WO2019107993A1 - P34 단백질 및 nedd4-1 단백질의 결합 억제제로서의 신규 화합물 및 이의 용도 - Google Patents

P34 단백질 및 nedd4-1 단백질의 결합 억제제로서의 신규 화합물 및 이의 용도 Download PDF

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cancer
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김두섭
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(주)인핸스드바이오
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    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
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    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Definitions

  • the present invention relates to a novel compound and its use, and more particularly, to a novel compound having a binding inhibitory effect of p34 protein and NEDD4-1 protein, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, ≪ / RTI > and their use.
  • Cancer is one of the greatest threats to human health, a disease that occurs when cells undergo a series of mutagenic processes that multiply and are immortalized in an unlimited, unregulated way.
  • the causes of cancer are environmental or external factors such as chemicals, viruses, bacteria, and ionizing radiation, and internal factors such as congenital mutations (Klaunig & Kamendulis, Annu Rev Pharmacol Toxicol., 44: 239-267, 2004 ).
  • treatments such as surgery, radiation therapy, and chemotherapy, but the side effects are becoming a serious problem.
  • life is terminated without any special treatment.
  • the death rate for colorectal cancer is 15.4% per 100,000 cancer patients.
  • the incidence of colorectal cancer per 100,000 population is increasing from 21.8% to 50.3%.
  • expression of PTEN decreases when colon cancer develops and metastasis progresses, and the role of PTEN in this process is very important. Taking this into consideration, it can be said that PTEN needs to be used as an endpoint in the development of anticancer drugs. Activation of PTEN inhibits the cell cycle and induces apoptosis.
  • tumor growth is inhibited when PTEN is overexpressed in an animal model derived from a colon cancer cell line.
  • the overexpression of PTEN in the animal models derived from the colorectal cancer cell lines SW480 and HT29 indicates that tumor growth is remarkably inhibited.
  • PTEN expression which is a tumor suppressor in PI3K / PTEN signal transduction in colorectal cancer, is rarely expressed in colorectal cancer, and 75.4% of patients with liver metastases have almost no expression of PTEN Year survival rate has been reported to decrease significantly.
  • One of the objects of the present invention is to provide a compound capable of selectively and effectively inhibiting the binding of p34 protein and NEDD4-1 protein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition comprising the compound as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition capable of preventing or treating various diseases mediated by selectively and effectively inhibiting the binding of p34 protein and NEDD4-1 protein by including the above compound as an active ingredient do.
  • the present invention provides a compound represented by the following general formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • n is an integer of 1 to 10
  • X 1 and X 4 are the same or different and are each independently selected from the group consisting of S, O, N (R 2 ) and C (R 3 ) (R 4 )
  • X 2 and X 3 are each independently N or C (R 5 ), at least one is N,
  • L 1 and L 2 are the same or different and each independently represents a single bond, a carbonyl group, an unsubstituted or substituted alkylene group having 1 to 10 carbon atoms or an unsubstituted or substituted arylene group having 6 to 30 carbon atoms,
  • Ar 1 and Ar 2 are the same or different and each independently represents an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 aryl group, an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 aralkyl group, an unsubstituted or substituted C 3 -C 30 A substituted or unsubstituted heteroaryl group, an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 heteroarylalkyl group, an unsubstituted or substituted C 3 -C 40 cycloalkyl group, and an unsubstituted or substituted C 3 -C 40 heterocycloalkyl group And,
  • R 1 to R 5 are the same or different from each other and each independently represents hydrogen, deuterium, a hydroxyl group, an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, a cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 30 carbon atoms, An aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms and an aryl group having 6 to 30 carbon atoms and may be bonded to adjacent groups to form a substituted or unsubstituted ring,
  • the substituted alkylene group, the substituted arylene group, the substituted aryl group, the substituted aralkyl group, the substituted heteroaryl group, the substituted heteroarylalkyl group, the substituted cycloalkyl group, and the substituted heterocycloalkyl group are each independently hydrogen, deuterium A halogen atom, a hydroxy group, an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, a cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 30 carbon atoms, an alkynyl group having 2 to 24 carbon atoms, an aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms , An aryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaralkyl group having 3 to 30 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 30 carbon atoms, an alkylamino group having 1 to 30 carbon atoms, an
  • a pharmaceutical composition comprising a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient, wherein said medicament is for the prevention or treatment of a disease mediated by the simultaneous expression of p34 and NEDD4-1 Purpose.
  • the disease is selected from tumor cells (e. G., Breast, colon and colon carcinoma).
  • tumor cells e. G., Breast, colon and colon carcinoma.
  • novel compounds according to the present invention can selectively or simultaneously inhibit various diseases mediated by the coexpression of p34 and NEDD4-1. Therefore, the novel derivatives according to the present invention can be usefully used for the treatment or prevention of tumor cells (for example, breast, colon and colon carcinoma).
  • tumor cells for example, breast, colon and colon carcinoma.
  • FIG. 1 is a graph comparing the growth of a tumor of a mouse group administered with p34 activity inhibitor and a control group by subcutaneously injecting SW620, a human colon cancer cell line, into a Balb / c nude mouse to form a xenograft tumor.
  • FIG. 2 shows the expression of PTEN and NEDD4-1 in the mouse group treated with p34 activity inhibitor and the control group by subcutaneously injecting SW620, a human colon cancer cell line, into Balb / c nude mice to form xenograft tumors This is a comparative photograph.
  • FIG. 3 is a graph comparing the growth of a tumor of a mouse group administered with p34 activity inhibitor and a control group by subcutaneously injecting SW620, a human colon cancer cell line, into a Balb / c nude mouse to form xenograft tumors.
  • 4a to 4d are graphs showing the results of performing NMR titration to determine the site of NEDD4-1 protein binding to p34.
  • &quot means fluorine, chlorine, bromine or iodine or both.
  • " alkyl " refers to saturated, straight or branched hydrocarbon radicals represented by C n H 2n + 1 , specifically between 1 and 6, refers to saturated, straight or branched hydrocarbon radicals containing between 8, 1 to 10, or between 1 and 20 carbon atoms.
  • these radicals include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, tert-butyl, neopentyl, n-hexyl, heptyl, octyl radicals.
  • " alkenyl " refers to monovalent groups derived from unsaturated, linear, or branched hydrocarbon moieties having at least one carbon-carbon double bond, refers to an unsaturated, straight chain or branched monovalent group comprising between 2 and 6, between 2 and 8, between 2 and 10, or between 2 and 20 carbon atoms. Examples thereof include, but are not limited to, ethenyl, propenyl, butenyl, 1-methyl-2-buten-1-yl, heptenyl, and octenyl radicals.
  • " cycloalkyl " refers to a monovalent radical derived from a monocyclic or polycyclic saturated or partially unsaturated carbocyclic ring compound.
  • examples of C3-C8-cycloalkyl include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cyclopentyl, and cyclooctyl;
  • Examples of C3-C12-cycloalkyl include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, bicyclo [2.2.1] heptyl, and bicyclo [2.2.2] octyl.
  • Monovalent radicals derived from monocyclic or polycyclic carbocyclic ring compounds having at least one carbon-carbon double bond by the removal of a single hydrogen atom are also contemplated.
  • groups include, but are not limited to, cyclopropenyl, cyclobutenyl, cyclopentenyl, cyclohexenyl and cycloheptenyl, cyclooctenyl, and the like.
  • " cycloalkenyl " refers to a partially unsaturated carbocyclic ring containing 3 to 6 carbon atoms and having a carbon-carbon double bond in the ring .
  • examples of such groups include, but are not limited to, cyclopentenyl, cyclohexenyl, and the like.
