WO2013154128A1

WO2013154128A1 - 新規動脈硬化症治療用医薬組成物及び動脈硬化症治療薬のスクリーニング方法

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Publication number: WO2013154128A1
Application number: PCT/JP2013/060798
Authority: WO
Inventors: 陽子山口; 六嶋　正知; 薫紀山本; 伊藤　剛; 和彦前川
Original assignee: 塩野義製薬株式会社
Priority date: 2012-04-11
Filing date: 2013-04-10
Publication date: 2013-10-17

Abstract

本発明は、ヒトCTNNB1、ヒトNFE2L2、ヒトTXN、ヒトCUL1、ヒトRAE1、ヒトTNFRSF10C、ヒトBCLAF1、ヒトTNIP1、ヒトSTK38、ヒトZC3H13、ヒトC14orf122、ヒトC4orf18、ヒトARS2、ヒトC4orf20、ヒトRC74、ヒトEP400、ヒトRUFY1、ヒトEPPK1、ヒトSLA2、ヒトFTMT、ヒトGPR139、ヒトOR10AG1、ヒトC1QTNF9、ヒトUBE2NL、ヒトFLJ16734又はヒトFLJ38596ヒトタンパク質をコードする遺伝子の脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療のターゲットとしての使用、それらの遺伝子をターゲットとする脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療剤、およびそれらの遺伝子をターゲットとする脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療剤のスクリーニング方法に関する。

Description

新規動脈硬化症治療用医薬組成物及び動脈硬化症治療薬のスクリーニング方法

　本発明は、特定の遺伝子の発現を抑制する物質を含む脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物に関する。具体的には、本発明は、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する物質又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を含有する脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物、並びにCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現変動に基づく脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療物質のスクリーニング方法、に関する。

　重篤な心疾患などの原因となる動脈硬化症の主要な成因としてコレステロールの関与は広く知られている。特に、低比重リポタンパク質（以下、「LDL」という。）の血中濃度が増加する高LDL血症は、冠動脈疾患の明らかな危険因子とされる。

　一方、高比重リポタンパク質（以下、「HDL」という。）は、細胞中の過剰なコレステロールを肝臓に回収し、生体のコレステロール値を正常に維持するための生体機構として知られるコレステロール逆転送系で重要な役割を果たしている。HDLはコレステロール逆転送系において中心的役割を果たしており、HDLが動脈硬化の防御因子の一つであることは現在広く認識されている。すなわち、HDL機能を増強させる医薬は動脈硬化性疾患治療薬として臨床上極めて有用であることが予想されるため、血漿中のHDLレベルを上げる物質の探索研究が行われている。

　HDLなどのリポタンパク質は一般に脂質とアポリポタンパク質と呼ばれるタンパク成分から構成されており、HDLではアポリポタンパクA1（以下、「ApoA1」という。）と呼ばれるアポリポタンパク質が主要な構成成分となっている。そのため、血漿中のHDLレベルを上げる物質の探索研究で最も効果的と思われる方法の一つとしては、HDLの主要な構成成分である血中ApoA1濃度を増加させることが想定され、事実ApoA1の肝臓でのmRNAレベルと血中ApoA1タンパク質およびHDLレベルとには直接の相関があることが明らかにされている（非特許文献１）。

　従って、ApoA1遺伝子発現を亢進させること、もしくは分泌量を亢進させることで、血中ApoA1濃度を上昇させることができれば、結果的にHDL機能を向上させ、コレステロール逆転送系の活性化につながると考えられるが、事実、ApoA1トランスジェニックマウスやApoA1を投与したウサギ病態モデルでは抗動脈硬化作用が示されている（非特許文献２～４）。

　これらのことから、ApoA1遺伝子の発現量を増やすなど、その血中濃度を増加させる物質は脂質代謝異常症、高脂血症、その他HDLが関与する様々な疾患に対する医薬の創製につながると考えられており、既に、特許文献１～３等の、ApoA1の増加作用を有する低分子化合物が記載された文献が存在する。しかし、低分子化合物では特異性の問題から、他の分子にも作用しうるので、思わぬ副作用を伴うことがある。また、ApoA1の増加を指標とするので、作用機構が不明確であり、その後の創薬展開が困難であり、実際に医薬品として実用化された化合物は存在しない。したがって、明確な作用機序の動脈硬化治療薬、すなわち、ApoA1の増加作用を有しつつ、それ以外の作用の少ない動脈硬化治療薬の開発が望まれていた。
　また、ApoA1とアルツハイマーとの関連性も報告されている（非特許文献５）。

　近年、所望の遺伝子（mRNA）に相補する約２１塩基程度のRNAオリゴヌクレオチド鎖及びそのアンチセンスRNAオリゴヌクレオチド鎖からなる二本鎖RNA（small interfering RNA；siRNA）が開発され、哺乳類細胞においても任意の遺伝子の発現を抑制する事が可能となった（非特許文献６）。現在、siRNAやアンチセンスオリゴの技術は、ライフサイエンスの研究において盛んに利用されているが、医薬品として販売されている疾患治療用siRNAやアンチセンスオリゴはまだ存在しない。

特開平５－２２１９５９特開平８－２９１０９４ＷＯ９７／０９０４８

J. Lipid Res. 38巻、1445-53頁、1997年 Nature, 353巻、265-267頁、1991年 Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 91巻、9607-9611頁、1994年 Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 15巻、1882-1888頁、1995年 Neurobiology of Aging 21巻1号、27-30頁、2000年 Nature, 411巻、494-498頁、2001年

　本発明の目的は、新規な動脈硬化治療のターゲット遺伝子、すなわちその発現を抑制することでApoA1の分泌を向上し、動脈硬化の治療を可能とする遺伝子を見出して、動脈硬化の治療用医薬組成物を提供することである。

　本発明者等は、ヒト肝由来細胞株に、ヒトの全遺伝子を網羅するsiRNAライブラリーを遺伝子導入することにより、遺伝子発現の抑制によりヒト肝由来細胞株からのApoA1の分泌を顕著に上昇させる26種の遺伝子（CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734及びFLJ38596遺伝子）を同定することにより、本発明を完成するに至った。

　すなわち、本発明は以下の[１]～[１４]を提供する。
［１］CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を含む、ApoA1の分泌上昇剤。
［２］遺伝子の発現を抑制する物質が核酸である、［１］に記載のApoA1の分泌上昇剤。
［３］遺伝子の発現を抑制する核酸が、siRNA若しくはアンチセンスオリゴヌクレオチド又はこれらの発現ベクターである［２］に記載のApoA1の分泌上昇剤。
［４］CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を含む、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療用医薬組成物。
［５］遺伝子の発現を抑制する物質が核酸である、［４］に記載の医薬組成物。
［６］遺伝子の発現を抑制する核酸が、siRNA若しくはアンチセンスオリゴヌクレオチド又はこれらの発現ベクターである［５］に記載の医薬組成物。
［７］（１）細胞と被験物質とを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた該細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量を測定し、該発現量を、被験物質を接触させない対照細胞における前記遺伝子の発現量と比較する工程、及び
（３）被験物質を与えられた細胞における前記遺伝子の発現が、被験物質を与えられていない細胞における前記遺伝子の発現よりも低下している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
［８］（１）細胞と被験物質とを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた該細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量を測定し、該発現量を、被験物質を接触させない対照細胞における前記遺伝子の発現量と比較する工程、及び
（３）被験物質を与えられた細胞における前記遺伝子の発現が、被験物質を与えられていない細胞における前記遺伝子の発現よりも低下している場合に、被験物質を脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質として選択する工程を含む、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。
［９］(1) 配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
(2) 配列番号１で表されるアミノ酸配列の1又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139タンパク質に対するアゴニストとの結合活性を有するポリペプチドを用いることを特徴とする、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
［１０］（１） GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
（ｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（ｉｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを接触させる工程、
(2) 被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性を、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較する工程、及び
(3) 被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性が、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較して変化している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
［１１］（1）GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
（ｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（ｉｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチド発現させた細胞を接触させる工程、
（2）被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度を、被験物質を接触させない対照細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比較する工程、及び
（3）被験物質を加えられた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオンの濃度が、被験物質を与えられていない細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比べて変化している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
［１２］(1) 配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
(2) 配列番号１で表されるアミノ酸配列の1又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを用いることを特徴とする、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。
［１３］（１） GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
（ｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（ｉｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを接触させる工程、
(2) 被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性を、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較する工程、及び
(3) 被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性が、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較して変化している場合に、被験物質を脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療物質として選択する工程として選択する工程を含む、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。
［１４］（1）GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
（ｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（ｉｉ）配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを発現させた細胞を接触させる工程、
（2）被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度を、被験物質を接触させない対照細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比較する工程、及び
（3）被験物質を加えられた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオンの濃度が、被験物質を与えられていない細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比べて変化している場合に、被験物質を脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療物質として選択する工程として選択する工程を含む、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。

