WO2016030354A1 - Amino-substituierte annellierte pyrimidine und ihre verwendung - Google Patents

Amino-substituierte annellierte pyrimidine und ihre verwendung Download PDF

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WO2016030354A1
WO2016030354A1 PCT/EP2015/069404 EP2015069404W WO2016030354A1 WO 2016030354 A1 WO2016030354 A1 WO 2016030354A1 EP 2015069404 W EP2015069404 W EP 2015069404W WO 2016030354 A1 WO2016030354 A1 WO 2016030354A1
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fluorine
hydrogen
oxides
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PCT/EP2015/069404
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Alexandros Vakalopoulos
Gaelle VALOT
Markus Follmann
Damian Brockschnieder
Johannes-Peter Stasch
Tobias Marquardt
Adrian Tersteegen
Frank Wunder
Lisa Dietz
Dieter Lang
Ursula Krenz
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Bayer Pharma Aktiengesellschaft
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    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Definitions

  • the present application relates to novel amino-substituted fused pyrimidines, processes for their preparation, their use alone or in combinations for the treatment and / or prophylaxis of diseases and their use for the preparation of medicaments for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular Treatment and / or prophylaxis of cardiovascular diseases.
  • cyclic guanosine monophosphate cGMP
  • NO nitric oxide
  • the guanylate cyclases catalyze the biosynthesis of cGMP from guanosine triphosphate (GTP).
  • GTP guanosine triphosphate
  • the previously known members of this family can be divided into two groups according to both structural features and the nature of the ligands: the particulate guanylate cyclases stimulable by natriuretic peptides and the soluble guanylate cyclases stimulable by NO.
  • the soluble guanylate cyclases consist of two subunits and most likely contain one heme per heterodimer that is part of the regulatory center. This is central to the activation mechanism. NO can bind to the iron atom of the heme and thus significantly increase the activity of the enzyme. On the other hand, heme-free preparations can not be stimulated by NO. Also, carbon monoxide (CO) is able to bind to the central iron atom of the heme, with stimulation by CO being significantly less than by NO.
  • CO carbon monoxide
  • guanylate cyclase plays a crucial role in various physiological processes, in particular in the relaxation and proliferation of smooth muscle cells, platelet aggregation and adhesion, neuronal signaling and diseases based on a disturbance of the above operations.
  • the NO / cGMP system may be suppressed, which may, for example, lead to hypertension, platelet activation, increased cell proliferation, endothelial dysfunction, arteriosclerosis, angina pectoris, heart failure, myocardial infarction, thrombosis, stroke and sexual dysfunction.
  • a NO-independent treatment option for such diseases which is aimed at influencing the cGMP pathway in organisms, is a promising approach on account of the expected high efficiency and low side effects.
  • phosphodiesterase-5 occurs predominantly in the smooth muscle of the penile erectile tissue (corpus cavernosum penis) and the pulmonary arteries.
  • Blocking of cGMP degradation by inhibition of PDE5 leads to increased signals of the relaxation signal pathways and especially to increased blood supply to the penile erectile tissue and pressure reduction in the blood vessels of the lung. They are used to treat erectile dysfunction and pulmonary arterial hypertension.
  • PDE5 there are other cGMP-cleaving phosphodiesterases (Stasch et al., Circulation 2011, 123, 2263-2273).
  • WO 00/06568 and WO 00/06569 fused pyrazole derivatives and in WO 03/095451 carbamate-substituted 3-pyrimidinyl-pyrazolopyridines are disclosed.
  • 3-Pyrimidinyl-pyrazolopyridines with phenylamide substituents are described in EM Becker et al., BMC Pharmacology 1 (13), 2001.
  • WO 2004/009590 describes pyrazolopyridines with substituted 4-aminopyrimidines for the treatment of CNS diseases.
  • WO 2010/065275 and WO 2011/149921 disclose substituted pyrrolo and dihydropyrido pyrimidines as sGC activators.
  • the sGC stimulators described in WO 2012/004259 are fused aminopyrimidines and in WO 2012/004258, WO 2012/143510 and WO 2012/152629 fused pyrimidines and triazines.
  • WO 2012/28647 discloses pyrazolopyridines with various azaheterocycles for the treatment of cardiovascular diseases.
  • the object of the present invention was to provide novel substances which act as stimulators of soluble guanylate cyclase and as stimulators of soluble guanylate cyclase and phosphodiesterase-5 inhibitors (dual principle) and have a similar or improved therapeutic profile compared to the compounds known from the prior art , such as for their in vivo properties, such as their pharmacokinetic and pharmacodynamic behavior, their solubility and / or their metabolism profile and / or their dose-response relationship.
  • the compounds according to the invention are distinguished, in particular, by improved solubility combined with high cell permeability.
  • the present invention relates to compounds of the general formula (I)
  • A is nitrogen or carbon
  • R 1 is phenyl, pyridyl, 3,3,3-trifluoroprop-1-yl, 4,4,4-trifluorobut-1-yl or 3,3,4,4,4-pentafluorobut-1-yl,
  • pyridyl having 1 or 2 substituents independently of one another is selected from the group consisting of fluorine, (C 1 -C 4 -alkyl, cyclopropyl or (C 1 -C 4 -alkoxy),
  • R 2 is hydrogen or (C 1 -C 4 ) -alkyl
  • R 3 is (C 1 -C 6 ) -alkyl
  • R 4 is (C 1 -C 4 ) -alkyl
  • R 5 is (C 1 -C 4 ) -alkyl
  • R 4 and R 5 together with the carbon atom to which they are attached form a 3- to 6-membered carbocycle
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen or fluorine
  • R 8 represents hydrogen, chlorine, fluorine or (C 1 -C 4 ) -alkyl
  • Compounds according to the invention are the compounds of the formula (I) and their salts, solvates and solvates of the salts comprising the compounds of the formulas below and their salts, solvates and solvates of the salts and of the formula (I) encompassed by formula (I), hereinafter referred to as exemplary compounds and their salts, solvates and solvates of the salts, as far as the compounds of formula (I), the compounds mentioned below are not already salts, solvates and solvates of the salts.
  • Salts used in the context of the present invention are physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention. Also included are salts which are themselves unsuitable for pharmaceutical applications but can be used, for example, for the isolation or purification of the compounds of the invention.
  • Physiologically acceptable salts of the compounds of the invention include acid addition salts of mineral acids, carboxylic acids and sulfonic acids, e.g. Salts of hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, toluene sulfonic acid, benzenesulfonic acid, naphthalenedisulfonic acid, formic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, propionic acid, lactic acid, tartaric acid, malic acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid and benzoic acid.
  • salts of hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, toluene sulfonic acid, benzenesulfonic acid, naphthalenedisulfonic acid formic acid, acetic acid, triflu
  • Physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention also include salts of customary bases, such as, by way of example and by way of preference, alkali metal salts (for example sodium and potassium salts), alkaline earth salts (for example calcium and magnesium salts) and ammonium salts derived from ammonia or organic amines having from 1 to 16 carbon atoms.
  • alkali metal salts for example sodium and potassium salts
  • alkaline earth salts for example calcium and magnesium salts
  • ammonium salts derived from ammonia or organic amines having from 1 to 16 carbon atoms such as, by way of example and by way of preference, alkali metal salts (for example sodium and potassium salts), alkaline earth salts (for example calcium and magnesium salts) and ammonium salts derived from ammonia or organic amines having from 1 to 16 carbon atoms.
  • Atoms such as, by way of example and by way of preference, ethylamine, diethylamine, triethylamine, ethyldiisopropylamine, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, dicyclohexylamine, dimethylaminoethanol, procaine, dibenzylamine, N-methylmorpholine, arginine, lysine, ethylenediamine and N-methylpiperidine.
  • Solvates in the context of the invention are those forms of the compounds according to the invention which form a complex in the solid or liquid state by coordination with solvent molecules. Hydrates are a special form of solvates that coordinate with water. As solvates, hydrates are preferred in the context of the present invention.
  • the compounds of the invention may exist in different stereoisomeric forms depending on their structure, i. in the form of configurational isomers or optionally also as conformational isomers (enantiomers and / or diastereomers, including those in atropisomers).
  • the present invention therefore encompasses the enantiomers and diastereomers and their respective mixtures. From such mixtures of enantiomers and / or diastereomers, the stereoisomerically uniform components can be isolated in a known manner; Preferably, chromatographic methods are used for this, in particular HPLC chromatography on achiral or chiral phase.
  • the present invention encompasses all tautomeric forms.
  • the present invention also includes all suitable isotopic variants of the compounds of the invention.
  • An isotopic variant of a compound according to the invention is understood to mean a compound in which at least one atom within the compound according to the invention is exchanged for another atom of the same atomic number but with a different atomic mass than the atomic mass that usually or predominantly occurs in nature.
  • isotopes that can be incorporated into a compound of the invention are those of hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, phosphorus, sulfur, fluorine, chlorine, bromine and iodine, such as 2 H (deuterium), ⁇ (tritium), 13 C , 14 C, 15 N, 17 0, 18 0, 32 P, 33 P, 33 S, 34 S, 35 S, 36 S, 18 F, 36 C, 82 Br, 123 I, 124 I, 129 I, and 131 I.
  • isotopic variants of a compound of the invention such as in particular those in which one or more radioactive isotopes are incorporated, may be useful, for example for the study of the mechanism of action or distribution of the drug in the body; Due to the comparatively easy production and detectability, compounds labeled with 3 H or 14 C isotopes in particular are suitable for this purpose.
  • isotopes such as deuterium may result in certain therapeutic benefits as a result of greater metabolic stability of the compound, such as prolonging the body's half-life or reducing the required effective dose;
  • Such modifications of the compounds of the invention may therefore optionally also constitute a preferred embodiment of the present invention.
  • Isotopic variants of the compounds according to the invention can be prepared by the methods known to the person skilled in the art, for example as described below methods described and reproduced in the embodiments by appropriate isotopic modifications of the respective reagents and / or starting compounds are used.
  • the present invention also includes prodrugs of the compounds of the invention.
  • prodrugs refers to compounds which themselves may be biologically active or inactive, but are converted during their residence time in the body to compounds of the invention (for example metabolically or hydrolytically).
  • alkyl is a linear or branched alkyl radical having in each case the number of carbon atoms specified.
  • alkyl is a linear or branched alkyl radical having in each case the number of carbon atoms specified.
  • alkyl is a linear or branched alkyl radical having in each case the number of carbon atoms specified.
  • Alkoxy in the context of the invention represents a linear or branched alkoxy radical of 1 to 4 carbon atoms.
  • Cyclo alkyl or carbocycle in the context of the invention is a monocyclic, saturated alkyl radical having the particular number of ring carbon atoms. Examples which may be mentioned by way of example include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and cycloheptyl.
  • Halogen in the context of the invention includes fluorine, chlorine, bromine and iodine. Preference is given to chlorine or fluorine.
  • radicals are substituted in the compounds according to the invention, the radicals can, unless otherwise specified, be monosubstituted or polysubstituted. In the context of the present invention, the meaning is independent of each other for all radicals which occur repeatedly. Substitution with one or two identical or different substituents is preferred. Very particular preference is given to the substitution with a substituent.
  • the term “treatment” or “treating” includes inhibiting, delaying, arresting, alleviating, attenuating, restraining, reducing, suppressing, restraining or curing a disease, a disease, a disease, an injury or a medical condition , the unfolding, the course or progression of such conditions and / or the symptoms of such conditions.
  • the term “therapy” is understood to be synonymous with the term “treatment”.
  • prevention means the avoidance or reduction of the risk, a disease, a disease, a disease, an injury or a health disorder, a development or a Progression of such conditions and / or to get, experience, suffer or have the symptoms of such conditions.
  • the treatment or the prevention of a disease, a disease, a disease, an injury or a health disorder can be partial or complete.
  • R 1 is phenyl or pyridyl
  • R 2 is hydrogen or methyl
  • R 4 is methyl or ethyl
  • R 5 is methyl or ethyl
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen or fluorine
  • R 8 is hydrogen, chlorine, methyl or ethyl
  • R 1 is phenyl or pyridyl
  • R 2 is hydrogen
  • R 4 is methyl or trifluoromethyl
  • R 5 is methyl or trifluoromethyl
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen or fluorine
  • R 8 is hydrogen, methyl or ethyl
  • A is nitrogen
  • R 1 is a phenyl group of the formula
  • R 9 is hydrogen or fluorine
  • R 10 is fluorine
  • R 11 is hydrogen or fluorine
  • R 2 is hydrogen
  • R 4 is methyl
  • R 5 is methyl or trifluoromethyl
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen or fluorine
  • R 8 is hydrogen or methyl
  • N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts are examples of N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • A is nitrogen or carbon, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • A is carbon, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • A is nitrogen, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 1 is a phenyl group of the formula
  • R 9 is hydrogen or fluorine
  • R 10 is fluorine
  • R 11 is hydrogen or fluorine
  • N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts are examples of N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 1 is a phenyl group of the formula
  • R 9 is hydrogen or fluorine
  • R 10 is fluorine
  • R 11 is hydrogen or fluorine
  • R 1 is 3-fluoropyridin-2-yl
  • N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts are examples of N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts are examples of N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 4 is methyl, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 5 is methyl or trifluoromethyl, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 5 is methyl, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 7 is hydrogen, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 7 is fluorine, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 8 is hydrogen or methyl, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • R 8 is hydrogen, and their N-oxides, salts, solvates, salts of N-oxides and solvates of N-oxides and salts.
  • radicals which are mentioned as being preferred, particularly preferred and very particularly preferred apply both to the compounds of the formula (I) and, correspondingly, to all intermediates.
  • the invention further provides a process for the preparation of the compounds of the formula (I) according to the invention which comprises reacting a compound of the formula (II)
  • R 1 , R 6 , R 7 and R 8 each have the abovementioned meanings, in an inert solvent, if appropriate in the presence of a suitable base, with a compound of the formula (III)
  • T 1 is (C 1 -C 4 ) -alkyl, to give a compound of the formula (IV)
  • R 2 and R 3 have each been as defined above, and the resulting compounds of formula (I) optionally with the corresponding (i) solvents and / or (ii) bases or acids in their solvates, salts and / or solvates of the salts transferred.
  • Inert solvents for process step (II) + (III) - (IV) are, for example, alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol or tert-butanol, ethers such as diethyl ether, dioxane, dimethoxyethane, tetrahydrofuran, glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether, hydrocarbons such as benzene, xylene, toluene, hexane, cyclohexane or petroleum fractions, or other solvents such as dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), / V, / V'-dimethyl- propyleneurea (DMPU), / V-methylpyrrolidone (NMP), pyridine, acetonitrile, sulfolane or even water. It is likewise possible to use mixtures of the solvents
  • Suitable bases for process step (II) + ( ⁇ ) - (IV) are alkali metal hydroxides such as lithium, sodium or potassium hydroxide, alkali metal carbonates such as lithium, sodium, potassium or cesium carbonate, alkali hydrogen carbonates such as sodium or potassium bicarbonate, Alkali alcoholates such as sodium or potassium methoxide, sodium or potassium ethoxide or potassium tert-butoxide, or organic amines such as triethylamine, diisopropylethylamine, pyridine, l, 8-diazabicyclo [5.4.0] undec-7-ene (DBU) or l, 5-diazabicyclo [4.3.0] non-5-ene (DBN). Preference is given to potassium tert-butoxide or sodium methoxide.
  • alkali metal hydroxides such as lithium, sodium or potassium hydroxide
  • alkali metal carbonates such as lithium, sodium, potassium or cesium carbonate
  • alkali hydrogen carbonates such as sodium
  • reaction ( ⁇ ) + (III) - (IV) is generally carried out in a temperature range from + 20 ° C to + 150 ° C, preferably at + 75 ° C to + 100 ° C, optionally in a microwave.
  • the reaction may be carried out at normal, elevated or reduced pressure (e.g., from 0.5 to 5 bar). Generally, one works at normal pressure.
  • suitable halogen sources in reaction (IV) - (V) are diiodomethane, a mixture of cesium iodide, iodine and copper (I) iodide or copper (II) bromide.
  • the process step (IV) - (V) is carried out in the case of diiodomethane as a halogen source with a molar ratio of 5 to 30 moles of isopentyl nitrite and 5 to 30 moles of the iodine equivalent based on 1 mole of the compound of formula (IV).
  • the process step (IV) - (V) is carried out with or without solvent.
  • Suitable solvents are all organic solvents which are inert under the reaction conditions. Preferred solvent is dioxane.
  • the reaction (IV) - (V) is generally carried out in a temperature range of + 20 ° C to + 100 ° C, preferably in the range of + 50 ° C to + 100 ° C, optionally in a microwave.
  • the reaction may be carried out at normal, elevated or reduced pressure (e.g., in Be
  • Inert solvents for process step (V) + (VI) - (I) are, for example, ethers, such as diethyl ether, dioxane, dimethoxyethane, tetrahydrofuran, glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether, hydrocarbons, such as benzene, xylene, toluene, hexane, cyclohexane or petroleum fractions, or others Solvents such as dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), N, N'-dimethylpropylurea (DMPU), / V-methylpyrrolidone (NMP), pyridine, acetonitrile or sulfolane.
  • ethers such as diethyl ether, dioxane, dimethoxyethane, tetrahydrofuran, glycol dimethyl ether or diethylene glycol dimethyl ether
  • hydrocarbons such as benzen
  • reaction (V) + (VI) -> (I) is generally carried out in a temperature range of + 20 ° C to + 200 ° C, preferably at + 100 ° C to + 200 ° C, preferably in a microwave.
  • the reaction can be carried out at normal, elevated or at reduced pressure (for example from 0.5 to 5 bar).
  • the compound of the formula (VII) is known from the literature (see, for example, Journal of Fluorine Chemistry, 1991, vol. 51, # 3, pp. 323-334).
  • the compounds of the formula (II) are known from the literature (see, for example, WO 03/095451, Example 6A, WO2013 / 104703, Example 52A, WO2013 / 030288, Example 54A) or can be prepared as in the synthesis scheme below (Scheme 3).
  • the compounds of the invention act as potent stimulators of soluble guanylate cyclase, have valuable pharmacological properties, and have an improved therapeutic profile, such as in their in vivo properties and / or their pharmacokinetic behavior and / or metabolic profile. It is therefore suitable for the treatment and / or prophylaxis of diseases in humans and animals.
  • the compounds of the invention cause vasorelaxation and inhibition of platelet aggregation and lead to a reduction in blood pressure and to an increase in coronary blood flow. These effects are mediated via direct stimulation of soluble guanylate cyclase and intracellular cGMP increase.
  • the compound according to the invention enhances the action of substances which increase cGMP levels, such as endothelium-derived relaxing factor (EDRF), NO donors, protoporphyrin IX, arachidonic acid or phenylhydrazine derivatives.
  • EDRF endothelium-derived relaxing factor
  • NO donors NO donors
  • protoporphyrin IX protoporphyrin IX
  • arachidonic acid or phenylhydrazine derivatives arachidonic acid or phenylhydrazine derivatives.
  • the compounds according to the invention are suitable for the treatment and / or prophylaxis of cardiovascular, pulmonary, thromboembolic and fibrotic disorders.
  • the compounds according to the invention can therefore be used in medicaments for the treatment and / or prophylaxis of cardiovascular diseases such as hypertension, resistant hypertension, acute and chronic heart failure, coronary heart disease, stable and unstable angina pectoris, peripheral and cardiac vascular diseases, arrhythmias, atrial arrhythmias and ventricular disorders such as atrio-ventricular blockades grade ⁇ - ⁇ (AB block I-III), supraventricular tachyarrhythmia, atrial fibrillation, atrial flutter, ventricular fibrillation, ventricular flutter, ventricular tachyarrhythmia, Torsade de pointes tachycardia, atrial and ventricular extrasystoles, AV junctional extrasystoles, sick sinus syndrome, syncope, AV nodal reentrant tachycardia, Wolff-Parkinson-White syndrome, acute coronary syndrome (ACS), autoimmune heart disease (pericarditis) , Endocarditis, valvolitis, a
  • cardiac failure includes both acute and chronic manifestations of cardiac insufficiency, as well as more specific or related forms of disease such as acute decompensated heart failure, right heart failure, left heart failure, global insufficiency, ischemic cardiomyopathy, dilated cardiomyopathy, hypertrophic cardiomyopathy, idiopathic cardiomyopathy, congenital heart defects.
  • Heart failure in heart valve defects mitral valve stenosis, mitral valve insufficiency, aortic valve stenosis, aortic valve insufficiency, tricuspid stenosis, tricuspid insufficiency, pulmonary valve stenosis, pulmonary valvular insufficiency, combined heart valve defects, myocarditis, chronic myocarditis, acute myocarditis, viral myocarditis, diabetic cardiac insufficiency, alcoholic cardiomyopathy, cardiac storage disorders, Diastolic heart failure as well as systolic heart failure and acute phases the worsening of an existing chronic heart failure.
  • the compound of the invention may also be used for the treatment and / or prophylaxis of arteriosclerosis, lipid metabolism disorders, hypolipoproteinemias, dyslipidemias, hypertriglyceridemias, hyperlipidemias, hypercholesterolemias, abetelipoproteinemia, sitosterolemia, xanthomatosis, Tangier's disease, obesity (obesity) and combined hyperlipidemias and the metabolic syndrome.
  • the compounds of the invention may be used for the treatment and / or prophylaxis of primary and secondary Raynaud's phenomenon, microcirculatory disorders, claudication, peripheral and autonomic neuropathies, diabetic microangiopathies, diabetic retinopathy, diabetic ulcers on the extremities, gangrenous, CREST syndrome, erythematosis, onycho - mycosis, rheumatic diseases and to promote wound healing.
  • the compounds according to the invention are suitable for the treatment of urological diseases such as benign prostatic syndrome (BPS), benign prostatic hyperplasia (BPH), benign prostate enlargement (BPE), bladder emptying disorder (BOO), lower urinary tract syndromes (LUTS, including Feiine's urological syndrome ( FUS)), diseases of the urogenital system including neurogenic overactive bladder (OAB) and (IC), incontinence (UI) such as mixed, urge, stress, or overflow incontinence (MUI, UUI, SUI, OUI), Pelvic pain, benign and malignant diseases of the organs of the male and female genitourinary system.
  • BPS benign prostatic syndrome
  • BPH benign prostatic hyperplasia
  • BPE benign prostate enlargement
  • BOO bladder emptying disorder
  • LUTS lower urinary tract syndromes
  • FUS lower urinary tract syndromes
  • UI incontinence
  • MUI mixed, urge, stress, or overflow incontinence
  • UUI UUI
  • kidney diseases in particular of acute and chronic renal insufficiency, as well as of acute and chronic renal failure.
  • renal insufficiency includes both acute and chronic manifestations of renal insufficiency, as well as underlying or related renal diseases such as renal hypoperfusion, intradialytic hypotension, obstructive uropathy, glomerulopathies, glomerulonephritis, acute glomerulonephritis, glomerulosclerosis, tubulo-interstitial disorders, nephropathic disorders such as primary and congenital kidney disease, nephritis, immunological kidney diseases such as renal transplant rejection, immune complex-induced kidney disease, nephropathy induced by toxic substances, contrast agent-induced nephropathy, diabetic and non-diabetic nephropathy, pyelonephritis, renal cysts, nephrosclerosis, hyperten
  • the present invention also encompasses the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prophylaxis of sequelae of renal insufficiency, such as pulmonary edema, cardiac insufficiency, uremia, anemia, electrolyte disorders (eg hyperkalemia, hyponatremia) and disorders in bone and carbohydrate metabolism.
  • sequelae of renal insufficiency such as pulmonary edema, cardiac insufficiency, uremia, anemia, electrolyte disorders (eg hyperkalemia, hyponatremia) and disorders in bone and carbohydrate metabolism.
  • the compounds according to the invention are also suitable for the treatment and / or prophylaxis of asthmatic diseases, pulmonary arterial hypertension (PAH) and other forms of pulmonary hypertension (PH), including left heart disease, HIV, sickle cell anemia, thromboembolism (CTEPH), sarcoidosis, COPD or Pulmonary fibrosis-associated pulmonary hypertension, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), acute respiratory syndrome (ARDS), acute lung injury (ALI), alpha-1-trypsin deficiency (AATD), pulmonary fibrosis, pulmonary emphysema (ex cigarette smoke-induced pulmonary emphysema) and cystic fibrosis (CF).
  • PAH pulmonary arterial hypertension
  • PH pulmonary hypertension
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • ARDS acute respiratory syndrome
  • ALI acute lung injury
  • AATD alpha-1-trypsin deficiency
  • CF cystic fibrosis
  • the compounds described in the present invention are also agents for controlling diseases in the central nervous system, which are characterized by disorders of the NO / cGMP system.
  • they are suitable for improving the perception, concentration performance, learning performance or memory performance after cognitive disorders such as occur in situations / diseases / syndromes such as mild cognitive impairment, age-associated learning and memory disorders, age-associated memory loss, vascular dementia, cranial brain -Trauma, stroke, post-stroke dementia, post-traumatic traumatic brain injury, generalized concentration disorder, difficulty concentrating in children with learning and memory problems, Alzheimer's disease, dementia with Lewy bodies , Dementia with degeneration of the frontal lobes including Pick's syndrome, Parkinson's disease, progressive nuclear palsy, dementia with corticobasal degeneration, amyolateral sclerosis (ALS), Huntington's disease, demyelinization, multiple sclerosis, thalamic degeneration, Creutzfeld-Jacob dementia, HIV dementia, schizophrenia with dementia or Korsakoff's psychosis. They are also
  • the compounds according to the invention are also suitable for regulating cerebral blood flow and are effective agents for combating migraine. They are also suitable for the prophylaxis and control of the consequences of cerebral infarct events (Apoplexia cerebri) such as stroke, cerebral ischaemias and craniocerebral trauma , Likewise, the compounds according to the invention can be used to combat pain and tinnitus.
  • cerebral infarct events Apoplexia cerebri
  • cerebral infarct events such as stroke, cerebral ischaemias and craniocerebral trauma
  • the compounds according to the invention can be used to combat pain and tinnitus.
