WO2017168876A1

WO2017168876A1 - Analysis vessel, target analysis instrument employing same, and target analysis method

Info

Publication number: WO2017168876A1
Application number: PCT/JP2016/087698
Authority: WO
Inventors: 克紀堀井; 嘉仁吉田
Original assignee: Ｎｅｃソリューションイノベータ株式会社
Priority date: 2016-03-31
Filing date: 2016-12-19
Publication date: 2017-10-05
Also published as: JPWO2017168876A1; JP6525301B2

Abstract

Provided are an analysis vessel in which a liquid is allowed to flow in a controlled manner, a target analysis device employing the same, and a target analysis method. This analysis vessel is characterized by comprising a first chamber 11, a second chamber 12 and a third chamber 13, and in that: the first chamber 11, the second chamber 12 and the third chamber 13 are sequentially arranged in this order; the analysis vessel has a first partition 111 between the first chamber 11 and the second chamber 12; the analysis vessel has a second partition 121 between the second chamber 12 and the third chamber 13; a sample holding instrument can be inserted inside the first chamber 11 from the outside; the first partition wall 111 breaks as a result of coming into contact with the tip of the sample holding instrument, which has been inserted in the first chamber 11; the second partition 121 is a porous partition; the third chamber 13 has at least one through hole 14; an openable/closable closing member is disposed on the through hole 14 to cover the through hole; and the closing member is removed to open the through hole 14 in order to allow liquid to flow from the second chamber 12 to the third chamber 13.

Description

分析用容器、それを用いたターゲット分析用具およびターゲット分析方法Analysis container, target analysis tool and target analysis method using the same

　本発明は、分析用容器、それを用いたターゲット分析用具およびターゲット分析方法に関する。 The present invention relates to an analysis container, a target analysis tool using the same, and a target analysis method.

　ターゲットの分析においては、一般的に、前記ターゲットに対する結合性を有する結合物質を使用し、前記ターゲットと前記結合物質との結合体を形成させ、これを直接的または間接的に検出することによって、ターゲットの有無または量を分析できる（特許文献１、特許文献２）。 In target analysis, generally, a binding substance having binding properties to the target is used, and a conjugate of the target and the binding substance is formed, and this is detected directly or indirectly, The presence / absence or amount of the target can be analyzed (Patent Document 1, Patent Document 2).

　しかし、このように結合物質を使用した分析方法においては、前記ターゲットと結合した結合物質と前記ターゲットに未結合の結合物質との分離が必要とされているため、一つの分析用具内で一連の処理を行い、ターゲットを検出することが困難である。 However, in the analysis method using the binding substance in this way, it is necessary to separate the binding substance bound to the target and the binding substance not bound to the target. It is difficult to perform processing and detect a target.

特表２０１４－５０７６７０号公報Special table 2014-507670 gazette 特表２００７－５１８９９４号公報Special table 2007-518994

　前記ターゲットと結合した結合物質と前記ターゲットに未結合の結合物質との分離を行なうための分析用具として、有底筒状の分析用容器内に、前記ターゲットと結合した結合物質と前記ターゲットに未結合の結合物質とを分離可能な隔壁を配置した分析用容器が考えられた。前記分析用容器では、前記隔壁の開口側の室において、前記ターゲットと前記結合物質との結合体を形成させた後、前記ターゲットと前記結合物質との混合物を、前記隔壁を通過させて底部側の室に導入することにより、前記ターゲットと結合した結合物質と前記ターゲットに未結合の結合物質とを分離できる。しかしながら、前記分析用容器では、前記隔壁を介した前記開口側の室から前記底部側の室への前記ターゲットと前記結合物質との混合物の移動が実質的に生じないという問題があった。 As an analysis tool for separating the binding substance bound to the target and the binding substance unbound to the target, the binding substance bound to the target and the target not bound to the target are placed in a bottomed cylindrical analysis container. An analytical container in which a partition wall capable of separating the binding substance of the binding was arranged was considered. In the analysis container, in the chamber on the opening side of the partition wall, a combined body of the target and the binding substance is formed, and then the mixture of the target and the binding substance is passed through the partition wall to be on the bottom side. By introducing into this chamber, the binding substance bound to the target and the binding substance not bound to the target can be separated. However, the analysis container has a problem that the mixture of the target and the binding substance does not substantially move from the opening-side chamber to the bottom-side chamber via the partition wall.

　また、前記分析用容器において、前記底部側の室に通気用の貫通孔を設けた場合、前記開口側の室において、前記ターゲットと前記結合物質との形成体を形成する前に、前記ターゲットと前記結合物質との混合物が、前記隔壁を通過し、前記底部側の室に導入されることがある。このため、十分な分析精度が得られない場合があるという問題があった。 Further, in the analysis container, when a through-hole for ventilation is provided in the bottom side chamber, the target and the binding substance are formed in the chamber on the opening side before the formation body of the target and the binding substance is formed. The mixture with the binding substance may pass through the partition and be introduced into the bottom chamber. For this reason, there is a problem that sufficient analysis accuracy may not be obtained.

　そこで、本発明は、分析用容器内の通液を制御可能な分析用容器、それを用いたターゲット分析用具およびターゲット分析方法を提供することを目的とする。 Therefore, an object of the present invention is to provide an analysis container capable of controlling the flow of liquid in the analysis container, a target analysis tool and a target analysis method using the same.

　本発明の分析用容器は、第１室、第２室および第３室を含み、
前記第１室、前記第２室および前記第３室が、この順序で連続して配置され、
前記第１室と前記第２室との間に、第１隔壁を有し、
前記第２室と前記第３室との間に、第２隔壁を有し、
前記第１室は、その外部から内部に、試料保持用具を挿入可能であり、
前記第１隔壁は、前記第１室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁であり、
前記第２隔壁は、多孔性隔壁であり、
前記第３室は、１以上の貫通孔を含み、
前記貫通孔には、開閉可能な閉塞部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔を前記閉塞部材から開放することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる
ことを特徴とする。 The analysis container of the present invention includes a first chamber, a second chamber, and a third chamber,
The first chamber, the second chamber, and the third chamber are sequentially arranged in this order,
A first partition between the first chamber and the second chamber;
A second partition wall between the second chamber and the third chamber;
The first chamber can be inserted with a sample holding tool from the outside to the inside,
The first partition is a partition that is destroyed by contacting the tip of the sample holding tool inserted into the first chamber,
The second partition is a porous partition,
The third chamber includes one or more through holes,
In the through hole, a closing member that can be opened and closed is arranged in a state of covering the through hole,
By opening the through hole from the closing member, liquid can be passed from the second chamber to the third chamber.

　本発明のターゲット分析用具（以下、「分析用具」ともいう。）は、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬を含み、
前記第２室は、前記第２試薬を含み、
前記第３室は、前記第１試薬または前記第２試薬における標識物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、担体に固定化された結合物質が通過できず、前記標識物質が結合した結合物質が通過できる多孔性隔壁であり、
前記第１試薬および前記第２試薬が、下記（１）～（３）および（４）のいずれかの組合せであることを特徴とする。
（１）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質である。
（２）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質である。
（３）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質が担体に固定化された固定化第１結合物質である。
（４）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質が担体に固定された固定化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質である。 The target analysis tool of the present invention (hereinafter also referred to as “analysis tool”) includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber contains the first reagent,
The second chamber contains the second reagent,
The third chamber is a detection unit for detecting a labeling substance in the first reagent or the second reagent,
The second partition wall is a porous partition wall through which the binding substance immobilized on the carrier cannot pass and the binding substance bound with the labeling substance can pass through.
The first reagent and the second reagent are any combination of the following (1) to (3) and (4).
(1) The first reagent is an immobilized second binding substance in which a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target is immobilized on a carrier, and the second reagent is the first binding substance. It is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a substance.
(2) The first reagent is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is a second binding substance that binds to the first binding substance. Is an immobilized second binding substance immobilized on a carrier.
(3) The first reagent is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound to a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is the first binding substance. Is an immobilized first binding substance immobilized on a carrier.
(4) The first reagent is an immobilized first binding substance in which a first binding substance that binds to a target is fixed to a carrier, and the second reagent binds to the first binding substance. This is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound.

　本発明のターゲット分析方法（以下、「分析方法」ともいう。）は、前記本発明のターゲット分析用具を使用し、下記（Ａ）～（Ｃ）および（Ｄ）のいずれかの分析方法を実施することを特徴とする。
（Ａ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（１）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
試料を保持した試料保持用具を前記ターゲット分析用具の前記第１室に挿入後、前記第１室と前記第２室との間の前記第１隔壁に接触させ、前記第２室に、前記試料と前記第１試薬とを導入する工程、
前記第２室において、前記試料と前記第１試薬と前記第２試薬とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させ、且つ前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第１試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｂ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（２）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させる工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記混合物中の前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第２試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｃ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（３）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させ、且つ、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質と前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｄ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（４）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させる工程、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記固定化第１結合物質と前記第２試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。 The target analysis method of the present invention (hereinafter also referred to as “analysis method”) uses the above-described target analysis tool of the present invention and performs any of the following analysis methods (A) to (C) and (D). It is characterized by doing.
(A) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (1),
After a sample holding tool holding a sample is inserted into the first chamber of the target analysis tool, the sample holding tool is brought into contact with the first partition between the first chamber and the second chamber, and the sample is placed in the second chamber. And introducing the first reagent,
In the second chamber, the sample, the first reagent, and the second reagent are brought into contact with each other, and the target in the sample and the labeled first binding substance that is the second reagent are bound to each other. And binding the labeled first binding substance unbound to the target to the immobilized second binding substance that is the first reagent,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(B) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of the above (2),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent with the sample in the first chamber to form a first conjugate in which the target in the sample is bound to the labeled first binding substance as the first reagent;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent, and the labeled first binding substance unbound to the target in the mixture is used as the second reagent. Binding to the immobilized second binding substance,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(C) Analytical method The target reagent which said 1st reagent and said 2nd reagent are the combination of said (3),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the second reagent. And binding the immobilized first binding substance that is unbound to the target and the labeled second binding substance that is the first reagent,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.
(D) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (4),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent and the sample in the first chamber to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the first reagent;
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. And introducing a mixture of the first reagent and
In the second chamber, the second reagent, a mixture of the sample and the first reagent are brought into contact with each other, and the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance as the second reagent are brought into contact with each other. Combining,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.

　本発明の分析用容器によれば、前記分析用容器内の通液を制御できる。 According to the analysis container of the present invention, the liquid flow in the analysis container can be controlled.

図１は、実施形態１の分析用容器の構成を示す模式断面図および前記分析用容器における液体の移動の一例を示す概略図である。FIG. 1 is a schematic cross-sectional view illustrating a configuration of an analysis container according to Embodiment 1 and a schematic diagram illustrating an example of liquid movement in the analysis container. 図２は、実施形態２の分析用容器の構成を示す模式断面図および前記分析用容器における液体の移動の一例を示す概略図である。FIG. 2 is a schematic cross-sectional view illustrating a configuration of an analysis container according to the second embodiment and a schematic diagram illustrating an example of liquid movement in the analysis container. 図３は、実施形態３の分析用容器の構成を示す模式断面図および模式分解図である。FIG. 3 is a schematic cross-sectional view and a schematic exploded view showing the configuration of the analysis container of the third embodiment. 図４は、実施形態４Ａのターゲット分析用具の一例を示す概略図である。FIG. 4 is a schematic diagram illustrating an example of the target analysis tool of Embodiment 4A. 図５は、実施形態４Ａのターゲット分析用具を用いた分析方法の一例を示す概略図である。FIG. 5 is a schematic diagram illustrating an example of an analysis method using the target analysis tool of Embodiment 4A. 図６は、実施形態４Ｂのターゲット分析用具の一例を示す概略図である。FIG. 6 is a schematic diagram illustrating an example of the target analysis tool of Embodiment 4B. 図７は、実施形態４Ｂのターゲット分析用具を用いた分析方法の一例を示す概略図である。FIG. 7 is a schematic diagram illustrating an example of an analysis method using the target analysis tool of Embodiment 4B. 図８は、実施形態４Ｃのターゲット分析用具の一例を示す概略図である。FIG. 8 is a schematic diagram illustrating an example of the target analysis tool of Embodiment 4C. 図９は、実施形態４Ｃのターゲット分析用具を用いた分析方法の一例を示す概略図である。FIG. 9 is a schematic diagram illustrating an example of an analysis method using the target analysis tool of Embodiment 4C. 図１０は、実施形態４Ｄのターゲット分析用具の一例を示す概略図である。FIG. 10 is a schematic diagram illustrating an example of a target analysis tool according to Embodiment 4D. 図１１は、実施形態４Ｄのターゲット分析用具を用いた分析方法の一例を示す概略図である。FIG. 11 is a schematic diagram illustrating an example of an analysis method using the target analysis tool of Embodiment 4D.

　本発明の分析用容器は、例えば、前記閉塞部材は、剥離可能なシール部材であり、
前記第３室の外表面には、前記シール部材は、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔から前記シール部材を剥離することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる。 In the analysis container of the present invention, for example, the closing member is a peelable seal member,
On the outer surface of the third chamber, the seal member is disposed in a state of covering the through hole,
By peeling the sealing member from the through hole, liquid can be passed from the second chamber to the third chamber.

　本発明の分析用容器は、例えば、前記閉塞部材は、除去可能な棒状部材であり、
前記第３室の外表面には、前記棒状部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔から前記棒状部材を除去することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる。 In the analysis container of the present invention, for example, the closing member is a removable rod-shaped member,
The rod-shaped member is disposed on the outer surface of the third chamber so as to cover the through-hole,
By removing the rod-shaped member from the through hole, liquid can be passed from the second chamber to the third chamber.

　本発明の分析用容器は、例えば、前記第１室は、前記第２室とは反対側に、前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される前隔壁を有する。 In the analysis container of the present invention, for example, the first chamber has a pre-partition wall that is destroyed by bringing the tip of the sample holding tool into contact with the side opposite to the second chamber.

　本発明の分析用容器は、例えば、第１筒、第２筒および第３筒を有し、
前記第２筒が、前記第１筒の内部に収容でき、
前記第３筒が、前記第１筒の端部に配置でき、
前記第２筒が、前記第１室を有し、
前記第３筒が、前記第３室を有し、
前記第１筒の内部に前記第２筒を収容し、前記第１筒の端部に前記第３筒を配置した際、前記第１筒が、前記第２筒の底部と前記第３筒の上部との間に空間を有する。 The analysis container of the present invention has, for example, a first cylinder, a second cylinder, and a third cylinder,
The second cylinder can be accommodated in the first cylinder;
The third cylinder can be disposed at an end of the first cylinder;
The second cylinder has the first chamber;
The third cylinder has the third chamber;
When the second cylinder is accommodated inside the first cylinder and the third cylinder is disposed at the end of the first cylinder, the first cylinder is connected to the bottom of the second cylinder and the third cylinder. There is a space between the upper part.

　本発明の分析用容器は、例えば、前記第１筒が、前記第１筒内の前記第２筒の収容位置を決める位置決め部材を有し、
前記第２筒が、前記前隔壁および前記第１隔壁を有し、
前記第３筒が、前記第２隔壁と、前記第１筒と接続するための接続部材とを有し、
前記第２筒が、前記第１筒内の所定位置に、前記位置決め部材により配置され、
前記第３筒が、前記接続部材を介して前記第１筒の端部に配置される。 In the analysis container of the present invention, for example, the first cylinder has a positioning member that determines an accommodation position of the second cylinder in the first cylinder,
The second cylinder has the front partition and the first partition;
The third cylinder has the second partition wall and a connection member for connecting to the first cylinder,
The second cylinder is disposed at a predetermined position in the first cylinder by the positioning member;
The third cylinder is disposed at an end of the first cylinder via the connection member.

　本発明の分析用容器は、例えば、外筒と内筒とを有し、
前記内筒が、前記外筒の内部に収容でき、
前記内筒が、前記第１室および前記第２室を有し、
前記外筒の内部に前記内筒を収容した際、前記外筒の底部と前記内筒の底部との間に空間を有する。 The analysis container of the present invention has, for example, an outer cylinder and an inner cylinder,
The inner cylinder can be accommodated in the outer cylinder;
The inner cylinder has the first chamber and the second chamber;
When the inner cylinder is accommodated in the outer cylinder, a space is provided between the bottom of the outer cylinder and the bottom of the inner cylinder.

