WO2020212384A1 - Incubator for biological material - Google Patents

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WO2020212384A1
WO2020212384A1 PCT/EP2020/060528 EP2020060528W WO2020212384A1 WO 2020212384 A1 WO2020212384 A1 WO 2020212384A1 EP 2020060528 W EP2020060528 W EP 2020060528W WO 2020212384 A1 WO2020212384 A1 WO 2020212384A1
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WO
WIPO (PCT)
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temperature control
chamber
viewing
incubator
housing
Prior art date
Application number
PCT/EP2020/060528
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German (de)
French (fr)
Inventor
Daniel HEKL
Original Assignee
Hektros S.r.l.
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Filing date
Publication date
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/14Incubators; Climatic chambers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34Internal compartments or partitions
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/40Manifolds; Distribution pieces
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/18Heat exchange systems, e.g. heat jackets or outer envelopes
    • C12M41/22Heat exchange systems, e.g. heat jackets or outer envelopes in contact with the bioreactor walls
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/18Heat exchange systems, e.g. heat jackets or outer envelopes
    • C12M41/24Heat exchange systems, e.g. heat jackets or outer envelopes inside the vessel

Definitions

  • the present invention relates to an incubator for biological material, with a housing, an incubation chamber for a biological material arranged in the housing, a viewing device arranged in the housing for observing the biological material in the incubation chamber, the viewing device having at least one viewing window and one viewing channel, and a first temperature control device for the viewing device.
  • Incubators are used to study small organisms and their development through a microscope. Such incubators are mostly used in biotechnology laboratories.
  • a general example of an incubator can be found in AT 500 473 B1. This is specifically about openings for the introduction of manipulation instruments.
  • a generic document is DE 102 59 251 B4, which describes a cultivation chamber that can be attached to a microscope stage or a microscope table.
  • a lid of this cultivation chamber is made of Teflon and the window attached to the lid consists of two layers of heat-conducting glass.
  • the window is heated to keep the cultivation chamber warm and to prevent the window from misting up.
  • an annular heating resistor is inserted between the two layers of glass to provide heat and prevent the glass from fogging up.
  • the disadvantage here is that the annular heating resistor is very expensive in terms of production technology and costs. Above all, this heating resistor must be supplied with electricity by means of its own electrical line.
  • the object of the present invention is therefore to create a simple and less complex incubator.
  • the disadvantages given in the prior art are to be eliminated.
  • the invention provides that the first temperature control device has a first temperature control chamber surrounding the viewing channel, a first inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the first temperature control chamber, and a first outlet opening via which the temperature control fluid can flow out of the first temperature control chamber.
  • a temperature control fluid from a circulation thermostat as is common in most laboratories, is used to prevent fogging.
  • the viewing window does not fog up and it is always possible to observe the biological material through the viewing window and the viewing channel.
  • the shape of the housing is arbitrary.
  • the housing can be designed in the shape of a cuboid.
  • the housing is essentially cylindrical and has a central axis, this central axis leading through the viewing channel, the at least one viewing window and the incubation chamber.
  • the viewing channel and the viewing window are arranged exactly in the middle of the housing.
  • Humidification chamber and a gas supply opening formed in the housing are provided, through which a gas can flow into the incubation chamber via the humidification chamber.
  • a second temperature control device (separate from the first temperature control device) is preferably provided for the incubation chamber, the second temperature control device over a second temperature control chamber surrounding the incubation chamber, a second inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the second temperature control chamber, and a second outlet opening which the temperature control fluid can flow out of the second temperature control chamber.
  • the exact geometric configuration of the viewing channel and / or the incubation chamber is arbitrary per se.
  • these components can be formed in or through a cuboid wall.
  • the viewing channel and / or the incubation chamber are / is delimited at least in some areas by a wall which is in the shape of a circular cylinder or a cone, preferably formed around the central axis.
  • the circular cylinder jacket-shaped wall of the viewing channel and the circular cylinder jacket-shaped wall of the incubation chamber preferably have the same radius.
  • first and / or second temperature control chamber are / is only formed in areas in the housing or only adjoin the viewing channel and / or the incubation chamber in areas.
  • first and / or second temperature control chambers are / is annular around the central axis.
  • the first and / or second temperature control chamber are / is delimited by an inner wall surface, an outer wall surface, a bottom surface and a top surface.
  • the inner wall surface and the outer wall surface are each designed in the shape of a circular cylinder and have the same central axis or central axis.
  • the The bottom surface and the top surface are designed at right angles to the central axis or central axis and run parallel to one another.
  • first and / or second temperature control chamber separate guide elements from the two wall surfaces for the flow line of the inflowing temperature control fluid are arranged.
  • These guide elements serve, on the one hand, to homogenize the temperature control fluid and, on the other hand, to ensure that the warm, just introduced temperature control fluid is directed inward to the viewing channel or the incubation chamber.
  • the guide elements serve primarily to prevent the viewing window from fogging up.
  • the guide elements serve to ensure that the introduced, still warm temperature control fluid is directed directly to converting the incubation chamber in which the biological material is located, so that the desired temperature prevails there.
  • the guide elements can only partially or partially protrude into the temperature control chamber.
  • the guiding elements are designed as guiding walls which are connected to the bottom surface and / or to the top surface.
  • the guide walls of the first temperature control device are designed in one piece with the top surface and the guide walls of the second temperature control device are designed in one piece with the bottom surface.
  • the guide elements are spaced apart from the wall surfaces and through-flow openings are formed between the guide elements and the wall surfaces.
  • the guide elements are arranged at regular intervals from one another and equally spaced from a central axis.
  • Three, four, five or six guide elements can preferably be provided in the temperature control chamber.
  • the guide elements comprise several, preferably five, main webs, the main webs having a first, radially outer, substantially radially aligned, straight guide section and a straight, second guide section connected to the first guide section and lying closer to the central axis, the second guide section at an angle between 15 ° and 65 °, preferably between 20 ° and 50 °, to the first guide section is aligned.
  • the main webs are thus designed in the form of a kink, which redirects the flow accordingly.
  • the guide elements comprise several, preferably five, side bars, the side bars being arranged separately and at a distance from the main bars in the temperature control chamber.
  • the side webs are preferably spaced apart from the outer wall surface by less than 5 mm, preferably between 0.5 mm and 2 mm.
  • a meander-shaped temperature control channel delimited by guide walls is formed in the first and / or second temperature control chamber.
  • the temperature control channel has an essentially radially extending inflow section, a first ring section adjoining the inflow section, bounded directly by the inner wall surface and leading around the central axis, and several first ring sections radially outward to the first ring section comprises subsequent ring sections which follow one another in a meandering shape and lead around the central axis.
  • the temperature control fluid is first directed into the inner (to the viewing channel or to the incubation chamber) and ensures the appropriate temperature control there. Then the temperature control fluid is directed to the outside ring section by ring section and gradually cools down slightly.
  • a second aspect of the present invention relates to an incubator for biological material, with a multi-part housing, an incubation chamber formed by the housing for a biological material, at least one viewing device formed by the housing for observing the biological material in the incubation chamber, the viewing device at least one viewing window and has a viewing channel delimited by a wall, one formed by the housing second temperature control device for the incubation chamber, wherein the second temperature control device has a second temperature control chamber surrounding the incubation chamber, a second inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the second temperature control chamber, and a second outlet opening through which the temperature control fluid can flow out of the second temperature control chamber, a humidification chamber formed by the housing and surrounding areas of the incubation chamber and a gas supply opening formed by the housing through which a gas can flow into the incubation chamber via the humidification chamber.
  • Incubators known to date such as those which emerge from AT 500 473 B1 and DE 102 59 251 B4, are intended for frequent use. As a result, they are built quite elaborately and cost a lot. In addition, extensive cleaning must be carried out after use.
  • the object of the second aspect of the invention is therefore to create a less complex and simple incubator which nevertheless provides all the basic functions. Above all, the incubator should be optimized for a single (and pre-sterilized) use.
  • the housing consists entirely of at least partially transparent, preferably injection-molded, plastic.
  • the incubator consists of plastic that is transparent at least in some areas.
  • this plastic incubator or its housing can have any number of individual components.
  • the housing comprises exactly five, each one-piece components.
  • a base element is provided as the first component, in which part of the incubation chamber, the second inlet opening, the second outlet opening, the
  • a first intermediate cover which can be connected to the base element, preferably frictionally, is provided as the second component, which together with the base element forms the second temperature control chamber.
  • a perforated cover element arranged on the first intermediate lid is provided as a third component, which, together with the intermediate lid, forms the humidification chamber.
  • the fourth component is a component that can be connected to the floor element, preferably frictionally
  • Cover element is provided in which the viewing device, the first inlet opening, the first outlet opening and part of the first temperature chamber are formed.
  • a second intermediate cover which can be connected to the cover element, preferably frictionally, is provided as the fifth component, which together with the cover element forms the first temperature control chamber.
  • a first, preferably planar or lens-shaped, viewing window is formed in the cover element and a second viewing window is formed in the second intermediate cover, the second viewing window delimiting the incubation chamber.
  • the viewing channel is limited or formed by its wall and the two viewing windows.
  • the individual components consist of different plastics that are best suited for the respective application.
  • the five components consist of the same plastic.
  • the plastic is a transparent thermoplastic, preferably polystyrene.
  • Protection is also sought after for an arrangement comprising an incubator according to the invention, a temperature control fluid source, temperature control fluid lines which connect the inlet openings or outlet openings to the temperature control fluid source, a gas source and a gas line connecting the gas source to the gas supply opening.
  • the temperature control fluid line has a first line section which connects the temperature control fluid source to the first inlet opening, a second line section which connects the first outlet opening to the second inlet opening, and a third line section which connects the second outlet opening to the temperature control fluid source .
  • the temperature chamber prevents the at least one viewing window in the humid interior of the incubator from fogging up.
  • the temperature control fluid can be in the form of a temperature control gas or a temperature control liquid.
  • a temperature control liquid for example, a special mixture of different substances can be used as the temperature control liquid.
  • water is used as the temperature control fluid. With water as the temperature control fluid, a more homogeneous heat distribution is achieved thanks to its high heat capacity. Water has the added benefit of being quite heavy.
  • the housing which is actually light and made of plastic, can be placed well and stably on the microscope due to the additional weight of the water. There is a secure hold.
  • a nutrient gas is introduced from the gas source into the incubation chamber via a gas line and the gas supply opening.
  • a mixture of 95% air and 5% carbon dioxide, for example, can be used as the nutrient gas.
  • a pH-buffered aqueous solution of sugars, amino acids, vitamins, salts and protective substances against microbial infection can be used as the nutrient medium.
  • a nutrient medium also known as a culture medium
  • a general problem with incubators for live cell observation is that, due to the system, no heating is possible in the culture container (incubation chamber) arranged in the middle or in the overlying see-through area. It can therefore be colder here, making condensation and fogging of the surfaces with water droplets more likely.
  • This problem is solved by the first temperature control device. This is designed above the culture container in a cover part in the form of a correspondingly large, cylindrical compartment. This is welded to the top surface and is also high enough to prevent condensation. Here an air cushion forms towards the culture container, which has a (heat) insulating effect.
  • the incubator is heated with water (temperature control fluid), with the water first entering the first temperature control chamber at the cover part and only flowing through a bridge (second line section) into the base part after flowing through the cover part. Since a little heat is given off when flowing through the lid, it is slightly warmer in the lid part than in the bottom part. This must be taken into account when setting the temperature for the culture of the cells (biological material), but it makes it possible that the top surface of the cover part does not fog up and thus an observation of the organisms in the culture chamber below is and remains possible. This is achieved above all by the fact that it is warmer in the lid area.
  • devices for guiding the heating medium are provided (guide elements or guide walls). Due to the geometric configuration of the devices, the centrally arranged culture container is evenly washed around by the heating medium (temperature control fluid) and thus also heated evenly.
  • the entire temperature chamber is flowed through evenly and thus the entire area is heated.
  • the heating medium can initially flow from the inlet opening directly to the culture container via a radial channel.
  • the spiral or meander-shaped then begins on the inside and runs with increasing radius outwards to the outlet opening is reached.
  • the temperature at the culture container must meet the requirements of the organisms; it should be the warmest here or the setpoint temperature should prevail. Radial temperature loss is acceptable and even desirable.
  • baffles In a second variant, web-shaped baffles (guide elements) are arranged in the temperature control chamber.
  • circular currents arise around the baffles, which ultimately means that the culture container in the form of a central vortex that is as homogeneous as possible is flowed evenly (circular, laminar) around. Accordingly, the arrangement and alignment of the baffles is essential here.
  • An arrangement is particularly favorable in which a spiral-shaped or meander-shaped channel is arranged in the cover and baffles are arranged in the bottom part. Due to the larger contact area of the inner walls, more heat is given off in the bottom part. As a result, the temperature difference in the axial direction is greater. This is beneficial for avoiding condensation in the central area.
  • the circuits for the heating medium are completely separated and separate from the supply of the nutrient medium.
  • the nutrient gas flows through a gas supply opening into a humidification chamber in which distilled water or a moistened sponge is arranged.
  • the nutrient gas absorbs moisture from the surrounding water or from the sponge and flows through upper openings into the culture container and then at the edge of the cover area first in the direction of the cover surface and then finally radially out between the cover and the edge of the incubator.
  • the passage opening for the nutrient gas at the bottom of the humidification chamber is selected to be correspondingly small so that no water can flow out here. It is also conceivable that the upper passage openings of the humidification chamber are of different sizes or have a different number in order to control the flow and distribution of the nutrient gas.
  • the top of the culture container protrudes into the so-called atmospheric cavity in the form of a web. This creates a sterilization edge that can avoid contamination of the cell culture with bacteria.
  • the sponge is moistened with sterile and deionized water through the upper openings with a pipette or a syringe. Humidification via the sponge through which the nutrient gas flows is usually sufficient for at least two days.
  • Drip ribs in the edge area of the cover part are also essential. This edge area represents the coldest zone in the incubator. Compared to previous versions, the drip ribs are larger and have a notch on the lower edge. Condensation can collect there and drip back into the humidification chamber.
  • the flow of the heating medium in the cover is most important.
  • a radial temperature loss (towards the outside) is wanted in order to keep the condensation in the outer areas.
  • the heat should be directed into areas where no condensation should occur.
  • Increased condensation in the area around the edge of the incubator means that less humidification of the atmosphere is lost due to the outflowing, moist nutrient gas and the incubator can be operated for longer (long incubation times possible).
  • the bottom surface has three concentric bars on which the incubator stands. This minimizes the direct heat conduction from the incubator to the support, with an additional insulating air cushion being created.
  • the incubator is controlled by the temperature of the water and the room temperature. Feedback is possible by inserting a thermometer through an additional channel or bar. In contrast to a high-end device made of metal, where a temperature release to the outside is wanted and is possible and balanced by a very precise temperature control, this is a sluggish system. The control accuracy is still around ⁇ 0.5 ° C (with the high-end device ⁇ 0.05 ° C).
  • a (printed) lens can be contained in the lid part or in the culture container for observation.
  • Fig. 4 is a perspective view of the base element, the first intermediate cover and the
  • Floor element. 1 shows an arrangement 40 with an incubator 6 including housing, a temperature control fluid source 41, a temperature control fluid line 42, a gas source 43 and a gas line 44.
  • the temperature control fluid source 41 contains a temperature control fluid T.
  • This temperature control fluid T can for example be water.
  • the temperature control fluid source 41 is connected to the first inlet opening 13 of the first temperature control device 11 via the first line section 42a of the temperature control fluid line 42.
  • the temperature control fluid T reaches the first temperature control chamber 12 via this first inlet opening 13.
  • This temperature control chamber 12 is formed around the viewing device 8 at least in regions.
  • the viewing device 8 has at least one viewing window 9 and one viewing channel 10. Specifically, a first (upper) viewing window 91 and a second (lower) viewing window 92 are provided.
  • the first temperature control device 11 also has a first outlet opening 14, via which the temperature control fluid T can exit again from the temperature control chamber 12. From there, the temperature control fluid T reaches the second inlet opening 23 of the second temperature control device 21 via the second line section 42b.
  • This second temperature control device 21 has a second temperature control chamber 22 which at least partially surrounds an incubation chamber K (can also be referred to as a cultivation chamber). Biological material M is contained in this incubation chamber K. This biological material M can contain, for example, cells, microorganisms or the like.
  • the temperature control fluid T can then leave the incubator 6 again via the second outlet opening 24 of the second temperature control device 21.
  • the brought temperature control fluid can then be disposed of via the third line section 42c or can flow into a drain.
  • the incubator 6 also has a gas supply opening 39.
  • Gas G e.g. a dry gas mixture consists of 95% air and 5% CO2 enters the incubator 6 via this gas supply opening 39. The gas G can then escape again through narrow openings or gaps, not shown here.
  • the nutrient medium which supplies the living biological material M with nutrients, is introduced directly into the incubation chamber K.
  • Such an arrangement 40 with an incubator 6 is mostly used in laboratories in order to observe the growth and further development of the biological material M via a microscope. For this it is particularly important that you have the Viewing device 8 an unhindered observation of the biological material M is possible. Since the temperature control fluid T is usually heated to a range between 30 ° and 50 ° C., preferably to 37 ° to 40 ° C., it is possible that parts of the incubator 6 may fog up. It is particularly disadvantageous if the at least one viewing window 9 fogs up. In order to avoid this, the viewing device 8 is temperature-controlled via the first temperature control device 11. During this temperature control, the temperature control fluid T cools down slightly, so that a slightly lower temperature prevails in the second temperature control chamber 22 (for example 1 ° C. lower).
  • the temperature control fluid T thus has a double function: on the one hand, the incubation chamber K is kept at a constant, ideal temperature. On the other hand, the temperature control fluid T also serves to prevent the viewing device 8 or the viewing windows 91 and 92 from fogging up.
  • FIG. 6 An exploded view of an embodiment of an incubator 6 is shown in perspective in FIG.
  • This incubator 6 has all the essential components of an incubator 6, but is nevertheless quite simply constructed. Above all, this incubator 6 consists of a few individual components, each made of a transparent plastic (preferably injection-molded polystyrene). Specifically, the housing 7 of this incubator 6 is made up of five components: base element 1, first intermediate cover 2, cover element 3, cover element 4 and second intermediate cover 5.
  • the second intermediate cover 5 can be inserted into the cover element 4.
  • the first temperature control chamber 12 of the first temperature control device 11 is thereby formed by the cover element 4 and the second intermediate cover 5.
  • the first inlet opening 13 and the first outlet opening 14 for the temperature control fluid T can also be seen in FIG. 2.
  • the first temperature control chamber 12 is annular around the central axis Z.
  • the central axis Z leads through the first viewing window 91 and the viewing channel 10 as well as through the second viewing window 92, which is formed by the second intermediate cover 5.
  • the bottom surface 12b of the first temperature control chamber 11 is also formed on the second intermediate cover 5.
  • the inner wall surface 12i and the outer wall surface 12a of the first temperature control chamber 11 are formed on the cover element 4.
  • the top surface 12d of the first temperature control chamber 11 is also formed on the cover element 4.