  • the compounds of the invention have anti-inflammatory action and can therefore be used as anti-inflammatory agents for the treatment and / or prophylaxis of sepsis (SIRS), multiple organ failure (MODS, MOF), inflammatory diseases of the kidney, chronic Inflammatory bowel disease (IBD, Crohn's Disease, UC), pancreatitis, peritonitis, rheumatoid diseases, inflammatory skin diseases as well as inflammatory eye diseases.
  • SIRS sepsis
  • MODS multiple organ failure
  • IBD chronic Inflammatory bowel disease
  • UC pancreatitis
  • peritonitis peritonitis
  • rheumatoid diseases inflammatory skin diseases as well as inflammatory eye diseases.
  • the compounds of the invention can also be used for the treatment and / or prophylaxis of autoimmune diseases.
  • the compounds according to the invention are suitable for the treatment and / or prophylaxis of fibrotic disorders of the internal organs such as, for example, the lung, the heart, the kidney, the bone marrow and in particular the liver, as well as dermatological fibroses and fibrotic disorders of the eye.
  • fibrotic disorders includes in particular the following terms: liver fibrosis, cirrhosis, pulmonary fibrosis, endomyocardial fibrosis, nephropathy, glomerulonephritis, interstitial renal fibrosis, fibrotic damage as a result of diabetes, bone marrow fibrosis and similar fibrotic disorders, scleroderma, morphea, keloids, hypertrophic scarring (also after surgical interventions), nevi, diabetic retinopathy, proliferative vitroretinopathy and connective tissue disorders (eg sarcoidosis).
  • the compounds of the invention are useful for controlling postoperative scarring, e.g. as a result of glaucoma surgery.
  • the compounds according to the invention can likewise be used cosmetically for aging and keratinizing skin.
  • the compounds according to the invention are suitable for the treatment and / or prophylaxis of hepatitis, neoplasm, osteoporosis, glaucoma and gastroparesis.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • the present invention further relates to the use of the compounds according to the invention for the treatment and / or prophylaxis of cardiac insufficiency, angina pectoris, hypertension, pulmonary hypertension, ischaemias, vascular disorders, renal insufficiency, thromboembolic disorders, fibrotic disorders, arteriosclerosis, dementia disorders and erectile dysfunction.
  • the present invention furthermore relates to the compounds according to the invention for use in a method for the treatment and / or prophylaxis of cardiac insufficiency, angina pectoris, hypertension, pulmonary hypertension, ischaemias, vascular disorders, renal insufficiency, thromboembolic disorders, fibrotic disorders and atherosclerosis.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the manufacture of a medicament for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • the present invention further relates to the use of the compounds according to the invention for the preparation of a medicament for the treatment and / or prophylaxis of cardiac insufficiency, angina pectoris, hypertension, pulmonary hypertension, ischaemias, vascular disorders, renal insufficiency, thromboembolic disorders, fibrotic disorders, arteriosclerosis, dementia disorders and erectile dysfunction.
  • Another object of the present invention is a method for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular the aforementioned diseases, using an effective amount of at least one of the compounds of the invention.
  • the present invention further provides a method for the treatment and / or prophylaxis of cardiac insufficiency, angina pectoris, hypertension, pulmonary hypertension, ischaemias, vascular diseases, renal insufficiency, thromboembolic disorders, fibrotic diseases and atherosclerosis, using an effective amount of at least one of the compounds according to the invention ,
  • the compounds of the invention may be used alone or as needed in combination with other agents.
  • Another object of the present invention are pharmaceutical compositions containing at least one of the compounds of the invention and one or more other active ingredients, in particular for the treatment and / or prophylaxis of the aforementioned diseases.
  • suitable combination active ingredients may be mentioned by way of example and preferably:
  • organic nitrates and NO donors such as sodium nitroprusside, nitroglycerin, isosorbide mononitrate, isosorbide dinitrate, molsidomine or SIN-1, and inhaled NO;
  • cGMP cyclic guanosine monophosphate
  • PDE phosphodiesterases
  • Inhibitors such as sildenafil, vardenafil and tadalafil;
  • Antithrombotic agents by way of example and preferably from the group of platelet aggregation inhibitors, anticoagulants or profibrinolytic substances;
  • Antihypertensive agents by way of example and preferably from the group of calcium antagonists, angiotensin AII antagonists, ACE inhibitors, endothelin antagonists, renin inhibitors, alpha-receptor blockers, beta-receptor blockers, mineralocorticoid receptor Antagonists and diuretics; and or Lipid metabolism-altering agents, by way of example and preferably from the group of thyroid receptor agonists, cholesterol synthesis inhibitors such as by way of example and preferably HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors, ACAT inhibitors, CETP inhibitors, MTP inhibitors, PPAR inhibitors alpha, PPAR gamma and / or PPAR delta agonists, cholesterol absorption inhibitors, lipase inhibitors, polymeric bile acid adsorbers, bile acid reabsorption inhibitors and lipoprotein (a) antagonists.
  • Lipid metabolism-altering agents by way of example and preferably from the group of thyroid receptor
  • Antithrombotic agents are preferably understood as meaning compounds from the group of platelet aggregation inhibitors, anticoagulants or profibrinolytic substances.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a platelet aggregation inhibitor, such as, by way of example and by way of preference, aspirin, clopidogrel, ticlopidine or dipyridamole.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a thrombin inhibitor, such as, by way of example and by way of preference, ximelagatran, dabigatran, melagatran, bivalirudin or Clexane.
  • a thrombin inhibitor such as, by way of example and by way of preference, ximelagatran, dabigatran, melagatran, bivalirudin or Clexane.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a GPIIb IIIa antagonist, such as, by way of example and by way of preference, tirofiban or abciximab.
  • a GPIIb IIIa antagonist such as, by way of example and by way of preference, tirofiban or abciximab.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a factor Xa inhibitor, such as by way of example and preferably rivaroxaban (BAY 59-7939), edoxaban (DU-176b), apixaban, otamixaban, fidexaban, razaxaban, Fondaparinux, Idraparinux, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 or SSR-128428.
  • a factor Xa inhibitor such as by way of example and preferably rivaroxaban (BAY 59-7939), edoxaban (DU-176b), apixaban, otamixaban, fidexaban, razaxaban, Fondaparinux, Idraparinux, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD
  • the compounds according to the invention are administered in combination with heparin or a low molecular weight (LMW) heparin derivative.
  • LMW low molecular weight
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a vitamin K antagonist, such as by way of example and preferably coumarin.
  • a vitamin K antagonist such as by way of example and preferably coumarin.
  • the antihypertensive agents are preferably compounds from the group of calcium antagonists, angiotensin AII antagonists, ACE inhibitors, endothelin antagonists, Renin inhibitors, alpha-receptors-B-loosened, beta-receptor blockers, mineralocorticoid receptor antagonists and diuretics understood.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a calcium antagonist, such as by way of example and preferably nifedipine, amlodipine, verapamil or diltiazem.
  • a calcium antagonist such as by way of example and preferably nifedipine, amlodipine, verapamil or diltiazem.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an alpha-1-receptor blocker, such as by way of example and preferably prazosin.
  • the compounds according to the invention are used in combination with a beta-receptor blocker such as, by way of example and by way of preference, propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oxprenolol, penbutolol, bupranolol, metipropanol, nadolol, mepindolol, Caroteneol, sotalol, metoprolol, betaxolol, celiprolol, bisoprolol, carteolol, esmolol, labetalol, carvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol or bucindolol.
  • a beta-receptor blocker such as, by way of example and by way of preference, propranolol, atenolol
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an angiotensin all-antagonist, such as by way of example and preferably losartan, candesartan, valsartan, telmisartan or embursatan.
  • an angiotensin all-antagonist such as by way of example and preferably losartan, candesartan, valsartan, telmisartan or embursatan.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an ACE inhibitor such as, by way of example and by way of preference, enalapril, captopril, lisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, quinopril, perindopril or trandopril.
  • an ACE inhibitor such as, by way of example and by way of preference, enalapril, captopril, lisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, quinopril, perindopril or trandopril.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an endothelin antagonist such as, by way of example and by way of preference, bosentan, darusentan, ambrisentan or sitaxsentan.
  • an endothelin antagonist such as, by way of example and by way of preference, bosentan, darusentan, ambrisentan or sitaxsentan.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a renin inhibitor, such as by way of example and preferably aliskiren, SPP-600 or SPP-800.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a mineralocorticoid receptor antagonist, such as by way of example and preferably spironolactone or eplerenone.
  • a mineralocorticoid receptor antagonist such as by way of example and preferably spironolactone or eplerenone.
  • the compounds of the present invention are used in combination with a loop diuretic such as furosemide, torasemide, bumetanide and piretanide with potassium sparing diuretics such as amiloride and triamterene with aldosterone antagonists such as spironolactone, potassium canrenoate and eplerenone and thiazide diuretics such as Hydrochlorothiazide, chlorthalidone, xipamide, and indapamide.
  • lipid metabolizing agents are preferably compounds from the group of CETP inhibitors, thyroid receptor agonists, cholesterol synthesis inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors, the ACAT inhibitors, MTP inhibitors, PPAR-alpha, PPAR gamma and / or PPAR delta agonists, cholesterol absorption inhibitors, polymeric bile acid adsorbers, bile acid reabsorption inhibitors, lipase inhibitors, and lipoprotein (a) antagonists.
  • CETP inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors
  • ACAT inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors
  • MTP inhibitors MTP inhibitors
  • PPAR-alpha PPAR-alpha
  • PPAR gamma and / or PPAR delta agonists cholesterol absorption inhibitors
  • polymeric bile acid adsorbers bil
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a CETP inhibitor, such as by way of example and preferably dalcetrapib, BAY 60-5521, anacetrapib or CETP vaccine (CETi-1).
  • a CETP inhibitor such as by way of example and preferably dalcetrapib, BAY 60-5521, anacetrapib or CETP vaccine (CETi-1).
  • the compounds of the invention are administered in combination with a thyroid receptor agonist such as, by way of example and by way of preference, D-thyroxine, 3,5,3'-triiodothyronine (T3), CGS 23425 or axitirome (CGS 26214).
  • a thyroid receptor agonist such as, by way of example and by way of preference, D-thyroxine, 3,5,3'-triiodothyronine (T3), CGS 23425 or axitirome (CGS 26214).
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an HMG-CoA reductase inhibitor from the class of statins, such as by way of example and preferably lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin, rosuvastatin or pitavastatin.
  • statins such as by way of example and preferably lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin, rosuvastatin or pitavastatin.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a squalene synthesis inhibitor, such as by way of example and preferably BMS-188494 or TAK-475.
  • a squalene synthesis inhibitor such as by way of example and preferably BMS-188494 or TAK-475.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an ACAT inhibitor, such as by way of example and preferably avasimibe, melinamide, pactimibe, eflucimibe or SMP-797.
  • an ACAT inhibitor such as by way of example and preferably avasimibe, melinamide, pactimibe, eflucimibe or SMP-797.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an MTP inhibitor such as, for example and preferably, implitapide, BMS-201038, R-103757 or JTT-130.
  • an MTP inhibitor such as, for example and preferably, implitapide, BMS-201038, R-103757 or JTT-130.
  • the compounds of the invention are administered in combination with a PPAR-gamma agonist such as, by way of example and by way of preference, pioglitazone or rosiglitazone.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a PPAR delta agonist, such as by way of example and preferably GW 501516 or BAY 68-5042.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a cholesterol absorption inhibitor, such as by way of example and preferably ezetimibe, tiqueside or pamaqueside.
  • a lipase inhibitor such as, for example and preferably, orlistat.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a polymeric bile acid adsorbent such as, by way of example and by way of preference, cholestyramine, colestipol, colesolvam, cholesta gel or colestimide.
  • a polymeric bile acid adsorbent such as, by way of example and by way of preference, cholestyramine, colestipol, colesolvam, cholesta gel or colestimide.
  • ASBT IBAT
  • the compounds of the invention are administered in combination with a lipoprotein (a) antagonist such as, by way of example and by way of preference, gemcabene calcium (CI-1027) or nicotinic acid.
  • compositions containing at least one compound of the invention usually together with one or more inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients, and their use for the purposes mentioned above.
  • the compounds according to the invention can act systemically and / or locally.
  • they may be applied in a suitable manner, such as, for example, orally, parenterally, pulmonarily, nasally, sublingually, lingually, buccally, rectally, dermally, transdermally, conjunctivally, otically or as an implant or stent.
  • the compounds according to the invention can be administered in suitable administration forms.
  • the compounds of the invention rapidly and / or modified donating application forms containing the compounds of the invention in crystalline and / or amorphized and / or dissolved form, such.
  • Tablets uncoated or coated tablets, for example with enteric or delayed-release or insoluble coatings which control the release of the compound of the invention
  • Parenteral administration can be accomplished by bypassing a resorption step (e.g., intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinal, or intralumbar) or by resorting to absorption (e.g., intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously, or intraperitoneally).
  • a resorption step e.g., intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinal, or intralumbar
  • absorption e.g., intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously, or intraperitoneally.
  • suitable as application forms i.a. Injection and infusion preparations in the form of solutions, suspensions, emulsions, lyophilisates or sterile powders.
  • Inhalant medicines including powder inhalers, nebulizers
  • nasal drops solutions or sprays
  • lingual, sublingual or buccal tablets films / wafers or capsules
  • suppositories ear or eye preparations
  • vaginal capsules aqueous suspensions (lotions, shake mixtures)
  • lipophilic Suspensions ointments
  • creams transdermal therapeutic systems (eg patches)
  • milk pastes, foams, powdered powders, implants or stents.
  • excipients include, but are not limited to, excipients (e.g., microcrystalline cellulose, lactose, mannitol), solvents (eg, liquid polyethylene glycols), emulsifiers and dispersing or wetting agents (e.g., sodium dodecylsulfate, polyoxysorbitanoleate), binders (e.g., polyvinylpyrrolidone), synthetic and natural polymers (e.g.
  • excipients e.g., microcrystalline cellulose, lactose, mannitol
  • solvents eg, liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers and dispersing or wetting agents e.g., sodium dodecylsulfate, polyoxysorbitanoleate
  • binders e.g., polyvinylpyrrolidone
  • synthetic and natural polymers e.g.
  • Method 1 Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Column: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 ⁇ 50 x 1 mm; Eluent A: 1: 1 water + 0.25 ml 99% formic acid, eluent B: 1: 1 acetonitrile + 0.25 ml 99% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A 1.2 min 5% A
  • Method 2 Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Column: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 ⁇ 50 x 1 mm; Eluent A: 1: 1 water + 0.25 ml 99% formic acid, eluent B: 1: 1 acetonitrile + 0.25 ml 99% formic acid; Gradient: 0.0 min 95% A- * 6.0 min 5% A -> 7.5 min 5% A Oven: 50 ° C; Flow: 0.35 ml / min; UV detection: 210 400 nm.
  • Method 3 Instrument: Micromass Quattro Premier with Waters UPLC Acquity; Column: Thermo Hypersil GOLD 1.9 ⁇ 50 x 1 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.5 ml of 50% formic acid, eluent B: 1 l of acetonitrile + 0.5 ml of 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 97% A »0.5 min 97% A> 3.2 min 5% A> 4.0 min 5% A Oven: 50 ° C; Flow: 0.3 ml / min; UV detection: 210 nm.
  • Method 4 Instrument MS: Waters (Micromass) Quattro Micro; Instrument HPLC: Agilent 1100 series; Column: YMC-Triart C18 3 ⁇ 50 x 3 mm; Eluent A: 1 liter of water + 0.01 mol Ammonium carbonate, eluent B: 1: 1 acetonitrile; Gradient: 0.0 min 100% A-> 2.75 min 5% A-> 4.5 min 5% A; Oven: 40 ° C; Flow: 1.25 ml / min; UV detection: 210 nm.
  • Method 5 Instrument MS: Waters (Micromass) QM; Instrument HPLC: Agilent 1 100 series; Column: Agient ZORBAX Extend-C18 3.0x50mm 3.5-micron; Eluent A: 1 l of water + 0.01 mol of ammonium carbonate, eluent R: 1 l of acetonitrile; Gradient: 0.0 min 98% A -> 0.2 min 98% A> 3.0 min 5% ⁇ 4.5 min 5% A; Oven: 40 ° C; Flow: 1.75 ml / min; UV detection: 210 nm.
  • Method 7 Instrument: Agilent MS Quad 6150; HPLC: Agilent 1290; Column: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 ⁇ 50 x 2.1 mm; Eluent A: 1 l of water + 0.25 ml of 99% formic acid, eluent B: 1 l of acetonitrile + 0.25 ml of 99% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A -> 0.3 min 90% A -> 1.7 min 5% A -> 3.0 min 5% A Furnace: 50 ° C; Flow: 1.20 ml / min; UV detection: 205 - 305 nm.
  • Method 8 Instrument: Thermo Scientific DSQII, Thermo Scientific Trace GC Ultra; Column: Restek RTX-35MS, 15 m x 200 ⁇ x 0.33 ⁇ ; constant flow with helium: 1.20 ml / min; Oven: 60 ° C; Inlet: 220 ° C; Gradient: 60 ° C, 30 ° C / min - »300 ° C (hold for 3.33 min).
  • Instrument MS Waters
  • Instrument HPLC Waters (column Phenomenex Luna 5 ⁇ C18 (2) 100A, AXIA Tech 50 x 21.2 mm, eluent A: water + 0.05% formic acid, eluent B: acetonitrile (ULC) with gradient, flow: 40 ml / min; UV detection: DAD; 210-400 nm).
  • Method 11 Instrument MS: ThermoFisherScientific LTQ-Orbitrap-XL; Device type HPLC: Agilent 1200SL; Column: Agilent, POROSHELL 120, 3 x 150 mm, SB - C18 2.7 ⁇ ; Eluent A: 1 1 water + 0.1% trifluoroacetic acid; Eluent B: 1 liter acetonitrile + 0.1% trifluoroacetic acid; Gradient: 0.0 min 2% B -> 1.5 min 2% B -> 15.5 min 95% B 18.0 min 95% B; Oven: 40 ° C; Flow: 0.75 ml / min; UV detection: 210 nm.
  • the compounds of the invention may be in salt form, for example as trifluoroacetate, formate or ammonium salt, if the Compounds of the invention contain sufficiently basic or acidic functionalities.
  • a salt can be converted into the corresponding free base or acid by various methods known to those skilled in the art.
  • amidines may be present as free compounds or proportionally (depending on the preparation in the presence of acetic acid) as acetate salts or acetate solvates.
  • the secondary amides according to the invention can be present as rotational isomers / isomer mixtures, in particular in NMR investigations.
  • Purity specifications usually refer to corresponding peak integrations in the LC / MS chromatogram, but may additionally have been determined with the help of the--NMR spectrum. If no purity is specified, it is usually a 100% purity according to automatic peak integration in the LC MS chromatogram, or the purity was not explicitly determined.
  • Example 1A the example compounds shown in Table 1A were prepared by reacting 5-fluoro-3-iodo-6-methyl-1H-pyrazolo [3,4-b] pyridine from Example 2A with 1- (bromomethyl) -2 - fluorobenzene, 2- (bromomethyl) -1, 3,4-trifluorobenzene or 2- (chloromethyl) -3-fluoropyridine hydrochloride (1.1 - 1.5 equivalents) and cesium carbonate (1.2 - 2 equivalents) under the reaction conditions described (reaction time: 2 - 72 h, temperature: RT to 60 ° C) were reacted in DMF.
  • Method A The reaction mixture was poured into water and then stirred for about h at room temperature. The resulting solid was filtered off, washed with water and dried under high vacuum.
  • Method B Alternatively, the reaction mixture was added to water and extracted with ethyl acetate. The collected organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was purified by column chromatography on silica gel (eluent: petroleum ether / ethyl acetate or dichloromethane / methanol).
  • Method C Alternatively, the reaction mixture was diluted with acetonitrile and purified by preparative HPLC (RP18 column, eluent: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA or 0.05% formic acid).
  • Example 7A Analogously to Example 7A, the example compounds shown in Table 2A were prepared by reacting the corresponding iodides with copper (I) cyanide (1.1-1.5 equivalents) under the reaction conditions described (reaction time: 1-5 h, temperature: 150 ° C.) DMSO were implemented.
  • Method A The reaction mixture, after cooling, was treated with ethyl acetate and washed three times with a mixture of half-saturated aqueous ammonium chloride solution and aqueous concentrated ammonia solution (3/1). The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered and the solvent removed in vacuo. The crude product was purified by column chromatography (silica gel, mobile phase: cyclohexane / ethyl acetate gradient: or dichloromethane / methanol gradient).
  • Method B Alternatively, the reaction mixture was diluted with acetonitrile and purified by preparative HPLC (RP18 column, eluent: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA or 0.05% formic acid).
  • the reaction mixture was admixed with 204 mg (3.81 mmol) of ammonium chloride and 0.71 ml (12.39 mmol) of acetic acid and stirred under reflux for 7 h.
  • the solvent was removed in vacuo and the residue was stirred with 38 ml of 1 N sodium hydroxide solution for 1 h at room temperature. Subsequently, the precipitate was filtered off and washed with water. 1.0 g of the target compound (90% of theory, purity 90%) was obtained.
  • Example 3A the example compounds shown in Table 3A were prepared by reacting the corresponding nitriles with sodium methoxide (1.0-1.2 equivalents) in methanol followed by ammonium chloride (1.2-1.5 equivalents) and acetic acid (3.5-5 equivalents) Reaction conditions (reaction time after ammonium chloride and acetic acid addition: 5 - 24 h, temperature: reflux) were reacted.
  • the target compounds obtained may optionally be present proportionally as acetate salt or acetate solvate.
  • Table 3A
  • Example 16A The preparation of the compound is described in WO 2013/004785 (Example 14A, pp 69-70).
  • Example 16A The preparation of the compound is described in WO 2013/004785 (Example 14A, pp 69-70).
  • Example 16A The preparation of the compound is described in WO 2013/004785 (Example 14A, pp 69-70).
  • Example 16A The preparation of the compound is described in WO 2013/004785 (Example 14A, pp 69-70).
  • Example 4A the example compounds shown in Table 4A were prepared by reacting the corresponding carboximidamides (amidines) with methyl 3,3-dicyanopivalate (1.1-1.5 equivalents) in tert -butanol [to amidines, which are known as acetate salt or Acetate solvate templates, 0.2 - 1.4 equivalents of potassium tert-butoxide were added] under the reaction conditions described (reaction time: 4 - 24 h) were reacted.
  • Example 23 A 3.00 g (14.70 mmol) of Example 23 A were dissolved in tetrahydrofuran (30 ml) and cooled to 0 ° C. Subsequently, 7.35 ml (22.05 mmol) of methylmagnesium chloride (3 M in THF) were added dropwise so that the temperature did not exceed 5 ° C. After complete addition, stirring was continued for 10 min. The mixture was then treated with 1 N aqueous hydrochloric acid and then extracted with ethyl acetate. The phases were separated and the aqueous phase was extracted twice more with ethyl acetate. The combined organic phases were washed with saturated aqueous sodium chloride solution, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated.
  • Butanol [to amidines, which were present as acetate salt or acetate solvate, 0.2 - 1.4 equivalents of potassium tert-butoxide were added] under the reaction conditions described (reaction time: 0.5 - 24 h) were reacted.
  • the reactions can be carried out in the microwave [0.5-10 h, 100 ° C]
  • Example 30A Analogously to Example 30A, the example compounds shown in Table 6A were prepared by reacting the corresponding anilines with diiodomethane (3-18 equivalents) and iso-pentylnitrite (3-10 equivalents) in dioxane under the reaction conditions described (temperature: 85 ° C; : 2 - 10 h) were implemented. Exemplary work-up of the reaction mixture:
  • Example 7A Analogously to Example 36A, the example compounds shown in Table 7A were prepared by reacting the corresponding anilines with diiodomethane (4-18 equivalents) and iso-pentyl nitrite (4-12 equivalents) in dioxane under the reaction conditions described (temperature: 85 ° C; : 2 - 10 h) were implemented.
  • reaction mixture was concentrated and the residue was chromatographed on silica gel (mobile phase: dichloromethane-methanol gradient). Possibly. a further purification by preparative HPLC was performed [column: Kinetex C18, 5 ⁇ , 100 x 300 mm; Eluent: water / acetonitrile 35/65].
  • reaction mixture was saturated with saturated aqueous sodium chloride solution and extracted six times with ethyl acetate.
  • the combined organic phases were washed once more with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated.
  • the starting compound was stored at -18 ° C. There were obtained 4.16 g (83% of theory, purity 84%) of the title compound.
  • the target compound had a concentration of 1.07 mol / l (133 mg / ml).
  • the mixture was stirred in the microwave at 130 ° C for 3.5 hours.
  • the reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated. 22 mg (12% of theory, purity 92%) of the title compound were obtained.
  • the mixture was stirred in the microwave at 130 ° C for 5 hours.
  • the reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated. 19 mg (10% of theory) of the title compound were obtained.
  • reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated. There was obtained 43 mg (12% of theory, purity 97%) of the title compound.
  • the mixture was stirred for 4.5 hours at 130 ° C in the microwave.
  • the reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated. 57 mg (31% of theory, purity 95%) of the title compound were obtained.
  • Enantiomer A 14 mg (99% purity, 99% ee)
  • Enantiomer B 16 mg (99% purity, 99% ee)
  • the mixture was stirred in the microwave at 130 ° C for 5 hours.
  • the reaction solution was purified directly by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: methanol / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were freed of methanol and extracted several times with a mixture of dichloromethane / methanol (10/1).
  • the combined organic phases were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate solution and sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered and evaporated.
  • the residue was again purified by preparative HPLC (RP18 Pillar. Eluent: methanol / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were concentrated. 37 mg (16% of theory, purity 85%) of the title compound were obtained.
  • Enantiomer A 7 mg (> 99% purity,> 99% ee)
  • Enantiomer B 11 mg (95% purity,> 99% ee)
  • Enantiomer A 18 mg (> 99% purity,> 99% ee)
  • Enantiomer B 19 mg (> 99% purity, ca. 98% ee)
  • the mixture was stirred for 4.5 hours at 130 ° C in the microwave.
  • the reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated.
