WO2020013172A1 - 移植片を移送するためのデバイス - Google Patents
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- A01N1/0263—Non-refrigerated containers specially adapted for transporting or storing living parts whilst preserving, e.g. cool boxes, blood bags or "straws" for cryopreservation
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- A61F2/0095—Packages or dispensers for prostheses or other implants
Definitions
- the present invention relates to a device for transferring an implant.
- a method of applying a sheet-shaped cell culture prepared using a temperature-responsive culture dish to which tissue engineering is applied in severe myocardial infarction or the like to the heart surface has been attempted.
- the method using a sheet-shaped cell culture allows a large amount of cells to be transplanted safely over a wide area, such as myocardial infarction (including chronic heart failure associated with myocardial infarction), dilated cardiomyopathy, ischemic cardiomyopathy It is particularly useful for the treatment of heart diseases associated with systolic dysfunction (eg, left ventricular systolic dysfunction) (eg, heart failure, especially chronic heart failure).
- systolic dysfunction eg, left ventricular systolic dysfunction
- heart failure especially chronic heart failure.
- sheet-shaped cell culture to clinical application, for example, it is necessary to store the prepared sheet-shaped cell culture together with a preservation solution in a container and transfer it to an intensive care unit where transplantation is performed.
- sheet cell cultures have low absolute physical strength, and wrinkles, tears, breakage, etc. occur due to vibrations generated when transferring containers, etc. You need to be very careful.
- the container for storing and transporting a membrane-like tissue described in Patent Document 1 below fills the storage portion with a storage solution to such an extent that a gas layer is not formed, thereby causing the storage solution to undulate or flow. As a result, vibration is not transmitted to the film-like tissue, and damage to the film-like tissue can be prevented.
- Patent Document 2 describes a package for transporting a cultured cell sheet. Such a package eliminates air with some liquid medium when sealing with a lid, so that even if the cultured cell sheet package shakes during transportation, bubbles do not move in the liquid medium, It is designed to prevent displacement and loss of the cultured cell sheet.
- Containers have been developed to safely transport fragile cell sheets as described above. Further, such a container is devised so that the inside of the container is liquid-tight so that the movement of air bubbles does not occur.
- the present invention has been made in view of such points, and an object of the present invention is to provide a device that can efficiently achieve a liquid-tight state with a simple operation.
- the present invention relates to the following.
- a device used detachably mounted on a container for accommodating an implant wherein a lid member for sealing the container and a first space are formed between the lid member and the container.
- the device wherein a second space is formed between the lid member and the inner surface of the container.
- the device according to [1] further including a seal member interposed between the container and the lid member.
- the sheet-shaped cell culture is a laminate.
- a holding device including a cover member and a base member configured to be able to press and hold the device according to any one of [1] to [7] from above and below.
- the device of the present invention since a liquid-tight state can be efficiently achieved by a simple mechanism and a simple operation, there are great advantages in terms of workability and manufacturing cost. And since the inside of a container can be made into a completely liquid-tight state, air bubbles (gas) do not enter in a container and bubbles do not move in a container due to shaking of the container during transfer, and the fragile object is not damaged. In particular, when the fragile material is a laminate of sheet-shaped cell cultures, bubbles do not move, and the laminate does not shift or lose. Therefore, it can be stored for a long time while maintaining the shape of the fragile object in the liquid to prevent deformation.
- the device of the present invention can easily release the liquid-tight state, it is possible to suppress the occurrence of vibration of the container and the flow of the liquid due to, for example, forcible removal of the lid member of the worker, and to reduce fragile objects. No damage.
- cleanliness is strictly controlled, such as in a bio-clean room used for producing sheet-shaped cell cultures and in intensive care rooms where sheet-shaped cell cultures are used. Suitable for use in controlled locations.
- FIG. 1 is a conceptual diagram of a device 1 according to the first embodiment.
- FIG. 2 is a cross-sectional view of the device 1 shown in FIG.
- FIG. 3 is a perspective view of the holding device 7 according to the second embodiment.
- FIG. 4 is a perspective view of a holding tool 7A according to the third embodiment.
- FIG. 5 is a perspective view of a holding tool 7B according to the fourth embodiment.
- a fragile object in the present invention refers to an object that has low physical strength and can be broken, broken, deformed, or the like due to shaking of a liquid.
- Examples of the shape of such an object include an object having a thin portion, an object having a band shape, an object having a sheet shape, and the like.
- Examples of the object having such a sheet shape include, but are not particularly limited to, a sheet-like structure, for example, a sheet-like cell culture, a flat membrane-like membrane tissue made of a biological material, plastic, paper, woven fabric, and nonwoven fabric. And films of various materials such as metals, polymers, and lipids. Among them, those which are hardly decomposable in liquid and those which are hardly disintegratable in liquid are preferred.
- the sheet-like structure may be polygonal or circular, and may or may not be uniform in width, thickness, diameter, and the like.
- the sheet-like structure in the present invention may be used alone in a single layer state, or may be used in a laminated state in which two or more sheets are stacked. In the latter case, each layer of the laminate may be connected to each other, or may not be connected.If connected, all the overlapping portions may be connected or partially connected. Is also good.
- the fragility is, for example, evaluation of the tensile properties in a conventional tensile tester (for example, those described in JIS K 7161 etc.) in which the object is fixed to the gripper outside the liquid, Difficult or practically impossible due to vulnerability.
- a fragile object for example, an object having a small value of each of the tensile properties and difficult to accurately measure with a conventional tensile tester can be cited.
- brittle materials include those that exhibit a breaking load of less than 10 N (Newton), less than 5 N, less than 2 N, less than 1 N, less than 0.5 N, less than 0.1 N, and less than 0.05 N in a tensile test.
- the measurement limit of the conventional tensile test is generally about 1 N as a breaking load
- a material showing a breaking load lower than this is preferable as a brittle substance. .
- the term “graft” refers to a fragile substance derived from a living body having relatively low physical strength. Grafts include cultured cells (eg, cell cultures) and harvested cells. Implants may also contain products produced by the cells. The graft may contain, in addition to the cells and / or the products of the cells, a material (supplementary material or support material) for supplementing and / or supporting a predetermined part (for example, an affected part) of the living body.
- the implant can take various shapes such as a sheet, a film, a block, and a column. The graft is used for transplantation into a living body or the like.
- the transplant examples include a three-dimensional cell tissue (organoid, spheroid, etc.) and a two-dimensional cell tissue (sheet-shaped cell culture, etc.).
- the sheet-shaped cell culture refers to a cell in which cells are connected to each other to form a sheet.
- the cells may be connected to each other directly (including via a cell element such as an adhesion molecule) and / or via an intermediary substance.
- the intervening substance is not particularly limited as long as it is a substance capable of at least physically (mechanically) connecting cells to each other, and examples thereof include an extracellular matrix.
- the intervening substance is preferably derived from cells, particularly from cells constituting a sheet-shaped cell culture.
- the sheet-shaped cell culture may be composed of one cell layer (single layer) or composed of two or more cell layers (multilayer body). Further, the sheet-shaped cell culture may have a three-dimensional structure having a thickness exceeding the thickness of one cell without the cells showing a clear layer structure. For example, in the vertical cross section of the sheet-shaped cell culture, the cells may exist in a non-uniform (eg, mosaic) state without being uniformly arranged in the horizontal direction.
- the sheet cell culture may exist as a single, independently formed sheet cell culture, or an independent single sheet cell culture may be present. It may exist as a laminate formed by laminating two or more layers.
- the layered product is, for example, a layered structure obtained by laminating two (2), three (3), four (4), five (5), or six (6) sheet-shaped cell cultures. It can be a body.
- the sheet-shaped cell culture of the present invention is composed of any cells capable of forming the above-mentioned structure.
- adherent cells include, for example, adherent somatic cells (eg, cardiomyocytes, fibroblasts, epithelial cells, endothelial cells, hepatocytes, pancreatic cells, kidney cells, adrenal cells, periodontal ligament cells, gingival cells, periosteal cells, skin Cells, synovial cells, chondrocytes, etc.) and stem cells (eg, tissue stem cells such as myoblasts, heart stem cells, embryonic stem cells, pluripotent stem cells such as iPS (induced pluripotent stem) cells, mesenchymal stem cells, etc.) Including.
- adherent somatic cells eg, cardiomyocytes, fibroblasts, epithelial cells, endothelial cells, hepatocytes, pancreatic cells, kidney cells, adrenal cells, periodontal ligament cells, gingival cells, perioste
- the somatic cells may be those differentiated from stem cells, especially iPS cells.
- Non-limiting examples of cells that can form sheet-shaped cell cultures include, for example, myoblasts (eg, skeletal myoblasts), mesenchymal stem cells (eg, bone marrow, adipose tissue, peripheral blood, skin, hair roots) , Muscle tissue, endometrium, placenta, cord blood, etc.), cardiomyocytes, fibroblasts, cardiac stem cells, embryonic stem cells, iPS cells, synovial cells, chondrocytes, epithelial cells (eg, oral mucosal epithelium) Cells, retinal pigment epithelial cells, nasal mucosal epithelial cells, etc.), endothelial cells (eg, vascular endothelial cells, etc.), hepatocytes (eg, hepatic parenchymal cells, etc.), pancreatic cells (eg, pancreatic islet cells, etc.), kidney cells
- Cells can be derived from any organism that can be treated with cell culture. Such organisms include, but are not limited to, for example, humans, non-human primates, dogs, cats, pigs, horses, goats, sheep, and the like. Further, only one type of cells may be used for forming the sheet-shaped cell culture, but two or more types of cells may be used. In a preferred embodiment of the present invention, when there are two or more types of cells forming a cell culture, the ratio (purity) of the most abundant cells is 65% or more at the end of cell culture production, for example, for skeletal myoblasts , Preferably 70% or more, more preferably 75% or more.
- the sheet-shaped cell culture in the present invention may be a sheet-shaped cultured tissue obtained by disseminating and culturing cells in a scaffold (a scaffold for cell culture), but preferably constitutes a cell culture. Consists of only cell-derived substances and contains no other substances.
- the sheet cell culture may be produced by any known technique.