　本発明の分析用具は、例えば、前記第１結合物質が、アプタマーであり、
前記第２結合物質が、前記アプタマーに相補的な核酸分子である。 In the analysis tool of the present invention, for example, the first binding substance is an aptamer,
The second binding substance is a nucleic acid molecule complementary to the aptamer.

　本発明の分析用具は、例えば、前記標識物質が、酵素、核酸、蛍光物質、色素物質、発光物質、放射性物質、および電子供与体からなる群から選択された少なくとも１つの物質である。前記酵素が、ルシフェラーゼであることが好ましい。 In the analysis tool of the present invention, for example, the labeling substance is at least one substance selected from the group consisting of an enzyme, a nucleic acid, a fluorescent substance, a dye substance, a luminescent substance, a radioactive substance, and an electron donor. The enzyme is preferably luciferase.

　本発明の分析用具は、例えば、前記第３室が、前記酵素に対する基質を含む。 In the analytical tool of the present invention, for example, the third chamber contains a substrate for the enzyme.

　本発明の分析用具は、例えば、前記担体が、ビーズである。 In the analysis tool of the present invention, for example, the carrier is a bead.

　本発明の分析用具は、例えば、前記第１室が、前記試料から、前記試料内部の成分を抽出する抽出液を含む。 In the analysis tool of the present invention, for example, the first chamber includes an extract that extracts components inside the sample from the sample.

　本発明の分析用具は、例えば、前記試料保持用具は、棒状の把持部および試料の保持部を含み、
前記把持部の先端に前記保持部を有する。 In the analysis tool of the present invention, for example, the sample holding tool includes a rod-shaped gripping part and a sample holding part,
The holding part is provided at the tip of the grip part.

　本発明の分析方法は、例えば、前記（Ｂ）または（Ｃ）の分析方法において、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程を含む。 The analysis method of the present invention is, for example, the analysis method of (B) or (C),
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. And introducing a mixture of the first reagent and the first reagent.

　本発明において、「上方向」とは、例えば、本発明の分析用容器の底面の面方向に対する垂直方向であり、且つ前記第３室から前記第２室および前記第１室方向を意味し、「下（底）方向」とは、前記上方向の逆方向を意味する。 In the present invention, the “upward direction” means, for example, a direction perpendicular to the surface direction of the bottom surface of the analysis container of the present invention, and means the second chamber and the first chamber direction from the third chamber, The “down (bottom) direction” means a direction opposite to the upward direction.

＜分析用容器＞
　本発明の分析用容器は、前述のように、第１室、第２室および第３室を含み、前記第１室、前記第２室および前記第３室が、この順序で連続して配置され、前記第１室と前記第２室との間に、第１隔壁を有し、前記第２室と前記第３室との間に、第２隔壁を有し、前記第１室は、その外部から内部に、試料保持用具を挿入可能であり、前記第１隔壁は、前記第１室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁であり、前記第２隔壁は、多孔性隔壁であり、前記第３室は、１以上の貫通孔を含み、前記貫通孔には、開閉可能な閉塞部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、前記貫通孔を前記閉塞部材から開放することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となることを特徴とする。本発明の分析用容器は、前記第３室が、１以上の貫通孔を含み、前記貫通孔には、開閉可能な閉塞部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、前記貫通孔を前記閉塞部材から開放することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となることが特徴であり、その他の構成および条件は、特に制限されない。前記閉塞部材は、例えば、前記貫通孔の開閉を制御可能な部材ということもできる。 <Container for analysis>
As described above, the analysis container of the present invention includes the first chamber, the second chamber, and the third chamber, and the first chamber, the second chamber, and the third chamber are sequentially arranged in this order. And having a first partition between the first chamber and the second chamber, and having a second partition between the second chamber and the third chamber, A sample holding tool can be inserted from the outside into the inside, and the first partition is a partition that is broken by bringing the tip of the sample holding tool inserted into the first chamber into contact with the second partition. The partition wall is a porous partition wall, the third chamber includes one or more through holes, and an openable and closable closing member is disposed in the through hole so as to cover the through hole. By opening the hole from the closing member, liquid can be passed from the second chamber to the third chamber. In the analysis container according to the present invention, the third chamber includes one or more through holes, and an opening / closing closing member is disposed in the through hole so as to cover the through hole. It is a feature that the liquid can be passed from the second chamber to the third chamber by opening from the closing member, and other configurations and conditions are not particularly limited. The blocking member can be said to be a member capable of controlling the opening and closing of the through hole, for example.

　本発明の分析用容器において、例えば、前記第２室に液体を導入すると、前記液体は、前記第２室と前記第３室との間の前記第２隔壁を通過し、前記第３室へ移動しようとする。しかしながら、この際に、前記閉塞部材が前記貫通孔を覆う状態で配置されていると、例えば、前記第３室の空気は、前記第３室から移動できない。このため、前記空気と置換されることにより前記第３室に導入される前記液体は、例えば、前記第２室から前記第３室に実質的に移動しない。他方、前記閉塞部材が除去され、前記貫通孔が前記閉塞部材から開放されると、例えば、前記第３室の空気は、前記貫通孔を介して、前記分析用容器外に移動可能となる、すなわち、前記第３室は、例えば、通気可能となる。このため、前記液体は、例えば、前記第２室から前記第３室に移動可能となり、前記第２室から前記第３室に移動する。したがって、本発明の分析用容器によれば、前記閉塞部材により前記貫通孔の開閉を制御することにより、前記第２室から前記第３室への通液を簡便に制御できる。 In the analysis container of the present invention, for example, when a liquid is introduced into the second chamber, the liquid passes through the second partition wall between the second chamber and the third chamber, and enters the third chamber. Try to move. However, at this time, if the closing member is disposed in a state of covering the through hole, for example, the air in the third chamber cannot move from the third chamber. For this reason, the liquid introduced into the third chamber by being replaced with the air does not substantially move from the second chamber to the third chamber, for example. On the other hand, when the blocking member is removed and the through hole is opened from the blocking member, for example, the air in the third chamber can be moved out of the analysis container via the through hole. That is, the third chamber can be vented, for example. For this reason, for example, the liquid can move from the second chamber to the third chamber, and moves from the second chamber to the third chamber. Therefore, according to the analytical container of the present invention, liquid flow from the second chamber to the third chamber can be easily controlled by controlling the opening and closing of the through hole by the closing member.

　以下、本発明の分析用容器について、図面を参照して、例をあげて詳細に説明する。ただし、本発明は、以下の例に限定および制限されない。また、図面においては、説明の便宜上、各部の構造は適宜簡略化して示す場合があり、各部の寸法比等は、実際とは異なり、模式的に示す場合がある。各実施形態は、特に言及しない限り、互いに組合せ可能である。 Hereinafter, the analysis container of the present invention will be described in detail with reference to the drawings with examples. However, the present invention is not limited or limited to the following examples. In the drawings, for convenience of explanation, the structure of each part may be simplified as appropriate, and the dimensional ratio of each part may be schematically shown, unlike the actual case. Each embodiment can be combined with each other unless otherwise specified.

（実施形態１）
　実施形態１の分析用容器１を図１に示す。図１（Ａ）は、本実施形態の分析用容器１の模式断面図であり、（Ｂ）および（Ｃ）は、分析用容器１において、貫通孔１４を開閉した際の第２室１２に導入された液体の移動を表す模式図である。図１（Ａ）に示すように、本実施形態の分析用容器１は、第１室１１、第２室１２、および第３室１３を有し、第３室１３は、貫通孔１４を有する。分析用容器１は、第１室１１と第２室１２との間には、第１隔壁１１１を有し、第２室１２と第３室１３との間には、多孔性の第２隔壁１２１を有する。また、第３室１３の外表面には、前記閉塞部材であるシール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。シール部材１５１は、第３室１３の外表面から剥離可能である。 (Embodiment 1)
The analysis container 1 of Embodiment 1 is shown in FIG. FIG. 1A is a schematic cross-sectional view of the analysis container 1 of this embodiment. FIGS. 1B and 1C show the second chamber 12 when the through-hole 14 is opened and closed in the analysis container 1. It is a schematic diagram showing the movement of the introduced liquid. As shown in FIG. 1A, the analysis container 1 of the present embodiment has a first chamber 11, a second chamber 12, and a third chamber 13, and the third chamber 13 has a through hole 14. . The analysis container 1 has a first partition 111 between the first chamber 11 and the second chamber 12, and a porous second partition between the second chamber 12 and the third chamber 13. 121. Further, on the outer surface of the third chamber 13, a sealing member 151, which is the closing member, is disposed so as to cover the through hole 14. The seal member 151 can be peeled off from the outer surface of the third chamber 13.

　図１（Ｂ）に示すように、本実施形態の分析用容器１は、シール部材１５１が貫通孔１４を覆う状態で配置されていると、第３室１３の空気は、第３室１３から移動できない。このため、第２室１２に導入された液体は、例えば、第２室１２から第３室１３に実質的に移動しない。そして、図１（Ｃ）に示すように、シール部材１５１が除去され、貫通孔１４がシール部材１５１から開放されると、例えば、第３室１３の空気は、貫通孔１４を介して、分析用容器１外に移動可能となる。このため、第２室１２の前記液体は、例えば、第２室１２から第３室１３に移動可能となり、第２室１２から第３室１３に移動する。したがって、本実施形態の分析用容器１によれば、シール部材１５１の剥離により貫通孔１４の開閉を制御でき、第２室１２から前記第３室１３への通液を簡便に制御できる。 As shown in FIG. 1B, when the analysis container 1 of the present embodiment is arranged in a state where the seal member 151 covers the through hole 14, the air in the third chamber 13 flows from the third chamber 13. I can't move. For this reason, for example, the liquid introduced into the second chamber 12 does not substantially move from the second chamber 12 to the third chamber 13. 1C, when the seal member 151 is removed and the through hole 14 is released from the seal member 151, for example, the air in the third chamber 13 is analyzed via the through hole 14. It becomes possible to move out of the container 1. Therefore, for example, the liquid in the second chamber 12 can move from the second chamber 12 to the third chamber 13, and moves from the second chamber 12 to the third chamber 13. Therefore, according to the analysis container 1 of the present embodiment, the opening and closing of the through hole 14 can be controlled by peeling off the seal member 151, and the liquid flow from the second chamber 12 to the third chamber 13 can be easily controlled.

　本実施形態の分析用容器１の形状は、特に制限されず、任意の形状とできる。本実施形態の分析用容器１の形成材料は、特に制限されず、任意の材料とでき、具体例として、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン、アクリロニトリル－ブタジエン－スチレン共重合合成樹脂等のプラスチック等があげられる。分析用容器１において、第１室１１、第２室１２、および第３室１３の大きさは、特に制限されず、例えば、分析する試料の体積等に応じて、適宜設計できる。 The shape of the analysis container 1 of the present embodiment is not particularly limited and can be any shape. The material for forming the analytical container 1 of the present embodiment is not particularly limited and may be any material. Specific examples thereof include plastics such as polyethylene, polystyrene, polypropylene, acrylonitrile-butadiene-styrene copolymer synthetic resin, and the like. . In the analysis container 1, the sizes of the first chamber 11, the second chamber 12, and the third chamber 13 are not particularly limited, and can be appropriately designed according to, for example, the volume of the sample to be analyzed.

　本実施形態の分析用容器１において、第３室１３は、１つの貫通孔１４を有するが、本発明はこれに限定されず、第３室１３は、２以上の貫通孔１４を有してもよい。また、本実施形態の分析用容器１において、貫通孔１４は、第３室１３の側面上部に形成されているが、本発明はこれに限定されず、例えば、第３室１３に液体が導入された際に、前記液体が分析用容器１の外部に実質的に流出しない任意の位置に形成されてもよい。貫通孔１４の形状は、特に制限されず、任意の形状とできる。貫通孔１４の大きさは、特に制限されず、例えば、分析用容器１内および外の空気が貫通孔１４を介して通気可能な大きさであればよい。具体例として、貫通孔１４の分析用容器１の内表面から外表面方向に対する断面方向の径が、例えば、０．０１～２．０ｍｍ、好ましくは、０．５～１．５ｍｍである。 In the analysis container 1 of the present embodiment, the third chamber 13 has one through hole 14, but the present invention is not limited to this, and the third chamber 13 has two or more through holes 14. Also good. Further, in the analysis container 1 of the present embodiment, the through hole 14 is formed in the upper part of the side surface of the third chamber 13, but the present invention is not limited to this, for example, a liquid is introduced into the third chamber 13. In this case, the liquid may be formed at any position where the liquid does not substantially flow out of the analysis container 1. The shape of the through hole 14 is not particularly limited and can be an arbitrary shape. The size of the through hole 14 is not particularly limited, and may be any size as long as air inside and outside the analysis container 1 can be vented through the through hole 14. As a specific example, the diameter of the through hole 14 in the cross-sectional direction from the inner surface to the outer surface direction of the analytical container 1 is, for example, 0.01 to 2.0 mm, preferably 0.5 to 1.5 mm.

　第１室１１と前記第２室１２との間の第１隔壁１１１は、前述のように、前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁である。第１隔壁１１１は、例えば、第１室１１の底部であり、第２室１２の上部であるともいえる。第１隔壁１１１は、前記試料保持用具の先端を接触させることで破壊できればよく、その材質や特性等は、特に制限されない。第１隔壁１１１としては、例えば、アルミ箔等の金属薄膜、紙、合成繊維等が使用できる。前記試料保持用具については、後述する。 As described above, the first partition 111 between the first chamber 11 and the second chamber 12 is a partition that is destroyed by bringing the tip of the sample holding tool into contact therewith. The first partition 111 is, for example, the bottom of the first chamber 11 and the top of the second chamber 12. The first partition 111 may be broken by bringing the tip of the sample holding tool into contact with the first partition 111, and the material, characteristics, and the like are not particularly limited. As the 1st partition 111, metal thin films, such as aluminum foil, paper, a synthetic fiber, etc. can be used, for example. The sample holding tool will be described later.

　第２室１２と第３室１３との間の第２隔壁１２１は、前述のように、多孔性隔壁である。前記多孔性隔壁は、特に制限されず、例えば、多孔質膜等があげられる。前記多孔質膜は、例えば、セルロース膜、酢酸セルロース、ニトロセルロース等のセルロース誘導体膜、ガラスフィルター等のフィルター、濾紙等があげられる。前記多孔性隔壁における孔径は、特に制限されず、分析用容器１に配置する試薬等に応じて、適宜設定できる。 The second partition 121 between the second chamber 12 and the third chamber 13 is a porous partition as described above. The porous partition is not particularly limited, and examples thereof include a porous film. Examples of the porous membrane include cellulose membranes, cellulose derivative membranes such as cellulose acetate and nitrocellulose, filters such as glass filters, filter papers, and the like. The pore diameter in the porous partition wall is not particularly limited and can be appropriately set according to the reagent or the like placed in the analysis container 1.

　本実施形態の分析用容器１において、シール部材１５１は、第３室１３の外表面に、貫通孔１４を覆う状態で配置されているが、本発明はこれに限定されず、例えば、シール部材１５１は、貫通孔１４内を塞いでもよい。シール部材１５１は、特に制限されず、例えば、任意の材料とでき、例えば、接着テープ、粘着テープ等が使用できる。シール部材１５１の配置方法は、剥離可能であればよく、例えば、接着等の方法があげられる。シール部材１５１は、例えば、剥離後、再度、貫通孔１４を閉塞可能であってもよい。 In the analysis container 1 of the present embodiment, the seal member 151 is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14. However, the present invention is not limited to this, and for example, the seal member 151 may block the inside of the through hole 14. The seal member 151 is not particularly limited, and may be any material, for example, an adhesive tape, an adhesive tape, or the like. The arrangement | positioning method of the sealing member 151 should just be peelable, for example, methods, such as adhesion | attachment, are mention | raise | lifted. The seal member 151 may be capable of closing the through hole 14 again after peeling, for example.

　本実施形態の分析用容器１は、例えば、外筒と内筒とを有してもよい。この場合、前記内筒が、前記外筒の内部に収容でき、前記内筒が、前記第１室および前記第２室を有し、前記外筒の内部に前記内筒を収容した際、前記外筒の底部と前記内筒の底部との間に空間を有する。前記外筒と前記内筒とを有する場合、前記内筒の第２室から前記外筒へ前記ターゲットと前記結合物質との混合物を導入後、前記内筒を取り外すことにより、前記外筒を前記第３室として使用することができる。 The analysis container 1 of the present embodiment may have, for example, an outer cylinder and an inner cylinder. In this case, the inner cylinder can be accommodated in the outer cylinder, the inner cylinder has the first chamber and the second chamber, and when the inner cylinder is accommodated in the outer cylinder, There is a space between the bottom of the outer cylinder and the bottom of the inner cylinder. When the outer cylinder and the inner cylinder are provided, the outer cylinder is removed by removing the inner cylinder after introducing the mixture of the target and the binding substance from the second chamber of the inner cylinder to the outer cylinder. It can be used as the third chamber.

