WO2022196848A1 - 개암 및 국우 추출물을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents

개암 및 국우 추출물을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDF

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Definitions

  • the present invention relates to a hair loss prevention and hair growth promoting composition comprising hazelnut and Korean beef extract, and a method for preparing the same.
  • hair loss symptoms not only cause severe stress to anyone, but also cause loss of external and internal self-confidence. It is desirable to diagnose and prevent or treat hair loss at an early stage. In particular, when the cause of genetic hair loss and the cause of acquired hair loss are combined, the symptoms of hair loss appear more severe, so it is better to diagnose and prevent it at an early stage.
  • Hair is formed from hair follicles, and hair follicles are composed of an inner root sheath, an outer root sheath, a hair shaft, and a hair matrix, and dermal papilla cells. ) is directly related to the ability to form hair follicles and plays a key function in the formation of hair follicles.
  • the causes of hair loss are generally heredity, aging, excessive stress, DHT (dihydrotestosterone) production due to excessive secretion of male hormone, endocrine system diseases, drug use, sensitive scalp, seborrheic scalp, synthetic surfactants used almost daily. surfactant), perm, and dyeing.
  • DHT dihydrotestosterone
  • surfactants used almost daily. surfactant
  • perm perm
  • dyeing dyeing.
  • environmental pollution, improper eating habits and westernization of diet, drinking and smoking, lack of sleep, nutritional imbalance, and excessive diet are also mentioned as causes of hair loss.
  • a composition for preventing or improving hair growth containing minoxidil is being studied as in Patent Registration No. 2003606, and hair loss prevention containing finasteride as in Patent Registration No. 1921246 Although the composition is being studied, minoxidil or finasteride has little effect or there is wide variation between people, and it is difficult to use it for a long period of time due to side effects.
  • An object of the present invention is to provide a composition that acts on the scalp, has no side effects on the human body, and is effective in preventing hair loss and hair growth, and a method for preparing the same.
  • the present invention provides a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, comprising a hazelnut extract and a Korean beef extract.
  • the present invention provides a method for preparing a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, comprising the step of preparing a first mixture comprising a hot water extract of hazelnuts and beef cattle.
  • the composition for preventing hair loss and promoting hair growth of the present invention reduces the production of DHT hormone and cortisol hormone in the scalp, thereby providing an effect of preventing hair loss, hair growth, and promoting hair growth, thereby increasing the thickness and density of hair. can do it In addition, since it uses a natural extract, it can provide effects of preventing hair loss, hair growth, and promoting hair growth without adversely affecting the human body.
  • FIG. 1 shows the results of comparing the change in hair thickness and hair density in the scalp to which the hair loss prevention and hair growth promoting composition is applied and the scalp to which it is not applied, according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 shows the results of comparing hormonal changes in the scalp when the hair loss prevention and hair growth promoting composition is applied and not applied, according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 3 shows the results of comparing the hormonal changes in saliva (saliva) when the hair loss prevention and hair growth promoting composition is applied and not applied, according to an embodiment of the present invention.
  • DHT dihydrotestosterone
  • the 5 ⁇ -reductase has two isoenzymes (type 1 and type 2), both of which are enzymes that convert testosterone into DHT.
  • Type 1 is mainly distributed in sebaceous glands, epidermis, keratinocytes of hair follicles, dermal papilla cells, and sweat glands.
  • Type 2 is mainly distributed in hair follicles of the scalp, epididymis, vas deferens, seminal vesicles, It is mainly distributed in the skin of the prostate and fetal reproductive organs.
  • inhibition of the 5 ⁇ -reductase isoenzyme has the potential to treat androgenic alopecia. That is, in a person who is congenitally deficient in type 2 5 ⁇ -reductase, androgen alopecia does not occur or the frontal forehead line recedes slightly backward. However, the activity of 5 ⁇ -reductase is high in the hair follicles of hair loss patients, which leads to direct hair loss.
  • Cortisol is a hormone produced by the adrenal cortex and is involved in stress conditions. A high level of cortisol indicates a high stress state, and a low level indicates less exposure to the stressful situation. In a state of stress, the human body requires a lot of energy, and the hair responds accordingly. Therefore, it is bound to be affected by all kinds of stress, and under the influence of stress, the active amount of TGF-ß1 (Transforming growth factor-ß1), a substance that promotes the transition from the growth phase to the degeneration phase and the resting phase during the hair growth cycle, also increases.
  • TGF-ß1 Transforming growth factor-ß1
  • the present specification provides a composition having an excellent hair loss prevention and hair growth promoting effect by effectively reducing the production of DHT and cortisol while having no side effects on the human body by using natural substances.
  • the present invention provides a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, comprising as an active ingredient a first mixture comprising a hazelnut extract and a Korean beef extract.
  • the present invention provides a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, wherein the first mixture contains 1 to 3 parts by weight of the Korean beef extract based on 1 part by weight of the hazelnut extract.
  • the first mixture uses hazelnuts having quercetin, which is used as an antioxidant and anti-aging substance as a main ingredient by reducing skin irritation and inflammation, and contains a large amount of phenolic compounds, so it has a strong antioxidant effect. It is possible to use beef broth that contains 15% or more of inulin, which is called natural insulin, among plant substances.
  • hazelnut is a fatty acid (fatty acid), which is a quercetin-based glycoside.
  • the quercetin is a kind of bioflavonoids found in plants and has anti-inflammatory and anti-allergic properties, and has an antioxidant action to prevent oxidation of unsaturated fatty acids and an anti-aging effect.
  • it purifies the blood by lowering the blood viscosity, reduces the amount of cholesterol in the blood, and helps prevent cardiovascular disease, cerebrovascular disease, and high blood pressure.
  • tannin one of the main components of hazelnut, is a kind of polyphenol and is useful for antioxidant, antibacterial, and anti-inflammatory action.
  • Hazelnuts also contain a natural anticancer substance called Taxol, which is effective in treating and preventing various cancers.
  • hazelnuts have the effect of increasing the moisture and elasticity of the skin.
  • the effect of preventing hair loss and hair growth of hazelnuts is not known.
  • the hazelnut extract may be extracted from the leaves, stems or roots of the hazel tree, and is preferably an extract using the fruit of the hazelnut tree.
  • beef cattle root of Helianthus tuberosus
  • vitamin B 2 that makes immune function normal
  • vitamin C that affects sugar metabolism
  • vitamins such as niacin (vitamin B 3 ), protein, carbohydrates, minerals, and potassium.
  • the soup contains a trace amount of fructose and glucose, and is effective for diet and constipation as it is rich in vegetable fiber.
  • Soup contains a large amount of phenolic compounds, anthocyanins, carotenoids, etc., so it has strong antioxidant and anti-inflammatory effects.