- the sheet-shaped cell culture is a sheet-shaped skeletal myoblast cell culture. This is because the sheet-shaped skeletal myoblast culture is so fragile that it breaks under its own weight when a part of it is grasped, so it cannot be transported alone by itself, nor can it return to its original shape once folded. This is because it is extremely difficult to maintain the shape of the sheet in the liquid.
- the container is not particularly limited as long as it can store a fragile substance, a liquid, or the like and does not leak the liquid, and any container including a commercially available container can be used.
- the material of the container include polyethylene, polypropylene, Teflon (registered trademark), polyethylene terephthalate, polymethyl methacrylate, nylon 6,6, polyvinyl alcohol, cellulose, silicon, polystyrene, glass, polyacrylamide, polydimethylacrylamide, and metal ( Examples thereof include, but are not limited to, iron, stainless steel, aluminum, copper, and brass).
- the container preferably has at least one flat bottom surface for maintaining the shape of the fragile object, and examples thereof include, but are not limited to, a petri dish, a cell culture dish, a cell culture bottle, and the like.
- the area of the flat bottom surface is not particularly limited, but is typically 9.1 to 78.5 cm 2 , 1.13 to 78.5 cm 2 , preferably 12.6 to 78.5 cm 2 , and more preferably 9 to 98.5 cm 2 . .1 to 60.8 cm 2 .
- the liquid in the container is composed of at least one kind of component, and the component is not particularly limited.
- the component is composed of liquid such as water, aqueous solution, non-aqueous solution, suspension, and emulsion.
- the liquid or liquid in the present specification may be a fluid having fluidity as a whole, and may include other non-liquid components such as a solid substance such as a cell scaffold and bubbles.
- the components constituting the liquid in the container are not particularly limited as long as they have little effect on the fragile substance.
- the fragile substance is a membrane made of a bio-derived material
- the components constituting the liquid in the container are biocompatible from the viewpoint of biological stability and long-term storability, i.e.
- those which do not cause unwanted effects such as inflammatory response, immune response, and poisoning response or at least have small effects are preferable.
- water saline, physiological buffer (eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepes) , Sodium bicarbonate, etc.), medium (eg, DMEM, MEM, F12, DMEM / F12, DME, RPMI1640, MCDB, L15, SkBM, RITC80-7, IMDM, etc.), sugar solution (sucrose solution, Ficoll-paque (registered)) Trademark) PLUS), seawater, serum-containing solution, renographin (registered trademark) solution, metrizamide solution, meg Min solution, glycerin, ethylene glycol, ammonia, benzene, toluene, acetone, ethyl alcohol, benzol, oil, mineral oil, animal fat, vegetable oil, olive oil, colloid solution, liquid paraffin, turpentine oil, linseed oil, castor oil, etc.
- physiological buffer eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepe
- the components constituting the liquid in the container can stably store the cells, contain the minimum amount of oxygen and nutrients necessary for cell survival, and Preferred are those that are not destroyed by osmotic pressure or the like.
- physiological saline eg, HBSS, PBS, EBSS, Hepes, sodium bicarbonate, etc.
- culture media eg, DMEM, MEM, F12, DMEM / F12, Examples include, but are not limited to, DME, RPMI 1640, MCDB, L15, SkBM, RITC80-7, IMDM, and the like, and sugar solutions (sucrose solution, Ficoll-paque @ PLUS (registered trademark), and the like).
- the amount of liquid in the container is such that the fragile object can be held in a state where the lid member is attached to the container, and the volume of liquid formed between the bottom of the container and the top of the lid member is reduced.
- the height is not particularly limited as long as it does not swing (do not swing) in the interior. That is, when a space is formed between the liquid surface and the lid member, the liquid (liquid surface) swings, and the fragile object easily swings in the liquid, so that there is no space between the liquid surface and the lid member. It is preferable to adjust the liquid volume.
- the diameter of the sheet cell culture is about 35 to 55 mm and the area is 6 cm 2 or more, or 10 cm 2 or more.
- the liquid volume can be, for example, 1.0 mm to 20.0 mm regardless of the diameter of the sheet-shaped cell culture.
- the lid member is not particularly limited as long as it can seal the container.
- the material of the lid member include polyethylene, polypropylene, Teflon (registered trademark), polyethylene terephthalate, polymethyl methacrylate, nylon 6,6, polyvinyl alcohol, cellulose, silicon, polystyrene, glass, polyacrylamide, polydimethylacrylamide, and metal. (Eg, iron, stainless steel, aluminum, copper, brass) and the like, but are not limited thereto.
- the shapes of the lid member and the container are not particularly limited as long as the lid member and the container can be engaged with each other and a closed space can be formed by such engagement.
- the shape of the lid member is preferably circular.
- the lid member and / or the container may be made of a light-transmitting material so that the state of the fragile object contained in the container and the presence or absence of bubbles in the liquid may be confirmed.
- the fragile object is held in the liquid in the container containing the liquid.
- the position of the fragile substance in the liquid is not particularly limited, but is arranged at a position where the lid member does not come into contact with the fragile substance in a state where the lid member is attached to the container to form a closed space (or even if the fragile substance is in contact with the container).
- the frangible is located in the liquid of the container, on the bottom surface of the container, near the bottom surface, or the like.
- water-repellent treatment refers to processing a solid surface such that a contact angle, which is an angle formed between a liquid surface and a solid surface, is 90 ° or more at a boundary line where the solid surface and the liquid contact. That means.
- a contact angle which is an angle formed between a liquid surface and a solid surface
- Teflon registered trademark
- water-repellent processing examples include a coating method in which a resin such as Teflon (registered trademark), silicon, a fluorine-based water-repellent, wax, alumina soap, pyridinium salt, and seratin is adhered to a solid surface. Further, a method of performing unevenness processing on the solid surface without using a coating agent, such as forming unevenness on the solid surface by laser processing or the like, such as super water repellent processing, may be used.
- a coating method in which a resin such as Teflon (registered trademark), silicon, a fluorine-based water-repellent, wax, alumina soap, pyridinium salt, and seratin is adhered to a solid surface.
- a method of performing unevenness processing on the solid surface without using a coating agent such as forming unevenness on the solid surface by laser processing or the like, such as super water repellent processing, may be used.
- annular member refers to a member having a space inside a ring formed by rotating a rectangle around an axis parallel to one side thereof.
- the height of the annular member is not particularly limited so that the liquid and the fragile substance can be accommodated in such a space, but is typically 1 to 20 mm, preferably 3 to 15 mm, and more preferably 5 to 10 mm.
- the inner diameter of the annular member is not particularly limited, but is typically 1 to 15 cm, preferably 3 to 15 cm, and more preferably 3 to 10 cm.
- the seal member refers to a member interposed between the container and the lid member to enhance the hermeticity of the container, such as a packing ring.
- the annular member and / or the sealing member can be made of an elastic material in order to absorb manufacturing tolerances of the container and the lid member and to enhance the hermeticity of the container.
- the elastic material include, but are not limited to, natural rubber, elastomer, nitrile rubber, silicon rubber, and the like.
- One aspect of the present invention is a device used detachably mounted on a container for accommodating an implant, a lid member for sealing the container, and a device interposed between the lid member and the container.
- FIG. 1 is a conceptual diagram of the device 1 according to the first embodiment of the present invention
- FIG. 2 is a sectional view of the device 1 shown in FIG.
- the size of each member is appropriately emphasized for ease of description, and the illustrated members do not indicate the actual size.
- the device 1 includes a lid member 3 for sealing a container 2, an annular member 4, a protective member 5, and a seal member 6.
- the container 2 is a commercially available petri dish having an edge 21 surrounding the opening, and constitutes a storage space in which the liquid L, the fragile material S, and the like can be stored.
- the lid member 3 includes a top part 32, a convex part 31 extending downward from the top part 32, and a cylindrical skirt wall 34 hanging down from the periphery of the top part 32.
- the convex portion 31 has a bottomed cylindrical shape having a bottom surface 33 and protrudes toward the internal space of the container 2 with the lid member 3 attached to the container 2.
- the outer diameter of the protrusion 31 is smaller than the inner diameter of the container 2, and a space G (second space) is generated between the protrusion 31 and the inner surface of the container 2 with the lid member 3 attached to the container 2.
- the cylindrical skirt wall 34 has an inner diameter larger than the outer diameter of the container 2, and functions as a guide mechanism for guiding the position of the projection 31 to the center of the container 2 when attaching the lid member 3 to the container 2.
- the annular member 4 is a member having a space (first space) inside a ring formed by rotating a rectangle around an axis parallel to one side thereof.
- the outer diameter of the annular member 4 is substantially the same as or slightly larger than the inner diameter of the container 2, and is configured to be able to be placed on the bottom surface of the container 2 without displacement. Further, the inner diameter of the annular member 4 is smaller than the outer diameter of the convex portion 31, and when the convex portion 31 is placed on the annular member 4, the convex portion 31 does not enter the space inside the annular member 4, 4 is configured to be placed on the upper surface.
- the cross section of the annular member 4 is rectangular, and is configured such that there is no space into which bubbles or the like enter when the annular member 4 is immersed in a liquid.
- the annular member 4 is made of an elastic material, and when sandwiched between the lid member 3 and the container 2, is configured to absorb manufacturing tolerances and the like of the container 2 and / or the lid member 3 to increase the adhesion. Have been.
- the protection member 5 is a member that is placed on the annular member 4 to protect the space inside the annular member 4.
- the diameter of the protection member 5 is larger than the inner diameter of the annular member 4, and when the protection member 5 is placed on the annular member 4, the protection member 5 does not enter the space inside the annular member 4, It is constituted so that it may be put on.
- the protection member 5 is made of a fluid-impermeable material so that gas and liquid do not permeate.
- the protection member 5 is configured as a flexible transparent film-shaped member, and has a sufficient strength that it is not damaged even if it is rolled, bent, or spread.
- the seal member 6 is an annular elastic member for increasing the adhesion by being interposed between the end 21 of the container 2 and the top 32 of the lid member 3.
- the inner diameter of the seal member 6 is larger than the inner diameter of the convex portion 31, and the outer diameter is slightly larger than the inner diameter of the cylindrical skirt wall 34. It is configured to be sandwiched between the portion 32 and the
- the annular member 4 when using the device 1, the annular member 4 is placed on the bottom surface of the container 2 containing the liquid L and the fragile object S, and the liquid L and the fragile object S are transferred to the annular member 4.