　本発明により、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現を抑制することで、ApoA1の分泌を亢進することが可能であり、これらの遺伝子の発現を阻害する物質は脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物の有効成分として用いることが出来る。本発明による医薬組成物は、特定の遺伝子の発現を特異的に抑制するという新しい作用機序の治療剤を提供するものであり、従来の脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療剤に比べて毒性が少ないことを大きな特徴とする。さらに本発明により、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子をターゲットとして用いる、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用物質をスクリーニングする方法も提供される。　　

　本明細書において使用される用語は、特に言及する場合を除いて、当該分野で通常用いる意味で用いられる。

　本発明は、１つの態様において、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を含む、医薬組成物を提供する。かかる医薬組成物は、例えば、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病、肥満、シンドロームＸ及び／又はアルツハイマーの治療に用いることができる。

　本明細書の実施例１から３に示す通り、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734及びFLJ38596を新規な脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症及びアルツハイマーの標的分子として見出した。

　本明細書において、「CTNNB1遺伝子」とは、CTNNB1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトCTNNB1遺伝子の塩基配列及びヒトCTNNB1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトCTNNB1遺伝子の塩基配列およびヒトCTNNB1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001904）、公表されている。
　本明細書において、ヒトCTNNB1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトCTNNB1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトCTNNB1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「CTNNB1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。
　CTNNB1タンパク質は、βカテニンとも呼ばれており、２つの機能を有する細胞内分子である。１つ目の機能は細胞間接着分子カドヘリンの細胞内ドメインに結合し、カドヘリンと細胞骨格をリンクさせる役割である（The Journal of Biological Chemistry、270巻34号、20201－20206頁、1995年）。もう一つは、Wntシグナルの伝達分子として、核内で転写因子と結合し、その標的遺伝子の転写を活性化させる機能である（Molecular and Cellular Biology、18巻5号、2474-2485頁、1998年）。
　しかし、CTNNB1遺伝子及びタンパク質とApoA1や動脈硬化等との関連については知られていない。

　本明細書において、「NFE2L2遺伝子」とは、NFE2L2タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトNFE2L2遺伝子の塩基配列及びヒトNFE2L2タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトNFE2L2遺伝子の塩基配列およびヒトNFE2L2タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_006164）、公表されている。
　本明細書において、ヒトNFE2L2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトNFE2L2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトNFE2L2遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「NFE2L2遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「TXN遺伝子」とは、TXNタンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトTXN遺伝子の塩基配列及びヒトTXNタンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトTXN遺伝子の塩基配列およびヒトTXNタンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_003329）、公表されている。
　本明細書において、ヒトTXNタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトTXNタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトTXN遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「TXN遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「CUL1遺伝子」とは、CUL1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトCUL1遺伝子の塩基配列及びヒトCUL1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトCUL1遺伝子の塩基配列およびヒトCUL1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_003592）、公表されている。
　本明細書において、ヒトCUL1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトCUL1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトCUL1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「CUL1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「RAE1遺伝子」とは、RAE1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトRAE1遺伝子の塩基配列及びヒトRAE1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトRAE1遺伝子の塩基配列およびヒトRAE1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001015885）、公表されている。
　本明細書において、ヒトRAE1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトRAE1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトRAE1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「RAE1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「TNFRSF10C遺伝子」とは、TNFRSF10Cタンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトTNFRSF10C遺伝子の塩基配列及びヒトTNFRSF10Cタンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトTNFRSF10C遺伝子の塩基配列およびヒトTNFRSF10Cタンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_003841）、公表されている。
　本明細書において、ヒトTNFRSF10Cタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトTNFRSF10Cタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトTNFRSF10C遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「TNFRSF10C遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「BCLAF1遺伝子」とは、BCLAF1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトBCLAF1遺伝子の塩基配列及びヒトBCLAF1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトBCLAF1遺伝子の塩基配列およびヒトBCLAF1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_014739）、公表されている。
　本明細書において、ヒトBCLAF1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトBCLAF1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトBCLAF1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「BCLAF1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「TNIP1遺伝子」とは、TNIP1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトTNIP1遺伝子の塩基配列及びヒトTNIP1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトTNIP1遺伝子の塩基配列およびヒトTNIP1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_006058）、公表されている。
　本明細書において、ヒトTNIP1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトTNIP1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトTNIP1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「TNIP1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「STK38遺伝子」とは、STK38タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトSTK38遺伝子の塩基配列及びヒトSTK38タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトSTK38遺伝子の塩基配列およびヒトSTK38タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_007271）、公表されている。
　本明細書において、ヒトSTK38タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトSTK38タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトSTK38遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「STK38遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「ZC3H13遺伝子」とは、ZC3H13タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトZC3H13遺伝子の塩基配列及びヒトZC3H13タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトZC3H13遺伝子の塩基配列およびヒトZC3H13タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_015070）、公表されている。
　本明細書において、ヒトZC3H13タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトZC3H13タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトZC3H13遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「ZC3H13遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「C14orf122遺伝子」とは、C14orf122タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトC14orf122遺伝子の塩基配列及びヒトC14orf122タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトC14orf122遺伝子の塩基配列およびヒトC14orf122タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_016049）、公表されている。
　本明細書において、ヒトC14orf122タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトC14orf122タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトC14orf122遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「C14orf122遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「C4orf18遺伝子」とは、C4orf18タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトC4orf18遺伝子の塩基配列及びヒトC4orf18タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトC4orf18遺伝子の塩基配列およびヒトC4orf18タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001031700）、公表されている。
　本明細書において、ヒトC4orf18タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトC4orf18タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトC4orf18遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「C4orf18遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「ARS2遺伝子」とは、ARS2タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトARS2遺伝子の塩基配列及びヒトARS2タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトARS2遺伝子の塩基配列およびヒトARS2タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_015908）、公表されている。
　本明細書において、ヒトARS2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトARS2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトARS2遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「ARS2遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「C4orf20遺伝子」とは、C4orf20タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトC4orf20遺伝子の塩基配列及びヒトC4orf20タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトARS2遺伝子の塩基配列およびヒトC4orf20タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_018359）、公表されている。
　本明細書において、ヒトC4orf20タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトC4orf20タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトC4orf20遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「C4orf20遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「RC74遺伝子」とは、RC74タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトRC74遺伝子の塩基配列及びヒトRC74タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトRC74遺伝子の塩基配列およびヒトRC74タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_018250）、公表されている。
　本明細書において、ヒトRC74タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトRC74タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトRC74遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「RC74遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「EP400遺伝子」とは、EP400タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトEP400遺伝子の塩基配列及びヒトEP400タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトEP400遺伝子の塩基配列およびヒトEP400タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_015409）、公表されている。
　本明細書において、ヒトEP400タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトEP400タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトEP400遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「EP400遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「RUFY1遺伝子」とは、RUFY1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトRUFY1遺伝子の塩基配列及びヒトRUFY1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトRUFY1遺伝子の塩基配列およびヒトRUFY1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_025158）、公表されている。
　本明細書において、ヒトRUFY1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトRUFY1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトRUFY1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「RUFY1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「EPPK1遺伝子」とは、EPPK1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトEPPK1遺伝子の塩基配列及びヒトEPPK1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトEPPK1遺伝子の塩基配列およびヒトEPPK1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_031308）、公表されている。
　本明細書において、ヒトEPPK1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトEPPK1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトEPPK1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「EPPK1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。
　EPPK1はEpiplakin1とも呼ばれており、形質膜に関連した接着ジャンクションにおいて、細胞骨格繊維を相互に連結・結合させる役割を担うplakinファミリーに属する遺伝子であることが知られている（Genes to Cells、13巻、667－678頁、2008年）。EPPK1タンパク質は、siRNAによるノックダウンの実験結果から、ケラチンの中間径繊維を維持し、ケラチノサイトの分化に関与していると推測されている（Journal of Cell Science、118巻4号、781-793頁、2005年）。
　しかし、EPPK1遺伝子及びタンパク質とApoA1や動脈硬化等との関連については知られていない。