  • Enantiomer A 14 mg (99% purity, 99% ee)
  • Enantiomer B 15 mg (95% purity, 98% ee)
  • reaction solution was mixed with water / acetonitrile / TFA and purified by preparative HPLC (RP18 column, mobile phase: acetonitrile / water gradient with the addition of 0.1% TFA).
  • the product fractions were evaporated.
  • the resulting residue was taken up in dichloromethane and a little methanol and washed twice with saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
  • the combined aqueous phases were extracted twice with dichloromethane.
  • the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and evaporated. 49 mg (25% of theory, purity about 92%) of the title compound were obtained.
  • Enantiomer A 13 mg (99% purity, 99% ee)
  • Enantiomer B 17 mg (about 92% purity, 97% ee)
  • phenylephrine is added cumulatively to the bath in increasing concentration. After several control cycles, the substance to be examined is added in each subsequent course in increasing dosages and the height of the contraction is compared with the height of the contraction achieved in the last predistortion. This is used to calculate the concentration required to reduce the level of the control value by 50% (IC5o value).
  • the standard application volume is 5 ⁇ , the DMSO content in the bath solution corresponds to 0.1%.
  • PDE 5 preparations are prepared from human platelets by digestion (Microfluidizer®, 800 bar, 3 passages), followed by centrifugation (75,000 g, 60 min, 4 ° C) and ion exchange chromatography of the supernatant on a Mono Q 10/10 column ( linear sodium chloride gradient, eluted with a 0.2-0.3 M solution of sodium chloride in buffer (20 mM Hepes pH 7.2, 2 mM magnesium chloride), fractions having PDE 5 activity are pooled (PDE 5 preparation) and at -80 ° C stored.
  • test substances are resolved to determine their in vitro effect on human PDE 5 in 100% DMSO and serially diluted.
  • Dilution series (1: 3) are typically prepared from 200 ⁇ to 0.091 ⁇ (resulting final concentrations in the assay: 4 ⁇ to 0.0018 ⁇ ). 2 ⁇ each of the diluted substance solutions are added to the wells of microtiter plates (Isoplate-96 / 200W, Perkin Elmer). Subsequently, 50 ⁇ ⁇ a dilution of the PDE 5 preparation described above are added.
  • the dilution of the PDE 5 preparation is chosen such that during the later incubation less than 70% of the substrate is reacted (typical dilution: 1: 100, dilution buffer: 50 mM Tris / hydrochloric acid pH 7.5, 8.3 mM magnesium chloride, 1.7 mM EDTA, 0.2 % BSA).
  • the substrate [8- 3 H] cyclic guanosine 3 ', 5'-monophosphate (1 ⁇ / ⁇ ; Perin Elmer) is diluted 1: 2000 with assay buffer (50 mM Tris / hydrochloric acid pH 7.5, 8.3 mM magnesium chloride, 1.7 mM EDTA) diluted to a concentration of 0.0005 ⁇ / ⁇ .
  • the enzyme reaction is finally started.
  • the test mixtures are incubated for 60 min at room temperature and the reaction is stopped by adding 25 ⁇ l of a suspension of 18 mg / ml Yttrium Scintillation Proximity Beads in water (phosphodiesterase beads for SPA assays, RPNQ 0150, Perkin Elmer).
  • the microtiter plates are sealed with a foil and left for 60 min at room temperature. The plates are then measured for 30 s per well in a Microbeta scintillation counter (Perkin Elmer).
  • IC 50 values are determined on the basis of the plot of the substance concentration versus the percentage PDE 5 inhibition.
  • a commercially available telemetry system from DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA is used for the blood pressure measurement on awake rats described below.
  • the system consists of 3 main components:
  • Physiotel® receivers connected to a data acquisition computer through a multiplexer (DSI Data Exchange Matrix).
  • the telemetry system allows continuous recording of blood pressure heart rate and body movement on awake animals in their habitual habitat.
  • the experimental animals are kept individually in macroion cages type 3 after transmitter implantation. You have free access to standard food and water. The day - night rhythm in the experimental laboratory is changed by room lighting at 6:00 in the morning and at 19:00 in the evening.
  • the TAH PA - C40 telemetry transmitters are surgically implanted into the experimental animals under aseptic conditions at least 14 days before the first trial.
  • the animals so instrumented are repeatedly used after healing of the wound and ingrowth of the implant.
  • the fasting animals are anaesthetized with pentobabital (Nembutal, Sanofi: 50 mg / kg ip) and shaved and disinfected on the ventral side.
  • pentobabital Nembutal, Sanofi: 50 mg / kg ip
  • the system's fluid-filled measuring catheter above the bifurcation is inserted cranially into the descending aorta and with tissue adhesive (VetBonD TM, 3M) attached.
  • the transmitter housing is fixed intraperitoneally to the abdominal wall musculature and the wound is closed in layers.
  • the existing telemetry measuring device is configured for 24 animals. Each trial is registered under a trial number (VYear month day).
  • the instrumented rats living in the plant each have their own receiving antenna (1010 receivers, DSI).
  • the implanted transmitters can be activated externally via a built-in magnetic switch. They will be put on the air during the trial run.
  • the emitted signals can be recorded online by a data acquisition system (Dataquest TM A.R.T. for Windows, DSI) and processed accordingly. The storage of the data takes place in each case in a folder opened for this purpose which carries the test number.
  • the measured value acquisition is repeated computer-controlled in 5-minute intervals.
  • the absolute value of the source data is corrected in the diagram with the currently measured barometric pressure (Ambient Pressure Reference Monitor, APR-1) and stored in individual data. Further technical details can be found in the extensive documentation of the manufacturer (DSI). Unless otherwise stated, the administration of the test substances will take place at 9 o'clock on the day of the experiment. Following the application, the parameters described above are measured for 24 hours.
  • the data is smoothed over a presettable time by means of value determination (15 minutes average) and transferred as a text file to a data medium.
  • value determination 15 minutes average
  • the presorted and compressed measured values are transferred to Excel templates and displayed in tabular form.
  • the filing of the collected data takes place per experiment day in a separate folder that bears the test number. Results and test reports are sorted in folders and sorted by paper. literature
  • a telemetry system from DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA, is used for the blood pressure measurement on conscious dogs described below.
  • the system consists of implantable pressure transmitters, receivers and a data acquisition computer.
  • the telemetry system allows continuous recording of blood pressure and heart rate on awake animals.
  • the telemetry transmitters used are surgically implanted in the experimental animals under aseptic conditions prior to the first trial.
  • the animals so instrumented are repeatedly used after healing of the wound and ingrowth of the implant.
  • the examinations are performed on adult male beagle dogs. Technical details can be found in the documentation of the manufacturer (DSI).
  • a vehicle-treated group of animals is used as a control.
  • hypoxia For measurements under hypoxia conditions, the animals are transferred to a chamber in which there is a hypoxic atmosphere (about 10% oxygen content). This is produced by commercially available hypoxic generators (Hoehenbalance, Cologne, Germany). In the standard procedure, e.g. one and five hours after substance administration, the dogs are transferred to the hypoxia chamber for 30 minutes. Here, the measurement of pressure and heart rate by telemetry takes place about 10 minutes before and after entering the hypoxia chamber, as well as during the stay in the hypoxia chamber. evaluation
  • the pharmacokinetic parameters of the compounds of the invention are determined in male CD-1 mice, male Wister rats, female beagle dogs and female cynomolgus monkeys.
  • Intravenous administration is in mice and rats using a species-specific plasma / DMSO formulation and in dogs and monkeys using a water / PEG400 / ethanol formulation.
  • Oral administration of the solute by gavage is performed in all species based on a water / PEG400 / ethanol formulation. Rats are placed in the right external jugular vein for ease of blood sampling prior to drug administration.
  • the operation is carried out at least one day before the experiment under isoflurane anesthesia and with the administration of an analgesic (atropine / rimadyl (3/1) 0.1 mL s.c.).
  • an analgesic atropine / rimadyl (3/1) 0.1 mL s.c.
  • the blood collection (usually more than 10 times) takes place in a time window, which includes terminal times of at least 24 to a maximum of 72 hours after substance administration.
  • the blood is transferred to heparinized tubes at collection. So then the blood plasma is recovered by centrifugation and optionally stored at -20 ° C until further processing.
  • the pharmacokinetic parameters such as AUC, Cmax , F (bioavailability), ti 2 (terminal half-life), MRI (Mean Residence Time) and CL (clearance) are calculated from the plasma concentration-time profiles determined by means of a validated pharmacokinetic calculation program.
  • the blood / plasma distribution of the substance must be determined in order to adjust the pharmacokinetic parameters accordingly.
  • a defined amount of substance is incubated in heparinized whole blood of the corresponding species for 20 min in a tumble roll mixer.
  • the plasma is recovered by centrifugation at 1000 g.
  • the quotient formation determines the Cssiut / Cpiasma value.
  • CYP cytochrome P450
  • the compounds of the invention were incubated at a concentration of about 0.1-10 ⁇ .
  • stock solutions of the compounds according to the invention with a concentration of 0.01-1 mM in acetonitrile were prepared, and then pipetted with a 1: 100 dilution into the incubation mixture.
  • the liver microsomes and recombinant enzymes were incubated in 50 mM potassium phosphate buffer pH 7.4 with and without NADPH-generating system consisting of 1 mM NADP + , 10 mM glucose-6-phosphate and 1 unit glucose-6-phosphate dehydrogenase at 37 ° C.
  • Primary hepatocytes were also incubated in suspension in Williams E medium also at 37 ° C.
  • the incubation mixtures were stopped with acetonitrile (final concentration about 30%) and the protein was centrifuged off at about 15,000 ⁇ g. The samples thus stopped were either analyzed directly or stored at -20 ° C until analysis.
  • the analysis is carried out by high performance liquid chromatography with ultraviolet and mass spectrometric detection (HPLC-UV-MS / MS).
  • HPLC-UV-MS / MS ultraviolet and mass spectrometric detection
  • the supernatants of the incubation samples are chromatographed with suitable C18-reversed-phase columns and variable eluent mixtures of acetonitrile and 10 mM aqueous ammonium formate solution or 0.05% formic acid.
  • the UV chromatograms in combination with mass spectrometry data serve to identify, structure elucidate and quantitatively estimate the metabolites, and quantitative metabolic decrease of the compound of the invention in the incubation approaches.
  • the permeability of a test substance was determined using the Caco-2 cell line, an established in vitro model for permeability prediction at the gastrointestinal barrier [Artursson, P. and Karlsson, J. (1991). Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells. Biochem. Biophys. 175 (3), 880-885].
  • the Caco-2 cells (ACC No. 169, DSMZ, German Collection of Microorganisms and Cell Cultures, Braunschweig, Germany) were seeded in 24-well plates with use and cultured for 15 to 16 days.
  • the test substance was dissolved in DMSO and washed with Transport buffer (Hanks Buffered Salt Solution, Gibco / Invitrogen, with 19.9 mM glucose and 9.8 mM HEPES) to the final test concentration.
  • Transport buffer Hybrid Buffered Salt Solution, Gibco / Invitrogen, with 19.9 mM glucose and 9.8 mM HEPES.
  • P app AB the solution containing the test substance was added to the apical side of the Caco-2 cell monolayer and transport buffer to the basolateral side.
  • the solution containing the test substance was added to the basolateral side of the Caco-2 cell monolayer and transport buffer to the apical side.
  • MRM Multiple Reaction Monitoring
  • the mixture of compound of the invention, lactose and starch is granulated with a 5% solution (m / m) of the PVP in water.
  • the granules are mixed after drying with the magnesium stearate for 5 minutes.
  • This mixture is compressed with a conventional tablet press (for the tablet format see above).
  • a pressing force of 15 kN is used.
  • Orally administrable suspension :
  • a single dose of 100 mg of the compound of the invention corresponds to 10 ml of oral suspension.
  • the rhodigel is suspended in ethanol, the compound according to the invention is added to the suspension. While stirring, the addition of water. Until the completion of the swelling of Rhodigels is stirred for about 6 h.
  • the compound of the invention is suspended in the mixture of polyethylene glycol and polysorbate with stirring. The stirring is continued until complete dissolution of the compound according to the invention. iv solution:
  • the compound of the present invention is dissolved in a concentration below the saturation solubility in a physiologically acceptable solvent (e.g., isotonic sodium chloride solution, glucose solution 5%, and / or PEG 400 solution 30%).
  • a physiologically acceptable solvent e.g., isotonic sodium chloride solution, glucose solution 5%, and / or PEG 400 solution 30%.
  • the solution is sterile filtered and filled into sterile and pyrogen-free injection containers.

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Abstract

Die vorliegende Anmeldung betrifft neue Amino-substituierte annellierte Pyrimidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung allein oder in Kombinationen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herz-Kreislauf-Erkrankungen.

Description

Amino-substituierte annellierte Pyrimidine und ihre Verwendung
Die vorliegende Anmeldung betrifft neue Amino-substituierte annellierte Pyrimidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung allein oder in Kombinationen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behand- lung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herz-Kreislauf-Erkrankungen.
Eines der wichtigsten zellulären Übertragungssysteme in Säugerzellen ist das cyclische Guanosin- monophosphat (cGMP). Zusammen mit Stickstoffmonoxid (NO), das aus dem Endothel freigesetzt wird und hormonelle und mechanische Signale überträgt, bildet es das NO/cGMP-System. Die Guanylatcyclasen katalysieren die Biosynthese von cGMP aus Guanosintriphosphat (GTP). Die bisher bekannten Vertreter dieser Familie lassen sich sowohl nach strukturellen Merkmalen als auch nach der Art der Liganden in zwei Gruppen aufteilen: Die partikulären, durch natriuretische Peptide stimulierbaren Guanylatcyclasen und die löslichen, durch NO stimulierbaren Guanylatcyclasen. Die löslichen Guanylatcyclasen bestehen aus zwei Untereinheiten und enthalten höchstwahrscheinlich ein Häm pro Heterodimer, das ein Teil des regulatorischen Zentrums ist. Dieses hat eine zentrale Bedeutung für den Aktivierungsmechanismus. NO kann an das Eisenatom des Häms binden und so die Aktivität des Enzyms deutlich erhöhen. Hämfreie Präparationen lassen sich hingegen nicht durch NO stimulieren. Auch Kohlenmonoxid (CO) ist in der Lage, an das Eisen-Zentralatom des Häms zu binden, wobei die Stimulierung durch CO deutlich geringer ist als die durch NO. Durch die Bildung von cGMP und der daraus resultierenden Regulation von Phosphodiesterasen, Ionenkanälen und Proteinkinasen spielt die Guanylatcyclase eine entscheidende Rolle bei unterschiedlichen physiologischen Prozessen, insbesondere bei der Relaxation und Proliferation glatter Muskelzellen, der Plättchenaggregation und -adhäsion, der neuronalen Signalübertragung sowie bei Erkrankungen, welche auf einer Störung der vorstehend genannten Vorgänge beruhen. Unter patho- physiologischen Bedingungen kann das NO/cGMP-System supprimiert sein, was zum Beispiel zu Bluthochdruck, einer Plättchenaktivierung, einer vermehrten Zellproliferation, endothelialer Dysfunktion, Arteriosklerose, Angina pectoris, Herzinsuffizienz, Myokardinfarkt, Thrombosen, Schlaganfall und sexueller Dysfunktion führen kann.
Eine auf die Beeinflussung des cGMP-Signalweges in Organismen abzielende NO-unabhängige Behandlungsmöglichkeit für derartige Erkrankungen ist aufgrund der zu erwartenden hohen Effizienz und geringen Nebenwirkungen ein vielversprechender Ansatz.
Zur therapeutischen Stimulation der löslichen Guanylatcyclase wurden bisher ausschließlich Verbindungen wie organische Nitrate verwendet, deren Wirkung auf NO beruht. Dieses wird durch Biokonversion gebildet und aktiviert die lösliche Guanylatcyclase durch Angriff am Eisen-Zentralatom des Häms. Neben den Nebenwirkungen gehört die Toleranzentwicklung zu den entscheidenden Nachteilen dieser Behandlungsweise.
Vor einigen Jahren wurden einige Substanzen beschrieben, die die lösliche Guanylatcyclase direkt, d.h. ohne vorherige Freisetzung von NO stimulieren, wie beispielsweise 3-(5'-Hydroxymefhyl-2'- furyl)-l-benzylindazol [YC-1; Wu et al., Blood 84 (1994), 4226; Mülsch et al., Brit. J. Pharmacol. 120 (1997), 681]. Zu den neueren Stimulatoren der löslichen Guanylatzyklase gehören u.a. BAY 41- 2272, BAY 41-8543 und Riociguat (BAY 63-2521) (siehe z.B. Stasch J.-P. et al., Nat. Rev. Drug Disc. 2006; 5: 755-768; Stasch J.-P. et al., ChemMedChem 2009; 4: 853-865. Stasch J.-P. et al., Circulation 2011; 123: 2263-2273). Interessanterweise zeigen einige dieser sGC Stimulatoren, wie beispielsweise YC-1 oder BAY 41-2272 zusätzlich zur direkten Guanylatzyklasestimulation auch eine PDE-5-inhibibitorische Wirkung. Um den cGMP-pathway zu maximieren, ist es pharmakologisch wünschenswert, die Synthese von cGMP zu stimulieren und gleichzeitig den Abbau über PDE-5 zu inhibieren. Dieses duale Prinzip ist pharmakologisch besonders vorteilhaft (z.B. Oudout et al., Eur. Urol. 2011; 60, 1020-1026; Albersen et al., J Sex Med. 2013; 10, 1268-1277). Das duale Prinzip wird im Sinne der vorliegenden Erfindung erfüllt, wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen eine Wirkung an rekombinanter Guanylatcyclase-Reporterzellinien gemäß der Untersuchung unter B-2 als minimal effective concentration (MEC) von < 3 μΜ zeigen und eine Inhibition der humanen Phosphodiesterase 5 (PDE5) gemäß der Untersuchung unter B-3 als IC50 < 100 nM zeigen. Phosphodiesterase-5 (PDE5) ist der Name für eines der Enzyme, die die Phosphorsäureesterbindung in cGMP spalten, wobei 5'-Guanosinmonophosphat (5'-GMP) entsteht. Beim Menschen kommt die Phosphodiesterase-5 vorwiegend in der glatten Muskulatur des Penisschwellkörpers (Corpus cavernosum penis) und der Lungenarterien vor. Blockierung des cGMP- Abbaus durch Hemmung von PDE5 (mit beispielsweise Sildenafil, Vardenafil oder Tadalafil) führt zu vermehrten Signalen der Entspannungs-Signalwege und speziell zu erhöhter Blutzufuhr in den Penisschwellkörper und Druckerniedrigung in den Blutgefäßen der Lunge. Sie werden zur Behandlung der erektilen Dysfunktion und der pulmonalen arteriellen Hypertonie eingesetzt. Neben PDE5 gibt es weitere, cGMP spaltende Phosphodiesterasen (Stasch et al. Circulation 2011; 123, 2263-2273).
Als Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase werden in WO 00/06568 und WO 00/06569 annellierte Pyrazol-Derivate und in WO 03/095451 Carbamat-substitutierte 3-Pyrimidinyl- Pyrazolopyridine offenbart. 3-Pyrimidinyl-Pyrazolopyridine mit Phenylamid-Substituenten werden in E. M. Becker et al., BMC Pharmacology 1 (13), 2001 beschrieben. WO 2004/009590 beschreibt Pyrazolopyridine mit substituierten 4-Aminopyrimidinen zur Behandlung von ZNS -Erkrankungen. WO 2010/065275 und WO 2011/149921 offenbaren substituierte Pyrrolo- und Dihydropyrido- pyrimidine als sGC Aktivatoren. Als sGC Stimulatoren werden in WO 2012/004259 annellierte Aminopyrimidine und in WO 2012/004258, WO 2012/143510 und WO 2012/152629 annellierte Pyrimidine und Triazine beschrieben. WO 2012/28647 offenbart Pyrazolopyridine mit verschiedenen Azaheterocyclen zur Behandlung kardiovaskulärer Erkrankungen.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung war die Bereitstellung neuer Substanzen, die als Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase sowie als Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase und Phosphodiesterase-5-Inhibitoren (duales Prinzip) wirken und ein gleiches oder verbessertes therapeutisches Profil gegenüber den aus dem Stand der Technik bekannten Verbindungen aufweisen, wie beispielsweise hinsichtlich ihrer in-vivo Eigenschaften, wie beispielsweise ihrem pharmakokinetischem und pharmakodynamischem Verhalten, ihrer Löslichkeit und/oder ihres Metabolismus-Profils und/oder ihrer Dosis-Wirkungsbeziehung.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeichnen sich insbesondere durch eine verbesserte Löslichkeit bei gleichzeitig hoher Zell-Permeabilität aus.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der allgemeinen Formel (I)
Figure imgf000004_0001
in welcher
A für Stickstoff oder Kohlenstoff steht,
R1 für Phenyl, Pyridyl, 3,3,3-Trifluorprop-l-yl, 4,4,4-Trifluorbut-l-yl oder 3,3,4,4,4-Penta- fluorbut-l-yl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe
Fluor, Chlor, (Ci-C -Alkyl, Cyclopropyl oder (Ci-C -Alkoxy substituiert ist,
und
wobei Pyridyl mit 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe Fluor, (Ci-C -Alkyl, Cyclopropyl oder (Ci-C -Alkoxy substituiert ist,
R2 für Wasserstoff oder (Ci-C4)-Alkyl steht,
R3 für (Ci-C6)-Alkyl steht,
wobei (Ci-Ce)-Alkyl mit Amino sowie bis zu fünffach mit Fluor substituiert ist, R4 für (Ci-C4)-Alkyl steht,
wobei (Ci-C4)-Alkyl bis zu fünffach mit Fluor substituiert sein kann,
R5 für (Ci-C4)-Alkyl steht,
wobei (Ci-C4)-Alkyl bis zu fünffach mit Fluor substituiert sein kann,
oder
R4und R5 zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 3- bis 6- gliedrigen Carbocyclus bilden,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff, Chlor, Fluor oder (Ci-C4)-Alkyl steht,
sowie ihre -Oxide, Salze, Solvate, Salze der -Oxide und Solvate der -Oxide und Salze.
Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formeln und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) umfassten, nachfolgend als Ausführungsbeispiele genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.
Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind, jedoch beispielsweise für die Isolierung oder Reinigung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluol- sulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Ameisensäure, Essigsäure, Trifluoressig- säure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Benzoesäure.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kalium- salze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C- Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methyl- morpholin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und N-Methylpiperidin. Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfindungsgemäßen Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungsmittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt. Als Solvate sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung Hydrate bevorzugt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in unterschiedlichen stereoisomeren Formen existieren, d.h. in Gestalt von Konfigurationsisomeren oder gegebenenfalls auch als Konformationsisomere (Enantiomere und/oder Diastereomere, einschließlich solcher bei Atropisomeren). Die vorliegende Erfindung umfasst deshalb die Enantiomere und Diastereo- mere und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/ oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren; vorzugsweise werden hierfür chromatographische Verfahren verwendet, insbesondere die HPLC- Chromatographie an achiraler bzw. chiraler Phase.
Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegende Erfindung sämtliche tautomere Formen.
Die vorliegende Erfindung umfasst auch alle geeigneten isotopischen Varianten der erfindungsgemäßen Verbindungen. Unter einer isotopischen Variante einer erfindungsgemäßen Verbindung wird hierbei eine Verbindung verstanden, in welcher mindestens ein Atom innerhalb der erfindungsgemäßen Verbindung gegen ein anderes Atom der gleichen Ordnungszahl, jedoch mit einer anderen Atommasse als der gewöhnlich oder überwiegend in der Natur vorkommenden Atommasse ausgetauscht ist. Beispiele für Isotope, die in eine erfindungsgemäße Verbindung inkorporiert werden können, sind solche von Wasserstoff, Kohlenstoff, Stickstoff, Sauerstoff, Phosphor, Schwefel, Fluor, Chlor, Brom und Iod, wie 2H (Deuterium), Ή (Tritium), 13C, 14C, 15N, 170, 180, 32P, 33P, 33S, 34S, 35S, 36S, 18F, 36C1, 82Br, 123I, 124I, 129I und 131I. Bestimmte isotopische Varianten einer erfindungsgemäßen Verbindung, wie insbesondere solche, bei denen ein oder mehrere radioaktive Isotope inkorporiert sind, können von Nutzen sein beispielsweise für die Untersuchung des Wirkmechanismus oder der Wirkstoff- Verteilung im Körper; aufgrund der vergleichsweise leichten Herstell- und Detektierbarkeit sind hierfür insbesondere mit 3H- oder 14C-Isotopen markierte Verbindungen geeignet. Darüber hinaus kann der Einbau von Isotopen, wie beispielsweise von Deu- terium, zu bestimmten therapeutischen Vorteilen als Folge einer größeren metabolischen Stabilität der Verbindung führen, wie beispielsweise eine Verlängerung der Halbwertszeit im Körper oder eine Reduktion der erforderlichen Wirkdosis; solche Modifikationen der erfindungsgemäßen Verbindungen können daher gegebenenfalls auch eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung darstellen. Isotopische Varianten der erfindungsgemäßen Verbindungen können nach den dem Fachmann bekannten Verfahren hergestellt werden, so beispielsweise nach den weiter unten beschriebenen Methoden und den bei den Ausführungsbeispielen wiedergegebenen Vorschriften, indem entsprechende isotopische Modifikationen der jeweiligen Reagentien und/oder Ausgangsverbindungen eingesetzt werden.
Außerdem umfasst die vorliegende Erfindung auch Prodrugs der erfindungsgemäßen Verbindungen. Der Begriff "Prodrugs" bezeichnet hierbei Verbindungen, welche selbst biologisch aktiv oder inaktiv sein können, jedoch während ihrer Verweilzeit im Körper zu erfindungsgemäßen Verbindungen umgesetzt werden (beispielsweise metabolisch oder hydrolytisch).
