WO2020218913A1 - Depósito, prueba, kit y método para detectar, analizar y diagnosticar sustancias - Google Patents

Depósito, prueba, kit y método para detectar, analizar y diagnosticar sustancias Download PDF

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WO2020218913A1
WO2020218913A1 PCT/MX2019/000041 MX2019000041W WO2020218913A1 WO 2020218913 A1 WO2020218913 A1 WO 2020218913A1 MX 2019000041 W MX2019000041 W MX 2019000041W WO 2020218913 A1 WO2020218913 A1 WO 2020218913A1
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WO
WIPO (PCT)
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test
hydrophobic
laminar
reservoir
interest
Prior art date
Application number
PCT/MX2019/000041
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English (en)
French (fr)
Inventor
Alejandro NUÑO AYALA
Nayeli Areli PÉREZ PADILLA
Pavel Hayl LUGO FABRES
José Luis NUÑO AYALA
Original Assignee
Unima Diagnosticos De México S. De R.L. De C.V.
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Publication date
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Publication of WO2020218913A1 publication Critical patent/WO2020218913A1/es

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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase

Definitions

  • the present invention is related to the technical fields of Biotechnology, Medicine, Chemistry, Biochemistry, Electronics and Information Technologies; since it provides a useful repository in the development of tests to detect, analyze and diagnose substances of interest; also provides a test, kit, and method to detect, analyze, and diagnose substances of interest; as well as a method for the manufacture of the tank and test in question.
  • Patent document US2010120061 (A) describes a rapid immunochromatographic test device for the detection of a target in a sample, which comprises: a) a first release pad for a gold conjugate, comprising colloidal gold conjugated with a first antibody or antigen and at least one oligonudeotide; and b) a second gold conjugate release pad, comprising colloidal gold conjugated with at least one oligonudeotide complementary to at least one oligonudeotide of the first conjugate of colloidal gold; where both release pads are located in different positions within the test device.
  • the invention of document US2010120061 (A) relates to a rapid immunochromatographic test device for the detection of a target in a sample, comprising a) a first gold conjugate releasing pad, comprising colloidal gold conjugated with a first antibody or antigen and at least one other antibody or antigen, wherein said additional antibody or antigen differs from said first antibody or antigen; and b) a second gold conjugate release pad, comprising colloidal gold conjugated to at least one additional antibody or antigen, wherein said additional antibody or antigen is specific for at least one additional antibody or antigen of the first conjugate of colloidal gold; where both release pads are located in different positions within the test device.
  • Document US2010120061 also refers to a method for the production of a device according to said invention comprising the steps of: a) preparing a colloidal gold solution; b) preparing a conjugation buffer; c) dividing the conjugation buffer by dividing it into a first and a second flask; d) adding an antibody according to the present invention to the conjugation buffer in the first flask; e) add colloidal gold solution to each flask; f) adding stabilizer buffer to each flask; g) concentrating each conjugate; h) adding a surfactant to the first conjugate and soaking the conjugate pad of the fiberglass sheet in the conjugate; I) soaking another conjugate pad of fiberglass sheet in the second conjugate; j) printing of sample and control lines on the membrane; k) lamination cards; and I) cutting cards into strips.
  • patent document CN203465275 (U) describes a rapid detection test strip for toxin T-2 (figure 1) in which it is used: a first fiberglass layer 1 located at one of the ends of the test strip, a second layer of fiber 2 impregnated with a T-2 toxin gold standard antibody, a layer of cellulose film 3 (nitrocellulose membrane), a layer of water absorbent material 4 (filter paper), and a support plate 7 made of a plastic strip that sequentially supports layers 1, 2, 3 and 4 from left to right; and the gold standard antibody fiber is used; and on the cellulose film 3 a band of a carrier protein solution compatible with the T-2 * toxin was added, and a band with a solution of goat anti-mouse IgG with a T control blot, and both bands were arranged in parallel with each other.
  • the combination transfer belt is '' II ''. But their
  • Gold particles which preferably have a diameter size in the range of about 20-55 nm, and more preferably in the Range of about 40-45 nm, serve as an Indicator dye.
  • the conjugate tag binds to antibodies in the sample to form a complex, and the complex then migrates along the membrane 18.
  • the MTB-specific antibodies bind to a mixture of at least two antigens that are immobilized at a discrete location 32 on the membrane 18.
  • the formation of this antigen-antibody mixture complex causes the indicator dye to precipitate and form a red line of detectable color (illustrated as TI "in figure 1), indicating a positive result that MTB-specific antibodies are present in the sample.
  • Figure 2 is an illustration of a test strip from Millipore Corporation (see Mansfield, M. (1999), A Short Guide: Development of Immunochromatographic Test Strips, Millipore Corporation, Bedford, MA) that has been modified in accordance with the present invention.
  • the devices of the documents described above have a very complex configuration, due to the materials required for their construction and despite the fact that they use pads to impregnate them with samples, their reaction sites are not delimited by hydrophobic barriers, either. which causes spills and sample waste.
  • Figure 1 is a conventional perspective view of a reservoir useful in the development of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, according to the present invention.
  • FIG. 2 is a top plan view of the tank of the present
  • Figure 3 is a section A-A 'of the deposit useful in the development of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest.
  • Figure 4 is a bottom plan view of said tank.
  • Figure 5 is a conventional perspective view of the tank in question, where the application of a wall that completely surrounds said tank is observed.
  • Figure 6 is a conventional perspective view of such a tank, where the application of a support is observed.
  • Figure 7 is a top plan view of a test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, made up of 6 deposits according to the proposal of the present invention.
  • Figure 8 is a B-B 'section of the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, according to the present invention.
  • Figure 9 is a bottom plan view of the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, in question.
  • Figure 10 is a conventional perspective view of said test for detecting, analyzing and / or diagnosing substances of interest.
  • Figure 11 is a conventional perspective view of the test in question, where the addition of a support and a fiberglass disk containing a detection agent is observed at each reaction site.
  • Figure 12 is a top plan view of the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest of the present invention, where the support and fiberglass discs, already attached, can be observed.
  • Figure 13 is a C-C 'section of the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest of the previous figure.
  • Figure 14 is a top plan view of a test for detecting, analyzing and / or diagnosing substances of interest in question, used to detect, analyze and diagnose tuberculosis and HIV.
  • An object of the present invention is a repository (1) useful in the development of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest.
  • the invention also has as its object a test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, made up of at least one deposit (1) such as the one proposed by the present invention.
  • This invention also has as its object a kit for detecting, analyzing and / or diagnosing substances of interest, which comprises at least one test according to the present invention.
  • Another object of the present invention is a method for the preparation of the deposit (1) useful in the preparation of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest.
  • a further object of the present invention is a method for preparing the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest.
  • Yet another object of the present invention is a method of analysis and interpretation of the results obtained by the test to detect, analyze and diagnose substances of interest.
  • the present invention relates to tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest; and as "substance of interest", it must be understood as any substance that can be applied in liquid or semi-liquid state to be detected, analyzed and diagnosed; that is, said "substance of interest” can be liquid or semi-liquid by nature, solid or semi-solid diluted in a liquid medium.
  • An example of the use of the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest according to the present invention is that it can be useful in a rapid diagnosis of diseases that can be detected in any substance of interest; in this case, such substances of interest can be liquid fluids from an animal patient, including human, to determine if there are antibodies against the pathogens that cause these diseases.
  • liquid fluids can be: blood, serum, plasma, tear, saliva, sweat, semen, etc .
  • diseases can be: infectious diseases (tuberculosis, HIV, dengue, zlka, influenza, syphilis, gonorrhea, etc.) and chronic degenerative diseases (diabetes, lupus, rheumatoid arthritis, cancer, cardiovascular, among others).
  • Deposit (1) useful in the manufacture of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest
  • the present invention refers to a tank (1) useful in the manufacture of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest; which is made up of a porous laminar substrate (4) that has at least one laminar face that allows a better flow of liquid fluids; where in one embodiment, the porous laminar substrate (4) is part of a porous laminar piece (2), which can be made of cellulose, chromatographic paper, filter paper, polymers, nitrocellulose membrane, to name a few examples.
  • the reservoir (1) is made up of barriers or walls, more specifically hydrophobic barriers or walls, arranged in such a way as to configure the reservoir (1) of the present invention.
  • the hydrophobic barriers can be: a horizontal hydrophobic laminar base (3) that seals one of the laminar faces of the porous laminar substrate (4), preferably that laminar face that does not allow a better flow of liquid fluids; and a vertical hydrophobic wall (6) that surrounds a portion of the porous laminar substrate (4).
  • An embodiment of the horizontal hydrophobic laminar base (3) and the vertical hydrophobic wall (6) is when they are manufactured with hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers and / or a combination between them , to name a few examples.
  • a more preferred embodiment of the horizontal hydrophobic sheet base (3) is when it is a printed coating of solid wax ink, preferably Cyan solid wax ink with a saturation of 66%; and the vertical hydrophobic wall (6) is a printed line of black solid wax ink with a saturation of 100%; therefore, the laminar base (3) and vertical wall (6) are printed with a printer that uses wax ink; to later be subjected to a melting temperature, to melt and penetrate through the pores of the substrate (4) until they make contact with each other and form said deposit (1) sealed to prevent the leakage of samples of the substances of interest.
  • the casting temperature can be around 121 ° C, for example, as this will depend on the type of wax and substrate.
  • Said deposit (1) useful in the manufacture of tests to detect, analyze and diagnose substances has at least one reaction site (5) on a portion of the laminar face of the substrate (4) that allows a better flow of liquid fluids , preferably.
  • a detection agent and a sample of the substance of interest are deposited, in order to carry out a reaction.
  • a preferred embodiment of the reservoir (1) is when the reaction site (5) is in the center of said reservoir (1), so that there is a balanced distribution of the sample of the substance of interest.
  • the reaction site (5) can comprise a fluid retention means (7) to reduce the dispersion rate of the sample and retain it for a longer time in the reaction site so that an optimal reaction occurs.
  • a fluid retention means (7) is a hydrophobic ring formed of a circular vertical wall (7) also made of hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers and / or a combination of them, to name a few examples.
  • One embodiment of the circular vertical wall (7) can be a solid wax ink printed line; where said solid wax ink is Cyan color with a saturation of 50%, also subjected to a melting temperature, to melt and penetrate the pores of the substrate (4).
  • a convenient configuration can be from a single linear longitudinal lane with a circular reaction site (5) located in the middle of said longitudinal lane, and the ends of the lane is the area where samples can flow during analysis. .
  • a more convenient configuration of the reservoir (1) is when this configuration comprises at least two longitudinal rails, linear and crossed with each other at their midpoints, to form a cross, an X or an asterisk; and at the point where they cross, the reaction site (5) is formed and the ends of the lanes are the areas through which the samples can flow during the reaction.
  • a further embodiment of the present reservoir (1) is when the lanes have at least one widening (6 ') in each arm of the lanes, to help the movement of the samples of the substances of interest.
  • Yet another embodiment of the tank (1), of the present invention is when it also comprises a vertical wall (8) that surrounds it; whereby said vertical wall (8) is supported by a portion outside the reservoir (1), of the porous laminar piece (2), vertically penetrating through the pores of said external portion of the porous laminar piece (2).
  • This vertical hydrophobic wall (8) is when it is manufactured with hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers and / or a combination of them, to name a few examples.
  • This vertical wall (8) can be a printed line of black wax with 100% saturation; and serves as a reference to delimit the area of the deposit (1) when an image is taken by photography, and that by means of software there is a recognition of the information of the detection, analysis and diagnosis carried out in the deposit (1).
  • the support (11) can be a structural base, such as a laminar body made of a material resistant to moisture and compatible with the other components of the tank (1); where the moisture resistant material can be polystyrene, to name an example.
  • Test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest The present invention also has as its object a test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest, which consists of, at least, one deposit (1) useful in the manufacture of tests to detect, analyze and / or diagnose substances of interest as described above.
  • the test to detect, analyze and / or diagnose substances of interest of the present invention also comprises at least one detection agent, which is placed on the reaction site (5) of the reservoir (1); and if said reaction site (5) has a fluid retention means (7), then the detection agent is placed on the retention means (7);
  • An example of the detection agent is that reagent or substance that is useful to detect and / or diagnose some information and / or condition present in a substance of interest; where such information and / or condition to detect and / or diagnose, may be the existence of pathogens, antibodies, diseases, substances, Stimulating substances, polluting substances, to name a few in an enunciative way.
