WO2009106715A2 - Peptide derived from a protein of the aquaporin family and cosmetic and/or pharmaceutical composition containing same - Google Patents

Peptide derived from a protein of the aquaporin family and cosmetic and/or pharmaceutical composition containing same Download PDF

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WO2009106715A2
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Jean-Marie Botto
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Definitions

  • the present invention is in the cosmetic and pharmaceutical field, and more particularly in the field of dermatology.
  • the present invention relates to a peptide of general formula (I): R 1 - (AA) n -X 1 -X 2 - X 3 -Pro-X 4 -X 5 -X 7 - (AA) p -R 2 derivative of a protein of the aquaporin family.
  • the present invention also relates to a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical, and especially dermatological, composition
  • a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical, and especially dermatological, composition comprising, in a physiologically suitable medium, at least one peptide of general formula (I), derived from a protein of the aquaporin family, as active agent alone or in combination with at least one other active agent.
  • the invention also relates to the use of this new active agent, orally or topically, in a cosmetic or nutraceutical composition, intended to improve the hydration and the barrier function of the epidermis, and intended to stimulate regeneration. skin.
  • the invention also relates to the use of this new active agent, orally or topically, for the production of a pharmaceutical composition, and especially a dermatological composition, intended to combat pathological dryness of the skin or mucous membranes, such as as xerosis or eczema, dry mouth symptoms or dryness of the eye.
  • a cosmetic treatment method intended to prevent and / or fight against the dryness of the skin and mucous membranes, and the manifestations of skin aging, according to which an effective amount of a peptide derived from aquaporins is applied, or a composition containing it, on the areas to be treated.
  • the skin is a vital organ composed of several layers (dermis, proliferative layers and stratum corneum) which covers the entire surface of the body and essentially provides a barrier function vis-à-vis the external environment.
  • This barrier function is based in particular on the quality of the epidermis which depends in particular on the state of the stratum corneum and the balance between proliferation and differentiation of epidermal keratinocytes.
  • the quality and the good functioning of the skin are closely related to the water content of the different layers of the epidermis.
  • the proliferative layers contain about 70% water, while the stratum corneum contains only 10 to 15%.
  • the hydration of the stratum corneum is the result of three factors: the water supply from the dermis, the loss of water to the outside environment and the capacity of the stratum corneum to fix the water molecules.
  • the cell membranes are hydrophobic in nature and therefore not very permeable to water, but there are water channels, a kind of pores facilitating the passage of water and some solutes.
  • Aquaporins are a class of transmembrane proteins that carry water and small molecules in solution, such as glycerol and urea, which facilitate the transport of water in epithelia and endothelia.
  • aquaporin 3 The size of aquaporin 3 is about 30 kDa with 6 alpha-helical transmembrane passages (Jung et al., J. Biol Chem 1994). Aquaporins are well-conserved molecules in all animal species and are also present in plants and bacteria (Borgnia MJ et al., J. Mol Biol., 1999). ⁇
  • Cutaneous water losses can have several origins, hereditary, acquired or related to the environment. In a very dry environment, evaporative water losses from the stratum corneum are significant and may exceed the transcellular diffusion replacement rate.
  • a first alternative treatment of dry skin is to administer topically products intended to restore the skin barrier, such as humectants capable of binding water, among which include urea and lactic acid that enter in the composition of NMF (Natural Moisturizer Factor, proteolytic derivatives of filaggrin), film-forming agents intended to retain water, or agents capable of reconstructing the cutaneous barrier (squalenes, fatty acid ceramides).
  • humectants capable of binding water among which include urea and lactic acid that enter in the composition of NMF (Natural Moisturizer Factor, proteolytic derivatives of filaggrin), film-forming agents intended to retain water, or agents capable of reconstructing the cutaneous barrier (squalenes, fatty acid ceramides).
  • NMF Natural Moisturizer Factor
  • proteolytic derivatives of filaggrin proteolytic derivatives of filaggrin
  • film-forming agents intended to retain water
  • agents capable of reconstructing the cutaneous barrier qualenes, fatty acid ceramide
  • the particular properties of the proteins of the aquaporin family make them biological targets of particular interest for improving the hydration of the skin and reducing the signs of cutaneous dryness.
  • the main object of the present invention is to provide a new active agent capable of preventing and combating the dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging.
  • the inventors have in fact demonstrated a cosmetic and therapeutic activity, especially dermatological, of peptides derived from a protein of the family of aquaporins.
  • these peptides when applied to the skin, improve the hydration and barrier function of the epidermis and mucous membranes and stimulate skin regeneration. These properties have been demonstrated by protection of the skin tissue and decreased apoptosis following water stress.
  • active agent capable of preventing and combating the dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging means any substance capable of improving the hydration and the barrier function of the epidermis and mucous membranes or to decrease apoptosis in cells or tissues under water stress.
  • topical application is meant the application or spreading of the active agent according to the invention, or a composition containing it, on the surface of the skin or mucosa.
  • cosmetic means that the active agent according to the invention, or a composition containing it, is suitable for coming into contact with the skin or a mucosa without causing toxicity or intolerance reactions.
  • Nutraceutical means a method of skin care, which involves the administration of active agents by routes other than the topical route, to healthy subjects who want to improve or maintain their physical appearance.
  • the subject of the invention is primarily a peptide derived from proteins of the aquaporin family, as active agent, alone or in combination with at least one other active agent.
  • peptide derived from protein of the aquaporin family designates any biologically active peptide fragment whose amino acid sequence is, ⁇
  • said peptide derived from aquaporin, or its biologically active derivative is a peptide whose number of amino acids is between 2 and 15.
  • said peptide is a derivative of aquaporin 3 or AQP3.
  • biologically active is meant "which has an activity in vivo or in vitro characteristic of the activity of the active agent according to the invention".
  • the peptide has a sequence which in whole or in part corresponds to the general formula (I)
  • X 1 is serine or no amino acid
  • X 2 is methionine or leucine or no amino acid
  • X 3 is asparagin or glutamine or no amino acid
  • X 4 is alanine or glycine
  • X 5 is arginine or lysine or no amino acid
  • X 6 is serine, aspartic acid or no amino acid
  • AA represents any amino acid, or a derivative thereof, and n and p are integers between 0 and 4,
  • R 1 represents the primary amino function of the N-terminal amino acid, free or substituted with a protective group which may be chosen from an acetyl group, a benzoyl group, a tosyl group or a benzyloxycarbonyl group.
  • R 2 represents the hydroxyl group of the carboxyl function of the C-terminal amino acid, free or substituted with a protecting group that may be chosen from a C 1 to C 2 0 alkyl chain, or an NH 2, NHY or NYY group with Y represents an alkyl chain of C 1 to C 4 .
  • the biologically active peptide is of sequence: (SEQ ID NO: 1) Ser-Met-Asn-Pro-Gly-Arg (SEQ ID NO: 2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID NO: 3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ ID NO: 4) Asn-Pro-Ala-Arg (SEQ ID NO: 5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH 2
  • the biologically active peptide corresponds to the sequence SEQ ID No. 4.
  • the biologically active peptide corresponds to the sequence SEQ ID No. 5.
  • the invention also relates to homologous forms of these sequences.
  • the term "homologue” denotes, according to the invention, any peptide sequence identical to at least 50%, or preferably at least 80%, and even more preferably to at least 90% of said peptide sequence, chosen from SEQ ID sequences. No. 1 to SEQ ID No. 10.
  • "Peptide sequence identical to at least X%” means a percentage identity between the amino acid residues of the two sequences to be compared, obtained after the optimal alignment of the two sequences. Optimal alignment is achieved using local homology algorithms such as those used by BLAST P or T BLAST N computer software available on the NCBI site.
  • the term "homologue” can also refer to a peptide which differs from the sequence of a peptide of sequence SEQ ID No. 1 to SEQ ID No. 10 by the substitution of chemically equivalent amino acids, that is, by the substitution of one residue for another with the same characteristics.
  • the classical substitutions are between Ala, Val, Leu and Ile; between Ser and Thr; between Asp and Glu acid residues; between Asn and GIn; and between the basic residues Lys and Arg; or between the aromatic residues Phe and Tyr.
  • amino acid refers herein to any natural or unnatural organic acid having the formula:
  • each -R is independently selected from hydrogen and an alkyl group having from 1 to 12 carbon atoms.
  • at least one -R group of each amino acid is a hydrogen.
  • alkyl is meant herein a carbon chain which may be linear or branched, substituted (mono- or poly-) or unsubstituted; saturated, mono-saturated (a double or triple bond in the chain) or polyunsaturated (two or more double bonds, two or more triple bonds, one or more double bonds and one or more triple bonds in the chain).
  • peptide refers to a sequence of two or more amino acids linked together by peptide bonds or modified peptide bonds.
  • peptide is meant the natural or synthetic peptide of the invention as described above, or at least one of its fragments, whether obtained by proteolysis or synthetically, or any peptide natural or synthetic whose sequence is totally or partially constituted by the sequence of the previously described peptide.
  • the form of protection must obviously be a biologically compatible form and must be compatible with use in the field of cosmetics or pharmacy.
  • the invention relates to a composition as defined above, characterized in that the peptide of sequence SEQ ID No. 1 to SEQ ID No. 10 is in protected form or not. Protection based on a substitution on the amino-terminus by an acetyl group, a benzoyl group, a tosyl group or a benzyloxycarbonyl group can be used.
  • a protection based on the amidation of the hydroxyl function of the carboxy-terminal end is used by a NYY group with Y representing a C 1 to C 4 alkyl chain, or esterification with an alkyl group. It is also possible to protect both ends of the peptide.
  • the peptide derivatives also relate to amino acids and peptides linked together by a pseudo-peptide bond.
  • the term "pseudo-peptide bond" means all types of bonds likely to replace the "classical" peptide bonds. In the field of amino acids, the molecules have a geometry such that they can theoretically be in the form of different optical isomers.
  • the amino acids constituting the peptide according to the invention can be in L- and D- configuration; preferably, the amino acids are in L form.
  • the peptide according to the invention can therefore be in L-, D- or DL- form.
  • the peptide of general formula (I) according to the invention can be obtained either by conventional chemical synthesis (in solid phase or in homogeneous liquid phase) or by enzymatic synthesis (Kullman et al., J. Biol Chem 1980, 225 , 8234), from constituent amino acids or their derivatives.
  • the peptide according to the invention can also be obtained by fermentation of a strain of bacteria modified or not, by genetic engineering, or by extraction of proteins of animal or plant origin, preferably of plant origin, followed by hydrolysis. controlled which releases peptide fragments totally or partially corresponding to the peptides of general formula (I).
  • the peptide according to the invention may be of natural or synthetic origin.
  • the peptide is obtained by chemical synthesis.
  • the active agent may be a single peptide, a mixture of peptides or peptide derivatives and / or constituted by amino acid derivatives.
  • the active agent according to the invention is first solubilized in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents, conventionally used by those skilled in the art, such as water, glycerol ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petroleum jelly, a vegetable oil or any mixture of these solvents.
  • one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents conventionally used by those skilled in the art, such as water, glycerol ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petroleum jelly, a vegetable oil or any mixture of these solvents.
  • the active agent according to the invention is solubilized beforehand in a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on powdery organic polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in, or attached to, any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier.
  • a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on powdery organic polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in, or attached to, any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier.
  • the subject of the invention is a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical composition, and especially a dermatological composition, comprising, in a physiologically adapted medium, an effective amount of peptide derived from proteins of the family of aquaporins, as active agent, alone or in association with at least one other active agent.
  • the effective amount of active agent corresponds to the amount necessary to obtain the desired result, namely, to improve the hydration and the barrier function of the epidermis, and / or to stimulate skin regeneration, and / or to prevent or fight against dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging.