- the space inside the space first space.
- the liquid volume of the liquid L is lower than the height of the annular member 4
- the liquid volume is adjusted such that the liquid volume is equal to or slightly higher than the height of the annular member 4 by pouring the liquid further. Since the cross section of the annular member 4 is rectangular and there is no space for storing gas, the first space is filled with the liquid L.
- the liquid surface of the liquid L contained in the first space is covered by covering the protective member 5 so as to cover the opening of the annular member 4.
- the protective member 5 is in the form of a film, the protective member 5 can be covered without undulating while gradually increasing the contact area with the liquid surface. Further, since the protective member 5 is transparent, the presence or absence of air bubbles can be visually confirmed, and the air bubbles can be easily pushed out by pressing the protective member 5 with a finger or the like. Thereby, a complete liquid-tight space surrounded by the bottom surface of the container 2, the annular member 4 and the protection member 5 can be formed.
- the cover member 3 is attached to the container 2, and the protection member 5 is sandwiched (fixed) between the convex portion 31 and the annular member 4, so that the protection member 5 is shifted from the liquid level. Not to be. At this time, even if air bubbles enter between the convex portion 31 and the protection member 5, the air bubbles do not enter the first space because the protection member 5 is fluid-impermeable.
- the liquid L extruded by the convex portion 31 is held in the space G between the convex portion 31 and the container 2, and the space between the edge 21 of the container 2 and the top portion 32 of the lid member 3 is Since the hermeticity is enhanced through the seal member 6, even if the liquid L held in the space G moves during the transfer of the device 1, problems such as leakage to the outside of the container 2 hardly occur.
- the first space is in a completely liquid-tight state and the liquid L is incompressible. Therefore, even if the device 1 vibrates during transfer, the liquid L does not move even if the device 1 vibrates. Does not occur.
- the lid member 3 When using the fragile material S, the lid member 3 is removed from the container 2 at the transfer destination.
- the device 1 does not have a structure in which the convex portion 31 enters the liquid-tight space (first space), an operator cannot use the device. It is difficult for the lid member to be removed by a strong force.
- the liquid surface of the liquid-tight space is protected by the protection member 5, the liquid surface is less likely to undulate when the cover member 3 is removed from the container 2, and the fragile object S is unlikely to be damaged.
- the film-like protective member 5 is stuck to the liquid L by surface tension, sticking to the protrusion 31 is unlikely to occur.
- the protective member 5 can gradually reduce the contact area with the liquid surface by gripping and winding the end portion with tweezers or the like, and can minimize the waving of the liquid surface. Then, the fragile object S stored in the first space is taken out and used.
- a liquid-tight state can be efficiently achieved with a simple mechanism and a simple operation, so that there are great advantages in terms of workability and manufacturing cost. is there.
- air bubbles gas
- the fragile object is not damaged.
- the fragile material is a laminate of sheet-shaped cell cultures, bubbles do not move, and the laminate does not shift or lose. Therefore, it can be stored for a long time while maintaining the shape of the fragile object in the liquid to prevent deformation.
- the liquid-tight state can be easily released, for example, the vibration of the container or the flow of the liquid due to the forcible removal of the lid member by the operator. Can be suppressed, and fragile objects are not damaged.
- cleanliness is strictly controlled, such as in a bio-clean room used for producing sheet-shaped cell cultures and in intensive care rooms where sheet-shaped cell cultures are used. Suitable for use in controlled locations.
- the device 1 according to the present invention has been described based on the first embodiment.
- the present invention is not limited to this, and can have various modifications.
- the protective member 5 and / or The lid member 3 may be subjected to a water-repellent treatment. That is, the liquid L enters between the protective member 5 and the lid member 3 by applying a water-repellent treatment to a portion where the protective member 5 and the lid member 3 are in contact, for example, the bottom surface of the convex portion 31 of the lid member 3. Even if they do not stick. Further, the protection member 5 can be omitted.
- the device 1 of the present invention does not have a structure in which the convex portion 31 of the lid member 3 enters the space (liquid-tight space) inside the annular member 4, it is difficult to apply an excessive force when removing the lid member 3. Even if the protective member 5 is omitted, problems such as waving hardly occur. Then, by applying a water-repellent treatment to the bottom surface of the convex portion 31, it is possible to prevent the liquid surface from being pulled by the convex portion 31 and to suppress the waving.
- the seal member 6 can also have various modifications.
- the upper surface of the seal member 6 may be fixed to the top portion 32 of the lid member 3 and a circular groove may be provided on the lower surface side.
- the edge 21 of the container 2 enters the circular groove, so that the airtightness of the second space is further improved and the lid member 3 is separated from the container 2. It is hard to come off.
- the sealing member 6 pulls the lid member 3 downward, the force for pressing the convex portion 31 of the lid member 3 against the annular member 4 is increased, and the liquid tightness of the first space is further improved.
- the seal member 6 can be freely provided by, for example, being provided between the cylindrical skirt wall 34 of the lid member 3 and the outer peripheral surface of the container 2 or between the convex portion 31 of the lid member 3 and the inner peripheral surface of the container 2. Additions and changes can be made.
- the annular member 4 can also have various modifications. For example, when the container is a commercially available petri dish, the inner peripheral surface of the petri dish is slightly inclined. Therefore, by forming at least the outer peripheral surface of the annular member 4 into a tapered shape, the annular member 4 can be configured to be in close contact with the inner peripheral surface of the petri dish.
- a mark such as a marker or a small protrusion (potch) may be provided on the upper surface of the annular member 4 so that the upper and lower sides of the annular member 4 can be distinguished.
- a protrusion the top and bottom can be distinguished simply by touching with a hand.
- the protection member 5 may float up. By providing the notch, it is possible to prevent this floating.
- each configuration can be replaced with any configuration that can perform the same function, or any configuration can be added.
- the use of the device of the present invention can be performed sequentially, for example, by the following steps. (1) Prepare a container containing a fragile substance and a liquid. (2) Place an annular member on the bottom of the container. (3) Place the protection member on the annular member. (4) The lid member is attached to the container to form a liquid-tight state. (5) Transfer the device. (6) Remove the lid member. (7) Remove the protection member to release the liquid tight state. (8) Take out the fragile material and use it.
- FIG. 3 is a perspective view of the holding device 7 according to the second embodiment of the present invention
- FIG. 4 is a perspective view of a holding device 7A according to the third embodiment of the present invention
- FIG. 5 is a fourth embodiment of the present invention. It is a perspective view of the holding tool 7B which concerns on a form.
- the size of each member is appropriately emphasized for ease of description, and the illustrated members do not indicate the actual size.
- the holding device 7 As shown in FIG. 3, the holding device 7 according to the present embodiment includes a base member 8 and a cover member 9.
- the holding device 7 can press and hold the device 1 including the container 2 (not shown) and the lid member 3 (not shown) for sealing the container 2 from above and below.
- the base member 8 includes an opening portion 81, a bottom portion 82, a screw portion (engaging portion) 83, a mounting portion 84, and a ridge portion 85.
- the engagement is a screw engagement.
- the mounting portion 84 has a mounting surface on which the container 2 can be mounted on an upper surface, and an opening 81 is provided at a central portion.
- the mounting portion 84 has an annular ridge 85 (elongated ridge) surrounding the lower end of the container 2 when the container 2 is mounted on the mounting surface, and defines an installation position of the container 2 with respect to the base member 8. be able to.
- the mounting portion 84 has a disk shape protruding upward from the bottom portion 82, and a screw portion 83 is provided on a side peripheral surface thereof.
- the bottom portion 82 has an outer diameter larger than the outer diameter of the mounting portion 84, and serves as a bottom portion when the base member 8 is installed on a table or the like.
- the cover member 9 includes an opening 91, a top part 92, a screwing part (engaging part) 93, a cylindrical skirt wall 94, and a grip part 95.
- the top portion 92 has a cover surface that can cover the upper surface of the lid member 3, and has an opening 91 in the center.
- the top part 92 includes a tubular skirt wall 94 hanging down from the periphery of the top part 92, and can be sandwiched between the top part 92, the tubular skirt wall 94 and the mounting part 84 so as to surround the device 1.
- a screw portion 93 (not shown) is provided on the inner peripheral surface of the lower end portion of the cylindrical skirt wall 94, and the screw portion 93 is screwed with the screw portion 83 of the base member 8 to cover the cover.
- the member 9 can be screwed to the base member 8.
- the inner diameter of at least a portion of the cylindrical skirt wall 94 (for example, the inner peripheral surface at the upper end of the cylindrical skirt wall 94) is matched with the outer diameter of the lid member 3 so that the lid member 3
- the installation position can also be defined.
- a closed space (liquid-tight space) can be formed by covering the lid member 3 with the container 2 filled with the liquid L arbitrarily.
- a sealing member 6 is interposed between the container 2 and the lid member 3 to improve the sealing property, or an annular member is interposed between the container 2 and the lid member 3 as described above.
- a liquid-tight space can be formed.
- the container 2 is placed on the base member 8. At this time, the container 2 can be positioned at the center of the placing portion 84 using the ridge 85.
- the screw portion 83 of the base member 8 is provided below the mounting portion 84, that is, since the screw portion 83 does not surround the side surface of the container 2, the container 2 is placed on the mounting portion 84.
- the cover member 9 is attached to the base member 8.
- the lid member 3 can be positioned at the center of the cover member 9 (and the base member 8) using the cylindrical skirt wall 94.
- the holding tool 7 can define the relative position between the container 2 and the lid member 3 by using the ridge 85 of the base member 8 and the cylindrical skirt wall 94 of the cover member 9. .
- the screw portion 83 of the base member 8 and the screw portion 93 of the cover member 9 are screwed.
- the container 2 and the lid member 3 are vertically connected by gripping a grip portion 95 provided as a protruding portion (may be a groove portion) on the outer peripheral surface of the cylindrical skirt wall 94 and performing screwing work. Can be tightened with strong force. This is suitable for use, for example, when the container 2 is a container having no screwing portion such as a general-purpose petri dish, and has high versatility.
- the cover member 3 can be configured not to rotate (screw) with respect to the container 2, and the rotational force of the cover member 3 does not reach the protection member 5 interposed between the container 2 and the cover member 3. It is particularly advantageous.