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung: Alkyl steht im Rahmen der Erfindung für einen linearen oder verzweigten Alkylrest mit der jeweils angegebenen Anzahl an Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, iso-Butyl, 1-Methylpropyl, tert.-Butyl, n-Pentyl, iso-Pentyl, 1- Ethylpropyl, 1-Methylbutyl, 2-Methylbutyl, 3-Methylbutyl, n-Hexyl, 1-Methylpentyl, 2- Methylpentyl, 3-Methylpentyl, 4-Methylpentyl, 3,3-Dimethylbutyl, 1-Ethylbutyl, 2-Ethylbutyl, 1,4- Dimethylpentyl, 4,4-Dimethylpentyl und 1,4,4-Trimethylpentyl.
Alkoxy steht im Rahmen der Erfindung für einen linearen oder verzweigten Alkoxyrest 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, n-Butoxy und ieri.-Butoxy.
Cyclo alkyl bzw. Carbocyclus steht in Rahmen der Erfindung für einen monocyclischen, gesättigten Alkylrest mit der jeweils angegebenen Anzahl an Ring-Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und Cycloheptyl.
Halogen schließt im Rahmen der Erfindung Fluor, Chlor, Brom und Iod ein. Bevorzugt sind Chlor oder Fluor.
In den Formeln der Gruppe, für die R1 und R3 stehen können, steht der Endpunkt der Linie, an dem ein Zeichen # bzw. ## steht, nicht für ein Kohlenstoffatom beziehungsweise eine CEL-Gruppe, sondern ist Bestandteil der Bindung zu dem jeweils bezeichneten Atom, an das R1 bzw. R3 gebunden sind.
Wenn Reste in den erfindungsgemäßen Verbindungen substituiert sind, können die Reste, soweit nicht anders spezifiziert, ein- oder mehrfach substituiert sein. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung gilt, dass für alle Reste, die mehrfach auftreten, deren Bedeutung unabhängig voneinander ist. Eine Substitution mit einem oder zwei gleichen oder verschiedenen Substituenten ist bevorzugt. Ganz besonders bevorzugt ist die Substitution mit einem Substituenten. Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Begriff "Behandlung" oder "behandeln" ein Hemmen, Verzögern, Aufhalten, Lindern, Abschwächen, Einschränken, Verringern, Unterdrücken, Zurückdrängen oder Heilen einer Krankheit, eines Leidens, einer Erkrankung, einer Verletzung oder einer gesundheitlichen Störung, der Entfaltung, des Verlaufs oder des Fortschreitens solcher Zustände und/oder der Symptome solcher Zustände. Der Begriff„Therapie" wird hierbei als synonym mit dem Begriff„Behandlung" verstanden.
Die Begriffe„Prävention",„Prophylaxe" oder„Vorbeugung" werden im Rahmen der vorliegenden Erfindung synonym verwendet und bezeichnen das Vermeiden oder Vermindern des Risikos, eine Krankheit, ein Leiden, eine Erkrankung, eine Verletzung oder eine gesundheitliche Störung, eine Entfaltung oder ein Fortschreiten solcher Zustände und/oder die Symptome solcher Zustände zu bekommen, zu erfahren, zu erleiden oder zu haben.
Die Behandlung oder die Prävention einer Krankheit, eines Leidens, einer Erkrankung, einer Verletzung oder einer gesundheitlichen Störung können teilweise oder vollständig erfolgen.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher A für Stickstoff oder Kohlenstoff steht,
R1 für Phenyl oder Pyridyl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe
Fluor und Methyl substituiert ist,
und
wobei Pyridyl mit 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe
Fluor und Methyl substituiert ist,
R2 für Wasserstoff oder Methyl steht,
R3 für
Figure imgf000008_0001
steht,wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
R4 für Methyl oder Ethyl steht,
wobei Methyl und Ethyl bis zu dreifach mit Fluor substituiert sein können,
R5 für Methyl oder Ethyl steht,
wobei Methyl und Ethyl bis zu dreifach mit Fluor substituiert sein können,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht, R8 für Wasserstoff, Chlor, Methyl oder Ethyl steht,
sowie ihre /V-Oxide, Salze, Solvate, Salze der /V-Oxide und Solvate der /V-Oxide und Salze.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher A für Stickstoff steht,
R1 für Phenyl oder Pyridyl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten Fluor substituiert ist,
und
wobei Pyridyl mit Fluor substituiert ist,
R2 für Wasserstoff steht,
R3 für
Figure imgf000009_0001
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
R4 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R5 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff, Methyl oder Ethyl steht,
sowie ihre TV-Oxide, Salze, Solvate, Salze der TV-Oxide und Solvate der TV-Oxide und Salze. Besonders bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für Stickstoff steht,
R1 für eine Phenyl-Gruppe der Formel
Figure imgf000009_0002
steht, wobei
# für die Anknüpfstelle an die Methylengruppe steht, und R9 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R10 für Fluor steht,
R11 für Wasserstoff oder Fluor steht,
oder
für 3-Fluorpyridin-2-yl steht,
R2 für Wasserstoff steht,
R3 für
Figure imgf000010_0001
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
R4 für Methyl steht,
R5 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff oder Methyl steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für Stickstoff oder Kohlenstoff steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für Kohlenstoff steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Besonderns bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
A für Stickstoff steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze. Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R1 für eine Phenyl-Gruppe der Formel
Figure imgf000011_0001
steht, wobei
# für die Anknüpfstelle an die Methylengruppe steht, und
R9 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R10 für Fluor steht,
R11 für Wasserstoff oder Fluor steht,
oder
für 3-Fluorpyridin-2-yl steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R1 für eine Phenyl-Gruppe der Formel
Figure imgf000011_0002
steht, wobei
# für die Anknüpfstelle an die Methylengruppe steht, und
R9 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R10 für Fluor steht,
R11 für Wasserstoff oder Fluor steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze. Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), welcher
R1 für 3-Fluorpyridin-2-yl steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), welcher
R3 für
Figure imgf000012_0001
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R4 für Methyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R5 für Methyl oder Trifluormethyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze. Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R5 für Methyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R5 für Trifluormethyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R7 für Wasserstoff oder Fluor steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R7 für Wasserstoff steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R7 für Fluor steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze. Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R8 für Wasserstoff oder Methyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher
R8 für Wasserstoff steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Bevorzugt sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung auch Verbindungen der Formel (I), in welcher R8 für Methyl steht, sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
Die in den jeweiligen Kombinationen bzw. bevorzugten Kombinationen von Resten im Einzelnen angegebenen Reste-Definitionen werden unabhängig von den jeweiligen angegebenen Kombinationen der Reste beliebig auch durch Reste-Definitionen anderer Kombinationen ersetzt.
Ganz besonders bevorzugt sind Kombinationen von zwei oder mehreren der oben genannten Vorzugsbereiche.
Die als bevorzugt, besonders bevorzugt und ganz besonders bevorzugt genannten Restedefinitionen gelten sowohl für die Verbindungen der Formel (I) als auch in entsprechender Weise für alle Zwischenprodukte.
Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel (II)
Figure imgf000014_0001
in welcher R1, R6, R7 und R8 jeweils die oben genannten Bedeutungen haben, in einem inerten Lösungsmittel gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base mit einer Verbindung der Formel (III)
Figure imgf000014_0002
(III),
in welcher R4 und R5 jeweils die oben genannten Bedeutungen haben und
T1 für (Ci-C4)-Alkyl steht, zu einer Verbindung der Formel (IV)
Figure imgf000015_0001
in welcher R1, R4, R5, R6, R7 und R8 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, umsetzt, diese dann mit iso-Pentylnitri in eine Verbindung der Formel (V)
Figure imgf000015_0002
in welcher R1, R4, R5, R6, R7 und R8 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben überführt, und diese im Anschluss in einen inerten Lösungsmittel mit einer Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000015_0003
in welcher
R2 und R3 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben überführt, und die resultierenden Verbindungen der Formel (I) gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen oder Säuren in ihre Solvate, Salze und/oder Solvate der Salze überführt.
Inerte Lösungsmittel für den Verfahrensschritt (Π) + (III)— (IV) sind beispielsweise Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, Isopropanol, n-Butanol oder tert.-Butanol, Ether wie Diethylether, Dioxan, Dimethoxyethan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Xylol, Toluol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, oder andere Lösungsmittel wie Dimethylformamid (DMF), Dimethylsulfoxid (DMSO), /V,/V'-Dimethyl- propylenharnstoff (DMPU), /V-Methylpyrrolidon (NMP), Pyridin, Acetonitril, Sulfolan oder auch Wasser. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel einzusetzen. Bevorzugt ist tert.-Butanol, Methanol oder Ethanol.
Geeignete Basen für den Verfahrensschritt (II) + (ΙΠ) — (IV) sind Alkalihydroxide wie beispielsweise Lithium-, Natrium- oder Kaliumhydroxid, Alkalicarbonate wie Lithium-, Natrium-, Kalium- oder Cäsiumcarbonat, Alkalihydrogencarbonate wie Natrium- oder Kaliumhydrogen- carbonat, Alkalialkoholate wie Natrium- oder Kaliummethanolat, Natrium- oder Kaliumethanolat oder Kalium-tert.-butylat, oder organische Amine wie Triethylamin, Diisopropylethylamin, Pyridin, l,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en (DBU) oder l,5-Diazabicyclo[4.3.0]non-5-en (DBN). Bevorzugt ist Kalium-tert.-butylat oder Natriummethanolat.
Die Reaktion (Π) + (III)— (IV) wird im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von +20°C bis +150°C, bevorzugt bei +75°C bis +100°C, gegebenenfalls in einer Mikrowelle, durchgeführt. Die Umsetzung kann bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck erfolgen (z.B. von 0.5 bis 5 bar). Im Allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck. Als Halogen-Quelle bei der Umsetzung (IV)— (V) eignen sich beispielsweise Diiodmethan, eine Mischung aus Cäsiumiodid, Iod und Kupfer-(I)-iodid oder Kupfer -(Il)-bromid.
Der Verfahrensschritt (IV)— (V) erfolgt im Fall von Diiodmethan als Halogenquelle mit einem Molverhältnis von 5 bis 30 Mol Isopentylnitrit und 5 bis 30 Mol des Iod-Äquivalents bezogen auf 1 Mol der Verbindung der Formel (IV). Der Verfahrensschritt (IV)— (V) erfolgt mit oder ohne Lösungsmittel. Als Lösungsmittel eignen sich alle organischen Lösungsmittel, die unter den Reaktionsbedingungen inert sind. Bevorzugtes Lösungsmittel ist Dioxan.
Die Reaktion (IV) — (V) erfolgt im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von +20°C bis +100°C, bevorzugt im Bereich von +50°C bis +100°C, gegebenenfalls in einer Mikrowelle. Die Umsetzung kann bei normalem, erhöhtem oder erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. im Be
Inerte Lösungsmittel für den Verfahrensschritt (V) + (VI)— (I) sind beispielsweise Ether wie Diethylether, Dioxan, Dimethoxyethan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykol- dimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Xylol, Toluol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, oder andere Lösungsmittel wie Dimethylformamid (DMF), Dimethylsulfoxid (DMSO), N,N'-Dimefhylpropylenharnstoff (DMPU), /V-Methylpyrrolidon (NMP), Pyridin, Acetonitril oder Sulfolan. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel einzusetzen. Bevorzugt ist NMP oder DMSO. Die Reaktion (V) + (VI)— > (I) wird im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von +20°C bis +200°C, bevorzugt bei +100°C bis +200°C, bevorzugt in einer Mikrowelle, durchgeführt. Die Umsetzung kann bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck erfolgen (z.B. von 0.5 bis 5 bar).
Das beschriebene Herstellverfahren kann durch die folgenden Syntheseschemata (Schema 1 und Schema 2) beispielhaft verdeutlicht werden:
Schema 1
Figure imgf000017_0001
[a): t-BuOH, evtl. t-BuOK, Rückfluss; b): Diiodmethan, Isopentylnitrit, Dioxan, 85°C]. Schema 2
Figure imgf000017_0002
[a): NMP, 130°C; Mikrowelle].
Die Verbindungen der Formel (III) sind kommerziell erhältlich, literaturbekannt oder können in Analogie zu literaturbekannten Verfahren hergestellt werden, oder können, wenn in Formel (III) R5 für Trifluormethyl und R4 für Methyl steht, durch Umsetzung von einer Verbindung der Formel (VII)
Figure imgf000018_0001
in einem inerten Lösungsmittel mit Methylmagnesiumhalogenid hergestellt werden.
Die Verbindung der Formel (VII) ist literaturbekannt (vgl. z.B. Journal of Fluorine Chemistry, 1991, vol. 51, # 3 S. 323 - 334.). Die Verbindungen der Formel (II) sind literaturbekannt (siehe z.B. WO 03/095451, Beispiel 6A; WO2013/104703, Beispiel 52A; WO2013/030288, Beispiel 54A) oder können wie in dem nachfolgenden Syntheseschema (Schema 3) hergestellt werden.
Schema 3
Figure imgf000018_0002
[a): Hydrazinhydrat, 1,2-Ethandiol; b): iso-Pentylnitrit, Nal, THF; c): Cs2C03, DMF; d): CuCN, DMSO, e): 1. NaOMe, MeOH, 2. NH4C1, Essigsäure]. Die Verbindung der Formel (VIII) ist literaturbekannt [WO 2007/041052] oder kann in Analogie zu literaturbekannten Verfahren [WO2013/004785 und WO 2011/149921] hergestellt werden.
Detaillierte Vorschriften und weitere Literaturangaben befinden sich auch im Experimentellen Teil im Abschnitt zur Herstellung der Ausgangsverbindungen und Intermediate. Weitere erfindungsgemäße Verbindungen können gegebenenfalls auch hergestellt werden durch Umwandlungen von funktionellen Gruppen einzelner Substituenten, insbesondere den unter R3 aufgeführten, ausgehend von den nach obigen Verfahren erhaltenen Verbindungen der Formel (I). Diese Umwandlungen werden nach üblichen, dem Fachmann bekannten Methoden durchgeführt und umfassen beispielsweise Reaktionen wie nukleophile und elektrophile Substitutionen, Oxidationen, Reduktionen, Hydrierungen, Übergangsmetall-katalysierte Kupplungsreaktionen, Eliminierungen, Alkylierung, Aminierung, Veresterung, Esterspaltung, Veretherung, Etherspaltung, Bildung von Carbonamiden, sowie Einführung und Entfernung temporärer Schutzgruppen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen wirken als potente Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase, besitzen wertvolle pharmakologische Eigenschaften, und weist ein verbessertes therapeutisches Profil auf, wie beispielsweise hinsichtlich ihrer in-vivo Eigenschaften und/oder ihres pharmakokinetischen Verhaltens und/oder metabolischen Profils. Sie eignet sich daher zur Behandlung und/ oder Prophylaxe von Erkrankungen bei Menschen und Tieren.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen bewirken eine Gefäßrelaxation und eine Hemmung der Thrombozytenaggregation und führen zu einer Blutdrucksenkung sowie zu einer Steigerung des koronaren Blutflusses. Diese Wirkungen sind über eine direkte Stimulation der löslichen Guanylatcyclase und einen intrazellulären cGMP-Anstieg vermittelt. Außerdem verstärkt die erfindungsgemäße Verbindung die Wirkung von Substanzen, die den cGMP-Spiegel steigern, wie beispielsweise EDRF (endothelium-derived relaxing factor), NO-Donatoren, Protoporphyrin IX, Arachidon- säure oder Phenylhydrazin-Derivate. Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich zur Behandlung und/oder Prophylaxe von kardiovaskulären, pulmonalen, thromboembolischen und fibrotischen Erkrankungen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können daher in Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von kardiovaskulären Erkrankungen wie beispielsweise Bluthochdruck (Hypertonie), resistente Hypertonie, akute und chronische Herzinsuffizienz, koronare Herzerkrankung, stabile und instabile Angina pectoris, periphere und kardiale Gefäßerkrankungen, Arrhythmien, Rhythmusstörungen der Vorhöfe und der Kammern sowie Überleitungsstörungen wie beispielsweise atrio-ventrikuläre Blockaden Grad Ι-ΠΙ (AB-Block I-III), supraventrikuläre Tachyarrhythmie, Vorhofflimmern, Vorhoffflattern, Kammerflimmern, Kammerflattern, ventrikuläre Tachyarrhytmie, Torsade de pointes-Tachykardie, Extrasystolen des Vorhoffs und des Ventrikels, AV-junktionale Extrasystolen, Sick-Sinus Syndrom, Synkopen, AV-Knoten-Reentrytachykardie, Wolff-Parkinson- White-Syndrom, von akutem Koronarsyndrom (ACS), autoimmune Herzerkrankungen (Perikarditis, Endokarditis, Valvolitis, Aortitis, Kardiomyopathien), Schock wie kardiogenem Schock, septischem Schock und anaphylaktischem Schock, Aneurysmen, Boxerkardiomyopathie (premature ventricular contraction (PVC)), zur Behandlung und/oder Prophylaxe von thromboembolischen Erkrankungen und Ischämien wie myokardiale Ischämie, Myokardinfarkt, Hirnschlag, Herzhypertrophie, transistorischen und ischämischen Attacken, Präeklampsie, entzündliche kardiovaskuläre Erkrankungen, Spasmen der Koronararterien und peripherer Arterien, Ödembildung wie beispielsweise pulmonales Ödem, Hirnödem, renales Ödem oder Herzinsuffizienz-bedingtes Ödem, peripheren Durchblutungsstörungen, Reperfusionsschäden, arterielle und venöse Thrombosen, Mikroalbuminurie, Herzmuskelschwäche, endotheliale Dysfunktion, zur Verhinderung von Restenosen wie nach Thrombolysetherapien, percutan-transluminalen Angioplastien (PTA), transluminalen Koronarangioplastien (PTCA), Herztransplantationen und Bypass-Operationen, sowie mikro- und makrovaskuläre Schädigungen (Vasculitis), erhöhte Spiegel von Fibrinogen und von LDL geringer Dichte sowie erhöhte Konzentrationen von Plasminogenaktivator-Inhibitor 1 (PAI-1), sowie zur Behandlung und/oder Prophylaxe von erektiler Dysfunktion und weiblicher sexueller Dysfunktion eingesetzt werden.
Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Begriff Herzinsuffizienz sowohl akute als auch chronische Erscheinungsformen der Herzinsuffizienz, wie auch spezifischere oder verwandte Krankheitsformen wie akut dekompensierte Herzinsuffizienz, Rechtsherzinsuffizienz, Linksherzinsuffizienz, Globalinsuffizienz, ischämische Kardiomyopathie, dilatative Kardiomyopathie, hypertrophe Kardiomyopathie, idiopathische Kardiomyopathie, angeborene Herzfehler, Herzinsuffizienz bei Herzklappenfehlern, Mitralklappenstenose, Mitralklappeninsuffizienz, Aorten- klappenstenose, Aortenklappeninsuffizienz, Trikuspidalstenose, Trikuspidalinsuffizienz, Pulmonal- klappenstenose, Pulmonalklappeninsuffizienz, kombinierte Herzklappenfehler, Herzmuskelentzündung (Myokarditis), chronische Myokarditis, akute Myokarditis, virale Myokarditis, diabetische Herzinsuffizienz, alkoholtoxische Kardiomyopathie, kardiale Speichererkrankungen, diastolische Herzinsuffizienz sowie systolische Herzinsuffizienz und akute Phasen der Verschlechterung einer bestehenden chronischen Herzinsuffizienz (worsening heart failure).
Darüber hinaus kann die erfindungsgemäße Verbindung auch zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Arteriosklerose, Lipidstoffwechselstörungen, Hypolipoproteinämien, Dyslipidämien, Hypertriglyceridämien, Hyperlipidämien, Hypercholesterolämien, Abetelipoproteinämie, Sitosterolämie, Xanthomatose, Tangier Krankheit, Fettsucht (Adipositas), Fettleibigkeit (Obesitas) und von kombinierten Hyperlipidämien sowie des Metabolischen Syndroms eingesetzt werden. Außerdem können die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von primärem und sekundärem Raynaud-Phänomen, von Mikrozirkulationsstörungen, Claudicatio, peripheren und autonomen Neuropathien, diabetischen Mikroangiopathien, diabetischer Retinopathie, diabetischen Geschwüren an den Extremitäten, Gangren, CREST- Syndrom, Erythematose, Onycho- mykose, rheumatischen Erkrankungen sowie zur Förderung der Wundheilung verwendet werden.
Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung urologischer Erkrankungen wie beispielsweise benignes Prostata-Syndrom (BPS), benigne Prostata-Hyperplasie (BPH), benigne Prostata Vergrösserung (BPE), Blasenentleerungsstörung (BOO), untere Harnwegssyndrome (LUTS, einschließlich Feiines Urologisches Syndrom (FUS)), Erkrankungen des Urogenital- Systems einschliesslich neurogene überaktive Blase (OAB) und (IC), Inkontinenz (UI) wie beispielsweise Misch-, Drang-, Stress-, oder Überlauf-Inkontinenz (MUI, UUI, SUI, OUI), Beckenschmerzen, benigne und maligne Erkrankungen der Organe des männlichen und weiblichen Urogenital- S y stems .
Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Nierenerkrankungen, insbesondere von aktuer und chronischer Niereninsuffizienz, sowie von akutem und chronischem Nierenversagen. Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Begriff Niereninsuffizienz sowohl akute als auch chronische Erscheinungsformen der Niereninsuffizienz, wie auch zugrundeliegende oder verwandte Nierenerkrankungen wie renale Hypoperfusion, intradialytische Hypotonie, obstruktive Uropathie, Glomerulopathien, Glomerulonephritis, akute Glomerulonephritis, Glomerulosklerose, tubulointerstitielle Erkrankungen, nephropathische Erkrankungen wie primäre und angeborene Nierenerkrankung, Nierenentzündung, immunologische Nierenerkrankungen wie Nierentransplantatabstoßung, Immunkomplex-induzierte Nierenerkrankungen, durch toxische Substanzen induzierte Nephropathie, Kontrastmittel-induzierte Nephropathie, diabetische und nicht-diabetische Nephropathie, Pyelonephritis, Nierenzysten, Nephrosklerose, hypertensive Nephrosklerose und nephrotisches Syndrom, welche diagnostisch beispielsweise durch abnorm verminderte Kreatinin- und/oder Wasser-Ausscheidung, abnorm erhöhte Blutkonzentrationen von Harnstoff, Stickstoff, Kalium und/oder Kreatinin, veränderte Aktivität von Nierenenzymen wie z.B. Glutamylsynthetase, veränderte Urinosmolarität oder Urinmenge, erhöhte Mikroalbuminurie, Makroalbuminurie, Läsionen an Glomerula und Arteriolen, tubuläre Dilatation, Hyperphosphatämie und/oder die Notwendigkeit zur Dialyse charakterisiert werden können. Die vorliegende Erfindung umfasst auch die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Folgeerscheinungen einer Niereninsuffizienz, wie beispielsweise Lungenödem, Herzinsuffizienz, Urämie, Anämie, Elektrolytstörungen (z.B. Hyperkalämie, Hyponaträmie) und Störungen im Knochen- und Kohlen- hydrat-Metabolismus. Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen auch zur Behandlung und/oder Prophylaxe von asthmatischen Erkrankungen, pulmonaler arterieller Hypertonie (PAH) und anderen Formen der pulmonalen Hypertonie (PH), umfassend mit Linksherzerkrankung, HIV, Sichelzellanämie, Thromboembolien (CTEPH), Sarkoidose, COPD oder Lungenfibrose assoziierte pulmonale Hypertonie, der chronisch-obstruktive Lungenerkrankung (COPD), des akuten Atemwegs- syndrom (ARDS), der akuten Lungenschädigung (ALI), der alpha- 1 -Anti trypsin-Defizienz (AATD), der Lungenfibrose, des Lungenemphysem (z.B. durch Zigarettenrauch induziertes Lungenemphysem) und der zystischen Fibrose (CF).
Die in der vorliegenden Erfindung beschriebenen Verbindungen stellen auch Wirkstoffe zur Bekämpfung von Krankheiten im Zentralnervensystem dar, die durch Störungen des NO/cGMP- Systems gekennzeichnet sind. Insbesondere sind sie geeignet zur Verbesserung der Wahrnehmung, Konzentrationsleistung, Lernleistung oder Gedächtnisleistung nach kognitiven Störungen, wie sie insbesondere bei Situationen/Krankheiten/Syndromen auftreten wie "Mild cognitive impairment", altersassoziierten Lern- und Gedächtnisstörungen, altersassoziierten Gedächtnisverlusten, vaskulärer Demenz, Schädel-Hirn-Trauma, Schlaganfall, Demenz, die nach Schlaganfällen auftritt ("post stroke dementia"), post-traumatischem Schädel-Hirn-Trauma, allgemeinen Konzentrationsstörungen, Konzentrationsstörungen bei Kindern mit Lern- und Gedächtnisproblemen, Alzheimer'scher Krankheit, Demenz mit Lewy-Körperchen, Demenz mit Degeneration der Frontallappen einschliesslich des Pick's-Syndroms, Parkinson'scher Krankheit, progressiver nuclear palsy, Demenz mit corticobasaler Degeneration, Amyolateralsklerose (ALS), Huntington' scher Krankheit, Demyelinisation, Multipler Sklerose, Thalamischer Degeneration, Creutzfeld-Jacob-Demenz, HIV- Demenz, Schizophrenie mit Demenz oder Korsakoff-Psychose. Sie eignen sich auch zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen des Zentralnervensystems wie Angst-, Spannungs- und Depressionszuständen, zentral-nervös bedingten Sexualdysfunktionen und Schlafstörungen sowie zur Regulierung krankhafter Störungen der Nahrungs-, Genuss- und Suchtmittelaufnahme.
Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen auch zur Regulation der cerebralen Durchblutung und stellen wirkungsvolle Mittel zur Bekämpfung von Migräne dar. Auch eignen sie sich zur Prophylaxe und Bekämpfung der Folgen cerebraler Infarktgeschehen (Apoplexia cerebri) wie Schlaganfall, cerebraler Ischämien und des Schädel-Hirn-Traumas. Ebenso können die erfin- dungsgemäßen Verbindungen zur Bekämpfung von Schmerzzuständen und Tinnitus eingesetzt werden.
Zudem besitzen die erfindungsgemäßen Verbindungen antiinflammatorische Wirkung und können daher als entzündungshemmende Mittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Sepsis (SIRS), multiplem Organversagen (MODS, MOF), entzündlichen Erkrankungen der Niere, chronischen Darmentzündungen (IBD, Crohn 's Disease, UC), Pankreatitis, Peritonitis, rheumatoiden Erkrankungen, entzündlichen Hauterkrankungen sowie entzündlichen Augenerkrankungen eingesetzt werden.