  • it is a detection agent to detect and / or diagnose infectious diseases, chronic-degenerative diseases, among others.
  • the reagent or substance can be a protein with biological activity, such as a fusion protein, a preferred embodiment being when the fusion protein comprises: a variable fragment of shark antibody fused with a specific antigen to an infectious disease.
  • infectious diseases that can be detected, analyzed and diagnosed with the test of the present invention are tuberculosis, HIV, dengue, Zika, influenza, syphilis, gonorrhea, etc .; and chronic degenerative diseases can be diabetes, lupus, rheumatic arthritis, cancer, cardiovascular disease, among others.
  • the detection agent that detects and / or diagnoses an infectious disease can be a protein, more specifically a fusion protein that generates an agglutination reaction ex vivo; and even more specifically, an example of the fusion protein is one that comprises a variable fragment of shark antibody fused with an antigen specific to a disease, which can be tuberculosis or HIV.
  • This fusion protein (chimeric) is the central part of the test of the present invention, which in the presence of disease-specific antibodies, an ex vivo hemagglutination reaction is generated that involves said antibodies, which can be used as Visual indicator of the presence of antibodies in the sample.
  • the detection agent can be applied directly on the reaction site (5) or retention medium (7); however, said detection agent can be applied by means of an application element (10); where said application element (10) can be a glass fiber disk, where the detection agent is impregnated.
  • the detection, analysis and diagnostic test of the present invention may comprise an identification reference (13) located adjacent to the area of the reservoir (s) (1) to give a unique Identity to each test. So an Identity reference (13) will contain a unique sequential number for each test; which is also very useful for when you want to make subsequent queries or reviews of said tests.
  • Some examples of identification reference (13) can be a linear code, QR code, ISBN code, two-dimensional code, EAN code, GTIN code, UPC code, among others.
  • the identification reference (13) is preferably printed within an area (12) delimited by a line printed on the porous sheet (2).
  • a variant of the detection, analysis and diagnosis test in question is when it comprises a vertical wall (9) that surrounds all the deposits (1) that make it up and the identity reference (13);
  • this vertical hydrophobic wall (9) is when it is manufactured with hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers and / or a combination between them, to name a few examples; in this case, said vertical wall (9) is a line of black wax ink with 100% saturation that is printed on the perimeter edge of the porous laminar piece (2), penetrating vertically through the pores of said laminar piece (2 ).
  • This vertical wall (9) serves as a reference for taking a photograph of said test when the results of said test are going to be analyzed with software.
  • the test in question may comprise a support (11) to facilitate its handling and conservation; where said test adheres to the support (11) by means of of the laminar face of the porous laminar piece (2) where the hydrophobic coating (3) is, leaving the opening of the reservoir (1) free to be able to apply the reaction materials.
  • Said support can be a structural base, which is a laminar body made of a material resistant to humidity and compatible with the other components of the test; the moisture-resistant material being polystyrene.
  • the detection, analysis and diagnostic test obtained in the present invention has the following advantages:
  • the test for the detection, analysis and diagnosis of substances of interest, of the present invention can be part of any kit to detect, analyze and diagnose, quickly and reliably, substances of interest; therefore, said kit is another object of the present invention.
  • An example of this kit can be a kit to detect, analyze and diagnose,
  • degenerative which includes:
  • a diluent for example a PBS buffer
  • a fluid capture pipette (to extract the sample) from a patient;
  • kit in question can comprise:
  • tuberculosis and HIV so their components are variable, depending on the
  • the present invention therefore, comprises a method for the elaboration
  • this method includes the following
  • a porous laminar substrate (4) that has at least one laminar face that allows a better flow of liquid fluids; which can be part of a porous laminar piece (2), which is selected from the following group: cellulose, chromatographic paper, filter paper, polymers, and nitrocellulose membrane.
  • reaction site (5) on a portion of the laminar face that allows a better flow of liquid fluids, of the laminar substrate (4), where a detection agent and a sample of the substance are deposited of interest; it is preferred that said reaction site is located in the center of the reservoir (1).
  • One embodiment of the method is that it also comprises adding a fluid retention medium (7) that reduces the dispersion rate of the sample, within the reaction site (5), where the retention medium is a hydrophobic ring formed of a circular vertical hydrophobic wall (7) that penetrates transversely through the pore of the substrate (4).
  • Yet another embodiment of the method in question is when it also comprises adding a vertical hydrophobic wall (8) that completely surrounds the reservoir (1), which penetrates transversely through the pores of the laminar substrate (4);
  • This wall (8) serves as a reference for taking an image by means of a photographic camera included in a device that has software to recognize the information of the test carried out in the tank (1).
  • One more modality of said method of the present invention is when the horizontal hydrophobic laminar base (3), vertical hydrophobic wall (6), circular vertical hydrophobic wall (7) and vertical hydrophobic wall (8), are manufactured with hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers, among others, and a combination of them.
  • a more specific embodiment of the method according to the present invention is when the horizontal hydrophobic base (3) is an undercoat.
  • Printed with solid wax ink preferably Cyan solid wax ink with a saturation of 66%; while the vertical hydrophobic walls (6 and 8) are lines Printed with solid wax ink, preferably black solid wax ink with a saturation of 100%; and the vertical and circular hydrophobic wall (7) is a line printed with solid wax ink, preferably clan colored solid ink with a saturation of 50%.
  • One more embodiment of said method is that it also comprises subjecting the horizontal hydrophobic base (3), vertical hydrophobic walls (6 and 8) and vertical and circular hydrophobic wall (7) to a melting temperature, so that they melt and penetrate through the pores of the substrate (4); where the melting temperature can be around 121 ° C, for example, since this will depend on the type of wax and substrate.
  • One embodiment of the method for making a tank (1) is when the tank (1) is made as a linear longitudinal lane with its circular reaction site (5) located in the middle part of said longitudinal lane.
  • the tank (1) is made with at least two longitudinal rails, linear and crossed with each other at their midpoints, to form a cross, an X or an asterisk; and at the point where they intersect, the reaction site (5) is formed and the ends of the lanes is the area where the samples can flow during the reaction.
  • One modality of the method in question is when the rails are made at least one widening (6 ') in each arm, to help the movement of the samples of the substances of interest.
  • the tank (1) is provided with a support (11) to facilitate its handling and conservation; where said deposit (1) adheres to the support (11) by means of the laminar face, of the porous laminar substrate (4), where the hydrophobic coating (3) is, leaving the opening of the deposit (1) exposed to apply the reaction materials.
  • the support (11) can be a structural base, which is a laminar body made of a material resistant to humidity and compatible with the other components of the tank (1), for example, polystyrene.
  • a further object of the present invention is a method to develop a test to detect, analyze and diagnose substances of interest, which comprises the following covers:
  • the unique identification reference (13) can be: a linear code, QR code, code ISBN, two-dimensional code, EAN code, GTIN code, UPC code, among others.
  • the detection agent used is a fusion protein, a chimeric protein being preferable, which may comprise a variable fragment of shark antibody fused with a disease-specific antigen; for example, a specific antigen to detect anti-tuberculosis and anti-HIV antibodies, or other disease.
  • One embodiment of the method in question is when the vertical hydrophobic wall (9) is manufactured with hydrophobic materials, preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers, etc., and a combination between them.
  • hydrophobic materials preferably solid hydrophobic materials, such as: waxes, saturated hydrocarbons, polymers, etc., and a combination between them.
  • Yet another embodiment of this method is when the vertical hydrophobic wall (9) is a line printed with solid wax ink, preferably black solid wax ink with a 100% saturation.
  • a further embodiment of this method is that it also comprises subjecting the vertical hydrophobic wall (9) to a melting temperature so that it melts and penetrates the pores of the substrate (4); where the melting temperature can be around 121 ° C, for example, since this will depend on the type of wax and substrate.
  • a further embodiment of said method of the present invention is when it also comprises, including a means (10) to apply the detection agent, in the reaction site (5) of the reservoir (1); where said means (10) to apply the detection agent can be a fiberglass disk, where said agent is impregnated, for example.
  • Said method can also comprise, providing the test in question, a support (11) to facilitate its handling and conservation; where the test adheres to the support (1 1) by means of the laminar face, of the porous laminar piece (2), where the hydrophobic coating (3) is, leaving the opening of the tank (1) exposed for the application of the reaction materials.
  • Said support (11) is a structural base, which is a laminar body made of a material resistant to humidity and compatible with the other components of said test, such as polystyrene.
  • the present invention also comprises as a further object, a method for detecting, analyzing and / or diagnosing substances of interest, which comprises the following steps:
  • the necessary reaction time can be 10 to 15 min.
  • the software goes to the screen to photograph the area of the test tanks (1) and then goes to a screen where patient information must be entered.
  • a guide area delimited with lines appears on the camera screen, which must coincide with the lines of the vertical wall (9), to ensure that the distance between the camera and the test is enough to obtain an image with a good quality resolution to be able to carry out the analysis of the information.
  • the software performs the analysis of the image photographed in stage D, and presents a result on the screen of the "Smartphone” indicating whether or not the analyzed sample has certain content. or condition, as well as their amounts or concentrations.
  • Said computer program has an algorithm trained with "machine leaming” and using artificial intelligence to determine if the test results correspond to the fact that the substance of interest has or does not have a certain content or condition. as well as their amounts or concentrations.
  • the software analyzes the image to detect the deposits (1) and the results of the reaction within these, extracts them and by means of the artificial intelligence algorithm trained by "machine leaming "using thousands of examples determines the result in each deposit (1) and using a logical algorithm is able to determine based on multiple markers for a single condition and the combination between them, if the sample from the patient is positive or negative to the disease or condition that is being detected, analyzed and / or diagnosed.
  • this method to detect, analyze and / or diagnose substances of interest may have slight variations in terms of the order of its stages, and even dispense with some of them, which will depend on the detection agent and the substance to be detected. , analyze and diagnose, among other factors.
  • Example 1 Test for detection, analysis and diagnosis of tuberculosis and HIV, simultaneously, in blood samples.
  • the horizontal hydrophobic laminar base (3) and vertical hydrophobic wall (6) were printed on the chromatographic paper (2) with solid wax ink in Cyan color with a saturation of 66%; and 100% saturation black solid wax ink, respectively. Both walls were subjected to 121 ° C to melt the wax and penetrate the pores of the chromatographic paper (2).
  • the tanks (1) had a configuration of two longitudinal rails, straight and crossed with each other at their midpoints, forming an X; and at the point where they crossed a reaction site (5) was formed and the extremities of the lanes were the areas where the samples were dispersed during the reaction.
  • the lanes were provided with a widening (6 ') in each arm, to help the movement of the blood samples to be diagnosed.
  • a hydrophobic ring (7) was printed, which was a printed line of solid wax ink Clan color with a saturation of 50%; and it was also subjected to 121 ° C so that the wax melts and penetrates through the pores of the chromatographic paper (2).
  • Figure 14 illustrates the designation of the diseases to be diagnosed in the respective deposits (1), where three deposits (1) were used to diagnose tuberculosis (T), two deposits (1) to diagnose Human Immunodeficiency Virus (HIV) , and a deposit (1) without diagnosing any disease, as a control (t).
  • T tuberculosis
  • HAV Human Immunodeficiency Virus
  • a fiberglass disk (10) impregnated with a fusion protein made up of a variable fragment of shark antibody fused with a tuberculosis specific antigen was placed on the ring (7) of each deposit
  • the fusion protein was deposited and immobilized by means of a piezoelectric printer on the glass fiber discs (10) and incubated at 55 ° C for 30 min, this material and this treatment were used since it was sought to minimize nonspecific binding and spontaneous of the fusion protein to the matrix of the porous laminar piece (2) in order to maximize the fusion protein available for the immuno-recognition reaction at the time of adding the sample to be analyzed.
  • the chimeric protein had been immobilized on the disks (10), these adhered to each of the reaction sites (5) corresponding to the substance to be analyzed.
