WO2009104990A1 - 2,4-diaminopyridine derivatives, a pharmaceutical composition and a medicinal agent which are based thereon and used for treating or preventing diseases and disturbances caused by the hyperactivation of nmda-receptors and/or in the form of cognitive function stimulators and a method for the use thereof - Google Patents

2,4-diaminopyridine derivatives, a pharmaceutical composition and a medicinal agent which are based thereon and used for treating or preventing diseases and disturbances caused by the hyperactivation of nmda-receptors and/or in the form of cognitive function stimulators and a method for the use thereof Download PDF

Info

Publication number
WO2009104990A1
WO2009104990A1 PCT/RU2009/000083 RU2009000083W WO2009104990A1 WO 2009104990 A1 WO2009104990 A1 WO 2009104990A1 RU 2009000083 W RU2009000083 W RU 2009000083W WO 2009104990 A1 WO2009104990 A1 WO 2009104990A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
compound
compounds
nmda
rule
substitute sheet
Prior art date
Application number
PCT/RU2009/000083
Other languages
French (fr)
Russian (ru)
Inventor
Владимир Григорьевич ГРАНИК
Валерий Александрович ПАРШИН
Геннадий Яковлевич ШВАРЦ
Original Assignee
Общество С Ограниченной Ответственностью "Валексфарм"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество С Ограниченной Ответственностью "Валексфарм" filed Critical Общество С Ограниченной Ответственностью "Валексфарм"
Publication of WO2009104990A1 publication Critical patent/WO2009104990A1/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/74—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system

Definitions

  • the invention relates to the field of chemistry, medicine and the pharmacological industry and relates to new derivatives of 2, 4-diaminopyridine of the general formula (I), their pharmaceutically acceptable salts and / or solvates, which are active against the central nervous system, the method for their preparation, compositions, drugs containing new derivatives of 2, 4-aminopyridine, and their use as blockers of NMDA receptors, as well as as stimulants of cognitive functions.
  • the glutamatergic system is the main exciting neurotransmitter system involved in the implementation of all the basic physiological functions of the brain, including maintaining its tone, wakefulness, psychological and physical activity, in the perception of sensory information.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) various modality, especially sensitive and pain impulses. She also has one of the leading roles in the implementation of synaptic plasticity and the highest integrative functions of the brain, including the ability to learn, shape and function of memory, and regulate behavior (Lodge D. Expert Amipo Acids and Non-apd Disase. J. Wileu & Sops: Chestestr , 1988; Whael H., Thompson A. - Exitor Amipo Acids and Sapartis Trissmissiop. Asademis Press: Lopdop, 1991).
  • Glutamatergic mechanisms of transmission of nerve impulses are present in approximately 40% of nerve cells, and the remaining part falls to the share of all other mediators (norepinephrine, serotonin, acetylcholine, dopamine, etc.) (A. Boldyrev. Neuronal receptors in the cells of the immune system // Nature, 2005, Ns 7 (1079), pp. 3-8).
  • the receptors of the main excitatory neurotransmitter, glutamate, are divided into two main classes: ionotropic and metabotropic.
  • Ionotropic receptors are structurally associated with ion channels, their activation by glutamate or agonists that mimic the action of glutamate leads to the depolarization of cell membranes and the opening of ion channels and, as a result, to the generation of an exciting postsynaptic potential.
  • Metabotropic receptors are a family of receptors conjugated with G-proteins that act on the ion channel indirectly through a chain of biochemical reactions, in particular, through the activation of a system of secondary messengers.
  • Ionotropic receptors are divided into 3 subtypes, named after the corresponding selective agonists: AMPA (2-alpha receptor - amino-3-hydroxy-5-methyl-4-
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) isoxazole propionic acid), KA (kainic acid receptor) and NMDA (N-methyl-D-aspartate receptor) (Wattkeeps J, Kroggsard-Larsep P, Honor T accelerate receptors, supplements Terps PHARMACOL Sci., 1990, 11, p. 25-33).
  • Metabotropic glutamate receptors are divided into three groups (Moleculoperiologic schreibf glutamate receptors. Appl. Rev ⁇ proficienthusiol 54: 507-536) Nozzle PJ, Pin JP ⁇ réellermacolptosptosoptosptos Rev. Pharmacol. Toxico L, 1997, 37, p.205-237).
  • ionotropic receptors Activation of ionotropic receptors induces the electrical activity of a neuron, while metabotropic receptors regulate its size and duration (A. Boldyrev. Functional interactions between glutamate receptors of different classes // Bull. Expert. Biol. And Med., 2000, v. 130, JYo 9, p. 244-252).
  • NMDA receptor The activity of the NMDA receptor is regulated by many modulatory sites that can be targets for selective agonists and antagonists (McBaip CJ., Mauer M.L. N-metul-D-acrartis aspertortorstrucure apfuptiop // Prusio 1, Rev. 1. v. 74, N ° 3, p. 723-
  • glutamatergic neurotransmission normal activation of the NMDA receptor causes a short-term opening of the calcium channel.
  • glutamate NMDA receptors are overactivated, causing prolonged neural excitation and leading to excessive intake of calcium ions into the neurons.
  • excitotoxicity from the English word “exotoxicity” - toxicity that develops upon excitation (Rothmap, SM, Olpeu, JW // Trepds ip Nepur. 10, M> 7, p.299-302; Non-Disorders schreibf Amipo Acids Metabolism, New York: Masmillap, 1989, p.
  • Excitotoxicity is believed to be a universal molecular mechanism for the development of any neurodegenerative process, since it is observed in the most diverse etiology of neurological and psychiatric diseases associated with neuronal death or impaired function (Bespalov A.Yu., Zvartau E.E. Neuropsychopharmacology of NMDA receptor antagonists , St. Orlando: Nevsky dialect, 2000, 297 pp.; Brian S. ⁇ Brassldrum Glutamate réelles réelle N Foodur thoroughlytr réellepsmitter Appel ⁇ prionp: R Canalv Foodw THERf Rhusi Cincinnatilog apd Rath Desitritiop. 1.
  • Wipebapk AJ Mechanisms of peoroti with ipjuru apdll deat // Neurol. CHn., 2000, Aug, 18 (3), pp. 525-540; Rubi LL, Neuropal cell de: ap uradated viw // Prog. Vraip. Res., 1998, 117, p. 3-8; Shoi DW Glutamate peruhotisit apd diseses of the first system // Neurop, 1988, v. 1, p. 623-634).
  • Possible therapeutic indications for NMDA receptor antagonists include acute forms of neurodegenerative diseases caused, for example, by cerebral ischemia, stroke, hypoxia, hypoglycemia, brain injury or spinal cord injury; chronic neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, epilepsy, multi dementia, Huntington's chorea, multiple sclerosis, amyotrophic lateral sclerosis; degenerative diseases of the retina, neurodegenerative diseases, associated with a bacterial or viral infection, neurological disorders and diseases, including causeless anxiety, psychosis, depression, schizophrenia, migraine, muscle cramps, urinary incontinence or paralysis; drug, drug or alcohol dependence, withdrawal syndrome; acute or chronic pain (EP1313703, AblKZ l / 445, published May 28, 2003; WO9511244, A61K31 / 50, published April 27, 1995; WO0234718, A61K31 / 404, published February 2, 2002; WO
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 9505175, A61K31 / 44, publ. 02/23/1995; US4902695, C07D217 / 16, publ. 02.20. 1990; US5192751, A61KZ 1/4427, publ. 03/03/1993; WO9606081, A61K31 / 40, publ. 02/29. 1996; Parsops CG, Dapusz W., Quask G. Glutamate in CNS Distributors and Target Drug Drug: Drug // Drugs News Respect, 1998, vl, III, p. 523-580).
  • the search for compounds capable of preventing or blocking the hyperactivation of NMDA receptors is one of the highest priorities in the development of drugs for the treatment of diseases of the central nervous system (Illarioshkin C H. et al. Preventive neuroprotection in neurodegenerative diseases: use of antagonists glutamate receptors (literature review and own experience) // Neurological journal, 2006, vol. 1, N ⁇ 5, pp. 47-54; Lei SZ et al. Vloskade inevitablyf NMDA resertor-mediadot mobilizer Ca2 + oulr schizophreniav pts peurotokhisitu // Vraip. Res., 1992, v. 598, 34 ° 1-2, p. 196-202).
  • polyamines are described as antagonists of NMDA receptors in patent publications (WO9312777, A61K31 / 13, publ. 08.07.1993); arylalkylamines (WO9856752, C07C211 / 32, publ. 17.12. 1998); polycyclic alkaloids (WO9703979, A61KZ 1/135, publ. 02/06/1997); amide derivatives of carboxylic acids (US4968678, C07D401 / 06, publ. 11.06. 1990; EP0539057, A61KZ 1/675, publ. 16.07. 1997; WO0234718, A61KZ 1/404, publ. 02.05.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) pyrido / 3,4-b / indoles (RU2106864, A61KZ 1/437, publ. 03.20.1998); pyridine derivatives (WO03040128, C07D 401/04, publ. 15.05. 2003); substituted hydroxypyridines (WO 9525721; WO 0075109; EP 824098; 2272027, 2178412); piperidine derivatives (WO9117156, A61KZ 1/425, publ. 14.11.1991; EP441506, A61K31 / 445, publ. 14.08. 1991; WO 9302052, A61KZ 1/445, publ.
  • NMDA receptor antagonists are known to have a drawback of most known NMDA receptor antagonists.
  • side effects including impaired coordination of movements, stimulation of the sympathetic nervous system, dizziness, headache, hallucinations, dysphoria, and mental impairment and memory, manifested in doses at which the known compounds exert their antagonistic effect on NMDA receptors.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26)
  • the closest structural analogues of the claimed compounds are derivatives of 4-aminopyridine, including 4-aminopyridine (fampridine), 3,4-diaminopyridine, 2,4-diaminopyridine, used in anesthesiology, as well as for the treatment of certain neuromuscular and neurodegenerative diseases (US4562196, 4461 A61K publ. 12/31/1985).
  • one of the objectives of the invention is the creation of new chemical compounds that would have strong antagonistic activity against NMDA receptors, but would not cause adverse side effects characteristic of known NMDA antagonists.
  • the objective of the invention is the development of new pharmaceutical compositions, drugs, methods for their use, which would be effective and safe for the treatment of neurodegenerative and psychiatric diseases and disorders caused by hyperactivation of the glutamatergic system.
  • the technical result of the invention is to obtain new pharmaceutically active compounds in a series of derivatives of 2,4-diaminopyridine, pharmaceutical compositions and medicines based on them, suitable for the treatment and prevention of neurological and psychiatric diseases and disorders and unexpectedly combining the properties of a high affinity antagonist
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) NMDA receptors with the properties of moderate acetylcholinesterase inhibitors and the properties of high-affinity agonists of nicotinic cholinergic receptors and sympathomimetics, which determines their complex normalizing effect on the imbalance of several neurotransmitter systems, including glutamatergic, cholinergic, and adrenergic effects, without the manifestation of previously observed undesirable NMDA , as well as activators of cognitive functions.
  • the present invention relates to new biologically active derivatives of 2,4-diaminopyridine of general formula (I)
  • R is hydrogen
  • R is hydrogen, Ci-C 7 alkyl or arylalkyl, or
  • R 1 and R 2 together mean piperidino, morpholino, N-methylpiperazino, pyrrolidino, hexahydroazepino,
  • X is hydrogen, a cyano group
  • Y is hydrogen, a cyano group (CN), a carboxyl group (COOH), an N-substituted or an N-, N-disubstituted urea group (CONHR 4 or CONR 4 R 5 , where R 4 and R 5 are C 1 -C 5 - alkyl)
  • R means unsubstituted and substituted benzyls, CrCg-alkyl, aminoalkyl, hydroxyalkyl, unsubstituted and variously substituted aryls, their pharmaceutically acceptable salts and / or solvates.
  • pharmaceutically acceptable salts of a compound of formula (I) means any salts of an inorganic or organic acid or base that possesses the necessary pharmacological activity of the parent compound. These salts can be prepared in situ during the synthesis, isolation or purification of the compounds of formula (I) or prepared specially.
  • salt formed by the acid examples include salts of mineral acids, in particular hydrohalic (hydrofluoric, hydrobromic, hydroiodic or hydrochloric acid), nitric, perchloric, carbonic, sulfuric or phosphoric acids; salts of alkyl sulfonic acids such as methanesulfonic acid, trifluoromethanesulfonic acid and ethanesulfonic acid; salts of arylsulfonic acids such as benzenesulfonic acid or paratoluenesulfonic acid; salts of organic carboxylic acids, such as acetic, fumaric, tartaric, oxalic, maleic, malic, succinic, benzoic, mandelic, ascorbic, lactic, gluconic, citric acid, etc.
  • the compounds of formula (I) according to the invention can be used in the form of various solvates, including in the form of a hydrate.
  • the most preferred compounds are 2-amino-4-phenylaminopyridine, 2-morpholino-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-N-methylpiperazino-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-N-methyl-2-piperin benzylamino-3-cyano-4-
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) phenylaminopyridine, 2-benzylamino-4-phenylaminopyridine 5 2-morpholin-4-p-chlorophenylaminopyridine.
  • the compounds of formula (I) and their physiologically acceptable salts or solvates possess an unexpected combination of complementary pharmacological properties that determine their complex effect on the central nervous system.
  • the new derivatives of 2,4-diaminopyridine are high-affinity antagonists of NMDA receptors, additionally combining the properties of moderate acetylcholinesterase inhibitors and high-affinity agonists of nicotinic cholinergic receptors, and, in addition, possessing the properties of sympathomimetics (i.e., have an affinity for the adrenergic system and low to dopamine receptors).
  • the compounds of the present invention possess the therapeutic potential of NMDA receptor antagonists, but at the same time do not exhibit the adverse and undesirable side effects inherent to known NMDA receptor antagonists.
  • the compounds of the present invention have less pronounced psychostimulating properties and exhibit them in doses 10 times higher than therapeutic doses, do not have a potentially adverse effect on blood pressure, respiration and heart rate, bioelectric activity of the heart, tone of bronchial muscles and periodic bowel activity.
  • the compounds of the present invention not only do not impair cognitive ability, but also possess the properties of nootropics and
  • SUBSTITUTE SHEET activators of cognitive functions that contribute to the development of memory, mental and behavioral abilities.
  • the compounds of the present invention improve the learning ability of animals in the development of simple and complex instrumental defensive reflexes (URAI and passive avoidance reaction), contribute to the consolidation and preservation of the memorable trace.
  • the new compounds stimulate cognitive function in animals with learning deficits, have an anti-amnestic effect in experimental memory impairment with the cholinolytic drug scopolamine and maximum electroshock (MES).
  • the pharmacological activity of the compounds of the present invention was determined using tests adopted to evaluate new pharmacological substances ("Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances", Moscow, 2000). At the same time, studies of the receptor activity of new derivatives of 2, 4-diaminopyridine were carried out in accordance with the standard recommendations of SHPHAR ("G ⁇ det Scientific Resource Apd Chappels", S.P.N. Alekhapder, A.Matie apd J.A. Reporters, BJP, v. 147, Su ⁇ l. 3, 2006). The ability of compounds to competitively bind to NMDA glutamate receptors was determined based on the analysis of radioligand binding to
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) using tritium-labeled ligands of the glutamate receptors [G- ⁇ H] -MK-801 (disocylpin) (see Nowak G., Tgallas R., Lauer R., Skolpik R., and Paul I. Adaptive chemotherapy n-metul- D-Aspartate Reserter Compiler Achter Chrytophtheptum with imipramine and 1-aminocyclopropanecarboxylic acid // J. Pharmacol. Exp. Ther., 1993, 265, p.1380-1386).
  • the inventive compounds can be obtained by the method illustrated by reaction scheme 1 below:
  • R, 1 - rR.5, X and Y have the meanings indicated above.
  • a subject of the invention is also a pharmaceutical composition which contains, as an active ingredient, a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, taken in an effective amount in a mixture with pharmaceutically acceptable excipients.
  • the term “effective amount)) means the amount of the active ingredient that, when administered to patients, provides a warning or amelioration of the disease and the symptoms of the disease to be prevented or treated.
  • any pharmaceutically acceptable components can be used that are compatible with the active ingredient and do not harm patients, traditionally used for the preparation of dosage forms, for example, fillers, binding agents, granulating agents, solubilizing agents , glidants, stabilizers, diluents, adjuvants, preservatives, components of buffer systems, solvents, d spergiruyuschie agents, preservatives, lubricants, flavorings, thickeners, colorants, emulsifiers, and prolonged delivery controllers, etc.
  • compositions are, for example, lactose, inositol, glucose, mannitol, dextran, cyclodextrin, sorbitol, starch and its modifications, sucrose,
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) magnesium aluminosilicate, synthetic aluminosilicate, crystalline cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, hydroxypropylated starch, calcium carboxymethyl cellulose, ion exchange resins, methyl cellulose, gelatin, gum arabic, hydroxypropyl cellulose, hydroxyvinyl hydroxyhydrochloride, hydroxyhydroxyhydroxyhydrochloride hydroxyhydrochloride , carboxyvinyl polymer, titanium oxide, fatty acid ester of sorbitol, sodium lauryl sulfate, glycerin, glycerin fatty acid firm, lanolin, glycerolatin, polysorbate, macrogol, vegetable oil, wax, paraffins, propylene glycol, polyethylene glycol, water, ethanol, polyalcohols, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, sodium chloride, sodium hydroxide, hydrochloric acid, dibasic sodium phosphate, monobasic citric acid, glutamic acid
  • compositions of the present invention can be in the form of an oral administration form, for example, in the form of tablets, granules, beads, powders, capsules, suspensions, syrups, emulsions, etc .; in injection form; suppository for rectal or vaginal administration; aerosols, spray, transdermal, intranasal, intraocular forms of administration, etc.
  • Solid forms of pharmaceutical compositions for oral administration and solutions for injection are preferred.
  • compositions may be prepared by any known method in the art using one or more pharmaceutically acceptable excipients.
  • pharmaceutically acceptable excipients for example, any known method in the art using one or more pharmaceutically acceptable excipients.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) in the manufacture of tablets, the active ingredient is mixed with traditional tablet ingredients, such as fillers, binders, disintegrants, granulating agents, lubricants and glidants, followed by compression of the resulting mixture in a tablet machine.
  • traditional tablet ingredients such as fillers, binders, disintegrants, granulating agents, lubricants and glidants, followed by compression of the resulting mixture in a tablet machine.
  • fillers and disintegrants lactose, sodium citrate, calcium carbonate and dicalcium phosphate, and the like can be used; binding agents - starch or its derivatives, gelatin, glucose, lactose, natural or synthetic gums, such as gum arabic, tragacanth or sodium alginate, carboxymethyl cellulose, polyethylene glycol, wax, sodium lauryl sulfate and talc, etc.
  • Lubricants used in these dosage forms include, but are not limited to, sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, etc.
  • tablets may be coated with sugar, gelatin, film, or intestinal coatings by standard methods, for example, a tablet may include an inner core containing the active ingredient and an outer layer in the form of a shell covering the core.
  • the outer shell can serve to protect against disintegration in the stomach, which will allow the inner core to pass intact into the duodenum and slowly release.
  • a variety of substances can be used to form such protective layers or shells, including a number of polymeric acids and mixtures of polymeric acids with common substances, such as alkali, cetyl alcohol and cellulose acetate. Sweeteners and flavorings may be added to improve the taste of the oral form.
  • a pharmaceutical composition in the form of capsules can be prepared by mixing the active ingredient with excipients, such as, for example, sorbitol or lactose, and filling the resulting mixture in capsules.
  • excipients such as, for example, sorbitol or lactose
  • a pharmaceutical composition in the form of oral medicines, elixirs, or syrups may contain water, polyols, sucrose, invert sugar, glucose, edible oils, for example, cottonseed oil, sesame oil, coconut oil or peanut oil, food flavorings, as pharmaceutically acceptable excipients, dyes, etc.
  • Potions, elixirs or syrups may additionally contain suspending agents and thickeners, such as synthetic and natural gums (tragacanth, Arabian gum), alginate, dextran, sodium carboxymethyl cellulose, gelatin, glycerin, methyl cellulose or polyvinyl pyrrolidone, or preservatives, for example.
  • a pharmaceutical composition in an injection form can be prepared by dissolving the active ingredient and possible adjuvants in part of the injection solvent, preferably in sterile water, adjusting the resulting solution to the desired volume, optionally adding a pH adjusting agent, solubilizer, stabilizer or antiseptic sterilizing the resulting solution and filling it with suitable ampoules or containers.
  • a solvent physiological saline, alcohols, poliols, glycol ethers, for example, polyoxyethylene sorbitan, monolaurate, monooleate or monostearate, glycerin, vegetable oils, etc. can be used.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) are, for example, natural or hardened oils, for example, cocoa butter, waxes, fats, glycerol and saturated fatty acid esters, glycerogelatin, macrogol, semi-liquid or liquid polyols, triglycerides, and the like.
  • the suppository base may also include a surfactant or stabilizer.
  • composition according to the invention may also contain such components that provide a quick, sustained or delayed release of the active ingredient after administration by patients.
  • the prolonged action of the composition can be achieved using agents that slow down the absorption of the active principle, for example aluminum monostearate and gelatin.
  • the active ingredient is included in the pharmaceutical composition of the present invention in unit dosage form.
  • in unit dosage form means any effective amount of an active ingredient which, in combination with pharmaceutically acceptable excipients, is contained in a dosage form of a pharmaceutical composition used for a single administration to a patient.
  • the pharmaceutical composition of the present invention in a single unit dose may contain the active ingredient in an amount of from 0.01 to 100 mg, preferably in an amount of from 0.1 to 10 mg of the active ingredient.
  • an effective amount of the active ingredient in some compositions may go beyond the above boundaries.
  • the invention also relates to a medicament containing
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) the compound of formula (I), its pharmaceutically acceptable salts, solvates, as such or in the form of a pharmaceutical composition, for the treatment and prevention of diseases or disorders of the central nervous system associated with increased activation of the glutamatergic system and / or impairment of intellectual and mnemonic functions.