  • the outer periphery of the second intermediate cover 5 formed Retaining ring 45 corresponds to an inner circumference of a retaining ring 46 formed on the cover element 4.
  • the situation is similar with the base element 1 and the first intermediate cover 2.
  • the first intermediate cover 2 has a central opening 47.
  • the wall of the incubation chamber K can be pushed through this.
  • the outer circumferential surface 48 corresponds to the inner circumferential surface 49 of the base element 1.
  • the second temperature control chamber 22 is formed or delimited by the outer wall surface 22a, the bottom surface 22b and the inner wall surface 22i, each formed on the bottom element 1.
  • the second inlet opening 23 and second outlet opening 24 for the temperature control fluid T are also formed on the base element 1.
  • this base element 1 of the incubator 6 has the gas supply opening 39.
  • the guide elements 31 in the form of the main webs 33 and the side webs 36 can also be seen.
  • a gas supply chamber 50 is formed in the base element 1. This is covered by the cover section 51 formed on the first intermediate cover 2. In this cover section 51 there is a passage opening 52.
  • the gas G supplied via the gas supply opening 39 can flow upwards and reaches an area between the cover element 4 and the base element 1.
  • the base element 1 is in the closed or assembled state connected to the cover element 4, since the inner circumferential surface 53 of the cover element 4 rests against the outer circumferential surface 54 of the base element 1.
  • the cover element 4 is thus pushed onto the base element 1. Precise positioning is ensured by the im Cover element 4 formed guide elements 55 and formed in the bottom element 1, corresponding guide recesses 56 allows.
  • the cover element 3 In the closed state, the cover element 3 is located between the cover element 4 and the base element 1. This cover element 3 rests on the first intermediate cover 2.
  • a humidification chamber 38 is located between the first intermediate cover 2 and the cover element 3.
  • a highly absorbent polymer sponge can be inserted into this humidification chamber 38. This allows up to 20 ml of water to be absorbed.
  • the cover element 3 has a central opening 57. With this central opening 57, the cover element 3 can be plugged onto the outer wall of the incubation chamber K.
  • several (specifically twelve) radial gas passage openings 58 are formed in the cover element 3. These have a diameter of about 1 mm.
  • the gas passage openings 58 serve, on the one hand, to fill the humidification chamber 38 with sterile water and, on the other hand, to allow gas to pass through, whereby the gas G entrains the water in the humidification chamber 38 as it flows through the humidification chamber 38, whereby a humidity of about 98% is reached.
  • the water vapor-enriched gas G that has passed through the gas passage openings 58 then passes through the central opening 57 into the incubation chamber K and prevents the biological material M from drying out there.
  • Fig. 3 the components of the incubator 6 are shown partially assembled.
  • the cover element 4 has the first inlet opening 13 and the first outlet opening 14.
  • the base element 1 has the second inlet opening 23, the second outlet opening 24 and the gas supply opening 39.
  • parts of the second line section 42b and of the third line section 42c are shown.
  • part of the gas line 44 is also shown.
  • the cover element 3 is received in the base element 1 and has the gas passage openings 58.
  • the guide recesses 56 can also be seen.
  • Fig. 4 the base element 1, the first intermediate cover 2 and the cover element 3 are shown.
  • the second temperature chamber 22 and the humidification chamber 38 are shown as perspective objects. Of course they are no concrete components, but the dimensions and shapes of these two chambers 22 and 38 result from the walls and surfaces of the other components 1, 2 and 3. In any case, it can be seen that both the second temperature chamber 22 and the humidification chamber 38 each are formed ring-shaped around the central axis Z around.
  • the second temperature chamber 22 is suitable for holding 30 to 50 ml, preferably approximately 40 ml, of temperature control fluid T.
  • the humidification chamber 38 is suitable for receiving 15 to 25, preferably about 20 ml, liquid.
  • This temperature control chamber 12 contains 30 to 50 ml, preferably about 40 ml, temperature control fluid T.
  • the inner surfaces or walls of the components 4 and 5 naturally form the temperature control chamber 12.
  • Fig. 6 matching to Fig. 4, the bottom element 1 and the first intermediate cover 2 are shown at the top right.
  • a plan view of this part of the incubator 6 can be seen in the lower left area.
  • the cutting lines BB and CC are drawn.
  • the gas supply opening 39 can be seen, via which gas G reaches the gas supply chamber 50.
  • the gas G that has flowed in passes through the passage opening 52 through the first intermediate cover 2 in the direction of the humidification chamber 38.
  • the first intermediate cover 2 rests in the outer area on an inner wall of the base element 1 and in the inner area on the wall the incubation chamber K rests on the outside.
  • the second intermediate cover 2 is connected relatively firmly to the base element 1 and the second temperature chamber 22 is formed between these two components 1 and 2.
  • This connection between the first intermediate cover 2 and the base element 1 can also be seen in section BB.
  • Section line AA is also drawn in section BB.
  • the associated section AA is shown at the top left of FIG.
  • the second inlet opening 23, the second outlet opening 24 and the gas supply opening 39 as well as the passage opening 52 result from this section AA.
  • the guide elements 31 can be seen particularly well in this section AA.
  • the side webs 36 are located relatively close to the outer wall surface 22a of the second temperature control chamber 22 and are inclined by approx. 35 ° to 55 ° to the radial direction.
  • the guide elements 31 serve to guide the flow of the inflowing temperature control fluid T. Between the guide elements 31 and the wall surfaces 22i and 22a, throughflow openings 32 are formed.
  • the guide elements 31 are arranged at regular intervals from one another and at a uniform distance from a central axis Z.
  • the main webs 33 comprise a first, radially outer, essentially radially aligned, straight guide section 34.
  • the main webs 33 have a straight, second guide section 35 that is closer to the central axis Z.
  • the second guide section 35 is oriented at an angle between 15 ° and 65 ° to the first guide section 34. In this case this angle a is approximately 40 °.
  • FIG. 7 contains the same representations as in FIG. 6, only in relation to the cover element 4 and the second intermediate cover 5.
  • the cover element 4 together with the first inlet opening 13 and first outlet opening 14 and the second intermediate cover 5 are shown.
  • a top view of the cover element 4 is shown at the bottom left. In this top view, the cutting lines HH and II are drawn.
  • the first outlet opening 14, which branches off from the first temperature control chamber 12, is shown in the lower right-hand section II.
  • the second intermediate cover 5, in particular its retaining ring 45, is designed to correspond to the retaining ring 46 of the cover element 4.
  • the two viewing windows 91 and 92 and the viewing channel 10 of the viewing device 8 can be seen particularly well from the section HH. These are arranged centrally in the incubator 6.
  • the drip chambers 59 can also be seen in this section HH.
  • the section line GG is drawn in section HH.
  • the associated section GG is shown in Fig. 7 top left.
  • the drip chambers 59 arranged in a ring around the incubation chamber K and the drip ribs 60 can be clearly seen in this section GG.
  • the incubation air rising from the incubation chamber K is saturated with water vapor and cools in the lid edge area and condenses on the walls of the draining chambers 59 and on the draining ribs 60.
  • the condensed water then drips back into the humidification chamber 38.
  • the inlet opening 13 and the first outlet opening 14 as well as the first temperature control chamber 12 are shown.
  • the first temperature chamber 12 is to the side of the outer wall surface 12a and the inner Wall area 12i limited.
  • These main webs 33 also have a first guide section 34 and a second guide section 35.
  • FIGS. 8, 9, 10 and 11 show further variants of how the temperature control chambers 12 and 22 are designed and, above all, how the flow conduction takes place therein.
  • FIG. 8 is essentially identical to the embodiment according to FIG. 6, only the second guide section 35 of the main webs 33 is less angled to the first guide section 34.
  • FIG. 9 is essentially identical to the embodiment according to FIG. 7.
  • the second guide sections 35 are less angled to the first guide section 34.
  • the baffles are designed in such a way that the central incubation chamber K in the base plate (base element 1) and the central optical see-through channel (viewing device 8) in the cover plate (cover element 4) are bathed in the best possible way with fresh warm water (temperature control fluid T).
  • Another advantage is the attachment of small edge baffles (side bars 36) in the outer area in order to avoid circulating currents with a long water retention time and the resulting zonal cooling there.
  • the inner baffles (main webs 33) are designed in the form of five angled long and four short straight lines in the base element 1 and in the form of five angled long and five short straight lines in the cover element 4. These guide elements 31 are offset from one another at an angle of 72 ° around the center of the plate (central axis Z).
  • Fig. 11 an alternative design of the flow guide in the temperature control chambers 12 and 22 is shown.
  • the cover element 4 is specifically shown in FIG. 11, but the same configuration can also be provided in the base element 1 be.
  • a meander-shaped temperature control channel 37 delimited by guide walls is formed in the first temperature control chamber 12 and / or the second temperature control chamber 22.
  • This temperature control channel 37 has an inflow section E running radially from the inlet opening 13 in the direction of the incubation chamber K.
  • the first ring section R1 delimited by the inner wall surface 12i directly adjoins this inflow section E.
  • This first ring section R1 is adjoined radially outward by a plurality of ring sections Rn which run around the central axis Z and follow one another in a meandering manner. From the outermost ring section Rn, the (cooled) temperature control fluid T then passes back into the first outlet opening 14.
  • This flow channel (temperature control channel 37) is thus laid out in partially annular meanders, whereby the inflowing water should always flow around the central area first in order to avoid heat transport loss to the incubated cells in the incubation chamber K or towards the viewing channel 10.
  • FIG. 12 shows a vertical section through the incubator 6, the second intermediate cover 5 and the cover element 4 being shown in dotted lines.
  • This FIG. 12 primarily illustrates the path of the gas G through the incubator 6.
  • FIG. 12 shows the bottom element 1 with the incubation chamber K, the gas supply chamber 50, the annular humidification chamber 38 and the warm water jacket (second temperature control device 21).
  • the gas supply chamber 50 serves as a gas chamber for preheating the inflowing dry gas mixture.
  • This dry gas mixture consists of about 95%, preferably air, and about 5%, preferably CO2.
  • the first intermediate cover 2 forms an annularly welded, watertight and gas-tight cover with a hole (gas outlet opening 58) for gas to pass into the humidification chamber 38.
  • the gas supply opening 39 has a central Luer-Lock connection coupling for a gas supply. This means that gas G can be supplied at around 10 ml per minute at a maximum of 1 bar.
  • a highly absorbent polymer sponge is preferably inserted in the humidification chamber 38. This is designed in a ring shape and enables water to be absorbed of up to 20 ml.
  • the gas G flowing in via the passage opening 52 takes water with it, as a result of which the gas G has an air humidity of up to 98%.
  • the humidification chamber 38 is covered by the cover element 3. This cover element 3 is perforated several times by the gas passage openings 58 and is annular. Between the cover element 3 and the second intermediate cover 5 is an atmosphere Cavity 61 is formed.
  • the cover element 4 has the warm water jacket (first temperature control device 11 including temperature control chamber 12), the sealed viewing device 8 and the drip ribs 60.
  • the gas passage openings 58 have a diameter of approximately 1 mm and are formed in the humidification chamber cover (cover element 3). These also serve to fill with about 20 ml of sterile water.
  • the warm water jacket (temperature control channel 12) in the cover element 4 is used to supply warm water to the viewing device 8.
  • the warm water is supplied by circulation thermostats (to be perfused with 38.5 ° C warm water at 20 ° C room temperature).
  • the viewing channel 10 is closed by disc-shaped viewing panels (viewing windows 91 and 92).
  • the viewing channel 10 is partially formed by an internally sealed see-through chamber. This is mainly used to avoid the formation of condensation in the optical path.
  • the rising incubation air which is saturated with water combat, is cooled with the drip ribs 60, as a result of which the water condenses in the lid edge area and the condensed water drips back towards the humidification chamber 38.
  • the second intermediate cover 5 forms a type of disk-shaped faceplate. This is welded in the shape of a ring and forms a water- and gas-tight barrier to the first temperature control chamber 12 and to the viewing channel 10 for cell observation. After the gas G has reached the incubation chamber K via the atmospheric cavity 61, the gas emerges in a ring at the lid edge of the incubator 6.
  • the gas G escapes at about 10 ml per minute through the slight gap between the lid element 4 and the base element 1 the incubator 6.
  • the warm water jacket (temperature chamber 22) in the base element 1 has a warm water supply (inlet opening 23).
  • the temperature control fluid T reaches the temperature control chamber 22 via this inlet opening 23 via a Luer lock coupling.
  • the water in this area is still about 37 ° C. warm. That is, the temperature control fluid T has cooled by about 1.5 ° C. after flowing through the first temperature control chamber 12.
  • a plurality of (specifically three) annularly closed (concentric) webs 62 are formed on the base element 1. These are about 1 mm high and serve to minimize contact with the ground.
  • the biological material M at the bottom of the incubation chamber K is formed by living cells.
  • the thickness of the base plate of the base element 1 is approximately 0.6 mm. This makes it suitable for lenses up to to a magnification of 60 times.
  • the section of the bottom element 1 of the incubation chamber K can be surface-treated on the inside. In a preferred embodiment, it is plasma-activated in order to produce a hydrophobic surface for better wettability and cell adhesion.
  • An incubation medium is designated by the reference numeral 63. This incubation medium 63 consists of nutrients and oxygen / CO2 dissolved therein.
  • the nutrient medium (incubation medium 63) supplies the incubated cells with nutrients and the gas exchange with the humidified nutrient gas takes place via its surface. CO2 formed by the cells diffuses through the liquid nutrient medium on its surface, while the oxygen required for breathing diffuses from the surface through the nutrient medium to the cells.
  • the incubation chamber K is open at the top and communicates with the atmospheric cavity 61. The humidity of about 98% prevents evaporation of the incubation medium 63.
  • FIG. 13 shows a plan view of an alternative embodiment of a cover element 4.
  • a viewing window 9 in the form of a central lens is formed in the cover element 4.
  • four regularly arranged guide elements 31 are formed in the first temperature control chamber 12.
  • a full temperature control fluid filling results in the cover element 4.
  • Fig. 14 an alternative embodiment of the floor element 1 is shown in perspective.
  • the underside of the incubator 6 is not continuously disk-shaped. Rather, the underside of the incubator 6 is provided with a clipped-in, frictionally connected glass base 64, which in this case is enclosed by an annular base surface 22b (made of polystyrene) and kept watertight.
  • the polystyrene base plate in the central chamber area is open in a circle and has retaining or clip webs on the inner edge.
  • the chamber floor (instead of 0.6 mm polystyrene) is preferably made of 16 to 20 ⁇ m thick, inert borosilicate or quartz glass and is UV-permeable, so that high-resolution microscope images (with up to 100-fold magnification) are possible.
  • the biological material M can be excited with wavelengths in the UV range in order to enable fluorescence recordings also with excitation wavelengths below 360 nm.

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Abstract

Incubator (6) for biological material (M), having a housing (7), having an incubation chamber (K) for a biological material (M), said incubation chamber being arranged in the housing (7), having a viewing device (8) for observing the biological material (M) in the incubation chamber (K), said viewing device being arranged in the housing (7), wherein the viewing device (8) has at least one viewing window (9) and a viewing channel (10), and having a first temperature-control device (11) for the viewing device (8), wherein the first temperature-control device (11) has a first temperature-control chamber (12), which surrounds the viewing channel (10), a first entry opening (13), via which a temperature-control fluid (T) can flow into the first temperature-control chamber (12), and a first exit opening (14), via which the temperature-control fluid (T) can flow out of the first temperature-control chamber (12).

Description

Inkubator für biologisches Material Incubator for biological material
Die vorliegende Erfindung betrifft einen Inkubator für biologisches Material, mit einem Gehäuse, einer im Gehäuse angeordneten Inkubationskammer für ein biologisches Material, einer im Gehäuse angeordneten Sichtvorrichtung zur Beobachtung des biologischen Materials in der Inkubationskammer, wobei die Sichtvorrichtung wenigstens ein Sichtfenster und einen Sichtkanal aufweist, und einer ersten Temperiervorrichtung für die Sichtvorrichtung. The present invention relates to an incubator for biological material, with a housing, an incubation chamber for a biological material arranged in the housing, a viewing device arranged in the housing for observing the biological material in the incubation chamber, the viewing device having at least one viewing window and one viewing channel, and a first temperature control device for the viewing device.
Inkubatoren (oft auch Kultiviervorrichtungen genannt) werden dazu eingesetzt, um kleine Organismen und deren Entwicklung über ein Mikroskop zu studieren. Derartige Inkubatoren werden meist in Laboren für Biotechnologie verwendet. Incubators (often called cultivation devices) are used to study small organisms and their development through a microscope. Such incubators are mostly used in biotechnology laboratories.
Ein allgemeines Beispiel für einen Inkubator geht aus der AT 500 473 B1 hervor. Hier geht es im Speziellen um Öffnungen zur Einführung von Manipulationsinstrumenten. A general example of an incubator can be found in AT 500 473 B1. This is specifically about openings for the introduction of manipulation instruments.
Ein gattungsbildendes Dokument ist die DE 102 59 251 B4, welche eine an einer Mikroskopbühne oder einem Mikroskoptisch anbringbare Kultivierkammer beschreibt. Ein Deckel dieser Kultivierkammer besteht aus Teflon und das am Deckel angebrachte Fenster besteht aus zwei Schichten wärmeleitenden Glases. Das Fenster ist erwärmt, um die Kultivierkammer warm zu halten und ein Beschlagen des Fensters zu verhindern. Konkret ist ein ringförmiger Heizwiderstand zwischen den beiden Schichten aus Glas eingefügt, um Wärme zu liefern und ein Beschlagen des Glases zu verhindern. Nachteilig hierbei ist, dass der ringförmige Heizwiderstand fertigungstechnisch und von den Kosten her recht aufwändig ist. Vor allem muss dieser Heizwiderstand mit einer eigenen elektrischen Leitung mit Strom versorgt werden. Zudem ist eine genaue Rückkoppelungsregelung und Abstimmung mit der Temperatur in der Kultivierkammer schwierig bzw. aufwändig, das heißt kaum ohne Ausbildung von unkontrollierbaren Temperaturgradienten zu bewerkstelligen. Darüber hinaus bedarf es einer externen, ebenfalls beheizten Luftbefeuchtungsvorrichtung, in welche das Inkubationsgas zuerst eingeleitet wird, bevor es der Inkubationskammer zugeführt wird. Dadurch entsteht je nach Umgebungstemperatur am Mikroskop das Problem der Wasserdampfuntersättigung und Kondensation im Zuleitungskanal zur Kultivierkammer. Zudem muss die Kammer vor jedem Einsatz gereinigt, sterilisiert mit Schrauben verschlossen und abgedichtet werden, was die Handhabung erschwert. A generic document is DE 102 59 251 B4, which describes a cultivation chamber that can be attached to a microscope stage or a microscope table. A lid of this cultivation chamber is made of Teflon and the window attached to the lid consists of two layers of heat-conducting glass. The window is heated to keep the cultivation chamber warm and to prevent the window from misting up. Specifically, an annular heating resistor is inserted between the two layers of glass to provide heat and prevent the glass from fogging up. The disadvantage here is that the annular heating resistor is very expensive in terms of production technology and costs. Above all, this heating resistor must be supplied with electricity by means of its own electrical line. In addition, a precise feedback control and coordination with the temperature in the cultivation chamber is difficult or expensive, that is to say can hardly be achieved without the formation of uncontrollable temperature gradients. In addition, an external, likewise heated air humidification device is required, into which the incubation gas is first introduced before it is fed to the incubation chamber. Depending on the ambient temperature on the microscope, this creates the problem of water vapor undersaturation and condensation in the supply channel to the cultivation chamber. In addition, the chamber must be cleaned, sterilized, closed with screws and sealed before each use, which makes handling difficult.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht daher darin, einen einfachen und weniger aufwändigen Inkubator zu schaffen. Insbesondere sollen die beim Stand der Technik gegeben Nachteile behoben werden. The object of the present invention is therefore to create a simple and less complex incubator. In particular, the disadvantages given in the prior art are to be eliminated.
