР». The invention relates to medicine and biology, and is intended for the prevention or treatment of coronavirus infections by using the drug "TRIAVIR".
2. Уровень техники 2. State of the art
Коронавирусы (КоВ) - многочисленное семейство вирусов, вызывающих болезнь от бытовой простуды до более серьезных заболеваний, таких как ближневосточный респираторный синдром (БВРС- КоВ) и тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС-КоВ). Новый коронавирус (нКоВ, COVID-19, SARS-CoV-2) - это новый штамм, ранее у человека не выявлявшийся [10]. Coronaviruses (CoV) are a large family of viruses that cause illness ranging from the common cold to more serious illnesses such as Middle East Respiratory Syndrome (MERS-CoV) and Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS-CoV). A novel coronavirus (nCoV, COVID-19, SARS-CoV-2) is a new strain that has not been previously identified in humans [10].
Первым известным человечеству коронавирусом стал IBV -вирус птичьего инфекционного бронхита, который до сих пор причиняет массу неприятностей птицеводам. Данный вирус был зарегистрирован в 1937 году. На данный момент известно 39 видов коронавируса, в каждый из которых может входить десятки и сотни штаммов, кроме того, есть еще 10 кандидатов к коронавирусы [16]. The first coronavirus known to mankind was IBV, an avian infectious bronchitis virus that still causes a lot of trouble for poultry farmers. This virus was registered in 1937. At the moment, 39 types of coronavirus are known, each of which can include tens and hundreds of strains, in addition, there are 10 more candidates for coronaviruses [16].
В XXI веке появились нескольких новых коронавирусов (CoV). Особенностью новых вирусов является необычайно высокая вирулентность и патогенность, а вызываемые ими поражения нередко заканчиваются летальным исходом [1,2]. Впервые коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) был выявлен в 2003 году [3]. Десятилетие спустя появился второй новый коронавирус - возбудитель ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV), впервые выявленный в Саудовской Аравии [1]. За время существования с момента первого выявления SARS-CoV инфицировал около 8000 человек, а летальный исход регистрировался примерно у 10 % инфицированных [4]. MERS-CoV был не так широко распространен, как SARS-CoV, но по своей активности он более патогенен и вирулентен, а также способствует более высокому проценту летальных исходов, равному 35-50 % от всех диагностированных случаев заражения [1,2]. Several novel coronaviruses (CoVs) have emerged in the 21st century. A feature of new viruses is their unusually high virulence and pathogenicity, and the lesions they cause often end in death [1,2]. Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) was first identified in 2003 [3]. A decade later, a second new coronavirus appeared, the causative agent of the Middle East respiratory syndrome (MERS-CoV), first identified in Saudi Arabia [1]. During its existence since The first detection of SARS-CoV infected about 8000 people, and death was recorded in about 10% of those infected [4]. MERS-CoV was not as widespread as SARS-CoV, but in terms of its activity it is more pathogenic and virulent, and also contributes to a higher percentage of deaths, equal to 35-50% of all diagnosed cases of infection [1,2].
Вызывает озабоченность тот факт, что в популяциях животных были обнаружены и другие CoV, что как повышает вероятность повторения подобных вспышек [4]. Поскольку оба вируса SARS-CoV и MERS-CoV зоонозные и способны вызвать гораздо более тяжелые заболевания, чем те, что обычно наблюдают для CoV. Следствием инфицирования SARS-CoV и MERS-CoV является тяжелое поражение легких в виде острого повреждения легочной ткани (ОПЛ), сопровождающееся отеком легких и дыхательной недостаточностью. При этом возможно динамическое развитие в ОПЛ - острый респираторный дистресс-синдром (ОРД С) [5]. It is of concern that other CoVs have been found in animal populations, which increases the likelihood of similar outbreaks recurring [4]. Because both SARS-CoV and MERS-CoV are zoonotic and can cause much more severe disease than those commonly seen with CoV. The consequence of infection with SARS-CoV and MERS-CoV is severe lung damage in the form of acute lung tissue injury (ALT), accompanied by pulmonary edema and respiratory failure. At the same time, dynamic development in ALI is possible - acute respiratory distress syndrome (ARDS) [5].
Развитие указанных синдромов имеет место и при новой коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2. Выявлено, что расстройства иммунной функции играют ключевую роль в ее патогенезе [6, 7, 8, 9]. Отмечается наличие лимфопении и отсутствии нейтропении. Лимфоциты периферической крови преимущественно относились к клеткам, имеющим маркеры HLA-DR и CD38. Они относились к субпопуляциям перфорин и/или гранулизин-положительных CD8+ Т- лимфоцитов или воспалительным ТЫ7- клеткам. Поскольку последние обладают выраженными повреждающими тканевыми эффектами, а также иммуносупрессивной активностью, то следствие подобных изменений являлось значительное повреждение легочной ткани в виде диффузного повреждения альвеол, и развитие ОРДС. Подобные изменения согласуются с высокой экспрессией рецептора SARS-CoV-2 на пневмоцитах. Последними исследованиями показано, что одним из биологически правдоподобных механизмов повреждения легких при SARS-CoV-2 является антителозависимое усиление (АЗУ) [8,9]. Антителозависимое усиление вызывается не только нейтрализующими антителами, но и ненейтрализующими антителами. Применительно к SARS-CoV-2 АЗУ обеспечивается клетками с фенотипом CD32, к которым относят моноциты и макрофаги, альвеолярные макрофаги. The development of these syndromes also occurs with a new coronavirus infection caused by SARS-CoV-2. Immune function disorders have been found to play a key role in its pathogenesis [6, 7, 8, 9]. The presence of lymphopenia and the absence of neutropenia are noted. Peripheral blood lymphocytes predominantly belonged to cells with HLA-DR and CD38 markers. They belonged to subpopulations of perforin and/or granulosin-positive CD8 + T lymphocytes or inflammatory Th17 cells. Since the latter have pronounced damaging tissue effects, as well as immunosuppressive activity, the consequence of such changes was significant damage to the lung tissue in the form of diffuse damage to the alveoli, and the development of ARDS. These changes are consistent with high expression of the SARS-CoV-2 receptor on pneumocytes. Recent studies have shown that one of the biologically plausible mechanisms of lung injury in SARS-CoV-2 is antibody dependent enhancement (AZA) [8,9]. Antibody-dependent enhancement is caused not only by neutralizing antibodies, but also by non-neutralizing antibodies. With regard to SARS-CoV-2, AZU is provided by cells with the CD32 phenotype, which include monocytes and macrophages, alveolar macrophages.
Первые случаи заражения COVID-19 зафиксированы в Китае в декабре 2019 г. Однако уже на 04 марта 2020 г. в мире зарегистрировано в общей сложности 93 090 случаев заболевания COVID-19 и 3198 смертей. Большая часть случаев и смертей - в Китае (80422 и 2984, соответственно), однако случаи коронавируса и смерти от него зафиксированы также в 76 странах мира [11]. The first cases of COVID-19 infection were recorded in China in December 2019. However, as of March 04, 2020, a total of 93,090 cases of COVID-19 and 3,198 deaths have been registered in the world. Most of the cases and deaths are in China (80422 and 2984, respectively), but cases of coronavirus and deaths from it have also been recorded in 76 countries around the world [11].
На 03 апреля 2020 г. в мире зарегистрировано в общей сложности 1 095 904 случаев заболевания COVID-19 и 58 814 смертей. Большая часть случаев и смертей - в США (275 744 и 7 086, соответственно), Италии (119 827 и 14 681, соответственно), Испании (119 199 и 11 198, соответственно), Германии (91 159 и 1 275, соответственно), в Китае (81 620 и 3 322, соответственно). Случаи коронавируса и смерти от него зафиксированы уже в 205 странах мира [12]. Очевидно, что темпы распространения инфекции крайне высокие, несмотря на принимаемые меры. As of April 03, 2020, a total of 1,095,904 cases of COVID-19 and 58,814 deaths have been registered worldwide. Most of the cases and deaths are in the USA (275,744 and 7,086, respectively), Italy (119,827 and 14,681, respectively), Spain (119,199 and 11,198, respectively), Germany (91,159 and 1,275, respectively) , in China (81,620 and 3,322, respectively). Cases of coronavirus and death from it have already been recorded in 205 countries around the world [12]. It is obvious that the infection rate is extremely high, despite the measures taken.
2019-nCoV - это вирус, оказывающий серьезное воздействие на здоровье населения, экономику и социально-политические вопросы. Сдерживание COVID-19 должно быть главным приоритетом для всех стран [13]. 2019-nCoV is a virus that has a major impact on public health, economics, and socio-political issues. The containment of COVID-19 should be the top priority for all countries [13].
Поскольку это новое инфекционное заболевание, то на сегодняшний день зарегистрированной вакцины против нового коронавируса нет [14]. Но из-за существования риска АУЗИ вакцина, формирующая прежде всего гуморальный ответ организма, нуждается в очень тщательной проверке на безопасность в модельных системах, максимально приближенных к воспроизведению реальных инфекций и в клинических исследованиях. В то же время, вакцина, формирующая клеточный иммунитет на консервативные антигенные детерминанты, не будет провоцировать АЗУИ. Since this is a new infectious disease, there is currently no registered vaccine against the new coronavirus [14]. But due to the existence of the risk of AUS, the vaccine, which primarily forms the humoral response of the body, needs to be very carefully tested for safety in model systems that are as close as possible to reproducing real infections and in clinical trials. research. At the same time, a vaccine that forms cellular immunity to conservative antigenic determinants will not provoke ASD.
Также существует острая неудовлетворенная потребность в оптимальном лечении, включая специфическую противовирусную терапию, изучении роли модуляции иммунной системы и как лучше всего обеспечить поддержку отказавших систем органов. На данный момент зарегистрировано более 160 рандомизированных и неслучайных исследований. Для лечения COVID-19 используют различные средства, включая кортикостероиды, различные комбинации рибавирина, лопинавира/ритонавира, хлорохина, гидроксихлорохина, интерферонов и других агентов. Проводится РКИ с использованием ремдесивира при тяжелом течении COVID-19 (NCT04257656). [15]. Лечение осуществляют также с использованием средств народной медицины. There is also an urgent unmet need for optimal treatment, including specific antiviral therapy, to explore the role of immune system modulation, and how best to provide support for failed organ systems. More than 160 randomized and non-randomized trials have been registered so far. Various agents have been used to treat COVID-19, including corticosteroids, various combinations of ribavirin, lopinavir/ritonavir, chloroquine, hydroxychloroquine, interferons, and other agents. An RCT is underway using remdesivir for severe COVID-19 (NCT04257656). [15]. Treatment is also carried out using traditional medicine.
Кроме обозначенных выше есть еще четыре человеческих коронавируса, два из которых, HCoV-229E и HCoV-OC43, были известны ещё до атипичной пневмонии от SARS-CoV, а два других, HCoV-NL63 и HCoV-HKUl, открыли в 2004 и 2005 годах. Все четыре не вызывают ничего серьёзнее мягкой простуды; хотя коронавирусная простуда встречается довольно часто — на её счёт относят 15 — 30% всей простуды в мире [16]. In addition to those indicated above, there are four more human coronaviruses, two of which, HCoV-229E and HCoV-OC43, were known even before SARS-CoV, and the other two, HCoV-NL63 and HCoV-HKUl, were discovered in 2004 and 2005. . All four cause nothing more serious than a mild cold; although the coronavirus cold is quite common, it accounts for 15-30% of all colds in the world [16].
Однако для всех коронавирусов характерно следующее. However, all coronaviruses are characterized by the following.
В электронный микроскоп можно увидеть, что округлые вирусные частицы украшены выступами, которые создают вокруг вируса как бы дополнительную оболочку, похожую на солнечную корону. Выступы — булавообразные молекулы белка S, который нужен вирусу, чтобы проникнуть в клетку. (Надо сказать, что «корона» из белка S есть ещё у одной группы вирусов — торовирусов, родственников коронавирусов, обычно заражающих животных и редко — человека.) У некоторых коронавирусов имеется «подкорона» — дополнительный слой выступающих из оболочки белков размером поменьше S. Этот более мелкий белок называется НЕ, гемагглютининэстераза. НЕ тоже нужен для взаимодействия с клеткой, и он есть кроме коронавирусов у торовирусов и у некоторых вирусов гриппа. In an electron microscope, you can see that rounded virus particles are decorated with protrusions that create an additional shell around the virus, similar to the solar corona. The protrusions are club-shaped molecules of the S protein, which the virus needs to enter the cell. (I must say that another group of viruses has a "crown" of the S protein - toroviruses, relatives of coronaviruses that usually infect animals and rarely humans.) Some coronaviruses have a "subcrown" - an additional layer of protruding from the shell of proteins smaller than S. This smaller protein is called HE, hemagglutinin esterase. NOT is also needed for interaction with the cell, and in addition to coronaviruses, toroviruses and some influenza viruses have it.
