WO2019139214A1 - 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

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WO2019139214A1
WO2019139214A1 PCT/KR2018/009805 KR2018009805W WO2019139214A1 WO 2019139214 A1 WO2019139214 A1 WO 2019139214A1 KR 2018009805 W KR2018009805 W KR 2018009805W WO 2019139214 A1 WO2019139214 A1 WO 2019139214A1
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skin
weight
microalgae extract
cosmetic composition
algae
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김차중
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(주)알렌바이오
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    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition containing an algae containing a microalgae extract.
  • the skin cells are active physiologically.
  • synthesis and metabolism of collagen important for suppressing the elasticity and wrinkle formation of the skin are active, and also, it is necessary for the skin including the hyaluronic acid GAGS (Glucosaminoglycans), a protein, is also actively synthesized, which can impart elasticity, softness, flexibility and moisturizing properties to the skin.
  • GAGS Glucosaminoglycans
  • proliferation of basal layer cells is active, and the production of binding proteins such as laminin, integrin, and desmosomes that enhance binding between skin cells is balanced Strengthens skin tissue to maintain healthy skin.
  • reactive oxygen radicals and free radicals which are generated due to increase of ultraviolet ray amount, air pollution and excessive fatigue and stress of modern people, oxidize or denature biological components (protein, nucleic acid, cell membrane lipid, etc.)
  • free radicals As the main cause of the rise, interest in free radicals is increasing.
  • the biosynthesis of various biologic antioxidants decreases, and oxidative stress due to various radicals is exposed to the harmful environment such as pollution of the atmospheric environment, unhealthy diet, ultraviolet ray exposure, stress and disease It becomes difficult to erase sufficiently, and when exposed to such oxidative stress, the skin ages and changes variously such as wrinkles, decreased elasticity, stain, freckles, and drying.
  • U.S. Patent Nos. 4603146 and 4877805 disclose examples using retinoids (vitamin A).
  • retinoids vitamin A
  • retinol is very limited in the cosmetic field due to the problem that it is discolored, detached, and titered because it is prescribed to the product and its effect is decreased and skin irritation is caused despite the use of a small amount.
  • U.S. Patent No. 3,906,108 discloses an oil-in-water (O / W) emulsifier type in which retinoic acid is stabilized by using BHT, dl- ⁇ -tocopherol as an oil-oxidizing agent and EDTA as a chelating agent
  • retinol which comprises retinol, retinyl acetate, and retinyl palmitate using BHT and BHA, which are oil-soluble oxidizing agents, in order to stabilize retinol by using citric acid and tocopherol
  • BHT and BHA oil-soluble oxidizing agents
  • United States Patent 4,720,353 discloses a water-in-oil type in which retinol is stabilized by using antioxidants such as BHA, ascorbic acid and tocopheryl linoleate.
  • an oil-in-water type emulsion composition containing at least one water-soluble antioxidant, at least one oil-soluble antioxidant, and a chelating gel is disclosed in order to improve the chemical stability of retinoids.
  • European Patent No. 1568106A1 discloses a retinoid A water-soluble antioxidant, an oil-in-water type emulsion composition containing an antioxidant and an free base type imidazole simultaneously present in an oil phase and an aqueous phase of an emulsion, and a chelating agent and an oil-soluble antioxidant.
  • Liposomes are widely used not only in the pharmaceutical field but also in cosmetics and foods. This has the advantage that the physiologically active ingredient can be stably delivered without breakage, and that the physiologically active ingredient can be both lipid-soluble and water-soluble. Liposomes are divided into multilamellar vesicles (MLV) and unilamellar vesicles (ULV). ULV can be divided into Large Unilamella vesicles and Small Unilamella vesicles.
  • MLV multilamellar vesicles
  • ULV can be divided into Large Unilamella vesicles and Small Unilamella vesicles.
  • the size of MLV is 400 ⁇ 3,500nm, the content of liposome is 5 ⁇ 15%, the size of LUV is 100 ⁇ 1,000nm, the content of liposome is 36 ⁇ 65% Is 20 to 50 nm and the amount that can be contained in the liposome is 0.5 to 1.0%.
  • the amount of physiologically active substance that can be contained is the most LUV but unstable, the SLV is the most stable, but the amount that can be contained is small.
  • a cell membrane with a bilayer structure in the form of a multilamellar vesicle is a constituent of all cells and distinguishes the inside and the outside of the cell.
  • the cell membrane is a thin, structured phospholipid bilayer composed of phospholipids and protein molecules, and has selective permeability.
  • Cell surface membranes also have receptor proteins and cell adhesion proteins (membrane proteins).
  • membrane proteins There are other proteins that perform other functions, and these proteins play a very important role in maintaining constant cell function and organization at all times. In animal cells, cell membranes perform this role alone, whereas in yeast, bacteria, and plants, cell walls form the outermost boundaries and provide physical protection.
  • the cell membrane is approximately 10 nanometers thick and can be faintly separated by transmission electron microscopy. Another important role of cell membranes is to maintain cell potential.
  • the basic structure and structure of cell membranes are the same as those of membranes surrounding other cell organelles.
  • the cell membrane is composed of two layers of phospholipid, a phospholipid bilayer, and the cell membrane is described as a flow mosaic structure.
  • a flow mosaic is a two-dimensional flow in which lipids float freely and has a protein acting as a channel or receptor across the cell membrane.
  • This cell membrane model was developed in 1971 by S.J. Singer proposed a lipid protein model, and in 1972 G.L. Nicolson has attached carbohydrates to present its flow properties. Cells vary in the type and amount of lipids to maintain cell membrane fluidity.
  • Cholesterol molecules (in the case of eukaryotic cells) or hopanoids (in the case of prokaryotes) inside the bilayer help to maintain fluidity.
  • all lipid molecules inside the cell membrane are not fluids in the sense that they can diffuse freely. That is, Caveola is relatively fixed in the cell membrane region, and many proteins do not diffuse.
  • the cytoskeleton supports the cell membrane, immobilizes the intracellular proteins, directs them to a specific surface, and also limits the extent to which proteins can move within the cell membrane.
  • the cell membrane surface always shows some structure, not a fluid that moves without form. Synapse is an example of a more structural cell membrane.
  • the new material is contained in or removed from the cell membrane in a number of ways: For example, the fusion of intercellular vesicles not only secretes vesicle internals, but also includes the vesicle membrane material into the cell membrane, which in turn forms vesicles that eventually become vesicles.
  • the cell membrane has a tubular structure, the material from the tube can be absorbed into the cell membrane.
  • molecular exchange is possible in these aqueous materials, even if the concentration of aqueous material in the cell membrane is low (stable cell membrane constituents are not well soluble in water).
  • the cell membrane tension affects the exchange rate of the material.
  • the cell membrane tension and area are related to elasticity and fluidity, respectively. The association with time is called homeostasis, which is how much the area or tension is constant over time.
  • MLV which has a multilamellar structure similar to the cell membrane structure of the skin, has affinity with the skin but is too large to penetrate the skin.
  • Korean Patent No. 10-0750870 discloses a method of extracting seaweed extracts from Salina species of the genus Dunaliella with Dunaliellaceae of Chlamydomonadales neck of Chlorophyceae And a cosmetic composition for improving skin transparency.
  • microalgae extract can be effectively used as an active ingredient of a skin anti-aging cosmetic composition in accordance with this purpose while seeking a substance for improving skin aging, and completed the present invention.
  • the present invention complements the disadvantages of conventional MLV liposomes which have disadvantages when using the above-described high-pressure emulsification device and have skin and affinity but are too large to penetrate the skin, thereby assuring skin-friendly and physiologically active ingredients as much as possible (Algaesome), which is easy to manufacture as well as being able to make microalgae extracts at room temperature to stabilize and penetrate into the skin.
  • the present invention relates to a cosmetic composition for preventing skin aging and containing an algae containing a microalgae extract in a lipid complex.
  • the algae contain a microalgae extract in a lipid complex consisting of phospholipid, phytosphingosine, ceramide 3, cholesterol, phytosterol, beta-sitosterol and squalene.
  • the algae comprises 0.01 to 30.0% by weight phospholipid, 0.01 to 10.0% by weight phytosphingosine, 0.01 to 50.0% by weight of ceramide 3, 0.01 to 30.0% by weight of cholesterol, 0.01 to 30.0% by weight of phytosterol 0.01 To 20.0% by weight, beta to sitosterol 0.01 to 10.0% by weight, squalene 0.01 to 80.0% by weight and microalgae extract 0.01 to 50.0% by weight.
  • the cosmetic composition for anti-aging has at least one of an effect of improving skin wrinkles, a skin elasticity improving effect, and a skin moisturizing effect.
  • the algae are contained in an amount of 0.01 to 100.0% by weight based on the total weight of the total cosmetic composition.
  • the above-mentioned algosa is dissolved at high pressure to form a lipid complex in the form of a translucent gel, and the lipid complex is formed at room temperature.
  • the lipid complex may be prepared by dissolving phosphatidylserine, phytosphingosine, ceramide 3, cholesterol, phytosterol, beta-sitosterol, And a microalgae extract.