- the elastic sealing member 6 and the annular member 4 are interposed, these members are accurately compressed and sealed between the container 2 and the lid member 3 whose relative positions are accurately determined. This is advantageous because the property is enhanced.
- the cover member 9 may be screwed by the height of the screwing portion 83 of the base member 8, so that the clamping operation is easy and the clamping pressure can be easily adjusted. Problems can be prevented.
- both the base member 8 and the cover member 9 have the opening 81 and the opening 91 at the center, the position where the device 1 is fixed and the liquid L and the stored material S stored in the device 1 are controlled. The state can always be observed. This is particularly advantageous when the container 2 and the lid member 3 are made of a light-transmitting material. Then, even if the graft is a low-visibility object such as a sheet-shaped cell culture, light is emitted from one opening and the sheet-shaped cell culture can be visually recognized from the other opening, which is advantageous. . In the case where the liquid-tight space is formed as described above, the lid member 3 may be pressed against the container 2 while confirming that air bubbles or foreign matter is not mixed into the container 2 through the opening 91.
- the device 1 is transferred. Since the device 1 is firmly held by the holding device 7, it is possible to prevent a problem that the cover member 3 is detached from the container 2 due to shaking during the transfer and the like. Since it is surrounded by the tool 7, it is protected from external impact. Finally, the holding tool 7 is removed from the device 1 at the transfer destination and used.
- the threaded portion 83 and the threaded portion 93 are formed by slide engagement (for example, see JP-A-2006-315575), flange fitting (for example, see JP-A-2006-001582), and ridge engagement (for example, JP-A-2006-001582). 2016-203985) or other engaging means having a function of pressing the device 1 from above and below.
- the annular ridge 85 can be replaced with another means such as a plurality of annularly arranged projections that can position the container 2 on the mounting surface.
- a fragile substance for example, a laminate of sheet-shaped cell cultures
- the container 2 is liquid-tightly transferred while maintaining the shape of the fragile substance. You can also.
- the holding device 7A includes a base member 8A and a cover member 9A.
- the base member 8A further includes a protruding wall 86, a groove 87, and a notch 88.
- the projecting wall 86 is a plurality of walls provided outside the projecting portion 85 and projecting beyond the height of the container 2 from the mounting portion 84.
- a groove 87 is provided on the lower surface of the bottom portion 82 of the base member 8A, and when the base member 8A is installed on a table or the like, it is possible to prevent the base member 8A from sticking to the work surface.
- the container 2 (not shown) is positioned at the center of the base member 8 using the ridges 85.
- the cover member 3 can be positioned at the center of the base member 8 by aligning the cover member 3 along the projecting wall 86. That is, the worker can define the relative position between the container 2 and the lid member 3 by using the ridge 85 and the projection wall 86 of the base member 8A. This is particularly advantageous when the annular sealing member 6 or the annular member 4 is interposed between the container 2 and the lid member 3 because these members can be pressed accurately.
- the device 1 (not shown) is sandwiched.
- the device 1 is provided on the side of the bottom portion 82 of the base member 8A and the grip portion 95 configured as a protruding portion radially protruding from the cover member 9A.
- the screwing operation can be easily performed.
- the screwing of the cover member 9 ⁇ / b> A is released and the device 1 is removed from the base member 8 ⁇ / b> A.
- the device 1 is exposed from the gaps of the plurality of projecting walls 86, the device 1 is exposed. Easy to grab one.
- the plurality of projecting walls 86 are arranged so as to surround the container 2, the lid member 3 can be accurately positioned with respect to the container 2.
- the holding device 7B includes a cover member (not shown) and a base member 8B.
- the base member 8B includes a mounting portion 84B, a ridge portion 85B, and a protruding wall 86B (the description of other components is omitted).
- the ridge 85B is arranged in a semi-annular shape on the placing portion 84B.
- the protruding wall 86B is semicircularly arranged outside the protruding ridge portion 85B, and a cutout (gap) C is provided in a part thereof (two or more protruding walls 86B are semicircularly provided with a gap). May be arranged). That is, in the present embodiment, one half of the mounting surface of the mounting portion 84B (the opposite half of the ridge portion 85B and the protruding wall 86B) is configured as a flat surface.
- the container 2 When using the holding device 7B, the container 2 (not shown) is slid in the lateral direction (the direction of the protruding portion 85B and the protruding wall 86B) from the side opposite to the protruding portion 85B and the protruding wall 86B. And install it. At this time, the container 2 is slid on the flat surface of the mounting portion 84B, so that careless vibration of the container 2 can be suppressed.
- the lid member 3 (not shown) is attached to the container 2. At this time, the lid member 3 is pressed against the projecting wall 86 ⁇ / b> B of the base member 8 ⁇ / b> B so that the lid member 3 is accurately positioned on the container 2. Can be positioned.
