WO2020017901A1 - 안정한 액체 약제학적 제제 - Google Patents

안정한 액체 약제학적 제제 Download PDF

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김소영
신연경
강혜영
김광우
오준석
김수정
이준원
한원용
이재빈
노지원
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(주)셀트리온
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Definitions

  • the present invention relates to a stable liquid pharmaceutical formulation.
  • Human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) is a tyrosine kinase bound to the cell membrane surface and is involved in signal transduction pathways that cause cell growth and cell differentiation, and is known to be involved in cell malignancy when overexpressed or activated.
  • Overexpression of the HER2 protein is one of the prognostic factors of breast cancer, resulting in a higher disease recurrence and a worse prognosis.
  • This overexpression of HER2 protein can be suppressed by using a targeted therapeutic agent, which can be used to treat diseases such as breast cancer, rectal cancer and gastrointestinal cancer.
  • Trastuzumab is a type of monoclonal antibody that can act as the inhibitor of HER2 expression.
  • Conventional preparations using this antibody were prepared by lyophilized powder and re-dissolved and injected into the vein in accordance with the dosage and dosage of each disease, or prepared by liquid and injected subcutaneously.
  • the administration of such conventional formulations (freeze drying ⁇ re-dissolution ⁇ intravenous administration) is expensive, cumbersome and frequent, resulting in discomfort, rejection and side effects of the patient, and the patient is a medically trained person. There is a problem that is limited.
  • the method of injecting subcutaneously prepared as a liquid has a disadvantage that the number of administration and the frequency of administration to 120 mg / mL of the antibody may be limited.
  • the problem to be solved by the present invention is to provide a stable liquid pharmaceutical formulation having a low viscosity even when the antibody is included in a high content as well as a low content.
  • Another problem to be solved by the present invention is to provide a liquid pharmaceutical formulation with excellent long-term storage stability based on excellent stability under accelerated conditions and harsh conditions.
  • Another object of the present invention is to provide a stable liquid pharmaceutical formulation capable of intravenous or subcutaneous administration.
  • Stable liquid pharmaceutical formulations include (A) an antibody or antigen-binding fragment thereof; (B) surfactants; (C) sugars or derivatives thereof; (D) buffers; And (E) stabilizers.
  • the (A) antibody may comprise an antibody that binds to HER2.
  • the (A) antibody may comprise trastuzumab, pertuzumab or mixtures thereof.
  • the (A) antibody may comprise a humanized IgG monoclonal antibody.
  • the antibody or antigen-binding fragment thereof comprises a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 A light chain variable region comprising a CDR3 domain; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6.
  • the antibody or antigen-binding fragment thereof comprises a light chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7; And a heavy chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.
  • the antibody comprises a light chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; And a heavy chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
  • the concentration of (A) antibody or antigen-binding fragment thereof may be 250 mg / ml or less.
  • the (B) surfactant may comprise polysorbate, poloxamer or mixtures thereof.
  • the (B) surfactant may comprise polysorbate 20, polysorbate 40, polysorbate 60, polysorbate 80 or a mixture of two or more thereof.
  • the (B) surfactant may comprise polysorbate 80.
  • the concentration of the (B) surfactant may be 0.02 to 0.1% (w / v).
  • (C) sugars comprise monosaccharides, disaccharides, oligosaccharides, polysaccharides or mixtures of two or more thereof, and derivatives of (C) sugars may comprise sugar alcohols, sugar acids or mixtures thereof .
  • the sugar (C) or derivatives thereof may comprise sorbitol, mannitol, trehalose, sucrose or a mixture of two or more thereof.
  • the concentration of (C) sugar or derivative thereof may be 1 to 10% (w / v).
  • the buffer (D) may comprise acetate.
  • the content of (D) buffer may be 1 to 50 mM.
  • the (E) stabilizer may comprise methionine, aspartic acid, proline or a mixture of two or more thereof.
  • the (E) stabilizer may comprise methionine.
  • the content of the stabilizer (E) may be 5 to 100 mM.
  • the pH may be 4.5 to 6.0.
  • it may not comprise NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4 or mixtures thereof.
  • a stable liquid pharmaceutical formulation comprises (A) a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 A light chain variable region comprising a CDR3 domain; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, an antibody or antigen thereof Binding fragments; (B) surfactants; (C) sugars or derivatives thereof; (D) a buffer comprising acetate; And (E) stabilizers comprising methionine.
  • a stable liquid pharmaceutical formulation comprises (A) a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 A light chain variable region comprising a CDR3 domain; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, an antibody or antigen thereof Concentration of binding fragments up to 250 mg / ml; (B) 0.02 to 0.1% (w / v) surfactant; (C) 1 to 10% (w / v) sugars or derivatives thereof; (D) buffer 1-50 mM; And (E) stabilizer 5-100 mM.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may be for intravenous administration or for subcutaneous administration.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not undergo a reconstitution step, dilution step or both before use.
  • Pre-filled syringes according to one embodiment of the present invention may be filled with the stable liquid pharmaceutical formulation.
  • a pre-field syringe may be included therein.
  • the stable liquid pharmaceutical preparation according to the present invention has a low viscosity even when the antibody is contained in a low content as well as a high content, and is excellent in long-term storage stability based on excellent stability under accelerated conditions and harsh conditions.
  • Stable liquid pharmaceutical formulations include (A) an antibody or antigen-binding fragment thereof; (B) surfactants; (C) sugars or derivatives thereof; (D) buffers; And (E) stabilizers.
  • does not contain in the specification of the present application means that the component is not included at all.
  • the term includes substantially no component of the component, i.e., to the extent that it does not affect the activity of the antibody, the stability and viscosity of the liquid pharmaceutical formulation, for example the total weight of the liquid pharmaceutical formulation. It means to include 0 to 1% (w / v), 0 to 1 ppm (w / v) or 0 to 1 ppb (w / v) on the basis.
  • An antibody refers to an immunoglobulin molecule consisting of four polypeptide chains in which two heavy chains and two light chains are connected to each other by disulfide bonds. Other naturally occurring antibodies with other altered structures, such as camelid antibodies, are also included in this definition.
  • Each heavy chain consists of a heavy chain variable region and a heavy chain constant region.
  • the heavy chain constant region consists of three domains (CH1, CH2 and CH3).
  • Each light chain consists of a light chain variable region and a light chain constant region.
  • the light chain constant region consists of one domain (CL).
  • the heavy chain variable region and the light chain variable region can be further subdivided into hypervariable regions called complementarity determining regions (CDRs), arranged with more conserved regions called framework regions (FR).
  • CDRs complementarity determining regions
  • FR framework regions
  • Each heavy and light chain variable region consists of three CDRs and four FRs, which are arranged in the following order from amino terminus to carboxy terminus: FR1,
  • the antibody may include polyclonal antibodies, monoclonal antibodies, recombinant antibodies, single chain antibodies, hybrid antibodies, chimeric antibodies, humanized antibodies or fragments thereof.
  • Humanized antibody means an antibody comprising heavy and light chain constant region sequences from either species and variable region sequences from humans.
  • the antibody may comprise a humanized IgG monoclonal antibody. Humanized IgG monoclonal antibodies consist of mouse heavy and light chain constant regions and human heavy and light chain variable regions bound thereto.
  • the antibody may comprise HER2 or an antibody that binds to the epitope of HER2.
  • Antibodies that bind to HER2 or an epitope of HER2 may include trastuzumab, pertuzumab, or mixtures thereof.
  • the antibody may comprise trastuzumab.
  • the antibody comprises a CDR1 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and a light chain variable comprising a CDR3 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 domain; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6.
  • the antibody comprises a light chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7; And a heavy chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.
  • the antibody comprises a light chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; And a heavy chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
  • the concentration of the antibody or antigen-binding fragment thereof can be freely adjusted within a range that does not substantially affect the stability and viscosity of the stable liquid pharmaceutical formulation according to the present invention.
  • the concentration of the antibody or antigen-binding fragment thereof may be 10 to 250 mg / ml.
  • the concentration of the antibody or antigen-binding fragment thereof is 10-250 mg / mL, 20-250 mg / mL, 30-250 mg / mL, 40-250 mg / mL, 50-250 mg / mL, 60 to 250 mg / mL, 70 to 250 mg / mL, 80 to 250 mg / mL, 90 to 250 mg / mL, 100 to 250 mg / mL, 110 to 250 mg / mL, 120 to 250 mg / mL , 130 to 250 mg / mL, 140 to 250 mg / mL, 150 to 250 mg / mL, 160 to 250 mg / mL, 170 to 250 mg / mL, 180 to 250 mg / mL, 190 to 250 mg / mL, 200 to 250 mg / mL, 210 to 250 mg / mL or 220 to 250 mg / mL.
  • the concentration of the antibody or antigen-binding fragment thereof is 10-240 mg / mL, 10-230 mg / mL, 10-220 mg / mL, 10-210 mg / mL, 10-200 mg / mL, 10 to 190 mg / mL, 10 to 180 mg / mL, 10 to 170 mg / mL, 10 to 160 mg / mL, 10 to 150 mg / mL, 10 to 140 mg / mL, 10 to 130 mg / mL , 10 to 120 mg / mL, 10 to 110 mg / mL, 10 to 100 mg / mL, 10 to 90 mg / mL, 10 to 80 mg / mL, 10 to 70 mg / mL, 10 to 60 mg / mL, 10 to 50 mg / mL, 10 to 40 mg / mL, 10 to 30 mg / mL or 10 to 20 mg / mL.
  • surfactants include polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters (eg polysorbate), polyoxyethylene alkyl ethers (eg Brij), alkylphenylpolyoxyethylene ethers (eg Triton-X), Polyoxyethylene-polyoxypropylene copolymers (eg, Poloxamer, Pluronic), sodium dodecyl sulfate (SDS), and the like.
  • polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters eg polysorbate
  • polyoxyethylene alkyl ethers eg Brij
  • alkylphenylpolyoxyethylene ethers eg Triton-X
  • Polyoxyethylene-polyoxypropylene copolymers eg, Poloxamer, Pluronic
  • SDS sodium dodecyl sulfate
  • the surfactant may include polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester (polysorbate).
  • the polysorbate may comprise polysorbate 20, polysorbate 40, polysorbate 60, polysorbate 80, or a mixture of two or more thereof.
  • the polysorbate may comprise polysorbate 20, polysorbate 80 or mixtures thereof.
  • the polysorbate may comprise polysorbate 80.
  • the concentration of the surfactant can be freely adjusted within a range that does not adversely affect the stability and viscosity of the stable liquid pharmaceutical formulation according to the present invention.
  • the concentration of the surfactant may be 0.001 to 5% (w / v), 0.01 to 1% (w / v) or 0.02 to 0.1% (w / v). If the concentration of the surfactant is within this range, it can exhibit excellent long-term stability and low viscosity.
  • the sugar may include monosaccharides, disaccharides, oligosaccharides, polysaccharides or mixtures of two or more thereof.
  • monosaccharides include, but are not limited to, glucose, fructose, galactose, and the like.
  • disaccharides include but are not limited to sucrose, lactose, maltose, trehalose and the like.
  • oligosaccharides include, but are not limited to, fructooligosaccharides, galactooligosaccharides, met oligosaccharides, and the like.
  • polysaccharides include, but are not limited to, starch, glycogen, cellulose, chitin, pectin, and the like.
  • sugars may include sugar alcohols, sugar acids or mixtures thereof.
  • sugar alcohols include glycerol, erythritol, traceol, arabitol, ziitol, ribitol, mannitol, sorbitol, galactitol, pushtol, iditol, inositol, bolitol, isomalt, maltitol, lactitol, maltotriitol , Maltotetriitol, polyglycitol and the like, but are not limited thereto.
  • sugar acids include, but are not limited to, aldonic acid (such as glyceric acid), uloxonic acid (such as neuramic acid), uronic acid (such as glucuronic acid), and aldar acid (such as tartaric acid).
  • aldonic acid such as glyceric acid
  • uloxonic acid such as neuramic acid
  • uronic acid such as glucuronic acid
  • aldar acid such as tartaric acid
  • the sugar or derivative thereof may include sorbitol, mannitol, trehalose, sucrose or a mixture of two or more thereof.
  • the concentration of sugar or derivative thereof can be freely adjusted within a range that does not substantially adversely affect the stability and viscosity of the liquid pharmaceutical preparation according to the present invention.
  • the concentration of sugar or derivatives thereof may be 0.1 to 30% (w / v), 1 to 20% (w / v) or 1 to 10% (w / v).
  • the concentration of the sugar or its derivative is within this range, it can exhibit excellent long-term stability and low viscosity.
  • Buffers are neutralizing substances that minimize changes in pH caused by acids or alkalis.
  • buffers include phosphate, acetate, succinate, gluconate, glutamate, and sheet. Citrate, histidine and the like.
  • the acetate buffer may comprise acetate.
  • acetate salts include, but are not limited to, sodium acetate, zinc acetate, aluminum acetate, ammonium acetate, potassium acetate, and the like.
  • Acetate buffers can be prepared by mixing the acetates with acetic acid.
  • the acetate buffer may comprise sodium acetate.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not comprise histidine, citrate (citrate), phosphate (phosphate) or mixtures thereof.
  • the amount of acetate in the acetate buffer can be freely adjusted within a range that does not substantially affect the stability and viscosity of the liquid pharmaceutical formulation according to the present invention.
  • the content of acetate buffer may be 1 to 50 mM, 5 to 30 mM or 10 to 25 mM. When the content of acetate is within this range, it can exhibit excellent long-term stability and low viscosity.
  • the acetate content is the content of the acetate in the formulation stored in one container, in the case of a container intended for dispensing or plural administrations, the acetate content may increase several times depending on the corresponding dispensed dose or the administered dose. have. On the contrary, in the case of small containers, the content of acetate may be reduced accordingly.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may comprise methionine, aspartic acid, proline or a mixture of two or more thereof as stabilizers.
  • methionine may be included as a stabilizer.
  • the amino acid may be included as a stabilizer within a range of 3 to 100 mM, for example, in a range of 5 to 100 mM, a range of 5 to 50 mM, and a range of 5 to 30 mM or 5 to 15 mM. have.
  • the content of the stabilizer is within this range, the long-term high molecular weight or low molecular weight component is kept low, the content of intact immunoglobulin G component or intact heavy and light chain is kept high, and it can exhibit excellent long-term stability and low viscosity. .
  • the pH of the stable liquid pharmaceutical composition according to the present invention can be freely adjusted within a range that does not substantially adversely affect the stability and viscosity of the liquid pharmaceutical preparation according to the present invention.
  • the pH of the composition can be 4.5 to 6.0, 5.0 to 6.0 or 5.0 to 5.5. If the pH is within this range, it can exhibit excellent long-term stability and low viscosity.