И белок S, и белок НЕ сидят в мембранной липидной оболочке, которую вирус берет у клеток хозяина, выходя из клетки. Кроме S и НЕ в ней сидит очень много белка М, который поддерживает и структурирует мембрану, и ещё немного белка Е. Под липидной оболочкой с белками геном вируса — нить молекулы РНК, которая усажена белком N: он упаковывает вирусную РНК в компактную свёрнутую спираль. Когда РНК попадает в клетку, то на ней сразу можно синтезировать белки, и такую РНК у вирусов обозначают плюсом. По этим признакам коронавирусы относят к РНК-содержащим вирусам, чей геном представляет собой одну-единственную плюс-цепь РНК. Both the S protein and the protein do NOT sit in the membrane lipid envelope that the virus picks up from the host cells as it leaves the cell. In addition to S and HE, there is a lot of M protein in it, which supports and structures the membrane, and a little more E protein. Under the lipid membrane with proteins, the virus genome is a thread of an RNA molecule, which is seated with N protein: it packs the viral RNA into a compact folded helix. When RNA enters a cell, proteins can immediately be synthesized on it, and such RNA in viruses is denoted by a plus. According to these features, coronaviruses are classified as RNA-containing viruses, whose genome is a single plus-strand RNA.
Коронавирус подходит к клетке и касается её шипиками белка S — того самого, который образует «корону». Поверхность клетки усажена множеством белков; среди них есть и ферменты-протеазы, то есть способные резать другие белковые молекулы. Клетка сначала поглощает вирус, впячивая в себя мембрану в том месте, где он с ней взаимодействовал, — и вирус оказывается внутри мембранного пузырька в клеточной цитоплазме. Ферменты-протеазы, с которыми соединился белок S, разрезают его, и в результате оставшаяся у вируса часть белка S меняет пространственную форму. Изменённый S помогает сблизиться мембране вируса и мембране пузырька, в который его поместила клетка, — две мембраны сливаются, вирусная мембранная оболочка расходится, и в клеточную цитоплазму выходит вирусная РНК [16]. The coronavirus approaches the cell and touches it with spikes of the S protein, the same one that forms the “crown”. The surface of the cell is seated with many proteins; among them there are protease enzymes, that is, capable of cutting other protein molecules. The cell first absorbs the virus, pushing the membrane into itself in the place where it interacted with it, and the virus is inside the membrane vesicle in the cell cytoplasm. Protease enzymes, with which the S protein is connected, cut it, and as a result, the part of the S protein remaining in the virus changes its spatial shape. The altered S helps bring the virus membrane and the membrane of the vesicle into which the cell has placed it closer — the two membranes merge, the viral membrane envelope diverges, and the viral RNA enters the cell cytoplasm [16].
В уровне техники описаны следующие подходы к лечению коронавирусной инфекции. The prior art describes the following approaches to the treatment of coronavirus infection.
Остановка копирования вирусного генома. Если ферменту, синтезирующему РНК, к обычным рибонуклеотидам добавить какую-нибудь молекулу-аналог, похожую на рибонуклеотид, то синтез РНК испортится: фермент остановится, не закончит начатую нить РНК или же продолжит её синтезировать, но теперь в РНК будут часто попадаться неправильные буквы, которые будут вступать в разные химические реакции и тем самым провоцировать многочисленные мутации. Stopping the copying of the viral genome. If an RNA-synthesizing enzyme is added to ordinary ribonucleotides with some analogue molecule similar to a ribonucleotide, then RNA synthesis will deteriorate: the enzyme will stop, will not finish the RNA thread it has started, or will continue to synthesize it, but now incorrect letters will often come across in RNA, which will enter into different chemical reactions and thereby provoke numerous mutations.
Коронавирусы и другие РНК-вирусы используют для синтеза особый фермент — РНК-зависимую РНК-полимеразу. В самой клетке такого фермента нет, клетка не занимается синтезом молекул РНК на шаблоне РНК, поэтому можно попробовать подействовать на вирусную полимеразу, не мешая клетке. Молекулы-аналоги рибонуклеотидов синтезируют давно, и некоторые из них создавали как раз для борьбы с вирусами. Например, лекарство ремдесивир разрабатывали против вирусов Эбола, но впоследствии оказалось, что ремдесивир подавляет размножение MERS-CoV и SARS-CoV. Известно, что ремдесивир блокирует инфекцию SARS-CoV-2 в культуре клеток человека и обезьяны. Клинические испытания с больными людьми проходят в Китае и США, и как минимум один пациент, принимавший ремдесивир, уже выздоровел — правда, пока непонятно, насколько он своим выздоровлением обязан именно этому препарату. Coronaviruses and other RNA viruses use a special enzyme for synthesis - RNA-dependent RNA polymerase. There is no such enzyme in the cell itself, the cell does not synthesize RNA molecules on the RNA template, so you can try to act on the viral polymerase without interfering with the cell. Molecules-analogues of ribonucleotides have been synthesized for a long time, and some of them were created just to fight viruses. For example, the drug remdesivir was developed against Ebola viruses, but later it turned out that remdesivir suppresses the reproduction of MERS-CoV and SARS-CoV. Remdesivir is known to block SARS-CoV-2 infection in human and monkey cell culture. Clinical trials with sick people are underway in China and the United States, and at least one patient who took remdesivir has already recovered - although it is not yet clear how much he owes his recovery to this particular drug.
Другой аналог рибонуклеотидов под названием EIDD-2801 разрабатывали против вируса гриппа, — и он, как говорится в недавней статье в «Science Translational Medicine», также подавляет инфекцию SARS- CoV и MERS-CoV у мышей и размножение нового SARS-CoV-2 в клетках лёгких человека. EIDD-2801 провоцирует много мутаций в вирусной РНК, при этом клеточная РНК не повреждается. Осталось дождаться результатов клинических исследований. Another ribonucleotide analog called EIDD-2801 has been developed against the influenza virus and, according to a recent article in Science Translational Medicine, also inhibits SARS-CoV and MERS-CoV infection in mice and the replication of the new SARS-CoV-2 in mice. human lung cells. EIDD-2801 provokes many mutations in viral RNA, while cellular RNA is not damaged. It remains to wait for the results of clinical trials.
Можно попробовать выключить саму вирусную РНК-полимеразу. Хлорохин используют против малярийного паразита, иногда — против патогенных амёб. Как оказалось, он ещё и подавляет активность вирусной полимеразы: хлорохин сильно повышает в клетке уровень ионов цинка, которые как раз мешают работать ферменту. Кроме того, хлорохин не даёт вторгающемуся в клетку вирусу высвободить свой геном в клеточную цитоплазму. Однако у хлорохина есть серьёзный минус — из-за него возникают аномалии в сердечном ритме, и, чем выше доза лекарства, тем выше риск сердечных аномалий. А пока нельзя сказать, могут ли небольшие дозы хлорохина остановить инфекцию SARS-CoV-2. You can try turning off the viral RNA polymerase itself. Chloroquine is used against the malaria parasite, sometimes against pathogenic amoebas. As it turned out, it also suppresses the activity of the viral polymerase: chloroquine greatly increases the level of zinc ions in the cell, which just interfere with the work of the enzyme. In addition, chloroquine prevents the invading virus from releasing its genome into the cell cytoplasm. However, chloroquine has a serious disadvantage - because of it, abnormalities in the heart rhythm occur, and the higher the dose of the drug, the higher the risk of cardiac abnormalities. In the meantime, it cannot be said whether small doses of chloroquine can stop SARS-CoV-2 infection.
Другой путь - это помешать проникнуть вирусу в клетку. Вне клетки вирус не может размножаться, а те вирусные частицы, что остались в межклеточном пространстве и в крови будут уничтожены клетками иммунной системы. S-белок играет роль отмычки, взламывающей клетку: чтобы вирус вошёл в клетку, его S-белок взаимодействует с белком АСЕ2, который сидит на поверхности клеточной мембраны. Another way is to prevent the virus from entering the cell. Outside the cell, the virus cannot multiply, and those viral particles that remain in the intercellular space and in the blood will be destroyed by the cells of the immune system. The S-protein plays the role of a master key that breaks the cell: in order for the virus to enter the cell, its S-protein interacts with the ACE2 protein, which sits on the surface of the cell membrane.
Вирусному S-белку можно предоставить обманку, похожую на АСЕ2, чтобы он отвлёкся от клеток. Например, сам АСЕ2, только свободно плавающий вокруг вируса, а не сидящий на клетке. Так, в апрельской статье в журнале «Cell» говорится про человеческий модифицированный АСЕ2, выращенный в бактериальных клетках. Его действие проверяли на органоидах — крохотных моделях почки и кровеносных сосудов, выращенных из стволовых клеток человека, и такой белок действительно не позволял вирусу проникать в человеческие клетки [17]. The viral S protein can be given a snag similar to ACE2 to distract it from the cells. For example, ACE2 itself, only freely floating around the virus, and not sitting on the cell. So, in the April article in the journal Cell, it is said about a human modified ACE2 grown in bacterial cells. Its action was tested on organoids - tiny models of the kidney and blood vessels grown from human stem cells, and such a protein really did not allow the virus to penetrate into human cells [17].
Однако универсально решения по профилактике и лечению короновирусной инфекции еще не найдено и на данный момент все еще существует острая необходимость в эффективных средствах и способах профилактики или лечении как новой короновирусной инфекции, так и любой из известных, а также вновь возникшей в будующем. However, a universal solution for the prevention and treatment of coronovirus infection has not yet been found, and at the moment there is still an urgent need for effective means and methods for the prevention or treatment of both a new coronovirus infection, and any of the known ones, as well as newly emerged in the future.
3. Сущность изобретения 3. The essence of the invention
Рецептура препарата «ТРИАВИР». Наименование компонента Количество на 1 флакон 100 мл Recipe of the drug "TRIAVIR". Component name Quantity for 1 vial 100 ml
Активные вещества Active substances
Интерферон а2Ь рекомбинантный 100 000 ME Interferon a2b recombinant 100,000 IU
Интерферон у рекомбинантный 10 000 ME Interferon y recombinant 10 000 ME
Лопинавир 2,0 мг Lopinavir 2.0 mg
Вспомогательные вещества Excipients
Натрия хлорид 900 мг Sodium chloride 900 mg
Спирт этиловый 2.0 Ethyl alcohol 2.0
Приведенный вариант рецептуры служит не для ограничения объёма притязаний, а для демонстрации конкретного примера воплощения. The given version of the recipe does not serve to limit the scope of claims, but to demonstrate a specific example of embodiment.
Дозы, используемые в рецептуре могут быть выбраны из следующего диапазона: лопинавир 0,1-32 мг/100 мл, интерферон альфа 50000 - 1000000 ME \100 мл, интерферон гамма 5000 - 500000 ME /100 мл. The doses used in the formulation can be selected from the following range: lopinavir 0.1-32 mg/100 ml, interferon alfa 50,000 - 1,000,000 IU/100 ml, interferon gamma 5,000 - 500,000 IU/100 ml.
Характеристика каждого из компонентов ингаляционной смеси, препарата «Триавир». Characteristics of each of the components of the inhalation mixture, the drug "Triavir".
Интерфероны - мультигенное семейство индуцибельных цитокинов, обладающих разнообразными функциями, включающими противовирусную, антипролиферативную, противоопухолевую и иммуномодулирующую. Interferons are a multigene family of inducible cytokines with a variety of functions, including antiviral, antiproliferative, antitumor, and immunomodulatory.