  • the microalgae extract is cultured with Dunaliella Salina .
  • the cosmetic composition is selected from the group consisting of solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays And may have a formulation to be selected.
  • the cosmetic of the present invention can contain a microalgae extract in an algae and stabilize it, so that the skin transfer effect is superior to that of a conventional liposome-capturing cosmetic, and thus, a better anti-aging effect of the skin can be obtained.
  • the active ingredient of the microalgae extract is stabilized at the alum size at room temperature, destruction of the active ingredient can be prevented.
  • FIG. 1 shows particle distributions of algae containing microalgae extract prepared in Example 1 according to the present invention.
  • FIG. 2 is a polarized microscope photograph of algae containing the microalgae extract prepared in Example 1.
  • FIG. 2 is a polarized microscope photograph of algae containing the microalgae extract prepared in Example 1.
  • the present invention relates to a skin anti-aging cosmetic composition containing algaesome containing microalgae extract which improves the skin aging phenomenon.
  • prevention of skin aging is used in a broad sense to include wrinkle improvement, elasticity enhancement effect, skin moisturizing effect and skin regeneration effect.
  • the microalgae extract includes all the extracts obtained by culturing microalgae.
  • the microalgae extract may be extracted with one or more extraction solvents selected from the group consisting of various extraction solvents available in the art, for example, purified water, alcohol, butylene glycol, glycerin, acetate, , Preferably ethanol or purified water, and more preferably can be extracted using purified water.
  • extraction solvents selected from the group consisting of various extraction solvents available in the art, for example, purified water, alcohol, butylene glycol, glycerin, acetate, , Preferably ethanol or purified water, and more preferably can be extracted using purified water.
  • microalgae extract according to the present invention includes an ultrasonic extract.
  • Ultrasonic extraction may be carried out by extracting microalgae in an extraction solvent, for example, an extraction solvent selected from the group consisting of purified water, alcohol, butylene glycol, glycerin, acetate, hexane and the like, followed by extraction with an ultrasonic extractor.
  • microalgae refers to a single-celled plant, often referred to as phytoplankton, which is only observable by microalgal microscopy and has no roots, stems, or leaves.
  • phytoplankton a single-celled plant
  • blue-green, yellow, red, and brown, depending on the pigment are typical microalgae such as diatoms and dinoflagellates.
  • a closed photobioreactor system capable of producing an expensive physiologically active substance and culturing at a high concentration was used.
  • the photobioreactor used in the present invention maximizes the surface area per unit volume to efficiently transmit light, selects an effective light source that can increase the utilization efficiency of the total light energy, and transmits light efficiently from the light source to the cell. Thereby maximizing the concentration.
  • algae in the present invention means a case where a vesicle containing a microalgae extract is captured and stabilized.
  • the alges according to the present invention can be used as a main lipid component constituting the cell membrane such as phospholipid, phytosphingosine, ceramide 3, cholesterol Dissolving cholesterol, phytosterol, beta-sitosterol and squalene at high pressure to prepare a lipid complex in the form of a translucent gel; and mixing the lipid complex and the microalgae extract at room temperature . ≪ / RTI >
  • the main lipid components constituting the cell membrane are phospholipid, phytosphingosine, ceramide 3, cholesterol, phytosterol, ⁇ -sitosterol ) And squalene are dissolved at high pressure using a high-pressure emulsifier (Microfludizer) to make a translucent gel-like lipid complex.
  • a high-pressure emulsifier Microfludizer
  • an appropriate amount of the lipid complex is added to an aqueous solution in which the microalgae extract is dispersed at room temperature to obtain an algae containing the microalgae extract of the present invention having a closed double-layer structure.
  • the temperature of the reaction process proceeds at room temperature.
  • the conventional liposome manufacturing process using a high-pressure microfludizer has a disadvantage in that heat stability of temperature-sensitive components can not be secured due to the formation of liposomes at a high temperature (60 ° C or higher).
  • the present invention differs from the use of a high pressure emulsification apparatus for mixing liposome composites, but the use of a high pressure emulsification apparatus for forming liposomes of the prior art.
  • a lipid complex dissolved and mixed in a high-pressure emulsification apparatus is formed, and they form a vesicle in an aqueous solution phase and form an algae by inlaying an effective ingredient, i.e., a microalgae extract, dispersed in an aqueous solution .
  • the content of the microalgae extract may be 0.001 to 50.0% by weight, preferably 0.1 to 20.0% by weight based on the total weight of the algae.
  • the phospholipid constituting the algae is contained in an amount of 0.001-30.0% by weight, preferably 0.1-10.0% by weight, based on the total weight, based on the total weight of the algae.
  • Phytosphingosine is contained in an amount of 0.01-10.0% by weight, preferably 0.1-5.0% by weight, based on the total weight of the algae.
  • Ceramide 3 is contained in an amount of 0.01 to 50.0% by weight, preferably 0.1 to 30.0% by weight based on the total weight of algae.
  • Cholesterol is contained in an amount of 0.01-30.0% by weight, preferably 0.01-20.0% by weight, based on the total weight of the algae.
  • Phytosterol is contained in an amount of 0.01-20.0% by weight, preferably 0.1-10.0% by weight, based on the total weight of the algae.
  • the beta-sitosterol is contained in an amount of 0.01-10.0% by weight based on the total weight of the algae, preferably 0.1-5.0% by weight based on the total weight.
  • Squalene content is 0.01-80.0 wt% based on the total weight of algae, preferably 0.1-50.0 wt% based on the total weight.
  • the average droplet size of the algae thus prepared is 20 to 500 nm, preferably 50 to 200 nm, and most preferably 80 to 150 nm.
  • average droplet size of the above algae exceeds 500 nm, skin penetration and formulation stability are very weak.
  • ALGAESOME may be contained in an amount of 0.01 to 100.0% by weight, preferably 0.1 to 20.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
  • the components contained in the cosmetic composition of the present invention may contain, in addition to the microalgae extract, various components which maintain the activity of the biological component, components commonly used in cosmetic compositions such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins , Customary adjuvants such as pigments and flavoring agents, and carriers, and the like.
  • the cosmetic composition containing the alginate containing the microalgae extract of the present invention is not particularly limited in its formulation and may be, for example, softening lotion, astringent lotion, nutritional lotion, eye cream, serum, It can be applied to the formulations of massage cream, cleansing cream, cleansing lotion, cleansing foam, cleansing water, body cleanser, body lotion, body cream, powder, essence, pack, hair tonic, hair treatment, shampoo, rinse, Lt; / RTI >
  • the other ingredients for further enhancing the efficacy in addition to the algae containing the microalgae extract may be selected and mixed without difficulty by those skilled in the art depending on the formulation or use purpose of other cosmetics.
  • the microalgae used for the present invention were Dunaliella Salina from KMMCC (Korea Marine Microalgae Bank), and the medium used for culture was F / 2 medium (Guillard and Ryther 1962) And sterilized at 121 ⁇ ⁇ for 15 minutes.
  • the cultured microalgae were centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes, and the supernatant containing the medium was discarded. Only the microalgae were separated, followed by centrifugation at 10,000 rpm for 10 minutes by adding purified water. The supernatant was discarded, The microalgae of the present invention are obtained. Add purified water to the obtained microalgae and sonicate (1min on, 30seconds off, 22.5kHz) 10 times. After sonication, centrifuge at 10,000 rpm for 10 minutes to separate the supernatant except for the precipitate, and centrifuge again at 10,000 rpm for 5 minutes. The supernatant thus obtained was filtered with a 6 ⁇ m filter to prepare microalgae extract of the present invention.
  • Algaesome has the same contents as in Table 1 below, such as phospholipid, phytosphingosine, ceramide 3, cholesterol, phytosterol, beta-sitosterol ⁇ -sitosterol and squalene were passed through a high-pressure microfludizer three times at a pressure of 1,000 bar to form a translucent gel-like lipid complex.
  • a solution in which a microalgae extract (Preparation Example 1) was dispersed on an aqueous solution was prepared. Next, at the room temperature, the lipid complex was added to the aqueous solution containing the microalgae extract to prepare the microalgae extract-captured algae.
  • the following experiment was conducted to examine the particle size distribution of the algae particles containing the microalgae extract of the present invention.
  • the particle size of the alumina particles was analyzed by using a Zetasizer NS apparatus and the results are shown in the graph of FIG.
  • the average particle size of the obtained algae is 120 nm, which is smaller than that of the liposome prepared using the conventional high pressure emulsifier (microfluidizer), and the homogeneity of the particle size can be improved and the stability can be improved.
  • FIG. 2 shows an SEM photograph of the algae (Preparation Example 2) containing the microalgae extract prepared according to the present invention.
  • Example 1 a composition (Example 1) containing the alginate containing the microalgae extract prepared in Preparation Example 2 and a composition containing the existing liposome containing the microalgae extract (Comparative Example 1) were prepared.