  • &quot refers to a mono- or poly-cyclic carbocyclic ring system having one or more fused or non-fused aromatic rings, including, but not limited to, Phenyl, naphthyl, tetrahydronaphthyl, indenyl, indenyl, and the like.
  • " heterocycloalkyl " includes saturated or partially unsaturated 3-10 membered rings containing one or more heteroatoms selected from N, O and S, Quot; means a monocyclic or polycyclic substituent of < / RTI >
  • monocyclic heterocycloalkyl include, but are not limited to, piperidinyl, morpholinyl, thiamorpholinyl, pyrrolidinyl, imidazolidinyl, tetrahydrofuranyl, piperazinyl, and similar groups. It is not.
  • " heteroaryl " refers to a monocyclic or bicyclic 5- to 12-membered ring containing one or more heteroatoms selected from O, N and S, refers to an aromatic group that is more than a click.
  • Examples of monocyclic heteroaryl include thiazolyl, oxazolyl, thiophenyl, furanyl, pyrroyl, imidazolyl, isoxazolyl, pyrazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, tetrazolyl, oxadiazolyl, pyridine Pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, and similar groups, but are not limited thereto.
  • bicyclic heteroaryl examples include, but are not limited to, indolyl, benzothiophenyl, benzofuranyl, benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzisoxazolyl, benzthiazolyl, benzthiadiazolyl, benztriazolyl, quinolinyl, Isoquinolinyl, purine, furopyridinyl and similar groups, but is not limited thereto.
  • non-aromatic condensed heterocyclic ring &quot refers to a heterocyclic ring having two or more rings condensed with each other and containing heteroatoms selected from N, O and S in addition to carbon as a ring- refers to a group having a non-aromacity (e.g., having 5 to 10 nucleus atoms).
  • non-aromatic fused heterocyclic rings include, but are not limited to, benzo [d] [1,3] dioxole and the like.
  • n is an integer of 1 to 10
  • X 1 and X 4 are the same or different and are each independently selected from the group consisting of S, O, N (R 2 ) and C (R 3 ) (R 4 )
  • X 2 and X 3 are each independently N or C (R 5 ), at least one is N,
  • L 1 and L 2 are the same or different and each independently represents a single bond, a carbonyl group, an unsubstituted or substituted alkylene group having 1 to 10 carbon atoms or an unsubstituted or substituted arylene group having 6 to 30 carbon atoms,
  • Ar 1 and Ar 2 are the same or different and each independently represents an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 aryl group, an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 aralkyl group, an unsubstituted or substituted C 3 -C 30 A substituted or unsubstituted heteroaryl group, an unsubstituted or substituted C 6 -C 30 heteroarylalkyl group, an unsubstituted or substituted C 3 -C 40 cycloalkyl group, and an unsubstituted or substituted C 3 -C 40 heterocycloalkyl group And,
  • R 1 to R 5 are the same or different from each other and each independently represents hydrogen, deuterium, a hydroxyl group, an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, a cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 30 carbon atoms, An aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms and an aryl group having 6 to 30 carbon atoms and may be bonded to adjacent groups to form a substituted or unsubstituted ring,
  • the substituted alkylene group, the substituted arylene group, the substituted aryl group, the substituted aralkyl group, the substituted heteroaryl group, the substituted heteroarylalkyl group, the substituted cycloalkyl group, and the substituted heterocycloalkyl group are each independently hydrogen, deuterium A halogen atom, a hydroxy group, an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, a cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 30 carbon atoms, an alkynyl group having 2 to 24 carbon atoms, an aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms , An aryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaralkyl group having 3 to 30 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 30 carbon atoms, an alkylamino group having 1 to 30 carbon atoms, an
  • Ar 1 may be a compound represented by the following formula (2):
  • n is an integer of 0 to 2
  • X 5 is selected from the group consisting of N (R 6), S, O and C (R 7) (R 8 ),
  • R 6 to R 8 are the same or different from each other and each independently represent a hydrogen atom, a hydrogen atom, a cyano group, a nitro group, a halogen group, a hydroxy group, an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, a cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, An alkenyl group having 2 to 24 carbon atoms, an aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms, an aryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaralkyl group having 3 to 30 carbon atoms, An alkoxy group, an alkylamino group having 1 to 30 carbon atoms, an arylamino group having 6 to 30 carbon atoms, an aralkylamino group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroarylamino group having 6 to 30 carbon atoms, an alkylsilyl group having 1 to 30 carbon atoms,
  • Ar 2 may be selected from the group consisting of compounds represented by the following formulas (3) to (5):
  • o is an integer from 0 to 4,
  • p and q are the same as or different from each other, each independently an integer of 0 to 2,
  • X 6 , X 9 and X 10 are the same or different and are each independently selected from the group consisting of N, O, S and C (R 11 )
  • X 7 and X 8 are the same or different and are each independently selected from the group consisting of N (R 12 ), O, S and C (R 13 ) (R 14 )
  • R 9 to R 14 are the same or different from each other and each independently represents hydrogen, deuterium, cyano group, nitro group, halogen group, hydroxyl group, alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, cycloalkyl group having 1 to 20 carbon atoms, An alkenyl group having 2 to 24 carbon atoms, an aralkyl group having 7 to 30 carbon atoms, an aryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaryl group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroaralkyl group having 3 to 30 carbon atoms, An alkoxy group, an alkylamino group having 1 to 30 carbon atoms, an arylamino group having 6 to 30 carbon atoms, an aralkylamino group having 6 to 30 carbon atoms, a heteroarylamino group having 6 to 30 carbon atoms, an alkylsilyl group having 1 to 30 carbon atoms, A cycloalkyl group having 3 to 40 carbon atoms
  • L 2 is a single bond, and adjacent R 1 and Ar 2 may bond to each other to form a condensed ring.
  • the condensed ring formed by combining R 1 and Ar 2 with each other is a compound represented by the following formula 6:
  • r is an integer of 1 to 4,
  • X 8 , R 10 and p are as defined in formula (4).
  • the compound of Formula 1 may be selected from the group consisting of the following compounds, but not limited thereto:
  • the compound of formula 1 according to the present invention can be prepared by a method represented by the following schemes 1 to 8:
  • the intermediate compound (2) containing a carboxylic acid group is synthesized by reacting a commercially available oxadiazole compound (1) as a starting material with chloroacetic acid and coupling reaction with various amines (3) to obtain the final compound (4) were synthesized.
  • the compound of formula (I) according to the present invention may be prepared in the form of a pharmaceutically acceptable salt to which an inorganic acid or an organic acid is added.
  • Preferred salts thereof include hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, nitric acid, acetic acid, glycolic acid, , Pyruvic acid, malonic acid, succinic acid, glutaric acid, fumaric acid, mandelic acid, tartaric acid, citric acid, ascorbic acid, palmitic acid, maleic acid, hydroxymaleic acid, benzoic acid, , Salicylic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid or toluenesulfonic acid.
  • the pharmaceutically acceptable salt according to the present invention is prepared by dissolving the compound of the formula (1) in an organic solvent such as acetone, methanol, ethanol, acetonitrile or the like, adding crystals precipitated by adding an organic acid or an inorganic acid, can do. Or by reducing the solvent or excess acid in a reaction mixture to which acid has been added and drying the residue, or by adding a different organic solvent to the precipitated salt.
  • an organic solvent such as acetone, methanol, ethanol, acetonitrile or the like
  • the compounds of formula (I) according to the invention, or pharmaceutically acceptable salts thereof, may be in the form of hydrates or solvates, and such compounds are also included in the present invention.
  • the compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to the present invention can effectively inhibit protein kinase.
  • the compounds of the present invention can effectively prevent or treat diseases mediated by the coexpression of p34 and NEDD4-1. That is, binding to a part of the p34 protein and binding to a part of the NEDD4-1 protein can inhibit binding of the p34 protein and the NEDD4-1 protein.