  • the blood sample was deposited on the fiberglass disc (10) and where there was turbulence generated by the cross flow of the sample as it passed through the disc (10) it re-mobilized the protein of immobilized fusion, which caused it to be incorporated with the sample to allow it to come into contact with the patient's antibodies and the recognition reaction to take place.
  • Each reservoir (1) was surrounded with a vertical hydrophobic wall (8) printed of black solid wax ink with 100% saturation; This hydrophobic wall (8) served as a reference to delimit the area of each deposit (1) when an image is taken with a photographic device to later be analyzed with software for the interpretation of the information from the test carried out in the deposit (1 ).
  • a vertical wall (9) was printed with solid black ink with 100% saturation on the perimeter edge of the chromatographic paper (2), to serve as a reference for taking an image with a photographic camera of a mobile device, then with a software to recognize the information of the detection test, analysis and diagnosis.
  • a QR code (13) was subsequently printed on the same laminar face where the deposits (1) are printed, of the chromatographic paper (2), but adjacent to the area where said deposits are (1), which serves to be read and known the information of the test in question.
  • the test was adhered to a polystyrene support (11), by means of the laminar face, of the chromatographic paper (2), where the hydrophobic coating (3) is located, leaving the openings of the six tanks (1) free to be able to apply the reaction materials.
  • Example 2 Kit for the detection, analysis and diagnosis of tuberculosis and HIV.
  • a kit was set up for the detection, analysis and diagnosis of tuberculosis and HIV, which included:
  • a diluent for example a PBS buffer
  • a fluid capture pipette (to extract the sample) from a patient;
  • a polypropylene box to cover the test and minimize the influence of ambient temperature and humidity.
  • Example 3 Rapid diagnosis of tuberculosis and HIV in blood samples from a patient, using the detection, analysis and diagnosis kit described in the previous example.
  • a screening, analysis and diagnosis kit such as the one described in the previous example, was used to rapidly detect, analyze and diagnose tuberculosis and HIV, where whole blood samples from a patient were used to determine if there are antibodies against the pathogens that cause these diseases.
  • a sample of 40 mL of blood was obtained from the patient's finger, making a puncture, the sample was collected with a commercial automatic disposable pipette specific for this purpose and the collected sample was transferred to a tube with diluent , this mixture was homogenized and a volume of 30 ml was deposited on each disk (10), using a fixed volume doser, after which the test was covered with a polypropylene protective box to minimize the influence of ambient temperature and humidity and allowed to stand for 15 min.
  • the protective box was opened and an image of the test was captured with a "Smartphone" that has software developed for it, the flow pattern and agglutinations resulting from the test were analyzed to determine if the samples they contain the target circulating antibodies, see figure 14.
  • the software also performed an interpretation and presented the diagnosis result on the “Smartphone” screen.
  • the results obtained were sent together with contextual information from the test automatically via internet or SMS to the servers in the virtual cloud computing, where they were stored and made available for consultation.
  • the chromatographic paper functions both as a support and as a reaction matrix. To differentiate samples positive and negative for the presence of circulating antibodies against the pathogen, the three-dimensional structure in which the cellulose fibers are accommodated in the chromatographic paper is used.
  • a sample in which there are no circulating antibodies does not present an agglutination reaction and flows without obstruction through this network of fibers until the printed reservoir (1) is completely filled, while a sample in which there are circulating antibodies will react and generate clusters of red blood cells that will block the empty spaces within of the cellulose fiber network until completely blocking the flow of the sample, thus generating certain characteristic patterns as well as preventing the sample from completely filling the printed reservoir (1). Dilution of the whole blood sample obtained from the patient is necessary to allow it to flow smoothly across the chromatographic paper and to prevent the blood from spontaneously clotting.
  • the Tuberculosis and HIV diagnostic test had 6 deposits (1), 3 of them were conditioned to detect tuberculosis antibodies (T), 2 for (HIV) and a deposit (1 ) for control (t) that allows to ensure that the preparation and flow of the samples were carried out in a satisfactory way that serves as a method control ( Figure 14). Therefore, it should be noted that for different diseases different markers would be used and the number of printed deposits (1) would be variable.
  • the diagnostic test had a unique QR printed on it that served as an identifier of the result and that at the same time indicated to the software which test was treated, which disease or diseases were analyzed and which interpretation algorithm was used.
  • the Printed QR was captured and the software activated the photographic camera, showing guides for capturing an image of the test.

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Abstract

Depósito (1) útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés que comprende un sustrato laminar poroso (4), como papel, celulosa, polímeros, etc., y una serie de barreras hidrofóbicas verticales (6) y horizontales (3) así como, al menos, un sitio de reacción (5) donde se deposita un agente de detección y una muestra donde se desea detectar la sustancia de interés. La invención también se refiere a la prueba que incluye la utilización de uno o más depósitos junto con una referencia de identificación (13) y a un kit que la contiene, así como a los métodos para elaborar el depósito y la prueba. El método de análisis e interpretación de los resultados comprende fotografiar los depósitos de la prueba con un dispositivo electrónico, tal como un teléfono móvil, capturar otra serie de datos (referencia de identificación, hora, etc.) y analizar la imagen y los resultados obtenidos con un software adecuado.

Description

DEPÓSITO, PRUEBA. KIT Y MÉTODO PARA DETECTAR, ANALIZAR Y DIAGNOSTICAR SUSTANCIAS
CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN
La presente invendón se relaciona con los campos técnicos de la Biotecnología, Medicina, Química, Bioquímica, Electrónica y Tecnologías de la Información; ya que proporciona un depósito útil en la elaboradón de pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de Interés; también proporciona una prueba, kit y método para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés; así como un método para la fabricadón del depósito y prueba en cuestión.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Actualmente las pruebas de diagnóstico rápido de enfermedades tienen los inconvenientes de requerir personal, equipo e instalaciones especializadas que son escasas principalmente en lugares de recursos limitados como los países de ingresos bajos y medios; la gran mayoría requieren de medios de refrigeración para prolongar su vida útil, lo cual dificulta su traslado a largas distancias; requieren de periodos de horas o incluso días para obtener los diagnósticos; además de que en general tienen precios elevados para los pacientes debido a los altos costos para su fabricación y su procesamiento en el laboratorio.
El documento de patente US2010120061 (A) describe un dispositivo de prueba inmunocromatográfica rápida para la detección de un objetivo en una muestra, el cual comprende: a) una primera almohadilla liberadora de un conjugado de oro, que comprende oro coloidal conjugado con un primer anticuerpo o antígeno y, al menos, un oligonudeótido; y b) una segunda almohadilla de liberación de conjugado de oro, que comprende oro coloidal conjugado con, al menos, un oligonudeótido complementario a, al menos, un oligonudeótido del primer conjugado de oro coloidal; donde ambas almohadillas de liberación están ubicadas en diferentes posiciones dentro del dispositivo de prueba.
En otra realización, la invención del documento US2010120061 (A) se refiere a un dispositivo de prueba inmunocromatográfica rápida para la detección de un objetivo en una muestra, que comprende a) una primera almohadilla liberadora de conjugado de oro, que comprende oro coloidal conjugado con un primer anticuerpo o antígeno y al menos otro anticuerpo o antígeno, en el que dicho anticuerpo o antígeno adicional difiere de dicho primer anticuerpo o antígeno; y b) una segunda almohadilla de liberación de conjugado de oro, que comprende oro coloidal conjugado con, al menos, un anticuerpo o antígeno adicional, donde dicho anticuerpo o antígeno adicional es específico para, al menos, un anticuerpo o antígeno adicional del primer conjugado de oro coloidal; donde ambas almohadillas de liberación están ubicadas en diferentes posiciones dentro del dispositivo de prueba.
El documento US2010120061 (A) también se refiere a un método para la producción de un dispositivo de acuerdo con dicha Invención que comprende las etapas de: a) preparar una solución de oro coloidal; b) preparar un tampón de conjugación; c) dividir el tampón de conjugación dividiéndolo en un primer y un segundo matraz; d) añadir un anticuerpo de acuerdo con la presente invención al tampón de conjugación en el primer matraz; e) agregar solución de oro coloidal en cada matraz; f) añadir tampón estabilizador a cada matraz; g) concentrar cada conjugado; h) añadir un agente tensioactivo al primer conjugado y remojar la almohadilla conjugada de la hoja de fibra de vidrio en el conjugado; I) empapar otra almohadilla conjugada de lámina de fibra de vidrio en el segundo conjugado; j) impresión de líneas de muestra y control en la membrana; k) tarjetas de laminación; y I) cortar tarjetas en tiras. Dicho documento también se refiere a un kit para la detección de una enfermedad, que comprende, el dispositivo de acuerdo con la presente Invención y un manual. Por otra parte, el documento de patente CN203465275 (U) describe una tira de prueba de detección rápida para toxina T-2 (figura 1 ) en la que se usa: una primera capa de fibra de vidrio 1 ubicada en uno de los extremos de la tira de prueba, una segunda capa de fibra 2 impregnada con un anticuerpo estándar de oro de toxina T-2, una capa de película de celulosa 3 (membrana de nitrocelulosa), una capa de material absorbente de agua 4 (papel filtro), y una placa de soporte 7 hecha de una tira de plástico que sustenta secuencialmente de izquierda a derecha a las capas 1 , 2, 3 y 4; y se usa la fibra de anticuerpo de patrón oro; y sobre la película de celulosa 3 se agregó una banda de solución de proteína transportadora compatible con la toxina T-2 Ύ, y una banda con una solución de IgG de cabra anti-ratón con una transferencia de control T, y ambas bandas se dispusieron en paralelo entre si. La cinta de transferencia combinada es ''II''. Pero sus sitios de depósito de reacción no están delimitados por barreras hidrofóbicas.
Mientras que el documento de patente EP1478395 (figuras 1 y 2) describe un ¡nmunoensayo 10 que comprende un pocilio de muestra 12, una almohadilla de muestra 14, una almohadilla de etiqueta conjugada 16, una membrana de ensayo de flujo lateral o tira de detección 18, una almohadilla absorbente 20, una capa adhesiva 22, un soporte de plástico 24 y una carcasa de plástico 40. La almohadilla de muestra 14 se solapa con la almohadilla de etiqueta conjugada 16 para formar una primera zona de superposición 26. La almohadilla de etiqueta de conjugado 16 y la membrana 18 forman una segunda zona de superposición 28. La membrana 18 y la almohadilla absorbente 20 forman una tercera zona de superposición 30. Una muestra de fluido corporal no puede colocarse en el pocilio de muestra 12 y filtrarse hacia abajo a través de la almohadilla de muestra 14 y luego a través de la almohadilla de etiqueta conjugada 16 que contiene un marcador conjugado, por ejemplo, proteína A conjugada con oro coloidal. Las partículas de oro, que preferiblemente tienen un tamaño de diámetro en el intervalo de aproximadamente 20-55 nm, y más preferiblemente en el Intervalo de aproximadamente 40-45 nm, sirven como un colorante Indicador. La etiqueta del conjugado se une a los anticuerpos en la muestra para formar un complejo, y el complejo luego migra a lo largo de la membrana 18. En una realización preferida, los anticuerpos específicos de MTB se unen a una mezcla de, al menos, dos antígenos que están Inmovilizados en una ubicación discreta 32 en la membrana 18. La formación de este complejo de mezcla de antígeno- anticuerpo provoca que el colorante indicador precipite y forme una línea roja de color detectable (ilustrada como TI" en la figura 1 ), indicando un resultado positivo de que los anticuerpos específicos de MTB están presentes en la muestra. La figura 2 es una ilustración de una tira de prueba de Millipore Corporation (véase Mansfield, M. (1999), Una guía breve: Desarrollo de tiras de prueba inmunocromatográficas, Millipore Corporation, Bedford, MA) que se ha modificado de acuerdo con la presente invención.
Como se puede notar, los dispositivos de los documentos antes descritos, tienen configuración muy compleja, por los materiales que se requieren para su construcción y a pesar de que utilizan almohadillas para impregnarlas de muestras, sus sitios de reacción tampoco están delimitados por barreras hidrofóbicas, lo cual provoca derrames y desperdicios de muestras.