  • Comparative Preparation Example 1 The conventional liposome used in Comparative Example 1 (Comparative Preparation Example 1) was prepared by mixing 3.0 wt% of phospholipid, 10.0 wt% of propylene glycol, 10.0 wt% of ethyl alcohol, 3.0 wt% of mineral oil and 64 wt% of purified water, , And then 10.0% by weight of the microalgae extract was poured into the above-mentioned solution, stirred, and then passed through a high pressure microfludizer at a pressure of 1,000 bar twice.
  • Example 1 Comparative Example 1 Totally 0.2 0.2 Algussa (Preparation Example 2) 10.0 - Liposome (Comparative Preparation Example 1) - 10.0 A Arachidyl alcohol 3.0 3.0 Glyceryl stearate 1.5 1.5 Squalane 5.0 5.0 Hydroxypolydecin 2.0 2.0 Trioctanoin 5.0 5.0 Polysorbate 80 1.0 1.0 Sorbitan stearate 0.5 0.5 Cyclopentasiloxane 3.0 3.0 Tocopheryl acetate 0.2 0.2 BHT 0.05 0.05 B Purified water Balance Balance Concentrated glycerin 4.0 4.0 1,3-butylene glycol 2.0 2.0 Dimethicone / Vinyl Dimethicone Crosspolymer 0.4 0.4 EDTA-2Na 0.05 0.05 Incense, preservative Suitable amount Suitable amount system 100 100 100
  • the skin wrinkle improving effect (mechanical evaluation) of the cosmetic containing the alginate containing the microalgae extract of the present invention was measured.
  • Example 1 was compared to Group B, and Comparative Example 1 was divided into 2X2 cm2 (SKIN VISIOMETER SV400, C + K Electronics GmbH, Germany) with replica of skin wrinkle using a transparent silicone solution while applying for 8 weeks (twice / day, 0.2g / Changes in skin wrinkles were measured.
  • the replica image is three-dimensionally analyzed with a CCD camera, and the average roughness roughness (R z ) of the following formula (1), which is a value obtained by dividing the sum of roughnesses of respective wrinkles (R m : m is an integer of 1 or more)
  • the wrinkle improvement effect was analyzed. Test results for the effect of improving skin wrinkles after 6 weeks are shown in Table 3 below.
  • Example 1 Comparative Example 1 T0 T8 ⁇ R z T0 T8 ⁇ R z Subject 1 129 62 -67 128 86 -42 Subject 2 128 41 -87 130 78 -52 Subject 3 121 38 -83 124 82 -42 Subject 4 132 55 -77 135 94 -41 Subject 5 120 22 -98 115 46 -69 Subject 6 136 43 -93 130 75 -55 Subject 7 128 36 -92 125 78 -47 Subject 8 121 39 -82 118 69 -49 Subject 9 129 43 -86 122 91 -31 Subject 10 125 41 -84 117 78 -39 Average -84.9 -46.7
  • Example 1 the average wrinkle roughness (R z ) after 8 weeks was 84.9 ⁇ m lower for cosmetics containing algae containing microalgae extract (Example 1) (p ⁇ 0.01)
  • the wrinkles were improved by about 81.8% as compared with Comparative Example 1 containing the ordinary liposome containing microalgae extract. From the above results, it can be seen that Example 1 containing algae containing microalgae extract showed a more effective wrinkle-reducing effect than Comparative Example 1 containing a general liposome stabilized with microalgae extract.
  • Example 1 Comparative Example 1 T0 T8 T0 T8 Subject 1 0 3 0 2 Subject 2 0 3 0 One Subject 3 0 3 0 2 Subject 4 0 2 0 One Subject 5 0 2 0 2 Subject 6 0 3 0 2 Subject 7 0 3 0 One Subject 8 0 3 0 3 Subject 9 0 2 0 2 Subject 10 0 3 0 2 DELTA W (T8-T0) 2.7 1.8
  • Example 1 Comparative Example 1 T0 T8 T0 T8 Subject 1 0 3 0 2 Subject 2 0 2 0 3 Subject 3 0 3 0 One Subject 4 0 2 0 2 Subject 5 0 3 0 2 Subject 6 0 2 0 One Subject 7 0 3 0 3 Subject 8 0 3 0 2 Subject 9 0 2 0 3 Subject 10 0 2 0 One DELTA W (T8-T0) 2.5 2.0
  • Example 1 the objective evaluation by the skilled person and the subjective evaluation by the subject were 2.7 and 2.5, respectively, indicating that the effect of improving wrinkles is excellent.
  • Example 1 of the present invention showed an increase of 50% in the objective evaluation of the expert and 25% in the subjective evaluation of the subject compared to Comparative Example 1 in which the conventional liposome containing the microalgae extract was contained. It can be seen that Example 1 containing the algae of the present invention improves the wrinkles very effectively.
  • the skin elasticity enhancing effect of the cosmetic containing the alginate containing the microalgae extract of the present invention was measured.
  • Example 1 was applied to A group, The skin elasticity was measured using a skin elasticity tester (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germany) after applying Comparative Example 1 around the eye area for 8 weeks (twice / day).
  • the test results are shown in the following Table 6 as the value of? R8 (R8 (8 weeks) -R8 (0 weeks)) of Cutometer SEM 575.
  • the R8 value indicates the nature of viscoelasticity of the skin.
  • the cosmetic composition (Example 1) containing the algae containing the microalgae extract of the present invention was superior to Comparative Example 1 containing the existing liposome containing microalgae extract
  • the elasticity increased by 56.7%, indicating a high skin elasticity improvement effect.
  • the skin moisturizing effect of the cosmetic containing the algae containing the microalgae extract of the present invention was measured.
  • Example 1 The cosmetic composition of Example 1 according to the present invention was divided into group A and the cosmetic composition according to Comparative Example 1 was divided into groups B and 20, (2 times / day) for 6 weeks.
  • the transepidermal water loss (TEWL) value was measured using a TEWAMETER TM210 (C + K electronic GmbH, Germany) with a change in the TEWL value ⁇ TEWL with time, and the change was measured using a CORNEOMETER CM 820 PC .
  • the moisture content of the skin was quantified from 0 to 150 by the change of the electrical conductivity according to the moisture content of the skin using the. The test results are shown in Table 7 below.
  • Example 1 containing algae containing microalgae extract was 1.5 g / hm 2 , which means that the transdermal water loss was significantly improved after 6 weeks compared to Comparative Example 1.
  • the corneometer value obtained by measuring the moisture content of the skin showed that the skin moisturizing effect of Example 1 was increased by 28.0% than that of the Comparative Example.
  • the skin penetration effect of the cosmetic composition containing the alginate containing the microalgae extract of the present invention was measured.
  • Human normal fibroblast 1 ⁇ 10 5 cells / ml Cells were injected into a collagen gel structure similar to the fibrous tissue of the human body.
  • DE Dermal Equivalent
  • Example 1 and Comparative Example 1 of the present invention were applied to artificial dermal tissue of the uppermost layer and cultured for 4 hours. Then, in Example 1 (Example 1) in which the epidermis and dermis of the artificial skin were permeated through DMEM medium containing no carti- And the amount of carotenoid in the microalgae extract contained in the liposome of Comparative Example 1 was analyzed by TLC. At this time, carnitoid was added to the medium so that the carnitide content in the microalgae extract was 200 ⁇ g / 1 ml, and the algae of Example 1 and the liposome of Comparative Example 1 were prepared so that the microalgae extract contained 10.0% of the total weight. Test results for the skin penetration effect are shown in Table 8 below.
  • the formulation stability of the cosmetic composition containing the algae containing the microalgae extract of the present invention was measured.
  • Example 1 and Comparative Example 1 of the present invention were placed in an opaque glass container in a thermostat kept constant at 45 DEG C and stored for 12 weeks, and the completely shaded After storage for 12 weeks in an opaque glass container in a refrigerator, the extent of discoloration and degree of discoloration were compared. The results are shown in Table 9 below. At this time, the degree of product separation and discoloration was classified into the following six grades and evaluated.
  • Example 1 containing algae was stable at 4 < 0 > C and 45 < 0 > C with no discoloration or separation symptoms, whereas Comparative Example 1, which contained normal liposomes, But it is not stable at 45 °C.
  • Example 1 and Comparative Example 1 Twenty subjects (mean age 26.7 years, age range 18 to 30 years) were subjected to a skin patch test on the upper limb using Haye's Test Chamber of Example 1 and Comparative Example 1 of the present invention. Patients with psoriasis, eczema, other skin lesions, pregnant, lactating or contraceptive, and antihistamines were excluded from the study.
  • the test site is wiped with 70% ethanol and dried, and 15 ⁇ g of each of Example 1 and Comparative Example 1 is dropped on the chamber, and then placed on the upper part of the test site to be fixed. After applying the patch for 24 hours and removing the patch, mark the test area with Marking Pen and observe the test area after 24 hours and 48 hours, respectively. The determination was carried out 24 hours and 48 hours after the removal of the patch, and the skin reaction was judged according to the rules of the International Contact Dermatitis Research Group (ICDRG) shown in Table 10 below. The test results are shown in Table 11 below as skin stability.
  • both the example 1 and the comparative example 1 have a mean degree of irritation of 0 and are a safe cosmetic without irritation to the skin.
  • composition of the present invention is not intended to be limited to the following formulation examples.