  • the active agent according to the invention is present in the compositions of the invention at a concentration of between about 0.0005 and 500 ppm (parts per million), and preferably at a concentration of concentration between about 0.01 and 5 ppm relative to the total weight of the final composition.
  • the composition that can be used according to the invention may in particular consist of a composition for hair care, and in particular a shampoo, a conditioner, a treatment lotion, a cream or a styling gel, a restructuring lotion for the hair, a mask, etc. .
  • the cosmetic composition according to the invention can be used in particular in treatments using an application that is followed or not by a rinse, or in the form of shampoo.
  • the active agent according to the invention may advantageously be used in anti-dandruff care of the scalp.
  • It can also be in the form of dye or mascara to be applied with a brush or a comb, in particular on eyelashes, eyebrows or hair.
  • the active agent according to the invention may be used alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition, or for the preparation of a pharmaceutical and / or dermatological composition.
  • the compositions that can be used according to the invention also contain various moisturizing active agents intended, in particular, for the prevention and / or treatment of aging-related disorders.
  • the composition according to the invention can associate glycerol, as an adjuvant active agent, with the active agent described in the present invention. This combination is particularly advantageous and provides optimum hydration efficiency, compared to the use of glycerol alone.
  • compositions according to the invention may be applied by any appropriate route, in particular oral, parenteral or external topical, and their formulation will be adapted by those skilled in the art, in particular for cosmetic or dermatological compositions.
  • the compositions according to the invention are intended for topical administration to the skin.
  • These compositions must therefore contain a cosmetically and / or dermatologically acceptable medium, that is to say compatible with the skin and superficial body growths, and cover all cosmetic or dermatological forms.
  • These compositions may especially be in the form of creams, oil-in-water emulsions, or water-in-oil or multiple emulsions, solutions, suspensions, gels, milks, lotions, sticks or powders, and adapted to an application on the skin, lips and / or integuments.
  • compositions comprise the excipients necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, surfactants, antioxidants, dyes, preservatives, perfumes.
  • the compositions will be suitable for oral administration for pharmaceutical or nutraceutical use.
  • the compositions may especially be in the form of tablets, capsules, capsules, chewable pastes, powders to be consumed as such or to mix extemporaneously with a liquid, syrups, gels, and any other form known to those skilled in the art.
  • suitable formulation excipients such as colorants, sweeteners, flavoring agents, bulking agents, binders, preservatives.
  • compositions may especially be in the form of an aqueous solution, hydroalcoholic or oily; an oil-in-water, water-in-oil emulsion or multiple emulsions; they may also be in the form of creams, suspensions or powders, suitable for application to the skin, mucous membranes, lips and / or integuments.
  • These compositions may be more or less fluid and have the appearance of a cream, lotion, milk, serum, ointment, gel, paste or paste. a foam. They can also be in solid form, as a stick, or be applied to the skin in the form of an aerosol. They can be used as a care product and / or as a make-up product for the skin.
  • compositions additionally comprise any additive commonly used in the field of application envisaged as well as the adjuvants necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, antioxidants, dyes, sunscreens, self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, odor absorbers, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, etc. .
  • additives such as solvents, thickeners, diluents, antioxidants, dyes, sunscreens, self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, odor absorbers, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, etc.
  • these adjuvants and their proportions are chosen so as not to adversely affect the desirable properties of the composition according to the invention.
  • These adjuvants may, for example, correspond to 0.01 to 20% of the total weight of the composition.
  • the fatty phase may represent from 5 to 80% by weight and preferably from 5 to 50% by weight relative to the total weight of the composition.
  • the emulsifiers and co-emulsifiers used in the composition will be chosen from those conventionally used in the field under consideration. For example, they can be used in a proportion ranging from 0.3 to 30% by weight, relative to the total weight of the composition.
  • the third object of the invention is the use of the active agent in cosmetic or nutraceutical compositions, or for the preparation of pharmaceutical compositions.
  • the active agent thanks to its particular properties, can be used in a cosmetic or nutraceutical composition for improving the hydration and barrier function of the epidermis or for preventing or treating dry skin.
  • the active agent according to the invention can advantageously be used in a cosmetic or nutraceutical composition intended to fight in a preventive and / or curative manner against the manifestations of cutaneous aging, and more specifically, in order to fight against and / or to prevent photo-induced aging (photo-aging).
  • Skin manifestations of aging means any changes in the external appearance of the skin and skin appendages due to aging, such as, for example, the superficial roughness of the stratum corneum, wrinkles and fine lines, but also any internal modification of the skin. which does not systematically result in a modified external appearance such as, for example, the thinning of the dermis or any other internal degradation of the skin following exposure to ultraviolet (UV) radiation.
  • UV ultraviolet
  • the active agent according to the invention may advantageously be used in a cosmetic or nutraceutical composition intended to protect the skin and the mucous membranes against all types of external aggressions.
  • external aggression refers to the aggressions that the environment can produce.
  • aggressions such as pollution, UV, or irritating products such as surfactants, preservatives or perfumes.
  • Pollution is understood to mean both “external” pollution due for example to diesel particles, ozone or heavy metals, and “internal” pollution, which may be due in particular to solvent emissions from paints, glues, or wallpaper (such as toluene, styrene, xylene or benzaldehyde), or even cigarette smoke. Dryness of the atmosphere is also an important cause of skin dryness.
  • the aggressions that the skin and the hair undergo are due, for example, to an imbalance of the electrochemical gradient across the cell membrane, which can lead to significant variations of the osmotic pressure and this can result in osmotic shocks and therefore cell lysis.
  • the inventors have surprisingly demonstrated that the peptides according to the invention protect cells against these osmotic shocks.
  • the skin can also be attacked by treatments such as shaving.
  • the subject of the invention is the use in a cosmetic composition of an effective quantity of active agent as described above, the active agent, or the composition containing it, being intended for preventing or treating damage. caused to the skin by shaving.
  • the active agent may be used advantageously in a cosmetic or nutraceutical composition, or to prepare a pharmaceutical composition intended to stimulate skin regeneration.
  • the invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective amount of active agent as described above, the active agent, or the composition containing it, being intended to prevent damage to the skin caused by exposure to the sun or a drying environment.
  • the invention also consists in the use of the active agent for the preparation of a pharmaceutical composition intended to prevent or treat pathologies characterized by dryness of the skin and mucous membranes, such as eczema, xerosis, atopic dermatitis, dry mouth, eye or vaginal.
  • the invention also consists of a cosmetic treatment method intended to improve the appearance of the skin and to prevent or combat the dryness of the skin and mucous membranes, according to which an effective amount of a peptide derived from the skin is applied.
  • the invention also consists of a cosmetic treatment method intended to prevent and / or fight against the cutaneous signs of aging and / or photo-aging, according to which is applied an effective amount of a peptide derived from aquaporin, or a composition containing it, on the areas to be treated.
  • Normal human keratinocytes in culture were placed in the presence of peptide SEQ ID No. 4 at 0.5%, 1% and 3% from a 50 ppm stock solution 24 hours before and during the osmotic shock.
  • Hypertonic culture conditions are performed by adding 250 mM sorbitol to the culture medium for 24 hours. Untreated controls are performed.
  • MTT MTT agent
  • the keratinocytes are incubated in a solution containing 0.1 mg / ml of MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide).
  • MTT 3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide.
  • This compound is absorbed by living cells and then metabolized by the mitochondrial enzymes (succinate dehydrogenase) into a blue violet compound, formazan, which is in the form of violet crystals insoluble in aqueous medium.
  • the formazan crystals are solubilized in DMSO and produce an optical density (O.D.) proportional to the number of living cells present in the sample.
  • results obtained show an increase in the dose-dependent viability of cells subjected to osmotic shock when the cells are treated with the peptide SEQ ID No. 4, compared with the untreated cells.
  • the increase in viability is 12% when the cells are treated with peptide SEQ ID No. 4 at 3%,
  • the peptide SEQ ID No. 4 effectively protects normal human keratinocytes subjected to osmotic shock.
  • Biopsies of human skin are stripped of their stratum corneum by tape-stripping and then cultured ex vivo and treated with a 1% solution of a 50 ppm SEQ peptide stock solution. ID # 5 for 24 hours. The absence of stratum corneum induces significant dehydration. Hematoxylin-Eosin (H & E) histological sections and stainings are used to evaluate the quality of cutaneous structures.
  • the peptide SEQ ID No. 5 effectively protects the skin from the stress induced by dehydration. On the other hand, the peptide SEQ ID No. 5 allows a regeneration of the epidermis.
  • EXAMPLE 3 Demonstration of the Activating Effect of Peptide SEQ ID No. 5 on the Expression of Claudines and Keratin KlO
  • Claudines are the main transmembrane proteins of intercellular adhesion structures called tight-junction, which play a role in cellular communication and epidermal cohesion.
  • KlO keratin is a specific keratin of differentiated epidermal layers (stratum granulosum) and is involved in the barrier function of the skin. The amount of protein was evaluated by immunofluorescence on sections of human skin.
  • Claudin-1 antibody rabbit polyclonal, ref: Abl5098, Abcam, dilution l / 200 eme
  • secondary antibody coupled to a fluorescent marker (Alexa Fluor 488 donkey anti-rabbit IgG, A21206, Molecular Probes, l / 1000th).
  • Immunolabelling of Keratin 10 is made using an antibody specific for keratin 10 (Klo antibodies: mouse monoclonal, ref: LHPl, Novocastra, dilution l / 50th), and then a secondary antibody, coupled with a fluorescent dye (Alexa Fluor 488 donkey anti-mouse IgG, A21202, Molecular Probes, l / 1000th). The skin sections are then examined under an Epi-fluorescence microscope (Nikon Eclipse E600 microscope).
  • phase B weigh the ingredients of the fatty phase and heat to 70 ° C with stirring. Prepare phase B and heat to 70 0 C. Emulsify phase A into phase B. Add phase D at 50 0 C with stirring. Below 40 ° C., add the active agent (Phase D). Perfume and cool to room temperature. 2 - moisturizing cream W / O
  • phase A weigh phase A and heat to 75 ° C with stirring. Prepare phase B and heat it to 75 ° C. Emulsify phase B in phase A under strong rotor-stator agitation.

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Abstract

The present invention relates to a peptide of general formula (I): R1‑(AA)n-X1-X2-X3-PrO-X4-X5-X7-(AA)P-R2, derived from a protein of the aquaporin family. The present invention also relates to a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical composition comprising a peptide of general formula (I), as active ingredient. The invention also relates to the use of this new active agent in a cosmetic or nutraceutical composition for improving the hydration and the barrier function of the epidermis and for stimulating skin regeneration. The invention also relates to the use of this new active agent, for the preparation of a pharmaceutical, and in particular dermatological, composition for treating pathogenic dryness of the skin or of the mucous membranes. The invention also relates to a cosmetic treatment method for preventing and/or combating dryness of the skin and of the mucous membranes, and the manifestations of skin ageing.

Description

PEPTIDE DERIVE D'UNE PROTEINE DE LA FAMILLE DES AQUAPORINES ET COMPOSITION COSMETIQUE ET/OU PHARMACEUTIQUE LE CONTENANT PEPTIDE DERIVED FROM A PROTEIN OF THE FAMILY OF AQUAPORINS AND COSMETIC AND / OR PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING THE SAME
La présente invention se situe dans le domaine cosmétique et pharmaceutique, et plus particulièrement dans le domaine de la dermatologie. La présente invention concerne un peptide de formule générale (I) : R1-(AA)n-X1-X2- X3-Pro-X4-X5-X7-(AA)P-R2, dérivé d'une protéine de la famille des aquaporines.The present invention is in the cosmetic and pharmaceutical field, and more particularly in the field of dermatology. The present invention relates to a peptide of general formula (I): R 1 - (AA) n -X 1 -X 2 - X 3 -Pro-X 4 -X 5 -X 7 - (AA) p -R 2 derivative of a protein of the aquaporin family.
