WO2021182914A1 - 신규한 cdk7 억제 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염 - Google Patents

신규한 cdk7 억제 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염 Download PDF

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WO2021182914A1
WO2021182914A1 PCT/KR2021/003100 KR2021003100W WO2021182914A1 WO 2021182914 A1 WO2021182914 A1 WO 2021182914A1 KR 2021003100 W KR2021003100 W KR 2021003100W WO 2021182914 A1 WO2021182914 A1 WO 2021182914A1
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formula
compound
oxalate
pharmaceutically acceptable
salt
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PCT/KR2021/003100
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이광옥
유자경
이준희
이미정
이강우
민지은
최은호
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영진약품 주식회사
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Definitions

  • the present invention relates to novel compounds of formula (I), pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, hydrates of salts, or solvates of salts thereof.
  • novel compound of the present invention exhibits high CDK7 inhibitory activity, it can be usefully used for the treatment or prevention of CDK7-related diseases.
  • Protein kinase refers to a protein that plays a central role in the regulation of a wide variety of cellular processes and control of cellular functions. Kinase activity is observed in a number of disease states, including benign and malignant proliferative disorders, as well as those resulting from inappropriate activation of the immune and nervous systems. Oncogenesis is closely related to genetic modification of cyclin-dependent kinase (CDK) and its regulators, suggesting that CDK inhibitors may be useful anticancer therapeutics.
  • CDK cyclin-dependent kinase
  • CDKs form a complex with cyclin proteins and activate them by phosphorylation of serine or threonine residues on the substrate.
  • CDK1, CDK2, CDK4, and CDK6 regulate the entry into each phase of the cell cycle by phosphorylating molecules important in the cell cycle.
  • CDK2/cyclin E is essential to enter the S phase
  • CDK2/cyclin A is essential just before the transition from S phase to G2 phase.
  • CDK8 and CDK9 are also involved in gene transcription.
  • CDK activation is completed by phosphorylation by CDK-activating kinase (CAK), and the CDK7/cyclin H complex acts as a CAK.
  • CDK7 phosphorylates the C-terminal domain (CTD) of RNA polymerase (RNAP) II, thereby regulating the expression of oncogenic transcription factors that induce cancer cell growth and survival. That is, CDK7 is the only CDK involved in transcription and regulating the cell cycle by simultaneously acting as a CAK and phosphorylating CTD.
  • cancer cells have the characteristics of increased genetic heterogeneity compared to normal cells, they can inhibit cancer cell growth or induce apoptosis by targeting driver mutations of major oncogenes.
  • transcriptional regulatory kinases such as CDK7 (Yubao Wang et al., Cell 163, 174-186, September 24, 2015). Accordingly, there is a need for compounds that treat diseases and disorders associated with selective transcriptional CDKs, particularly CDK7.
  • the present inventors have researched and developed novel compounds that selectively inhibit CDK7, and pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, hydrates of salts, and solvates of salts with improved physicochemical stability and solubility of the compounds.
  • the present invention was completed.
  • Patent Document 1 International Publication WO 2014/063068 A1
  • Patent Document 2 International Publication WO 2015/058140 A1
  • An object of the present invention is to provide a novel compound having excellent CDK7 inhibitory activity.
  • Another object of the present invention is to provide pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, hydrates of salts, and solvates of salts of the novel compounds, which have excellent physicochemical stability and solubility.
  • Another object of the present invention is to provide a method for preparing pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, hydrates of salts, and solvates of salts of the novel compounds.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the novel compound, a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, hydrate of a salt, or a solvate of a salt thereof.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating CDK7-related diseases, including the novel compound, a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, salt hydrate, or salt solvate thereof.
  • the present invention provides a compound of formula (I): or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Ra is linear C 1 -C 3 alkyl unsubstituted or substituted with halogen
  • Rb is cyano or halo, Rc is H;
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (I) is oxalate, hydrochloride, benzenesulfonate, hemifumarate, succinate, hemmaleate, nicotinate, tosylate, glycolate, hemi Sulfonate, tartrate, maleate, aspartate, malate, citrate, malonate, phosphate, glutamate, camphorsulfonate, 3-hydroxy-2-naphthoate, mesylate, and 4-hydroxy- It may be selected from the group consisting of benzoates.
  • the tartrate may be L-tartrate
  • the aspartate may be L-aspartate
  • the glutamate may be L-glutamate
  • the camphorsulfonate may be (+)-camphorsulfonate.
  • it may be oxalate, hydrochloride, benzenesulfonate, hemifumarate, succinate, hemmaleate, glycolate, or nicotinate, and more preferably, hydrochloride or oxalate.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (I) may be in the form of a hydrate or solvate.
  • the solvate of the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (I) is acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl It may be formed by one or more solvents selected from the group consisting of ether and heptane, but is not limited thereto.
  • the present invention provides a compound selected from the group consisting of compounds of formulas (II) to (VIII), or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formulas (II) to (VIII) are oxalate, hydrochloride, benzenesulfonate, hemifumarate, succinate, hemmaleate, nicotinate, tosylate, glycolate, hemisulfonate, tartrate, maleate, aspartate, malate, citrate, malonate, phosphate, glutamate, camphorsulfonate, 3-hydroxy-2-naphthoate, mesylate, and 4 -Hydroxy-benzoate may be selected from the group consisting of.
  • the tartrate may be L-tartrate
  • the aspartate may be L-aspartate
  • the glutamate may be L-glutamate
  • the camphorsulfonate may be (+)-camphorsulfonate.
  • it may be oxalate, hydrochloride, benzenesulfonate, hemifumarate, succinate, hemmaleate, glycolate, or nicotinate, and more preferably, hydrochloride or oxalate.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formulas (II) to (VIII) may be in the form of a hydrate or a solvate.
  • the solvate of a pharmaceutically acceptable salt of a compound of Formulas (II) to (VIII) is acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, diethyl ether. , methyl tertiary butyl ether, and may be formed by one or more solvents selected from the group consisting of heptane, but is not limited thereto.
  • the present invention provides a compound of formula (VI) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (VI) is selected from the group consisting of oxalate, hydrochloride, benzenesulfonate, hemifumarate, succinate, hemmaleate, glycolate, and nicotinate. may be selected, and preferably, hydrochloride or oxalate.
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (VI) may be in the form of a hydrate or solvate.
  • the solvate of the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (VI) is acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, diethyl ether, methyltertbutyl It may be formed by one or more solvents selected from the group consisting of ether and heptane, but is not limited thereto.
  • the present invention provides an oxalate salt of a compound of formula (VI).
  • the present invention provides a hydrate of the oxalate salt of the compound of formula (VI).
  • the hydrate of the oxalate salt of the compound of formula (VI) may be amorphous.
  • the present invention provides solvates of the oxalates of the compounds of formula (VI).
  • the solvate of the oxalate salt of the compound of formula (VI) is acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, diethyl ether, methyltertiarybutyl ether, and heptane. It may be formed by one or more solvents selected from the group consisting of, preferably, it may be an acetone solvate of oxalate.
  • the acetone solvate of the oxalate salt of the compound of formula (VI) may be in crystalline form, preferably 7.4°, 8.3°, 9.3°, 10.1°, 11.2°, 11.5°, 12.6°, 15.2 °, 16.5°, 16.9°, 17.4°, 17.8°, 18.6°, 19.8°, 20.3°, 21.6°, 22.1°, 22.9°, 23.6°, 24.4°, 25.5°, 26.6°, 29.0° and 31.5° It may be a crystalline form showing an X-ray diffraction (XRD) spectrum comprising characteristic peaks at four or more diffraction angles 2 ⁇ 0.2° selected from the group consisting of, and more preferably, X-ray diffraction as shown in FIG. 1 . (XRD) spectrum.
  • XRD X-ray diffraction
  • the present invention provides the anhydride of the oxalate salt of the compound of formula (VI).
  • the anhydride of the oxalate salt of the compound of formula (VI) may be in crystalline form, preferably 8.3°, 13.7°, 14.9°, 15.3°, 16.0°, 16.7°, 16.9°, 17.6°, Characteristic at 4 or more diffraction angles 2 ⁇ ⁇ 0.2° selected from the group consisting of 18.4°, 18.8°, 19.2°, 19.9°, 20.7°, 21.4°, 21.9°, 22.7°, 23.8°, 25.3°, and 25.6° It may be a crystalline form exhibiting an X-ray diffraction (XRD) spectrum including peaks, and more preferably, a crystalline form having an X-ray diffraction (XRD) spectrum as shown in FIG. 3 .
  • XRD X-ray diffraction
  • the present invention provides the hydrochloride salt of the compound of formula (VI).
  • the hydrochloride salt of the compound of formula (VI) may be in crystalline form, preferably 7.0°, 9.1°, 10.5°, 11.0°, 13.5°, 17.1°, 19.0°, 20.8°, 21.3° , 23.2°, and 25.7° may be in a crystalline form showing an X-ray diffraction (XRD) spectrum comprising characteristic peaks at four or more diffraction angles 2 ⁇ 0.2° selected from the group consisting of, more preferably, FIG. 4 It may be in a crystalline form having an X-ray diffraction (XRD) spectrum as shown in
  • the present invention provides a hydrate of the hydrochloride salt of the compound of formula (VI).
  • the present invention provides solvates of the hydrochloride salts of the compounds of formula (VI).
  • the solvate of the hydrochloride salt of the compound of formula (VI) is acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, diethyl ether, methyltertiarybutyl ether, and heptane. It may be formed by one or more solvents selected from the group consisting of.
  • the present invention provides the anhydride of the hydrochloride salt of the compound of formula (VI).
  • the oxalate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate. , diethyl ether, methyl tertiary butyl ether, and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding oxalic acid to the solution; and obtaining an oxalate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate.
  • diethyl ether, methyl tertiary butyl ether and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding ox
  • the acetone solvate of the oxalate of the compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the oxalate of the compound of formula (I) in a solvent, for example, a mixture of purified water and acetone to obtain a solution; and obtaining an oxalate acetone solvate of the compound of formula (I).
  • a solvent for example, a mixture of purified water and acetone
  • the hydrate of the oxalate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by impregnation with an oxalate solvate of a compound of formula (I), for example acetone solvate; and obtaining a hydrate of the oxalate salt of the compound of formula (I).
  • the anhydride of the oxalate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by adding ethanol to the oxalate hydrate of a compound of formula (I); After stirring the mixture, vacuum drying; and obtaining an anhydride of the oxalate salt of the compound of formula (I).