  • Example 2 10.0 Cetostearyl alcohol 2.0 Glyceryl stearate 1.5 Trioctanoin 5.0 Polysorbate 60 1.2 Sorbitan stearate 0.5 Squalane 5.0 Liquid paraffin 3.0 Cyclomethicone 3.0 Viechti 0.05 Delta-tocopherol 0.2 Concentrated glycerin 4.0 1,3-butylene glycol 2.0 Xanthan gum 0.1 EDITEE-2 EN 0.05 Incense, preservative a very small amount Purified water to 100

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Abstract

본 발명은 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 알게좀은 포스포리피드, 피토스핑고신, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 피토스테롤, 베타-시토스테롤 및 스쿠알렌으로 이루어진 지질복합체에 미세조류 추출물이 포집되어 있어, 피부 전달효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 미세조류 추출물을 함유하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물은 우수한 피부 주름개선효과, 피부탄력증진 및 보습효과를 나타낸다.

Description

미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물
본 발명은 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 노화가 진행되기 전에는 피부세포의 생리활성이 활발하다. 즉, 진피(Dermis)에 있는 섬유아세포(fibroblast)에서는 피부의 탄력 및 주름형성 억제에 중요한 콜라겐(collagen)의 합성과 신진대사가 왕성하며, 또한 피부 수분 유지에 필수적인 히아루론산(Hyaluronic acid)을 포함한 당단백질류인 GAGS(Glucosaminoglycans) 합성도 활발하여 피부에 탄력성, 부드러움, 유연성 및 보습성을 스스로 부여할 수 있다. 또한 표피(Epidermis)에서는 기저세포(basal layer cell)의 증식(proliferation)이 활발하고, 피부 세포간의 결합을 강화시키는 라미닌, 인테그린, 데스모좀과 같은 결합단백질(Adhesion protein)의 생성이 균형적으로 이루어져 피부 세포조직을 강화시켜 건강한 피부를 유지해 준다.
그러나 현대인의 피부는 외부의 각종 유해 환경 및 스트레스에 노출되어 다양한 손상을 받고 있고, 나이가 들면서 피부의 생리활성이 저하되고 손상된 피부의 회복속도가 느려지면서 피부는 탄력저하, 건조, 주름형성, 색소침착, 검버섯, 칙칙함 등의 다양한 피부노화 현상이 나타난다. 따라서 화장료의 가장 큰 목표는 이런 노화증세를 개선하는데 있고, 이를 위한 다양한 화장료가 개발되고 있다.
일반적으로, 피부탄력 감소, 피부주름, 색소침착 등의 피부노화현상은 콜라겐의 파괴, 콜라겐 합성의 감소, 엘라스틴의 소실 및 피부생리 저하에 따른 멜라닌 색소침착 등에 의해서 나타나는 것으로서, 피부 표피와 진피에서 일어나는 현상이라고 볼 수 있다. 최근, 피부 노화방지에 대한 피부 생리학적 연구가 많이 행해지고 있으며, 실제로 화장료에 있어서 피부주름방지를 위해 자외선 차단제, 항산화제, 세포활성촉진제 등이 사용되고 있고, 또한 콜라겐 합성에 따른 피부 주름개선 방법들이 제시되고 있다.
한편, 생화학 및 분자생물학의 발전을 기반으로 하여 우리 생체 내에 존재하는 성장인자와 같은 소량의 신호물질들이 발견되었으며, 이를 기반으로 한 생체의 노화이론이 재정립되고 있는 중이다. 또한, 이 신호물질은 나이가 증가함에 따라 생체 내에서 감소하게 되는데 바로 이 성장인자의 감소가 우리의 노화와 밀접한 관계가 있다는 것이 밝혀지고 있다.
특히, 자외선량의 증가와 대기오염 및 현대인의 과도한 피로와 스트레스 등으로 인해 생성되는 반응성이 높은 활성산소와 자유라디칼은 생체성분(단백질, 핵산, 세포막 지질 등)을 산화시키거나 변성시킴으로써 피부노화를 일으키는 주원인으로 대두되면서 자유라디칼에 대한 관심도 점점 더 높아지고 있다. 그러나, 나이가 들면서 이런 다양한 생체 항산화제의 생합성이 저하되고 대기환경의 오염, 불건전한 식생활, 자외선 노출, 스트레스, 질병 등의 유해환경에 노출됨으로써 여러 라디칼들에 의한 산화적 스트레스(Oxidative stress)를 충분히 소거하기 어렵게 되며, 이런 산화적 스트레스에 계속 노출되면 피부는 노화되어 주름형성, 탄력저하, 기미, 주근깨, 건조등 다양한 변화를 맞게된다.
이러한 피부노화에 대한 문제점을 해결하기 위해 미국 특허공보 4603146, 4877805등에는 레티노이드(비타민 A)를 이용한 사례가 개시되어 있다. 그러나 레티놀은 피부주름 개선 및 방지효과가 매우 우수함에도 제품에 처방되어 변색, 변취, 역가가 떨어져 효과가 떨어지고, 소량 사용에도 불구하고 피부자극이 유발되는 문제점으로 인하여 화장료 분야에서 극히 제한되어 사용되고 있다.
따라서 이러한 레티노이드를 안정화시키기 위한 다양한 연구가 진행되고 있다. 예를 들어, 미국특허 3,906,108에서는 유용성 산화제인 BHT, dl-α-토코페롤과 킬레이트제인 EDTA를 사용하여 레티노익 애씨드를 안정화시킨 수중유(O/W)형의 유화제형이 개시되어 있고, 미국특허 4,247,547에서는 유용성산화제인 토코페롤과, 구연산을 사용하여 레티놀을 안정화시킨 수중유형의 유화제형이 개시되어 있고, 미국특허 4,826,828에서는 유용성 산화제인 BHT, BHA를 사용하여 레티놀, 레티닐아세테이트, 레티닐 팔미테이트를 함유시켜 안정화시킨 유중수형의 유화제형이 개시되어 있고, 미국특허 4,720,353에서는 레티놀을 항산화제인 BHA, 아스코르빅 애씨드, 토코페릴리놀레에이트를 사용하여 안정화시킨 유중수형이 개시되어 있다. 또한, 유럽특허 0440,398 BI에서는 레티노이드의 화학적 안정성을 향상시키기 위해 한종류 이상의 수용성 항산화제, 한종류이상의 유용성 항산화제, 킬레이트젤을 함유한 수중유형 유화조성물이 개시되어 있고, 유럽특허 1568106A1 에서는 레티노이드를 안정화시키는 시스템으로 킬레이트제와 유용성 항산화제, 킬레이트제와 수용성 항산화제, 유화물의 유상과 수상에 동시에 존재하는 항산화제 및 자유 염기형의 이미다졸을 함유하는 수중유형의 유화조성물이 개시되어 있다.
이처럼 주름개선, 보습 및 탄력증진 등을 목적으로 하는 성분들의 효과가 뛰어난 물질들은 안전성 및 안정성에 문제가 있고 반면 안전성 및 안정성이 우수한 성분들은 상대적으로 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등 문제점을 갖고 있다.
리포좀은 현재 제약 분야뿐만 아니라 화장품, 식품 등에도 널리 이용되는 있는 물질이다. 이는 생리활성 성분을 깨지지 않고 안정하게 전달할 수 있고, 생리활성 성분이 지용성이든 수용성이든 모두 내포시킬 수 있다는 장점을 갖고 있다. 리포좀은 크게 다막리포좀(MLV:Multilamella vesicle)과 단막리포좀(ULV:Unilamella vesicle)로 구분되고 ULV는 다사 대단막리포좀(Large Unilamella vesicle)과 소단막리포좀(Small Unilamella vesicle)으로 나눌 수 있다. MLV는 그 크기가 400~3,500nm이고 리포좀 안에 내포시킬 수 있는 양은 5~15%이고, LUV는 그 크기가 100~1,000nm이고 리포좀 안에 내포시킬 수 있는 양은 36~65%이고, SLV는 그 크기가 20~50nm이고 리포좀 안에 내포시킬 수 있는 양은 0.5~1.0%이다. 생리활성 물질을 내포시킬 수 있는 양은 LUV가 가장 많으나 불안정하고, SLV는 가장 안정하나 내포시킬 수 있는 양이 적다.
다막리포좀(MLV:Multilamella vesicle)의 형태인 이중막 구조를 갖고 있는 세포막(Cell Membrane)은 모든 세포가 가지고 있는 구성요소이며, 세포 내부와 외부를 서로 구분해 준다. 세포막은 인지질 및 단백질 분자로 구성된 얇고 구조적인 인지질 이중층으로 되어 있으며, 선택적인 투과성을 지닌다. 세포 표면막은 수용체 단백질과 세포부착 단백질(막단백질)을 지니고 있기도 한다. 이외에도 다른 기능을 수행하는 단백질들도 존재하며, 이러한 단백질은 세포 기능 및 조직 구성을 항시 일정하게 유지하는 데 매우 중요한 역할을 담당한다. 동물 세포에서, 세포막은 이러한 역할을 홀로 수행하는 반면, 효모, 세균, 식물에서는 세포벽이 최외곽 경계를 형성하며, 물리적인 방호력을 제공한다. 세포막은 대략 10 나노미터 두께이며, 투과 전자 현미경으로 희미하게 구분할 수 있다. 세포막의 또 다른 중요한 역할은 세포전위를 유지하는 것이다.