Dies wird durch einen Inkubator mit den Merkmalen von Anspruch 1 gelöst. Demnach ist erfindungsgemäß vorgesehen, dass die erste Temperiervorrichtung eine den Sichtkanal umgebende erste Temperierkammer, eine erste Eintrittsöffnung, über die ein Temperierfluid in die erste Temperierkammer strömen kann, und eine erste Austrittsöffnung, über die das Temperierfluid aus der ersten Temperierkammer strömen kann, aufweist. Somit ist keine eigenständige Stromversorgung notwendig, sondern es wird ein Temperierfluid eines Umlaufthermostaten, wie in den meisten Laboratorien gebräuchlich, für das Verhindern des Beschlagens eingesetzt. Dadurch beschlägt das Sichtfenster nicht und es ist eine Beobachtung des biologischen Materials durch das Sichtfenster und den Sichtkanal hindurch stets möglich. This is achieved by an incubator with the features of claim 1. Accordingly, the invention provides that the first temperature control device has a first temperature control chamber surrounding the viewing channel, a first inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the first temperature control chamber, and a first outlet opening via which the temperature control fluid can flow out of the first temperature control chamber. This means that no separate power supply is necessary, but a temperature control fluid from a circulation thermostat, as is common in most laboratories, is used to prevent fogging. As a result, the viewing window does not fog up and it is always possible to observe the biological material through the viewing window and the viewing channel.
Bevorzugte Ausführungsbeispiele der vorliegenden Erfindung sind in den abhängigen Ansprüchen angeführt. Preferred embodiments of the present invention are given in the dependent claims.
Die Form des Gehäuses ist an sich beliebig. So kann das Gehäuse beispielsweise quaderförmig ausgebildet sein. Bevorzugt ist für eine einfache Handhabung allerdings vorgesehen, dass das Gehäuse im Wesentlichen zylindrisch ausgebildet ist und eine Zentralachse aufweist, wobei diese Zentralachse durch den Sichtkanal, das wenigstens eine Sichtfenster und die Inkubationskammer führt. Somit sind der Sichtkanal und das Sichtfenster genau mittig im Gehäuse angeordnet. The shape of the housing is arbitrary. For example, the housing can be designed in the shape of a cuboid. For simple handling, however, it is preferably provided that the housing is essentially cylindrical and has a central axis, this central axis leading through the viewing channel, the at least one viewing window and the incubation chamber. Thus, the viewing channel and the viewing window are arranged exactly in the middle of the housing.
An sich ist es möglich, dass im Gehäuse zwei oder mehrere Sichtvorrichtungen ausgebildet sind. Bevorzugt ist allerdings vorgesehen, dass im Gehäuse nur eine Sichtvorrichtung und nur eine Inkubationskammer ausgebildet sind. It is in itself possible for two or more viewing devices to be formed in the housing. However, it is preferably provided that only one viewing device and only one incubation chamber are formed in the housing.
Um eine gute Entwicklung des biologischen Materials zu ermöglichen, ist bevorzugt eine im Gehäuse ausgebildete und die Inkubationskammer bereichsweise umgebenden Befeuchtungskammer und eine im Gehäuse ausgebildete Gaszuführöffnung vorgesehen, über welche ein Gas über die Befeuchtungskammer in die Inkubationskammer einströmen kann. In order to enable a good development of the biological material, one formed in the housing and surrounding the incubation chamber in some areas is preferred Humidification chamber and a gas supply opening formed in the housing are provided, through which a gas can flow into the incubation chamber via the humidification chamber.
Für die Entwicklung des biologischen Materials in der Inkubationskammer ist es zudem wesentlich, dass eine möglichst gleichbleibende Temperatur in der Inkubationskammer herrscht. Deswegen ist bevorzugt eine (von der ersten Temperiervorrichtung separate) zweite Temperiervorrichtung für die Inkubationskammer vorgesehen, wobei die zweite Temperiervorrichtung eine die Inkubationskammer umgebende zweite Temperierkammer, eine zweite Eintrittsöffnung, über die ein Temperierfluid in die zweite Temperierkammer strömen kann, und eine zweite Austrittsöffnung, über die das Temperierfluid aus der zweiten Temperierkammer strömen kann, aufweist. For the development of the biological material in the incubation chamber, it is also essential that the temperature in the incubation chamber is as constant as possible. For this reason, a second temperature control device (separate from the first temperature control device) is preferably provided for the incubation chamber, the second temperature control device over a second temperature control chamber surrounding the incubation chamber, a second inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the second temperature control chamber, and a second outlet opening which the temperature control fluid can flow out of the second temperature control chamber.
Die genaue geometrische Ausgestaltung des Sichtkanals und/oder der Inkubationskammer ist an sich beliebig. So können diese Komponenten beispielsweise in einer oder durch eine quaderförmige Wandung ausgebildet sein. Bevorzugt ist allerdings vorgesehen, dass der Sichtkanal und/oder die Inkubationskammer zumindest bereichsweise von einer, vorzugsweise um die Zentralachse ausgebildeten, kreiszylindermantelförmigen oder kegelmantelförmigen Wandung begrenzt sind/ist. Bevorzugt weisen die kreiszylindermantelförmige Wandung des Sichtkanals und die kreiszylindermantelförmige Wandung der Inkubationskammer denselben Radius auf. The exact geometric configuration of the viewing channel and / or the incubation chamber is arbitrary per se. For example, these components can be formed in or through a cuboid wall. However, it is preferably provided that the viewing channel and / or the incubation chamber are / is delimited at least in some areas by a wall which is in the shape of a circular cylinder or a cone, preferably formed around the central axis. The circular cylinder jacket-shaped wall of the viewing channel and the circular cylinder jacket-shaped wall of the incubation chamber preferably have the same radius.
Es ist möglich, dass die erste und/oder zweite Temperierkammer nur bereichsweise im Gehäuse ausgebildet sind/ist bzw. nur bereichsweise an den Sichtkanal und/oder die Inkubationskammer angrenzen. Für eine möglichst homogene Temperierleistungseinbringung ist aber bevorzugt vorgesehen, dass die erste und/oder zweite Temperierkammer ringförmig um die Zentralachse ausgebildet sind/ist. It is possible that the first and / or second temperature control chamber are / is only formed in areas in the housing or only adjoin the viewing channel and / or the incubation chamber in areas. For the most homogeneous possible introduction of temperature control, however, it is preferably provided that the first and / or second temperature control chambers are / is annular around the central axis.
Weiters ist bevorzugt vorgesehen, dass die erste und/oder zweite Temperierkammer von einer inneren Wandfläche, einer äußeren Wandfläche, einer Bodenfläche und einer Deckfläche begrenzt sind/ist. Besonders bevorzugt sind die innere Wandfläche und die äußere Wandfläche jeweils kreiszylindermantelförmig ausgebildet und weisen dieselbe Mittelachse bzw. Zentralachse auf. Zudem ist bevorzugt vorgesehen, dass die Bodenfläche und die Deckfläche rechtwinkelig zur Mittelachse bzw. Zentralachse ausgebildet sind und parallel zueinander verlaufen. Furthermore, it is preferably provided that the first and / or second temperature control chamber are / is delimited by an inner wall surface, an outer wall surface, a bottom surface and a top surface. Particularly preferably, the inner wall surface and the outer wall surface are each designed in the shape of a circular cylinder and have the same central axis or central axis. In addition, it is preferably provided that the The bottom surface and the top surface are designed at right angles to the central axis or central axis and run parallel to one another.
Gemäß einem bevorzugten Ausführungsbeispiel ist vorgesehen, dass in der ersten und/oder zweiten Temperierkammer von den beiden Wandflächen separate Leitelemente zur Strömungsleitung des einströmenden Temperierfluids angeordnet sind. Diese Leitelemente dienen einerseits zur Homogenisierung des Temperierfluids und andererseits dazu, dass das warme, gerade eingeleitete Temperierfluid nach innen zum Sichtkanal bzw. zur Inkubationskammer geleitet wird. In der ersten Temperiervorrichtung dienen die Leitelemente vornehmlich dazu, dass das Sichtfenster nicht beschlägt. In der zweiten Temperiervorrichtung dienen die Leitelemente dazu, dass das eingeleitete, noch warme Temperierfluid direkt zur Umwandlung der Inkubationskammer geleitet wird, in welcher sich das biologische Material befindet, sodass dort die gewünschte Temperatur herrscht. According to a preferred embodiment it is provided that in the first and / or second temperature control chamber separate guide elements from the two wall surfaces for the flow line of the inflowing temperature control fluid are arranged. These guide elements serve, on the one hand, to homogenize the temperature control fluid and, on the other hand, to ensure that the warm, just introduced temperature control fluid is directed inward to the viewing channel or the incubation chamber. In the first temperature control device, the guide elements serve primarily to prevent the viewing window from fogging up. In the second temperature control device, the guide elements serve to ensure that the introduced, still warm temperature control fluid is directed directly to converting the incubation chamber in which the biological material is located, so that the desired temperature prevails there.
Die Leitelemente können an sich nur teilweise oder bereichsweise in die Temperierkammer ragen. Bevorzugt ist für eine gute Leitwirkung allerdings vorgesehen, dass die Leitelemente als Leitwände ausgebildet sind, welche mit der Bodenfläche und/oder mit der Deckfläche verbunden sind. Konkret sind die Leitwände der ersten Temperiervorrichtung einstückig mit der Deckfläche ausgebildet und die Leitwände der zweiten Temperiervorrichtung einstückig mit der Bodenfläche ausgebildet. The guide elements can only partially or partially protrude into the temperature control chamber. For a good guiding effect, however, it is preferably provided that the guiding elements are designed as guiding walls which are connected to the bottom surface and / or to the top surface. Specifically, the guide walls of the first temperature control device are designed in one piece with the top surface and the guide walls of the second temperature control device are designed in one piece with the bottom surface.
Um eine gezielte Strömung in der Temperierkammer zu erreichen, ist bevorzugt vorgesehen, dass die Leitelemente von den Wandflächen beabstandet sind und zwischen den Leitelementen und den Wandflächen Durchströmöffnungen ausgebildet sind. In order to achieve a targeted flow in the temperature control chamber, it is preferably provided that the guide elements are spaced apart from the wall surfaces and through-flow openings are formed between the guide elements and the wall surfaces.
Weiters ist bevorzugt vorgesehen, dass die Leitelemente in regelmäßigen Abständen zueinander und gleichmäßig beabstandet zu einer Zentralachse angeordnet sind. Bevorzugt können drei, vier, fünf oder sechs Leitelemente in der Temperierkammer vorgesehen sein. Furthermore, it is preferably provided that the guide elements are arranged at regular intervals from one another and equally spaced from a central axis. Three, four, five or six guide elements can preferably be provided in the temperature control chamber.
Besonders bevorzugt ist vorgesehen, dass die Leitelemente mehrere, vorzugsweise fünf, Hauptstege umfassen, wobei die Hauptstege einen ersten, radial außenliegenden, im Wesentlichen radial ausgerichteten, geraden Leitabschnitt und einen mit dem ersten Leitabschnitt verbundenen, näher an der Zentralachse liegenden, geraden, zweiten Leitabschnitt aufweisen, wobei der zweite Leitabschnitt in einem Winkel zwischen 15° und 65°, vorzugsweise zwischen 20° und 50°, zum ersten Leitabschnitt ausgerichtet ist. Somit sind die Hauptstege in Form eines Knicks ausgebildet, welcher die Strömung entsprechend umleitet. It is particularly preferably provided that the guide elements comprise several, preferably five, main webs, the main webs having a first, radially outer, substantially radially aligned, straight guide section and a straight, second guide section connected to the first guide section and lying closer to the central axis, the second guide section at an angle between 15 ° and 65 °, preferably between 20 ° and 50 °, to the first guide section is aligned. The main webs are thus designed in the form of a kink, which redirects the flow accordingly.
Weiters ist bevorzugt vorgesehen, dass die Leitelemente mehrere, vorzugsweise fünf, Seitenstege umfassen, wobei die Seitenstege separat und beabstandet von den Hauptstegen in der Temperierkammer angeordnet sind. Die Seitenstege sind bevorzugt um weniger als 5 mm, vorzugsweise zwischen 0,5 mm und 2 mm, von der äußeren Wandfläche beabstandet. Furthermore, it is preferably provided that the guide elements comprise several, preferably five, side bars, the side bars being arranged separately and at a distance from the main bars in the temperature control chamber. The side webs are preferably spaced apart from the outer wall surface by less than 5 mm, preferably between 0.5 mm and 2 mm.
Alternativ zu den Leitelementen kann vorgesehen sein, dass in der ersten und/oder zweiten Temperierkammer ein von Leitwänden begrenzter, mäanderförmiger Temperierkanal ausgebildet ist. As an alternative to the guide elements, it can be provided that a meander-shaped temperature control channel delimited by guide walls is formed in the first and / or second temperature control chamber.
Eine besonders homogene und vorteilhafte Temperierung wird dadurch erreicht, dass der Temperierkanal einen im Wesentlichen radial verlaufenden Einströmabschnitt, einen an den Einströmabschnitt anschließenden, direkt von der inneren Wandfläche begrenzten, um die Zentralachse führenden, ersten Ringabschnitt und mehrere, an den ersten Ringabschnitt radial nach außen anschließende, um die Zentralachse führende, mäanderförmig aufeinander folgende Ringabschnitte umfasst. Dadurch wird das Temperierfluid zunächst in das innere (zum Sichtkanal bzw. zur Inkubationskammer) geleitet und sorgt dort für die entsprechende Temperierung. Dann wird das Temperierfluid Ringabschnitt für Ringabschnitt nach außen geleitet und kühlt dabei nach und nach geringfügig ab. A particularly homogeneous and advantageous temperature control is achieved in that the temperature control channel has an essentially radially extending inflow section, a first ring section adjoining the inflow section, bounded directly by the inner wall surface and leading around the central axis, and several first ring sections radially outward to the first ring section comprises subsequent ring sections which follow one another in a meandering shape and lead around the central axis. As a result, the temperature control fluid is first directed into the inner (to the viewing channel or to the incubation chamber) and ensures the appropriate temperature control there. Then the temperature control fluid is directed to the outside ring section by ring section and gradually cools down slightly.
Ein zweiter Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft einen Inkubator für biologisches Material, mit einem mehrteiligen Gehäuse, einer vom Gehäuse gebildeten Inkubationskammer für ein biologisches Material, wenigstens einer vom Gehäuse gebildeten Sichtvorrichtung zur Beobachtung des biologischen Materials in der Inkubationskammer, wobei die Sichtvorrichtung wenigstens ein Sichtfenster und einen von einer Wandung begrenzten Sichtkanal aufweist, einer vom Gehäuse gebildeten zweiten Temperiervorrichtung für die Inkubationskammer, wobei die zweite Temperiervorrichtung eine die Inkubationskammer umgebende zweite Temperierkammer, eine zweite Eintrittsöffnung, über die ein Temperierfluid in die zweite Temperierkammer strömen kann, und eine zweite Austrittsöffnung, über die das Temperierfluid aus der zweiten Temperierkammer strömen kann, aufweist, einer vom Gehäuse gebildeten und die Inkubationskammer bereichsweise umgebenden Befeuchtungskammer und einer vom Gehäuse gebildeten Gaszuführöffnung, über welche ein Gas über die Befeuchtungskammer in die Inkubationskammer einströmen kann. A second aspect of the present invention relates to an incubator for biological material, with a multi-part housing, an incubation chamber formed by the housing for a biological material, at least one viewing device formed by the housing for observing the biological material in the incubation chamber, the viewing device at least one viewing window and has a viewing channel delimited by a wall, one formed by the housing second temperature control device for the incubation chamber, wherein the second temperature control device has a second temperature control chamber surrounding the incubation chamber, a second inlet opening through which a temperature control fluid can flow into the second temperature control chamber, and a second outlet opening through which the temperature control fluid can flow out of the second temperature control chamber, a humidification chamber formed by the housing and surrounding areas of the incubation chamber and a gas supply opening formed by the housing through which a gas can flow into the incubation chamber via the humidification chamber.
Bisher bekannte Inkubatoren, wie sie beispielsweise aus der AT 500 473 B1 und der DE 102 59 251 B4 hervorgehen, sind für einen oftmaligen Gebrauch vorgesehen. Dadurch sind sie recht aufwändig gebaut und kosten relativ viel. Zudem muss eine aufwändige Reinigung nach dem Gebrauch durchgeführt werden. Incubators known to date, such as those which emerge from AT 500 473 B1 and DE 102 59 251 B4, are intended for frequent use. As a result, they are built quite elaborately and cost a lot. In addition, extensive cleaning must be carried out after use.
Die Aufgabe des zweiten Aspekts der Erfindung besteht daher darin, einen weniger aufwändigen und einfachen Inkubator zu schaffen, welcher aber dennoch sämtliche Grundfunktionen zur Verfügung stellt. Vor allem soll der Inkubator für einen einmaligen (und vorsterilisierten) Gebrauch optimiert sein. The object of the second aspect of the invention is therefore to create a less complex and simple incubator which nevertheless provides all the basic functions. Above all, the incubator should be optimized for a single (and pre-sterilized) use.
Dies wird durch einen Inkubator mit den Merkmalen von Anspruch 16 gelöst. Demnach ist erfindungsgemäß vorgesehen, dass das Gehäuse vollständig aus zumindest bereichsweise transparentem, vorzugsweise spritzgegossenem, Kunststoff besteht. Anders ausgedrückt besteht der Inkubator aus zumindest bereichsweise transparenten Kunststoff. Dadurch sind sämtliche Grundfunktionen vorhanden, die einzelnen Komponenten sind aber auf einfache Weise aus einem Kunststoff und nicht aus Metall oder sonstigen aufwändigen Materialien hergestellt. Der Inkubator kann daher relativ günstig hergestellt und verkauft werden, sodass dieser für eine einmalige Benutzung ideal ist. This is achieved by an incubator having the features of claim 16. Accordingly, it is provided according to the invention that the housing consists entirely of at least partially transparent, preferably injection-molded, plastic. In other words, the incubator consists of plastic that is transparent at least in some areas. As a result, all the basic functions are available, but the individual components are made in a simple way from a plastic and not from metal or other complex materials. The incubator can therefore be manufactured and sold relatively cheaply, making it ideal for one-time use.