  • the disease may be selected from, but not limited to, metastatic growth of the tumor.
  • the compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof can effectively prevent or treat cancer or tumor, and further effectively inhibit the metastasis of cancer cells.
  • the cancer is selected from the group consisting of liver cancer, hepatocellular carcinoma, thyroid cancer, colorectal cancer, testicular cancer, bone cancer, oral cancer, basal cell carcinoma, cancer of the head and neck, colorectal cancer, bladder cancer, ovarian cancer, ovarian cancer, brain tumor, gallbladder carcinoma, biliary tract cancer, esophageal cancer, glioma, glioblastoma, renal cancer, malignant melanoma, gastric cancer, pancreatic cancer, gastric cancer, Breast cancer, sarcoma, pharynx carcinoma, uterine cancer, cervical cancer, prostate cancer, rectal cancer, pancreatic cancer, Lung cancer, colorectal cancer, colon cancer, and other solid tumors. It is selected from the group, but is not limited to this.
  • the compound of formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof can effectively prevent or treat the carcinoma mediated by the simultaneous expression of p34 and NEDD4-1.
  • the carcinoma can be selected from the group consisting of lung, liver, bile duct, gastrointestinal tract, head and neck, pancreas, prostate, cervix, breast, colon and colon.
  • the compound of the formula (1) according to the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof and the like can be administered to a specimen to prevent or treat the above-mentioned diseases.
  • the dosage of the compound of formula (I) is usually 0.1 to 2,000 mg per day on a weight basis of 70 kg as an active ingredient to a human, although the dosage thereof may vary depending on the subject to be treated, the severity of the disease or condition, , Preferably from 1 to 1,000 mg per day, or via an oral or parenteral route, with an on / off schedule of one to four times per day. In some cases, doses less than the above-mentioned ranges may be more suitable, more doses may be used without causing harmful side effects, and more doses may be dispensed with several smaller doses per day do.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated according to a conventional method and may be formulated into various oral dosage forms such as tablets, pills, powders, capsules, syrups, emulsions and microemulsions, or by intramuscular, intravenous or subcutaneous administration Can be prepared in parenteral dosage forms.
  • the carrier to be used examples include cellulose, calcium silicate, corn starch, lactose, sucrose, dextrose, calcium phosphate, stearic acid, magnesium stearate, Calcium, gelatin, talc, surfactants, suspending agents, emulsifying agents, diluents and the like.
  • the carrier includes water, saline solution, glucose aqueous solution, pseudosugar solution, alcohol, glycol, ether (e.g. polyethylene glycol 400), oil, fatty acid, Glyceride, a surfactant, a suspending agent, an emulsifying agent and the like can be used.
  • DIPEA diisopropylethylamine
  • Example 3 The compounds of Examples 3 to 6 were synthesized in the same manner except for the amine used in Example 1, and the results are shown in Table 1. (5-2,3-dimethyl-1H-indol-5-yl) -1,3,4-oxadiazol-2-yl) acetic acid obtained in Preparation Example 1 instead of 2- The compound of Example 2 was synthesized using 2- ⁇ 5- (1H-indol-5-yl) -1,3,4-oxadiazol-2-yl ⁇ acetic acid obtained in 2 .
  • the inhibitory activity of the compound against p34 and NEDD4-1 was evaluated using the p34 protein and the NEDD4-1 protein based on HTRF technology developed by CISBio. This assay measures the FRET (fluorescence resonance energy transfer) signal in the presence of Terbium-labeled Anti-FLAG antibody and d2-labeled Anti-6XHis antibody. Experiments were performed in 384-well plates, 1X PBS pH 7.4, 0.1% BSA and 2% DMSO.
  • Example 1 45.8
  • Example 2 65.8
  • Example 3 59.4
  • Example 4 54.6
  • Example 6 46.6 control 0
  • Test Example 2 Evaluation of activity by inducing PTEN reactivation of p34 activity inhibitor
  • the human colon cancer cell line, SW620 was treated with 5 uM of p34 activity inhibitor for 48 hours.
  • the cell lysate was collected and immunoprecipitated with PTEN antibody.
  • reaction buffer 100 mM tris-HCl pH 8.0, 10 mM DTT
  • Solution for 30 minutes at room temperature, and the PTEN lipid phosphatase activity was measured at CD650 nm.
  • the activity of the phospholipase by PTEN reactivation of the compound was calculated as%. The results are shown in Table 3 below.
  • Example 1 Compound_ID PTEN activity (relative fold @ 5? N) Example 1 1.8 Example 2 1.0 Example 3 2.1 Example 4 2.2 Example 5 2.2 Example 6 1.8 control 1.0
  • Test Example 3 Evaluation of tumor growth inhibitory activity in xenograft mouse animal model of p34 activity inhibitor
  • Human colon cancer cell line SW620 was injected subcutaneously into Balb / c nude mice to form xenograft tumors. Tumor size was monitored every 3 days and the size of the tumor was continuously monitored by oral administration of p34 activity inhibitor daily (the control group was administered only the solvent) with 0 day when the tumor size reached 100 mm 3 .
  • Fig. 1 and Fig. 3 tumor growth was significantly reduced in the mouse group to which the p34 activity inhibitor was administered, as compared with the control group.
  • PTEN expression was increased and NEDD4-1 expression was decreased in the group to which p34 activity inhibitor was administered.
  • Test Example 4 Identification of the binding site of NEDD4-1 binding to p34
  • NMR titration was performed to determine the site of NEDD4-1 protein binding to p34.
  • 0.5 mM recombinant 14 N-labeled NEDD4-1 WW1 domain and 0.8 mM unlabed p34 protein were prepared.
  • Two proteins are 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 8.1 mM Na 2 HPO 4 and 1.5 mM KH 2 PO 4, It was prepared by dissolving in PBS buffer for the pH 7.4 in 10% D 2 O .
  • Unlabed p34 increased the concentration of 14 N-labeled NEDD4-1 ratios with the WW1 domain to 1: 0. 1: 0.25, and 1: 0.5, respectively.
  • All NMR experiments were performed with Bruker DRX 850 MHz and the results were analyzed by XWINNMR program and NMRpipe / NMRDraw software.
  • Figures 4a-4d illustrate the molecular interaction and backbone dynamics of the WW1 domain of NEDD4-1 after interaction with p34SEI-1.
  • Figure 4a is a superposition of the 2D 1H-15N HSQC spectrum of the 15N WW1 domain of NEDD4-1 (Red) titrated with increasing concentrations of unlabeled p34SEI-1 (1e120).
  • Figure 4b is an enlargement of the overlapping 1H-15N HSQC spectrum of the WW1 domain of NEDD4-1 titrated with increasing concentrations of unlabeled p34SEI-1 (1e120).
  • the asterisk [*] denotes residues that have disappeared due to peak broadening.
  • FIG. 4c shows the average heteronuclear NOE value for the NEDD4-1 WW1 domain and the corresponding secondary structure (shown on the panel) as a result of the 1H-15N heteronuclear NOE experiment.
  • FIG. 4D is a depiction of a sausage form showing the dynamic region of the NEDD4-1 WW1 domain (SWISS-MODEL).

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Abstract

본 발명은 p34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합 억제 효과를 갖는 신규 화합물에 관한 것으로, 본 발명의 화합물을 활성성분으로 함유하는 약학 조성물은 암의 치료 및/또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

P34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합 억제제로서의 신규 화합물 및 이의 용도
본 발명은 신규한 화합물 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 p34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합 억제 효과를 갖는 신규한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물, 이러한 화합물을 활성 성분으로서 포함하는 약학 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.