세포막의 기본 구성 및 구조는 다른 세포소기관을 감싸는 막과 동일하다. 세포막은 인지질 이중층이라는 두 겹의 인지질로 구성되어 있으며, 세포막은 유동 모자이크 구조로 설명된다. 유동 모자이크란 지질이 자유롭게 떠다니는 2차원적인 흐름을 의미하며, 내부에는 세포막을 가로지르는 통로 혹은 수용체로 작용하는 단백질을 가지고 있다. 이러한 세포막 모형은 1971년 S.J. Singer가 지질 단백질 모형을 제안하고, 1972년 G.L. Nicolson과 함께 유동 특성을 제시에 탄수화물이 붙어있다. 세포는 세포막의 유동성을 유지하기 위해서 지질의 종류 및 양을 다양하게 변화시킨다. 이중층 내부에 있는 콜레스테롤 분자(진핵세포의 경우)나 hopanoids(원핵세포의 경우)는 유동성을 유지시켜주는 데 도움을 준다. 사실 세포막 내부의 모든 지방 분자는 자유롭게 확산할 수 있다는 의미에서의 유체가 아니다. 즉 카베올라 등은 세포막 영역에 상대적으로 고정되어 있으며, 많은 단백질의 경우는 확산하지 않는다. 세포골격은 세포막을 지지하면서 세포막 내부 단백질을 고정시키고, 특정한 면으로 향하게 해주며, 또한 단백질이 세포막 내부에서 움직일 수 있는 범위를 제한해준다. 세포막 표면은 항상 형태 없이 움직이는 유체가 아니라, 어느 정도의 구조를 보여준다. 시냅스는 보다 구조적인 세포막의 예이다.
새로운 물질은 다음과 같은 여러 가지 방식에 의해 세포막에 포함되거나 혹은 제거된다. 일 예로, 세포간의 소포의 융합은 소포 내부 물질을 분비할 뿐만 아니라 소포막의 물질을 세포막에 포함시키는 것이며, 세포막은 훗날 소포가 되는 수포를 형성하기도 한다. 다른 예로, 세포막이 관상 구조를 가지고 있다면, 관으로부터의 물질은 세포막 속으로 흡수될 수 있다. 또 다른 예로, 비록 세포막 내부에 수성물질의 농도가 낮다고 하더라도(안정된 세포막 구성물은 물에 잘 녹지 않음), 이러한 수성 물질에서 분자 교환이 가능한것이다. 위 모든 경우에서, 세포막의 장력은 물질의 교환 비율에 영향을 미친다. 일부 세포에서, 특히 매끈한 형태를 가지는 세포에서, 세포막의 장력 및 면적은 각각 탄력성 및 유동성과 관련이 있다. 시간에 대한 연관성은 항상성이라고 하며, 즉 시간에 대해 면적이나 장력이 얼마나 일정한가를 의미하는 것이다.
또한, 피부의 세포막 구조와 유사한 다막(Multilamella)의 구조를 갖고 있는 MLV는 피부와 친화력이 있으나 크기가 너무 커 피부 침투가 어렵다.
한국등록특허 제10-0750870호는 녹조강(Chlorophyceae)의 클라이도모나달레스(Chlamydomonadales)목의 듀날리엘라세에(Dunaliellaceae)과의 듀날리엘라(Dunaliella)속의 살리나(Salina)종에서 추출한 해조추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부투명도 개선용 화장료 조성물에 대하여 개시되어 있다.
본 발명자들은 피부 노화를 개선하는 물질을 찾고자 예의 노력하던 중 미세조류 추출물이 이러한 목적에 부합되어 피부 노화방지 화장료 조성물의 유효성분으로 효과적으로 사용될 수 있음을 발견하고 이 발명을 완성하였다.
기존 리포좀 제조 과정은 60℃ 이상의 열이 발생하는 고압유화장치(microflidizer)를 활용함으로써 미세조류 추출물 내에 있는 여러 생리활성 물질들의 열에 의한 안정성에 문제가 있었다. 본 발명은 상기와 같은 고압유화장치를 활용한 경우의 단점 및 피부와 친화력이 있으나 크기가 너무 커 피부 침투가 어려운 기존의 MLV 리포좀의 단점을 보완하여 피부 친화적이며 생리활성 성분들의 활성을 최대한 확보함은 물론 제조가 용이한 알게좀(Algaesome)을 완성하여, 상온에서 미세조류 추출물을 안정화시켜 피부내로 침투시킬 수 있는 기술을 완성하였다.
본 발명의 목적은 미세조류 추출물을 내포하여 안정화한 알게좀을 포함하는 피부 노화방지 효과가 탁월한 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명은 미세조류 추출물을 지질복합체에 내포시킨 알게좀을 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.
바람직하게는, 상기 알게좀은 포스포리피드, 피토스핑고신, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 피토스테롤, 베타-시토스테롤 및 스쿠알렌으로 이루어진 지질복합체에 미세조류 추출물을 내포시킨 것이다.
바람직하게는, 상기 알게좀은 알게좀 총 중량에 대하여 포스포리피드 0.01~30.0 중량%, 피토스핑고신 0.01~10.0 중량%, 세라마이드 3 0.01~50.0 중량%, 콜레스테롤 0.01~30.0 중량%, 피토스테롤 0.01~20.0 중량%, 베타~시토스테롤 0.01~10.0 중량%, 스쿠알렌 0.01~80.0 중량% 및 미세조류 추출물 0.01~50.0 중량%가 함유되어 있는 이다.
바람직하게는, 상기 노화 방지용 화장료 조성물은 피부 주름개선 효과, 피부 탄력 증진 효과 및 피부 보습 효과 중 하나 이상의 효과를 갖는다.
바람직하게는, 상기 알게좀은 전체 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01~100.0 중량% 함유된다.
바람직하게는, 상기 알게좀은 포스포리피드, 피토스핑고신, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 피토스테롤, 베타-시토스테롤, 및 스쿠알렌을 고압에서 용해하여 반투명 젤 형태의 지질복합체를 만드는 단계 및 상온에서 상기 지질복합체와 미세조류 추출물을 혼합하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것이다.
바람직하게는, 상기 미세조류 추출물은 두나리엘라 살리나(Dunaliella Salina)를 배양한 것이다.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖을 수 있다.
본 발명의 화장료는 미세조류 추출물을 알게좀에 내포하여 안정화시킴으로써, 기존 리포좀 포집 화장료보다 피부 전달효과가 우수하여 보다 우수한 피부 노화방지효과를 가져올 수 있다. 또한, 상온에서 미세조류 추출물의 유효성분을 알게좀에 안정화시키기 때문에 유효성분의 파괴를 방지할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 실시예 1에서 제조된 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀의 입자분포를 나타낸 것이다.
도 2는 실시예 1에서 제조된 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀의 편광현미경 사진이다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한, 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, "포함하다" 및 "포함하는"이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.
본 발명은 피부 노화현상을 개선시키는 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀(ALGAESOME)을 함유하는 피부노화 방지 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 피부노화방지란, 포괄적으로 주름개선, 탄력 증진 효과, 피부 보습 효과 및 피부 재생 효과를 포함하는 의미로 사용된다.
본 발명에서 미세조류 추출물은 미세조류를 배양하여 얻을 수 있는 모든 추출물을 포함한다.
예를 들어, 미세조류 추출물은 당해 기술 분야에서 사용가능한 다양한 추출용매, 예를 들어 정제수, 알코올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세테이트, 헥산 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출용매로 추출될 수 있으며, 바람직하게는 에탄올 또는 정제수을 사용하여 추출될 수 있고, 보다 바람직하게는 정제수를 사용하여 추출될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 미세조류 추출물은 초음파 추출물을 포함한다. 초음파 추출은 미세조류를 추출용매, 예를 들어 정제수, 알코올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세테이트, 헥산 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출용매에 넣은 후, 초음파 추출기로 추출할 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "미세조류"는 흔히 피토플랑크톤(phytoplankton)이라고 부르는 단세포성 식물을 의미하며, 미세조류 현미경으로만 관찰 가능하고 뿌리, 줄기, 잎 등의 구조가 없다. 또한, 색소에 따라 Blue-green, Yellow, Red, Brown 등으로 보이고, 대표적인 미세조류로 규조류(Diatoms)와 와편모조류(Dinoflagellates)가 있다.
본 발명의 미세조류 배양 방법으로는 고가의 생리활성 물질을 생산할 수 있고 고농도 배양이 가능한 밀폐형 광생물반응기(closed photobioreactor system)를 사용하였다. 본 발명에 사용한 광생물 반응기는 단위부피당 표면적을 최대화하여 빛의 효율적인 전달을 꾀하고, 전체 빛 에너지의 이용 효율을 높일 수 있는 효과적인 광원의 선택, 광원에서 세포로의 효율적인 빛의 전달을 통하여 균체의 농도를 극대화하였다.