ИФН подразделяют на три типа: IFN is divided into three types:
Тип I - известный как вирусный интерферон, включает ИФН-а (лейкоцитарный, синтезируется активированными моноцитами и В- лимфоцитами), ИФН--Ь (фибробластный, синтезируется фибробластами и эпителиальными клетками, макрофагами), ИФН-w, ИФН-к; Type I - known as viral interferon, includes IFN-a (leukocyte, synthesized by activated monocytes and B- lymphocytes), IFN-b (fibroblast, synthesized by fibroblasts and epithelial cells, macrophages), IFN-w, IFN-k;
Тип II - известный как иммунный, включает ИФН-у (синтезируется активированными Т-лимфоцитами и NK-клетками); Type II - known as immune, includes IFN-y (synthesized by activated T-lymphocytes and NK-cells);
Тип III - был обнаружен позже типа I и типа II, информация о нем свидетельствует о важности ИФН типа III в некоторых видах вирусных инфекций. Type III - was discovered later than type I and type II, information about it indicates the importance of type III IFN in some types of viral infections.
Первому типу (ИФН-а), главным образом, присущи антивирусный и антипролиферативный эффекты, в меньшей степени иммуномодулирующий. Они вырабатываются непосредственно после встречи с патогеном, их действие направлено на локализацию возбудителя и предотвращение его распространения в организме. Эти интерфероны осуществляют раннюю и неспецифическую защиту организма от инфекционного агента. The first type (IFN-a) is mainly characterized by antiviral and antiproliferative effects, to a lesser extent immunomodulatory. They are produced immediately after a meeting with a pathogen, their action is aimed at localizing the pathogen and preventing its spread in the body. These interferons carry out early and non-specific protection of the body from an infectious agent.
Главное действие интерферонов второго типа (ИФН-у) - участие в реакциях иммунитета. Он начинает вырабатываться на последующих этапах инфекционного процесса уже сенсибилизированными Т-лимфоцитами и активно участвует в каскаде специфического иммунного ответа. The main action of interferons of the second type (IFN-y) is participation in immune reactions. It begins to be produced at subsequent stages of the infectious process by already sensitized T-lymphocytes and is actively involved in the specific immune response cascade.
Вирусные интерфероны индуцируются в процессе вирусной инфекции, а синтез интерферонов II типа (ИФН-у) активируется митогенными или антигенными стимулами. Большинство типов вирусоинфицированных клеток способно синтезировать ИФН а/b в клеточной культуре. В противоположность этому ИФН-у синтезируется только некоторыми клетками иммунной системы, включая естественные киллерные (NK) клетки, CD4 Т-клетки и CDS цитотоксические супрессорные клетки [18]. Согласно «Временным методическим рекомендациям Минздрава РФ» [19], «рекомбинантный интерферон альфа 2Ь (ИФН-а2Ь) в виде раствора для интраназального введения обладает иммуномодулирующим, противовоспалительным и противовирусным действием. Механизм действия основан на предотвращении репликации вирусов, попадающих в организм через дыхательные пути». Viral interferons are induced during viral infection, and the synthesis of type II interferons (IFN-γ) is activated by mitogenic or antigenic stimuli. Most types of virus-infected cells are able to synthesize IFN a/b in cell culture. In contrast, IFN-y is synthesized only by some cells of the immune system, including natural killer (NK) cells, CD4 T cells, and CDS cytotoxic suppressor cells [18]. According to the Interim Guidelines of the Ministry of Health of the Russian Federation [19], “recombinant interferon alfa 2b (IFN-a2b) in the form of a solution for intranasal administration has immunomodulatory, anti-inflammatory and antiviral effects. The mechanism of action is based on preventing the replication of viruses that enter the body through the respiratory tract.
Эффективность ингаляционного применения ИФН-а2Ь при COVID-19 также доказана с высокой степенью достоверности [20-23,29]. Именно поэтому, согласно Клиническим рекомендациям, принятым в настоящее время в КНР: «Интерфероновая ингаляция ИФН-а2Ь рекомендуется во всех протоколах лечения COV1D-19». При этом ингаляции ИФН-а2Ь входят в протоколы лечения разных периодов, а также степей тяжести заболевания и применяются у детей старше 5 лет [25]. The effectiveness of inhaled IFN-a2b in COVID-19 has also been proven with a high degree of certainty [20-23,29]. That is why, according to the Clinical Guidelines currently adopted in the PRC: "IFN-a2b interferon inhalation is recommended in all COV1D-19 treatment protocols." At the same time, IFN-a2b inhalations are included in the treatment protocols for different periods, as well as the severity of the disease, and are used in children older than 5 years [25].
Таким образом, ингаляционное введение ИФН-а2Ь является существенно более эффективным средством, чем его интраназальное применение, особенно при COVID-19, где поражаются преимущественно нижние отделы дыхательной системы [25,20-23,29]. При этом обращает на себя внимание чрезвычайно высокий уровень безопасности такого способа введения препарата. Так, при использовании дозированного распыляющего небулайзера, разовая доза ИФН-а2Ь для взрослых колебалась от 1,0 до 120 млн. ME. При этом ИФН-а2Ь в плазме крови не определялся при ингаляционных дозах в 1-18 млн ME, но при дозах 60 млн. ME определялись следовые дозы ИФН-а2Ь в плазме. При этом у пациентов, получавших ингаляционно 120 млн ME ИФН-а2Ь, в плазме определялось от 11 до 35 ME ИФН-а2Ь. Никаких системных и местных побочных эффектов от ингаляционного приема ИФН-а2Ь в дозах 1-18 млн ME не наблюдалось, однако дозы от 60 до 120 млн ME, приводили к гипертермии, головной боли и общему недомоганию. Эти симптомы начинались через 3-6 часов, достигали максимальной выраженности через 8-10 часов и заканчивались через 12-24 часа после ингаляции [26]. Таким образом, применение ИФН-а2Ь является традиционным способом терапии COVID-19, с доказанной эффективностью и безопасностью. Интерферон гамма (ИФН-у), кроме внутримышечного и подкожного способа введения применяется интраназально и в виде ингаляций, в том числе у детей [29-31, 32,28,27]. В отличие от других интерферонов ИФН-у, повышает экспрессию антигенов главного комплекса гистосовместимости (ГКГС) как1-го, таки 2-го классов на разных клетках, причем индуцирует экспрессию этих молекул даже на тех клетках, которые не экспрессируют их конститутивно. Тем самым повышается эффективность презентации антигенов и способность их распознавания Т-лимфоцитами. ИФН-у блокирует репликацию вирусных ДНК и РНК, синтез вирусных белков и сборку зрелых вирусных частиц. Интерферон гамма оказывает цитотоксическое воздействие на вирусинфицированные клетки. Применение ИФН-у при новой коронавирусной инфекции обусловлено тем, что только этот тип ИФН блокирует синтез 0-TGF, ответственных за развитие фиброза легких, который является частым отдаленным осложнением C0VID-19 [32,33]. В клинической пульмонологии в настоящее время возрастает интерес к потенциальной роли ИФН-у в лечении заболеваний респираторного тракта, причем предпочтение отдается прямой доставке препарата прямо в орган- мишень путем ингаляционного введения, как наиболее эффективного и безопасного способа [34,35]. Исследования на здоровых добровольцах при сравнении ингаляционного и подкожного введения ИФН-у продемонстрировали, что, в отличие от ингаляционного, при парентеральном введении препарата, определяются отчетливое повышение уровня ИФН-у в плазме крови, но не в легочных смывах[32]. Многочисленные клинические данные продемонстрировали существенно большую эффективность и безопасность аэрозольного пути введения ИФН-у для лечения респираторных вирусных инфекций [32,34,35]. Эффективные терапевтические дозировки ИФН-у в тысячи раз ниже возможных токсических, и составляют для взрослого человека при дозированном ингаляционном введении 125-500 пг/мл (31250-125000МЕ/мл). При этом, терапевтические дозы интерферонов, из-за их низкой концентрации практически не обладают каким-либо местно-раздражающим действием и могут применяться по нескольку раз в день в течение длительного времени (до нескольких месяцев] [34]. Таким образом, безопасность введения ИФН-у путем небулайзерных ингаляций в терапевтических дозах несомненно доказана по результатам достоверных клинических исследований. Кроме того, важным доводом в пользу этого утверждения является функциональное и структурное сходство молекул ИФН-у и ИФН-а2Ь, что определяет отсутствие межмолекулярного взаимодействия между ними, а также сходные токсикологические свойства. Thus, inhalation administration of IFN-a2b is a significantly more effective agent than its intranasal administration, especially in COVID-19, where the lower respiratory system is predominantly affected [25,20-23,29]. At the same time, the extremely high level of safety of this method of drug administration is noteworthy. Thus, when using a metered spray nebulizer, a single dose of IFN-a2b for adults ranged from 1.0 to 120 million IU. At the same time, IFN-a2b in blood plasma was not determined at inhalation doses of 1-18 million IU, but at doses of 60 million IU, trace doses of IFN-a2b were determined in plasma. At the same time, in patients who received 120 million IU of IFN-a2b by inhalation, from 11 to 35 IU of IFN-a2b were determined in plasma. No systemic and local side effects from inhaled IFN-a2b at doses of 1-18 million IU were observed, however, doses from 60 to 120 million IU led to hyperthermia, headache and general malaise. These symptoms began after 3-6 hours, reached a maximum severity after 8-10 hours and ended 12-24 hours after inhalation [26]. Thus, the use of IFN-a2b is a traditional method of treating COVID-19, with proven efficacy and safety. Interferon gamma (IFN-y), in addition to the intramuscular and subcutaneous route of administration, is used intranasally and in the form of inhalations, including in children [29-31, 32,28,27]. Unlike other interferons, IFN-γ increases the expression of major histocompatibility complex (MCHC) antigens of both the 1st and 2nd classes on different cells, and induces the expression of these molecules even on those cells that do not express them constitutively. This increases the efficiency of antigen presentation and the ability of their recognition by T-lymphocytes. IFN-y blocks the replication of viral DNA and RNA, the synthesis of viral proteins and the assembly of mature viral particles. Interferon gamma has a cytotoxic effect on virus-infected cells. The use of IFN-y in a new coronavirus infection is due to the fact that only this type of IFN blocks the synthesis of 0-TGF, which is responsible for the development of pulmonary fibrosis, which is a frequent long-term complication of C0VID-19 [32,33]. In clinical pulmonology, interest is currently growing in the potential role of IFN-γ in the treatment of respiratory tract diseases, with preference given to direct delivery of the drug directly to the target organ by inhalation administration, as the most effective and safe method [34,35]. Studies in healthy volunteers comparing inhaled and subcutaneous administration of IFN-γ have shown that, unlike inhalation, with parenteral administration of the drug, a clear increase in the level of IFN-γ in blood plasma is determined, but not in pulmonary washings [32]. Numerous clinical data have demonstrated a significantly greater efficacy and safety of the aerosol route of administration of IFN-y for the treatment of respiratory viral infections [32,34,35]. Effective therapeutic doses of IFN-γ are thousands of times lower than possible toxic, and amount to an adult with dosed inhalation administration of 125-500 pg / ml (31250-125000 IU / ml). At the same time, therapeutic doses of interferons, due to their low concentration, practically do not have any local irritating effect and can be used several times a day for a long time (up to several months) [34]. -y by nebulizer inhalation in therapeutic doses has been undoubtedly proven by the results of reliable clinical studies.In addition, an important argument in favor of this statement is the functional and structural similarity of the IFN-y and IFN-a2b molecules, which determines the absence of intermolecular interaction between them, as well as similar toxicological properties.
Лопинавир является ингибитором SARS ЗС-подобной протеазы, и активно изучался на возбудителях SARS и MERS in vitro, продемонстрировав определенные результаты в плане ингибирования репликации этих вирусов [29-30,35]. При этом сравнительный генетический анализ показал практически полную идентичность структуры SARS ЗС-подобной протеазы у вируса SARS-CoV-2, по сравнению с таковыми у SARS и MERS [36]. Lopinavir is an inhibitor of the SARS 3C-like protease and has been actively studied in vitro in SARS and MERS pathogens, showing some results in terms of inhibiting the replication of these viruses [29-30,35]. At the same time, comparative genetic analysis showed almost complete identity of the structure of the SARS 3C-like protease in the SARS-CoV-2 virus, compared with those in SARS and MERS [36].