　また、本実施形態の分析用容器１は、例えば、さらに、前処理室を備えてもよい。本実施形態の分析用容器１において、前記第１室が、前記第２室とは反対側で、前記前処理室に連続して配置されてもよい。つまり、本実施形態の分析用容器１は、前記前処理室、前記第１室、前記第２室および前記第３室が、この順序で配置されてもよい。 Moreover, the analysis container 1 of the present embodiment may further include a pretreatment chamber, for example. In the analysis container 1 of the present embodiment, the first chamber may be arranged continuously to the pretreatment chamber on the side opposite to the second chamber. That is, in the analysis container 1 of the present embodiment, the pretreatment chamber, the first chamber, the second chamber, and the third chamber may be arranged in this order.

　前記前処理室は、例えば、その外部から内部に、前記試料保持用具を挿入可能である。前記前処理室は、例えば、前記試料から、前記試料内部の成分を抽出する抽出液を含む。前記抽出液は、特に制限されず、分析に供する前記試料の種類、分析対象の成分の種類等によって、適宜選択できる。 The sample processing tool can be inserted into the pretreatment chamber from the outside to the inside, for example. The pretreatment chamber includes, for example, an extract that extracts components inside the sample from the sample. The extract is not particularly limited, and can be appropriately selected depending on the type of sample to be analyzed, the type of component to be analyzed, and the like.

　本実施形態の分析用容器１は、例えば、前記前処理室と前記第１室の間に、隔壁を有し、前記隔壁は、前記前処理室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁である。前記破壊される隔壁は、例えば、前述と同様であり、例えば、アルミ箔等があげられる。 The analysis container 1 of the present embodiment has, for example, a partition between the pretreatment chamber and the first chamber, and the partition contacts the tip of the sample holding tool inserted in the pretreatment chamber. It is a partition which is destroyed by making it. The partition wall to be destroyed is the same as described above, for example, an aluminum foil or the like.

　本実施形態の分析用容器１は、例えば、前記前処理室が、前記第１室との前記隔壁の反対側に、前記前処理室の開口のカバーを有し、前記カバーは、その外部から内部に、前記試料保持用具を挿入可能である。前記カバーは、前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁が好ましく、前述と同様の隔壁が例示できる。 In the analysis container 1 of the present embodiment, for example, the pretreatment chamber has a cover of the opening of the pretreatment chamber on the opposite side of the partition wall from the first chamber, and the cover is provided from the outside. The sample holding tool can be inserted inside. The cover is preferably a partition that is broken by bringing the tip of the sample holding tool into contact with the cover, and examples include the same partition as described above.

（実施形態２）
　つぎに、実施形態２の分析用容器２を図２に示す。図２（Ａ）は、本実施形態の分析用容器２の模式断面図であり、（Ｂ）および（Ｃ）は、分析用容器２において、貫通孔１４を開閉した際の第２室１２に導入された液体の移動を表す模式図である。図２において、図１と同一箇所には同一符号を付している。図２（Ａ）に示すように、本実施形態の分析用容器２は、シール部材１５１に代えて、前記閉塞部材として棒状部材１５２を有し、第３室１３の外表面に、棒状部材１５２が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている点を除き、実施形態１の分析用容器１と同様の構成を有し、その説明を援用できる。 (Embodiment 2)
Next, the analysis container 2 of Embodiment 2 is shown in FIG. FIG. 2A is a schematic cross-sectional view of the analysis container 2 of the present embodiment. FIGS. 2B and 2C show the second chamber 12 when the through-hole 14 is opened and closed in the analysis container 2. It is a schematic diagram showing the movement of the introduced liquid. In FIG. 2, the same parts as those in FIG. As shown in FIG. 2A, the analysis container 2 of this embodiment has a rod-shaped member 152 as the closing member instead of the seal member 151, and the rod-shaped member 152 is formed on the outer surface of the third chamber 13. However, except having the point arrange | positioned in the state which covers the through-hole 14, it has the structure similar to the container 1 for analysis of Embodiment 1, and can use the description.

　図２（Ｂ）に示すように、本実施形態の分析用容器２は、棒状部材１５２が貫通孔１４を覆う状態で配置されていると、第３室１３の空気は、第３室１３から移動できない。このため、第２室１２に導入された液体は、例えば、第２室１２から第３室１３に実質的に移動しない。そして、図２（Ｃ）に示すように、棒状部材１５２が除去され、貫通孔１４が棒状部材１５２から開放されると、例えば、第３室１３の空気は、貫通孔１４を介して、分析用容器２外に移動可能となる。このため、第２室１２の前記液体は、例えば、第２室１２から第３室１３に移動可能となり、第２室１２から第３室１３に移動する。したがって、本実施形態の分析用容器２によれば、棒状部材１５２の除去により貫通孔１４の開閉を制御でき、第２室１２から前記第３室１３への通液を簡便に制御できる。 As shown in FIG. 2B, when the analytical container 2 of the present embodiment is arranged in a state where the rod-shaped member 152 covers the through-hole 14, the air in the third chamber 13 flows from the third chamber 13. I can't move. For this reason, for example, the liquid introduced into the second chamber 12 does not substantially move from the second chamber 12 to the third chamber 13. 2C, when the rod-shaped member 152 is removed and the through-hole 14 is released from the rod-shaped member 152, for example, the air in the third chamber 13 is analyzed via the through-hole 14. It becomes possible to move out of the container 2. Therefore, for example, the liquid in the second chamber 12 can move from the second chamber 12 to the third chamber 13, and moves from the second chamber 12 to the third chamber 13. Therefore, according to the analysis container 2 of the present embodiment, the opening and closing of the through hole 14 can be controlled by removing the rod-shaped member 152, and the liquid flow from the second chamber 12 to the third chamber 13 can be easily controlled.

　本実施形態の分析用容器２において、棒状部材１５２は、第３室１３の外表面に、貫通孔１４を覆う状態で配置されているが、本発明はこれに限定されず、例えば、棒状部材１５２は、貫通孔１４内を塞いでもよい。棒状部材１５２は、特に制限されず、例えば、任意の材料とでき、例えば、棒状のプラスチック等があげられる。棒状部材１５２は、例えば、分析用容器２と同じ材料でもよいし、異なる材料でもよい。棒状部材１５２の配置方法は、棒状部材１５２を除去可能な公知の配置方法であればよく、例えば、熱融着等の方法があげられる。棒状部材１５２は、例えば、除去後、再度、貫通孔１４を閉塞可能であってもよい。 In the analysis container 2 of the present embodiment, the rod-shaped member 152 is arranged on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14. However, the present invention is not limited to this, and for example, the rod-shaped member 152 may block the inside of the through hole 14. The rod-shaped member 152 is not particularly limited, and can be any material, for example, a rod-shaped plastic. For example, the rod-shaped member 152 may be made of the same material as that of the analysis container 2 or may be made of a different material. The arrangement method of the rod-shaped member 152 may be a known arrangement method capable of removing the rod-shaped member 152, and examples thereof include a method such as heat fusion. For example, the rod-shaped member 152 may be able to close the through-hole 14 again after removal.

（実施形態３）
　つぎに、実施形態３の分析用容器３を図３に示す。図３（Ａ）は、本実施形態の分析用容器３の模式断面図であり、（Ｂ）は、分析用容器３の模式分解図である。図３において、図１と同一箇所には同一符号を付している。図３（Ａ）に示すように、本実施形態の分析用容器３は、第１筒３１、第２筒３２、および第３筒３３を有し、第１筒３１は、第１筒３１の内側方向の凸部として形成された位置決め部材１６を有し、第２筒３２は、第１室１１、第１隔壁１１１および前隔壁１１２を有し、第３筒３３は、第３室１３、第２隔壁１２１、貫通孔１４および第１筒３１の内面に接する筒として形成された接続部材１７を有する。第２筒３２は、第１筒３１の内面に接するように収容され、また、第３筒３３は、接続部材１７が、第１筒３１の下方端側において第１筒３１の内面に接することで、第１筒３１の端部に配置されている。本実施形態の分析用容器３において、第１筒３１の内部に第２筒３２を収容し、第１筒３１の端部に第３筒３３を配置した際、第１筒３１と、第２筒３２の底部の第１隔壁１１１と、第３筒３３の第２隔壁１２１および接続部材１７とに囲まれた空間が、第２室１２となる。また、図３（Ｂ）に示すように、第２筒３２は、第１筒３１の下方から第１筒３１内に挿入可能であり、第１筒３１の位置決め部材１６と、第２筒３２の上部である前隔壁１１２とが接触することにより、第１筒３１内の所定位置に位置決めされる。第３筒３３の接続部材１７も、第１筒３１の下方から第１筒３１内に挿入可能である。これらの点を除き、本実施形態の分析用容器３は、実施形態１の分析用容器１と同様の構成を有し、その説明を援用できる。本実施形態の分析用容器３によれば、３つの筒を組合せることで、簡便に分析用容器を組み立てることができる。このため、本実施形態の分析用容器３によれば、簡便に製造できる。 (Embodiment 3)
Next, the analysis container 3 of Embodiment 3 is shown in FIG. FIG. 3A is a schematic cross-sectional view of the analysis container 3 of the present embodiment, and FIG. 3B is a schematic exploded view of the analysis container 3. In FIG. 3, the same parts as those in FIG. As shown in FIG. 3A, the analysis container 3 of the present embodiment has a first cylinder 31, a second cylinder 32, and a third cylinder 33, and the first cylinder 31 is the first cylinder 31. The second cylinder 32 has a first chamber 11, a first partition wall 111 and a front partition wall 112, and the third cylinder 33 has a third chamber 13, The connecting member 17 is formed as a cylinder in contact with the inner surface of the second partition wall 121, the through hole 14, and the first cylinder 31. The second cylinder 32 is accommodated in contact with the inner surface of the first cylinder 31, and the third cylinder 33 has the connection member 17 in contact with the inner surface of the first cylinder 31 on the lower end side of the first cylinder 31. Thus, it is arranged at the end of the first cylinder 31. In the analysis container 3 of the present embodiment, when the second cylinder 32 is accommodated inside the first cylinder 31 and the third cylinder 33 is disposed at the end of the first cylinder 31, the first cylinder 31 and the second cylinder A space surrounded by the first partition 111 at the bottom of the cylinder 32, the second partition 121 and the connection member 17 of the third cylinder 33 is the second chamber 12. As shown in FIG. 3B, the second cylinder 32 can be inserted into the first cylinder 31 from below the first cylinder 31, and the positioning member 16 of the first cylinder 31 and the second cylinder 32. The front partition 112 that is the upper part of the first cylinder 31 is in contact with the front partition 112 and is positioned at a predetermined position in the first cylinder 31. The connection member 17 of the third cylinder 33 can also be inserted into the first cylinder 31 from below the first cylinder 31. Except for these points, the analysis container 3 of the present embodiment has the same configuration as the analysis container 1 of the first embodiment, and the description thereof can be used. According to the analysis container 3 of the present embodiment, the analysis container can be easily assembled by combining three cylinders. For this reason, according to the container 3 for analysis of this embodiment, it can manufacture simply.

　本実施形態の分析用容器３において、第１筒３１は、位置決め部材１６を有するが、位置決め部材１６は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、分析用容器３において、位置決め部材１６は、第１筒３１の内側方向の凸部として形成されているが、本発明はこれに限定されず、位置決め部材１６としては、第２筒３２の位置を固定可能な公知の固定手段等が使用できる。また、第１筒３１における位置決め部材１６の位置は、特に制限されず、第１筒３１の内部に第２筒３２を収容し、第１筒３１の端部に第３筒３３を配置した際、第２筒３２の底部と第３筒３３の上部との間に空間を有するように、第２筒３２を配置できる位置であればよい。 In the analysis container 3 of the present embodiment, the first cylinder 31 includes the positioning member 16, but the positioning member 16 may have any configuration and may or may not be provided. In the analysis container 3, the positioning member 16 is formed as a convex portion in the inner direction of the first cylinder 31, but the present invention is not limited to this, and the positioning member 16 includes the second cylinder 32. Known fixing means that can fix the position can be used. Further, the position of the positioning member 16 in the first cylinder 31 is not particularly limited. When the second cylinder 32 is accommodated in the first cylinder 31 and the third cylinder 33 is disposed at the end of the first cylinder 31. Any position that allows the second cylinder 32 to be disposed so as to have a space between the bottom of the second cylinder 32 and the upper portion of the third cylinder 33 may be used.

　本実施形態の分析用容器３において、第２筒３２は、前隔壁１１２を有するが、前隔壁１１２は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。前隔壁１１２は、前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁である。前隔壁１１２は、例えば、第１室１１の上部であるともいえる。前隔壁１１２は、前記試料保持用具の先端を接触させることで破壊できればよく、その材質や特性等は、特に制限されない。前隔壁１１２としては、例えば、アルミ箔等の金属薄膜、紙、合成繊維等が使用できる。前隔壁１１２は、例えば、第１隔壁１１１と同じ材料でもよいし、異なる材料でもよい。第２筒３２において、第１隔壁１１１と前隔壁１１２とは、第２筒３２の両端に配置されているが、本発明はこれに限定されず、第１隔壁１１１と前隔壁１１２とは、第２室３２の端部以外の位置に配置されてもよい。 In the analysis container 3 of the present embodiment, the second cylinder 32 includes the front partition 112, but the front partition 112 may have any configuration and may or may not be provided. The front partition 112 is a partition that is destroyed by contacting the tip of the sample holding tool. It can be said that the front partition 112 is, for example, the upper part of the first chamber 11. The front partition 112 may be destroyed by bringing the tip of the sample holding tool into contact with the front partition 112, and the material, characteristics, and the like are not particularly limited. As the front partition 112, for example, a metal thin film such as aluminum foil, paper, synthetic fiber, or the like can be used. For example, the front partition 112 may be made of the same material as the first partition 111 or may be made of a different material. In the second cylinder 32, the first partition 111 and the front partition 112 are arranged at both ends of the second cylinder 32, but the present invention is not limited to this, and the first partition 111 and the front partition 112 are: It may be arranged at a position other than the end of the second chamber 32.

　本実施形態の分析用容器３において、第３筒３３は、接続部材１７を有するが、接続部材１７は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、分析用容器３において、接続部材１７は、第１筒３１の内面に接する筒として形成されているが、本発明はこれに限定されず、接続部材１７としては、２つの部材を接続する公知の接続手段を使用できる。また、第３筒３３における接続部材１７の位置は、特に制限されず、前記接続手段に応じて、適宜設定できる。 In the analysis container 3 of the present embodiment, the third cylinder 33 includes the connection member 17, but the connection member 17 may have any configuration and may or may not be provided. In the analysis container 3, the connection member 17 is formed as a cylinder in contact with the inner surface of the first cylinder 31, but the present invention is not limited to this, and the connection member 17 connects two members. Known connection means can be used. Further, the position of the connection member 17 in the third cylinder 33 is not particularly limited, and can be appropriately set according to the connection means.

＜ターゲット分析用具およびターゲット分析方法＞
　本発明のターゲット分析用具は、前述のように、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬を含み、
前記第２室は、前記第２試薬を含み、
前記第３室は、前記第１試薬または前記第２試薬における標識物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、担体に固定化された結合物質が通過できず、前記標識物質が結合した結合物質が通過できる多孔性隔壁であり、
前記第１試薬および前記第２試薬が、下記（１）～（３）および（４）のいずれかの組合せであることを特徴とする。
（１）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質である。
（２）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質である。
（３）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質が担体に固定化された固定化第１結合物質である。
（４）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質が担体に固定された固定化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質である。 <Target analysis tool and target analysis method>
As described above, the target analysis tool of the present invention includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber contains the first reagent,
The second chamber contains the second reagent,
The third chamber is a detection unit for detecting a labeling substance in the first reagent or the second reagent,
The second partition wall is a porous partition wall through which the binding substance immobilized on the carrier cannot pass and the binding substance bound with the labeling substance can pass through.
The first reagent and the second reagent are any combination of the following (1) to (3) and (4).
(1) The first reagent is an immobilized second binding substance in which a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target is immobilized on a carrier, and the second reagent is the first binding substance. It is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a substance.
(2) The first reagent is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is a second binding substance that binds to the first binding substance. Is an immobilized second binding substance immobilized on a carrier.
(3) The first reagent is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound to a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is the first binding substance. Is an immobilized first binding substance immobilized on a carrier.
(4) The first reagent is an immobilized first binding substance in which a first binding substance that binds to a target is fixed to a carrier, and the second reagent binds to the first binding substance. This is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound.