본 발명에서 "알게좀"이란 용어는 미세조류 추출물을 포집하여 안정화시킨 베시클(Vesicle)을 포함하는 경우를 의미한다.
본 발명에 따른 알게좀은 피부 친화적이고 안정적인 베시클(Vesicle)을 제조위해 세포막을 구성하는 주요 지질 성분인 포스포리피드(Phospholipid), 피토스핑고신(Phytosphingosine), 세라마이드 3(Ceramide 3), 콜레스테롤(Cholesterol), 피토스테롤(Phytosterol), 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 및 스쿠알렌(Squalene)을 고압에서 용해하여 반투명 젤 형태의 지질복합체를 만드는 단계 및 상온에서 상기 지질복합체와 미세조류 추출물을 혼합하는 단계를 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.
구체적으로, 세포막을 구성하는 주요 지질 성분인 포스포리피드(Phospholipid), 피토스핑고신(Phytosphingosine), 세라마이드 3 (Ceramide 3), 콜레스테롤(Cholesterol), 피토스테롤(Phytosterol), 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 및 스쿠알렌(Squalene)을 고압유화장치(Microfludizer)를 활용하여 고압에서 용해하여 반투명 젤 형태의 지질복합체를 만든다. 다음으로 상온에서 이 지질복합체 적당량을 미세조류 추출물이 분산된 수용액에 넣고 섞어주면, 폐쇄된 이중층 구조를 가진 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 얻을 수 있다. 이때 반응 공정의 온도는 상온에서 진행된다. 기존의 고압유화장치(microfludizer)를 이용한 리포좀 제조공정이 고온(60℃이상)에서 리포좀이 형성됨으로 인해 온도에 민감한 성분들의 열 안정성을 확보할 수 없는 단점이 있었다. 본 발명은 지질복합체를 형성하는 재료를 혼합하기 위하여 고압유화장치를 사용하지만, 상기 종래기술의 리포좀 형성에 고압유화장치를 사용하는 것과는 다르다. 본 발명에서는 고압유화장치에서 용해되어 혼합된 지질복합체가 형성되고, 이들이 수용액 상(phase)에서 스스로 베시클을 형성하여 수용액 상에 분산되어 있는 유효성분, 즉 미세조류 추출물을 포접하여 알게좀을 형성하게 된다.
본 발명에서 목적하는 효과를 얻기 위하여 미세조류 추출물의 함량은 알게좀의 총 중량에 대하여 0.001 내지 50.0 중량% 함유될 수 있으며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1 내지20.0 중량% 함유될 수 있다.
알게좀을 구성하는 포스포리피드(phospholipid)는 알게좀의 총 중량에 대하여 0.001-30.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-10.0 중량% 함유될 수 있다. 피토스핑고신(Phytosphingosine)은 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-10.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-5.0 중량% 함유될 수 있다. 세라마이드 3 (Ceramide 3)는 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-50.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-30.0 중량% 함유될 수 있다. 콜레스테롤(Cholesterol)은 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-30.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.01-20.0 중량% 함유될 수 있다. 피토스테롤(Phytosterol)은 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-20.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-10.0 중량% 함유될 수 있다. 베타-시토스테롤(β-sitosterol)은 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-10.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-5.0 중량% 함유될 수 있다. 스쿠알렌(Squalene) 함량은 알게좀 총 중량에 대하여 0.01-80.0 중량% 함유되며, 바람직하게는 총 중량에 대하여 0.1-50.0 중량% 함유될 수 있다.
이렇게 제조된 알게좀의 평균 소적 크기는 20 내지 500 nm이며, 바람직하게는 50 내지 200 nm이며, 가장 바람직하게는 80 내지 150nm인 나노화된 리포좀을 의미한다. 상기 알게좀의 평균 소적 크기가 500nm를 초과하는 경우에는 피부 침투 및 제형 안정성이 매우 미약하다.
본 발명에서 목적하는 효과를 얻기 위하여 알게좀(ALGAESOME)은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 100.0 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 20.0 중량%의 양으로 함유될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 미세조류 추출물 이외에 생체성분의 활성을 유지시켜주는 다양한 성분들, 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 세럼, 영양크림, 맛사지크림, 클렌징크림, 클렌징로션, 클렌징폼, 클렌징워터, 바디클렌져, 바디로션, 바디크림, 파우더, 에센스, 팩, 헤어토닉, 헤어트리트먼트, 샴푸, 린스, 여성청결제, 손세정제 등의 제형을 가질 수 있다. 그리고 각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀 외에 효능을 더 증진시키기 위한 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.
이하, 실시예, 실험예, 제조예 및 제형예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 상세히 설명한다. 그러나 이러한 실시예, 실험예, 제조예 및 제형예는 당업계의 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 명확하게 설명하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 본 발명을 이들 실시예, 실험예, 제조예 및 제형예에 한정하고자 하는 것은 아니며, 본 발명에 따른 실시예, 실험예, 제조예 및 제형예 들은 여러 다른 형태로 변형될 수 있다.
[제조예 1] 미세조류 추출물의 제조
본 발명을 위해 사용된 미세조류는 두나리엘라 살리나(Dunaliella Salina)로 한국해양미세조류은행(KMMCC)으로부터 분양받아 사용하였으며, 배양을 위해 사용된 배지는 F/2배지(Guillard and Ryther 1962)를 121℃에서 15분간 멸균하여 사용하였다. 본 발명을 위한 두나리엘라 살리나(Dunaliella Salina)를 밀폐형 광생물반응기(closed photobioreactor system)에 접종하고 배양온도를 22℃에 맞추고, 440nm 파장을 갖는 백색 LED를 60W 세기로 일정하게 공급하면서 10일 동안 배양하여 본 발명의 미세조류를 얻었다. 배양된 미세조류를 10,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 배지 성분이 포함된 상등액을 버리고 미세조류만을 분리한 뒤, 정제수를 넣고 진탕하여 다시 10,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 상등액을 버려 남아 있는 배지를 깨끗이 제거하여 본 발명의 미세조류를 얻는다. 얻은 미세조류에 정제수를 넣고 음파처리(sonication)(1min on, 30seconds off, 22.5kHz)를 10회 실시한다. 음파처리 후 10,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 침전물을 제외한 상등액을 분리하여 다시 한 번 더 10,000 rpm에서 5분 동안 원심분리한다. 이렇게 얻은 상등액을 6 μm 필터로 여과하여 본 발명의 미세조류 추출물을 제조하였다.
[제조예 2] 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀(ALGAESOME)의 제조
알게좀(ALGAESOME)은 아래 표 1에 기재된 함량과 같이 포스포리피드(Phospholipid), 피토스핑고신(Phytosphingosine), 세라마이드 3 (Ceramide 3), 콜레스테롤(Cholesterol), 피토스테롤(Phytosterol), 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 및 스쿠알렌(Squalene)을 1,000bar의 압력으로 고압유화장치(microfludizer)를 3회 통과시켜 반투명 젤 형태의 지질복합체를 만들었다. 수용액 상에 미세조류 추출물(제조예 1)을 분산시킨 용액을 제조하였다. 다음으로, 상온에서 이 지질복합체를 미세조류 추출물이 분산된 수용액 상에 첨가하여 미세조류 추출물이 포집된 알게좀을 제조하였다.
성분 중량%
포스포리피드 5.0
피토스핑고신 2.5
세라마이드 3 25.0
콜레스테롤 2.5
피토스테롤 2.5
베타-시토스테롤 2.5
스쿠알렌 50.1
미세조류 추출물 (제조예 1) 10.0
합계 100
[ 실험예 1] 알게좀 입자의 입도 분포
본 발명의 미세조류 추출물을 함유하는 알게좀 입자의 입도 분포를 알아보기 위해 아래와 같이 실험을 진행하였다. 상기 표 1의 제조예 2의 알게좀을 10%-Microplasma Hyopnemoniae OD410=0.1 완충용액에 적당한 농도로 희석한 후 알게좀 입자의 입도를 측정하였다. 상기 알게좀 입자의 입도는 제타사이저 엔에스(Zetasizer NS) 장비를 이용하여 빛 산란방식을 분석하여, 그 결과를 도 1의 그래프에 나타내었다. 이렇게 얻어진 알게좀의 입자크기는 평균 120 nm로서, 기존 고압유화장치(microfluidizer)를 이용하여 제조된 리포좀에 비하여 입도 사이즈가 작고, 균질성이 향상되어 안정성을 향상시킬 수 있다. 또한, 본 발명에 따라 제조된 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀(제조예 2)의 SEM 사진을 도 2에 나타내었다.
[ 실시예 1] 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물의 제조
하기 표 2과 같이 제조예 2에서 제조된 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유한 조성물(실시예 1)과 미세조류 추출물을 내포하는 기존 리포좀을 함유한 조성물(비교예 1)이 제조되었다. 비교예 1에 사용된 기존 리포좀(비교제조예 1)은 포스포리피드 3.0 중량%, 프로필렌글리콜 10.0 중량%, 에틸알콜 10.0 중량%, 미네랄오일 3.0 중량% 및 정제수 64 중량%를 혼합한 뒤 60℃까지 가온하여 용해한 다음 미세조류 추출물 10.0 중량%를 상기 용해액에 부어 교반한 후 고압유화장치(microfludizer)에서 1,000bar의 압력으로 2회 통과시켜 얻었다.