- the device 1 When using the device 1 (not shown), the device 1 is removed from the base member 8A. At this time, the side of the device 1 (container 2 and / or lid member 3) exposed from the cutout C is removed. By pushing in, the device 1 can be removed by sliding on a flat surface. A projection 89 serving as a mark may be provided on the mounting portion 84B on the side facing the notch C so that the sliding direction when the device 1 is slid on the base member 8A is easy to understand. Thus, the device 1 can be accurately positioned on the mounting portion 84B only by sliding the device 1 between the protrusion 89 and the notch C. The device 1 is displaced by arranging the protrusion 89 on the extension of the protrusion 85B so as to face the notch C so that the side surface of the device 1 is locked by the protrusion 89. It can also be excluded.
- the container and the lid can be efficiently brought into close contact with each other with a simple mechanism and a simple operation.
- the contents in the container can be visually recognized from the outside, the state of the contents, mixing of foreign matter, and the like can be easily checked.
- the relative positional relationship between the container and the lid member can be accurately adjusted, the hermeticity is improved.
- an elastic sealing member 6 or an annular member 4 is interposed between the container and the lid member, these members can be pressed accurately, so that the airtightness is further improved.
- the container and the lid member can be securely brought into close contact with each other and fixed, problems such as the lid member coming off the container during transfer can be prevented.
- the container when the container is a laminate of sheet-shaped cell cultures, the container can be reliably transported in a liquid-tight state, air bubbles enter the container and move, and the laminate is displaced or defective. And can be stored for a long period of time while maintaining its shape to prevent deformation.
- the present invention is not limited to the above embodiments, and those skilled in the art can appropriately combine the configurations and shapes of the holding devices according to the above-described first to third embodiments, and have different configurations and shapes.
- the cover member 9 or the cover member 9A may be combined with the base member 8, the base member 8A or the base member 8B, or the protrusion 85, the protrusion 85B, the protrusion wall 86 or the protrusion wall 86B may be used. It may be combined with the base member 8, the base member 8A or the base member 8B.
- each configuration can be replaced with any configuration that can perform the same function, or any configuration can be added.
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Abstract
本発明の目的は、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるデバイスを提供することにある。本発明は、移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイスに関する。
Description
本発明は、移植片を移送するためのデバイスに関する。
近年、重症心不全治療の解決策として新しい再生医療の開発が進められている。その一例として、重症心筋梗塞等において組織工学を応用した温度応答性培養皿を用いて作製したシート状細胞培養物を心臓表面に適用する手法などが試みられている。シート状細胞培養物を用いる手法は、大量の細胞を広範囲に安全に移植することが可能であり、例えば、心筋梗塞(心筋梗塞に伴う慢性心不全を含む)、拡張型心筋症、虚血性心筋症、収縮機能障害(例えば、左室収縮機能障害)を伴う心疾患(例えば、心不全、特に慢性心不全)などの治療にとくに有用である。
このようなシート状細胞培養物を臨床応用するには、例えば、作製されたシート状細胞培養物を保存液と共に容器内に収容し、移植が行われる集中治療室などに移送する必要がある。しかしながら、シート状細胞培養物は絶対的な物理的強度が低く、容器を移送する際などに生じる振動で、皺、破れ、破損などが生じることから、この移送作業には高度な技術が要求され、かつ細心の注意を払う必要がある。
このようなニーズに応えるために、種々の方法や容器が開発されている。例えば、下記特許文献1に記載された膜状組織の保存輸送容器は、収容部内を気体層が形成されることがない程度に保存液で満たすことで、保存液が波打ったり流動したりせず、結果的に、膜状組織に振動が伝わらず、膜状組織の破損を防止できるようになっている。
下記特許文献2には、培養細胞シートを運搬するための包装体が記載されている。かかる包装体は、リッドで密封する際に若干の液体培地と共に空気を排除することによって、運搬時に培養細胞シート包装体が揺れても、液体培地中を気泡が移動したりすることがないため、培養細胞シートのズレや欠損を防止できるようになっている。
上述のように脆弱な細胞シートを安全に移送するための容器が開発されている。またこのような容器は、容器内を液密にして気泡の移動が起こらないような工夫がなされている。
しかしながら、容器内から完全に気泡を取り除いて液密状態を達成するには高度な技術が要求される。また、液密状態の容器から蓋を取り外すには強い力が必要なため、蓋の脱着の際に液体が波打ち、細胞シートを破損させてしまうことがある。
本発明はこのような点を考慮してなされたものであり、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるデバイスを提供することを目的とする。
すなわち本発明は、以下に関する。
[1]移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイス。
[2]容器と蓋部材との間に介在するシール部材をさらに含む、[1]に記載のデバイス。
[3]環状部材と蓋部材との間に介在して第一空間を保護する保護部材をさらに含む、[1]または[2]に記載のデバイス。
[1]移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイス。
[2]容器と蓋部材との間に介在するシール部材をさらに含む、[1]に記載のデバイス。
[3]環状部材と蓋部材との間に介在して第一空間を保護する保護部材をさらに含む、[1]または[2]に記載のデバイス。
[4]保護部材が可撓性を有する、[3]に記載のデバイス。
[5]保護部材および/または蓋部材に撥水加工が施されている、[1]または[3]に記載のデバイス。
[6]移植片がシート状細胞培養物である、[1]~[5]のいずれかに記載のデバイス。
[7]シート状細胞培養物が、積層体である、[6]に記載のデバイス。
[8][1]~[7]のいずれかに記載のデバイスを上下から押圧して挟持できるように構成されているカバー部材とベース部材とを含む、挟持具。
[5]保護部材および/または蓋部材に撥水加工が施されている、[1]または[3]に記載のデバイス。
[6]移植片がシート状細胞培養物である、[1]~[5]のいずれかに記載のデバイス。
[7]シート状細胞培養物が、積層体である、[6]に記載のデバイス。
[8][1]~[7]のいずれかに記載のデバイスを上下から押圧して挟持できるように構成されているカバー部材とベース部材とを含む、挟持具。
本発明のデバイスによれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡(気体)が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
本発明のデバイスは、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。また、周囲を汚染することなく作業を行うことができるため、シート状細胞培養物の作製に使用されるバイオクリーンルームや、シート状細胞培養物が使用される集中治療室など、清浄度が厳密に管理されている場所での使用に適している。
本発明における脆弱物とは、物理的強度が低く、液体の揺れなどによって、破れ、破損、変形などが生じ得る物体をいう。かかる物体の形状としては、薄肉部を有する物体、帯形状を有する物体、シート形状を有する物体などが挙げられる。かかるシート形状を有する物体としては、とくに限定されないが、シート状構造物、例えば、シート状細胞培養物などの、生体由来材料からなる平膜状の膜組織や、プラスチック、紙、織布、不織布、金属、高分子、脂質といった種々の材質のフィルム等が含まれる。これらのうち、液体中で難分解性のもの、液体中で難崩壊性のものなどが好ましい。シート状構造物は、多角形や円形などであってもよく、幅、厚み、直径などは一様であってもなくてもよい。本発明におけるシート状構造物は、1枚のみを単層の状態で使用してもよいし、2枚以上を重ねた積層体の状態で使用してもよい。後者の場合、積層体の各層は互いに連結していても、連結していなくてもよく、連結している場合は、重なり合っている部分が全て連結していても、部分的に連結していてもよい。また、本発明において脆弱とは、例えば、液体外で物体のつかみ具への固定がなされる従来の引張試験機(例えば、JIS K 7161等に記載のもの)での引張特性の評価が、その脆弱性のために困難であるか、実質的に不可能であることを指す。かかる脆弱な物体としては、例えば、引張特性の各数値が小さく、従来の引張試験機では正確に測定することが困難な物体などが挙げられる。かかる脆弱物としては、引張試験において、例えば、10N(ニュートン)未満、5N未満、2N未満、1N未満、0.5N未満、0.1N未満、0.05N未満の破断荷重を示すものが挙げられる。また、従来の引張試験の測定限界は、破断荷重として一般に1N程度であるため、本発明の一態様においては、これを下回る破断荷重(例えば、0.5N未満)を示すものが脆弱物として好ましい。
本発明において、移植片とは、比較的に物理的強度が低い生体由来の脆弱物をいう。移植片は培養した細胞(例えば細胞培養物など)や採取された細胞を含む。移植片はさらに細胞が産生した産生物を含むことがある。移植片は細胞および/または細胞の産生物のほかに、生体の所定部(例えば患部等)を補填および/または支持するための材料(補填材料や支持材料)なども含むことができる。移植片はシート状、膜状、塊状、柱状等の種々の形状をとることができる。移植片は生体への移植などに用いられる。移植片の一例としては、3次元細胞組織(オルガノイド、スフェロイド等)、2次元細胞組織(シート状細胞培養物等)などが挙げられる。