Grundsätzlich kann dieser aus Kunststoff bestehende Inkubator bzw. dessen Gehäuse beliebige viele einzelne Bauteile aufweisen. Um aber eine möglichst günstige und einfache Produktion zu ermöglichen, ist bevorzugt vorgesehen, dass das Gehäuse genau fünf, jeweils einstückige Bauteile umfasst. Konkret ist als erstes Bauteil ein Bodenelement vorgesehen, in welchem ein Teil der Inkubationskammer, die zweite Eintrittsöffnung, die zweite Austrittsöffnung, dieIn principle, this plastic incubator or its housing can have any number of individual components. However, in order to enable the most favorable and simple production possible, it is preferably provided that the housing comprises exactly five, each one-piece components. Specifically, a base element is provided as the first component, in which part of the incubation chamber, the second inlet opening, the second outlet opening, the
Gaszuführöffnung und ein Teil der zweiten Temperierkammer ausgebildet sind. Als zweites Bauteil ist ein mit dem Bodenelement, vorzugsweise reibschlüssig, verbindbarer, erster Zwischendeckel vorgesehen, welcher zusammen mit dem Bodenelement die zweite Temperierkammer bildet. Als drittes Bauteil ist ein auf dem ersten Zwischendeckel angeordnetes perforiertes Abdeckelement vorgesehen, welches zusammen mit dem Zwischendeckel die Befeuchtungskammer bildet. Als viertes Bauteil ist ein mit dem Bodenelement, vorzugsweise reibschlüssig, verbindbaresGas supply opening and part of the second temperature chamber are formed. A first intermediate cover which can be connected to the base element, preferably frictionally, is provided as the second component, which together with the base element forms the second temperature control chamber. A perforated cover element arranged on the first intermediate lid is provided as a third component, which, together with the intermediate lid, forms the humidification chamber. The fourth component is a component that can be connected to the floor element, preferably frictionally
Deckelelement vorgesehen, in welchem die Sichtvorrichtung, die erste Eintrittsöffnung, die erste Austrittsöffnung und ein Teil der ersten Temperierkammer ausgebildet sind. Als fünftes Bauteil ist ein mit dem Deckelelement, vorzugsweise reibschlüssig, verbindbarer, zweiter Zwischendeckel vorgesehen, welcher zusammen mit dem Deckelelement die erste Temperierkammer bildet. Cover element is provided in which the viewing device, the first inlet opening, the first outlet opening and part of the first temperature chamber are formed. A second intermediate cover which can be connected to the cover element, preferably frictionally, is provided as the fifth component, which together with the cover element forms the first temperature control chamber.
Weiters ist bevorzugt vorgesehen, dass im Deckelelement ein erstes, vorzugsweise planares oder linsenförmiges, Sichtfenster ausgebildet ist und im zweiten Zwischendeckel ein zweites Sichtfenster ausgebildet ist, wobei das zweite Sichtfenster die Inkubationskammer begrenzt. Der Sichtkanal wird durch dessen Wandung und die beiden Sichtfenster begrenzt bzw. gebildet. Furthermore, it is preferably provided that a first, preferably planar or lens-shaped, viewing window is formed in the cover element and a second viewing window is formed in the second intermediate cover, the second viewing window delimiting the incubation chamber. The viewing channel is limited or formed by its wall and the two viewing windows.
Es ist möglich, dass die einzelnen Bauteile aus unterschiedlichen Kunststoffen bestehen, die für die jeweilige Anwendung am besten geeignet sind. Für eine einfache Produktion ist allerdings bevorzugt vorgesehen, dass die fünf Bauteile aus demselben Kunststoff bestehen. It is possible that the individual components consist of different plastics that are best suited for the respective application. For simple production, however, it is preferably provided that the five components consist of the same plastic.
Besonders bevorzugt ist vorgesehen, dass der Kunststoff ein transparenter Thermoplast, vorzugsweise Polystyrol, ist. It is particularly preferred that the plastic is a transparent thermoplastic, preferably polystyrene.
Schutz wird auch begehrt für eine Anordnung umfassend einen erfindungsgemäßen Inkubator, eine Temperierfluidquelle, Temperierfluidleitungen, welche die Eintrittsöffnungen bzw. Austrittsöffnungen mit der Temperierfluidquelle verbinden, eine Gasquelle und eine die Gasquelle mit der Gaszuführöffnung verbindende Gasleitung. Besonders bevorzugt ist vorgesehen, dass die Temperierfluidleitung einen ersten Leitungsabschnitt, welcher die Temperierfluidquelle mit der ersten Eintrittsöffnung verbindet, einen zweiten Leitungsabschnitt, welcher die erste Austrittsöffnung mit der zweiten Eintrittsöffnung verbindet, und einen dritten Leitungsabschnitt, welcher die zweite Austrittsöffnung mit der Temperierfluidquelle verbindet, aufweist. Somit gelangt das„frische“ Temperierfluid zunächst mit einer etwas höheren Temperatur in die erste Temperierkammer, wo es leicht auskühlt, und anschließend in die zweiteProtection is also sought after for an arrangement comprising an incubator according to the invention, a temperature control fluid source, temperature control fluid lines which connect the inlet openings or outlet openings to the temperature control fluid source, a gas source and a gas line connecting the gas source to the gas supply opening. It is particularly preferably provided that the temperature control fluid line has a first line section which connects the temperature control fluid source to the first inlet opening, a second line section which connects the first outlet opening to the second inlet opening, and a third line section which connects the second outlet opening to the temperature control fluid source . This means that the “fresh” temperature control fluid first enters the first temperature control chamber at a slightly higher temperature, where it cools down slightly, and then into the second
Temperierkammer. Aufgrund der etwas höheren Temperatur in der erstenTemperature chamber. Because of the slightly higher temperature in the first
Temperierkammer wird ein Beschlagen des wenigstens einen Sichtfensters im feuchten Innenraum des Inkubators verhindert. The temperature chamber prevents the at least one viewing window in the humid interior of the incubator from fogging up.
Das Temperierfluid kann in Form eines Temperiergases oder einer Temperierflüssigkeit vorliegen. Beispielsweise kann eine spezielle Mischung aus verschiedenen Substanzen als Temperierflüssigkeit verwendet werden. Bevorzugt ist allerdings vorgesehen, dass als Temperierfluid Wasser verwendet wird. Mit Wasser als Temperierfluid wird durch seine hohe Wärmekapazität eine homogenere Wärmeverteilung erreicht. Wasser hat den zusätzlichen Vorteil, dass es recht schwer ist. Somit kann das an sich leichte, aus Kunststoff bestehende Gehäuse durch das zusätzliche Gewicht des Wassers gut und stabil auf dem Mikroskop platziert werden. Es ergibt sich ein sicherer Halt. The temperature control fluid can be in the form of a temperature control gas or a temperature control liquid. For example, a special mixture of different substances can be used as the temperature control liquid. However, it is preferably provided that water is used as the temperature control fluid. With water as the temperature control fluid, a more homogeneous heat distribution is achieved thanks to its high heat capacity. Water has the added benefit of being quite heavy. Thus, the housing, which is actually light and made of plastic, can be placed well and stably on the microscope due to the additional weight of the water. There is a secure hold.
Aus der Gasquelle wird ein Nährgas über eine Gasleitung und die Gaszuführöffnung in die Inkubationskammer eingeführt. Als Nährgas kann beispielsweise ein Gemisch aus 95 % Luft und 5 % Kohlendioxid eingesetzt werden. Als Nährmedium kann beispielsweise eine pH-gepufferte wässrige Lösung aus Zuckern, Aminosäuren, Vitaminen, Salzen und Schutzsubstanzen gegen mikrobielle Infektion eingesetzt werden. Ein Nährmedium (auch als Kulturmedium bezeichnet) dient zur Kultivierung des biologischen Materials. Konkret können sich Mikroorganismen, Zellen, Gewebe oder kleine Pflanzen und Tiere als biologisches Material in der Inkubationskammer befinden. A nutrient gas is introduced from the gas source into the incubation chamber via a gas line and the gas supply opening. A mixture of 95% air and 5% carbon dioxide, for example, can be used as the nutrient gas. A pH-buffered aqueous solution of sugars, amino acids, vitamins, salts and protective substances against microbial infection can be used as the nutrient medium. A nutrient medium (also known as a culture medium) is used to cultivate the biological material. Specifically, microorganisms, cells, tissues or small plants and animals can be found in the incubation chamber as biological material.
Wichtige Punkte und Merkmale der vorliegenden Erfindung(en) werden in den folgenden Absätzen mit teilweise anderen Worten angeführt: Ein generelles Problem bei Inkubatoren für die Lebendzellbeobachtung besteht darin, dass im mittig bzw. zentral angeordneten Kulturbehälter (Inkubationskammer) und im darüber liegenden Durchsichtbereich selbst systembedingt keine Heizung möglich ist. Hier kann es daher kälter sein, wodurch eine Kondensation und somit ein Beschlagen der Oberflächen mit Wassertropfen wahrscheinlicher wird. Durch die erste Temperiervorrichtung wird dieses Problem gelöst. Dieses ist über dem Kulturbehälter in einem Deckelteil in Form eines entsprechend großen, zylinderförmigen Kompartiments ausgebildet. Dieses ist mit der Deckfläche verschweißt und ist auch hoch genug, um eine Kondensation zu vermeiden. Hier bildet sich ein Luftkissen zum Kulturbehälter hin, das (wärme-)isolierend wirkt. Important points and features of the present invention (s) are cited in the following paragraphs, sometimes with different words: A general problem with incubators for live cell observation is that, due to the system, no heating is possible in the culture container (incubation chamber) arranged in the middle or in the overlying see-through area. It can therefore be colder here, making condensation and fogging of the surfaces with water droplets more likely. This problem is solved by the first temperature control device. This is designed above the culture container in a cover part in the form of a correspondingly large, cylindrical compartment. This is welded to the top surface and is also high enough to prevent condensation. Here an air cushion forms towards the culture container, which has a (heat) insulating effect.
Beheizt wird der Inkubator mit Wasser (Temperierfluid), wobei zuerst das Wasser beim Deckelteil in die erste Temperierkammer eintritt und erst nach Druchströmen des Deckelteils über eine Brücke (zweiter Leitungsabschnitt) in den Bodenteil fließt. Da beim Durchströmen des Deckels ein wenig Wärme abgegeben wird, ist es im Deckelteil etwas wärmer als im Bodenteil. Dies muss beim Einstellen der Temperatur für die Kultur der Zellen (biologisches Material) berücksichtigt werden, ermöglicht aber, dass die Deckfläche des Deckelteils nicht beschlägt und somit eine Beobachtung der Organismen in der Kulturkammer darunter möglich ist und bleibt. Dies wird vor allem dadurch erreicht, dass es im Deckelbereich wärmer ist. The incubator is heated with water (temperature control fluid), with the water first entering the first temperature control chamber at the cover part and only flowing through a bridge (second line section) into the base part after flowing through the cover part. Since a little heat is given off when flowing through the lid, it is slightly warmer in the lid part than in the bottom part. This must be taken into account when setting the temperature for the culture of the cells (biological material), but it makes it possible that the top surface of the cover part does not fog up and thus an observation of the organisms in the culture chamber below is and remains possible. This is achieved above all by the fact that it is warmer in the lid area.
Zumindest im Deckelteil, bevorzugt aber auch im Bodenteil, sind Vorrichtungen zur Lenkung des Heizmediums vorgesehen (Leitelemente bzw. Leitwände). Aufgrund der geometrischen Ausgestaltung der Vorrichtungen wird der mittig angeordnete Kulturbehälter gleichmäßig vom Heizmedium (Temperierfluid) umspült und somit auch gleichmäßig beheizt. At least in the cover part, but preferably also in the bottom part, devices for guiding the heating medium are provided (guide elements or guide walls). Due to the geometric configuration of the devices, the centrally arranged culture container is evenly washed around by the heating medium (temperature control fluid) and thus also heated evenly.
Es sind zwei Ausführungsformen für die Strömungslenkung möglich: There are two possible designs for the flow control:
Bei einem spiralförmigen bzw. mäanderförmigen Kanal wird die gesamte Temperierkammer gleichmäßig durchströmt und somit der ganze Bereich beheizt. Dabei kann das Heizmedium über einen Radialkanal von der Eintrittsöffnung zunächst direkt zum Kulturbehälter strömen. Der spiralförmige bzw. mäanderförmige beginnt dann innen und verläuft mit zunehmendem Radius nach außen bis die Austrittsöffnung erreicht ist. Die Temperatur beim Kulturbehälter muss den Ansprüchen der Organismen entsprechen; hier sollte es am wärmsten sein bzw. genau die Sollwert-Temperature vorherrschen. Ein radialer Temperaturverlust ist akzeptabel und sogar gewünscht. In the case of a spiral or meander-shaped channel, the entire temperature chamber is flowed through evenly and thus the entire area is heated. The heating medium can initially flow from the inlet opening directly to the culture container via a radial channel. The spiral or meander-shaped then begins on the inside and runs with increasing radius outwards to the outlet opening is reached. The temperature at the culture container must meet the requirements of the organisms; it should be the warmest here or the setpoint temperature should prevail. Radial temperature loss is acceptable and even desirable.
Bei einer zweiten Variante sind in der Temperierkammer stegförmige Schikanen (Leitelemente) angeordnet. Hier entstehen zirkuläre Ströme um die Schikanen, wodurch letztlich der Kulturbehälter in Form eines möglichst homogenen, zentralen Wirbels gleichmäßig (zirkulär, laminar) umströmt wird. Dementsprechend ist hier die Anordnung und Ausrichtung der Schikanen essentiell. In a second variant, web-shaped baffles (guide elements) are arranged in the temperature control chamber. Here, circular currents arise around the baffles, which ultimately means that the culture container in the form of a central vortex that is as homogeneous as possible is flowed evenly (circular, laminar) around. Accordingly, the arrangement and alignment of the baffles is essential here.
Besonders günstig ist eine Anordnung, bei der im Deckel ein spiralförmiger bzw. mäanderförmiger Kanal und im Bodenteil Schikanen angeordnet sind. Durch die größere Kontaktfläche der Innenwandungen wird im Bodenteil mehr Wärme abgegeben. Dadurch ist die Temperaturdifferenz in axialer Richtung größer. Dies ist günstig für die Vermeidung der Kondensation im zentralen Bereich. An arrangement is particularly favorable in which a spiral-shaped or meander-shaped channel is arranged in the cover and baffles are arranged in the bottom part. Due to the larger contact area of the inner walls, more heat is given off in the bottom part. As a result, the temperature difference in the axial direction is greater. This is beneficial for avoiding condensation in the central area.
Die Kreisläufe für das Heizmedium (Temperierfluid) sind vollkommen abgetrennt und separat von der Zufuhr des Nährmediums. The circuits for the heating medium (temperature control fluid) are completely separated and separate from the supply of the nutrient medium.
Bei einem Kulturbehälterdurchmesser von 20 mm ergibt sich eine Temperaturdifferenz zwischen der angeströmten Kulturbehälterwand und dem Zentrum des Kulturbehälters von etwa 0,8° C. Bei einem Kulturbehälterdurchmesser von 25 mm ergibt sich eine Temperaturdifferenz zwischen der angeströmten Kulturbehälterwand und dem Zentrum des Kulturbehälters von etwa 1 ,2° C. Die kleinere Variante ist bevorzugt, da hier eine homogenere Temperierung der Kulturkammer möglich ist. Ein zu großer Temperaturunterschied ist demnach ungünstig. With a culture container diameter of 20 mm there is a temperature difference between the wall of the culture container and the center of the culture container of about 0.8 ° C. With a culture container diameter of 25 mm there is a temperature difference between the culture container wall and the center of the culture container of about 1, 2 ° C. The smaller variant is preferred, since it allows more homogeneous temperature control of the culture chamber. Too great a temperature difference is therefore unfavorable.
Das Nährgas fließt über eine Gaszuführöffnung in eine Befeuchtungskammer, in welcher destilliertes Wasser oder ein befeuchteter Schwamm angeordnet ist. Das Nährgas nimmt vom umgebenden Wasser oder vom Schwamm Feuchtigkeit auf und strömt über obere Öffnungen in den Kulturbehälter und dann am Rand des Deckelbereichs zuerst in Richtung Deckelfäche und dann letztlich radial zwischen Deckel und Inkubatorrand hinaus. Die Durchlassöffnung für das Nährgas am Boden der Befeuchtungskammer ist entsprechend klein gewählt, sodass hier kein Wasser ausfließen kann. Denkbar ist auch, dass die oberen Durchlassöffnungen der Befeuchtungskammer verschieden groß sind oder eine unterschiedliche Anzahl aufweisen, um die Strömung und Verteilung des Nährgases zu steuern. The nutrient gas flows through a gas supply opening into a humidification chamber in which distilled water or a moistened sponge is arranged. The nutrient gas absorbs moisture from the surrounding water or from the sponge and flows through upper openings into the culture container and then at the edge of the cover area first in the direction of the cover surface and then finally radially out between the cover and the edge of the incubator. The passage opening for the nutrient gas at the bottom of the humidification chamber is selected to be correspondingly small so that no water can flow out here. It is also conceivable that the upper passage openings of the humidification chamber are of different sizes or have a different number in order to control the flow and distribution of the nutrient gas.
Die Oberseite des Kulturbehälters ragt in Form eines Steges in den sogenannten Atmosphären-Hohlraum. Dadurch wird eine Sterilisationskante erzeugt, die eine Kontamination der Zellkultur mit Bakterien vermeiden kann. The top of the culture container protrudes into the so-called atmospheric cavity in the form of a web. This creates a sterilization edge that can avoid contamination of the cell culture with bacteria.
Der Schwamm wird über die oberen Öffnungen mit einer Pipette oder einer Spritze mit sterilem und deionisiertem Wasser befeuchtet. Die Befeuchtung über den nährgasdurchströmten Schwamm reicht üblicherweise mindestens für zwei Tage. The sponge is moistened with sterile and deionized water through the upper openings with a pipette or a syringe. Humidification via the sponge through which the nutrient gas flows is usually sufficient for at least two days.
Wesentlich sind auch Abtropfrippen im Randbereich des Deckelteils. Dieser Randbereich stellt die kälteste Zone im Inkubator dar. Im Vergleich zu vorigen Ausführungen sind die Abtropfrippen größer und weisen eine Einkerbung am unteren Rand auf. Dort kann sich Kondenswasser sammeln und wieder zur Befeuchtungskammer abtropfen. Drip ribs in the edge area of the cover part are also essential. This edge area represents the coldest zone in the incubator. Compared to previous versions, the drip ribs are larger and have a notch on the lower edge. Condensation can collect there and drip back into the humidification chamber.
Um die Kondensation im Bereich des Sichtfensters zu vermeiden, ist die Strömung des Heizmediums im Deckel am wichtigsten. Dabei ist ein radialer Temperaturverlust (nach außen hin) gewollt, um die Kondensation in den äußeren Bereichen zu halten. Kurzum: Die Wärme soll in Bereiche gelenkt werden, wo keine Kondensation erfolgen soll. In order to avoid condensation in the area of the viewing window, the flow of the heating medium in the cover is most important. A radial temperature loss (towards the outside) is wanted in order to keep the condensation in the outer areas. In short: the heat should be directed into areas where no condensation should occur.