Недавние систематизированные обзоры изучения клинического эффекта при COVID-19 лопинавира/ритонавира при пероральном введении [20,38,24] показали недостаточную клиническая эффективность лопинавира/ритонавира. Recent systematic reviews of the clinical effect of oral lopinavir/ritonavir in COVID-19 [20,38,24] showed insufficient clinical efficacy of lopinavir/ritonavir.
Таким образом, поскольку в уровне техники уже изучалось воздействие лопинавира/ритонавира на новую короновирусную инфекцию, но результаты применения лопинавира/ритонавира были неудовлетворительными, то специалист не мог бы предполагать, что при изменении пути введения будет достигнут необходимый уровень лечебного эффекта. Поскольку ингаляционное введение оказалось эффективным для COVID-19, то учитывая генетическую близость коронавирусов по ЗС- подобной протеазы, лечебный эффект для профилактики и лечения COVID- 19 может быть экстраполирован на любую коронавирусную инфекцию. Thus, since the prior art has already studied the effect of lopinavir / ritonavir on a new coronovirus infection, but the results of using lopinavir / ritonavir were unsatisfactory, the specialist could not assume that the necessary level of therapeutic effect would be achieved by changing the route of administration. Since inhalation administration proved to be effective for COVID-19, given the genetic proximity of coronaviruses for the 3C-like protease, the therapeutic effect for the prevention and treatment of COVID-19 can be extrapolated to any coronavirus infection.
Как показали наши исследования, ингаляционное воздействие in situ приводит к существенному потенцированию противовирусного эффекта, предположительно в связи со значительным повышением активной концентрации вещества при его непосредственном воздействии на вирус. Очень важным доводом в пользу этого является существенно более высокая безопасность такого способа введения по сравнению с пероральным. Это связано с тем, что максимальная дозировка, которая применяется при пероральном введении лопинавира оставляет 400 мг два раза в день, при этом средняя максимальная концентрация в плазме (Стах) составляет 9,8±3,7 мкг/мл и достигается примерно через 4 ч после приема. Очевидно, что ингаляционное введение препарата в дозе 400 мкг/мл, т.е., в 1000 раз меньшей, практически безопасно (в отношении системного и местнораздражающего действия) и при этом воздействует на SARS ЗС-подобную протеазу вируса в среднем в 40-50 раз более эффективной дозой в плане её блокирующего воздействия на инфицирование вирусом. As our studies have shown, in situ inhalation exposure leads to a significant potentiation of the antiviral effect, presumably due to a significant increase in the active concentration of the substance when it is directly exposed to the virus. A very important argument in favor of this is the significantly higher safety of this route of administration compared to oral administration. This is due to the fact that the maximum dosage that is used for oral administration of lopinavir leaves 400 mg twice a day, while the average maximum plasma concentration (Cmax) is 9.8 ± 3.7 μg / ml and is reached after approximately 4 hours after taking. It is obvious that the inhalation administration of the drug at a dose of 400 μg / ml, i.e., 1000 times less, is practically safe (in terms of systemic and local irritating effects) and at the same time affects the SARS 3C-like protease of the virus by an average of 40-50 times more effective dose in terms of its blocking effect on virus infection.
Однако ранее в уровне техники не содержалось подобных предположений. Следовательно, средний специалист не мог бы предположить, что ингаляционное введение будет эффективным в сравнении с пероральным. Обычно специалист ожидает повысить эффект препарата изменив путь введения на внутривенный или по меньшей мере внутримышечный. However, earlier in the prior art did not contain such assumptions. Therefore, one of ordinary skill in the art would not assume that inhalation administration would be effective in comparison with oral administration. Typically, one skilled in the art would expect to enhance the effect of a drug by changing the route of administration to intravenous or at least intramuscular.
Имеющиеся данные по доклиническим токсикологическим исследованиям препарата калетра (лопинавир/ритонавир) при его пероральном применении, который как известно прошел всестороннее изучение безопасности по протоколам FDA, а также по правилам доклинического исследования препаратов, зарегистрированных в РФ,- свидетельствуют о том, что действующая субстанция относится к классу малотоксичных препаратов (ЛД50 при однократном пероральном введении лопинавира отдельно, составляет более 2500 мг/кг, low toxicity (GRAS status). Available data from preclinical toxicology studies of oral kaletra (lopinavir/ritonavir), which is known to have been extensively safety studies according to FDA protocols, as well as according to the rules of preclinical studies of drugs registered in the Russian Federation, indicate that the active substance belongs to the class of low-toxic drugs (LD50 with a single oral administration of lopinavir alone is more than 2500 mg / kg, low toxicity ( GRAS status).
Риск ингаляционного отравления при использовании терапевтических доз практически отсутствует [39,40]. The risk of inhalation poisoning when using therapeutic doses is practically absent [39,40].
Техническим результатом, достигаемым при реализации заявляемого решения, является эффективная профилактика или лечение пациентов с коронавирусной инфекцией. The technical result achieved by the implementation of the proposed solution is the effective prevention or treatment of patients with coronavirus infection.
Нами проведено рандомизированное контролируемое в параллельных группах, проспективное, одноцентровое терапевтическое исследование комбинированной ингаляционной смеси препарата «ТРИАВИР®» для профилактики и лечения COVID-19: у пациентов 25-90 лет. В результате исследования была разработана эффективная ингаляционная смесь препарата «ТРИАВИР®» для лечения и профилактики COVID-19 у пациентов 25-90 лет. We conducted a randomized, parallel-group controlled, prospective, single-center therapeutic study of the combined inhalation mixture of the drug "TRIAVIR®" for the prevention and treatment of COVID-19: in patients aged 25-90 years. As a result of the study, an effective inhalation mixture of the drug "TRIAVIR®" was developed for the treatment and prevention of COVID-19 in patients aged 25-90 years.
Примеры Examples
Общая длительность исследования для каждого пациента составила не более 14 дней, разделенных на 3 периода: The total duration of the study for each patient was no more than 14 days, divided into 3 periods:
- период скрининга (1 день) — день исследования -1 день; - screening period (1 day) - study day -1 day;
- период лечения исследуемым препаратом (14 дней (±2 дня)) - день исследования с 1 по 10 (±2); - study drug treatment period (14 days (±2 days)) - study day 1 to 10 (±2);
- период завершения исследования (1 день) — день исследования 14 (±2). - study completion period (1 day) - study day 14 (±2).
Период скрининга: Screening period:
Визит V0 (день -1), Врач-исследователь проводит сбор эпидемиологического анамнеза, демографических данных, жалоб и анамнеза, физикальное обследование, оценку клинических проявлений заболевания, назначает проведение компьютерной томографии (МСКТ) легких, ЭКГ, пульсоксиметрии с измерением SpO2, забор мазков из носоглотки и ротоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР, общий (клинический) анализ крови с определением уровня лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, абсолютного и процентного содержания лимфоцитов, биохимических анализ крови, общий анализ мочи, исследование уровня С-реактивного белка (СРВ) в сыворотке крови. Visit V0 (day -1), The research doctor collects an epidemiological history, demographic data, complaints and anamnesis, a physical examination, an assessment of the clinical manifestations of the disease, prescribes computed tomography (MSCT) of the lungs, ECG, pulse oximetry with SpO2 measurement, swabs from the nasopharynx and oropharynx for the presence of SARS-RNA CoV-2 by PCR, general (clinical) blood test with the determination of the level of leukocytes, leukocyte formula, absolute and percentage of lymphocytes, biochemical blood tests, general urinalysis, examination of the level of C-reactive protein (CPV) in blood serum.
На основании полученных результатов проведена оценка критериев включения/невключения. Based on the results obtained, the inclusion/non-inclusion criteria were evaluated.
Период лечения исследуемым препаратом: Treatment period with study drug:
Визит VI (день 1). Visit VI (Day 1).
После заключительной оценки критериев включения невключения по результатам выполненных обследований, проведены сбор жалоб, регистрация сопутствующей терапии, физикальное обследование, оценка клинических проявлений заболевания, после чего, принято решение о включении пациента в исследование, и он рандомизирован методом случайных чисел в одну из четырех групп: After the final assessment of the inclusion criteria for non-inclusion based on the results of the examinations performed, complaints were collected, registration of concomitant therapy, physical examination, assessment of the clinical manifestations of the disease, after which a decision was made to include the patient in the study, and he was randomly assigned to one of four groups:
- Первая группа пациентов (контрольная) получала стандартную терапию в соответствии с временными методическими рекомендациями Министра здравоохранения Российской Федерации по профилактике, диагностике и лечению новой коронавирусной инфекции (covid-19) (Версия 5 (08.04.2020). - The first group of patients (control group) received standard therapy in accordance with the interim guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation for the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020).
- Вторая группа - дополнительно к стандартной терапии в соответствии с временными методическими рекомендациями Министра здравоохранения Российской Федерации по профилактике, диагностике и лечению новой коронавирусной инфекции (covid-19) (Версия 5 (08.04.2020) пациентам назначена комбинированная ингаляционная смесь №1 через небулайзер в течение 10 минут 4 раза в день в течение 14 дней. - The second group - in addition to standard therapy in accordance with the temporary guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation for prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed a combined inhalation mixture No. 1 through a nebulizer for 10 minutes 4 times a day for 14 days.
- Третья группа - дополнительно к стандартной терапии в соответствии с временными методическими рекомендациями Министра здравоохранения Российской Федерации по профилактике, диагностике и лечению новой коронавирусной инфекции (covid-19) (Версия 5 (08.04.2020) пациентам назначена комбинированная ингаляционная смесь №2 через небулайзер в течение 10 минут 4 раза в день в течение 14 дней. - The third group - in addition to standard therapy in accordance with the temporary guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation on the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed a combined inhalation mixture No. 2 through a nebulizer in for 10 minutes 4 times a day for 14 days.
- Четвертая группа - дополнительно к стандартной терапии в соответствии с временными методическими рекомендациями Министра здравоохранения Российской Федерации по профилактике, диагностике и лечению новой коронавирусной инфекции (covid-19) (Версия 5 (08.04.2020) пациентам назначена комбинированная ингаляционная смесь №3 через небулайзер в течение 10 минут 4 раза в день в течение 14 дней. - The fourth group - in addition to standard therapy in accordance with the interim guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation on the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed a combined inhalation mixture No. 3 through a nebulizer in for 10 minutes 4 times a day for 14 days.
- Пятая группа - дополнительно к стандартной терапии в соответствии с временными методическими рекомендациями Министра здравоохранения Российской Федерации по профилактике, диагностике и лечению новой коронавирусной инфекции (covid-19) (Версия 5 (08.04.2020) пациентам назначен и применен препарат «ТРИАВИР®» в виде ингаляций через небулайзер в течение 10 минут 4 раза в день в течение 10 дней. - Fifth group - in addition to standard therapy in accordance with the interim guidelines of the Minister of Health of the Russian Federation for the prevention, diagnosis and treatment of a new coronavirus infection (covid-19) (Version 5 (04/08/2020), patients were prescribed and used the drug "TRIAVIR®" in the form of inhalation through a nebulizer for 10 minutes 4 times a day for 10 days.
Для этого каждому участнику исследования присвоен рандомизационный номер методом генерации случайных чисел с использованием статистической программы SPSS Statistics 19.0. Этот номер определяет вид применяемой терапии (Т1-Т5) в соответствии с планом рандомизации. Данный номер закреплялся за участником исследования на весь период исследования. To do this, each participant in the study was assigned a randomization number by random number generation using the statistical program SPSS Statistics 19.0. This number identifies the type of therapy used (T1-T5) according to the randomization plan. This number was assigned to the study participant for the entire period of the study.
Пациент находился в стационаре на протяжении всего исследования и до полного выздоровления или иного исхода. Пульсоксиметрия, регистрация симптомов, жалоб, физикальный осмотр и измерение температуры тела производился в каждый день исследования с момента рандомизации для мониторинга динамики заболевания. The patient remained in the hospital throughout the study and until complete recovery or other outcome. Pulse oximetry, registration of symptoms, complaints, physical examination and body temperature measurement were performed on each day of the study from the moment of randomization to monitor the dynamics of the disease.
Затем проведена оценка нежелательных явлений. Then an assessment of adverse events was carried out.
Визит V2 (день 4 от Визита VI). Visit V2 (day 4 from Visit VI).