　また、本発明のターゲット分析方法は、前述のように、前記本発明のターゲット分析用具を使用し、下記（Ａ）～（Ｃ）および（Ｄ）のいずれかの分析方法を実施することを特徴とする。
（Ａ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（１）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
試料を保持した試料保持用具を前記ターゲット分析用具の前記第１室に挿入後、前記第１室と前記第２室との間の前記第１隔壁に接触させ、前記第２室に、前記試料と前記第１試薬とを導入する工程、
前記第２室において、前記試料と前記第１試薬と前記第２試薬とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させ、且つ前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第１試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｂ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（２）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させる工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記混合物中の前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第２試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｃ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（３）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させ、且つ、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質と前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｄ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（４）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させる工程、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記固定化第１結合物質と前記第２試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。 In addition, the target analysis method of the present invention is characterized in that, as described above, the target analysis tool of the present invention is used and any one of the following analysis methods (A) to (C) and (D) is performed. And
(A) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (1),
After a sample holding tool holding a sample is inserted into the first chamber of the target analysis tool, the sample holding tool is brought into contact with the first partition between the first chamber and the second chamber, and the sample is placed in the second chamber. And introducing the first reagent,
In the second chamber, the sample, the first reagent, and the second reagent are brought into contact with each other, and the target in the sample and the labeled first binding substance that is the second reagent are bound to each other. And binding the labeled first binding substance unbound to the target to the immobilized second binding substance that is the first reagent,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(B) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of the above (2),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent with the sample in the first chamber to form a first conjugate in which the target in the sample is bound to the labeled first binding substance as the first reagent;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent, and the labeled first binding substance unbound to the target in the mixture is used as the second reagent. Binding to the immobilized second binding substance,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(C) Analytical method The target reagent which said 1st reagent and said 2nd reagent are the combination of said (3),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the second reagent. And binding the immobilized first binding substance that is unbound to the target and the labeled second binding substance that is the first reagent,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.
(D) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (4),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent and the sample in the first chamber to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the first reagent;
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. And introducing a mixture of the first reagent and
In the second chamber, the second reagent, a mixture of the sample and the first reagent are brought into contact with each other, and the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance as the second reagent are brought into contact with each other. Combining,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.

　本発明において、分析とは、例えば、前記ターゲットの有無を判断する定性分析でもよいし、前記ターゲットの量を判断する定量分析でもよい。 In the present invention, the analysis may be, for example, a qualitative analysis that determines the presence or absence of the target, or a quantitative analysis that determines the amount of the target.

　本発明において使用するターゲットに結合する第１結合物質は、例えば、ターゲットに結合すればよく、その種類は、特に制限されない。前記第１結合物質の具体例としては、例えば、アプタマー、抗体等があげられる。 The first binding substance that binds to the target used in the present invention may be bound to the target, for example, and the type thereof is not particularly limited. Specific examples of the first binding substance include aptamers and antibodies.

　以下、本発明の分析用具および分析方法について、図面を参照して、例をあげて詳細に説明する。ただし、本発明は、以下の例に限定および制限されない。また、図面においては、説明の便宜上、各部の構造は適宜簡略化して示す場合があり、各部の寸法比等は、実際とは異なり、模式的に示す場合がある。各実施形態は、特に言及しない限り、互いに組合せ可能である。 Hereinafter, the analysis tool and the analysis method of the present invention will be described in detail with reference to the drawings with examples. However, the present invention is not limited or limited to the following examples. In the drawings, for convenience of explanation, the structure of each part may be simplified as appropriate, and the dimensional ratio of each part may be schematically shown, unlike the actual case. Each embodiment can be combined with each other unless otherwise specified.

（実施形態４Ａ）
　本実施形態は、前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（１）の組合せの分析用具、ならびに前記（１）の組合せの分析用具を用いた（Ａ）の分析方法の実施形態である。 (Embodiment 4A)
The present embodiment is an embodiment of the analysis method of (A) in which the first reagent and the second reagent use the analysis tool of the combination of (1) and the analysis tool of the combination of (1). .

　実施形態４Ａの分析用具は、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬として、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質を含み、
前記第２室は、前記第２試薬として、前記第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質を含み、
前記第３室は、前記標識化第１結合物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、前記固定化第２結合物質が通過できず、試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体が通過できる多孔性隔壁である。 The analysis tool of Embodiment 4A includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber includes, as the first reagent, an immobilized second binding substance in which a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target is immobilized on a carrier;
The second chamber includes, as the second reagent, a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to the first binding substance,
The third chamber is a detection unit for detecting the labeled first binding substance,
The second partition wall is a porous partition wall through which the immobilized second binding substance cannot pass, but through which the first combined body in which the target in the sample and the labeled first binding substance as the second reagent are bound can pass through. It is.

　また、実施形態４Ａの分析方法は、前記実施形態４Ａのターゲット分析用具を使用し、
試料を保持した試料保持用具を前記ターゲット分析用具の前記第１室に挿入後、前記第１室と前記第２室との間の前記第１隔壁に接触させ、前記第２室に、前記試料と前記第１試薬とを導入する工程、
前記第２室において、前記試料と前記第１試薬と前記第２試薬とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させ、且つ前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第１試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む。 Moreover, the analysis method of Embodiment 4A uses the target analysis tool of Embodiment 4A,
After a sample holding tool holding a sample is inserted into the first chamber of the target analysis tool, the sample holding tool is brought into contact with the first partition between the first chamber and the second chamber, and the sample is placed in the second chamber. And introducing the first reagent,
In the second chamber, the sample, the first reagent, and the second reagent are brought into contact with each other, and the target in the sample and the labeled first binding substance that is the second reagent are bound to each other. And binding the labeled first binding substance unbound to the target to the immobilized second binding substance that is the first reagent,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
In the third chamber, the method includes detecting the labeled first binding substance in the first conjugate.

　本実施形態によれば、まず、前記第１室において、例えば、試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第２結合物質とが混合する。そして、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物が、前記第２室に導入されると、前記第２室では、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合し、且つ、未結合の前記標識化第１結合物質と前記第１試薬である前記固定化第２結合物質とが結合する。そして、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第２結合物質が通過できず、前記標識化第１結合物質を含む第１結合体が通過できる前記多孔性隔壁であるため、前記固定化第２結合物質は、前記隔壁を通過せずに前記第２室に残る。つまり、前記固定化第２結合物質に結合した前記標識化第１結合物質は、前記第３室に移動することなく前記第２室に残る。他方、前記固定化第２結合物質に未結合の遊離した前記標識化第１結合物質、すなわち前記第１結合体を形成している前記標識化第１結合物質は、前記隔壁を通過して前記第３室に導入される。本実施形態の分析用具における前記標識化第１結合物質は、例えば、既知量とすることができるため、前記固定化第２結合物質に未結合の前記標識化第１結合物質の量は、前記試料中のターゲット量と間接的に対応することになる。このため、前記第３室に導入された前記未結合の標識化第１結合物質を検出することによって、間接的に、前記試料中のターゲットの有無または量を分析することができる。 According to this embodiment, first, in the first chamber, for example, the target in the sample and the immobilized second binding substance that is the first reagent are mixed. When the mixture of the sample and the first reagent in the first chamber is introduced into the second chamber, the labeling that is the target in the sample and the second reagent is performed in the second chamber. The first binding substance binds to the unbound labeled first binding substance and the immobilized second binding substance as the first reagent. The second partition between the second chamber and the third chamber cannot pass through the immobilized second binding substance, and can pass through the first conjugate containing the labeled first binding substance. Since the barrier rib is an insulating partition, the immobilized second binding substance remains in the second chamber without passing through the partition. That is, the labeled first binding substance bound to the immobilized second binding substance remains in the second chamber without moving to the third chamber. On the other hand, the labeled first binding substance released unbound to the immobilized second binding substance, that is, the labeled first binding substance forming the first conjugate passes through the partition wall and passes through the partition wall. Introduced into the third chamber. Since the labeled first binding substance in the analysis tool of the present embodiment can be, for example, a known amount, the amount of the labeled first binding substance unbound to the immobilized second binding substance is This indirectly corresponds to the target amount in the sample. Therefore, the presence or amount of the target in the sample can be indirectly analyzed by detecting the unbound labeled first binding substance introduced into the third chamber.

　以下、前記（１）の組合せの分析用具およびそれを用いた（Ａ）の分析方法について、分析用容器として、前記実施形態１の分析用容器を使用し、前記第１結合物質としてアプタマーを使用する形態を、例にあげて説明する。 Hereinafter, for the analysis tool of the combination of (1) and the analysis method of (A) using the same, the analysis container of Embodiment 1 is used as the analysis container, and the aptamer is used as the first binding substance The form to be described will be described by way of example.

　本実施形態は、前記標識化第１結合物質における前記第１結合物質として、前記アプタマーを使用する形態である。前記アプタマーは、前記ターゲットに結合できればよい。前記アプタマーは、例えば、ＤＮＡアプタマーでもよいし、ＲＮＡアプタマーでもよいし、ＤＮＡとＲＮＡとを含むキメラアプタマーでもよい。また、前記アプタマーは、天然核酸からなるアプタマーでもよいし、非天然核酸からなるアプタマーでもよいし、前記天然核酸および前記非天然核酸を含むアプタマーでもよい。また、前記アプタマーは、例えば、修飾アプタマーでもよい。前記アプタマーは、例えば、一本鎖である。 In the present embodiment, the aptamer is used as the first binding substance in the labeled first binding substance. The aptamer only needs to be able to bind to the target. The aptamer may be, for example, a DNA aptamer, an RNA aptamer, or a chimeric aptamer containing DNA and RNA. The aptamer may be an aptamer made of a natural nucleic acid, an aptamer made of a non-natural nucleic acid, or an aptamer containing the natural nucleic acid and the non-natural nucleic acid. The aptamer may be a modified aptamer, for example. The aptamer is, for example, a single strand.

　前記固定化第２結合物質における前記第２結合物質は、前記アプタマーに結合可能であればよく、例えば、前記アプタマーに相補的な核酸分子（以下、「相補性核酸分子」または「相補鎖」ともいう。）があげられる。前記アプタマーに相補的とは、例えば、前記アプタマーまたはその部分配列にハイブリダイズ可能な程度の相補性を有していればよく、相補性１００％には制限されない。前記相補性は、例えば、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、１００％である。前記第２結合物質として前記相補的な核酸分子を使用することによって、例えば、前記ターゲット、前記標識化第１結合物質および前記固定化第２結合物質との反応を容易に行うことができることから、反応時間を短縮でき、また、より感度が良く、ダイナミックレンジにも優れる。前記相補的な核酸分子は、例えば、前記ターゲットには非結合であることが好ましい。 The second binding substance in the immobilized second binding substance only needs to be able to bind to the aptamer. For example, a nucleic acid molecule complementary to the aptamer (hereinafter referred to as “complementary nucleic acid molecule” or “complementary strand”). Say). The term “complementary to the aptamer” is not limited to 100% complementarity, for example, as long as the aptamer or the partial sequence thereof is capable of hybridizing. The complementarity is, for example, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more, 100%. By using the complementary nucleic acid molecule as the second binding substance, for example, the target, the labeled first binding substance, and the immobilized second binding substance can be easily reacted. The reaction time can be shortened, the sensitivity is higher, and the dynamic range is better. The complementary nucleic acid molecule is preferably non-binding to the target, for example.

　前記標識化第１結合物質における前記標識物質は、例えば、酵素、核酸、蛍光物質、色素物質、発光物質、放射性物質、および電子供与体等があげられる。前記核酸は、例えば、触媒機能を示す触媒核酸分子があげられる。前記酵素は、例えば、ルシフェラーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）等のペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ等があげられる。 Examples of the labeling substance in the labeled first binding substance include enzymes, nucleic acids, fluorescent substances, dye substances, luminescent substances, radioactive substances, and electron donors. Examples of the nucleic acid include catalytic nucleic acid molecules exhibiting a catalytic function. Examples of the enzyme include luciferase, peroxidase such as horseradish peroxidase (HRP), alkaline phosphatase, and the like.

　前記固定化第２結合物質における前記担体は、例えば、ビーズがあげられる。前記ビーズの材質は、特に制限されず、例えば、アガロース、セファロース、セルロース等のポリマー等があげられる。また、前記ビーズは、例えば、磁気ビーズがあげられる。前記磁気ビーズは、例えば、磁性材料からなるビーズ、前記磁性材料を含むビーズでもよいし、その表面が前記磁性材料でコーティングされたビーズでもよい。前記磁性材料としては、例えば、可磁化物質があげられ、具体例としては、例えば、γＦｅ_２Ｏ_３、Ｆｅ_３Ｏ_４等があげられる。前記ビーズの形状は、特に制限されず、例えば、真球状等の球状があげられる。前記ビーズの平均直径は、特に制限されず、例えば、１～１０μｍ、１０～１００μｍ、１００～１０００μｍである。前記担体としては、例えば、Sepharose、Sephadex等の樹脂も使用できる。前記担体が前記ビーズの場合、前記担体（ビーズ）に固定化する相補鎖の量は、特に制限されず、例えば、前記ビーズの表面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。 Examples of the carrier in the immobilized second binding substance include beads. The material of the beads is not particularly limited, and examples thereof include polymers such as agarose, sepharose, and cellulose. Examples of the beads include magnetic beads. The magnetic bead may be, for example, a bead made of a magnetic material, a bead containing the magnetic material, or a bead whose surface is coated with the magnetic material. Examples of the magnetic material include a magnetizable substance, and specific examples include γFe ₂ O ₃ , Fe ₃ O _{4, and the} like. The shape of the beads is not particularly limited, and examples thereof include a spherical shape such as a true spherical shape. The average diameter of the beads is not particularly limited, and is, for example, 1 to 10 μm, 10 to 100 μm, or 100 to 1000 μm. As the carrier, for example, resins such as Sepharose and Sephadex can be used. When the carrier is the bead, the amount of complementary strand to be immobilized on the carrier (bead) is not particularly limited, and for example, 0.1 fmol to 100 pmol, 1 fmol to 10 pmol, 10 fmol to 1 mm ² surface area of the bead. 1 pmol.

　前記触媒核酸分子は、特に制限されず、例えば、ＤＮＡｚｙｍｅ、ＲＮＡｚｙｍｅがあげられる。前記標識化第１結合物質における前記触媒核酸分子の触媒機能は、例えば、前記標識化第１結合物質への前記ターゲットの結合の有無にかかわらず、触媒機能を奏することが好ましい。前記結合物質と前記触媒核酸分子との結合形態は、特に制限されず、例えば、ホスホジエステル結合である。また、前記結合物質と前記触媒核酸分子とは、例えば、直接的に結合させてもよいし、リンカーを介して間接的に結合させてもよい。前記リンカーは、例えば、ＤＮＡおよびＲＮＡの少なくとも一方からなる核酸分子である。前記触媒核酸分子は、例えば、一本鎖が好ましい。前記標識物質が前記触媒核酸分子の場合、前記触媒核酸分子が、前記標識物質と前記第２結合物質の両方を兼ねてもよい。すなわち、前記触媒核酸分子が前記第１結合物質に相補的であれば、前記触媒核酸分子を前記標識化第２結合物質とすることもできる。 The catalyst nucleic acid molecule is not particularly limited, and examples thereof include DNAzyme and RNAzyme. The catalytic function of the catalytic nucleic acid molecule in the labeled first binding substance preferably exhibits a catalytic function regardless of whether the target is bound to the labeled first binding substance, for example. The binding form of the binding substance and the catalytic nucleic acid molecule is not particularly limited, and is, for example, a phosphodiester bond. In addition, the binding substance and the catalytic nucleic acid molecule may be bound directly or indirectly via a linker, for example. The linker is, for example, a nucleic acid molecule composed of at least one of DNA and RNA. The catalytic nucleic acid molecule is preferably a single strand, for example. When the labeling substance is the catalyst nucleic acid molecule, the catalyst nucleic acid molecule may serve as both the labeling substance and the second binding substance. That is, if the catalytic nucleic acid molecule is complementary to the first binding substance, the catalytic nucleic acid molecule can be used as the labeled second binding substance.