本発明において、シート状細胞培養物とは、細胞が互いに連結してシート状になったものをいう。細胞同士は、直接(接着分子などの細胞要素を介するものを含む)および/または介在物質を介して、互いに連結していてもよい。介在物質としては、細胞同士を少なくとも物理的(機械的)に連結し得る物質であれば特に限定されないが、例えば、細胞外マトリックスなどが挙げられる。介在物質は、好ましくは細胞由来のもの、特に、シート状細胞培養物を構成する細胞に由来するものである。細胞は少なくとも物理的(機械的)に連結されるが、さらに機能的、例えば、化学的、電気的に連結されてもよい。シート状細胞培養物は、1の細胞層から構成されるもの(単層)であっても、2以上の細胞層から構成されるもの(多層体)であってもよい。また、シート状細胞培養物は、細胞が明確な層構造を示すことなく、細胞1個分の厚みを超える厚みを有する3次元構造を有してもよい。例えば、シート状細胞培養物の垂直断面において、細胞が水平方向に均一に整列することなく、不均一に(例えば、モザイク状に)配置された状態で存在していてもよい。シート状細胞培養物は、独立して形成された単一の(一枚の)シート状細胞培養物として存在してもよく、また独立した単一の(一枚の)シート状細胞培養物が二以上積層されて形成された積層体として存在してもよい。積層体は、例えばシート状細胞培養物が2層(2枚)、3層(3枚)、4層(4枚)、5層(5枚)、または6層(6枚)積層された積層体であってよい。
本発明において、シート状細胞培養物とは、細胞が互いに連結してシート状になったものをいう。細胞同士は、直接(接着分子などの細胞要素を介するものを含む)および/または介在物質を介して、互いに連結していてもよい。介在物質としては、細胞同士を少なくとも物理的(機械的)に連結し得る物質であれば特に限定されないが、例えば、細胞外マトリックスなどが挙げられる。介在物質は、好ましくは細胞由来のもの、特に、シート状細胞培養物を構成する細胞に由来するものである。細胞は少なくとも物理的(機械的)に連結されるが、さらに機能的、例えば、化学的、電気的に連結されてもよい。シート状細胞培養物は、1の細胞層から構成されるもの(単層)であっても、2以上の細胞層から構成されるもの(多層体)であってもよい。また、シート状細胞培養物は、細胞が明確な層構造を示すことなく、細胞1個分の厚みを超える厚みを有する3次元構造を有してもよい。例えば、シート状細胞培養物の垂直断面において、細胞が水平方向に均一に整列することなく、不均一に(例えば、モザイク状に)配置された状態で存在していてもよい。シート状細胞培養物は、独立して形成された単一の(一枚の)シート状細胞培養物として存在してもよく、また独立した単一の(一枚の)シート状細胞培養物が二以上積層されて形成された積層体として存在してもよい。積層体は、例えばシート状細胞培養物が2層(2枚)、3層(3枚)、4層(4枚)、5層(5枚)、または6層(6枚)積層された積層体であってよい。
本発明におけるシート状細胞培養物は、上記の構造を形成し得る任意の細胞から構成される。かかる細胞の例としては、限定されずに、接着細胞(付着性細胞)を含む。接着細胞は、例えば、接着性の体細胞(例えば、心筋細胞、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、肝細胞、膵細胞、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞、滑膜細胞、軟骨細胞など)および幹細胞(例えば、筋芽細胞、心臓幹細胞などの組織幹細胞、胚性幹細胞、iPS(induced pluripotent stem)細胞などの多能性幹細胞、間葉系幹細胞等)などを含む。体細胞は、幹細胞、特にiPS細胞から分化させたものであってもよい。シート状細胞培養物を形成し得る細胞の非限定例としては、例えば、筋芽細胞(例えば、骨格筋芽細胞など)、間葉系幹細胞(例えば、骨髄、脂肪組織、末梢血、皮膚、毛根、筋組織、子宮内膜、胎盤、臍帯血由来のものなど)、心筋細胞、線維芽細胞、心臓幹細胞、胚性幹細胞、iPS細胞、滑膜細胞、軟骨細胞、上皮細胞(例えば、口腔粘膜上皮細胞、網膜色素上皮細胞、鼻粘膜上皮細胞など)、内皮細胞(例えば、血管内皮細胞など)、肝細胞(例えば、肝実質細胞など)、膵細胞(例えば、膵島細胞など)、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞等が挙げられる。本明細書においては、単層の細胞培養物を形成するもの、例えば、筋芽細胞または心筋細胞などが好ましく、とくに好ましくは骨格筋芽細胞またはiPS細胞由来の心筋細胞である。
細胞は、細胞培養物による治療が可能な任意の生物に由来し得る。かかる生物には、とくに限定されないが、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ブタ、ウマ、ヤギ、ヒツジなどが含まれる。また、シート状細胞培養物の形成に用いる細胞は1種類のみであってもよいが、2種類以上の細胞を用いることもできる。本発明の好ましい態様において、細胞培養物を形成する細胞が2種類以上ある場合、最も多い細胞の比率(純度)は、細胞培養物製造終了時において、例えば骨格筋芽細胞の場合、65%以上、好ましくは70%以上、より好ましくは75%以上である。
本発明におけるシート状細胞培養物は、スキャフォールド(細胞培養時の足場)に細胞を播種し、培養することによって得られるシート形状の培養組織などでもよいが、好ましくは、細胞培養物を構成する細胞由来の物質のみからなり、それら以外の物質を含まない。
シート状細胞培養物は、任意の既知の手法によって製造されたものであってよい。
シート状細胞培養物は、任意の既知の手法によって製造されたものであってよい。
本発明の一態様において、シート状細胞培養物は、シート状骨格筋芽細胞培養物である。これは、シート状骨格筋芽細胞培養物は、その一部をつかむと自重で破断するほど脆弱であるがゆえに、従来単体で移送することができないばかりか、一度折り重なると元の形状に戻すことが極めて困難なため、液中でシート形状を維持することに大きな意義があるからである。
本発明において、容器は、内部に脆弱物、液体などを収容でき、液体が漏出しないものであればとくに限定されず、市販の容器を含む任意のものを用いることができる。容器の材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、テフロン(登録商標)、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、ナイロン6,6、ポリビニルアルコール、セルロース、シリコン、ポリスチレン、ガラス、ポリアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、金属(例えば、鉄、ステンレス、アルミニウム、銅、真鍮)等が挙げられるがこれに限定されない。また、容器は、脆弱物の形状を維持するための少なくとも1つの平坦な底面を有することが好ましく、例えば、シャーレ、細胞培養皿、細胞培養ボトルなどが挙げられるがこれに限定されない。平坦な底面の面積は、特に限定されないが、典型的には、9.1~78.5cm2、1.13~78.5cm2、好ましくは12.6~78.5cm2、より好ましくは9.1~60.8cm2である。
本発明において、容器内の液体は、少なくとも1種の成分から構成され、その成分としてはとくに限定されないが、例えば、水、水溶液、非水溶液、懸濁液、乳液などの液体から構成される。
本明細書における液または液体とは、全体として流動性を有する流体であればよく、細胞足場などの固形物質や気泡などその他非液体成分を含んでもよい。
本明細書における液または液体とは、全体として流動性を有する流体であればよく、細胞足場などの固形物質や気泡などその他非液体成分を含んでもよい。
容器内の液体を構成する成分は、脆弱物に与える影響が少ないものであればとくに限定されない。脆弱物が生体由来材料からなる膜である場合、容器内の液体を構成する成分は、生物学的安定性や長期保存可能性の観点から、生体適合性のもの、すなわち、生体組織や細胞に対して炎症反応、免疫反応、中毒反応などの望まない作用を起こさないか、少なくともかかる作用が小さいものが好ましく、例えば、水、生理食塩水、生理緩衝液(例えば、HBSS、PBS、EBSS、Hepes、重炭酸ナトリウム等)、培地(例えば、DMEM、MEM、F12、DMEM/F12、DME、RPMI1640、MCDB、L15、SkBM、RITC80-7、IMDM等)、糖液(スクロース溶液、Ficoll-paque(登録商標)PLUS等)、海水、血清含有溶液、レノグラフィン(登録商標)溶液、メトリザミド溶液、メグルミン溶液、グリセリン、エチレングリコール、アンモニア、ベンゼン、トルエン、アセトン、エチルアルコール、ベンゾール、オイル、ミネラルオイル、動物脂、植物油、オリーブ油、コロイド溶液、流動パラフィン、テレピン油、アマニ油、ヒマシ油などが挙げられる。
脆弱物がシート状細胞培養物である場合、容器内の液体を構成する成分は、細胞を安定して保存することができ、細胞生存に必要な最低限の酸素や栄養等を含み、細胞を浸透圧等により破壊しないものが好ましく、例えば、生理食塩水、生理緩衝液(例えば、HBSS、PBS、EBSS、Hepes、重炭酸ナトリウム等)、培地(例えば、DMEM、MEM、F12、DMEM/F12、DME、RPMI1640、MCDB、L15、SkBM、RITC80-7、IMDM等)、糖液(スクロース溶液、Ficoll-paque PLUS(登録商標)等)などが挙げられるが、これらに限定されない。
容器内の液体の量は、蓋部材を容器に取り付けた状態で脆弱物を保持できる程度であって、容器の底部と蓋部材の頂部との間に形成される液嵩が、脆弱物が液中で揺動しない(揺れ動かない)程度の高さであればとくに限定されない。すなわち、液面と蓋部材との間に空間が生じると、液体(液面)が揺れ動き、脆弱物が液中で揺れ動きやすくなるため、液面と蓋部材との間に空間が生じないように液嵩を調整することが好ましい。本発明の一態様において、シート状細胞培養物の直径は約35~55mmであり、面積は6cm2以上、または10cm2以上である。上記液嵩は、シート状細胞培養物の直径に関わらず、例えば、1.0mm~20.0mmとすることができる。
本発明において、蓋部材は、容器を密閉できるものであればとくに限定されない。蓋部材の材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、テフロン(登録商標)、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、ナイロン6,6、ポリビニルアルコール、セルロース、シリコン、ポリスチレン、ガラス、ポリアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、金属(例えば、鉄、ステンレス、アルミニウム、銅、真鍮)等が挙げられるがこれに限定されない。
本発明において、蓋部材および容器の形状は、蓋部材と容器とが係合可能で、かかる係合により密閉空間が形成され得る限り、特に限定されない。例えば、容器が汎用シャーレである場合は、蓋部材の形状を円形にすることが好ましい。また、蓋部材および/または容器を光透過性の材料で構成することで、容器に収容されている脆弱物の状態や、液体中の気泡の有無を確認できるようにしてもよい。
本発明において、脆弱物は液体が収容された容器内の液体中に保持される。脆弱物の液体中での位置は、特に限定されないが、蓋部材を容器に取り付けて密閉空間を形成した状態で、蓋部材と脆弱物とが接触しない位置に配置される(または接触してもよい)。好ましくは、脆弱物は、容器の液体中で、容器の底面上、底面付近などに配置される。
本発明において、「撥水加工」とは、固体表面と液体とが接触する境界線において、液体面が固体面と成す角度である接触角が90°以上になるように、個体表面を加工することをいう。例えば、テフロン(登録商標)加工などが施された撥水性のある固体表面では接触角は180°に近くなり、液滴がほぼ球形になるため、撥水加工が施された個体表面同士の間に液体が介在しても個体表面同士は張り付かない。撥水加工法としては、固体表面にテフロン(登録商標)、シリコン、フッ素系撥水剤、蝋質、アルミナ石鹸、ピリジニウム塩、セラチンなどの樹脂を付着させるコーティング法が挙げられる。また、超撥水加工のように、レーザー加工などで固体表面に凹凸を形成するなど、コーティング剤を使用せずに固体表面に凹凸加工を施す方法でもよい。
本発明において、環状部材とは、矩形をその一辺に平行な軸の周りで回転させることでできる輪の内側に空間を有する部材をいう。また、かかる空間に液体および脆弱物が収容できるように、環状部材の高さは、特に限定されないが、典型的には、1~20mm、好ましくは3~15mm、より好ましくは5~10mmである。環状部材の内径は、特に限定されないが、典型的には、1~15cm、好ましくは3~15cm、より好ましくは3~10cmである。
本発明において、シール部材とは、容器と蓋部材との間に介在して容器の密閉性を高めるための部材をいい、例えば、パッキンリングなどが挙げられる。
環状部材および/またはシール部材は、容器や蓋部材の製造公差などを吸収し、容器の密閉性を高めるために、弾性材料で構成することができる。弾性材料としては、天然ゴム、エラストマー、ニトリルゴム、シリコンゴム等が挙げられるが、これに限定されない。
環状部材および/またはシール部材は、容器や蓋部材の製造公差などを吸収し、容器の密閉性を高めるために、弾性材料で構成することができる。弾性材料としては、天然ゴム、エラストマー、ニトリルゴム、シリコンゴム等が挙げられるが、これに限定されない。
〔第1実施形態〕