  • the hydrochloride salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate, dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of diethyl ether, methyl tertiary butyl ether, and heptane to obtain a solution; adding hydrochloric acid to the solution; and obtaining a hydrochloride salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate
  • the benzenesulfonate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane to obtain a solution; adding benzenesulfonic acid to the solution; and obtaining a benzenesulfonate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane
  • the hemifumarate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane to obtain a solution; adding fumaric acid to the solution; and obtaining a hemifumarate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane
  • the succinate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate. , diethyl ether, methyl tertiary butyl ether, and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding succinic acid to the solution; and obtaining a succinate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate.
  • diethyl ether, methyl tertiary butyl ether and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding succinic acid to the solution; and
  • the hemimaleate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane to obtain a solution; adding maleic acid to the solution; and obtaining a hemimaleate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of acetate, diethyl ether, methyl tertbutyl ether, and heptane
  • the nicotinate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate. , diethyl ether, methyl tertiary butyl ether, and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding nicotinic acid to the solution; and obtaining a nicotinate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate.
  • diethyl ether, methyl tertiary butyl ether and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding
  • the glycolate salt of a compound of formula (I) of the present invention is prepared by dissolving the compound of formula (I) in a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate. , diethyl ether, methyl tertiary butyl ether, and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding glycolic acid to the solution; and obtaining a glycolate salt of the compound of formula (I).
  • a solvent such as acetone, ethanol, methanol, 1-butanol, 2-butanol, 1-propanol, ethyl acetate.
  • diethyl ether, methyl tertiary butyl ether and dissolving in one or more solvents selected from the group consisting of heptane to obtain a solution; adding glycolic acid to the solution; and obtaining
  • the present invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a compound selected from the group consisting of compounds of formulas (I) to (VIII), a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, hydrate of salt, or solvate of salt, as an active ingredient. to provide.
  • the present invention relates to a CDK7-related disease comprising a compound selected from the group consisting of compounds of formulas (I) to (VIII), a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, salt hydrate, or salt solvate as an active ingredient It provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of.
  • the CDK7 related disease may be a proliferative disease or an infectious disease.
  • the CDK7-related disease may be cancer, specifically breast cancer, blood cancer, liver cancer, or lung cancer.
  • novel compound according to the present invention exhibits high CDK7 inhibitory activity, it can be usefully used as a pharmaceutical composition for preventing or treating CDK7-related diseases.
  • Example 1 is a graph showing the XRD pattern of Example 8.
  • Example 2 is a graph showing the XRD pattern of Example 9.
  • Example 3 is a graph showing the XRD pattern of Example 10.
  • Example 4 is a graph showing the XRD pattern of Example 11.
  • Example 8 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 8.
  • Example 6 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 9.
  • Example 7 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 10.
  • Example 8 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 11.
  • Example 9 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 12.
  • Example 10 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 13.
  • Example 11 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 14.
  • Example 12 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 15
  • FIG. 13 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 16.
  • Example 14 shows a hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum analysis diagram of Example 17
  • alkyl is a hydrocarbon having primary, secondary, tertiary and/or quaternary carbon atoms, substituted or unsubstituted, and saturated, which may be straight-chain, branched, cyclic, or combinations thereof. contains aliphatic groups.
  • an alkyl group has 1 to 20 carbon atoms (ie, C 1 -C 20 alkyl), 1 to 10 carbon atoms (ie, C 1 -C 10 alkyl), or 1 to 6 carbon atoms (ie, C 1 -C 10 alkyl). C 1 -C 6 alkyl).
  • alkyl refers to C 1 -C 6 alkyl.
  • alkyl groups examples include methyl (Me, —CH 3 ), ethyl (Et, —CH 2 CH 3 ), 1-propyl (n-Pr, n-propyl, —CH 2 CH 2 CH 3 ), 2-propyl ( i-Pr, i-propyl, -CH(CH 3 ) 2 ), 1-butyl (n-Bu, n-butyl, -CH 2 CH 2 CH 2 CH 3 ), 2-methyl-1-propyl (i- Bu, i-butyl, -CH 2 CH(CH 3 ) 2 ), 2-butyl (s-Bu, s-butyl, -CH(CH 3 )CH 2 CH 3 ), 2-methyl-2-propyl (t -Bu, t-butyl, -C(CH 3 ) 3 ), 1-pentyl (n-pentyl, -CH 2 CH 2 CH 2 CH 3 ), 2-pentyl (-CH(CH3)CH 2 CH
  • alkyl as used throughout the specification, examples and claims is intended to include both unsubstituted and substituted alkyl groups, the latter of which include haloalkyl groups such as trifluoromethyl, and the like; refers to an alkyl moiety having a substituent replacing a hydrogen on one or more carbons of the hydrocarbon backbone.
  • Cx-y or “Cx-Cy,” when used with alkyl, means containing from x to y carbons in the chain.
  • a C 1 -C 6 alkyl group contains 1 to 6 carbon atoms in the chain.
  • halo or “halogen” includes chloro, fluoro, bromo, and iodo.
  • substituted refers to a particular moiety of a compound of the present invention having one or more substituents.
  • substituted eg, “substituted alkyl,” with respect to alkyl and the like, means that one or more hydrogen atoms of the alkyl are each independently replaced by a non-hydrogen substituent.
  • the term "pharmaceutically acceptable salt” means any acid or base addition salt, which is nontoxic and harmless to the patient and the side effects attributable to the salt do not diminish the beneficial efficacy of the compound of the present invention.
  • Inorganic acids that form suitable salts include hydrochloric acid, phosphoric acid, sulfuric acid, nitric acid, tartaric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, nitrous acid, or phosphorous acid
  • organic acids that form suitable salts include glycolic acid, lactic acid, pyruvic acid, malonic acid, succinic acid, Fumaric acid, malic acid, tartaric acid, citric acid, ascorbic acid, maleic acid, benzoic acid, phenylacetic acid, cinnamic acid, salicylic acid, nicotinic acid, tosylic acid, camphorsulfonic acid, naphthoic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, oxalic acid, manderic acid
  • solvate refers to a solid in which compound molecules and solvent molecules form a complex
  • hydrate refers to a specific solvate in which the solvent is water
  • the compounds, pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, hydrates of salts, and solvates of salts are meant to include both crystalline and amorphous forms, respectively.
  • the compounds of the present invention can be prepared from readily available starting materials using modifications to synthetic protocols known to those skilled in the art.
  • Certain compounds of the present invention may have one or more stereocenters within their structure. Such stereocenters may exist in either the R or S configuration, the R and S designations being described in Pure Appl. Chem. (1976), 45, 11-30].
  • the present invention includes all stereoisomeric forms of a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof, such as enantiomeric and diastereomeric forms, including all possible mixtures of stereoisomers.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be a pharmaceutical composition for preventing or treating a CDK7-related disease, and the CDK7-related disease includes a proliferative disease or an infectious disease.
  • Proliferative disease means, for example, cancer, benign neoplasm, angiogenesis, inflammatory disease, auto-inflammatory disease, or autoimmune disease
  • infectious disease means, for example, bacterial disease or viral disease.
  • Acetonitrile (165 ml) is added to the racemic form of 2-(3-bromophenyl)propanoic acid (33.13 g, 144.63 mmol) followed by addition of (R)-1-phenylethan-1-amine, Stirred at 30-35°C. After stirring at 20-25° C. for 2 hours, the reaction is filtered, washed with 0-5° C. acetonitrile (100 ml) and dried. Acetonitrile (165 ml) was added to the dried compound and the mixture was stirred at 80-85° C. for 1 hour. After that, the mixture was cooled to 30-35° C. and stirred for 1 hour.
  • reaction mixture was diluted with DCM, washed with water, dried (MgSO 4 ), filtered and dried under reduced pressure. Purify the residue by combi-flash column (EA/Hex 0 to 60 % gradient) to (S)-2-(3-bromophenyl)-N-(5-trifluoromethylthiazol-2-yl ) propanamide (3.4 g, 80%) was provided as a white solid.
  • the title compound was prepared in the same manner as in Example 1, except that 5-ethylthiazol-2-amine was used instead of 5-trifluoromethylthiazol-2-amine.
  • CDK7 inhibitory activity was measured using recombinant purified human CDK7 (ThermoFisher, PV3868) and ADP Glo kinase assay kit (Promega, V9102).
  • CDK7 was diluted with IX kinase reaction buffer (40 mM Tris-Cl, pH 7.5, 20 mM MgCl 2 , 0.1 mg/ml BSA and 50 ⁇ M DTT) and added to 96 well plates (CDK7 final concentration per reaction: 50 ng) ).
  • the compound was finally treated to a 1% aqueous DMSO solution, and a substrate cocktail containing ATP (final concentration 90 ⁇ M) and 0.2 ⁇ g/ ⁇ l MBP (myelin basic protein) in a total of 25 ⁇ l reaction mass was added to a 96 well plate.
  • a substrate cocktail containing ATP final concentration 90 ⁇ M
  • MBP myelin basic protein
  • the kinase activity was measured by the chemiluminescence method according to the ADP Glo Kinase Assay Kit instruction manual, and the CDK7 inhibitory activity of the compound according to the present invention was calculated. Results analysis of each compound was performed using Microsoft Excel, and IC 50 values were calculated by Prism software, and the degree of CDK7 inhibition (IC 50 ) is shown in Table 1 below.
  • Example CDK7 inhibition (IC 50 nM) One 7.6 2 4.3 3 5.9 4 8.5 5 4.2 6 6.0 7 4.0
  • the compounds of the present invention have very high CDK7 inhibitory activity.
  • Test Example 2 Antiproliferative effect of the compound of the present invention on cancer cells
  • MDA-MB-468 cells are one of the cells of triple-negative breast cancer (TNBC: negative for estrogen receptor, progesterone receptor and HER2 expression) known as a malignant tumor with a difficult initial diagnosis and high metastatic capacity, and these cells are Used to test inhibition of cell proliferation and survival.
  • TNBC triple-negative breast cancer
  • Compounds of the present invention were tested at different concentrations (from 1000 nM to 1 nM) to assess their ability to inhibit proliferation of MDA-MB-468 cells.
  • Cells were cultured in RPMI 1640 (Wellgene) + 10% FBS (Gibco) + 1% penicillin/streptomycin (Gibco) and incubated at 37° C. in a humidified chamber in the presence of 5% CO 2 .
  • MDA-MB-468 cells cultured in 96-well cell culture plates were treated with the compounds of the present invention and incubated for 72 hours. Then, the antiproliferative effect of the compound was analyzed by the MTT method using a tetrazolium salt, and the degree of inhibition of cell proliferation (IC 50 ) is shown in Table 2 below.
  • Example MDA-MB-468 (IC 50 nM) One 23.0 2 30.0 3 74.0 4 35.0 5 14.0 6 34.0 7 7.0
  • the compound of the present invention has a high inhibitory activity against the proliferation of MDA-MB-468 cells.