Desweiteren können die erfindungsgemäßen Verbindungen ebenfalls zur Behandlung und/ oder Prophylaxe von Autoimmunerkrankungen eingesetzt werden. Weiterhin sind die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe fibrotischer Erkrankungen der inneren Organe, wie beispielsweise der Lunge, des Herzens, der Niere, des Knochenmarks und insbesondere der Leber, sowie dermatologischer Fibrosen und fibrotischer Erkrankungen des Auges, geeignet. Im Sinne der vorliegenden Erfindungen umfasst der Begriff fibrotischer Erkrankungen insbesondere die folgenden Begriffe Leberfibrose, Leberzirrhose, Lungenfibrose, Endomyocardfibrose, Nephropathie, Glomerulonephritis, interstitielle Nierenfibrose, fibrotische Schäden in Folge von Diabetes, Knochenmarksfibrose und ähnliche fibrotische Erkrankungen, Sklerodermie, Morphaea, Keloide, hypertrophe Narbenbildung (auch nach chirurgischen Eingriffen), Naevi, diabetische Retinopathie, proliferative Vitroretinopathie und Erkrankungen des Bindegewebes (z.B. Sarkoidose). Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Bekämpfung postoperativer Narbenbildung, z.B. in Folge von Glaukom-Operationen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können ebenfalls kosmetisch bei alternder und verhornender Haut eingesetzt werden.
Außerdem sind die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/ oder Prophylaxe von Hepatitis, Neoplasma, Osteoporose, Glaukom und Gastroparese geeignet.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Ver- bindungen zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembolischen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen, Arteriosklerose, Demenzerkrankungen und erektiler Dysfunktion.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung und/ oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembolischen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen und Arteriosklerose. Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Ver- bindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembolischen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen, Arteriosklerose, Demenzerkrankungen und erektiler Dysfunktion.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembolischen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen und Arteriosklerose, unter Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können allein oder bei Bedarf in Kombination mit anderen Wirkstoffen eingesetzt werden. Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, enthaltend mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen und einen oder mehrere weitere Wirkstoffe, insbesondere zur Behandlung und/oder Prophylaxe der zuvor genannten Erkrankungen. Als geeignete Kombinationswirkstoffe seien beispielhaft und vorzugsweise genannt:
• organische Nitrate und NO-Donatoren, wie beispielsweise Natriumnitroprussid, Nitroglycerin, Isosorbidmononitrat, Isosorbiddinitrat, Molsidomin oder SIN-1, sowie inhalatives NO;
• Verbindungen, die den Abbau von cyclischem Guanosinmonophosphat (cGMP) inhibieren, wie beispielsweise Inhibitoren der Phosphodiesterasen (PDE) 1, 2 und/oder 5, insbesondere PDE 5-
Inhibitoren wie Sildenafil, Vardenafil und Tadalafil;
• antithrombotisch wirkende Mittel, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien oder der profibrinolytischen Substanzen;
• den Blutdruck senkende Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Calcium- Antagonisten, Angiotensin AII-Antagonisten, ACE-Hemmer, Endothelin-Antagonisten, Renin- Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-Blocker, beta-Rezeptoren-Blocker, Mineralocorticoid-Rezeptor- Antagonisten sowie der Diuretika; und/oder • den Fettstoffwechsel verändernde Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Inhibitoren wie beispielhaft und vorzugsweise HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese-Inhibitoren, der ACAT-Inhibitoren, CETP- Inhibitoren, MTP-Inhibitoren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta-Agonisten, Cholesterin-Absorptionshemmer, Lipase-Inhibitoren, polymeren Gallensäureadsorber, Gallensäure-Reabsorptionshemmer und Lipoprotein(a)-Antagonisten.
Unter antithrombotisch wirkenden Mittel werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien oder der profibrinolytischen Substanzen verstanden. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Thrombozytenaggregationshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Aspirin, Clopidogrel, Ticlopidin oder Dipyridamol, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Thrombin-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Ximela- gatran, Dabigatran, Melagatran, Bivalirudin oder Clexane, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem GPIIb IIIa-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Tirofiban oder Abciximab, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Faktor Xa-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Riva- roxaban (BAY 59-7939), Edoxaban (DU- 176b), Apixaban, Otamixaban, Fidexaban, Razaxaban, Fondaparinux, Idraparinux, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 oder SSR-128428, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit Heparin oder einem low molecular weight (LMW)-Heparin-Derivat verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Vitamin K-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Coumarin, verabreicht. Unter den Blutdruck senkenden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Calcium-Antagonisten, Angiotensin AII-Antagonisten, ACE-Hemmer, Endothelin-Antagonisten, Renin-Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-B locker, beta-Rezeptoren-Blocker, Mineralocorticoid-Rezeptor- Antagonisten sowie der Diuretika verstanden.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Calcium-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Nife- dipin, Amlodipin, Verapamil oder Diltiazem, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem alpha- 1 -Rezeptoren-Blocker, wie beispielhaft und vorzugsweise Prazosin, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem beta-Rezeptoren-Blocker, wie beispielhaft und vorzugsweise Propranolol, Atenolol, Timolol, Pindolol, Alprenolol, Oxprenolol, Penbutolol, Bupranolol, Meti- pranolol, Nadolol, Mepindolol, Carazalol, Sotalol, Metoprolol, Betaxolol, Celiprolol, Bisoprolol, Carteolol, Esmolol, Labetalol, Carvedilol, Adaprolol, Landiolol, Nebivolol, Epanolol oder Bucindo- lol, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Angiotensin All- Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Losartan, Candesartan, Valsartan, Telmisartan oder Embursatan, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem ACE-Hemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Enalapril, Captopril, Lisinopril, Ramipril, Delapril, Fosinopril, Quinopril, Perindopril oder Trandopril, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Endothelin-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Bosentan, Darusentan, Ambrisentan oder Sitaxsentan, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Renin- Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Aliskiren, SPP-600 oder SPP-800, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Mineralocorticoid-Rezeptor-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Spironolacton oder Eplerenon, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Schleifendiuretikum, wie beispielsweise Furosemid, Torasemid, Bumetanid und Piretanid, mit kaliumsparenden Diuretika wie beispielsweise Amilorid und Triamteren, mit Aldosteronantagonisten, wie beispielsweise Spironolacton, Kaliumcanrenoat und Eplerenon sowie Thiaziddiuretika, wie beispielsweise Hydrochlorothiazid, Chlorthalidon, Xipamid, und Indapamid, verabreicht.
Unter den Fettstoffwechsel verändernden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der CETP- Inhibitoren, Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Inhibitoren wie HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese-Inhibitoren, der ACAT-Inhibitoren, MTP-Inhibitoren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta-Agonisten, Cholesterin-Absorptionshemmer, polymeren Gallensäureadsorber, Gallensäure-Reabsorptionshemmer, Lipase-lnhibitoren sowie der Lipoprotein(a)-Antagonisten verstanden.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem CETP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Dalcetrapib, BAY 60-5521, Anacetrapib oder CETP-vaccine (CETi-1), verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Thyroidrezeptor-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise D- Thyroxin, 3,5,3'-Triiodothyronin (T3), CGS 23425 oder Axitirome (CGS 26214), verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem HMG-CoA-Reduktase-Inhibitor aus der Klasse der Statine, wie beispielhaft und vorzugsweise Lovastatin, Simvastatin, Pravastatin, Fluvastatin, Atorvastatin, Rosuvastatin oder Pitavastatin, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Squalensynthese-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise BMS- 188494 oder TAK-475, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem ACAT-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Avasimibe, Melinamide, Pactimibe, Eflucimibe oder SMP-797, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem MTP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Implitapide, BMS-201038, R-103757 oder JTT-130, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem PPAR-gamma-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Pioglitazone oder Rosiglitazone, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem PPAR-delta-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise GW 501516 oder BAY 68-5042, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Cholesterin-Absorptionshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Ezetimibe, Tiqueside oder Pamaqueside, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Lipase-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Orlistat, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem polymeren Gallensäureadsorber, wie beispielhaft und vorzugs- weise Cholestyramin, Colestipol, Colesolvam, CholestaGel oder Colestimid, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Gallensäure-Reabsorptionshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise ASBT (= IBAT)-Inhibitoren wie z.B. AZD-7806, S-8921, AK- 105, BARI- 1741, SC-435 oder SC-635, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Lipoprotein(a)-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Gemcabene calcium (CI-1027) oder Nicotinsäure, verabreicht.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat bzw. Stent. Für diese Applikationswege können die erfindungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.
Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende, die erfindungsgemäßen Verbindungen schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nicht-überzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophylisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weich- gelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen.
Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die par- enterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.
Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalations arzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen, -lösungen oder -sprays, lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augenpräparationen, Vaginalkapseln, wäßrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme (z.B. Pflaster), Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.
Bevorzugt sind die orale oder parenterale Applikation, insbesondere die orale Applikation.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Lactose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige Poly- ethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecylsulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispielsweise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien. Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 0.001 bis 1 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 0.5 mg kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0.001 bis 2 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.001 bis 1 mg kg Körpergewicht. Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele erläutern die Erfindung.
Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.
A. Beispiele
Abkürzungen:
abs. absolut
aq. wässrige Lösung
ber. berechnet
Boc feri-Butyloxycarbonyl
br. s breites Singulett (bei NMR)
Cbz Benzyloxycarbonyl
δ Verschiebung im NMR Spektrum (Angabe in ppm)
d Dublett (NMR-Kopplungsmuster)
DC Dünnschichtchromatographie
DCI direkte chemische Ionisation (bei MS)
dd Dublett vom Dublett (NMR Kopplungsmuster)
ddt doppeltes Dublett vom Triplett (NMR Kopplungsmuster)
DMF Dimethylformamid
DMSO Dimethylsulfoxid
d. Th. der Theorie (bei Ausbeute)
ent enantiomerenrein
eq. Äquivalent(e)
ESI Elektrospray-Ionisation (bei MS)
Et Ethyl
gef. gefunden
h Stunde(n)
HATU (l-[Bis(dimemylamino)methylen]-lH-l,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium
3-oxid hexafluorophosphat)
HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie
HRMS hochaufgelöste Massenspektrometrie
konz. konzentriert
LC-MS Hüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektrometrie m Multiplett
Me Methyl
min Minute(n)
MS Massenspektrometrie
NMR Kernresonanzspektrometrie
PdCl2(dppf)CH2Cl2 1 , 1 '-Bis(diphenylphosphino)ferrocen-Palladium(II)dichlorid
Dichlormethan Komplex Ph Phenyl
q Quartett (NMR Kopplungsmuster)
quint. Quintett (NMR Kopplungsmuster)
rac racemisch
rel relative Stereochemie
RT Raumtemperatur
Rt Retentionszeit (bei HPLC)
s Singulett (NMR Kopplungsmuster)
SFC Supercritical Fluid Chromatography (superkritische
Hüssigkeitschromatographie)
t Triplett (NMR Kopplungsmuster)
TBTU (Benzotriazol- 1 -yloxy)bisdimethylaminomethyliumfluorborat
TFA Trifluoressigsäure
THF Tetrahydrofuran
UV Ultraviolett-Spektrometrie
v/v Volumen zu Volumen- Verhältnis (einer Lösung)
HPLC-, GC-MS- und LC-MS-Methoden:
Methode 1 (LC-MS): Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Säule: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 50 x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitrii + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A 1.2 min 5% A
-> 2.0 min 5% A Ofen: 50 °C; Fluss: 0.40 ml/min; UV-Detektion: 208 400 nm.
Methode 2 (LC-MS): Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Säule: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 50 x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitrii + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 95% A— * 6.0 min 5% A -> 7.5 min 5% A Ofen: 50°C; Fluss: 0.35 ml/min; UV-Detektion: 210 400 nm.
Methode 3 (LC-MS): Instrument: Micromass Quattro Premier mit Waters UPLC Acquity; Säule: Thermo Hypersil GOLD 1.9 μ 50 x 1 mm; Eluent A: 1 I Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitrii + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 97% A » 0.5 min 97% A > 3.2 min 5% A > 4.0 min 5% A Ofen: 50°C; Fluss: 0.3 ml/min; UV-Detektion: 210 nm. Methode 4 (LC-MS): Instrument MS: Waters (Micromass) Quattro Micro; Instrument HPLC: Agilent 1100 Serie; Säule: YMC-Triart C18 3 μ 50 x 3 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.01 mol Ammoniumcarbonat, Eluent B: 1 1 Acetonitril; Gradient: 0.0 min 100% A— > 2.75 min 5% A— > 4.5 min 5% A; Ofen: 40°C; Fluss: 1.25 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 5 (LC-MS): Instrument MS: Waters (Micromass) QM; Instrument HPLC: Agilent 1 100 Serie; Säule: Agient ZORBAX Extend-C18 3.0x50mm 3.5-Micron; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.01 mol Ammoniumcarbonat, Eluent R: 1 1 Acetonitril; Gradient: 0.0 min 98% A — > 0.2min 98% A > 3.0 min 5% Λ 4.5 min 5% A; Ofen: 40°C; Fluss: 1.75 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 6 (GC-MS): Instrument: Micromass GCT, GC6890; Säule: Restek RTX-35, 15 m x 200 μιη x 0.33 μιη; konstanter Fluss mit Helium: 0.88 ml/min; Ofen: 70°C; Inlet: 250°C; Gradient: 70°C, 30°C/min -> 310°C (3 min halten). Methode 7 (LC-MS): Instrument: Agilent MS Quad 6150; HPLC: Agilent 1290; Säule: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 50 x 2.1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.25 ml 99%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -> 0.3 min 90% A -> 1.7 min 5% A -> 3.0 min 5% A Ofen: 50°C; Fluss: 1,20 ml/min; UV-Detektion: 205 - 305 nm. Methode 8 (GC-MS): Instrument: Thermo Scientific DSQII, Thermo Scientific Trace GC Ultra; Säule: Restek RTX-35MS, 15 m x 200 μιη x 0.33 μιη; konstanter Fluss mit Helium: 1.20 ml/min; Ofen: 60°C; Inlet: 220°C; Gradient: 60°C, 30°C/min -» 300°C (3.33 min halten).
Method 9 (LC-MS): Instrument MS: Waters SQD; Instrument HPLC: Waters UPLC; Säule: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2.1 mm, 1.8 μιη; Eluent A: Wasser + 0.025% Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril (ULC) + 0.025% Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 98%A - 0.9 min 25%A - 1.0 min 5%A - 1.4 min 5%A - 1.41 min 98%A - 1.5 min 98%A; Ofen: 40°C; Fluss: 0.600 ml/min; UV- Detektion: DAD; 210 nm.
Methode 10 (präparative HPLC): Instrument MS: Waters, Instrument HPLC: Waters (Säule Waters X-Bridge C18, 19 mm x 50 mm, 5 μιη, Eluent A: Wasser + 0.05% Ammoniak, Eluent B: Acetonitril (ULC) mit Gradient; Fluss: 40 ml/min; UV-Detektion: DAD; 210 - 400 nm). bzw.:
Instrument MS: Waters, Instrument HPLC: Waters (Säule Phenomenex Luna 5μ C18(2) 100A, AXIA Tech. 50 x 21.2 mm, Eluent A: Wasser + 0.05% Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril (ULC) mit Gradient; Fluss: 40 ml/min; UV-Detektion: DAD; 210 - 400 nm). Methode 11 (LC-MS): Instrument MS: ThermoFisherScientific LTQ-Orbitrap-XL; Gerätetyp HPLC: Agilent 1200SL; Säule: Agilent, POROSHELL 120, 3 x 150 mm, SB - C18 2.7 μιη; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.1% Trifluoressigsäure; Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.1% Trifluoressigsäure; Gradient: 0.0 min 2% B -> 1.5 min 2% B -> 15.5 min 95% B 18.0 min 95% B; Ofen: 40°C; Fluss: 0.75 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Weitere Angaben:
Bei Aufreinigungen von erfindungsgemäßen Verbindungen per präparativer HPLC nach den oben beschriebenen Methoden, in denen die Elutionsmittel Zusatzstoffe wie beispielsweise Trifluoressigsäure, Ameisensäure oder Ammoniak enthalten, können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Salz-Form, beispielsweise als Trifluoracetat, Formiat oder Ammonium-Salz anfallen, sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen ausreichend basische bzw. saure Funktionalitäten enthalten. Ein solches Salz kann durch verschiedene dem Fachmann bekannte Methoden in die entsprechende freie Base bzw. Säure überführt werden.
Des Weiteren können Amidine als freie Verbindungen oder anteilig (abhängig von der Präparation bei Beteiligung von Essigsäure) als Acetat-Salze oder Acetat-Solvate vorliegen.
Wenn bei den im Folgenden beschriebenen Synthese-Intermediaten und Ausführungsbeispielen der Erfindung eine Verbindung in der Form eines Salzes der korrespondierenden Base bzw. Säure aufgeführt ist, so ist die exakte stöchiometrische Zusammensetzung eines solchen Salzes, wie es nach dem jeweiligen Herstell- und/oder Reinigungsverfahren erhalten wurde, in der Regel nicht bekannt. Sofern nicht genauer spezifiziert, sind daher Namens- und Strukturformel-Zusätze wie beispielsweise "Hydrochlorid", "Trifluoracetat", "Natrium- Salz" bzw. "x HCl", "x CF3COOH", "x Na+" bei solchen Salzen nicht stöchiometrisch zu verstehen, sondern haben allein deskriptiven Charakter bezüglich der enthaltenen salzbildenden Komponenten.
Sinngemäß gleiches gilt für den Fall, dass Synthese-Intermediate oder Ausführungsbeispiele oder Salze hiervon nach den beschriebenen Herstell- und/oder Reinigungsverfahren in Form von Solvaten, wie beispielsweise Hydraten, erhalten wurden, deren stöchiometrische Zusammensetzung (sofern definierter Art) nicht bekannt ist.
Weiterhin können die erfindungsgemäßen sekundären Amide als Rotationsisomere/ Isomerengemische, insbesondere bei NMR-Untersuchungen, vorliegen. Reinheitsangaben beziehen sich in der Regel auf entsprechende Peak- Integrationen im LC/MS-Chromatogramm, können aber zusätzlich auch unter Zuhilfenahme des ^-NMR-Spektrums ermittelt worden sein. Wenn keine Reinheit angegeben ist, handelt es sich in der Regel um eine 100%-Reinheit laut automatischer Peak- Integration im LC MS-Chromatogramm oder die Reinheit wurde nicht explizit ermittelt.
Angaben zu Ausbeuten in % d. Th. sind in der Regel reinheitskorrigiert, sofern eine Reinheit <100% angegeben ist. Bei lösungsmittelhaltigen oder verunreinigten Chargen kann die Ausbeute formal ">100%" betragen; in diesen Fällen ist die Ausbeute nicht lösungsmittel- bzw. reinheitskorrigiert.
Alle Angaben in ^-NMR-Spektren geben die Chemischen Verschiebungen δ in ppm an. Die in den folgenden Paragraphen angegebenen Multiplizitäten von Protonensignalen in H-NMR- Spektren geben die jeweils beobachtete Signalform wieder und berücksichtigen keine Signalphänomene höherer Ordnung. In der Regel bezieht sich die Angabe zur chemischen Verschiebung auf das Zentrum des betreffenden Signals. Bei breiten Multipletts erfolgt die Angabe eines Intervalls. Durch Lösungsmittel oder Wasser verdeckte Signale wurden entweder tentativ zugeordnet oder sind nicht aufgeführt. Stark verbreiterte Signale - z.B. verursacht durch schnelle Rotation von Molekülteilen oder aufgrund von austauschenden Protonen - wurden ebenfalls tentativ zugeordnet (oft als breites Multiplett oder breites Singulett bezeichnet) oder sind nicht aufgeführt.
Schmelzpunkte und Schmelzbereiche, soweit angegeben, sind nicht korrigiert.
Für alle Reaktanden oder Reagenzien, deren Herstellung im Folgenden nicht explizit beschrieben ist, gilt, dass sie von allgemein zugänglichen Quellen kommerziell bezogen wurden. Für alle übrigen Reaktanden oder Reagenzien, deren Herstellung im Folgenden ebenfalls nicht beschrieben ist und die nicht kommerziell erhältlich waren oder von Quellen bezogen wurden, die nicht allgemein zugänglich sind, ist ein Verweis auf die veröffentlichte Literatur angegeben, in der ihre Herstellung beschrieben ist.
Ausgangsverbindungen und Intermediate: Beispiel 1A
5-Fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]p
Figure imgf000035_0001
2
58 g (340.03 mmol) 2-Chlor-5-fluor-6-methylnicotinonitril (Darstellung beschrieben in WO2007/041052, Beispiel U-2, Seite 80) wurden in 1,2-Ethandiol (580 ml) vorgelegt und danach mit Hydrazinhydrat (24.81 ml) und 56.09 ml (340.03 mmol) A^ -Diisopropylefhylamin versetzt. Es wurde für 16 h bei 80°C gerührt und danach für 6 h bei 120°C. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser (2.5 1) und Essigsäureethylester (2.5 1) versetzt und der entstandene Feststoff wurde abgesaugt. Der erhaltene Feststoff wurde im Vakuum getrocknet. Man erhielt so 28.4 g (47% d. Th.) der Zielverbindung.
LC-MS (Methode 4): Rt = 1.77 min
MS (ESIpos): m/z = 167 [M+H]+
Beispiel 2A
5-Fluor-3-iod-6-methyl- lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin
Figure imgf000036_0001
28 g (168.5 mmol) 5-Fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-amin aus Beispiel 1A wurden in 1.32 1 THF vorgelegt und auf 0°C abgekühlt. Anschließend wurden 41.45 ml (337.03 mmol) Bortrifluorid-Diethylether-Komplex langsam zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde auf -10°C abgekühlt. Danach wurde eine Lösung von 25.66 g (219.07 mmol) Isopentylnitrit in 166 ml THF langsam zugegeben und danach 30 min weiter gerührt. Danach wurde ie Reaktionslösung auf etwa ein Viertel ihres Volumens eingeengt. Anschließend wurde die Lösung mit 988 ml Aceton versetzt und auf 0°C gekühlt. Es wurde zu dieser Lösung eine Lösung von 32.84 g (219.07 mmol) Natriumiodid in 412 ml Aceton hinzugetropft und das Gemisch wurde anschließend für 2 h bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf 5 1 Eiswasser gegossen und dreimal mit je 750 ml Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit 750 ml gesättigter, wässriger Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und dann im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde mittels Säulenchromatographie (Kieselgel, Laufmittel: Cyclohexan/Essigsäureethylester, Gradient: 9: 1 nach 1: 1). Man erhielt 14.90 g (32% d. Th.) der Titelverbindung.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.84 min
MS (ESIpos): m/z = 278 [M+H]+
Beispiel 3A
1 -(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-3-iod-6-methyl- 1 H-pyrazolo [3,4-b]pyridin
Figure imgf000036_0002
2.60 g (9.37 mmol) 5-Fluor-3-iod-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin aus Beispiel 2A wurden in 35 ml DMF vorgelegt. Anschließend wurde eine Lösung von 3.67 g (11.26 mmol) Cäsiumcarbonat und 1.94 g (9.37 mmol) l-(Brommethyl)-2,3-difluorbenzol in 10 ml DMF, hinzugegeben und es wurde danach über Nacht bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zu 200 ml Wasser gegeben und zweimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die gesammelten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, Laufmittel: Petrolether/Essigsäureethylester = 10/1) gereinigt und die Produktfraktionen eingeengt. Es erfolgte eine weitere Reinigung mittels präparativer HPLC (Säule: Sunfire C18, 5 μιη, 250 x 20 mm; Eluent: 12% Wasser + 85% Methanol + 3 % einprozentige, wässrige TFA-Lösung; Fluss: 25 ml/min; Temperatur: 40°C; Wellenlänge: 210 nm). Man erhielt 2.67 g (71 % d. Th.) der Titelverbindung.
LC-MS (Methode 1): Rt = 1.29 min
MS (ESIpos) : m/z = 404 [M+H] +
In Analogie zu Beispiel 3A wurden die in Tabelle 1A gezeigten Beispiel Verbindungen hergestellt, indem 5-Fluor-3-iod-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin aus Beispiel 2A mit l-(Brommethyl)-2- fluorbenzol, 2-(Brommethyl)-l,3,4-trifluorbenzol oder 2-(Chlormethyl)-3-fluorpyridin-Hydrochlorid (1.1 - 1.5 Äquivalente) und Cäsiumcarbonat (1.2 - 2 Äquivalente) unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Reaktionszeit: 2 - 72 h; Temperatur: RT bis 60°C) in DMF umgesetzt wurden.
Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Methode A: Das Reaktionsgemisch wurde in Wasser gegeben und anschließend etwal h bei Raumtemperatur gerührt. Der entstandene Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Hochvakuum getrocknet.
Methode B: Alternativ wurde das Reaktionsgemisch auf Wasser gegeben und mit Essigsäureethylester extrahiert. Die gesammelten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt (Laufmittel: Petrolether/Essigsäureethylester oder Dichlormethan/Methanol).
Methode C: Alternativ wurde das Reaktionsgemisch mit Acetonitril verdünnt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Eluent: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA oder 0.05% Ameisensäure).
Tabelle 1A:
Figure imgf000037_0001
Figure imgf000038_0001
Diese Ausgangsverbindung wurde bereits in WO2013/ 104703 (Beispiel 50A) beschrieben.
Beispiel 7A
l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-carbonitril
Figure imgf000038_0002
Eine Mischung aus 2.47 g (6.13 mmol) l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-3-iod-6-methyl-lH- pyrazolo[3,4-b]pyridin aus Beispiel 3A und 0.576 g (6.43 mmol) Kupfer-(I)-cyanid wurden in 12.1 ml abs. DMSO in einem ausgeheizten Kolben vorgelegt und für 3 h bei 150°C gerührt. Die abgekühlte Reaktionslösung wurde mit Essigsäureethylester versetzt und dreimal mit einer Mischung aus halbgesättigter wässriger Ammoniumchloridlösung und wässriger konzentrierter Ammoniaklösung (3/1) gewaschen. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Das Rohprodukt wurde mittels Flashchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel: Cyclohexan/Essigsäureethylester-Gradient: 15/1 bis 10/1; anschließend mit Dichlormethan/Methanol: 10/1). Es wurden 780 mg der Zielverbindung (42% d. Th.) erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 1.19 min
MS (ESIpos): m/z = 303 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 2.65 (d, 3H), 5.87 (s, 2H), 7.10 - 7.25 (m, 2H), 7.39 - 7.48 (m, 1H), 8.41 (d, 1H).