암은 인류의 건강을 위협하는 최대의 질병 중의 하나로서, 세포가 일련의 돌연변이 과정을 거쳐, 무제한적이고 비조절적인 방식으로 증식하고 불사화되어 발생하는 질병이다. 암 발생의 원인으로는 화학물질, 바이러스, 세균, 전리방사선 등의 환경적 또는 외적 요인과 선천성 유전자 변이 등의 내적 요인을 들 수 있다(Klaunig&Kamendulis, Annu Rev Pharmacol Toxicol., 44:239-267, 2004). 초기에 발견된 암일 경우 수술, 방사선 치료, 화학적 요법 등의 치료법이 있으나 그 부작용이 큰 문제로 대두되고 있으며, 말기 암이나 전이된 암의 경우 특별한 치료법 없이 시한부 인생으로 삶을 마감하는 상황이다.
2011년 기준 6대 암 10만명 당 사망률은 대장암의 경우 15.4%이고, 인구 10만 명 당 대장암 발병율은 21.8%에서 50.3%로 증가하고 있는 추세이다. 보다 구체적으로, 대장암이 발생하여 전이가 진행될 때, PTEN의 발현이 감소하는 것을 확인하였으며, 이 과정 중에 PTEN의 역할이 매우 중요하다고 할 것이다. 이러한 점에 착안하여, 항암제 개발 시 PTEN을 종말점(endpoint)으로 사용할 필요가 있다고 할 수 있다. PTEN이 활성화되면 세포 주기(cell cycle)를 억제하고 아포프토시스(apoptosis)를 유도한다.
또한, 대장암 세포주 유래 동물 모델에서 PTEN이 과발현된 경우 종양 성장이 억제된다. 대장 암 세포주인 SW480과 HT29 유래 동물 모델에서 PTEN이 과발현된 경우 종양 성장이 현저하게 억제되는 것을 확인할 수 있다.
대장암에서 PI3K/PTEN 신호전달에서 종양억제 기능을 하고 있는 PTEN의 발현이 대장암에서 거의 발현되지 않고 있다고 보고되었으며, 대장암환자 중 간전이를 갖는 환자의 75.4%가 PTEN이 거의 발현되지 않고 5년간 생존률이 크게 감소하는 것으로 보고되고 있다.
이러한, 대장암의 치료를 위한, 보다 구체적으로 대장암 근치적 절제술 후에도 20 내지 50%에서 재발하는 전이성 대장암 환자를 포함하여 50 내지 60% 환자가 항암약물 요법치료에 대상이 된다. 최근 생물학적 표적치료제가 대장암 항암요법에 적용되어 전이성 대장암 환자 일부에서 치료 효과를 보이지만 미흡한 수준이다.
본 발명의 일 목적 중 하나는 p34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합을 선택적 및 효과적으로 억제할 수 있는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하고자 한다.
본 발명의 다른 목적 중 하나는 상기 화합물을 활성 성분으로 포함하는 약학 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 또 다른 목적 중 하나는 상기 화합물을 활성 성분으로 포함하여 p34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합을 선택적 및 효과적으로 억제함으로써, 이에 의해 매개되는 각종 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 약학 조성물을 제공하고자 한다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000001
여기서,
n은 1 내지 10의 정수이며,
X1 및 X4는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 S, O, N(R2) 및 C(R3)(R4)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
X2 및 X3는 각각 독립적으로 N 또는 C(R5)이며, 적어도 하나는 N이며,
L1 및 L2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 단일 결합, 카보닐기, 비치환 또는 치환된 탄소수 1 내지 10의 알킬렌기 또는 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴렌기이며,
Ar1 및 Ar2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아르알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 30의 헤테로아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기 및 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기로 이루어진 군으로부터 선택되며,
R1 내지 R5는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴기로 이루어진 군으로부터 선택되며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있으며,
상기 치환된 알킬렌기, 치환된 아릴렌기, 치환된 아릴기, 치환된 아르알킬기, 치환된 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴알킬기, 치환된 시클로알킬기 및 치환된 헤테로시클로알킬기는 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 치환기로 치환되며, 복수 개의 치환기로 치환되는 경우 이들은 서로 동일하거나 상이하며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 활성 성분으로서 화학식 1의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 조성물에 있어서, p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 질병의 예방 또는 치료 용도를 제공하고자 한다.
질환이 종양 세포 (예를 들어, 유방, 대장 및 결장의 암종)로부터 선택되는 것이 특히 바람직하다.
본 발명에 따른 신규 화합물은 p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 다양한 질환을 선택적으로 또는 동시에 억제할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 신규 유도체는 종양 세포 (예를 들어, 유방, 대장 및 결장의 암종)의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 인간 대장암 세포주인 SW620를 Balb/c 누드 마우스에 피하로 주입하여 이종이식편 (xenograft) 종양을 형성시키고, p34 활성 억제제를 투여한 마우스군과 대조군의 종양의 성장을 비교한 그래프이다.
도 2는 인간 대장암 세포주인 SW620를 Balb/c 누드 마우스에 피하로 주입하여 이종이식편 (xenograft) 종양을 형성시키고, p34 활성 억제제를 투여한 마우스군과 대조군의 PTEN 및 NEDD4-1의 발현 정도를 비교한 사진이다.
도 3은 인간 대장암 세포주인 SW620를 Balb/c 누드 마우스에 피하로 주입하여 이종이식편 (xenograft) 종양을 형성시키고, p34 활성 억제제를 투여한 마우스군과 대조군의 종양의 성장을 비교한 그래프이다.
도 4a 내지 4d는 p34와 결합하는 NEDD4-1 단백질의 부위를 결정하기 위하여 NMR titration을 수행한 결과를 도시한 그래프이다.
아래 열거된 정의는 본 발명을 기술하기 위해 사용된 다양한 용어들의 정의이다. 이들 정의는 달리 제한되지 않는 한, 개별적으로 또는 이들을 포함하는 용어의 일부분으로서 본 명세서 전체에 적용된다.
본 명세서에 사용되는 용어 '할로겐'은 다른 언급이 없으면, 플루오르, 염소, 브롬 또는 요오드 혹은 이들 모두 중 어느 하나를 의미한다.
본 명세서에 사용되는 용어 '알킬'은 다른 언급이 없으면, CnH2n+1로 표시되는 포화된, 직쇄형 또는 분지형의 탄화수소 라디칼을 지칭하며, 구체적으로 각각 1 내지 6개 사이, 1 내지 8개 사이, 1 내지 10개 사이, 또는 1 내지 20개 사이의 탄소 원자를 포함하는 포화된, 직쇄형 또는 분지형의 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 이들 라디칼의 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 터트-부틸, 네오펜틸, n-헥실, 헵틸, 옥틸 라디칼이 포함되지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용되는 용어 '알켄일'은 다른 언급이 없으면, 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화된, 직쇄형 또는 분지형의 탄화수소 모이어티로부터 유래하는 1가 기를 지칭하며, 구체적으로 각각 2 내지 6개 사이, 2 내지 8개 사이, 2 내지 10개 사이, 또는 2 내지 20개 사이의 탄소 원자를 포함하는 불포화된, 직쇄형 또는 분지형의 1가 기를 지칭한다. 이들의 예로는 에텐일, 프로펜일, 부텐일, 1-메틸-2-부텐-1-일, 헵텐일, 옥텐일 라디칼이 포함되지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용되는 용어 '사이클로알킬'은 다른 언급이 없으면 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 포화 또는 부분적으로 불포화된 카보사이클릭 고리 화합물로부터 유래하는 1가 기를 나타낸다. 예를 들어, C3-C8-사이클로알킬의 예시에는, 이로 제한되지는 않지만, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로펜틸 및 사이클로 옥틸이 포함되고; C3-C12-사이클로알킬의 예시에는, 이로 제한되지는 않지만, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 바이사이클로 [2.2.1] 헵틸, 및 바이사이클로 [2.2.2] 옥틸이 포함된다. 단일 수소 원자의 제거에 의해 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 카르보사이클릭 고리 화합물로부터 유래하는 1가기가 또한 고려된다. 이러한 기의 예시에는, 이로 제한되지는 않지만, 사이클로프로펜일, 사이클로부텐일, 사이클로펜텐일, 사이클로헥센일 및 사이클로헵텐일, 사이클로옥텐일 등이 포함된다.