  • pH can be adjusted using acetate buffer. In other words, when the acetate buffer is included in a predetermined amount, it may exhibit a pH in the above range without a separate pH adjuster. When using buffers comprising histidine, citrate, phosphate or mixtures thereof, it may be difficult to exhibit a pH in this range. When additionally including an acid or a base (eg, sodium hydroxide) as a separate pH adjusting agent, the stability of the antibody may be lowered.
  • an acid or a base eg, sodium hydroxide
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not include salts. Precipitation may occur when the salt is included, and the preparation may have the shape of gelatin, and the stability may be poor.
  • salts include, but are not limited to, NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4, and the like.
  • preservatives include octadecyldimethylbenzyl ammonium chloride, hexamethonium chloride, benzalkonium chloride, benzetonium chloride, phenol, butyl alcohol, benzyl alcohol, alkyl parabens, catechol, resorcinol, cyclohexanol, 3-pentane Ol, m-cresol, and the like. Including a preservative may not help improve stability.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation of the present invention may further include additives known in the art within a range that does not substantially affect the activity of the antibody, the stability and low viscosity of the formulation. have.
  • it may further comprise an aqueous carrier, an antioxidant, or a mixture of two or more thereof.
  • Aqueous carriers are pharmaceutically acceptable (safe and nontoxic when administered to humans) and are useful carriers for the preparation of liquid pharmaceutical formulations. Examples of aqueous carriers include, but are not limited to, sterile water for injection (SWFI), bacteriostatic water for injection (BWFI), sterile saline solution, Ringer's solution, dextrose and the like.
  • Antioxidants include, but are not limited to, ascorbic acid.
  • stable in the “stable” liquid pharmaceutical formulation of the present invention means that the antibody according to the present invention substantially retains its physical stability and / or chemical stability and / or biological activity during the manufacturing process and / or during storage / storage. I mean. Various analytical techniques for measuring the stability of antibodies are readily available in the art.
  • Physical stability can be assessed by methods known in the art, which include sample apparent attenuation measurements of light (absorption or optical density). This light attenuation measurement is related to the turbidity of the formulation.
  • the high molecular weight component, the main component content, the low molecular weight component content, the content of intact immunoglobulin G, the content of intact heavy and light chains, the number of insoluble foreign particles, etc. may be measured with respect to physical stability.
  • Chemical stability can be assessed, for example, by detecting and quantifying a chemically altered form of the antibody.
  • Chemical stability includes charge changes (eg, occurring as a result of deamidation or oxidation) that can be assessed, for example, by ion exchange chromatography. Charge variants (acidic or basic peaks) and the like can be measured for chemical stability.
  • Bioactivity can be assessed by methods known in the art, and antigen binding affinity can be measured, for example, via ELISA.
  • the liquid pharmaceutical formulation may be stable for a long time.
  • stable liquid pharmaceutical formulation means a liquid pharmaceutical formulation that satisfies one or more of the following.
  • Liquid pharmaceutical preparations having an absorbance A600 of 0 to 0.0110 measured by spectrophotometer after 7 weeks of storage at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and an absorbance A600 of 0 to 0.0110 measured by spectrophotometer after storage for 7 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main component of 99 to 100% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and 99-100% of the main component measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main component of 98% to 100% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and a main component of 98-100% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main ingredient of 97% to 100% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5% and a main component of 97-100% as measured by SE-HPLC after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0 to 1.0% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0 to 1.0% as measured by SE-HPLC after storage for 5 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0 to 1.0% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0 to 1.0% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0% to 2.5% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a high molecular weight component of 0 to 2.5% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a low molecular weight component of 0 to 0.2% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a low molecular weight component of 0 to 0.2% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical formulations having a low molecular weight component of 0 to 0.3% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a low molecular weight component of 0-0.3% as measured by SE-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a low molecular weight component of 0% to 2.0% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a low molecular weight component of 0 to 2.0% as measured by SE-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a content of intact immunoglobulin G (Intact IgG%) of 97.0% to 100% as measured by non-reducing CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C ⁇ 3 ° C;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a content of intact immunoglobulin G (Intact IgG%) of 97.0% to 100% as measured by non-reducing CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a content of intact immunoglobulin G (Intact IgG%) of 96.0% to 100% as measured by non-reducing CE-SDS after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Intact immunoglobulin G content (Intact IgG%), measured by non-reducing CE-SDS, after storage for 6 weeks in a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and in a closed condition.
  • Liquid pharmaceutical preparations
  • Liquid pharmaceutical preparations having a content of intact immunoglobulin G (Intact IgG%) of 90.4% to 100% as measured by non-reducing CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Intact immunoglobulin G content (Intact IgG%) as measured by non-reducing CE-SDS after storage for 7 weeks at 40 ° C ⁇ 2 ° C, relative humidity 75 ⁇ 5% and closed conditions. Liquid pharmaceutical preparations;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an intact heavy and light chain content (Intact HC + LC%) of 99.0% to 100% as measured by reduced CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C ⁇ 3 ° C;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an intact heavy and light chain content (Intact HC + LC%) of 99.0% to 100% as measured by reduced CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an intact heavy and light chain content (Intact HC + LC%) of 99.1% to 100% as measured by reduced CE-SDS after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Intact heavy and light chain content (Intact HC + LC%), measured by reduced CE-SDS, after storage for 6 weeks at 25 ° C ⁇ 2 ° C, 60 ⁇ 5% relative humidity and closed conditions; Phosphorus liquid pharmaceutical preparations;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a content of intact heavy and light chains (Intact HC + LC%) of 96.8% to 100% as measured by reduced CE-SDS after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Intact heavy and light chain content (Intact HC + LC%) measured by reduced CE-SDS after storage for 7 weeks at 40 ° C ⁇ 2 ° C, 75 ⁇ 5% relative humidity, and closed conditions; Liquid pharmaceutical formulations in%;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical formulations having a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and a number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after 7 weeks in closed conditions, with 0-100;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and a number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 7 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • a liquid drug having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ° 5%, and a number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after 7 weeks in a sealed condition.
  • Liquid pharmaceutical preparations having a number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • a liquid drug having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ° 5%, and a number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) measured by MFI after 7 weeks in a sealed condition.
  • Liquid pharmaceutical preparations having an oxidation rate of 0% to 3.0% of the heavy chain Met 255 as determined by LC-MS after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a oxidation rate of 0% to 3.0% of the heavy chain Met 255 as measured by LC-MS after storage for 5 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an oxidation rate of 0% to 2.1% of the heavy chain Met 255 as measured by LC-MS after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an oxidation rate of 0% to 2.1% of the heavy chain Met 255 as measured by LC-MS after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an oxidation rate of 0% to 5.7% of the heavy chain Met 255 as determined by LC-MS after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and an oxidation rate of 0 to 5.7% of the heavy chain Met 255 as determined by LC-MS after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an acidic peak of 20% to 32% as measured by IEC-HPLC after 7 weeks of storage at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an acidic peak of 20% to 32% as measured by IEC-HPLC after storage for 5 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an acidic peak of 22% to 30% as measured by IEC-HPLC after 6 weeks of storage at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an acidic peak of 22% to 30% as measured by IEC-HPLC after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having an acidic peak of 19% to 34% as measured by IEC-HPLC after 7 weeks of storage at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and an acidic peak measured by IEC-HPLC of 19% to 34% after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 50% to 60% as measured by IEC-HPLC after 7 weeks of storage at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 50% to 60% as measured by IEC-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 40% to 48% as measured by IEC-HPLC after 6 weeks of storage at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 40% to 48% as measured by IEC-HPLC after storage for 6 weeks at 25 ° C ⁇ 2 ° C, 60 ⁇ 5% relative humidity and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 19% to 30% as measured by IEC-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and a main peak of 19% to 30% as measured by IEC-HPLC after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a basic peak of 12% to 20% as measured by IEC-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 12% to 20% as measured by IEC-HPLC after storage for 5 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a basic peak of 26% to 37% as measured by IEC-HPLC after 6 weeks of storage at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a main peak of 26% to 37% as measured by IEC-HPLC after storage for 6 weeks in temperature 25 ° C. ⁇ 2 ° C., relative humidity 60 ⁇ 5% and closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a basic peak of 40% to 66% as measured by IEC-HPLC after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and a basic peak of 40% to 66% as measured by IEC-HPLC after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical formulations having a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after storage for 7 weeks at a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical formulations having a temperature of 5 ° C. ⁇ 3 ° C. and a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after 7 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after storage for 6 weeks at a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a temperature of 25 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 60 ⁇ 5% and a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after storage for 6 weeks in closed conditions;
  • Liquid pharmaceutical preparations having a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after storage for 7 weeks at a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C .;
  • Liquid pharmaceutical formulations having a temperature of 40 ° C. ⁇ 2 ° C., a relative humidity of 75 ⁇ 5%, and a HER2 binding affinity of 80% to 120% as measured by ELISA after 7 weeks of storage in closed conditions;
  • Stable liquid pharmaceutical formulations of the invention can be prepared using known methods and are not limited to specific methods.
  • the pH may be adjusted by adding an acetate buffer to a solution containing a surfactant and a sugar or derivative thereof, and then the antibody may be added to the mixed solution to prepare a liquid pharmaceutical preparation.
  • the formulation may not comprise a freeze drying process or may comprise a freeze drying process.
  • the liquid pharmaceutical formulation of the present invention may be prepared and placed in a closed container immediately after treatment such as sterilization.
  • liquid pharmaceutical preparations according to the invention can be prepared by supplementing or replacing components which have been removed or modified by storage / storage.
  • freeze-drying only the components excluding components that can be removed or modified by freeze drying and / or storage / storage in the liquid pharmaceutical preparation of the present invention or after freeze-drying and storing / storing only those components
  • the above excluded components may be added to prepare a liquid pharmaceutical preparation according to the present invention.
  • Stable liquid pharmaceutical formulations according to the invention can be used to treat harmful diseases through HER2 binding.
  • diseases in which the activity of HER2 is harmful include, but are not limited to, breast cancer, rectal cancer, and gastrointestinal cancer.
  • the harmful disease due to binding to HER2 may be selected from breast cancer, rectal cancer, gastrointestinal cancer.
  • Stable liquid pharmaceutical formulations according to the invention can be used for single, several or intravenous or subcutaneous administration.
  • the concentration of other components, including antibodies, in the liquid pharmaceutical formulation is as described above, and the total volume of the liquid pharmaceutical formulation may be 0.2-3.5 mL.
  • Dosage and timing of the liquid pharmaceutical preparation may vary depending on the type of disease, the severity and course of the disease, the patient's health and response to treatment, and the judgment of the treating physician, and the particular dosage and timing of administration It is not limited to.
  • one or several products containing the liquid pharmaceutical formulation may be administered 600 mg based on antibody concentration, followed by administration of the same dose every three weeks.
  • the invention also relates to a patient with a disease for which the activity of HER2 is detrimental (A) an antibody or antigen-binding fragment thereof; (B) surfactants; (C) sugars or derivatives thereof; (D) buffers; And (E) a stable liquid pharmaceutical formulation comprising a stabilizer.
  • the invention also relates to (A) an antibody or antigen-binding fragment thereof; (B) surfactants; (C) sugars or derivatives thereof; (D) buffers; And (E) a stable liquid pharmaceutical formulation comprising a stabilizer in a liquid pharmaceutical formulation.
  • the antibody may comprise an antibody that binds to HER2.
  • the antibody may comprise trastuzumab, pertuzumab, or mixtures thereof.
  • the antibody may comprise a humanized IgG monoclonal antibody.
  • the antibody comprises a CDR1 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and a CDR3 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3 A light chain variable region comprising; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6.
  • the antibody comprises a light chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7; And a heavy chain variable region comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.