Con la finalidad de contrarrestar los inconvenientes antes mencionados, se ha desarrollado un depósito útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés; también se ha desarrollado una prueba, kit y método para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de Interés; así como un método para la fabricación del depósito y prueba en cuestión, cuyos detalles característicos se muestran claramente en la siguiente descripción detallada de algunas de sus realizaciones preferentes, y en las figuras que se acompañan a manera de ejemplos enunciativos pero no limitativos, donde:
La figura 1 es una vista en perspectiva convencional de un depósito útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, de acuerdo con la presente invención.
La figura 2 es una vista en planta superior del depósito de la presente
Invención. La figura 3 es un corte A-A’ del depósito útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de Interés.
La figura 4 es una vista en planta inferior de dicho depósito.
La figura 5 es una vista en perspectiva convencional del depósito en cuestión, donde se observa la aplicación de una pared que circunda por completo a dicho depósito.
La figura 6 es una vista en perspectiva convencional de tal depósito, donde se observa la aplicación de un soporte.
La figura 7 es una vista en planta superior de una prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, conformada de 6 depósitos de acuerdo con la propuesta de la presente invención.
La figura 8 es un corte B-B’ de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, según la presente invención.
La figura 9 es una vista en planta inferior de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, en cuestión.
La figura 10 es una vista en perspectiva convencional de dicha prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés.
La figura 11 es una vista en perspectiva convencional de la prueba en cuestión, donde se observa la adición de un soporte y un disco de fibra de vidrio que contiene un agente de detección, en cada sitio de reacción.
La figura 12 es una vista en planta superior de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés de la presente invención, donde se observa el soporte y discos de fibra de vidrio, ya adheridos.
La figura 13 es un corte C-C’ de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés de la figura anterior.
La figura 14 es una vista en planta superior de una prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés en cuestión, utilizada para detectar, analizar y diagnosticar tuberculosis y VIH. OBJETO DE LA INVENCIÓN
Un objeto de la presente invención es un depósito (1 ) útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés.
La invención también tiene como objeto una prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, conformada por al menos, un depósito (1 ) como el que propone la presente Invención.
Esta invención también tiene como objeto un kit para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, que comprende al menos una prueba de acuerdo con la presente Invención.
Otro objeto que tiene la presente invención es un método para la elaboración del depósito (1 ) útil en la elaboración de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés.
Un objeto más de la presente Invención es un método para la elaboración de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés.
Otro objeto más de la presente invención es un método de análisis e interpretación de los resultados arrojados por la prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés; y como“sustancia de interés", se debe de entender como cualquier sustancia que se pueda aplicar en estado líquido o semilíquido para ser detectada, analizada y diagnosticada; o sea que dicha “sustancia de interés" puede ser líquida o semilíquida por naturaleza, sólida o semisóllda diluida en un medio líquido. Un ejemplo de uso de la prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés de acuerdo con la presente invención, es que puede ser útil en un diagnóstico rápido de enfermedades que pueden ser detectadas en cualquier sustancia de Interés; en este caso tales sustancias de Interés pueden ser fluidos líquidos de un paciente animal incluyendo al humano, para determinar si existen anticuerpos contra los agentes patógenos que causan estas enfermedades. Por ejemplo, los fluidos líquidos pueden ser: sangre, suero, plasma, lágrima, saliva, sudor, semen, etc.; mientras que las enfermedades pueden ser: enfermedades infecciosas (tuberculosis, VIH, dengue, zlka, influenza, sífilis, gonorrea, etc.) y enfermedades crónico degenerativas (diabetes, lupus, artritis reumatoide, cáncer, cardiovasculares, entre otras).
Depósito (1) útil en la fabricación de pruebas para detectar, analizar v/o diagnosticar sustancias de interés
Por lo tanto, en primera Instancia, la presente invención se refiera a un depósito (1) útil en la fabricación de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés; el cual se conforma de, un sustrato laminar poroso (4) que tiene, al menos, una cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos; donde en una realización, el sustrato laminar poroso (4) es parte de una pieza laminar porosa (2), la cual puede ser de celulosa, papel cromatográfico, papel filtro, polímeros, membrana de nitrocelulosa, por citar algunos ejemplos.
El depósito (1 ) se conforma de barreras o paredes, más específicamente barreras o paredes hidrofóbicas, dispuestas entre sí, de tal manera que configuren al depósito (1) de la presente invención. A manera de ejemplo, las barreras hidrofóbicas pueden ser: una base laminar hidrofóbica horizontal (3) que sella una de las caras laminares del sustrato laminar poroso (4), preferentemente aquella cara laminar que no permite un mejor flujo de fluidos líquidos; y una pared hidrofóbica vertical (6) que circunda una porción del sustrato laminar poroso (4). Una realización de la base laminar hidrofóbica horizontal (3) y la pared hidrofóbica vertical (6), es cuando son fabricadas con materiales hidrofóbicos, preferentemente, materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros y/o una combinación entre ellos, por citar algunos ejemplos.
Una realización más preferente, de la base laminar hidrofóbica horizontal (3) es cuando es un recubrimiento impreso de tinta de cera sólida, preferentemente tinta de cera sólida color Cían con una saturación de un 66 %; y la pared hidrofóbica vertical (6) es una línea impresa de tinta de cera sólida negra con una saturación de un 100%; por lo tanto, la base laminar (3) y pared vertical (6) son impresos con una impresora que utiliza tinta de cera; para después ser sometidos a una temperatura de fundición, para derretirse y penetren por los poros del sustrato (4) hasta hacer contacto entre sí y formar dicho depósito (1 ) sellado para evitar la fuga de muestras de las sustancias de interés. La temperatura de fundición puede ser alrededor de 121 °C, por ejemplo, ya que esto dependerá del tipo de cera y sustrato.
Dicho depósito (1 ) útil en la fabricación de pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias tiene, al menos, un sitio de reacción (5) sobre una porción de la cara laminar del sustrato (4) que permite un mejor flujo de fluidos líquidos, preferentemente. En el sitio de reacción (5) se deposita un agente de detección y una muestra de la sustancia de interés, para que se lleve acabo una reacción. Una modalidad preferente del depósito (1 ) es cuando el sitio de reacción (5) está en el centro de dicho depósito (1), para que haya una distribución equilibrada de la muestra de la sustancia de interés.
Opcionalmente, el sitio de reacción (5) puede comprender un medio de retención (7) de fluidos para reducir la velocidad de dispersión de la muestra y retenerla más tiempo en el sitio de reacción para que se dé una óptima reacción. Un ejemplo de este medio de retención (7) es un aro hidrofóbico conformado de una pared vertical circular (7) fabricada también con materiales hidrofóbicos, preferentemente, materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros y/o una combinación entre ellos, por citar algunos ejemplos.
Una realización de la pared vertical circular (7) puede ser una línea impresa de tinta de cera sólida; donde dicha tinta de cera sólida es color Cían con una saturación de un 50 %, también sometida a una temperatura de fundición, para derretirse y penetrar por los poros del sustrato (4).
En cuanto a la forma de dicho depósito (1 ), esta debe ser la más conveniente para poder recibir cualquier tipo de agente de detección y sustancia de interés sometidos a la reacción. Por ejemplo, una configuración conveniente puede ser desde un solo carril longitudinal lineal con un sitio de reacción (5) circular ubicado en la parte media de dicho carril longitudinal, y las extremidades del carril es el área por donde pueden fluir las muestras durante el análisis.
Sin embargo, una configuración más conveniente del depósito (1 ) es cuando esta configuración comprende, al menos, dos carriles longitudinales, lineales y cruzados entre si en sus puntos medios, para formar una cruz, una equis o un asterisco; y en el punto donde se cruzan se forma el sitio de reacción (5) y las extremidades de los carriles son las áreas por donde pueden fluir las muestras durante la reacción.
Una modalidad más del presente depósito (1) es cuando los carriles tienen, al menos, un ensanchamiento (6') en cada brazo de los carriles, para ayudar al desplazamiento de las muestras de las sustancias de interés.
Otra realización más del depósito (1), de la presente invención, es cuando además comprende, una pared vertical (8) que lo circunda; por lo que dicha pared vertical (8) se sustenta en una porción extema al depósito (1 ), de la pieza laminar porosa (2), penetrando verticalmente por los poros de dicha porción extema de la pieza laminar porosa (2). Una realización de esta pared hidrofóbica vertical (8), es cuando es fabricada con materiales hidrofóbicos, preferentemente materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros y/o una combinación entre ellos, por citar algunos ejemplos. Esta pared vertical (8) puede ser una línea impresa de cera negra con saturación al 100 %; y sirve de referencia para delimitar el área del depósito (1 ) cuando se toma una imagen por fotografía, y que por medio de un software haya un reconocimiento de la información de la detección, análisis y diagnóstico realizada en el depósito (1).
Otra modalidad de dicho depósito (1 ) es cuando además comprende un soporte (11 ) para facilitar su manipulación y conservación, donde el depósito (1) se adhiere sobre el soporte (11) por medio de la cara laminar del sustrato laminar poroso (4) donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando la otra cara del depósito (1 ) expuesta para aplicar los materiales de reacción. El soporte (11 ) puede ser una base estructural, como por ejemplo un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes del depósito (1 ); donde el material resistente a la humedad puede ser poliestireno, por citar algún ejemplo.
Prueba para detectar, analizar v/o diagnosticar sustancias de interés La presente invención también tiene como objeto una prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, la cual se conforma de, al menos, un depósito (1 ) útil en la fabricación de pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés como el descrito anteriormente. La prueba para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés de la presente Invención también comprende, al menos, un agente de detección, el cual se coloca sobre el sitio de reacción (5) del depósito (1 ); y si dicho sitio de reacción (5) tiene un medio de retención (7) de fluidos, entonces el agente de detección se coloca sobre el medio de retención (7); un ejemplo del agente de detección es aquél reactivo o sustancia que sea útil para detectar y/o diagnosticar alguna información y/o condición presente en una sustancia de interés; donde tal información y/o condición a detectar y/o diagnosticar, puede ser la existencia de patógenos, anticuerpos, enfermedades, sustancias, sustancias estimulantes, sustancias contaminantes, por citar algunas de manera enunciativas. Específicamente en cuanto a las enfermedades, se trata de un agente de detección para detectar y/o diagnosticar enfermedades infecciosas, enfermedades crónico-degenerativa, entre otras.
Por lo tanto, más específicamente, el reactivo o sustancia puede ser una proteína con actividad biológica, como por ejemplo una proteína de fusión, siendo una realización preferente cuando la proteína de fusión comprende: un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a una enfermedad infecciosa.
Entre las enfermedades infecciosas que se pueden detectar, analizar y diagnosticar con la prueba de la presente invención están la tuberculosis, VIH, dengue, zika, influenza, sífilis, gonorrea, etc.; y las enfermedades crónico- degenerativa puede ser diabetes, lupus, artritis reumatolde, cáncer, cardiovasculares, entre otras.
El agente de detección que detecta y/o diagnostica una enfermedad infecciosa puede ser una proteína, más específicamente una proteína de fusión que genera una reacción de aglutinación ex vivo; y aún más específicamente, un ejemplo de la proteína de fusión es aquella que comprende un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a una enfermedad, la cual puede ser tuberculosis o VIH. Esta proteína de fusión (quimérica) es la parte central de la prueba de la presente invención, la cuál en presencia de anticuerpos específicos de la enfermedad, se genera una reacción de hemoaglutinación ex vivo que involucra a dichos anticuerpos, lo cuál puede ser utilizado como indicador visual de la presencia de anticuerpos en la muestra. Por otro lado, en una muestra negativa no se llevará a cabo la reacción de reconocimiento proteína quimérica-anticuerpo, por lo que no sucederá una reacción de hemoaglutinación, lo cuál puede ser interpretado como ausencia de anticuerpos en la muestra. Cabe agregar que el agente de detección se puede aplicar directamente sobre el sitio de reacción (5) o medio de retención (7); sin embargo, dicho agente de detección se puede aplicar por medio de un elemento de aplicación (10); donde dicho elemento de aplicación (10) puede ser un disco de fibra de vidrio, donde se Impregna el agente de detección.