  • beef broth contains inulin, a low-calorie polysaccharide, which functions as a natural insulin that does not raise blood sugar levels.
  • the effect of preventing hair loss and hair growth of the Korean beef extract is not known.
  • the active ingredient in the active ingredient, is golden berry, quinoa, earl yew and sucrose, and further comprising a second mixture comprising at least one extract selected from the group consisting of preventing hair loss and promoting hair growth A composition is provided.
  • the present invention provides a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, wherein the second mixture contains 1 to 2 parts by weight of each of the quinoa extract, the pea extract and the succulent extract based on 1 part by weight of the golden berry extract .
  • the golden berry (Physalis Peruviana) contains beta-sitosterol, which is a plant sterol and provitamin D, and is widely used in arteriosclerosis, angina, myocardial infarction, cerebrovascular disease, and diabetes due to cholesterol accumulation. .
  • Beta-sitosterol is beneficial for wound healing and inflammation, and also helps with gum disease, caries prevention, enlarged prostate, and hair loss.
  • Quinoa (Chenopodium quinoa) is rich in betaine and has a high content of potassium, vitamin E, lysine, and saponin among cereals. Lysine of quinoa is a kind of basic amino acid and helps in the production of antibodies, hormones, enzymes, collagen, and tissue formation and repair. cause hair loss Quinoa's saponin helps to promote hair growth by improving scalp blood circulation, is also involved in improving hair thickness, and inhibits skin aging and inflammation.
  • Paeonia radix has various efficacy and effects such as skin whitening and antioxidant. Furthermore, in the scalp and hair, it has the efficacy and effect of protecting the hair from external damage, inducing hair growth by supplying moisture to the scalp, and suppressing itching and dandruff. In addition, it has excellent antioxidant properties, inhibits the activity of type 2 5 ⁇ -reductase, and has a hair growth effect, hair loss prevention effect, antioxidant, anticancer effect, and the like.
  • sauerkraut (Pleuropterus multiflorus) has the effect of preventing hair loss, promoting hair growth, and inhibiting the activity of type 2 5 ⁇ -reductase, in particular, it has the effect of promoting hair growth and darkening the hair.
  • Hasuo activates the metabolic activity of cells in the body, especially scalp cells, thereby improving the scalp condition, thereby exhibiting the effect of preventing hair loss.
  • the second mixture may be mixed with the first mixture and used, for example, in a volume ratio of 2:1 to 2:1, preferably in a volume ratio of 1:1.
  • the content of the second mixture is relatively significantly large, and when it exceeds the scope of the present invention, there may be a problem that the scalp soothing effect is reduced, and the content of the first mixture is relatively significantly large, the scope of the present invention If it exceeds, there may be a problem with the moisture of the scalp and hair.
  • the extract of the present invention may be a hot water extract of each raw material component.
  • it may be an extract extracted by immersing the raw material in water for a certain period of time and then applying heat, and all of the hazelnut and gukwoo extract, and golden berry, quinoa, earl yam and sageum extract may be used in the form of a hot water extract.
  • the extracts of hazelnuts and beef cattle may be obtained by soaking hazelnuts and beef cattle in water for 5 hours, and then heating them at 80 to 120° C. for 8 to 22 hours.
  • the hair loss prevention and hair growth promoting composition of the present invention may be a cosmetic composition.
  • the cosmetic composition may be used in a form that is easy to apply to the scalp, for example, in a formulation selected from the group consisting of soap, shampoo, rinse, treatment, essence, tonic, cream, pack, lotion, nutrition, paste and gel. It may be used in any one formulation, but is not limited thereto, as long as it is in a form that is easy to apply to the scalp.
  • the present invention provides a method for preparing a composition for preventing hair loss and promoting hair growth.
  • the present invention provides a method for preparing a composition for preventing hair loss and promoting hair growth, comprising the step of preparing a first mixture comprising a hot water extract of hazelnuts and beef cattle.
  • the step of preparing the first solution may be performed by mixing the hazelnut and beef broth in a weight ratio of 1:1 to 3, and then mixing 1 to 5 times the weight of water based on the total weight of the hazelnut and beef broth. .
  • the present invention comprises the steps of preparing a second mixture comprising the hot water extract of golden berry, quinoa, earl yam and sageum; and mixing the second mixture with the first mixture to prepare a mixed extraction solution. It provides a method for preparing a composition for preventing hair loss and promoting hair growth.
  • the golden berry, the quinoa, the earl yam, and the sorghum are mixed in an amount of 1 to 2 parts by weight, respectively, of quinoa, the quinoa, and the succulent based on 1 part by weight of the golden berry. After that, it can be carried out by mixing 1 to 5 times the weight of water with the total weight of the golden berry, quinoa, earl yam and sage.
  • the hot water extraction may be performed by heating at a temperature of 80 to 120° C. for 8 to 22 hours, for example, by heating an aqueous solution in which hazelnuts, noodles, and water are mixed at a temperature of 100° C. for 16 hours. .
  • the first solution and the second solution may be soaked in water for 5 to 8 hours before heating.
  • the present invention may further include the step of putting the first mixture, the second mixture or the mixed extraction solution in a concentrator before or after the step of preparing the mixed extraction solution and concentrating at 80 to 90° C. for 5 to 15 hours. and, for example, the mixed extraction solution may be concentrated at 80 to 90° C. for 5 to 15 hours.
  • the concentrated extract solution may be stabilized through the step of removing impurities through filtration and aging.
  • the filtration may be performed with a filtration device of 250 to 350 mesh, and impurities in the concentrated mixed extraction solution may be almost removed through the filtration device as described above.
  • the aging may be performed at 20 to 25 °C for 60 to 80 hours, through which the mixed extraction solution may be stabilized.
  • Hazelnuts fruits of the hazel tree
  • guk beef, ear buckthorn, and sorghum were washed and dried, cut into pieces, and golden berries and quinoa were washed and used, and water was used as the extraction solvent.
  • the extraction is to prepare an aqueous solution by mixing 50 g of hazelnuts, 100 g of beef broth, and 750 g of water, heating the aqueous solution at 100 ° C. for 16 hours, and then cooling it completely at room temperature (20 ° C. to 25 ° C.), the first A mixture was prepared.
  • an aqueous solution is prepared by mixing 100 g of the golden berry, 150 g of quinoa, about 150 g of earl, 150 g of sauerkraut, and 2,750 g of water, and heating the aqueous solution at 100 ° C. for 16 hours, then at room temperature (20 ° C. to 25 ° C.) After cooling completely, a second mixture was prepared.
  • the first mixture and the second mixture were mixed in a volume ratio of 1:1, concentrated at 85° C. for 10 hours, and then completely cooled at room temperature (20° C. to 25° C.) to obtain a mixed extraction solution.