  • Diseases or disorders to be treated or prevented with the drugs of the present invention include acute forms of neurodegenerative disorders or diseases associated with sudden damage to neurons or impairment of their functions, including, but not limited to, cerebrovascular insufficiency, cerebral ischemia, stroke, neuropathies caused by hypoxia or hypoglycemia, brain injury or damage to the spinal cord and the like; chronic neurodegenerative disorders or diseases associated with damage to motor neurons, including, but not limited to, amyotrophic lateral sclerosis, spinocerebellar degeneration, degenerative ataxia, cortico-basal degeneration, the Guam complex (amyotrophic lateral sclerosis-parkinsonism-dementia complex), subacute sclerosalitis ; chronic neurodegenerative demyelinating diseases associated with the destruction or violation of the formation of the myelin sheath of the nerve conductors, including, but not limited to, multiple (multiple) sclerosis, multiple encephalomyelitis, Schilder's sclerosis, inflammatory and
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Bygnamy, central pontine myelinolysis, neurooptomyelitis, Devik's syndrome, Balo's disease, HIV myelopathy, secondary demyelinating diseases such as CNS lupus, polyarteritis nodosa, Sjogren's syndrome, sarcoidosis, localized cerebral vasculitis and the like; chronic neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, multi-infarction dementia, Huntington's disease; neurodegenerative diseases associated with bacterial or viral infections; neurological and psychiatric disorders and diseases associated with excitotoxic neuronal damage, including, but not limited to, feelings of causeless anxiety, psychosis, depression, schizophrenia, epilepsy, migraine, muscle cramps, urinary incontinence, paralysis, drug, drug or alcohol dependence, syndrome cancellation; conditions with acute or chronic pain syndrome; acute or chronic neurodegenerative disorders or diseases associated with impaired cognitive function, learning ability, memory impairment, remembering, impaired attention, which may
  • the therapeutic and prophylactic effect of the drugs of the present invention is based on several complementary mechanisms, which are based on the neuroprotective and cognitively activating effects of the new derivatives of 2,4-diaminopyridine.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Due to the presence of strong antagonistic activity against NMDA receptors, the proposed drugs are able to block the hyperactivation of NMDA receptors and inhibit the pathological influx of calcium into neurons associated with this process, thereby protecting neurons from pathological activation and excitotoxicity, which makes them suitable for treatment and prevention of various neurodegenerative and psychiatric diseases caused by hyperactivity of the glutamatergic system.
  • the cognitive activity of the drugs of the present invention is associated with the stimulation of cholinergic processes in the brain by the activation of nicotinic cholinergic receptors, as well as the inhibition of acetylcholinesterase.
  • Compounds that activate nicotinic receptors or block acetylcholinesterase activity are known to compensate for the deficiency of hypofunction of the cholinergic system and can have an anti-anamnestic and nootropic effect and can be used in the treatment of cognitive disorders (V.G. Granik, “Medicine”, 2006, M ., “Byzovskaya book”, pp. 173-177).
  • the compounds of the present invention also show the presence of sympathomimetic activity.
  • the presence of this activity determines the activation of cognitive functions (along with a psychostimulating effect), antidepressant effects and increased performance.
  • the compounds of the present invention possess the above activities, as a result of which they not only do not cause impaired mental ability, attention and memory, characteristic of known NMDA receptor antagonists, but, moreover, can
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) be suitable for the treatment and prevention of a number of diseases or disorders associated with impaired cognitive function and learning ability.
  • (Fropsis PT Alan M Ralmer, Mishail Spare apd Gordop K Wilsosk, J. Neurol. Neurosurg. Psihiatru; 66: 137-147, 1999, Dwoski LP apd P.A. Sprouts, JPET 298: 395-402a, 2001; , M., Le-pipg & Metoru, 11: 43-49; 2004).
  • the drugs according to the invention have a complex normalizing effect on the imbalance of several neurotransmitter systems, including glutamatergic, cholinergic, adrenergic systems, have an extremely low degree of affinity for dopamine receptors, and therefore can be more effective for the treatment or prevention of a number of diseases or disorders of the central nervous system without manifesting undesirable side effects, previously observed vshihsya the known NMDA antagonists.
  • the invention also relates to a method for the treatment or prophylaxis of diseases and disorders associated with increased activation of the glutamatergic system and / or impairment of intellectual-mnemonic functions, by introducing the patient
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) an effective dose of a compound of formula (I), a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, pharmaceutical composition or a medicine thereof.
  • a compound of formula (I), pharmaceutically acceptable salts, solvates, a pharmaceutical composition or a medicament based thereon, are administered to the patient by conventional methods well known to those skilled in the art, for example, orally, rectally, intravaginally, transdermally, intranasally, intraocularly or parenterally injections.
  • a preferred method of administration of the invention is oral or parenteral administration.
  • the dose and course of administration prescribed to treat or prevent the above diseases or disorders can vary widely. In each case, the choice of the appropriate dosage depends on the age, body weight of the patient, route of administration, the particular type of disease to be treated or prevented, and the severity of the disease or condition of the patient.
  • the recommended daily dose for an adult patient is 0.01-300 mg / day, a dose of 0.01-30 mg / day is preferred for all of the above indications.
  • the full daily dose can be administered in a single dose, or the daily dose can be prescribed in divided doses two, three or four times a day.
  • Mass spectrum M + ' 210; IR spectrum, v cm ⁇ 1 : 2200 (CN), 3195, 3310, 3400 (NH, NH 2 ).
  • the aqueous mother liquor was extracted with chloroform (2 times 70 ml), the chloroform extracts were dried with CaCl 2 , filtered, evaporated, the residue was triturated with petroleum ether, and an additional 0.3 g was filtered off.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 100 ml of ethylene glycol is boiled for 4 hours, cooled, 100 ml are added. water, incubated for 1 hour at +2 0 C, 1.3 g of compound Ia were filtered off (80.5%).
  • reaction is carried out analogously to example 11, but take Ir 2-chlorop-3-cyano-4-p-chlorophenylaminopyridine, ml ml of morpholine and 20 ml of absolute alcohol, the mixture is heated for 10 hours at 200-210 0 C in an autoclave and get 2-Mopfolino-3 - cyano-4-p-chlorophenylaminopyridine
  • Example 17 Determination of the activity of compounds against the NMDA receptor.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) tritium compound MK-801 (disocylpin), which is a known antagonist of NMDA receptors.
  • the affinity of the tested compounds for the NMDA receptor and their antagonistic activity was evaluated by the value of IC 5O , which reflects the ability of the compounds to displace the labeled ligand from the phencyclidine binding site to NMDA receptors.
  • NMDA receptors For the preparation of membrane preparations of NMDA receptors, the hippocampus and cerebellum isolated from rat brain frozen in liquid nitrogen are used. The tissue is thoroughly homogenized in a Potter homogenizer (Teflon-glass) in 10 volumes of 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer (pH 7.6) containing 0.32 M sucrose (JNkI buffer). The homogenate is diluted to 50 volumes with 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer (pH 7.6) (Ns2 buffer) and centrifuged for 10 min at 1000 g. The supernatant was collected and centrifuged again for 20 minutes at 25,000 g. The pellet was homogenized in 50 volumes of JN ° 2 buffer and centrifuged for 20 min at 8,000 g. The supernatant and its soft, unsteady layer are removed and centrifuged again for 20 minutes at 25,000 g.
  • a Potter homogenizer Teflon-glass
  • the resulting precipitate was suspended in 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer containing 1 mM Na4EDTA (pH 7.6) (JN ° 3 buffer), and the suspension was again centrifuged. This washing procedure is carried out four times, and with the last washing, EDTA is excluded from the buffer. The final precipitate was resuspended in 5 volumes of JN ° 2 buffer and stored in liquid nitrogen.
  • a tritium-labeled MK-801 with a specific activity of 210 Curie / mol is used in a receptor binding experiment.
  • the reaction mixture (final volume 0.5 ml) contains 200 ⁇ l of JN22 buffer, 50 ⁇ l of labeled ligand (50 nM pp) and 250 ⁇ l of membrane suspension.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Nonspecific binding is determined in the presence of 50 ⁇ l of unlabeled ligand.
  • the reaction mixture is incubated at room temperature for 2 hours in the presence of calculated concentrations of the test compounds of formula (I).
  • the samples are filtered through GF / B glass fiber filters (Whatmap), pre-soaked in 0.3% polyethyleneamine for 2 hours at 4 ° C. Each tube is washed once with cold N ° 2 buffer, then the filters are washed three times with the same buffer volume . The filters are dried in air until completely dry and transferred to scintillation vials. Filters fill 5 ml.
  • the values of the IC 5O index are determined for the tested compounds. As a result of these tests, it was found that the IC 5O value for the most active compound Ia of the present invention is 2.4 ⁇ M, which indicates a high degree of affinity for NMDA receptors and strong antagonistic activity against this glutamate receptor subtype.
  • Example 18 Determination of the activity of compounds against dopamine receptors.
  • striatums from 4 animals are thoroughly homogenized in 10 ml of ice
  • Radioligand analysis The resulting membrane fraction is incubated with [G-CH] -labeled ligand, which is added to the incubation mixture in a volume of 50 ⁇ l at a final concentration of 0.1 nM for 20 .min at a temperature of 37 ° C using a solid-state thermostat “Termmit” (NPO “ DHK diagnostics ”).
  • Non-specific binding is determined in the presence of 50 ⁇ l of unlabeled spiroperidol (20 ⁇ M) or - SCH23390, which on average does not exceed 12-14% of the total. Specific binding is calculated as the difference between total and non-specific binding.
  • IC 5O with respect to the [G-3H] -spiperidol (specific activity 95 Ci / mmol) or [G-3H] -SCH23390 (specific activity 60 BSi / mmol) is determined by adding 50 ⁇ l of the compounds under study to the incubation medium at final concentrations in the range of 10 "3 -10 " 10 M.
  • the volume of the incubation mixture is 500 ⁇ l.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) binding is stopped by adding 2 ml of ice-cold 50 mM Tris-HCl buffer and rapid filtration through GF / B type glass filters (Whtmap), followed by washing with ice-cold buffer with a total volume of 14 ml.
  • the filters are pre-wetted before the experiment in ice-cold 50 mM Tris-Hcl buffer for 3 hours.
  • the filters are dried for 12 hours at room temperature, then placed in a scintillation fluid (Bray reagent) with a volume of 4 ml and used for scintillation counting.
  • the radioactivity of each sample is measured for 2 min on a WaIIaC 1411 scintillation counter.
  • the counting efficiency for tritium is 40-45%.
  • Determination of protein content in samples is carried out according to the Lowry method.
  • Optical density (X 700 nm) was measured on a SF-46 spectrophotometer (JIOMO): The results were processed with. using standard statistical programs with calculus of arithmetic mean and SEM.
  • IC 5O values are determined.
  • the test results indicate that the compounds of formula (I) in vitro do not show neurochemically significant tropism for the D-dopamine and D2-dopamine rat striatum receptors.
  • the value of IC 5O with respect to the D-dopamine receptor, for example, for compound Ia, is 220 ⁇ M, and the value of IC 5O with respect to the D2-dopamine receptor is 195 ⁇ M.
  • Example 19 Determination of the activity of compounds against cholinergic receptors.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) radioactive selective ligand with rat brain membranes.
  • a ligand tritium-labeled ( ⁇ ) Nicotin with a specific activity of 140 Curie / mmol obtained by solid-phase labeling is used.
  • Isolation of plasma membranes of the brain is carried out according to the method of Romano C. apd A.Goldstep, (Sciepse, 1980, 210, p. 647-650).
  • outbred male rats weighing 200-250 g are decapitated, the whole brain is extracted and homogenized in 10 volumes of ice-cold buffer (Hepes, 50 mM; NaCl, 118 mM; CaCl 2 , 2.5 mM; KCl 5 4.8 mM; MgSO 4, 1.2 mM; pH 7.4) in a Teflon-glass homogenizer.
  • the homogenate is centrifuged for 30 minutes at 1750Og.
  • the resulting precipitate is suspended in 20 volumes of cold distilled water and left for an hour for osmotic destruction. The resulting suspension is again centrifuged for 30 minutes at 1750Og. The resulting precipitate was suspended in buffer and again precipitated under the same regime. The pellet was resuspended in buffer to a final concentration (40 mg of starting tissue per 1 ml of buffer).
  • Radioligand analysis The tubes are filled with a reaction mixture containing in a final volume of 50 ⁇ l of [3H] ( ⁇ ) Nicotin, 250 ⁇ l of buffer and 200 ⁇ l of a protein suspension of membranes prepared as described above. Nonspecific binding is determined by adding unlabeled ligand in a concentration range from 10 "10 to 10 4 M in triplicates.
  • Tubes with the reaction mixture are incubated with constant shaking at 37 ° C for 40 minutes.
  • the tubes are then quickly immersed in ice to stop the reaction. After 20 minutes, the contents of the tubes are ultrafiltered through GF / C filters, previously incubated for 24 hours in a 0.3% solution.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) polyethyleneimine at 4 0 C. After washing with cold buffer, the filters are transferred to vials and dioxane-based scintillation fluid is added. The radioactivity of the samples is determined on a Wallac 1411 scintillation counter with a counting efficiency of about 40-44%.
  • the test results indicate that the compounds of formula (I) are characterized by a high degree of affinity for the binding sites of [3H] nicotin with rat brain membranes.
  • concentration dependence of the effect of nicotine on the binding of a labeled ligand is described by a classical curve with an IC 5O value of 0.13 ⁇ M.
  • Compound Ia shifts the concentration curve to the right to IC 5 Q values of 3.20 ⁇ M. This concentration range is considered as a high degree of receptor affinity.
  • Example 20 Determination of anticholinesterase activity of the compounds.
  • the anticholinesterase activity of the compounds of formula (I) was studied in vitro experiments using a standard set of reagents for the determination of cholinesterase (CE) of the company Lashema (Czech Republic).
  • CE cholinesterase
  • the principle of the method is that CE splits the butyryl-thiocholinium iodide substrate into butyric acid and thiocholinium iodide, which reacts with dithio-bisnitrobenzoic acid to form a yellow color.
  • the determination is carried out on the FEK model KF-2-UXL-4.2 ( Russian): To determine the ability to inhibit CE, the test compounds are added to a solution containing the CE enzyme and substrate and the color change is observed in comparison with the control.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) activity is expressed in IK 5 o - the concentration of inhibitor at which the enzyme activity is blocked by 50% compared with the control.
  • Table l presents the results of determining the anticholinesterase activity of the most active compounds of this invention in comparison with the most well-known drugs of this pharmacological group.
  • Example 21 Determination of the activity of compounds in relation to the adrenergic system.
  • norepinephrine HA
  • norepinephrine HA
  • norepinephrine-sensitive adenylate cyclase of the cell membrane of the adrenoreceptor system which leads to increased formation of a secondary cAMP mediator and further the implementation of adrenergic physiological effects.
  • the central sympathomimetic effect is due to the excitation of norepinephrine and dopaminergic brain structures and is expressed in behavioral hyperactivity, acceleration of the mnemonic and cognitive functions of the brain, activation of electroencephalographic (EEG) indicators - the electrical activity of the brain.
  • EEG electroencephalographic
  • Another way of activating the noradrenergic system is characteristic of indirect sympathomimetics such as amphetamine and other drugs of the ⁇ -phenylethylamine series, which cause the release of norepinephrine from the depot, which already further affects adrenoreceptors. This is typical for most drugs with the psychostimulating effect of the amphetamine series and structurally similar drugs - indirect sympathomimetics.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) methyl p-tyrosine, an inhibitor of the synthesis of HA and dopamine (DA), as well as under conditions of emptying neuronal depot of mediators by reserpine, as described below.
  • Locomotor activity in animals placed in a new environment consists of an orientation-research reaction (OIR) during the first 4-6 minutes and locomotion, which is caused by cycles of behavioral activity.
  • OIR orientation-research reaction
  • the introduction of substances having psychostimulating activity increases the level of locomotion, i.e. transfers spontaneous locomotion to the level of locomotor hyperactivity, bypassing OIR.
  • mice Male mice weighing 20-22 g and male rats weighing 180-200 g.
  • the spontaneous locomotor activity of mice was recorded using an Opto-varimex actometer (Columbus, USA) according to the method of Swssssop, Thieme (1969).
  • Motor activity is recorded every 10 min for 2-4 hours, before and after administration of the test compound.
  • the test compounds are administered in doses of 1-10-12.5-25-50 and 100 mg / kg.
  • the locomotor activity of control animals is recorded, to which the corresponding volume of physiological saline is injected.
  • the EDgo value is calculated - the dose that causes a 2-fold increase in motor activity (200%) in relation to the control.
  • compound Ia when administered subcutaneously, is inferior in strength to the central stimulating effect of phenamine, and when administered orally, it is more than 3 times weaker than phenamine and close to sydnocarb. According to the severity of locomotor excitation in mice, the effect of compound Ia is similar to the effects of phenamine and sydnocarb.
  • ED 5 o is the dose causing the appearance of stereotypic reactions in 50% of rats.
  • EDgo is the dose causing a 2-fold increase in spontaneous motor activity in mice.
  • mice Male mice weighing 18-20 g, which are administered intraperitoneally with reserpine at a dose of 2 mg / kg.
  • Reserpine has a depressive effect on the central nervous system, causing a decrease in motor activity (hypolocomotion), ptosis and hypothermia.
  • the hypolocation is recorded using the Opto-Varimex actometer (Columbus, USA), ptosis is evaluated visually in points on a 4-point scale,
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) hypothermia is determined using a TPEM-1 electrothermometer by temperature in the rectum.
  • test compounds are administered orally and subcutaneously at doses of 1, 5 and 10 mg / kg.
  • Compound Ia administered at a dose of 10 mg / kg (subcutaneously) 2 hours after reserpine, restores the reduced locomotor activity of mice to the level of activity of animals in the control group, reduces ptosis by more than 70% and completely eliminates the hypothermic effect of reserpine, converting it to hyperthermic.
  • Compound Ia acts on the effects of reserpine about 2 times weaker than phenamine (in equal dose). Sydnocarb at a dose of 25 mg / kg in these experiments has a negligible effect on the effects of reserpine.
  • Compounds (I f-h) when administered orally to animals in a dose range of up to 100 mg / kg, change the severity of the depriving effects of reserpine (inactivity, ptosis, hypothermia) similar to compound Ia.
  • mice showed that in the central action of the compounds of the present invention there is a component associated with indirect sympathomimetic properties, expressed in antagonism to the effects of reserpine.
  • indirect sympathomimetic properties expressed in antagonism to the effects of reserpine.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) the properties of the compounds of formula (I) are significantly inferior to phenamine, the psychostimulating effect of which is associated with the effect on the release of the mediator from the rapidly renewable (labile) NA depot in the presynaptic region of the neuron.
  • the central action mechanism of the studied compounds is also evaluated in experiments using ⁇ -methyl-p-tyrosine (alpha-MT), an inhibitor of the tyrosine hydroxylase enzyme, which is involved in the biosynthesis of dopamine from tyrosine in nerve endings as a pharmacological analyzer.
  • alpha-MT ⁇ -methyl-p-tyrosine
  • the experiments are carried out on male mice weighing 18-20 g, which are administered ⁇ -methyl-p---
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) tyrosine at a dose of 250 mg / kg, intraperitoneally.
  • Administration of ⁇ -methyl-p-tyrosine causes a decrease in locomotor activity of animals by more than 6 times, which reflects a decrease in the level of dopamine in the brain.
  • compound Ia Against the background of the preliminary administration of ⁇ -methyl-p-tyrosine, compound Ia has a weak effect on physical inactivity, which differs from phenamine and even more so from sydnocarb, which, the first partially and the second completely, eliminate the changes in the motor activity of animals caused by the introduction of a tyrosine inhibitor hydroxylases.
  • Compounds (I f-h) when administered orally in a dose range of up to 100 mg / kg, exhibit an effect similar to compound Ia.
  • the experiments performed show that the compounds of formula (I) have practically no effect on the effect of ⁇ -methyl-tyrosine in mice and differ in this respect from phenamine and sydnocarb.
  • the compounds of the invention are inferior to phenamine in influencing the spontaneous motor activity of animals, do not cause disorganization of targeted activity, but surpass phenamine in strength and duration.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) activating effect on EEG in rats. In addition, they do not have a significant peripheral sympathomimetic effect.
  • Example 22 Evaluation of the neuroprotective activity of compounds in a model of multiple sclerosis.
  • the ability of the compounds of formula (I) to have a neuroprotective effect in the treatment or prevention of neurodegenerative diseases was determined ip vivo in an experimental model of human multiple sclerosis.
  • Such a model is experimental autoimmune (allergic) encephalomyelitis (EAE), a myelin antigen-induced and T-cell-mediated autoimmune disease in laboratory animals that is similar in clinical and histological features to multiple human sclerosis (Steimp, L. // Sprimps. , v. 14, p. 79-93).
  • EAE encephalomyelitis
  • the methodology for assessing the effect of the compounds of formula (I) on reducing the severity of EAE in experimental animals is presented below.
  • mice are immunized with 75 ⁇ g of myelin lipoprotein protein (hereinafter referred to as PLP) emulsified with Freund's adjuvant (CFA) and 0.6 mg / ml Musobacterium tubulosis H37RA (Difso, Detroit, MI, USA) to create an emulsion in a 1: 1 ratio.
  • PLP was synthesized by Heped sup Sprintsis (Sap Francisco CA).
  • Each mouse receives a subcutaneous injection of 200 ⁇ l of the emulsion divided into 4 parts into the axillary region and inguinal lymph nodes.
  • pertussis toxin Pertussis toxip, Calbiochem, Nottham, UK
  • pertussis toxin As a co-adjuvant, pertussis toxin (Pertussis toxip, Calbiochem, Nottham, UK) is used, which is administered intragastrically at a dose of 200 ng / mouse 0 and 2 days after immunization.
  • the animals of the experimental groups are administered an orally tested compound of the formula (I) 6 times a week: to the 1st experimental group - at a dose of 1.0 mg / kg; The 2nd experimental group - at a dose of -3.0 mg / kg; The 3rd experimental group - at a dose of -5.0 mg / kg. Treatment with the test compound is carried out for 30 days.
  • mice of the control and experimental groups were observed daily for 30 days after immunization, the clinical signs of EAE were weighed and recorded.
  • animals are sorted using the following scale: 0 - no symptoms (no disease); 1 - lowering the tone of the tail; 2 - weakening of the muscles of the hind limbs, impaired gait (moderate paraparesis); 3- hind limb paralysis (severe paraparesis); four -
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) complete paralytic immobility (state of dying); 5 - the death of an animal.
  • Example 23 Determination of the effect of compounds on the activation of cognitive functions.
  • the cognitive-stimulating activity of the compounds of the present invention is evaluated in a number of behavioral experiments on animals by their ability to improve memory and learning in mice, as well as exert anti-amnestic effects in animals with experimentally induced amnesia.
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) (conditioned reflex of passive avoidance). Violation of training and information storage is modeled using the amnestic action of the central anticholinergic scopolamine.