La présente invention concerne également une composition cosmétique, nutraceutique ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement adapté, au moins un peptide de formule générale (I), dérivé d'une protéine de la famille des aquaporines, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif. L'invention est également relative à l'utilisation de ce nouvel agent actif, par voie orale ou topique, dans une composition cosmétique ou nutraceutique, destinée à améliorer l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme, et destinée à stimuler la régénération cutanée. L'invention est également relative à l'utilisation de ce nouvel agent actif, par voie orale ou topique, pour la réalisation d'une composition pharmaceutique, et notamment dermatologique, destinée à lutter contre les sécheresses pathologiques de la peau ou des muqueuses, telles que la xérose ou l'eczéma, les symptômes de bouche sèche ou la sécheresse de l'œil. L'invention porte encore sur un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses, et les manifestations du vieillissement cutané, selon lequel on applique une quantité efficace d'un peptide dérivé des aquaporines, ou une composition le contenant, sur les zones à traiter.The present invention also relates to a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical, and especially dermatological, composition comprising, in a physiologically suitable medium, at least one peptide of general formula (I), derived from a protein of the aquaporin family, as active agent alone or in combination with at least one other active agent. The invention also relates to the use of this new active agent, orally or topically, in a cosmetic or nutraceutical composition, intended to improve the hydration and the barrier function of the epidermis, and intended to stimulate regeneration. skin. The invention also relates to the use of this new active agent, orally or topically, for the production of a pharmaceutical composition, and especially a dermatological composition, intended to combat pathological dryness of the skin or mucous membranes, such as as xerosis or eczema, dry mouth symptoms or dryness of the eye. The invention also relates to a cosmetic treatment method intended to prevent and / or fight against the dryness of the skin and mucous membranes, and the manifestations of skin aging, according to which an effective amount of a peptide derived from aquaporins is applied, or a composition containing it, on the areas to be treated.
La peau est un organe vital composé de plusieurs couches (derme, couches prolifératives et stratum corneum) qui recouvre toute la surface du corps et assure essentiellement une fonction de barrière vis-à-vis du milieu extérieur. Cette fonction barrière repose en particulier sur la qualité de l'épiderme qui dépend notamment de la l'état du stratum corneum et de l'équilibre entre la prolifération et la différenciation des kératinocytes épidermiques. La qualité et le bon fonctionnement de la peau sont étroitement liés à la teneur en eau des différentes couches de l'épiderme. Ainsi dans un épiderme normal, les couches prolifératives contiennent environ 70 % d'eau, alors que le stratum corneum en contient seulement 10 à 15 %. L'hydratation du stratum corneum est la résultante de trois facteurs l'approvisionnement en eau à partir du derme, la perte en eau vers le milieu extérieur et la capacité du stratum corneum à fixer les molécules d'eau.The skin is a vital organ composed of several layers (dermis, proliferative layers and stratum corneum) which covers the entire surface of the body and essentially provides a barrier function vis-à-vis the external environment. This barrier function is based in particular on the quality of the epidermis which depends in particular on the state of the stratum corneum and the balance between proliferation and differentiation of epidermal keratinocytes. The quality and the good functioning of the skin are closely related to the water content of the different layers of the epidermis. Thus in a normal epidermis, the proliferative layers contain about 70% water, while the stratum corneum contains only 10 to 15%. The hydration of the stratum corneum is the result of three factors: the water supply from the dermis, the loss of water to the outside environment and the capacity of the stratum corneum to fix the water molecules.
La régulation de la distribution en eau se fait par des hormones (aldostérone, hormones sexuelles), le pH ou les variations osmotiques. Les membranes cellulaires sont de nature hydrophobes et donc peu perméables à l'eau, mais il existe des canaux hydriques, sortes de pores facilitant le passage de l'eau et de certains solutés.Regulation of water distribution is by hormones (aldosterone, sex hormones), pH or osmotic variations. The cell membranes are hydrophobic in nature and therefore not very permeable to water, but there are water channels, a kind of pores facilitating the passage of water and some solutes.
Les aquaporines sont une classe de protéines transmembranaires transporteurs d'eau et de petites molécules en solution, telles que le glycérol et l'urée, qui facilitent le transport de l'eau dans les épithéliums et les endothéliums.Aquaporins are a class of transmembrane proteins that carry water and small molecules in solution, such as glycerol and urea, which facilitate the transport of water in epithelia and endothelia.
La fonction déterminante des aquaporines dans les épithéliums impliqués dans le transport de l'eau ou des solutés, tels que le rein, a été bien étudiée (Deen et al., 1994). De même, les aquaporines ont été rapidement identifiées dans les glandes exocrines productrices de la salive ou des pleurs. Toutefois, la découverte d'aquaporines de type 3, ou AQP3, dans l'épidémie humain, et plus précisément dans la membrane plasmique des kératinocytes des couches prolifératives de l'épiderme (SOUGRAT R. et al., J. Invest. DermatoL, 2002), a mis en lumière l'importance des flux hydriques régulés dans la peau. Les AQP3 sont capables de transporter l'eau et le glycérol, ce dernier jouant un rôle important dans la constitution du film hydrolipidique de surface ainsi que dans le maintien de la souplesse et des qualités sensorielles du stratum corneum.The determinant function of aquaporins in epithelia involved in the transport of water or solutes, such as the kidney, has been well studied (Deen et al., 1994). Similarly, aquaporins were quickly identified in the exocrine glands producing saliva or crying. However, the discovery of type 3 aquaporins, or AQP3, in the human epidermis, and more specifically in the plasma membrane of keratinocytes of the proliferative layers of the epidermis (Sougraat R. et al., J. Invest DermatoL, 2002), highlighted the importance of regulated water flows in the skin. AQP3 are able to carry water and glycerol, the latter playing an important role in the constitution of the surface hydrolipidic film as well as in maintaining the flexibility and sensory qualities of the stratum corneum.
L'importance des AQP3 a été démontrée chez la souris. En effet, l'inactivation du gène provoque l'apparition de multiples déficiences de la peau, telles qu'un faible taux d'hydratation, une fonction barrière inefficace, un temps de régénération tissulaire augmenté et une diminution de l'élasticité (Ma T. et al., J. Mol. Biol., 2002). On a découvert depuis que l'aquaporine 3 est exprimée dans les fibroblastes dermiques où elle intervient dans la migration de ces cellules lors de la régénération des plaies (Cao C. et al., Biochem J., 2006). D'autre part, les aquaporines jouent un rôle dans la fonction barrière en régulant positivement l'établissement des liaisons et communications cellulaires de type tight junction (KAwedia J. et al., PNAS 104(9), 2007). La taille de l'aquaporine 3 est d'environ 30 kDa avec 6 passages transmembranaires en hélice alpha (Jung et al., J. Biol. Chem. 1994). Les aquaporines sont des molécules bien conservées chez l'ensemble des espèces animales et sont également présentes chez les plantes et les bactéries (Borgnia MJ. et al., J. Mol. Biol., 1999). ^The importance of AQP3 has been demonstrated in mice. Indeed, the inactivation of the gene causes the appearance of multiple skin deficiencies, such as a low hydration rate, an inefficient barrier function, an increased tissue regeneration time and a decrease in elasticity (Ma T et al., J. Mol Biol., 2002). It has since been discovered that aquaporin 3 is expressed in dermal fibroblasts where it is involved in the migration of these cells during wound regeneration (Cao C. et al., Biochem J., 2006). On the other hand, aquaporins play a role in the barrier function by positively regulating the establishment of tight junction cell-type connections and communications (KAwedia J. et al., PNAS 104 (9), 2007). The size of aquaporin 3 is about 30 kDa with 6 alpha-helical transmembrane passages (Jung et al., J. Biol Chem 1994). Aquaporins are well-conserved molecules in all animal species and are also present in plants and bacteria (Borgnia MJ et al., J. Mol Biol., 1999). ^
Les pertes cutanées en eau peuvent avoir plusieurs origines, héréditaires, acquises ou liées à l'environnement. Dans un environnement très sec, les pertes en eau par évaporation à partir du stratum corneum sont significatives et peuvent excéder le taux de remplacement par diffusion transcellulaire.Cutaneous water losses can have several origins, hereditary, acquired or related to the environment. In a very dry environment, evaporative water losses from the stratum corneum are significant and may exceed the transcellular diffusion replacement rate.
Au cours du vieillissement cutané, la peau devient sèche. Ainsi, il est très souvent constaté chez les sujets âgés, et notamment de plus de 50 ans, la manifestation d'une xérose ou d'une sécheresse des muqueuses, liée à une moindre sécrétion de sébum, à des modifications hormonales ou à des ralentissements du flux hydrique à travers l'épiderme. La peau est alors le siège de démangeaisons et de tiraillements, deux symptômes caractéristiques d'une peau sèche. Parmi les pathologies acquises se traduisant par une sécheresse de la peau, on peut citer la xérose induite par la photo-chimiothérapie et l'eczéma. Parmi les pathologies acquises provoquant une sécheresse de la bouche, ou xérostomie, on peut citer le syndrome de Sjogren ou la radiothérapie du cou. Des sécheresses pathologiques peuvent également affecter d'autres zones muqueuses de l'organisme, parmi lesquelles on peut citer la muqueuse vaginale et la muqueuse oculaire.During skin aging, the skin becomes dry. Thus, it is very often found in the elderly, and in particular over 50 years, the manifestation of xerosis or dryness of the mucous membranes, related to a lower secretion of sebum, hormonal changes or slowdowns water flow through the epidermis. The skin is then the seat of itching and tugging, two characteristic symptoms of dry skin. Acquired pathologies resulting in dry skin include xerosis induced by photochemotherapy and eczema. Among the pathologies acquired causing a dry mouth, or xerostomia, mention may be made of Sjogren's syndrome or radiotherapy of the neck. Pathological dryness can also affect other mucosal areas of the body, including vaginal mucosa and ocular mucosa.
Une première alternative de traitement des peaux sèches consiste à administrer par voie topique des produits destinés à restaurer la barrière cutanée, tels que des agents humectants capables de fixer l'eau, parmi lesquels on peut citer l'urée et l'acide lactique qui entrent dans la composition du NMF (Natural Moisturizer Factor ; dérivés protéolytiques de la filaggrine), des agents filmogènes destinés à retenir l'eau, ou encore des agents capables de reconstruire la barrière cutanée (squalènes, céramides acides gras). Toutefois, ces produits ont une action superficielle qui ne corrige pas les défauts biologiques d'une peau souffrant de déshydratation chronique.A first alternative treatment of dry skin is to administer topically products intended to restore the skin barrier, such as humectants capable of binding water, among which include urea and lactic acid that enter in the composition of NMF (Natural Moisturizer Factor, proteolytic derivatives of filaggrin), film-forming agents intended to retain water, or agents capable of reconstructing the cutaneous barrier (squalenes, fatty acid ceramides). However, these products have a superficial action that does not correct the biological defects of a skin suffering from chronic dehydration.
Dans ce contexte, les propriétés particulières des protéines de la famille des aquaporines en font des cibles biologiques particulièrement intéressantes pour améliorer l'hydratation de la peau et diminuer les signes de sécheresse cutanée.In this context, the particular properties of the proteins of the aquaporin family make them biological targets of particular interest for improving the hydration of the skin and reducing the signs of cutaneous dryness.