La prueba de detección, análisis y diagnóstico, de la presente invención, puede comprender una referencia de identificación (13) ubicada adyacente al área del(os) depósito(s) (1 ) para dar una Identidad única a cada prueba. Por lo que una referencia de Identidad (13) contendrá un número secuencial único para cada prueba; lo cual también es muy útil para cuando se desea hacer consultas o revisiones posteriores de dichas pruebas. Algunos ejemplos de referencia de identificación (13) pueden ser un código lineal, código QR, código ISBN, código bidimenslonal, código EAN, código GTIN, código UPC, entre otros. La referencia de identificación (13) se prefiere que sea impresa dentro de un área (12) delimitada por una línea impresa en la pieza laminar porosa (2).
Una variante de la prueba de detección, análisis y diagnóstico en cuestión, es cuando comprende una pared vertical (9) que circunda a todos los depósitos (1 ) que la conforman y a la referencia de identidad (13); una realización de esta pared hidrofóbica vertical (9), es cuando es fabricada con materiales hidrofóblcos, preferentemente materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros y/o una combinación entre ellos, por citar algunos ejemplos; en este caso, dicha pared vertical (9) es una línea de tinta de cera negra con saturación al 100% que se imprime en el borde perimetral de la pieza laminar porosa (2), penetrando verticalmente por los poros de dicha pieza laminar (2). Esta pared vertical (9) sirve de referencia para la toma de una fotografía de dicha prueba cuando se va analizar con un software los resultados de dicha prueba.
Si el o los depósitos (1 ) carecen de soporte (11 ), entonces la prueba en cuestión puede comprender un soporte (11 ) para facilitar su manipulación y conservación; donde dicha prueba se adhiere sobre el soporte (11 ) por medio de la cara laminar de la pieza laminar porosa (2) donde está el recubrimiento hidrafóbico (3), quedando la abertura del depósito (1) libre para poderle aplicar los materiales de reacción. Dicho soporte puede ser una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes de la prueba; siendo el material resistente a la humedad el poliestireno.
Hay muchas maneras de poder observar los resultados de la detección del contenido de las sustancias de interés, lo cual depende del tipo de agente de detección y sustancia de interés a analizar; por ejemplo, puede ser una manera visual por medio de coiorimetría, aglutinación, textura, etc.; o por medición, como por ejemplo pH, temperatura, etc.
La prueba de detección, análisis y diagnóstico, obtenida en la presente invención tiene las siguientes ventajas:
- Los resultados son obtenidos en un tiempo máximo de 15 minutos.
- No se requiere de refrigeración ni cadena fría, para la conservación y transporte de las pruebas en cuestión.
- Pueden ser usadas por personal con entrenamiento técnico limitado.
- No requieren de equipo de laboratorio.
- Pueden ser utilizados Incluso en lugares muy remotos sin acceso a laboratorios y técnicos especializados.
- Tienen un costo muy bajo de fabricación, por su sencilla configuración.
- Entre otras ventajas.
Kit para detectar, analizar v diagnosticar, sustancias de interés
La prueba de detección, análisis y diagnóstico de sustancias de interés, de la presente invención, puede ser parte de cualquier kit para detectar, analizar y diagnosticar, de manera rápida y confiable, sustancias de interés; por lo que dicho kit es otro objeto de la presente invención. Un ejemplo de este kit, puede ser un kit para detectar, analizar y diagnosticar,
al mismo tiempo enfermedades infecciosas y enfermedades crónico
degenerativas, el cual comprende:
- Al menos, una prueba de detección, análisis y diagnóstico de sustancias
de interés, como la que propone la presente invención;
- Un tubo de centrífuga de 600 microlitros;
- Un dlluyente, por ejemplo, un amortiguador PBS;
- Una pipeta de captura de fluido (para extraer la muestra) de un paciente;
- Una minl pipeta de 30 micro litros para depositar la muestra de fluido;
- Una protección para cubrir la prueba y minimizar la influencia de la
temperatura y humedad ambiental, como por ejemplo una caja de
polipropileno; y
- Un software, para analizar las muestras de los fluidos.
Opcionalmente, el kit en cuestión puede comprender:
- Una lanceta para pinchar al paciente, cuando la muestra del fluido es
sangre; y
- Una solución desinfectante en caso de pinchar.
Este es meramente un ejemplo para un kit que al mismo tiempo detecta
tuberculosis y VIH, por lo que sus componentes son variables, dependiendo del
tipo y número de enfermedades o condiciones a detectar, analizar y
diagnosticar.
Método para la elaboración de un depósito (1) útil en la fabricación de pruebas
para detectar, analizar v/o diagnosticar sustancias de interés La presente invención, por lo tanto, comprende un método para la elaboración
de un depósito (1 ) útil en la construcción de pruebas para detectar, analizar y/o
diagnosticar sustancias de Interés, dicho método comprende las siguientes
etapas: i A. Seleccionar un sustrato laminar poroso (4) que tiene, al menos, una cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos; el cual puede ser parte de una pieza laminar porosa (2), la cual se selecciona del siguiente grupo: celulosa, papel cromatográfico, papel filtro, polímeros, y membrana de nitrocelulosa.
B. Incorporar una base laminar hidrofóbica horizontal (3) para sellar una de las caras laminares, del sustrato laminar poroso (4), preferentemente aquella que no permite un mejor flujo de fluidos líquidos;
C. Aplicar una pared hidrofóbica vertical (6) circundando al sustrato laminar poroso (4), penetrando transversalmente por los poros de dicho sustrato
(4);
D. Confeccionar, al menos, un sitio de reacción (5) sobre una porción de la cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos, del sustrato laminar (4), donde se deposita un agente de detección y una muestra de la sustancia de interés; se prefiere que dicho sitio de reacción se ubique en el centro del depósito (1 ).
E. Y configurar de manera conveniente el depósito (1 ) para una reacción adecuada y confiable, según el tipo de agente de análisis y la sustancia a analizar.
Una realización del método es que además comprende, añadir un medio de retención (7) de fluidos que reduce la velocidad de dispersión de la muestra, dentro del sitio de reacción (5), donde el medio de retención, es un aro hidrofóbico conformado de una pared hidrofóbica vertical circular (7) que penetra transversalmente por lo poro del sustrato (4).
Otra realización más del método en cuestión, es cuando además comprende agregar una pared hidrofóbica vertical (8) que circunda completamente al depósito (1 ), la cual penetra transversalmente por los poros del sustrato laminar (4); esta pared (8) sirve de referencia para la toma de una imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer la Información de la prueba realizada en el depósito (1 ). Una modalidad más de dicho método de la presente invención, es cuando la base laminar hidrofóblca horizontal (3), pared hidrofóbica vertical (6), pared hidrofóbica vertical circular (7) y pared hidrofóbica vertical (8), son fabricadas con materiales hidrofóbicos, preferentemente materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, entre otros, y una combinación entre ellos.
Una realización más específica del método de acuerdo con la presente invención, es cuando la base hidrofóblca horizontal (3) es un recubrimiento inferior Impreso con tinta de cera sólida, preferentemente tinta de cera sólida color Cían con una saturación de un 66 %; mientras que las paredes hidrofóbicas verticales (6 y 8) son líneas Impresas con tinta de cera sólida, de preferencia tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %; y la pared hidrofóbica vertical y circular (7) es una línea impresa con tinta de cera sólida, de preferencia tinta sólida color clan con una saturación de un 50 %.
Una realización más de dicho método, es que además comprende someter a una temperatura de fundición a la base hidrofóbica horizontal (3), paredes hidrofóbicas verticales (6 y 8) y pared hidrofóbica vertical y circular (7), para que éstas se derritan y penetren por los poros del sustrato (4); donde la temperatura de fundición puede ser alrededor de 121 °C, por ejemplo, ya que esto dependerá del tipo de cera y sustrato.
Una realización del método para la elaboración de un depósito (1 ), es cuando el depósito (1 ) es realizado como un carril longitudinal lineal con su sitio de reacción (5) circular ubicado en la parte media de dicho carril longitudinal. Aunque también se prefiere que el depósito (1) sea realizado con, al menos, dos carriles longitudinales, lineales y cruzados entre sí en sus puntos medios, para formar una cruz, una equis o un asterisco; y en el punto donde se cruzan se forma el sitio de reacción (5) y las extremidades de los carriles es el área por donde pueden fluir las muestras durante la reacción. Una modalidad del método en cuestión, es cuando los carriles se les hace, al menos, un ensanchamiento (6') en cada brazo, para ayudar al desplazamiento de las muestras de las sustancias de interés. Otra realización del método, es que al depósito (1) se le provee de un soporte (11) para facilitar su manipulación y conservación; donde dicho depósito (1) se adhiere sobre el soporte (11) por medio de la cara laminar, del sustrato laminar poroso (4), donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando la abertura del depósito (1) expuesta para aplicar los materiales de reacción. El soporte (11) puede ser una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes del depósito (1), por ejemplo, poliestireno.
Método para elaborar una prueba para detectar, analizar v diagnosticar sustancias de interés
Un objeto más de la presente invención es un método elaborar una prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, el cual comprende las siguientes tapas:
A. Fabricar, al menos, un depósito (1) útil en pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de Interés, de conformidad con el método de fabricación de un depósito (1) descrito en la presente invención, en una pieza laminar porosa (2).
B. Aplicar un agente de detección colocado en el sitio de reacción (5) del depósito (1), para detectar y/o diagnosticar alguna información y/o condición presente en una sustancia de interés, como por ejemplo la existencia de patógenos, anticuerpos, enfermedades, sustancias, sustancias estimulantes, y sustancias contaminantes, entre otros.
C. Agregar una referencia de identificación única (13) sobre la cara laminar de la pieza laminar porosa (2), donde está el depósito de análisis (1), pero adyacente al área donde está dicho depósito (1). La referencia de identificación única (13) puede ser: un código lineal, código QR, código ISBN, código bidimensional, código EAN, código GTIN, código UPC, entre otros.
D. E incorporar una pared hidrofóbica vertical (9) que circunda el depósito (1 ) y la referencia de identificación única (1 ), penetrando verticalmente por sus poros de la pieza laminar porosa (2), dicha pared hidrofóbica (9) sirve de referencia para la toma de una imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer ia información de la prueba realizada; por lo qué, se recomienda ubicarla la pared hidrofóbica vertical (9) en el borde perimetral de la pieza laminar porosa (2).
Una modalidad del método en cuestión es cuando el agente de detección utilizado es una proteína de fusión, siendo preferible una proteína quimérica, la cual puede comprender, un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a una enfermedad; por ejemplo, un antígeno específico para detectar anticuerpos anti-tuberculosis y anti-VIH, u otra enfermedad.
Una realización del método en cuestión, es cuando la pared hidrofóbica vertical (9) es fabricada con materiales hidrofóbicos, preferentemente materiales hidrofóbicos sólidos, tales como: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, etc., y una combinación entre ellos.
Otra modalidad más de este método, es cuando la pared hidrofóbica vertical (9) es una línea impresa con tinta de cera sólida, preferentemente tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %.
Una realización más de este método, es que además comprende someter a una temperatura de fundición a la pared hidrofóbicas vertical (9) para que se derrita y penetren por los poros del sustrato (4); donde la temperatura de fundición puede ser alrededor de 121 °C, por ejemplo, ya que esto dependerá del tipo de cera y sustrato. Una realización más de dicho método de la presente invención, es cuando además comprende, incluir un medio (10) para aplicar el agente de detección, en el sitio de reacción (5) del depósito (1 ); donde dicho medio (10) para aplicar el agente de detección, puede ser un disco de fibra de vidrio, donde se impregna dicho agente, por ejemplo.
Dicho método también puede comprender, proveer a la prueba en cuestión, un soporte (11) para facilitar su manipulación y conservación; donde la prueba se adhiere sobre el soporte (1 1) por medio de la cara laminar, de la pieza laminar porosa (2), donde está el recubrimiento hldrofóbico (3), quedando la abertura del depósito (1 ) expuesta para la aplicación los materiales de reacción. Dicho soporte (11 ) es una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes de dicha prueba, como por ejemplo el poliestireno.
Método para detectar, analizar v/o diagnosticar sustancias de interés
La presente invención también comprende como un objeto más, a un método para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, el cual comprende las siguientes etapas:
A. Colocar, al menos, una muestra de una sustancia de interés sobre el sitio de reacción (5) de, al menos, un depósito (1 ) de una prueba para la detección, análisis y diagnóstico como la que propone la presente invención.