  • the experiments are carried out on male mice weighing 20-22 g, forming groups of 10-12 animals for each study dose.
  • Passive avoidance reaction is produced according to the ster dowp method, in an illuminated chamber with an electrode floor and a rescue platform in the middle.
  • the behavior of an animal when it is placed in a chamber is expressed in the form of tentative research activity (examination of the chamber).
  • the animal descends from the platform to the electrode floor, it receives an electric shock on its paws (50 V for 3-5 seconds), after which it is returned back to the living cage.
  • the training is carried out in three sessions, the criterion for the training of animals is to stay on the platform for 1 minute.
  • the functional state of memory is evaluated by the ability of mice to reproduce the developed passive avoidance reaction skill when an animal is placed in a chamber on a rescue platform 2 hours after the development of a conditioned reflex reaction and amnestic effect.
  • scopolamine is administered to mice at a dose of 1 mg / kg, intraperitoneally, for 15-20 minutes. before the introduction of the test compounds.
  • Scopolamine is a central M-anticholinergic drug that causes memory impairment (amnesia) and reduces learning ability.
  • the test compounds are administered orally, at a dose of 10 mg / kg, 40 minutes before training.
  • the basis for the use of these doses is the initial active dose of compound Ia, taken as a comparison drug, and component 3 mg / kg, orally.
  • SUBSTITUTE SHEET mice and rats using standard tests, such as passive avoidance reaction, URAI (active avoidance conditioned reflex test), electroshock-induced amnesia (MES), scopolamine amnesia, and electrophysiological experiments.
  • URAI active avoidance conditioned reflex test
  • MES electroshock-induced amnesia
  • scopolamine amnesia and electrophysiological experiments.
  • reference drugs use piracetam, meclofenoxate
  • the compounds of the present invention have a positive effect on cognitive functions in animals with learning disabilities, as well as on amnesia models caused by the administration of the cholinolytic drug scopolamine (1.0 mg / kg, s / c) and the effect of maximum electroshock.
  • compound Ia when producing URAI and passive avoidance reaction, surpasses the nootropic drugs piracetam and meclofenoxate.
  • nootropic drugs act primarily in conditions of impaired function.
  • an improvement in the associative functions of the brain is observed, as evidenced by the results of experiments to solve the extrapolation problem in animals under stressful conditions, in which it also exceeded piracetam and acefen.
  • compound Ia has an activating effect on the EEG of old rats, increasing the power of its spectrum and restoring impaired functional asymmetry between the cerebral hemispheres, which is characteristic of
  • Example 24 Determination of the antidepressant activity of the compounds.
  • the antidepressant activity of the compounds is evaluated by their effect on the psychoemotional and behavioral characteristics of animals in standard tests simulating the development of an emotional-stress state.
  • the stress state in animals is caused when they are placed in a chamber with water equipped with a rotating ribbed wheel.
  • mice were carried out on male mice weighing 20-22 g.
  • the test compound was administered subcutaneously to experimental animals at doses of 5 and 10 mg / kg.
  • the control group of animals injected with saline in the same doses. For each dose, 8-10 animals are taken.
  • Example 25 The effect of connections on health.
  • mice An assessment of the effect of the compounds of formula (I) on physical performance is examined in a “swimming” test.
  • the experiments are carried out on mice.
  • the test compound is administered to experimental animals subcutaneously in doses of 5-15 mg / kg.
  • the control group of animals injected with saline in the same doses.
  • 8-10 animals are taken.
  • a load of 7.5% of body weight was recorded on each animal and placed in a chamber with water at a water temperature of 24-26 0 C Record the time during which the mouse is able to hold
  • Example 26 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a tablet containing 0.1 mg of the active ingredient.
  • the active ingredient take the compound of formula (I) obtained in examples 1, mixed with the calculated amount of microcrystalline cellulose, silicon dioxide, stearic
  • the compound of formula (I) - 0.1 mg Microcrystalline cellulose - 30 mg Silicon dioxide - 20 mg Stearic acid - 1, 9 mg Tablet weight - 52 mg.
  • Example 27 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of tablets containing 1 mg of the active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of corn starch, microcrystalline cellulose, lactose, povidone, croscarmellose sodium, magnesium stearate are thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 90 mg each.
  • Example 28 Obtaining a pharmaceutical composition in tablet form containing 2.5 mg of the active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of milk sugar, polyvinylpyrrolidone of low molecular weight potato starch,
  • Example 29 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a tablet containing 5 mg of the active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of corn starch, lactose, hydroxypropylcellulose and crystalline cellulose. Hydroxypropyl cellulose dissolved in water is added and thoroughly mixed again. The resulting mixture was dried, granulated and magnesium stearate and light anhydrous silicic acid were added and pressed to obtain tablets weighing 70 mg. The tablets are then coated in the usual manner with a film coating using hydroxypropyl cellulose.
  • the mass of the tablet core is 70 mg.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of milk sugar, polyvinylpyrrolidone of low molecular weight potato starch, calcium stearate is thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 320 mg each. Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
  • Example 31 Preparation of tablets containing 100 mg of active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of starch, crushed lactose, talc, mixed thoroughly and pressed into a block.
  • the resulting bar is crushed into granules and sieved through sieves.
  • the granules obtained are tabletted into a suitable tablet form weighing 460 mg each.
  • the weight of the tablet is 460 mg.
  • the active ingredient (compound of formula 1), starch and cellulose are passed through a sieve and mixed thoroughly.
  • the resulting powder is mixed with a solution of polyvinylpyrrolidone and granulated.
  • the granules are dried at 50 ° C and combined with sodium carboxymethyl, magnesium stearate and talc. Thoroughly mixed and pressed in a machine for making tablets to obtain tablets weighing 150 mg each.
  • the weight of the tablet is 150 mg.
  • Example 33 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of suppositories.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of lanolin and melted cocoa butter and mixed thoroughly.
  • the manufacture of suppositories is carried out on machines with the necessary technological conditions by molding.
  • Example 34 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a capsule containing 5 mg of the active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of crystalline lactose and corn starch, mixed thoroughly. Next, talc and magnesium stearate are added and mixed again. The resulting mixture is filled in hard gelatin capsules of the appropriate size.
  • the mass of the contents of the capsule is 200 mg.
  • Example 35 Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a capsule containing 50 mg of the active ingredient.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of crystalline lactose and microcrystalline cellulose to a homogeneous state, sieved, and then talc and magnesium stearate are mixed. Hard or soft gelatin capsules of the appropriate size are filled with the finished mixture.
  • the mass of the contents of the capsule is 150 mg.
  • the active ingredient take the compound of formula (I), mix with the calculated amount of excipients.
  • the resulting solution is filtered and poured into ampoules of the appropriate size, which are sealed and sterilized in an autoclave.
  • the compound of formula (I) 0.5 mg Sorbitol - 5.1 mg Acetic acid - 0.08 mg Water for injection - up to 1 ml.
  • the compound of formula (1) 100 mg Mannitol - 100 mg 5 n sodium hydroxide - 200 ⁇ l Purified water - up to 5 ml.
  • the compound of formula (1) 50 mg Citric acid - 210 mg D-mannitol - 100 mg distilled water - up to 10 ml.
  • a compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of ethanol, a dispersant of chlorodifluoromethane cooled to -3O 0 C is added and aerosol cans are filled.

Abstract

The invention relates to novel 2,4-diaminopyridine derivatives, pharmaceutically acceptable salts and /or solvates thereof, to compositions and medicinal agents containing the novel 2,4-diaminopyridine derivatives and to the use thereof as the NMDA-receptor blockers and cognitive function stimulators. The novel derivatives combine the properties of highly affine NMDA-receptor antagonist with the properties of moderate acetylcholinesterase inhibitors and with the properties of highly affine agonists of nicotine cholinoreceptors and sympathomimetics, whereby determining the comprehensive normalising action thereof on the disballance of several neurotransmitting systems, including glytamatergic, cholinergic and adrenergic systems without undesirable side effects which were previously observed in the known NMDA-antagonists. They not only do not cause the disturbance of intellectual abilities, attention and memory that is typical for the known NMDA-receptor antagonists, but, in addition, can be useful for treating and preventing a range of diseases and disturbances related to disturbed cognitive functions and learning ability. The method for treating or preventing diseases and disorders caused by the incresed activation of the glutamatergic system and/or by the damage of intellectual mnestic functions.

Description

ПРОИЗВОДНЫЕ 2,4-ДИAMИHOПИPВДИHA ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО НА ИХ ОСНОВЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ И НАРУШЕНИЙ, ВЫЗВАННЫХ ГИПЕРАКТИВАЦИЕЙ NMDA- РЕЦЕПТОРОВ И/ИЛИ В КАЧЕСТВЕ СТИМУЛЯТОРОВ КОГНИТИВНЫХ ФУНКЦИЙ И СПОСОБ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ DERIVATIVES OF 2,4-DIAMETER-PHARMACEUTICAL COMPOSITION, A MEDICINAL THEREOUS ON THEIR BASIS FOR TREATMENT OR PREVENTION OF DISEASES AND DISORDERS CAUSED BY OVERHEAT RESEARCHERITIS
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИFIELD OF TECHNOLOGY
Изобретение относится к области химии, медицины и фармакологической промышленности и касается новых производных 2, 4-диaминoпиpидинa общей формулы (I), их фармацевтически приемлемых солей и/или сольватов, проявляющих активность в отношении центральной нервной системы, способу их получения, композициям, лекарственным средствам, содержащим новые производные 2, 4-aминoпиpидинa, и их применению в качестве блокаторов NМDА-рецепторов, а также в качестве стимуляторов когнитивных функций.The invention relates to the field of chemistry, medicine and the pharmacological industry and relates to new derivatives of 2, 4-diaminopyridine of the general formula (I), their pharmaceutically acceptable salts and / or solvates, which are active against the central nervous system, the method for their preparation, compositions, drugs containing new derivatives of 2, 4-aminopyridine, and their use as blockers of NMDA receptors, as well as as stimulants of cognitive functions.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION
Детальные исследования последнего десятилетия существенно расширили представления о структуре и многочисленных функциях глутаматергической системы.Detailed studies of the last decade have significantly expanded our understanding of the structure and numerous functions of the glutamatergic system.
Доказано, что глутаматергическая система является главной возбуждающей нейромедиаторной системой, участвующей в реализации всех основных физиологических функций головного мозга, включая поддерживание его тонуса, бодрствования, психологической и физической активности, в восприятии сенсорной информации ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) различной модальности, особенно чувствительных и болевых импульсов. Ей принадлежит также одна из ведущих ролей в осуществлении синаптической пластичности и высших интегративных функций мозга, в том числе способности к обучению, формированию и функционированию памяти, регуляции поведения (Lоdgе D. Ехсitаtоrу Аmiпо Асids iп Неаlth апd Disеаsе. J. Wilеу & Sопs: Сhiсhеstеr, 1988; Whеаl H., Thompson A. - Ехсitоrу Аmiпо Асids апd Sупарtiс Тrапsmissiоп. Асаdеmiс Рrеss: Lопdоп, 1991).It is proved that the glutamatergic system is the main exciting neurotransmitter system involved in the implementation of all the basic physiological functions of the brain, including maintaining its tone, wakefulness, psychological and physical activity, in the perception of sensory information. SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) various modality, especially sensitive and pain impulses. She also has one of the leading roles in the implementation of synaptic plasticity and the highest integrative functions of the brain, including the ability to learn, shape and function of memory, and regulate behavior (Lodge D. Expert Amipo Acids and Non-apd Disase. J. Wileu & Sops: Chestestr , 1988; Whael H., Thompson A. - Exitor Amipo Acids and Sapartis Trissmissiop. Asademis Press: Lopdop, 1991).
Глутаматергические механизмы передачи нервных импульсов представлены примерно в 40% нервных клеток, а оставшаяся часть выпадает на долю всех остальных медиаторов (норадреналина, серотонина, ацетилхолина, дофамина и др.) (Болдырев А. А. Нейрональные рецепторы в клетках иммунной системы // Природа, 2005, Ns 7 (1079), с. 3 — 8).Glutamatergic mechanisms of transmission of nerve impulses are present in approximately 40% of nerve cells, and the remaining part falls to the share of all other mediators (norepinephrine, serotonin, acetylcholine, dopamine, etc.) (A. Boldyrev. Neuronal receptors in the cells of the immune system // Nature, 2005, Ns 7 (1079), pp. 3-8).
Рецепторы главного возбуждающего нейромедиатора, глутамата, подразделяются на два основных класса: ионотропные и метаботропные.The receptors of the main excitatory neurotransmitter, glutamate, are divided into two main classes: ionotropic and metabotropic.
Ионотропные рецепторы структурно связаны с ионными каналами, их активация глутаматом или агонистами, имитирующими действие глутамата, приводит к деполяризации клеточных мембран и открытию ионных каналов и, как результат, к генерации возбуждающего постсинаптического потенциала.Ionotropic receptors are structurally associated with ion channels, their activation by glutamate or agonists that mimic the action of glutamate leads to the depolarization of cell membranes and the opening of ion channels and, as a result, to the generation of an exciting postsynaptic potential.
Метаботропные рецепторы - это семейство рецепторов, сопряженных с G-белками, воздействующих на ионный канал опосредованно через цепочку биохимических реакций, в частности, через активацию системы вторичных мессенжеров.Metabotropic receptors are a family of receptors conjugated with G-proteins that act on the ion channel indirectly through a chain of biochemical reactions, in particular, through the activation of a system of secondary messengers.
Ионотропные рецепторы подразделяются на 3 подтипа, получившие названия от соответствующих селективных агонистов: AMPA (рецептор 2-aльфa - aминo-3-гидpoкcи-5-мeтил-4-Ionotropic receptors are divided into 3 subtypes, named after the corresponding selective agonists: AMPA (2-alpha receptor - amino-3-hydroxy-5-methyl-4-
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) изоксазолпропионовой кислоты), KA (рецептор каиновой кислоты) и NMDA (рецептор N-метил-D-аспартата) (Wаtkiпs J, Кrоgsgааrd-Lаrsеп P, Honor T Stгасturе асtivitу rеlаtiопshiрs iп thе dеvеlорmепt оf ехсitаtоrу аmiпо асid rесерtоr аgопists апd соmреtitivе апtаgопists // Тrепds Рhаrmасоl Sci.,1990, 11, р. 25-33). Метаботропные глутаматные рецепторы подразделяются на три группы (Моlесulаr пеurоbiоlоgу оf glutаmаtе rесерtоrs. Аппu Rеv Рhуsiоl 54:507-536) Сопл P. J., Pin J. P. Рhаrmасоlоgу апd fαпсtiопs оf mеtаbоtrорiс glutаmаtе rесерtоrs// Аппu. Rеv. Рhаrmасоl. ТохiсоL, 1997, 37, p.205-237).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) isoxazole propionic acid), KA (kainic acid receptor) and NMDA (N-methyl-D-aspartate receptor) (Wattkeeps J, Kroggsard-Larsep P, Honor T accelerate receptors, supplements Terps PHARMACOL Sci., 1990, 11, p. 25-33). Metabotropic glutamate receptors are divided into three groups (Moleculoperiologic оf glutamate receptors. Appl. Rev Рсhusiol 54: 507-536) Nozzle PJ, Pin JP Раrmacolptosptosoptosptos Rev. Pharmacol. Toxico L, 1997, 37, p.205-237).
Активация ионотропных рецепторов вызывает электрическую активность нейрона, тогда как метаботропные регулируют ее величину и длительность (Болдырев А.А. Функциональные взаимодействия между глутаматными рецепторами разных классов // Бюл. экспер. биол. и мед., 2000, т. 130, JYo 9, с. 244-252).Activation of ionotropic receptors induces the electrical activity of a neuron, while metabotropic receptors regulate its size and duration (A. Boldyrev. Functional interactions between glutamate receptors of different classes // Bull. Expert. Biol. And Med., 2000, v. 130, JYo 9, p. 244-252).
Процессы нейрональной возбудимости и синаптической пластичности во многом базируются на механизмах, в которых NMDA- рецепторный комплекс играет ключевую роль. Открытие канала, сопряженного с NМDА-рецепторным комплексом, приводит к увеличению концентрации внутриклеточного кальция. В свою очередь, это изменяет функциональную активность нейрона, поскольку именно с повышением содержания внутриклеточного кальция связывают синаптическую передачу возбуждающих сигналов (Соtmап С. W., Вridgеs RJ., Таubе J. S. еt аl. Thе rоlе оf thе NМDА-rесерtоrs iп сепtrаl пеrvоus sуstеm рlаstiсitу апd раthоlоgу // J. NIH Rеs., 1987, v. 1, р. 65-74).The processes of neuronal excitability and synaptic plasticity are largely based on mechanisms in which the NMDA receptor complex plays a key role. The opening of the channel associated with the NMDA receptor complex leads to an increase in the concentration of intracellular calcium. In turn, this changes the functional activity of the neuron, since synaptic transmission of excitatory signals is associated with an increase in intracellular calcium content (Сotmap C. W., Bridges RJ., Tube JS et al. Thе rе оf tе NMDa-reserters per sepertulum add ratologue // J. NIH Res., 1987, v. 1, pp. 65-74).
Активность NМDА-рецептора регулируется множеством модуляторных сайтов, которые могут быть мишенями для селективных агонистов и антагонистов (МсВаiп CJ., Мауеr М.L. N-mеthуl-D-аsраrtiс асid rесерtоr struсturе апd fuпсtiоп // Рhуsiоl. Rev.,1 994, v. 74, N° 3, р. 723-The activity of the NMDA receptor is regulated by many modulatory sites that can be targets for selective agonists and antagonists (McBaip CJ., Mauer M.L. N-metul-D-acrartis aspertortorstrucure apfuptiop // Prusio 1, Rev. 1. v. 74, N ° 3, p. 723-
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 760; Dingledine R., Воrgеs К., Воwiе D., Тrаупеlis S.F. Тhе Glutаmаtе Rесерtоr Iоп Сhаппеls // Рhаrmасоl. Rеv., 1999, v. 51, N° 1, р. 7-62).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 760; Dingledine R., Worges K., Wowe D., Trapeelis SF The Glutamate Resource Iop Chappels // Pharmacol. Rev. 1999, v. 51, N ° 1, p. 7-62).
При глутаматергической нейроτрансмиссии в норме активация NMDA- рецептора вызывает кратковременное открытие кальциевого канала. Однако, при определенных условиях происходит гиперактивация глутаматных NМDА-рецепторов, вызывающая длительное нейронное возбуждение и приводящая к избыточному поступлению ионов кальция внутрь нейронов.With glutamatergic neurotransmission, normal activation of the NMDA receptor causes a short-term opening of the calcium channel. However, under certain conditions, the glutamate NMDA receptors are overactivated, causing prolonged neural excitation and leading to excessive intake of calcium ions into the neurons.
Избыточная или длительная стимуляция глутаматергических NМDА-рецепторов ведет к дисфункции и последующей гибели нейронов посредством механизма, известного как эксайтотоксичность (от англ. "ехitоtохiсitу" - токсичность, развивающаяся при возбуждении (Rоthmап, S. M., Оlпеу, J. W. // Тrепds iп Nеurоsсi., 1987, 10, M>7, p.299- 302; Неritаgе Disоrdеrs оf Аmiпо Асids Меtаbоlism, Nеw Yоrk: Масmillап, 1989, р. 501-512). В соответствии с этим механизмом деполяризация мембран нейронов при патологической активации NМDА-рецепторов приводит к нарушению кальциевого гомеостаза в нервных клетках, что вызывает активизацию ряда ферментов, инициирующих каскад фатальных для клетки биохимических реакций. Установлено, что кальциевая перегрузка нейронов способна индуцировать процессы образования оксида азота (NO), реактивных форм кислорода, прежде всего, супероксид-анион-радикала и гидроксил-радикала, что в свою очередь, вызывает митохондриальную дисфункцию и другие патофизиологические изменения, в конечном итоге, ведущие к гибели клетки (Сhоi D.W. Glutаmаtе пеurоtохiсitу iп соrtiсаl сеll сulturе is саlсium dерепdепt // Nеurоsсi. Lеtt, 1985, v. 58, JNs 3, р. 293-297; Dubiпskу J.M., Rоthmап S. M. Iпtrасеllulаr саlсium сопсепtrаtiопs duriпg "сhеmiсаl hурохiа" апd ехсitоtохiс пеurопаl iпjurу // J. Nеurоsсi., 1991, v. 11, N° 8, р.Excessive or prolonged stimulation of glutamatergic NMDA receptors leads to dysfunction and subsequent death of neurons through a mechanism known as excitotoxicity (from the English word “exotoxicity” - toxicity that develops upon excitation (Rothmap, SM, Olpeu, JW // Trepds ip Nepur. 10, M> 7, p.299-302; Non-Disorders оf Amipo Acids Metabolism, New York: Masmillap, 1989, p. 501-512) In accordance with this mechanism, depolarization of neuronal membranes during pathological activation of NMDA receptors leads to disturbance of calcium homeostasis in nerve cells, which causes It activates a number of enzymes that initiate a cascade of biochemical reactions fatal for the cell.It was found that calcium overload of neurons is able to induce the formation of nitric oxide (NO), reactive oxygen species, primarily superoxide anion radical and hydroxyl radical, which in turn causes mitochondrial dysfunction and other pathophysiological changes, ultimately leading to cell death (Choi DW Glutamate peperotica iporticul cellulite is salium distribution // Neurosi. Lettt, 1985, v. 58, JNs 3, p. 293-297; Dubipsku J.M., Rothmap S. M. Iptacacellulacellium sopseptratiops duripg "chemil hurokhia" apd exitotokhis peopal ipjuru // J. Neuroci., 1991, v. 11, N ° 8, p.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 2545-2551; Carpenter D. NMDA receptors and the molecular mechanisms of ехсitоtохiсitу // Охidаtivе Strеss аt Моlесulаr, Сеllulаr апd Оrgап Lеvеls, Еds РJоhпsоп, А.Воldуrеv. Rеsеаrсh Sigпроst, Тrivапdгаm, 2002, р.77-88; Bading H., Giпtу D.D., Grеепbеrg М.Е. Rеgulаtiоп оf gепе ехрrеssiоп iп hiрросаmраl пеurопs bу distiпсt саlсium sigпаliпg раthwауs // Science,1993, v. 260, Ns 5105, р. 181-186; Dоblе A. The RoIe оf Ехсitоtохiсitу iп Nеurоdеgепеrаtivе Disеаsе: Imрliсаtiоп fоr Тhеrару // Рhаrmасоlоgу апd Тhеrареutiсs, 1999, v.81, ÷NbЗ, p.163-221).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 2545-2551; Carpenter D. NMDA receptors and the molecular mechanisms of excitotoxicity // Oxidative Strass at Molular, Sell apd Org Levls, Ed Pehsop, A. Valdurev. Research Sigprost, Trivapdgam, 2002, p. 77-88; Bading H., Giptu DD, Greepberg M.E. Regulatiof of gepe expresiop ip hrrosamral peuros b distipt salsium sigpalipgthaus // Science, 1993, v. 260, Ns 5105, p. 181-186; See A. The RoIe оf Exitоtісhісіty іn Neurodegеperаtivе Disеsе: Imаlistiop fоr Тhearuu // Раrmасолоууд ад Тэререутісs, 1999, v.81, ÷ NbЗ, p.163-221).