　前記試料は、特に制限されず、例えば、食品由来試料等があげられる。前記食品由来試料は、例えば、食品、食品原料、食品添加物、食品加工場または調理場等における付着物、洗浄後の洗浄液等があげられる。前記試料の形態は、特に制限されず、例えば、液体試料でもよいし、固体試料でもよい。前記固体試料の場合、例えば、溶媒を用いて、混合液、抽出液、溶解液等を調製し、これを前記試料として使用してもよい。前記溶媒は、特に制限されず、例えば、水、生理食塩水、緩衝液等があげられる。前記試料は、例えば、前記ターゲットを含む試料でもよいし、前記ターゲットを含まない試料でもよいし、ターゲットを含むか不明の試料であってもよい。 The sample is not particularly limited, and examples thereof include food-derived samples. Examples of the food-derived sample include foods, food raw materials, food additives, deposits in food processing plants or kitchens, washing liquids after washing, and the like. The form of the sample is not particularly limited, and may be, for example, a liquid sample or a solid sample. In the case of the solid sample, for example, a mixed solution, an extract, a dissolved solution, or the like may be prepared using a solvent and used as the sample. The solvent is not particularly limited, and examples thereof include water, physiological saline, and buffer solution. The sample may be, for example, a sample including the target, a sample not including the target, or a sample unknown whether the target is included.

　本実施形態では、前述のように、前記第１結合物質としてアプタマー、前記第２結合物質として相補性核酸分子を使用できることから、例えば、熱安定性であり、保存がより容易である。また、前記標識物質として、例えば、ルシフェラーゼ、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ等の酵素を使用できることから、例えば、感度よくターゲットを分析できる。 In the present embodiment, as described above, since aptamers can be used as the first binding substance and complementary nucleic acid molecules can be used as the second binding substance, for example, it is heat-stable and is easier to store. Moreover, since an enzyme such as luciferase, alkaline phosphatase or peroxidase can be used as the labeling substance, for example, the target can be analyzed with high sensitivity.

　前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第２結合物質が通過できず、前記第１結合体が通過できる多孔性隔壁である。前記第２隔壁の孔径は、例えば、前記固定化第２結合物質および前記第１結合体の大きさに応じて適宜設定できる。前記第２隔壁における孔径は、例えば、０．２～１００μｍ、０．２～５０μｍ、０．５～１０μｍである。 The second partition wall between the second chamber and the third chamber is a porous partition wall through which the immobilized second binding substance cannot pass and the first combined body can pass. The hole diameter of the second partition wall can be appropriately set according to the size of the immobilized second binding substance and the first combined body, for example. The hole diameter in the second partition wall is, for example, 0.2-100 μm, 0.2-50 μm, 0.5-10 μm.

　前記第１室は、例えば、さらに、前記試料内部の成分を抽出する抽出液を含んでもよい。前記抽出液は、特に制限されず、分析に供する前記試料の種類、分析対象の成分の種類等によって、適宜選択できる。 The first chamber may further include, for example, an extract for extracting the components inside the sample. The extract is not particularly limited, and can be appropriately selected depending on the type of sample to be analyzed, the type of component to be analyzed, and the like.

　前記標識物質として触媒核酸分子を使用する場合、前記第２室は、前記第２試薬として、さらに、タンパク質および脂質の少なくとも一方を吸着する吸着担体を含むことが好ましい。前記第２室が前記吸着担体を含む場合、前記第２室において、前記吸着担体にタンパク質および脂質等が吸着される。このため、例えば、前記第３室に、前記触媒核酸分子の触媒機能に影響を与えるタンパク質、脂質等が導入することを防止し、前記第３室における前記未結合の標識化第１結合物質の検出を、より精度良く行うことができる。本実施形態において、前記ターゲットに結合する第１結合物質であるアプタマー、前記第１結合物質に結合する第２結合物質である相補的な核酸分子は、いずれも核酸であることから、核酸以外の成分である、タンパク質および脂質等を前記吸着担体で第２室に保持することで、より精度よくターゲットの分析を行うことができる。 In the case where a catalytic nucleic acid molecule is used as the labeling substance, the second chamber preferably further includes an adsorption carrier that adsorbs at least one of protein and lipid as the second reagent. When the second chamber includes the adsorption carrier, proteins, lipids, and the like are adsorbed on the adsorption carrier in the second chamber. For this reason, for example, the introduction of proteins, lipids, etc. that affect the catalytic function of the catalytic nucleic acid molecule into the third chamber is prevented, and the unbound labeled first binding substance in the third chamber is prevented. Detection can be performed with higher accuracy. In this embodiment, since the aptamer that is the first binding substance that binds to the target and the complementary nucleic acid molecule that is the second binding substance that binds to the first binding substance are both nucleic acids, By retaining the components such as protein and lipid in the second chamber with the adsorption carrier, the target can be analyzed more accurately.

　前記吸着担体の材質は、特に制限されず、例えば、シリカ、多孔性構造を有する架橋高分子、活性炭等があげられる。前記吸着担体の形状は、特に制限されず、例えば、ビーズがあげられる。前記吸着担体としては、例えば、シリカ製ビーズが好ましい。前記吸着担体の大きさは、特に制限されず、例えば、前記第２隔壁（多孔性隔壁）を通過できない大きさであることが好ましい。前記吸着担体の大きさは、例えば、前記固定化第２結合物質における前記担体の大きさと同様である。 The material of the adsorption carrier is not particularly limited, and examples thereof include silica, a crosslinked polymer having a porous structure, activated carbon, and the like. The shape of the adsorption carrier is not particularly limited, and examples thereof include beads. As the adsorption carrier, for example, silica beads are preferable. The size of the adsorption carrier is not particularly limited, and for example, it is preferable that the size of the adsorption carrier cannot pass through the second partition wall (porous partition wall). The size of the adsorption carrier is, for example, the same as the size of the carrier in the immobilized second binding substance.

　前記第３室は、前記標識化第２結合物質における前記標識物質が前記触媒性核酸分子または前記酵素の場合、例えば、さらに、その触媒機能に対する基質を含むことが好ましい。前記基質としては、例えば、ＡＴＰとルシフェリンの組合せ、ルミノール反応液等があげられる。 In the case where the labeling substance in the labeled second binding substance is the catalytic nucleic acid molecule or the enzyme, the third chamber preferably further contains, for example, a substrate for its catalytic function. Examples of the substrate include a combination of ATP and luciferin, a luminol reaction solution, and the like.

　実施形態４Ａの分析用具を用いた分析方法の一例について、図面を用いて、具体的に説明する。なお、本発明は、この例には制限されない。 An example of an analysis method using the analysis tool of Embodiment 4A will be specifically described with reference to the drawings. Note that the present invention is not limited to this example.

　図４は、前記実施形態４Ａの分析用具の概略を示す図面である。図４において、図１と同一箇所には同一符号を付している。分析用具４は、第１室１１、第２室１２、第３室１３を有し、第１室１１には、アプタマー１８１に対する相補鎖１９１がビーズ１９２に固定化された固定化相補鎖１９が配置され、第２室１２には、アプタマー１８１に酵素１８２が付加した標識化アプタマー１８が配置されている。第１室１１と第２室１２との間には、第１隔壁１１１を有し、第２室１２と第３室１３との間には、多孔性の第２隔壁１２１を有する。また、第３室１３は、貫通孔１４を有し、第３室１３の外表面には、前記閉塞部材であるシール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。シール部材１５１は、第３室１３の外表面から剥離可能である。また、試料保持用具２０は、棒状の把持部２０１と試料の保持部２０２とを有し、把持部２０１の先端に保持部２０２が配置されている。試料保持用具２０は、保持部２０２で試料を採取する。保持部２０２には、例えば、前記試料中のターゲット２１等が付着する。 FIG. 4 is a diagram showing an outline of the analysis tool of the embodiment 4A. In FIG. 4, the same parts as those in FIG. The analysis tool 4 has a first chamber 11, a second chamber 12, and a third chamber 13, and an immobilized complementary strand 19 in which a complementary strand 191 for the aptamer 181 is immobilized on a bead 192 is contained in the first chamber 11. In the second chamber 12, a labeled aptamer 18 obtained by adding an enzyme 182 to the aptamer 181 is disposed. A first partition 111 is provided between the first chamber 11 and the second chamber 12, and a porous second partition 121 is provided between the second chamber 12 and the third chamber 13. The third chamber 13 has a through hole 14, and a sealing member 151, which is the closing member, is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14. The seal member 151 can be peeled off from the outer surface of the third chamber 13. The sample holding tool 20 includes a rod-shaped gripping part 201 and a sample holding part 202, and the holding part 202 is disposed at the tip of the gripping part 201. The sample holding tool 20 collects a sample with the holding unit 202. For example, the target 21 in the sample adheres to the holding unit 202.

　つぎに、図４の分析用具４を使用した分析方法について、図５を用いて説明する。図５は、分析用具４の使用方法を示す概略図である。 Next, an analysis method using the analysis tool 4 of FIG. 4 will be described with reference to FIG. FIG. 5 is a schematic view showing how to use the analytical tool 4.

　まず、分析用具４の第１室１１に、保持部２０２に試料を保持させた試料保持用具２０を挿入し、第１室１１において、試料中のターゲット２１と固定化相補鎖１９とを混合させる。前記両者の混合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の混合は、例えば、液体溶媒中で行うことが好ましく、前記液体溶媒は、例えば、水、緩衝液、生理食塩水、これらの混合液等の水性溶媒があげられる。 First, the sample holding tool 20 in which the sample is held in the holding portion 202 is inserted into the first chamber 11 of the analysis tool 4, and the target 21 in the sample and the immobilized complementary strand 19 are mixed in the first chamber 11. . The processing conditions for mixing the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The mixing of the two is preferably performed, for example, in a liquid solvent, and examples of the liquid solvent include water, a buffer solution, physiological saline, and an aqueous solvent such as a mixed solution thereof.

　つぎに、試料保持用具２０により、第１隔壁１１１を破壊し、第１室１１内の内容物を第２室１２に導入する。そして、前記内容物中のターゲット２１を標識化アプタマー１８に結合させ、また、標識化アプタマー１８のうち、ターゲット２１と未結合である標識化アプタマー１８を、固定化相補鎖１９に結合させる。また、前記両者の結合処理中、第３室１３の外表面に、シール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の結合は、例えば、前記液体溶媒中で行うことが好ましい。 Next, the first partition 111 is broken by the sample holding tool 20, and the contents in the first chamber 11 are introduced into the second chamber 12. Then, the target 21 in the contents is bound to the labeled aptamer 18, and among the labeled aptamers 18, the labeled aptamer 18 that is not bound to the target 21 is bound to the immobilized complementary strand 19. Further, a sealing member 151 is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14 during the coupling process of the both. The treatment conditions for the combination of the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The bonding between the two is preferably performed, for example, in the liquid solvent.

　さらに、前記結合処理中または処理後に、貫通孔１４からシール部材１５１が剥離されると、第２室１２から第３室１３への通液が可能となる。第２隔壁１２１は、固定化相補鎖１９を通過せず、標識化アプタマー１８とターゲット２１との第１結合体を通過する多孔性隔壁であるため、標識化アプタマー１８のうち、固定化相補鎖１９に未結合のもののみが、第２隔壁１２１を通過して、第３室１３に導入される。そして、第３室１３において、固定化相補鎖１９に未結合の標識化アプタマー１８について、酵素１８２の触媒機能を測定することにより、間接的に、試料中のターゲットを分析できる。酵素１８２の触媒機能の測定は、酵素１８２の種類に応じて適宜決定できる。 Furthermore, when the sealing member 151 is peeled from the through hole 14 during or after the bonding process, the liquid can be passed from the second chamber 12 to the third chamber 13. Since the second partition 121 is a porous partition that does not pass through the immobilized complementary strand 19 and passes through the first conjugate of the labeled aptamer 18 and the target 21, the immobilized complementary strand of the labeled aptamer 18. Only the unbonded material 19 passes through the second partition 121 and is introduced into the third chamber 13. Then, in the third chamber 13, the target in the sample can be indirectly analyzed by measuring the catalytic function of the enzyme 182 for the labeled aptamer 18 that is not bound to the immobilized complementary strand 19. The measurement of the catalytic function of the enzyme 182 can be appropriately determined according to the type of the enzyme 182.

（実施形態４Ｂ）
　本実施形態は、前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（２）の組合せの分析用具、ならびに前記（２）の組合せの分析用具を用いた（Ｂ）の分析方法の実施形態である。 (Embodiment 4B)
This embodiment is an embodiment of the analysis method of (B) using the analysis tool of the combination of (2) and the analysis tool of the combination of (2) as the first reagent and the second reagent. .

　実施形態４Ｂの分析用具は、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬として、ターゲットに結合する第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質を含み、
前記第２室は、前記第２試薬として、前記第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質を含み、
前記第３室は、前記標識化第１結合物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、前記固定化第２結合物質が通過できず、試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体が通過できる多孔性隔壁である。 The analysis tool of Embodiment 4B includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber includes, as the first reagent, a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a first binding substance that binds to a target;
The second chamber includes, as the second reagent, an immobilized second binding substance in which a second binding substance that binds to the first binding substance is immobilized on a carrier,
The third chamber is a detection unit for detecting the labeled first binding substance,
The second partition wall is a porous partition wall through which the immobilized second binding substance cannot pass, but through which the first combined body in which the target in the sample and the labeled first binding substance as the first reagent are bound can pass through. It is.

　また、実施形態４Ｂの分析方法は、前記実施形態４Ｂのターゲット分析用具を使用し、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させる工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記混合物中の前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第２試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む。 Moreover, the analysis method of Embodiment 4B uses the target analysis tool of Embodiment 4B,
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent with the sample in the first chamber to form a first conjugate in which the target in the sample is bound to the labeled first binding substance as the first reagent;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent, and the labeled first binding substance unbound to the target in the mixture is used as the second reagent. Binding to the immobilized second binding substance,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
In the third chamber, the method includes detecting the labeled first binding substance in the first conjugate.

　本実施形態によれば、まず、前記第１室において、試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合する。そして、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物が、前記第２室に導入されると、前記第２室では、前記標識化第１結合物質のうち、前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質に、前記固定化第２結合物質が結合する。そして、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第２結合物質が通過できず、前記第１標識化結合物質を含む前記第１結合体が通過できる前記多孔性隔壁であるため、前記固定化第２結合物質は、前記隔壁を通過せずに前記第２室に残る。つまり、前記固定化第２結合物質に結合した前記標識化第１結合物質は、前記第３室に移動することなく前記第２室に残る。他方、前記固定化第２結合物質に未結合の遊離した前記標識化第１結合物質、すなわち前記第１結合体を形成している前記標識化第１結合物質は、前記隔壁を通過して前記第３室に導入される。本実施形態の分析用具における前記標識化第１結合物質は、例えば、既知量とすることができるため、前記固定化第２結合物質に未結合の前記標識化第１結合物質の量は、前記試料中のターゲット量と間接的に対応することになる。このため、前記第３室に導入された前記未結合の標識化第１結合物質を検出することによって、間接的に、前記試料中のターゲットの有無または量を分析することができる。 According to the present embodiment, first, in the first chamber, the target in the sample and the labeled first binding substance as the first reagent are bound. When the mixture of the sample and the first reagent in the first chamber is introduced into the second chamber, the second chamber is not bound to the target among the labeled first binding substances. The immobilized second binding substance binds to the labeled first binding substance. The second partition between the second chamber and the third chamber cannot pass through the immobilized second binding substance, and can pass through the first conjugate containing the first labeled binding substance. Since it is a porous partition wall, the immobilized second binding substance remains in the second chamber without passing through the partition wall. That is, the labeled first binding substance bound to the immobilized second binding substance remains in the second chamber without moving to the third chamber. On the other hand, the labeled first binding substance released unbound to the immobilized second binding substance, that is, the labeled first binding substance forming the first conjugate passes through the partition wall and passes through the partition wall. Introduced into the third chamber. Since the labeled first binding substance in the analysis tool of the present embodiment can be, for example, a known amount, the amount of the labeled first binding substance unbound to the immobilized second binding substance is This indirectly corresponds to the target amount in the sample. Therefore, the presence or amount of the target in the sample can be indirectly analyzed by detecting the unbound labeled first binding substance introduced into the third chamber.