(단위 : 중량%))
성분 실시예 1 비교예 1
토타롤 0.2 0.2
알게좀(제조예 2) 10.0 -
리포좀(비교제조예 1) - 10.0
A 아라키딜알콜 3.0 3.0
글리세릴스테아레이트 1.5 1.5
스쿠알란 5.0 5.0
하이드록시폴리데신 2.0 2.0
트리옥타노인 5.0 5.0
폴리솔베이트 80 1.0 1.0
솔비탄스테아레이트 0.5 0.5
사이클로펜타실록산 3.0 3.0
토코페릴아세테이트 0.2 0.2
BHT 0.05 0.05
B 정제수 잔량 잔량
농글리세린 4.0 4.0
1,3-부틸렌글리콜 2.0 2.0
디메치콘/비닐디메치콘크로스폴리머 0.4 0.4
EDTA-2Na 0.05 0.05
향,방부제 적량 적량
계 100 100
[ 실험예 2] 피부 주름 개선 효과 ( 기기적 평가)
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 피부주름 개선 효과(기기적 평가)를 측정하였다.
20세 이상의 여성 20명(평균연령 35.2세)을 2그룹(A, B)으로 나누어 A 그룹을 대상으로는 실시예 1을, B 그룹을 대상으로는 비교예 1를 각각 눈가 2X2 ㎠의 면적에(2회/일, 0.2g/회) 8주간 도포하면서, 투명한 실리콘 재질의 용액을 이용하여 피부주름의 레플리카(Replica)를 떠서 피부주름측정기(SKIN VISIOMETER SV400, C+K Electronics GmbH. Germany)로 피부주름변화를 측정하였다. 레플리카의 상을 CCD 카메라로 3차원적 분석하고, 각각의 주름의 거칠기(Rm: m은 1이상의 정수)의 합을 주름의 개수로 나눈 값인 하기 수학식 1의 평균주름거칠기(Rz)로 주름개선 효과를 분석하였다. 6 주후 피부주름 개선효과에 시험결과는 하기 표 3에 나타내었다.
[수학식 1]
Figure PCTKR2018009805-appb-I000001
평균주름거칠기(Rz, ㎛)
실시예 1 비교예 1
T0 T8 △Rz T0 T8 △Rz
피검자 1 129 62 -67 128 86 -42
피검자 2 128 41 -87 130 78 -52
피검자 3 121 38 -83 124 82 -42
피검자 4 132 55 -77 135 94 -41
피검자 5 120 22 -98 115 46 -69
피검자 6 136 43 -93 130 75 -55
피검자 7 128 36 -92 125 78 -47
피검자 8 121 39 -82 118 69 -49
피검자 9 129 43 -86 122 91 -31
피검자 10 125 41 -84 117 78 -39
평균 -84.9 -46.7
상기 표 3의 시험 결과에서 알 수 있는 바와 같이, 8주 후 평균주름거칠기(Rz)는 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유한 화장료(실시예 1)의 경우에는 84.9 ㎛ 낮아져(p<0.01) 미세조류 추출물을 내포하는 일반 리포좀을 함유한 비교예 1 보다 약 81.8% 정도 주름이 더 개선되었다. 따라서 위의 결과로부터 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유한 실시예 1이 미세조류 추출물을 안정화한 일반 리포좀을 함유한 비교예 1 보다 매우 효과적인 주름 개선 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.
[실험예 3] 피부 주름 개선 효과 (육안 평가)
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 피부주름 개선에 대한 육안평가를 실시하였다.
20세 이상의 여성 20명(평균연령 35.2세)을 2그룹(A, B)으로 나누어 A 그룹을 대상으로는 실시예 1을, B 그룹을 대상으로는 비교예 1을 주름이 있는 눈가를 중심으로 8주간 도포(2회/일)한 후, 숙련자의 객관적 평가와 피검자의 주관적 평가를 다음의 6등급으로 분류하여 평가함으로써 피부주름의 개선정도(ΔW)를 측정하였다. 피부주름개선 임상효과는 하기 표 4(숙련자의 객관적 평가) 와 표 5(피검자의 주관적 평가)에 나타내었다.
피부주름개선 평가 기준 :
-3: 극히 심하게 악화 -2: 악화 -1: 약간 악화
0: 변화없음 1: 약간 개선 2: 개선 3: 매우 개선
피부주름개선 임상효과(숙련자의 객관적 평가)
피부주름 개선정도(△W)
실시예 1 비교예 1
T0 T8 T0 T8
피검자 1 0 3 0 2
피검자 2 0 3 0 1
피검자 3 0 3 0 2
피검자 4 0 2 0 1
피검자 5 0 2 0 2
피검자 6 0 3 0 2
피검자 7 0 3 0 1
피검자 8 0 3 0 3
피검자 9 0 2 0 2
피검자 10 0 3 0 2
△W(T8-T0) 2.7 1.8
피부주름개선 임상효과(피검자의 주관적 평가)
피부주름 개선정도(△W)
실시예 1 비교예 1
T0 T8 T0 T8
피검자 1 0 3 0 2
피검자 2 0 2 0 3
피검자 3 0 3 0 1
피검자 4 0 2 0 2
피검자 5 0 3 0 2
피검자 6 0 2 0 1
피검자 7 0 3 0 3
피검자 8 0 3 0 2
피검자 9 0 2 0 3
피검자 10 0 2 0 1
△W(T8-T0) 2.5 2.0
육안 평가 결과 실시예 1의 경우 숙련자의 객관적 평가와 피검자의 주관적 평가가 각각 2.7, 2.5로 주름개선 효과가 매우 우수함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 실시예 1이 미세조류 추출물을 내포하는 기존 리포좀을 함유하는 비교예 1에 비해 숙련자의 객관적 평가에서는 50%, 피검자의 주관적 평가에서는 25% 증가한 것으로 나타나 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 실시예 1이 매우 효과적으로 주름을 개선시킴을 알 수 있다.
[실험예 4] 피부 탄력 증진 효과
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 피부탄력 증진 효과를 측정하였다.
온도 24 내지 26℃, 습도 75% 조건에서 20세 이상의 여성 20명(평균연령 35.2세)을 2그룹(A, B)으로 나누어 A 그룹을 대상으로는 실시예 1을, B 그룹을 대상으로는 비교예 1을 각각 눈가를 중심으로 8주간 도포(2회/일)한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 시험 결과는 하기 표 6에 Cutometer SEM 575의 △R8(R8(8주)-R8(0주)) 값으로 나타내었다. R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.
실험제품 △R8
실시예 1 0.47
비교예 1 0.30
상기 표 6의 결과에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료 조성물(실시예 1)은 미세조류 추출물을 내포하는 기존 리포좀을 함유한 비교예 1 보다 피부탄력이 56.7% 증가하여, 높은 피부탄력 증진 효과를 갖고 있음을 알 수 있다.
[ 실험예 5] 피부 보습 효과
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 피부보습 효과를 측정하였다.
측정 시에는 온도 24-26℃, 상대습도 45%, 공기의 흐름이 없는 실내에서 20~30분간 피부를 안정화시킨 뒤 측정하였다. 20세 이상의 여성 20명(평균연령 40.5세)을 각각 A, B 그룹으로 나누어, 본 발명에 따른 실시예 1의 화장료 조성물은 A 그룹에, 비교예 1의 화장료 조성물은 B 그룹에 각각 눈가를 중심으로 6주간 도포(2회/일)하였다. TEWAMETER TM210(C+K electronic GmbH. Germany)를 이용하여 경피수분손실량 즉, TEWL(Transepidermal Water Loss)값을 시간 변화에 따른 TEWL 값 변화량 △TEWL로 측정하고, CORNEOMETER CM 820 PC(C+K electronic GmbH. Germany)를 이용하여 표피 수분량에 따른 전기전도도의 변화로 0에서 150까지 피부의 수분량을 수치화하여 보습효과를 측정하였다. 시험결과는 하기 표 7에 나타내었다.
시험제품 △TEWL Corneometer Value
실시예 1 1.5 118
비교예 1 4.6 85
시험 결과, 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 실시예 1의 △TEWL 값은 1.5g/hm2로 비교예 1에 비해 경피수분손실량이 6주 후 매우 효과적으로 개선되었음을 알 수 있다. 아울러 피부의 수분량을 측정한 Corneometer value에서도 실시예 1이 비교예에 비해 각각 28.0% 증가하여 피부 보습 효과가 매우 증가되었음을 알 수 있다.
[ 실험예 6] 피부 침투 효과
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 피부침투효과를 측정하였다.