B. Dejar que la muestra de la sustancia de interés reaccione con el agente de detección, durante el tiempo necesario que requiera para que se lleve acabo dicha reacción, el tiempo necesario de reacción puede ser de 10 a 15 min.
C. Capturar la referencia de identificación (13) de la prueba en cuestión, con un dispositivo electrónico capaz de capturar una imagen y procesarla con medios electrónicos, como por ejemplo, un teléfono móvil inteligente, específicamente un "Smartphone". Dicho dispositivo electrónico ya debe tener integrado un software, con el cual automáticamente aparece en pantalla la cámara para capturar la referencia de Identificación (13) como un código QR que contiene información sobre la fecha de fabricación, tipo de prueba y sirven como identificador único para cada tarjeta, además de que analiza la geometría de ésta y si no coincide con la que espera para el tipo de prueba que espera encontrar debido al QR, no analiza la tarjeta. El código QR contiene también información que le Indica al software qué enfermedad se va a analizar y cuántos depósitos (1 ) se van a leer en la prueba.
D. Una vez capturada la referencia de identificación (13), el software pasa a la pantalla para fotografiar el área de los depósitos (1 ) de la prueba y posteriormente pasa a una pantalla donde debe introducirse información del paciente. Para la captura de la imagen de la prueba, en la pantalla de la cámara aparece un área guía delimitada con lineas, las cuales deben coincidir con las líneas de la pared vertical (9), para asegurar que la distancia entre la cámara y prueba es la suficiente para obtener una imagen con una resolución de buena calidad para poder llevar a cabo el análisis de la información.
E. Capturar una información contextual como la hora y ubicación geográfica (de manera automática) e información del paciente como género y edad (de manera manual) y llevar a cabo un procesamiento de la información obtenida.
F. Una vez que toda la información ha sido capturada, el software lleva a cabo el análisis de la imagen fotografiada en la etapa D, y presenta un resultado en la pantalla del "Smartphone” donde indica si la muestra analizada tiene o no cierto contenido o condición, así como sus cantidades o concentraciones. Dicho programa de computadora tiene un algoritmo entrenado con "machine leaming” y usando inteligencia artificial para determinar si los resultados de la prueba corresponden a que la sustancia de interés tiene o no cierto contenido o condición, así como sus cantidades o concentraciones. El software analiza la imagen para detectar los depósitos (1) y los resultados de la reacción dentro de estos, los extrae y por medio del algoritmo de inteligencia artificial entrenado por "machine leaming" usando miles de ejemplos determina el resultado en cada depósito (1) y usando un algoritmo lógico es capaz de determinar en base a múltiples marcadores para una sola condición y la combinación entre estos, si la muestra proveniente del paciente es positiva o negativa a la enfermedad o condición que se busca detectar, analizar y/o diagnosticar.
G. Y una vez terminado el proceso de análisis de una muestra, el usuario puede iniciar el proceso de análisis de otra muestra con presionar un botón en la pantalla del teléfono móvil, mientras que el software de manera automática inicia el envío de los resultados obtenidos en la prueba junto con el identificador QR, información contextual de ubicación, hora y la información capturada del paciente a un servidor en la nube virtual donde se archiva para futura consulta o análisis estadístico.
Cabe Indicar que este método para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés puede tener ligeras variaciones en cuanto al orden de sus etapas, e incluso prescindir de alguna de ellas, lo cual dependerá, del agente de detección, de la sustancia a detectar, analizar y diagnosticar, entre otros factores.
EJEMPLOS
Los siguientes ejemplos, junto con las figuras incluidas, ilustran algunas de las realizaciones preferentes de la presente invención, por lo que son meramente ilustrativos y no deben ser considerados como una limitante para a los alcances de la invención.
Ejemplo 1. Prueba para detección, análisis y diagnóstico de tuberculosis y VIH, simultáneamente, en muestras de sangre.
Se elaboró una prueba para diagnosticar tuberculosis y VIH simultáneamente, la cual comprendió 6 depósitos de detección, análisis y diagnóstico (1 ) abiertos en su parte superior, los cuales fueron delimitados por barreras hidrofóbicas impresas en un papel cromatográfico (2); donde una barrera es una base laminar hidrofóbica horizontal (3) que selló la cara laminar, del papel cromatográfico (2) que no tenía un mejor flujo de fluidos líquidos; la otra barrera es una pared hidrofóbica vertical (6), la cual circundó al papel cromatográfico (2), penetrando por los poros de dicho papel (2); quedando una porción de papel cromatográfico (4) dentro de las barreras hidrofóbicas.
La base laminar hidrofóbica horizontal (3) y pared hidrofóbica vertical (6), fueron impresas en el papel cromatográfico (2) con tinta de cera sólida color Cían con una saturación de un 66 %; y tinta de cera sólida negra con saturación al 100 %, respectivamente. Ambas paredes fueron sometidas a 121 °C para derretirse la cera y penetrar por los poros del papel cromatográfico (2).
Los depósitos (1 ) tuvieron una configuración de dos carriles longitudinales, rectos y cruzados entre sí en sus puntos medios, formando una equis; y en el punto donde se cruzaron se formó un sitio de reacción (5) y las extremidades de los carriles fueron las áreas por donde las muestras se dispersan durante la reacción. A los carriles se les proveyó de un ensanchamiento (6’) en cada brazo, para ayudar al desplazamiento de las muestras de sangre a diagnosticar.
Dentro de cada sitio de reacción (5) se imprimió un aro hidrofübico (7), el cual fue una línea impresa de tinta de cera sólida color Clan con una saturación de un 50 %; y también se sometió a 121 °C para que la cera se derrita y penetre por los poros del papel cromatográfico (2).
En la figura 14 se ilustra la designación de las enfermedades a diagnosticar en los respectivos depósitos (1), donde tres depósitos (1 ) fueron destinados para diagnosticar tuberculosis (T), dos depósitos (1 ) para diagnosticar virus de Inmunodeficiencia humana (VIH), y un depósito (1) sin diagnosticar ninguna enfermedad, como testigo (t).
Un disco de fibra de vidrio (10) impregnado con una proteína de fusión conformada de un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a tuberculosis se puso sobre el aro (7) de cada depósito
(1 ) asignado para diagnosticar tuberculosis (T); y un disco de fibra de vidrio (10) impregnado con una proteína de fusión conformada de un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a VIH se colocó sobre el aro (7) de cada depósito (1 ) asignados para diagnosticar VIH, ver figura 14.
La proteína de fusión se depositó e inmovilizó por medio de una impresora piezoeléctrica sobre los discos de fibra de vidrio (10) y se incubó a 55 °C durante 30 min, se usó este material y este tratamiento ya que se buscó minimizar la unión inespecífica y espontánea de la proteína de fusión a la matriz de la pieza laminar porosa (2) con el fin de maximizar la proteína de fusión disponible para la reacción de inmuno-reconocimiento al momento de añadir la muestra a analizar. Una vez inmovilizada la proteína quimérica en los discos (10), estos se adhirieron en cada uno de los sitios de reacción (5) correspondientes a la sustancia a analizar. Al momento de ejecución de la prueba, la muestra de sangre se depositó sobre el disco de fibra de vidrio (10) y donde hubo turbulencia generada por el flujo transversal de la muestra al pasar a través del disco (10) re-movilizó la proteína de fusión inmovilizada, lo que provocó que esta se incorporara con la muestra para permitir que entre en contacto con los anticuerpos del paciente y se lleve a cabo la reacción de reconocimiento.
Cada depósito (1 ) fue circundado con una pared hidrofóbica vertical (8) impresa de tinta de cera sólida negra con saturación al 100%; esta pared hidrofóbica (8) sirvió de referencia para delimitar el área de cada depósito (1 ) cuando se toma una imagen con un dispositivo fotográfico para después ser analizado con un software para la interpretación de la información de la prueba realizada en el depósito (1 ).
Una pared vertical (9) se imprimió con tinta negra sólida con una saturación al 100% en el borde perimetral del papel cromatográfico (2), para servir de referencia para la toma de una imagen con una cámara fotográfica de un dispositivo móvil, para después con un software reconocer la información de la prueba de detección, análisis y diagnóstico.
Un código QR (13) se Imprimió posteriormente sobre la misma cara laminar donde están impresos los depósitos (1 ), del papel cromatográfico (2), pero adyacente al área donde están dichos depósitos (1), el cual sirve para ser leído y conocer la información de la prueba en cuestión.
La prueba se adhirió sobre un soporte de poliestireno (11), por medio de la cara laminar, del papel cromatográfico (2), donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando las aberturas de los seis depósitos (1 ) libre para poderle aplicar los materiales de reacción.
Ejemplo 2. Kit para la detección, análisis y diagnóstico de tuberculosis y VIH.
Se configuró un kit para la detección, análisis y diagnóstico de tuberculosis y VIH, el cual comprendió:
- Una prueba para la detección, análisis y diagnóstico de sustancias, como la descrita en el ejemplo 1 ;
- Un tubo de centrífuga de 600 microlitros;
- 160 microlitros de un diluyente, por ejemplo, un amortiguador PBS;
- Una pipeta de captura de fluido (para extraer la muestra) de un paciente;
- Una mini pipeta de 30 microlitros para depositar la muestra de fluido; y
- Un software, para analizar las muestras de los fluidos.
- Una lanceta para pinchar al paciente, cuando la muestra del fluido es sangre;
- Una solución desinfectante en caso de pinchar; y
- Una caja de polipropileno para cubrir la prueba y minimizar la influencia de la temperatura y humedad ambiental.
Ejemplo 3. Diagnóstico rápido de tuberculosis y VIH en muestras de sangre de un paciente, utilizando el kit de detección, análisis y diagnóstico descrito en el ejemplo anterior. §e usó un kit de detección, análisis y diagnóstico, como el descrito en el ejemplo anterior, para detectar, analizar y diagnosticar rápidamente tuberculosis y VIH, donde se utilizaron muestras de sangre completa de un paciente para determinar si existen anticuerpos contra los agentes patógenos que causan estas enfermedades.
Para la ejecución de la prueba, se obtuvo una muestra de 40 mL de sangre del dedo del paciente, haciéndole una punción, la muestra se colectó con una pipeta desechadle automática comercial específica para este fin y se transfirió la muestra colectada a un tubo con diluyente, esta mezcla se homogenizó y depositó un volumen de 30 ml sobre cada disco (10), usando un doslficador de volumen fijo, tras lo cual se cubrió la prueba con una caja protectora de polipropileno para minimizar la influencia de la temperatura y humedad ambiental y se dejó reposar durante 15 min. Una vez transcurrido este tiempo, se abrió la caja protectora y se capturó una imagen de la prueba con un “Smartphone" que tiene un software desarrollado para ello, se analizó el patrón de flujo y de aglutinaciones resultantes de la prueba para determinar si las muestras contienen los anticuerpos circulantes objetivo, ver figura 14. El software también realizó una interpretación y presentó el resultado del diagnóstico en la pantalla del“Smartphone". Los resultados obtenidos fueron enviados junto con información contextual de la prueba de manera automática vía interet o SMS a los servidores en la nube virtual informática, en donde se almacenaron y quedaron disponibles para su consulta. Como se puede ver, el papel cromatográfico funciona a la vez como soporte y como matriz de reacción. Para diferenciar muestras positivas y negativas a la presencia de anticuerpos circulantes contra el patógeno, se aprovecha la estructura tridimensional en la que se acomodan las fibras de celulosa en el papel cromatográfico. Una muestra en la que no hay anticuerpos circulantes no presenta una reacción de aglutinación y fluye sin obstrucción a través de esta red de fibras hasta llenar por completo el depósito (1 ) impreso mientras que una muestra en la que sí existen anticuerpos circulantes reaccionará y generará cúmulos de glóbulos rojos que bloquearán los espacios vacíos dentro de la red de fibras de celulosa hasta bloquear por completo el flujo de la muestra, generando de esta manera ciertos patrones característicos además de impedir que la muestra llene por completo el depósito (1 ) impreso. La dilución de la muestra de sangre completa obtenida del paciente es necesaria para permitir que esta fluya sin problemas de manera transversal en el papel cromatográfico y para evitar que la sangre se coagule espontáneamente.