  • HepG2 cells a human hepatocellular carcinoma cell
  • MEM Wellgene
  • FBS FBS
  • penicillin/streptomycin Gibco
  • HepG2 cells cultured in 96-well cell culture plates were treated with the compound and incubated for 72 hours.
  • Cell viability was measured by the CCK-8 method using tetrazolium salts and the ability of the compounds according to the invention to inhibit cancer cell proliferation was calculated. Results analysis of each compound was performed using Microsoft Excel, IC 50 values were calculated by Prism software, and the results are shown in Table 3 below.
  • Example HepG2 (IC 50 nM) One 5.0 2 5.0 3 17.4 4 4.2 5 3.0 6 38.0 7 3.8
  • the compound of the present invention has a high inhibitory activity against proliferation of HCC (HepG2) cells.
  • CDK2, CDK5, and CDK7 inhibition was measured using a scanMAX kinase assay panel with a set of 468 kinases including CDK2, CDK5.
  • the compounds of the present invention were screened at 1 ⁇ M, and the results are shown in Table 4 below.
  • Example 5 Comparative Example 1 CDK7 4.0 9.7 Healing cancer MV-4-11 4.2 16.5 Breast Cancer MCF-7 22.1 417.1 Liver Cancer HepG2 3.8 128.1 Liver Cancer Hep3B 22.0 248.7
  • the compound of the present invention contains a "thiazole” ring and has excellent CDK7 inhibitory and cancer cell proliferation inhibitory effects.
  • Example 5 Comparative Example 2 Comparative Example 3 CDK7 (IC 50 nM) 4.2 339 197
  • Example 6 As shown in Table 6, the compound of Example 5 containing a "4-(dimethylamino)but-2-enamide” group exhibited about 80-fold and about 80-fold inhibition of CDK7 compared to the compounds of Comparative Examples 2 and 3, respectively. It was confirmed that it was 45 times superior.
  • the compound of the present invention contains a "4-(dimethylamino)but-2-enamide” group and has an excellent CDK7 inhibitory effect.
  • the compound of Example 5 including a substituted pyridine ring and unsubstituted pyridine
  • the degree of inhibition of CDK7 and the degree of inhibition of cancer cell proliferation were compared between the compound of Comparative Example 4 containing a ring and the compound of Comparative Example 5 without pyridine.
  • Example 5 Comparative Example 4 Comparative Example 5 CDK7 4.0 9.3 96 Blood cancer MV-4-11 4.2 34.4 446 Breast Cancer MCF-7 22.1 55.8 467 Liver Cancer HepG2 3.8 16.7 128 Liver Cancer Hep3B 22.0 51.6 125
  • the compound of the present invention has excellent CDK7 inhibitory and cancer cell proliferation inhibitory effects including the "pyridine” ring, and further increases the inhibitory effect when the pyridine ring is substituted.
  • Example 6 Comparative Example 4 CDK7 (IC 50 nM) 6.0 4.0 11.0
  • the compound of the present invention has excellent CDK7 inhibitory activity when the pyridine ring is substituted with a halogen or cyano group or forms a fused ring with pyrrolidine.
  • the stability of the compound of Example 5 (the compound of formula (VI)) and the compound of Example 9 (the oxalate hydrate of the compound of formula (VI)) of the present invention were compared. Specifically, a stability test was performed according to the ICH guidelines, and analysis was performed using a high-performance liquid chromatography (HPLC) analysis method. After storage for 28 days in a sealed state at a temperature of 25 ⁇ 2 °C and a relative humidity of 60 ⁇ 5 %, the change in purity was measured, and the results are shown in Table 9 below.
  • HPLC high-performance liquid chromatography
  • Example 5 Compound of formula (VI)
  • Example 9 (of the compound of formula (VI) oxalate hydrate) Initial 94.98% 98.14% 7 days 93.98% 98.01% 14 days 93.21% 98.05% 21 days 92.78% 97.73% 28 days 91.91% 97.64%
  • the compound of formula (VI) showed a purity change of at least 3% by day 28, whereas the oxalate hydrate of the compound of formula (VI) showed a purity change of 0.5% by day 28, It was confirmed that the oxalate hydrate of the compound of (VI) has excellent storage stability.
  • Table 10 shows the results of solubility evaluation of the compound of Example 5 (the compound of formula (VI)) and the compound of Example 9 (the oxalate hydrate of the compound of formula (VI)).
  • Example 5 Compound of formula (VI)
  • Example 9 Olalate hydrate of the compound of formula (VI)
  • Solubility (mg/mL) 0.18 238
  • the oxalate hydrate of the compound of formula (VI) of the present invention has very good solubility and is advantageous for drug development by improving absorption and bioavailability of the drug.
  • Test Example 7 X-ray diffraction spectroscopy analysis
  • the salt of the compound of formula (VI), the hydrate of the salt, or the solvate of the salt prepared in Examples 8 to 11 were analyzed using an X-ray diffraction analyzer.
  • the X-ray diffraction analyzer (XRD) measurement conditions are as follows.
  • Hydrogen nuclear magnetic resonance spectral analysis was performed on the salts, hydrates of the salts, or solvates of the salts of the compound of formula (VI) prepared in Examples 8 to 17.
  • the hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum measurement conditions were as follows, and the results are shown in FIGS. 5 to 14 .

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Abstract

본 발명은 신규한 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물에 관한 것이다. 본 발명의 신규한 화합물은 높은 CDK7 억제 활성을 나타내므로 CDK7 관련 질환의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

신규한 CDK7 억제 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염
본 발명은 신규한 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물에 관한 것이다.
<화학식 (I)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000001
본 발명의 신규한 화합물은 높은 CDK7 억제 활성을 나타내므로 CDK7 관련 질환의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.
단백질 키나제는 매우 다양한 세포 과정의 조절 및 세포 기능에 대한 제어에 있어서 중심적인 역할을 담당하는 단백질을 의미한다. 키나제 활성은 양성 및 악성 증식성 장애뿐만 아니라 면역계 및 신경계의 부적절한 활성화로부터 발병하는 질환을 비롯한 다수의 질환 상태에서 관찰된다. 종양 발생은 사이클린-의존성 키나제 (cyclin-dependent kinase: CDK) 및 그 조절인자의 유전자 변형 등과 밀접하게 연관되어 있으며, 이는 CDK 억제제가 유용한 항암 치료제일 수 있음을 시사한다.
CDK는 사이클린 단백질과 복합체를 형성하여 기질의 세린 또는 트레오닌 잔기를 인산화하여 활성화시킨다. 그 중, CDK1, CDK2, CDK4, 및 CDK6는 세포 주기에 중요한 분자들을 인산화시킴으로써 세포 주기의 각 단계로 진입하는 것을 조절한다. 예를 들어, CDK2/사이클린E는 S 단계 (phase)로 진입하는데 필수적이며, CDK2/사이클린A는 S 단계에서 G2 단계로 넘어가기 직전에 필수적이다. 또한 CDK8 및 CDK9는 유전자 전사에 관여한다.
이러한 CDK의 활성화는 CDK 활성화 키나제 (CDK-activating kinase: CAK)에 의한 인산화로써 완성되는데, CDK7/사이클린H 복합체가 CAK로서 작용한다. 또한 CDK7은 RNA 중합효소 (RNA polymerase: RNAP) II의 C-말단 도메인 (C-terminal domain: CTD)을 인산화하여, 암세포의 성장 및 생존을 유도하는 발암성 전사 인자의 발현을 조절한다. 즉, CDK7은 CAK로서 작용하고 CTD를 인산화하는 역할을 동시에 수행하여 세포 주기를 조절하고 전사에 관여하는 유일한 CDK이다.
암세포는 정상세포에 비해 유전자 이질성이 증가된 특징을 갖긴 하지만, 주요 발암 유전자의 운전자 (Driver) 돌연변이를 표적 치료함으로써 암세포 성장을 억제하거나 세포사멸 (apoptosis)을 유도할 수 있다. 그러나, 특정 운전자 돌연변이가 없는 "전사중독 암세포"의 경우 CDK7과 같은 전사 조절 키나제에 의해 암세포의 성장을 억제할 수 있다 (Yubao Wang et al., Cell 163, 174-186, September 24, 2015). 따라서, 선택적 전사 CDK, 특히 CDK7과 연관된 질병 및 장애를 치료하는 화합물의 필요성이 요구된다.
한편 의약품의 항상성을 유지하기 위해서 제품의 제조 단계에서부터 보관 기간 중 유효성분의 함량 저하를 억제해야 하며, 불순물 또는 유연물질의 증가를 최소한으로 유지하여야 한다.