Durch eine zonal im Inkubatorrandbereich gesteigerte Kondensation geht auch weniger Atmosphärenbefeuchtung durch ausströmendes, feuchtes Nährgas verloren und der Inkubator kann länger betrieben werden (lange Inkubationszeit möglich). Increased condensation in the area around the edge of the incubator means that less humidification of the atmosphere is lost due to the outflowing, moist nutrient gas and the incubator can be operated for longer (long incubation times possible).
Ein weiteres Problem ist die Wärmeabgabe nach außen, wenn der Inkubator auf ein metallisches Mikroskop gestellt wird. Um die Kontaktfläche zu minimieren, weist die Bodenfläche drei konzentrische Stege auf, auf denen der Inkubator steht. Dadurch wird die direkte Wärmeleitung vom Inkubator zur Auflage minimiert, wobei zusätzlich ein isolierender Luftpolster entsteht. Der Inkubator wird über die Temperatur des Wassers und die Raumtemperatur gesteuert. Eine Rückkopplung ist möglich, indem über einen zusätzlichen Kanal oder Steg ein Thermometer eingeführt wird. Im Gegensatz zu einem High-End-Gerät aus Metall, wo eine Temperaturabgabe nach außen gewollt und durch eine sehr genaue Temperatursteuerung möglich ist und ausgeglichen wird, handelt es sich hier um ein träges System. Die Regelgenauigkeit liegt aber dennoch bei etwa ±0,5° C (beim High- End-Gerät ±0,05° C). Another problem is the heat dissipation to the outside when the incubator is placed on a metal microscope. In order to minimize the contact area, the bottom surface has three concentric bars on which the incubator stands. This minimizes the direct heat conduction from the incubator to the support, with an additional insulating air cushion being created. The incubator is controlled by the temperature of the water and the room temperature. Feedback is possible by inserting a thermometer through an additional channel or bar. In contrast to a high-end device made of metal, where a temperature release to the outside is wanted and is possible and balanced by a very precise temperature control, this is a sluggish system. The control accuracy is still around ± 0.5 ° C (with the high-end device ± 0.05 ° C).
Zur Beobachtung kann im Deckelteil oder im Kulturbehälter eine (gedruckte) Linse enthalten sein. A (printed) lens can be contained in the lid part or in the culture container for observation.
Weitere Einzelheiten und Vorteile der vorliegenden Erfindung werden anhand der Figurenbeschreibung unter Bezugnahme auf die in den Zeichnungen dargestellten Ausführungsbeispiele im Folgenden näher erläutert. Darin zeigen: Further details and advantages of the present invention are explained in more detail below on the basis of the description of the figures with reference to the exemplary embodiments shown in the drawings. Show in it:
Fig. 1 schematisch eine Anordnung mit einem Inkubator, 1 schematically shows an arrangement with an incubator,
Fig. 2 perspektivisch eine Explosionsdarstellung eines Inkubators, 2 shows an exploded view of an incubator in perspective,
Fig. 3 perspektivisch das Bodenelement und das Deckelelement, 3 shows the bottom element and the cover element in perspective,
Fig. 4 perspektivisch das Bodenelement, der erste Zwischendeckel und das Fig. 4 is a perspective view of the base element, the first intermediate cover and the
Abdeckelement, Cover element,
Fig. 5 perspektivisch das Deckelelement und der zweite Zwischendeckel, 5 shows the cover element and the second intermediate cover in perspective,
Fig. 6 das Bodenelement samt erstem Zwischendeckel mit diversen Schnitten,6 the floor element including the first intermediate cover with various cuts,
Fig. 7 das Deckelelement samt zweitem Zwischendeckle mit diversen Schnitten,7 shows the cover element including the second intermediate cover with various cuts,
Fig. 8-11 Schnitte durch die Temperierkammer mit unterschiedlich ausgebildeten Fig. 8-11 Sections through the temperature chamber with differently designed
Elementen zur Strömungslenkung, Elements for flow control,
Fig. 12 einen vertikalen Schnitt durch den Inkubator mit veranschaulichter 12 shows a vertical section through the incubator with the illustrated
Gasströmung, Gas flow,
Fig. 13 eine Draufsicht auf ein alternatives Ausführungsbeispiel des 13 is a plan view of an alternative embodiment of the
Deckelelements und Cover element and
Fig. 14 eine perspektivische Ansicht eines alternativen Ausführungsbeispiels des 14 is a perspective view of an alternative embodiment of the
Bodenelements. In Fig. 1 zeigt eine Anordnung 40 mit einem Inkubator 6 samt Gehäuse, einer Temperierfluidquelle 41 , einer Temperierfluidleitung 42, einer Gasquelle 43 und einer Gasleitung 44. In der Temperierfluidquelle 41 ist ein Temperierfluid T enthalten. Dieses Temperierfluid T kann beispielsweise Wasser sein. Über den ersten Leitungsabschnitt 42a der Temperierfluidleitung 42 ist die Temperierfluidquelle 41 mit der ersten Eintrittsöffnung 13 der ersten Temperiervorrichtung 11 verbunden. Über diese erste Eintrittsöffnung 13 gelangt das Temperierfluid T in die erste Temperierkammer 12. Diese Temperierkammer 12 ist zumindest bereichsweise um die Sichtvorrichtung 8 herum ausgebildet. Die Sichtvorrichtung 8 weist wenigstens ein Sichtfenster 9 und einen Sichtkanal 10 auf. Konkret sind ein erstes (oberes) Sichtfenster 91 und ein zweites (unteres) Sichtfenster 92 vorgesehen. Die erste Temperiervorrichtung 11 weist auch eine erste Austrittsöffnung 14 auf, über welche das Temperierfluid T wieder aus der Temperierkammer 12 austreten kann. Von dort gelangt das Temperierfluid T über den zweiten Leitungsabschnitt 42b zur zweiten Eintrittsöffnung 23 der zweiten Temperiervorrichtung 21. Diese zweite Temperiervorrichtung 21 weist eine zweite Temperierkammer 22 auf, welche zumindest bereichsweise eine Inkubationskammer K (kann auch als Kultivierkammer bezeichnet werden) umgibt. In dieser Inkubationskammer K ist biologisches Material M enthalten. Dieses biologische Material M kann beispielsweise Zellen, Mikroorganismen oder Ähnliches enthalten. Das Temperierfluid T kann dann über die zweite Austrittsöffnung 24 der zweiten Temperiervorrichtung 21 wieder den Inkubator 6 verlassen. Über den dritten Leitungsabschnitt 42c kann dann das gebrachte Temperierfluid entsorgt werden bzw. in einen Abfluss fließen. Bevorzugt ist allerdings vorgesehen, dass über den dritten Leitungsabschnitt 42c das Temperierfluid T wieder zur Temperierfluidquelle 41 geleitet wird. Somit ist ein Temperierfluidkreislauf gegeben ist. Zudem weist der Inkubator 6 eine Gaszufuhröffnung 39 auf. Über diese Gaszufuhröffnung 39 gelangt Gas G (z. B. ein Trockengasgemisch besteht zu 95 % aus Luft und zu 5 % aus CO2) in den Inkubator 6. Das Gas G kann dann durch hier nicht gezeigte schmale Öffnungen bzw. Spalte wieder entweichen. Das Nährmedium, welches das lebende biologische Material M mit Nährstoffen versorgt, wird direkt in die Inkubationskammer K eingebracht. Floor element. 1 shows an arrangement 40 with an incubator 6 including housing, a temperature control fluid source 41, a temperature control fluid line 42, a gas source 43 and a gas line 44. The temperature control fluid source 41 contains a temperature control fluid T. This temperature control fluid T can for example be water. The temperature control fluid source 41 is connected to the first inlet opening 13 of the first temperature control device 11 via the first line section 42a of the temperature control fluid line 42. The temperature control fluid T reaches the first temperature control chamber 12 via this first inlet opening 13. This temperature control chamber 12 is formed around the viewing device 8 at least in regions. The viewing device 8 has at least one viewing window 9 and one viewing channel 10. Specifically, a first (upper) viewing window 91 and a second (lower) viewing window 92 are provided. The first temperature control device 11 also has a first outlet opening 14, via which the temperature control fluid T can exit again from the temperature control chamber 12. From there, the temperature control fluid T reaches the second inlet opening 23 of the second temperature control device 21 via the second line section 42b. This second temperature control device 21 has a second temperature control chamber 22 which at least partially surrounds an incubation chamber K (can also be referred to as a cultivation chamber). Biological material M is contained in this incubation chamber K. This biological material M can contain, for example, cells, microorganisms or the like. The temperature control fluid T can then leave the incubator 6 again via the second outlet opening 24 of the second temperature control device 21. The brought temperature control fluid can then be disposed of via the third line section 42c or can flow into a drain. However, it is preferably provided that the temperature control fluid T is conducted again to the temperature control fluid source 41 via the third line section 42c. A temperature control fluid circuit is thus provided. The incubator 6 also has a gas supply opening 39. Gas G (e.g. a dry gas mixture consists of 95% air and 5% CO2) enters the incubator 6 via this gas supply opening 39. The gas G can then escape again through narrow openings or gaps, not shown here. The nutrient medium, which supplies the living biological material M with nutrients, is introduced directly into the incubation chamber K.
Eine derartige Anordnung 40 mit einem Inkubator 6 wird meist in Laboren verwendet, um über ein Mikroskop das Wachstum und die Weiterentwicklung des biologischen Materials M zu beobachten. Dafür ist es besonders wichtig, dass über die Sichtvorrichtung 8 eine ungehinderte Beobachtung des biologischen Materials M möglich ist. Da das Temperierfluid T meist auf einen Bereich zwischen 30° und 50° C, bevorzugt auf 37° bis 40° C, erwärmt wird, ist es möglich, dass Teile des Inkubators 6 beschlagen. Besonders nachteilig ist es, wenn das wenigstens eine Sichtfenster 9 beschlägt. Um dies zu vermeiden, wird die Sichtvorrichtung 8 über die erste Temperiervorrichtung 11 temperiert. Bei dieser Temperierung kühlt das Temperierfluid T bereits geringfügig ab, sodass in der zweiten Temperierkammer 22 eine geringfügig niedrigere Temperatur herrscht (z. B. um 1 ° C niedriger). Dadurch ist es im (oberen) Bereich des Inkubators 6 geringfügig wärmer, wodurch ein Beschlagen verhindert wird. Somit hat das Temperierfluid T eine Doppelfunktion: Einerseits wird die Inkubationskammer K auf einer gleichbleibenden, idealen Temperatur gehalten. Andererseits dient das Temperierfluid T auch dazu, ein Beschlagen der Sichtvorrichtung 8 bzw. der Sichtfenster 91 und 92 zu verhindern. Such an arrangement 40 with an incubator 6 is mostly used in laboratories in order to observe the growth and further development of the biological material M via a microscope. For this it is particularly important that you have the Viewing device 8 an unhindered observation of the biological material M is possible. Since the temperature control fluid T is usually heated to a range between 30 ° and 50 ° C., preferably to 37 ° to 40 ° C., it is possible that parts of the incubator 6 may fog up. It is particularly disadvantageous if the at least one viewing window 9 fogs up. In order to avoid this, the viewing device 8 is temperature-controlled via the first temperature control device 11. During this temperature control, the temperature control fluid T cools down slightly, so that a slightly lower temperature prevails in the second temperature control chamber 22 (for example 1 ° C. lower). As a result, it is slightly warmer in the (upper) area of the incubator 6, which prevents fogging. The temperature control fluid T thus has a double function: on the one hand, the incubation chamber K is kept at a constant, ideal temperature. On the other hand, the temperature control fluid T also serves to prevent the viewing device 8 or the viewing windows 91 and 92 from fogging up.
In Fig. 2 ist perspektivisch eine Explosionsdarstellung eines Ausführungsbeispiels eines Inkubators 6 gezeigt. Dieser Inkubator 6 weist alle wesentlichen Komponenten eines Inkubators 6 auf, ist aber dennoch recht einfach aufgebaut. Vor allem besteht dieser Inkubator 6 aus wenigen einzelnen Bauteilen, die jeweils aus einem transparenten Kunststoff (vorzugsweise spritzgegossenem Polystyrol) bestehen. Konkret ist das Gehäuse 7 dieses Inkubators 6 aus fünf Bauteilen aufgebaut: Bodenelement 1 , erster Zwischendeckel 2, Abdeckelement 3, Deckelelement 4 und zweiter Zwischendeckel 5. An exploded view of an embodiment of an incubator 6 is shown in perspective in FIG. This incubator 6 has all the essential components of an incubator 6, but is nevertheless quite simply constructed. Above all, this incubator 6 consists of a few individual components, each made of a transparent plastic (preferably injection-molded polystyrene). Specifically, the housing 7 of this incubator 6 is made up of five components: base element 1, first intermediate cover 2, cover element 3, cover element 4 and second intermediate cover 5.
Der zweite Zwischendeckel 5 ist in das Deckelelement 4 einsteckbar. Dadurch wird vom Deckelelement 4 und vom zweiten Zwischendeckel 5 die erste Temperierkammer 12 der ersten Temperiervorrichtung 11 gebildet. Erkennbar ist in Fig. 2 auch die erste Eintrittsöffnung 13 und die erste Austrittsöffnung 14 für das Temperierfluid T. Um die Zentralachse Z herum ist die erste Temperierkammer 12 ringförmig ausgebildet. Die Zentralachse Z führt durch das erste Sichtfenster 91 und den Sichtkanal 10 sowie durch das zweite Sichtfenster 92, welches durch den zweiten Zwischendeckel 5 gebildet ist. Die Bodenfläche 12b der ersten Temperierkammer 11 ist ebenfalls am zweiten Zwischendeckel 5 ausgebildet. Dagegen ist die innere Wandfläche 12i und die äußere Wandfläche 12a der ersten Temperierkammer 11 am Deckelelement 4 ausgebildet. Ebenso ist die Deckfläche 12d der ersten Temperierkammer 11 am Deckelelement 4 ausgebildet. Der äußere Umfang des am zweiten Zwischendeckel 5 ausgebildeten Halterings 45 korrespondiert mit einem inneren Umfang eines am Deckelelement 4 ausgebildeten Halterings 46. Durch Aufschieben des zweiten Zwischendeckels 5 auf das Deckelelement 4 werden diese beiden Bauteile 4 und 5 über die korrespondierenden Halteringe 45 und 46 reibschlüssig aneinander gehalten. Der zweite Zwischendeckel 5 bildet also eine Art Abdeckung, mit der die Temperierkammer 12 geschlossen wird. The second intermediate cover 5 can be inserted into the cover element 4. The first temperature control chamber 12 of the first temperature control device 11 is thereby formed by the cover element 4 and the second intermediate cover 5. The first inlet opening 13 and the first outlet opening 14 for the temperature control fluid T can also be seen in FIG. 2. The first temperature control chamber 12 is annular around the central axis Z. The central axis Z leads through the first viewing window 91 and the viewing channel 10 as well as through the second viewing window 92, which is formed by the second intermediate cover 5. The bottom surface 12b of the first temperature control chamber 11 is also formed on the second intermediate cover 5. In contrast, the inner wall surface 12i and the outer wall surface 12a of the first temperature control chamber 11 are formed on the cover element 4. The top surface 12d of the first temperature control chamber 11 is also formed on the cover element 4. The outer periphery of the second intermediate cover 5 formed Retaining ring 45 corresponds to an inner circumference of a retaining ring 46 formed on the cover element 4. By sliding the second intermediate cover 5 onto the cover element 4, these two components 4 and 5 are frictionally held together by the corresponding retaining rings 45 and 46. The second intermediate cover 5 thus forms a type of cover with which the temperature control chamber 12 is closed.
Ähnlich verhält es sich auch mit dem Bodenelement 1 und dem ersten Zwischendeckel 2. Der erste Zwischendeckel 2 weist eine zentrale Öffnung 47 auf. Durch diese ist die Wandung der Inkubationskammer K durchsteckbar. Die äußere Umfangsfläche 48 korrespondiert mit der inneren Umfangsfläche 49 des Bodenelements 1. Durch Einschieben des ersten Zwischendeckels 2 in das Bodenelement 1 werden die beiden Bauteile 1 und 2 reibschlüssig miteinander verbunden, wobei die äußere Umfangsfläche 48 an die innere Umfangsfläche 49 des Bodenelements 1 gepresst bzw. gedrückt wird. In diesem zusammengesetzten Zustand wird zwischen den beiden Bauteilen 1 und 2 die zweite Temperierkammer 22 gebildet. Diese zweite Temperierkammer 22 weist die durch den ersten Zwischendeckel 2 gebildete Deckfläche 22d auf. Zudem wird die zweite Temperierkammer 22 durch die jeweils am Bodenelement 1 ausgebildete äußere Wandfläche 22a, die Bodenfläche 22b und die innere Wandfläche 22i gebildet bzw. begrenzt. Am Bodenelement 1 sind auch die zweite Eintrittsöffnung 23 und zweite Austrittsöffnung 24 für das Temperierfluid T ausgebildet. Weiters weist dieses Bodenelement 1 des Inkubators 6 die Gaszuführöffnung 39 auf. In diesem Bodenelement 1 sind auch bereits die Leitelemente 31 in Form der Hauptstege 33 und der Seitenstege 36 erkennbar. Zudem ist im Bodenelement 1 eine Gaszuführkammer 50 ausgebildet. Diese wird durch den am ersten Zwischendeckel 2 ausgebildeten Abdeckabschnitt 51 abgedeckt. In diesem Abdeckabschnitt 51 befindet sich eine Durchlassöffnung 52. Über diese Durchlassöffnung 52 kann das über die Gaszuführöffnung 39 zugeführte Gas G nach oben strömen und gelangt in einen Bereich zwischen dem Deckelelement 4 und dem Bodenelement 1. In geschlossenem bzw. zusammengebauten Zustand ist das Bodenelement 1 mit dem Deckelelement 4 verbunden, da die innere Umfangsfläche 53 des Deckelelements 4 an der äußeren Umfangsfläche 54 des Bodenelements 1 anliegt. Das Deckelelement 4 ist somit auf das Bodenelement 1 aufgesteckt. Eine genaue Positionierung wird dabei durch die im Deckelelement 4 ausgebildeten Führungselemente 55 und die im Bodenelement 1 ausgebildeten, korrespondierenden Führungsausnehmungen 56 ermöglicht. The situation is similar with the base element 1 and the first intermediate cover 2. The first intermediate cover 2 has a central opening 47. The wall of the incubation chamber K can be pushed through this. The outer circumferential surface 48 corresponds to the inner circumferential surface 49 of the base element 1. By pushing the first intermediate cover 2 into the base element 1, the two components 1 and 2 are frictionally connected to one another, the outer circumferential surface 48 being pressed or pressed against the inner circumferential surface 49 of the base element 1 is pressed. In this assembled state, the second temperature control chamber 22 is formed between the two components 1 and 2. This second temperature control chamber 22 has the top surface 22d formed by the first intermediate cover 2. In addition, the second temperature control chamber 22 is formed or delimited by the outer wall surface 22a, the bottom surface 22b and the inner wall surface 22i, each formed on the bottom element 1. The second inlet opening 23 and second outlet opening 24 for the temperature control fluid T are also formed on the base element 1. Furthermore, this base element 1 of the incubator 6 has the gas supply opening 39. In this base element 1, the guide elements 31 in the form of the main webs 33 and the side webs 36 can also be seen. In addition, a gas supply chamber 50 is formed in the base element 1. This is covered by the cover section 51 formed on the first intermediate cover 2. In this cover section 51 there is a passage opening 52. Via this passage opening 52, the gas G supplied via the gas supply opening 39 can flow upwards and reaches an area between the cover element 4 and the base element 1. The base element 1 is in the closed or assembled state connected to the cover element 4, since the inner circumferential surface 53 of the cover element 4 rests against the outer circumferential surface 54 of the base element 1. The cover element 4 is thus pushed onto the base element 1. Precise positioning is ensured by the im Cover element 4 formed guide elements 55 and formed in the bottom element 1, corresponding guide recesses 56 allows.