  • the hair loss prevention and hair growth promoting composition obtained through this process was named JU7505, prepared as a solid shampoo (JU7505), and applied to a clinical trial for hair loss prevention and hair growth promotion.
  • the following Example 1 and Comparative Example 1 describe the above clinical study, and this clinical study was conducted at Seoul National University Bundang Hospital.
  • the solid shampoo prepared from the hair loss prevention and hair growth promoting composition prepared in Preparation Example was treated to a patient with hair loss, and hair thickness, hair density, and various hormone levels were measured.
  • Example 1 and Comparative Example 1 were performed for the general public whose hair loss is in progress as shown in Table 1 below.
  • normal people normal people without hair loss
  • a photograph of each individual's scalp was taken using a hair diagnostic device equipped with a lens of 50 or 250 magnification, and the hair density was measured by counting the number of hairs included in one angle of view of the photograph.
  • Example 1 By repeatedly measuring the thickness and density of the hair before (0 months), 2 months, and 4 months after using the solid shampoo using the above method, and observing the changes, the hair thickness of Example 1 and Comparative Example 1 And the results of measuring the hair density are shown in Table 2 and Figure 1 below.
  • the steroid hormone contained in the collected hair was extracted using the method of Deng et al. (1999). Specifically, the chopped hair was subjected to alkali decomposition at room temperature using 1 ml of 1N NaOH, and then neutralized to pH 7.0 using 1N HCl after 1 hour. The steroid hormone contained in the neutralized solution was extracted using 4 ml of 100% diethyl ether. The steroid hormone contained in the diethyl ether was concentrated using a centrifugal evaporator, and 1 ml of a phosphate buffer solution for hormone analysis was added and stored in a -80°C freezer. This was referred to as HSS-1 (hair steroid solution-1).
  • DHT dihydrotestosterone
  • the steroid hormone contained in diethyl ether was concentrated using a centrifugal evaporator, and 0.2 ml of a phosphate buffer solution for hormone analysis was added for DHT analysis, and then stored in a -80°C freezer until just before hormone analysis.
  • the steroid hormone contained in HSS-1 was analyzed using radioimmunoassay. Cortisol, testosterone, dehydroepiandrosterone (DHEA) and epitestosterone (Epi-T) were analyzed using HSS-1. Antibodies to cortisol from USbiological life sciences (MA, USA), antibodies to DHEA from LSBio (WA, USA), antibodies to testosterone from Absolue Antibody (MA, USA), and antibodies to Epi-T It was purchased from Creative diagnostics (NY, USA) and used. Standard materials for each hormone required for hormone quantitative analysis were purchased from Sigma-aldrich (MO, USA) and used. Chloramine-T (Chloramine-T) method was used to bind 125 I to steroid hormones (steroid- 125 I) and used for quantitative analysis of hormones.
  • Intra-experimental and inter-experimental coefficients of variation (CV) appearing in the steroid analysis process using radioimmunoassay were less than 10% and 5%, respectively, and the sensitivity for corticosterone analysis was up to 2.5pg/ It was tube.
  • composition of the present invention affects hormonal changes in the scalp and hair follicles.
  • Saliva samples obtained from each participant were subjected to primary purification. Specifically, the saliva sample is centrifuged at 2000xg for 30 minutes to remove foreign substances contained in the saliva, and after centrifugation, the supernatant is taken and left at -80°C for 2 hours, then rapidly thawed and centrifuged at 15000xg for 30 minutes. min), and the supernatant was stored at -80°C until just before hormone analysis. This was designated as sample 1.
  • concentration of DHT from sample 2 was quantitatively analyzed in the same manner as the [measurement of changes in hormone production in the scalp region].
  • the steroid hormone contained in the sample was quantitatively analyzed by radioimmunoassay based on the method of Ahn et al. (Ahn et al., 2007). Since the concentration of steroid hormone contained in Sample 1 is several tens of times lower than that of blood (20-30 times for cortisol), a commercially available kit for hormone analysis is not suitable for measuring steroid hormones in saliva.
  • the concentration of steroid hormones contained in saliva was measured using a liquid phased-double antibody radioimmunoassay method.
  • Cortisol, testosterone, dehydroepiandrosterone (DHEA) and epitestosterone (Epi-T) were analyzed.
  • Chloramine-T (Chloramine-T) method was used to bind 125 I to steroid hormones (steroid- 125 I) and used for quantitative analysis of hormones.
  • composition of the present invention significantly lowers the hormone production in the scalp, but does not cause a significant change in the hormone production in the body, thereby confirming that there is no side effect to the human body.

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Abstract

본 발명은 두피에 작용하고, 인체에 부작용이 없으며, 탈모 방지 및 발모에 효과가 있는 조성물 및 이의 제조 방법을 제공하는 것으로, 상세하게 본 발명은 개암 추출물 및 국우 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 유효 성분으로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물 및 이의 제조 방법을 제공한다.

Description

개암 및 국우 추출물을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물 및 이의 제조 방법
본 발명은 개암 및 국우 추출물을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물, 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
사회 발달에 따른 환경적 요인과 사회적 요인 등의 다양한 원인들에 의해 모든 연령층에서 탈모 인구가 계속 증가하고 있고, 성별에 관계없이 그 연령층마저 갈수록 낮아지면서 탈모가 늘어나고 있는 현실이다. 탈모 증상은 누구에게나 심한 스트레스를 줄뿐만 아니라 외적 내적 자신감을 잃게 한다. 탈모는 초기에 진단하여 예방하거나 치료하는 것이 바람직하다. 특히 유전적 탈모의 원인과 후천성 탈모의 원인이 복합되면 탈모증상은 더욱 심하게 나타나므로 초기에 진단하여 예방하는 것이 좋다.
모발은 모낭에서 형성되고, 모낭은 내모근초(inner root sheath), 외모근초(outer root sheath), 모간(hair shaft), 모기질세포(hair matrix) 등으로 구성되며, 모유두세포(dermal papilla cell)는 모낭형성 능력과 직결되어 모낭형성에 있어서 핵심기능을 하므로 모유두세포가 없거나 제 기능을 하지 못하면 모낭을 형성하지 못한다.
탈모의 원인으로는 일반적으로 유전, 노화, 과도한 스트레스, 남성호르몬 과다분비로 인한 DHT(dihydrotestosterone) 생성, 내분비 계통의 질환, 약물 사용, 예민성 두피, 지루성 두피, 거의 매일 사용하는 합성계면활성제(synthetic surfactant)의 사용, 파마, 염색 등을 들 수 있다. 또한 환경오염, 부적절한 식습관과 식생활의 서구화, 음주와 흡연, 수면 부족, 영양 불균형 그리고 과도한 다이어트 등도 탈모의 원인으로 거론된다.