　本明細書において、「SLA2遺伝子」とは、SLA2タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトSLA2遺伝子の塩基配列及びヒトSLA2タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトSLA2遺伝子の塩基配列およびヒトSLA2タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_032214）、公表されている。
　本明細書において、ヒトSLA2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトSLA2タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトSLA2遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「SLA2遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「FTMT遺伝子」とは、FTMTタンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトFTMT遺伝子の塩基配列及びヒトFTMTタンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトFTMT遺伝子の塩基配列およびヒトFTMTタンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_177478）、公表されている。
　本明細書において、ヒトFTMTタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトFTMTタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトFTMT遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「FTMT遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「GPR139遺伝子」とは、GPR139タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトGPR139遺伝子の塩基配列及びヒトGPR139タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトGPR139遺伝子の塩基配列およびヒトGPR139タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001002911）、公表されている。
　本明細書において、ヒトGPR139タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトGPR139タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトGPR139遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「GPR139遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。
　GPR139タンパク質は、主に中枢神経系に発現しているGタンパク質共役受容体で、運動行動において重要な役割を担っていると思われている（Biochemical and Biophysical Research Communications、331巻、363－369頁、2005年）。共役しているGタンパク質のαサブユニットは、Gsタイプであるとの報告と（Journal of Biomolecular Screening、14巻7号、789－797頁、2009年）、Gq/11タイプであるとの報告がある（Biochemical and Biophysical Research Communications、331巻、363－369頁、2005年）。
　しかし、GPR139遺伝子及びタンパク質とApoA1や動脈硬化等との関連については知られていない。

　本明細書において、「OR10AG1遺伝子」とは、OR10AG1タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトOR10AG1遺伝子の塩基配列及びヒトOR10AG1タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトOR10AG1遺伝子の塩基配列およびヒトOR10AG1タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001005491）、公表されている。
　本明細書において、ヒトOR10AG1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトOR10AG1タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトOR10AG1遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「OR10AG1遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「C1QTNF9遺伝子」とは、C1QTNF9タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトC1QTNF9遺伝子の塩基配列及びヒトC1QTNF9タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトC1QTNF9遺伝子の塩基配列およびヒトC1QTNF9タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_178540）、公表されている。
　本明細書において、ヒトC1QTNF9タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトC1QTNF9タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトC1QTNF9遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「C1QTNF9遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「UBE2NL遺伝子」とは、UBE2NLタンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトUBE2NL遺伝子の塩基配列及びヒトUBE2NLタンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトUBE2NL遺伝子の塩基配列およびヒトUBE2NLタンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001012989）、公表されている。
　本明細書において、ヒトUBE2NLタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトUBE2NLタンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトUBE2NL遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「UBE2NL遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「FLJ16734遺伝子」とは、FLJ16734タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトFLJ16734遺伝子の塩基配列及びヒトFLJ16734タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトFLJ16734遺伝子の塩基配列およびヒトFLJ16734タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. AK131514）、公表されている。
　本明細書において、ヒトFLJ16734タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトFLJ16734タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトFLJ16734遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「FLJ16734遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「FLJ38596遺伝子」とは、FLJ38596タンパク質をコードする遺伝子を意味する。ヒトFLJ38596遺伝子の塩基配列及びヒトFLJ38596タンパク質のアミノ酸配列は公知であり、例えば、ヒトFLJ38596遺伝子の塩基配列およびヒトFLJ38596タンパク質アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋに登録され（GenBank Accession No. NM_001039905）、公表されている。
　本明細書において、ヒトFLJ38596タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質において１アミノ酸又は数アミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたタンパク質であって多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。ただし、これらの変異体ヒトFLJ38596タンパク質は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するものである。
　本明細書において、ヒトFLJ38596遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子のみならず、ヒト個体内で生じ得る変異体も含み、例えば前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列からなる遺伝子において１塩基又は数塩基が欠失、置換及び／又は付加された遺伝子であって、多型性や突然変異に基づく変異により生じるもの、が含まれる。さらに、「FLJ38596遺伝子」は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されている塩基配列に対して、８０％以上、例えば、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．７％以上または９９．９％以上の同一性を有するヌクレオチド配列からなる変異体を含む。塩基配列の同一性は、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡなどの公知のアルゴリズムを利用して決定できる。ただし、これらの変異体遺伝子は、前記のＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列からなるタンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードするものである。

　本明細書において、「遺伝子の発現を抑制する物質」とは、標的遺伝子のmRNAの転写を抑制する物質、転写されたmRNAを分解する物質、またはmRNAからのタンパク質の翻訳を抑制する物質であれば特に限定されるものでない。かかる物質として、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド若しくはリボザイム又はこれらの発現ベクターなどが例示される。其の中でも、siRNA及びその発現ベクターが好ましく、特にsiRNAが好ましい。「遺伝子の発現を抑制する物質」としては、上記のほか、タンパク質やペプチド、あるいは他の小分子も含まれる。なお、本発明において標的遺伝子は、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子である。

　本明細書において、「タンパク質の活性を抑制する物質」とは、標的タンパク質が本来有する機能を抑制する物質であれば特に限定されるものではない。かかる物質として、抗体やアンタゴニストなどが例示される。
例えば、GPR１３９タンパク質の活性を抑制する物質とは、GPR139タンパク質に対する内在性リガンドとの結合を阻害することにより、細胞内のcAMP量増加を阻害するか、又は、細胞内カルシウム濃度増加を阻害する抗体やアンタゴニスト等を意味する。

　本明細書において、「siRNA」とは、約１５～約４０塩基からなる二本鎖RNA部分を有するRNA分子であり、前記siRNAのアンチセンス鎖と相補的な配列をもつ標的遺伝子のmRNAを切断し、標的遺伝子の発現を抑制する機能を有する。詳細には、本発明におけるsiRNAは、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子のmRNA中の連続したRNA配列と相同な配列からなるセンスRNA鎖と、該センスRNA配列に相補的な配列からなるアンチセンスRNA鎖とからなる二本鎖RNA部分を含んでなるRNAである。かかるsiRNAおよび後述の変異体siRNAの設計および製造は当業者の技量の範囲内である。