Предполагается, что эксайтотоксичность является универсальным молекулярным механизмом развития любого нейродегенеративного процесса, поскольку наблюдается при самых различных по этиологии неврологических и психиатрических заболеваниях, связанных с гибелью нейронов или нарушением их функции (Беспалов A.Ю., Звартау Э.Э. Нейропсихофармакология антагонистов NMDA- рецепторов, СПб.: Невский диалект, 2000, 297 с. ; Brian S. Меldrum Glutаmаtе аs а Nеurоtrапsmittеr iп thе Вrаiп: Rеviеw оf Рhуsiоlоgу апd Раthоlоgу// Jоurпаl оf Nutritiоп., 2000,130, p.1007-1015; МсDопаld ES., Wiпdеbапk AJ, Mechanisms оf пеurоtохiс iпjurу апd сеll dеаth // Nеurоl. CHn., 2000, Аug, 18(3), p.525-540; Rubiп LL, Nеurопаl сеll dеаth: ап uрdаtеd viеw// Рrоg. Вrаiп. Rеs., 1998, 117, р. 3-8; Сhоi D. W. Glutаmаtе пеurоtохiсitу апd disеаsеs оf thе пеrvоus sуstеm // Nеurоп, 1988, v. 1, р.623- 634).Excitotoxicity is believed to be a universal molecular mechanism for the development of any neurodegenerative process, since it is observed in the most diverse etiology of neurological and psychiatric diseases associated with neuronal death or impaired function (Bespalov A.Yu., Zvartau E.E. Neuropsychopharmacology of NMDA receptor antagonists , St. Petersburg: Nevsky dialect, 2000, 297 pp.; Brian S. Меldrum Glutamate аs а Nеurоtrаpsmitter аrе Вpаp: Rеvеw оf Rhusiоlog apd Rathоlogu // Jоurpal оf Nutritiop. 1. , Wipebapk AJ, Mechanisms of peoroti with ipjuru apdll deat // Neurol. CHn., 2000, Aug, 18 (3), pp. 525-540; Rubi LL, Neuropal cell de: ap uradated viw // Prog. Vraip. Res., 1998, 117, p. 3-8; Shoi DW Glutamate peruhotisit apd diseses of the first system // Neurop, 1988, v. 1, p. 623-634).
Установлено также, что гиперактивация глутаматергической системы является первичной причиной дегенерации нейронов при ишемии головного мозга, инсульте, травмах головного и спинного мозга (Маrtiп LJ. еt аl. Nеurоdеgепеrаtiоп iп ехсitоtохiсitу, glоbаl сеrеbrаl isсhеmiа, апd tаrgеt dерrivаtiоп: А реrsресtivе оп thе сопtributiопs оf арорtоsis апd песrоsis // Вrаiп Rеs. BuIL, 1998, JuI 1, 46(4), p.281-309),It has also been established that hyperactivation of the glutamatergic system is the primary cause of neuronal degeneration in cases of cerebral ischemia, stroke, injuries of the brain and spinal cord (Martin LJ. Et al. apd song // Vraip Res. BuIL, 1998, JuI 1, 46 (4), p. 281-309),
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) болезни Альцгеймера (Wаtкiпs апd Соlliпgridgе. Тhе NMDA Rесерtоr, Охfоrd: IRL Рrеss, 1989; Vаrаdаrаjап S. еt аl. Rеviеw: Аlzhеimеr's аmуlоid bеtа-рерtidе-аssосiаtеd frее rаdiсаl охidаtivе strеss апd пеurоtохiсitу // J. Stmсt. Вiоl., 2000, Juп, 130(2-3), p.184-208), болезни Паркинсона (Кlосkgеthеr T. Тurski L. Тrепds Nеurоsсi. 1989, 12, 285-286; Fаrооqui и Ноrrосks, Вrаiп Rеs. Rеv., 1991, 16, 171; Rоthmап, S. M. апd Оlпеу, J. W., Тrепds iп Nеurоsсi., 1987,10(7),299-302; Fоlеу Р., Riеdеrеr P. Iпfluепсе оf пеurоtохiпs апd охidаtivе strеss оп thе опsеt апd рrоgrеssiоп оf Раrkiпsоп's disеаsе // J. Nеurоl., 2000, Арr, 247, Suррl 2, р.l 182-1194), некоторых формах эпилепсии (Diпglеdiпе еt аl., Ехсitаtоrу аmiпо асid rесерtоrs iп ерilерsу. Тrепds Рhаrmасоl. Sсi., 1990, 11, 334; Вrаdfоrd Н.F. Glutаmаtе, GABA, апd ерilерsу // Рrоg. Nеurоbiоl., 1995,v. 47, N° 6, р. 477-511), тревожных и депрессивных состояниях (Wilеу апd Dаlstеr. Рrесliпiсаl еvаluаtiоп оf N-mеthуl-D-аsраrtаtе апtаgопists fоr апtiапхiеtу еffесts: А rеviеw // Мultiрlе Sigmа апd PCP Rесерtоr Ligапds: Месhапisms fоr Nеurоmоdulаtiоп апd Nеurорrоtесtiоп, 1992, NPP Вооks, Апп Аrbоr, Мiсhigап, p.801-815).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Alzheimer's Disease (Watkips apd Collidegrid, also NMDA Resource, Oxford: IRL Resp. 1989; Varadarjap S. et al. Relived eligible Jupp, 130 (2-3), p. 184-208), Parkinson's disease (Kloscother T. Turski L. Treps Neurosi. 1989, 12, 285-286; Farooqui and Norocs, Brain Res. Rev., 1991, 16, 171; Rothmap, SM apt Alpeu, JW, Treps ip Neurossi., 1987.10 (7), 299-302; Foleu R., Riederer P. Ipfluepse of optimo opsoprespecoprespopre . Nеurol., 2000, Arr. 247, Srl 2, p. 182-1194), some forms of epilepsy (Dipglédipe et al., Exactor amipo asid testors ip erillers. harmacol. Sсi., 1990, 11, 334; Varford N.F. Glutamate, GABA, add-ons // Prog. Neurobiol., 1995, v. 47, N ° 6, p. 477-511), anxiety and depressive states (Wileu apd Dalster Rreslipisal evaluatiop ° F N-methul-D-asrartate aptagopists for aptiaphietu effests:. A review // Multirle Sigma apd PCP Resertor Ligapds: Meshapisms for Neuromodulatiop apd Neurorrotestiop 1992, NPP Vooks, Ann Arbor, Mishigap, p.801 -815).
С эксайтотоксичностью связывают развитие хореи Гентингтона и амиотрофического латерального склероза (Dоblе А. Тhе RoIe оf Ехсitоtохiсitу iп Nеurоdеgепеrаtivе Disеаsе: Imрliсаtiоп fоr Тhеrару. Рhаrmасоlоgу апd Тhеrареutiсs. 1999, v.81, N°3, р.163-221). Ехсitаtоrу Аmiпо Асids апd Dгаg Rеsеаrсh. Ed. bу М.R.Szеwсzаk & NJ.Нuib. Аlап RХiss, iпс. Nеw Yогk, 1989, p.380; Тhе NMDA Rесерtоr. Еds.Wаtkiпs & Соlliпgridgе G., 1989, IRL Рrеss), шизофрению, повышенную болевую чувствительность (Diсkепsоп, А сurе fоr wiпd-uр: NMDA rесерtоr апtаgопists аs роtепtiаl апаlgеsiсs. Тrепds Рhаrmасоl. Sсi. 11 : 307, 1990) (Соlliпgridgе еt аl., Тhе NMDA Rесерtоr, Охfоrd Uпivеrsitу Рrеss, 1994).The development of Huntington’s chorea and amyotrophic lateral sclerosis is associated with excitotoxicity. Exitotor Amipo Asids ddgag Research. Ed. b. M. R. Szewszak & NJ. Huib. Alap RXiss, IPS. New York, 1989, p. 380; The NMDA Test. Eds.Watkips & Sollipgridge G., 1989, IRL Rress), schizophrenia, increased pain sensitivity (Diskepsop, for sure A wipd-UP:. NMDA resertor aptagopists AS roteptial apalgesiss Trepds Rharmasol Ssi 11:.. 307, 1990) (Sollipgridge et al., The NMDA Resource, Oxford University Press, 1994).
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) На большом количестве экспериментов, моделирующих самые разнообразные нейропатологические ситуации, было также показано, что соединения, действующие как конкурентные или неконкурентные антагонисты NМDА-рецептора, в результате связывания с рецептором блокируют его функцию и таким образом ослабляют или подавляют эксайтотоксичность, вызываемую гиперактивацией глутаматергической системы.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) In a large number of experiments simulating a wide variety of neuropathological situations, it was also shown that compounds acting as competitive or non-competitive antagonists of the NMDA receptor, by binding to the receptor, block its function and thus weaken or suppress excitotoxicity caused by hyperactivation of the glutamatergic system.
Следствием открытия феномена эксайтотоксичности и выявления универсального механизма фармакологического действия антагонистов NМDА-рецептора явилось создание новых терапевтических стратегий для лечения и предупреждения самых разнообразных заболеваний центральной нервной системы.The discovery of the phenomenon of excitotoxicity and the identification of a universal mechanism of the pharmacological action of NMDA receptor antagonists resulted in the creation of new therapeutic strategies for the treatment and prevention of a wide variety of diseases of the central nervous system.
" Возможные терапевтические показания для антагонистов NMDA- рецепторов включают острые формы нейродегенеративных заболеваний, вызванные, например, церебральной ишемией, инсультом, гипоксией, гипогликемией, мозговой травмой или повреждением спинного мозга; хронические нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, эпилепсия, мультиинфарктное слабоумие, хорея Гентингтона, множественный склероз, боковой амиотрофический склероз; дегенеративные заболевания сетчатки, нейродегенеративные заболевания, ассоциированные с бактериальной или вирусной инфекциями, неврологические расстройства и заболевания, включающие чувство беспричинной тревоги, психоз, депрессию, шизофрению, мигрень, мышечные спазмы, недержание мочи или паралич; лекарственную, наркотическую или алкагольную зависимость, синдром отмены; острую или хроническую боль (EP1313703, AбlKЗ l/445, опубл. 28.05 2003; WO9511244, A61K31/50, опубл. 27.04. 1995; WO0234718, A61K31/404, oпyбл.02.05. 2002; WO " Possible therapeutic indications for NMDA receptor antagonists include acute forms of neurodegenerative diseases caused, for example, by cerebral ischemia, stroke, hypoxia, hypoglycemia, brain injury or spinal cord injury; chronic neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, epilepsy, multi dementia, Huntington's chorea, multiple sclerosis, amyotrophic lateral sclerosis; degenerative diseases of the retina, neurodegenerative diseases, associated with a bacterial or viral infection, neurological disorders and diseases, including causeless anxiety, psychosis, depression, schizophrenia, migraine, muscle cramps, urinary incontinence or paralysis; drug, drug or alcohol dependence, withdrawal syndrome; acute or chronic pain (EP1313703, AblKZ l / 445, published May 28, 2003; WO9511244, A61K31 / 50, published April 27, 1995; WO0234718, A61K31 / 404, published February 2, 2002; WO
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 9505175, A61K31/44, опубл. 23.02.1995; US4902695, C07D217/16, опубл. 20.02. 1990; US5192751, A61KЗ 1/4427, опубл. 09.03.1993; WO9606081, A61K31/40, опубл. 29.02. 1996; Раrsопs C.G., Dапуsz W., Quаск G. Glutаmаtе in CNS Disоrdеrs аs а Таrgеt fоr Drug Dеvеlорmепt: An Uрdаtе // Drugs Nеws Реrsресt, 1998, v.l l, Ш, p.523-580).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 9505175, A61K31 / 44, publ. 02/23/1995; US4902695, C07D217 / 16, publ. 02.20. 1990; US5192751, A61KZ 1/4427, publ. 03/09/1993; WO9606081, A61K31 / 40, publ. 02/29. 1996; Parsops CG, Dapusz W., Quask G. Glutamate in CNS Distributors and Target Drug Drug: Drug // Drugs News Respect, 1998, vl, III, p. 523-580).
В соответствии с этим, поиск соединений, способных предотвращать или блокировать гиперактивацию NMDA - рецепторов, является одним из наиболее приоритетных направлений в разработке лекарственных средств для лечения заболеваний центральной нервной системы (Иллариошкин C H. и др. Превентивная нейропротекция при нейро дегенеративных заболеваниях: использование антагонистов глутаматных рецепторов (обзор литературы и собственный опыт) // Неврологический журнал, 2006, т.l 1, N≥5, с.47-54; Lеi S.Z. еt аl. Вlосkаdе оf NMDA rесерtоr-mеdiаtеd mоbilizаtiоп оf iпtrасеllulаr Ca2+ рrеvепts пеurоtохiсitу // Вrаiп. Rеs., 1992, v. 598, 34° 1-2, р. 196-202).Accordingly, the search for compounds capable of preventing or blocking the hyperactivation of NMDA receptors is one of the highest priorities in the development of drugs for the treatment of diseases of the central nervous system (Illarioshkin C H. et al. Preventive neuroprotection in neurodegenerative diseases: use of antagonists glutamate receptors (literature review and own experience) // Neurological journal, 2006, vol. 1, N≥5, pp. 47-54; Lei SZ et al. Vloskade оf NMDA resertor-mediadot mobilizer Ca2 + рrеv pts peurotokhisitu // Vraip. Res., 1992, v. 598, 34 ° 1-2, p. 196-202).
К настоящему времени было синтезировано большое число соединений, принадлежащих к различным химическим группам, которые способны блокировать функцию NМDА-рецепторов.To date, a large number of compounds have been synthesized that belong to different chemical groups that are capable of blocking the function of NMDA receptors.
В частности, в качестве антагонистов NМDА-рецепторов в патентных публикациях описаны полиамины (WO9312777, A61K31/13, опубл. 08.07.1993); арилалкиламины (WO9856752, C07C211/32, опубл. 17.12. 1998); полициклические aлкaлoиды(WO9703979, A61KЗ 1/135, опубл. 06.02.1997); амидные производные карбоновых кислот (US4968678, C07D401/06, опубл. 11.06. 1990; EP0539057, A61KЗ 1/675, опубл. 16.07. 1997; WO0234718, A61KЗ 1/404, опубл. 02.05. 2002); производные алкилтиомочевин (RU 2252936, C07C335/12, опубл. 27.05.2005); 3-зaмeщeнныe производные карбоксииндолов (WO9216205, C07D209/42, опубл. 01.10.1992); производные гидрированныхIn particular, polyamines are described as antagonists of NMDA receptors in patent publications (WO9312777, A61K31 / 13, publ. 08.07.1993); arylalkylamines (WO9856752, C07C211 / 32, publ. 17.12. 1998); polycyclic alkaloids (WO9703979, A61KZ 1/135, publ. 02/06/1997); amide derivatives of carboxylic acids (US4968678, C07D401 / 06, publ. 11.06. 1990; EP0539057, A61KZ 1/675, publ. 16.07. 1997; WO0234718, A61KZ 1/404, publ. 02.05. 2002); derivatives of alkylthioureas (RU 2252936, C07C335 / 12, publ. 27.05.2005); 3-substituted derivatives of carboxyindoles (WO9216205, C07D209 / 42, publ. 01.10.1992); hydrogenated derivatives
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) пиpидo/3,4-b/индoлoв (RU2106864, A61KЗ 1/437, опубл. 20.03.1998); производные пиридина (WO03040128, C07D 401/04 , опубл. 15.05. 2003); замещенные гидроксипиридины (WO 9525721; WO 0075109; EP 824098; 2272027, 2178412); производные пиперидина (WO9117156, A61KЗ 1/425, oпyбл.14.11.1991; EP441506, A61K31/445, опубл. 14.08. 1991; WO 9302052, A61KЗ 1/445, опубл. 04.02.1993; WO9637226, A61K45/06, опубл. 28.1 1.1996); производные хиноксалина (WO9113878, A61KЗ 1/495, опубл. 19.09.1991; WO9518616, C07D487/04, oпyбл.13.07.1995); производные декагидроизохинолина (US4902695, C07D217/16, 20.02.1990); производные имидазопиридинов (EP0092458, A61KЗ 1/435, oпyбл.26.10.1983; WO9108211, A61K31/435, опубл.13.06. 1991); производные пиперидиноалканолов (WO9014088, C07D451/02, опубл. 29.11. 1990; WO9606081, A61K31/40, опубл. 29.02. 1996; WO9707098, C07D211/52, опубл. 27.02.1997; WO0247685, C07D211/52, опубл. 20.06. 2002); производные бензила (WO0228814, A61K31/00, опубл. 11.04.2002); производные 4-зaмeщeнныx пиперидинов (WO9723216, C07D211/14, опубл 03.07.1997.; WO 0000197, A61KЗ 1/435, опубл. 06.01. 2000); N-замещенные неарильные гетероциклические соединения (EP1379520, A61KЗ 1/444, опубл. 14.01. 2004); производные адамантана (US5061703, A61K31/13, опубл. 29.10.1991; WO0208219, опубл. 31.01. 2002).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) pyrido / 3,4-b / indoles (RU2106864, A61KZ 1/437, publ. 03.20.1998); pyridine derivatives (WO03040128, C07D 401/04, publ. 15.05. 2003); substituted hydroxypyridines (WO 9525721; WO 0075109; EP 824098; 2272027, 2178412); piperidine derivatives (WO9117156, A61KZ 1/425, publ. 14.11.1991; EP441506, A61K31 / 445, publ. 14.08. 1991; WO 9302052, A61KZ 1/445, publ. 04.02.1993; WO9637226, A61K45 / 06. 28.1 1.1996); quinoxaline derivatives (WO9113878, A61KZ 1/495, publ. 09/19/1991; WO9518616, C07D487 / 04, publ. 13.07.1995); derivatives of decahydroisoquinoline (US4902695, C07D217 / 16, 02.20.1990); imidazopyridine derivatives (EP0092458, A61KZ 1/435, publ. 26.10.1983; WO9108211, A61K31 / 435, publ. 13.06. 1991); derivatives of piperidinoalkanols (WO9014088, C07D451 / 02, publ. 29.11. 1990; WO9606081, A61K31 / 40, publ. 29.02. 1996; WO9707098, C07D211 / 52, publ. 02.27.1997; WO0247685, C07D.06.11 / 52. ); benzyl derivatives (WO0228814, A61K31 / 00, publ. 11.04.2002); derivatives of 4-substituted piperidines (WO9723216, C07D211 / 14, publ. 07/03/1997; WO 0000197, A61KZ 1/435, publ. 06.01. 2000); N-substituted non-aryl heterocyclic compounds (EP1379520, A61KZ 1/444, publ. 14.01. 2004); derivatives of adamantane (US5061703, A61K31 / 13, publ. 10/29/1991; WO0208219, publ. 31.01. 2002).
Недостатком большинства известных антагонистов NMDA - рецепторов является наличие побочных эффектов, включающих нарушение координации движений, стимуляцию симпатической нервной системы, головокружение, головную боль, галлюцинации, дисфорию, и ухудшение умственных способностей и памяти, проявляющихся в дозах, при которых известные соединения оказывают свое антагонистическое действие на NМDА-рецепторы.The drawback of most known NMDA receptor antagonists is the presence of side effects, including impaired coordination of movements, stimulation of the sympathetic nervous system, dizziness, headache, hallucinations, dysphoria, and mental impairment and memory, manifested in doses at which the known compounds exert their antagonistic effect on NMDA receptors.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Ближайшими структурными аналогами заявляемым соединениям являются производные 4-aминoпиpидинa, включающие 4-aминoпиpидин (фампридин), 3,4 -диаминопиридин, 2,4-диaминoпиpидин, используемые в анестезиологии, а также для лечения некоторых нейромышечных и нейродегенеративных болезней (US4562196, A61K31/44, опубл. 31.12.1985).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The closest structural analogues of the claimed compounds are derivatives of 4-aminopyridine, including 4-aminopyridine (fampridine), 3,4-diaminopyridine, 2,4-diaminopyridine, used in anesthesiology, as well as for the treatment of certain neuromuscular and neurodegenerative diseases (US4562196, 4461 A61K publ. 12/31/1985).
Однако данные соединения не обладают антагонистической активностью в отношении NМDА-рецепторов. Кроме того, известные производные 4-aминoпиpидинa не нашли широкого клинического применения из-за серьезных побочных эффектов.However, these compounds do not have antagonistic activity against NMDA receptors. In addition, the known 4-aminopyridine derivatives have not found wide clinical use due to serious side effects.
РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION
В связи с этим, одной из задач изобретения является создание новых химических соединений, которые обладали бы сильной антагонистической активностью по отношению к NМDА-рецепторам, но не вызывали бы побочных неблагоприятных эффектов, характерных для известных NМDА-антагонистов.In this regard, one of the objectives of the invention is the creation of new chemical compounds that would have strong antagonistic activity against NMDA receptors, but would not cause adverse side effects characteristic of known NMDA antagonists.
Задачей изобретения также является разработка новых фармацевтических композиций, лекарственных средств, способов их применения, которые были бы эффективны и безопасны для лечения нейродегенеративных и психиатрических заболеваний и расстройств, обусловленных гиперактивацией глутаматергической системы.The objective of the invention is the development of new pharmaceutical compositions, drugs, methods for their use, which would be effective and safe for the treatment of neurodegenerative and psychiatric diseases and disorders caused by hyperactivation of the glutamatergic system.