In geschlossenem Zustand befindet sich zwischen dem Deckelelement 4 und dem Bodenelement 1 das Abdeckelement 3. Dieses Abdeckelement 3 liegt auf dem ersten Zwischendeckel 2 auf. Zwischen dem ersten Zwischendeckel 2 und dem Abdeckelement 3 befindet sich eine Befeuchtungskammer 38. In dieser Befeuchtungskammer 38 kann ein saugstarker Polymer-Schwamm eingelegt werden. Dieser erlaubt eine Wasseraufnahme von bis zu 20 ml. Das Abdeckelement 3 weist eine zentrale Öffnung 57 auf. Mit dieser zentralen Öffnung 57 ist das Abdeckelement 3 auf die Außenwandung der Inkubationskammer K aufsteckbar. Zudem sind im Abdeckelement 3 mehrere (konkret zwölf) radiale Gasdurchtrittsöffnungen 58 ausgebildet. Diese weisen einen Durchmesser von etwa 1 mm auf. Die Gasdurchtrittsöffnungen 58 dienen einerseits dem Befüllen der Befeuchtungskammer 38 mit sterilem Wasser und andererseits dem Gasdurchtritt, wobei das Gas G beim Durchströmen der Befeuchtungskammer 38 das in der Befeuchtungskammer 38 befindliche Wasser mitnimmt, wodurch eine Luftfeuchte von etwa 98 % erreicht wird. Danach gelangt das durch die Gasdurchtrittsöffnungen 58 hindurchgetretene, wasserdampfangereicherte Gas G über die zentrale Öffnung 57 in die Inkubationskammer K und verhindert dort das Austrocknen des biologischen Materials M. In the closed state, the cover element 3 is located between the cover element 4 and the base element 1. This cover element 3 rests on the first intermediate cover 2. A humidification chamber 38 is located between the first intermediate cover 2 and the cover element 3. A highly absorbent polymer sponge can be inserted into this humidification chamber 38. This allows up to 20 ml of water to be absorbed. The cover element 3 has a central opening 57. With this central opening 57, the cover element 3 can be plugged onto the outer wall of the incubation chamber K. In addition, several (specifically twelve) radial gas passage openings 58 are formed in the cover element 3. These have a diameter of about 1 mm. The gas passage openings 58 serve, on the one hand, to fill the humidification chamber 38 with sterile water and, on the other hand, to allow gas to pass through, whereby the gas G entrains the water in the humidification chamber 38 as it flows through the humidification chamber 38, whereby a humidity of about 98% is reached. The water vapor-enriched gas G that has passed through the gas passage openings 58 then passes through the central opening 57 into the incubation chamber K and prevents the biological material M from drying out there.
In Fig. 3 sind die Komponenten des Inkubators 6 teilweise zusammengesetzt dargestellt. Das Deckelelement 4 weist die erste Eintrittsöffnung 13 und die erste Austrittsöffnung 14 auf. Das Bodenelement 1 weist die zweite Eintrittsöffnung 23, die zweite Austrittsöffnung 24 und die Gaszuführöffnung 39 auf. Zudem sind Teile des zweiten Leitungsabschnitts 42b und des dritten Leitungsabschnitts 42c gezeigt. Darüber hinaus ist auch ein Teil der Gasleitung 44 dargestellt. Das Abdeckelement 3 ist im Bodenelement 1 aufgenommen und weist die Gasdurchtrittsöffnungen 58 auf. Auch die Führungsausnehmungen 56 sind erkennbar. In Fig. 3 the components of the incubator 6 are shown partially assembled. The cover element 4 has the first inlet opening 13 and the first outlet opening 14. The base element 1 has the second inlet opening 23, the second outlet opening 24 and the gas supply opening 39. In addition, parts of the second line section 42b and of the third line section 42c are shown. In addition, part of the gas line 44 is also shown. The cover element 3 is received in the base element 1 and has the gas passage openings 58. The guide recesses 56 can also be seen.
In Fig. 4 sind das Bodenelement 1 , der erste Zwischendeckel 2 und das Abdeckelement 3 dargestellt. Zudem sind die zweite Temperierkammer 22 und die Befeuchtungskammer 38 als perspektivische Objekte dargestellt. Natürlich sind dies keine konkreten Bauteile, sondern es ergeben sich die Abmessungen und die Formen dieser beiden Kammern 22 und 38 durch die Wandungen und Flächen der anderen Bauteile 1 , 2 und 3. Es ist jedenfalls erkennbar, dass sowohl die zweite Temperierkammer 22 als auch die Befeuchtungskammer 38 jeweils ringförmig um die Zentralachse Z herum ausgebildet sind. Die zweite Temperierkammer 22 ist zur Aufnahme von 30 bis 50 ml, vorzugsweise von etwa 40 ml, Temperierfluid T geeignet. Die Befeuchtungskammer 38 ist zur Aufnahme von 15 bis 25, vorzugsweise von etwa 20 ml, Flüssigkeit geeignet. In Fig. 4 the base element 1, the first intermediate cover 2 and the cover element 3 are shown. In addition, the second temperature chamber 22 and the humidification chamber 38 are shown as perspective objects. Of course they are no concrete components, but the dimensions and shapes of these two chambers 22 and 38 result from the walls and surfaces of the other components 1, 2 and 3. In any case, it can be seen that both the second temperature chamber 22 and the humidification chamber 38 each are formed ring-shaped around the central axis Z around. The second temperature chamber 22 is suitable for holding 30 to 50 ml, preferably approximately 40 ml, of temperature control fluid T. The humidification chamber 38 is suitable for receiving 15 to 25, preferably about 20 ml, liquid.
Auf gleiche Art und Weise ist in Fig. 5 perspektivisch das Deckelelement 4 samt zweiten Zwischendeckel 5 und dazwischen ausgebildeter erster Temperierkammer 12 dargestellt. Diese Temperierkammer 12 enthält 30 bis 50 ml, vorzugsweise etwa 40 ml, Temperierfluid T. Auch hier bilden natürlich wieder die inneren Flächen bzw. Wandungen der Bauteile 4 und 5 die Temperierkammer 12. In the same way, the cover element 4 together with the second intermediate cover 5 and the first temperature control chamber 12 formed between them is shown in perspective in FIG. 5. This temperature control chamber 12 contains 30 to 50 ml, preferably about 40 ml, temperature control fluid T. Here, too, the inner surfaces or walls of the components 4 and 5 naturally form the temperature control chamber 12.
In Fig. 6 ist passend zu Fig. 4 rechts oben das Bodenelement 1 und der erste Zwischendeckel 2 dargestellt. Im linken, unteren Bereich ist eine Draufsicht auf diesen Teil des Inkubators 6 ersichtlich. In dieser Draufsicht sind die Schnittlinien B-B und C-C eingezeichnet. Im rechts unten dargestellten Schnitt C-C ist die Gaszuführöffnung 39 erkennbar, über welche Gas G in die Gaszuführkammer 50 gelangt. Über die Durchlassöffnung 52 hindurch gelangt das eingeströmte Gas G durch den ersten Zwischendeckel 2 hindurch in Richtung Befeuchtungskammer 38. Erkennbar ist in diesem Schnitt C-C, dass der erste Zwischendeckel 2 im äußeren Bereich an einer Innenwandung des Bodenelements 1 anliegt und im inneren Bereich an der Wandung der Inkubationskammer K außen anliegt. Dadurch wird der zweite Zwischendeckel 2 relativ fest mit dem Bodenelement 1 verbunden und es bildet sich zwischen diesen beiden Bauteilen 1 und 2 die zweite Temperierkammer 22. Im Schnitt B-B ist diese Verbindung zwischen erstem Zwischendeckel 2 und Bodenelement 1 ebenfalls erkennbar. Im Schnitt B-B ist auch die Schnittlinie A-A eingezeichnet. Der dazugehörige Schnitt A-A ist links oben zu Fig. 6 dargestellt. Vor allem ergibt sich aus diesem Schnitt A-A wiederum die zweite Eintrittsöffnung 23, die zweite Austrittsöffnung 24 und die Gaszuführöffnung 39 sowie die Durchlassöffnung 52. Besonders gut sind in diesem Schnitt A-A aber die Leitelemente 31 erkennbar. Konkret gibt es zwei Arten von Leitelementen 31. Einerseits sind dies die Hauptstege 33 und andererseits die Seitenstege 36. Die Seitenstege 36 befinden sich relativ nah an der äußeren Wandfläche 22a der zweiten Temperierkammer 22 und sind zur radialen Richtung um ca. 35° bis 55° schräggestellt. Die Leitelemente 31 dienen zur Strömungsleitung des einströmenden Temperierfluids T. Zwischen den Leitelementen 31 und den Wandflächen 22i und 22a sind Durchströmöffnungen 32 ausgebildet. Die Leitelemente 31 sind in regelmäßigen Abständen zueinander und gleichmäßig beabstandet zu einer Zentralachse Z angeordnet. Die Hauptstege 33 umfassen einen ersten, radial außenliegenden, im Wesentlichen radial ausgerichteten, gerade Leitabschnitt 34. Zudem weisen die Hauptstege 33 einen näher an der Zentralachse Z liegenden, geraden, zweiten Leitabschnitt 35 auf. Der zweite Leitabschnitt 35 ist in einem Winkel zwischen 15° und 65° zum ersten Leitabschnitt 34 ausgerichtet. In diesem Fall beträgt dieser Winkel a in etwa 40°. In Fig. 6, matching to Fig. 4, the bottom element 1 and the first intermediate cover 2 are shown at the top right. A plan view of this part of the incubator 6 can be seen in the lower left area. In this top view, the cutting lines BB and CC are drawn. In the section CC shown at the bottom right, the gas supply opening 39 can be seen, via which gas G reaches the gas supply chamber 50. The gas G that has flowed in passes through the passage opening 52 through the first intermediate cover 2 in the direction of the humidification chamber 38. It can be seen in this section CC that the first intermediate cover 2 rests in the outer area on an inner wall of the base element 1 and in the inner area on the wall the incubation chamber K rests on the outside. As a result, the second intermediate cover 2 is connected relatively firmly to the base element 1 and the second temperature chamber 22 is formed between these two components 1 and 2. This connection between the first intermediate cover 2 and the base element 1 can also be seen in section BB. Section line AA is also drawn in section BB. The associated section AA is shown at the top left of FIG. Above all, the second inlet opening 23, the second outlet opening 24 and the gas supply opening 39 as well as the passage opening 52 result from this section AA. However, the guide elements 31 can be seen particularly well in this section AA. Specifically, there are two types of guide elements 31. On the one hand, these are the main webs 33 and, on the other hand, the Side webs 36. The side webs 36 are located relatively close to the outer wall surface 22a of the second temperature control chamber 22 and are inclined by approx. 35 ° to 55 ° to the radial direction. The guide elements 31 serve to guide the flow of the inflowing temperature control fluid T. Between the guide elements 31 and the wall surfaces 22i and 22a, throughflow openings 32 are formed. The guide elements 31 are arranged at regular intervals from one another and at a uniform distance from a central axis Z. The main webs 33 comprise a first, radially outer, essentially radially aligned, straight guide section 34. In addition, the main webs 33 have a straight, second guide section 35 that is closer to the central axis Z. The second guide section 35 is oriented at an angle between 15 ° and 65 ° to the first guide section 34. In this case this angle a is approximately 40 °.
In Fig. 7 sind dieselben Darstellungen wie in Fig. 6 enthalten, nur bezogen auf das Deckelelement 4 und den zweiten Zwischendeckel 5. Rechts oben sind das Deckelelement 4 samt erster Eintrittsöffnung 13 und erster Austrittsöffnung 14 sowie der zweite Zwischendeckel 5 dargestellt. Links unten ist eine Draufsicht auf das Deckelelement 4 gezeigt. In dieser Draufsicht sind die Schnittlinien H-H und l-l eingezeichnet. Im rechts unten dargestellten Schnitt l-l ist die erste Austrittsöffnung 14 gezeigt, welche von der ersten Temperierkammer 12 abzweigt. Der zweite Zwischendeckel 5, im speziellen dessen Haltering 45, ist korrespondierend zum Haltering 46 des Deckelelements 4 ausgebildet. Aus dem Schnitt H-H sind besonders gut die beiden Sichtfenster 91 und 92 sowie der Sichtkanal 10 der Sichtvorrichtung 8 erkennbar. Diese sind zentral im Inkubator 6 angeordnet. In diesem Schnitt H-H sind auch die Abtropfkammern 59 erkennbar. Im Schnitt H-H ist die Schnittlinie G-G eingezeichnet. Der dazugehörige Schnitt G-G ist in Fig. 7 links oben dargestellt. Gut sind in diesem Schnitt G-G die ringförmig um die Inkubationskammer K angeordneten Abtropfkammern 59 und die Abtropfrippen 60 erkennbar. Die von der Inkubationskammer K aufsteigende Inkubationsluft ist wasserdampfgesättigt und kühlt im Deckel-Randbereich ab und kondensiert an den Wänden der Abtropfkammern 59 und an den Abtropfrippen 60. Das kondensierte Kondenswasser tropft dann in die Befeuchtungskammer 38 zurück. Im Schnitt G-G sind auch die Eintrittsöffnung 13 und die erste Austrittsöffnung 14 sowie die erste Temperierkammer 12 dargestellt. Die erste Temperierkammer 12 ist seitlich von der äußeren Wandfläche 12a und der inneren Wandfläche 12i begrenzt. Auch in dieser ersten Temperierkammer 12 sind Leitelemente 31 angeordnet, welche wieder in Seitenstege 36 und Hauptstege 33 unterteilt sind. Auch diese Hauptstege 33 weisen einen ersten Leitabschnitt 34 und einen zweiten Leitabschnitt 35 auf. 7 contains the same representations as in FIG. 6, only in relation to the cover element 4 and the second intermediate cover 5. At the top right, the cover element 4 together with the first inlet opening 13 and first outlet opening 14 and the second intermediate cover 5 are shown. A top view of the cover element 4 is shown at the bottom left. In this top view, the cutting lines HH and II are drawn. The first outlet opening 14, which branches off from the first temperature control chamber 12, is shown in the lower right-hand section II. The second intermediate cover 5, in particular its retaining ring 45, is designed to correspond to the retaining ring 46 of the cover element 4. The two viewing windows 91 and 92 and the viewing channel 10 of the viewing device 8 can be seen particularly well from the section HH. These are arranged centrally in the incubator 6. The drip chambers 59 can also be seen in this section HH. The section line GG is drawn in section HH. The associated section GG is shown in Fig. 7 top left. The drip chambers 59 arranged in a ring around the incubation chamber K and the drip ribs 60 can be clearly seen in this section GG. The incubation air rising from the incubation chamber K is saturated with water vapor and cools in the lid edge area and condenses on the walls of the draining chambers 59 and on the draining ribs 60. The condensed water then drips back into the humidification chamber 38. In the section GG, the inlet opening 13 and the first outlet opening 14 as well as the first temperature control chamber 12 are shown. The first temperature chamber 12 is to the side of the outer wall surface 12a and the inner Wall area 12i limited. Guide elements 31, which are again subdivided into side webs 36 and main webs 33, are also arranged in this first temperature control chamber 12. These main webs 33 also have a first guide section 34 and a second guide section 35.
In den Figuren 8, 9, 10 und 11 sind weitere Varianten dargestellt, wie die Temperierkammern 12 bzw. 22 ausgebildet sind und vor allem wie darin die Strömungsleitung erfolgt. FIGS. 8, 9, 10 and 11 show further variants of how the temperature control chambers 12 and 22 are designed and, above all, how the flow conduction takes place therein.
Fig. 8 ist im Wesentlichen identisch zur Ausführungsform gemäß Fig. 6, lediglich der zweite Leitabschnitt 35 der Hauptstege 33 ist weniger stark zum ersten Leitabschnitt 34 abgewinkelt. FIG. 8 is essentially identical to the embodiment according to FIG. 6, only the second guide section 35 of the main webs 33 is less angled to the first guide section 34.
Fig. 9 dagegen ist dagegen im Wesentlichen identisch zur Ausführungsform gemäß Fig. 7. Auch hier sind die zweiten Leitabschnitte 35 weniger stark zum ersten Leitabschnitt 34 abgewinkelt. In contrast, FIG. 9 is essentially identical to the embodiment according to FIG. 7. Here, too, the second guide sections 35 are less angled to the first guide section 34.
In Fig. 10 ist passend zu Fig. 8 auch die Strömung des Temperierfluids T dargestellt. Die Dicke der Pfeile gibt dabei die Stärke und/oder Geschwindigkeit der Strömung an. Generell sind die Schikanen (Leitelemente 31 ) so ausgelegt, dass die zentrale Inkubationskammer K in der Bodenplatte (Bodenelement 1 ) und der zentrale optische Durchsichtskanal (Sichtvorrichtung 8) in der Deckelplatte (Deckelelement 4) bestmöglich mit frischem Warmwasser (Temperierfluid T) umspült werden. Ein weiterer Vorteil ist die Anbringung kleiner Rand-Schikanen (Seitenstege 36) im Außenbereich, um dort Kreiselströme mit hoher Wasserverweildauer und dadurch bedingter zonaler Abkühlung zu vermeiden. Die inneren Schikanen (Hauptstege 33) sind in Form von fünf abgewinkelten langen und vier kurzen Geraden im Bodenelement 1 und in Form von fünf abgewinkelten langen und fünf kurzen Geraden im Deckelelement 4 ausgebildet. Diese Leitelemente 31 sind im Winkel von 72° zueinander um den Plattenmittelpunkt (Zentralachse Z) versetzt angeordnet. In FIG. 10, in line with FIG. 8, the flow of the temperature control fluid T is also shown. The thickness of the arrows indicates the strength and / or speed of the flow. In general, the baffles (guide elements 31) are designed in such a way that the central incubation chamber K in the base plate (base element 1) and the central optical see-through channel (viewing device 8) in the cover plate (cover element 4) are bathed in the best possible way with fresh warm water (temperature control fluid T). Another advantage is the attachment of small edge baffles (side bars 36) in the outer area in order to avoid circulating currents with a long water retention time and the resulting zonal cooling there. The inner baffles (main webs 33) are designed in the form of five angled long and four short straight lines in the base element 1 and in the form of five angled long and five short straight lines in the cover element 4. These guide elements 31 are offset from one another at an angle of 72 ° around the center of the plate (central axis Z).