인체 정상 섬유아세포(Human normal fibroblast) 1x105 cells/ml 세포를 인체의 결합조직을 이루는 섬유조직과 유사한 콜라겐 젤 구조에 콜라겐 수용액 3mg/ml : 5X DMEM : 2.2% 소듐바이카보네이트(Sodium bicarbonate)와 200mM Hepes 완충액이 포함된 0.05N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합된 배지에 접종하여 5% CO2, 37℃에서 7일 동안 배양하여 얻은 Dermal Equivalent(DE)를 3μm 다공성 폴리카보네이트(Porous polycarbonate) 재질로 된 막(Membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트(Plates)의 안쪽에 넣고 섬유아세포가 배양된 Dermal Equivalent(DE) 표면위에 표피 각질형성세포(Epidermal Keratinocyte) 1x105 cells/ml 세포를 접종하여 카르티노이드와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양한다. 그 후 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하고 바깥쪽에 10% FBS가 함유된 K-SFM과 카르티노이드가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 넣어 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다.
여기에 본 발명의 실시예 1 및 비교예 1을 맨 위층의 인공피부 조직에 적용하여 4시간 배양한 후 카르티노이드가 들어있지 않은 DMEM 배지에서 인공피부의 표피와 진피를 침투하여 통과된 실시예 1의 알게좀과 비교예 1의 리포좀에 함유되어 있는 미세조류 추출물 내의 카르티노이드 양을 TLC로 분석하였다. 이때 미세조류 추출물 내의 카르티노이드 함량은 200μg/1㎖ 되도록 카르티노이드를 배지에 첨가하고, 미세조류 추출물은 총 중량의 10.0% 함유하도록 실시예 1의 알게좀과 비교예 1의 리포좀을 제조하였다. 피부침투효과에 대한 시험결과는 하기 표 8에 나타내었다.
배지중의 EGF의 양(μg/1㎖)
실시예 1 30.7
비교예 1 12.3
이상의 결과에서 미세조류 추출물이 함유된 알게좀은 일반 리포좀에 미세조류 추출물을 포접했을 때보다 높은 피부침투효과가 있음을 알 수 있다.이는 미세조류 추출물을 함유하는 알게좀의 입자 사이즈가 작고 피부에 더 친화력일 뿐만 아니라 제조 공정이 상온에서 진행되어 열에 민감한 카르티노이드의 안정성에 알게좀이 높은 활성을 유지함으로 인해 더 많은 피부침투량을 나타내는 것으로 예상된다.
[ 실험예 7] 화장료 조성물의 제형 안정성
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료에 대한 제형 안정성를 측정하였다.
화장료의 제형 안정성을 시험하기 위해 본 발명의 실시예 1 및 비교예 1을 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관하고, 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 후, 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. 이때 제품 분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다.
제품 변색 평가 기준 :
0: 변화 없음 1: 극히 조금 분리(변색)
2: 조금 분리(변색) 3: 조금 심하게 분리(변색)
4: 심하게 분리(변색) 5: 극히 심하게 분리(변색)
온도 시험물질 변색 정도
실시예 1 비교예 1
45℃ 0 1.9
4℃ 0 0
상기 표 9에서 알 수 있는 바와 같이, 알게좀을 함유한 실시예 1은 4℃와 45℃에서 모두 변색이나 분리 증상이 없이 안정하였으나 일반 리포좀을 함유한 비교예 1은 4℃는 변색이나 분리 증상이 없었으나 45℃에서 분리 증상이 나타나 불안정함을 알 수 있다.
[ 실험예 8] 피부 안정성 실험
상기 본 발명의 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유한 화장료에 대한 피부 안전성 시험을 실시하였다.
피검자 20명(평균연령 26.7세, 연령분포 18세-30세)을 본 발명의 실시예 1 및 비교예 1을 Haye's Test Chamber를 이용하여 상박에 피부 첩포시험(Patch Test)을 실시하였다. 단 건선(Psoriasis), 습진(Eczema), 기타 피부병변 보유자나 임신, 수유부 또는 피임제, 항히스타민제 등을 복용하고 있는 사람은 본 실험에서 제외 하였다. 시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시키고, 실시예 1 및 비교예 1을 각각 15μg씩 Chamber에 적하시킨 후, 시험 부위인 상박 부위에 얹어 고정시킨다. 첩포는 24시간 동안 도포하고 첩포를 제거한 후에는 Marking Pen으로 시험부위를 표시하여 각각 24시간, 48시간 후에 시험부위를 관찰한다. 판정은 첩포 제거 24시간, 48시간 후에 행하며 피부반응은 하기 표 10의 국제접촉피부염연구회(International Contact Dermatitis Research Group:ICDRG)의 규정에 따라 판정하였다. 시험결과는 하기 표 11에서 피부 안정성으로 나타내었다.
기호 판 정 기 준 평 가 Mean Score
±++++++- Doubtful or slight reaction and erythemaErythema + Induration Erythema + Induration + VesicleErythema + Induration + BullaeNegative 미소자극경자극중자극강자극무자극 0~0.91.0~2.93.0~4.95.0이상0
경과시간 실시예 1 비교예 1
24시간 0 0.0
48시간 0 0.0
표 11의 피부안전성 시험 결과, 실시예 1 및 비교예 1은 모두 평균 자극정도가 0으로 피부에 자극이 없는 안전한 화장료임을 알 수 있다.
이하 상기한 실험예들의 결과를 근거로 하여 미세조류 추출물을 내포하는 알게좀을 함유하는 화장료를 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.
[ 제형예 1] 유연화장수(스킨로션)
배합성분 중량%
제조예 2 1.0
1,3-부틸렌글리콜 6.0
글리세린 4.0
올레일알코올 0.1
폴리솔베이트 20 0.5
에탄올 15.0
벤조페논-9 0.05
향, 방부제 미량
정제수 to 100
[ 제형예 2] 영양화장수( 밀크로션 )
배합성분 중량%
제조예 2 3.0
프로필렌글리콜 6.0
글리세린 4.0
트리에탄올아민 1.2
토코페릴아세테이트 3.0
유동 파라핀 5.0
스쿠알란 3.0
마카다미아너트오일 2.0
폴리솔베이트 60 1.5
솔비탄세스퀴올레이트 1.0
카르복시비닐 폴리머 1.0
비에치티이 0.01
이디티에이-2엔에이 0.01
향, 방부제 미량
정제수 to 100
[ 제형예 3] 영양크림
배합성분 중량%
제조예 2 10.0
세토스테아릴알콜 2.0
글리세릴스테아레이트 1.5
트리옥타노인 5.0
폴리솔베이트 60 1.2
솔비탄스테아레이트 0.5
스쿠알란 5.0
유동파라핀 3.0
싸이클로메치콘 3.0
비에치티이 0.05
델타-토코페롤 0.2
농글리세린 4.0
1,3-부틸렌글리콜 2.0
산탄검 0.1
이디티에이-2엔에이 0.05
향, 방부제 미량
정제수 to 100
[ 제형예 4] 마사지크림
배합성분 중량%
제조예 2 3.0
프로필렌글리콜 6.0
글리세린 4.0
트리에탄올아민 0.5
밀납 2.0
토코페릴아세테이트 0.1
폴리솔베이트 60 3.0
솔비탄세스퀴올레이트 2.5
세테아릴알코올 2.0
유동파라핀 30.0
카르복시비닐폴리머 0.5
향, 방부제 미량
정제수 to 100
[ 제형예 5] 팩
배합성분 중량%
제조예 2 2.0
프로필렌글리콜 2.0
글리세린 4.0
카르복시비닐 폴리머 0.3
에탄올 7.0
피이지-40 히드로게비이티드 캐스터 오일 0.8
트리에탄올아민 0.3
비에치티이 0.01
이디티에이-2엔에이 0.01
향, 방부제 미량
정제수 to 100

Claims (7)

  1. 미세조류 추출물을 지질복합체에 내포시킨 알게좀을 함유하는 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 알게좀은 포스포리피드, 피토스핑고신, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 피토스테롤, 베타-시토스테롤 및 스쿠알렌으로 이루어진 지질복합체에 미세조류 추출물을 내포시킨 것인, 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 알게좀은 알게좀 총 중량에 대하여 포스포리피드 0.01~30.0 중량%, 피토스핑고신 0.01~10.0 중량%, 세라마이드 3 0.01~50.0 중량%, 콜레스테롤 0.01~30.0 중량%, 피토스테롤 0.01~20.0 중량%, 베타-시토스테롤 0.01~10.0 중량%, 스쿠알렌 0.01~80.0 중량% 및 미세조류 추출물 0.01~50.0 중량%가 함유되어 있는 것인, 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 주름개선 효과, 피부 탄력 증진 효과 및 피부 보습 효과 중 하나 이상의 효과를 갖는, 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 알게좀은 전체 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01~100.0 중량% 함유되는, 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 알게좀은 포스포리피드, 피토스핑고신, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 피토스테롤, 베타-시토스테롤, 및 스쿠알렌을 고압에서 용해하여 반투명 젤 형태의 지질복합체를 만드는 단계 및 상온에서 상기 지질복합체와 미세조류 추출물을 혼합하는 단계를 포함하는 방법으로 제조된 것인, 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 미세조류 추출물은 두나리엘라 살리나(Dunaliella Salina)를 추출한 것인, 화장료 조성물.
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