이와 같은 탈모를 방지하고, 진행된 탈모를 개선시키기 위해, 등록특허 제2003606호와 같이 미녹시딜을 함유하는 탈모 예방 또는 발모 개선용 조성물이 연구되고 있으며, 등록특허 제1921246호와 같이 피나스테리드를 함유하는 탈모 방지 조성물이 연구되고 있으나, 미녹시딜이나 피나스테리드는 효과가 미미하거나 사람마다 편차가 심하고, 부작용이 있어 장기간 사용이 어려운 것이 현실이다.
따라서 부작용이 없으며, 안전성이 뛰어난 탈모 방지제, 양모제, 육모제, 발모제 개발이 절실하다.
본 발명은 두피에 작용하고, 인체에 부작용이 없으며, 탈모 방지 및 발모에 효과가 있는 조성물 및 이의 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 견지에 따르면, 본 발명은 개암 추출물 및 국우 추출물을 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 견지에 따르면, 본 발명은 개암 및 국우의 열수 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 제조하는 단계를 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물은 두피에서 DHT 호르몬, 코티졸 호르몬의 생성을 감소시켜, 탈모 방지, 양모, 육모 및 발모 촉진 효과를 제공할 수 있으며, 이로 인해 모발의 굵기 및 모발의 밀도 역시 증가시킬 수 있다. 또한, 천연 추출물을 사용하기 때문에 인체에 부작용을 주지 않으면서 탈모 방지, 양모, 육모 및 발모 촉진 효과를 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따라, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 적용한 두피와 적용하지 않은 두피에서의 모발 굵기 변화 및 모발 밀도의 변화를 비교한 결과를 나타낸다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따라, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 적용한 경우와 적용하지 않은 경우, 두피에서의 호르몬 변화를 비교한 결과를 나타낸다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따라, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 적용한 경우와 적용하지 않은 경우, 타액(saliva)내의 호르몬 변화를 비교한 결과를 나타낸다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 형태를 설명한다. 그러나, 본 발명의 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다.
정상적인 모발의 성장은 모낭(hair follicle)의 활동과 세포분열이 활발해 모발이 성장하는 생장기(anagen), 모낭의 성장활동이 정지되고 급속도로 위축되는 퇴행기(catagen), 모낭의 세포 활동이 완전히 소멸된 휴지기(telogen)의 주기인, 모주기(hair cycle)에 따라 생성 및 소멸을 반복한다.
한편, 테스토스테론은 5α-환원효소(5α-reductase)의 작용에 의해 모낭(hair follicle)에서 활성이 높은 DHT(Dihydrotestosterone)로 환원되는데, 환원된 DHT는 안드로겐 수용체와 결합하여 모낭세포의 단백질 합성을 지연시켜 모낭의 생장기를 단축시키고, 모기질(hair matrix) 세포의 분열을 억제시키며, 모낭을 위축시켜 탈모를 야기시킨다.
상기 5α-환원효소는 2종류(제1형, 제2형)의 동종효소가 있으며 두 가지 모두 테스토스테론을 DHT로 변화시키는 효소이다. 제1형은 피지선, 표피, 모낭의 각질형성세포(keratinocytes), 모유두세포, 땀샘에 주로 분포하며, 제2형은 두피 모낭의 모근초(root sheaths), 부고환, 정관, 정낭(seminal vesicle), 전립선, 태아 생식기의 피부에 주로 분포한다.
따라서, 상기 5α-환원효소의 동종효소들을 억제하면 안드로겐 탈모(androgenic alopecia)를 치료할 수 있는 가능성이 있다. 즉, 제2형 5α-환원효소가 선천적으로 결핍된 사람에서는 안드로겐 탈모가 발생되지 않거나 앞 이마선이 뒤로 조금 후퇴하는 정도가 된다. 그러나, 탈모 환자들의 모낭에는 5α-환원효소의 활성도가 높고, 이로 인해 직접적인 탈모가 발생된다.
또한, 탈모는 코티졸(cortisol) 호르몬에 의해 영향을 받기도 한다. 코티졸은 부신피질에서 생성되는 호르몬으로 스트레스 상태에 관여한다. 코티졸 수치가 높다는 것은 스트레스 상태가 높다는 것이며, 수치가 낮다는 것은 그만큼 스트레스 상황에 덜 노출되어 있다는 것이다. 스트레스 상태에서 인체는 많은 에너지를 필요로 하게 되며 모발도 그에 따라 반응하게 된다. 따라서 어떤 탈모든 스트레스에 그 영향을 받기 마련이고, 스트레스의 영향으로 발모주기 중 성장기에서 퇴행기 및 휴지기로 이행을 촉진시키는 물질인 TGF-ß1(Transforming growth factor-ß1)의 활성량도 증가한다.
즉, DHT와 코티졸의 증가는 탈모에 직접적인 영향을 미치는 것으로, 상기 DHT 및 코티졸의 생성을 감소시킬 수 있다면, 탈모를 예방하거나, 양모, 육모 및 발모를 촉진시킬 수 있을 것이다.
이에, 본 명세서는 천연 물질들을 사용하여, 인체에 부작용이 없으면서도, DHT 및 코티졸의 생성을 효과적으로 감소시켜 우수한 탈모 예방 및 발모 촉진 효과를 갖는 조성물을 제공한다.
상세하게, 본 발명은 개암 추출물 및 국우 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 유효 성분으로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명은 상기 제1 혼합물이 상기 개암 추출물 1 중량부를 기준으로 하여 국우 추출물을 1 내지 3의 중량부로 포함되는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 제공한다.
상기 제1 혼합물은 피부 자극 및 염증을 감소시켜 항산화 및 항노화물질로 사용되는 퀘세틴(quercetin)을 주요 성분으로 가지고 있는 개암을 사용하며, 다량의 페놀성 화합물이 함유되어 있어 강력한 항산화 효과를 지니고 있으면서도, 식물성 물질 가운데 천연 인슐린으로 불리는 이눌린(inulin)을 15% 이상 함유하고 있는 국우를 사용할 수 있다.
구체적으로, 개암(Corylus heterophylla)의 주요 성분은 지방산(fatty acid)으로 퀘세틴(quercetin)계 배당체이다. 상기 퀘세틴은 식물에서 발견되는 바이오플라보노이드(Bioflavonoids)의 일종으로 항염증, 항알러지 성질을 가지고 있으며, 불포화 지방산의 산화를 막는 항산화 작용을 하고 노화방지 효과를 갖는다. 더불어 혈액 점도를 낮춰 피를 맑게 하고 혈중 콜레스테롤 양을 줄여주며 심혈관 질환 및 뇌혈관 질환, 고혈압 예방에 도움을 준다. 또한 개암의 주요 성분 중 하나인 탄닌(tannin) 성분은 폴리페놀(polyphenol)의 일종으로써 항산화, 항균, 항염 작용에 유용하다. 그리고 개암은 택솔(Taxol)이라는 천연 항암(natural anticancer) 물질도 함유하고 있어 각종 암치료와 예방에 효과를 나타낸다. 또한 개암은 피부의 보습과 탄력을 증가시켜주는 효과가 있다. 다만, 개암의 탈모 방지 및 발모 효과는 알려진 바 없다.