In Fig. 11 ist eine alternative Ausbildung der Strömungsführung in den Temperierkammern 12 bzw. 22 dargestellt. In Fig. 11 ist konkret das Deckelelement 4 dargestellt, jedoch kann dieselbe Ausgestaltung auch im Bodenelement 1 vorgesehen sein. In dieser Fig. 11 ist in der ersten Temperierkammer 12 und/oder der zweiten Temperierkammer 22 ein von Leitwänden begrenzter, mäanderförmiger Temperierkanal 37 ausgebildet. Dieser Temperierkanal 37 weist einen radial von der Eintrittsöffnung 13 in Richtung Inkubationskammer K verlaufenden Einströmabschnitt E auf. An diesem Einströmabschnitt E schließt direkt der von der inneren Wandfläche 12i begrenzte erste Ringabschnitt R1 an. An diesen ersten Ringabschnitt R1 schließen radial nach außen mehrere, um die Zentralachse Z führende, mäanderförmig aufeinander folgende Ringabschnitte Rn an. Vom äußersten Ringabschnitt Rn gelangt dann das (abgekühlte) Temperierfluid T wieder in die erste Austrittsöffnung 14. Somit ist dieser Strömungskanal (Temperierkanal 37) in teilringförmigen Mäandern angelegt, wobei das einströmende Wasser immer zuerst den Zentralbereich umströmen soll, um einen Wärmetransportverlust zu den inkubierten Zellen in der Inkubationskammer K bzw. hin zum Sichtkanal 10 zu vermeiden. In Fig. 11, an alternative design of the flow guide in the temperature control chambers 12 and 22 is shown. The cover element 4 is specifically shown in FIG. 11, but the same configuration can also be provided in the base element 1 be. In this FIG. 11, a meander-shaped temperature control channel 37 delimited by guide walls is formed in the first temperature control chamber 12 and / or the second temperature control chamber 22. This temperature control channel 37 has an inflow section E running radially from the inlet opening 13 in the direction of the incubation chamber K. The first ring section R1 delimited by the inner wall surface 12i directly adjoins this inflow section E. This first ring section R1 is adjoined radially outward by a plurality of ring sections Rn which run around the central axis Z and follow one another in a meandering manner. From the outermost ring section Rn, the (cooled) temperature control fluid T then passes back into the first outlet opening 14.This flow channel (temperature control channel 37) is thus laid out in partially annular meanders, whereby the inflowing water should always flow around the central area first in order to avoid heat transport loss to the incubated cells in the incubation chamber K or towards the viewing channel 10.
Fig. 12 zeigt einen vertikalen Schnitt durch den Inkubator 6, wobei der zweite Zwischendeckel 5 und das Deckelelement 4 punktiert dargestellt sind. Diese Fig. 12 veranschaulicht vor allem den Weg des Gases G durch den Inkubator 6. Generell ist in Fig. 12 das Bodenelement 1 mit der Inkubationskammer K, der Gaszuführkammer 50, der ringförmig umlaufenden Befeuchtungskammer 38 und dem Warmwassermantel (zweite Temperiervorrichtung 21 ) dargestellt. Die Gaszuführkammer 50 dient als Begasungskammer zum Vorwärmen des einströmenden Trockengas-Gemisches. Dieses Trockengas-Gemisch besteht zu, vorzugsweise etwa 95 %, aus Luft und zu, vorzugsweise etwa 5 %, aus CO2. Der erste Zwischendeckel 2 bildet einen ringförmig verschweißten, wasser- und gasdichten Deckel mit einem Loch (Gasaustrittsöffnung 58) zum Gasübertritt in die Befeuchtungskammer 38. Die Gaszuführöffnung 39 weist eine zentrale Luer-Lock-Anschlusskupplung für eine Gaszufuhr auf. Damit kann Gas G mit etwa 10 ml pro Minute bei maximal 1 bar zugeführt werden. Bevorzugt ist in der Befeuchtungskammer 38 ein saugstarker Polymerschwamm eingelegt. Dieser ist ringförmig ausgebildet und ermöglicht eine Wasseraufnahme von bis zu 20 ml. Das über die Durchlassöffnung 52 einströmende Gas G nimmt Wasser mit, wodurch das Gas G eine Luftfeuchte von bis zu 98 % aufweist. Die Befeuchtungskammer 38 ist durch das Abdeckelement 3 abgedeckt. Dieses Abdeckelement 3 ist durch die Gasdurchtrittsöffnungen 58 mehrfach perforiert und ist ringförmig ausgebildet. Zwischen dem Abdeckelement 3 und dem zweiten Zwischendeckel 5 ist ein Atmosphären- Hohlraum 61 ausgebildet. Dieser sorgt für einen barrierefreien Gasaustausch mit der Inkubationskammer K. Das Deckelelement 4 weist den Warmwassermantel (erste Temperiervorrichtung 11 samt Temperierkammer 12), die versiegelte Sichtvorrichtung 8 und die Abtropfrippen 60 auf. Die Gasdurchtrittsöffnungen 58 weisen einen Durchmesser von etwa 1 mm auf und sind im Befeuchtungskammerdeckel (Abdeckelement 3) ausgebildet. Diese dienen gleichzeitig zum Befüllen mit etwa 20 ml sterilem Wasser. Der Warmwassermantel (Temperierkanal 12) im Deckelelement 4 dient der Warmwasserzufuhr zur Sichtvorrichtung 8. Die Warmwasserzufuhr erfolgt von Umlaufthermostaten (bei 20°C Raumtemperatur mit 38,5°C warmen Wasser zu perfundieren). Der Sichtkanal 10 ist durch scheibenförmige Sichtplatten (Sichtfenster 91 und 92) abgeschlossen. Dadurch wird der Sichtkanal 10 teilweise durch eine innenversiegelte Durchsichtskammer gebildet. Diese dient vor allem auch zur Vermeidung von Kondenswasserbildung im optischen Pfad. Mit den Abtropfrippen 60 wird die aufsteigende Inkubationsluft, welche wasserkampfgesättigt ist, abgekühlt, wodurch im Deckelrandbereich das Wasser kondensiert und das Kondenswasser zurück Richtung Befeuchtungskammer 38 tropft. Der zweite Zwischendeckel 5 bildet eine Art scheibenförmige Sichtplatte. Diese ist ringförmig verschweißt und bildet eine wasser- und gasdichte Barriere zur ersten Temperierkammer 12 und zum Sichtkanal 10 zur Zellbeobachtung. Nachdem das Gas G über den Atmosphären-Hohlraum 61 die Inkubationskammer K erreicht hat, erfolgt der Gasaustritt ringförmig am Deckelrand des Inkubators 6. Konkret entweicht das Gas G mit etwa 10 ml pro Minute durch den geringfügigen Spalt zwischen dem Deckelelement 4 und dem Bodenelement 1 aus dem Inkubator 6. Der Warmwassermantel (Temperierkammer 22) im Bodenelement 1 verfügt über eine Warmwasserzufuhr (Eintrittsöffnung 23). Über diese Eintrittsöffnung 23 gelangt das Temperierfluid T vom Deckelelement 4 über eine Luer-Lock-Kupplung in die Temperierkammer 22. Bei einer Raumtemperatur von 22° C ist das Wasser in diesem Bereich noch etwa 37° C warm. D. h., das Temperierfluid T hat sich nach dem Durchfließen der ersten Temperierkammer 12 um etwa 1 ,5° C abgekühlt. Am Bodenelement 1 sind mehrere (konkret drei) ringförmig geschlossene (konzentrische) Stege 62 ausgebildet. Diese sind etwa 1 mm hoch und dienen zur Minimierung des Bodenkontaktes. Dadurch wird ein Wärmeverlust über die Ableitung zum Mikroskoptisch verhindert. Das biologische Material M am Boden der Inkubationskammer K wird durch lebende Zellen gebildet. Die Dicke der Bodenplatte des Bodenelements 1 beträgt etwa 0,6 mm. Dadurch ist es geeignet, für Objektive bis zu einer 60-fachen Vergrößerung. Der Abschnitt des Bodenelements 1 der Inkubationskammer K kann an der Innenseite oberflächenbehandelt sein. In einer bevorzugten Ausführungsform ist er plasmaaktiviert, um zur besseren Benetzbarkeit und Zellhaftung eine hydrophobe Oberfläche herzustellen. Mit dem Bezugszeichen 63 ist ein Inkubationsmedium bezeichnet. Dieses Inkubationsmedium 63 besteht aus Nährstoffen und darin gelöstem Sauerstoff / CO2. Das Nährmedium (Inkubationsmedium 63) versorgt die inkubierten Zellen mit Nährstoffen und über seine Oberfläche findet der Gasaustausch mit dem befeuchteten Nährgas statt. Von den Zellen gebildetes CO2 diffundiert dabei durch das flüssige Nährmedium an dessen Oberfläche, während für die Atmung benötigter Sauerstoff von der Oberfläche durch das Nährmedium zu den Zellen diffundiert. Die Inkubationskammer K ist nach oben offen und kommuniziert mit dem Atmosphären-Hohlraum 61 . Die Luftfeuchte von etwa 98 % verhindert eine Verdunstung des Inkubationsmediums 63. 12 shows a vertical section through the incubator 6, the second intermediate cover 5 and the cover element 4 being shown in dotted lines. This FIG. 12 primarily illustrates the path of the gas G through the incubator 6. Generally, FIG. 12 shows the bottom element 1 with the incubation chamber K, the gas supply chamber 50, the annular humidification chamber 38 and the warm water jacket (second temperature control device 21). The gas supply chamber 50 serves as a gas chamber for preheating the inflowing dry gas mixture. This dry gas mixture consists of about 95%, preferably air, and about 5%, preferably CO2. The first intermediate cover 2 forms an annularly welded, watertight and gas-tight cover with a hole (gas outlet opening 58) for gas to pass into the humidification chamber 38. The gas supply opening 39 has a central Luer-Lock connection coupling for a gas supply. This means that gas G can be supplied at around 10 ml per minute at a maximum of 1 bar. A highly absorbent polymer sponge is preferably inserted in the humidification chamber 38. This is designed in a ring shape and enables water to be absorbed of up to 20 ml. The gas G flowing in via the passage opening 52 takes water with it, as a result of which the gas G has an air humidity of up to 98%. The humidification chamber 38 is covered by the cover element 3. This cover element 3 is perforated several times by the gas passage openings 58 and is annular. Between the cover element 3 and the second intermediate cover 5 is an atmosphere Cavity 61 is formed. This ensures a barrier-free gas exchange with the incubation chamber K. The cover element 4 has the warm water jacket (first temperature control device 11 including temperature control chamber 12), the sealed viewing device 8 and the drip ribs 60. The gas passage openings 58 have a diameter of approximately 1 mm and are formed in the humidification chamber cover (cover element 3). These also serve to fill with about 20 ml of sterile water. The warm water jacket (temperature control channel 12) in the cover element 4 is used to supply warm water to the viewing device 8. The warm water is supplied by circulation thermostats (to be perfused with 38.5 ° C warm water at 20 ° C room temperature). The viewing channel 10 is closed by disc-shaped viewing panels (viewing windows 91 and 92). As a result, the viewing channel 10 is partially formed by an internally sealed see-through chamber. This is mainly used to avoid the formation of condensation in the optical path. The rising incubation air, which is saturated with water combat, is cooled with the drip ribs 60, as a result of which the water condenses in the lid edge area and the condensed water drips back towards the humidification chamber 38. The second intermediate cover 5 forms a type of disk-shaped faceplate. This is welded in the shape of a ring and forms a water- and gas-tight barrier to the first temperature control chamber 12 and to the viewing channel 10 for cell observation. After the gas G has reached the incubation chamber K via the atmospheric cavity 61, the gas emerges in a ring at the lid edge of the incubator 6. Specifically, the gas G escapes at about 10 ml per minute through the slight gap between the lid element 4 and the base element 1 the incubator 6. The warm water jacket (temperature chamber 22) in the base element 1 has a warm water supply (inlet opening 23). The temperature control fluid T reaches the temperature control chamber 22 via this inlet opening 23 via a Luer lock coupling. At a room temperature of 22 ° C., the water in this area is still about 37 ° C. warm. That is, the temperature control fluid T has cooled by about 1.5 ° C. after flowing through the first temperature control chamber 12. A plurality of (specifically three) annularly closed (concentric) webs 62 are formed on the base element 1. These are about 1 mm high and serve to minimize contact with the ground. This prevents heat loss via the dissipation to the microscope stage. The biological material M at the bottom of the incubation chamber K is formed by living cells. The thickness of the base plate of the base element 1 is approximately 0.6 mm. This makes it suitable for lenses up to to a magnification of 60 times. The section of the bottom element 1 of the incubation chamber K can be surface-treated on the inside. In a preferred embodiment, it is plasma-activated in order to produce a hydrophobic surface for better wettability and cell adhesion. An incubation medium is designated by the reference numeral 63. This incubation medium 63 consists of nutrients and oxygen / CO2 dissolved therein. The nutrient medium (incubation medium 63) supplies the incubated cells with nutrients and the gas exchange with the humidified nutrient gas takes place via its surface. CO2 formed by the cells diffuses through the liquid nutrient medium on its surface, while the oxygen required for breathing diffuses from the surface through the nutrient medium to the cells. The incubation chamber K is open at the top and communicates with the atmospheric cavity 61. The humidity of about 98% prevents evaporation of the incubation medium 63.
In Fig. 13 ist eine Draufsicht auf eine alternative Ausführungsform eines Deckelelements 4 dargestellt. Im Deckelelement 4 ist eine Sichtfenster 9 in Form einer zentralen Linse ausgebildet. Konkret sind hier vier regelmäßig angeordnete Leitelemente 31 in der ersten Temperierkammer 12 ausgebildet. Es ergibt sich eine volle Temperierfluidfüllung im Deckelelement 4. FIG. 13 shows a plan view of an alternative embodiment of a cover element 4. A viewing window 9 in the form of a central lens is formed in the cover element 4. Specifically, four regularly arranged guide elements 31 are formed in the first temperature control chamber 12. A full temperature control fluid filling results in the cover element 4.
In Fig. 14 ist perspektivisch ein alternatives Ausführungsbeispiel des Bodenelements 1 dargestellt. Die Unterseite des Inkubators 6 ist in diesem Fall nicht durchgängig scheibenförmig ausgebildet. Vielmehr ist die Unterseite des Inkubators 6 mit einem eingeklipsten, reibschlüssig verbundenen Glasboden 64 versehen, der in diesem Fall von einer ringförmigen Bodenfläche 22b (aus Polystyrol) umschlossen und wasserdicht gehalten wird. Im zentralen Kammerbereich ist die Polystyrol-Bodenplatte in diesem Fall also kreisförmig offen und am Innenrand mit Halte- oder Klipsstegen versehen. Der Kammerboden ist in dieser Variante (statt aus 0,6 mm Polystyrol) vorzugsweise aus 16 bis 20 pm starkem, inerten Borosilikat- oder Quartzglas gebildet und UV-durchlässig, so dass hochauflösende Mikroskopaufnahmen (mit bis zu 100-facher Vergrößerungen) möglich sind. Zudem kann das biologische Material M mit Wellenlängen im UV-Bereich angeregt werden, um Fluoreszenzaufnahmen auch mit Anregungswellenlängen unter 360nm zu ermöglichen. Bezugszeichenliste In Fig. 14, an alternative embodiment of the floor element 1 is shown in perspective. In this case, the underside of the incubator 6 is not continuously disk-shaped. Rather, the underside of the incubator 6 is provided with a clipped-in, frictionally connected glass base 64, which in this case is enclosed by an annular base surface 22b (made of polystyrene) and kept watertight. In this case, the polystyrene base plate in the central chamber area is open in a circle and has retaining or clip webs on the inner edge. In this variant, the chamber floor (instead of 0.6 mm polystyrene) is preferably made of 16 to 20 μm thick, inert borosilicate or quartz glass and is UV-permeable, so that high-resolution microscope images (with up to 100-fold magnification) are possible. In addition, the biological material M can be excited with wavelengths in the UV range in order to enable fluorescence recordings also with excitation wavelengths below 360 nm. List of reference symbols
1 Bodenelement 1 floor element
2 erster Zwischendeckel 2 first intermediate cover
3 Abdeckelement 3 cover element
4 Deckelelement 4 cover element
5 zweiter Zwischendeckel 5 second intermediate cover
6 Inkubator 6 incubator
7 Gehäuse 7 housing
8 Sichtvorrichtung 8 viewing device
9 Sichtfenster 9 viewing windows
91 erstes Sichtfenster 91 first viewing window
92 zweiter Sichtfenster 92 second viewing window
10 Sichtkanal 10 viewing channel
11 erste Temperiervorrichtung 11 first temperature control device
12 erste Temperierkammer 12 first temperature chamber
12i innere Wandfläche der ersten Temperierkammer 12a äußere Wandfläche der ersten Temperierkammer 12b Bodenfläche der ersten Temperierkammer 12i inner wall surface of the first temperature control chamber 12a outer wall surface of the first temperature control chamber 12b bottom surface of the first temperature control chamber
12d Deckfläche der ersten Temperierkammer 12d top surface of the first temperature chamber
13 erste Eintrittsöffnung 13 first entry opening
14 erste Austrittsöffnung 14 first outlet opening
21 zweite Temperiervorrichtung 21 second temperature control device
22 zweite Temperierkammer 22 second temperature chamber
22i innere Wandfläche der zweiten Temperierkammer 22a äußere Wandfläche der zweiten Temperierkammer 22b Bodenfläche der zweiten Temperierkammer 22d Deckfläche der zweiten Temperierkammer 22i inner wall surface of the second temperature chamber 22a outer wall surface of the second temperature chamber 22b bottom surface of the second temperature chamber 22d top surface of the second temperature chamber
23 zweite Eintrittsöffnung 23 second inlet opening
24 zweite Austrittsöffnung 24 second outlet opening
30 Wandung 30 wall
31 Leitelemente 31 guide elements
32 Durchströmöffnungen 32 flow openings
33 Hauptstege 33 main bridges
34 erster Leitabschnitt 35 zweiter Leitabschnitt34 first guide section 35 second guide section
36 Seitenstege 36 side bars
37 Temperierkanal 37 Temperature control channel
38 Befeuchtungskammer 38 humidification chamber
39 Gaszuführöffnung39 Gas supply opening
40 Anordnung 40 arrangement
41 Temperierfluidquelle 41 Tempering fluid source
42 Temperierfluidleitung 42a erster Leitungsabschnitt 42b zweiter Leitungsabschnitt 42c dritter Leitungsabschnitt42 temperature control fluid line 42a first line section 42b second line section 42c third line section
43 Gasquelle 43 gas source
44 Gasleitung 44 gas pipe
45 Haltering 45 retaining ring
46 Haltering 46 retaining ring
47 zentrale Öffnung 47 central opening
48 äußere Umfangsf lache 48 outer circumference
49 innere Umfangsf lache49 inner circumference
50 Gaszuführkammer50 gas supply chamber
51 Abdeckabschnitt 51 cover section
52 Durchlassöffnung 52 Passage opening
53 innere Umfangsfläche 53 inner peripheral surface
54 äußere Umfangsfläche54 outer peripheral surface
55 Führungselemente55 guide elements
56 Führungsausnehmungen56 guide recesses
57 zentrale Öffnung 57 central opening
58 Gasdurchtrittsöffnungen 58 gas passage openings
59 Abtropfkammern 59 drip compartments
60 Abtropfrippen 60 drip ribs
61 Atmosphären-Hohlraum 61 atmosphere cavity
62 Stege 62 bars
63 Inkubationsmedium 63 incubation medium
64 Glasboden 64 glass bottom
M biologisches Material K Inkubationskammer M biological material K incubation chamber
T Temperierfluid T temperature control fluid
Z Zentralachse Z central axis
a Winkel 35 zu 34 a angle 35 to 34
E Einströmabschnitt E inflow section
R1 erster Ringabschnitt R1 first ring section
Rn mäanderförmig aufeinander folgende Ringabschnitte G Gas Rn meandering successive ring sections G gas

Claims

Patentansprüche Claims
1 . Inkubator (6) für biologisches Material (M), mit 1 . Incubator (6) for biological material (M), with
- einem Gehäuse (7), - a housing (7),
- einer im Gehäuse (7) angeordneten Inkubationskammer (K) für ein biologisches Material (M), - an incubation chamber (K) arranged in the housing (7) for a biological material (M),
- einer im Gehäuse (7) angeordneten Sichtvorrichtung (8) zur Beobachtung des biologischen Materials (M) in der Inkubationskammer (K), wobei die Sichtvorrichtung (8) wenigstens ein Sichtfenster (9) und einen Sichtkanal (10) aufweist, und - A viewing device (8) arranged in the housing (7) for observing the biological material (M) in the incubation chamber (K), the viewing device (8) having at least one viewing window (9) and one viewing channel (10), and
- einer ersten Temperiervorrichtung (1 1 ) für die Sichtvorrichtung (8), - A first temperature control device (1 1) for the viewing device (8),
dadurch gekennzeichnet, dass die erste Temperiervorrichtung (T1 ) eine den Sichtkanal (10) umgebende erste Temperierkammer (12), eine erste Eintrittsöffnung (13), über die ein Temperierfluid (T) in die erste Temperierkammer (12) strömen kann, und eine erste Austrittsöffnung (14), über die das Temperierfluid (T) aus der ersten Temperierkammer (12) strömen kann, aufweist. characterized in that the first temperature control device (T1) has a first temperature control chamber (12) surrounding the viewing channel (10), a first inlet opening (13) through which a temperature control fluid (T) can flow into the first temperature control chamber (12), and a first Outlet opening (14) through which the temperature control fluid (T) can flow out of the first temperature control chamber (12).