Технический результат изобретения заключается в получении новых фармацевтически активных соединений в ряду производных 2,4- диаминопиридина, фармацевтических композиций и лекарственных средств на их основе, пригодных для лечения и предупреждения неврологических и психиатрических заболеваний и расстройств и неожиданно сочетающих свойства высокоаффинного антагонистаThe technical result of the invention is to obtain new pharmaceutically active compounds in a series of derivatives of 2,4-diaminopyridine, pharmaceutical compositions and medicines based on them, suitable for the treatment and prevention of neurological and psychiatric diseases and disorders and unexpectedly combining the properties of a high affinity antagonist
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) NMDA- рецепторов со свойствами умеренных ингибиторов ацетилхолинэстеразы и свойствами высокоаффинных агонистов никотиновых холинорецепторов и симпатомиметиков, что обуславливает их комплексное нормализующее действие на дисбаланс нескольких нейротрансмиттерных систем, включая глутаматергическую, холинергическую, и адренергическую, без проявления нежелательных побочных эффектов, ранее наблюдавшихся у известных NMDA- антагонистов, а также в качестве активаторов когнитивных функций.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) NMDA receptors with the properties of moderate acetylcholinesterase inhibitors and the properties of high-affinity agonists of nicotinic cholinergic receptors and sympathomimetics, which determines their complex normalizing effect on the imbalance of several neurotransmitter systems, including glutamatergic, cholinergic, and adrenergic effects, without the manifestation of previously observed undesirable NMDA , as well as activators of cognitive functions.
ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯMODES FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к новым биологически активным производным 2,4-диaминoпиpидинa общей формулы (I)The present invention relates to new biologically active derivatives of 2,4-diaminopyridine of general formula (I)
Figure imgf000013_0001
где R означает водород,
Figure imgf000013_0001
where R is hydrogen,
R означает водород, Ci-C7 -алкил или арилалкил, либоR is hydrogen, Ci-C 7 alkyl or arylalkyl, or
R1 и R2 совместно означают пиперидино-, морфолино-, N- метилпиперазино-, пирролидино, гексагидроазепино,R 1 and R 2 together mean piperidino, morpholino, N-methylpiperazino, pyrrolidino, hexahydroazepino,
R3 " фенил или замещенный фенил,R 3 " phenyl or substituted phenyl,
X означает водород, циано-группу,X is hydrogen, a cyano group,
XR3 вместе означают (CH2)U5 n=2-4,XR 3 together means (CH 2 ) U5 n = 2-4,
Y означает водород, циано-группу (CN), карбоксильную группу (COOH ), N-замещенную или N-,N-дизaмeщeннyю карбамидную группы (CONHR4 или CONR4R5, где R4 и R5 обозначают C1-C5 - алкил),Y is hydrogen, a cyano group (CN), a carboxyl group (COOH), an N-substituted or an N-, N-disubstituted urea group (CONHR 4 or CONR 4 R 5 , where R 4 and R 5 are C 1 -C 5 - alkyl)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) при R = H, и поименованными выше R , X и Y5 R означает незамещенный и замещенные бензилы, СrСg-алкил, аминоалкил, гидроксиалкил, незамещенный и различно замещенные арилы, их фармацевтически приемлемым солям и/или сольватам.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) at R = H, and R, X, and Y 5 referred to above, R means unsubstituted and substituted benzyls, CrCg-alkyl, aminoalkyl, hydroxyalkyl, unsubstituted and variously substituted aryls, their pharmaceutically acceptable salts and / or solvates.
Термин «фapмaцeвтичecки приемлемые соли соединения формулы (I)» означает любые соли неорганической или органической кислоты или основания, которые обладает необходимой фармакологической активностью исходного соединения. Эти соли могут быть получены iп situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединения формулы (I) или приготовлены специально. Примерами соли, образованной кислотой, являются соли минеральных кислот, в частности, галогенводородных (фтористоводородная, бромистоводородная, иодистоводородная или хлористоводородная кислота), азотной, хлорной, угольной, серной или фосфорной кислот; соли алкилсульфокислот, таких, как метансульфокислота, трифторметансульфокислота и этансульфокислота; соли арилсульфокислот, таких как бензолсульфокислота или паратолуолсульфокислота; соли органических карбоновой кислот, таких, как уксусная, фумаровая, винная, щавелевая, малеиновая, яблочная, янтарная, бензойная, миндальная, аскорбиновая, молочная, глюконовая, лимонная кислота и др. Соединения формулы (I) по изобретению могут быть использованы в виде различных сольватов, в том числе в виде гидрата.The term “pharmaceutically acceptable salts of a compound of formula (I)” means any salts of an inorganic or organic acid or base that possesses the necessary pharmacological activity of the parent compound. These salts can be prepared in situ during the synthesis, isolation or purification of the compounds of formula (I) or prepared specially. Examples of the salt formed by the acid are salts of mineral acids, in particular hydrohalic (hydrofluoric, hydrobromic, hydroiodic or hydrochloric acid), nitric, perchloric, carbonic, sulfuric or phosphoric acids; salts of alkyl sulfonic acids such as methanesulfonic acid, trifluoromethanesulfonic acid and ethanesulfonic acid; salts of arylsulfonic acids such as benzenesulfonic acid or paratoluenesulfonic acid; salts of organic carboxylic acids, such as acetic, fumaric, tartaric, oxalic, maleic, malic, succinic, benzoic, mandelic, ascorbic, lactic, gluconic, citric acid, etc. The compounds of formula (I) according to the invention can be used in the form of various solvates, including in the form of a hydrate.
Наиболее предпочтительными соединениями являются 2-aминo-4- фениламинопиридин, 2-мopфoлинo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин, 2- N-мeтилпипepaзинo-З-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин, 2-N- мeтилпипepaзинo-4-фeнилaминoпиpидин, 2-бeнзилaминo-3-циaнo-4-The most preferred compounds are 2-amino-4-phenylaminopyridine, 2-morpholino-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-N-methylpiperazino-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-N-methyl-2-piperin benzylamino-3-cyano-4-
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) фениламинопиридин, 2-бeнзилaминo-4-фeнилaминoпиpидин5 2- мopфoлинo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидин.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) phenylaminopyridine, 2-benzylamino-4-phenylaminopyridine 5 2-morpholin-4-p-chlorophenylaminopyridine.
Соединения формулы (I) и их физиологически приемлемые соли или сольваты обладают неожиданной комбинацией взаимодополняющих фармакологических свойств, обуславливающих их комплексное действие на центральную нервную систему.The compounds of formula (I) and their physiologically acceptable salts or solvates possess an unexpected combination of complementary pharmacological properties that determine their complex effect on the central nervous system.
Новые производные 2,4-диaминoпиpидинa являются высокоаффинными антагонистами NМDА-рецепторов, дополнительно сочетающие в себе свойства умеренных ингибиторов ацетилхолинэстеразы и высокоаффинных агонистов никотиновых холинорецепторов, и, кроме того, обладающие свойствами симпатомиметиков (т.е. обладают сродством к адренергической системе и низкой степенью сродства к дофаминовым рецепторам).The new derivatives of 2,4-diaminopyridine are high-affinity antagonists of NMDA receptors, additionally combining the properties of moderate acetylcholinesterase inhibitors and high-affinity agonists of nicotinic cholinergic receptors, and, in addition, possessing the properties of sympathomimetics (i.e., have an affinity for the adrenergic system and low to dopamine receptors).
Благодаря уникальному сочетанию указанных видов активности, соединения настоящего изобретения обладают терапевтическим потенциалом антагонистов NMDA -рецепторов, но в то же время не проявляют неблагоприятных и нежелательных побочных эффектов, свойственных известным антагонистам NMDA - рецепторов. В частности, соединения настоящего изобретения обладают менее выраженными психостимулирующими свойствами и проявляют их в дозах в 10 раз превосходящих терапевтические дозы, не оказывают потенциально неблагоприятного влияния на артериальное давление, дыхание и частоту сердечных сокращений, биоэлектрическую активность сердца, тонус бронхиальной мускулатуры и периодическую деятельность кишечника.Due to the unique combination of these types of activity, the compounds of the present invention possess the therapeutic potential of NMDA receptor antagonists, but at the same time do not exhibit the adverse and undesirable side effects inherent to known NMDA receptor antagonists. In particular, the compounds of the present invention have less pronounced psychostimulating properties and exhibit them in doses 10 times higher than therapeutic doses, do not have a potentially adverse effect on blood pressure, respiration and heart rate, bioelectric activity of the heart, tone of bronchial muscles and periodic bowel activity.
В отличие от известных антагонистов NМDА-рецепторов, соединения настоящего изобретения не только не нарушают познавательной способности, но и обладают свойствами ноотропов иUnlike the known antagonists of NMDA receptors, the compounds of the present invention not only do not impair cognitive ability, but also possess the properties of nootropics and
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) активаторов когнитивных функций, способствующих развитию памяти, умственных и поведенческих способностей. Так, соединения настоящего изобретения улучшают обучаемость животных при выработке простых и сложных инструментальных оборонительных рефлексов (УРАИ и УРПИ), способствуют консолидации и сохранению памятного следа. Новые соединения стимулируют когнитивные функции у животных с дефицитом обучения, оказывают антиамнестическое действие при экспериментальном нарушении памяти холинолитическим препаратом скопол амином и максимальным электрошоком (МЭШ). В экспериментах на старых животных оказывают активирующее влияние на биоэлектрическую активность головного мозга, восстанавливают нарушенную функциональную асимметрию между его полушариями, уменьшают повреждающее действие гипоксии на высшие отделы мозга; облегчают решение экспериментальной экстраполяционной задачи животными в условиях стрессорной ситуации, что может свидетельствовать об улучшении под их влиянием ассоциативных функций головного мозга.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) activators of cognitive functions that contribute to the development of memory, mental and behavioral abilities. Thus, the compounds of the present invention improve the learning ability of animals in the development of simple and complex instrumental defensive reflexes (URAI and passive avoidance reaction), contribute to the consolidation and preservation of the memorable trace. The new compounds stimulate cognitive function in animals with learning deficits, have an anti-amnestic effect in experimental memory impairment with the cholinolytic drug scopolamine and maximum electroshock (MES). In experiments on old animals, they have an activating effect on the bioelectric activity of the brain, restore impaired functional asymmetry between its hemispheres, and reduce the damaging effect of hypoxia on the higher parts of the brain; facilitate the solution of the experimental extrapolation problem by animals in a stressful situation, which may indicate an improvement in their associative functions of the brain.
Фармакологическая активность соединений настоящего изобретения была определена с использованием тестов, принятых для оценки новых фармакологических веществ («Pyкoвoдcтвo по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических вeщecтв», Москва, 2000). При этом исследования рецепторной активности новых производных 2, 4-диaминoпиpидинa проводились в соответствии со стандартными рекомендациями ШPHAR("Gшde tо Rесерtоrs апd Сhаппеls", S.Р.Н.Аlехапdеr, А.Маthiе апd J.А.Реtеrs, BJP, v.147, Suρρl.3, 2006). Способность соединений конкурентно связываться с NMDA глутаматными рецепторами определялась на основе анализа на радиолигандное связывание сThe pharmacological activity of the compounds of the present invention was determined using tests adopted to evaluate new pharmacological substances ("Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances", Moscow, 2000). At the same time, studies of the receptor activity of new derivatives of 2, 4-diaminopyridine were carried out in accordance with the standard recommendations of SHPHAR ("Gшdetо Resource Apd Chappels", S.P.N. Alekhapder, A.Matie apd J.A. Reporters, BJP, v. 147, Suρρl. 3, 2006). The ability of compounds to competitively bind to NMDA glutamate receptors was determined based on the analysis of radioligand binding to
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) использованием тритий-меченых лигандов глутаматных рецепторов [G- ЗH]-MK-801(дизoцилпин) (см. Nоwаk G., Тгаllаs R., Lауеr R., Skоlпik Р., and Paul I. Аdарtivе сhапgеs iп thе N-mеthуl-D-Аsраrtаtе rесерtоr соmрlех аftеr сhrопiс trеаtmепt with imipramine and 1-aminocyclopropanecarboxylic асid // J. Рhаrmасоl. Ехр. Тhеr., 1993, 265, p.1380-1386). Активность соединений в отношении дофаминовых рецепторов определялась с использованием тритий-меченых лигандов [G-ЗH]-SCH -23390 для Дl- типа дофаминового рецептора и [G -ЗH]-cпиpoпepидoлa (спироприла) - для Д2 -типа дофаминового рецептора (Suп W., Giпоvаrt N., Ко F., Sееmап Р., еt аl., In vivо еvidепсе fоr dораmiпе-mеdiаtеd iпtеrпаlizаtiоп оf D2-receptors аftеr аmрhеtаmiпе: diffеrепtiаl fmdiпgs with [ЗЩrасlорridе vегsus [ЗH]sρiρerone. MoI Рhаrmасоl 63(2): 456-62, 2003).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) using tritium-labeled ligands of the glutamate receptors [G-ЗH] -MK-801 (disocylpin) (see Nowak G., Tgallas R., Lauer R., Skolpik R., and Paul I. Adaptive chemotherapy n-metul- D-Aspartate Reserter Compiler Achter Chrytophtheptum with imipramine and 1-aminocyclopropanecarboxylic acid // J. Pharmacol. Exp. Ther., 1993, 265, p.1380-1386). The activity of the compounds with respect to dopamine receptors was determined using tritium-labeled ligands [G-CH] -SCH -23390 for the D-type of dopamine receptor and [G-CH] -spiroperidol (spiropril) for the D2-type of dopamine receptor (Supp W. , Gipovart N., Co. F., Sémap R., et al., In vivo evidepés fordepalizémépéd D2-receptors apter amphepémépère: Dépémépépépée [Zépépépépée [Zépédép. 456-62, 2003).
Для изучения сродства соединений формулы (I) к холинорецепторам приводились эксперименты по радиолигандному связыванию с использованием меченого тритием (±)Hикoтинa с удельной активностью 140 Кюри/ммоль, полученным методом твердофазного мечения (Ковалев Г.И. Пресинаптические рецепторы нейромедиаторов ЦНС млекопитающих как объект фармакологических воздействий. Москва, ВИНИТИ, т.15, CC.5-61, 1987).To study the affinity of the compounds of formula (I) for cholinergic receptors, experiments were carried out on radioligand binding using tritium-labeled (±) Nicotin with a specific activity of 140 Curie / mmol obtained by the solid-phase labeling method (Kovalev G.I. Mammalian CNS presynaptic receptors as an object of pharmacological effects Moscow, VINITI, v.15, CC.5-61, 1987).
Фармакологическая активность соединений формулы (I) в качестве активаторов когнитивных функций продемонстрирована на моделях амнезии и поведенческих экспериментах iп vivо (экспериментальные животные - мыши, крысы).The pharmacological activity of the compounds of formula (I) as activators of cognitive functions was demonstrated in amnesia models and behavioral experiments in vivo (experimental animals — mice, rats).
Активность соединений формулы (I) в качестве симпатомиметиков подтверждена на стандартных моделях, таких как тесты по влиянию на поведенческие реакции, на депримирующий эффект резерпина.The activity of the compounds of formula (I) as sympathomimetics was confirmed on standard models, such as tests on the effect on behavioral reactions, on the deprimative effect of reserpine.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Эффективность новых производных 2,4-диaминoпиρидинa для лечения рассеянного склероза продемонстрирована на моделях экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ), являющихся общепринятыми при тестировании новых агентов для лечения демиелинизирущих и других нейродегенеративных заболеваний человека (Наflеr, D. А. апd Wеiпеr, Н.L.// Immuпоlоgiсаl Rеviеws, 1995, 144, р. 75).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The effectiveness of the new derivatives of 2,4-diaminopyridine for the treatment of multiple sclerosis has been demonstrated on experimental allergic encephalomyelitis (EAE) models, which are generally accepted when testing new agents for the treatment of demyelinating and other human neurodegenerative diseases (Nafler, D. A. ap Weeper, N.L. // Immologic Revisions, 1995, 144, p. 75).
Заявляемые соединения могут быть получены способом, проиллюстрированным реакционной схемой 1, представленной ниже:The inventive compounds can be obtained by the method illustrated by reaction scheme 1 below:
Схема 1Scheme 1
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000018_0001
где R , 1- rR.5 , X и У имеют значения, указанные выше.where R, 1 - rR.5, X and Y have the meanings indicated above.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Результаты синтеза, биохимических исследований и тестирования фармакологической активности соединений формулы (I) приведены в соответствующих примерах, которые иллюстрируют, но не ограничивают рамки настоящего изобретения.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The results of the synthesis, biochemical studies and testing of the pharmacological activity of the compounds of formula (I) are given in the corresponding examples, which illustrate but do not limit the scope of the present invention.
Объектом изобретения является также фармацевтическая композиция, которая содержит в качестве активного ингредиента соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, взятые в эффективном количестве в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами.A subject of the invention is also a pharmaceutical composition which contains, as an active ingredient, a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, taken in an effective amount in a mixture with pharmaceutically acceptable excipients.
Термин «эффeктивнoe количество)) означает количество активного ингредиента, которое при введении пациентам обеспечивает предупреждение или ослабление заболевания и симптомов заболевания, подлежащих профилактике или лечению.The term “effective amount)) means the amount of the active ingredient that, when administered to patients, provides a warning or amelioration of the disease and the symptoms of the disease to be prevented or treated.
В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ в составе фармацевтической композиции согласно изобретения могут быть использованы любые фармацевтически приемлемые компоненты, которые совместимы с активным ингредиентом и не наносят вреда пациентам, традиционно используемые для приготовления лекарственных форм, например, наполнители, связующие агенты, гранулирующие агенты, солюбилизирующие агенты, средства для скольжения, стабилизаторы, разбавители, адъюванты, консерванты, компоненты буферных систем, растворители, диспергирующие агенты, консерванты, смазывающие агенты, вкусовые добавки, загустители, пищевые красители, эмульгаторы, регуляторы пролонгированной доставки и т.п.As pharmaceutically acceptable excipients in the pharmaceutical composition according to the invention, any pharmaceutically acceptable components can be used that are compatible with the active ingredient and do not harm patients, traditionally used for the preparation of dosage forms, for example, fillers, binding agents, granulating agents, solubilizing agents , glidants, stabilizers, diluents, adjuvants, preservatives, components of buffer systems, solvents, d spergiruyuschie agents, preservatives, lubricants, flavorings, thickeners, colorants, emulsifiers, and prolonged delivery controllers, etc.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами являются, например, лактоза, инозит, глюкоза, маннит, декстран, циклодекстрин, сорбит, крахмал и его модификации, сахароза,Pharmaceutically acceptable excipients are, for example, lactose, inositol, glucose, mannitol, dextran, cyclodextrin, sorbitol, starch and its modifications, sucrose,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) алюмосиликат магния, синтетический алюмосиликат, кристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, гидроксипропилированный крахмал, карбоксиметилцеллюлоза кальция, ионообменные смолы, метилцеллюлоза, желатин, гуммиарабик, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, альгиновая кислота, альгинат натрия, безводная кремниевая кислота, стеарат магния, тальк, карбоксивиниловый полимер, оксид титана, эфир жирной кислоты и сорбита, натрия лаурилсульфат, глицерин, глицериновый эфир жирной кислоты, ланолин, глицерожелатин, полисорбат, макроголь, растительное масло, воск, парафины, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, вода, этанол, полиспирты, полиоксиэтиленгидрированное касторовое масло, хлорид натрия, гидроксид натрия, соляная кислота, двухосновный фосфат натрия, моноосновный фосфат натрия, лимонная кислота, глутаминовая кислота, бензиловый спирт, метил п-оксибензоат, этил п-оксибензоат и тому подобное.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) magnesium aluminosilicate, synthetic aluminosilicate, crystalline cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, hydroxypropylated starch, calcium carboxymethyl cellulose, ion exchange resins, methyl cellulose, gelatin, gum arabic, hydroxypropyl cellulose, hydroxyvinyl hydroxyhydrochloride, hydroxyhydroxyhydroxyhydrochloride hydroxyhydrochloride , carboxyvinyl polymer, titanium oxide, fatty acid ester of sorbitol, sodium lauryl sulfate, glycerin, glycerin fatty acid firm, lanolin, glycerolatin, polysorbate, macrogol, vegetable oil, wax, paraffins, propylene glycol, polyethylene glycol, water, ethanol, polyalcohols, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, sodium chloride, sodium hydroxide, hydrochloric acid, dibasic sodium phosphate, monobasic citric acid, glutamic acid, benzyl alcohol, methyl p-hydroxybenzoate, ethyl p-hydroxybenzoate and the like.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть выполнены в виде пероральной формы введения, например, в форме таблеток, гранул, шариков, порошков, капсул, суспензий, сиропов, эмульсий и т.д.; в инъекционной форме; суппозиторий для ректального или вагинального введения; аэрозоли, спрея, трансдермальных, интраназальных, интраокулярных форм введения и т.п. Твердые формы фармацевтических композиций для перорального применения и растворы для инъекций являются предпочтительными.The pharmaceutical compositions of the present invention can be in the form of an oral administration form, for example, in the form of tablets, granules, beads, powders, capsules, suspensions, syrups, emulsions, etc .; in injection form; suppository for rectal or vaginal administration; aerosols, spray, transdermal, intranasal, intraocular forms of administration, etc. Solid forms of pharmaceutical compositions for oral administration and solutions for injection are preferred.
Фармацевтические композиции могут быть приготовлены любым известным способом в данной области, используя одно или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. Например,The pharmaceutical compositions may be prepared by any known method in the art using one or more pharmaceutically acceptable excipients. For example,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) при производстве таблеток активный ингредиент смешивают с традиционными таблетирующими ингредиентами, такими как наполнители, связывающие агенты, разрыхлители, гранулирующие агенты, смазывающие агенты и средства для скольжения, с последующим прессованием полученной смеси в таблетировочной машине. В качестве наполнителей и разрыхлителей могут быть использованы лактоза, цитрат натрия, карбонат кальция и дикальций фосфат и т.п.; связующих агентов - крахмал или его производные, желатин, глюкоза, лактоза, натуральные или синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воск, натрий лаурилсульфат и тальк и т.п. Смазывающие вещества, используемые в этих лекарственных формах, включают, без ограничения, олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т. п. При желании, таблетки можно покрыть сахарной, желатиновой, пленочной или кишечной оболочками посредством стандартных способов, например, таблетка может включать внутреннее ядро, содержащее активный ингредиент, и внешний слой в виде оболочки, покрывающей ядро. Внешняя оболочка может служить для защиты от распадаемости в желудке, что позволит внутреннему ядру проходить интактным в двенадцатиперстную кишку и медленно высвобождаться. Для образования подобных защитных слоев или оболочек можно использовать разнообразные вещества, включая ряд полимерных кислот и смеси полимерных кислот с обычными веществами, такими как щеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы. Для улучшения вкуса пероральной формы можно добавить подсластители и ароматизаторы.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) in the manufacture of tablets, the active ingredient is mixed with traditional tablet ingredients, such as fillers, binders, disintegrants, granulating agents, lubricants and glidants, followed by compression of the resulting mixture in a tablet machine. As fillers and disintegrants, lactose, sodium citrate, calcium carbonate and dicalcium phosphate, and the like can be used; binding agents - starch or its derivatives, gelatin, glucose, lactose, natural or synthetic gums, such as gum arabic, tragacanth or sodium alginate, carboxymethyl cellulose, polyethylene glycol, wax, sodium lauryl sulfate and talc, etc. Lubricants used in these dosage forms include, but are not limited to, sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, etc. If desired, tablets may be coated with sugar, gelatin, film, or intestinal coatings by standard methods, for example, a tablet may include an inner core containing the active ingredient and an outer layer in the form of a shell covering the core. The outer shell can serve to protect against disintegration in the stomach, which will allow the inner core to pass intact into the duodenum and slowly release. A variety of substances can be used to form such protective layers or shells, including a number of polymeric acids and mixtures of polymeric acids with common substances, such as alkali, cetyl alcohol and cellulose acetate. Sweeteners and flavorings may be added to improve the taste of the oral form.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Фармацевтическая композиция в форме капсул может быть приготовлена смешиванием активного ингредиента с наполнителями, такими, как, например, сорбит или лактоза, и расфасовыванием полученной смеси в капсулы.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) A pharmaceutical composition in the form of capsules can be prepared by mixing the active ingredient with excipients, such as, for example, sorbitol or lactose, and filling the resulting mixture in capsules.