　二本鎖RNA部分の長さは、塩基として、約１５～約４０塩基、好ましくは１５～３０塩基、より好ましくは１５～２５塩基、更に好ましくは１８～２３塩基、最も好ましくは１９～２１塩基である。siRNAのセンス鎖またはアンチセンス鎖の末端構造としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、平滑末端を有するものであってもよいし、突出末端（オーバーハング）を有するものであってもよく、３’末端が突き出したタイプが好ましい。センスRNA鎖およびアンチセンスRNA鎖の３’末端に数個の塩基、好ましくは１～３個の塩基、さらに好ましくは２個の塩基からなるオーバーハングを有するsiRNAは、標的遺伝子の発現を抑制する効果が大きい場合が多く、好ましいものである。オーバーハングの塩基の種類は特に制限はなく、RNAを構成する塩基あるいはDNAを構成する塩基のいずれであってもよい。

　さらに、上記siRNAのセンス鎖またはアンチセンス鎖の一方または両方において１～数個までのヌクレオチドが欠失、置換、挿入及び／又は付加されているsiRNAもまた、本発明の動脈硬化の治療用医薬組成物に用いることができる。ここで、１～数塩基とは、特に限定されるものではないが、好ましくは１～４塩基、さらに好ましくは１～３塩基、最も好ましくは１～２塩基である。かかる変異の具体例としては、３’末端のオーバーハング部分の塩基数を０～３個としたもの、３’末端のオーバーハング部分の塩基配列を他の塩基配列に変更したもの、あるいは塩基の挿入、付加または欠失により上記センスRNA鎖とアンチセンスRNA鎖の長さが１～３塩基異なるもの、センス鎖および／またはアンチセンス鎖において塩基が別の塩基にて置換されているもの等が挙げられるが、これらに限定されない。ただし、これらの変異体siRNAにおいてセンス鎖とアンチセンス鎖がハイブリダイゼーションしうること、ならびにこれらの変異体siRNAが変異を有しないsiRNAと同等の遺伝子発現抑制能を有することが必要である。

　さらに、該siRNAは、一方の端が閉じた構造の分子、例えば、ヘアピン構造を有するsiRNA（Short hairpin RNA；shRNA）であってもよい。shRNAは、標的遺伝子の特定配列のセンス鎖RNA、該センス鎖RNAに相補的な配列からなるアンチセンス鎖RNA及びその両鎖を繋ぐリンカー配列を含むRNAであり、センス鎖部分とアンチセンス鎖部分がハイブリダイズし、二本鎖RNA部分を形成する。

　siRNAは、臨床使用の際には、いわゆるoff－target効果を示さないことが望ましい。off－target効果とは、標的遺伝子以外に、使用したsiRNAに部分的にホモロジーのある別の遺伝子の発現を抑制する作用をいう。off－target効果を避けるために、候補siRNAについて、予めDNAマイクロアレイなどを利用して交差反応がないことを確認することが可能である。また、NCBI（National Center for Biotechnology Information）などが提供する公知のデータベースを用いて、標的となる遺伝子以外に候補siRNAの配列と相同性が高い部分を含む遺伝子が存在しないかを確認する事によって、off－target効果を避けることが可能である。

　本発明のsiRNAを作製するには、化学合成による方法及び遺伝子組換え技術を用いる方法等、公知の方法を適宜用いることができる。合成による方法では、配列情報に基づき、常法により二本鎖RNAを合成することができる。また、遺伝子組換え技術を用いる方法では、センス鎖配列やアンチセンス鎖配列を組み込んだ発現ベクターを構築し、該ベクターを宿主細胞に導入後、転写により生成されたセンス鎖RNAやアンチセンス鎖RNAをそれぞれ取得することによって作製することもできる。また、標的遺伝子の特定配列のセンス鎖RNA、該センス鎖RNAに相補的な配列からなるアンチセンス鎖RNA及びその両鎖を繋ぐリンカー配列を含み、ヘアピン構造を形成するshRNAを発現させることにより、所望の二本鎖RNAを作製することもできる。

　siRNAは、標的遺伝子の発現抑制活性を有する限りにおいては、siRNAを構成する核酸の一部がDNAであっても良い。また、siRNAは、標的遺伝子の発現抑制活性を有する限りにおいては、siRNAを構成する核酸の全体又はその一部が修飾された核酸であってもよい。
　修飾された核酸とは、ヌクレオシド（塩基部位、糖部位）及び／又はヌクレオシド間結合部位に修飾が施されていて、天然の核酸と異なった構造を有するものを意味する。修飾された核酸を構成する「修飾されたヌクレオシド」としては、例えば、無塩基（abasic）ヌクレオシド；アラビノヌクレオシド、２’－デオキシウリジン、α－デオキシリボヌクレオシド、β－Ｌ－デオキシリボヌクレオシド、その他の糖修飾を有するヌクレオシド；ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ホスフェート基が結合したペプチド核酸（ＰＨＯＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、モルホリノ核酸等が挙げられる。前記糖修飾を有するヌクレオシドには、２’－Ｏ－メチルリボース、２’－デオキシ－２’－フルオロリボース、３’－Ｏ－メチルリボース等の置換五単糖；１’，２’－デオキシリボース；アラビノース；置換アラビノース糖；六単糖およびアルファ－アノマーの糖修飾を有するヌクレオシドが含まれる。これらのヌクレオシドは塩基部位が修飾された修飾塩基であってもよい。このような修飾塩基には、例えば、５－ヒドロキシシトシン、５－フルオロウラシル、４－チオウラシル等のピリミジン；６－メチルアデニン、６－チオグアノシン等のプリン；及び他の複素環塩基等が挙げられる。
　修飾された核酸を構成する「修飾されたヌクレオシド間結合」としては、例えば、アルキルリンカー、グリセリルリンカー、アミノリンカー、ポリ（エチレングリコール）結合、メチルホスホネートヌクレオシド間結合；メチルホスホノチオエート、ホスホトリエステル、ホスホチオトリエステル、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、トリエステルプロドラッグ、スルホン、スルホンアミド、サルファメート、ホルムアセタール、Ｎ－メチルヒドロキシルアミン、カルボネート、カルバメート、モルホリノ、ボラノホスホネート、ホスホルアミデートなどの非天然ヌクレオシド間結合が挙げられる。

　本発明の二本鎖siRNAに含まれる核酸配列としては、配列表の配列番号２～１５７に記載の配列を好ましく用いることができる。これらのsiRNAのヌクレオチド配列を表１及び表２に示す。表１及び２中、大文字で示されるのはセンスRNA配列およびアンチセンスRNA配列であり、小文字で示されるのは３’末端オーバーハング配列である。
　例えば、表１の１番上の配列は、配列番号：２に示すセンス鎖と配列番号：３に示すアンチセンス鎖とからなる２本鎖siRNAであり、配列番号：２の３’末端のttおよび配列番号：３の３’末端のtcがオーバーハング配列である。
　これらのsiRNAは、ApoA1の分泌を顕著に亢進させるので、これらのsiRNAを含む脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物の効果は大きいものである。

　標的遺伝子のmRNA対して相補的なオリゴヌクレオチドを「アンチセンスオリゴヌクレオチド」と呼び、当該アンチセンスオリゴヌクレオチドが標的とする遺伝子（mRNA）と二本鎖を形成することによりmRNAの働きを抑制する。「アンチセンスオリゴヌクレオチド」には、標的となる遺伝子（mRNA）と完全に相補的であるもののみならず、mRNAと安定にハイブリダイズできる限り、多少のミスマッチが存在してもよい。