  • the antibody comprises a light chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; And a heavy chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
  • the concentration of (A) the antibody or antigen-binding fragment thereof may be 250 mg / ml or less.
  • the surfactant may comprise polysorbate, poloxamer or mixtures thereof.
  • the surfactant may comprise polysorbate 20, polysorbate 40, polysorbate 60, polysorbate 80, or a mixture of two or more thereof.
  • the surfactant may comprise polysorbate 80.
  • the concentration of (B) surfactant may be 0.02 to 0.1% (w / v).
  • the sugar may comprise a monosaccharide, a disaccharide, an oligosaccharide, a polysaccharide or a mixture of two or more thereof, and the derivative of the sugar may comprise a sugar alcohol, a sugar acid or a mixture thereof.
  • the sugar or derivative thereof may comprise sorbitol, mannitol, trehalose, sucrose or a mixture of two or more thereof.
  • the concentration of (C) sugar or derivative thereof may be 1 to 10% (w / v).
  • the buffer (D) may comprise acetate.
  • the content of (D) buffer may be 1 to 50 mM.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may comprise (E) stabilizer as methionine, aspartic acid, proline or a mixture of two or more thereof.
  • the stabilizer (E) may comprise methionine.
  • the content of the stabilizer (E) may be 5 to 100 mM.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may have a pH of 4.5 to 6.0.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not include salts. Precipitation may occur when salts are included and the preparation may have the shape of gelatin.
  • salts include, but are not limited to, NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na 2 SO 4, NaSCN, K 2 SO 4, and the like.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not comprise a preservative.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may further comprise an aqueous carrier, antioxidant, or a mixture of two or more thereof.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation comprises (A) a CDR1 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, a CDR2 domain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3 A light chain variable region comprising a CDR3 domain comprising an amino acid sequence; And a heavy chain variable region comprising a CDR1 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, a CDR2 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a CDR3 domain comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, an antibody or antigen thereof Concentration of binding fragments up to 250 mg / ml; (B) 0.02 to 0.1% (w / v) surfactant; (C) 1 to 10% (w / v) sugars or derivatives thereof; (D) buffer 1-50 mM; And (E) a stable liquid pharmaceutical formulation comprising a stabilizing agent of 5 to 100 mM.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may be for intravenous or subcutaneous administration.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may have a viscosity measured within 20 cP after sample preparation.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation may not undergo a reconstitution step, dilution step or both before use.
  • a pre-filled syringe may be filled with the stable liquid pharmaceutical formulation.
  • the auto-injector may include the pre-field syringe therein.
  • the present invention also provides the above stable liquid pharmaceutical formulations; And a container for receiving the stable liquid pharmaceutical formulation in a hermetically sealed state.
  • the stable liquid pharmaceutical formulation is as described above.
  • the container may be formed from a material such as glass, polymer (plastic), metal, and the like, but is not limited thereto.
  • the container is a bottle, vial, cartridge, syringe (pre-field syringe, auto-injector), or tube, but is not limited thereto.
  • the container may be a glass or polymer vial, or a glass or polymer pre-field syringe.
  • the inside of the container may not be coated with silicone oil. If silicone oil is coated, the stability may be reduced.
  • the container may be a container for single administration or for several administrations.
  • the product may further comprise instructions for providing a method of use, storage or both of the stable liquid pharmaceutical formulation.
  • the method of use includes treatment of diseases in which the activity of HER2 is detrimental and may include the route of administration, dosage and timing of administration.
  • the product may include other tools needed from a commercial and user standpoint, such as needles, syringes, and the like.
  • trastuzumab prepared from Celltrion was used.
  • the content of high molecular weight components was determined using size exclusion HPLC.
  • the main peak content (% peak) was determined using Size Exclusion HPLC.
  • the content of low molecular weight components was determined using size exclusion high performance liquid chromatography (Size Exclusion HPLC).
  • Non-reduced capillary electrophoresis-Sodium Dodecyl Sulfate (NR CE-SDS) was used to determine the percentage of intact immunoglobulin G.
  • R CE-SDS Reduced capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfate
  • MFI Micro Flow Imaging
  • the oxidation rate (%) of the heavy chain Met 255 was determined by peptide mapping by liquid chromatography through mass spectrometry (LC-MS).
  • HER2 binding affinity (%) was determined by Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA).
  • each buffer was prepared for each pH, and then various amino acids were added, an antibody was added thereto, and a surfactant was added to prepare the samples of Table 1. Specific contents of each component are as described in Table 1 below. The total dose was 3 mL.
  • Example 1 0.0 0.1 0.5 1.1
  • Example 2 0.0 0.1 0.6 1.2
  • Example 3 0.0 0.1 0.8 1.7
  • Example 1 contains less than 1.1% of the low molecular weight component after 7 weeks at a temperature of 40 °C.
  • Example 1 contains more than 97.1% of the main components after 7 weeks at a temperature of 40 °C.
  • Example 1 97.6 97.1 95.4 92.5
  • Example 2 97.6 97.1 95.2 91.9
  • Example 3 97.2 97.0 94.6 90.4
  • Example 1 is intact immunoglobulin G content of 92.5% or more higher than Example 2 and Example 3.
  • Example 1 shows that the content of the intact heavy chain and light chain is 97.3% or more higher than Example 2 and Example 3.
  • Example 1 shows the lowest oxidation rate of heavy chain Met 255 under all conditions.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 7 weeks at a temperature of 40 °C is 3.1% or less than Example 2 and Example 3.
  • Example 1 59.7 53.1 27.6 21.5
  • Example 2 59.7 52.9 27.0 20.1
  • Example 3 59.8 52.5 23.8 15.4
  • Example 1 has the highest main peak under all conditions. In particular, it can be seen that in Example 1 the main peak after 7 weeks at a temperature of 40 °C the highest 21.5% or more.
  • Example 1 is the least number of insoluble foreign particles (1.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) after 7 weeks at a temperature of 40 °C.
  • each buffer was prepared for each pH, and then each sugar alcohol was added, an antibody was added thereto, and a surfactant was added as shown in Table 9 below. Samples were prepared. The concentration of each component is as described in Table 9 below. The total dose was 3 mL.
  • Example 4 0.0045 0.0040 0.0030 0.0020 0.0040
  • Example 5 0.0045 0.0040 0.0040 0.0035 0.0040
  • Example 6 0.0050 0.0040 0.0040 0.0045 0.0030
  • Example 7 0.0070 0.0050 0.0040 0.0040 0.0050
  • Example 4 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
  • Example 5 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
  • Example 6 0.0 0.0 0.0 0.0 0.5 1.2
  • Example 7 0.0 0.0 0.0 0.1 0.5 1.0
  • Example 4 3.3 2.8 2.8 3.8 5.0
  • Example 5 2.8 2.7 2.9 3.7 4.9
  • Example 6 2.7 2.7 2.9 3.8 5.0
  • Example 7 3.3 2.7 2.7 3.8 4.9
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 is 7% or less after 7 weeks at a temperature of 40 ° C.
  • Example 4 0.0045 0.0040 0.0030 0.0020 0.0040
  • Example 8 0.0060 0.0020 0.0030 0.0020 0.0030
  • Example 4 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
  • Example 8 0.0 0.0 0.1 0.5 1.0
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) after 7 weeks at 40 ° C. is 10 or less. .
  • a buffer was prepared at pH 5.0 with sodium acetate and then sorbitol was added as sugar alcohol, amino acid was added thereto, antibody was added thereto, and surfactant was added.
  • the content of each component is as described in Table 22 below. The total dose was 3 mL.
  • the results are shown in Tables 23 to 53 below.
  • Example 10 200 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.5
  • Example 11 180 0.4 0.5 0.5 0.7 0.7 1.1 1.3
  • Example 12 220 0.5 0.6 0.5 0.8 0.9 1.4 1.7
  • the higher molecular weight component increases, but the high molecular weight component is generally lower after 6 weeks at 5 ° C, 25 ° C, and 40 ° C within the range of 180-220 mg / mL antibody concentration. It can be seen.
  • Example 10 200 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
  • Example 11 180 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.1
  • Example 12 220 0.0 0.1 0.0 0.1 0.2 0.6 1.0
  • the low molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within the range of antibody concentration 180 to 220 mg / mL.
  • Example 10 200 1.8 2.1 2.2 2.5
  • Example 11 180 1.7 2.1 2.1 2.4
  • Example 12 220 1.9 2.0 2.1 2.4
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within the range of antibody concentration 180 to 220 mg / mL is generally low to 2.5% or less.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ ⁇ 100.00 ⁇ m) is 200 or less after 6 weeks at 5 ° C, 25 ° C and 40 ° C within a range of antibody concentration of 180 to 220 mg / mL. Can be.
  • the high molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within the range of 4% to 5% sorbitol concentration as a sugar alcohol.
  • the low molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within the range of 4% to 5% sorbitol concentration with sugar alcohol.
  • the content of intact immunoglobulin G is generally high after 6 weeks at 5 ° C., 25 ° C., and 40 ° C. within a range of 4% to 5% sorbitol concentration with sugar alcohol.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) is 200 or less after 6 weeks at 5 ° C., 25 ° C. and 40 ° C. within a range of 4% to 5% sorbitol concentration with sugar alcohol. It can be seen that.
  • the viscosity is 14 cP or less after 0 weeks 5 °C in the range of 4% to 5% of sorbitol concentration with sugar alcohol.
  • the high molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C in the concentration range of 5 mM to 15 mM of methionine.
  • the main component is generally high after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C in the concentration range of 5 mM to 15 mM methionine.
  • the low molecular weight components are generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C in the concentration range of 5 mM to 15 mM methionine.
  • the intact immunoglobulin G component is generally high after 6 weeks at 5 ° C, 25 ° C, and 40 ° C in a concentration range of 5 mM to 15 mM of methionine.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within a concentration range of 5 mM to 15 mM methionine is generally low to 2.6% or less.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) is 100 or less after 6 weeks at 5 ° C, 25 ° C, and 40 ° C in a concentration range of 5 mM to 15 mM of methionine. Can be.
  • the viscosity is 14 cP or less after 0 weeks 5 °C in the concentration range of 5 mM to 15 mM methionine.
  • the high molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C in the range of 0.02% to 0.08% polysorbate.
  • the low molecular weight component is generally low after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C polysorbate 0.02% to 0.08% range.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 6 weeks at 5 °C, 25 °C and 40 °C within a range of 0.02% to 0.08% polysorbate is generally low to 2.5% or less.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ ⁇ 100.00 ⁇ m) is 200 or less after 6 weeks at 5 ° C, 25 ° C and 40 ° C in the range of 0.02% to 0.08% polysorbate. have.
  • the viscosity is 14 cP or less after 0 weeks 5 ° C in the range of 0.02% to 0.08% polysorbate.
  • Example 18 100 0.0051 0.0050 0.0034 0.0044 0.0025
  • Example 19 140 0.0050 0.0054 0.0045 0.0033 0.0038
  • Example 21 160 0.0020 0.0046 0.0044 0.0030 0.0039
  • Example 18 100 0.4 0.4 0.6 0.4 0.8
  • Example 19 140 0.5 0.4 0.8 0.5 1.0
  • Example 21 160 0.5 0.5 0.9 0.7 1.2
  • the high molecular weight component increases as the antibody concentration increases, but the high molecular weight component is generally low after 4 weeks at 5 ° C and 40 ° C within the range of the antibody concentration of 100 to 160 mg / mL. .
  • the main component is lowered as the antibody concentration is increased, it can be seen that after 4 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of 100 to 160 mg / mL of the antibody concentration is generally high.
  • Example 18 100 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
  • Example 19 140 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
  • Example 21 160 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
  • the low molecular weight component is generally low after 4 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of the antibody concentration 100 to 160 mg / mL.
  • the content of intact immunoglobulin G is generally high after 4 weeks at 5 ° C. and 40 ° C. within an antibody concentration of 100 to 160 mg / mL.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 4 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of the antibody concentration 100 to 160 mg / mL is generally low to 3.0% or less.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) after 4 weeks at 5 ° C. and 40 ° C. in the range of antibody concentration of 100 to 160 mg / mL is still lower, with 200 or less. It can be seen that it is maintained.
  • the high molecular weight component is generally low after 4 weeks at 5 °C and 40 °C within a concentration range of 10 mM to 30 mM of methionine.
  • the main component content is generally high after 4 weeks at 5 °C and 40 °C in the concentration range of 10 mM to 30 mM of methionine.
  • the low molecular weight components are generally low after 4 weeks at 5 °C and 40 °C within a concentration range of 10 mM to 30 mM of methionine.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 is slightly higher at a concentration of 30 mM methionine, but the oxidation rate of the heavy chain Met 255 is generally lower after 4 weeks at 5 ° C. and 40 ° C. within a concentration range of 10 mM to 30 mM of methionine. Can be.
  • the number of insoluble foreign particles (10.00 ⁇ m ⁇ , ⁇ 100.00 ⁇ m) is maintained at a low level even after 4 weeks at 5 ° C. and 40 ° C. within a concentration range of 10 mM to 30 mM of methionine. It can be seen.
  • Example 21 include 0.50 0.49 0.90 0.67 1.17
  • Example 21 has a lower polymer component content than Comparative Example 4.
  • Example 21 include 99.39 99.37 98.58 99.16 97.94
  • Example 21 has a higher main component content than Comparative Example 4.
  • Example 21 include 98.95 98.10 97.35 97.01 94.95
  • Example 21 has a higher content of intact immunoglobulin G than Comparative Example 3.
  • Example 21 include 99.92 99.91 99.91 99.81 99.46
  • Example 21 include 99.92 99.90 99.91 99.80 99.54
  • Example 21 has a higher content of intact heavy and light chain than Comparative Example 3.
  • Example 77 it can be seen that after 4 weeks at 5 °C and 40 °C Comparative Example 5 has a higher polymer component content than Example 21.
  • Example 78 it can be seen that after 4 weeks at 5 °C and 40 °C Comparative Example 5 has a lower main component content than Example 21.
  • Example 79 it can be seen that after 4 weeks at 5 °C and 40 °C Comparative Example 5 has a higher content of low-molecular components than Example 21.
  • Example 81 it can be seen that after 4 weeks at 5 °C and 40 °C Comparative Example 5 has a higher oxidation rate than Example 21.
  • the main component is lowered, it can be seen that the main component is generally high after 2 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of antibody concentration of 10 to 120 mg / mL.
  • Example 22 10 0.18 0.14 0.43
  • Example 23 50 0.17 0.14 0.45
  • Example 24 120 0.16 0.14 0.50
  • the low molecular weight component is generally low after 2 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of antibody concentration of 10 to 120 mg / mL.
  • the oxidation rate of the heavy chain Met 255 after 2 weeks at 5 °C and 40 °C within the range of antibody concentration 10 to 120 mg / mL is generally low to 3.9% or less.