이에 본 발명자들은 선택적으로 CDK7을 억제하는 신규한 화합물과, 상기 화합물의 물리화학적 안정성 및 용해도가 개선된 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 및 염의 용매화물을 연구 및 개발하여 본 발명을 완성하였다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
(특허문헌 1) 국제공개공보 WO 2014/063068 A1
(특허문헌 2) 국제공개공보 WO 2015/058140 A1
본 발명은 CDK7을 억제하는 활성이 우수한 신규한 화합물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 우수한 물리화학적 안정성 및 용해도를 갖는, 상기 신규 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 및 염의 용매화물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 상기 신규한 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 및 염의 용매화물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 상기 신규한 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물을 포함하는 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 상기 신규한 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물을 포함하는 CDK7 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
<화학식 (I)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000002
상기 식에서,
Ra는 할로겐으로 치환되거나 또는 비치환된 선형 C 1-C 3 알킬이고;
Rb는 시아노 또는 할로이고, Rc는 H이거나; 또는
Rb와 Rc는 Rb에 연결된 피리딘 및 Rc에 연결된 질소와 함께 융합된 2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘을 형성한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (I)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 니코틴산염, 토실산염, 글리콜산염, 헤미설폰산염, 타르타르산염, 말레산염, 아스파르트산염, 말산염, 시트르산염, 말론산염, 인산염, 글루탐산염, 캄포술폰산염, 3-히드록시-2-나프토산염, 메실산염, 및 4-히드록시-벤조산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있다. 이 때, 타르타르산염은 L-타르타르산염일 수 있고, 아스파르트산염은 L-아스파르트산염일 수 있고, 글루탐산염은 L-글루탐산염일 수 있으며, 캄포술폰산염은 (+)-캄포술폰산염일 수 있다. 바람직하게는, 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 글리콜산염, 또는 니코틴산염일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 염산염 또는 옥살산염일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (I)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 수화물 또는 용매화물 형태일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (I)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 하기 화학식 (II) 내지 (VIII)의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
<화학식 (II)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000003
<화학식 (III)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000004
<화학식 (IV)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000005
<화학식 (V)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000006
<화학식 (VI)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000007
<화학식 (VII)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000008
<화학식 (VIII)>
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000009
일 실시태양에서, 상기 화학식 (II) 내지 (VIII)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 니코틴산염, 토실산염, 글리콜산염, 헤미설폰산염, 타르타르산염, 말레산염, 아스파르트산염, 말산염, 시트르산염, 말론산염, 인산염, 글루탐산염, 캄포술폰산염, 3-히드록시-2-나프토산염, 메실산염, 및 4-히드록시-벤조산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있다. 이 때, 타르타르산염은 L-타르타르산염일 수 있고, 아스파르트산염은 L-아스파르트산염일 수 있고, 글루탐산염은 L-글루탐산염일 수 있으며, 캄포술폰산염은 (+)-캄포술폰산염일 수 있다. 바람직하게는, 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 글리콜산염, 또는 니코틴산염일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 염산염 또는 옥살산염일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (II) 내지 (VIII)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 수화물 또는 용매화물 형태일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (II) 내지 (VIII)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 글리콜산염, 및 니코틴산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있고, 바람직하게는, 염산염 또는 옥살산염일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 수화물 또는 용매화물 형태일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염을 제공한다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 수화물을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 수화물은 무정형일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것일 수 있고, 바람직하게는, 옥살산염의 아세톤 용매화물일 수 있다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 아세톤 용매화물은 결정형일 수 있고, 바람직하게는, 7.4°, 8.3°, 9.3°, 10.1°, 11.2°, 11.5°, 12.6°, 15.2°, 16.5°, 16.9°, 17.4°, 17.8°, 18.6°, 19.8°, 20.3°, 21.6°, 22.1°, 22.9°, 23.6°, 24.4°, 25.5°, 26.6°, 29.0°및 31.5°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 도 1에 나타낸 바와 같은 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 갖는 결정형일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 무수물을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 무수물은 결정형일 수 있고, 바람직하게는, 8.3°, 13.7°, 14.9°, 15.3°, 16.0°, 16.7°, 16.9°, 17.6°, 18.4°, 18.8°, 19.2°, 19.9°, 20.7°, 21.4°, 21.9°, 22.7°, 23.8°, 25.3°, 및 25.6°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 도 3에 나타낸 바와 같은 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 갖는 결정형일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염은 결정형일 수 있고, 바람직하게는, 7.0°, 9.1°, 10.5°, 11.0°, 13.5°, 17.1°, 19.0°, 20.8°, 21.3°, 23.2°, 및 25.7°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절 (XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 도 4에 나타낸 바와 같은 X-선 회절 (XRD) 스펙트럼을 갖는 결정형일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 수화물을 제공한다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 용매화물을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 무수물을 제공한다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 옥살산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염의 아세톤 용매화물은 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염을 용매, 예를 들어 정제수 및 아세톤의 혼합액에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염 아세톤 용매화물을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염의 수화물은 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염 용매화물, 예를 들어 아세톤 용매화물을 함습하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염의 수화물을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염의 무수물은 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염 수화물에 에탄올을 첨가하는 단계; 상기 혼합물을 교반한 후 진공 건조하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 옥살산염의 무수물을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 염산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 염산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 염산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 벤젠설폰산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 벤젠설폰산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 벤젠설폰산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 헤미푸마르산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 푸마르산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 헤미푸마르산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 숙신산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 숙신산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 숙신산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 헤미말레산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 말레산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 헤미말레산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 니코틴산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 니코틴산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 니코틴산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
일 실시태양에서, 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 글리콜산염은 화학식 (I)의 화합물을 용매, 예를 들어 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 용해시켜 용액을 수득하는 단계; 상기 용액에 글리콜산을 첨가하는 단계; 및 화학식 (I)의 화합물의 글리콜산염을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명은 화학식 (I) 내지 (VIII)의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 화학식 (I) 내지 (VIII)의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 CDK7 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
일 실시태양에서, 상기 CDK7 관련 질환은 증식성 질환 또는 감염성 질환일 수 있다. 일 실시태양에서, 상기 CDK7 관련 질환은 암일 수 있으며, 구체적으로 유방암, 혈액암, 간암, 또는 폐암일 수 있다.
본 발명에 따른 신규한 화합물은 높은 CDK7 억제 활성을 나타내므로 CDK7 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 실시예 8의 XRD 패턴을 나타내는 그래프이다.
도 2는 실시예 9의 XRD 패턴을 나타내는 그래프이다.
도 3은 실시예 10의 XRD 패턴을 나타내는 그래프이다.
도 4는 실시예 11의 XRD 패턴을 나타내는 그래프이다.
도 5는 실시예 8의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 6은 실시예 9의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 7은 실시예 10의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 8은 실시예 11의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 9는 실시예 12의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 10은 실시예 13의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 11은 실시예 14의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 12는 실시예 15의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 13은 실시예 16의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
도 14는 실시예 17의 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석도를 나타낸다.
이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본원의 실시태양 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본원은 여러 가지 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시태양 및 실시예에 한정되지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 치환 또는 비치환된 1차, 2차, 3차 및/또는 4차 탄소 원자를 갖는 탄화수소이며, 직쇄형, 분지형, 환형, 또는 이들의 조합일 수 있는 포화 지방족기를 포함한다. 예를 들어, 알킬기는 1 내지 20개의 탄소 원자 (즉, C 1-C 20 알킬), 1 내지 10개의 탄소 원자 (즉, C 1-C 10 알킬), 또는 1 내지 6개의 탄소 원자 (즉, C 1-C 6 알킬)를 가질 수 있다. 달리 정의되지 않는 한, 바람직한 실시양태에서, 알킬은 C 1-C 6 알킬을 지칭한다. 적합한 알킬기의 예로는 메틸 (Me, -CH 3), 에틸 (Et, -CH 2CH 3), 1-프로필 (n-Pr, n-프로필, -CH 2CH 2CH 3), 2-프로필 (i-Pr, i-프로필, -CH(CH 3) 2), 1-부틸 (n-Bu, n-부틸, -CH 2CH 2CH 2CH 3), 2-메틸-1-프로필 (i-Bu, i-부틸, -CH 2CH(CH 3) 2), 2-부틸 (s-Bu, s-부틸, -CH(CH 3)CH 2CH 3), 2-메틸-2-프로필 (t-Bu, t-부틸, -C(CH 3) 3), 1-펜틸 (n-펜틸, -CH 2CH 2CH 2CH 2CH 3), 2-펜틸 (-CH(CH3)CH 2CH 2CH 3), 3-펜틸 (-CH(CH 2CH 3) 2), 2-메틸-2-부틸 (-C(CH 3) 2CH 2CH 3), 3-메틸-2-부틸 (-CH(CH 3)CH(CH 3) 2), 3-메틸-1-부틸 (-CH 2CH 2CH(CH 3) 2), 2-메틸-1-부틸 (-CH 2CH(CH 3)CH 2CH 3), 1-헥실 (-CH 2CH 2CH 2CH 2CH 2CH 3), 2-헥실 (-CH(CH3)CH 2CH 2CH 2CH 3), 3-헥실 (-CH(CH 2CH3)(CH 2CH 2CH 3)), 2-메틸-2-펜틸 (-C(CH 3) 2CH 2CH 2CH 3), 3-메틸-2-펜틸 (-CH(CH 3)CH(CH 3)CH 2CH 3), 4-메틸-2-펜틸 (-CH(CH 3)CH 2CH(CH 3) 2), 3-메틸-3-펜틸 (-C(CH 3)(CH 2CH 3) 2), 2-메틸-3-펜틸 (-CH(CH 2CH 3)CH(CH 3) 2), 2,3-디메틸-2-부틸 (-C(CH 3) 2CH(CH 3) 2), 3,3-디메틸-2-부틸 (-CH(CH 3)C(CH 3) 3), 및 옥틸 (-(CH 2) 7CH 3)을 들 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
더욱이, 명세서, 실시예 및 청구항 전반에 걸쳐 사용되는 용어 "알킬"은 비치환된 및 치환된 알킬기 모두를 포함하는 것으로 의도되며, 이들 중 후자는 트리플루오로메틸과 같은 할로알킬기 등을 포함하는, 탄화수소 골격의 1개 이상의 탄소 상의 수소를 대체하는 치환기를 갖는 알킬 잔기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "Cx-y" 또는 "Cx-Cy"는, 알킬과 함께 사용되는 경우, 사슬 내에 x 내지 y개의 탄소를 함유하는 것을 의미한다. 예를 들어, C 1-C 6 알킬기는 사슬 내에 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유한다.
본원에 사용된 용어 "할로" 또는 "할로겐"은, 클로로, 플루오로, 브로모, 및 요오도를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "치환된"은 1개 이상의 치환기를 갖는 본 발명의 화합물의 특정 잔기를 지칭한다. 알킬 등에 대하여 용어 "치환된", 예를 들어 "치환된 알킬"은 알킬의 1개 이상의 수소 원자가 각각 독립적으로 비-수소 치환기에 의해 대체된 것을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "약학적으로 허용가능한 염"은 환자에게 비독성이고 무해하며 상기 염에 기인한 부작용이 본 발명의 화합물의 이로운 효능을 저하시키지 않는 임의의 산부가염 또는 염기부가염을 의미한다. 적합한 염을 형성하는 무기산은 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 아질산, 또는 아인산 등이 있고, 적합한 염을 형성하는 유기산은 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 니코틴산, 토실산, 캄포술폰산, 나프토산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 옥살산, 만데르산, 프로피온산, 구연산, 젖산, 글루콘산, 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산, 글루쿠론산, 아스파르트산, 카본산, 바닐릭산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산, 또는 메탄설폰산 등이 있으며, 바람직하게는 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 니코틴산염, 토실산염, 글리콜산염, 헤미설폰산염, 타르타르산염, 말레산염, 아스파르트산염, 말산염, 시트르산염, 말론산염, 인산염, 글루탐산염, 캄포술폰산염, 3-히드록시-2-나프토산염, 메실산염, 또는 4-히드록시-벤조산염일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이러한 염은 수화물, 용매화물 또는 실질적으로 무수물 형태로 존재할 수 있다. 또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 제조할 수 있으며, 금속염으로는 나트륨, 칼륨, 또는 칼슘염 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원에 사용된 용어 "용매화물"은 화합물 분자와 용매 분자가 복합체를 형성한 고체를 의미하고, "수화물"은 상기 용매가 물인 특정한 용매화물을 의미한다.
본원 명세서 전체에서, 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 및 염의 용매화물은 각각의 결정형 형태 및 무정형 형태를 모두 포함하는 것을 의미한다.