　アンチセンスオリゴヌクレオチドは、修飾されていてもよい。適当な修飾を施すことにより、当該アンチセンスオリゴヌクレオチドは生体内で分解されにくくなり、より安定して標的遺伝子の発現を阻害できるようになる。このような修飾されたオリゴヌクレオチドとしては、Ｓ－オリゴ型（ホスホロチオエート型）、Ｃ－５チアゾール型、Ｄ－オリゴ型（ホスホジエステル型）、Ｍ－オリゴ型（メチルフォスフォネイト型）、ペプチド核酸型、リン酸ジエステル結合型、Ｃ－５プロピニルピリミジン型、２－Ｏ－プロピルリボース、２'－メトキシエトキシリボース型等の修飾型のアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。さらに、アンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、リン酸基を構成する酸素原子の少なくとも一部がイオウ原子に置換、修飾されているものでもよい。このようなアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ耐性、RNAへの親和性に特に優れている。リン酸基を構成する酸素原子の少なくとも一部がイオウ原子に置換、修飾されたアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、例えば、Ｓ－オリゴ型等のオリゴヌクレオチドが挙げられる。
　アンチセンスオリゴヌクレオチド（又はその誘導体）は常法によって合成することができ、例えば、市販のDNA合成装置（例えばＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製など）によって容易に合成することができる。合成法はホスホロアミダイトを用いた固相合成法、ハイドロジェンホスホネートを用いた固相合成法などがある。

　「リボザイム」とは核酸を切断する酵素活性を有するRNAをいうが、最近では当該酵素活性部位の塩基配列を有するオリゴDNAも同様に核酸切断活性を有することが明らかになっているので、本明細書では配列特異的な核酸切断活性を有する限りDNAをも包含する概念として用いる。具体的には、リボザイムは、標的遺伝子をコードするmRNAまたは初期転写産物を、コード領域の内部（初期転写産物の場合はイントロン部分を含む）で特異的に切断し得る。リボザイムで最も汎用性の高いものとしては、ウイロイドやウイルソイド等の感染性RNAに見られるセルフスプライシングRNAがあり、ハンマーヘッド型やヘアピン型等が知られている。ハンマーヘッド型は約４０塩基程度で酵素活性を発揮し、ハンマーヘッド構造をとる部分に隣接する両端の数塩基ずつ（合わせて約１０塩基程度）をmRNAの所望の切断部位と相補的な配列にすることにより、標的mRNAのみを特異的に切断することが可能である。さらに、リボザイムを、それをコードするDNAを含む発現ベクターの形態で使用する場合には、転写産物の細胞質への移行を促進するために、ｔRNAを改変した配列をさらに連結したハイブリッドリボザイムとすることもできる（Nucleic Acids Res., 29(13): 2780-2788 (2001)）。

　標的遺伝子の発現を抑制する物質は、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド又はリボザイムなどの核酸分子および、該核酸分子をコードする発現ベクターでもよい。当該発現ベクターは、上記の核酸分子をコードするオリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドが、投与対象である哺乳動物の細胞内でプロモーター活性を発揮し得るプロモーターに機能的に連結されていなければならない。使用されるプロモーターは、投与対象である哺乳動物で機能し得るものであれば特に制限はないが、例えば、ｐｏｌＩＩＩプロモーター（例、ｔＲＮＡプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター）、哺乳動物用プロモーター（例、ＣＭＶプロモーター、ＣＡＧプロモーター、ＳＶ４０プロモーター）などが挙げられる。
　発現ベクターは、好ましくは核酸分子をコードするオリゴ（ポリ）ヌクレオチドの下流に転写終結シグナル、すなわちターミネーター領域を含有する。さらに、形質転換細胞選択のための選択マーカー遺伝子（テトラサイクリン、アンピシリン、カナマイシン、ハイグロマイシン、ホスフィノスリシン等の薬剤に対する抵抗性を付与する遺伝子、栄養要求性変異を相補する遺伝子等）をさらに含有することもできる。
　発現ベクターとして使用される基本骨格のベクターは特に制限されないが、例えば、プラスミドベクター、ウイルスベクターが挙げられる。ヒト等の哺乳動物への投与に好適なベクターとしては、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、ポリオウイルス、シンドビスウイルス、センダイウイルス等のウイルスベクターが挙げられる。

　本発明の発現ベクターとしては、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド又はリボザイムの発現ベクターが例示されるが、其の中でも、siRNAの発現ベクターが好ましい。
　本発明のsiRNAの発現ベクターがコードする核酸配列としては、表１及び２に記載の配列が好ましい。表１及び２記載のsiRNAは、ApoA1の分泌を顕著に亢進させるので、これらのsiRNAを含む脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物の効果は大きいものである。

　本発明において、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質は、医薬組成物の有効成分として使用することができる。本発明の医薬組成物は、当該医薬組成物を生体内に投与することにより、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療用医薬組成物として使用することができる。

　本発明の医薬組成物は、単一の発現抑制物質を有効成分としてもよいし、複数の遺伝子発現抑制物質を有効成分としても良い。上記複数の遺伝子発現抑制物質の標的遺伝子が異なる遺伝子であっても良い。本発明の医薬組成物の発現抑制物質がsiRNAである場合には、１種またはそれ以上のsiRNAを有効成分としてもよい。例えば、本発明の医薬組成物が、GPR139遺伝子に対するsiRNAと EPPK1遺伝子に対するsiRNAとを含んでいても良い。

　本発明の医薬組成物の治療の対象である疾患の種類は、特に限定されることはないが、例えば、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病、肥満、シンドロームＸ及び／又はアルツハイマーを挙げることができる。

　本発明の医薬組成物は、経口投与及び非経口投与のいずれの剤形をも採用することができる。

　本発明の医薬組成物は常法にしたがって製剤化することができ、医薬的に許容される担体や添加物を含むものであってもよい。このような担体及び添加物として、水、医薬的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、寒天、ポリエチレングリコール、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬添加物として許容される界面活性剤等が挙げられる。
　添加物は、本発明の医薬組成物の剤形に応じて上記の中から単独で又は適宜組み合わせて選ばれる。剤形としては、経口投与の場合は、錠剤、カプセル剤、細粒剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等として、または適当な剤形により投与が可能である。非経口投与の場合は、経肺剤形（例えばネフライザーなどを用いたもの）、経鼻投与剤形、経皮投与剤形（例えば軟膏、クリーム剤）、注射剤形等が挙げられる。注射剤形の場合は、例えば点滴等の静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射等により全身又は局部的に投与することができる。

　標的遺伝子の発現を抑制する物質がsiRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド若しくはリボザイムなどの核酸分子、又は該核酸分子をコードする発現ベクターである場合は、リポソームなどのリン脂質小胞体に当該発現抑制物質を導入し、その小胞体を本発明の医薬組成物とすることも可能である。

　本発明の医薬組成物の投与量は、年齢、性別、症状、投与経路、投与回数、剤形によって異なる。投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択する。有効投与量は、一回につき体重１ｋｇあたり０．０１μｇ～１０００ｍｇ、好ましくは０．１μｇ～１００μｇである。但し、上記治療剤はこれらの投与量に制限されるものではない。

　本発明は、さらなる態様において、
（ｉ）CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を投与する工程を有する、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーを治療する方法、
（ｉｉ）脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療に用いられる、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質、ならびに
（ｉｉｉ）脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療剤の製造のための、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質の使用
を提供する。
　上記「遺伝子の発現を抑制する物質」及び「タンパク質の活性を抑制する」については、上で説明したとおりである。

　本発明は、もう１つの態様において、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現の抑制又はGPR139タンパク質のアンタゴニスト活性を指標とする脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療剤をスクリーニングする方法を提供する。

　スクリーニング方法に供される被験物質は、いかなる公知化合物および新規化合物であってもよく、例えば、核酸、糖質、脂質、蛋白質、ペプチド、有機低分子化合物、コンビナトリアルケミストリー技術を用いて作製された化合物ライブラリー、固相合成やファージディスプレイ法により作製されたランダムペプチドライブラリー、あるいは微生物、動植物、海洋生物等由来の天然成分等が挙げられる。

　一実施形態では、本発明のスクリーニング方法は、
（１）細胞と被験物質とを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた該細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量を測定し、該発現量を、被験物質を接触させない対照細胞における前記遺伝子の発現量と比較する工程、及び
（３）被験物質を与えられた細胞における前記遺伝子の発現が、被験物質を与えられていない細胞における前記遺伝子の発現よりも低下している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質又は脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症若しくはアルツハイマーの治療物質として選択する工程を含む。