Abstract

본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 계면활성제; 당 또는 이의 유도체; 완충제; 및 안정화제를 포함한다. 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 항체를 저함량뿐만 아니라 고함량으로 포함하여도 낮은 점도를 가지고, 가속 조건 및 가혹 조건에서의 우수한 안정성을 바탕으로 장기간 보관 안정성이 우수하다.

Description

안정한 액체 약제학적 제제
본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제에 관한 것이다.
인간상피증식인자 수용체 2(HER2)는 세포막 표면에 결합된 티로신 인산화 효소로 세포 성장과 세포 분화를 일으키는 신호 전달 경로에 관여하며 과발현 또는 활성화 되는 경우 세포의 악성화에 관여하는 것으로 알려져 있다. HER2 단백질의 과발현은 유방암의 예후인자 중 하나로서, 질병 재발을 더 높게 하고 더 나쁜 예후를 야기한다. 이러한 HER2 단백질의 과발현은 표적 치료제를 이용하여 억제할 수 있으며 이를 통해 유방암, 직장암 및 위장암 등과 같은 질병의 치료가 가능하다.
트라스투주맙은 상기 HER2 발현 억제제의 역할을 수행할 수 있는 단일클론항체의 일종이다. 이 항체를 이용하는 종래 제제는 동결 건조 분말로 제조되어 이를 재용해 하여 각 질환의 투여 용법 및 용량에 맞춰 정맥에 주사하는 방식이거나, 또는 액체로 제조되어 이를 피하로 주사하는 방식이었다. 그러나, 이와 같은 종래 제제의 투여방식(동결 건조 → 재용해 → 정맥 투여)에는 비용이 많이 들고, 번거롭고, 빈번한 투여로 인해 환자의 불편, 거부감 및 부작용이 발생하고, 투여자가 의료 교육을 받은 사람으로 제한되는 문제점이 있다. 또한 액체로 제조되어 피하로 주사하는 방식은 항체의 함량이 120 mg/mL로 투여 횟수 및 투여 주기가 제한될 수 있다는 단점이 있다.
따라서, 상기 종래 액체 약제학적 제제의 문제점을 해결하면서, HER2 억제제로서 항체, 특히 트라스투주맙을 포함할 수 있는 안정한 액체 약제학적 제제에 대한 필요성이 존재한다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 항체를 저함량뿐만 아니라 고함량으로 포함하여도 낮은 점도를 갖는 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 가속 조건 및 가혹 조건에서의 우수한 안정성을 바탕으로 장기간 보관 안정성이 우수한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
본 발명이 해결하고자 하는 또 다른 과제는 정맥 투여 또는 피하 투여가 가능한 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
본 발명의 일 구현예에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 이의 유도체; (D) 완충제; 및 (E) 안정화제를 포함한다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체는 HER2에 결합하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체는 트라스투주맙(trastuzumab), 페르투주맙(pertuzumab) 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체는 인간화된 IgG 단일클론 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 250 mg/ml 이하일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (B) 계면활성제의 농도는 0.02 내지 0.1 %(w/v)일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하고, (C) 당의 유도체는 당 알코올, 당 산 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당 또는 이의 유도체는 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당 또는 이의 유도체의 농도는 1 내지 10 %(w/v)일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 완충제는 아세테이트를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 완충제의 함량은 1 내지 50 mM일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (E) 안정화제는 메티오닌, 아스파르트산, 프롤린 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (E) 안정화제는 메티오닌을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (E) 안정화제의 함량은 5 내지 100 mM일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, pH가 4.5 내지 6.0일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4 또는 이들의 혼합물을 포함하지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 이의 유도체; (D) 아세테이트를 포함하는 완충제; 및 (E) 메티오닌을 포함하는 안정화제를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도 250 mg/ml 이하; (B) 계면활성제 0.02 내지 0.1%(w/v); (C) 당 또는 이의 유도체 1 내지 10%(w/v); (D) 완충제 1 내지 50 mM; 및 (E) 안정화제 5 내지 100 mM을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 정맥 투여용 또는 피하 투여용일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 사용 전에 재용해(reconstitution) 단계, 희석(dilution) 단계 또는 이들 모두를 거치지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따른 프리-필드 시린지(pre-filled syringe)는 상기 안정한 액체 약제학적 제제가 충진될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따른 자동 주사기(auto-injector)는 프리-필드 시린지가 그 내부에 포함될 수 있다.
본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 항체를 저함량뿐만 아니라 고함량으로 포함하여도 낮은 점도를 가지고, 가속 조건 및 가혹 조건에서의 우수한 안정성을 바탕으로 장기간 보관 안정성이 우수하다.
[안정한 액체 약제학적 제제]
본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 이의 유도체; (D) 완충제; 및 (E) 안정화제를 포함한다.
본 출원의 명세서에서 용어 “포함하지 않음”은 해당 성분을 전혀 포함하지 않는 것을 의미한다. 또한, 해당 용어는 해당 성분을 실질적으로 포함하지 않는 것, 즉 항체의 활성, 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 영향을 주지 않는 범위로 포함하는 것, 예를 들어 액체 약제학적 제제의 전체 중량을 기준으로 0 내지 1 %(w/v), 0 내지 1 ppm(w/v) 또는 0 내지 1 ppb(w/v)로 포함하는 것을 의미한다.
(A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편
항체는 2개의 중쇄(Heavy Chain) 및 2개의 경쇄(Light Chain)가 디설파이드 결합에 의해 서로 연결되어 있는 4개의 폴리펩타이드쇄로 이루어진 면역글로불린 분자를 가리킨다. 기타 변화된 구조를 갖는 자연 발생 항체, 예를 들어 카멜리드 항체도 이 정의에 포함된다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변 영역으로 이루어진다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인(CH1, CH2 및 CH3)으로 이루어진다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역으로 이루어진다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인(CL)으로 이루어진다. 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은, 골격 영역(FR)으로 불리는 보다 보존된 영역과 함께 배치된, 상보성 결정 영역(CDR)으로 불리는 초가변성 영역으로 더욱 세분될 수 있다. 각각의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 이루어지고, 이들은 아미노 말단에서 카복시 말단까지 하기의 순서로 배열되어 있다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
본 발명의 일 구현예에서, 항체로서 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체, 재조합 항체, 단일쇄 항체, 하이브리드 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 이들의 단편을 포함할 수 있다. 인간화 항체는 어느 한 종으로부터의 중쇄 및 경쇄 불변 영역 서열과 인간으로부터의 가변 영역 서열을 포함하는 항체를 의미한다. 본 발명의 일 구현예에서, 항체로서 인간화 된 IgG 단일 클론 항체를 포함할 수 있다. 인간화 된 IgG 단일 클론 항체는 마우스 중쇄 및 경쇄 불변 영역과 이에 결합된 인간 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로 이루어진다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체로서 HER2 또는 HER2의 에피토프에 결합하는 항체를 포함할 수 있다. HER2 또는 HER2의 에피토프에 결합하는 항체로서 트라스투주맙, 페르투주맙 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 항체로서 트라스투주맙을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 10 내지 250 mg/ml일 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 10 내지 250 mg/mL, 20 내지 250 mg/mL, 30 내지 250 mg/mL, 40 내지 250 mg/mL, 50 내지 250 mg/mL, 60 내지 250 mg/mL, 70 내지 250 mg/mL, 80 내지 250 mg/mL, 90 내지 250 mg/mL, 100 내지 250 mg/mL, 110 내지 250 mg/mL, 120 내지 250 mg/mL, 130 내지 250 mg/mL, 140 내지 250 mg/mL, 150 내지 250 mg/mL, 160 내지 250 mg/mL, 170 내지 250 mg/mL, 180 내지 250 mg/mL, 190 내지 250 mg/mL, 200 내지 250 mg/mL, 210 내지 250 mg/mL 또는 220 내지 250 mg/mL일 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 10 내지 240 mg/mL, 10 내지 230 mg/mL, 10 내지 220 mg/mL, 10 내지 210 mg/mL, 10 내지 200 mg/mL, 10 내지 190 mg/mL, 10 내지 180 mg/mL, 10 내지 170 mg/mL, 10 내지 160 mg/mL, 10 내지 150 mg/mL, 10 내지 140 mg/mL, 10 내지 130 mg/mL, 10 내지 120 mg/mL, 10 내지 110 mg/mL, 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 10 내지 80 mg/mL, 10 내지 70 mg/mL, 10 내지 60 mg/mL, 10 내지 50 mg/mL, 10 내지 40 mg/mL, 10 내지 30 mg/mL 또는 10 내지 20 mg/mL일 수 있다. 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도가 이 범위 내인 경우, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 고함량에 따라 투여 용량 및 투여 주기의 자유도를 높일 수 있고, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다.
(B) 계면활성제
계면활성제의 예는 폴리옥시에틸렌소르비탄지방산에스테르(예를 들면, 폴리소르베이트), 폴리옥시에틸렌알킬에테르(예들 들면, Brij), 알킬페닐폴리옥시에틸렌에테르(예를 들면, Triton-X), 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 코폴리머(예를 들면, Poloxamer, Pluronic), 나트륨 도데실 설페이트(SDS) 등을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 계면활성제는 폴리옥시에틸렌소르비탄지방산에스테르(폴리소르베이트)를 포함할 수 있다. 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에서, 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 계면활성제의 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 악영향을 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다. 예를 들어, 계면활성제의 농도는 0.001 내지 5%(w/v), 0.01 내지 1%(w/v) 또는 0.02 내지 0.1%(w/v)일 수 있다. 계면활성제의 농도가 이 범위 내인 경우, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다.
(C) 당 또는 당의 유도체
당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 단당류의 예로는 글루코스, 프룩토스, 갈락토스 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 이당류의 예로는 수크로오스, 락토스, 말토스, 트레할로스 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 올리고당의 예로는 프룩토올리고당, 갈락토올릭고당, 만난올리고당 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 다당류의 예로는 전분, 글리코겐, 셀룰로스, 키틴, 펙틴 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
당의 유도체는 당 알코올, 당 산 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 당 알코올의 예로는 글리세롤, 에리스리톨, 트레이톨, 아라비톨, 자이리톨, 리비톨, 만니톨, 소르비톨, 갈락티톨, 푸시톨, 이디톨, 이노시톨, 볼레미톨, 아이소말트, 말티톨, 락티톨, 말토트리이톨, 말토테트라이톨, 폴리글리시톨 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 당 산의 예로는 알돈산(글리세르산 등), 울로손산(뉴라민산 등), 우론산(글루쿠론산 등), 알다르산(타르타르산 등) 등이 있으며 이에 제한되지 않는다
본 발명의 일 구현예에서, 당 또는 이의 유도체로서 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 당 또는 이의 유도체의 농도는 본 발명에 따른 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다. 예를 들어, 당 또는 이의 유도체의 농도는 0.1 내지 30%(w/v), 1 내지 20%(w/v) 또는 1 내지 10%(w/v)일 수 있다. 당 또는 이의 유도체의 농도가 이 범위 내인 경우, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다.
(D) 완충제
완충제는 산이나 알칼리에 의한 pH의 변화를 최소화시키는 중화성 물질이며, 완충제의 예로는 포스페이트(phosphate), 아세테이트(acetate), 숙시네이트(succinate), 글루코네이트(gluconate), 글루타메이트(glutamate), 시트레이트(citrate), 히스티딘(histidine) 등이 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 아세테이트 완충제는 아세트산염을 포함할 수 있다. 아세트산염의 예로는 아세트산나트륨, 아세트산아연, 아세트산알루미늄, 아세트산암모늄, 아세트산칼륨 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 아세테이트 완충제는 상기 아세트산염과 아세트산을 혼합하여 제조할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 아세테이트 완충액은 아세트산나트륨을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 안정한 액체 약제학적 제제는 히스티딘, 시트레이트(시트르산염), 포스페이트(인산염) 또는 이들의 혼합물을 포함하지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 아세테이트 완충제 내의 아세테이트의 함량은 본 발명에 따른 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다. 예를 들어, 아세테이트 완충제의 함량은 1 내지 50 mM, 5 내지 30 mM 또는 10 내지 25 mM일 수 있다. 아세테이트의 함량이 이 범위 내인 경우, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다.
한편, 상기 아세테이트의 함량은 1개의 용기 내에 보관된 제제 내의 아세테이트의 함량으로서, 분배 또는 복수회의 투여를 목적으로 하는 용기의 경우 해당 분배수 또는 해당 투여수에 따라 아세테이트의 함량이 수 배 증가할 수 있다. 반대로 소형 용기의 경우 이에 맞춰 아세테이트의 함량이 감소할 수 있다.
(E) 안정화제
본 발명의 일 구현예에서, 안정한 액체 약제학적 제제는 안정화제로서 메티오닌, 아스파르트산, 프롤린 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 구현예에서, 안정화제로서 메티오닌을 포함할 수 있다. 예를 들어, 안정화제로서 아미노산을 3 내지 100 mM 이내의 범위, 예를 들어, 5 내지 100 mM의 범위, 5 내지 50 mM의 범위, 5 내지 30 mM 또는 5 내지 15 mM의 범위로 포함할 수 있다. 안정화제의 함량이 이 범위 내인 경우, 장기간 고분자량 또는 저분자량 성분이 낮게 유지되고, 온전한 면역글로불린 G성분 또는 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 높게 유지되며, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다.
(F) pH
본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 조성물의 pH는 본 발명에 따른 액체 약제학적 제제의 안정성 및 점도에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다. 예를 들어, 본 조성물의 pH는 4.5 내지 6.0, 5.0 내지 6.0 또는 5.0 내지 5.5일 수 있다. pH가 이 범위 내인 경우, 장기간 안정성 및 저점도를 우수하게 나타낼 수 있다. pH는 아세테이트 완충액을 이용하여 조절할 수 있다. 다시 말해서, 아세테이트 완충액을 소정의 함량으로 포함하는 경우 별도의 pH 조절제 없이도 상기 범위의 pH를 나타낼 수 있다. 히스티딘, 시트레이트, 포스페이트 또는 이들의 혼합물을 포함하는 완충액을 사용하는 경우 상기 범위의 pH를 나타내는 것이 어려울 수 있다. 별도의 pH 조절제로서 산 또는 염기(예를 들어, 수산화나트륨)를 추가로 포함하는 경우, 항체의 안정성이 저하될 수 있다.
(G) 기타 성분
본 발명의 일 구현예에서, 안정한 액체 약제학적 제제는 염(Salts)를 포함하지 않을 수 있다. 염을 포함하는 경우 침전 현상이 발생하고 그 제제가 젤라틴의 형상을 가질 수 있으며, 안정성이 열악할 수 있다. 염의 예로는 NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4 등이 있으며 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 보존제를 포함하지 않을 수 있다. 보존제의 예로는 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드, 헥사메토늄 클로라이드, 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드, 페놀, 부틸 알코올, 벤질 알콜, 알킬 파라벤, 카테콜, 레소르시놀, 시클로헥산올, 3-펜탄올, m-크레졸 등이 있다. 보존제를 포함하는 경우 안정성 개선에 도움이 되지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제에 있어서 항체의 활성, 제제의 안정성 및 저점도에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 당해 기술분야에서 공지된 첨가제를 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 수성 담체, 산화방지제, 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 더 포함할 수 있다. 수성 담체는 제약상 허용되고(인간에게 투여시 안전하고 무독성이고), 액체 약제학적 제제의 제조에 유용한 담체이다. 수성 담체의 예로는 멸균 주사용수(SWFI), 정균성 주사용수(BWFI), 멸균 염수 용액, 링거 용액, 덱스트로스 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 산화방지제는 아스코르브산 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
(H) “안정한” 액체 약제학적 제제
본 발명의 "안정한" 액체 약제학적 제제에서 용어 “안정한”은 본 발명에 따른 항체가 제조 공정 동안 및/또는 보관/저장 시에 이의 물리적 안정성 및/또는 화학적 안정성 및/또는 생물학적 활성을 실질적으로 보유하는 것을 의미한다. 항체의 안정성을 측정하는 다양한 분석학적 기술은 당해 기술분야에서 용이하게 이용할 수 있다.
물리적 안정성은 당해 기술분야에 공지된 방법으로 평가할 수 있으며, 이러한 방법은 광(흡광 또는 광학 밀도)의 샘플 겉보기 감쇠 측정을 포함한다. 이러한 광 감쇠 측정은 제제의 탁도와 관련된다. 또한, 물리적 안정성에 대해 고분자량 성분 함량, 주성분 함량, 저분자량 성분 함량, 온전한 면역글로불린 G의 함량, 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량, 불용성 이물 입자수 등을 측정할 수 있다.
화학적 안정성은, 예를 들어, 화학적으로 변화된 형태의 항체를 검출하고 정량함으로써 평가할 수 있다. 화학적 안정성은, 예를 들어 이온 교환 크로마토그래피에 의해 평가될 수 있는 하전 변화(예: 탈아미드화 또는 산화의 결과로서 발생)를 포함한다. 화학적 안정성에 대해 전하 변형체(산성 또는 염기성 피크) 등을 측정할 수 있다.
생물학적 활성은 당해 기술분야에 공지된 방법으로 평가할 수 있으며, 예를 들어 ELISA를 통해 항원 결합 친화도를 측정할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 액체 약제학적 제제는 장기간 동안 안정할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 용어 “안정한” 액체 약제학적 제제는 다음 중 하나 이상을 만족하는 액체 약제학적 제제를 의미한다.
탁도
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 분광 광도계로 측정한 흡광도 A600이 0 내지 0.0110인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 분광 광도계로 측정한 흡광도 A600이 0 내지 0.0110인 액체 약제학적 제제;