2. Inkubator nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass das Gehäuse (7) im Wesentlichen zylindrisch ausgebildet ist und eine Zentralachse (Z) aufweist, wobei diese Zentralachse (Z) durch den Sichtkanal (10), das wenigstens eine Sichtfenster (9) und die Inkubationskammer (K) führt. 2. Incubator according to claim 1, characterized in that the housing (7) is essentially cylindrical and has a central axis (Z), this central axis (Z) through the viewing channel (10), the at least one viewing window (9) and the incubation chamber (K) leads.
3. Inkubator nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass im Gehäuse (7) nur eine Sichtvorrichtung (8) und nur eine Inkubationskammer (K) ausgebildet sind. 3. Incubator according to claim 1 or 2, characterized in that only one viewing device (8) and only one incubation chamber (K) are formed in the housing (7).
4. Inkubator nach einem der Ansprüche 1 bis 3, gekennzeichnet durch eine zweite Temperiervorrichtung (21 ) für die Inkubationskammer (K), wobei die zweite Temperiervorrichtung (21 ) eine die Inkubationskammer (K) umgebende zweite Temperierkammer (22), eine zweite Eintrittsöffnung (23), über die ein Temperierfluid (T) in die zweite Temperierkammer (22) strömen kann, und eine zweite Austrittsöffnung (24), über die das Temperierfluid (T) aus der zweiten Temperierkammer (22) strömen kann, aufweist. 4. Incubator according to one of claims 1 to 3, characterized by a second temperature control device (21) for the incubation chamber (K), the second temperature control device (21) having a second temperature control chamber (22) surrounding the incubation chamber (K), a second inlet opening ( 23), via which a temperature control fluid (T) can flow into the second temperature control chamber (22), and a second outlet opening (24) via which the temperature control fluid (T) can flow out of the second temperature control chamber (22).
5. Inkubator nach wenigstens einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Sichtkanal (10) und/oder die Inkubationskammer (K) zumindest bereichsweise von einer, vorzugsweise um die Zentralachse (Z) ausgebildeten, kreiszylindermantelförmigen oder kegelmantelförmigen Wandung (30) begrenzt sind/ist. 5. Incubator according to at least one of the preceding claims, characterized in that the viewing channel (10) and / or the incubation chamber (K) are at least partially bounded by a circular cylinder jacket-shaped or conical jacket-shaped wall (30) preferably formed around the central axis (Z) / is.
6. Inkubator nach wenigstens einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die erste Temperierkammer (12) und/oder zweite6. Incubator according to at least one of the preceding claims, characterized in that the first temperature chamber (12) and / or second
Temperierkammer (22) ringförmig um die Zentralachse (Z) ausgebildet sind/ist. Tempering chamber (22) are / is ring-shaped around the central axis (Z).
7. Inkubator nach wenigstens einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die erste Temperierkammer (12) und/oder zweite7. Incubator according to at least one of the preceding claims, characterized in that the first temperature chamber (12) and / or second
Temperierkammer (22) von einer inneren Wandfläche (12i; 22i), einer äußeren Wandfläche (12a; 22a), einer Bodenfläche (12b; 22b) und einer Deckfläche (12d; 22d) begrenzt sind/ist. The temperature control chamber (22) is / is delimited by an inner wall surface (12i; 22i), an outer wall surface (12a; 22a), a bottom surface (12b; 22b) and a top surface (12d; 22d).
8. Inkubator nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass in der ersten Temperierkammer (12) und/oder zweiten Temperierkammer (22) von den beiden Wandflächen (12i, 12a; 22i, 22a) separate Leitelemente (31 ) zur Strömungsleitung des einströmenden Temperierfluids (T) angeordnet sind. 8. Incubator according to claim 7, characterized in that in the first temperature control chamber (12) and / or second temperature control chamber (22) from the two wall surfaces (12i, 12a; 22i, 22a) separate guide elements (31) for the flow of the inflowing temperature control fluid ( T) are arranged.
9. Inkubator nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Leitelemente (31 ) als Leitwände ausgebildet sind, welche mit der Bodenfläche (12b; 22b) und/oder mit der Deckfläche (12d; 22d) verbunden sind. 9. Incubator according to claim 8, characterized in that the guide elements (31) are designed as guide walls which are connected to the bottom surface (12b; 22b) and / or to the top surface (12d; 22d).
10. Inkubator nach Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, dass die Leitelemente (31 ) von den Wandflächen (12i, 12a; 22i, 22a) beabstandet sind und zwischen den Leitelementen (31 ) und den Wandflächen (12i, 12a; 22i, 22a) Durchströmöffnungen (32) ausgebildet sind. 10. Incubator according to claim 8 or 9, characterized in that the guide elements (31) from the wall surfaces (12i, 12a; 22i, 22a) are spaced apart and between the guide elements (31) and the wall surfaces (12i, 12a; 22i, 22a) ) Throughflow openings (32) are formed.
1 1 . Inkubator nach einem der Ansprüche 8 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass die Leitelemente (31 ) in regelmäßigen Abständen zueinander und gleichmäßig beabstandet zu einer Zentralachse (Z) angeordnet sind. 1 1. Incubator according to one of Claims 8 to 10, characterized in that the guide elements (31) are arranged at regular intervals from one another and equally spaced from a central axis (Z).
12. Inkubator nach einem der Ansprüche 8 bis 11 , dadurch gekennzeichnet, dass die Leitelemente (31 ) mehrere, vorzugsweise fünf, Hauptstege (33) umfassen, wobei die Hauptstege (33) einen ersten, radial außenliegenden, im Wesentlichen radial ausgerichteten, geraden Leitabschnitt (34) und einen mit dem ersten Leitabschnitt (34) verbundenen, näher an der Zentralachse (Z) liegenden, geraden, zweiten Leitabschnitt (35) aufweisen, wobei der zweite Leitabschnitt (35) in einem Winkel (a) zwischen 15° und 65°, vorzugsweise zwischen 20° und 50°, zum ersten Leitabschnitt (34) ausgerichtet ist. 12. Incubator according to one of claims 8 to 11, characterized in that the guide elements (31) comprise several, preferably five, main webs (33), the main webs (33) having a first, radially outer, substantially radially aligned, straight guide section (34) and a straight, second guide section (35) connected to the first guide section (34) and lying closer to the central axis (Z), the second guide section (35) at an angle (a) between 15 ° and 65 °, preferably between 20 ° and 50 °, is aligned with the first guide section (34).
13. Inkubator nach einem der Ansprüche 8 bis 12, dadurch gekennzeichnet, dass die Leitelemente (31 ) mehrere, vorzugsweise fünf, Seitenstege (36) umfassen, wobei die Seitenstege (36) separat und beabstandet von den Hauptstegen (33) in der Temperierkammer (12; 22) angeordnet sind. 13. Incubator according to one of claims 8 to 12, characterized in that the guide elements (31) comprise several, preferably five, side bars (36), the side bars (36) being separate and spaced from the main bars (33) in the temperature control chamber ( 12; 22) are arranged.
14. Inkubator nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass in der ersten Temperierkammer (12) und/oder zweiten Temperierkammer (22) ein von Leitwänden begrenzter, mäanderförmiger Temperierkanal (37) ausgebildet ist. 14. Incubator according to claim 7, characterized in that a meander-shaped temperature control channel (37) delimited by guide walls is formed in the first temperature control chamber (12) and / or second temperature control chamber (22).
15. Inkubator nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass der Temperierkanal (37) 15. Incubator according to claim 14, characterized in that the temperature control channel (37)
- einen im Wesentlichen radial verlaufenden Einströmabschnitt (E), - a substantially radially extending inflow section (E),
- einen an den Einströmabschnitt (E) anschließenden, direkt von der inneren Wandfläche (12i; 22i) begrenzten, um die Zentralachse (Z) führenden, ersten Ringabschnitt (R1 ) und - A first ring section (R1), which adjoins the inflow section (E) and is delimited directly by the inner wall surface (12i; 22i) and leading around the central axis (Z)
- mehrere, an den ersten Ringabschnitt (R1 ) radial nach außen anschließende, um die Zentralachse (Z) führende, mäanderförmig aufeinander folgende Ringabschnitte (Rn) - several ring sections (Rn) following one another in a meandering shape, adjoining the first ring section (R1) radially outwards, leading around the central axis (Z)
umfasst. includes.
16. Inkubator (6) für biologisches Material (M), insbesondere nach einem der Ansprüche 1 bis 15, mit 16. Incubator (6) for biological material (M), in particular according to one of claims 1 to 15, with
- einem mehrteiligen Gehäuse (7), - a multi-part housing (7),
- einer vom Gehäuse (7) gebildeten Inkubationskammer (K) für ein biologisches Material (M), - einer vom Gehäuse (7) gebildeten Sichtvorrichtung (8) zur Beobachtung des biologischen Materials (M) in der Inkubationskammer (K), wobei die Sichtvorrichtung (8) wenigstens ein Sichtfenster (9) und einen Sichtkanal (10) aufweist, - An incubation chamber (K) formed by the housing (7) for a biological material (M), - A viewing device (8) formed by the housing (7) for observing the biological material (M) in the incubation chamber (K), the viewing device (8) having at least one viewing window (9) and one viewing channel (10),
- einer vom Gehäuse (7) gebildeten zweiten Temperiervorrichtung (21 ) für die Inkubationskammer (K), wobei die zweite Temperiervorrichtung (21 ) eine die Inkubationskammer (K) umgebende zweite Temperierkammer (22), eine zweite Eintrittsöffnung (23), über die ein Temperierfluid (T) in die zweite Temperierkammer (22) strömen kann, und eine zweite Austrittsöffnung (24), über die das Temperierfluid (T) aus der zweiten Temperierkammer (22) strömen kann, aufweist, - A second temperature control device (21) formed by the housing (7) for the incubation chamber (K), the second temperature control device (21) having a second temperature control chamber (22) surrounding the incubation chamber (K), a second inlet opening (23) via which a Temperature control fluid (T) can flow into the second temperature control chamber (22) and has a second outlet opening (24) through which the temperature control fluid (T) can flow from the second temperature control chamber (22),
- einer vom Gehäuse (7) gebildeten und die Inkubationskammer (K) bereichsweise umgebenden Befeuchtungskammer (38) und - A humidification chamber (38) formed by the housing (7) and surrounding areas of the incubation chamber (K) and
- einer vom Gehäuse (7) gebildeten Gaszuführöffnung (39), über welche ein Gas (G) über die Befeuchtungskammer (38) in die Inkubationskammer (K) einströmen kann, - A gas supply opening (39) formed by the housing (7), via which a gas (G) can flow into the incubation chamber (K) via the humidification chamber (38),
dadurch gekennzeichnet, dass das Gehäuse (7) vollständig aus zumindest bereichsweise transparentem, vorzugsweise spritzgegossenem, Kunststoff besteht. characterized in that the housing (7) consists entirely of at least partially transparent, preferably injection-molded, plastic.
17. Inkubator nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass das Gehäuse (7) die folgenden fünf, jeweils einstückigen Bauteile (1 , 2, 3, 4, 5) umfasst: 17. Incubator according to claim 16, characterized in that the housing (7) comprises the following five, each one-piece components (1, 2, 3, 4, 5):
- ein Bodenelement (1 ), in welchem ein Teil der Inkubationskammer (K), die zweite Eintrittsöffnung (23), die zweite Austrittsöffnung (24), die Gaszuführöffnung (39) und ein Teil der zweiten Temperierkammer (22) ausgebildet ist, - A base element (1) in which part of the incubation chamber (K), the second inlet opening (23), the second outlet opening (24), the gas supply opening (39) and part of the second temperature chamber (22) are formed,
- einen mit dem Bodenelement (1 ), vorzugsweise reibschlüssig, verbindbaren, ersten Zwischendeckel (2), welcher zusammen mit dem Bodenelement (1 ) die zweite Temperierkammer (22) bildet, - A first intermediate cover (2) which can be connected to the base element (1), preferably with a friction fit, which together with the base element (1) forms the second temperature chamber (22),
- ein auf dem ersten Zwischendeckel (2) angeordnetes perforiertes Abdeckelement (3), welches zusammen mit dem Zwischendeckel (2) die Befeuchtungskammer (38) bildet, - ein mit dem Bodenelement (1 ), vorzugsweise reibschlüssig, verbindbares Deckelelement (4), in welchem die Sichtvorrichtung (8), die erste Eintrittsöffnung (13), die erste Austrittsöffnung (14) und ein Teil der ersten Temperierkammer (12) ausgebildet ist, und - A perforated cover element (3) which is arranged on the first intermediate lid (2) and which, together with the intermediate lid (2), forms the humidification chamber (38), - A cover element (4) which can be connected to the base element (1), preferably with a friction fit, in which the viewing device (8), the first inlet opening (13), the first outlet opening (14) and part of the first temperature chamber (12) are formed , and
- einen mit dem Deckelelement (4), vorzugsweise reibschlüssig, verbindbaren, zweiten Zwischendeckel (5), welcher zusammen mit dem Deckelelement (4) die erste Temperierkammer (12) bildet. - A second intermediate cover (5) which can be connected to the cover element (4), preferably with a friction fit, which together with the cover element (4) forms the first temperature control chamber (12).
18. Inkubator nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass im Deckelelement (4) ein erstes, vorzugsweise linsenförmiges, Sichtfenster (91 ) ausgebildet ist und im zweiten Zwischendeckel (5) ein zweites Sichtfenster (92) ausgebildet ist, wobei das zweite Sichtfenster (92) die Inkubationskammer (K) begrenzt. 18. Incubator according to claim 17, characterized in that a first, preferably lens-shaped, viewing window (91) is formed in the cover element (4) and a second viewing window (92) is formed in the second intermediate cover (5), the second viewing window (92 ) the incubation chamber (K) is limited.
19. Inkubator nach Anspruch 17 oder 18, dadurch gekennzeichnet, dass die fünf Bauteile (1 , 2, 3, 4, 5) aus demselben Kunststoff bestehen. 19. Incubator according to claim 17 or 18, characterized in that the five components (1, 2, 3, 4, 5) consist of the same plastic.
20. Inkubator nach einem der Ansprüche 17 bis 19, dadurch gekennzeichnet, dass der Kunststoff ein transparenter Thermoplast, vorzugsweise Polystyrol, ist. 20. Incubator according to one of claims 17 to 19, characterized in that the plastic is a transparent thermoplastic, preferably polystyrene.
21. Anordnung (40) mit einem Inkubator (6) nach einem der Ansprüche 1 bis 20, mit21. Arrangement (40) with an incubator (6) according to one of claims 1 to 20, with
- einer Temperierfluidquelle (41 ), - a temperature control fluid source (41),
- einer Temperierfluidleitung (42), welche die Eintrittsöffnungen (13; 23) bzw. - A temperature control fluid line (42), which the inlet openings (13; 23) or
Austrittsöffnungen (14; 24) mit der Temperierfluidquelle (41 ) verbindet, Connects outlet openings (14; 24) with the temperature control fluid source (41),
- einer Gasquelle (43) und - A gas source (43) and
- einer die Gasquelle (43) mit der Gaszuführöffnung (39) verbindenden Gasleitung (44). - A gas line (44) connecting the gas source (43) to the gas supply opening (39).
22. Anordnung nach Anspruch 21 , dadurch gekennzeichnet, dass die Temperfluidleitung (42) einen ersten Leitungsabschnitt (42a), welcher die Temperierfluidquelle (41 ) mit der ersten Eintrittsöffnung (13) verbindet, und einen zweiten Leitungsabschnitt (42b), welcher die erste Austrittsöffnung (14) mit der zweiten Eintrittsöffnung (23) verbindet. 22. Arrangement according to claim 21, characterized in that the tempering fluid line (42) has a first line section (42a) which connects the temperature control fluid source (41) to the first inlet opening (13), and a second line section (42b) which connects the first outlet opening (14) connects to the second inlet opening (23).
23. Anordnung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die Temperierfluidleitung (42) einen dritten Leitungsabschnitt (42c), welcher die zweite Austrittsöffnung (24) mit der Temperierfluidquelle (41 ) verbindet, aufweist. 23. The arrangement according to claim 22, characterized in that the temperature control fluid line (42) has a third line section (42c) which connects the second outlet opening (24) to the temperature control fluid source (41).
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