На данном визите проведены сбор жалоб (изменения после предыдущего визита), регистрация сопутствующей терапии, физикальное обследование, оценка клинических проявлений заболевания, пульсоксиметрия с измерением SpO2, забор мазков из носоглотки и ротоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР. At this visit, complaints were collected (changes after the previous visit), registration of concomitant therapy, physical examination, assessment of the clinical manifestations of the disease, pulse oximetry with SpO2 measurement, swabs from the nasopharynx and oropharynx for the presence of SARS-CoV-2 RNA by PCR.
Визит V3 (день 8 от Визита VI). Visit V3 (Day 8 from Visit VI).
На данном визите проведены сбор жалоб (изменения после предыдущего визита), регистрация сопутствующей терапии, физикальное обследование, оценка клинических проявлений заболевания, пульсоксиметрия с измерением SpO2, забор мазков из носоглотки и ротоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР, проведение общего (клинического) анализа крови с определением уровня лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, абсолютного и процентного содержания лимфоцитов, биохимического анализа крови, исследование уровня С- реактивного белка (СРВ) в сыворотке крови. At this visit, complaints were collected (changes after the previous visit), registration of concomitant therapy, physical examination, assessment of the clinical manifestations of the disease, pulse oximetry with SpO2 measurement, swabs from the nasopharynx and oropharynx for the presence of SARS-CoV-2 RNA by PCR, general ( clinical) blood test with determination of the level of leukocytes, leukocyte formula, absolute and percentage of lymphocytes, biochemical blood test, examination of the level of C-reactive protein (CPV) in blood serum.
Визит V4 (день 14 (±2) от Визита VI). Visit V4 (Day 14 (±2) from Visit VI).
На данном визите проведены сбор жалоб (изменения после предыдущего визита), регистрация сопутствующей терапии, физикальное обследование, оценка клинических проявлений заболевания, проведение компьютерной томографии (МСКТ) легких, пульсоксиметрия с измерением SpO2, забор мазков из носоглотки и ротоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР, проведение общего (клинического) анализа крови с определением уровня лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, абсолютного и процентного содержания лимфоцитов, биохимического анализа крови, общего анализа мочи, исследование уровня С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови. At this visit, complaints were collected (changes after the previous visit), registration of concomitant therapy, physical examination, assessment of the clinical manifestations of the disease, computed tomography (MSCT) of the lungs, pulse oximetry with SpO2 measurement, swabs from the nasopharynx and oropharynx for the presence of SARS-CoV RNA -2 by PCR method, conducting a general (clinical) blood test with determination of the level of leukocytes, leukocyte formula, absolute and percentage of lymphocytes, biochemical blood test, general urinalysis, examination of the level of C-reactive protein (CRP) in blood serum.
В исследование включено 70 взрослых пациентов 25-90 лет обоих полов со среднетяжелой формой COVID-19. The study included 70 adult patients aged 25-90 years of both sexes with a moderate form of COVID-19.
В ходе исследования все пациенты рандомизированы на 5 групп: 36 пациентов - в контрольной; по 9 пациентов в каждой исследуемой группе. During the study, all patients were randomized into 5 groups: 36 patients in the control group; 9 patients in each study group.
В исследование были включены пациенты с подтвержденным диагнозом: «Новая коронавирусная инфекция COVID-19, среднетяжелая форма, внебольничная двусторонняя пневмония без дыхательной недостаточности» на основании исследования мазка из носоглотки и МСКТ легких. Отсутствие приема препаратов, содержащих Лопинавир за 7 дней до начала исследования. Интервал между началом симптомов (гипертермия, кашель) и рандомизацией не более 7 дней. Для женщин отрицательный тест на беременность или подтверждение отсутствия репродуктивного потенциала. The study included patients with a confirmed diagnosis of "Novel coronavirus infection COVID-19, moderate form, community-acquired bilateral pneumonia without respiratory failure" based on a nasopharyngeal swab and MSCT of the lungs. Absence of taking drugs containing Lopinavir 7 days before the start of the study. The interval between the onset of symptoms (hyperthermia, cough) and randomization is no more than 7 days. For women, a negative pregnancy test or confirmation of lack of reproductive potential.
Пациенты, имеющие одно из следующих, не были включены в исследование: Patients with one of the following were not included in the study:
1. Повышенная чувствительность к любому компоненту препарата. 1. Hypersensitivity to any component of the drug.
2. Наличие дыхательной недостаточности ДН II или III степени, острого респираторного дистресс синдрома. 2. The presence of respiratory failure DN II or III degree, acute respiratory distress syndrome.
3. Наличие бактериального сепсиса с поражением легких (возбудитель не уточнен) 3. The presence of bacterial sepsis with lung damage (causative agent not specified)
4. Наличие противопоказаний к приему лопинавира 4. The presence of contraindications to taking lopinavir
5. Наличие противопоказаний к приему интерферонов 5. The presence of contraindications to taking interferons
6. Наличие у пациента факторов риска серьезного течения и смертности при COVID-19; 7. Сахарный диабет 1 или 2 типа; 6. The presence of risk factors for serious course and mortality in the patient with COVID-19; 7. Diabetes mellitus type 1 or 2;
8. Бронхиальная астма; 8. Bronchial asthma;
9. ХОБЛ; 9. COPD;
10. Легочно-сердечная недостаточность; 10. Pulmonary heart failure;
11. Наличие трансплантированных органов и тканей; 11. The presence of transplanted organs and tissues;
12. Онкологические заболевания любой локализации; 12. Oncological diseases of any localization;
13. Ожирение; 13. Obesity;
14. ВИЧ, Гепатит и другие острые инфекционные заболевания, кроме COVID-19; 14. HIV, Hepatitis and other acute infectious diseases, except for COVID-19;
15. Другие заболевания и состояния, которые на момент исследования считаются факторами риска; 15. Other diseases and conditions that are considered risk factors at the time of the study;
16. Беременность и лактация; 16. Pregnancy and lactation;
17. Пациент нуждается в приеме препаратов запрещенной терапии;17. The patient needs to take drugs of prohibited therapy;
18. Активный туберкулез, муковисцидоз, системные заболевания соединительной ткани; 18. Active tuberculosis, cystic fibrosis, systemic connective tissue diseases;
19. Тяжелые, декомпенсированные или нестабильные соматические заболевания (любые заболевания или состояния, которые угрожают жизни пациента или ухудшают прогноз пациента, а также делают невозможным проведение клинического исследования); 19. Severe, decompensated or unstable somatic diseases (any disease or condition that threatens the patient's life or worsens the patient's prognosis, and also makes it impossible to conduct a clinical trial);
20. Наличие психического заболевания, не позволяющего проводить оценку проводимой терапии (в т.ч. клаустрофобия); 20. The presence of a mental illness that does not allow for the assessment of ongoing therapy (including claustrophobia);
21. Алкоголизм и наркомания в настоящее время, либо в анамнезе;21. Alcoholism and drug addiction at the present time, or in history;
22. Отсутствие готовности пациента к сотрудничеству; 22. Lack of willingness of the patient to cooperate;
23. Участие пациента в любом другом клиническом исследовании в последние 30 дней. 23. Patient participation in any other clinical trial in the last 30 days.
Длительность применения исследуемых препаратов составила 14 дней (±2 Дня). The duration of study drug use was 14 days (±2 days).
Длительность наблюдения пациента 14 дней (±2 дня). Контроль безопасности и переносимости препаратов проводился на протяжении всего периода его использования и последующего наблюдения. Duration of observation of the patient is 14 days (±2 days). Control of safety and tolerability of drugs was carried out throughout the entire period of its use and subsequent observation.
Контроль заключался в оценке частоты, характера и интенсивности нежелательных явлений и серьезных нежелательных явлений. Control consisted in assessing the frequency, nature and intensity of adverse events and serious adverse events.
Состав ингаляционных смесей: The composition of inhalation mixtures:
Ингаляционная смесь №1 - ИФНа2Ь -2000МЕ/мл Inhalation mixture No. 1 - IFNa2b -2000 IU / ml
Ингаляционная смесь№2 - ИФНу -200МЕ/мл Inhalation mixture No. 2 - IFNu -200 IU / ml
Ингаляционная смесь №3 - ИФНа2Ь ,2000МЕ/мл + ИФНу, 200МЕ/мл Inhalation mixture No. 3 - IFNa2b, 2000 IU / ml + IFNu, 200 IU / ml
Ингаляционная смесь №4 - препарат «ТРИАВИР®»Inhalation mixture No. 4 - drug "TRIAVIR®"
(ИФНа2Ь,1000МЕ/мл + ИФНу, 100МЕ/мл+ лопинавир 80 мкг/мл) (IFNa2b, 1000 IU/ml + IFNy, 100 IU/ml + lopinavir 80 mcg/ml)
Результаты лечения Treatment results
Таблица 1. Характеристика исследуемой популяции
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000025_0001
Figure imgf000025_0002
Table 1. Characteristics of the study population
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000025_0001
Figure imgf000025_0002
Ингаляционная смесь №1 - ИФНа2Ь -2000МЕ/млInhalation mixture No. 1 - IFNa2b -2000 IU / ml
Ингаляционная смесь№2 - ИФНу -200МЕ/мл Inhalation mixture No. 2 - IFNu -200 IU / ml
Ингаляционная смесь №3 - ИФНа2Ь ,2000МЕ/мл + ИФНу, 200МЕ/мл Препарат «ТРИАВИР» (ИФНа2Ь ,1000МЕ/мл + ИФНу, 100МЕ/мл+ лопинавир 80 мкг/мл). Inhalation mixture No. 3 - IFNa2b, 2000 IU / ml + IFNu, 200 IU / ml The drug "TRIAVIR" (IFNa2b, 1000 IU/ml + IFNu, 100 IU/ml + lopinavir 80 mcg/ml).
Таблица 2.
Figure imgf000026_0001
Таблица 3.
Figure imgf000027_0001
Table 2.
Figure imgf000026_0001
Table 3
Figure imgf000027_0001
Figure imgf000028_0001
Figure imgf000028_0001
Возрастные характеристики также отражены на фиг.1. Age characteristics are also reflected in Fig.1.
Таблица 4.
Figure imgf000029_0001
Figure imgf000030_0001
Весовые характеристики также отражены на фиг.2. Table 4
Figure imgf000029_0001
Figure imgf000030_0001
Weight characteristics are also reflected in Fig.2.
Таблица 5.
Figure imgf000031_0001
Figure imgf000032_0001
Table 5
Figure imgf000031_0001
Figure imgf000032_0001
Ростовые характеристики также отражены на фиг.З. Growth characteristics are also reflected in Fig.3.
Таблица 6.
Figure imgf000033_0001
Figure imgf000034_0001
Figure imgf000035_0001
Figure imgf000036_0001
Table 6
Figure imgf000033_0001
Figure imgf000034_0001
Figure imgf000035_0001
Figure imgf000036_0001
Характеристики ИМТ также отражены на фиг.4. Characteristics of BMI are also reflected in Fig.4.
Таким образом, выборка пациентов исследуемых групп является однородной. Thus, the sample of patients in the study groups is homogeneous.
Нет существенных различий, влияющих на результат в исследуемых группах и контроле. There are no significant differences affecting the result in the study groups and controls.
Проведённая оценка эффективности проведенного лечения нижеприведенными составами: The evaluation of the effectiveness of the treatment with the following formulations:
Состав ингаляционных смесей: The composition of inhalation mixtures:
Ингаляционная смесь №1 - ИФНа2Ь -2000МЕ/мл Inhalation mixture No. 1 - IFNa2b -2000 IU / ml
Ингаляционная смесь№2 - ИФНу -200МЕ/мл Inhalation mixture No. 2 - IFNu -200 IU / ml
Ингаляционная смесь №3 - ИФНа2Ь ,2000МЕ/мл + ИФНу, 200МЕ/мл Inhalation mixture No. 3 - IFNa2b, 2000 IU / ml + IFNu, 200 IU / ml
Ингаляционная смесь №4 - препарат «ТРИАВИР» (ИФНа2Ь ,1000МЕ/мл + ИФНу, 100МЕ/мл+ лопинавир 80 мкг/мл), при использовании указанных ниже критериев показала следующее. Первичные конечные точки: Inhalation mixture No. 4 - the drug "TRIAVIR" (IFNa2b, 1000 IU / ml + IFNu, 100 IU / ml + lopinavir 80 μg / ml), using the criteria below, showed the following. Primary Endpoints:
1. Положительная динамика результатов специфических изменений легких, характерных для пациентов с подтвержденным диагнозом «Новая коронавирусная инфекция COVID-19» при проведении компьютерной томографии (МСКТ) легких, по сравнению с результатами скрининга. 1. Positive dynamics of the results of specific changes in the lungs, characteristic of patients with a confirmed diagnosis of "New coronavirus infection COVID-19" during computed tomography (MSCT) of the lungs, compared with the results of screening.