주성분 함량(메인 피크)
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 99 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 99 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 98% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 98 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 97% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5% 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 주성분이 97 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
고분자량 성분(메인 피크(온전한 IgG)를 기준으로 체류 시간(retention time)이 앞쪽인 피크)
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0 내지 1.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0 내지 1.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0 내지 1.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0 내지 1.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0% 내지 2.5%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5% 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 고분자량 성분이 0 내지 2.5%인 액체 약제학적 제제;
저분자량 성분(메인 피크(온전한 IgG)를 기준으로 체류 시간(retention time)이 뒷쪽인 피크)
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0 내지 0.2%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃ 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0 내지 0.2%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0 내지 0.3%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0 내지 0.3%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0% 내지 2.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5% 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 SE-HPLC로 측정한 저분자량 성분이 0 내지 2.0%인 액체 약제학적 제제;
온전한 면역글로불린 G의 함량
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 97.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃ 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 97.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 96.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 96.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 90.4% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5% 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)이 90.4% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 99.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 99.0% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 99.1% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 99.1% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 96.8% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)이 96.8% 내지 100%인 액체 약제학적 제제;
불용성 이물 입자수
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 100개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 100개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 3000개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 3000개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 100개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 100개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 4,000개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 4,000개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 200개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 200개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 7,000개인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 MFI로 측정한 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 0 내지 7,000개인 액체 약제학적 제제;
산화율
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 3.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 3.0%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 2.1%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 2.1%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 5.7%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 LC-MS로 측정한 중쇄 Met 255의 산화율이 0% 내지 5.7%인 액체 약제학적 제제;
전하 변형체
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 20% 내지 32%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 20% 내지 32%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 22% 내지 30%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 22% 내지 30%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 19% 내지 34%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 산성 피크가 19% 내지 34%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 50% 내지 60%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 50% 내지 60%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 40% 내지 48%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 40% 내지 48%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 19% 내지 30%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 19% 내지 30%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 염기성 피크가 12% 내지 20%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 12% 내지 20%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 염기성 피크가 26% 내지 37%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 주요 피크가 26% 내지 37%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 염기성 피크가 40% 내지 66%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 IEC-HPLC로 측정한 염기성 피크가 40% 내지 66%인 액체 약제학적 제제;
HER2 결합 친화도
- 온도 5℃±3℃에서 7주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5℃±3℃, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃에서 6주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25℃±2℃, 상대습도 60±5% 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃에서 7주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40℃±2℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 7주 동안 보관한 후 ELISA로 측정한 HER2 결합 친화도가 80% 내지 120%인 액체 약제학적 제제;
[안정한 액체 약제학적 제제의 제조방법]
본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제는 공지된 방법을 이용하여 제조할 수 있으며, 특정 방법으로 제한되지 않는다. 예를 들어, 계면활성제 및 당 또는 이의 유도체를 포함하는 용액에 아세테이트 완충액을 첨가하면서 pH를 조절한 후, 이 혼합 용액에 항체를 넣어 액체 약제학적 제제를 제조할 수 있다.
또한, 상기 제제는 제조시 동결 건조 공정을 포함하지 않을 수 있거나 동결 건조 공정을 포함할 수 있다.
동결 건조 공정을 포함하지 않은 경우, 예를 들어, 본 발명의 액체 약제학적 제제를 제조하고 멸균 등의 처리 후 바로 밀폐 용기에 담을 수 있다.
동결 건조 공정을 포함하는 경우, 예를 들어, 본 발명의 액체 약제학적 제제를 제조하고 동결 건조한 후, 또는 본 발명의 액체 약제학적 제제를 제조하고 동결 건조하고 보관/저장한 후, 동결 건조 및/또는 보관/저장에 의해 제거되었거나 변형된 성분을 보충하거나 교체하여 본 발명에 따른 액체 약제학적 제제를 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 액체 약제학적 제제 중에서 동결 건조 및/또는 보관/저장에 의해 제거되거나 변형될 수 있는 성분들이 제외된 성분들만을 동결 건조한 후, 또는 그 성분들만을 동결 건조하고 보관/저장한 후, 상기 제외되었던 성분들을 첨가하여 본 발명에 따른 액체 약제학적 제제를 제조할 수 있다.
[안정한 액체 약제학적 제제의 사용방법]
본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 HER2 결합을 통하여 유해한 질병을 치료하는데 사용될 수 있다. HER2의 활성이 유해한 질병의 예로는 유방암, 직장암, 위장암 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, HER2와의 결합으로 인해 유해한 질병은 유방암, 직장암, 위장암으로부터 선택될 수 있다. 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 1회, 수회 또는 정맥 투여용 또는 피하 투여용으로 사용될 수 있다.
상기 액체 약제학적 제제 내의 항체를 비롯한 다른 성분들의 농도는 상술한 바와 같으며, 액체 약제학적 제제의 전체 부피는 0.2 내지 3.5 mL일 수 있다.
상기 액체 약제학적 제제의 투여량 및 투여시기는 질병의 종류, 질병의 중증도 및 경과상태, 환자의 건강 및 치료에 대한 반응, 및 치료하는 의사의 판단에 따라 달라질 수 있으며, 특정 투여량 및 투여시기로 제한되지 않는다. 예를 들어, 상기 액체 약제학적 제제를 포함하는 1개 또는 수개의 제품으로 항체 농도를 기준으로 600 mg을 투여한 후 동일한 투여량을 3주마다 투여할 수 있다.
[치료방법 및 안정화 방법]
본 발명은 또한 HER2의 활성이 유해한 질병을 갖는 환자에게 (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 이의 유도체; (D) 완충제; 및 (E) 안정화제를 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 투여하는 것을 포함하는 HER2의 활성이 유해한 질병을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 이의 유도체; (D) 완충제; 및 (E) 안정화제를 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 액체 약제학적 제제 내에서 안정화하는 방법을 제공한다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 HER2에 결합하는 항체를 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 트라스투주맙, 페르투주맙 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 인간화된 IgG 단일클론 항체를 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 250 mg/ml 이하일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (B) 계면활성제의 농도는 0.02 내지 0.1 %(w/v)일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (C) 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 포함하고, 당의 유도체는 당 알코올, 당 산 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (C) 당 또는 이의 유도체는 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (C) 당 또는 이의 유도체의 농도는 1 내지 10 %(w/v)일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (D) 완충제는 아세테이트를 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (D) 완충제의 함량은 1 내지 50 mM일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 (E) 안정화제로서 메티오닌, 아스파르트산, 프롤린 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (E) 안정화제는 메티오닌을 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, (E) 안정화제의 함량은 5 내지 100 mM일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 pH가 4.5 내지 6.0일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 염(Salts)를 포함하지 않을 수 있다. 염을 포함하는 경우 침전 현상이 발생하고 그 제제가 젤라틴의 형상을 가질 수 있다. 염의 예로는 NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 보존제를 포함하지 않을 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 수성 담체, 산화방지제, 또는 이들 중 2이상의 혼합물을 더 포함할 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도 250 mg/ml 이하; (B) 계면활성제 0.02 내지 0.1%(w/v); (C) 당 또는 이의 유도체 1 내지 10%(w/v); (D) 완충제 1 내지 50 mM; 및 (E) 안정화제 5 내지 100 mM을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 투여하는 것을 포함하는 HER2의 활성이 유해한 질병을 치료하는 방법을 제공한다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 정맥투여용 또는 피하투여용 일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 시료 제조 후 측정한 점도가 20 cP 이내일 수 있다.
상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 사용 전에 재용해(reconstitution) 단계, 희석(dilution) 단계 또는 이들 모두를 거치지 않을 수 있다.
또한, 상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 프리-필드 시린지(pre-filled syringe)에는 상기 안정한 액체 약제학적 제제가 충진될 수 있다.
아울러, 상기 치료방법 또는 안정화 방법의 일 구현예에서, 자동 주사기(auto-injector)에는 상기 프리-필드 시린지가 그 내부에 포함될 수 있다.
[제품]
본 발명은 또한 상기 안정한 액체 약제학적 제제; 및 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 밀폐된 상태로 수용하는 용기를 포함하는 제품을 제공한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제는 상술한 바와 같다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 유리, 폴리머(플라스틱), 금속 등의 물질로부터 형성될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 병, 바이알, 카트리지, 주사기(프리-필드 시린지, 자동 주사기), 또는 튜브이며, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 유리 또는 폴리머 바이알, 또는 유리 또는 폴리머 프리-필드 시린지일 수 있다.
상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등의 구체적인 제품형태와 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등에 충진하는 방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 용이하게 입수하거나 실시할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제4,861,335호, 제6,331,174호 등은 프리-필드 시린지의 구체적인 제품형태 및 충진방법을 개시한다. 예를 들어, 미국 특허 제5,085,642호, 제5,681,291호 등은 자동 주사기의 구체적인 제품형태 및 조립방법을 개시한다. 상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등으로서 상용화된 제품을 그대로 이용하거나, 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 물성, 투여부위, 투여량 등을 고려하여 별도로 주문 제작한 제품을 이용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기의 내부에 실리콘 오일이 코팅되어 있지 않을 수 있다. 실리콘 오일이 코팅되어 있는 경우 안정성이 저하될 수 있다. 상기 용기는 1회 투여용 또는 수회 투여용 용기일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 제품은 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 사용방법, 보관방법 또는 이들 모두를 제공하는 지시사항을 더 포함할 수 있다. 상기 사용방법은 HER2의 활성이 유해한 질병의 치료법을 포함하고, 투여경로, 투여량 및 투여시기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 제품은 상업적 및 사용자 관점에서 필요한 기타 도구, 예를 들어 바늘, 주사기 등을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
아래 실험예에서 사용된 항체와 관련하여, 셀트리온에서 제조한 트라스투주맙을 사용하였다.
아래 실시예에서 사용된 액체 약제학적 제제의 물리적 안정성, 화학적 안정성 및 생물학적 활성의 측정방법으로서 다음과 같은 방법을 사용하였다.
- 탁도(Turbidity)
UV-Vis 분광 광도계를 이용하여 600 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
- 고분자량 성분 함량
크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피(Size Exclusion HPLC)를 이용하여 고분자량 성분의 함량(pre-peak; %)을 측정하였다.
- 주성분 함량
크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피(Size Exclusion HPLC)를 이용하여 주성분 함량(main peak; %)을 측정하였다.
- 저분자량 성분 함량
크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피(Size Exclusion HPLC)를 이용하여 저분자량 성분의 함량(post-peak; %)을 측정하였다.
- 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
비환원 모세관 전기이동 나트륨 도데실 설페이트(Non-Reduced Capillary Electrophoresis-Sodium Dodecyl Sulfate; NR CE-SDS)를 이용하여 온전한 면역글로불린 G의 함량(%)을 측정하였다.
- 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
환원 모세관 전기이동 나트륨 도데실 설페이트(Reduced Capillary Electrophoresis-Sodium Dodecyl Sulfate; R CE-SDS)를 이용하여 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(%)을 측정하였다.
- 불용성 이물 입자(Sub-visible particles)의 수
마이크로 플로우 이미징(Micro Flow Imaging; MFI)을 이용하여 불용성 이물 입자의 수를 측정하였다.
- 산화율(Oxidation)
질량분석을 통한 액체 크로마토그래피(LC-MS)로 펩티드 매핑(Peptide mapping)을 통해 중쇄 Met 255의 산화율(%)을 측정하였다.
- 전하 변형체
이온 교환 크로마토그래피-고성능 액체 크로마토그래피(Ion Exchange Chromatography-High Performance Liquid Chromatography; IEC-HPLC)로 산성 및 주요 피크(%)를 측정하였다.
- HER2 결합 친화도
효소결합면역흡착 분석법(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay; ELISA)으로 HER2 결합 친화도(%)를 측정하였다.
- 점도
플로우 셀(B05 센서형, 50μm 셀 깊이)이 장착된 마이크로-모세관 유동계(겉보기 전단율 범위: 103~105 s-1) 장비를 이용하여, 25℃±0.1℃에서 500μL 시린지에 담아 측정하였다.