La recherche d'agents actifs capables de lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses, de prévenir ou lutter contre les manifestations du vieillissement cutané, ou encore de limiter les dommages causés par les agressions extérieures, telles que les expositions prolongés aux UV, est une préoccupation importante de la recherche médicale et de la cosmétique. A cet égard, il a été proposé des compositions cosmétiques ou thérapeutiques pour application topique contenant des aquaporine natives (FR 2 831 058). Mais il faut noter que la pénétration transcutanée d'une protéine est très faible, et le coût de telles molécules assez élevé. A ce jour, aucun peptide dérivé des aquaporines, tel que divulgué dans la présente invention, n'a encore été décrit.The search for active agents able to fight against dryness of the skin and mucous membranes, to prevent or fight against the manifestations of skin aging, or to limit the damage caused by external aggressions, such as prolonged exposures to UV, is a major concern of medical research and of cosmetics. In this respect, it has been proposed cosmetic or therapeutic compositions for topical application containing native aquaporins (FR 2 831 058). But it should be noted that the transcutaneous penetration of a protein is very low, and the cost of such molecules quite high. To date, no peptide derived from aquaporins, as disclosed in the present invention, has yet been described.
La présente invention a pour principal objectif de fournir un nouvel agent actif, capable de prévenir et de lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses et les manifestations du vieillissement cutané. Les inventeurs ont en effet mis en évidence une activité cosmétique et thérapeutique, notamment dermatologique, de peptides dérivés d'une protéine de la famille des aquaporines.The main object of the present invention is to provide a new active agent capable of preventing and combating the dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging. The inventors have in fact demonstrated a cosmetic and therapeutic activity, especially dermatological, of peptides derived from a protein of the family of aquaporins.
Il a en particulier été mis en évidence que ces peptides, lorsqu'ils sont appliqués sur la peau, améliorent l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme et des muqueuses et stimulent la régénération cutanée. Ces propriétés ont été démontrées par une protection du tissu cutané et une diminution de l'apoptose à la suite d'un stress hydrique.In particular, it has been demonstrated that these peptides, when applied to the skin, improve the hydration and barrier function of the epidermis and mucous membranes and stimulate skin regeneration. These properties have been demonstrated by protection of the skin tissue and decreased apoptosis following water stress.
On entend par « agent actif capable de prévenir et de lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses et les manifestations du vieillissement cutané», toute substance capable d'améliorer l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme et des muqueuses ou de diminuer l'apoptose dans des cellules ou des tissus soumis à un stress hydrique. On entend par « application topique », le fait d'appliquer ou d'étaler l'agent actif selon l'invention, ou une composition le contenant, à la surface de la peau ou d'une muqueuse.The term "active agent capable of preventing and combating the dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging" means any substance capable of improving the hydration and the barrier function of the epidermis and mucous membranes or to decrease apoptosis in cells or tissues under water stress. By "topical application" is meant the application or spreading of the active agent according to the invention, or a composition containing it, on the surface of the skin or mucosa.
On entend par « cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable, que l'agent actif selon l'invention, ou une composition le contenant, est approprié pour entrer en contact avec la peau ou une muqueuse sans provoquer de réactions de toxicité ou d'intolérance. On entend par « nutraceutique », une méthode de soin de la peau, qui implique l'administration d'agents actifs par des voies autres que la voie topique, à des sujets en bonne santé qui veulent améliorer ou entretenir leur apparence physique.By "cosmetically or dermatologically acceptable, it is meant that the active agent according to the invention, or a composition containing it, is suitable for coming into contact with the skin or a mucosa without causing toxicity or intolerance reactions. "Nutraceutical" means a method of skin care, which involves the administration of active agents by routes other than the topical route, to healthy subjects who want to improve or maintain their physical appearance.
Ainsi, l'invention a pour objet premier un peptide dérivé de protéines de la famille des aquaporines, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif.Thus, the subject of the invention is primarily a peptide derived from proteins of the aquaporin family, as active agent, alone or in combination with at least one other active agent.
L'expression « peptide dérivé de protéine de la famille des aquaporines » désigne tout fragment peptidique biologiquement actif dont la séquence en acides aminés est, ^The expression "peptide derived from protein of the aquaporin family" designates any biologically active peptide fragment whose amino acid sequence is, ^
entièrement ou partiellement, analogue ou homologue de la séquence peptidique des aquaporines.completely or partially, analogous or homologous to the peptide sequence of aquaporins.
Préférentiellement, selon la présente invention, ledit peptide dérivé de l'aquaporine, ou son dérivé biologiquement actif, est un peptide dont le nombre d'acides aminés est compris entre 2 et 15.Preferably, according to the present invention, said peptide derived from aquaporin, or its biologically active derivative, is a peptide whose number of amino acids is between 2 and 15.
Préférentiellement, selon la présente invention, ledit peptide est un dérivé de l'aquaporine 3 ou AQP3.Preferably, according to the present invention, said peptide is a derivative of aquaporin 3 or AQP3.
Par l'expression «biologiquement actif », on entend « qui possède une activité in vivo ou in vitro caractéristique de l'activité de l'agent actif selon l'invention ».By the term "biologically active" is meant "which has an activity in vivo or in vitro characteristic of the activity of the active agent according to the invention".
Selon une méthode particulièrement avantageuse de réalisation de l'invention, le peptide possède une séquence qui répond en tout ou en partie à la formule générale (I)According to a particularly advantageous method of carrying out the invention, the peptide has a sequence which in whole or in part corresponds to the general formula (I)
R1-(AA)n-X1-X2-X3-PrO-X4-X5-X7-(AA)P-R2 Dans laquelle,R 1 - (AA) n -X 1 -X 2 -X 3 -PrO-X 4 -X 5 -X 7 - (AA) P -R 2 wherein,
X1 est la serine ou aucun acide aminé, X2 est la méthionine ou la leucine ou aucun acide aminé, X3 est l'asparagme ou la glutamine ou aucun acide aminé, X4 est l'alanine ou la glycine, X5 est l'arginine ou la lysine ou aucun acide aminé,X 1 is serine or no amino acid, X 2 is methionine or leucine or no amino acid, X 3 is asparagin or glutamine or no amino acid, X 4 is alanine or glycine, X 5 is arginine or lysine or no amino acid,
X6 est la serine, l'acide aspartique ou aucun acide aminé,X 6 is serine, aspartic acid or no amino acid,
AA représente un acide aminé quelconque, ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers compris entre 0 et 4,AA represents any amino acid, or a derivative thereof, and n and p are integers between 0 and 4,
R1 représente la fonction aminé primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle.R 1 represents the primary amino function of the N-terminal amino acid, free or substituted with a protective group which may be chosen from an acetyl group, a benzoyl group, a tosyl group or a benzyloxycarbonyl group.
R2 représente le groupe hydroxyle de la fonction carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substitué par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi une chaîne alkyle de C1 à C2o, ou un groupement NH2, NHY ou NYY avec Y représentant une chaîne alkyle de C1 à C4.R 2 represents the hydroxyl group of the carboxyl function of the C-terminal amino acid, free or substituted with a protecting group that may be chosen from a C 1 to C 2 0 alkyl chain, or an NH 2, NHY or NYY group with Y represents an alkyl chain of C 1 to C 4 .
Selon une méthode de réalisation de l'invention tout particulièrement préférée, le peptide biologiquement actif est de séquence : (SEQ ID n°l) Ser-Met-Asn-Pro-Gly-Arg (SEQ ID n°2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID n°3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ ID n°4) Asn-Pro-Ala-Arg (SEQ ID n°5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH2 According to a particularly preferred embodiment of the invention, the biologically active peptide is of sequence: (SEQ ID NO: 1) Ser-Met-Asn-Pro-Gly-Arg (SEQ ID NO: 2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID NO: 3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ ID NO: 4) Asn-Pro-Ala-Arg (SEQ ID NO: 5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH 2
(SEQ ID n°6) Asn-Pro-Ala (SEQ ID n°7) Asn-Pro- AIa-NH2 (SEQ ID n°8) Pro-Ala-Arg (SEQ ID n°9) Pro-Ala-Arg-NH2 (SEQ ID n° 10) Leu-Asn-Pro-Ala(SEQ ID NO: 6) Asn-Pro-Ala (SEQ ID NO: 7) Asn-Pro-AIa-NH 2 (SEQ ID NO: 8) Pro-Ala-Arg (SEQ ID No. 9) Pro-Ala Arg-NH 2 (SEQ ID NO: 10) Leu-Asn-Pro-Ala
Selon un mode de réalisation particulièrement intéressant, le peptide biologiquement actif correspond à la séquence SEQ ID n°4.According to a particularly interesting embodiment, the biologically active peptide corresponds to the sequence SEQ ID No. 4.
Selon un autre mode de réalisation particulièrement intéressant, le peptide biologiquement actif correspond à la séquence SEQ ID n°5.According to another particularly interesting embodiment, the biologically active peptide corresponds to the sequence SEQ ID No. 5.
L'invention concerne aussi des formes homologues de ces séquences. Le terme « homologue » désigne, selon l'invention, toute séquence peptidique identique à au moins 50%, ou de préférence au moins 80%, et encore plus préférentiellement à au moins 90% de ladite séquence peptidique, choisie parmi les séquences SEQ ID n° 1 à SEQ ID n° 10. Par « séquence peptidique identique à au moins X% », on entend désigner un pourcentage d'identité entre les résidus d'acides aminés des deux séquences à comparer, obtenu après l'alignement optimal des deux séquences. L'alignement optimal est obtenu à l'aide d'algorithmes d'homologies locales tels que ceux utilisés par les logiciels informatiques BLAST P ou T BLAST N disponibles sur le site NCBI. Le terme « homologue » peut également désigner un peptide qui diffère de la séquence d'un peptide de séquence SEQ ED n° 1 à SEQ ED n° 10 par la substitution d'acides aminés chimiquement équivalents, c'est-à-dire par la substitution d'un résidu par un autre possédant les mêmes caractéristiques. Ainsi, les substitutions classiques se font entre AIa, Val, Leu et Ile ; entre Ser et Thr ; entre les résidus acides Asp et Glu ; entre Asn et GIn ; et entre les résidus basiques Lys et Arg ; ou entre les résidus aromatiques Phe et Tyr.The invention also relates to homologous forms of these sequences. The term "homologue" denotes, according to the invention, any peptide sequence identical to at least 50%, or preferably at least 80%, and even more preferably to at least 90% of said peptide sequence, chosen from SEQ ID sequences. No. 1 to SEQ ID No. 10. "Peptide sequence identical to at least X%" means a percentage identity between the amino acid residues of the two sequences to be compared, obtained after the optimal alignment of the two sequences. Optimal alignment is achieved using local homology algorithms such as those used by BLAST P or T BLAST N computer software available on the NCBI site. The term "homologue" can also refer to a peptide which differs from the sequence of a peptide of sequence SEQ ID No. 1 to SEQ ID No. 10 by the substitution of chemically equivalent amino acids, that is, by the substitution of one residue for another with the same characteristics. Thus, the classical substitutions are between Ala, Val, Leu and Ile; between Ser and Thr; between Asp and Glu acid residues; between Asn and GIn; and between the basic residues Lys and Arg; or between the aromatic residues Phe and Tyr.