Фармацевтическая композиция в форме пероральных микстур, эликсиров или сиропов может содержать в качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ воду, полиолы, сахарозу, инвертированный сахар, глюкозу, пищевые масла, например, масло семян хлопчатника, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, пищевые ароматизаторы, красители и т.п. Микстуры, эликсиры или сиропы могут дополнительно содержать суспендирующие вещества и загустители, такие как, синтетические и натуральные камеди (трагакант, аравийская камедь), альгинат, декстран, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, желатин, глицерин, метилцеллюлоза или поливинилпирролидон, или консерванты, например, гидроксибензоаты.A pharmaceutical composition in the form of oral medicines, elixirs, or syrups may contain water, polyols, sucrose, invert sugar, glucose, edible oils, for example, cottonseed oil, sesame oil, coconut oil or peanut oil, food flavorings, as pharmaceutically acceptable excipients, dyes, etc. Potions, elixirs or syrups may additionally contain suspending agents and thickeners, such as synthetic and natural gums (tragacanth, Arabian gum), alginate, dextran, sodium carboxymethyl cellulose, gelatin, glycerin, methyl cellulose or polyvinyl pyrrolidone, or preservatives, for example.
Фармацевтическая композиция в форме для инъекций может быть получена растворением активного ингредиента и возможных вспомогательных добавок в части растворителя для инъекций, предпочтительно в стерильной воде, доведением полученного раствора до требуемого объема, в случае необходимости, добавлением буферного агента, регулирующего рН, солюбилизатора, стабилизатора или антисептика, стерилизацией полученного раствора и заполнением им подходящих ампул или емкостей. В качестве растворителя могут использоваться физиологический раствор, спирты, пoлиoлы,гликoлeвыe эфиры, например, полиоксиэтиленсорбитан, монолаурат, моноолеат или моностеарат, глицерин, растительные масла и т.п.A pharmaceutical composition in an injection form can be prepared by dissolving the active ingredient and possible adjuvants in part of the injection solvent, preferably in sterile water, adjusting the resulting solution to the desired volume, optionally adding a pH adjusting agent, solubilizer, stabilizer or antiseptic sterilizing the resulting solution and filling it with suitable ampoules or containers. As a solvent, physiological saline, alcohols, poliols, glycol ethers, for example, polyoxyethylene sorbitan, monolaurate, monooleate or monostearate, glycerin, vegetable oils, etc. can be used.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами при получении фармацевтической композиции в форме суппозиториевPharmaceutically acceptable excipients in the preparation of a pharmaceutical composition in the form of suppositories
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) являются, например, природные или отвержденные масла, например, масло какао, воска, жиры, эфир глицерина и насыщенной жирной кислоты, глицерожелатин, макрогол, полужидкие или жидкие полиолы, триглицериды и т.п. Основа суппозиториев может включать также поверхностно-активное вещество или стабилизатор.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) are, for example, natural or hardened oils, for example, cocoa butter, waxes, fats, glycerol and saturated fatty acid esters, glycerogelatin, macrogol, semi-liquid or liquid polyols, triglycerides, and the like. The suppository base may also include a surfactant or stabilizer.
Композиция по изобретению может содержать также такие компоненты, которые обеспечат быстрое продолжительное или замедленное высвобождение активного ингредиента после приема пациентами. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например моностеарат алюминия и желатин.The composition according to the invention may also contain such components that provide a quick, sustained or delayed release of the active ingredient after administration by patients. The prolonged action of the composition can be achieved using agents that slow down the absorption of the active principle, for example aluminum monostearate and gelatin.
Предпочтительно, чтобы активный ингредиент входил в состав фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде единичных доз.Preferably, the active ingredient is included in the pharmaceutical composition of the present invention in unit dosage form.
Термин "в виде единичных доз" означает любое эффективное количество активного ингредиента, которое в сочетании с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами содержится в лекарственной форме фармацевтической композиции, используемой для разового введения пациенту.The term "in unit dosage form" means any effective amount of an active ingredient which, in combination with pharmaceutically acceptable excipients, is contained in a dosage form of a pharmaceutical composition used for a single administration to a patient.
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения в одной единичной дозе может содержать активный ингредиент в количестве от 0.01 до 100 мг, предпочтительно, в количестве от 0,1 до 10 мг активного ингредиента. Разумеется, эффективное количество активного ингредиента в некоторых композициях может выходить за вышеуказанные границы.The pharmaceutical composition of the present invention in a single unit dose may contain the active ingredient in an amount of from 0.01 to 100 mg, preferably in an amount of from 0.1 to 10 mg of the active ingredient. Of course, an effective amount of the active ingredient in some compositions may go beyond the above boundaries.
Нижеследующие примеры рецептур являются чисто иллюстративными и не ограничивают рамки настоящего изобретения. Изобретение также относится к лекарственному средству, содержащемуThe following formulation examples are illustrative only and do not limit the scope of the present invention. The invention also relates to a medicament containing
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) соединение формулы (I), его фармацевтически приемлемые соли, сольваты, как таковые или в виде фармацевтической композиции, для лечения и предупреждения заболеваний или расстройств центральной нервной системы, связанных с повышенной активацией глутаматергической системы и/или поражением интеллектуально- мнестических функций.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) the compound of formula (I), its pharmaceutically acceptable salts, solvates, as such or in the form of a pharmaceutical composition, for the treatment and prevention of diseases or disorders of the central nervous system associated with increased activation of the glutamatergic system and / or impairment of intellectual and mnemonic functions.
К числу заболеваний или нарушений, которые подлежат лечению или профилактике лекарственными средствами настоящего изобретения, относятся острые формы нейродегенеративных расстройств или заболеваний, связанные с внезапным повреждением нейронов или нарушением их функций, включающие, в качестве неограничивающих примеров, церебрососудистую недостаточность, церебральную ишемию, инсульт, нейропатии, вызванные гипоксией или гипогликемией, мозговой травмой или повреждением спинного мозга и тому подобное; хронические нейродегенеративные расстройства или заболевания, связанные с поражением двигательных нейронов, включающие, в качестве неограничивающих примеров, амиотрофический боковой склероз, спиноцеребеллярную дегенерацию, дегенеративные атаксии, кортико-базальную дегенерацию, комплекс Гуама (комплекс амиотрофический боковой склероз - паркинсонизм - деменция), подострый склерозирующий панэнцефалит; хронические нейродегенеративные демиелинизирующие заболевания, связанные с разрушением или нарушением формирования миелиновой оболочки нервных проводников, включающие, в качестве неограничивающих примеров, рассеянный (множественный) склероз, рассеянный энцефаломиелит, склероз Шильдера, миелинопатии воспалительного и сосудистого характера. воспалительную демиелинизирующую полинейропатию, синдром Гийена-Барре, болезнь Маркиафавы-Diseases or disorders to be treated or prevented with the drugs of the present invention include acute forms of neurodegenerative disorders or diseases associated with sudden damage to neurons or impairment of their functions, including, but not limited to, cerebrovascular insufficiency, cerebral ischemia, stroke, neuropathies caused by hypoxia or hypoglycemia, brain injury or damage to the spinal cord and the like; chronic neurodegenerative disorders or diseases associated with damage to motor neurons, including, but not limited to, amyotrophic lateral sclerosis, spinocerebellar degeneration, degenerative ataxia, cortico-basal degeneration, the Guam complex (amyotrophic lateral sclerosis-parkinsonism-dementia complex), subacute sclerosalitis ; chronic neurodegenerative demyelinating diseases associated with the destruction or violation of the formation of the myelin sheath of the nerve conductors, including, but not limited to, multiple (multiple) sclerosis, multiple encephalomyelitis, Schilder's sclerosis, inflammatory and vascular myelinopathy. inflammatory demyelinating polyneuropathy, Guillain-Barré syndrome, Markiafava disease -
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Бигнами, центральный понтинный миелинолиз, нейрооптикомиелит, синдром Девика, болезнь Бало, миелопатии при ВИЧ, вторичные демиелинизирующие заболевания, такие как красная волчанка ЦНС, узелковый полиартериит, синдром Шегрена, саркоидоз, локализованный церебральный васкулит и тому подобное; хронические нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, мультиинфарктное слабоумие, болезнь Гентингтона; нейродегенеративные заболевания, ассоциированные с бактериальной или вирусной инфекциями; неврологические и психиатрические расстройства и заболевания, связанные с эксайтотоксическим нейрональным повреждением, включающие, в качестве неограничивающих примеров, чувство беспричинной тревоги, психоз, депрессию, шизофрению, эпилепсию, мигрень, мышечные спазмы, недержание мочи, паралич, лекарственную, наркотическую или алкогольную зависимость, синдром отмены; состояния с острым или хроническим болевым синдромом; острые или хронические нейродегенеративные расстройства или заболевания, связанные с нарушениями когнитивных функций, способности к обучению, расстройства памяти, запоминания, нарушения внимания, которые могут быть результатом возрастных изменений, умственной отсталости, инсульта, травмы, приема алкоголя или наркотических средств или любых других острых или хронических нейродегенеративных заболеваний, например, таких как, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и тому подобное..SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Bygnamy, central pontine myelinolysis, neurooptomyelitis, Devik's syndrome, Balo's disease, HIV myelopathy, secondary demyelinating diseases such as CNS lupus, polyarteritis nodosa, Sjogren's syndrome, sarcoidosis, localized cerebral vasculitis and the like; chronic neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, multi-infarction dementia, Huntington's disease; neurodegenerative diseases associated with bacterial or viral infections; neurological and psychiatric disorders and diseases associated with excitotoxic neuronal damage, including, but not limited to, feelings of causeless anxiety, psychosis, depression, schizophrenia, epilepsy, migraine, muscle cramps, urinary incontinence, paralysis, drug, drug or alcohol dependence, syndrome cancellation; conditions with acute or chronic pain syndrome; acute or chronic neurodegenerative disorders or diseases associated with impaired cognitive function, learning ability, memory impairment, remembering, impaired attention, which may result from age-related changes, mental retardation, stroke, trauma, alcohol or drug use, or any other acute or chronic neurodegenerative diseases, for example, such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease and the like ..
Лечебное и профилактическое действие лекарственных средств настоящего изобретения основано на нескольких взаимодополняющих механизмах, в основе которых лежат нейропротекторные и когнитивно- активирующие эффекты новых производных 2,4-диaминoпиρидинa.The therapeutic and prophylactic effect of the drugs of the present invention is based on several complementary mechanisms, which are based on the neuroprotective and cognitively activating effects of the new derivatives of 2,4-diaminopyridine.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Благодаря наличию сильной антагонистической активности в отношении NМDА-рецепторов, предлагаемые лекарственные средства способны блокировать гиперактивацию NMDA- рецепторов и подавлять связанный с этим процессом патологический приток кальция в нейроны, тем самым защищая нейроны от патологической активации и эксайтотоксического действия, вследствие чего они пригодны для лечения и предупреждения различных нейродегенеративных и психиатрических заболеваний, обусловленных гиперактивностью глутаматергической системы.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Due to the presence of strong antagonistic activity against NMDA receptors, the proposed drugs are able to block the hyperactivation of NMDA receptors and inhibit the pathological influx of calcium into neurons associated with this process, thereby protecting neurons from pathological activation and excitotoxicity, which makes them suitable for treatment and prevention of various neurodegenerative and psychiatric diseases caused by hyperactivity of the glutamatergic system.
Когнитивная активность лекарственных средств, представленных в настоящем изобретении, связана со стимуляцией холинергических процессов в мозге, осуществляемой путем активации никотиновых холинорецепторов, а также ингибирования ацетилхолинэстеразы. Соединения, которые активируют никотиновые рецепторы или же блокируют активность ацетилхолинэстеразы, как известно, за счет компенсации дефицита гипофункции холинергической системы способны оказывать антиамнестическое и ноотропное действие и могут найти применение при терапии когнитивных расстройств ( В.Г.Граник, «Лeкapcтвa», 2006, M., «Byзoвcкaя книгa», стр. 173-177).The cognitive activity of the drugs of the present invention is associated with the stimulation of cholinergic processes in the brain by the activation of nicotinic cholinergic receptors, as well as the inhibition of acetylcholinesterase. Compounds that activate nicotinic receptors or block acetylcholinesterase activity are known to compensate for the deficiency of hypofunction of the cholinergic system and can have an anti-anamnestic and nootropic effect and can be used in the treatment of cognitive disorders (V.G. Granik, “Medicine”, 2006, M ., “Byzovskaya book”, pp. 173-177).
Для соединений, представленных в настоящем изобретении показано также наличие симпатомиметической активности. Наличие этой активности обусловливает активацию когнитивных функций (наряду с психостимулирующим эффектом), антидепрессивного действия и повышение работоспособности.The compounds of the present invention also show the presence of sympathomimetic activity. The presence of this activity determines the activation of cognitive functions (along with a psychostimulating effect), antidepressant effects and increased performance.
Соединения настоящего изобретения обладают выше указанными активностями, вследствие чего они не только не вызывают нарушения умственных способностей, внимания и памяти, характерные для известных антагонистов NМDА-рецепторов, но и, более того, могутThe compounds of the present invention possess the above activities, as a result of which they not only do not cause impaired mental ability, attention and memory, characteristic of known NMDA receptor antagonists, but, moreover, can
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) быть пригодны для лечения и предупреждения ряда заболеваний или расстройств, связанных с нарушениями когнитивных функций и способности к обучению. (Lупсh, 2003; Vоrопiп, Сhегаbiпi, 2003; Ререu, Giоvаппiпi, 2004; Меsulаm, 2004). (Ререu J. апd М.L.Giоvаппiпi, Lеаrпiпg & Меmоrу, 11 :21-27; 2004.). (Frапсis P.T., Alan M Раlmеr, Мiсhаеl Sпаре апd Gоrdоп К Wilсосk, J. Nеurоl. Nеurоsurg. Рsусhiаtrу; 66:137-147, 1999, Dwоskiп L.P. апd Р.А.Сrооks, JPET 298:395-402, 2001; Меsulаm, M., Lеаrпiпg & Меmоrу, 11 : 43-49; 2004).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) be suitable for the treatment and prevention of a number of diseases or disorders associated with impaired cognitive function and learning ability. (Lupsh, 2003; Voropip, Schegabipi, 2003; Pereu, Giovappipi, 2004; Mesulam, 2004). (Pereu J. apt, M. L. G. Giovappi, Leapipg & Method, 11: 21-27; 2004.). (Fropsis PT, Alan M Ralmer, Mishail Spare apd Gordop K Wilsosk, J. Neurol. Neurosurg. Psihiatru; 66: 137-147, 1999, Dwoski LP apd P.A. Sprouts, JPET 298: 395-402a, 2001; , M., Le-pipg & Metoru, 11: 43-49; 2004).
(Nishizаki Т., Т.Маtsuоkа, Т.Nоmurа, еt аl., Моl.Рhаrmасоl., 53:1-5;(Nishizaki T., T. Matsuoka, T. Nomura, et al., Mol. Pharmacol., 53: 1-5;
1998. Nishizаki Т., Т.Маtsuоkа, Т.Nоmurа еt аl., Вrаiп Rеs., 826(2) :281-288;1998. Nishizaki T., T. Matsuoka, T. Nomura et al., Braip Res., 826 (2): 281-288;
1999. Nishizаki T, Маtsuоkа T, Nоmurа T, Копdоh T, Wаtаbе S, Shiоtапi T, Yоshii M - Аlzhеimеr Dis Аssос Disоrd 2000; 14 Suррl l :S82-94). (Sсhпеidеr J.S., J. P. Тiпkеr, F. Мепzаghi апd G. К. Llоуd, JPET 306:401-406, 2003).1999. Nishizaki T, Matsuoka T, Nomura T, Kopdokh T, Vatabe S, Shiotapi T, Yoshii M - Alzheimer Dis Assos Disord 2000; 14 Surpr. L: S82-94). (Schpeider J.S., J. P. Tipker, F. Mapzagi, G.K. Lloud, JPET 306: 401-406, 2003).
Таким образом, на основании профиля действия предлагаемые согласно изобретению лекарственные средства оказывают комплексное нормализующее действие на дисбаланс нескольких нейротрансмиттерных систем, включая глутаматергическую, холинергическую, адренергическую системы, обладают чрезвычайно низкой степенью сродства к дофаминовым рецепторам, и поэтому могут быть более эффективными для лечения или предупреждения ряда заболеваний или нарушений центральной нервной системы без проявления нежелательных побочных эффектов, ранее наблюдавшихся у известных NМDА-антагонистов.Thus, on the basis of the action profile, the drugs according to the invention have a complex normalizing effect on the imbalance of several neurotransmitter systems, including glutamatergic, cholinergic, adrenergic systems, have an extremely low degree of affinity for dopamine receptors, and therefore can be more effective for the treatment or prevention of a number of diseases or disorders of the central nervous system without manifesting undesirable side effects, previously observed vshihsya the known NMDA antagonists.
Изобретение относится также к способу лечения или профилактики заболеваний и расстройств, связанных с повышенной активацией глутаматергической системы и/или поражением интеллектуально-мнестических функций, путем введения пациентуThe invention also relates to a method for the treatment or prophylaxis of diseases and disorders associated with increased activation of the glutamatergic system and / or impairment of intellectual-mnemonic functions, by introducing the patient
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) эффективной дозы соединения формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, фармацевтической композиции или лекарственного средства на их основе.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) an effective dose of a compound of formula (I), a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, pharmaceutical composition or a medicine thereof.
Соединение формулы (I), фармацевтически приемлемые соли, сольваты, фармацевтическая композиция или лекарственное средство на их основе вводят в организм пациенту обычными методами, хорошо известными специалистам в этой области, например, перорально, ректально, интравагинально, трансдермально, интраназально, интраокулярно или же парентеральными инъекциями. Предпочтительным методом введения по изобретению являются пероральное или парентеральное введение.A compound of formula (I), pharmaceutically acceptable salts, solvates, a pharmaceutical composition or a medicament based thereon, are administered to the patient by conventional methods well known to those skilled in the art, for example, orally, rectally, intravaginally, transdermally, intranasally, intraocularly or parenterally injections. A preferred method of administration of the invention is oral or parenteral administration.
Доза и курс введения, назначаемые для лечения или предупреждения указанных выше заболеваний или нарушений, могут варьировать в широких пределах. В каждом конкретном случае выбор соответствующей дозировки зависит от возраста, массы тела пациента, способа введения, конкретного вида заболевания, подлежащего лечению или профилактике, а также тяжести болезни или состояния пациента. Рекомендуемая суточная доза для взрослого пациента составляет 0,01-300 мг/день, доза 0,01-30 мг/день является предпочтительной для всех из описанных выше показаний. Полная суточная доза может быть введена одной дозой или же суточную дозу можно назначать в разделенных дозах два, три или четыре раза в день.The dose and course of administration prescribed to treat or prevent the above diseases or disorders can vary widely. In each case, the choice of the appropriate dosage depends on the age, body weight of the patient, route of administration, the particular type of disease to be treated or prevented, and the severity of the disease or condition of the patient. The recommended daily dose for an adult patient is 0.01-300 mg / day, a dose of 0.01-30 mg / day is preferred for all of the above indications. The full daily dose can be administered in a single dose, or the daily dose can be prescribed in divided doses two, three or four times a day.
Специалистам в данной области понятно, что можно легко определить оптимальные дозировки и курс лечения, которые обеспечат терапевтический или профилактический эффект в каждом конкретном случае.Specialists in this field it is clear that it is easy to determine the optimal dosage and course of treatment that will provide a therapeutic or preventive effect in each case.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Изобретение иллюстрируется, но не ограничивается следующими примерами.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The invention is illustrated, but not limited to the following examples.
Пример 1. 2-aминo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 1. 2-amino-3-cyano-4-phenylaminopyridine.
К 25,5 г 2-xлop-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидинa (соединение II) прибавляют 200 мл спиртового аммиака (концентрация аммиака 13+1%) и нагревают в автоклаве при 200-2100C в течение 9 ч. Смесь охлаждают, отгоняют 100 мл спирта и выдерживают при O0C в течение 2 ч. Осадок отфильтровывают, промывают 50 мл воды, сушат, получают 20 г технического 2-aминo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидинa (соединение формулы (I)5 где R1=R2=X=H, У= CN, R3=Ph, в последующем именуется как соединение Ib ), выход 85,7 %, т.пл. 194-1970C. После перекристаллизации из метанола, т.пл. 194-1960C.To 25.5 g of 2-chlorop-3-cyano-4-phenylaminopyridine (compound II), 200 ml of alcohol ammonia (ammonia concentration 13 + 1%) was added and heated in an autoclave at 200-210 0 C for 9 hours. The mixture was cooled , 100 ml of alcohol are distilled off and kept at O 0 C for 2 hours. The precipitate is filtered off, washed with 50 ml of water, dried, and 20 g of technical 2-amino-3-cyano-4-phenylaminopyridine are obtained (compound of formula (I) 5 where R 1 = R 2 = X = H, Y = CN, R 3 = Ph, hereinafter referred to as compound Ib), the yield is 85.7%, so pl. 194-197 0 C. After recrystallization from methanol, so pl. 194-196 0 C.