Como ya se mencionó en el ejemplo 1, la prueba para diagnóstico de Tuberculosis y VIH se le imprimieron 6 depósitos (1 ), 3 de ellos se acondicionaron para detectar anticuerpos de tuberculosis (T), 2 para (VIH) y un depósito (1 ) para testigo (t) que permite asegurar que la preparación y flujo de las muestras se realizaron de manera satisfactoria que sirve como control del método (Figura 14). Por lo tanto, cabe señalar que para diferentes enfermedades se utilizarían diferentes marcadores y el número de depósitos (1 ) impresos sería variable.
Si las reacciones generan aglutinación en los depósitos (1 ) significa que las muestras sí tienen anticuerpos de tuberculosis, como sucedió en los depósitos (1 ) identificados con la letra“T; en cambio si no hay reacción de aglutinación quiere decir que la muestra no contiene anticuerpos de VIH como sucedió en los depósitos (1 ) señalados con la expresión VIH, en la figura 14.
La prueba de diagnóstico tuvo impreso un QR único que sirvió como identificador del resultado y que al mismo tiempo le Indicó al software de qué prueba se trató, qué enfermedad o enfermedades se analizaron y qué algoritmo de interpretación se utilizó. Para la lectura e interpretación de los resultados de la prueba, siguiendo las instrucciones de la aplicación y operando dentro de ésta, se capturó el QR Impreso y el software activó la cámara fotográfica, mostrando guías para la captura de una imagen de la prueba.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Un depósito (1) útil en pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, caracterizado porque comprende: i) un sustrato laminar poroso (4) que tiene, al menos, una cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos;
ii) una base laminar hidrofobica horizontal (3) sella una de las caras laminares, del sustrato laminar poroso (4), preferentemente aquella que no permite un mejor flujo de fluidos líquidos;
iii) una pared hidrofobica vertical (6) circunda al sustrato laminar poroso
(4), penetrando transversalmente por los poros de dicho sustrato (4);
¡v) al menos, un sitio de reacción (5) sobre una porción de la cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos, del sustrato laminar (4); donde se deposita un agente de detección y una muestra de la sustancia de interés; y
V) una configuración conveniente para una reacción adecuada y confiable, según el tipo de agente de análisis y la sustancia a analizar.
2. El depósito de la reivindicación anterior, donde el sustrato laminar poroso (4) es parte de una pieza laminar porosa (2), la cual se selecciona del siguiente grupo: celulosa, papel cromatográfico, papel filtro, polímeros, y membrana de nitrocelulosa.
3. El depósito de la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende, un medio de retención (7) de fluidos que reduce la velocidad de dispersión de la muestra, dentro del sitio de reacción (5).
4. El depósito según la reivindicación anterior, donde el medio de retención, es un aro hidrofobia) conformado de una pared hldrofobica vertical circular (7) que penetra transversalmente por los poros del sustrato (4).
5. El depósito de la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende, una pared hidrofóbica vertical (8) que circunda al depósito (1 ), la cual penetra transversalmente por los poros del sustrato laminar (4); esta pared (8) sirve de referencia para la toma de una imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer la información de la prueba realizada en el depósito (1 ).
6. El depósito de la reivindicación 1 , 4 y 5, donde la base laminar hidrofóbica horizontal (3), pared hidrofóbica vertical (6), pared hidrofóbica vertical circular (7) y pared hidrofóbica vertical (8), son fabricadas con materiales hidrofóblcos.
7. El depósito de la reivindicación precedente, donde los materiales hidrofóbicos, son materiales hidrofóbicos sólidos.
8. El depósito según la reivindicación anterior, donde los materiales hidrofóbicos sólidos son: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, y una combinación entre ellos.
9. El depósito de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 6, donde la base hidrofóbica horizontal (3) es un recubrimiento inferior impreso con tinta de cera sólida.
10. El depósito de la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida es tinta de cera sólida color Clan con una saturación de un 66 %.
11. El depósito de las reivindicaciones 1 , 5 y 6, donde las paredes hidrofóbicas verticales (6 y 8) son líneas impresas con tinta de cera sólida.
12. El depósito según la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida, es tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %.
13. El depósito de acuerdo con las reivindicaciones 4 y 6, donde la pared hldrofóbica vertical y circular (7), es una línea impresa con tinta de cera sólida.
14. El depósito de la reivindicación anterior, donde la tinta de cera sólida, es tinta sólida color clan con una saturación de un 50 %.
15. El depósito de acuerdo con la reivindicación 1 , donde el sitio de reacción (5), está ubicado en el centro del depósito (1 ).
16. El depósito tal y como se reclama en la reivindicación 1 , donde la configuración conveniente, es un carril longitudinal recto con su sitio de reacción (5) circular ubicado en la parte media de dicho carril longitudinal, y las extremidades del carril es el área por donde pueden fluir las muestras durante la reacción.
17. El depósito de conformidad con la reivindicación 1 , donde la configuración es de, al menos, dos carriles longitudinales, lineales y cruzados entre sí en sus puntos medios, para formar una cruz, una equis o un asterisco; y en el punto donde se cruzan se forma el sitio de reacción (5) y las extremidades de los carriles es el área por donde pueden fluir las muestras durante la reacción.
18. El depósito de las reivindicaciones 16 y 17, donde los carriles tienen, al menos, un ensanchamiento (6’) en cada brazo de los carriles, para ayudar al desplazamiento de las muestras de las sustancias de interés.
19. El depósito según la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende, un soporte (11 ) para facilitar su manipulación y conservación; donde dicho depósito (1) se adhiere sobre el soporte (11 ) por medio de la cara laminar, del sustrato laminar poroso (4), donde está el recubrimiento hidrofobico (3), quedando la abertura del depósito (1 ) expuesta para apilcar los materiales de reacción.
20. El depósito de la reivindicación anterior, donde el soporte (1 1 ) es una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes del depósito (1 ).
21. El depósito de acuerdo con la reivindicación precedente, donde el material resistente a la humedad es poliestireno.
22. Una prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de Interés, caracterizada porque comprende: i) al menos, un depósito (1 ) útil en la construcción de pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 18; ü) una pieza laminar porosa (2) sustenta el depósito (1 );
Ni) un agente de detección colocado en el sitio de reacción (5) del depósito (1), para detectar y/o diagnosticar alguna Información y/o condición presente en una sustancia de interés;
iv) una referencia de identificación única (13) sobre la cara laminar de la pieza laminar porosa (2), donde está el depósito (1), pero adyacente al área donde está dicho depósito (1); y
V) una pared hidrofóbica vertical (9) que circunda el depósito (1 ) y la referencia de identificación única (1 ), penetrando verticalmente por sus poros de la pieza laminar porosa (2), dicha pared hidrofóbica (9) sirve de referencia para la toma de una Imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer la información de la prueba realizada.
23. La prueba de la reivindicación anterior, donde la información y/o condición a detectar y/o diagnosticar, es la existencia de patógenos, anticuerpos, enfermedades, sustancias, sustancias estimulantes, y sustancias contaminantes.
24. La prueba según la reivindicación 22, donde el agente de detección es un reactivo.
25. La prueba de la reivindicación anterior, donde el reactivo es una proteína con actividad biológica.
26. La prueba según la reivindicación precedente, donde la protefna con actividad biológica, es una proteína de fusión.
27. La prueba de acuerdo con la reivindicación anterior, donde la proteína de fusión comprende, un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a una enfermedad.
28. La prueba según la reivindicación anterior, donde el antígeno específico a una enfermedad detecta anticuerpos anti-tuberculosis y anti-VIH.
29. La prueba acorde la reivindicación 22, donde la pared hidrofóbica vertical (9), se ubica en el borde perimetral de la pieza laminar porosa (2).
30. La prueba de la reivindicación 22 y 29, donde la pared hidrofóbica vertical (9) es fabricada con materiales hidrofóbicos.
31. La prueba según la reivindicación anterior, donde los materiales hidrofóbicos son materiales hldrofóblcos sólidos.
32. La prueba de acuerdo con la reivindicación anterior, donde los materiales hidrofóbicos sólidos son: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, y una combinación entre ellos.
33. La prueba acorde con la reivindicación 22 y 29, donde la pared hidrofóbica vertical (9) es una línea impresa con tinta de cera sólida.
34. La prueba según la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida, es tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %.
35. La prueba de la reivindicación 22, donde la referencia de identificación (13) es: un código lineal, código QR, código ISBN, código bidimensional, código EAN, código GTIN, y código UPC.
36. La prueba de la reivindicación 22, caracterizada porque además comprende, un medio (10) para aplicar el agente de detección, en el sitio de reacción (5) del depósito (1 ).
37. La prueba de acuerdo con la rehzindicación anterior, donde el medio (10) para aplicar el agente de detección, es un disco de fibra de vidrio, donde se deposita e inmoviliza dicho agente.
38. La prueba según la reivindicación 22, caracterizada porque además comprende, un soporte (11) para facilitar su manipulación y conservación; donde la prueba se adhiere sobre el soporte (11) por medio de la cara laminar, de la pieza laminar porosa (2), donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando la abertura del depósito (1) expuesta para la aplicación los materiales de reacción.
39. La prueba de la reivindicación anterior, donde el soporte (11 ) es una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes de dicha prueba.
40. La prueba de acuerdo con la reivindicación anterior, donde el material resistente a la humedad es el poliestireno.
41. Un kit para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, caracterizado porque comprende, al menos, una prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 22 a la 40.
42. Un método para la elaboración de un depósito (1 ) útil en pruebas para detectar, analizar y/o diagnosticar sustancias de interés, caracterizado porque comprende:
I) seleccionar un sustrato laminar poroso (4) que tiene, al menos, una cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos;
II) incorporar una base laminar hidrofóbica horizontal (3) para sellar una de las caras laminares, del sustrato laminar poroso (4), preferentemente aquella que no permite un mejor flujo de fluidos líquidos;
III) aplicar una pared hidrofóbica vertical (6) circundando al sustrato laminar poroso (4), penetrando transversalmente por los poros de dicho sustrato (4);
lv) confeccionar, al menos, un sitio de reacción (5) sobre una porción de la cara laminar que permite un mejor flujo de fluidos líquidos, del sustrato laminar (4); donde se deposita un agente de detección y una muestra de la sustancia de interés; y
v) configurar de manera conveniente el depósito (1 ) para una reacción adecuada y confiable, según el tipo de agente de análisis y la sustancia a analizar.
43. El método de la reivindicación anterior, donde el sustrato laminar poroso
(4) es parte de una pieza laminar porosa (2), la cual se selecciona del siguiente grupo: celulosa, papel cromatográfico, papel filtro, polímeros, y membrana de nitrocelulosa.
44. El método de la reivindicación 42, caracterizado porque además comprende, añadir un medio de retención (7) de fluidos que reduce la velocidad de dispersión de la muestra, dentro del sitio de reacción (5).
45. El método según la reivindicación anterior, donde el medio de retención
(7), es un aro hidrofóbico conformado de una pared hidrofóbica vertical circular (7) que penetra transversalmente por lo poro del sustrato (4).
46. El método de la reivindicación 42, caracterizado porque además comprende, agregar una pared hidrofóbica vertical (8) que circunda completamente al depósito (1 ), la cual penetra transversalmente por los poros del sustrato laminar (4); esta pared (8) sirve de referencia para la toma de una imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer la información de la prueba realizada en el depósito (1 ).
47. El método de la reivindicación 42, 45 y 46, donde la base laminar hidrofóbica horizontal (3), pared hidrofóbica vertical (6), pared hidrofóbica vertical circular (7) y pared hidrofóbica vertical (8), son fabricadas con materiales hldrofóbicos.
48. El método de la reivindicación precedente, donde los materiales hidrofóbicos, son materiales hidrofóbloos sólidos.
49. El método según la reivindicación anterior, donde los materiales hldrofóbicos sólidos son: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, y una combinación entre ellos.
50. El método de acuerdo con las reivindicaciones 42 y 47, donde la base hidrofóbica horizontal (3) es un recubrimiento inferior impreso con tinta de cera sólida.
51. El método de la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida es tinta de cera sólida color Clan con una saturación de un 66 %.
52. El método de las reivindicaciones 42, 46 y 47, donde las paredes hidrofóbicas verticales (6 y 8) son líneas impresas con tinta de cera sólida.