Dans l'invention, le terme « acide aminé » se réfère ici à tout acide organique naturel ou non naturel ayant la formule :In the invention, the term "amino acid" refers herein to any natural or unnatural organic acid having the formula:
-NHR-CR-C(O)-O- où chaque -R est indépendamment sélectionné entre un hydrogène et un groupement alkyl ayant entre 1 et 12 atomes de carbone. Préférentiellement, au moins un groupement -R de chaque acide aminé est un hydrogène. Par le terme « alkyl », on entend ici une chaîne carbonée pouvant être linéaire ou ramifiée, substituée (mono- ou poly-) ou non-substituée ; saturée, mono-saturée (une double ou triple liaison dans la chaîne) ou poly-insaturée (deux ou plusieurs doubles liaisons, deux ou plusieurs triples liaisons, une ou plusieurs doubles liaisons et une ou plusieurs triples liaisons dans la chaîne).NHR-CR-C (O) -O- wherein each -R is independently selected from hydrogen and an alkyl group having from 1 to 12 carbon atoms. Preferably, at least one -R group of each amino acid is a hydrogen. By the term "alkyl" is meant herein a carbon chain which may be linear or branched, substituted (mono- or poly-) or unsubstituted; saturated, mono-saturated (a double or triple bond in the chain) or polyunsaturated (two or more double bonds, two or more triple bonds, one or more double bonds and one or more triple bonds in the chain).
Le terme « peptide » désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées. Par « peptide », il faut entendre le peptide naturel ou synthétique de l'invention tel que décrit ci-dessus, ou au moins l'un de ses fragments, qu'il soit obtenu par protéolyse ou de manière synthétique, ou encore tout peptide naturel ou synthétique dont la séquence est totalement ou partiellement constituée par la séquence du peptide précédemment décrit. De façon à améliorer la résistance à la dégradation, il peut être nécessaire d'utiliser une forme protégée du peptide selon l'invention. La forme de protection doit évidemment être une forme biologiquement compatible et doit être compatible avec une utilisation dans le domaine des cosmétiques ou de la pharmacie.The term "peptide" refers to a sequence of two or more amino acids linked together by peptide bonds or modified peptide bonds. By "peptide" is meant the natural or synthetic peptide of the invention as described above, or at least one of its fragments, whether obtained by proteolysis or synthetically, or any peptide natural or synthetic whose sequence is totally or partially constituted by the sequence of the previously described peptide. In order to improve the resistance to degradation, it may be necessary to use a protected form of the peptide according to the invention. The form of protection must obviously be a biologically compatible form and must be compatible with use in the field of cosmetics or pharmacy.
De nombreuses formes de protection biologiquement compatibles peuvent être envisagées. Elles sont bien connues de l'homme du métier comme, par exemple, l'acylation ou l'acétylation de l'extrémité amino-terminale, ou l'amidation ou l'estérification de l'extrémité carboxy-terminale. Ainsi, l'invention concerne une composition telle que définie précédemment, caractérisée par le fait que le peptide de séquence SEQ DD n°l à SEQ ID n°10 est sous forme protégée ou non. On peut utiliser une protection basée sur une substitution sur l'extrémité amino-terminale par un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle. De préférence, on utilise une protection basée sur l'amidation de la fonction hydroxyle de l'extrémité carboxy- terminale par un groupement NYY avec Y représentant une chaîne alkyle de C1 à C4, ou l'estérification par un groupement alkyle. Il est également possible de protéger les deux extrémités du peptide. Les dérivés de peptides concernent aussi les acides aminés et les peptides reliés entre eux par une liaison pseudo-peptidique. On entend par « liaison pseudo-peptidique », tous les types de liaisons susceptibles de remplacer les liaisons peptidiques « classiques ». Dans le domaine des acides aminés, les molécules une géométrie telle, qu'elles peuvent théoriquement se présenter sous la forme d'isomères optiques différents. Il existe ainsi une conformation moléculaire de l'acide aminé (AA) qui dévie à droite le plan de polarisation de la lumière (conformation dextrogyre ou D-aa), et une conformation moléculaire de l'acide aminé (aa) qui dévie à gauche le plan de polarisation de la lumière (conformation lévogyre ou L-aa). Les acides aminés naturels sont toujours de conformation lévogyre, en conséquence, un peptide d'origine naturelle ne sera constitué que d'acides aminés de type L- aa. Cependant, la synthèse chimique en laboratoire permet de préparer des acides aminés ayant les deux conformations possibles. A partir de ce matériel de base, il est possible d'incorporer lors de la synthèse de peptide aussi bien des acides aminés sous forme d'isomères optiques dextrogyre que lévogyre. Ainsi, les acides aminés constituant le peptide selon l'invention peuvent être sous configuration L- et D- ; de manière préférentielle, les acides aminés sont sous forme L. Le peptide selon l'invention peut donc être sous forme L-, D- ou DL-. Le peptide de formule générale (I) selon l'invention peut être obtenu soit par synthèse chimique classique (en phase solide ou en phase homogène liquide), soit par synthèse enzymatique (Kullman et al., J. Biol. Chem. 1980, 225, 8234), à partir d'acides aminés constitutifs ou de leurs dérivés.Many forms of biologically compatible protection can be envisaged. They are well known to those skilled in the art such as, for example, the acylation or acetylation of the amino-terminal end, or the amidation or esterification of the carboxy-terminal end. Thus, the invention relates to a composition as defined above, characterized in that the peptide of sequence SEQ ID No. 1 to SEQ ID No. 10 is in protected form or not. Protection based on a substitution on the amino-terminus by an acetyl group, a benzoyl group, a tosyl group or a benzyloxycarbonyl group can be used. Preferably, a protection based on the amidation of the hydroxyl function of the carboxy-terminal end is used by a NYY group with Y representing a C 1 to C 4 alkyl chain, or esterification with an alkyl group. It is also possible to protect both ends of the peptide. The peptide derivatives also relate to amino acids and peptides linked together by a pseudo-peptide bond. The term "pseudo-peptide bond" means all types of bonds likely to replace the "classical" peptide bonds. In the field of amino acids, the molecules have a geometry such that they can theoretically be in the form of different optical isomers. There is thus a molecular conformation of the amino acid (AA) which deviates on the right the plane of polarization of light (dextrorotatory conformation or D-aa), and a molecular conformation of the amino acid (aa) which deviates to the left the plane of polarization of the light (laevorotatory conformation or L-aa). The natural amino acids are always of levorotatory conformation, therefore, a naturally occurring peptide will consist only of L-aa amino acids. However, chemical synthesis in the laboratory makes it possible to prepare amino acids having both possible conformations. From this basic material, it is possible to incorporate during the peptide synthesis both amino acids in the form of optical isomers dextrorotatory and levorotatory. Thus, the amino acids constituting the peptide according to the invention can be in L- and D- configuration; preferably, the amino acids are in L form. The peptide according to the invention can therefore be in L-, D- or DL- form. The peptide of general formula (I) according to the invention can be obtained either by conventional chemical synthesis (in solid phase or in homogeneous liquid phase) or by enzymatic synthesis (Kullman et al., J. Biol Chem 1980, 225 , 8234), from constituent amino acids or their derivatives.
Le peptide selon l'invention peut également être obtenu par fermentation d'une souche de bactéries modifiées ou non, par génie génétique, ou encore par extraction de protéines d'origine animale ou végétale, préférentiellement d'origine végétale, suivie d'une hydrolyse contrôlée qui libère des fragments peptidiques correspondant totalement ou partiellement aux peptides de formule générale (I).The peptide according to the invention can also be obtained by fermentation of a strain of bacteria modified or not, by genetic engineering, or by extraction of proteins of animal or plant origin, preferably of plant origin, followed by hydrolysis. controlled which releases peptide fragments totally or partially corresponding to the peptides of general formula (I).
De très nombreuses protéines trouvées dans les plantes sont susceptibles de contenir ces séquences au sein de leur structure. L'hydrolyse ménagée permet de dégager ces fragments peptidiques. Il est possible, mais non nécessaire pour réaliser l'invention, d'extraire soit les protéines concernées d'abord et de les hydrolyser ensuite, soit d'effectuer l'hydrolyse d'abord sur un extrait brut et de purifier les fragments peptidiques ensuite. Il est également possible d'utiliser certains extraits hydrolyses sans en purifier les fragments peptidiques correspondant aux peptides de formule générale I selon l'invention, mais en s'assurant toutefois de la présence desdits fragments par des moyens analytiques appropriés.Many proteins found in plants are likely to contain these sequences within their structure. The controlled hydrolysis makes it possible to release these peptide fragments. It is possible, but not necessary to carry out the invention, to extract either the proteins concerned first and then hydrolyze them, or to carry out the hydrolysis first on a crude extract and then to purify the peptide fragments. . It is also possible to use certain hydrolysed extracts without purifying the peptide fragments corresponding to the peptides of general formula I according to the invention, but nevertheless ensuring the presence of said fragments by appropriate analytical means.
D'autres procédés plus simples ou plus complexes peuvent être envisagés par l'homme du métier connaissant le métier de synthèse, d'extraction et de purification des protéines et des peptides. Ainsi, le peptide selon l'invention peut être d'origine naturelle ou synthétique. Préférentiellement selon l'invention, le peptide est obtenu par synthèse chimique.Other simpler or more complex processes may be envisaged by those skilled in the art of synthesis, extraction and purification of proteins and peptides. Thus, the peptide according to the invention may be of natural or synthetic origin. Preferably according to the invention, the peptide is obtained by chemical synthesis.
Selon l'invention, l'agent actif peut être un peptide unique, un mélange de peptides ou de dérivés peptidiques et/ou constitués de dérivés d'acides aminés.According to the invention, the active agent may be a single peptide, a mixture of peptides or peptide derivatives and / or constituted by amino acid derivatives.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'agent actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables, classiquement utilisés par l'homme du métier, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants.According to an advantageous embodiment of the invention, the active agent according to the invention is first solubilized in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents, conventionally used by those skilled in the art, such as water, glycerol ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petroleum jelly, a vegetable oil or any mixture of these solvents.
Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, l'agent actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable.According to yet another advantageous embodiment of the invention, the active agent according to the invention is solubilized beforehand in a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on powdery organic polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in, or attached to, any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier.
L'invention a pour second objet une composition cosmétique, nutraceutique ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement adapté, une quantité efficace de peptide dérivé de protéines de la famille des aquaporines, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif.The subject of the invention is a cosmetic, nutraceutical or pharmaceutical composition, and especially a dermatological composition, comprising, in a physiologically adapted medium, an effective amount of peptide derived from proteins of the family of aquaporins, as active agent, alone or in association with at least one other active agent.
Il est bien évident que l'invention s'adresse aux mammifères en général, et plus particulièrement aux êtres humains. La quantité efficace d'agent actif correspond à la quantité nécessaire pour obtenir le résultat recherché, à savoir, améliorer l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme, et/ou stimuler la régénération cutanée, et/ou prévenir ou lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses et les manifestations du vieillissement cutané.It is obvious that the invention is directed to mammals in general, and more particularly to humans. The effective amount of active agent corresponds to the amount necessary to obtain the desired result, namely, to improve the hydration and the barrier function of the epidermis, and / or to stimulate skin regeneration, and / or to prevent or fight against dryness of the skin and mucous membranes and the manifestations of skin aging.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'agent actif selon l'invention est présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,0005 et 500 ppm (parties par million) environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 ppm environ par rapport au poids total de la composition finale. La composition utilisable selon l'invention peut en particulier consister en une composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en œuvre une application qui est suivie ou non d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing. Ainsi, l'agent actif selon l'invention pourra avantageusement être utilisé dans les soins antipelliculaires du cuir chevelu.According to an advantageous embodiment of the invention, the active agent according to the invention is present in the compositions of the invention at a concentration of between about 0.0005 and 500 ppm (parts per million), and preferably at a concentration of concentration between about 0.01 and 5 ppm relative to the total weight of the final composition. The composition that can be used according to the invention may in particular consist of a composition for hair care, and in particular a shampoo, a conditioner, a treatment lotion, a cream or a styling gel, a restructuring lotion for the hair, a mask, etc. . The cosmetic composition according to the invention can be used in particular in treatments using an application that is followed or not by a rinse, or in the form of shampoo. Thus, the active agent according to the invention may advantageously be used in anti-dandruff care of the scalp.