　上記方法の工程（１）における、細胞とは、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現を測定することが可能な細胞のことを意味する。該工程では、細胞と被験物質とが培養培地中で接触条件下におかれる。

　CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現を測定することが可能な細胞とは、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の産物、例えば、転写産物、翻訳産物の発現レベルを直接的または間接的に評価可能な細胞をいう。該遺伝子の産物の発現レベルを直接的に評価可能な細胞は、該遺伝子を天然で発現可能な細胞であり得、一方、該遺伝子の産物の発現レベルを間接的に評価可能な細胞としては、該遺伝子転写調節領域についてレポーターアッセイを可能とする細胞などが挙げられる。該遺伝子の発現を測定可能な細胞は、動物細胞、例えばマウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、イヌ、サルあるいはヒトの哺乳動物細胞を用いることができ、なかでも、ヒト由来の細胞が望ましい。

　遺伝子転写調節領域についてレポーターアッセイを可能とする細胞は、標的遺伝子転写調節領域、当該領域に機能可能に連結されたレポーター遺伝子を含む細胞である。標的遺伝子転写調節領域およびレポーター遺伝子は、発現ベクター中に挿入することが出来る。標的遺伝子の転写調節領域は、標的遺伝子の発現を制御し得る領域である限り特に限定されないが、例えば、転写開始点から上流約２ｋｂｐまでの領域、あるいは該領域の塩基配列において１以上の塩基が欠失、置換若しくは付加された塩基配列からなり、且つ標的遺伝子の転写を制御する能力を有する領域などが挙げられる。レポーター遺伝子は、検出可能な蛋白質または検出可能な物質を生成する酵素をコードする遺伝子であればよく、例えばＧＦＰ（緑色蛍光蛋白質）遺伝子、ＧＵＳ（β－グルクロニダーゼ）遺伝子、ＬＵＣ（ルシフェラーゼ）遺伝子、ＣＡＴ（クロラムフェニコルアセチルトランスフェラーゼ）遺伝子等が挙げられる。

　遺伝子転写調節領域、当該領域に機能可能に連結されたレポーター遺伝子が導入される細胞は、標的となる遺伝子の転写調節機能を評価できる限り、即ち、該レポーター遺伝子の発現量が定量的に解析可能である限り特に限定されない。

　細胞と被験物質とが接触される培養培地は、用いられる細胞の種類などに応じて適宜選択されるが、例えば、約５～２０％のウシ胎仔血清を含む最少必須培地（ＭＥＭ）、ダルベッコ改変最少必須培地（ＤＭＥＭ）、ＲＰＭＩ１６４０培地、１９９培地などである。培養条件もまた、用いられる細胞の種類などに応じて適宜決定されるが、例えば、培地のｐＨは約６～約８であり、培養温度は通常約３０～約４０℃であり、培養時間は約１２～約１４４時間である。

　上記方法の工程（２）では、先ず、被験物質を接触させた細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量が測定される。発現量の測定は、用いた細胞の種類などを考慮し、自体公知の方法により行われ得る。例えば、該遺伝子の発現を測定可能な細胞として、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子を天然で発現可能な細胞を用いた場合、発現量は、遺伝子の産物、例えば、転写産物または翻訳産物を対象として自体公知の方法により測定できる。例えば、転写産物の発現量は、細胞からtotal RNAを調製し、ＲＴ－ＰＣＲ、ノーザンブロッティング等により測定され得る。また、翻訳産物の発現量は、細胞から抽出液を調製し、免疫学的手法により測定され得る。免疫学的手法としては、放射性同位元素免疫測定法（ＲＩＡ法）、ＥＬＩＳＡ法（Methods in Enzymol. 70: 419-439 (1980)）、蛍光抗体法などが使用できる。一方、CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現を測定可能な細胞として、遺伝子転写調節領域についてレポーターアッセイを可能とする細胞を用いた場合、発現量は、レポーターのシグナル強度に基づき測定され得る。

　上記方法の工程（３）では、被験物質を接触させた細胞における該遺伝子の発現量が、被験物質を接触させない対照細胞における遺伝子の発現量と比較される。
発現量の比較は、好ましくは、有意差の有無に基づいて行なわれる。被験物質を接触させない対照細胞における遺伝子の発現量は、被験物質を接触させた細胞における遺伝子の発現量の測定に対し、事前に測定した発現量であっても、同時に測定した発現量であってもよいが、実験の精度、再現性の観点から同時に測定した発現量であることが好ましい。

　また、他の一実施形態では、本発明のスクリーニング方法は、
（１）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列の1又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139タンパク質に対するアゴニストとの結合活性を有するポリペプチドを用いることを特徴とする、ApoA1の分泌上昇物質又は脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法である。

　他の一実施形態では、本発明のスクリーニング方法は、
（１）GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
１：配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
２：配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性を、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較する工程、及び
（３）被験物質を接触させたアゴニストとポリペプチドの結合活性が、被験物質を接触させないアゴニストとポリペプチドの結合活性と比較して変化している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法又は脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法である。

　上記方法の工程（１）における、GPR139タンパク質に対するアゴニストは、適宜選択することが可能であるが、例えば、論文で報告されているLP-360924などが挙げられる（Journal of Biomolecular Screening、14巻7号、789－797頁、2009年）
配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチドは、単離されたポリペプチド、膜画分中のポリペプチド及び細胞内のポリペプチドを含む。
GPR１３９活性を有するポリペプチドとは、GPR139タンパク質に対する内在性リガンドとの結合活性を有し、Gαsに共役することにより、細胞内のcAMP量を増加させる作用を有するか、又は、Gαqに共役することにより、細胞内カルシウム濃度を増加させる作用を有するポリペプチドを意味する。

　他の一実施形態では、本発明のスクリーニング方法は、
（１）GPR139タンパク質に対するアゴニスト、被験物質及び
１：配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
２：配列番号１で表されるアミノ酸配列の１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139活性を有するポリペプチドを発現させた細胞を接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度を、被験物質を接触させない対照細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比較する工程、及び
（３）被験物質を加えられた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオンの濃度が、被験物質を与えられていない細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比べて変化している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、ApoA1の分泌上昇物質又は脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法である。

　上記方法の工程（１）では、GPR139のタンパク質を発現させた細胞とアゴニスト及び被験物質とが接触される培養培地は、用いられる細胞の種類などに応じて適宜選択されるが、例えば、約５～２０％のウシ胎仔血清を含む最少必須培地（ＭＥＭ）、ダルベッコ改変最少必須培地（ＤＭＥＭ）、ＲＰＭＩ１６４０培地、１９９培地などである。培養条件もまた、用いられる細胞の種類などに応じて適宜決定されるが、例えば、培地のｐＨは約６～約８であり、培養温度は通常約３０～約４０℃であり、培養時間は約１２～約１４４時間である。

　上記方法の工程（２）では、先ず、アゴニスト及び被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度が測定される。細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度の測定は、用いた細胞の種類などを考慮し、自体公知の方法により行われ得る。
　被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度が、被験物質を接触させない対照細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度と比較される。
　上記方法の工程（３）の、細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度の比較は、好ましくは、有意差の有無に基づいて行なわれる。被験物質を接触させない対照細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度は、被験物質を接触させた細胞における細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度に対し、事前に測定した細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度であっても、同時に測定した細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度であってもよいが、実験の精度、再現性の観点から同時に測定した細胞内cAMP量又はカルシウムイオン濃度であることが好ましい。