본 발명의 화합물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 수화물, 용매화물, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물은 용이하게 입수가능한 출발물질로부터 당업자에게 공지된 합성 프로토콜에 대한 변형을 이용해서 제조될 수 있다.
본 발명의 특정 화합물은 이의 구조 내에 1개 이상의 입체 중심을 가질 수 있다. 이러한 입체 중심은 R 또는 S 배위로 존재할 수 있으며, 상기 R 및 S 표기는 문헌 [Pure Appl. Chem. (1976), 45, 11-30]에 기재된 규칙에 상응하여 사용된다. 본 발명은 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 모든 입체이성질체 형태, 예컨대 거울상이성질체 및 부분입체이성질체 형태 (입체이성질체의 모든 가능한 혼합물 포함)를 포함한다.
본 발명의 화합물 중 일부는 또한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있다. 이러한 형태는 본원에 기재된 화학식에 명백히 표시되지는 않았지만 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 의도된다.
본 발명의 약학 조성물은 CDK7 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물일 수 있으며, CDK7 관련 질환은 증식성 질병 또는 감염성 질병을 포함한다. 증식성 질병은 예를 들어, 암, 양성 신생물, 혈관형성, 염증성 질병, 자가염증성 질병, 또는 자가면역 질병을 의미하고, 감염성 질병은 예를 들어, 세균성 질병 또는 바이러스성 질병을 의미한다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 하나, 하기의 실시예는 단지 설명의 목적을 위한 것이며 본원 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다.
[실시예 1]
(S,E)-4-(디메틸아미노)-N-(3-플루오로-5-(3-(1-옥소-1-((5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)아미노)프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)부트-2-엔아미드(화학식 (II)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000010
단계 1) 2-(3-브로모페닐)프로판산의 제조
2-(3-브로모페닐)아세트산 (21 g, 97.56 mmol)을 THF (200 ml, 0.5M)에 용해시킨 후, 1 M NaHMDS (200 ml, 200 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 30분 동안 교반한 후, MeI (6.07 ml, 97.56 mmol)를 첨가한 후, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 1N HCl로 세척한 후, 유기층을 건조시키고 (MgSO 4), 여과하고, 감압 하에 건조시켰다. 콤비-플래쉬 컬럼(Combi-flash column) (EA/Hex 10 중 100 % 구배)을 이용하여 잔류물을 정제하여 2-(3-브로모페닐)프로판산 (19.6 g, 92 %)을 수득하였다.
단계 2) (S)-2-(3-브로모페닐)프로판산의 제조
아세토니트릴 (165 ml)을 라세미 형태의 2-(3-브로모페닐)프로판산 (33.13 g, 144.63 mmol)에 첨가한 후, (R)-1-페닐에탄-1-아민을 첨가하고, 30 내지 35℃에서 교반하였다. 2시간 동안 20 내지 25℃에서 교반한 후, 반응물을 여과하고, 0 내지 5℃의 아세토니트릴 (100 ml)로 세척하고, 건조시켰다. 아세토니트릴 (165 ml)을 건조된 화합물에 첨가하고, 혼합물을 80 내지 85℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 혼합물을 30 내지 35℃로 냉각시키고, 1시간 동안 교반하였다. 20 내지 25℃로 냉각시킨 후, 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 여과하고, 0 내지 5℃로 냉각된 아세토니트릴 (100 ml)로 건조시켰다. 이 과정을 2회 반복하였다. 염화메틸렌 (265 ml) 및 1N HCl (132 ml)을 수득된 고체에 첨가하고, 고체를 추출하고, MgSO 4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜, (S)-2-(3-브로모페닐)프로판산 (6.6 g)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.85(br, 1H), 7.45-7.44(m, 1H), 7.43-7.40 (m, 1H), 7.23-7.20 (m, 2H), 7.05-7.04(m, 1H), 3.76-3.71(m, 1H), 2.00-1.94(m, 1H), 1.60(d, J=6.8, Hz, 3H), 1.01-0.96 (m, 2H), 0.75-0.69(m, 2H); MS (m/z): 352.0 [M+1]; 99.6ee %
단계 3) (S)-2-(3-브로모페닐)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)프로판아미드의 제조
(S)-2-(3-브로모페닐)프로판산 (2.6 g, 11.35 mmol)을 디클로로메테인 (113 ml, 0.1 M)에 용해시킨 후, 옥살릴 클로라이드 (1.09 ml, 12.97 mmol)를 첨가하고, 디메틸포름아미드 (18 ul, 0.23 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 농축시켰다. 농축된 혼합물을 DCM (113 ml, 0.1 M)에 용해시키고, 5-트리플루오로메틸티아졸-2-아민 (2.06 g, 12.28 mmol)을 첨가하였다. DIPEA (2.1 ml, 12.28 mmol)를 천천히 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고 (MgSO 4), 여과하고, 감압 하에 건조시켰다. 콤비-플래쉬 컬럼 (EA/Hex 0 내지 60 % 구배)에 의해 잔류물을 정제하여 (S)-2-(3-브로모페닐)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)프로판아미드 (3.4 g, 80 %)를 백색 고체로서 제공하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 12.94(brs, 1H), 8.09 (m, 1H), 7.58 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.49 (dt, J = 8.0 Hz, 1,2 Hz, 1H), 7.38 -7.30 (m, 2H), 4.07-4.00 (m, 1H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H)
단계 4) (S)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)-2-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판아미드의 제조
(S)-2-(3-브로모페닐)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)프로판아미드 (3.2 g, 8.5 mmol) 및 KOAc (1.66 g, 16.91 mmol)에 무수 1,4-디옥산 (42 ml, 0.2 M)을 첨가하고, 반응 혼합물을 교반하고 탈기시켰다. 그 후, 비스(피나콜라토)디보론 (2.79 g, 10.99 mmol) 및 Pd(dppf)Cl 2.DCM (690 mg, 0.85 mmol)을 첨가하고, 85℃에서 15시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척한 후, 건조시키고 (MgSO 4), 여과한 후, 감압 하에 건조시켰다. 콤비-플래쉬 컬럼 (EA/Hex 0 내지 60 % 구배)에 의해 잔류물을 정제하여 (S)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)-2-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판아미드 (2.7 g, 75 %)를 백색 고체로서 제공하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.90 (brs, 1H), 7.78 (td, J = 4.4 Hz, 1.2 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.67 (q, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41-7.39 (m, 2H), 3.84 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 1.65 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.37 (s, 12H)
단계 5) (S,E)-4-(디메틸아미노)-N-(3-플루오로-5-(3-(1-옥소-1-((5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)아미노)프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)부트-2-엔아미드의 제조
(S)-N-(5-트리플루오로메틸티아졸-2-일)-2-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판아미드 (1.53 g, 3.6 mmol), (E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 (0.906 g, 3.0 mmol) 및 Cs 2CO 3 (2.44 g, 7.5 mmol)에 H 2O (15 ml) 및 1,4-디옥산 (45 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 교반하고 탈기시켰다. 그 후, Pd(dppf)Cl 2.DCM (244 mg, 0.30 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척하고, 염수로 추가로 세척한 후, 건조시키고 (MgSO 4), 여과한 후, 감압 하에 건조시켰다. 콤비-플래쉬 컬럼 (EA/Hex 50 내지 100 % 구배)에 의해 잔류물을 정제하여 (S,E)-4-(디메틸아미노)-N-(3-플루오로-5-(3-(1-옥소-1-((5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)아미노)프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)부트-2-엔아미드 (547mg, 35 %)를 백색 고체로서 제공하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.40 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.11 (dd, J = 11.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 8.15-7.98 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.49-7.40 (m, 2H), 6.80 (dt, J = 15.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 15.6 Hz, 1H) 4.07-4.02 (m, 1H), 3.08 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 12.19 (s, 6H), 1.53 (d, J = 6.8 Hz, 3H); MS (m/z); 522.0 [M+1]; 70ee %
[실시예 2]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-옥소-1-((5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)아미노)프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (III)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000011
(E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 대신에 (E)-N-(5-브로모-3-시아노피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드를 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.91 (brs, 1H), 11.04 (s, 1H), 9.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.10 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.75 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.90 (dt, J = 15.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 6.40 (dt, J = 15.6 Hz, 1.6 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.12 (dd, J = 6.0 Hz, 1.2 Hz, 2H), 2.22 (s, 6H), 1.57 (d, J = 6.8 Hz, 3H); MS (m/z); 529.0 [M+1]; 70ee %
[실시예 3]
(S,E)-2-(3-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-엔오일)-2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)페닐)-N-(5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)프로판아미드(화학식 (IV)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000012
(E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 대신에 (E)-N-(5-브로모-2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드를 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.44 (s, 1H), 7.96-7.91 (m, 3H), 7.69 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 15.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 4.12-4.02 (m, 3H), 3.13-3.11 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 1.51 (d, J = 7.2 Hz, 3H); MS (m/z); 530.0 [M+1]; 69ee %
[실시예 4]
(S,E)-N-(3-클로로-5-(3-(1-옥소-1-((5-(트리플루오로메틸)티아졸-2-일)아미노)프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (V)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000013
(E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 대신에 (E)-N-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드를 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.41 (s, 1H), 8.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.79 (dt, J = 15.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.11 (q, 5.2 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 6.0 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 1.53 (d, J = 7.2 Hz, 3H); MS (m/z); 538.5 [M+1]; 68ee %
[실시예 5]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000014
5-트리플루오로메틸티아졸-2-아민 대신에 5-에틸티아졸-2-아민을 사용하고, (E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 대신에 (E)-N-(5-브로모-3-시아노피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드를 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 (brs, 1H), 11.03 (brs, 1H), 9.01 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.72 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.89 (dt, J = 15.6 Hz, 6.0 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.05 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.10 (dd, J = 5.6 Hz, 1.2 Hz, 2H), 2.72 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.20 (s, 6H), 1.52 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H); MS (m/z); 489.0 [M+1]; 75ee %
[실시예 6]
(S,E)-2-(3-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-엔오일)-2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)페닐)-N-(5-에틸티아졸-2-일)프로판아미드(화학식 (VII)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000015