Elle peut également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux.It can also be in the form of dye or mascara to be applied with a brush or a comb, in particular on eyelashes, eyebrows or hair.
II est bien entendu que l'agent actif selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique et/ou dermatologique. Avantageusement, les compositions utilisables selon l'invention contiennent en outre divers agents actifs hydratants, destinés, notamment, à la prévention et/ou au traitement des désordres liés au vieillissement. Ainsi, la composition selon l'invention peut associer du glycérol, en tant qu'agent actif adjuvant, à l'agent actif décrit dans la présente invention. Cette association est particulièrement avantageuse et procure une efficacité d'hydratation optimale, comparée à l'utilisation du glycérol seul.It is understood that the active agent according to the invention may be used alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition, or for the preparation of a pharmaceutical and / or dermatological composition. Advantageously, the compositions that can be used according to the invention also contain various moisturizing active agents intended, in particular, for the prevention and / or treatment of aging-related disorders. Thus, the composition according to the invention can associate glycerol, as an adjuvant active agent, with the active agent described in the present invention. This combination is particularly advantageous and provides optimum hydration efficiency, compared to the use of glycerol alone.
Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par voie topique cutanée. Ces compositions doivent donc contenir un milieu cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et les phanères, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions pourront notamment être sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions, sticks ou encore de poudres, et adaptées à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions comprennent les excipients nécessaires à leur formulation, tels que solvants, épaississants, diluants, tensioactifs, anti-oxydants, colorants, conservateurs, parfums. Selon une autre forme de l'invention, les compositions seront appropriées à une administration orale pour un usage pharmaceutique ou nutraceutique. Ainsi, les compositions pourront notamment se présenter sous forme de comprimés, capsules, gélules, pâtes à mâcher, poudres à consommer telles quelles ou à mélanger extemporanément avec un liquide, sirops, gels, et toute autre forme connue de l'homme du métier. Elles contiendront des excipients de formulation appropriés, tels que colorants, édulcorants, aromatisants, agents de charge, liants, conservateurs.The compositions according to the invention may be applied by any appropriate route, in particular oral, parenteral or external topical, and their formulation will be adapted by those skilled in the art, in particular for cosmetic or dermatological compositions. Advantageously, the compositions according to the invention are intended for topical administration to the skin. These compositions must therefore contain a cosmetically and / or dermatologically acceptable medium, that is to say compatible with the skin and superficial body growths, and cover all cosmetic or dermatological forms. These compositions may especially be in the form of creams, oil-in-water emulsions, or water-in-oil or multiple emulsions, solutions, suspensions, gels, milks, lotions, sticks or powders, and adapted to an application on the skin, lips and / or integuments. These compositions comprise the excipients necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, surfactants, antioxidants, dyes, preservatives, perfumes. According to another form of the invention, the compositions will be suitable for oral administration for pharmaceutical or nutraceutical use. Thus, the compositions may especially be in the form of tablets, capsules, capsules, chewable pastes, powders to be consumed as such or to mix extemporaneously with a liquid, syrups, gels, and any other form known to those skilled in the art. They will contain suitable formulation excipients, such as colorants, sweeteners, flavoring agents, bulking agents, binders, preservatives.
Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples ; elles peuvent aussi se présenter sous forme de crèmes, de suspensions, ou encore de poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, comme un stick, ou être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Elles peuvent être utilisées comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la peau.These compositions may especially be in the form of an aqueous solution, hydroalcoholic or oily; an oil-in-water, water-in-oil emulsion or multiple emulsions; they may also be in the form of creams, suspensions or powders, suitable for application to the skin, mucous membranes, lips and / or integuments. These compositions may be more or less fluid and have the appearance of a cream, lotion, milk, serum, ointment, gel, paste or paste. a foam. They can also be in solid form, as a stick, or be applied to the skin in the form of an aerosol. They can be used as a care product and / or as a make-up product for the skin.
Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels que des solvants, des épaississants, des diluants, des anti-oxydants, des colorants, des filtres solaires, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, etc.These compositions additionally comprise any additive commonly used in the field of application envisaged as well as the adjuvants necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, antioxidants, dyes, sunscreens, self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, odor absorbers, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, etc. .
Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de telle manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, correspondre à 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la phase grasse peut représenter de 5 à 80 % en poids et de préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsionnants et co-émulsionnants utilisés dans la composition seront choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine considéré. Par exemple, ils peuvent être utilisés en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, par rapport au poids total de la composition. L'invention a pour troisième objet l'utilisation de l'agent actif dans des compositions cosmétiques ou nutraceutiques, ou pour la préparation de compositions pharmaceutiques.In all cases, those skilled in the art will ensure that these adjuvants and their proportions are chosen so as not to adversely affect the desirable properties of the composition according to the invention. These adjuvants may, for example, correspond to 0.01 to 20% of the total weight of the composition. When the composition of the invention is an emulsion, the fatty phase may represent from 5 to 80% by weight and preferably from 5 to 50% by weight relative to the total weight of the composition. The emulsifiers and co-emulsifiers used in the composition will be chosen from those conventionally used in the field under consideration. For example, they can be used in a proportion ranging from 0.3 to 30% by weight, relative to the total weight of the composition. The third object of the invention is the use of the active agent in cosmetic or nutraceutical compositions, or for the preparation of pharmaceutical compositions.
Ainsi, l'agent actif, grâce à ses propriétés particulières, pourra être utilisé dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à améliorer l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme ou destinée à prévenir ou à traiter la sécheresse cutanée.Thus, the active agent, thanks to its particular properties, can be used in a cosmetic or nutraceutical composition for improving the hydration and barrier function of the epidermis or for preventing or treating dry skin.
D'autre part, l'agent actif selon l'invention pourra être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à lutter de manière préventive et/ou curative contre les manifestations du vieillissement cutané, et plus spécifiquement, afin de lutter contre et/ou de prévenir le vieillissement photo-induit (photo-vieillissement). Par manifestations cutanées du vieillissement, on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau et des phanères dues au vieillissement comme, par exemple, les rugosités superficielles de la couche cornée, les rides et ridules, mais également toute modification interne de la peau qui ne se traduit pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, l'amincissement du derme ou toute autre dégradation interne de la peau consécutive à une exposition aux rayonnements ultraviolets (UV). Ainsi, l'agent actif selon l'invention, ou la composition le contenant, permettra de lutter, en particulier, contre la perte d'efficacité de la fonction barrière de la peau et permettra de stimuler la régénération du derme et de l'épiderme.On the other hand, the active agent according to the invention can advantageously be used in a cosmetic or nutraceutical composition intended to fight in a preventive and / or curative manner against the manifestations of cutaneous aging, and more specifically, in order to fight against and / or to prevent photo-induced aging (photo-aging). Skin manifestations of aging means any changes in the external appearance of the skin and skin appendages due to aging, such as, for example, the superficial roughness of the stratum corneum, wrinkles and fine lines, but also any internal modification of the skin. which does not systematically result in a modified external appearance such as, for example, the thinning of the dermis or any other internal degradation of the skin following exposure to ultraviolet (UV) radiation. Thus, the active agent according to the invention, or the composition containing it, will make it possible, in particular, to combat the loss of effectiveness of the skin barrier function and will make it possible to stimulate the regeneration of the dermis and the epidermis .
Selon un autre aspect de l'invention, l'agent actif selon l'invention pourra être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à protéger la peau et les muqueuses contre tous types d'agressions extérieures.According to another aspect of the invention, the active agent according to the invention may advantageously be used in a cosmetic or nutraceutical composition intended to protect the skin and the mucous membranes against all types of external aggressions.
On entend par l'expression « agression extérieure », les agressions que peut produire l'environnement. A titre d'exemple, on peut citer des agressions telles que la pollution, les UV, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou les parfums. Par pollution, on entend aussi bien la pollution « extérieure » due par exemple aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution « intérieure » qui peut être due notamment aux émissions de solvants de peintures, de colles, ou de papier- peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldehyde), ou bien encore la fumée de cigarette. La sécheresse de l'atmosphère est également une cause importante de dessèchement cutané. Les agressions que subissent la peau et les cheveux sont dues, par exemple, à un déséquilibre du gradient électrochimique à travers la membrane cellulaire, ce qui peut aboutir à des variations importantes de la pression osmotique et cela peut avoir pour conséquence des chocs osmotiques et donc la lyse des cellules. Or les inventeurs ont démontré, d'une manière surprenante, que les peptides selon l'invention protègent les cellules contre ces chocs osmotiques.The term "external aggression" refers to the aggressions that the environment can produce. By way of example, mention may be made of aggressions such as pollution, UV, or irritating products such as surfactants, preservatives or perfumes. Pollution is understood to mean both "external" pollution due for example to diesel particles, ozone or heavy metals, and "internal" pollution, which may be due in particular to solvent emissions from paints, glues, or wallpaper (such as toluene, styrene, xylene or benzaldehyde), or even cigarette smoke. Dryness of the atmosphere is also an important cause of skin dryness. The aggressions that the skin and the hair undergo are due, for example, to an imbalance of the electrochemical gradient across the cell membrane, which can lead to significant variations of the osmotic pressure and this can result in osmotic shocks and therefore cell lysis. The inventors have surprisingly demonstrated that the peptides according to the invention protect cells against these osmotic shocks.
La peau peut également être agressée par des traitements tels que le rasage.The skin can also be attacked by treatments such as shaving.
Avantageusement, l'invention a pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace d'agent actif tel que décrit précédemment, l'agent actif, ou la composition le contenant, étant destiné à prévenir ou à traiter les dommages causés à la peau par le rasage.Advantageously, the subject of the invention is the use in a cosmetic composition of an effective quantity of active agent as described above, the active agent, or the composition containing it, being intended for preventing or treating damage. caused to the skin by shaving.
Selon encore un autre aspect de l'invention, l'agent actif pourra être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou nutraceutique, ou pour préparer une composition pharmaceutique destinée à stimuler la régénération cutanée.According to yet another aspect of the invention, the active agent may be used advantageously in a cosmetic or nutraceutical composition, or to prepare a pharmaceutical composition intended to stimulate skin regeneration.
L'invention a également pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une quantité efficace d'agent actif tel que décrit précédemment, l'agent actif, ou la composition le contenant, étant destiné à prévenir les dommages causés à la peau par une exposition au soleil ou à un environnement desséchant.The invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective amount of active agent as described above, the active agent, or the composition containing it, being intended to prevent damage to the skin caused by exposure to the sun or a drying environment.
L'invention consiste encore en l'utilisation de l'agent actif pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou traiter les pathologies caractérisées par une sécheresse de la peau et des muqueuses, telles que l'eczéma, la xérose, les dermatites atopiques, les sécheresses buccales, oculaires ou vaginales.The invention also consists in the use of the active agent for the preparation of a pharmaceutical composition intended to prevent or treat pathologies characterized by dryness of the skin and mucous membranes, such as eczema, xerosis, atopic dermatitis, dry mouth, eye or vaginal.
L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à améliorer l'aspect de la peau et prévenir ou à lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses, selon lequel on applique une quantité efficace d'un peptide dérivé de l'aquaporine, ou une composition le contenant, sur les zones à traiter.The invention also consists of a cosmetic treatment method intended to improve the appearance of the skin and to prevent or combat the dryness of the skin and mucous membranes, according to which an effective amount of a peptide derived from the skin is applied. aquaporin, or a composition containing it, on the areas to be treated.