2. Положительная динамика результатов пульсоксиметрии с измерением SpO2 по сравнению с визитом 1. 2. Positive dynamics of pulse oximetry results with SpO2 measurement compared to visit 1.
3. Положительная динамика нормализации относительно количества лимфоцитов в общем клиническом анализе крови. 3. Positive dynamics of normalization in relation to the number of lymphocytes in the general clinical blood test.
4. Положительная динамика (нормализация уровня С- реактивного белка в анализе крови. 4. Positive dynamics (normalization of the level of C-reactive protein in the blood test.
Вторичные конечные точки: Secondary Endpoints:
Количество пациентов с отрицательным результатом исследования мазков из носоглотки и ротоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР. Number of patients with negative nasopharyngeal and oropharyngeal swabs for SARS-CoV-2 RNA by PCR.
Частота ухудшения (обострения пневмонии). Frequency of worsening (exacerbation of pneumonia).
Таблица 7. Table 7
Результаты исследования результатов компьютерной томографии (МСКТ) легких
Figure imgf000037_0001
Figure imgf000038_0001
Figure imgf000039_0001
Figure imgf000040_0001
Figure imgf000041_0001
The results of the study of the results of computed tomography (MSCT) of the lungs
Figure imgf000037_0001
Figure imgf000038_0001
Figure imgf000039_0001
Figure imgf000040_0001
Figure imgf000041_0001
Таблица 8.
Figure imgf000041_0002
Table 8
Figure imgf000041_0002
Figure imgf000042_0001
Figure imgf000042_0001
Выводы по результатам исследования: Conclusions from the results of the study:
1. Положительная динамика отмечается у всех пациентов, включая контрольную группу. 1. Positive dynamics is noted in all patients, including the control group.
2. В группах, получавших лечение ингаляционными смесями, отмечается достоверно более выраженная положительная динамика (см. фиг.5-10). 2. In groups treated with inhalation mixtures, there is a significantly more pronounced positive dynamics (see Fig.5-10).
3. В группе, получавшей лечение препаратом «ТРИАВИР» она выражена в наибольшей степени (см. фиг.5-10). 3. In the group treated with the drug "TRIAVIR" it is expressed to the greatest extent (see Fig.5-10).
Таблица 9. Классификация результатов КТ в зависимости от степени выявленных изменений
Figure imgf000042_0002
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000044_0001
Table 9. Classification of CT results depending on the degree of changes detected
Figure imgf000042_0002
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000044_0001
Таблица 10. Стадии развития вирусного поражения легких приTable 10. Stages of development of viral damage to the lungs in
COVID 19
Figure imgf000044_0002
Figure imgf000045_0001
Figure imgf000046_0001
COVID-19
Figure imgf000044_0002
Figure imgf000045_0001
Figure imgf000046_0001
Все исследователи подчеркивают значимость таких изменений, как матовое стекло, консолидация, ретикулярные изменения и площадь поражения, единодушно соглашаясь, что они отражают тяжесть заболевания и позволяют прогнозировать его дальнейшее развитие. Но их комбинация широко обсуждается, что порождает массу классификаций. Очевидно, что существует достоверная корреляционная связь между тяжестью поражения легких, методом КТ и клиническим течением заболевания, целесообразность количественной оценки протяженности изменений в паренхиме легких. All researchers emphasize the importance of such changes as ground glass, consolidation, reticular changes and the area of the lesion, unanimously agreeing that they reflect the severity of the disease and allow predicting its further development. But their combination is widely discussed, which gives rise to a lot of classifications. It is obvious that there is a significant correlation between the severity of lung damage, the CT method and the clinical course of the disease, the expediency of quantitative assessment of the extent of changes in the lung parenchyma.
Таблица 11. Анализ результатов пульсоксиметрии с измерением SpO2
Figure imgf000046_0002
Figure imgf000047_0001
Figure imgf000048_0001
Figure imgf000049_0001
Figure imgf000050_0001
Table 11. Analysis of the results of pulse oximetry with SpO2 measurement
Figure imgf000046_0002
Figure imgf000047_0001
Figure imgf000048_0001
Figure imgf000049_0001
Figure imgf000050_0001
Статистика Визит 1
Figure imgf000050_0004
Figure imgf000050_0002
Figure imgf000050_0003
Statistics Visit 1
Figure imgf000050_0004
Figure imgf000050_0002
Figure imgf000050_0003
Figure imgf000051_0001
Figure imgf000051_0001
Figure imgf000052_0001
Figure imgf000052_0001
Визит1 Диаграмма ствол-лист дляVisit1 Stem-List Diagram for
Группа= 1,00 Group= 1.00
Frequency Stem & Лист Frequency Stem & Leaf
2,00 Extremes (=<90, 0) 2.00 Extremes (=<90, 0)
2,00 91. 00 2.00 91.00
,00 91 . .00 91 .
9,00 92. 000000000 9.00 92.000000000
,00 92 . .00 92 .
22,00 93 . 000000000000000000000022.00 93 . 0000000000000000000000
,00 93 . .00 93 .
1,00 94. 0 1.00 94.0
Ширина ствола: 1 Barrel Width: 1
Каждый лист: 1 наблюдения Визит1 Диаграмма ствол-лист дляEach leaf: 1 observation Visit1 Stem-List Diagram for
Группа= 2,00 Group= 2.00
Frequency Stem & Лист Frequency Stem & Leaf
3,00 Extremes (=<90, 0) 3.00 Extremes (=<90, 0)
14,00 92 . 0000000000000014.00 92 . 00000000000000
,00 92 . .00 92 .
14,00 93 . 0000000000000014.00 93 . 00000000000000
,00 93 . .00 93 .
4,00 94. 0000 4.00 94.0000
1,00 Extremes (>=95,0)1.00 Extremes (>=95.0)
Ширина ствола: 1 Barrel Width: 1
Каждый лист: 1 наблюденияEach leaf: 1 observation
Фиг.11 также описывает визит 1.
Figure imgf000053_0002
Figure imgf000053_0001
Figure imgf000053_0003
Fig. 11 also describes visit 1.
Figure imgf000053_0002
Figure imgf000053_0001
Figure imgf000053_0003
Figure imgf000054_0001
Figure imgf000054_0002
Figure imgf000054_0001
Figure imgf000054_0002
Если в результате получена вероятность ошибки р менее 0,05, то данное распределение значимо отличается от нормального. В данном примере распределение можно считать нормальным. If the resulting error probability p is less than 0.05, then this distribution is significantly different from the normal one. In this example, the distribution can be considered normal.
По диаграмме нормального распределения, называемой диаграммой Q- Q (см.фиг.11) можно визуально определить, достаточно ли близко заданное распределение приближается к нормальному. Здесь каждое наблюдаемое значение сравнивается со значением, ожидаемым при нормальном распределении. При условии точного выполнения нормального распределения все точки лежат на прямой. Наблюдаемые значения откладываются по оси X, а ожидаемые - по оси Y, при этом все значения подвергаются стандартизации (z-преобразованию). В данном примере наблюдаемые значения достаточно близки к прямой. From a normal distribution diagram, called a Q-Q diagram (see FIG. 11), one can visually determine whether a given distribution is close enough to a normal distribution. Here, each observed value is compared to the value expected under a normal distribution. Under the condition that the normal distribution is exactly fulfilled, all points lie on a straight line. Observed values are plotted on the x-axis and expected values are plotted on the y-axis, with all values being standardized (z-transformed). In this example, the observed values are quite close to a straight line.
На диаграмме с исключенным трендом отклонения наблюдаемых значений от ожидаемых при нормальном распределении представлены в зависимости от наблюдаемых значений. В случае нормального распределения все точки лежат на горизонтальной прямой, проходящей через нуль. Явное отклонение от прямой указывает на отличие распределения от нормального. На этой диаграмме все значения, также подвергаются стандартизации (z-преобразованию) (см.фиг.11). In a detrended chart, the deviations of observed values from those expected in a normal distribution are presented as a function of the observed values. In the case of a normal distribution, all points lie on a horizontal line passing through zero. Explicit deviation from the straight line indicates the difference of the distribution from the normal one. In this diagram, all values are also standardized (z-transformed) (see FIG. 11).
Статистика Визит 4
Figure imgf000055_0003
Figure imgf000055_0001
Figure imgf000055_0002
Figure imgf000056_0001
Statistics Visit 4
Figure imgf000055_0003
Figure imgf000055_0001
Figure imgf000055_0002
Figure imgf000056_0001
Визит 4 Диаграмма ствол-лист дляVisit 4 Stem-List Diagram for
Группа= 1,00 Group= 1.00
Frequency Stem & Лист Frequency Stem & Leaf
4,00 92 . 0000 ,00 92. 4.00 92 . 0000 .00 92.
22,00 93 . 000000000000000000000022.00 93 . 0000000000000000000000
,00 93 . .00 93 .
7,00 94. 0000000 7.00 94.0000000
,00 94. .00 94.
2,00 95 . 00 2.00 95 . 00
I,00 Extremes (>=96,0) I.00 Extremes (>=96.0)
Ширина ствола: 1 Barrel Width: 1
Каждый лист: 1 наблюдения Each leaf: 1 observation
Визит 4 Диаграмма ствол-лист дляVisit 4 Stem-List Diagram for
Группа= 2,00 Group= 2.00
Frequency Stem & Лист Frequency Stem & Leaf
2,00 92 . 00 2.00 92 . 00
,00 92 . .00 92 .
7,00 93 . 0000000 7.00 93 . 0000000
,00 93 . .00 93 .
II,00 94. 00000000000 II,00 94.00000000000
,00 94. 14,00 95.00000000000000.00 94. 14.00 95.00000000000000
,00 95. .00 95.
2,00 96. 00 2.00 96.00
Ширина ствола: 1 Barrel Width: 1
Каждый лист: 1 наблюденияEach leaf: 1 observation
Фиг.12 также описывает визит 4.
Figure imgf000058_0002
Figure imgf000058_0001
Figure imgf000058_0003
Fig. 12 also describes visit 4.
Figure imgf000058_0002
Figure imgf000058_0001
Figure imgf000058_0003
Визит 1
Figure imgf000059_0001
Visit 1
Figure imgf000059_0001
Таблица 20. Критерий для независимых выборок
Figure imgf000059_0002
Table 20. Criteria for independent samples
Figure imgf000059_0002
Figure imgf000060_0001
Figure imgf000060_0001
Визит 4 Visit 4
Таблица 21. Статистика группы
Figure imgf000060_0002
Table 21. Group statistics
Figure imgf000060_0002
Таблица 22. Критерий для независимых выборок
Figure imgf000060_0003
Table 22. Criteria for independent samples
Figure imgf000060_0003
Figure imgf000061_0001
Figure imgf000061_0001
Результат анализа следующий: - так как значение р-уровня <0,05, можно сделать вывод о статистически значимых различиях в уровне выраженности уровня насыщенности гемоглобина кислородом до и после лечения; - учитывая, что значение t-критерия отрицательное = -4,171, можно говорить о статистически значимом росте значений SpO2 после проведения лечения; то есть проведенное лечение оказалось эффективным. Выведенные результаты содержат: количество наблюдений, средние значения, стандартные отклонения и стандартные ошибки средних в обеих группах,
Figure imgf000062_0001
результаты теста Левена на равенство дисперсий.The result of the analysis is as follows: - since the p-value is <0.05, it can be concluded that there are statistically significant differences in the severity of hemoglobin oxygen saturation before and after treatment; - given that the value of the t-test is negative = -4.171, we can talk about a statistically significant increase in SpO2 values after treatment; that is, the treatment was effective. The displayed results contain: number of observations, means, standard deviations and standard errors of the means in both groups,
Figure imgf000062_0001
results of the Levene test for equality of variances.