Найдено %: С 68,68, H 5,05, N 26,67; C12Hi0N4 ;Found%: C 68.68, H 5.05, N 26.67; C 12 Hi 0 N 4 ;
Вычислено %: С 68,57, H 4,76, N 26,67;Calculated%: C 68.57, H 4.76, N 26.67;
Масс-спектр: M+' 210; ИК-спектр, v см^1: 2200 (CN), 3195, 3310, 3400 (NH, NH2).Mass spectrum: M + ' 210; IR spectrum, v cm ^ 1 : 2200 (CN), 3195, 3310, 3400 (NH, NH 2 ).
Пример 2. 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 2. 2-amino-4-phenylaminopyridine.
К 10 г полученного по примеру 1 соединения Ib добавляют 10 г KOH, 8 мл этиленгликоля и 1,5 мл воды, смесь кипятят 7 ч, охлаждают, добавляют 500 мл воды и выдерживают 0,5 ч при +20C. Отфильтровывают 3,9 г (44,3%) 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидинa (соединение формулы (I) , где R1=R2=X=У= H, R3=Ph, в последующем именуется как соединение Ia), и осадок промывают водой. Водный маточный раствор экстрагируют хлороформом (2 раза по 70 мл), хлороформные экстракты сушат CaCl2, фильтруют, упаривают, остаток затирают в петролейном эфире, отфильтровывают дополнительно 0,3 гTo 10 g of compound Ib obtained in Example 1, 10 g of KOH, 8 ml of ethylene glycol and 1.5 ml of water are added, the mixture is boiled for 7 hours, cooled, 500 ml of water are added and the mixture is kept for 0.5 h at +2 0 C. Filter 3, 9 g (44.3%) of 2-amino-4-phenylaminopyridine (compound of formula (I), where R 1 = R 2 = X = Y = H, R 3 = Ph, hereinafter referred to as compound Ia), and the precipitate washed with water. The aqueous mother liquor was extracted with chloroform (2 times 70 ml), the chloroform extracts were dried with CaCl 2 , filtered, evaporated, the residue was triturated with petroleum ether, and an additional 0.3 g was filtered off.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) (3,4 %) соединения Ia. Общий выход соединения Ia равен 4,2 г (47,7%), T.ШI.164-166°C (из гексана).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) (3.4%) of compound Ia. The total yield of compound Ia was 4.2 g (47.7%), T. ШI.164-166 ° C (from hexane).
Найдено %: С 70,96, H 5,99, N 22,94; CnH11N3 ;Found%: C 70.96, H 5.99, N 22.94; C n H 11 N 3 ;
Вычислено %: С 71,30, H 5,95, N 22,70;Calculated%: C 71.30, H 5.95, N 22.70;
Масс-спектр: M+' 185,Mass spectrum: M + ' 185,
ИК-спектр, v см"1:, 3400, 3495 (NH, NH2),IR spectrum, v cm "1 :, 3400, 3495 (NH, NH 2 ),
Η яМР-спектр (ДМФА d7), м.д.: 5,74 (2H,yшиp. с, NH2); 6,30 (2H, м., 3-H, 5-H); 7,00-7,40 (5H, м., Ph), 7,70 (IH, д, 3J5-н, б-н=5,9 Щ., 6-H); 8,52 (IH, ушир. c., NH).Η NMR spectrum (DMF d 7 ), ppm: 5.74 (2H, broad s, NH 2 ); 6.30 (2H, m. 3-H, 5-H); 7.00-7.40 (5H, m, Ph); 7.70 (IH, d, 3 J 5-n, b- n = 5.9 H, 6-H); 8.52 (IH, broad s., NH).
Пример 3. 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидин-3-кapбoнoвaя кислота.Example 3. 2-amino-4-phenylaminopyridine-3-carboxylic acid.
А) Водный слой, оставшийся после экстракции соединения Ia по примеру 2, подкисляют концентрированной HCl до рН 5-6 и отфильтровывают 4,2 г (38,5%) 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидин-3- карбоновой кислоты (соединение формулы (I), где R = R =X =H, Y=COOH, R3 = Ph, в последующем именуется как соединение Ic), промывают водой, т.пл. 258-2600C (из диметилформамида).A) The aqueous layer remaining after extraction of compound Ia according to Example 2 was acidified with concentrated HCl to pH 5-6 and 4.2 g (38.5%) of 2-amino-4-phenylaminopyridine-3-carboxylic acid was filtered off (compound of the formula ( I), where R = R = X = H, Y = COOH, R 3 = Ph, hereinafter referred to as compound Ic), washed with water, so pl. 258-260 0 C (from dimethylformamide).
Найдено %: С 62,90, H 4,97, N 18,21; Ci2H11N3O2;Found%: C 62.90, H 4.97, N 18.21; Ci 2 H 11 N 3 O 2 ;
Вычислено %: С 62,88, H 4,80, N 18,34;Calculated%: C 62.88, H 4.80, N 18.34;
Масс-спектр: M+' 229,Mass spectrum: M + ' 229,
ИК-спектр, v см"1:, 1660 (СО), 3400, 3495 (NH, NH2),IR spectrum, v cm "1 :, 1660 (СО), 3400, 3495 (NH, NH 2 ),
1H ЯМР-спектр (CF3COOD), м.д.: 6,41 (IH, д , 3J5-6 =7,6 щ. ,5-H); 7,25-7,65 (6H, м., 6H, Ph). 1 H NMR Spectrum (CF 3 COOD), ppm: 6.41 (IH, d, 3 J 5-6 = 7.6 bp, 5-H); 7.25-7.65 (6H, m, 6H, Ph).
Б) К 5 г соединения Ib добавляют 15 г. KOH, 20 мл диэтиленгликоля и нагревают при 130-140 С в течение 7 ч, смесь охлаждают, добавляют 100 мл воды и отфильтровывают 0,18 г (18,2%) соединения Ia. Маточный раствор подкисляют раствором H2SO4 и отфильтровывают 3 г соединения Ic (55%). Смесь 2г. соединения Ic иB) To 5 g of compound Ib, add 15 g of KOH, 20 ml of diethylene glycol and heated at 130-140 C for 7 hours, the mixture is cooled, 100 ml of water are added and 0.18 g (18.2%) of compound Ia is filtered off. The mother liquor is acidified with a solution of H 2 SO 4 and 3 g of compound Ic (55%) is filtered off. Mixture 2g. compounds Ic and
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 100 мл.этиленгликоля кипятят 4 часа, охлаждают, добавляют 100 мл. воды, выдерживают 1 час при +20C, отфильтровывают 1,3 г. соединения Ia (80,5%).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) 100 ml of ethylene glycol is boiled for 4 hours, cooled, 100 ml are added. water, incubated for 1 hour at +2 0 C, 1.3 g of compound Ia were filtered off (80.5%).
Пример 4. 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидинa фосфат.Example 4. 2-amino-4-phenylaminopyridine phosphate.
К раствору Ir соединения Ia в 8,5 мл спирта прибавляют 1,5 мл воды, охлаждают до O0C и за 0,5 ч при перемешивании прибавляют по каплям 0,7 г 100%-нoй ортофосфорной кислоты в 3 мл спирта и воды (8,5:1,5), выдерживают 2 ч при O0C и затем 3 суток при + 20C. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 10 мл ацетона, получают 1,2 г (78,5 %) 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидинa фосфата, т. пл. 196-1990C.1.5 ml of water are added to a solution of Ir of compound Ia in 8.5 ml of alcohol, cooled to O 0 C and 0.7 g of 100% orthophosphoric acid in 3 ml of alcohol and water are added dropwise with stirring in 0.5 ml. (8.5: 1.5), incubated for 2 hours at O 0 C and then 3 days at + 2 0 C. The precipitate was filtered off, washed with 10 ml of acetone, 1.2 g (78.5%) of 2-amino -4-phenylaminopyridine phosphate, mp 196-199 0 C.
Найдено %: С 46,62 H 4,94, N 14,48, P 10,95; C11H14N3O4P;Found%: C 46.62; H 4.94; N 14.48; P 10.95; C 11 H 14 N 3 O 4 P;
Вычислено %: С 46,64, H 4,95, N 14,84, P 10,95;Calculated%: C 46.64, H 4.95, N 14.84, P 10.95;
Масс-спектр: M+' 185,Mass spectrum: M + ' 185,
1H ЯМР-спектр (D2O), м.д.: 6,06 (IH, с. с подрасщеплением, 4J3-н-5-н =2,2 гц. 3-H); 6,35 (IH, с подрасщеплением, 3Js-н-б-нэ = 7,3 щ.,5-H); 7,42 (Ш, д., 6-H), 7,15-7,50 (5H, м., Ph). 1 H NMR spectrum (D 2 O), ppm: 6.06 (IH, s. With sub-cleavage, 4 J 3- n- 5- n = 2.2 Hz. 3-H); 6.35 (IH, with cleavage, 3 Js-n- b- n e = 7.3 n, 5-H); 7.42 (W, d, 6-H); 7.15-7.50 (5H, m, Ph).
Пример 5. 2-aминo-4-фeнилaминoпиpидинa гидробромид.Example 5. 2-amino-4-phenylaminopyridine hydrobromide.
К 3 г соединения Ia прибавляют 30 мл 20%-нoй HBr, реакционную массу доводят до кипения, осадок, при этом, растворяется, охлаждают, упаривают, остаток затирают в ацетонитриле, получают 2,6 г (60,3 %) 2- aминo-4-фeнилaминoпиpидин гидробромида, T.ПЛ.175-176°C (из изoпpoпaнoл:aцeтoнитpил 1 :1).30 ml of 20% HBr are added to 3 g of compound Ia, the reaction mass is brought to a boil, the precipitate is dissolved, cooled, evaporated, the residue is triturated with acetonitrile, 2.6 g (60.3%) of 2-amino are obtained -4-phenylaminopyridine hydrobromide, T. Mp. 175-176 ° C (from isopropanol: acetonitrile 1: 1).
Найдено %: Br 30,36; CnHi2BrN3; Вычислено %: Br 30,08.Found%: Br 30.36; C n Hi 2 BrN 3 ; Calculated%: Br 30.08.
Пример 6. 2-Mopфoлинo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 6. 2-Morpholino-3-cyano-4-phenylaminopyridine.
К Ir соединения II прибавляют 15 мл морфолина и смесь нагревают 10 ч при 200-2100C в автоклаве, смесь охлаждают, добавляют 100 мл 92%-нoгo спирта, фильтруют, спирт отгоняют в вакууме, остаток растирают с водой, продукт отфильтровывают, перекристаллизовывают15 ml of morpholine is added to the compound II Ir and the mixture is heated for 10 hours at 200-210 0 C in an autoclave, the mixture is cooled, 100 ml of 92% alcohol are added, filtered, the alcohol is distilled off in vacuum, the residue is triturated with water, the product is filtered off and recrystallized
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) из гексана, получают 1,2 г (98%) 2-Mopфoлинo-3-циaнo-4- фениламинопиридина (соединение формулы (I), где Y=CN, R3 =Ph, X= H, R1, R2= морфолино, в последующем именуется как соединение Id) , т.пл. 152-1540C.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) from hexane, 1.2 g (98%) of 2-Morpholino-3-cyano-4-phenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = CN, R 3 = Ph, X = H, R 1 , R 2 = morpholino, hereinafter referred to as compound Id), so pl. 152-154 0 C.
Найдено %: С 68,64 H 5,80, N 20,09; Cj6H16N4O;Found%: C 68.64; H 5.80; N 20.09; Cj 6 H 16 N 4 O;
Вычислено %: С 68,57, H 5,71, N 20,00; Масс-спектр: M+' 280.Calculated%: C 68.57, H 5.71, N 20.00; Mass spectrum: M + ' 280.
Пример 7. 2-N-Meтилпипepaзинo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 7. 2-N-Methylpiperazino-3-cyano-4-phenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 6, но на 1 г соединения II берут 15 мл N-метилпиперазина, нагревают 10 ч при 200-210° в автоклаве, получают 1,04 г 2-N-Meтилпипepaзинo-3-циaнo-4- фениламинопиридин (соединение формулы (I), где R3=Ph, Y=CN, X =H, R1, R2 = N-метилпиперазино, в последующем именуется как соединение Ie), выход 94%, т.пл. 123-1250C (из гептана)The reaction is carried out analogously to example 6, but 15 ml of N-methylpiperazine are taken per 1 g of compound II, heated for 10 hours at 200-210 ° C. in an autoclave, 1.04 g of 2-N-methylpiperazino-3-cyano-4-phenylaminopyridine is obtained (compound formula (I), where R 3 = Ph, Y = CN, X = H, R 1 , R 2 = N-methylpiperazino, hereinafter referred to as compound Ie), yield 94%, mp. 123-125 0 C (from heptane)
Найдено % : С 69,80 H 6,57, N 23,65; C16H21N5;Found%: C 69.80; H, 6.57; N, 23.65; C 16 H 21 N 5 ;
Вычислено % : С 69,62, H 6,48, N 23,89; Масс-спектр: M+' 293.Calculated%: C 69.62, H 6.48, N 23.89; Mass spectrum: M + ' 293.
Пример 8. 2-N-Meтилпипepaзинo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 8. 2-N-Methylpiperazino-4-phenylaminopyridine.
Ir соединения Ie нагревают в полифосфорной кислоте 4 ч при 160- 1700C (ПФК; приготовлено из 15 г ортофосфорной кислоты и 15,7 г P2O5), охлаждают, добавляют 75 мл воды, подщелачивают 4%-нoй NaOH до рН 8, экстрагируют хлороформом и из хлороформного экстракта обычной процедурой получают 0,87 г (95%) 2-N- Meтилпипepaзинo-4-фeнилaминoпиρидинa (соединение формулы (I), где R3=Ph, Y= X =H, R1, R2 = N-метилпиперазино, в последующем именуется как соединение If), т.пл. 160-1620C (из гептана).Ir of compound Ie is heated in polyphosphoric acid for 4 hours at 160-170 ° C (PFC; prepared from 15 g of phosphoric acid and 15.7 g of P 2 O 5 ), cooled, 75 ml of water are added, alkalinized with 4% NaOH to pH 8, extracted with chloroform and 0.87 g (95%) of 2-N-methylpiperazino-4-phenylaminopyridine (compound of formula (I), where R 3 = Ph, Y = X = H, R 1 , is obtained from the chloroform extract by the usual procedure R 2 = N-methylpiperazino, hereinafter referred to as the compound If), so pl. 160-162 0 C (from heptane).
Найдено % : С 71,67 H 7,73, N 21,21; C16H20N4;Found%: C 71.67 H 7.73, N 21.21; C 16 H 20 N 4 ;
Вычислено % : С 71,64, H 7,63, N 20,90; Масс-спектр: M+' 268.Calculated%: C 71.64, H 7.63, N 20.90; Mass spectrum: M + ' 268.
Пример 9. 2-Mopфoлинo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 9. 2-Morpholino-4-phenylaminopyridine.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) K Ir соединения Id прибавляют Ir KOH и 8 мл этиленгликоля и смесь кипятят 6,5 ч. После обычной обработки, подобной той, которая применена при получении соединения Ia по примеру 2, выделено 0,8 г (88%) 2-Mopфoлинo-4-фeнилaминoпиpидинa (соединение формулы (I), где R3=Ph, Y= X =H, R1, R2 = морфолино, в последующем именуется как соединение Ig), т.пл. 160-1620C (из гептана).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) To K Ir of compound Id, Ir KOH and 8 ml of ethylene glycol are added and the mixture is boiled for 6.5 hours. After the usual work-up similar to that used to obtain compound Ia in Example 2, 0.8 g (88%) of 2-Mopfolino-4 are recovered. -phenylaminopyridine (compound of formula (I), where R 3 = Ph, Y = X = H, R 1 , R 2 = morpholino, hereinafter referred to as the Ig compound), mp 160-162 0 C (from heptane).
Найдено % : С 70,49 H 6,72, N 16,47; Ci5Hi7N3O; Вычислено % : С 70,59, H 6,67, N 16,47; Масс-спектр: M+' 268.Found%: C 70.49; H, 6.72; N, 16.47; Ci 5 Hi 7 N 3 O; Calculated%: C 70.59, H 6.67, N 16.47; Mass spectrum: M + ' 268.
Пример 10. 2-Пипepидинo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 10. 2-Piperidino-4-phenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 9, но берут Ir соединения 2-Пипepидинo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидинa, Ir KOH и 8 мл этиленгликоля и смесь кипятят 6,5 ч и получают 0,8 г 2-Пипepидинo-4- фениламинопиридин (соединение формулы (I), где R =Ph, Y= X =H, R , R2 = пиперидино, в последующем именуется как соединение Ih). Выход 87%, т.пл. 181-1830C (из гептана).The reaction is carried out analogously to example 9, but take Ir compounds 2-Piperidino-3-cyano-4-phenylaminopyridine, Ir KOH and 8 ml of ethylene glycol and the mixture is boiled for 6.5 hours and get 0.8 g of 2-Piperidino-4-phenylaminopyridine (compound formula (I), where R = Ph, Y = X = H, R, R 2 = piperidino, hereinafter referred to as compound Ih). Yield 87%, mp. 181-183 0 C (from heptane).
Найдено % : С 75,68 H 7,60, N 16,60; CI6HJ9N3;Found%: C 75.68; H 7.60; N, 16.60; C I6 H J9 N 3 ;
Вычислено % : С 75,90, H 7,51, N 16,60; Масс-спектр: M+' 253.Calculated%: C 75.90, H 7.51, N 16.60; Mass spectrum: M + ' 253.
Пример 11. 2-Бeнзилaминo-3-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин.Example 11. 2-Benzilamino-3-cyano-4-phenylaminopyridine.
К Ir соединения II прибавляют lмл бензиламина и 20 мл абсолютного спирта, смесь нагревают 10 ч при 200-2100C в автоклаве, охлаждают, осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из абсолютного спирта, получают 1,3 г (99%) 2-Бeнзилaминo-3-циaнo-4- фениламинопиридина (соединение формулы (I), где Y=CN, R3=Ph, X=R1 =H, R2= бензиламино, в последующем именуется как соединение Ii)3 т.пл. 163-1650C.Lml of benzylamine and 20 ml of absolute alcohol are added to Ir of compound II, the mixture is heated for 10 hours at 200-210 0 C in an autoclave, cooled, the precipitate is filtered off, recrystallized from absolute alcohol, 1.3 g (99%) of 2-benzylamino-3 are obtained -cyano-4-phenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = CN, R 3 = Ph, X = R 1 = H, R 2 = benzylamino, hereinafter referred to as compound Ii) 3 mp. 163-165 0 C.
Найдено % : С 75,96 H 5,30, N 18,74; Ci9Hi6N4;Found%: C 75.96 H 5.30, N 18.74; Ci 9 Hi 6 N 4 ;
Вычислено % : С 76,00, H 4,95, N 14,84, P 10,95; Масс-спектр: M+' 280.Calculated%: C 76.00, H 4.95, N 14.84, P 10.95; Mass spectrum: M + ' 280.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 12. 2~Бeнзилaминo-4-фeнилaминoпиpидин.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Example 12. 2 ~ Benzylamino-4-phenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 9, но берут Ir соединения Ii прибавляют Ir KOH и 8 мл этиленгликоля и смесь кипятят 6,5 ч и получают 0,84 г 2-Бeнзилaминo-4-фeнилaминoпиpидинa (соединение формулы (I), где Y=H5 R3HPh, X=R1=H, R2= бензиламино , в последующем именуется как соединение Ik). Выход 90 %, т.пл. 111- 1130C (из гептана).The reaction is carried out analogously to example 9, but they take Ir, compounds Ii, Ir KOH and 8 ml of ethylene glycol are added and the mixture is boiled for 6.5 hours to obtain 0.84 g of 2-Benzilamino-4-phenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = H 5 R 3 HPh, X = R 1 = H, R 2 = benzylamino, hereinafter referred to as compound Ik). Yield 90%, mp. 111-113 0 C (from heptane).
Найдено % : С 78,72 H 6,40, N 15,15; Ci8H17N3;Found%: C 78.72; H, 6.40; N, 15.15; Ci 8 H 17 N 3 ;
Вычислено % : С 78,55, H 6,18, N 15,27; Масс-спектр: M+' 275.Calculated%: C 78.55, H 6.18, N 15.27; Mass spectrum: M + ' 275.
Пример 13. 2-Mopфoлинo-3-циaнo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидин.Example 13. 2-Morpholino-3-cyano-4-p-chlorophenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 11, но берут Ir 2-xлop-З- циaнo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидинa, lмл морфолина и 20 мл абсолютного спирта, смесь нагревают 10ч при 200-2100C в автоклаве и получают 2-Mopфoлинo-З -циaнo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидинThe reaction is carried out analogously to example 11, but take Ir 2-chlorop-3-cyano-4-p-chlorophenylaminopyridine, ml ml of morpholine and 20 ml of absolute alcohol, the mixture is heated for 10 hours at 200-210 0 C in an autoclave and get 2-Mopfolino-3 - cyano-4-p-chlorophenylaminopyridine
(соединение формулы (I), где Y=CN, R =п-xлopфeнил, X= H, R , R = морфолино, в последующем именуется как соединение Im). Выход 75 %, т.пл. 161-1630C (из гептана).(a compound of formula (I), where Y = CN, R = p-chlorophenyl, X = H, R, R = morpholino, hereinafter referred to as compound Im). Yield 75%, mp. 161-163 0 C (from heptane).
Найдено % : С 61,20, H 4,97, N 17,86, Cl 11,39; Ci8HnN3;Found%: C 61.20, H 4.97, N 17.86, Cl 11.39; Ci 8 H n N 3 ;
Вычислено % : С 61,05, H 4,77, N 17,81, Cl 11,29;Calculated%: C 61.05, H 4.77, N 17.81, Cl 11.29;
Масс-спектр: M+' 314.Mass spectrum: M + ' 314.
Пример 14. 2-Mopфoлинo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидин.Example 14. 2-Morpholino-4-p-chlorophenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 9, но берут Ir Im, Ir. KOH и 8 мл этиленгликоля и смесь кипятят 6,5 ч и получают 2-Mopфoлинo-4- п-хлорфениламинопиридин (соединение формулы (I) , где Y=H, R3 =п- хлорфенил, X= H, R1, R2 = морфолино, в последующем именуется как соединение In) . Выход 97 %, т.пл. 148-1490C (из гептана).The reaction is carried out analogously to example 9, but take Ir Im, Ir. KOH and 8 ml of ethylene glycol and the mixture is boiled for 6.5 hours to give 2-Morpholino-4-p-chlorophenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = H, R 3 = p-chlorophenyl, X = H, R 1 , R 2 = morpholino, hereinafter referred to as compound In). Yield 97%, mp. 148-149 0 C (from heptane).