5-트리플루오로메틸티아졸-2-아민 대신에 5-에틸티아졸-2-아민을 사용하고, (E)-N-(5-브로모-3-플루오로피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 대신에 (E)-N-(5-브로모-2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드를 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 (s, 1H), 8.44 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.96-7.92 (m, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.58 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.87 (dd, J = 15.2 Hz, 6.4 Hz, 1H), 4.13-4.06 (m, 2H), 4.04-3.98 (m, 1H), 3.15-3.10 (m, 4H), 2.74-2.67 (m, 2H), 2.20 (s, 6H), 1.50 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.6 Hz, 3H); MS (m/z); 490.0 [M+1]; 72ee %
[실시예 7]
(S,E)-4-(디메틸아미노)-N-(5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)-3-플루오로피리딘-2-일)부트-2-엔아미드(화학식 (VIII)의 화합물)의 합성
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000016
5-트리플루오로메틸티아졸-2-아민 대신에 5-에틸티아졸-2-아민을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1과 동일한 방식으로 표제 화합물을 제조하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 (brs, 1H), 10.48 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.10 (dd, J = 11.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.80 (dt, J = 15.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.72 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H); MS (m/z); 482.0 [M+1]; 65ee %
[실시예 8]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 옥살산염 아세톤 용매화물의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 30 g을 메탄올 60 mL 및 아세톤 90 mL의 혼합액에 투입 후 40 ~ 45℃까지 승온하여 용해시키고, 옥살산염 5.6 g을 투입하였다. 아세톤 210 mL를 천천히 투입하여 결정석출을 유도 (seed 30 mg 투입)한 후, 1 ~ 2시간 동안 결정화하였다. 혼합액의 온도를 5 ~ 10℃로 냉각하고, 1시간 동안 교반하여 결정을 숙성시킨 후 고체를 여과하고, 20:1 비율의 메탄올 및 물 혼합액 150 mL로 세척하였다. 아세톤 60 mL로 추가 세척 후, 30℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염을 수득하였다 (25.5 g, 85.0 %). 수득한 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 20 g을 정제수 20 mL 및 아세톤 100 mL의 혼합액에 투입 후 40 ~ 45℃까지 승온하여 용해하였다. 아세톤 140 mL를 천천히 투입하여 결정석출을 유도 (seed 20 mg 투입)한 후, 1 ~ 2시간 동안 결정화하였다. 혼합액의 온도를 20 ~ 25℃로 2 ~ 3시간 동안 천천히 냉각하고 12 ~ 15시간 동안 교반하여 결정을 숙성시킨 후 고체를 여과하고, 40:1 비율의 아세톤 및 물의 혼합액 100 mL로 세척하였다. 아세톤 40 mL로 추가 세척 후, 30℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 아세톤 용매화물을 수득하였다 (15 g, 75 %). X선 회절분광도 분석 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 7.4°, 8.3°, 9.3°, 10.1°, 11.2°, 11.5°, 12.6°, 15.2°, 16.5°, 16.9°, 17.4°, 17.8°, 18.6°, 19.8°, 20.3°, 21.6°, 22.1°, 22.9°, 23.6°, 24.4°, 25.5 °, 26.6°, 29.0° 및 31.5°의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크를 확인하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.31 (s, 1H), 9.04 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52-7.44 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.95 (dt, J = 15.2 Hz, 6.8 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 8.4 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.74 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 2.71 (s, 6H), 2.09 (s, 3H), 1.53 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.21 (t, J = 7.6 Hz, 3H)
[실시예 9]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 옥살산염 수화물의 제조
상기 실시예 8에서 제조한 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 아세톤 용매화물 20 g을 습도 85 ~ 90 %, 온도 20 ~ 25℃챔버에서 2 ~ 4일간 방치 후 30′℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 수화물을 수득하였다 (18 g, 98 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6 ) : 11.26 (s, 1H) ; 9.03 (d, 1H)) ; 8.68 (d, 1H), 7.83 (s, 1H) ; 7.73 (d, 1H) ; 7.52-7.44 (m, 2H) ; 7.14 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H) ; 6.53 (d, 1H) ; 4.06 (q, 1H) ; 3.77 (d, 2H) ; 2.75-2.68 (m, 2H) ; 2.67 (s, 6H) ; 1.52 (d, 3H) ; 1.19 (t, 3H)
[실시예 10]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 옥살산염 무수물의 제조
상기 실시예 9에서 제조한 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 수화물 2g에 에탄올 50ml를 투입하였다. 온도를 40 ~ 45℃로 유지하면서 24시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 에탄올 10mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 옥살산염 무수물을 수득하였다 (1.7 g, 85 %). X선 회절분광도 분석 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 8.3°, 13.7°, 14.9°, 15.3°, 16.0°, 16.7°, 16.9°, 17.6°, 18.4°, 18.8°, 19.2°, 19.9°, 20.7°, 21.4°, 21.9°, 22.7°, 23.8°, 25.3°, 및 25.6°의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크를 확인하였다.
1H NMR (400MHz , DMSO-d6 ) : 11.29 (s, 1H) ; 9.03 (d, 1H)) ; 8.69 (d, 1H), 7.83 (s, 1H) ; 7.74 (d, 1H) ; 7.52-7.44 (m, 2H) ; 7.14 (s, 1H) ; 6.94 (dt, 1H) ; 6.56 (d, 1H) ; 4.08 (q, 1H) ; 3.81 (d, 2H) ; 2.74-2.68 (m, 2H) ; 2.68 (s, 6H) ; 1.53 (d, 3H) ; 1.21 (t, 3H)
[실시예 11]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 염산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 500mg을 아세톤 10 mL에 용해시키고 20 ~ 25℃에서 10 ~ 15분간 교반한 후 디에틸에테르 중 1.25 M의 염산 용액 0.9 mL을 천천히 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 6 ~ 7 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 아세톤 10 mL로 세척하였다. 30 ~ 35℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 염산염을 수득하였다 (315 mg, 58 %). X선 회절분광도 분석 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 7.0°, 9.1°, 10.5°, 11.0°, 13.5°, 17.1°, 19.0°, 20.8°, 21.3°, 23.2°, 및 25.7°의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크를 확인하였다.
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.15 (s, 1H) ; 11.38 (s, 1H) ; 10.75 (s, 1H) ; 9.06 (d, 1H) ; 8.71 (d, 1H) ; 7.86 (s, 1H) ; 7.76 (dd, 1H) ; 7.54-7.47 (m, 2H) ; 7.16 (s, 1H) ; 6.97 (dt, 1H) ; 6.61 (d, 1H) ; 4.09 (q, 1H) ; 4.03-4.00 (m, 2H) ; 2.81 (d, 6H) ; 2.77-2.71 (m, 2H) ; 1.54 (d, 3H) ; 1.22 (t, 3H)
[실시예 12]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 벤젠설폰산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 50 mg을 메틸삼차부틸에테르 1 mL에 용해시키고 20 ~ 25℃에서 10분간 교반한 후 벤젠설폰산 16.6 mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 0.5 ~ 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 메틸삼차부틸에테르 1 mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 벤젠설폰산염을 수득하였다 (46 mg, 73 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.13 (s, 1H) ; 11.35 (s, 1H) ; 9.69 (bs, 1H) ; 9.06 (d, 1H) ; 8.72 (d, 1H) ; 7.85 (s, 1H) ; 7.75 (dd, 1H) ; 7.63-7.61 (m, 3H) ; 7.53-7.49 (m, 2H) ; 7.36-7.33 (m, 4H) ; 7.17 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H), 6.60 (d, 1H) ; 4.07 (q, 1H) ; 4.04-4.02 (m, 2H) ; 2.86 (d, 6H) ; 2.76-2.75 (m, 2H) ; 1.55 (d, 3H) ; 1.22 (t, 3H)
[실시예 13]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 헤미푸마르산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 50mg을 메틸삼차부틸에테르 1mL에 용해시키고 20 ~ 25℃에서 10분간 교반한 후 푸마르산 11.8mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 0.5 ~ 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 메틸삼차부틸에테르 1mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 헤미푸마르산염을 수득하였다 (42mg, 78 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.13 (bs, 1H) ; 11.07 (s, 1H) ; 9.03 (d, 1H) ; 8.68 (d, 1H) ; 7.85 (s, 1H) ; 7.75 (dd, 1H) ; 7.54-7.46 (m, 2H) ; 7.16 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H) ; 6.63 (s, 1H) ; 6.42 (d, 1H) ; 4.07 (q, 1H) ; 3.20-3.18 (m, 2H) ; 2.77-2.71 (m, 2H) ; 2.27 (s, 6H) ; 1.55 (d, 3H) ; 1.22 (t, 3H)
[실시예 14]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 숙신산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 50 mg을 메틸삼차부틸에테르 1 mL에 용해시키고 20 ~ 25℃에서 10분간 교반한 후 숙신산 24.16 mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 0.5 ~ 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 메틸삼차부틸에테르 1 mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 숙신산염을 수득하였다 (39 mg, 73 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.13 (bs, 1H) ; 11.05 (s, 1H) ; 9.03 (d, 1H) ; 8.67 (d, 1H) ; 7.85 (s, 1H) ; 7.76 (dd, 1H) ; 7.54-7.46 (m, 2H) ; 7.16 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H) ; 6.41 (d, 1H) ; 4.07 (q, 1H) ; 3.17-3.15 (m, 2H) ; 2.77-2.71 (m, 2H) ; 2.42 (s, 2H) ; 2.25 (s, 6H) ; 1.54 (d, 3H) ; 1.21 (t, 3H)
[실시예 15]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 헤미말레산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 50 mg을 메틸삼차부틸에테르 1 mL에 용해시키고 20 ~ 25℃에서 10분간 교반한 후 말레산 12.47 mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 0.5 ~ 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 메틸삼차부틸에테르 1 mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 헤미말레산염을 수득하였다 (38 mg, 71 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.13 (s, 1H) ; 11.21 (s, 1H) ; 9.75 (bs, 1H) ; 9.05 (d, 1H) ; 8.70 (d, 1H) ; 7.85 (s, 1H) ; 7.75 (dd, 1H) ; 7.54-7.46 (m, 2H) ; 7.16 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H) ; 6.51 (d, 1H) ; 6.04 (s, 1H) ; 4.07 (q, 1H) ; 3.30-3.40 (m, 2H) ; 2.77-2.71 (m, 2H) ; 2.53 (s, 6H) ; 1.54 (d, 3H) ; 1.22 (t, 3H)
[실시예 16]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 니코틴산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 50 mg을 메틸삼차부틸에테르 1 mL에 용해시키고 20 ~ 25에서 10분간 교반한 후 니코틴산 13.9 mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 0.5 ~ 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 메틸삼차부틸에테르 1 mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 니코틴산염을 수득하였다 (33 mg, 55 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6) : 12.12 (bs, 1H) ; 11.06 (s, 1H) ; 9.09 (d, 1H) ; 9.04 (d, 1H) ; 8.79 (dd, 1H) ; 8.68 (d, 1H) ; 8.28 (dd, 1H) ; 7.85 (s, 1H) ; 7.75 (dd, 1H) ; 7.57-7.48 (m, 3H) ; 7.17 (s, 1H) ; 6.90 (dt, 1H) ; 6.44 (d, 1H) ; 4.08 (q, 1H) ; 3.17-3.15 (m, 2H) ; 2.76-2.74 (m, 2H) ; 2.25 (s, 6H) ; 1.55 (d, 3H) ; 1.21 (t, 3H)
[실시예 17]
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드(화학식 (VI)의 화합물) 글리콜산염의 제조
(S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 500 mg을 아세톤 7.5 mL에 용해시킨 후 40 ~ 45℃에서 10분간 교반한 후 글리콜산 86 mg을 투입하였다. 온도를 20 ~ 25℃로 유지하면서 1 ~ 2 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 아세톤 5 mL로 세척하였다. 25℃에서 진공건조하여 (S,E)-N-(3-시아노-5-(3-(1-((5-에틸티아졸-2-일)아미노)-1-옥소프로판-2-일)페닐)피리딘-2-일)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드 글리콜산염을 수득하였다 (422 mg, 73 %).