本発明の一側面は、移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイスに関する。
本発明の一側面は、移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイスに関する。
以下、本発明の好適な実施形態について、図面を参照しつつ詳細に説明する。
まず、本発明の第1実施形態について説明する。
図1は、本発明の第1実施形態に係るデバイス1の概念図、図2は、図1に示されるデバイス1の断面図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
まず、本発明の第1実施形態について説明する。
図1は、本発明の第1実施形態に係るデバイス1の概念図、図2は、図1に示されるデバイス1の断面図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
図1に示すように、本発明の第1実施形態に係るデバイス1は、容器2を密閉するための蓋部材3、環状部材4、保護部材5およびシール部材6を含む。容器2は、開口部を取り囲む縁部21を有する市販のシャーレであり、液体Lや脆弱物Sなどを収容できる収容空間を構成する。蓋部材3は、天部32と、天部32から下方に延出する凸部31と、天部32の周縁から垂下する筒状スカート壁34とを含む。凸部31は、底面33を有する有底筒状であり、蓋部材3を容器2に取り付けた状態で、容器2の内部空間に向けて突出する。凸部31の外径は、容器2の内径より小さく、蓋部材3を容器2に取り付けた状態で、凸部31と容器2の内側面との間に空間G(第二空間)が生じるように構成されている。筒状スカート壁34は、容器2の外径より大きな内径を有し、蓋部材3を容器2に取り付ける際に、凸部31の位置を容器2の中央に誘導するガイド機構として機能する。
環状部材4は、矩形をその一辺に平行な軸の周りで回転させることでできる輪の内側に空間(第一空間)を有する部材である。環状部材4の外径は、容器2の内径と略同じか、それよりも僅かに大きく、容器2の底面にずれなく載置できるように構成されている。また、環状部材4の内径は、凸部31の外径より小さく、凸部31を環状部材4に載置した際に、凸部31が環状部材4の内側の空間に入り込まずに、環状部材4の上面に載置されるように構成されている。環状部材4の断面は矩形であり、環状部材4を液中に浸漬した際に気泡などが入り込む空間が存在しないように構成されている。環状部材4は、弾性材料で構成されており、蓋部材3と容器2とで挟持された際に、容器2および/または蓋部材3の製造公差などを吸収して密着性が高まるように構成されている。
保護部材5は、環状部材4の上に載置して、環状部材4の内側の空間を保護するための部材である。保護部材5の直径は、環状部材4の内径より大きく、保護部材5を環状部材4に載置した際に、保護部材5が環状部材4の内側の空間に入り込むことなく、環状部材4の上面に載置されるように構成されている。保護部材5は、気体や液体が透過しないように流体不透過性の材料で構成されている。保護部材5は、可撓性を有する透明のフィルム状部材として構成されており、丸めたり、折り曲げたり、広げたりしても、破損しない十分な強度を有している。シール部材6は、容器2の端部21と蓋部材3の天部32との間に介在させることで密着性を高めるための、環状の弾性体部材である。シール部材6の内径は凸部31より大きく、外径は筒状スカート壁34の内径より僅かに大きく、蓋部材3に取り付ける際に凸部31と筒状スカート壁34との間に入り込み、天部32と縁部21との間に挟持されるように構成されている。
図2Aに示されるように、デバイス1を使用する際は、液体Lおよび脆弱物Sが収容された容器2の底面に環状部材4を載置して、液体Lおよび脆弱物Sを環状部材4の内側の空間(第一空間)に取り込む。そして、液体Lの液嵩が環状部材4の高さより低い場合は、液体をさらに注ぎ込むなどして、液嵩が環状部材4の高さと同じかそれより僅かに高くなるように調整する。環状部材4の断面は矩形であり、気体が溜まる空間が存在しないため、第一空間内は液体Lで満たされる。次に、保護部材5を環状部材4の開口部を塞ぐように被せることで、第一空間に収容されている液体Lの液面を覆う。保護部材5はフィルム状であるため、液面との接触面積を徐々に増やしながら波立たせることなく覆うことができる。また、保護部材5は透明であるため、気泡の有無を目視で確認でき、指で保護部材5を押すなどして気泡を簡単に押し出すことができる。これにより、容器2の底面、環状部材4および保護部材5とで取り囲まれた完全な液密空間を形成することができる。
次に、図2Bに示されるように、容器2に蓋部材3を装着し、凸部31と環状部材4とで保護部材5を挟持(固定)することで、保護部材5が液面からずれないようにする。この際に、凸部31と保護部材5との間に仮に気泡が入った場合でも、保護部材5は流体不透過性であるため、気泡が第一空間に入り込むことがない。また、凸部31によって押し出された液体Lは、凸部31と容器2との間の空間Gに保持されており、容器2の縁部21と蓋部材3の天部32との間は、シール部材6を介して密閉性が高められているため、デバイス1の移送中に空間Gに保持されている液体Lが移動しても、容器2の外に漏出するなどの問題が起きにくい。そして、第一空間内は完全な液密状態であり、液体Lは非圧縮性であるため、移送中にデバイス1が振動しても液体Lの移動は生じず、脆弱物Sを変形させる外力は発生しない。
脆弱物Sを使用する際は、移送先で蓋部材3を容器2から取り外すが、本デバイス1は、凸部31が液密空間(第一空間)に入り込む構造ではないため、作業者が無理な力で蓋部材を取り外すようなことが起きにくい。また、液密空間の液面は保護部材5で保護されているため、蓋部材3を容器2から取り外す際に液面が波打ち、脆弱物Sが破損するようなことが起きにくい。フィルム状の保護部材5は表面張力で液体Lに張り付いているため、凸部31に張り付くようなことが起きにくい。保護部材5は、ピンセットなどで端部を把持して巻き取ることで、液面との接触面積を徐々に小さくでき、液面の波打ちを最小限に抑えることができる。そして、第一空間に収容されている脆弱物Sを取り出して使用する。
以上、本願発明の第1実施形態に係るデバイス1によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく液密状態を達成することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。そして、容器内を完全に液密状態にできるため、気泡(気体)が容器内にはいらず、移送中の容器の揺れなどによって気泡が容器内で動いて脆弱物を破損することがない。特に、脆弱物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、気泡が移動して、積層体がズレたり欠損したりすることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
また、本願発明の第1実施形態に係るデバイス1によれば、液密状態を簡単に解除することができるため、例えば、作業者の蓋部材の無理な取り外しによる、容器の振動や液体の流動の発生を抑えることができ、脆弱物を破損することがない。また、周囲を汚染することなく作業を行うことができるため、シート状細胞培養物の作製に使用されるバイオクリーンルームや、シート状細胞培養物が使用される集中治療室など、清浄度が厳密に管理されている場所での使用に適している。
以上、本発明に係るデバイス1を実施態様1に基づいて説明したが、本発明はこれに限定されるものではなく、さらに種々の変形例を有することができ、例えば、保護部材5および/または蓋部材3に撥水加工を施してもよい。すなわち、保護部材5と蓋部材3とが接する部分、例えば、蓋部材3の凸部31の底面に撥水加工を施すことで、保護部材5と蓋部材3との間に液体Lが入り込んだ場合でも、これらが引っ付くことがない。また、保護部材5は省略することができる。すなわち、本発明のデバイス1は、蓋部材3の凸部31が環状部材4の内側の空間(液密空間)に入り込む構造ではないため、蓋部材3を取り外す際に無理な力が加わり難く、保護部材5を省略しても波打ちなどの問題は起きにくい。そして、凸部31の底面に撥水加工を施すことで、液面が凸部31に引っ張られないようにして、波打ちを抑えることもできる。
また、シール部材6も種々の変形例を有することができる。例えば、シール部材6の上面を蓋部材3の天部32に固定し、下面側に円形の溝を設けることもできる。これにより、蓋部材3を容器2に取り付けた際に、容器2の縁部21が円形の溝に入り込むため、上記の第二空間の気密性がより高まる上に、蓋部材3が容器2から外れ難くなる。また、同時に、シール部材6が蓋部材3を下方に引っ張るため、蓋部材3の凸部31を環状部材4に押し付ける力が強くなり、第一空間の液密性がより高まる。さらに、シール部材6は、蓋部材3の筒状スカート壁34と容器2の外周面との間や、蓋部材3の凸部31と容器2の内周面との間に設けるなど、自由に追加や変更を加えることができる。
さらに、環状部材4も種々の変形例を有することができる。例えば、容器が、市販のシャーレである場合、シャーレの内周面は僅かであるが傾斜している。したがって、環状部材4の少なくとも外周面をテーパー状にすることで、環状部材4がシャーレの内周面に密着するように構成することもできる。この場合、環状部材4の上下が判別できるように、環状部材4の上面にマーカーなどの目印や小さな突起(ポッチ)などを設けるようにしてもよい。突起の場合は、手で触れるだけで上下を判別できるが、突起上に保護部材5が配置されると、保護部材5が浮き上がってしまう場合があるため、突起の位置に合わせて保護部材5に切り欠きを設けることで、この浮き上がりを防止することもできる。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
さらに、環状部材4も種々の変形例を有することができる。例えば、容器が、市販のシャーレである場合、シャーレの内周面は僅かであるが傾斜している。したがって、環状部材4の少なくとも外周面をテーパー状にすることで、環状部材4がシャーレの内周面に密着するように構成することもできる。この場合、環状部材4の上下が判別できるように、環状部材4の上面にマーカーなどの目印や小さな突起(ポッチ)などを設けるようにしてもよい。突起の場合は、手で触れるだけで上下を判別できるが、突起上に保護部材5が配置されると、保護部材5が浮き上がってしまう場合があるため、突起の位置に合わせて保護部材5に切り欠きを設けることで、この浮き上がりを防止することもできる。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
本発明のデバイスの使用は、例えば以下の工程によって順次行うことができる。
(1)脆弱物および液体が収容された容器を用意する。
(2)容器の底面に環状部材を載置する。
(3)保護部材を環状部材上に載置する。
(4)蓋部材を容器に取り付けて液密状態を形成する。
(5)デバイスを移送する。
(6)蓋部材を取り外す。
(7)保護部材を取り外して液密状態を解除する。
(8)脆弱物を取り出して使用する。
(1)脆弱物および液体が収容された容器を用意する。
(2)容器の底面に環状部材を載置する。
(3)保護部材を環状部材上に載置する。
(4)蓋部材を容器に取り付けて液密状態を形成する。
(5)デバイスを移送する。
(6)蓋部材を取り外す。
(7)保護部材を取り外して液密状態を解除する。
(8)脆弱物を取り出して使用する。
以下、本発明のデバイス1(容器2および蓋部材3)を押圧して挟持するのに好適な挟持具の実施形態について、図面を参照しつつ詳細に説明する。
図3は、本発明の第2実施形態に係る挟持具7の斜視図、図4は、本発明の第3実施形態に係る挟持具7Aの斜視図、図5は、本発明の第4実施形態に係る挟持具7Bの斜視図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
図3は、本発明の第2実施形態に係る挟持具7の斜視図、図4は、本発明の第3実施形態に係る挟持具7Aの斜視図、図5は、本発明の第4実施形態に係る挟持具7Bの斜視図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
〔第2実施形態〕
図3に示すように、本実施形態に係る挟持具7は、ベース部材8およびカバー部材9を含む。挟持具7は、容器2(図示せず)および容器2を密閉するための蓋部材3(図示せず)を含むデバイス1を上下から挟み込むように押圧して挟持することができる。
図3に示すように、本実施形態に係る挟持具7は、ベース部材8およびカバー部材9を含む。挟持具7は、容器2(図示せず)および容器2を密閉するための蓋部材3(図示せず)を含むデバイス1を上下から挟み込むように押圧して挟持することができる。
ベース部材8およびカバー部材9は、共に円形形状を有しており、デバイス1を上下から適切に押圧することができる。ベース部材8は、開口部81、底部82、螺合部(係合部)83、載置部84および突条部85を含む。本実施形態において係合は螺合である。載置部84は、容器2を載置することができる載置面を上面に有し、中央部には開口部81が設けられている。載置部84は、容器2を載置面に載置した際に容器2の下端を取り囲む環状の突条部85(細長いリッジ)を有し、ベース部材8に対する容器2の設置位置を画定することができる。載置部84は、底部82から上方に突出する円盤形状を有しており、その側周面には螺合部83が設けられている。底部82は、載置部84の外径より大きな外径を有しており、テーブルなどにベース部材8を設置する際の底部としての役割を果たす。