실험예 1: 아미노산 종류에 따른 안정성 비교
실험예 1에서 사용된 액체 약제학적 제제와 관련하여, 각 완충액을 각 pH에 맞게 제조한 뒤 다양한 아미노산을 첨가하고, 이에 항체를 첨가하고, 계면활성제를 첨가하여 표 1의 시료들을 제조하였다. 각 성분의 구체적인 함량은 하기 표 1에 기재된 바와 같다. 전체 용량은 3 mL였다.
구분 항체 함량 (mg/mL) 계면활성제 당 알코올 또는 NaCl 완충액 pH 아미노산
실시예 1 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 2 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 프롤린 87 mM
실시예 3 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 아스파르트산 10 mM
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 액체 약제학적 제제에 대한 5±3℃의 온도에서 0주 후, 3주 후, 7주 후의 안정성 그리고 40±2℃의 온도 및 75±5%의 상대습도에서 3주 후 및 7주 후의 안정성을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2 내지 8에 나타내었다.
저분자량 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 0.0 0.1 0.5 1.1
실시예 2 0.0 0.1 0.6 1.2
실시예 3 0.0 0.1 0.8 1.7
상기 표 2를 보면, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 저분자량 성분을 1.1 % 이하로 포함함을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 99.4 99.3 98.1 97.1
실시예 2 99.4 99.3 98.0 97.0
실시예 3 99.5 99.3 98.0 96.7
상기 표 3을 보면, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 주요 성분을 97.1 % 이상으로 포함함을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 97.6 97.1 95.4 92.5
실시예 2 97.6 97.1 95.2 91.9
실시예 3 97.2 97.0 94.6 90.4
상기 표 4를 보면, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 온전한 면역글로불린 G의 함량이 92.5% 이상으로 실시예 2와 실시예 3 보다 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 99.4 98.8 99.2 97.3
실시예 2 99.4 98.8 98.1 97.2
실시예 3 99.4 98.8 99.1 96.8
상기 표 5를 보면, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 97.3% 이상으로 실시예 2와 실시예 3보다 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 2.7 2.5 2.8 3.1
실시예 2 2.7 3.0 4.1 5.1
실시예 3 2.8 3.0 4.0 5.7
상기 표 6을 보면, 모든 조건에서 실시예 1이 가장 낮은 중쇄 Met 255의 산화율을 보인다. 특히, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 3.1% 이하로 실시예 2과 실시예 3보다 낮음을 알 수 있다.
전하 변형체(주요 피크)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 59.7 53.1 27.6 21.5
실시예 2 59.7 52.9 27.0 20.1
실시예 3 59.8 52.5 23.8 15.4
상기 표 7을 보면, 실시예 1이 모든 조건에서 주요 피크가 가장 높은 것을 알 수 있다. 특히, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 주요 피크가 21.5% 이상으로 가장 높음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자의 수(1.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 1 225 530 44
실시예 2 221 29 239
실시예 3 293 155 53
상기 표 8을 보면, 실시예 1이 40℃의 온도에서 7주 후 불용성 이물 입자(1.00㎛≤, <100.00㎛)의 수가 가장 적음을 알 수 있다.
실험예 2: 당알코올의 종류, pH, 계면활성제 종류에 따른 안정성 비교
실험예 2에서 사용된 액체 약제학적 제제와 관련하여, 각 완충액을 각 pH에 맞게 완충액을 제조한 뒤 각 당알코올을 첨가하고, 이에 항체를 첨가하고, 계면활성제를 첨가하여 하기와 같이 표 9의 시료들을 제조하였다. 각 성분의 농도는 하기 표 9에 기재된 바와 같다. 전체 용량은 3 mL였다.
구분 항체 함량 (mg/mL) 계면활성제 당 알코올 또는 NaCl 완충액 pH
실시예 4 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0
실시예 5 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 만니톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0
실시예 6 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 트레할로즈 10 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0
실시예 7 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 수크로즈 10 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0
실시예 8 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.5
실시예 9 200 폴리소르베이트 20 0.05 %(w/v) 소르비톨 5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0
상기 제제에 대해 5±3℃의 온도에서 0주 후, 3주 후, 7주 후의 안정성 그리고 40±2℃의 온도 및 75±5%의 상대습도에서 3주 후 및 7주 후의 안정성을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 10 내지 20에 나타내었다.
- 당알코올의 종류
탁도
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 0.0045 0.0040 0.0030 0.0020 0.0040
실시예 5 0.0045 0.0040 0.0040 0.0035 0.0040
실시예 6 0.0050 0.0040 0.0040 0.0045 0.0030
실시예 7 0.0070 0.0050 0.0040 0.0040 0.0050
상기 표 10을 보면, 당 알코올로서 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로스를 사용한 경우, 40℃에서 7주 후에도 흡광도가 0.0050 이하임을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 99.4 99.3 99.3 98.0 96.8
실시예 5 99.4 99.4 99.3 97.9 96.8
실시예 6 99.4 99.3 99.3 98.0 96.8
실시예 7 99.3 99.2 99.2 97.9 96.7
상기 표 11을 보면, 당 알코올로서 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로스를 사용한 경우, 40℃에서 7주 후에도 주요 성분 함량이 96.7% 이상 임을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
실시예 5 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
실시예 6 0.0 0.0 0.0 0.5 1.2
실시예 7 0.0 0.0 0.1 0.5 1.0
상기 표 12를 보면, 당 알코올로서 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로스를 사용한 경우, 40℃에서 7주 후에도 저분자량 성분 함량이 1.3% 이하 임을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 99.4 99.6 98.9 99.1 97.0
실시예 5 99.4 99.6 98.9 99.2 97.0
실시예 6 99.2 99.6 98.9 99.1 97.1
실시예 7 99.4 99.6 98.8 99.2 97.2
상기 표 13을 보면, 당알코올로 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로스를 사용한 경우, 40℃의 온도에서 7주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 97.0% 이상 임을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 3.3 2.8 2.8 3.8 5.0
실시예 5 2.8 2.7 2.9 3.7 4.9
실시예 6 2.7 2.7 2.9 3.8 5.0
실시예 7 3.3 2.7 2.7 3.8 4.9
상기 표 14를 보면, 당알코올로 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로스를 사용한 경우, 40℃의 온도에서 7주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 5.0% 이하 임을 알 수 있다.
- pH
탁도
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 0.0045 0.0040 0.0030 0.0020 0.0040
실시예 8 0.0060 0.0020 0.0030 0.0020 0.0030
상기 표 15를 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에도 흡광도가 0.0040 이하임을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 99.4 99.3 99.3 98.0 96.8
실시예 8 99.3 99.2 99.1 97.8 96.6
상기 표 16을 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에도 주요 성분 함량이 96.6% 이상 임을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 0.0 0.0 0.1 0.6 1.3
실시예 8 0.0 0.0 0.1 0.5 1.0
상기 표 17을 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에도 저분자량 성분 함량이 1.3% 이하 임을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 96.3 97.4 97.0 95.2 91.8
실시예 8 97.7 97.4 97.1 95.4 92.5
상기 표 18을 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에도 온전한 면역글로불린 G의 함량이 91.8% 이상 임을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 99.4 99.6 98.9 99.1 97.0
실시예 8 99.4 99.6 98.8 99.2 97.2
상기 표 19를 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 97.0% 이상 임을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 7주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 7주 후
실시예 4 3.3 2.8 2.8 3.8 5.0
실시예 8 2.8 2.7 2.9 3.8 5.1
상기 표 20을 보면, pH가 5.0 내지 5.5인 경우, 40℃에서 7주 후에 중쇄 Met 255의 산화율이 5.1% 이하 임을 알 수 있다.
- 계면활성제의 종류
불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 계면활성제 5℃, 0주 후 5℃, 3주 후 5℃, 7주 후 40℃, 3주 후 40℃, 7주 후
실시예 4 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 32 6 15 42 2
실시예 9 폴리소르베이트 20 0.05 %(w/v) 3 12 0 11 9
상기 표 21을 보면, 계면활성제로서 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 20을 사용한 경우, 40℃에서 7주 후 불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)의 개수는 10 개 이하 임을 알 수 있다.
실험예 3: 단백질, 당알코올, 아미노산, 계면활성제 농도에 따른 안정성 비교
실험예 3에서 사용된 액체 약제학적 제제와 관련하여, 아세트산나트륨으로 pH 5.0에 맞게 완충액을 제조한 뒤 소르비톨을 당알코올로 첨가하고, 이에 아미노산을 첨가하고, 이에 항체를 첨가하고, 계면활성제를 첨가하여 하기 표 22의 시료들을 제조하였다. 각 성분의 함량은 하기 표 22에 기재된 바와 같다. 전체 용량은 3 mL였다.
구분 항체 함량 (mg/mL) 계면활성제 당 완충액 pH 아미노산
실시예 1 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 10 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 11 180 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 12 220 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 13 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 14 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 5 mM
실시예 15 200 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 15 mM
실시예 16 200 폴리소르베이트 80 0.02 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 17 200 폴리소르베이트 80 0.08 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
상기 제제에 대해 5±3℃의 온도에서 0주 후, 3주 후, 6주 후의 안정성; 25±2℃의 온도 및 60±5%의 상대 습도에서 3주 후, 6주 후의 안정성 그리고 40±2℃의 온도 및 75±5%의 상대습도에서 3주 후 및 6주 후의 안정성을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 23 내지 53에 나타내었다.
- 단백질 농도
고분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.5
실시예 11 180 0.4 0.5 0.5 0.7 0.7 1.1 1.3
실시예 12 220 0.5 0.6 0.5 0.8 0.9 1.4 1.7
상기 표 23을 보면, 항체 농도의 상승에 따라, 고분자량 성분이 많아지나, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 99.5 99.4 99.4 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 11 180 99.6 99.5 99.5 99.2 99.1 98.3 97.6
실시예 12 220 99.5 99.4 99.4 99.0 98.9 98.1 97.3
상기 표 24를 보면, 항체 농도의 상승에 따라, 주요 성분이 낮아지나, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 11 180 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.1
실시예 12 220 0.0 0.1 0.0 0.1 0.2 0.6 1.0
상기 표 25를 보면, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 98.2 97.6 97.0 97.3 96.3 95.7 91.4
실시예 11 180 98.2 97.6 97.1 97.3 96.2 95.7 91.4
실시예 12 220 98.2 97.6 97.0 97.2 96.1 95.7 91.4
상기 표 26을 보면, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 면역글로불린 G의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 99.5 99.3 99.4 99.3 99.2 99.0 98.5
실시예 11 180 99.5 99.4 99.4 99.3 99.2 99.0 98.3
실시예 12 220 99.5 99.4 99.4 99.3 99.2 98.9 98.3
상기 표 27을 보면, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 1.8 2.1 2.2 2.5
실시예 11 180 1.7 2.1 2.1 2.4
실시예 12 220 1.9 2.0 2.1 2.4
상기 표 28을 보면, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 2.5% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 200 27 18 21 6 31 0 17
실시예 11 180 6 5 15 0 13 10 136
실시예 12 220 0 37 8 4 5 0 59
상기 표 29를 보면, 항체 농도 180 내지 220 mg/mL의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 200개 이하임을 알 수 있다.
- 당알코올의 농도
고분자량 성분 함량
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.2 1.5
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.5
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.2 1.5
상기 표 30을 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 99.5 99.4 99.5 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 99.5 99.4 99.4 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 99.5 99.4 99.5 99.1 99.0 98.2 97.5
상기 표 31을 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
상기 표 32를 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 98.2 97.6 97.1 97.3 95.8 95.8 91.5
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 98.2 97.6 97.0 97.3 96.3 95.7 91.4
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 98.2 97.6 97.1 97.3 95.6 95.6 91.4
상기 표 33을 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 면역글로불린 G의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 99.4 99.4 99.3 99.3 99.2 99.0 98.4
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 99.5 99.3 99.4 99.3 99.2 99.0 98.5
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 99.5 99.3 99.3 99.3 99.2 98.9 98.5
상기 표 34를 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 1.8 2.0 2.1 2.4
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 1.8 2.1 2.2 2.5
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 1.8 2.0 2.1 2.3
상기 표 35를 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 2.5% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 5 0 10 20 10 8 21
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 27 117 21 6 31 0 17
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 7 29 0 16 12 60 8
상기 표 36을 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 200개 이하임을 알 수 있다.
점도 (cP)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후
실시예 1 소르비톨5%(w/v) 13.7
실시예 10 소르비톨4.5%(w/v) 12.2
실시예 13 소르비톨4%(w/v) 12.8
상기 표 37을 보면, 당알코올로 소르비톨 농도 4% 내지 5%의 범위 내에서 5℃ 0주 후 점도가 14 cP 이하 임을 알 수 있다.
- 아미노산의 농도
고분자량 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.5
실시예 14 메티오닌5 mM 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.8
실시예 15 메티오닌15 mM 0.4 0.5 0.5 0.7 0.8 1.2 1.5
상기 표 38을 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 99.5 99.4 99.4 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 14 메티오닌5 mM 99.5 99.4 99.5 99.1 99.0 98.2 97.2
실시예 15 메티오닌15 mM 99.5 99.4 99.5 99.1 99.0 98.3 97.5
상기 표 39를 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 14 메티오닌5 mM 0.1 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 15 메티오닌15 mM 0.0 0.1 0.0 0.1 0.2 0.6 1.0
상기 표 40을 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 98.2 97.6 97.0 97.3 96.3 95.7 91.4
실시예 14 메티오닌5 mM 98.2 97.5 97.2 97.3 96.1 95.7 92.0
실시예 15 메티오닌15 mM 98.0 97.6 97.2 97.3 96.0 95.7 92.1
상기 표 41을 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 면역글로불린 G 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 99.5 99.3 99.4 99.3 99.2 99.0 98.5
실시예 14 메티오닌5 mM 99.4 99.4 99.4 99.3 99.1 98.9 98.4
실시예 15 메티오닌15 mM 99.5 99.3 99.3 99.3 99.1 98.9 98.5
상기 표 42를 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 1.8 2.1 2.2 2.5
실시예 14 메티오닌5 mM 1.8 2.0 2.1 2.6
실시예 15 메티오닌15 mM 1.7 2.0 2.1 2.2
상기 표 43을 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 2.6% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 27 18 21 6 31 35 17
실시예 14 메티오닌5 mM 6 3 9 18 17 8 4