1H NMR (400MHz , DMSO-d6 ) : 12.12 (bs, 1H); 11.05 (s, 1H) ; 9.02 (d, 1H)) ; 8.66 (d, 1H), 7.83 (s, 1H) ; 7.74 (d, 1H) ; 7.52-7.43 (m, 2H) ; 7.14 (s, 1H) ; 6.89 (dt, 1H) ; 6.39 (d, 1H) ; 4.05 (q, 1H) ; 3.89 (s, 2H) ; 3.13 (d, 2H) ; 2.75-2.69 (m, 2H) ; 2.22 (s, 6H) ; 1.52 (d, 3H) ; 1.19 (t, 3H)
[시험예]
상기 실시예에서 제조된 화합물의 효능을 다음과 같이 평가하고, 그 결과를 하기에 나타내었다.
시험예 1: CDK7 억제 활성
본 발명의 화합물을, ADP-Glo 플랫폼을 사용하여 CDK7 억제 활성에 대해 시험관내 검정하였다. 구체적으로, 재조합 정제된 인간 CDK7 (써모피셔 (ThermoFisher), PV3868) 및 ADP Glo 키나제 검정 키트 (프로메가(Promega), V9102)를 사용하여 CDK7 억제 활성을 측정하였다. CDK7을 1X 키나제 반응 완충액 (40 mM Tris-Cl, pH 7.5, 20 mM MgCl 2, 0.1 mg/ml BSA 및 50 μM DTT)으로 희석하고, 96 웰 플레이트에 첨가하였다 (반응 당 CDK7 최종 농도: 50 ng). 화합물을 최종적으로 1 % DMSO 수용액이 되도록 처리하고, 총 25 ㎕의 반응 덩어리 중 ATP (최종 농도 90 μM) 및 0.2 ㎍/㎕의 MBP (미엘린 염기성 단백질)를 함유하는 기질 칵테일을 96 웰 플레이트에 첨가하여, 이에 의해 효소 반응을 개시하였다. 인큐베이션 (30℃) 2시간 후, 동등한 부피 (반응 당 25 ㎕)의 ADP Glo를 첨가하고, 실온에서 60분 동안 인큐베이션시켰다 (30℃). 그 후, 키나제 검출 시약 (반응 당 50 ㎕)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 인큐베이션시켰다 (30℃). 화학발광 방법에 의해 ADP Glo 키나제 검정 키트 지침 매뉴얼에 따라 키나제 활성을 측정하고, 본 발명에 따른 화합물의 CDK7 억제 활성을 계산하였다. 마이크로소프트 엑셀을 이용하여 각각의 화합물의 결과 분석을 수행하고, 프리즘 (Prism) 소프트웨어에 의해 IC 50 값을 계산하여 하기 표 1에 CDK7 억제 정도 (IC 50)를 나타내었다.
실시예 CDK7 억제 (IC 50 nM)
1 7.6
2 4.3
3 5.9
4 8.5
5 4.2
6 6.0
7 4.0
그 결과, 본 발명의 화합물들은 매우 높은 CDK7 억제 활성을 갖는 것을 확인하였다.
시험예 2: 암세포에 대한 본 발명의 화합물의 항증식성 효과
MDA-MB-468 세포
MDA-MB-468 세포는 초기 진단이 어렵고 높은 전이 능력을 갖는 악성 종양으로 공지된 삼중-음성 유방암 (TNBC: 에스트로겐 수용체, 프로게스테론 수용체 및 HER2 발현에 대해 음성)의 세포 중 하나이고, 이들 세포는 유방암 세포의 증식 및 생존의 억제를 시험하는데 사용된다.
MDA-MB-468 세포의 증식을 억제하는 능력을 평가하기 위해 본 발명의 화합물을 상이한 농도 (1000 nM로부터 1 nM까지)에서 시험하였다. 세포를 RPMI 1640 (웰진) + 10 % FBS (깁코) + 1 % 페니실린/스트렙토마이신 (깁코)에서 배양하고, 5 % CO 2의 존재 하에 가습 챔버에서 37℃에서 배양하였다.
96-웰 세포 배양 플레이트에서 배양된 MDA-MB-468 세포를 본 발명의 화합물로 처리하고, 72시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 테트라졸륨 염을 사용하는 MTT 방법에 의해 화합물의 항증식성 효과를 분석하여 세포 증식 억제 정도(IC 50)를 하기 표 2에 나타내었다.
실시예 MDA-MB-468 (IC 50 nM)
1 23.0
2 30.0
3 74.0
4 35.0
5 14.0
6 34.0
7 7.0
그 결과, 본 발명의 화합물은 MDA-MB-468 세포의 증식에 대한 높은 억제 활성을 갖는 것을 확인하였다.
HepG2 세포
인간 간세포 암종 세포인 HepG2 세포의 증식을 억제하는 능력을 시험관내 세포 생존성 검정을 통해 측정하였다. MEM (웰진) + 10 % FBS (깁코) + 1 % 페니실린/스트렙토마이신 (깁코)의 배양 배지를 사용하여 5 % CO 2의 존재하에 가습 조건에서 37℃에서 세포를 배양하였다. 96-웰 세포 배양 플레이트에서 배양된 HepG2 세포를 화합물로 처리하고, 72시간 동안 배양하였다. 테트라졸륨 염을 사용하는 CCK-8 방법에 의해 세포 생존성을 측정하고, 암세포 증식을 억제하는 본 발명에 따른 화합물의 능력을 계산하였다. 마이크로소프트 엑셀을 이용하여 각각의 화합물의 결과 분석을 수행하고, 프리즘 소프트웨어에 의해 IC 50 값을 계산하고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
실시예 HepG2 (IC 50 nM)
1 5.0
2 5.0
3 17.4
4 4.2
5 3.0
6 38.0
7 3.8
그 결과, 본 발명의 화합물은 HCC (HepG2) 세포의 증식에 대한 높은 억제 활성을 갖는 것을 확인하였다.
시험예 3: CDK7 선택성
CDK2, CDK5를 포함하는 468종의 키나제의 한 세트를 갖는 스캔맥스 (scanMAX) 키나제 검정 패널을 이용하여 CDK2, CDK5, 및 CDK7 억제 정도를 측정하였다. 본 발명의 화합물을 1 μM에서 스크리닝하고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
실시예 1uM에서의 억제율 (%)
CDK2 CDK5 CDK7
2 26 22 99
5 20 30 99
상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물의 CDK7에 대한 높은 억제 활성, 및 CDK 2 및 CDK5에 대한 낮은 억제 활성을 확인하였다. 상기 결과로부터 본 발명의 화합물이 CDK7을 매우 선택적으로 억제한다는 것을 확인하였다.
시험예 4: 구조 및 활성 간의 상관관계 분석
이하에서는, 본 발명의 화합물의 구조 및 활성 (CDK7 억제 효과 및 암세포에 대한 항증식성 효과) 간의 상관관계를 분석하였다.
"티아졸" 고리
본 발명의 화합물에 포함되는 "티아졸" 고리가 본 발명의 화합물이 갖는 활성에 미치는 영향을 분석하기 위하여, 본 발명의 실시예 5의 화합물과 "티아졸" 고리를 포함하지 않는 비교예 1의 화합물의 CDK7 억제 정도 및 암세포 증식 억제 정도를 비교하였다.
CDK7 억제 정도를 확인하기 위한 실험은 상기 시험예 1과 동일한 방법으로 수행하였다. 또한 암세포 증식 억제 정도를 확인하기 위하여 MV-4-11 (혈액암) 세포, MCF-7 (유방암) 세포, HepG2 (간암) 세포, 및 Hep3B (간암) 세포의 증식 정도를 측정하였고, HepG2 세포의 증식 정도는 상기 실험예 2와 동일한 방법으로 수행하였다. MV-4-11 세포, MCF-7 세포, 및 Hep3B 세포의 증식 정도는 각각 IMDM (웰진) + 10 % FBS (깁코) + 1 % 페니실린/스트렙토마이신 (깁코), RPMI (웰진) + 10 % FBS (깁코) + 1 % 페니실린/스트렙토마이신 (깁코), 및 MEM (웰진) + 10 % FBS (깁코) + 1 % 페니실린/스트렙토마이신 (깁코)의 배양 배지를 사용하여 세포를 배양하고, CCK-8 방법 (MV-4-11 세포, Hep3B 세포)과 MTT 방법 (MCF-7 세포)에 의해 세포 생존성을 측정하는 것 이외에 상기 시험예 2의 방법과 동일하게 수행하였다. 각 화합물의 CDK7 억제 정도 (IC 50 nM) 및 암세포 증식 억제 정도 (IC 50 nM)를 하기 표 5에 나타내었다.
실시예 5
(화학식 (VI)의 화합물)		 비교예 1
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000017
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000018
CDK7 4.0 9.7
핼액암 MV-4-11 4.2 16.5
유방암 MCF-7 22.1 417.1
간암 HepG2 3.8 128.1
간암 Hep3B 22.0 248.7
상기 표 5에 나타난 바와 같이, "티아졸" 고리를 포함한 실시예 5의 화합물과 "티아졸" 고리를 포함하지 않는 비교예 1의 화합물을 비교한 결과, CDK7 억제 정도가 약 2.4배 우수하고, 모든 암세포에 대한 증식 억제 정도가 월등하게 우수하였으며, 특히 간암 HepG2 세포에 대한 증식 억제 정도는 33배 이상 우수한 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 화합물은 "티아졸" 고리를 포함하여 우수한 CDK7 억제 및 암세포 증식 억제 효과를 갖는 것을 알 수 있다.
"4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드" 기
본 발명의 화합물에 포함되는 "4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드" 기가 본 발명의 화합물이 갖는 활성에 미치는 영향을 분석하기 위하여, 본 발명의 실시예 5의 화합물과 "4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드" 기를 포함하지 않는 비교예 2 및 3의 화합물의 CDK7 억제 정도를 비교하였다.