　以下、前記（２）の組合せの分析用具およびそれを用いた（Ｂ）の分析方法について、分析用容器として、前記実施形態１の分析用容器を使用し、前記第１結合物質としてアプタマーを使用する形態を、例にあげて説明する。実施形態４Ｂは、例えば、前記実施形態１～３および４Ａ等の説明を援用できる。 Hereinafter, for the analysis tool of the combination (2) and the analysis method (B) using the same, the analysis container of the first embodiment is used as the analysis container, and the aptamer is used as the first binding substance. The form to be described will be described by way of example. For the embodiment 4B, for example, the description of the embodiments 1 to 3 and 4A can be cited.

　本実施形態は、前記標識化第１結合物質における前記第１結合物質として、前記アプタマーを使用する形態であり、前記アプタマーは、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 This embodiment is a form in which the aptamer is used as the first binding substance in the labeled first binding substance, and the aptamer is the same as that in Embodiment 4A, for example.

　前記固定化第２結合物質における前記第２結合物質は、前記アプタマーに結合可能であればよく、例えば、前記アプタマーに相補的な核酸分子があげられる。前記アプタマーに相補的な核酸分子は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The second binding substance in the immobilized second binding substance only needs to be able to bind to the aptamer, and examples thereof include a nucleic acid molecule complementary to the aptamer. The nucleic acid molecule complementary to the aptamer is, for example, the same as in Embodiment 4A.

　前記標識化第１結合物質における前記標識物質は、例えば、触媒機能を示す触媒核酸分子または酵素が好ましく、前記標識物質、前記触媒核酸分子および前記酵素は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The labeling substance in the labeled first binding substance is preferably, for example, a catalytic nucleic acid molecule or an enzyme exhibiting a catalytic function, and the labeling substance, the catalytic nucleic acid molecule, and the enzyme are the same as in, for example, Embodiment 4A .

　前記固定化第２結合物質における前記担体は、例えば、ビーズでもよいし、前記第２室の内壁でもよい。前記ビーズは、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。前記担体が前記ビーズの場合、前記担体（ビーズ）に固定化する第２結合物質の量は、特に制限されず、例えば、前記ビーズの表面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。また、前記担体が前記第２室の内壁の場合、前記担体（内壁）に固定化する第２結合物質の量は、特に制限されず、例えば、前記第２室の内壁の面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。 The carrier in the immobilized second binding substance may be, for example, a bead or the inner wall of the second chamber. The beads are the same as in Embodiment 4A, for example. When the carrier is the bead, the amount of the second binding substance immobilized on the carrier (bead) is not particularly limited, and for example, 0.1 fmol to 100 pmol, 1 fmol to 10 pmol per 1 mm ² of the surface area of the bead, 10 fmol to 1 pmol. Further, when the carrier is the inner wall of the second chamber, the amount of the second binding substance immobilized on the carrier (inner wall) is not particularly limited, for example, per 1 mm ² area of the inner wall of the second chamber, 0.1 fmol to 100 pmol, 1 fmol to 10 pmol, 10 fmol to 1 pmol.

　本実施形態において、前記第１隔壁は、例えば、前記第１室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁でもよいし、前記第１室の内容物を前記第２室に通過できる多孔性隔壁でもよい。前者の場合、破壊により、例えば、前記第１室の内容物を前記第２室に移動することができ、後者の場合、前記多孔性隔壁を通じて、前記第１室の内容物を前記第２室に移動することができる。前者の場合、前述のような破壊可能な部材が使用できる。後者の場合、例えば、前記第１室の内容物が通過可能な孔を有する膜が使用できる。前記第２室と前記第３室との間の前記第２隔壁は、前記実施形態４Ａと同様である。 In this embodiment, the first partition may be, for example, a partition that is destroyed by bringing the tip of the sample holding tool inserted into the first chamber into contact, or the contents of the first chamber may be the first partition. It may be a porous partition wall that can pass through two chambers. In the former case, for example, the contents of the first chamber can be moved to the second chamber by destruction, and in the latter case, the contents of the first chamber can be transferred to the second chamber through the porous partition wall. Can be moved to. In the former case, a breakable member as described above can be used. In the latter case, for example, a membrane having holes through which the contents of the first chamber can pass can be used. The second partition wall between the second chamber and the third chamber is the same as in Embodiment 4A.

　前記第１室は、例えば、さらに、前記試料内部の成分を抽出する抽出液を含んでもよい。前記抽出液は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The first chamber may further include, for example, an extract for extracting the components inside the sample. For example, the extract is the same as in Embodiment 4A.

　前記第２室は、前記第２試薬として、さらに、タンパク質および脂質の少なくとも一方を吸着する吸着担体を含んでもよい。前記吸着担体は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The second chamber may further include an adsorption carrier that adsorbs at least one of protein and lipid as the second reagent. The adsorption carrier is the same as that in the embodiment 4A, for example.

　前記第３室は、例えば、さらに、前記触媒性核酸分子または前記酵素の触媒機能に対する基質を含むことが好ましい。前記基質は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The third chamber preferably further contains a substrate for the catalytic function of the catalytic nucleic acid molecule or the enzyme, for example. The substrate is the same as that in Embodiment 4A, for example.

　実施形態４Ｂの分析用具を用いた分析方法の一例について、図面を用いて、具体的に説明する。なお、本発明は、この例には制限されない。 An example of an analysis method using the analysis tool of Embodiment 4B will be specifically described with reference to the drawings. Note that the present invention is not limited to this example.

　図６は、前記実施形態４Ｂの分析用具の概略を示す図面である。図６において、図４と同一箇所には同一符号を付している。分析用具５は、第１室１１には、アプタマー１８１に酵素１８２が付加した標識化アプタマー１８が配置され、第２室１２には、アプタマー１８１に対する相補鎖１９１がビーズ１９２に固定化された固定化相補鎖１９が配置されている。この点を除き、本実施形態の分析用具５は、前記実施形態４Ａの分析用具４と同様の構成を有し、その説明を援用できる。 FIG. 6 is a diagram showing an outline of the analysis tool of the embodiment 4B. In FIG. 6, the same parts as those in FIG. In the analysis tool 5, a labeled aptamer 18 in which an enzyme 182 is added to an aptamer 181 is arranged in the first chamber 11, and a complementary strand 191 for the aptamer 181 is immobilized in the beads 192 in the second chamber 12. A complementary strand 19 is arranged. Except for this point, the analysis tool 5 of this embodiment has the same configuration as the analysis tool 4 of Embodiment 4A, and the description thereof can be used.

　つぎに、図６の分析用具５を使用した分析方法について、図７を用いて説明する。図７は、分析用具５の使用方法を示す概略図である。 Next, an analysis method using the analysis tool 5 of FIG. 6 will be described with reference to FIG. FIG. 7 is a schematic view showing how to use the analytical tool 5.

　まず、分析用具５の第１室１１に、保持部２０２に試料を保持させた試料保持用具２０を挿入し、第１室１１において、試料中のターゲット２１を標識化アプタマー１８のアプタマー１８１に結合させる。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の結合は、例えば、液体溶媒中で行うことが好ましく、前記液体溶媒は、例えば、水、緩衝液、生理食塩水、これらの混合液等の水性溶媒があげられる。 First, the sample holding tool 20 in which the sample is held in the holding unit 202 is inserted into the first chamber 11 of the analysis tool 5, and the target 21 in the sample is bound to the aptamer 181 of the labeled aptamer 18 in the first chamber 11. Let The treatment conditions for the combination of the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The combination of the two is preferably performed in, for example, a liquid solvent, and examples of the liquid solvent include aqueous solvents such as water, buffer solution, physiological saline, and a mixed solution thereof.

　つぎに、試料保持用具２０により、第１隔壁１１１を破壊し、第１室１１内の内容物を第２室１２に導入する。そして、標識化アプタマー１８のうち、ターゲット２１と未結合である標識化アプタマー１８を、固定化相補鎖１９に結合させる。また、前記両者の結合処理中、第３室１３の外表面に、シール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の結合は、例えば、前記液体溶媒中で行うことが好ましい。 Next, the first partition 111 is broken by the sample holding tool 20, and the contents in the first chamber 11 are introduced into the second chamber 12. Then, of the labeled aptamer 18, the labeled aptamer 18 that is not bound to the target 21 is bound to the immobilized complementary strand 19. Further, a sealing member 151 is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14 during the coupling process of the both. The treatment conditions for the combination of both are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The bonding between the two is preferably performed, for example, in the liquid solvent.

（実施形態４Ｃ）
　本実施形態は、前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（３）の組合せの分析用具、ならびに前記（３）の組合せの分析用具を用いた（Ｃ）の分析方法の実施形態である。 (Embodiment 4C)
This embodiment is an embodiment of the analysis method of (C) using the analysis tool of the combination of (3) and the analysis tool of the combination of (3) as the first reagent and the second reagent. .

　実施形態４Ｃの分析用具は、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬として、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質を含み、
前記第２室は、前記第２試薬として、前記第１結合物質が担体に固定化された固定化第１結合物質を含み、
前記第３室は、前記標識化第２結合物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる多孔性隔壁である。 The analysis tool of Embodiment 4C includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber includes, as the first reagent, a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound to a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target;
The second chamber includes, as the second reagent, an immobilized first binding substance in which the first binding substance is immobilized on a carrier,
The third chamber is a detection unit for detecting the labeled second binding substance,
The second partition wall is a porous partition wall through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass through.

　また、実施形態４Ｃの分析方法は、前記実施形態４Ｃのターゲット分析用具を使用し、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させ、且つ、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質と前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む。 Moreover, the analysis method of Embodiment 4C uses the target analysis tool of Embodiment 4C,
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the second reagent. And binding the immobilized first binding substance that is unbound to the target and the labeled second binding substance that is the first reagent,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
The step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber is included.

　本実施形態によれば、まず、前記第１室において、例えば、試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とが混合する。そして、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物が、前記第２室に導入されると、前記第２室では、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記固定化第１結合物質とが結合し、且つ、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質と前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とが結合する。そして、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる前記多孔性隔壁であるため、前記固定化第１結合物質は、前記隔壁を通過せずに前記第２室に残る。つまり、前記固定化第１結合物質に結合した前記標識化第２結合物質は、前記第３室に移動することなく前記第２室に残る。他方、前記固定化第１結合物質に未結合の遊離した前記標識化第２結合物質は、前記隔壁を通過して前記第３室に導入される。本実施形態の分析用具における前記標識化第２結合物質は、例えば、既知量とすることができるため、前記固定化第１結合物質に未結合の前記標識化第２結合物質の量は、前記試料中のターゲット量と間接的に対応することになる。このため、前記第３室に導入された前記未結合の標識化第２結合物質を検出することによって、間接的に、前記試料中のターゲットの有無または量を分析することができる。 According to this embodiment, first, in the first chamber, for example, a target in a sample and the labeled second binding substance as the first reagent are mixed. Then, when the mixture of the sample and the first reagent in the first chamber is introduced into the second chamber, the immobilization that is the target in the sample and the second reagent in the second chamber. The immobilized first binding substance that binds to the first binding substance and is not bound to the target binds to the labeled second binding substance that is the first reagent. And since the second partition between the second chamber and the third chamber is the porous partition wall through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass through, The immobilized first binding substance remains in the second chamber without passing through the partition wall. That is, the labeled second binding substance bound to the immobilized first binding substance remains in the second chamber without moving to the third chamber. On the other hand, the free labeled second binding substance that has not been bound to the immobilized first binding substance passes through the partition wall and is introduced into the third chamber. Since the labeled second binding substance in the analysis tool of the present embodiment can be, for example, a known amount, the amount of the labeled second binding substance unbound to the immobilized first binding substance is This indirectly corresponds to the target amount in the sample. Therefore, the presence or amount of the target in the sample can be indirectly analyzed by detecting the unbound labeled second binding substance introduced into the third chamber.

　以下、前記（３）の組合せの分析用具およびそれを用いた（Ｃ）の分析方法について、分析用容器として、前記実施形態１の分析用容器を使用し、前記第１結合物質としてアプタマーを使用する形態を、例にあげて説明する。実施形態４Ｃは、例えば、前記実施形態１～３、４Ａおよび４Ｂ等の説明を援用できる。 Hereinafter, for the analysis tool of the combination (3) and the analysis method (C) using the same, the analysis container of the first embodiment is used as the analysis container, and the aptamer is used as the first binding substance. The form to be described will be described by way of example. For the embodiment 4C, for example, the description of the embodiments 1 to 3, 4A, 4B and the like can be cited.

　本実施形態は、前記固定化第１結合物質における前記第１結合物質として、前記アプタマーを使用する形態であり、前記アプタマーは、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 This embodiment is a form in which the aptamer is used as the first binding substance in the immobilized first binding substance, and the aptamer is the same as that in Embodiment 4A, for example.

　前記標識化第２結合物質における前記第２結合物質は、前記アプタマーに結合可能であればよく、例えば、前記アプタマーに相補的な核酸分子があげられる。前記アプタマーに相補的な核酸分子は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The second binding substance in the labeled second binding substance only needs to be able to bind to the aptamer, and examples thereof include a nucleic acid molecule complementary to the aptamer. The nucleic acid molecule complementary to the aptamer is, for example, the same as in Embodiment 4A.

　前記標識化第２結合物質における前記標識物質は、例えば、触媒機能を示す触媒核酸分子または酵素が好ましく、前記標識物質、前記触媒核酸分子および前記酵素は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The labeling substance in the labeled second binding substance is preferably, for example, a catalytic nucleic acid molecule or an enzyme exhibiting a catalytic function, and the labeling substance, the catalytic nucleic acid molecule, and the enzyme are the same as in, for example, Embodiment 4A .

　前記固定化第１結合物質における前記担体は、例えば、ビーズでもよいし、前記第２室の内壁でもよい。前記ビーズは、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。前記担体が前記ビーズの場合、前記担体（ビーズ）に固定化するアプタマーの量は、特に制限されず、例えば、前記ビーズの表面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。また、前記担体が前記第２室の内壁の場合、前記担体（内壁）に固定化するアプタマーの量は、特に制限されず、例えば、前記第２室の内壁の面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。 The carrier in the immobilized first binding substance may be, for example, a bead or the inner wall of the second chamber. The beads are the same as in Embodiment 4A, for example. When the carrier is the bead, the amount of aptamer immobilized on the carrier (bead) is not particularly limited. For example, 0.1 fmol to 100 pmol, 1 fmol to 10 pmol, 10 fmol to 1 pmol per 1 mm ² of the surface area of the bead. It is. In addition, when the carrier is the inner wall of the second chamber, the amount of aptamer immobilized on the carrier (inner wall) is not particularly limited. For example, 0.1 fmol per 1 mm ² area of the inner wall of the second chamber ˜100 pmol, 1 fmol˜10 pmol, 10 fmol˜1 pmol.

　本実施形態において、前記第１隔壁は、例えば、前記第１室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁でもよいし、前記第１室の内容物を前記第２室に通過できる多孔性隔壁でもよい。前者の場合、破壊により、例えば、前記第１室の内容物を前記第２室に移動することができ、後者の場合、前記多孔性隔壁を通じて、前記第１室の内容物を前記第２室に移動することができる。前者の場合、前述のような破壊可能な部材が使用できる。後者の場合、例えば、前記第１室の内容物が通過可能な孔を有する膜が使用できる。前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる多孔性隔壁である。前記第２隔壁の孔径は、例えば、前記固定化第１結合物質および前記標識化第２結合物質の大きさに応じて適宜設定できる。前記第２隔壁における孔径は、例えば、０．２～１００μｍ、０．２～５０μｍ、０．５～１０μｍである。 In this embodiment, the first partition may be, for example, a partition that is destroyed by bringing the tip of the sample holding tool inserted into the first chamber into contact, or the contents of the first chamber may be the first partition. It may be a porous partition wall that can pass through two chambers. In the former case, for example, the contents of the first chamber can be moved to the second chamber by destruction, and in the latter case, the contents of the first chamber can be transferred to the second chamber through the porous partition wall. Can be moved to. In the former case, a breakable member as described above can be used. In the latter case, for example, a membrane having holes through which the contents of the first chamber can pass can be used. The second partition between the second chamber and the third chamber is a porous partition through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass. The pore diameter of the second partition wall can be appropriately set according to the size of the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance, for example. The hole diameter in the second partition wall is, for example, 0.2-100 μm, 0.2-50 μm, 0.5-10 μm.