본 명세서에 사용되는 용어 '사이클로알켄일'은 다른 언급이 없으면, 달리 언급하지 않는 한, 3 내지 6개의 탄소 원자를 함유하고 고리 내에 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 부분적으로 불포화된 탄소환형을 지칭한다. 이러한 기의 예시로는, 이에 제한되지는 않지만, 사이클로펜텐일 및 사이클로헥센일 등이 포함된다.
본 명세서에 사용되는 용어 '아릴'은 다른 언급이 없으면, 융합 또는 비-융합된 하나 이상의 방향족 고리를 갖는, 모노- 또는 폴리-사이클릭 카르보사이클릭 고리 시스템을 지칭하고, 이로 제한되지는 않지만, 페닐, 나프틸, 테트라하이드로나프틸, 인덴일, 이덴일 등을 포함한다.
본 명세서에 사용되는 용어 '헤테로사이클로알킬'은 다른 언급이 없으면 N, O 및 S 중에서 선택된 1개 이상, 예를 들어 1개 내지 4개의 헤테로 원자를 함유하는 포화 또는 부분적으로 불포화된 3 내지 10원의 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 치환기를 의미한다. 모노사이클릭 헤테로사이클로알킬의 예로는 피페리딘일, 모폴린일, 티아모폴린일, 피롤리딘일, 이미다졸리딘일, 테트라하이드로퓨란일, 피페라진일 및 이와 유사한 그룹을 들 수 있으나 이들로 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용되는 용어 '헤테로아릴'은 다른 언급이 없으면 O, N 및 S 중에서 선택된 1개 이상, 예를 들어 1개 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 12원의 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 이상의 방향족 그룹을 의미한다. 모노사이클릭 헤테로아릴의 예로는 티아졸일, 옥사졸일, 티오펜일, 퓨란일, 피롤일, 이미다졸일, 이소옥사졸일, 피라졸일, 트리아졸일, 티아디아졸일, 테트라졸일, 옥사디아졸일, 피리딘일, 피리다진일, 피리미딘일, 피라진일 및 이와 유사한 그룹을 들 수 있으나 이들로 제한되는 것은 아니다. 바이사이클릭 헤테로아릴의 예로는 인돌일, 벤조티오펜일, 벤조퓨란일, 벤즈이미다졸일, 벤즈옥사졸일, 벤즈이속사졸일, 벤즈티아졸일, 벤즈티아디아졸일, 벤즈트리아졸일, 퀴놀린일, 이소퀴놀린일, 퓨린일, 퓨로피리딘일 및 이와 유사한 그룹을 들 수 있으나, 이들로 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '비-방향족(non-aromatic) 축합 헤테로 다환'은 2 이상의 고리가 서로 축합되어 있고, 고리 형성 원자로서 탄소 외에 N, O 및 S 중에서 선택된 헤테로 원자를 포함하고, 분자 전체가 비-방향족성(non-aromacity)를 갖는 그룹(예를 들면, 핵원자수 5 내지 10개를 가짐)을 의미한다. 상기 비-방향족 축합 헤테로 다환의 예로는, 벤조[d][1,3]디옥솔 등을 포함할 수 있는데, 이에 한정되지 않는다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000002
여기서,
n은 1 내지 10의 정수이며,
X1 및 X4는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 S, O, N(R2) 및 C(R3)(R4)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
X2 및 X3는 각각 독립적으로 N 또는 C(R5)이며, 적어도 하나는 N이며,
L1 및 L2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 단일 결합, 카보닐기, 비치환 또는 치환된 탄소수 1 내지 10의 알킬렌기 또는 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴렌기이며,
Ar1 및 Ar2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아르알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 30의 헤테로아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기 및 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기로 이루어진 군으로부터 선택되며,
R1 내지 R5는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴기로 이루어진 군으로부터 선택되며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있으며,
상기 치환된 알킬렌기, 치환된 아릴렌기, 치환된 아릴기, 치환된 아르알킬기, 치환된 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴알킬기, 치환된 시클로알킬기 및 치환된 헤테로시클로알킬기는 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 치환기로 치환되며, 복수 개의 치환기로 치환되는 경우 이들은 서로 동일하거나 상이하며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 Ar1은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물일 수 있다:
[화학식 2]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000003
여기서,
*는 결합이 이루어지는 부분을 의미하며,
m은 0 내지 2의 정수이며,
X5는 N(R6), S, O 및 C(R7)(R8)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
R6 내지 R8은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 Ar2는 하기 화학식 3 내지 5로 표시되는 화합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다:
[화학식 3]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000004
[화학식 4]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000005
[화학식 5]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000006
여기서,
*는 결합이 이루어지는 부분을 의미하며,
o는 0 내지 4의 정수이며,
p및 q는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 0 내지 2의 정수이며,
X6, X9 및 X10은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 N, O, S 및 C(R11)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
X7 및 X8은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 N(R12), O, S 및 C(R13)(R14)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
R9 내지 R14은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 L2는 단일 결합이고, 인접하는 R1 및 Ar2는 서로 결합하여 축합고리를 형성할 수 있다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 R1 및 Ar2가 서로 결합하여 형성되는 축합고리는 하기 화학식 6으로 표시되는 화합물이다:
[화학식 6]
Figure PCTKR2018015013-appb-I000007
여기서,
r은 1 내지 4의 정수이며,
X8, R10 및 p는 화학식 4에서 정의한 바와 같다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 화학식 1의 화합물은 아래의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 이들로 제한되는 것은 아니다:
Figure PCTKR2018015013-appb-I000008
본 발명에 따른 상기 화학식 1의 화합물은 하기 반응식 1 내지 8에 대표적으로 도시된 방법에 의해 제조될 수 있다:
<반응식 1>
Figure PCTKR2018015013-appb-I000009
상업적으로 구입 가능한 옥사다이아졸 화합물(1)을 출발물질로 하여 클로로아세트산과 반응시켜 카복실산기를 포함하는 중간체 화합물(2)를 합성하고 이를 다양한 아민(3)과 커플링 반응시켜 아마이드기를 포함하는 최종 화합물(4)을 합성하였다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 무기산 또는 유기산이 부가된 약학적으로 허용 가능한 염 형태로 제조될 수 있으며, 이때 바람직한 염으로는 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 질산, 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 석신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 만델산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 팔미트산, 말레산, 하이드록시말레산, 벤조산, 하이드록시벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 메탄술폰산, 벤젠술폰산 또는 톨루엔술폰산 등으로부터 유도된 염을 들 수 있다.