Как правило, гипотеза о равенстве (гомогенности) дисперсий не принимается, если тест Левена дает значение р < 0,05 (гетерогенность дисперсий). Для случаев как гомогенности (равенства), так и гетерогенности (неравенства) выводятся следующие характеристики: результаты t-теста: значение распределения Т, количество степеней свободы ст. св., вероятность ошибки р (под обозначением «Значимость (2- сторонняя)»), а также разница средних значений, ее среднеквадратичная ошибка и доверительный интервал. В данном случае наблюдается значимое различие воздействия схемы лечения на количество кислорода в крови пациента (р = 0,000). As a rule, the hypothesis of equality (homogeneity) of variances is not accepted if the Levene test gives a p value < 0.05 (heterogeneity of variances). For cases of both homogeneity (equality) and heterogeneity (inequality), the following characteristics are derived: t-test results: distribution value T, number of degrees of freedom st. St., the probability of error p (under the designation "Significance (2-sided)"), as well as the difference in the means, its standard error and confidence interval. In this case, there is a significant difference in the effect of the treatment regimen on the amount of oxygen in the patient's blood (p = 0.000).
Таблица 23. Статистика парных выборок
Figure imgf000062_0002
Figure imgf000063_0001
Figure imgf000063_0002
Table 23. Statistics of paired samples
Figure imgf000062_0002
Figure imgf000063_0001
Figure imgf000063_0002
Наблюдается Значимое изменения содержания кислорода как в целом за время лечения (р = 0,001).
Figure imgf000063_0003
Figure imgf000064_0001
Figure imgf000064_0002
Figure imgf000064_0003
Так и внутри группы сравнения. There is a significant change in oxygen content as a whole during treatment (p = 0.001).
Figure imgf000063_0003
Figure imgf000064_0001
Figure imgf000064_0002
Figure imgf000064_0003
The same is true for the comparison group.
Вывод: - так как значение р-уровня <0,05, можно сделать вывод о статистически значимых различиях в уровне выраженности уровня насыщенности гемоглобина кислородом до и после лечения; - учитывая, что значение t-критерия отрицательное = -10,073 (по всем пациентам) и -11,441 (по группам сравнения), можно говорить о статистически значимом росте значений SpO2 после проведения лечения; то есть проведенное лечение оказалось эффективным, особенно значимое лечение - с применением ингаляционных смесей.
Figure imgf000065_0001
Figure imgf000066_0001
Figure imgf000066_0002
Figure imgf000067_0001
Figure imgf000068_0001
Conclusion: - since the p-value is <0.05, we can conclude that there are statistically significant differences in the level of severity of hemoglobin oxygen saturation before and after treatment; - given that the value of the t-test is negative = -10.073 (for all patients) and -11.441 (for comparison groups), we can talk about a statistically significant increase in SpO2 values after treatment; that is, the treatment was effective, especially significant treatment with the use of inhalation mixtures.
Figure imgf000065_0001
Figure imgf000066_0001
Figure imgf000066_0002
Figure imgf000067_0001
Figure imgf000068_0001
В этом примере дисперсионный анализ дает значимый результат (р = 0,003). In this example, the analysis of variance gives a significant result (p = 0.003).
Данные по SpO2 также представлены на фиг.13а - Сводный результат по SpO2 (из расчета среднегрупповых показателей), сравнения по группам фиг.13б. SpO2 data are also presented in Fig. 13a - Summary of SpO2 results (based on group averages), group comparisons of Fig. 13b.
Таблица 32. Table 32
РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР
Figure imgf000068_0002
Figure imgf000069_0001
Figure imgf000070_0001
Figure imgf000071_0001
SARS-CoV-2 RNA by PCR
Figure imgf000068_0002
Figure imgf000069_0001
Figure imgf000070_0001
Figure imgf000071_0001
На фиг.14 представлены отрицательные и положительные пробы ПЦР по группам после окончания лечения. Figure 14 shows negative and positive PCR samples by group after the end of treatment.
На фиг.15 представлены сравнения результатов ПЦР по группам во время визитов 1-3. Figure 15 shows comparisons of PCR results by group during visits 1-3.
Критерий результат ПЦР не дает достоверных отличий, очевидно, это связано с недостоверностью самого критерия определения эффективности (уровень ложно- отрицательных результатов равен 45%). The PCR result criterion does not give significant differences, obviously, this is due to the unreliability of the efficiency criterion itself (the level of false negative results is 45%).
Общий (клинический) анализ крови с определением уровня лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, General (clinical) blood test with determination of the level of leukocytes, leukocyte formula,
Таблица 33. Процентное содержание лимфоцитов
Figure imgf000071_0002
Figure imgf000072_0001
Figure imgf000073_0001
Figure imgf000074_0001
Figure imgf000075_0001
Table 33. Percentage of lymphocytes
Figure imgf000071_0002
Figure imgf000072_0001
Figure imgf000073_0001
Figure imgf000074_0001
Figure imgf000075_0001
Таблица 34. Описательные статистики
Figure imgf000075_0002
Table 34. Descriptive statistics
Figure imgf000075_0002
Figure imgf000076_0001
Figure imgf000076_0001
Figure imgf000077_0001
Figure imgf000078_0001
Figure imgf000077_0001
Figure imgf000078_0001
Figure imgf000079_0001
Figure imgf000079_0001
Figure imgf000080_0001
Figure imgf000081_0001
Figure imgf000080_0001
Figure imgf000081_0001
Figure imgf000082_0001
Figure imgf000083_0001
Figure imgf000082_0001
Figure imgf000083_0001
Figure imgf000084_0001
Figure imgf000084_0001
Содержание лимфоцитов также отражено на фиг.16. The content of lymphocytes is also reflected in Fig.16.
Приведенные данные достоверно показывают повышение эффективности лечения, в исследуемой группе по сравнению с контрольной группой. При этом среди групп сравнения наибольшая эффективность отмечается в группе «препарат «ТРИАВИР®». These data reliably show an increase in the effectiveness of treatment in the study group compared to the control group. At the same time, among the comparison groups, the highest efficiency was observed in the group “drug “TRIAVIR®”.
Таблица 36. Уровень С-реактивного белка (СРВ) в сыворотке крови.
Figure imgf000084_0002
Figure imgf000085_0001
Figure imgf000086_0001
Figure imgf000087_0001
Figure imgf000088_0001
Table 36. The level of C-reactive protein (SRV) in blood serum.
Figure imgf000084_0002
Figure imgf000085_0001
Figure imgf000086_0001
Figure imgf000087_0001
Figure imgf000088_0001
Таблица 37. Описательные статистики
Figure imgf000088_0002
Figure imgf000089_0001
Figure imgf000090_0001
Figure imgf000091_0001
Таблица 38. ANOVA
Figure imgf000092_0001
Table 37. Descriptive statistics
Figure imgf000088_0002
Figure imgf000089_0001
Figure imgf000090_0001
Figure imgf000091_0001
Table 38
Figure imgf000092_0001
Указанные данные также демонстрирует фиг.17. This data is also shown in Fig.17.
Приведенные таблицы и фиг.17 достоверно показывают повышение эффективности лечения, в исследуемой группе по сравнению с контрольной группой. При этом среди групп сравнения наибольшая эффективность отмечается в группе «препарат «ТРИАВИР®». The tables and Fig.17 reliably show the increase in the effectiveness of treatment in the study group compared with the control group. At the same time, among the comparison groups, the highest efficiency was observed in the group “drug “TRIAVIR®”.
Приведенные выше примеры однозначно свидетельствуют о промышленной применимости заявленного изобретения, так как показывают как воспроизводимость, так и реализацию назначения. При этом они достоверно подтверждают правомерность широты заявленных притязаний, так как согласно национальному законодательству для обоснования правомерности использованной заявителем степени обобщения при раскрытии существенного признака изобретения предоставляются сведения о частных формах реализации этого существенного признака. Выше представлено достаточное количество примеров осуществления изобретения, подтверждающих возможность получения указанного заявителем технического результата при использовании частных форм реализации существенного признака изобретения. Как было указано выше все корона вирусы имеют принципиальное сходство строения, механизма проникновения и жизнедеятельности. На основании национального законодательства может быть приведен один пример со ссылками на графические материалы. Приведенные примеры показывают возможность реализации изобретения с достижением технического результата и не должны служить для ограничения объема прав заявителя. Исходя из приведенного выше, следует, что существенным признаком изобретения, за счёт которого достигается технический результат, является использование препарата «ТРИАВИР» в виде ингаляций через небулайзер. При этом специалист может подобрать эффективное количество препарата, а также время его использования и периодичность, исходя из веса и состояния пациента. Приведенные выше сведения, как указывалось, получены на пациентах средней тяжести, не имеющих избыточной массы тела. Соответственно, для других групп пациентов частота использования и доза, а также длительность лечения может быть изменена на основании общих подходов, используемых в медицине. The above examples unequivocally testify to the industrial applicability of the claimed invention, as they show both reproducibility and implementation of the purpose. At the same time, they reliably confirm the legitimacy of the breadth of the stated claims, since, according to national legislation, to justify the legitimacy of the degree of generalization used by the applicant when disclosing an essential feature of the invention, information is provided on particular forms of implementation of this essential feature. The above is enough examples of the invention, confirming the possibility of obtaining the technical result indicated by the applicant when using private forms of implementing an essential feature of the invention. As mentioned above, all corona viruses have a fundamental similarity in structure, mechanism of penetration and vital activity. On the basis of national legislation, one example can be given with reference to graphic materials. The examples given show the possibility of implementing the invention with the achievement of a technical result and should not serve to limit the scope of the applicant's rights. Based on the above, it follows that an essential feature of the invention, due to which the technical result is achieved, is the use of the drug "TRIAVIR" in the form of inhalation through a nebulizer. In this case, the specialist can choose the effective amount of the drug, as well as the time of its use and frequency, based on the weight and condition of the patient. The above information, as indicated, was obtained on moderately severe patients who are not overweight. Accordingly, for other groups of patients, the frequency of use and dose, as well as the duration of treatment, can be changed based on the general approaches used in medicine.
Из приведенных сведений с достоверной очевидностью следует, что «ТРИАВИР» может быть применен как в комбинированной профилактики или терапии, так и в виде монотерапии для начальных и лёгких форм или монопрофилактики. Режимы введения и дозировки при комбинированном применении и монопременении будут подбираться специалистом, исходя из состояния пациента. From the above information, it clearly follows that TRIAVIR can be used both in combined prophylaxis or therapy, and as monotherapy for initial and mild forms or monoprophylaxis. Modes of administration and dosage for combined use and mono-use will be selected by a specialist, based on the patient's condition.