53. El método según la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida, es tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %.
54. El método de acuerdo con las reivindicaciones 42 y 45, donde la pared hldrofóblca vertical y circular (7), es una línea Impresa con tinta de cera sólida.
55. El método de la reivindicación anterior, donde la tinta de cera sólida, es tinta sólida color cian con una saturación de un 50 %.
56. El método tal y como se reclama en las reivindicaciones 50, 52 y 54, caracterizado porque además comprende, someter a una temperatura de fundición a la base hidrofóbica horizontal (3), paredes hidrofóbicas verticales (6 y 8) y pared hidrofóbica vertical y circular (7), para que éstas se derritan y penetren por los poros del sustrato (4).
57. El método de la reivindicación anterior, donde la temperatura de fundición es de alrededor de 121 °C.
58. El método de acuerdo con la reivindicación 42, donde el sitio de reacción (5), fabricado en el centro del depósito (1 ).
59. El método tal y como se reclama en la reivindicación 42, donde la configuración conveniente del depósito (1 ), es un carril longitudinal lineal con su sitio de reacción (5) circular ubicado en la parte media de dicho carril longitudinal.
60. El método de conformidad con la reivindicación 42, donde la configuración es de, al menos, dos carriles longitudinales, lineales y cruzados entre sí en sus puntos medios, para formar una cruz, una equis o un asterisco; y en el punto donde se cruzan se forma el sitio de reacción (5) y las extremidades de los carriles es el área por donde pueden fluir las muestras durante la reacción.
61. El método de las reivindicaciones 59 y 60, donde los carriles se les provee de, al menos, un ensanchamiento (6’) en cada brazo de los carriles, para ayudar al desplazamiento de las muestras de las sustancias de Interés.
62. El método según la reivindicación 42, caracterizado porque además comprende, un soporte (11) para facilitar su manipulación y conservación; donde dicho depósito (1 ) se adhiere sobre el soporte (11 ) por medio de la cara laminar, del sustrato laminar poroso (4), donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando la abertura del depósito (1) expuesta para aplicar los materiales de reacción.
63. El método de la reivindicación anterior, donde el soporte (11 ) es una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes del depósito (1 ).
64. El método de acuerdo con la reivindicación precedente, donde el material resistente a la humedad es poliestireno.
65. Un método para elaborar una prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, caracterizado porque comprende: i) construir, al menos, un depósito (1 ) útil en la fabricación de pruebas para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, de conformidad con el método de cualquiera de las reivindicaciones 42 a la 61 , en una pieza laminar porosa (2);
ii) aplicar un agente de detección colocado en el sitio de reacción (5) del depósito (1), para detectar y/o diagnosticar alguna información y/o condición presente en una sustancia de Interés;
¡ii) agregar una referencia de identificación única (13) sobre la cara laminar de la pieza laminar porosa (2), donde está el depósito de análisis (1), pero adyacente al área donde está dicho depósito (1 ); y iv) incorporar una pared hidrofóbica vertical (9) que circunda el depósito (1) y la referencia de identificación única (1 ), penetrando verticalmente por sus poros de la pieza laminar porosa (2), dicha pared hidrofóbica (9) sirve de referencia para la toma de una imagen por medio de una cámara fotográfica comprendida en un dispositivo que tiene un software para reconocer la información de la prueba realizada.
66. El método de la reivindicación anterior, donde la información y/o condición a detectar y/o diagnosticar, es la existencia de patógenos, anticuerpos, enfermedades, sustancias, sustancias estimulantes, y sustancias contaminantes.
67. El método según la reivindicación 65, donde el agente de detección es un reactivo.
68. El método de la reivindicación anterior, donde el reactivo es una protelna con actividad biológica.
69. El método según la reivindicación precedente, donde la proteína con actividad biológica, es una proteína de füsión.
70. El método de acuerdo con la reivindicación anterior, donde la proteína de fusión comprende, un fragmento variable de anticuerpo de tiburón fusionado con un antígeno específico a una enfermedad.
71. El método según la reivindicación anterior, donde el antígeno específico a una enfermedad detecta anticuerpos anti-tuberculosis y anti-VIH.
72. El método acorde la reivindicación 65, donde la pared hidrofóbica vertical (9), se ubica en el borde perimetral de la pieza laminar porosa (2).
73. El método de la reivindicación 65 y 72, donde la pared hidrofóbica vertical (9) es fabricada con materiales hidrofóbicos.
74. El método según la reivindicación anterior, donde los materiales hidrofóbicos son materiales hidrofóbicos sólidos.
75. El método de acuerdo con la reivindicación anterior, donde los materiales hidrofóbicos sólidos son: ceras, hidrocarburos saturados, polímeros, y una combinación entre ellos.
76. El método acorde con la reivindicación 65 y 73, donde la pared hidrafóblca vertical (9) es una línea Impresa con tinta de cera sólida.
77. El método según la reivindicación precedente, donde la tinta de cera sólida, es tinta de cera sólida color negro con una saturación del 100 %.
78. El método de la reivindicación 76, caracterizado porque además comprende, someter a una temperatura de fundición a la pared hidrofóbicas vertical (9) para que se derrita y penetre por los poros del sustrato (4).
79. El método de la reivindicación precedente, donde la temperatura de fundición puede ser alrededor de 121 °C.
80. El método de la reivindicación 65, donde la referencia de identificación (13) es: un código lineal, código QR, código ISBN, código bidimensional, código EAN, código GTIN, y código UPC.
81. El método de la reivindicación 65, caracterizado porque además comprende, Incluir un medio (10) para aplicar el agente de detección, en el sitio de reacción (5) del depósito (1 ).
82. El método de acuerdo con la reivindicación anterior, donde el medio (10) para aplicar el agente de detección, es un disco de fibra de vidrio, donde se deposita e inmoviliza dicho agente.
83. El método según la reivindicación 65, caracterizado porque además comprende, aplicar un soporte (11 ) a la prueba para facilitar su manipulación y conservación; donde dicha prueba se adhiere sobre el soporte (11) por medio de la cara laminar, de la pieza laminar porosa (2), donde está el recubrimiento hidrofóbico (3), quedando la abertura del depósito (1 ) expuesta para la aplicación los materiales de reacción.
84. El método de la reivindicación anterior, donde el soporte (11 ) es una base estructural, la cual es un cuerpo laminar fabricado de un material resistente a la humedad y compatible con los demás componentes de dicha prueba.
85. El método de acuerdo con la reivindicación anterior, donde el material resistente a la humedad es el poliestireno.
86. Un método de análisis e interpretación de los resultados arrojados por la prueba para detectar, analizar y diagnosticar sustancias de interés, caracterizado porque comprende:
¡) colocar, al menos, una muestra de una sustancia de interés sobre el sitio de reacción (5) de, al menos, un depósito (1 ) de una prueba para la detección, análisis y diagnóstico, de conformidad con las reivindicaciones 22 a la 40;
ü) dejar que la muestra de la sustancia de interés reaccione con el agente de detección, durante el tiempo necesario que requiera para que se lleve acabo dicha reacción;
iü) capturar la referencia de identificación (13) de la prueba, con un dispositivo electrónico capaz de capturar una Imagen y procesarla con medios electrónicos, que tiene un software con el cual automáticamente aparece en pantalla la cámara del teléfono móvil para capturar la referencia de identificación (13) que contiene información sobre fecha de fabricación, tipo de prueba, tipo de sustancia a analizar y diagnosticar, cuántos depósitos (1 ) se van a leer en dicha prueba, y sirve como identificador único de la prueba; iv) fotografiar el área de los depósitos (1 ) de la prueba, para ello el software pasa a otra pantalla donde aparece una guía rectangular, la cual debe alinearse al rectángulo formado por la pared vertical (9), para asegurar que la distancia entre cámara y prueba es la necesaria para obtener una Imagen con la suficiente resolución; v) capturar una información contextual como la hora y ubicación geográfica (de manera automática) e información del paciente como género y edad (de manera manual) y llevar a cabo un procesamiento de la Información obtenida;
vi) analizar de la imagen fotografiada en la etapa iv) con el software, el cual analiza la imagen para detectar los depósitos (1 ) y los resultados de la reacción dentro de estos, los extrae y por medio de un algoritmo de Inteligencia artificial entrenado por “machine leaming” usando miles de ejemplos es capaz de determinar el resultado en cada sitio de reacción (5) y usando un algoritmo lógico determina, en base a múltiples marcadores para una sola condición y la combinación entre estos, si la muestra analizada tiene o no cierto contenido o condición, asi como sus cantidades; el resultado se muestra en la pantalla del dispositivo electrónico capaz de capturar una imagen; y
vii) enviar de manera automática los resultados obtenidos en la prueba junto con el identificador QR, información contextual de ubicación y hora, y la información capturada del paciente, a un servidor en la nube virtual donde se archiva para futura consulta o análisis estadístico.
87. El método de la reivindicación anterior, donde el tiempo necesario de reacción es de 10 a 15 mln.
88. El método de la reivindicación 86, donde el dispositivo electrónico capaz de capturar una imagen y procesarla con medios electrónicos, es un teléfono móvil.
89. El método de cuerdo con la reivindicación 86, donde la referencia de identificación (13) es: un código lineal, código QR, código ISBN, código bidlmensional, código EAN, código GTIN, y código URC.
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Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090298191A1 (en) * 2006-10-18 2009-12-03 President And Fellows Of Harvard College Lateral Flow and Flow-through Bioassay Devices Based On Patterned Porous Media, Methods of Making Same, and Methods of Using Same
MX2011003581A (es) * 2011-03-23 2012-10-02 Ct De Investigacion Cientifica Y De Educacion Superior De Ensenada Baja California Proteína acarreadora de antígenos para detección de patógenos por medio de hemoaglutinación, proveniente de heterodontus francisci.
US20150079668A1 (en) * 2013-09-19 2015-03-19 Rie Kobayashi Fluidic device, testing device, and method for fabricating fluidic device
US20160291039A1 (en) * 2009-09-24 2016-10-06 Monash University Testing Device For Identifying Antigens And Antibodies In Biofluids
US20180104685A1 (en) * 2015-04-29 2018-04-19 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Microfluidic devices and methods for pathogen detection in liquid samples
CN108940389A (zh) * 2018-06-29 2018-12-07 东南大学 基于激光打印的纸基微流控芯片及其制备方法和应用
US20180369808A1 (en) * 2017-06-23 2018-12-27 Group K Diagnostics, Inc. Microfluidic Device
US20190111425A1 (en) * 2017-10-18 2019-04-18 Group K Diagnostics, Inc. Single-layer microfluidic device and methods of manufacture and use thereof

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090298191A1 (en) * 2006-10-18 2009-12-03 President And Fellows Of Harvard College Lateral Flow and Flow-through Bioassay Devices Based On Patterned Porous Media, Methods of Making Same, and Methods of Using Same
US20160291039A1 (en) * 2009-09-24 2016-10-06 Monash University Testing Device For Identifying Antigens And Antibodies In Biofluids
MX2011003581A (es) * 2011-03-23 2012-10-02 Ct De Investigacion Cientifica Y De Educacion Superior De Ensenada Baja California Proteína acarreadora de antígenos para detección de patógenos por medio de hemoaglutinación, proveniente de heterodontus francisci.
US20150079668A1 (en) * 2013-09-19 2015-03-19 Rie Kobayashi Fluidic device, testing device, and method for fabricating fluidic device
US20180104685A1 (en) * 2015-04-29 2018-04-19 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Microfluidic devices and methods for pathogen detection in liquid samples
US20180369808A1 (en) * 2017-06-23 2018-12-27 Group K Diagnostics, Inc. Microfluidic Device
US20190111425A1 (en) * 2017-10-18 2019-04-18 Group K Diagnostics, Inc. Single-layer microfluidic device and methods of manufacture and use thereof
CN108940389A (zh) * 2018-06-29 2018-12-07 东南大学 基于激光打印的纸基微流控芯片及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANONYMOUS: "Cicese presente en Alemania", EL VIGÍA, 30 April 2018 (2018-04-30), pages 1 - 3, XP055755983, Retrieved from the Internet <URL:https://www.elvigia.net/general/2018/4/30/cicese-presente-alemania-302448.html> [retrieved on 20200115] *

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