L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les signes cutanés du vieillissement et/ou du photo-vieillissement, selon lequel on applique une quantité efficace d'un peptide dérivé de l'aquaporine, ou une composition le contenant, sur les zones à traiter.The invention also consists of a cosmetic treatment method intended to prevent and / or fight against the cutaneous signs of aging and / or photo-aging, according to which is applied an effective amount of a peptide derived from aquaporin, or a composition containing it, on the areas to be treated.
Des modes de réalisation particuliers de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif.Particular embodiments of this cosmetic treatment method also result from the foregoing description. Other advantages and characteristics of the invention will appear better on reading the examples given by way of illustration and not limitation.
Exemple 1 : Evaluation de l'effet protecteur du peptide SEO ID n°4 vis-à-vis d'un choc osmotique Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du peptide SEQ ID n°4 vis-à- vis de kératinocytes humains normaux soumis à un choc osmotique provoqué par le sorbitol. L'évaluation de l'état cellulaire s'effectue ensuite par un test de viabilité au MTT.EXAMPLE 1 Evaluation of the Protective Effect of SEO Peptide ID No. 4 on Osmotic Shock The aim of this study is to determine the protective effect of peptide SEQ ID No. 4 with respect to of normal human keratinocytes subjected to osmotic shock caused by sorbitol. The evaluation of the cellular state is then carried out by an MTT viability test.
Protocole :Protocol:
Des kératinocytes humains normaux en culture ont été mis en présence du peptide SEQ ID n°4 à 0,5 %, 1 % et 3 % à partir d'une solution mère à 50 ppm, 24 heures avant et pendant le choc osmotique. Les conditions de culture hypertoniques sont réalisées en ajoutant du sorbitol à 250 mM au milieu de culture pendant 24 heures. Des contrôles non traités sont réalisés.Normal human keratinocytes in culture were placed in the presence of peptide SEQ ID No. 4 at 0.5%, 1% and 3% from a 50 ppm stock solution 24 hours before and during the osmotic shock. Hypertonic culture conditions are performed by adding 250 mM sorbitol to the culture medium for 24 hours. Untreated controls are performed.
Des tests de viabilité cellulaire ont ensuite été réalisés par la technique au MTT. L'agent MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium bromide) est utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire. Les kératinocytes sont incubés dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium bromide). Ce composé est absorbé par les cellules vivantes puis métabolisé par les enzymes mitochondriales (succinate déshydrogénase) en un composé bleu violet, le formazan, qui se présente sous forme de cristaux violets insolubles en milieu aqueux.Cell viability tests were then performed using the MTT technique. The MTT agent (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide) is used to evaluate cell viability. The keratinocytes are incubated in a solution containing 0.1 mg / ml of MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide). This compound is absorbed by living cells and then metabolized by the mitochondrial enzymes (succinate dehydrogenase) into a blue violet compound, formazan, which is in the form of violet crystals insoluble in aqueous medium.
Les cristaux de formazan sont solubilisés dans du DMSO et produisent une densité optique (D. O.) proportionnelle au nombre de cellules vivantes présentes dans l'échantillon.The formazan crystals are solubilized in DMSO and produce an optical density (O.D.) proportional to the number of living cells present in the sample.
Des mesures de densité optique à 540 nm sont ensuite réalisées pour chaque échantillon étudié. La D.O. est alors directement proportionnelle à l'activité enzymatique ainsi qu'au nombre de cellules vivantes. Résultats :Optical density measurements at 540 nm are then made for each sample studied. The OD is then directly proportional to the enzymatic activity as well as to the number of living cells. Results:
Les résultats obtenus montrent une augmentation de la viabilité, dose-dépendante, des cellules soumises au choc osmotique lorsque les cellules sont traitées avec le peptide SEQ ID n°4, en comparaison avec les cellules non traitées. L'augmentation de viabilité est de 12 % lorsque les cellules sont traitées avec le peptide SEQ DD n°4 à 3 %,The results obtained show an increase in the dose-dependent viability of cells subjected to osmotic shock when the cells are treated with the peptide SEQ ID No. 4, compared with the untreated cells. The increase in viability is 12% when the cells are treated with peptide SEQ ID No. 4 at 3%,
Conclusions :Conclusions:
Le peptide SEQ ID n°4 protège efficacement les kératinocytes humains normaux soumis à un choc osmotique.The peptide SEQ ID No. 4 effectively protects normal human keratinocytes subjected to osmotic shock.
Exemple 2 : Evaluation de l'effet protecteur du peptide SEQ ID n°5 vis-à-vis d'une déshydratation cutanée induiteEXAMPLE 2 Evaluation of the Protective Effect of Peptide SEQ ID No. 5 with Respect to Induced Skin Dehydration
Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du peptide SEQ ID n°5, vis-à- vis de cultures d'épiderme ex vivo soumises à un stress par une déshydratation cutanée induite. Protocole :The purpose of this study is to determine the protective effect of peptide SEQ ID No. 5 vis-à-vis ex vivo epidermis cultures subjected to stress by induced skin dehydration. Protocol:
Des biopsies de peau humaine sont débarrassées de leur couche cornée par arrachage à l'aide de ruban adhésif (tape stripping) puis maintenues en culture ex vivo et traitées avec une solution à 1 %, d'une solution mère à 50 ppm de peptide SEQ ID n°5 pendant 24 heures. L'absence de couche cornée induit une déshydratation importante. Des coupes et des colorations histologiques hématoxyline-éosine (H&E) permettent d'évaluer la qualité des structures cutanées.Biopsies of human skin are stripped of their stratum corneum by tape-stripping and then cultured ex vivo and treated with a 1% solution of a 50 ppm SEQ peptide stock solution. ID # 5 for 24 hours. The absence of stratum corneum induces significant dehydration. Hematoxylin-Eosin (H & E) histological sections and stainings are used to evaluate the quality of cutaneous structures.
Résultats :Results:
L'observation des coupes de peau montrent une nette diminution des signes de stress cellulaire et une meilleure préservation des structures cutanées dans les biopsies de peau traitées par le peptide SEQ DD n°5, comparées aux biopsies de peau non traitées. D'autre part, l'aspect des kératinocytes de l'assise basale montre un effet régénérant du peptide SEQThe observation of the skin sections shows a clear decrease of the signs of cellular stress and a better preservation of the cutaneous structures in the skin biopsies treated with the peptide SEQ DD n ° 5, compared to the untreated skin biopsies. On the other hand, the appearance of the keratinocytes of the basal layer shows a regenerating effect of the SEQ peptide
ID n°5.ID No. 5.
Conclusions :Conclusions:
Le peptide SEQ ID n°5 protège efficacement la peau du stress induit par la déshydratation. D'autre part, le peptide SEQ ID n°5 permet une régénération de l'épiderme. Exemple 3 : Mise en évidence de l'effet activateur du peptide SEQ ID n°5 sur l'expression des claudines et de la kératine KlOThe peptide SEQ ID No. 5 effectively protects the skin from the stress induced by dehydration. On the other hand, the peptide SEQ ID No. 5 allows a regeneration of the epidermis. EXAMPLE 3 Demonstration of the Activating Effect of Peptide SEQ ID No. 5 on the Expression of Claudines and Keratin KlO
Le but de cette étude est de déterminer l'influence du peptide SEQ ID n°5 sur l'expression des claudines et de la kératine KlO. Les claudines sont les principales protéines transmembranaires des structures d'adhésion intercellulaires nommées tight-junction, qui jouent un rôle dans la communication cellulaire et la cohésion épidermique. La kératine KlO est une kératine spécifique des couches épidermiques différenciées (stratum granulosum) et intervient dans la fonction barrière de la peau. La quantité de protéine a été évaluée par immunofluorescence sur des coupes de peau humaine.The aim of this study is to determine the influence of peptide SEQ ID No. 5 on the expression of claudines and keratin KlO. Claudines are the main transmembrane proteins of intercellular adhesion structures called tight-junction, which play a role in cellular communication and epidermal cohesion. KlO keratin is a specific keratin of differentiated epidermal layers (stratum granulosum) and is involved in the barrier function of the skin. The amount of protein was evaluated by immunofluorescence on sections of human skin.
Protocole : Des échantillons de peau humaine sont mis en culture à l'interface air/liquide. Une solution à 1 % d'une solution mère à 50 ppm de peptide SEQ DD n°5 est appliquée topiquement, puis les échantillons sont incubés durant 24 heures.Protocol: Human skin samples are cultured at the air / liquid interface. A 1% solution of a 50 ppm stock solution of SEQ ID No. 5 peptide is applied topically, and then the samples are incubated for 24 hours.
Ces échantillons de peau sont ensuite fixés avec du formaldéhyde puis inclus dans la paraffine. Des coupes de 2 à 3 μm sont alors réalisées. L'immunomarquage est effectué après différentes étapes de lavage et d'incubation de ces coupes.These skin samples are then fixed with formaldehyde and then embedded in paraffin. Sections of 2 to 3 μm are then made. Immunolabeling is performed after various stages of washing and incubation of these sections.
L'immunomarquage de la Claudin-1 est réalisé à l'aide d'un anticorps spécifique de la claudin-1 (anticorps claudin-1: rabbit polyclonal, ref: Abl5098, Abcam, dilution l/200eme), puis d'un anticorps secondaire, couplé à un marqueur fluorescent (alexa Fluor 488 donkey anti-rabbit IgG, A21206, Molecular Probes, l/1000ème).The immunolabeling of Claudin-1 is carried out using an antibody specific for claudin-1 (claudin-1 antibody: rabbit polyclonal, ref: Abl5098, Abcam, dilution l / 200 eme ), then a secondary antibody coupled to a fluorescent marker (Alexa Fluor 488 donkey anti-rabbit IgG, A21206, Molecular Probes, l / 1000th).
L'immunomarquage de la Kératine 10 est réalisé à l'aide d'un anticorps spécifique de la kératine 10 (anticorps KlO: mouse monoclonal, ref: LHPl, Novocastra, dilution l/50ème), puis d'un anticorps secondaire, couplé à un marqueur fluorescent (alexa Fluor 488 donkey anti-mouse IgG, A21202, Molecular Probes, l/1000ème). Les coupes de peau sont alors examinées au microscope à Epi-fluorescence (Nikon Eclipse E600 microscope).Immunolabelling of Keratin 10 is made using an antibody specific for keratin 10 (Klo antibodies: mouse monoclonal, ref: LHPl, Novocastra, dilution l / 50th), and then a secondary antibody, coupled with a fluorescent dye (Alexa Fluor 488 donkey anti-mouse IgG, A21202, Molecular Probes, l / 1000th). The skin sections are then examined under an Epi-fluorescence microscope (Nikon Eclipse E600 microscope).