구체적으로는 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 염은, 화학식 1의 화합물을 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토나이트릴 등에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 침전된 결정을 여과하여 제조할 수 있다. 또는 산이 부가된 반응 혼합물에서 용매나 과량의 산을 감압하여, 잔사를 건조시켜서 제조하거나, 또는 다른 유기용매를 가하여 석출된 염을 여과하여 제조할 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 수화물 또는 용매화물의 형태일 수 있으며, 그러한 화합물 역시 본 발명에 포함된다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 단백질 카이네이즈를 효과적으로 억제할 수 있다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 상기 p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 즉, p34 단백질의 일부에 결합하고, NEDD4-1 단백질의 일부에 결합함에 따라, p34 단백질 및 NEDD4-1 단백질의 결합을 억제할 수 있다. 구체적으로 상기 질환으로는 종양의 전이 성장으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 암 또는 종양을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있으며, 더 나아가서는 암 세포의 전이 또한 효과적으로 억제할 수 있다. 여기서 상기 암은 간암(liver cancer), 간세포암(hepatocellular carcinoma), 갑상선암(thyroid cancer), 결장암(colorectal cancer), 고환암 (testicular cancer), 골암(bone cancer), 구강암(oral cancer), 기저세포암(basal cell carcinoma), 난소암(ovarian cancer), 뇌종양(brain tumor), 담낭암(gallbladder carcinoma), 담도암(biliary tract cancer), 두경부암(head and neck cancer), 대장암(colorectal cancer), 방광암(vesical carcinoma), 설암(tongue cancer), 식도암(esophageal cancer), 신경교종(glioma), 신경교아종(glioblastoma), 신장암(renal cancer), 악성흑색종(malignant melanoma), 위암(gastric cancer), 유방암(breast cancer), 육종(sarcoma), 인두암(pharynx carcinoma), 자궁암(uterine cancer), 자궁경부암(cervical cancer), 전립선암(prostate cancer), 직장암(rectal cancer), 췌장암(pancreatic cancer), 폐암(lung cancer), 대장암(colorectal cancer), 결장암(colon cancer) 및 기타 고형암으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 구체적인 한 실시양태에서, 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 암종을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 여기서, 상기 암종은 폐, 간, 담도, 위장관, 두부 및 경부, 췌장, 전립선, 자궁 경부, 유방, 대장 및 결장으로 이루어지는 군에서 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 등은 상기 질환을 예방 또는 치료하기 위하여 검체에 투여될 수 있다. 이때 그 투여량은 처리되는 대상, 질병 또는 상태의 심각도, 투여의 속도 및 처방 의사의 판단에 따라 다를 수 있으나, 통상 화학식 1의 화합물을 사람에게 활성성분으로서 체중 70 kg 기준시 하루 0.1 내지 2,000 ㎎, 바람직하게는 1 내지 1,000 ㎎의 양으로 1일 1 내지 4회 또는 온/오프(on/off) 스케줄로 경구 또는 비경구적 경로를 통해 투여될 수 있다. 일부 경우에 있어서, 상기 언급된 범위 보다 적은 투여량이 보다 적합할 수도 있고, 해로운 부작용을 일으키지 않으면서도 보다 많은 투여량이 사용될 수도 있으며, 보다 많은 투여량의 경우는 하루에 걸쳐 수회의 적은 투여량으로 분배된다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 통상적인 방법에 따라 제제화할 수 있으며, 정제, 환제, 산제, 캅셀제, 시럽, 에멀젼, 마이크로에멀젼 등의 다양한 경구 투여 형태로, 또는 근육내, 정맥내 또는 피하투여와 같은 비경구 투여 형태로 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물이 경구제형의 형태로 제조되는 경우, 사용되는 담체의 예로는 셀룰로오스, 규산칼슘, 옥수수전분, 락토오스, 수크로스, 덱스트로스, 인산칼슘, 스테아르산, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 젤라틴, 탈크, 계면활성제, 현탁제, 유화제, 희석제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 약학 조성물이 주사제의 형태로 제조되는 경우, 상기 담체로는 물, 식염수, 포도당 수용액, 유사 당 수용액, 알콜, 글리콜, 에테르(예: 폴리에틸렌글리콜 400), 오일, 지방산, 지방산에스테르, 글리세라이드, 계면활성제, 현탁제, 유화제 등을 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
[제조예 1] 2-{5-(2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일}아세트산
Figure PCTKR2018015013-appb-I000010
상온에서 5-(2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-티온 (2.45g, 10 mmol)을 무수 에탄올 (100 mL)에 녹인 후, 트리에틸아민 (2.1 mL, 15 mmol, 1.5 eq)을 넣는다. 이 용액에 클로로아세트산 (1.42g, 12 mmol)을 조금씩 첨가한 후, 용액의 온도를 70°C로 올린 후 12시간 교반하였다. 출발물질이 모두 반응하면 용매를 감압 하에 모두 제거한 후, 무수 에탄올 (30 mL)에 녹인 후, 1N HCl를 조금씩 첨가하여 산성화 (pH 2~3) 하여 생긴 고체를 여과하여 목적화합물 (2.91g, 96%)을 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ (ppm) 11.15 (1H,s, -NH), 7.97(1H, s, ArH), 7.58 (1H, d, J=8.8, ArH), 7.38(1H, d, J=8.8, ArH), 4.16 (2H, s, S-CH2-COOH), 2.33 (3H, s), 2.20 (3H, s)
MS (ESI) m/z 304 (M++1).
[제조예 2] 2-{5-(1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일}아세트산
Figure PCTKR2018015013-appb-I000011
상기 제조예 1에서 5-(2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-티온 대신에 5-(1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-티온을 사용한 것을 제외하고는 동일한 방법으로 목적화합물을 얻었고 정제없이 다음 반응에 바로 사용하였다.
[실시예 1] 2-((5-2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)티오)-N-(티아졸-2-일메틸)아세트아마이드
Figure PCTKR2018015013-appb-I000012
제조예 1 에서 얻은 2-((5-2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)아세트산 (2.60g, 8.57 mmol)와 5-(아미노메틸)티아졸디하이드로클로라이드 (1.60g, 8.57 mmol)을 녹인 DMF (120 mL) 용액에, 1-하이드록시벤조트리아졸 (HOBT, 1.27g, 9.40 mmol, 1.1 eq), 디메틸아미노프로필)-N-에틸카보디이미드하이드로클로라이드 (EDC, 1.80g, 1.1 eq) 및 디이소프로필에틸아민 (DIPEA, 15 mL, 94.0 mmol, 10eq)을 첨가한 후, 상온에서 16시간 교반하였다. 출발물질들이 모두 반응한 후, 포화 NaHCO3 수용액 (60 mL)을 넣고 에틸 아세테이트 (200 mL, 2회)로 추출하고 무수 MgSO4로 건조한 후, 감압 하에 용매를 제거하여 조생성물 (2.24g)을 얻었다. 조 생성물에 에틸 아세테이트/MEOH (2:1, v/v, 15mL)를 넣어 1시간 정도 슬러리 (slurry)하여 생성된 연한 노란색 (pale yellow)의 고체인 화합물 (1.78g, 52%, HPLC 순도 >98%)을 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ (ppm) 11.15 (1H, s, -NH), 9.01 (1H, t, J=5.8 Hz, -NH), 8.93 (1H, s, ArH), 7.96 (1H, s, ArH), 7.78 (1H, s, ArH), 7.58 (1H, dd, J=8.4 & 1.2, ArH), 7.37 (1H, d, J=8.4, ArH), 4.54 (2H, br. s, NH-CH2-thiazole), 4.12 (2H, s, S-CH2-C=O), 2.33 (3H, s), 2.12 (3H, s)
MS (ESI) m/z 400 (M++1).
실시예 1에서 사용한 아민을 제외하고는 동일한 방법으로 실시예 3 내지 6의 화합물을 합성하였고 이를 표 1에 나타내었다. 또한 실시예 1에서 제조예 1 에서 얻은 2-((5-2,3-디메틸-1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일)아세트산 대신에 제조예 2에서 얻은 2-{5-(1H-인돌-5-일)-1,3,4-옥사다이아졸-2-일}아세트산을 사용하여 실시예 2의 화합물을 합성하였고 이를 표 1에 나타내었다.