CDK7 억제 정도를 확인하기 위한 실험은 상기 시험예 1과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
실시예 5 비교예 2 비교예 3
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000019
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000020
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000021
CDK7(IC 50nM) 4.2 339 197
상기 표 6에서 나타난 바와 같이, "4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드" 기를 포함한 실시예 5의 화합물은 비교예 2 및 3의 화합물과 비교하여 CDK7 억제 정도가 각각 약 80배 및 약 45배 우수한 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 화합물이 "4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드" 기를 포함하여, 우수한 CDK7 억제 효과를 갖는 것을 알 수 있다.
치환된 "피리딘" 고리
본 발명의 화합물에 포함되는 시아노 또는 할로겐 기로 치환된 "피리딘" 고리가 본 발명의 화합물이 갖는 활성에 미치는 영향을 분석하기 위하여, 치환된 피리딘 고리를 포함한 실시예 5의 화합물과 비치환된 피리딘 고리를 포함하는 비교예 4의 화합물 및 피리딘을 포함하지 않는 비교예 5 화합물의 CDK7 억제 정도 및 암세포 증식 억제 정도를 비교하였다.
암세포 증식 억제 정도를 확인하기 위하여 MV-4-11 (혈액암) 세포, MCF-7 (유방암) 세포, HepG2 (간암) 세포, 및 Hep3B (간암) 세포의 증식 정도를 측정하였고, 실험은 상기 비교예 1의 화합물과의 비교실험과 동일한 방법으로 수행하였다. 각 화합물의 CDK7 억제 정도 (IC 50 nM) 및 암세포 증식 억제 정도 (IC 50 nM)를 하기 표 7에 나타내었다.
실시예 5 비교예 4 비교예 5
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000022
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000023
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000024
CDK7 4.0 9.3 96
혈액암 MV-4-11 4.2 34.4 446
유방암 MCF-7 22.1 55.8 467
간암 HepG2 3.8 16.7 128
간암 Hep3B 22.0 51.6 125
상기 표 7에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물은 비치환된 피리딘 고리를 포함한 비교예 4 및 피리딘 고리를 포함하지 않는 비교예 5와 비교하여 우수한 CDK7 억제 활성 및 암세포 증식 억제 활성을 갖는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 화합물이 "피리딘" 고리를 포함하여 우수한 CDK7 억제 및 암세포 증식 억제 효과를 갖고, 더욱이 피리딘 고리가 치환된 경우 억제 효과가 더욱 증가하는 것을 알 수 있다.
할로겐 기로 치환되거나 피롤리딘과 융합된 고리를 형성하는 피리딘 고리를 포함하는 본 발명의 화합물이 비치환된 피리딘 고리를 포함하는 비교예 4의 화합물과 비교하여 우수한 활성을 갖는지 여부를 검증하기 위하여, 본 발명의 화합물과 비교예 4의 화합물의 CDK7 억제 활성을 직접 비교실험하였다. 이 때 실험은 상기 시험예 1과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
실시예 6 실시예 7 비교예 4
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000025
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000026
Figure PCTKR2021003100-appb-img-000027
CDK7
(IC 50nM)		 6.0 4.0 11.0
상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화합물들이 비치환된 피리딘 고리를 포함하는 비교예 4와 비교하여, 더욱 우수한 CDK7 억제 활성을 갖는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 화합물은 피리딘 고리가 할로겐 또는 시아노 기로 치환되거나 피롤리딘과 융합된 고리를 형성할 경우, 우수한 CDK7 억제 활성을 갖는 것을 알 수 있다.
시험예 5: 염의 안정성 시험
본 발명의 실시예 5의 화합물(화학식 (VI)의 화합물) 및 실시예 9의 화합물(화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물)의 안정성을 비교하였다. 구체적으로 ICH 가이드라인에 따라 안정성 시험을 수행하고, 고속액체크로마토그래피 (HPLC) 분석법을 이용하여 분석하였다. 온도 25 ±2℃ 상대습도 60 ±5 %에서 밀봉 상태로 28일 동안 저장한 후 순도 변화를 측정하여 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다.
실시예5
(화학식 (VI)의 화합물)		 실시예 9
(화학식 (VI)의 화합물의
옥살산염 수화물)
Initial 94.98% 98.14%
7일 93.98% 98.01%
14일 93.21% 98.05%
21일 92.78% 97.73%
28일 91.91% 97.64%
상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 화학식 (VI)의 화합물은 28일까지 3% 이상의 순도 변화를 나타낸 반면, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물은 28일까지 0.5 %의 순도 변화를 나타내어, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물은 우수한 보관 안정성을 갖는 것을 확인하였다.
시험예 6: 염의 용해도 평가
실시예 5의 화합물(화학식 (VI)의 화합물) 및 실시예 9의 화합물(화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물)에 대하여 용해도를 평가한 결과를 하기 표 10에 나타내었다.
실시예 5
(화학식 (VI)의 화합물)		 실시예 9
(화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물)
용해도 (mg/mL) 0.18 238
상기 표 10에 나타낸 바와 같이, 정제수에서 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물은 화학식 (VI)의 화합물과 비교하여 1000배 이상의 매우 높은 용해도를 갖는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염 수화물은 매우 우수한 용해도를 가지고, 약물의 체내 흡수 및 생체이용률을 개선하여 의약품으로의 개발에 유리한 것을 알 수 있다.
시험예 7: X선 회절분광도 분석
X선 회절 분석기를 사용하여 실시예 8 내지 11에서 제조된 화학식 (VI)의 화합물의 염, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물을 분석하였다. 상기 X선 회절 분석기 (XRD) 측정조건은 다음과 같다.
1) 장치: D8 Advance(Bruker)
2) Detector: Lynxeye
3) X선 광원의 파장: 1.5405Å
분석 결과를 각각 도 1 내지 4에 나타내었다.
시험예 8: 수소 핵자기공명 스펙트럼 (NMR) 분석
실시예 8 내지 17에서 제조된 화학식 (VI)의 화합물의 염, 염의 수화물, 또는 염의 용매화물에 대하여 수소 핵자기공명 스펙트럼 분석을 실시하였다. 상기 수소 핵자기공명 스페트럼 측정 조건은 다음과 같고, 그 결과를 도 5 내지 14에 나타내었다.
1) 장치: Bruker Model AVANCE II 400
2) 측정범위: -1 ~ 14ppm
3) 스캔 횟수: 16

Claims (23)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
    <화학식 (I)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000028
    상기 식에서,
    Ra는 할로겐으로 치환되거나 또는 비치환된 선형 C 1-C 3 알킬이고;
    Rb는 시아노 또는 할로이고, Rc는 H이거나; 또는
    Rb와 Rc는 Rb에 연결된 피리딘 및 Rc에 연결된 질소와 함께 융합된 2,3-디히드로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘을 형성한다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 니코틴산염, 토실산염, 글리콜산염, 헤미설폰산염, 타르타르산염, 말레산염, 아스파르트산염, 말산염, 시트르산염, 말론산염, 인산염, 글루탐산염, 캄포술폰산염, 3-히드록시-2-나프토산염, 메실산염, 및 4-히드록시-벤조산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  3. 하기 화학식 (II) 내지 (VIII)의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
    <화학식 (II)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000029
    <화학식 (III)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000030
    <화학식 (IV)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000031
    <화학식 (V)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000032
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000033
    <화학식 (VII)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000034
    <화학식 (VIII)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000035
  4. 제3항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 니코틴산염, 토실산염, 글리콜산염, 헤미설폰산염, 타르타르산염, 말레산염, 아스파르트산염, 말산염, 시트르산염, 말론산염, 인산염, 글루탐산염, 캄포술폰산염, 3-히드록시-2-나프토산염, 메실산염, 및 4-히드록시-벤조산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  5. 제4항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 글리콜산염, 및 니코틴산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  6. 제4항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 염산염 또는 옥살산염인 것을 특징으로 하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  7. 하기 화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로서,
    상기 약제학적으로 허용가능한 염은 옥살산염, 염산염, 벤젠설폰산염, 헤미푸마르산염, 숙신산염, 헤미말레산염, 글리콜산염, 및 니코틴산염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000036
  8. 제7항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 염산염 또는 옥살산염인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  9. 결정형의 하기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000037
  10. 제9항에 있어서, 상기 염산염은 7.0°, 9.1°, 10.5°, 11.0°, 13.5°, 17.1°, 19.0°, 20.8°, 21.3°, 23.2°, 및 25.7°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 염산염.
  11. 하기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 수화물.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000038
  12. 하기 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 용매화물.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000039
  13. 제12항에 있어서, 상기 염산염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 염산염의 용매화물.
  14. 하기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 수화물.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000040
  15. 제14항에 있어서, 상기 옥살산염의 수화물은 무정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 수화물.
  16. 하기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000041
  17. 제16항에 있어서, 상기 옥살산염의 용매화물은 아세톤, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, 1-프로판올, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 메틸삼차부틸에테르, 및 헵탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매에 의해 형성된 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물.
  18. 제16항에 있어서, 상기 옥살산염의 용매화물은 옥살산염의 아세톤 용매화물인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물.
  19. 제18항에 있어서, 상기 옥살산염의 아세톤 용매화물은 결정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물.
  20. 제19항에 있어서, 상기 옥살산염의 아세톤 용매화물은 7.4°, 8.3°, 9.3°, 10.1°, 11.2°, 11.5°, 12.6°, 15.2°, 16.5°, 16.9°, 17.4°, 17.8°, 18.6°, 19.8°, 20.3°, 21.6°, 22.1°, 22.9°, 23.6°, 24.4°, 25.5°, 26.6°, 29.0° 및 31.5°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 용매화물.
  21. 하기 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 무수물.
    <화학식 (VI)>
    Figure PCTKR2021003100-appb-img-000042
  22. 제21항에 있어서, 상기 옥살산염의 무수물은 결정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 무수물.
  23. 제22항에 있어서, 상기 옥살산염의 무수물은 8.3°, 13.7°, 14.9°, 15.3°, 16.0°, 16.7°, 16.9°, 17.6°, 18.4°, 18.8°, 19.2°, 19.9°, 20.7°, 21.4°, 21.9°, 22.7°, 23.8°, 25.3°, 및 25.6°로 이루어진 군에서 선택된 4개 이상의 회절각 2θ ± 0.2°에서 특징적인 피크들을 포함하는 X-선 회절(XRD) 스펙트럼을 나타내는 결정형인 것을 특징으로 하는, 화학식 (VI)의 화합물의 옥살산염의 무수물.
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