　実施形態４Ｃの分析用具を用いた分析方法の一例について、図面を用いて、具体的に説明する。なお、本発明は、この例には制限されない。 An example of an analysis method using the analysis tool of Embodiment 4C will be specifically described with reference to the drawings. Note that the present invention is not limited to this example.

　図８は、実施形態４Ｃの分析用具の概略を示す図面である。図８において、図４と同一箇所には同一符号を付している。分析用具６は、第１室１１には、アプタマー２８１に対する相補鎖２９１に酵素２９２が付加した標識化相補鎖２９が配置され、第２室１２には、アプタマー２８１がビーズ２８２に固定化された固定化アプタマー２８が配置されている。この点を除き、本実施形態の分析用具６は、前記実施形態４Ａの分析用具４と同様の構成を有し、その説明を援用できる。 FIG. 8 is a drawing showing an outline of the analysis tool of Embodiment 4C. In FIG. 8, the same parts as those in FIG. In the analysis tool 6, a labeled complementary strand 29 in which an enzyme 292 is added to a complementary strand 291 for the aptamer 281 is arranged in the first chamber 11, and the aptamer 281 is immobilized on the beads 282 in the second chamber 12. An immobilized aptamer 28 is disposed. Except for this point, the analysis tool 6 of this embodiment has the same configuration as the analysis tool 4 of Embodiment 4A, and the description thereof can be used.

　つぎに、図８の分析用具６を使用した分析方法について、図９を用いて説明する。図９は、分析用具６の使用方法を示す概略図である。 Next, an analysis method using the analysis tool 6 of FIG. 8 will be described with reference to FIG. FIG. 9 is a schematic view showing how to use the analytical tool 6.

　まず、分析用具６の第１室１１に、保持部２０２に試料を保持させた試料保持用具２０を挿入し、第１室１１において、試料中のターゲット２１と標識化相補鎖２９とを混合させる。前記両者の混合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の混合は、例えば、液体溶媒中で行うことが好ましく、前記液体溶媒は、例えば、水、緩衝液、生理食塩水、これらの混合液等の水性溶媒があげられる。 First, the sample holding tool 20 in which the sample is held in the holding portion 202 is inserted into the first chamber 11 of the analysis tool 6, and the target 21 in the sample and the labeled complementary strand 29 are mixed in the first chamber 11. . The processing conditions for mixing the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The mixing of the two is preferably performed, for example, in a liquid solvent, and examples of the liquid solvent include water, a buffer solution, physiological saline, and an aqueous solvent such as a mixed solution thereof.

　つぎに、試料保持用具２０により、第１隔壁１１１を破壊し、第１室１１内の内容物を第２室１２に導入する。そして、前記内容物中のターゲット２１を固定化アプタマー２８に結合させ、また、固定化アプタマー２８のうち、ターゲット２１と未結合である固定化アプタマー２８を、標識化相補鎖２９に結合させる。また、前記両者の結合処理中、第３室１３の外表面に、シール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～３７℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の結合は、例えば、前記液体溶媒中で行うことが好ましい。 Next, the first partition 111 is broken by the sample holding tool 20, and the contents in the first chamber 11 are introduced into the second chamber 12. Then, the target 21 in the contents is bound to the immobilized aptamer 28, and among the immobilized aptamers 28, the immobilized aptamer 28 that is not bound to the target 21 is bound to the labeled complementary strand 29. Further, a sealing member 151 is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14 during the coupling process of the both. The treatment conditions for the combination of both are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 37 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The bonding between the two is preferably performed, for example, in the liquid solvent.

　さらに、前記結合処理中または処理後に、貫通孔１４からシール部材１５１が剥離されると、第２室１２から第３室１３への通液が可能となる。第２隔壁１２１は、固定化アプタマー２８を通過せず、標識化相補鎖２９を通過する多孔性隔壁であるため、標識化相補鎖２９のうち、固定化アプタマー２８に未結合のもののみが、第２隔壁１２１を通過して、第３室１３に導入される。そして、第３室１３において、固定化アプタマー２８に未結合の標識化相補鎖２９について、酵素２９２の触媒機能を測定することにより、間接的に、試料中のターゲットを分析できる。酵素２９２の触媒機能の測定は、酵素２９２の種類に応じて適宜決定できる。 Furthermore, when the sealing member 151 is peeled from the through hole 14 during or after the bonding process, the liquid can be passed from the second chamber 12 to the third chamber 13. Since the second partition wall 121 is a porous partition wall that does not pass through the immobilized aptamer 28 but passes through the labeled complementary strand 29, only the one that is not bound to the immobilized aptamer 28 among the labeled complementary strand 29, It passes through the second partition 121 and is introduced into the third chamber 13. In the third chamber 13, the target in the sample can be indirectly analyzed by measuring the catalytic function of the enzyme 292 for the labeled complementary strand 29 that is not bound to the immobilized aptamer 28. The measurement of the catalytic function of the enzyme 292 can be appropriately determined according to the type of the enzyme 292.

（実施形態４Ｄ）
　本実施形態は、前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（４）の組合せの分析用具、ならびに（４）の組合せの分析用具を用いた（Ｄ）の分析方法の実施形態である。 (Embodiment 4D)
This embodiment is an embodiment of the analysis method of (D) in which the first reagent and the second reagent use the analysis tool of the combination (4) and the analysis tool of the combination (4).

　実施形態４Ｄの分析用具は、前記本発明の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬として、ターゲットに結合する第１結合物質が担体に固定された固定化第１結合物質を含み、
前記第２室は、前記第２試薬として、前記第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質を含み、
前記第３室は、前記標識化第２結合物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる多孔性隔壁である。 The analysis tool of Embodiment 4D includes the analysis container of the present invention, a first reagent, and a second reagent,
The first chamber includes, as the first reagent, an immobilized first binding substance in which a first binding substance that binds to a target is fixed to a carrier;
The second chamber includes, as the second reagent, a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound to a second binding substance that binds to the first binding substance,
The third chamber is a detection unit for detecting the labeled second binding substance,
The second partition wall is a porous partition wall through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass through.

　また、実施形態４Ｄの分析方法は、前記実施形態４Ｄのターゲット分析用具を使用し、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させる工程、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記固定化第１結合物質と前記第２試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む。 In addition, the analysis method of Embodiment 4D uses the target analysis tool of Embodiment 4D,
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent and the sample in the first chamber to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the first reagent;
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. And introducing a mixture of the first reagent and
In the second chamber, the second reagent, a mixture of the sample and the first reagent are brought into contact with each other, and the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance as the second reagent are brought into contact with each other. Combining,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
The step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber is included.

　本実施形態によれば、まず、前記第１室において、試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第１結合物質とが結合する。そして、前記試料保持用具により前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁を破壊すると、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物が、前記第２室に導入される。前記第２室では、前記固定化第１結合物質のうち、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質に、前記標識化第２結合物質が結合する。そして、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる前記多孔性隔壁であるため、前記固定化第１結合物質は、前記隔壁を通過せずに前記第２室に残る。つまり、前記固定化第１結合物質に結合した前記標識化第２結合物質は、前記第３室に移動することなく前記第２室に残る。他方、前記固定化第１結合物質に未結合の遊離した前記標識化第２結合物質は、前記隔壁を通過して前記第３室に導入される。本実施形態の分析用具における前記標識化第２結合物質は、例えば、既知量とすることができるため、前記固定化第１結合物質に未結合の前記標識化第２結合物質の量は、前記試料中のターゲット量と間接的に対応することになる。このため、前記第３室に導入された前記未結合の標識化第２結合物質を検出することによって、間接的に、前記試料中のターゲットの有無または量を分析することができる。 According to this embodiment, first, in the first chamber, the target in the sample and the immobilized first binding substance that is the first reagent are bound. Then, when the first partition between the first chamber and the second chamber is destroyed by the sample holding tool, the mixture of the sample and the first reagent in the first chamber is introduced into the second chamber. Is done. In the second chamber, the labeled second binding substance binds to the immobilized first binding substance that is not bound to the target among the immobilized first binding substances. And since the second partition between the second chamber and the third chamber is the porous partition wall through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass through, The immobilized first binding substance remains in the second chamber without passing through the partition wall. That is, the labeled second binding substance bound to the immobilized first binding substance remains in the second chamber without moving to the third chamber. On the other hand, the free labeled second binding substance that has not been bound to the immobilized first binding substance passes through the partition wall and is introduced into the third chamber. Since the labeled second binding substance in the analysis tool of the present embodiment can be, for example, a known amount, the amount of the labeled second binding substance unbound to the immobilized first binding substance is This indirectly corresponds to the target amount in the sample. Therefore, the presence or amount of the target in the sample can be indirectly analyzed by detecting the unbound labeled second binding substance introduced into the third chamber.

　以下、前記（４）の組合せの分析用具およびそれを用いた（Ｄ）の分析方法について、分析用容器として、前記実施形態１の分析用容器を使用し、前記第１結合物質としてアプタマーを使用する形態を、例にあげて説明する。実施形態４Ｄは、例えば、前記実施形態１～３、４Ａ、４Ｂおよび４Ｃ等の説明を援用できる。 Hereinafter, for the analysis tool of the combination of (4) and the analysis method of (D) using the same, the analysis container of Embodiment 1 is used as the analysis container, and the aptamer is used as the first binding substance The form to be described will be described by way of example. For the embodiment 4D, for example, the description of the embodiments 1 to 3, 4A, 4B, and 4C can be cited.

　前記標識化第２結合物質における前記第２結合物質は、前記アプタマーに結合可能であればよく、例えば、前記相補性核酸分子があげられる。前記相補性核酸分子は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 The second binding substance in the labeled second binding substance only needs to be able to bind to the aptamer, and examples thereof include the complementary nucleic acid molecule. The complementary nucleic acid molecule is the same as that in the embodiment 4A, for example.

　前記固定化第１結合物質における前記担体は、例えば、ビーズがあげられる。前記ビーズは、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 Examples of the carrier in the immobilized first binding substance include beads. The beads are the same as in Embodiment 4A, for example.

　前記固定化第１結合物質において、前記担体に固定化するアプタマーの量は、特に制限されない。前記担体に固定化するアプタマーの量は、例えば、前記担体の表面積１ｍｍ^２あたり、０．１ｆｍｏｌ～１００ｐｍｏｌ、１ｆｍｏｌ～１０ｐｍｏｌ、１０ｆｍｏｌ～１ｐｍｏｌである。 In the immobilized first binding substance, the amount of aptamer immobilized on the carrier is not particularly limited. The amount of aptamer immobilized on the carrier is, for example, 0.1 fmol to 100 pmol, 1 fmol to 10 pmol, 10 fmol to 1 pmol per 1 mm ² of the surface area of the carrier.

　前記標識化第２結合物質における前記標識物質は、例えば、触媒機能を示す触媒核酸分子、酵素等があげられ、前記標識物質、前記触媒核酸分子および前記酵素は、例えば、それぞれ、前記実施形態４Ａと同様である。 Examples of the labeling substance in the labeled second binding substance include a catalytic nucleic acid molecule and an enzyme that exhibit a catalytic function, and the labeling substance, the catalytic nucleic acid molecule, and the enzyme are, for example, each of Embodiment 4A. It is the same.

　本実施形態では、例えば、前記第１結合物質としてアプタマー、前記第２結合物質として相補性核酸分子を使用できることから、例えば、熱安定性であり、保存がより容易である。また、前記標識物質として、例えば、ルシフェラーゼ、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ等の酵素を使用できることから、例えば、感度よくターゲットを分析できる。 In this embodiment, for example, an aptamer can be used as the first binding substance, and a complementary nucleic acid molecule can be used as the second binding substance. Moreover, since an enzyme such as luciferase, alkaline phosphatase or peroxidase can be used as the labeling substance, for example, the target can be analyzed with high sensitivity.

　前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁は、前述のように、前記固定化第１結合物質が通過できず、前記標識化第２結合物質が通過できる多孔性隔壁である。前記第２隔壁の孔径は、例えば、前記固定化第１結合物質および前記標識化第２結合物質の大きさに応じて適宜設定できる。前記第２隔壁における孔径は、例えば、０．２～１００μｍ、０．２～５０μｍ、０．５～１０μｍである。 As described above, the second partition between the second chamber and the third chamber is a porous partition through which the immobilized first binding substance cannot pass and the labeled second binding substance can pass. . The pore diameter of the second partition wall can be appropriately set according to the size of the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance, for example. The hole diameter in the second partition wall is, for example, 0.2-100 μm, 0.2-50 μm, 0.5-10 μm.

　前記第３室は、前記標識化第２結合物質における前記標識物質が前記触媒性核酸分子または前記酵素の場合、例えば、さらに、その触媒機能に対する基質を含むことが好ましい。前記基質は、例えば、前記実施形態４Ａと同様である。 In the case where the labeling substance in the labeled second binding substance is the catalytic nucleic acid molecule or the enzyme, the third chamber preferably further contains, for example, a substrate for its catalytic function. The substrate is the same as that in Embodiment 4A, for example.

　実施形態４Ｄの分析用具を用いた分析方法の一例について、図面を用いて、具体的に説明する。なお、本発明は、この例には制限されない。 An example of an analysis method using the analysis tool of Embodiment 4D will be specifically described with reference to the drawings. Note that the present invention is not limited to this example.

　図１０は、実施形態４Ｄの分析用具の概略を示す図面である。図１０において、図４と同一箇所には同一符号を付している。分析用具７は、第１室１１には、アプタマー２８１がビーズ２８２に固定化された固定化アプタマー２８が配置され、第２室１２には、アプタマー２８１に対する相補鎖２９１に酵素２９２が付加した標識化相補鎖２９が配置されている。この点を除き、本実施形態の分析用具７は、前記実施形態４Ａの分析用具４と同様の構成を有し、その説明を援用できる。 FIG. 10 is a drawing showing an outline of the analysis tool of Embodiment 4D. 10, the same parts as those in FIG. 4 are denoted by the same reference numerals. In the analysis tool 7, an immobilized aptamer 28 in which an aptamer 281 is immobilized on a bead 282 is arranged in the first chamber 11, and a label in which an enzyme 292 is added to a complementary strand 291 for the aptamer 281 in the second chamber 12. The complementary strand 29 is arranged. Except for this point, the analysis tool 7 of this embodiment has the same configuration as the analysis tool 4 of Embodiment 4A, and the description thereof can be used.

　つぎに、図１０の分析用具７を使用した分析方法について、図１１を用いて説明する。図１１は、分析用具７の使用方法を示す概略図である。 Next, an analysis method using the analysis tool 7 of FIG. 10 will be described with reference to FIG. FIG. 11 is a schematic view showing how to use the analytical tool 7.

　まず、分析用具７の第１室１１に、保持部２０２に試料を保持させた試料保持用具２０を挿入し、第１室１１において、試料中のターゲット２１を固定化アプタマー２８のアプタマー２８１に結合させる。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～４５℃、時間が、例えば、１０秒～１０分である。前記両者の結合は、例えば、液体溶媒中で行うことが好ましく、前記液体溶媒は、例えば、水、緩衝液、生理食塩水、これらの混合液等の水性溶媒があげられる。 First, the sample holding tool 20 in which the sample is held in the holding unit 202 is inserted into the first chamber 11 of the analysis tool 7, and the target 21 in the sample is bound to the aptamer 281 of the immobilized aptamer 28 in the first chamber 11. Let The treatment conditions for the combination of the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 45 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 10 minutes. The combination of the two is preferably performed in, for example, a liquid solvent, and examples of the liquid solvent include aqueous solvents such as water, buffer solution, physiological saline, and a mixed solution thereof.

　つぎに、試料保持用具２０により、第１隔壁１１１を破壊し、第１室１１内の内容物を第２室１２に導入する。そして、ビーズ２８２に固定化されたアプタマー２８１のうち、ターゲット２１と未結合であるアプタマー２８１に、標識化相補鎖２９を結合させる。また、前記両者の結合処理中、第３室１３の外表面に、シール部材１５１が、貫通孔１４を覆う状態で配置されている。前記両者の結合の処理条件は、特に制限されず、温度が、例えば、４～４５℃、時間が、例えば、１０秒～３０分である。前記両者の結合は、例えば、前記液体溶媒中で行うことが好ましい。 Next, the first partition 111 is broken by the sample holding tool 20, and the contents in the first chamber 11 are introduced into the second chamber 12. Then, the labeled complementary strand 29 is bound to the aptamer 281 that is not bound to the target 21 among the aptamers 281 immobilized on the beads 282. Further, a sealing member 151 is disposed on the outer surface of the third chamber 13 so as to cover the through hole 14 during the coupling process of the both. The treatment conditions for the combination of the two are not particularly limited, and the temperature is, for example, 4 to 45 ° C., and the time is, for example, 10 seconds to 30 minutes. The bonding between the two is preferably performed, for example, in the liquid solvent.