　以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

　阻害することでApoA1の分泌を亢進可能な遺伝子を見出す目的で、以下のスクリーニングを実施した。ヒト肝臓癌由来細胞株であるHepG2を対象とし、ヒト全遺伝子siRNAライブラリー（Silencer Select Human Genome siRNA Library；Ambion 社製；21,585遺伝子；64,755 siRNA；3 siRNAs/遺伝子）を用いて、発現抑制により同細胞のApoA1分泌量が増加する遺伝子をスクリーニングした。スクリーニングのプロトコールとしては、まず、Poly-D-Lysine（PDL）でコートした384ウェルプレート（Corning社製）に、0.5μMのライブラリーsiRNAを1.5μl（0.75 pmol）ずつスポットした。また、各プレートに陰性コントロールとしてNegative Control #1 siRNA（NT-1；Ambion社製）も同量分注し、ヒットクライテリア設定に使用した。
　一方で、Opti-MEM I（Gibco社製）3.36μlとsiRNA導入試薬であるRNAiMAX（Invitrogen社製）0.14μlを混合し、室温で5分間保持した後、前述のsiRNAを分注した384ウェルプレートに添加した。室温で20分間インキュベーションした後、D-MEM, low-glucose（Sigma Aldrich社製）、2% Fetal Bovine Serum（Sigma社製）から成り、HepG2細胞を10,000個含む培養液を25μl添加し、37℃、5%CO2環境下で4日間培養した。培養上清を回収後、培地を加えて4倍希釈し、本希釈液2μlを1536ウェルプレート（グライナー社製）に分注した。ApoA1 HTRF assays（Cisbio社製）に含まれるAnti-ApoA1 Eu³⁺- Cryptate conjugateおよびAnti-ApoA1 d2 conjugateの混合液6μl を添加し、終夜で反応後、620nmおよび665nmの蛍光量をViewluxハイスループットマイクロプレートイメージャー（PerkinElmer社製）を用いて測定した。665nm/620nm x 10,000の値をHTRF Ratioとして算出し、培養上清中のApoA1のタンパク量を反映した値として以降の解析に用いた。
　ヒットクライテリアを陰性コントロールの125%以上と設定し、各遺伝子に対する3配列のsiRNAのうち2配列以上が同クライテリアを満たすものを抽出した結果、179遺伝子が得られた。

　上記179遺伝子に対するsiRNAのフォーカスライブラリー（3 siRNAs/遺伝子）を作成し、実施例１と同様のプロトコールにより再現性試験を実施した。結果、同一遺伝子に対する3配列のsiRNAのうち、2配列以上が陰性コントロールに対して120%以上のHTRF Ratioを有するものを選定し、HepG2細胞においてApoA1の分泌を増加させる27個の遺伝子を得た。

　実施例２で得られた27遺伝子について、カウンターアッセイとして、各遺伝子をsiRNAでノックダウンした際のApoBの分泌量を評価した。前述の27遺伝子に対するsiRNA（3 siRNAs/遺伝子）に関して、実施例１と同様のプロトコールにて、ApoB HTRF assays（Cisbio社製）を用いてApoBの分泌量を測定したところ、27遺伝子中、表３に示す26遺伝子についてはApoB分泌量の亢進は認められなかった（陰性コントロールの115%以下）。
以上の実験結果から、当該26遺伝子を、ApoA1分泌亢進作用を有する新規標的として同定した。

　上記26遺伝子について、ApoA1分泌上昇活性を主としつつ、文献調査により得られた結果を加味して、CTNNB1、EPPK1およびGPR139の3遺伝子について更なる検討を進めることとした。
　ヒトの生体内により近い条件下での作用を検討するため、ヒトプライマリー肝細胞を用いた評価を実施した。まず、PDLコートした96ウェルプレート（BD社製）に、0.5μMの各遺伝子に対するsiRNA（3 siRNAs/遺伝子）を6μl（3 pmol）ずつ分注した。また、陰性コントロールとしてNegative Control #1 siRNAも同量分注した。
　一方で、Opti-MEM I 12.9μlとRNAiMAX（Invitrogen社製）1.1μlを混合し、室温で5分間保持した後、前述のsiRNAを分注した96ウェルプレートに添加した。室温で20分間インキュベーションした後、Hepatocyte One Step Purification Kit（BD社製）で調製後、10% Fetal Bovine Serum（Sigma社製）を加えたヒトプライマリー肝細胞（BD社製）を60,000個含む培養液を100μl添加し、37℃、5%CO2環境下で4日間培養した。培養上清を回収後、実施例１と同様のプロトコールにてApoA1の分泌量をHTRF法により測定した。その結果、下記の表４に示す通り、CTNNB1およびEPPK1、GPR139については3配列中、2配列以上のsiRNAにおいて陰性コントロールに対してApoA1分泌量が110%以上に上昇していた。

　また、上記の3遺伝子をノックダウンした際に、ApoA1分泌量が亢進するメカニズムを解析するために、3遺伝子のノックダウンした際の、ApoA1 mRNA量の変化を調べた。前述の3遺伝子に対するsiRNA（3 siRNAs/遺伝子）を用い、実施例１と同様なプロトコールによりHepG2細胞において各遺伝子をノックダウンした。トランスフェクションから96時間後に培養上清を除去して細胞サンプルを調製し、FastLane Cell SYBR Green Kit（Qiagen社製）と、ヒトApoA1およびGAPDHの定量PCR用プライマー対（タカラバイオ社製；カタログ番号；ApoA1, HA092176；GAPDH，HA067812）を用いて、7900HT Fast Real Time PCR System（Applied Biosystems社製）により定量PCRを実施した。GAPDHを内部標準とした比較Ct法によりApoA1の発現量を算出したところ、3遺伝子とも、3配列中、2配列以上のsiRNAにおいて陰性コントロールに対して150%以上の発現レベルを示した。
　このことから、当該3遺伝子のノックダウンによるApoA1分泌亢進は、ApoA1遺伝子の転写活性化、もしくはmRNAの安定化に起因することが明らかとなった。

アンチセンスオリゴヌクレオチドの配列設計
　新規標的3遺伝子に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの塩基配列を設計する。各遺伝子の塩基配列情報は、例えば米国National Center for Biological InformationのGenBankに登録されているもの（ヒトGPR139, NM_001002911; ヒトEPPK1, NM_0313086; ヒトCTNNB1, NM_001904）を使用することが可能である。各塩基配列を基に、例えば、１）鎖長は１３塩基、２）免疫賦活作用を示さないように、TLR9のリガンドとなりうるCpG配列を含まない、３）分子内で高次構造をとらない、４）他の遺伝子に対して高いホモロジーを示さない、という基準により効果的な配列を選択することが可能である。ただし、標的核酸に対する発現抑制効果を有する配列を選択可能なものであれば、選択基準は上記に限定されるものではない。上記基準により設計した各新規標的に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの例を表５～表１１に示すが、標的核酸に対する発現抑制効果を有するものであれば、アンチセンスオリゴはこれらに限定されるものではない。また、これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドは修飾塩基を含むものであってもよく、塩基がホスホジエステル結合以外の結合により結合されていてもよい。例えば、表５～表１１の小文字で示された塩基の少なくとも１つがＬＮＡ（Locked Nucleic Acid）であってもよく、大文字で示された塩基間の結合の少なくとも１つがホスホロチオエート結合であってもよい。かかる修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドの具体例としては、表５～表１１の小文字で示された塩基がすべてＬＮＡであり、大文字で示された塩基間の結合がホスホロチオエート結合であるものが挙げられるが、これらに限定れない。

配列は５’から３’方向に記載する。

アンチセンスオリゴヌクレオチド合成
　ヨウ素による酸化を伴う標準ホスホロアミダイト化学を用いて、自動化ＤＮＡ合成機（ＮＴＳ　Ｈ－８－ＳＥ；　Ｎｉｈｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏ　Ｓｅｒｖｉｃｅ　Ｃｏ．　Ｌｔｄ．）で、非置換および置換ホスホジエステル（Ｐ＝Ｏ）オリゴヌクレオチドを合成する。