Résultats : Les observations microscopiques montrent une fluorescence plus forte dans les peaux traitées par le peptide SEQ DD n°5 à 1 %, en particulier les couches supérieures de l'épiderme aussi bien pour la protéine claudin-1 que pour la kératine KlO. Conclusions : Le peptide SEQ ID n°5, à la concentration de 0,05 ppm, stimule fortement l'expression des claudines, en particulier dans les couches supérieures de l'épiderme. De même, le peptide SEQ ID n°5, à la concentration de 0,05 ppm, stimule fortement l'expression de la kératine KlO, et plus généralement les fonctions barrières de l'épiderme. Exemple 4 : Préparation de compositionsResults: The microscopic observations show a stronger fluorescence in the skin treated with the peptide SEQ ID No. 5 at 1%, in particular the upper layers of the epidermis for both the claudin-1 protein and the keratin KlO. Conclusions: Peptide SEQ ID No. 5, at a concentration of 0.05 ppm, strongly stimulates the expression of claudines, particularly in the upper layers of the epidermis. Similarly, the peptide SEQ ID No. 5, at a concentration of 0.05 ppm, strongly stimulates the expression of the keratin KlO, and more generally the barrier functions of the epidermis. Example 4: Preparation of compositions
1 - Crème de jour1 - Day cream
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000018_0001
Mode Opératoire :Operating mode:
Peser les ingrédients de la phase grasse et chauffer à 70°C sous agitation. Préparer la phase B et la chauffer à 700C. Emulsionner la phase A dans la phase B. Ajouter la phase D vers 500C sous agitation. En dessous de 4O0C, additionner l'agent actif (Phase D) Parfumer et refroidir jusqu'à température ambiante. 2 - Crème hydratante W/OWeigh the ingredients of the fatty phase and heat to 70 ° C with stirring. Prepare phase B and heat to 70 0 C. Emulsify phase A into phase B. Add phase D at 50 0 C with stirring. Below 40 ° C., add the active agent (Phase D). Perfume and cool to room temperature. 2 - moisturizing cream W / O
Figure imgf000019_0001
Figure imgf000019_0001
Mode Opératoire :Operating mode:
Peser la phase A et chauffer à 75°C sous agitation. Préparer la phase B et la chauffer à 75°C. Emulsionner la phase B dans la phase A sous forte agitation rotor-stator.Weigh phase A and heat to 75 ° C with stirring. Prepare phase B and heat it to 75 ° C. Emulsify phase B in phase A under strong rotor-stator agitation.
Homogénéiser quelques minutes. Refroidir brutalement à l'aide d'un bain d'eau glacée sous vive agitation. Ajouter la phase C aux environs de 5O0C et additionner le parfum (phase D) à 4O0C. Poursuivre le refroidissement jusqu'à température ambiante. 3 - Lotion hydratanteHomogenize a few minutes. Cool suddenly with an ice-water bath with vigorous stirring. Add phase C at about 50 ° C. and add the perfume (phase D) at 40 ° C. Continue cooling to room temperature. 3 - Moisturizing lotion
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000020_0001
Mode Opératoire :Operating mode:
Incorporer les ingrédients un à un à la quantité d'eau nécessaire et agiter jusqu'à parfaite dissolution. Réajuster le pH aux environs de 5,5 si nécessaire. Incorporer l'actif en fin de formulation. Parfumer avec un parfum hydrosoluble sous faible agitation. Add the ingredients one by one to the amount of water needed and shake until dissolved. Readjust the pH to around 5.5 if necessary. Incorporate the asset at the end of the formulation. Perfume with a water-soluble fragrance under slight agitation.

Claims

REVENDICATIONS
1. Peptide dérivé de la famille des aquaporines, caractérisé en ce qu'il correspond à une des séquences suivantes : (SEQ ID n° 1 ) Ser-Met- Asn-Pro-Gly- Arg1. Peptide derived from the family of aquaporins, characterized in that it corresponds to one of the following sequences: (SEQ ID No. 1) Ser-Met-Asn-Pro-Gly-Arg
(SEQ ID n°2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID n°3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ ID n°4) Asn-Pro- AIa- Arg (SEQ ID n°5) Asn-Pro- Ala-Arg-NH2 (SEQ ID n°6) Asn-Pro-Ala(SEQ ID NO: 2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID NO: 3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ ID NO: 4) Asn-Pro-AI-Arg (SEQ ID No. 5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH 2 (SEQ ID No. 6) Asn-Pro-Ala
(SEQ ID n°7) Asn-Pro- AIa-NH2 (SEQ ID n°9) Pro-Ala-Arg-NH2 (SEQ ID NO: 7) Asn-Pro-AIa-NH 2 (SEQ ID No. 9) Pro-Ala-Arg-NH 2
2. Peptide selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il correspond à la séquence SEQ ID n°4.2. Peptide according to claim 1, characterized in that it corresponds to the sequence SEQ ID No. 4.
3. Peptide selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il correspond à la séquence SEQ ID n°5.3. Peptide according to claim 1, characterized in that it corresponds to the sequence SEQ ID No. 5.
4. Peptide selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il possède au moins un groupement fonctionnel protégé par un groupement protecteur, ce groupement protecteur étant soit une acylation ou une acétylation de l'extrémité amino- terminale, soit une amidation ou une estérification de l'extrémité carboxy-terminale, soit les deux.4. Peptide according to any one of the preceding claims, characterized in that it has at least one functional group protected by a protective group, this protecting group being either an acylation or an acetylation of the amino-terminal end, or a amidation or esterification of the carboxy terminus, or both.
5. Peptide selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la protéine de la famille des aquaporines est l'aquaporine 3.5. Peptide according to any one of the preceding claims, characterized in that the protein of the aquaporin family is aquaporin 3.
6. Procédé de préparation d'une composition cosmétique ou pharmaceutique caractérisé en ce qu'un peptide dérivé de la famille des aquaporines et correspondant à une des séquences suivantes :6. A process for preparing a cosmetic or pharmaceutical composition characterized in that a peptide derived from the family of aquaporins and corresponding to one of the following sequences:
(SEQ ID n°l) Ser-Met- Asn-Pro-Gly- Arg(SEQ ID NO: 1) Ser-Met-Asn-Pro-Gly-Arg
(SEQ ID n°2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID n°3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ E) n°4) Asn-Pro-Ala-Arg (SEQ ID n°5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH2 (SEQ ID n°6) Asn-Pro-Ala (SEQ DD n°7) Asn-Pro-Ala-NH2 (SEQ ID NO: 2) Gln-Pro-Ala-Lys-Ser (SEQ ID NO: 3) Asn-Pro-Ala-Arg-Asp (SEQ E) No. 4) Asn-Pro-Ala-Arg (SEQ ID No. 5) Asn-Pro-Ala-Arg-NH 2 (SEQ ID NO: 3) ID No. 6) Asn-Pro-Ala (SEQ ID No. 7) Asn-Pro-Ala-NH 2
(SEQ ID n°8) Pro-Ala-Arg (SEQ ID n°9) Pro-Ala-Arg-NH2 est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants.(SEQ ID No. 8) Pro-Ala-Arg (SEQ ID No. 9) Pro-Ala-Arg-NH 2 is first solubilized in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents, such as water, glycerol, amine ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petroleum jelly, a vegetable oil or any mixture of these solvents.
7. Composition cosmétique ou pharmaceutique, telle qu'obtenue selon le procédé de la revendication 6, caractérisée en ce que ledit peptide est présent à une concentration comprise entre 0,0005 et 500 ppm environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 ppm.7. Cosmetic or pharmaceutical composition, as obtained according to the process of claim 6, characterized in that said peptide is present at a concentration of between approximately 0.0005 and 500 ppm, and preferentially at a concentration of between 0.01. and 5 ppm.
8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle contient en outre du glycérol en tant qu'agent hydratant.8. Composition according to claim 7, characterized in that it further contains glycerol as a moisturizing agent.
9. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à améliorer l'hydratation et la fonction barrière de l'épiderme, ledit peptide étant dérivé d'une protéine de la famille des aquaporines, et étant de formule générale (I)Use of an effective amount of peptide, as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition for improving the hydration and barrier function of the epidermis , said peptide being derived from a protein of the family of aquaporins, and being of general formula (I)
R1-(AA)n-X1-X2-X3-PrO-X4-X5-X6-(AA)P-R2 dans laquelle,R 1 - (AA) n -X 1 -X 2 -X 3 -PrO-X 4 -X 5 -X 6 - (AA) P -R 2 in which,
X1 est la serine ou aucun acide aminé,X 1 is serine or no amino acid,
X2 est la méthionine ou la leucine ou aucun acide aminé, X3 est l'asparagine ou la glutamine ou aucun acide aminé,X 2 is methionine or leucine or no amino acid, X 3 is asparagine or glutamine or no amino acid,
X4 est l'alanine ou la glycine,X 4 is alanine or glycine,
Xs est l'arginine ou la lysine ou aucun acide aminé,Xs is arginine or lysine or no amino acid,
X6 est la serine, l'acide aspartique ou aucun acide aminé, AA représente un acide aminé quelconque, ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers compris entre 0 et 4,X 6 is serine, aspartic acid or no amino acid, AA represents any amino acid, or a derivative thereof, and n and p are integers between 0 and 4,
R1 représente la fonction aminé primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle,R 1 represents the primary amino function of the N-terminal amino acid, free or substituted by a protective group which may be chosen from an acetyl group, a benzoyl group, a tosyl group or a benzyloxycarbonyl group,
R2 représente le groupe hydroxyle de la fonction carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substitué par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi une chaîne alkyle de C1 à C2o, ou un groupement NH2, NHY ou NYY avec Y représentant une chaîne alkyle de C1 à C4, ladite séquence de formule générale (I) étant constituée de 2 à 15 résidus d'acides aminés, ladite séquence de formule générale (I) pouvant comprendre des substitutions des acides aminés X1 à X6 par d'autres acides aminés chimiquement équivalents.R 2 represents the hydroxyl group of the carboxyl function of the C-terminal amino acid, free or substituted with a protecting group that may be chosen from a C 1 to C 2 0 alkyl chain, or an NH 2, NHY or NYY group with Y represents an alkyl chain of C 1 to C 4 , said sequence of general formula (I) consisting of 2 to 15 amino acid residues, said sequence of general formula (I) may comprise substitutions of amino acids X 1 to X 6 by other chemically equivalent amino acids.
10. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans la revendication 9, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique, destinée à prévenir ou à traiter la sécheresse cutanée.Use of an effective amount of peptide as defined in claim 9 as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition for preventing or preventing treat cutaneous dryness.
11. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans la revendication 9, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à protéger la peau et les muqueuses des agressions extérieures.Use of an effective amount of peptide as defined in claim 9 as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition for protecting the skin and the mucous membranes of external aggressions.
12. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans la revendication 9, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à stimuler la régénération cutanée.Use of an effective amount of peptide, as defined in claim 9, as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for stimulating skin regeneration.
13. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans la revendication 9, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou nutraceutique destinée à prévenir ou à traiter les signes cutanés du vieillissement et/ou du photo- vieillissement. Use of an effective amount of peptide, as defined in claim 9, as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic or nutraceutical composition for preventing or treating cutaneous signs of aging and / or photo-aging.
14. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans la revendication 9, en tant qu'agent actif, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou traiter les états pathologiques liés à la sécheresse de la peau ou des muqueuses.Use of an effective amount of peptide, as defined in claim 9, as an active agent, alone or in combination with at least one other active agent, for preparing a pharmaceutical composition for preventing or treating conditions pathological conditions related to dryness of the skin or mucous membranes.
15. Procédé de traitement cosmétique destiné à améliorer l'aspect de la peau et à prévenir et/ou lutter contre la sécheresse de la peau et des muqueuses, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau ou les muqueuses à traiter une composition contenant une quantité efficace d'agent actif tel que défini dans la revendication 9.15. Cosmetic treatment method intended to improve the appearance of the skin and to prevent and / or fight against the dryness of the skin and mucous membranes, characterized in that it is applied topically to the skin or the mucous membranes to treat a skin. composition containing an effective amount of active agent as defined in claim 9.
16. Procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les signes cutanés du vieillissement et/ou du photo-vieillissement, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau à traiter une composition contenant une quantité efficace d'agent actif tel que défini dans la revendication 9. 16. Cosmetic treatment process intended to prevent and / or to fight against the cutaneous signs of aging and / or photo-aging, characterized in that a composition containing an effective amount of treatment is applied topically to the skin to be treated. active agent as defined in claim 9.
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