상기 개암 추출물은 개암나무의 잎, 줄기 또는 뿌리로부터 추출될 수 있으며, 바람직하게는 개암나무의 열매를 이용한 추출물이다.
나아가, 국우(Helianthus tuberosus의 뿌리)는 면역기능을 정상적으로 만들어주는 비타민B 2, 당 대사에 영향을 주는 비타민C, 나이아신(niacin, 비타민B 3) 등의 비타민, 단백질, 당질, 미네랄, 칼륨이 풍부하다. 또한 국우에는 과당, 글루코스(glucose)가 미량 포함되어 있고, 식물성 섬유가 풍부하여 다이어트, 변비에 효과가 있다. 국우에는 다량의 페놀성 화합물(Phenolic compounds), 안토시아닌(anthocyanin), 카로티노이드(carotenoid) 등이 함유되어 있어 강력한 항산화, 항염 효과를 지니고 있다. 특히 국우에는 칼로리가 낮은 다당류인 이눌린(inulin)이 함유되어 있어 혈당치를 상승시키지 않는 천연 인슐린(natural insulin) 기능을 수행한다. 다만, 국우 추출물의 탈모 방지 및 발모 효과는 알려진 바 없다.
나아가, 본 발명은, 상기 유효 성분에 있어서, 상기 유효 성분은 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 1종 이상의 추출물을 포함하는 제2 혼합물을 더 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 제공한다.
바람직하게, 본 발명은 상기 제2 혼합물이 상기 골든베리 추출물 1 중량부를 기준으로 하여 퀴노아 추출물, 백작약 추출물 및 하수오 추출물을 각각 1 내지 2 중량부의 함량으로 포함되는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 제공한다.
상기 골든베리(Physalis Peruviana)는 식물성 스테롤(sterol)이자 프로비타민D인 베타시토스테롤(β-sitosterol)을 포함하고 있으며, 콜레스테롤 축적에 의한 동맥경화증, 협심증, 심근경색, 뇌혈관성 질환, 당뇨병에 널리 쓰인다. 베타시토스테롤은 상처 치유, 염증의 제거에 유익하며, 잇몸 질환, 충치예방, 전립선비대증, 탈모 등에도 도움을 준다.
퀴노아(Chenopodium quinoa)는 베타인(betaine)이 풍부하고 곡류 중에서도 칼륨, 비타민E, 라이신(lysine), 사포닌(saponin) 함유량이 높다. 퀴노아의 라이신은 염기성 아미노산의 일종으로 항체, 호르몬, 효소, 콜라겐(collagen) 생성 및 조직형성과 복구에 도움을 주는데, 특히 라이신은 모발 성장 촉진과 모발 탄력에 효능을 지니고 있어, 라이신의 결핍은 탈모를 유발시킨다. 퀴노아의 사포닌은 두피 혈행을 개선해 모발의 성장을 촉진하는데 도움을 주고 모발 굵기 개선에도 관여하며, 피부 노화와 염증을 억제하는 작용을 한다.
백작약(Paeonia radix)은 피부 미백과 항산화 등 다양한 효능과 효과를 가지고 있다. 나아가, 두피와 모발에서는 모발을 외부의 손상으로부터 보호하고, 두피에 보습을 공급하여 모발 성장을 유도하고 가려움과 비듬을 억제하는 효능과 효과를 가지고 있다. 또한, 백작약은 우수한 항산화와 제2형 5α-환원효소의 활성을 억제하고 모발 성장 효과와 탈모 방지 효과, 항산화, 항암효과 등을 가지고 있다.
또한, 하수오(Pleuropterus multiflorus)는 탈모를 예방하고 모발의 성장을 촉진시키며 제2형 5α-환원효소의 활성을 억제하는 효과를 가지고 있으며, 특히 모발성장 촉진과 머리카락을 검게 하는 효과를 지니고 있다. 또한 하수오는 체내의 세포, 특히 두피 세포의 대사활동을 활성화시켜 두피 상태를 개선시킴으로써 탈모 방지 효과를 나타나도록 한다.
상기 제2 혼합물은 상기 제1 혼합물과 혼합되어 사용될 수 있으며, 예를 들어, 2:1 내지 2:1의 부피비, 바람직하게는 1:1의 부피비로 혼합되어 사용될 수 있다. 상기 부피비에서 제2 혼합물의 함량이 상대적으로 현저히 많아, 본 발명의 범위를 초과하는 경우에는 두피 진정 효과가 감소되는 문제가 생길 수 있으며, 제1 혼합물의 함량이 상대적으로 현저히 많아, 본 발명의 범위를 초과하는 경우에는 두피 및 모발의 보습(moisture)에 문제가 생길 수 있다.
나아가, 본 발명의 추출물은 각 원료 성분의 열수 추출물일 수 있다. 예를 들어, 원료를 물에 일정시간 담가둔 다음, 열을 가해 추출된 추출물일 수 있으며, 상기 개암 및 국우 추출물, 그리고 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오 추출물 모두 열수 추출물의 형태로 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 개암 및 국우 추출물은 개암 및 국우를 물에 5시간 동안 담가 둔 다음, 80 내지 120℃에서 8 내지 22시간 동안 가열하여 획득될 수 있다.
한편, 본 발명의 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 두피에 적용되기 쉬운 형태로 사용될 수 있으며, 예를 들어, 비누, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 에센스, 토닉, 크림, 팩, 로션, 영양제, 페이스트 및 겔로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 제형 중 어느 하나의 제형으로 사용될 수 있으나, 두피에 적용되기 쉬운 형태라면, 이에 제한되지 않는다.
나아가, 본 발명은 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법을 제공한다.
상세하게, 본 발명은 개암 및 국우의 열수 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 제조하는 단계를 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법을 제공한다.
상기 제1 용액을 제조하는 단계는, 상기 개암과 국우를 1:1 내지 3의 중량비로 혼합한 후, 상기 개암 및 국우 총 중량을 기준으로 1 내지 5배 중량의 물을 혼합하여 수행할 수 있다.
이 때, 상기 개암을 기준으로, 상기 국우의 중량비가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 제공하고자 하는 영양 공급에 문제가 생길 수 있다.
또한, 본 발명은 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오의 열수 추출물을 포함하는 제2 혼합물을 제조하는 단계; 및 상기 제2 혼합물을 상기 제1 혼합물과 혼합하여 혼합 추출 용액을 제조하는 단계를 추가로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법을 제공한다.