　標準酸化ビンを、亜リン酸塩結合の段階的硫化（ｔｈｉａｔｉｏｎ）のためにアセトニトリル中の０．２Ｍ溶液の３Ｈ－１，２－ベンゾジチオール－３－オン１，１－ジオキサイドで置き変えたこと以外は、ホスホロジエステルオリゴヌクレオチドと同様に、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）を合成する。硫化待機工程を７０秒に延長し、その後キャップ付加工程を続ける。ＣＰＧカラムからの切断および５５℃での濃縮水酸化アンモニウム中での脱保護（１８時間）の後、公知のゲルろ過法あるいは逆相ＨＰＬＣ法によりオリゴヌクレオチドを精製する。

　米国特許第５５０８２７０号明細書に記載の方法を用いて、ホスフィネートオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第４４６９８６３号明細書に記載の方法を用いて、アルキルホスフォネートオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第５６１０２８９号明細書または米国特許第５６２５０５０号明細書に記載の方法を用いて、３'－デオキシ－３'－メチレンホスホネートオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第５２５６７７５号明細書または米国特許第５３６６８７８号明細書に記載の方法を用いて、ホスホロアミダイトオリゴヌクレオチドを調製する。
　国際公開第９４／１７０９３号または国際公開第９４／０２４９９号に記載の方法を用いて、アルキルホスホノチオエートオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第５４７６９２５号明細書に記載の方法を用いて、３'－デオキシ－３'－アミノホスホルアミデートオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第５０２３２４３号明細書に記載の方法を用いて、ホスホトリエステルオリゴヌクレオチドを調製する。
　米国特許第５１３０３０２号明細書または米国特許第５１７７１９８号明細書に記載の方法を用いて、ボラノ（Ｂｏｒａｎｏ）ホスフェートオリゴヌクレオチドを調製する。

　国際公開第２００３／０１０２８４号に記載の方法を用いて、ヌクレオシドに修飾が入ったオリゴヌクレオチド（例えば、LNA等）を調製する。

アンチセンスオリゴヌクレオチドの発現抑制効果の評価
　アンチセンスオリゴヌクレオチドが有する標的核酸の発現抑制効果は、標的核酸が測定可能なレベルで存在するならば様々な細胞タイプにおいて評価することができる。発現抑制効果は、例えば、定量PCR法もしくはノーザンブロット分析を用いて常法よりに決定することができる。以下ではヒト肝臓癌由来細胞株であるHepG2を用いた実施例を記載するが、標的核酸が発現しているならば、細胞タイプは特に限定されるものではない。
　24ウェルプレート（Costar社製）にD-MEM（Sigma Aldrich社製）と10% Fetal Bovine Serumから成り、HepG2細胞を25,000個含む培養液を500μl分注し、37℃、5%CO2環境下で終夜培養し細胞を接着させる。上記で設計・合成したアンチセンスオリゴヌクレオチド60 pmol、Opti-MEM I 100μl、およびLipofectamine2000（Invitrogen社製）2μlからなる混合液を添加し、数時間培養後、培地を交換する。なお、陰性コントロールとして、アンチセンスを加えない群を設定する。さらに48時間培養し、細胞サンプルを調製する。RNeasy Plus Mini Kit（Qiagen社製）を用いて全RNAを抽出し、QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit（Qiagen社製）を用いて定量PCRを行う。同時にβアクチンの測定を行い、同遺伝子を内部標準とする比較Ct法により相対発現量を算出する。なお、各遺伝子の定量PCR用プライマーは、例えばタカラバイオ社（カタログ番号；CTNNB1, HA135644；EPPK1, HA114366；GPR139, HA033632；βアクチン, HA067803）の製品を使用することができる。陰性コントロールと比較して、各遺伝子の発現低下の度合いを調べ、各アンチセンスオリゴヌクレオチドの発現抑制作用を評価することが可能である。

アンチセンスオリゴヌクレオチドのApoA1分泌亢進作用の評価
　標的核酸に対する発現抑制効果を確認できたアンチセンスオリゴヌクレオチドについては、細胞に対するApoA1分泌亢進作用を評価する。ApoA1分泌亢進作用は、例えば上記の一次スクリーニングに関する実施例と同様に、培養上清サンプルのApoA1タンパク量をHTRF法により測定することで、日常的に決定することができる。以下、HepG2細胞を用いた実例を提供するが、選択する細胞タイプに対してアンチセンスオリゴヌクレオチドが導入可能であれば他の細胞タイプも用いることができる。
　24ウェルプレートに、D-MEM（Sigma Aldrich社製）と2% Fetal Bovine Serumから成り、HepG2細胞を40,000個含む培養液を500μl分注し、37℃、5%CO2環境下で終夜培養し細胞を接着させる。上記で発現抑制効果が確認できたアンチセンスオリゴヌクレオチド18 pmol、Opti-MEM I 100μl、およびLipofectamine2000（Invitrogen社）2μlからなる混合液を添加し、数時間培養する。なお、陰性コントロールとしてアンチセンスを加えないサンプルも用意する。培地交換後、さらに96時間培養し、培養上清を回収する。同培養上清を培地で4倍希釈後、ApoA1 HTRF assays（Cisbio社製）を用いてHTRF法によりApoA1タンパク量を測定し、陰性コントロールと比較してアンチセンス処理群でApoA1の分泌量が亢進するかを評価する。

　本発明は、医薬品の分野、特に脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマーの治療薬の開発および製造の分野において利用可能である。

Claims

CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらの遺伝子がコードするタンパク質の活性を抑制する物質を含む、ApoA1の分泌上昇剤。
遺伝子の発現を抑制する物質が核酸である、請求項１記載のApoA1の分泌上昇剤。
遺伝子の発現を抑制する核酸が、siRNA若しくはアンチセンスオリゴヌクレオチド又はこれらの発現ベクターである請求項２記載のApoA1の分泌上昇剤。
CTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734若しくはFLJ38596遺伝子の発現を抑制する又はこれらのタンパク質の遺伝子がコードする活性を抑制する物質を含む、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療用医薬組成物。　
遺伝子の発現を抑制する物質が核酸である、請求項４記載の医薬組成物。
遺伝子の発現を抑制する核酸が、siRNA若しくはアンチセンスオリゴヌクレオチド又はこれらの発現ベクターである請求項５記載の医薬組成物。
（１）細胞と被験物質とを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた該細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量を測定し、該発現量を、被験物質を接触させない対照細胞における前記遺伝子の発現量と比較する工程、及び
（３）被験物質を与えられた細胞における前記遺伝子の発現が、被験物質を与えられていない細胞における前記遺伝子の発現よりも低下している場合に、被験物質をApoA1の分泌を上昇させる物質として選択する工程を含む、
ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
（１）細胞と被験物質とを接触させる工程、
（２）被験物質を接触させた該細胞におけるCTNNB1、NFE2L2、TXN、CUL1、RAE1、TNFRSF10C、BCLAF1、TNIP1、STK38、ZC3H13、C14orf122、C4orf18、ARS2、C4orf20、RC74、EP400、RUFY1、EPPK1、SLA2、FTMT、GPR139、OR10AG1、C1QTNF9、UBE2NL、FLJ16734又はFLJ38596遺伝子の発現量を測定し、該発現量を、被験物質を接触させない対照細胞における前記遺伝子の発現量と比較する工程、及び
（３）被験物質を与えられた細胞における前記遺伝子の発現が、被験物質を与えられていない細胞における前記遺伝子の発現よりも低下している場合に、被験物質を脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質として選択する工程を含む、
脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。
（１）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列の1又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139タンパク質に対するアゴニストとの結合活性を有するポリペプチドを用いることを特徴とする、ApoA1の分泌上昇物質のスクリーニング方法。
（１）配列番号１で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、又は
（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列の1又は数個のアミノ酸が欠失、置換、及び／若しくは付加されたアミノ酸配列を有し、GPR139タンパク質に対するアゴニストとの結合活性を有するポリペプチドを用いることを特徴とする、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化症又はアルツハイマー症の治療物質のスクリーニング方法。