실시예 화학구조 NMR 스펙트럼 데이터
1
Figure PCTKR2018015013-appb-I000013
 1H NMR (DMSO-d6) δ 11.15 (1H, s, -NH), 9.01 (1H, t, J=5.8 Hz, -NH), 8.93 (1H, s, ArH), 7.96 (1H, s, ArH), 7.78 (1H, s, ArH), 7.58 (1H, dd, J=8.4 & 1.2, ArH), 7.37 (1H, d, J=8.4, ArH), 4.54 (2H, br. s, NH-CH2-thiazole), 4.12 (2H, s, S-CH2-C=O), 2.33 (3H, s), 2.12 (3H, s)
2
Figure PCTKR2018015013-appb-I000014
 1H NMR (DMSO-d6) δ 0.85(s, 1H), 1.06(s, 1H), 1.34(d, 1H), 1.82(s, 1H), 2.32(s, 1H), 4.52(d, 3H), 4.68(d, 1H), 5.13(s, 3H), 6.52(s, 1H), 7.40-7.48(m, 3H), 7.58-7.60(m, 2H), 7.73(s, 1H), 7.81(s, 1H), 7.88(d, 1H), 8.05(d, 1H), 8.13(s, 1H), 8.94(d, 2H), 9.01-9.07(m, 3H)
3
Figure PCTKR2018015013-appb-I000015
 1H NMR (DMSO-d6) δ 2.20(s, 3H), 2.33(s, 3H), 4.17(s, 2H), 4.62(d, 2H), 7.39(d, 1H), 7.58-7.61(m, 2H), 7.70(d, 1H), 7.97(s, 1H), 9.23(t, 1H), 11.15(s, 1H)
4
Figure PCTKR2018015013-appb-I000016
 1H NMR (DMSO-d6) δ 2.15(s, 3H), 2.29(s, 3H), 3.93(t, 1H), 4.00(t, 2H), 4.17(t, 1H), 4.68(s, 3H), 7.34(s, 1H), 7.55-7.58(m, 1H), 7.80(s, 1H), 7.94(s, 1H), 11.11(s, 1H)
5
Figure PCTKR2018015013-appb-I000017
 1H NMR (DMSO-d6) δ 2.15(s, 3H), 2.28(s, 3H), 3.90(s, 1H), 4.23(d, 2H), 4.61(d, 2H), 7.27-7.33(m, 3H), 7.55-7.58(m, 3H), 7.93(d, 1H), 9.14(t, 1H), 11.10(s, 1H)
6
Figure PCTKR2018015013-appb-I000018
 1H NMR (DMSO-d6) δ 2.20(s, 3H), 2.33(s, 3H), 3.33(s, 5H), 4.20(s, 2H), 4.49(d, 2H), 7.38(d, 1H), 7.59(d, 1H), 7.97(s, 1H), 8.51-8.62(m, 3H), 9.03(t, 1H), 11.14(s, 1H)
시험예
상기 실시예에서 제조한 화합물들에 대해 다음과 같이 효능을 평가하여 결과를 나타내었다.
시험예 1: FRET (fluorescence resonance energy transfer) assay를 이용한 p34와 NEDD4-1 결합 저해 활성 평가
화합물의 p34와 NEDD4-1의 결합에 대한 저해활성 평가는 CISBio사에 의해 개발된 HTRF 기술을 기반으로, p34 단백질과 NEDD4-1 단백질을 이용하였다. 이 평가법은 Terbium이 라벨된 Anti-FLAG 항체와 d2가 라벨된 Anti-6XHis 항체의 존재 하에 FRET(fluorescence resonance energy transfer) 신호(signal)를 측정한다. 실험은 384-웰 플레이트(well plate)에서, 1X PBS pH 7.4, 0.1% BSA 및 2% DMSO 조건 하에서 수행되었다. 기저신호(Background signal)를 p34-NEDD4-1 단백질이 없는 상태에서 측정하고, 비저해신호로서 용매(2% DMSO)만을 첨가하여 측정한 후에, 평가하고자 하는 화합물을 처리하여 최종 농도가 10uM이 되도록 만든 후 화합물의 p34-NEDD4-1 저해활성을 %로 산출하였다. 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
Compound_ID FRET result (Inhibition% @10νM)
실시예 1 45.8
실시예 2 65.8
실시예 3 59.4
실시예 4 54.6
실시예 5 58.9
실시예 6 46.6
control 0
시험예 2: p34 활성 억제제의 PTEN 재활성화 유도를 통한 활성 평가
인간 대장암 세포주인 SW620에 p34 활성 억제제를 5uM 농도로 48시간 동안 처리한 후, 세포액을 수거하여 PTEN 항체로 면역침강을 실시하였다. 그 후 water-soluble diC8-phosphatidylinositol 3, 4, 5 tri-phosphate가 포함된 반응 완충액 (100mm tris-HCl pH8.0, 10mM DTT)과 37℃에서 40분간 반응시킨 후, 상책액만 수거하여 Biomol Green 용액과 30분간 상온에서 반응시키고, CD650nm에서 PTEN 지질 인산분해효소 활성을 측정하였다. 화합물의 PTEN재활성화에 의한 인산분해효소 활성을 %로 산출하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
Compound_ID PTEN activity (relative fold @5νΝ)
실시예 1 1.8
실시예 2 1.0
실시예 3 2.1
실시예 4 2.2
실시예 5 2.2
실시예 6 1.8
control 1.0
시험예 3: p34 활성 억제제의 xenograft 마우스 동물모델에서 종양성장 억제 활성 평가
인간 대장암 세포주인 SW620를 Balb/c 누드 마우스에 피하로 주입하여 이종이식편 (xenograft) 종양을 형성시켰다. 종양의 크기를 매 3일간격으로 관찰하여, 종양의 크기가 100mm3에 도달하였을 때를 0일로 하여 매일 p34 활성 억제제를 경구투여하고 (대조군은 용매만 투여함) 종양의 크기를 계속 관찰하였다. p34 활성 억제제는 포스페이트 버퍼 (pH4.0):10%PVP:Tween80 = 47.5:47.5:5 용매에 완전히 풀어 10, 30, 100mg/kg 혹은 50mg/kg(BID)의 농도로 투여하였다. 도 1, 도 3에 나타낸 바와 같이, p34 활성 억제제를 투여한 마우스군은 대조군에 비하여 종양의 성장이 현저하게 감소하였다. 도 2에 나타낸 바와 같이, p34 활성 억제제를 투여한 군에서는 PTEN의 발현이 증가하였으며, NEDD4-1의 발현은 감소하였다.
시험예 4: p34와 결합하는 NEDD4-1의 결합부위 규명
p34와 결합하는 NEDD4-1 단백질의 부위를 결정하기 위하여 NMR titration을 수행하였다. 0.5mM 재조합 14N-labeled NEDD4-1WW1 domain과 0.8mM unlabed p34 단백질을 준비하였다. 두 단백질은 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 8.1 mM Na2HPO4 and 1.5 mM KH2PO4, pH 7.4 in 10% D2O를 포함하는 PBS 버퍼에 녹여 준비하였다. Unlabed p34의 농도를 증가시켜 14N-labeled NEDD4-1WW1 domain과의 ratios를 1:0. 1:0.25, 1:0.5가 되도록 가하면서 tiration을 수행하였다. 모든 NMR 실험은 Bruker DRX 850 MHz 를 사용하였고, 결과는 XWINNMR 프로그램과 NMRpipe/NMRDraw software로 분석하였다.