4. Краткое описание чертежей 4. Brief description of the drawings
На Фиг.1. представлены возрастные характеристики исследуемой популяции; на фиг.2 - весовые характеристики исследуемой популяции; на фиг.З - ростовые характеристики исследуемой популяции; на фиг.4 - характеристики ИМТ; на фиг.ба - Результаты КТ контрольной группы на Визите 1; на фиг.56 - Результаты КТ группы сравнения на Визите 1; на фиг.ба - Результаты КТ контрольной группы на Визите 4; на фиг.бб - Результаты КТ группы сравнения на Визите 4; на фиг.7а - Результаты КТ группы 2 на Визите 1; на фиг.7б - Результаты КТ группы 2 на Визите 4; на фиг. 8а - Результаты КТ группы 3 на Визите 1; на фиг. 86 - Результаты КТ группы 3 на Визите 1; на фиг. 9а - Результаты КТ группы 4 на Визите 1; на фиг. 96 - Результаты КТ группы 4 на Визите 4; на фиг. 10а - Результаты КТ группы 5 на Визите 1; на фиг. 106 - Результаты КТ группы 5 на Визите 4; на фиг. 11а - Диаграмма ствол-лист для группы 1,00 и 2,00; на фиг. 116 - Гистограмма для группа 1,00; на фиг. Ив - Гистограмма для группа 2,00; на фиг. Иг - Нормальный график Q-Q Визит1 для группа 1,00; на фиг. Ид - Нормальный график Q-Q Визит1 для группа 2,00; на фиг. Ие - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 1 для группа 1,00 ; на фиг. Иж - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 1 для группа 2,00; на фиг. 12а - Визит 4 Диаграмма ствол-лист для Группа = 1,00 и 2,00; на фиг. 126 - Гистограмма для группы 1,00; на фиг. 12в - Гистограмма для группы 2,00; на фиг. 12г - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 4 для группы 1,00; на фиг. 12д - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 4 для группы 2,00; на фиг. 12е - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 4 для группы 1,00; на фиг. 12ж - Нормальный график Q-Q с удаленным трендом Визит 4 для группы 2,00; на фиг. 13а - Сводный результат по SP02 из расчета среднегрупповых показателей; на фиг. 136 Результаты пульсоксиметрии с измерением SP02 на фиг. 14а Контрольная группа Визит 1; на фиг.14б Контрольная группа Визит 2; на фиг.14в - Контрольная группа Визит 3; на фиг.14г - Контрольная группа Визит 4; на фиг. 15а - Группа сравнения Визит 1; на фиг. 156 - Группа сравнения Визит 2; на фиг. 15в - Группа сравнения Визит 3; на фиг. 15г - Группа сравнения Визит 3; на фиг. 16а - Среднее содержание лимфоцитов на Визит 1; на фиг. 166 - Среднее содержание лимфоцитов на Визит 2; на фиг. 16в - Среднее содержание лимфоцитов на Визит 3; на фиг. 16г - Среднее содержание лимфоцитов на Визит 4; на фиг. 17а - Среднее СРВ на Визит 1; на фиг.17б - Среднее СРВ на Визит 2; In Fig.1. the age characteristics of the studied population are presented; figure 2 - weight characteristics of the study population; on fig.Z - growth characteristics of the studied population; figure 4 - characteristics of BMI; on fig.ba - CT scan results of the control group at Visit 1; Fig.56 - CT results of the comparison group at Visit 1; fig.ba - CT results of the control group at Visit 4; fig.bb - CT results of the comparison group at Visit 4; on figa - CT results of group 2 at Visit 1; on fig.7b - CT results of group 2 at Visit 4; in fig. 8a - Group 3 CT scan results at Visit 1; in fig. 86 - Group 3 CT scan results at Visit 1; in fig. 9a - Group 4 CT scan results at Visit 1; in fig. 96 - Group 4 CT scan results at Visit 4; in fig. 10a - Group 5 CT scan results at Visit 1; in fig. 106 - Group 5 CT scan results at Visit 4; in fig. 11a - Stem-list diagram for group 1.00 and 2.00; in fig. 116 - Histogram for group 1.00; in fig. Yves - Histogram for group 2.00; in fig. Yr - Normal schedule QQ Visit1 for group 1.00; in fig. Eid - Normal schedule QQ Visit1 for group 2.00; in fig. Ie - Normal QQ chart with removed trend Visit 1 for group 1.00 ; in fig. Izh - Normal QQ chart with removed trend Visit 1 for group 2.00; in fig. 12a - Visit 4 Stem-List Chart for Group = 1.00 and 2.00; in fig. 126 - Histogram for group 1.00; in fig. 12c - Histogram for group 2.00; in fig. 12d - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 1.00; in fig. 12e - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 2.00; in fig. 12e - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 1.00; in fig. 12g - Normal QQ chart with removed trend Visit 4 for group 2.00; in fig. 13a - Summary result for SP02 based on group averages; in fig. 136 Pulse oximetry results with SP02 measurement in FIG. 14a Control group Visit 1; on figb Control group Visit 2; on figv - Control group Visit 3; on fig.14g - Control group Visit 4; in fig. 15a - Comparison group Visit 1; in fig. 156 - Comparison group Visit 2; in fig. 15c - Comparison group Visit 3; in fig. 15g - Comparison group Visit 3; in fig. 16a - Mean lymphocyte count at Visit 1; in fig. 166 - Mean lymphocyte count at Visit 2; in fig. 16c - Average content of lymphocytes at Visit 3; in fig. 16g - Average content of lymphocytes at Visit 4; in fig. 17a - Average CRV for Visit 1; on Fig.17b - Average SRV on Visit 2;

Claims

Формула Способ профилактики или лечения коронавирусной инфекции, включающий использование препарата «ТРИАВИР» в эффективном количестве в виде ингаляций через небулайзер. Способ по п.1, где коронавирусная инфекция представляет COVID- 19. Способ по п.1, где ингаляции проводят через небулайзер в течение 10 минут 4 раза в день в течение 10 дней. Способ по п.1, где «ТРИАВИР» используется в виде монотерапии или в комбинированной терапии. Применение препарата «ТРИАВИР» для профилактики или лечения коронавирусной инфекции. Применение по п.4, где коронавирусная инфекция представляет COVID-19. Formula Method of prevention or treatment of coronavirus infection, including the use of the drug "TRIAVIR" in an effective amount in the form of inhalation through a nebulizer. The method according to claim 1, where the coronavirus infection is COVID-19. The method according to claim 1, where inhalations are carried out through a nebulizer for 10 minutes 4 times a day for 10 days. The method according to claim 1, where "TRIAVIR" is used as monotherapy or in combination therapy. The use of the drug "TRIAVIR" for the prevention or treatment of coronavirus infection. Use according to claim 4, wherein the coronavirus infection is COVID-19.
95 95
PCT/RU2021/000354 2021-08-16 2021-08-16 Method of preventing or treating coronavirus infection WO2023022616A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2021/000354 WO2023022616A1 (en) 2021-08-16 2021-08-16 Method of preventing or treating coronavirus infection

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2021/000354 WO2023022616A1 (en) 2021-08-16 2021-08-16 Method of preventing or treating coronavirus infection

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2023022616A1 true WO2023022616A1 (en) 2023-02-23

Family

ID=85240903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2021/000354 WO2023022616A1 (en) 2021-08-16 2021-08-16 Method of preventing or treating coronavirus infection

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2023022616A1 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2411039C2 (en) * 2007-12-26 2011-02-10 Валентина Васильевна Малиновская Immunocorrective agent for treating diseases of viral aetiology
RU2672861C2 (en) * 2014-10-31 2018-11-20 Общество с ограниченной ответственностью "Эксифарм" (ООО "Эксифарм") Composition based on interferon i or iii type and gamma-d-glutaminyl-l-tryptophan for prevention and treatment of infectious diseases and immunodeficiency conditions (options)
US20200268656A1 (en) * 2020-05-14 2020-08-27 Darren Rubin Nebulized Ethanol for Internal Disinfecting and Improvement
US20210244726A1 (en) * 2020-02-07 2021-08-12 Centre For Digestive Diseases Therapeutic combinations of drugs for treating, preventing, ameliorating or preventing coronavirus infection

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2411039C2 (en) * 2007-12-26 2011-02-10 Валентина Васильевна Малиновская Immunocorrective agent for treating diseases of viral aetiology
RU2672861C2 (en) * 2014-10-31 2018-11-20 Общество с ограниченной ответственностью "Эксифарм" (ООО "Эксифарм") Composition based on interferon i or iii type and gamma-d-glutaminyl-l-tryptophan for prevention and treatment of infectious diseases and immunodeficiency conditions (options)
US20210244726A1 (en) * 2020-02-07 2021-08-12 Centre For Digestive Diseases Therapeutic combinations of drugs for treating, preventing, ameliorating or preventing coronavirus infection
US20200268656A1 (en) * 2020-05-14 2020-08-27 Darren Rubin Nebulized Ethanol for Internal Disinfecting and Improvement

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DOBRYANSKYI D. V., G. L. GYMENIUK, P. F. DUDKA, R. I. ILNYTSKYI, I. P. TARCHENKO, N. M. KUZMENKO: "Nebulized therapy - practical aspects", ASTMA TA ALERGIYA, 1 January 2018 (2018-01-01), XP093037939, ISSN: 2307-3373 *
ESQUIVEL-MOYELNO IDELSIS, PÉREZ-ESCRIBANO JÉSUS, DUNCAN-ROBERTS YAQUELIN, VÁZQUEZ-BLOMQUIST DANIA, BEQUET-ROMERO MÓNICA, BÁEZ-RODR: "A combination treatment of IFN-α2b and IFN-γ accelerates viral clearance and control inflammatory response in COVID-19: Preliminary results of a randomized controlled trial", ANNALS OF ANTIVIRALS AND ANTIRETROVIRALS, 15 June 2021 (2021-06-15), XP093037936, DOI: 10.17352/aaa.000010 *
MYASNIKOV, ALEXANDER L.; BERNS, SVETLANA A.; TALYZIN, PAVEL A.; ERSHOV, FELIX I. : "Interferon gamma v terapii patsientov s COVID-19 srednetiazhelogo techeniia = Interferon gamma in the treatment of patients with moderate COVID-19", VOPROSY VIRUSOLOGII / PROBLEMS OF VIROLOGY., MOSCOW., RU, vol. 66, no. 1, 30 November 2020 (2020-11-30), RU , pages 47 - 54, XP009543735, ISSN: 0507-4088 *
ZENG YAN-MING, XU XIAO-LEI, HE XIAO-QING, TANG SHENG-QUAN, LI YAO, HUANG YIN-QIU, HARYPURSAT VIJAY, CHEN YAO-KAI: "Comparative effectiveness and safety of ribavirin plus interferon-alpha, lopinavir/ritonavir plus interferon-alpha, and ribavirin plus lopinavir/ritonavir plus interferon-alpha in patients with mild to moderate novel coronavirus disease 2019: study protocol", CHINESE MEDICAL JOURNAL / ZHONGHUA YIXUE ZAZHI YINGWEN BAN., CHINESE MEDICAL ASSOCIATION, BEIJING., CN, vol. 133, no. 9, 1 January 2020 (2020-01-01), CN , pages 1132 - 1134, XP093037942, ISSN: 0366-6999, DOI: 10.1097/CM9.0000000000000790 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jin et al. Chemoprophylaxis, diagnosis, treatments, and discharge management of COVID-19: An evidence-based clinical practice guideline (updated version)
Dos Santos Natural history of COVID-19 and current knowledge on treatment therapeutic options
Favilli et al. Effectiveness and safety of available treatments for COVID-19 during pregnancy: a critical review
AU766597B2 (en) Combination therapy comprising ribavirin and interferon alpha in antiviral treatment naive patients having chronic hepatitis C infection
Hanna et al. Understanding COVID-19 pandemic: molecular mechanisms and potential therapeutic strategies. An evidence-based review
US11364227B2 (en) Sphingosine kinase 2 inhibitor for treating coronavirus infection
Shamim et al. Potential strategies for combating COVID-19
Sumon et al. A revisit to the research updates of drugs, vaccines, and bioinformatics approaches in combating COVID-19 pandemic
Baksh et al. A systematic review of cases of acute respiratory distress syndrome in the coronavirus disease 2019 pandemic
Khaitov et al. Treatment of COVID‐19 patients with a SARS‐CoV‐2‐specific siRNA‐peptide dendrimer formulation
Sarvepalli Coronavirus disease 2019: a comprehensive review of etiology, pathogenesis, diagnosis, and ongoing clinical trials
Blair Remdesivir: a review in COVID-19
KR102609352B1 (en) Composition for preventing or treating CoVid-19
CN113209087A (en) Pharmaceutical composition for inhibiting coronavirus and application thereof
US11844771B2 (en) Methods of treating acute respiratory distress syndrome using colchicine
WO2023022616A1 (en) Method of preventing or treating coronavirus infection
He et al. Prolonged SARS-CoV-2 viral shedding in patients with COVID-19 was associated with delayed initiation of Arbidol treatment and consulting doctor later: a retrospective cohort study
CN1561227A (en) Method for treating hepatitis C virus infection in treatment failure patients
Latarissa et al. Efficacy of Quinine Sulfate in Patients with Mild-To-Moderate COVID-19: A Randomized Controlled Trial
RU2794315C1 (en) Method for prevention or treatment of coronavirus and other acute respiratory viral infections
US20210317454A1 (en) Use of a tlr9 agonist in methods for treating covid-19
Haw et al. TLR7 promotes smoke-induced lung damage through the activity of mast cell tryptase
WO2021213504A1 (en) Use of vegf inhibitor in preparation of medicament for treating hypoxia-related diseases
US20230285510A1 (en) Treatment of coronavirus infection with interferon lambda
Chen et al. Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection in Patients Living with Human Immunodeficiency Virus: Case Reports and Review of the Literature

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21954361

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1