　以上、実施形態を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本発明のスコープ内で当業者が理解しうる様々な変更をできる。 As mentioned above, although this invention was demonstrated with reference to embodiment, this invention is not limited to the said embodiment. Various changes that can be understood by those skilled in the art can be made to the configuration and details of the present invention within the scope of the present invention.

　この出願は、２０１６年３月３１日に出願された日本出願特願２０１６－０７３５２１を基礎とする優先権を主張し、その開示のすべてをここに取り込む。 This application claims priority based on Japanese Patent Application No. 2016-073521 filed on Mar. 31, 2016, the entire disclosure of which is incorporated herein.

１、２、３　　　　分析用容器
４、５、６、７　　分析用具
１１　　　　　　　第１室
１１１　　　　　　第１隔壁
１１２　　　　　　前隔壁
１２　　　　　　　第２室
１２１　　　　　　第２隔壁
１３　　　　　　　第３室
１４　　　　　　　貫通孔
１５１　　　　　　シール部材
１５２　　　　　　棒状部材
１６　　　　　　　位置決め部材
１７　　　　　　　接続部材
１８　　　　　　　標識化アプタマー
１８１、２８１　　アプタマー
１８２、２９２　　酵素
１９　　　　　　　固定化相補鎖
１９１、２９１　　相補鎖
１９２、２８２　　ビーズ
２０　　　　　　　試料保持用具
２０１　　　　　　把持部
２０２　　　　　　保持部
２１　　　　　　　ターゲット
２８　　　　　　　固定化アプタマー
２９　　　　　　　標識化相補鎖
３１　　　　　　　第１筒
３２　　　　　　　第２筒
３３　　　　　　　第３筒 1, 2, 3

Analysis container

4, 5, 6, 7 Analysis tool 11 First chamber 111 First partition 112 Front partition 12 Second chamber 121 Second partition 13 Third chamber 14 Through hole 151 Seal member 152 Bar-shaped member 16 Positioning member 17 Connecting member 18 Labeled

aptamer

181, 281

Aptamer

182, 292 Enzyme 19 Immobilized

complementary strand

191, 291

Complementary strand

192, 282 Bead 20 Sample holding tool 201 Gripping portion 202 Holding portion 21 Target 28 Immobilized aptamer 29 Labeling Complementary strand 31 First cylinder 32 Second cylinder 33 Third cylinder

Claims

第１室、第２室および第３室を含み、
前記第１室、前記第２室および前記第３室が、この順序で連続して配置され、
前記第１室と前記第２室との間に、第１隔壁を有し、
前記第２室と前記第３室との間に、第２隔壁を有し、
前記第１室は、その外部から内部に、試料保持用具を挿入可能であり、
前記第１隔壁は、前記第１室に挿入された前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される隔壁であり、
前記第２隔壁は、多孔性隔壁であり、
前記第３室は、１以上の貫通孔を含み、
前記貫通孔には、開閉可能な閉塞部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔を前記閉塞部材から開放することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる
ことを特徴とする、分析用容器。 Including a first chamber, a second chamber and a third chamber;
The first chamber, the second chamber, and the third chamber are sequentially arranged in this order,
A first partition between the first chamber and the second chamber;
A second partition wall between the second chamber and the third chamber;
The first chamber can be inserted with a sample holding tool from the outside to the inside,
The first partition is a partition that is destroyed by contacting the tip of the sample holding tool inserted into the first chamber,
The second partition is a porous partition,
The third chamber includes one or more through holes,
In the through hole, a closing member that can be opened and closed is arranged in a state of covering the through hole,
An analysis container characterized in that liquid can be passed from the second chamber to the third chamber by opening the through hole from the closing member.
前記閉塞部材は、剥離可能なシール部材であり、
前記第３室の外表面には、前記シール部材は、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔から前記シール部材を剥離することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる、請求項１記載の分析用容器。 The closing member is a peelable seal member,
On the outer surface of the third chamber, the seal member is disposed in a state of covering the through hole,
The analysis container according to claim 1, wherein the seal member is peeled from the through hole, thereby allowing liquid to flow from the second chamber to the third chamber.
前記閉塞部材は、除去可能な棒状部材であり、
前記第３室の外表面には、前記棒状部材が、前記貫通孔を覆う状態で配置されており、
前記貫通孔から前記棒状部材を除去することにより、前記第２室から前記第３室に通液可能となる、請求項１記載の分析用容器。 The blocking member is a removable rod-shaped member,
The rod-shaped member is disposed on the outer surface of the third chamber so as to cover the through-hole,
The analysis container according to claim 1, wherein the liquid can be passed from the second chamber to the third chamber by removing the rod-shaped member from the through hole.
前記第１室は、前記第２室とは反対側に、前記試料保持用具の先端を接触させることにより破壊される前隔壁を有する、請求項１から３のいずれか一項に記載の分析用容器。 The analysis according to any one of claims 1 to 3, wherein the first chamber has a front partition wall that is destroyed by contacting the tip of the sample holding tool on the side opposite to the second chamber. container.
第１筒、第２筒および第３筒を有し、
前記第２筒が、前記第１筒の内部に収容でき、
前記第３筒が、前記第１筒の端部に配置でき、
前記第２筒が、前記第１室を有し、
前記第３筒が、前記第３室を有し、
前記第１筒の内部に前記第２筒を収容し、前記第１筒の端部に前記第３筒を配置した際、前記第１筒が、前記第２筒の底部と前記第３筒の上部との間に空間を有する、請求項１から４のいずれか一項に記載の分析用容器。 Having a first cylinder, a second cylinder and a third cylinder;
The second cylinder can be accommodated in the first cylinder;
The third cylinder can be disposed at an end of the first cylinder;
The second cylinder has the first chamber;
The third cylinder has the third chamber;
When the second cylinder is accommodated inside the first cylinder and the third cylinder is disposed at the end of the first cylinder, the first cylinder is connected to the bottom of the second cylinder and the third cylinder. The analytical container according to any one of claims 1 to 4, which has a space between the upper part and the upper part.
前記第１筒が、前記第１筒内の前記第２筒の収容位置を決める位置決め部材を有し、
前記第２筒が、前記前隔壁および前記第１隔壁を有し、
前記第３筒が、前記第２隔壁と、前記第１筒と接続するための接続部材とを有し、
前記第２筒が、前記第１筒内の所定位置に、前記位置決め部材により配置され、
前記第３筒が、前記接続部材を介して前記第１筒の端部に配置される、請求項５記載の分析用容器。 The first cylinder has a positioning member for determining a housing position of the second cylinder in the first cylinder;
The second cylinder has the front partition and the first partition;
The third cylinder has the second partition wall and a connection member for connecting to the first cylinder,
The second cylinder is disposed at a predetermined position in the first cylinder by the positioning member;
The analysis container according to claim 5, wherein the third cylinder is disposed at an end of the first cylinder via the connection member.
外筒と内筒とを有し、
前記内筒が、前記外筒の内部に収容でき、
前記内筒が、前記第１室および前記第２室を有し、
前記外筒の内部に前記内筒を収容した際、前記外筒の底部と前記内筒の底部との間に空間を有する、請求項１から４のいずれか一項に記載の分析用容器。 Having an outer cylinder and an inner cylinder,
The inner cylinder can be accommodated in the outer cylinder;
The inner cylinder has the first chamber and the second chamber;
5. The analytical container according to claim 1, wherein when the inner cylinder is accommodated in the outer cylinder, a space is provided between a bottom portion of the outer cylinder and a bottom portion of the inner cylinder. 6.
請求項１から７のいずれか一項の分析用容器、第１試薬および第２試薬を含み、
前記第１室は、前記第１試薬を含み、
前記第２室は、前記第２試薬を含み、
前記第３室は、前記第１試薬または前記第２試薬における標識物質が検出される検出部であり、
前記第２隔壁は、担体に固定化された結合物質が通過できず、前記標識物質が結合した結合物質が通過できる多孔性隔壁であり、
前記第１試薬および前記第２試薬が、下記（１）～（３）および（４）のいずれかの組合せであることを特徴とする、ターゲット分析用具。
（１）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質である。
（２）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に標識物質が結合した標識化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質が担体に固定化された固定化第２結合物質である。
（３）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質が担体に固定化された固定化第１結合物質である。
（４）前記第１試薬が、ターゲットに結合する第１結合物質が担体に固定された固定化第１結合物質であり、前記第２試薬が、前記第１結合物質に結合する第２結合物質に標識物質が結合した標識化第２結合物質である。 The analysis container according to any one of claims 1 to 7, comprising a first reagent and a second reagent,
The first chamber contains the first reagent,
The second chamber contains the second reagent,
The third chamber is a detection unit for detecting a labeling substance in the first reagent or the second reagent,
The second partition wall is a porous partition wall through which the binding substance immobilized on the carrier cannot pass and the binding substance bound with the labeling substance can pass through.
The target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are any combination of the following (1) to (3) and (4).
(1) The first reagent is an immobilized second binding substance in which a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target is immobilized on a carrier, and the second reagent is the first binding substance. It is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a substance.
(2) The first reagent is a labeled first binding substance in which a labeling substance is bound to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is a second binding substance that binds to the first binding substance. Is an immobilized second binding substance immobilized on a carrier.
(3) The first reagent is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound to a second binding substance that binds to a first binding substance that binds to a target, and the second reagent is the first binding substance. Is an immobilized first binding substance immobilized on a carrier.
(4) The first reagent is an immobilized first binding substance in which a first binding substance that binds to a target is fixed to a carrier, and the second reagent binds to the first binding substance. This is a labeled second binding substance in which a labeling substance is bound.
前記第１結合物質が、アプタマーであり、
前記第２結合物質が、前記アプタマーに相補的な核酸分子である、請求項８記載のターゲット分析用具。 The first binding substance is an aptamer;
The target analysis tool according to claim 8, wherein the second binding substance is a nucleic acid molecule complementary to the aptamer.
前記標識物質が、酵素、核酸、蛍光物質、色素物質、発光物質、放射性物質、および電子供与体からなる群から選択された少なくとも１つの物質である、請求項８または９記載のターゲット分析用具。 The target analysis tool according to claim 8 or 9, wherein the labeling substance is at least one substance selected from the group consisting of an enzyme, a nucleic acid, a fluorescent substance, a dye substance, a luminescent substance, a radioactive substance, and an electron donor.
前記酵素が、ルシフェラーゼである、請求項１０記載のターゲット分析用具。 The target analysis tool according to claim 10, wherein the enzyme is luciferase.
前記第３室が、前記酵素に対する基質を含む、請求項１０または１１記載のターゲット分析用具。 The target analysis tool according to claim 10 or 11, wherein the third chamber contains a substrate for the enzyme.
前記担体が、ビーズである、請求項８から１２のいずれか一項に記載のターゲット分析用具。 The target analysis tool according to any one of claims 8 to 12, wherein the carrier is a bead.
前記第１室が、前記試料から、前記試料内部の成分を抽出する抽出液を含む、請求項８から１３のいずれか一項に記載のターゲット分析用具。 The target analysis tool according to any one of claims 8 to 13, wherein the first chamber includes an extraction liquid for extracting a component inside the sample from the sample.
前記試料保持用具は、棒状の把持部および試料の保持部を含み、
前記把持部の先端に前記保持部を有する、請求項８から１４のいずれか一項に記載のターゲット分析用具。 The sample holding tool includes a rod-shaped gripping part and a sample holding part,
The target analysis tool according to claim 8, wherein the holding unit is provided at a tip of the gripping unit.
請求項８から１５のいずれか一項に記載のターゲット分析用具を使用し、下記（Ａ）～（Ｃ）および（Ｄ）のいずれかの分析方法を実施することを特徴とする、ターゲット分析方法。
（Ａ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（１）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
試料を保持した試料保持用具を前記ターゲット分析用具の前記第１室に挿入後、前記第１室と前記第２室との間の前記第１隔壁に接触させ、前記第２室に、前記試料と前記第１試薬とを導入する工程、
前記第２室において、前記試料と前記第１試薬と前記第２試薬とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させ、且つ前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第１試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｂ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（２）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記標識化第１結合物質とが結合した第１結合体を形成させる工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記混合物中の前記ターゲットに未結合の前記標識化第１結合物質を前記第２試薬である前記固定化第２結合物質に結合させる工程、
前記第１結合体を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記第１結合体における前記標識化第１結合物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｃ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（３）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第２試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させ、且つ、前記ターゲットに未結合の前記固定化第１結合物質と前記第１試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。
（Ｄ）の分析方法
前記第１試薬および前記第２試薬が、前記（４）の組合せであるターゲット分析用具を用い、
前記ターゲット分析用具の前記第１室に、試料を保持した試料保持用具を挿入する工程、
前記第１室において、前記第１試薬と前記試料とを接触させ、前記試料中のターゲットと前記第１試薬である前記固定化第１結合物質とを結合させる工程、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程、
前記第２室において、前記第２試薬と、前記試料と前記第１試薬との混合物とを接触させ、前記固定化第１結合物質と前記第２試薬である前記標識化第２結合物質とを結合させる工程、
未結合の前記標識化第２結合物質を、前記第２室と前記第３室との間の第２隔壁を通過させ、前記第３室に導入する工程、および、
前記第３室において、前記標識化第２結合物質における前記標識物質を検出する工程を含む、分析方法。 16. A target analysis method characterized in that the target analysis tool according to any one of claims 8 to 15 is used, and any one of the following analysis methods (A) to (C) and (D) is performed: .
(A) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (1),
After a sample holding tool holding a sample is inserted into the first chamber of the target analysis tool, the sample holding tool is brought into contact with the first partition between the first chamber and the second chamber, and the sample is placed in the second chamber. And introducing the first reagent,
In the second chamber, the sample, the first reagent, and the second reagent are brought into contact with each other, and the target in the sample and the labeled first binding substance that is the second reagent are bound to each other. And binding the labeled first binding substance unbound to the target to the immobilized second binding substance that is the first reagent,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(B) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of the above (2),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent with the sample in the first chamber to form a first conjugate in which the target in the sample is bound to the labeled first binding substance as the first reagent;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent, and the labeled first binding substance unbound to the target in the mixture is used as the second reagent. Binding to the immobilized second binding substance,
Introducing the first combined body into the third chamber through a second partition between the second chamber and the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeled first binding substance in the first conjugate in the third chamber.
(C) Analytical method The target reagent which said 1st reagent and said 2nd reagent are the combination of said (3),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
In the second chamber, the second reagent is brought into contact with the mixture of the sample and the first reagent to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the second reagent. And binding the immobilized first binding substance that is unbound to the target and the labeled second binding substance that is the first reagent,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.
(D) Analysis method Using the target analysis tool, wherein the first reagent and the second reagent are a combination of (4),
Inserting a sample holding tool holding a sample into the first chamber of the target analysis tool;
Contacting the first reagent and the sample in the first chamber to bind the target in the sample and the immobilized first binding substance as the first reagent;
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. And introducing a mixture of the first reagent and
In the second chamber, the second reagent, a mixture of the sample and the first reagent are brought into contact with each other, and the immobilized first binding substance and the labeled second binding substance as the second reagent are brought into contact with each other. Combining,
Introducing unbound labeled second binding substance through the second partition between the second chamber and the third chamber into the third chamber; and
An analysis method comprising a step of detecting the labeling substance in the labeled second binding substance in the third chamber.
前記（Ｂ）または（Ｃ）の分析方法において、
前記第１室内の前記試料保持用具を、前記第１室と前記第２室との間の第１隔壁に接触させ、前記隔壁を破壊し、前記第２室に、前記第１室における前記試料と前記第１試薬との混合物を導入する工程を含む、請求項１６記載のターゲット分析方法。 In the analysis method of (B) or (C),
The sample holding tool in the first chamber is brought into contact with a first partition between the first chamber and the second chamber, the partition is broken, and the sample in the first chamber is placed in the second chamber. The target analysis method according to claim 16, further comprising a step of introducing a mixture of the first reagent and the first reagent.