In Analogie zu Beispiel 7A wurden die in Tabelle 2A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Iodide mit Kupfer(I)-cyanid (1.1 - 1.5 Äquivalente) unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Reaktionszeit: 1 - 5 h; Temperatur: 150°C) in DMSO umgesetzt wurden.
Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Methode A: Das Reaktionsgemisch wurde nach Abkühlen mit Essigsäureethylester versetzt und dreimal mit einer Mischung aus halbgesättigter wässriger Ammoniumchloridlösung und wässriger konzentrierter Ammoniaklösung (3/1) gewaschen. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt.. Das Rohprodukt wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel: Cyclohexan/Essigsäureethylester-Gradient: oder Dichlormethan/Methanol-Gradient) .
Methode B: Alternativ wurde das Reaktionsgemisch mit Acetonitril verdünnt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Eluent: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA oder 0.05% Ameisensäure).
Tabelle 2A:
Figure imgf000040_0001
Diese Ausgangsverbindung wurde bereits in WO2013/ 104703 (Beispiel 51A) beschrieben.
Beispiel I IA
l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-carboximidamid
Figure imgf000041_0001
960 mg (3.18 mmol) l-(2 -Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-carbonitril aus Beispiel 7A wurden in 9.47 ml Methanol vorgelegt. Es wurden 0.69 ml (3.18 mmol) Natriummethanolat in Methanol zugegeben und anschließend für 1 h bei RT gerührt. Dann wurden nochmals 10 ml Methanol zu dem Reaktionsgemisch gegeben und es wurde anschließend für 1 h bei 60°C gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 204 mg (3.81 mmol) Ammoniumchlorid und 0.71 ml (12.39 mmol) Essigsäure versetzt und 7 h unter Rückfluss gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand mit 38 ml 1 N Natronlauge 1 h bei Raumtemperatur verrührt. Anschließend wurde der Niederschlag abfiltriert und mit Wasser nachgewaschen. Es wurden 1.0 g der Ziel Verbindung (90% d. Th.; Reinheit 90%) erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.68 min
MS (ESIpos): m/z = 320 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 2.60 (d, 3H), 5.77 (s, 2H), 6.62 (br. s, 3H), 6.91 - 6.98 (m, 1H), 7.11 - 7.20 (m, 1H), 7.34 - 7.44 (m, 1H), 8.29 (d, 1H). In Analogie zu Beispiel I IA wurden die in Tabelle 3A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Nitrile mit Natriummethanolat (1.0 - 1.2 Äquivalente) in Methanol und anschließend mit Ammoniumchlorid (1.2 - 1.5 Äquivalente) und Essigsäure (3.5 - 5 Äquivalente) unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Reaktionszeit nach Ammoniumchlorid- und Essigsäure-Zusatz: 5 - 24 h; Temperatur: Rückfluss) umgesetzt wurden. Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Das Lösungsmittel wurde eingedampft und der Rückstand mit 1 N Natronlauge 0.5 - 2 h bei Raumtemperatur verrührt. Anschließend wurde der Niederschlag abfiltriert und mit Wasser nachgewaschen und anschließend getrocknet.
Die erhaltenen Zielverbindungen können ggf. anteilig als Acetat-Salz oder Acetat-Solvat vorliegen. Tabelle 3A:
Figure imgf000042_0001
l) Diese Ausgangsverbindung wurde als Acetat-Salz bereits in WO 2013/104703 (Beispiel 52A) beschrieben.
Beispiel 15A
5-Fluor-l-[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-carboximidamid Acetat
Figure imgf000043_0001
Die Herstellung der Verbindung ist beschrieben in WO 2013/004785 (Beispiel 14A, S. 69-70). Beispiel 16A
6-Chlor-l-(2-fluorbenzyl)-lH-indazol-3-carboximidamid Acetat
Figure imgf000043_0002
Die Herstellung der Verbindung ist beschrieben in WO2013/104598 (Beispiel 54A, S. 97-98).
Beispiel 17A
4-Amino-2-[l-(23-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5,5-dimethyl- 5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000043_0003
2.34 g (6.67 mmol; Reinheit 90%) l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4- b]pyridin-3-carboximidamid aus Beispiel I IA wurden in 50.5 ml tert.-Butanol vorgelegt Anschließend wurden 1.33 g (8.00 mmol) Methyl-3,3-dicyanopivalat hinzuzugegeben und die Mischung wurde anschließend 6 h unter Rückfluss gerührt. Es wurden nochmals 8 ml tert.-Butanol hinzugegeben und das Gemisch wurde anschließend über Nacht unter Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Reaktionsgemisch mit Wasser versetzt und für 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Der Feststoff wurde am Hochvakuum getrocknet. Es wurden 3.25 g (99% d. Th.; Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 1.03 min
MS (ESIpos): m/z = 454 [M+H]+
In Analogie zu Beispiel 17A wurden die in Tabelle 4A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Carboximidamide (Amidine) mit Methyl-3,3-dicyanopivalat (1.1 - 1.5 Äquivalente) in tert.-Butanol [zu Amidinen, welche als Acetat-Salz oder Acetat-Solvat vorlagen, wurden 0.2 - 1.4 Äquivalente Kalium-tert.-butylat hinzugegeben] unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Reaktionszeit: 4 - 24 h) umgesetzt wurden.
Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Das Reaktionsgemisch wurde mit Wasser versetzt und die Mischung für 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Tabelle 4A:
BeiIUPAC-Name / Struktur Analytische Daten spiel (Ausbeute)
4-Amino-2-[5-fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyl-lH- LC-MS (Methode 1): Rt = 1.01
18A
pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5,5-dimethyl-5,7-dihydro- min
6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on MS (ESIpos): m/z = 436 [M+H]+
Figure imgf000044_0001
(71% d. Th.; Reinheit 89%) v>
Figure imgf000045_0001
Figure imgf000046_0001
Diese Ausgangsverbindung wurde bereits in WO 2013/104703 (Beispiel 55A) beschrieben.
Beispiel 23A
Methyl-3,3-dicyano-2-(trifluormethyl);
Figure imgf000047_0001
Die Synthese dieser Verbindung ist beschrieben in Journal of Fluorine Chemistry 1991, vol. 51, 3, S. 323-334.
Beispiel 24A
Methyl -2-(dicyanomethyl)-3,3,3-trifluor- -methylpropanoat
Figure imgf000047_0002
3.00 g (14.70 mmol) Beispiel 23 A wurden in Tetrahydrofuran (30 ml) gelöst und auf 0°C abgekühlt. Anschließend wurden 7.35 ml (22.05 mmol) Methylmagnesiumchlorid (3 M in THF) so zugetropft, dass die Temperatur 5°C nicht überstieg. Nach vollständiger Zugabe wurde 10 min nachgerührt. Der Ansatz wurde dann mit 1 N wässriger Salzsäure versetzt und anschließend mit Essigsäureethylester extrahiert. Die Phasen wurden getrennt und die wässrige Phase wurde noch zweimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Das Rohprodukt wurde anschließend durch Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel: Cyclohexan, danach Cyclohexan:Essigsäureethylester 9: 1 (v:v)). Nach Einengen erhielt man 3.24 g (63 % d. Th.) der Titel Verbindung.
Ή-NMR (400 MHz, CDCL): δ [ppm] = 1.81 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.48 (s, 1H).
Beispiel 25A
rac-4-Amino-2-{5-fluor-l-[(3-fluo yridin-2-yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl- 5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000048_0001
23.0 g (66.02 mmol) 5-Ρ1υοΓ-1-[(3-ί1υο γή(1ίη-2-γ1^ε11ιγ1]-1Η-ργΓαζο1ο[3,4^]ρντί(1ίη-3- carboximidamid Acetat aus Beispiel 15A wurden in tert.-Butanol (400 ml) vorgelegt und mit 13.43 g (119.68 mmol) Kalium- tert.-butylat versetzt. Anschließend wurden 21.08 g (95.75 mmol) Methyl-2- (dicyanomethyl)-3,3,3-trifluor-2-methylpropanoat aus Beispiel 24A in tert.-Butanol (100 ml) zugegeben und die Mischung über Nacht unter Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Reaktionsgemisch mit Wasser versetzt und für weitere 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und mit Wasser und wenig Diethylether nachgewaschen. Der Feststoff wurde am Hochvakuum getrocknet. Es wurden 16.1 g der Titelverbindung erhalten (51% d. Th.).
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.95 min;
MS (ESIpos): m/z = 477 [M+H]+
XH-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.72 (s, 3H), 5.96 (s, 2H), 7.10 (br. s, 2H), 7.42 - 7.48 (m, 1H), 7.75 - 7.80 (m, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.68 (dd, 1H), 8.86 (dd, 1H), 11.60 (br. s, 1H). In Analogie zu Beispiel 25A wurden die in Tabelle 5A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Carboximidamide (Amidine) mit Methyl-2-(dicyanomethyl)-3,3,3-trifluor- 2-methylpropanoat (1.1 - 1.5 Äquivalente) in tert.-Butanol [zu Amidinen, welche als Acetat-Salz oder Acetat-Solvat vorlagen, wurden 0.2 - 1.4 Äquivalente Kalium-tert.-butylat hinzugegeben] unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Reaktionszeit: 0.5 - 24 h) umgesetzt wurden.
Alternativ dazu können die Reaktionen in der Mikrowelle durchgeführt werden [0.5 - 10 h, 100°C]
Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Das Reaktionsgemisch wurde mit Wasser versetzt und für 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und mit Wasser nachgewaschen. abelle 5A:
Figure imgf000049_0001
BeiIUPAC-Name / Struktur Analytische Daten
spiel (Ausbeute)
rac-4-Amino-2-[l-(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl- LC-MS (Methode 1): Rt = 1.14
28A
lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluor- min
methyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on MS (ESIpos): m/z = 508 [M+H]+
Figure imgf000050_0001
(94% d. Th.; Reinheit 91%)
rac-A- Amino-2- { 5 -fluor- 1 - [(3 -fluorpyridin-2-yl)methyl] - LC-MS (Methode 1): Rt = 0.99
29A
6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5- min
(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- MS (ESIpos): m/z = 491 [M+H]+ d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000050_0002
(79% d. Th)
Beispiel 30A
2-[l-(23-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-4-iod-5,5-dimemyl-5 - dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000051_0001
3.25 g (6.61 mmol; Reinheit 92%) 4-Amino-2-[l-(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 17A wurden in 64 ml Dioxan vorgelegt, mit 4.42 ml (33.04 mmol) iso-Pentylnitrit und 2.66 ml (33.04 mmol) Diiodmethan versetzt und anschließend für 3 h auf 85°C erhitzt. Nach Abkühlen wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde über Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan-Methanol-Gradient). Nach Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum erhielt man 2.32 g (51% d. Th.; Reinheit 82%) der Titelverbindung.
LC-MS (Methode 1): Rt = 1.34 min
MS (ESIpos): m/z = 565 [M+H]+
In Analogie zu Beispiel 30A wurden die in Tabelle 6A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Aniline mit Diiodmethan (3 - 18 Äquivalente) und iso-Pentylnitrit (3 - 10 Äquivalente) in Dioxan unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Temperatur: 85°C; Reaktionszeit: 2 - 10 h) umgesetzt wurden. Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt [ggf. zwischen Wasser und einem organischen Lösungsmittel verteilt und anschließend eingeengt] und der Rückstand wurde über Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan-Methanol oder Cyclohexan- EssigsäureethylesterGradient]. Ggf. wurde eine weitere Reinigung mittels präparativer HPLC durchgeführt [Säule: Sunfire C18, 5 μΜ, 100 x 30 mm; Eluent: Wasser/Acetonitril + 0.2%ige Ameisensäure]. Tabelle 6A:
Figure imgf000052_0001
BeiIUPAC-Name / Struktur Analytische Daten spiel (Ausbeute)
2- { 5-Fluor- 1 - [(3 -fluorpyridin-2-yl)methyl] -6-methyl- 1 H- LC-MS (Methode 1): Rt = 1.15
33A
pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-4-iod-5,5-dimethyl-5,7- min
dihydro-6H-pyrrolo [2,3 -d] pyrimidin-6-οη MS (ESIpos): m/z = 548 [M+H]+
o 3
(46% d. Th; Reinheit 96%)
2- { 5-Fluor- 1 - [(3 -fluorpyridin-2-yl)methyl] - 1 H- LC-MS (Methode 7): Rt = 1.36
34A
pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-4-iod-5,5-dimethyl-5,7- min
dihydro-6H-pyrrolo [2,3 -d] pyrimidin-6-οη MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]+
Figure imgf000053_0001
(30% d. Th.; Reinheit 83%)
Figure imgf000054_0001
Diese Ausgangsverbindung wurde bereits in WO 2013/104703 (Beispiel 56A) beschrieben.
Beispiel 36A
rac-2-{5-Fluor-l-[(3-fluo yridin-2-yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-4-iod-5-methyl-5- (trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000054_0002
565 mg (1.19 mmol) rac-4-Amino-2-{5-fluor-l-[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4- b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 25A in 15 ml Dioxan wurden mit 798 μΐ (5.93 mmol) iso-Pentylnitrit und 286 μΐ (3.56 mmol) Diiodmethan versetzt und für 4 h auf 85 °C erhitzt. Nach Abkühlen wurde im Vakuum eingeengt, der Rückstand mit Dichlormethan aufgenommen, mit Kieselgur versetzt und anschließend im Vakuum eingeengt. Die so auf Kieselgur aufgezogene Rohverbindung wurde anschließend durch Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel: Cyclohexan-Essigsäureethylester-Gradient). Nach Einengen erhielt man 297 mg (42 % d. Th.) der Titelverbindung.
LC-MS (Methode 1): Rt = 1.19 min;
MS (ESIpos): m/z = 588 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.81 (s, 3H), 6.04 (s, 2H), 7.43 - 7.47 (m, 1H), 7.77 - 7.82 (m, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.47 (dd, 1H), 8.76 (dd, 1H), 12.41 (br. s, 1H).
In Analogie zu Beispiel 36A wurden die in Tabelle 7A gezeigten Beispielverbindungen hergestellt, indem die entsprechenden Aniline mit Diiodmethan (4 - 18 Äquivalente) und iso-Pentylnitrit (4 - 12 Äquivalente) in Dioxan unter den beschriebenen Reaktionsbedingungen (Temperatur: 85°C; Reaktionszeit: 2 - 10 h) umgesetzt wurden.
Beispielhafte Aufarbeitung der Reaktionsmischung:
Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt und der Rückstand wurde über Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan-Methanol-Gradient). Ggf. wurde eine weitere Reinigung mittels präparativer HPLC durchgeführt [Säule: Kinetex C18, 5 μΜ, 100 x 300 mm; Eluent: Wasser/Acetonitril 35/65].
Tabelle 7A:
Figure imgf000055_0001
Figure imgf000056_0001
BeiIUPAC-Name / Struktur Analytische Daten spiel (Ausbeute)
rac-1- { 5-Fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] -6-methyl- LC-MS (Methode 1): Rt = 1.26
40A
lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-4-iod-5-methyl-5- min
(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- MS (ESIpos): m/z = 602 [M+H]+
Figure imgf000057_0001
(60% d. Th; Reinheit 80%)
Beispiel 41A
2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propano
Figure imgf000057_0002
8.75 g (178.6 mmol) Natriumcyanid wurden in 132 ml 2N Ammoniak-Lösung in Methanol vorgelegt. 15.0 g (159.5 mmol) 1,3-Difluoraceton und 9.55 g (178.6 mmol) Ammoniumchlorid wurden bei RT zugegeben. Die Suspension wurde 2 h bei 70°C Ölbadtemperatur gerührt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde mit 300 ml Diethylether versetzt, 10 min gerührt und vom Feststoff abfiltriert. Das Filtrat wurde in Vakuum eingeengt (50°C, 70 mbar). Es wurden 19.2 g (100% d. Th.) der Zielverbindung erhalten. Das Produkt wurde ohne weitere Aufreinigung weiter umgesetzt.
GC-MS (Methode 8): Rt = 1.78 min
MS (ESpos): m/z = 121 (M+H)+
Beispiel 42A
Benzyl-(2-cyan- 1 ,3-difluorpropan-2-yl)carbamat
Figure imgf000058_0001
5.0 g (41.6 mmol) 2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propanonitril aus Beispiel 41A wurden in 14.5 ml (83.3 mmol) /V,/V-Diisopropylefhylamin vorgelegt. 10.65 g (62.5 mmol) Chlorameisensäurebenzylester wurden bei RT langsam zugetropft und es wurde drei Tage bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit 25 ml Dichlormethan verdünnt und zu einer Lösung von 12.9 g (124.9 mmol) N-(2-Aminoethyl)ethan-l,2-diamin in 225 ml Dichlormethan bei 0°C zugetropft und 10 min gerührt. Anschließend wurden 200 ml gesättigte Ammoniumchlorid-Lösung bei RT zugetropft. Die Phasen wurden getrennt und die wässrige Phase wurde dreimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden eingeengt. Das Rohprodukt wurde anschließend über Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Cyclohexa Essigsäureethylester- Gradient). Es wurden 4.40 g (42 % d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.92 min
MS (ESpos): m/z = 255 (M+H)+
Beispiel 43A
Benzyl-[l-amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propan-2- l]carbamat
Figure imgf000058_0002
5.00 g (16.32 mmol) Benzyl-[l-amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propan-2-yl]carbamat aus Beispiel 42 Λ wurden in 80 ml abs. Ethanol bei RT vorgelegt. 3.09 g (81.62 mmol) Natriumborhydrid wurden bei RT zugegeben und es wurde 2 h bei RT gerührt. 250 ml gesättigte Ammoniumchlorid-Lösung wurden unter Eiskühlung sehr langsam zugetropft. Dann wurde 1 N wässrige Salzsäure zugegeben bis pl I 4 eingestellt war (ca. 100 ml). Anschließend wurde das Reaktionsgemisch mit gesättigter, wässriger Natriumchlorid-Lösung abgesättigt und sechsmal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden noch einmal mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Ausgangsverbindung wurde bei -18°C gelagert. Es wurden 4.16 g (83 % d. Th.; Reinheit 84%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 5 ): K, = 1.99 min
MS (ESpos): m/z = 259 (M+H)+
Beispiel 44A
3-Fluor-2-(fluormethyl)propan- 1 ,2-diamin
Figure imgf000059_0001
4.16 g (13.53 mmol) Benzyl-[l-amino-3-fluor-2-(rluormethyl)propan-2-yl]carbamat aus Beispiel 43A wurden in 12 ml l-Methyl-2-pyrrolidon vorgelegt und unter Argon mit 216 mg (0.20 mmol) 10%igem Palladium auf Aktivkohle versetzt. Das Reaktionsgemiseh wurde über Nacht bei RT und Normaldruck hydriert. Die Reaktionsmischung wurde über Celite filtriert und der Filter wurde anschließend mit 2.5 ml l-Methyl-2-pyrrolidon nachgewaschen. Die vereinigten Lösungen wurden direkt in die nächste Reaktion eingesetzt.
Es wurde mit einer Konzentration von 1.07 mol/1 (133 mg/ml) der Zielverbindung ausgegangen.
Ausführungsbeispiele :
Beispiel 1
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [ 1 -(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl- 1 H- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000059_0002
Eine Lösung von 144 mg (1.16 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2- pyrrolidon (NMP) aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/1] wurden zu 200 mg (0.29 mmol; Reinheit 82%) 2-[l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3- yl]-4-iod-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 30A zugegeben und mit 0.5 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 3.5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 22 mg (12% d. Th.; Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.82 min
MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.36 (s, 6H), 1.84 (br. s, 2H), 2.62 (d, 3H), 3.73 (d, 2H), 4.18 - 4.48 (m, 4H), 5.82 (s, 2H), 6.49 (br. s, 1H), 6.99 - 7.06 (m, 1H), 7.11 - 7.20 (m, 1H), 7.34 - 7.43 (m, 1H), 8.55 (d, 1H), 11.08 (br. s, 1H).
Beispiel 2
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [5-fluor- 1 -(2-fluorbenzyl)-6-methyl- 1H- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5 d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000060_0001
Eine Lösung von 273 mg (2.20 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in 1 -Methyl -2- pyrrolidon aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/1] wurde zu 300 mg (0.55 mmol) 2-[5-Fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-4-iod-5,5-dimethyl-5,7- dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus gegeben und mit 2.7 ml 1 -Methyl -2 -pyrrolidon verdünnt. Das Gemisch wurde 7 h bei 130°C gerührt. Die Reaktionslösung wurde direkt mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Methanol/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Es erfolgte eine weitere Reinigung mittels präparativer HPLC [Kinetex C18, 5 μΜ, 100 x 21.2 mm; Eluent: Wasser/Acetonitril/1% Ameisensäure in Wasser = 60/35/5, isokratisch]. Es wurden 40 mg (12% d. Th.; Reinheit 86%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 7): Rt = 1.06 min
MS (ESIpos): m/z = 543 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.38 (s, 6H), 2.62 (d, 3H), 3.76 (d, 2H), 4.21 - 4.31 (m, 1H), 4.36 (d, 2H), 4.47 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 6.56 (t, 1H), 7.11 - 7.27 (m, 3H), 7.32 - 7.40 (m, 1H), 8.53 (d, 1H), 11.07 (s, 1H).
Beispiel 3
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [5-fluor-6-methyl- 1 -(2,3,6-trifluorbenzyl)- 1 I I- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000061_0001
Eine Lösung von 256 mg (2.06 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in 1 -Methyl -2- pyrrolidon aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/1 wurde zu 300 mg (0.51 mmol) 2-[5-Fluor-6-methyl-l-(2,3,6-trifluorbenzyl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-4-iod-5,5-dimethyl-
5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 32A zugegeben und mit 2.5 ml 1 -. Methyl - 2-pyrrolidon verdünnt. Das Gemisch wurde 4 h bei 130°C gerührt. Die Reaktionslösung wurde direkt mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule. Laufmittel: Methanol/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 20 mg (6% d. Th.; Reinheit 86%) der Titelverbindung erhalten. LC-MS (Methode 5): Rt = 2.55 min
MS (ESIpos) : m/z = 579 [M+H] + Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.37 (s, 6H), 1.85 (br. s., 2H), 2.63 (d, 3H), 3.73 (d, 2H), 4.19 (d, IH), 4.31 (d, 2H), 4.43 (d, IH), 5.80 (s, 2H), 6.55 (t, IH), 7.18 (ddt, IH), 7.54 (ddt, IH), 8.52 (d, IH), 11.05 (s, IH).
Beispiel 4
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 - [(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] -6- memyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5,5-dimemyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrim
Figure imgf000062_0001
Eine Lösung von 169 mg (1.36 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2- pyrrolidon aus Beispiel 44 A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/l] wurden zu 200 mg (0.34 mmol) 2- { 5-Fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] -6-methyl- 1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl } -4-iod- 5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 33A gegeben und mit 0.4 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/ Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 19 mg (10% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.72 min
MS (ESIpos): m/z = 544 [M+H]+
Ί Ι-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.37 (s, 6H), 1.83 (br. s, 2H), 2.60 (d, 3H), 3.75 (d, 2H), 4.17 - 4.47 (m, 4H), 5.91 (s, 2H), 6.51 (t, IH), 7.40 - 7.47 (m, IH), 7.72 - 7.80 (m, IH), 8.28 (d, IH), 8.53 (d, IH), 11.02 (br. s, IH). Beispiel 5
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 - [(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - 1 H- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5,5-dimethyl-5 -dihydro-6H-pyrrolo[2 -d]pyrimidin-6-ori
Figure imgf000063_0001
Eine Lösung von 348 mg (2.80 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in 1 -Methyl -2- pyrrolidon (NMP) aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/1] wurden zu 450 mg (0.70 mmol; Reinheit 83%) 2-{5-Fluor-l-[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3- yl}-4-iod-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 34A gegeben und mit 1.2 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 4 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: AcetonitrilA asser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 43 mg (12% d. Th.; Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.66 min
MS (ESIpos): m/z = 530 [M+H]+
Ή-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.39 (s, 6H), 1.85 (br. s, 2H), 3.76 (d, 2H), 4.20 - 4.46 (m, 4H), 5.96 (s, 2H), 6.53 (t, 1H), 7.40 - 7.46 (m, 1H), 7.73 - 7.80 (m, 1H), 8.25 - 9.29 (m, 1H), 8.63 - 8.69 (m, 2H), 11.05 (br. s, 1H).
Beispiel 6
rac-4-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[l-(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl- lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000064_0001
Eine Lösung von 1 4 1 mg (1.14 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2- pyrrolidon aus Beispiel 44 A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/l] wurden zu 200 mg (0.29 mmol; Reinheit 88%) rac-2-[l-(2,3-Difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3- yl]-4-iod-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 39A zugegeben und mit 0.4 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 4.5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 57 mg (31% d. Th.; Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.91 min
MS (ESIpos): m/z = 615 [M+H]+
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.66 (s, 3H), 1.87 (br. s, 2H), 2.61 (d, 3H), 3.59 - 3.68 (m, 1H), 3.73 - 3.84 (m, 1H), 4.21 (d, 1H), 4.28 - 4.36 (m, 2H), 4.40 - 4.47 (m, 1H), 5.83 (s, 2H), 6.24 (br. s, 1H), 6.97 - 7.05 (m, 1H), 7.09 - 7.22 (m, 1H), 7.32 - 7.44 (m, 1H), 8.51 (d, 1H), 11.69 (br. s, 1H).
Beispiel 7
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [ 1 -(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl- lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer A)
Figure imgf000065_0001
50 mg rac-A-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[l-(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6- memyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormemyl)-5 -dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 6) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralcel OX-H, 5 μιη, 250 x 20 mm, Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 15 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm] . Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer A: 14 mg (99% Reinheit, 99% ee)
Rt = 5.36 min [Daicel Chiralcel OX-H, 5μιη, 250 x 4.6 mm; Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm].