カバー部材9は、開口部91、天部92、螺合部(係合部)93、筒状スカート壁94およびグリップ部95を含む。天部92は、蓋部材3の上面を覆うことができるカバー面を有し、中央部には開口部91が設けられている。天部92は、天部92の周縁から垂下する筒状スカート壁94を含み、天部92、筒状スカート壁94および載置部84で、デバイス1を取り囲むようにして挟持することができる。筒状スカート壁94下端部の内周面には螺合部93(図示せず)が設けられており、かかる螺合部93をベース部材8の螺合部83と螺合させることにより、カバー部材9をベース部材8に螺着させることができる。任意に、筒状スカート壁94の少なくとも一部(例えば、筒状スカート壁94上端部の内周面)の内径を、蓋部材3の外径と合わせることにより、挟持具7に対する蓋部材3の設置位置を画定させることもできる。
挟持具7を使用する際は、収容物Sが収容された容器2に蓋部材3を被せる。この際に、任意に、容器2内を液体Lで満たした状態で蓋部材3を被せることで、密閉空間(液密空間)を形成することもできる。また、任意に、容器2と蓋部材3との間にシール部材6を介在させて密閉性を高めたり、上記のように容器2と蓋部材3との間に、環状部材を介在させたりして、液密空間を形成することもできる。次に、容器2をベース部材8に設置するが、この際に、突条部85を利用して容器2を載置部84の中央に位置決めすることができる。また、ベース部材8の螺合部83は、載置部84より下側に設けられている、すなわち、螺合部83が容器2の側面を取り囲む構造ではないため、容器2を載置部84に設置/除去する際に、容器2を横方向にスライドさせることで振動を抑えることができる。次に、カバー部材9をベース部材8に取り付けるが、この際に、筒状スカート壁94を利用して蓋部材3をカバー部材9(およびベース部材8)の中央に位置決めすることもできる。
このように、挟持具7は、ベース部材8の突条部85と、カバー部材9の筒状スカート壁94とを利用して、容器2と蓋部材3との相対位置を画定することができる。デバイス1を挟持する際には、ベース部材8の螺合部83と、カバー部材9の螺合部93とを螺合させる。この際に、筒状スカート壁94の外周面に突出部(溝部でもよい)として設けられているグリップ部95を把持して螺合作業を行うことにより、容器2と蓋部材3とを上下から強い力で締め付けることができる。これは、例えば、容器2が汎用シャーレのような螺合部を有さない容器である場合の使用に適しており、汎用性が高い。また、蓋部材3を容器2に対して回転(螺合)させないように構成でき、容器2と蓋部材3との間に介在させた保護部材5に蓋部材3の回転力が及ばないため、特に有利である。そして、特に、弾性のシール部材6や環状部材4を介在させている場合に、正確に相対位置が確定された容器2と蓋部材3との間で、これらの部材が正確に圧縮されて密閉性が高まるため有利である。カバー部材9は、ベース部材8の螺合部83の高さ分だけ螺合させればよく、挟持作業が容易である上に、挟持圧力を容易に調節できるため、デバイス1を破壊するなどの問題を防止することができる。
ベース部材8およびカバー部材9は、共に中央部に開口部81、開口部91を有しているため、デバイス1の固定位置や、デバイス1内に収容されている液体Lや収容物Sなどの状態を常時観察することができる。これは、容器2および蓋部材3が、光透過性の材料で構成されている場合に、特に有利である。そして、移植片が、シート状細胞培養のような視認性が低い物であっても、一方の開口部から光を放射し、他方の開口部からシート状細胞培養を視認できるため、有利である。また、上記のように液密空間を形成する場合は、開口部91を介して容器2内に気泡や異物などが混入していないかを確認しながら、蓋部材3を容器2に押し付けることができる。次に、デバイス1を移送するが、デバイス1は、挟持具7で強固に挟持されているため、移送中の揺れなどによって蓋部材3が容器2から外れるなどの問題を防止でき、周囲が挟持具7で取り囲まれているため、外部からの衝撃から保護される。最後に、移送先でデバイス1から挟持具7を取り外して使用する。
本発明を図示の実施形態について説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。例えば、螺合部83および螺合部93は、スライド係合(例えば、特開2006-315757参照)、フランジ嵌合(例えば、特開2006-001582参照)、突条係合(例えば、特開2016-203985参照)など、デバイス1を上下方向から押圧する機能を有する他の係合手段に置き換えることができる。環状の突条部85は、環状に配置された複数の突起など、容器2を載置面上で位置決めできる他の手段に置き換えることができる。収容物Sとして、例えば、脆弱物(例えば、シート状細胞培養の積層体)を収容することもでき、この場合は、容器2内を液密にすることで脆弱物の形状を保持しながら移送することもできる。
〔第3実施形態〕
次に、本発明の第3実施形態について説明する。以下、第2実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
次に、本発明の第3実施形態について説明する。以下、第2実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
図4に示すように、本実施形態に係る挟持具7Aは、ベース部材8Aおよびカバー部材9Aを含む。本実施形態において、ベース部材8Aは、突設壁86、溝部87および切り欠き部88をさらに含む。突設壁86は、突条部85の外側に複数設けられる、載置部84から容器2の高さを越えて突設された壁である。ベース部材8Aの底部82下面には、溝部87が設けられており、ベース部材8Aをテーブルなどに設置した際に、ベース部材8Aが作業面に張り付くことを防止することができる。
挟持具7Aを使用する際は、容器2(図示せず)を突条部85を利用してベース部材8の中央に位置決めする。次に、容器2に蓋部材3(図示せず)を被せる際に、蓋部材3を突設壁86に沿わせることで、蓋部材3をベース部材8の中央に位置決めすることができる。すなわち、作業者は、ベース部材8Aの突条部85と突設壁86とを利用して、容器2と蓋部材3との相対位置を画定することができる。これは、特に、容器2と蓋部材3との間に環状のシール部材6や環状部材4を介在させている場合に、これらの部材を正確に押圧できるため有利である。
次に、デバイス1(図示せず)を挟持するが、この際に、カバー部材9Aから放射状に突出する突出部として構成されているグリップ部95と、ベース部材8Aの底部82側面に設けられている切り欠き部88とを把持することで螺合作業を容易に行うことができる。デバイス1を使用する際は、カバー部材9Aの螺合を解除してデバイス1をベース部材8Aから取り外すが、この際に、複数の突設壁86の隙間からデバイス1が露出しているためデバイス1を掴みやすい。また、複数の突設壁86は、容器2を取り囲むように配置されているため、蓋部材3を容器2に対して正確に位置決めすることができる。
〔第4実施形態〕
次に、本発明の第4実施形態について説明する。以下、第2実施形態および第3実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
次に、本発明の第4実施形態について説明する。以下、第2実施形態および第3実施形態との相違点について詳細に説明し、同様の事項については、説明を省略する。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
図5に示すように、本実施形態に係る挟持具7Bは、カバー部材(図示せず)と、ベース部材8Bとを含む。ベース部材8Bは、載置部84B、突条部85Bおよび突設壁86Bを含む(他の構成の説明は省略)。突条部85Bは、載置部84B上に半環状に配置されている。突設壁86Bは、突条部85Bの外側に半環状に配置されており、一部に切り欠き(隙間)Cが設けられている(2以上の突設壁86Bを半環状に隙間を設けて配置してもよい)。すなわち、本実施形態において、載置部84Bの載置面の片側半分(突条部85Bおよび突設壁86Bの反対側半分)は、平坦な面として構成されている。
挟持具7Bを使用する際は、容器2(図示せず)を突条部85Bおよび突設壁86Bの反対側から横方向(突条部85Bおよび突設壁86Bの方向)にスライドさせるようにして設置する。この際に、容器2を載置部84Bの平坦な面上で滑らせることで、容器2の不用意な振動を抑えることができる。次に、蓋部材3(図示せず)を容器2に取り付けるが、この際に、蓋部材3をベース部材8Bの突設壁86Bに押し付けることで、蓋部材3を容器2に対して正確に位置決めすることができる。デバイス1(図示せず)を使用する際は、デバイス1をベース部材8Aから取り外すが、この際に、切り欠きCから露出しているデバイス1(容器2および/または蓋部材3)の側面を押し込むことで、デバイス1を平坦な面上でスライドさせるようにして取り外すことができる。デバイス1をベース部材8A上でスライドさせる際のスライド方向が分かりやすいように、載置部84B上の切り欠きCと対向する側に目印となる突起部89を設けてもよい。これにより、デバイス1を突起部89と切り欠きCとの間でスライドさせるだけで、デバイス1を載置部84B上に正確に位置決めすることができる。また、突起部89を突条部85Bの延長線上に、切り欠きCと対向するように配置し、デバイス1の側面が突起部89で係止されるように構成することで、デバイス1がズレないようにすることもできる。
以上、本願発明の第1~3実施形態に係る挟持具によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よく容器と蓋とを密着させることができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。また、容器内の収容物を外側から視認できるため、収容物の状態や異物の混入などを簡単に確認することができる。さらに、容器と蓋部材との相対的な位置関係を正確に合わせることができるため、密閉性が高まる。特に、容器と蓋部材との間に弾性のシール部材6や環状部材4を介在させる場合は、これらの部材を正確に押圧することができるため、密閉性がより高まる。
また、本発明の挟持具によれば、容器と蓋部材とを確実に密着させて固定できるため、移送中に蓋部材が容器から外れるなどの問題を防止できる。特に、収容物がシート状細胞培養物の積層体である場合に、容器内を確実に液密状態にして移送することができ、容器内に気泡が入り込んで移動し、積層体がズレたり欠損したりすることが防止でき、その形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
本発明は上記の実施形態に限定されるものではなく、当業者は、上記の実施形態1~3に係る挟持具の各構成およびその形状を好適に組み合わせて、異なる構成や形状を有する挟持具を実現することができる。例えば、カバー部材9またはカバー部材9Aを、ベース部材8、ベース部材8Aまたはベース部材8Bと組み合わせてもよいし、突条部85、突条部85B、突設壁86または突設壁86Bを、ベース部材8、ベース部材8Aまたはベース部材8Bと組み合わせてもよい。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
1 デバイス
2 容器
21 縁部
3 蓋部材
31 凸部
32 天部
33 底面
34 筒状スカート壁
4 環状部材
5 保護部材
6 シール部材
2 容器
21 縁部
3 蓋部材
31 凸部
32 天部
33 底面
34 筒状スカート壁
4 環状部材
5 保護部材
6 シール部材
7,7A,7B 挟持具
8,8A,8B ベース部材
81 開口部
82 底部
83 係合部
84 載置部
85,85B 突条部
86,86B 突設壁
87 溝部
88 切り欠き部
89 突起部
8,8A,8B ベース部材
81 開口部
82 底部
83 係合部
84 載置部
85,85B 突条部
86,86B 突設壁
87 溝部
88 切り欠き部
89 突起部
9,9A カバー部材
91 開口部
92 天部
93 係合部
94 筒状スカート壁
95 グリップ部
91 開口部
92 天部
93 係合部
94 筒状スカート壁
95 グリップ部
Claims (8)
- 移植片を収容するための容器に着脱可能に装着して用いるデバイスであって、容器を密閉するための蓋部材と、蓋部材と容器との間に介在させて第一空間を形成するための環状部材とを含み、蓋部材と容器内側面との間に第二空間が形成される、前記デバイス。
- 容器と蓋部材との間に介在するシール部材をさらに含む、請求項1に記載のデバイス。
- 環状部材と蓋部材との間に介在して第一空間を保護する保護部材をさらに含む、請求項1または2に記載のデバイス。
- 保護部材が可撓性を有する、請求項3に記載のデバイス。
- 保護部材および/または蓋部材に撥水加工が施されている、請求項3または4に記載のデバイス。
- 移植片がシート状細胞培養物である、請求項1~5のいずれか一項に記載のデバイス。
- シート状細胞培養物が、積層体である、請求項6に記載のデバイス。
- 請求項1~7のいずれか一項に記載のデバイスを上下から押圧して挟持できるように構成されているカバー部材とベース部材とを含む、挟持具。
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NENP | Non-entry into the national phase |
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