실시예 15 메티오닌15 mM 12 6 7 6 6 18 6
상기 표 44를 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 100개 이하임을 알 수 있다.
점도 (cP)
구분 당알코올 함량 5±3℃ 0주 후
실시예 10 메티오닌10 mM 13.7
실시예 14 메티오닌5 mM 13.2
실시예 15 메티오닌15 mM 13.2
상기 표 45를 보면, 메티오닌의 농도 5 mM 내지 15 mM의 범위 내에서 5℃ 0주 후 점도가 14 cP 이하 임을 알 수 있다.
- 계면활성제의 농도
고분자량 성분 함량
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.3 1.5
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.2 1.5
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 0.5 0.5 0.5 0.8 0.8 1.2 1.6
상기 표 46을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 99.5 99.4 99.4 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 99.5 99.4 99.5 99.1 99.0 98.2 97.5
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 99.5 99.4 99.5 99.1 98.9 98.2 97.4
상기 표 47을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 0.0 0.1 0.1 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 0.0 0.0 0.0 0.1 0.2 0.6 1.0
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 0.0 0.1 0.0 0.1 0.2 0.6 1.0
상기 표 48을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 98.2 97.6 97.0 97.3 96.3 95.7 91.4
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 98.2 97.6 97.0 97.2 96.2 95.7 91.4
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 98.2 97.6 97.2 97.2 96.2 95.7 91.8
상기 표 49를 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 면역글로불린 G 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 3주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 3주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 3주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 99.5 99.3 99.4 99.3 99.2 99.0 98.5
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 99.5 99.4 99.3 99.3 99.2 98.9 98.5
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 99.5 99.3 99.3 99.3 99.1 99.0 98.5
상기 표 50을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 1.8 2.1 2.2 2.5
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 1.8 2.0 2.1 2.4
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 1.5 2.1 2.1 2.5
상기 표 51을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 2.5% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 6주 후 25±2℃ 6주 후 40±2℃ 6주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 27 21 31 17
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 62 8 6 23
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 3 58 31 120
상기 표 52를 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃, 25℃ 및 40℃에서 6주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 200개 이하임을 알 수 있다.
점도 (cP)
구분 계면활성제 함량 5±3℃ 0주 후
실시예 10 폴리소르베이트 80 0.05%(w/v) 13.7
실시예 16 폴리소르베이트 80 0.02%(w/v) 13.2
실시예 17 폴리소르베이트 80 0.08%(w/v) 13.0
상기 표 53을 보면, 폴리소르베이트 0.02% 내지 0.08% 범위 내에서 5℃ 0주 후 점도가 14 cP 이하 임을 알 수 있다.
실험예 4: 항체 농도, 항체 치환, 아미노산 농도, 제형 조합 변경, 금속염 포함 여부에 따른 안정성 비교
실험예 4에서 사용된 액체 약제학적 제제와 관련하여, 항체의 농도, 항체의 치환, 아미노산의 농도, 제형 조합의 일부 성분 변경 및 금속염의 포함 여부 등에 대한 제제 안정성의 변화를 알아보고자 실험을 수행하였다. 이를 위해, 아세트산나트륨으로 pH 5.0에 맞게 완충액을 제조한 뒤 소르비톨을 당알코올로 첨가하고, 하기 표 54의 시료들을 제조하였다. 각 성분의 함량은 하기 표 54에 기재된 바와 같다. 전체 용량은 3 mL였다.
구분 항체 함량 (mg/mL) 계면활성제 당/염류 완충액 pH 아미노산
실시예 18 100 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 19 140 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 20 160 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 30 mM
실시예 21 160 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
비교예 1 160(타항체_infliximab) 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
비교예 2 160(타항체_omalizumab) 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
비교예 3 160 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) - 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
비교예 4 160 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 -
비교예 5 160 폴리소르베이트 80 0.05 %(w/v) 염화나트륨 140 mM 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
상기 제제에 대해 5±3℃의 온도에서 0주 후, 2주 후, 4주 후의 안정성; 40±2℃의 온도 및 75±5%의 상대 습도에서 2주 후, 4주 후의 안정성을 각각 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 55 내지 표 82 에 나타내었다.
- 항체 농도
탁도
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 0.0051 0.0050 0.0034 0.0044 0.0025
실시예 19 140 0.0050 0.0054 0.0045 0.0033 0.0038
실시예 21 160 0.0020 0.0046 0.0044 0.0030 0.0039
상기 표 55를 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후에 흡광도가 0.0040 이하임을 알 수 있다.
고분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 0.4 0.4 0.6 0.4 0.8
실시예 19 140 0.5 0.4 0.8 0.5 1.0
실시예 21 160 0.5 0.5 0.9 0.7 1.2
상기 표 56을 보면, 항체 농도의 상승에 따라 고분자량 성분이 많아지나, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 99.5 99.5 98.9 99.4 98.4
실시예 19 140 99.5 99.4 98.7 99.3 98.1
실시예 21 160 99.4 99.4 98.6 99.2 97.9
상기 표 57을 보면, 항체 농도의 상승에 따라 주요 성분이 낮아지나, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
실시예 19 140 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
실시예 21 160 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
상기 표 58을 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 99.0 98.3 97.4 97.2 95.1
실시예 19 140 98.9 98.5 97.3 97.2 95.0
실시예 21 160 99.0 98.1 97.4 97.0 95.0
상기 표 59를 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 온전한 면역글로불린 G의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 99.9 99.9 99.9 99.8 99.6
실시예 19 140 99.9 99.9 99.9 99.8 99.6
실시예 21 160 99.9 99.9 99.9 99.8 99.5
상기 표 60을 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 2.8 2.8 2.9
실시예 19 140 2.8 2.8 3.0
실시예 21 160 2.7 2.6 2.9
상기 표 61을 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 3.0% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 18 100 3 8 7 41 80
실시예 19 140 5 2 13 8 26
실시예 21 160 5 0 7 5 162
상기 표 62를 보면, 항체 농도 100 내지 160 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 200개 이하로서 여전히 낮은 수준으로 유지됨을 알 수 있다.
- 항체 치환
점도(cP)
구분 항체 5±3℃ 0주 후
비교예 1 타항체_infliximab 10.2
비교예 2 타항체_omalizumab 64.9
실시예 21 trastuzumab 6.6
상기 표 63을 보면, 동일한 농도 및 제제에서 항체 trastuzumab을 타항체 infliximab 및 odalizumab으로 치환 시 점도가 현저히 높아 안정성이 감소함을 알 수 있다.
- 아미노산 농도
탁도
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 0.0026 0.0157 0.0043 0.0035 0.0030
실시예 21 메티오닌 10 mM 0.0020 0.0046 0.0044 0.0030 0.0039
상기 표 64를 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 흡광도가 0.0040 이하임을 알 수 있다.
고분자량 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 0.5 0.5 0.9 0.6 1.2
실시예 21 메티오닌 10 mM 0.5 0.5 0.9 0.7 1.2
상기 표 65를 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 99.4 99.4 98.6 99.3 97.9
실시예 21 메티오닌 10 mM 99.4 99.4 98.6 99.2 97.9
상기 표 66을 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 주요 성분 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
실시예 21 메티오닌 10 mM 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
상기 표 67을 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 98.9 98.2 97.2 97.1 94.9
실시예 21 메티오닌 10 mM 99.0 98.1 97.4 97.0 95.0
상기 표 68을 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 온전한 면역 글로불린 G의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 99.9 99.9 99.9 99.8 99.5
실시예 21 메티오닌 10 mM 99.9 99.9 99.9 99.8 99.5
상기 표 69를 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 3.0 2.9 3.3
실시예 21 메티오닌 10 mM 2.7 2.6 2.9
상기 표 70을 보면, 메티오닌의 농도 30 mM에서 중쇄 Met 255의 산화율이 다소 높으나 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 대체로 낮음을 알 수 있다.
불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 아미노산 함량 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
실시예 20 메티오닌 30 mM 15 2 7 9 2
실시예 21 메티오닌 10 mM 5 0 7 5 162
상기 표 71을 보면, 메티오닌의 농도 10 mM 내지 30 mM 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 4주 후 불용성 이물 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 200개 이하로서 여전히 낮은 수준으로 유지됨을 알 수 있다.
- 제형 조합 변경
고분자량 성분 함량
구분 메티오닌 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 4 불포함 0.50 0.50 0.94 0.54 1.22
실시예 21 포함 0.50 0.49 0.90 0.67 1.17
상기 표 72를 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 실시예 21이 비교예 4보다 고분자 성분 함량이 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 메티오닌 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 4 불포함 99.40 99.36 98.54 99.28 97.88
실시예 21 포함 99.39 99.37 98.58 99.16 97.94
상기 표 73을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 실시예 21이 비교예 4보다 주요 성분 함량이 높은 것을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 소르비톨 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 3 불포함 98.84 98.14 97.23 97.04 94.64
실시예 21 포함 98.95 98.10 97.35 97.01 94.95
상기 표 74을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 실시예 21이 비교예 3보다 온전한 면역글로불린 G의 함량이 높은 것을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 소르비톨 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 3 불포함 99.92 99.91 99.91 99.81 99.46
실시예 21 포함 99.92 99.90 99.91 99.80 99.54
상기 표 75를 보면, 40℃에서 4주 후 실시예 21이 비교예 3보다 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 높은 것을 알 수 있다.
- 금속염 포함 여부
탁도
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 0.0555 0.0596 0.0629 0.0575 0.0634
실시예 21 소르비톨 포함 0.0020 0.0046 0.0044 0.0030 0.0039
상기 표 76을 보면, 5℃ 및 40℃의 모든 조건에서 비교예 5의 흡광도가 0.05 이상으로 실시예 21 보다 현저하게 높음을 알 수 있다.
고분자량 성분 함량
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 0.6 0.6 1.2 0.6 1.6
실시예 21 소르비톨 포함 0.5 0.5 0.9 0.7 1.2
상기 표 77을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 고분자 성분 함량이 높음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 99.3 99.3 98.2 99.2 97.4
실시예 21 소르비톨 포함 99.4 99.4 98.6 99.2 97.9
상기 표 78을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 주요 성분 함량이 낮음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 0.1 0.1 0.6 0.2 1.1
실시예 21 소르비톨 포함 0.1 0.1 0.5 0.2 0.9
상기 표 79을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 저분자 성분 함량이 높음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 98.9 98.2 97.0 97.1 94.2
실시예 21 소르비톨 포함 99.0 98.1 97.4 97.0 95.0
상기 표 80을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 온전한 면역글로불린 G의 함량이 낮은 것을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 2.9 3.0 3.8
실시예 21 소르비톨 포함 2.7 2.6 2.9
상기 표 81을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 산화율이 높은 것을 알 수 있다.
불용성 이물 입자(10.00㎛≤, <100.00㎛)
구분 당 또는 염류 포함 여부 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 5±3℃ 4주 후 40±2℃ 2주 후 40±2℃ 4주 후
비교예 5 염화나트륨 포함 0 13 25 7 2120
실시예 21 소르비톨 포함 5 0 7 5 162
상기 표 82을 보면, 5℃ 및 40℃에서 4주 후 비교예 5가 실시예 21보다 불용성 입자의 수(10.00㎛≤, <100.00㎛)가 현저하게 많은 것을 알 수 있다.
실험예 5: 추가 항체 농도에 따른 안정성 비교
실험예 5에서 사용된 액체 약제학적 제제와 관련하여, 다양한 농도 범위의 항체에 대한 제제 안정성의 변화를 알아보고자 추가 실험을 수행하였다. 이를 위해, 아세트산나트륨으로 pH 5.0에 맞게 완충액을 제조한 뒤 소르비톨을 당알코올로 첨가하고, 하기 표 83의 시료들을 제조하였다. 각 성분의 함량은 하기 표 83에 기재된 바와 같다. 전체 용량은 3 mL였다.
구분 항체 함량 (mg/mL) 계면활성제 당/염류 완충액 pH 아미노산
실시예 22 10 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 23 50 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5%(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
실시예 24 120 폴리소르베이트 800.05 %(w/v) 소르비톨 4.5 %(w/v) 아세트산나트륨 25 mM 5.0 메티오닌 10 mM
상기 제제에 대해 5±3℃의 온도에서 0주 후, 2주 후의 안정성; 40±2℃의 온도 및 75±5%의 상대 습도에서 2주 후의 안정성을 각각 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 84 내지 표 90에 나타내었다.
- 항체 농도
탁도
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 0.0034 0.0014 0.0031
실시예23 50 0.0033 0.0028 0.0033
실시예24 120 0.0037 0.0037 0.0067
상기 표 84을 보면, 항체 함량 10 mg/ml 내지 120 mg/ml 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 흡광도가 0.0070 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.
고분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 0.37 0.48 0.43
실시예23 50 0.43 0.56 0.57
실시예24 120 0.46 0.59 0.85
상기 표 85을 보면, 항체 농도의 상승에 따라, 고분자량 성분이 많아지나, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 고분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
주요 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 99.46 99.37 99.15
실시예23 50 99.40 99.31 98.98
실시예24 120 99.38 99.27 98.64
상기 표 86를 보면, 항체 농도의 상승에 따라, 주요 성분이 낮아지나, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 주요 성분이 대체로 높음을 알 수 있다.
저분자량 성분 함량
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 0.18 0.14 0.43
실시예23 50 0.17 0.14 0.45
실시예24 120 0.16 0.14 0.50
상기 표 87를 보면, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 저분자량 성분이 대체로 낮음을 알 수 있다.
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 99.69 97.74 96.80
실시예23 50 99.66 97.78 96.82
실시예24 120 99.67 97.75 96.67
상기 표 88을 보면, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 온전한 면역글로불린 G의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 99.95 99.75 99.63
실시예23 50 99.94 99.75 99.63
실시예24 120 99.95 99.74 99.63
상기 표 89을 보면, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 대체로 높음을 알 수 있다.
산화율(중쇄 Met 255)
구분 항체 함량 (mg/mL) 5±3℃ 0주 후 5±3℃ 2주 후 40±2℃ 2주 후
실시예22 10 3.4 3.4 3.4
실시예23 50 3.7 3.4 3.5
실시예24 120 3.9 3.5 3.6
상기 표 90을 보면, 항체 농도 10 내지 120 mg/mL의 범위 내에서 5℃ 및 40℃에서 2주 후 중쇄 Met 255의 산화율이 3.9% 이하로 대체로 낮음을 알 수 있다.