Beispiel 8
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [ 1 -(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6-methyl- lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer B)
Figure imgf000065_0002
50 mg rac-A-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[l-(2,3-difluorbenzyl)-5-fluor-6- memyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormemyl)-5 -dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 6) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralcel OX-H, 5 μιη, 250 x 20 mm, Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 15 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm] . Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer B: 16 mg (99% Reinheit, 99% ee)
Rt = 8.31 min [Daicel Chiralcel OX-H, 5μιη, 250 x 4.6 mm; Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm].
Beispiel 9
rac- 4-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[5-fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyl-lH- pyrazolo[3,4-b]pyTidin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormemyl)-5,7-dmydro-6H-p)Trolo[2,3-d]pyrimidin-6- on
Figure imgf000066_0001
Eine Lösung von 165 mg (1.33 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in -Methyl -2- pyrrolidon aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/11 wurde zu 200 mg (0.33 mmol) rac-2-[5-Fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-4-iod-5-methyl-5- (trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 37A zugegeben und mit 1 .5 ml l-Methyl-2-pyrrolidon verdünnt. Das Gemisch wurde 5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde direkt mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Methanol/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden vom Methanol befreit und mit einer Mischung von Dichlormethan/Methanol (10/1) mehrmals extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Natriumliydrogencarbonatlösung und Natriumchlorid gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde nochmal mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule. Laufmittel: MethanolAVasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingeengt. Es wurden 37 mg (16% d. I ii.; Reinheit 85%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 7): K,= 1.11 min
MS (ESIpos): m/z = 597 [M+H]+
ΊΙ- ΜΚ (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.75 (s, 311), 1.95 (br. s, 211), 2.63 (d, 311).3.66 (dd, III), 3.86 (dd, III).4.22 (d, 1H), 4.30 - 4.36 (m, 211).4.44 (dd, III).5.80 (s, 211).6.52 (t, III).7.09 - 7.27 (m, 311), 7.32 - 7.41 (m, 1H), 8.50 (d, 1H), 11.72 (br. s, 1 H).
Beispiel lj
ent- 4-{[2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[5-fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyi-lH- pyrazolo[3,4-b]pyTidin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormemyi)-5,7-dmydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6- on (Enantiomer A)
Figure imgf000067_0001
36 mg ra<-4-( |2-Amino-3-fluor-2-( tlu()nnelliyl)propyl|amino}-2-|5-lluor-l -(2-lluorbt'ii/yl)-6- methyl- 11 l-pyra/()l()|3,4-b|pyri(l!ii-3-yl|-5-nK,thyl-5-(trinu()niiethyl)-5,7-d!hyclr()-6l l-pyrrolo|2.3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 9) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralcel O/.-ll.5 ,um.250 x 20 mm. Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol, Fluss 15 ml/min; 35°C, Detektion: 220 nm].
Enantiomer A: 7 mg (>99% Reinheit, >99% ee)
K,= 4.15 min [Daicel Chiralcel O/.-ll, 5μιη, 250 x 4.6 mm; Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% I ethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 30°C; Detektion: 270 nm].
Beispiel 11
ent- 4-{[2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[5-fluor-l-(2-fluorbenzyl)-6-methyl-lH- pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormemyl)-5,7-dmydro-6H-p)'rroio[2,3-d]pyrimidin-6- on (Enantiomer B)
Figure imgf000068_0001
36 mg ruc-4- { 12-Amino-3-lluor-2-( tluormetliyl )propy 1 |amino } -2-| 5-lluor- 1 -( 2-lluortx'n/y 1 )-6- methyl- 1 1 1-pyra/()l()| 3.4-b|pyridin-3-yl |-5-nK'tliyl-5-( trinu()nnelliyl )-5 J-(liliyclr()-6I l-pyrrolo| 2.3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 9) wurden an duraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralcel O/.-l l. 5 μ ηι. 250 x 20 mm. Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol, Fluss 15 ml/min; 35°C, Detektion: 220 nm|.
Enantiomer B: 11 mg (95% Reinheit, >99% ee)
Rt = 5.60 min [Daicel Chiralcel O/.-l l. 5μ ηι. 250 x 4.6 mm; Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 30°C; Detektion: 270 nm|.
Beispiel 12
rac-4-{ [2-Amino-3-iluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[5-fluor-6-methyl-l-(2,3,6-trifluorbenzyl)- lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrroio[2,3- d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000068_0002
Eine Lösung von 156 mg (1.26 mmol) 3-1 luor-2-( tluormetliyl Ipropan- 1.2-diamin in l-Methyl-2- pyiTolidon aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol l] wurde zu 200 mg (0.31 mmol ) /•^( -2-|5-I Ίυ()Γ-6-ιηοΐ1ιν1-1-(2. .6-ΐΓΐΠυ()ΓΓΗ.'η/ν1)-111-pyra/()k)| .4-b|pyriclin- -yl|-4-i(xl-5-inetliyl-5-
(trifluormethyl)-5,7-dmydro-6H-pyrrolo[23-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 38A gegeben und mit 1.5 ml l-Methyl-2-pyrrolidon verdünnt. Das Gemisch wurde 5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde direkt mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Lauf mittel: MethanolAVasser-Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingeengt, mit einer Mischung von Dichlormethan/Methanol (10/1) verdünnt, mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Natriumchlorid gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 84 mg (35% d. Th.; Reinheit 82%) der Titelverbindung erhalten. LC-MS (Methode 1): R, = 0.86 min
MS (ESIpos): mz = 633 [M+H]+
l-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.74 (s, 311), 1.86 (br. s, 211).2.64 (d, 311), 3.63 (dd, Iii), 3.83 (dd, 111).4.20 (d, III).4.27 - 4.35 (m, 211).4.42 (dd, III).5.82 (s, 2H), 6.53 (t, III).7.19 (ddt, III).7.54 (ddt, III).8.48 (d, 1H), 11.71 (br. s, III).
Beispiel 13
ent-4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [5-fluor-6-methyl- 1 -(2,3,6-trifluorbenzyl)- lH-pyrazolo[3,4-b]pyTidin-3-yl]-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer
Figure imgf000069_0001
84 mg rac-A-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-[5-fluor-6-methyl-l-(2,3,6- trifluorbenzyl)-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-memyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on (Beispiel 12) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt
[Säule: Daicel Chiralcel O/.-ll.5 μιη.250 x 20 mm, Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol, Fluss 15 ml/min; 35°C, Detektion: 220 nm|.
Enantiomer A: 18 mg (>99% Reinheit, >99% ee)
R, = 4.27 min [Daicel Chiralcel OZ-II.5um.250 x 4.6 mm; Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% I ethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 30°C; Detektion: 270 nm|. Beispiel 14
ent-4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [5-fluor-6-methyl- l-(2,3,6-trifluorbenzyl)- 1 1 l-pyra/()k)| 3.4-b|pyriclin-3-yl |-5-nietliyl-5-(tritlu()nnet!iyl)-5.7-cliliy(lr()-6I l-pyrrolo| 2.3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer
Figure imgf000070_0001
trifluorben/yD- l I l-pyni/()k)| 3.4-b|pyridin-3-yl |-5-ineliiyl-5-(lrinui)niielliyl )-5.7-(liliydn)-6I I- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on (Beispiel 12) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralcel O/.-l l. 5 um. 250 x 20 mm. Eluent: 80% iso-Hexan, 20% Ethanol, Fluss 15 ml/min; 35°C, Detektion: 220 nm|.
Enantiomer B: 19 mg (>99% Reinheit, ca. 98% ee)
Rt = 4.99 min [Daicel Chiralcel O/.-l l. 5μ ιη. 250 x 4.6 mm; Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% I Methylamin; Fluss 1.0 ml/min; 30°C; Detektion: 270 nm|.
Beispiel 15
rac-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 - [(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - 6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000071_0001
Eine Lösung von 132 mg (1.06 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in 1 -Methyl -2- pyrrolidon aus Beispiel 44 A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/l] wurden zu 200 mg (0.27 mmol; Reinheit 80%) rac-2-{5-Fluor-l-[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl]-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4- b]pyridin-3-yl}-4-iod-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 40A gegeben und mit 0.4 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 4.5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Acetonitril/Wasser- Gradient unter Zusatz von 0.1% TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Der Rückstand wurde nochmals mittels Dickschichtchromatographie gereinigt (Laufmittel: Dichlormethan/2N Ammoniak in Methanol = 10/1). Es wurden 37 mg (23% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.81 min
MS (ESIpos): m/z = 598 [M+H]+
' l l-NM R (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.73 (s, 3H), 1.88 (br. s, 2H), 2.61 (d, 3H), 3.63 - 3.70 (m, 1H), 3.82 - 3.88 (m, 1H), 4.22 (d, 1H), 4.30 - 4.36 (m, 2H), 4.40 - 4.46 (m, 1H), 5.94 (s, 2H), 6.49 (t, 1H), 7.40 - 7.46 (m, 1H), 7.73 - 7.79 (m, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.50 (d, 1H), 11.68 (br. s, 1H).
Beispiel 16
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - 6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-memyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer A)
Figure imgf000072_0001
32 mg rac-4-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-{5-fluor-l-[(3-fluorpyridin-2- yl)memyl]-6-memyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dmydro-6H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on (Beispiel 15) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralpak AZ-H, 5 μηι, 250 x 30 mm, Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 30 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm]. Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer A: 14 mg (99% Reinheit, 99% ee)
Rt = 3.97 min [Daicel Chiralpak AZ-H, 5μηι, 250 x 4.6 mm; Eluent: 30% iso-Hexan, 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm].
Beispiel 17
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - 6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer
Figure imgf000072_0002
32 mg rac-A-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-{5-fluor-l-[(3-fluorpyridin-2- yl)methyl]-6-methyl-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on (Beispiel 15) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralpak AZ-H, 5 μηι, 250 x 30 mm, Eluent: 70% iso-Hexan, 30% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 30 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm]. Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer B: 15 mg (95% Reinheit, 98% ee)
Rt = 6.33 min [Daicel Chiralpak AZ-H, 5μηι, 250 x 4.6 mm; Eluent: 30% iso-Hexan, 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm].
Beispiel 18
rac-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 - [(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on
Figure imgf000073_0001
Eine Lösung von 148 mg (1.20 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2- pyrrolidon aus Beispiel 44 A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/l] wurden zu 200 mg (0.34 mmol) rac-1- { 5-Fluor- 1 - [(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl } -4-iod-5- methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 36A gegeben und mit 0.4 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 4.5 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: AcetonitrilA asser-Gradient unter Zusatz von 0.1 % TFA). Die Produktfraktionen wurden eingedampft. Der erhaltene Rückstand wurde in Dichlormethan und wenig Methanol aufgenommen und zweimal mit gesättigter, wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten wässrigen Phasen wurden zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Es wurden 49 mg (25% d. Th.; Reinheit ca. 92%) der Titelverbindung erhalten.
LC-MS (Methode 1): Rt = 0.77 min MS (ESIpos): m/z = 584 [M+H]+
ΊΙ-ΝΜΚ (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.74 (s, 311).1.89 (br. s, 211).3.64 - 3.71 (m, Iii).3.81 - 3.88 (m, III).4.22 (d, III).4.30 - 4.36 (m, 211).4.40 - 4.46 (m, III).5.98 (s, 211).6.52 (t, 1H), 7.40 - 7.46 (m, III).7.73 - 7.79 (m, III).8.26 (d, III).8.59 - 8.63 (m, III).8.68 - 8.71 (m, III).11.70 (br. s, III).
Beispiel 19
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- { 5-fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer
Figure imgf000074_0001
36 mg rac-A-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amino}-2-{5-fluor-l-[(3-fluorpyridin-2- yl)methyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 18) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralpak AZ-H, 5 μιη, 250 x 30 mm, Eluent: 40% iso-Hexan, 60% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 30 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm]. Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer A: 13 mg (99% Reinheit, 99%ee)
Rt= 4.05 min [Daicel Chiralpak AZ-H, 5μιη, 250 x 4.6 mm; Eluent: 30% iso-Hexan, 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm].
Beispiel 20
ent-A- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- {5-fluor- 1 -[(3-fluorpyridin-2-yl)methyl] - lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-methyl-5-(trifluormethyl)-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Enantiomer B)
Figure imgf000075_0001
36 mg rac-4-{ [2-Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl]amm^
yl)memyl]-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl}-5-memyl-5-(trifluormethyl)-5 -dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on (Beispiel 18) wurden an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralpak AZ-H, 5 μιη, 250 x 30 mm, Eluent: 40% iso-Hexan, 60% Ethanol + 0.2% Diethylamin, Fluss 30 ml/min; 40°C, Detektion: 220 nm]. Die Produktfraktionen wurden auf Trockeneis aufgefangen, eingedampft und anschließend lyophilisiert.
Enantiomer B: 17 mg (ca. 92% Reinheit, 97%ee)
Rt = 5.56 min [Daicel Chiralpak AZ-H, 5μιη, 250 x 4.6 mm; Eluent: 30% iso-Hexan, 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin; Fluss 1.0 ml/min; 40°C; Detektion: 220 nm] .
Beispiel 21
4- { [2- Amino-3-fluor-2-(fluormethyl)propyl] amino } -2- [6-chlor- 1 -(2-fluorbenzyl)- 1 H-indazol-3-yl] - 5,5-dimethyl-5,7-dihydro- -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-on Trifluoracetat
Figure imgf000075_0002
Eine Lösung von 70 mg (0.57 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2- pyrrolidon aus Beispiel 44A [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/11 wurden zu 80 mg (0.14 mmol) 2-[6-Chlor-l-(2-fluorbenzyl)-lH-indazol-3-yl]-4-iod-5,5-dimethyl-5,7-dihydro-6H-pyrrolo[2,3- d]pyrimidin-6-on aus Beispiel 35A gegeben und mit 0.2 ml l-Methyl-2-pyrrolidon (NMP) verdünnt. Das Gemisch wurde 4 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Anschließend wurden nochmals eine Lösung von 35 mg (0.28 mmol) 3-Fluor-2-(fluormethyl)propan-l,2-diamin in l-Methyl-2-pyrrolidon aus Beispiel 44 Λ [Annahme der Konzentration: 1.07 mol/l] hinzugegeben und es wurde 2 h bei 130°C in der Mikrowelle gerührt. Die Reaktionslösung wurde mit Wasser/Acetonitril/TFA versetzt und mittels präparativer HPLC gereinigt (RP18 Säule, Laufmittel: Acetonitril/Wasser-Gradient unter Zusatz von 0.1 % TFA). Es wurden 3 mg (3% d. Th.; Reinheit ca. 93%) der Titelverbindung erhalten. LC-MS (Methode 1): Rt = 0.84 min
MS (ESIpos): m/z = 544.4 [M+H]+ Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.38 (s, 6H), 3.75 - 3.81 (m, 2H), 4.58 - 4.69 (m, 2H), 4.71 - 4.82 (m, 2H), 5.83 (s, 2H), 6.90 (t, 1H), 7.06 - 7.11 (m, 1H), 7.12 - 7.18 (m, 1H), 7.21 - 7.28 (m, 1H), 7.32 - 7.42 (m, 2H), 7.94 (s, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.98 (br. s, 3H), 11.22 (s, 1H).
B. Bewertung der pharmakologischen Wirksamkeit
Im Folgenden werden die nachstehenden Abkürzungen verwendet:
BSA Bovines Serumalbumin
EDTA Efhylendiamintetraessig '
Micro Curie
Tris Tris(hydroxymethyl)-aminomethan
Die pharmakologische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden:
B-l . Gefäßrelaxierende Wirkung in vitro
Die Bestimmung der relaxierenden Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen an isolierten Gefäßen wurde, wie in JP Stasch et al., Br J Pharmacol. 2002; 135, 333-343 beschrieben, durchgeführt. Kaninchen werden durch Nackenschlag betäubt und entblutet. Die Aorta wird ent- nommen, von anhaftendem Gewebe befreit, in 1.5 mm breite Ringe geteilt und einzeln unter einer Vorspannung in 5 ml-Organbäder mit 37°C warmer, Carbogen-begaster Krebs-Henseleit-Lösung folgender Zusammensetzung gebracht (jeweils mM): Natriumchlorid: 119; Kaliumchlorid: 4.8; Calciumchlorid-Dihydrat: 1 ; Magnesiumsulfat-Heptahydrat: 1.4; Kaliumdihydrogenphosphat: 1.2; Natriumhydrogencarbonat: 25; Glucose: 10. Die Kontraktionskraft wird mit Statham UC2-Zellen erfasst, verstärkt und über A/D- Wandler (DAS- 1802 HC, Keithley Instruments München) digitalisiert sowie parallel auf Linienschreiber registriert.
Zur Erzeugung einer Kontraktion wird Phenylephrin dem Bad kumulativ in ansteigender Konzentration zugesetzt. Nach mehreren Kontrollzyklen wird die zu untersuchende Substanz in jedem weiteren Durchgang in jeweils steigender Dosierung zugesetzt und die Höhe der Kontraktion mit der Höhe der im letzten Vordurchgang erreichten Kontraktion verglichen. Daraus wird die Konzentration errechnet, die erforderlich ist, um die Höhe des Kontrollwertes um 50% zu reduzieren (IC5o-Wert). Das Standardapplikations volumen beträgt 5 μΐ, der DMSO-Anteil in der Badlösung entspricht 0.1%.
B-2. Wirkung an rekombinanter Guanylatcyclase-Reporterzelllinie Die zelluläre Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen wird an einer rekombinanten Guanylatcyclase-Reporterzelllinie, wie in F. Wunder et al., Anal. Biochem. 339, 104-112 (2005) beschrieben, bestimmt. Repräsentative Werte (MEC = minimal effektive Konzentration) für die erfindungsgemäßen Verbindungen sind in der nachstehenden Tabelle (Tabelle 1 ; zum Teil als Mittelwerte aus Einzelbestimmungen) wiedergegeben:
Tabelle 1 :
Figure imgf000078_0002
Figure imgf000078_0001
B-3. Inhibition der humanen Phosphodiesterase 5 (PDE 5)
PDE 5-Präparationen werden aus humanen Plättchen durch Aufschluss (Microfluidizer®, 800 bar, 3 Passagen), gefolgt von Zentrifugation (75000 g, 60 min, 4°C) und Ionenaustauscher- Chromatographie des Überstandes auf einer Mono Q 10/10 Säule (linearer Natriumchlorid- Gradient, Elution mit einer 0.2-0.3M Lösung von Natriumchlorid in Puffer (20 mM Hepes pH 7.2, 2 mM Magnesiumchlorid) gewonnen. Fraktionen, die PDE 5 Aktivität aufweisen, werden vereinigt (PDE 5-Präparat) und bei -80°C gelagert.
Die Testsubstanzen werden zur Bestimmung ihrer in vitro Wirkung an humaner PDE 5 in 100% DMSO aufgelöst und seriell verdünnt. Typischerweise werden Verdünnungsreihen (1 :3) von 200 μΜ bis 0.091 μΜ hergestellt (resultierende Endkonzentrationen im Test: 4 μΜ bis 0.0018 μΜ). Jeweils 2 μΕ der verdünnten Substanzlösungen werden in die Vertiefungen von Mikrotiterplatten (Isoplate-96 /200W; Perkin Elmer) vorgelegt. Anschließend werden 50 μΐ^ einer Verdünnung des oben beschriebenen PDE 5-Präparats hinzugefügt. Die Verdünnung des PDE 5 Präparats wird so gewählt, dass während der späteren Inkubation weniger als 70% des Substrates umgesetzt wird (typische Verdünnung: 1: 100; Verdünnungspuffer: 50 mM Tris/Salzsäure pH 7.5, 8.3 mM Magnesiumchlorid, 1.7 mM EDTA, 0.2% BSA). Das Substrat [8-3H] cyclisches Guanosin-3',5'- monophosphat (1 μΰί/μΕ; Perin Elmer) wird 1 :2000 mit Assaypuffer (50 mM Tris/Salzsäure pH 7.5, 8.3 mM Magnesiumchlorid, 1.7 mM EDTA) auf eine Konzentration von 0.0005μΟ/μΕ verdünnt. Durch Zugabe von 50 μΕ (0.025 μθϊ) des verdünnten Substrates wird die Enzymreaktion schließlich gestartet. Die Testansätze werden für 60 min bei Raumtemperatur inkubiert und die Reaktion durch Zugabe von 25 μΕ einer Suspension von 18 mg/mL Yttrium Scintillation Proximity Beads in Wasser (Phosphodiesterase beads für SPA Assays, RPNQ 0150, Perkin Elmer) gestoppt. Die Mikrotiterplatten werden mit einer Folie versiegelt und für 60 min bei Raumtemperatur stehengelassen. Anschließend werden die Platten für 30 s pro Vertiefung in einem Microbeta Szintillationszähler (Perkin Elmer) vermessen. ICso-Werte werden anhand der graphischen Auftragung der Substanzkonzentration gegen die prozentuale PDE 5-Inhibition bestimmt.
Repräsentative Werte ICso-Werte für die erfindungsgemäßen Verbindungen sind in der nachstehenden Tabelle (Tabelle 2; zum Teil als Mittelwerte aus Einzelbestimmungen)) wiedergegeben:
Tabelle 2:
Beispiel Nr. ICso [nM]
1 52
2 1 60
3 1 94
4 1 80
5 70
6 32
7 120
8 120
Figure imgf000079_0001
10 290 B-4. Radiotelemetrische Blutdruckmessung an wachen, spontan hypertensiven Ratten
Für die im Folgenden beschriebene Blutdruckmessung an wachen Ratten wird ein im Handel erhältliches Telemetriesystem der Firma DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA eingesetzt.
Das System besteht aus 3 Hauptkomponenten:
— Implantierbare Sender (Physiotel® Telemetrietransmitter)
— Empfänger (Physiotel® Receiver), die über einen Multiplexer (DSI Data Exchange Matrix ) mit einem Datenakquisitionscomputer verbunden sind.
— Die Telemetrieanlage ermöglicht eine kontinuierliche Erfassung von Blutdruck Herzfrequenz und Körperbewegung an wachen Tieren in ihrem gewohnten Lebensraum.
Tiermaterial
Die Untersuchungen werden an ausgewachsenen weiblichen spontan hypertensiven Ratten (SHR Okamoto) mit einem Körpergewicht von >200 g durchgeführt. SHR/NCrl von Okamoto Kyoto School of Medicine, 1963 wurden aus männlichen Wistar Kyoto Ratten mit stark erhöhtem Blutdruck und weiblichen mit leicht erhöhtem Blutdruck gekreuzt und in der Fl 3 an die U.S. National Institutes of Health abgegeben.
Die Versuchstiere werden nach Senderimplantation einzeln in Makroion - Käfigen Typ 3 gehalten. Sie haben freien Zugang zu Standardfutter und Wasser. Der Tag - Nacht - Rhythmus im Versuchslabor wird per Raumbeleuchtung um 6:00 Uhr morgens und um 19:00 Uhr abends gewechselt.
Senderimplantation
Die eingesetzten Telemetriesender TAH PA - C40 werden den Versuchstieren mindestens 14 Tage vor dem ersten Versuchseinsatz unter aseptischen Bedingungen chirurgisch implantiert. Die so instrumentierten Tiere sind nach Abheilen der Wunde und Einwachsen des Implantats wiederholt einsetzbar.
Zur Implantation werden die nüchternen Tiere mit Pentobabital (Nembutal, Sanofi: 50mg/kg i.p. ) narkotisiert und an der Bauchseite weiträumig rasiert und desinfiziert. Nach Eröffnung des Bauchraumes entlang der Linea alba wird der flüssigkeitsgefüllte Meßkatheter des Systems oberhalb der Bifurcation nach cranial in die Aorta descendens eingesetzt und mit Gewebekleber (VetBonD TM, 3M) befestigt. Das Sendergehäuse wird intraperitoneal an der Bauchwandmuskulatur fixiert und die Wunde wird schichtweise verschlossen.
Postoperativ wird zur Infektionsprophylaxe ein Antibiotikum verabreicht (Tardomyocel COMP Bayer 1ml kg s.c.) Substanzen und Lösungen
Wenn nicht anders beschrieben werden die zu untersuchenden Substanzen jeweils einer Gruppe von Tieren (n = 6) per Schlundsonde oral verabreicht. Entsprechend einem Applikationsvolumen von 5 ml/kg Körpergewicht werden die Testsubstanzen in geeigneten Lösungsmittelgemischen gelöst oder in 0.5%-iger Tylose suspendiert. Eine Lösungsmittel- behandelte Gruppe von Tieren wird als Kontrolle eingesetzt.
Versuchsablauf
Die vorhandene Telemetrie - Meßeinrichtung ist für 24 Tiere konfiguriert. Jeder Versuch wird unter einer Versuchsnummer registiert (VJahr Monat Tag).
Den in der Anlage lebenden instrumentierten Ratten ist jeweils eine eigene Empfangsantenne zugeordnet (1010 Receiver, DSI).
Die implantierten Sender sind über einen eingebauten Magnetschalter von außen aktivierbar. Sie werden bei Versuchsvorlauf auf Sendung geschaltet. Die ausgestrahlten Signale können durch ein Datenakquisitionssystem (Dataquest TM A.R.T. for WINDOWS, DSI) online erfasst und entsprechend aufgearbeitet werden. Die Ablage der Daten erfolgt jeweils in einem hierfür eröffneten Ordner der die Versuchsnummer trägt.
Im Standardablauf werden über je 10 Sekunden Dauer gemessen:
- Systolischer Blutdruck (SBP)
- Diastolischer Blutdruck (DBP)
- Arterieller Mitteldruck (MAP)
— Herzfrequenz (HR)
- Aktivität (ACT).
Die Messwerterfassung wird rechnergesteuert in 5 Minuten Abständen wiederholt. Die als Absolutwert erhobenen Quelldaten werden im Diagramm mit dem aktuell gemessenen Barometerdruck (Ambient Pressure Reference Monitor; APR-1) korrigiert und in Einzeldaten abgelegt. Weitere technische Details sind der umfangreichen Dokumentation der Herstellerfirma (DSI) zu entnehmen. Wenn nicht anders beschrieben erfolgt die Verabreichung der Prüfsubstanzen am Versuchstag um 9.00 Uhr. Im Anschluss an die Applikation werden die oben beschriebenen Parameter 24 Stunden gemessen.