상기 제2 용액을 제조하는 단계는, 상기 골든베리, 상기 퀴노아, 상기 백작약 및 상기 하수오를, 상기 골든베리 1 중량부를 기준으로 하여 퀴노아, 백작약 및 하수오를 각각 1 내지 2 중량부의 함량으로 혼합한 후, 상기 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오 총 중량에 1 내지 5배 중량의 물을 혼합하여 수행할 수 있다.
이 때, 상기 골든베리를 기준으로, 상기 퀴노아, 백작약 및 하수오의 중량비가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 추출되는 성분에 차이가 발생하여, 영양 공급에 문제가 생길 수 있다.
상기 열수 추출은 80 내지 120℃의 온도로 8 내지 22시간 동안 가열하여 수행될 수 있으며, 예를 들어 개암, 국우 및 물이 혼합된 수용액을 100℃의 온도로 16시간 동안 가열하여 수행할 수 있다.
다만, 본 발명은 성분의 효율적인 추출을 위해, 상기 제1 용액 및 제2 용액을 가열하기 전에 5 내지 8시간 동안 물에 담가둘 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 혼합 추출 용액을 제조하는 단계 이전 또는 이후에 제1 혼합물, 제2 혼합물 또는 혼합 추출 용액을 농축기에 넣어 80 내지 90℃에서 5 내지 15시간 동안 농축하는 단계를 추가로 포함할 수 있으며, 예를 들어, 상기 혼합 추출 용액을 80 내지 90℃에서 5 내지 15시간 농축시킬 수 있다.
상기와 같이 농축된 혼합 추출 용액은 여과를 통해 불순물이 제거되고, 숙성하는 단계를 통해 안정화될 수 있다.
예를 들어, 상기 여과는 250 내지 350메쉬의 여과 장치로 수행될 수 있으며, 상기와 같은 여과 장치를 통해 농축된 혼합 추출 용액 내의 불순물이 거의 제거될 수 있다. 또한, 상기 숙성은 20 내지 25℃에서 60 내지 80시간 동안 수행될 수 있으며, 이를 통해 상기 혼합 추출 용액이 안정화될 수 있다.
이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시에 불과하며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
제조예
개암(개암나무의 열매), 국우, 백작약, 하수오를 세척 건조하여 세절(細切)하고 골든베리, 퀴노아는 세척하여 사용하였으며, 추출용매로는 물을 사용하였다.
보다 구체적으로, 추출은 상기 개암 50g, 국우 100g 및 물 750g을 혼합하여 수용액을 제조하고, 상기 수용액을 100℃에서 16시간 동안 가열한 다음, 상온(20℃ 내지 25℃)에서 완전히 식혀, 제1 혼합물을 제조하였다.
나아가, 상기 골든베리 100g, 퀴노아 150g, 백작약 150g, 하수오 150g 및 물 2,750g을 혼합하여 수용액을 제조하고, 상기 수용액을 100℃에서 16시간 동안 가열한 다음, 상온(20℃ 내지 25℃)에서 완전히 식혀, 제2 혼합물을 제조하였다.
상기 제1 혼합물 및 제2 혼합물을 1:1의 부피비로 혼합한 다음, 85℃에서 10시간 동안 농축시킨 후 상온(20℃ 내지 25℃)에서 완전히 식혀, 혼합 추출 용액을 획득하였다.
상기 혼합 추출 용액을 300메쉬의 여과장치를 통해 여과시킨 후 획득된 조성물의 안정화를 위해 상온(20℃ 내지 25℃)에서 72시간 동안 숙성시켜 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 획득하였다.
이러한 과정을 통해 획득한 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물을 JU7505로 명명하고, 고형샴푸로 제조(JU7505)하여 탈모 예방 및 발모 촉진을 위한 임상에 적용하였다. 하기 실시예 1 및 비교예 1은 상기 임상 연구를 기재한 것이며, 본 임상 연구는 분당서울대학교병원에서 진행하였다.
실시예 1
상기 제조예에서 제조된 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물로 제조된 고형 샴푸를 탈모가 있는 환자에게 처리하여 모발 굵기, 모발 밀도 및 각종 호르몬 수치를 측정하였다.
비교예 1
탈모가 있는 환자에게 아무런 처리를 하지 않고, 모발 굵기, 모발 밀도 및 각종 호르몬 수치를 측정하였다.
구체적인 실험을 위해 하기 표 1과 같은 탈모가 진행 중인 일반인을 대상으로, 상기 실시예 1 및 비교예 1을 수행하였다. 비교를 위해 정상인(탈모가 없는 일반인)을 컨트롤로 설정하였다.
[표 1]
Figure PCTKR2021003438-appb-img-000001
[모발 굵기 및 모발 밀도의 측정]
상기 실시예 1, 비교예 1 및 컨트롤의 두부에 미간 중간기점을 기점으로 두정부로 이어지는 가상의 선(미간선)과 좌측 귀바퀴 정점을 기점으로 우측 귀바퀴로 이어지는 가상의 선(측선)을 기준선으로 하여 측정점을 정하였다.
각 개인의 측정점을 기준으로 반경 2cm 내 지점에서 틴닝가위를 이용하여 약 50mg의 모발(일렬로 묶으면 성냥개비 절반 두께 정도)을 두피로부터 2cm 길이로 채취하였고, 채취된 모발은 두께측정 게이지(Thickness gaze)를 이용하여 모발 굵기를 측정하였다.
모발 채취 후 50배 혹은 250배율의 렌즈가 장착된 모발진단기를 이용하여 각 개인의 측정점 부위 두피 사진을 촬영하였고, 이 사진의 한 화각에 포함되어 있는 모발의 수를 세어 모발밀도를 측정하였다.
위 방법으로 고형샴푸 사용 전(0개월 후), 고형샴푸 사용 2개월 후 및 4개월 후의 모발의 굵기 및 밀도를 반복적으로 측정하여 그 변화를 관찰하여, 상기 실시예 1 및 비교예 1의 모발 굵기 및 모발 밀도를 측정한 결과를 하기 표 2 및 도 1에 나타내었다.
[표 2]
Figure PCTKR2021003438-appb-img-000002
표 2 및 도 1에 보이는 바와 같이, 탈모가 진행 중인 일반인에게 본 발명의 조성물을 처리한 경우 모발의 굵기와 모발 수가 증가함을 확인할 수 있었다.
[두피 부분의 호르몬 생성 변화 측정]
두피 부분의 호르몬 생성 변화는 다음과 같은 순서로 수행되었다.