도 4a 내지 4d는 p34SEI-1와 상호 작용 후 NEDD4-1의 WW1 도메인의 분자 상호 작용 및 백본 역학 관계를 도시한 것이다. 도 4a는 증가된 농도의 비표지화된 p34SEI-1 (1e120)으로 적정된 NEDD4-1 (Red)의 15N WW1 도메인의 2D 1H-15N HSQC 스펙트럼을 중첩한 것이다. 도 4b는 증가된 농도의 비표지화된 p34SEI-1 (1e120)으로 적정된 NEDD4-1의 WW1 도메인의 1H-15N HSQC 스펙트럼을 중첩한 것을 확대한 것이다. 별표 [*]는 피크 넓어짐 (peak broadening)로 인해 사라진 잔류물 (residues)을 나타낸다. 도 4c는 1H-15N 이종핵 (heteronuclear) NOE 실험의 결과로서 NEDD4-1 WW1 도메인 및 상응하는 이차 구조 (패널 위에 도시된)에 대한 평균 이종핵 NOE 값으로 표시된다. 도 4d는 NEDD4-1 WW1 도메인 (SWISS-MODEL)의 역학적 영역을 나타낸 소시지 형태의 묘사도이다.
도 4a 내지 4d에 나타낸 바와 같이, NEDD4-1WW1 도메인의 중심 영역 (core region)에 위치하는 G196, E198, I203, Y209, V210, N211, H212, K220과 R221 아미노산을 통해 p34 단백질과 결합한다.
이상, 본 발명을 상기 실시 예를 중심으로 하여 설명하였으나 이는 예시에 지나지 아니하며, 본 발명은 본 발명의 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명한 다양한 변형 및 균등한 기타의 실시 예를 이하에 첨부한 청구범위 내에서 수행할 수 있다는 사실을 이해하여야 한다.

Claims (15)

  1. 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000019
    여기서,
    n은 1 내지 10의 정수이며,
    X1 및 X4는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 S, O, N(R2) 및 C(R3)(R4)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
    X2 및 X3는 각각 독립적으로 N 또는 C(R5)이며, 적어도 하나는 N이며,
    L1 및 L2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 단일 결합, 카보닐기, 비치환 또는 치환된 탄소수 1 내지 10의 알킬렌기 또는 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴렌기이며,
    Ar1 및 Ar2는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 아르알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 30의 헤테로아릴기, 비치환 또는 치환된 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴알킬기, 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기 및 비치환 또는 치환된 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기로 이루어진 군으로부터 선택되며,
    R1 내지 R5는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴기로 이루어진 군으로부터 선택되며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있으며,
    상기 치환된 알킬렌기, 치환된 아릴렌기, 치환된 아릴기, 치환된 아르알킬기, 치환된 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴알킬기, 치환된 시클로알킬기 및 치환된 헤테로시클로알킬기는 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 치환기로 치환되며, 복수 개의 치환기로 치환되는 경우 이들은 서로 동일하거나 상이하며, 인접하는　기와 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 고리를 형성할 수 있다.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 Ar1은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000020
    여기서,
    *는 결합이 이루어지는 부분을 의미하며,
    m은 0 내지 2의 정수이며,
    X5는 N(R6), S, O 및 C(R7)(R8)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
    R6 내지 R8은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된다.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 Ar2는 하기 화학식 3 내지 5로 표시되는 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000021
    [화학식 4]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000022
    [화학식 5]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000023
    여기서,
    *는 결합이 이루어지는 부분을 의미하며,
    o는 0 내지 4의 정수이며,
    p및 q는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 0 내지 2의 정수이며,
    X6, X9 및 X10은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 N, O, S 및 C(R11)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
    X7 및 X8은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 N(R12), O, S 및 C(R13)(R14)로 이루어진 군으로부터 선택되며,
    R9 내지 R14은 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시아노기, 니트로기, 할로겐기, 히드록시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬기, 탄소수 1 내지 20의 시클로알킬기, 탄소수 2 내지 30의 알케닐기, 탄소수 2 내지 24의 알키닐기, 탄소수 7 내지 30의 아르알킬기, 탄소수 6 내지 30의 아릴기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로아릴기, 탄소수 3 내지 30의 헤테로아르알킬기, 탄소수 1 내지 30의 알콕시기, 탄소수 1 내지 30의 알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아릴아미노기, 탄소수 6 내지 30의 아르알킬아미노기, 탄소수 6 내지 30의 헤테로 아릴아미노기, 탄소수 1 내지 30의 알킬실릴기, 탄소수 3 내지 40의 시클로알킬기, 탄소수 3 내지 40의 헤테로시클로알킬기, 탄소수 6 내지 60의 아릴실릴기 및 탄소수 6 내지 30의 아릴옥시기로 이루어진 군으로부터 선택된다.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 L2는 단일 결합이고, 인접하는 R1 및 Ar2는 서로 결합하여 축합고리를 형성할 수 있는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 R1 및 Ar2가 서로 결합하여 형성되는 축합고리는 하기 화학식 6으로 표시되는 화합물인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 6]
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000024
    여기서,
    r은 1 내지 4의 정수이며,
    X8, R10 및 p는 제3항에서 정의한 바와 같다.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1의 화합물이 하기 화합물들로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure PCTKR2018015013-appb-I000025
  7. 제1항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적 유효량으로 포함하는, 약학 조성물.
  8. 제6항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약학적 유효량으로 포함하는, 약학 조성물.
  9. 약학적 유효량의 제1항의 화합물을 검체에게 투여하는 것을 포함하는, 검체나 세포에서 p34 및 NEDD4-1(Neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated 4-1) 단백질의 결합을 억제하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 화합물이 NEDD4-1WW1 도메인의 중심 영역 (core region)에 위치하는 G196, E198, I203, Y209, V210, N211, H212, K220 및 R221 아미노산을 통해 p34 단백질과 결합하는 것을 차단하는 방식으로 검체나 세포에서 p34 및 NEDD4-1 단백질의 결합을 억제하는 방법.
  11. 약학적 유효량의 제1항의 화합물을 검체에게 투여하는 것을 포함하는, 검체에서 암 세포의 전이를 억제하는 방법.
  12. p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 암종의 치료를 필요로 하는 검체에게 약학적 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, p34 및 NEDD4-1의 동시 발현에 의해 매개되는 암종의 치료 방법.
  13. 제12항에 있어서,
    상기 암종이 폐, 유방, 대장, 결장, 간, 담도, 위장관, 두부 및 경부, 췌장, 전립선 및 자궁 경부의 암종, 다발성 골수종, 흑색종, 신경교종 및 아교모세포종으로 이루어지는 군에서 선택되는 것인 방법.
  14. 제7항 또는 제8항에 있어서,
    상기 약학 조성물이 암 또는 종양을 예방 또는 치료하기 위한 것인 약학 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 암이 간암(liver cancer), 간세포암(hepatocellular carcinoma), 갑상선암(thyroid cancer), 결장암(colorectal cancer), 고환암 (testicular cancer), 골암(bone cancer), 구강암(oral cancer), 기저세포암(basal cell carcinoma), 난소암(ovarian cancer), 뇌종양(brain tumor), 담낭암(gallbladder carcinoma), 담도암(biliary tract cancer), 두경부암(head and neck cancer), 대장암(colorectal cancer), 방광암(vesical carcinoma), 설암(tongue cancer), 식도암(esophageal cancer), 신경교종(glioma), 신경교아종(glioblastoma), 신장암(renal cancer), 악성흑색종(malignant melanoma), 위암(gastric cancer), 유방암(breast cancer), 육종(sarcoma), 인두암(pharynx carcinoma), 자궁암(uterine cancer), 자궁경부암(cervical cancer), 전립선암(prostate cancer), 직장암(rectal cancer), 췌장암(pancreatic cancer), 폐암(lung cancer), 피부암(skin cancer), 대장암(colorectal cancer), 결장암(colon cancer)및 기타 고형암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
PCT/KR2018/015013 2017-11-30 2018-11-29 P34 단백질 및 nedd4-1 단백질의 결합 억제제로서의 신규 화합물 및 이의 용도 WO2019107993A1 (ko)

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