Auswertung Nach Versuchsende werden die erhobenen Einzeldaten mit der Analysis-Software (DATAQUEST TM A. R.T. TM ANALYSIS) sortiert. Als Leerwert werden hier 2 Stunden vor Applikation angenommen, so dass der selektierte Datensatz den Zeitraum von 7:00 Uhr am Versuchstag bis 9:00 Uhr am Folgetag umfasst.
Die Daten werden über eine voreinstellbare Zeit durch Mittel Wertbestimmung geglättet (15 Minuten Average) und als Textdatei auf einen Datenträger übertragen. Die so vorsortierten und komprimierten Messwerte werden in Excel- Vorlagen übertragen und tabellarisch dargestellt. Die Ablage der erhobenen Daten erfolgt pro Versuchstag in einem eigenen Ordner, der die Versuchsnummer trägt. Ergebnisse und Versuchsprotokolle werden in Papierform nach Nummern sortiert in Ordnern abgelegt. Literatur
Klaus Witte, Kai Hu, Johanna Swiatek, Claudia Müssig, Georg Ertl and Björn Lemmer: Experimental heart failure in rats: effects on cardio vascular circadian rhythms and on myocardial ß-adrenergic signaling. Cardiovasc Res 47 (2): 203-405, 2000; Kozo Okamoto: Spontaneous hypertension in rats. Int Rev Exp Pathol 7: 227- 270, 1969; Maarten van den Buuse: Circadian Rhythms of Blood Pressure, Heart Rate, and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio-Telemetry. Physiology & Behavior 55(4): 783-787, 1994
B-5. Bestimmung der Organ-protektiven Wirkungen im Langzeitversuch an Ratten.
Die Organ-protektiven Wirkungen der erfindungsgemäßen Verbindungen werden in einem therapeutisch relevanten„low nitric oxide (NO) / high renin" Hypertoniemodell an der Ratten gezeigt. Die Studie wurde in Anlehnung an die kürzlich erschienene Publikation durchgeführt (Sharkovska Y, et al. J Hypertension 2010; 28: 1666-1675). Dabei werden Renin-transgene Ratten (TGR(mRen2)27), denen der NO-Synfhase-Inhibitor L-NAME über das Trinkwasser verabreicht wurde, gleichzeitig mit der erfindungsgemäßen Verbindung oder Vehikel über mehrere Wochen behandelt. Haemodynamische und renale Parameter werden während des Behanlungszeitraums bestimmt. Am Ende der Langzeitstudie wird die Organprotektion (Niere, Lunge, Herz, Aorta) durch histopathologische Untersuchungen, Biomarker, Expressionsanalysen und kardiovaskuläre Plasmaparameter gezeigt. B-6. Messungen des pulmonal-arteriellen Drucks (PAP) in wachen Hunden unter Hypo xiebedin gun gen
Für die im Folgenden beschriebene Blutdruckmessung an wachen Hunden wird zum Beispiel ein Telemetriesystem der Firma DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA eingesetzt. Das System besteht aus implantierbaren Drucksendern, Empfänger und einem Daten- akquisitionscomputer. Die Telemetrieanlage ermöglicht eine kontinuierliche Erfassung von Blutdrücken und der Herzfrequenz an wachen Tieren. Die eingesetzten Telemetriesender werden den Versuchstieren vor dem ersten Versuchseinsatz unter aseptischen Bedingungen chirurgisch implantiert. Die so instrumentierten Tiere sind nach Abheilen der Wunde und Einwachsen des Implantats wiederholt einsetzbar. Die Untersuchungen werden an erwachsenen, männlichen Beagle Hunden durchgeführt. Technische Details können der Dokumentation der Herstellerfirma (DSI) entnommen werden.
Substanzen und Lösungen
Die zu untersuchenden Substanzen werden jeweils einer Gruppe von Hunden (n = 3-6) oral mittels einer Gelatine-Kapsel oder intravenös in geeigneten Lösungsmittelgemischen verabreicht. Eine Vehikel- behandelte Gruppe von Tieren wird als Kontrolle eingesetzt.
Versuchsablauf
Für die Messungen unter Hypoxiebedingungen werden die Tiere in eine Kammer überführt, in der eine hypoxische Atmosphäre (ca. 10% Sauerstoffgehalt) herrscht. Diese wird mit kommerziell erhältlichen Hypoxiegeneratoren (Firma Hoehenbalance, Cologne, Germany) erzeugt. Im Standardablauf werden z.B. ein und fünf Stunden nach Substanzgabe die Hunde für 30 min in die Hypoxiekammer überführt. Dabei erfolgt die Messung von Drücken und Herzfrequenz mittels Telemetrie ca. 10 min vor und nach Eintritt in die Hypoxiekammer, als auch während des Aufenthaltes in der Hypoxiekammer. Auswertung
In gesunden Hunden kommt es unter Hypoxie zu einem schnellen Anstieg des PAP. Durch die Gabe von Substanzen kann dieser Anstieg reduziert werden. Für die Quantifizierung des PAP Anstieges und der Herzfrequenz- bzw. systemischen Blutdruck-Unterschiede werden die durch Mittelwertbestimmung geglätteten Daten vor und während der Hypoxieperiode verglichen. Die graphische Darstellung der Verläufe der gemessenen Parameter erfolgt mit der Prism Software (GraphPad, USA). B-7. Bestimmung pharmakokinetischer Kenngrößen nach intravenöser und oraler Gabe
Die pharmakokinetischen Parameter der erfindungsgemäßen Verbindungen werden in männlichen CD- 1 -Mäusen, männlichen Wister-Ratten, weiblichen Beagle-Hunden und weiblichen Cynomolgus-Affen bestimmt. Die intravenöse Gabe erfolgt bei Mäusen und Ratten mittels einer speziesspezifischen Plasma/DMSO-Formulierung sowie bei Hunden und Affen mittels einer Wasser/PEG400/Ethanol-Formulierung. Die orale Gabe der gelösten Substanz mittels Schlundsonde wird in allen Spezies basierend auf einer Wasser/PEG400/Ethanol-Formulierung durchgeführt. Den Ratten wird zur vereinfachten Blutabnahme vor der Substanzgabe ein Silikonkatheter in die rechte Vena jugularis externa gelegt. Die Operation erfolgt mindestens einen Tag vor dem Versuch unter Isofluran-Narkose und unter Gabe eines Analgetikums (Atropin/Rimadyl (3/1) 0.1 mL s.c). Die Blutabnahme (in der Regel mehr als 10 Zeitpunkte) erfolgt in einem Zeitfenster, welches terminale Zeitpunkte von mindestens 24 bis maximal 72 Stunden nach Substanzgabe beinhaltet. Das Blut wird bei der Entnahme in heparinisierte Röhrchen geleitet. So dann wird mittels Zentrifugation das Blutplasma gewonnen und gegebenenfalls bis zur weiteren Bearbeitung bei -20°C gelagert.
Den Proben der erfindungsgemäßen Verbindungen, Kalibrierproben und Qualifier wird ein interner Standard zugesetzt (dies kann auch eine chemisch nicht verwandte Substanz sein) und es folgt eine Proteinfällung mittels Acetonitril im Überschuss. Nach Zugabe einer Puffer-Lösung, die an die LC- Bedingungen angepasst ist und folgendem Vortexen, wird bei 1000 g zentrifugiert. Der Überstand wird mittels LC-MS(/MS) unter Verwendung von C18-reversed-phase-Säulen und variablen Eluenten-Gemischen vermessen. Die Quantifizierung der Substanzen erfolgt anhand der Peakhöhen oder -flächen aus extrahierten Ionenchromatogrammen spezifischer selected ion monitoring- Experimente oder hochaufgelöster LC-MS Experimente.
Aus den ermittelten Plasmakonzentration-Zeit- Verläufen werden die pharmakokinetischen Kenngrößen wie AUC, Cmax, F (Bioverfügbarkeit), ti 2 (terminale Halbwertszeit), MRT (Mean Residence Time) und CL (Clearance) mittels eines validierten pharmakokinetischen Rechenprogramms berechnet.
Da die Substanzquantifizierung in Plasma durchgeführt wird, muss die Blut/Plasma- Verteilung der Substanz bestimmt werden, um die pharmakokinetischen Parameter entsprechend anpassen zu können. Dazu wird eine definierte Menge Substanz in heparinisiertem Vollblut der entsprechenden Spezies für 20 min im Taumelrollenmischer inkubiert. Das Plasma wird durch Zentrifugation bei 1000 g gewonnen. Nach Messung der Konzentrationen in Plasma und Blut (mittels LC-MS(/MS); s.o.), wird durch Quotientenbildung der Cßiut/Cpiasma-Wert ermittelt. B-8. Metabolismus-Untersuchung
Zur Bestimmung des Metabolismus-Profils der erfindungsgemäßen Verbindungen werden diese mit rekombinanten humanen Cytochrom P450 (CYP) Enzymen, Lebermikrosomen oder mit primären frischen Hepatozyten verschiedener Tierspezies (z.B. Ratte, Hund) als auch humanen Ursprungs inkubiert, um Informationen über einen möglichst kompletten hepatischen Phase I- und Phase II-Metabolismus sowie über die am Metabolismus beteiligten Enzyme zu erhalten und zu vergleichen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen wurden mit einer Konzentration von etwa 0.1-10 μΜ inkubiert. Dazu wurden Stammlösungen der erfindungsgemäßen Verbindungen mit einer Konzentration von 0.01-1 mM in Acetonitril hergestellt, und dann mit einer 1 : 100 Verdünnung in den Inkubationsansatz pipettiert. Die Lebermikrosomen und rekombinanten Enzyme wurden in 50 mM Kaliumphosphatpuffer pH 7.4 mit und ohne NADPH-generierendem System, bestehend aus 1 mM NADP+, 10 mM Glucose-6-phosphat und 1 Unit Glucose-6-phosphat Dehydrogenase, bei 37°C inkubiert. Primäre Hepatozyten wurden in Suspension in Williams E Medium ebenfalls bei 37°C inkubiert. Nach einer Inkubationszeit von 0 - 4h wurden die Inkubationsansätze mit Acetonitril abgestoppt (Endkonzentration ca. 30%) und das Protein bei ca. 15000 x g abzentrifugiert. Die so abgestoppten Proben wurden entweder direkt analysiert oder bis zur Analyse bei -20°C gelagert.
Die Analyse erfolgt mittels Hochleistungsflüssigkeits-Chromatographie mit Ultraviolett- und massenspektrometrischer Detektion (HPLC-UV-MS/MS). Dazu werden die Überstände der Inkubationsproben mit geeigneten C18-reversed-phase-Säulen und variablen Eluenten-Gemischen aus Acetonitril und 10 mM wässriger Ammoniumformiat- Lösung oder 0.05 % Ameisensäure chromatographiert. Die UV-Chromatogramme in Verbindung mit massenspektrometrischen Daten dienen zur Identifizierung, Strukturaufklärung und quantitativen Abschätzung der Metabolite, und der quantitativen metabolischen Abnahme der erfindungsgemäßen Verbindung in den Inkubationsansätzen.
B-9. Caco-2 Permeabilitäts-Test
Die Permeabilität einer Testsubstanz wurde mit Hilfe der Caco-2 Zelllinie, einem etablierten in vitro Modell für Permeabilitäts vorhersagen an der gastrointestinalen Barriere, bestimmt [Artursson, P. and Karlsson, J. (1991). Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells. Biochem. Biophys.175 (3), 880-885]. Die Caco-2 Zellen (ACC No. 169, DSMZ, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen, Braunschweig, Deutschland) wurden in 24-Well Platten mit Einsatz ausgesät und 15 bis 16 Tage kultiviert. Für die Permeabilitätsstudien wurde die Testsubstanz in DMSO gelöst und mit Transportpuffer (Hanks Buffered Salt Solution, Gibco/Invitrogen, mit 19.9 mM Glukose und 9.8 mM HEPES) auf die finale Testkonzentration verdünnt. Um die Permeabilität von apikal nach basolateral (PappA-B) der Testsubstanz zu bestimmen, wurde die Lösung mit der Testsubstanz auf die apikale Seite des Caco-2 Zellmonolayers gegeben und Transportpuffer auf die basolaterale Seite. Um die Permeabilität von basolateral nach apikal (PappB-A) der Testsubstanz zu bestimmen, wurde die Lösung mit der Testsubstanz auf die basolaterale Seite des Caco-2 Zellmonolayers gegeben und Transportpuffer auf die apikale Seite. Zu Beginn des Experiments wurden Proben aus dem jeweiligen Donor-Kompartiment genommen, um die Massenbilanz sicher zu stellen. Nach einer Inkubation von zwei Stunden bei 37° C wurden Proben aus beiden Kompartimenten genommen. Die Proben wurden mittels LC-MS/MS analysiert und die apparenten Permeabilitätskoeffizienten (PapP) berechnet. Die Permeabilität von Lucifer Yellow wurde für jeden Zellmonolayer bestimmt, um die Integrität der Zellschicht sicher zu stellen. Die Permeabilität von Atenolol (Marker für niedrige Permeabilität) und Sulfasalazin (Marker für aktive Exkretion) wurde in jedem Testlauf als Qualitätskontrolle mitbestimmt. B-10. Löslichkeitsbestimmung von Substanzen in Puffer pH 6.5
2 mg einer Prüfsubstanz werden mit 40 μΐ DMSO versetzt [50g/L]. Aus dieser Lösung werden 10 μΐ entnommen und in 990 μΐ PBS-Puffer pH 6.5 eingebracht (c=500 μg/ml). Diese Lösung/Suspension wird für 24 h bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach Ultrazentrifugation bei 114000 g für 30 min wird der Überstand abgenommen, mit ACNA asser 8:2 verdünnt und per LC-MSMS analysiert. Für die Kalibrierung werden ebenfalls 10 μΐ aus der DMSO-Stammlösung entnommen und in 823 μΐ DMSO eingebracht (c=600μg/ml). Quantifiziert wird über eine Fünf-Punkt-Kalibrationskurve .
Geräte für die LC-MSMS-Quantifizierung:
AB Sciex TRIPLE QUAD 4500; Agilent 1260 mit primärer Pumpe (G1312B Infinity), Degasser (G4225a Infinity), Säulenthermostat (G1316C Infinity); CTC Analytics PAL Injektionssystem THC- xt
HPLC-Methode:
Eluent:
A: 0.5 ml Ameisensäure (50%ig) / L Wasser
B: 0.5 ml Ameisensäure (50%ig) / L Acetonitril
Gradient:
Zeit [min] % A %B
0 90 10
0.5 5 95
0.84 5 95 0.85 90 10
1.50 90 10
Fluss: 2,5 ml
Injektionsvolumen: 5 μΐ
Säule: Waters OASIS HLB, 2.1 x 20 mm, 25 μ
Säulentemperatur: 30°C
Splitter (vor MS) 1:20
MS-Methoden:
How Injection Analysis (FIA) für die Optimierung
Multiple Reaction Monitoring (MRM) für die Quantifizierung
Eluent:
A: 0.5 ml Ameisensäure (50%ig)/ L Wasser
B: 0.5 ml Ameisensäure (50%ig) / L Acetonitril
Fluss: 0.25 ml
Injektionsvolumen: 5 μΐ
Säule: Edelstahlkapillare
Kapillartemperatur: 22°C
Repräsentative Löslichkeiten der erfindungsgemäßen Verbindungen sind in Tabelle 3 angegeben. Tabelle 3
Beispiel Löslichkeit [mg/1]
1 7.6
2 5.1
4 260.5
5 278.4 B-l l. Löslichkeitsbestimmung von Substanzen in Puffern mit unterschiedlichen pH-Werten
Pro Substanz und Puffer werden jeweils 0.5 - 0.6 mg exakt eingewogen (8 Einwaagen). Eine weitere Einwaage von 0.5 - 0.6 mg wird für die DMSO-Kalibrationslösung (Einwaage 9) benötigt. Es wird jeweils soviel Puffer zu der Probe gegeben, dass man eine Konzentration von c = 500μg/ml erhält. Diese Probelösung wird für 24 h bei RT und 1400 rpm geschüttelt.
Das Eppendorfgefäß mit der Einwaage für die Kalibrierung wird mit DMSO bis zu einer Konzentration c=600 μg/ml aufgefüllt. Aus dieser Stammlösung werden 2 Kalibrationslösungen angesetzt. In ein 2 ml Eppendorf-Gefäß werden 1000 μΐ DMSO vorgelegt und 34.4 μΐ der Stammlösung dazu pipettiert (c= 20 μg/ml). Von dieser Lösung (c=20 μg/ml) werden 71.4 μΐ in ein weiteres 2 ml Eppendorf-Gefäß zu 500 μΐ DMSO gegeben (c= 2^g/ml). Beide Kalibrierlösungen werden in HPLC-Vials überführt.
Nach dem Schütteln der Probelösungen werden jeweils 200 μΐ des Überstandes in ein Zentrifugenröhrchen überführt und bei 114000 g für 30 min zentrifugiert. Dann werden 150 μΐ des Überstandes abgenommen, mit DMSO 1:5 und 1: 100 verdünnt und in HPLC-Vials überführt. Die beiden Kalibrierlösungen und die verdünnten Probenlösungen werden per HPLC analysiert. Quantifiziert wird über die entsprechenden Peakflächen.
Lösemittel und Puffer
Dest. Wasser
Perchlorsäure (Fluka; 77227)
Acetonitril (Leitungsware)
DMSO (Merck; 8.02912.2500)
Puffer
pH 1 HCl-Puffer (Fluka)
pH 2 Citrat-Puffer (Fluka)
pH 4 Citrat-Puffer (Fluka)
pH 5 Citrat-Puffer (Fluka)
pH 6 PBS-Puffer (Fluka)
pH 7 PBS-Puffer (Fluka)
pH 8 Borsäure-Puffer (Fluka)
pH 10 Borsäure-Puffer (Fluka)
Geräte
Agilent 1100 oder vergleichbares Gerät mit UV-Detektion, variable Wellenlänge (z.B. Dioden- Array) Ultraschallbad
Vibromix von Janke & Kunkel Thermomixer von Eppendorf
HPLC-Methode:
Eluent A: 5 ml HCIO4/L Wasser
Eluent B: Acetonitril
Gradient:
Zeit [min] A [%] B [ [%]
0.0 98 2
0.5 98 2
4.5 10 90
6.5 10 90
6.7 98 2
7.5 98 2
Säule: Kromasil 100 C18, 60 x 2.1mm, 3.5μιη
Säulenofen: 30°C
Flussrate: 0.75 ml/min
Detektor: 210nm
Injektionsvolumen: 60μ1
C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden:
Tablette:
Zusammensetzung:
100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.
Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm. Herstellung:
Die Mischung aus erfindungsgemäßer Verbindung, Lactose und Stärke wird mit einer 5 %-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat 5 Minuten gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet. Oral applizierbare Suspension:
Zusammensetzung:
1000 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 1000 mg Ethanol (96 %), 400 mg Rhodigel® (Xanthan gum der Firma FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser.
Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 mL orale Suspension.
Herstellung:
Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, die erfindungsgemäße Verbindung wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluß der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt.
Oral applizierbare Lösung:
Zusammensetzung:
500 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 2.5 g Polysorbat und 97 g Polyethylenglycol 400. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 20 g orale Lösung. Herstellung:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in der Mischung aus Polyethylenglycol und Polysorbat unter Rühren suspendiert. Der Rührvorgang wird bis zur vollständigen Auflösung der erfindungsgemäßen Verbindung fortgesetzt. i.v.-Lösung:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in einer Konzentration unterhalb der Sättigungslöslichkeit in einem physiologisch verträglichen Lösungsmittel (z.B. isotonische Natriumchlorid-Lösung, Glucose- lösung 5 % und/oder PEG 400-Lösung 30 %) gelöst. Die Lösung wird steril filtriert und in sterile und pyrogenfreie Injektionsbehältnisse abgefüllt.

Claims

Patentansprüche
1. Verbindung der Formel
Figure imgf000091_0001
in welcher
A für Stickstoff oder Kohlenstoff steht,
R1 für Phenyl, Pyridyl, 3,3,3-Trifluorprop-l-yl, 4,4,4-Trifluorbut-l-yl oder 3,3,4,4,4-Penta- fluorbut-l-yl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, (Ci-C -Alkyl, Cyclopropyl oder (Ci-C -Alkoxy substituiert ist, und
wobei Pyridyl mit 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der
Gruppe Fluor, (Ci-C -Alkyl, Cyclopropyl oder (Ci-C -Alkoxy substituiert ist, R2 für Wasserstoff oder (Ci-C4)-Alkyl steht,
R3 für (Ci-C6)-Alkyl steht,
wobei (Ci-C6)-Alkyl mit Amino sowie bis zu fünffach mit Fluor substituiert ist, R4 für (Ci-C4)-Alkyl steht,
wobei (Ci-C -Alkyl bis zu fünffach mit Fluor substituiert sein kann,
R5 für (Ci-C4)-Alkyl steht,
wobei (Ci-C4)-Alkyl bis zu fünffach mit Fluor substituiert sein kann,
oder
R4und R5 zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 3- bis 6- gliedrigen Carbocyclus bilden,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff, Chlor, Fluor oder (G-C4)-Alkyl steht,
sowie ihre -Oxide, Salze, Solvate, Salze der -Oxide und Solvate der -Oxide und Salze.
2. Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, in welcher
A für Stickstoff oder Kohlenstoff steht, R1 für Phenyl oder Pyridyl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der
Gruppe Fluor und Methyl substituiert ist,
und
wobei Pyridyl mit 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der
Gruppe Fluor und Methyl substituiert ist,
R2 für Wasserstoff oder Methyl steht,
R3 für
Figure imgf000092_0001
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
R4 für Methyl oder Ethyl steht,
wobei Methyl und Ethyl bis zu dreifach mit Fluor substituiert sein können, R5 für Methyl oder Ethyl steht,
wobei Methyl und Ethyl bis zu dreifach mit Fluor substituiert sein können, R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff, Chlor, Methyl oder Ethyl steht,
sowie ihre N-Oxide, Salze, Solvate, Salze der N-Oxide und Solvate der N-Oxide und Salze.
3. Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder 2, in welcher
A für Stickstoff steht,
R1 für Phenyl oder Pyridyl steht,
wobei Phenyl mit 1 bis 3 Substituenten Fluor substituiert ist,
und
wobei Pyridyl mit Fluor substituiert ist,
R2 für Wasserstoff steht,
R3 für
Figure imgf000092_0002
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht, R4 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R5 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff, Methyl oder Ethyl steht,
sowie ihre TV-Oxide, Salze, Solvate, Salze der TV-Oxide und Solvate der TV-Oxide und Salze.
4. Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, 2 oder 3, in welcher
A für Stickstoff steht,
R1 für eine Phenyl-Gruppe der Formel
Figure imgf000093_0001
steht, wobei
# für die Anknüpfstelle an die Methylengruppe steht, und
R9 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R10 für Fluor steht,
Ru für Wasserstoff oder Fluor steht,
oder
für 3-Fluorpyridin-2-yl steht,
R2 für Wasserstoff steht,
R3 für
Figure imgf000093_0002
steht, wobei
## für die Anknüpfungsstelle an das Stickstoffatom steht,
R4 für Methyl steht,
R5 für Methyl oder Trifluormethyl steht,
R6 für Wasserstoff steht,
R7 für Wasserstoff oder Fluor steht,
R8 für Wasserstoff oder Methyl steht, sowie ihre -Oxide, Salze, Solvate, Salze der -Oxide und Solvate der -Oxide und Salze.
5. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I), wie in den Ansprüchen 1 bis 4 definiert, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel
Figure imgf000094_0001
in welcher R1, R6, R7 und R8 jeweils die oben genannten Bedeutungen haben, in einem inerten Lösungsmittel gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base mit einer Verbindung der Formel (III)
Figure imgf000094_0002
(HD,
in welcher R4 und R5 jeweils die oben genannten Bedeutungen haben und
T1 für (Ci-C4)-Alkyl steht, zu einer Verbindung der Formel (IV)
Figure imgf000094_0003
in welcher R1, R4, R5, R6, R7 und R8 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, umsetzt, diese dann mit iso-Pentylnitrit und einem Iod-Äquivalent in eine Verbindung der Formel (V)
Figure imgf000095_0001
in welcher R1, R4, R5, R6, R7 und R8 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben überführt, und diese im Anschluss in einen inerten Lösungsmittel mit einer Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000095_0002
in welcher
R2 und R3 jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben überführt, und die resultierenden Verbindungen der Formel (I) gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen oder Säuren in ihre Solvate, Salze und/oder Solvate der Salze überführt.
6. Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten.
7. Verwendung einer Verbindung der Formel (I), wie in den Ansprüchen 1 bis 4 definiert, zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembolischen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen, Arteriosklerose, Demenzerkrankungen und erektiler Dysfunktion.
8. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, in Kombination mit einem oder mehreren inerten, nicht-toxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen.
9. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, wie in den Ansprüchen 1 bis 4 definiert, in Kombination mit einem weiteren Wirkstoff ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus organischen Nitraten, NO-Donatoren, cGMP-PDE-Inhibitoren, antithrombotisch wirkenden Mitteln, den Blutdruck senkenden Mitteln sowie den Fettstoffwechsel verändernden Mitteln.
10. Arzneimittel nach Anspruch 8 oder 9 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembohschen Erkrankungen, fibrotischen Erkrankungen, Arteriosklerose, Demenzerkrankungen und erektiler Dysfunktion.
11. Verfahren zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Herzinsuffizienz, Angina pectoris, Hypertonie, pulmonaler Hypertonie, Ischämien, Gefäßerkrankungen, Niereninsuffizienz, thromboembohschen Erkrankungen, Arteriosklerose, Demenzerkrankungen und erektiler Dysfunktion bei Menschen und Tieren unter Verwendung einer wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel (I), wie in den Ansprüchen 1 bis 4 definiert, oder eines Arzneimittels, wie in einem der Ansprüche 8 bis 10 definiert.
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