1) 시료 정제
각 참여자들로부터 약 2cm 길이의 모발 80-100 mg을 탈모가 진행중인 가장자리 부위에서 채취하였다. 화학천칭을 이용하여 채취된 모발의 무게를 다시 정량하였고 수술용 가위와 핀셋을 이용하여 이들 모발을 3-4 mm 간격으로 잘게 절단하였다.
2) DHT의 정량분석
Deng 등(1999)의 방법을 이용하여 상기 채취된 모발에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬을 추출하였다. 구체적으로, 잘게 절단된 모발에 1N NaOH를 1ml 이용하여 상온에서 알칼리 분해하였고, 1시간 후에 1N HCl을 이용하여 pH 7.0으로 중화하였다. 중화된 용액에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬은 4ml의 100% 디에틸에테르(diethyl ether)를 이용하여 추출하였다. 원심증발농축기를 이용하여 상기 디에틸에테르에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬을 농축하였고, 1ml의 호르몬 분석용 인산완충용액을 첨가한 후 -80℃ 냉동고에 보관하였다. 이를 HSS-1(hair steroid solution-1)로 하였다.
테스토스테론(testosterone)과 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone, DHT)의 분자구조는 상호 유사하기 때문에 방사면역측정법을 이용해 호르몬을 정량분석 하고자 할 때, DHT의 항체(antibody)는 테스토스테론과 DHT를 구분하지 못하는 특징이 있다. 따라서 Werawatgoompa 등(1982)의 방법을 이용하여 테스토스테론을 산화시켜 제거한 후에 DHT를 정량 분석하였다. 구체적으로는, 0.5 ml의 HSS-1에 500ul의 과망간산 칼륨(potassium permanganate, 500mg/lOOml)을 첨가한 후 20분간 상온에 방치하여 HSS-1에 포함되어 있는 테스토스테론을 제거하였고, 이 혼합액에 2ml의 100% 디에틸에테르를 첨가하여 30분간 교반하여 혼합액에 포함되어 있는 다른 스테로이드 호르몬을 추출하였다. 원심증발농축기를 이용하여 디에틸에테르에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬을 농축하였고, DHT의 분석을 위하여 0.2ml의 호르몬 분석용 인산완충용액을 첨가한 후 호르몬 분석 직전까지 -80℃ 냉동고에 보관하였다.
3) 모발에 포함되어 있는 호르몬 분석
방사면역측정법을 이용하여 HSS-1에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬을 분석하였다. HSS-1을 이용하여 코티졸, 테스토스테론, 디히드로에피안드로스테론(dehydroepiandrosterone, DHEA) 및 에피테스토스테론(epitestosterone, Epi-T)을 분석하였다. 코티졸에 대한 항체는 USbiological life sciences(MA, USA)에서, DHEA에 대한 항체는 LSBio(WA, USA)에서, 테스토스테론에 대한 항체는 Absolue antibody 사(MA, USA)에서, Epi-T에 대한 항체는 Creative diagnostics 사(NY, USA)에서 구입하여 사용하였다. 호르몬 정량분석에 필요한 각 호르몬의 표준물질은 Sigma-aldrich(MO, USA)에서 구입하여 사용하였다. 클로라민-T(Chloramine-T) 방법을 이용하여 스테로이드 호르몬에 125I를 결합시켜 (스테로이드- 125I) 호르몬 정량분석에 이용하였다.
방사면역측정법을 이용한 스테로이드 호르몬 분석은 Ahn 등(2007)의 방법을 따랐다. 구체적으로는 각 시험관에 포함되어 있는 방사성의 총량은 감마선계측기(gamma counter, PerkinElmer life sciences, MA, USA)를 이용하여 계측하였으며 통상적으로 각 분석과정에 둘 또는 셋의 표준시료가 적용되었고 각 시료는 두 번의 반복적 실험 과정을 거쳤다. 방사선 계측이 끝난 시험관의 스테로이드 호르몬 농도는 개인용 컴퓨터에서 Riasmart program(PerkinElmer life sciences, MA, USA)을 사용하여 계산하였다. 방사면역측정법을 이용한 스테로이드 분석과정에 나타나는 실험내, 실험간 변동계수(coefficients of variation, CV)는 각각 10%, 5% 미만이었으며 코티코스테론(corticosterone)을 분석할 수 있는 예민도는 최고 2.5pg/tube 이었다.
상기와 같은 방법을 사용하여, 상기 컨트롤, 실시예 1 및 비교예 1의 두피 부분의 호르몬의 생성 변화를 측정한 결과를 하기 표 3 및 도 2에 나타내었다.
[표 3]
Figure PCTKR2021003438-appb-img-000003
상기 표 3 및 도 2에 보이는 바와 같이, 탈모가 진행 중인 일반인에게 본 발명의 조성물을 처리한 경우 두피의 코티졸, 테스토스테론, DHT, Epi-T 및 DHEA가 모두 감소함을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명의 조성물이 두피 및 모낭의 호르몬 변화에 영향을 미치는 것을 확인할 수 있었다.
[타액에서의 호르몬 생성 변화 측정]
타액에서의 호르몬 변화 측정은 다음과 같은 순서로 수행되었다.
1) 시료정제
각 참여자들로부터 얻은 타액검체는 1차적인 정제 작업을 거쳤다. 구체적으로, 타액검체는 2000xg에서 30분간 원심분리하여 타액에 포함되어 있는 이물질을 제거하고, 원심분리 후 상층액을 취하여 -80℃에서 2시간 동안 방치한 후 급속 해동하여 고속원심분리(15000xg에서 30분)한 다음, 상층액을 호르몬 분석직전까지 -80℃에 보관하였다. 이를 검체 1로 하였다.
2) DHT의 정량분석 준비
상기 검체에서 300 ul의 시료를 취한 후, 상기 시료에 0.3 ml의 과망간산 칼륨(potassium permanganate, 500mg/lOOml)을 첨가한 후 20분간 상온에 방치하여 HSS-1에 포함되어 있는 테스토스테론을 제거하였고, 이 혼합액에 1.2ml의 100% 디에틸에테르(diethyl ether)를 첨가하여 30분간 교반하여 혼합액에 포함되어 있는 다른 스테로이드 호르몬을 추출하였다. 나아가, 원심증발농축기를 이용하여 디에틸에테르에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬을 농축하였고, DHT의 분석을 위하여 0.2ml의 호르몬 분석용 인산완충용액을 첨가한 후 호르몬 분석 직전까지 -80℃ 냉동고에 보관하였다. 이를 검체 2로 하였다.
나아가, 상기 [두피 부분의 호르몬 생성 변화 측정]와 동일한 방법으로 상기 검체 2로부터 DHT의 농도를 정량분석 하였다.