Claims (27)

  1. (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
    (B) 계면활성제;
    (C) 당 또는 이의 유도체;
    (D) 완충제; 및
    (E) 안정화제를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  2. 청구항 1에 있어서, (A) 항체는 HER2에 결합하는 항체를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  3. 청구항 1에 있어서, (A) 항체는 트라스투주맙(trastuzumab), 페르투주맙(pertuzumab) 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  4. 청구항 1에 있어서, (A) 항체는 인간화된 IgG 단일클론 항체를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  5. 청구항 1에 있어서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및
    서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  6. 청구항 1에 있어서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  7. 청구항 1에 있어서, (A) 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄; 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  8. 청구항 1에 있어서, (A) 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 250 mg/ml 이하인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  9. 청구항 1에 있어서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  10. 청구항 1에 있어서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  11. 청구항 1에 있어서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  12. 청구항 1에 있어서, (B) 계면활성제의 농도는 0.02 내지 0.1 %(w/v)인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  13. 청구항 1에 있어서, (C) 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하고, (C) 당의 유도체는 당 알코올, 당 산 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  14. 청구항 1에 있어서, (C) 당 또는 이의 유도체는 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  15. 청구항 1에 있어서, (C) 당 또는 이의 유도체의 농도는 1 내지 10 %(w/v)인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  16. 청구항 1에 있어서, (D) 완충제는 아세테이트를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  17. 청구항 1에 있어서, (D) 완충제의 함량은 1 내지 50 mM인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  18. 청구항 1에 있어서, (E) 안정화제는 메티오닌, 아스파르트산, 프롤린 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  19. 청구항 1에 있어서, (E) 안정화제는 메티오닌을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  20. 청구항 1에 있어서, (E) 안정화제의 함량은 5 내지 100 mM인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  21. 청구항 1에 있어서, pH가 4.5 내지 6.0인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  22. 청구항 1에 있어서, NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, K2SO4 또는 이들의 혼합물을 포함하지 않는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  23. (A) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 경쇄 가변영역; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1 도메인, 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2 도메인 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3 도메인을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도 250 mg/ml 이하;
    (B) 계면활성제 0.02 내지 0.1%(w/v);
    (C) 당 또는 이의 유도체 1 내지 10%(w/v);
    (D) 완충제 1 내지 50 mM; 및
    (E) 안정화제 5 내지 100 mM을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  24. 청구항 1 내지 청구항 23 중 어느 한 항에 있어서, 정맥 투여용 또는 피하투여용인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  25. 청구항 1 내지 청구항 23 중 어느 한 항에 있어서, 사용 전에 재용해(reconstitution) 단계, 희석(dilution) 단계 또는 이들 모두를 거치지 않는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  26. 청구항 1 내지 청구항 23 중 어느 한 항에 기재된 안정한 액체 약제학적 제제가 충진된 프리-필드 시린지(pre-filled syringe).
  27. 청구항 26에 기재된 프리-필드 시린지가 그 내부에 포함된 자동 주사기(auto-injector).
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022151940A1 (zh) * 2021-01-15 2022-07-21 浙江博锐生物制药有限公司 一种稳定的帕妥珠单抗的药物组合物
US11634485B2 (en) 2019-02-18 2023-04-25 Eli Lilly And Company Therapeutic antibody formulation

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220020228A (ko) * 2020-08-11 2022-02-18 (주)셀트리온 안정한 약제학적 제제

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4861335A (en) 1985-07-26 1989-08-29 Duoject Medical Systems Inc. Syringe
US5085642A (en) 1989-07-17 1992-02-04 Survival Technology, Inc. Conveniently carried frequent use autoinjector
US5681291A (en) 1992-11-19 1997-10-28 Tebro S.A. Disposable auto-injector for prefilled syringes
US6331174B1 (en) 1994-10-27 2001-12-18 Schott Glaswerke Prefilled, low particle, sterile disposable syringe for injecting preparations and procedure for manufacture
KR20070068385A (ko) * 2004-10-20 2007-06-29 제넨테크, 인크. 히스티딘-아세테이트 완충제 중의 항체 제형
KR20130041374A (ko) * 2009-07-31 2013-04-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 피하용 항-에이치이알2 항체 제형
KR20130079486A (ko) * 2010-07-14 2013-07-10 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항―ｎｇｆ 항체를 함유하는 안정화된 제형

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA06011199A (es) * 2004-03-31 2007-04-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta humanizados.
AU2013202020B2 (en) * 2009-07-31 2014-11-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Subcutaneous anti-HER2 antibody formulation
EP3791862A1 (en) * 2013-09-11 2021-03-17 Eagle Biologics, Inc. Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents
WO2016168769A1 (en) 2015-04-15 2016-10-20 The California Institute For Biomedical Research Chimeric receptor t cell switches for her2
RU2750821C2 (ru) * 2017-01-17 2021-07-05 Дженентек, Инк. Препараты антител против her2 для подкожного введения

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4861335A (en) 1985-07-26 1989-08-29 Duoject Medical Systems Inc. Syringe
US5085642A (en) 1989-07-17 1992-02-04 Survival Technology, Inc. Conveniently carried frequent use autoinjector
US5681291A (en) 1992-11-19 1997-10-28 Tebro S.A. Disposable auto-injector for prefilled syringes
US6331174B1 (en) 1994-10-27 2001-12-18 Schott Glaswerke Prefilled, low particle, sterile disposable syringe for injecting preparations and procedure for manufacture
KR20070068385A (ko) * 2004-10-20 2007-06-29 제넨테크, 인크. 히스티딘-아세테이트 완충제 중의 항체 제형
KR20130041374A (ko) * 2009-07-31 2013-04-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 피하용 항-에이치이알2 항체 제형
KR20130079486A (ko) * 2010-07-14 2013-07-10 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항―ｎｇｆ 항체를 함유하는 안정화된 제형

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE NCBI . GenBank 30 August 2014 (2014-08-30), "anti-HER2 single chain antibody variable region, partial [synthetic construct", Database accession no. AIL24996.1 *
DATABASE NCBI GenBank 14 May 2018 (2018-05-14), "Chain H. Trastuzumab Anti-HER2 Fab Heavy Chain [Homo sapiens", Database accession no. 6BHZ _ H *
DATABASE NCBI. GenBank 14 May 2018 (2018-05-14), "Chain L. Trastuzumab Anti-HER2 Fab Light Chain D I85A [Homo sapiens", Database accession no. 6BHZ L *
See also references of EP3824904A4

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11634485B2 (en) 2019-02-18 2023-04-25 Eli Lilly And Company Therapeutic antibody formulation
WO2022151940A1 (zh) * 2021-01-15 2022-07-21 浙江博锐生物制药有限公司 一种稳定的帕妥珠单抗的药物组合物

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Publication number Publication date
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KR20200010103A (ko) 2020-01-30
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