3) 타액에 포함되어 있는 호르몬 분석
상기 검체에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬은 Ahn 등(Ahn et al., 2007)의 방법에 근거하여 방사면역측정법으로 정량분석하였다. 검체 1에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬의 농도는 혈액에 비해 수십 배(코티졸의 경우 20-30배) 낮기 때문에 상용화된 호르몬 분석용 키트는 타액내의 스테로이드 호르몬 측정을 위해 적합하지 않다.
따라서 액상-이중 항체(liquid phased-double antibody) 방사면역측정법 이용하여 타액에 포함되어 있는 스테로이드 호르몬 농도를 측정하였다. 코티졸, 테스토스테론, 디히드로에피안드로스테론(dehydroepiandrosterone, DHEA) 및 에피테스토스테론(epitestosterone, Epi-T)을 분석하였다. 코티졸에 대한 항체는 USbiological life sciences(MA, USA)에서, DHEA에 대한 항체는 LSBio(WA, USA)에서, 테스토스테론에 대한 항체는 Absolue antibody 사(MA, USA)에서, Epi-T에 대한 항체는 Creative diagnostics 사(NY, USA)에서 구입하여 사용하였다. 호르몬 정량분석에 필요한 각 호르몬의 표준물질은 Sigma-aldrich(MO, USA)에서 구입하여 사용하였다. 클로라민-T(Chloramine-T) 방법을 이용하여 스테로이드 호르몬에 125I를 결합시켜(스테로이드- 125I) 호르몬 정량분석에 이용하였다.
상기 측정과정은 측정튜브에 정해진 농도의 표준(standard) 시료들과 시료 0.1ml을 각각 넣고, 비특이반응(non-specific binding)을 측정하기 위해 스테로이드 호르몬이 첨가되지 않은 시험관에 호르몬에 대한 항체를 대신하여 GPBS가 첨가되었으며, 표준시료의 스테로이드 호르몬이 포함되어 있는 시험관에는 차콜-스트립 침(charcoal-stripped saliva)이 추가되었다. 125I로 표지된 스테로이드 호르몬의 전체 방사선량은 대략 50,000cpm/tube 으로 하였고 항체는 30-35% 결합하게 희석하였다. 1차 반응 전체 부피는 시험관 당 0.4ml 이었고, 표준시료와 분석 대상들은 4℃에서 24시간 반응시켰다. 그리고 다음날 2차 반응을 위해 실온에서 30분간 추가 반응시킨 후, 2차 항체 0.1ml 이 각 시험관에 추가하였고 그 후 30분을 더 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 각 시험관에 10% PEG 0.5ml 추가하여 15분간 반응시키고 4℃에서 1500g로 20분 동안 원심분리 하였다. 원심분리 후 상층액은 진공펌프를 이용하여 제거하였고 각 시험관에 남아있는 침전물의 방사선량은 감마선 계측기(Cobra 5005, PerkinElmer Life and Analytical Sciences)를 이용하여 측정하였다. 측정된 각 호르몬의 농도는 Riasmart 소프트웨어 (PerkinElmer Life and Analytical Sciences)를 이용하여 표준 커브(standard curve)로부터 산출되었다.
상기와 같은 방법에 의해, 상기 컨트롤, 실시예 1 및 비교예 1의 타액에서의 호르몬의 생성 변화를 측정한 결과를 하기 표 4 및 도 3에 나타내었다.
[표 4]
Figure PCTKR2021003438-appb-img-000004
상기 표 4 및 도 3에 보이는 바와 같이, 탈모가 진행 중인 일반인에게 본 발명의 조성물을 처리한 경우 타액(saliva)의 코티졸, 테스토스테론, DHT, Epi-T 및 DHEA는 본 발명의 조성물을 처리하지 않은 경우와 호르몬의 차이가 크지 않음(유의미한 차이가 있지 않음)을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명의 조성물은 두피에서의 호르몬 생성을 유의하게 낮추나, 체내 호르몬 생성에는 유의미한 변화를 일으키지 않아, 인체에 부작용이 없는 것임을 확인할 수 있었다.
이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (17)

  1. 개암 추출물 및 국우 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 유효 성분으로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 제1 혼합물은 상기 개암 추출물 1 중량부를 기준으로 하여 국우 추출물을 1 내지 3의 중량부로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 유효 성분은 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 1종 이상의 추출물을 포함하는 제2 혼합물을 더 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 제2 혼합물은 상기 골든베리 추출물 1 중량부를 기준으로 하여 퀴노아 추출물, 백작약 추출물 및 하수오 추출물을 각각 1 내지 2 중량부의 함량으로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 제2 혼합물은 제1 혼합물과 2:1 내지 1:2의 부피비로 혼합되는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  6. 제1항 또는 제3항에 있어서,
    추출물은 각 원료 성분의 열수 추출물인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물은 화장료 조성물인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 비누, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 에센스, 토닉, 크림, 팩, 로션, 영양제, 페이스트 및 겔로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 제형 중 어느 하나의 제형인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
  9. 개암 및 국우의 열수 추출물을 포함하는 제1 혼합물을 제조하는 단계
    를 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  10. 제9항에 있어서,
    골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오의 열수 추출물을 포함하는 제2 혼합물을 제조하는 단계; 및
    상기 제2 혼합물을 상기 제1 혼합물과 혼합하여 혼합추출용액을 제조하는 단계를 추가로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 제1 혼합물을 제조하는 단계는, 상기 개암과 국우를 1:1 내지 3의 중량비로 혼합한 후, 상기 개암 및 국우 총 중량을 기준으로 1 내지 5배 중량의 물을 혼합하여 수행하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  12. 제10항에 있어서,
    상기 제2 혼합물을 제조하는 단계는, 상기 골든베리, 상기 퀴노아, 상기 백작약 및 상기 하수오를, 상기 골든베리 1 중량부를 기준으로 하여 퀴노아, 백작약 및 하수오를 각각 1 내지 2 중량부의 함량으로 혼합한 후, 상기 골든베리, 퀴노아, 백작약 및 하수오 총 중량에 1 내지 5배 중량의 물을 혼합하여 수행하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  13. 제10항에 있어서,
    상기 열수 추출은 80 내지 120℃의 온도로 8 내지 22시간 동안 가열하여 수행되는 것인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  14. 제10항에 있어서,
    상기 혼합 추출 용액을 제조하는 단계 이전 또는 이후에 제1 혼합물, 제2 혼합물 또는 혼합 추출 용액을 농축기에 넣어 80 내지 90℃에서 5 내지 15시간 동안 농축하는 단계를 추가로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  15. 제14항에 있어서,
    농축된 혼합추출 용액을 여과시킨 후 숙성하는 단계를 추가로 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 여과는 250 내지 350메쉬의 여과 장치로 수행하는 것인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
  17. 제15항에 있어서,
    상기 숙성은 20 내지 25℃에서 60 내지 80시간 동안 수행하는 것인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물의 제조 방법.
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