Найдено % : С 62,23 H 5,52, N 14,39, 12,16; C18HnN3Cl;Found%: C 62.23; H, 5.52; N, 14.39; 12.16; C 18 H n N 3 Cl;
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Вычислено % : С 62,18, H 5,53, N 14,51, Cl 12,26 ; Масс-спектр: M+- 289.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Calculated%: C 62.18, H 5.53, N 14.51, Cl 12.26; Mass spectrum: M + - 289.
Пример 15. 2-Aминo-3-циaнo-4-п-мeтoкcифeнилaминoпиpидин.Example 15. 2-Amino-3-cyano-4-p-methoxyphenylaminopyridine.
Синтез проводят аналогично примеру 11, но в реакцию с Ir 2- xлop-З-циaнo-4-п-мeтoкcифeнилaминoпиρидинoм берут 20 мл спиртовой аммиака, смесь нагревают 10 ч при 200-2100C в автоклаве и получают 2- Aминo-З-циaнo-4-п-мeтoкcифeнилaминoпиpидин (соединение формулы (I), где Y=CN, R =X=R =H, R =п-мeтoкcифeнил, в последующем именуется как соединение Iо) . Выход 76 %, т.пл. 211-2130C (из изопропанола).The synthesis is carried out analogously to example 11, but in the reaction with Ir 2-chlorop-3-cyano-4-p-methoxyphenylaminopyridine take 20 ml of alcohol ammonia, the mixture is heated for 10 hours at 200-210 0 C in an autoclave and get 2-Amino-3- cyano-4-p-methoxyphenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = CN, R = X = R = H, R = p-methoxyphenyl, hereinafter referred to as compound Io). Yield 76%, mp. 211-213 0 C (from isopropanol).
Найдено % : С 78,72 H 6,40, N 15,15; Ci8H17N3;Found%: C 78.72; H, 6.40; N, 15.15; Ci 8 H 17 N 3 ;
Вычислено % : С 61,20, H 4,97, N 17,98; Масс-спектр: M+' 314.Calculated%: C 61.20, H 4.97, N 17.98; Mass spectrum: M + ' 314.
Пример 16. 2-Aминo-4-п-мeтoкcифeнилaминoпиpидин.Example 16. 2-Amino-4-p-methoxyphenylaminopyridine.
Реакцию проводят аналогично примеру 9, но берут Ir Iо, прибавляют Ir KOH и 8 мл этиленгликоля и смесь кипятят 6,5 ч и получают 2-Aминo-4-п-мeтoкcифeнилaминoпиpидин (соединение формулы (I), где Y=H, R
Figure imgf000035_0001
в последующем именуется как соединение Ip). Выход 56%, т.пл. 154- 1560C (из бензола).The reaction is carried out analogously to example 9, but Ir Io is taken, Ir KOH and 8 ml of ethylene glycol are added and the mixture is boiled for 6.5 hours to obtain 2-Amino-4-p-methoxyphenylaminopyridine (compound of formula (I), where Y = H, R
Figure imgf000035_0001
hereinafter referred to as the connection Ip). Yield 56%, mp. 154-156 0 C (from benzene).
Найдено % : С 66,72 H 6,04, N 19,74; Ci8HnN3;Found%: C 66.72; H, 6.04; N, 19.74; Ci 8 H n N 3 ;
Вычислено % : С 66,98, H 6,05, N 19,53; Масс-спектр: M+' 215.Calculated%: C 66.98, H 6.05, N 19.53; Mass spectrum: M + ' 215.
Пример 17. Определение активности соединений в отношении NМDА-рецептора.Example 17. Determination of the activity of compounds against the NMDA receptor.
Соединения формулы (I) испытывают на NMDA- антагонистическую активность на модели мембранных препаратов методом радиолигандного анализа, основанного на конкурентном связывании испытуемого соединения или селективного меченого лиганда с NMDA -рецептором. В качестве лиганда используют меченоеCompounds of formula (I) are tested for NMDA antagonistic activity in a membrane preparation model by radioligand assay based on competitive binding of a test compound or selective labeled ligand to an NMDA receptor. As a ligand use labeled
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) тритием соединение MK-801 (дизоцилпин), являющееся известным антагонистом NMDA- рецепторов. Сродство испытуемых соединений NМDА-рецептору и их антагонистическую активность оценивают по величине показателя IC5O, отражающего способность соединений вытеснять меченый лиганд из фенциклидинового сайта связывания с NMDA -рецепторами.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) tritium compound MK-801 (disocylpin), which is a known antagonist of NMDA receptors. The affinity of the tested compounds for the NMDA receptor and their antagonistic activity was evaluated by the value of IC 5O , which reflects the ability of the compounds to displace the labeled ligand from the phencyclidine binding site to NMDA receptors.
Для приготовления мембранных препаратов NМDА-рецепторов используют замороженные в жидком азоте гиппокамп и мозжечок, выделенные из мозга крыс. Ткань тщательно гомогенизируют в гомогенизаторе Поттера («тeфлoн-cтeклo») в 10 объемах 5 мМ HEPES /4,5 mМ Трис буфера (рН 7,6), содержащего 0,32 M сахарозу (буфер JNkI). Гомогенат разбавляют до 50 объемов 5 мМ HEPES/4,5 mМ Трис буфера (рН 7,6) (буфер Ns2) и центрифугируют 10 мин при 1000 g. Супернатант отбирают и вновь центрифугируют 20 мин при 25 000 g. Осадок гомогенизируют в 50 объемах буфера JN°2 и центрифугируют 20 мин при 8 000 g. Супернатант и его мягкий, зыбкий надслой отбирают и вновь центрифугируют 20 мин при 25 000 g.For the preparation of membrane preparations of NMDA receptors, the hippocampus and cerebellum isolated from rat brain frozen in liquid nitrogen are used. The tissue is thoroughly homogenized in a Potter homogenizer (Teflon-glass) in 10 volumes of 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer (pH 7.6) containing 0.32 M sucrose (JNkI buffer). The homogenate is diluted to 50 volumes with 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer (pH 7.6) (Ns2 buffer) and centrifuged for 10 min at 1000 g. The supernatant was collected and centrifuged again for 20 minutes at 25,000 g. The pellet was homogenized in 50 volumes of JN ° 2 buffer and centrifuged for 20 min at 8,000 g. The supernatant and its soft, unsteady layer are removed and centrifuged again for 20 minutes at 25,000 g.
Полученный осадок суспендируют в 5 мМ HEPES /4,5 mМ Трис буфера, содержащем 1 мМ Na4EDTA (рН 7,6) (буфер JN°3), и суспензию вновь центрифугируют. Такую процедуру отмывки проводят четырежды, причем при последней отмывке EDTA исключают из состава буфера. Конечный осадок ресуспендируют в 5 объемах буфера JN°2 и сохраняют в жидком азоте.The resulting precipitate was suspended in 5 mM HEPES / 4.5 mM Tris buffer containing 1 mM Na4EDTA (pH 7.6) (JN ° 3 buffer), and the suspension was again centrifuged. This washing procedure is carried out four times, and with the last washing, EDTA is excluded from the buffer. The final precipitate was resuspended in 5 volumes of JN ° 2 buffer and stored in liquid nitrogen.
В эксперименте по рецепторному связыванию используют меченый тритием MK-801 с удельной активностью 210 Кюри/моль. Реакционная смесь (конечный объем 0.5 мл) содержит 200 мкл буфера JN22, 50 мкл меченого лиганда (50 нМ р-р) и 250 мкл суспензии мембран.A tritium-labeled MK-801 with a specific activity of 210 Curie / mol is used in a receptor binding experiment. The reaction mixture (final volume 0.5 ml) contains 200 μl of JN22 buffer, 50 μl of labeled ligand (50 nM pp) and 250 μl of membrane suspension.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Неспецифическое связывание определяют в присутствии 50 мкл немеченого лиганда.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Nonspecific binding is determined in the presence of 50 μl of unlabeled ligand.
Реакционную смесь инкубируют при комнатной температуре в течение 2 часов в присутствии расчетных концентраций исследуемых соединений формулы (I). По окончании инкубации пробы фильтруют через стекловолокнистые фильтры GF/В (Whаtmап), предварительно смоченные в 0.3% полиэтиленэмине в течение 2 часов при 40C. Каждую пробирку промывают один раз холодным буфером N°2, затем фильтры промывают три раза тем же объемом буфера. Фильтры сушат на воздухе, до полного высыхания, и переносят в сцинтилляционные флаконы. Фильтры заливают 5 мл. сцинтилляционной смеси, содержащей 4г PPO (2,5-дифeнилoкcaзoл), 0.2г POPOP [1,4-биc (5- фeнил-2-oкcaзoлил)бeнзoл)] на lл толуола. Радиоактивность регистрируют на сцинтилляционном счетчике WаllасНП с эффективностью счета около 46%.The reaction mixture is incubated at room temperature for 2 hours in the presence of calculated concentrations of the test compounds of formula (I). At the end of the incubation, the samples are filtered through GF / B glass fiber filters (Whatmap), pre-soaked in 0.3% polyethyleneamine for 2 hours at 4 ° C. Each tube is washed once with cold N ° 2 buffer, then the filters are washed three times with the same buffer volume . The filters are dried in air until completely dry and transferred to scintillation vials. Filters fill 5 ml. of a scintillation mixture containing 4 g of PPO (2,5-diphenyl oxazole), 0.2 g of POPOP [1,4-bis (5-phenyl-2-oxazolyl) benzene)] per l of toluene. Radioactivity is recorded on a WallacNP scintillation counter with a counting efficiency of about 46%.
Белок во всех экспериментах определяют по методу Лоури. В статистической и графической обработке используют пакеты специальных программ Stаtistiса 6.0, Sigmа Рlоt 9.0, GrарhРаd Рrism 4.Protein in all experiments is determined by the Lowry method. In statistical and graphical processing, the packages of special programs Statistica 6.0, Sigma Рlot 9.0, and GrhRad Prism 4 are used.
Для тестированных соединений определяют значения показателя IC5O- В результате этих испытаний было установлено, что величина IC5O для наиболее активного соединения Ia настоящего изобретения составляет 2,4 мкМ, что свидетельствует о высокой степени сродства к NMDA - рецепторам и сильной антагонистической активности в отношении указанного подтипа глутаматных рецепторов.The values of the IC 5O index are determined for the tested compounds. As a result of these tests, it was found that the IC 5O value for the most active compound Ia of the present invention is 2.4 μM, which indicates a high degree of affinity for NMDA receptors and strong antagonistic activity against this glutamate receptor subtype.
Пример 18. Определение активности соединений в отношении дофаминовых рецепторов.Example 18. Determination of the activity of compounds against dopamine receptors.
Для получения мембранных препаратов дофаминовых рецепторов стриатумы от 4- животных тщательно гомогенизируют в 10мл ледяногоTo obtain membrane preparations of dopamine receptors, striatums from 4 animals are thoroughly homogenized in 10 ml of ice
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) (0-40C) 5OmM Тris-НСl буфера (рН 7,4 при 4°C), используя гомогенизатор «тeфлoн-cтeклo». Полученную суспензию центрифугируют при 40 000 g в течение 20мин в ультрацентрифуге «Optima L-70K» (Весkтап Соultеr).SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) (0-4 0 C) 5OmM Tris-Hcl buffer (pH 7.4 at 4 ° C) using a Teflon-glass homogenizer. The resulting suspension is centrifuged at 40,000 g for 20 min in an Optima L-70K ultracentrifuge (Vesktap Сoulter).
После центрифугирования супернатант сливают, осадок ресуспендируют повторной гомогенизацией в том же объеме буфера, затем вновь центрифугируют. Процедуру отмывки проводят трижды, полученный осадок ресуспендируют в 10 мл 50 MM Тris-НСl инкубационного буфера (рН 7,4 при 37°C) с добавлением солей (120 MM NaCl, 5 MM KCl, 2 MM CaCl2-2 H2O5 1 MM MgCl2-OH2O) и используют по 250 мкл в указанной процедуре связывания [G-ЗH]-SCH -23390 (Дl- тип дофаминового рецептора) и [G -ЗH]-cпиpoпepидoлa (Д2 -тип дофаминового рецептора).After centrifugation, the supernatant is drained, the pellet is resuspended by repeated homogenization in the same volume of the buffer, then centrifuged again. The washing procedure is carried out three times, the resulting precipitate is resuspended in 10 ml of 50 MM Tris-Hcl incubation buffer (pH 7.4 at 37 ° C) with the addition of salts (120 MM NaCl, 5 MM KCl, 2 MM CaCl 2 -2 H 2 O 5 1 MM MgCl 2 -OH 2 O) and 250 μl each are used in the indicated binding procedure of [G-CH] -SCH -23390 (Dl type of dopamine receptor) and [G-CH] spiroperidol (D2 type of dopamine receptor).
Радиолигандный анализ. Полученную мембранную фракцию инкубируют с [G -ЗH]-мeчeнным лигандом, который добавляют в инкубационную смесь в объеме 50 мкл в конечной концентрации 0,1 нМ в течение 20 .мин при температуре 37°C с использованием твердотельного термостата «Tepмит» (НПО «ДHK-диaгнocтикa»). Неспецифическое связывание определяют в присутствии 50 мкл немеченного спироперидола (20 мкМ) или - SCH23390, которое в среднем не превышает 12-14% от общего. Специфическое связывание рассчитывают как разницу между общим и неспецифическим связыванием.Radioligand analysis. The resulting membrane fraction is incubated with [G-CH] -labeled ligand, which is added to the incubation mixture in a volume of 50 μl at a final concentration of 0.1 nM for 20 .min at a temperature of 37 ° C using a solid-state thermostat “Termmit” (NPO “ DHK diagnostics ”). Non-specific binding is determined in the presence of 50 μl of unlabeled spiroperidol (20 μM) or - SCH23390, which on average does not exceed 12-14% of the total. Specific binding is calculated as the difference between total and non-specific binding.
IC5O по отношению к [G-ЗH]-cпипeпepидoлy (удельная активность 95 Ки/ммоль) или [G -3H]- SCH23390 (удельная активность 60 БСи/ммолъ) определяют при добавлении в инкубационную среду 50 мкл исследуемых соединений в конечных концентрациях в диапазоне 10"3-10" 10 M. Объем инкубационной смеси составляет 500 мкл. ПроцессIC 5O with respect to the [G-3H] -spiperidol (specific activity 95 Ci / mmol) or [G-3H] -SCH23390 (specific activity 60 BSi / mmol) is determined by adding 50 μl of the compounds under study to the incubation medium at final concentrations in the range of 10 "3 -10 " 10 M. The volume of the incubation mixture is 500 μl. Process
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) связывания останавливают путем добавления 2 мл ледяного 50 мМ Тris- HCl буфера и быстрой фильтрации через стекловолоконные фильтры типа GF/В (Whаtmап) с последующей промывкой ледяным буфером общим объемом 14 мл. Фильтры предварительно смачивают перед экспериментом в ледяном 50 мМ Тris-НСl буфере в течение 3 часов.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) binding is stopped by adding 2 ml of ice-cold 50 mM Tris-HCl buffer and rapid filtration through GF / B type glass filters (Whtmap), followed by washing with ice-cold buffer with a total volume of 14 ml. The filters are pre-wetted before the experiment in ice-cold 50 mM Tris-Hcl buffer for 3 hours.
Далее фильтры высушивают в течение 12 часов при комнатной температуре, затем помещают в сцинтилляционную жидкость (реактив Брея) объемом 4 мл и используют для сцинтилляционного счета. Радиоактивность каждой пробы измеряют в течение 2 мин на сцинтилляционном счетчике WaIIaC 1411. Эффективность счета для трития составляет 40-45%. Определение содержания белка в пробах проводят по методу Лоури. Оптическую плотность (X=700 нм) измеряют на спектрофотометре CФ-46 (JIOMO): Результаты обрабатывают с. помощью стандартных статистических программ с исчислением среднего арифметического и SEM.Next, the filters are dried for 12 hours at room temperature, then placed in a scintillation fluid (Bray reagent) with a volume of 4 ml and used for scintillation counting. The radioactivity of each sample is measured for 2 min on a WaIIaC 1411 scintillation counter. The counting efficiency for tritium is 40-45%. Determination of protein content in samples is carried out according to the Lowry method. Optical density (X = 700 nm) was measured on a SF-46 spectrophotometer (JIOMO): The results were processed with. using standard statistical programs with calculus of arithmetic mean and SEM.
Для всех тестированных соединений определяют значения показателя IC5O- Результаты испытаний свидетельствуют о том, что соединения формулы (I) в условиях iп vitrо не проявляют нейрохимически значимой тропности к Дl -дофаминовым и Д2- дофаминовым рецепторам стриатума крыс. Величина IC5O по отношению к Дl -дофаминовому рецептору, например, для соединения Ia, составляет 220 мкМ, а величина IC5O по отношению к Д2-дoфaминoвoмy рецептору составляет 195 мкМ.For all tested compounds, IC 5O values are determined. The test results indicate that the compounds of formula (I) in vitro do not show neurochemically significant tropism for the D-dopamine and D2-dopamine rat striatum receptors. The value of IC 5O with respect to the D-dopamine receptor, for example, for compound Ia, is 220 μM, and the value of IC 5O with respect to the D2-dopamine receptor is 195 μM.
Пример 19. Определение активности соединений в отношении холинергических рецепторов.Example 19. Determination of the activity of compounds against cholinergic receptors.
Для изучения сродства соединений настоящего изобретения к рецепторам ацетилхолина никотинового типа проводят эксперименты по радиолигандному связыванию испытуемого соединения иIn order to study the affinity of the compounds of the present invention for nicotinic type acetylcholine receptors, radioligand binding experiments of the test compound are carried out and
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) радиоактивного селективного лиганда с мембранами мозга крыс. В качестве лиганда используют меченый тритием (±)Hикoтин с удельной активностью 140 Кюри/ммоль, полученный методом твердофазного мечения.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) radioactive selective ligand with rat brain membranes. As a ligand, tritium-labeled (±) Nicotin with a specific activity of 140 Curie / mmol obtained by solid-phase labeling is used.
Выделение плазматических мембран мозга проводят по методу Romano C. апd А.Gоldstеiп, (Sсiепсе, 1980, 210, р. 647 - 650). При этом беспородных самцов крыс массой 200-250 г декапитируют, извлекают целый мозг и гомогенизируют его в 10 объемах «лeдянoгo» буфера (Нереs, 50 mМ; NaCl, 118 mМ; CaCl2, 2.5 mМ; KCl5 4.8 mМ; MgSO4, 1.2 mМ; рН 7.4) в гомогенизаторе «тeфлoн-cтeклo». Гомогенат центрифугируют в течение 30 минут при 1750Og. Полученный осадок суспендируют в 20 объемах холодной дистиллированной воды и оставляют на час для осмотического разрушения. Образовавшуюся суспензию вновь центрифугируют в течение 30 минут при 1750Og. Полученный осадок суспендируют в буфере и снова осаждают при том же режиме. Осадок ресуспендируют в буфере до конечной концентрации (40 мг исходной ткани на 1 мл буфера).Isolation of plasma membranes of the brain is carried out according to the method of Romano C. apd A.Goldstep, (Sciepse, 1980, 210, p. 647-650). In this case, outbred male rats weighing 200-250 g are decapitated, the whole brain is extracted and homogenized in 10 volumes of ice-cold buffer (Hepes, 50 mM; NaCl, 118 mM; CaCl 2 , 2.5 mM; KCl 5 4.8 mM; MgSO 4, 1.2 mM; pH 7.4) in a Teflon-glass homogenizer. The homogenate is centrifuged for 30 minutes at 1750Og. The resulting precipitate is suspended in 20 volumes of cold distilled water and left for an hour for osmotic destruction. The resulting suspension is again centrifuged for 30 minutes at 1750Og. The resulting precipitate was suspended in buffer and again precipitated under the same regime. The pellet was resuspended in buffer to a final concentration (40 mg of starting tissue per 1 ml of buffer).
Радиолигандный анализ. Пробирки заполняют реакционной смесью, содержащей в конечном объеме 50 мкл [ЗH](±)Hикoтинa, 250 мкл буфера и 200 мкл белковой суспензии мембран, полученной как указано выше. Неспецифическое связывание определяют при добавлении немеченного лиганда в диапазоне концентраций от 10"10 до 104M в трипликатах.Radioligand analysis. The tubes are filled with a reaction mixture containing in a final volume of 50 μl of [3H] (±) Nicotin, 250 μl of buffer and 200 μl of a protein suspension of membranes prepared as described above. Nonspecific binding is determined by adding unlabeled ligand in a concentration range from 10 "10 to 10 4 M in triplicates.
Пробирки с реакционной смесью инкубируют при постоянном встряхивании при 370C в течение 40 минут. Затем пробирки для остановки реакции быстро погружают в лед. Через 20 минут содержимое пробирок подвергают ультрафильтрации сквозь фильтры GF/С, предварительно выдержанные в течение суток в 0,3% раствореTubes with the reaction mixture are incubated with constant shaking at 37 ° C for 40 minutes. The tubes are then quickly immersed in ice to stop the reaction. After 20 minutes, the contents of the tubes are ultrafiltered through GF / C filters, previously incubated for 24 hours in a 0.3% solution.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) полиэтиленимина при 40C. После промывки холодным буфером фильтры переносят во флаконы и добавляют сцинтилляционную жидкость на основе диоксана. Радиоактивность проб определяют на сцинтилляционном счетчике «Wallac 1411» с эффективностью счета около 40-44%.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) polyethyleneimine at 4 0 C. After washing with cold buffer, the filters are transferred to vials and dioxane-based scintillation fluid is added. The radioactivity of the samples is determined on a Wallac 1411 scintillation counter with a counting efficiency of about 40-44%.
Результаты обрабатывают с помощью специализированной программы GRAPHPAD Рrizm.The results are processed using the specialized program GRAPHPAD Рrizm.
Результаты испытаний свидетельствуют о том, что соединения формулы (I) характеризуются высокой степенью сродства к местам cвязывaния[ЗH]-никoтинa с мембранами мозга крыс. Концентрационная зависимость влияния никотина на связывание меченого лиганда описывается классической кривой с величиной IC5O, равной 0,13 мкМ. Соединение Ia смещает концентрационную кривую вправо до значений IC5Q, равных 3,20 мкМ. Данная область концентраций рассматривается в качестве высокой степени аффинности к рецептору.The test results indicate that the compounds of formula (I) are characterized by a high degree of affinity for the binding sites of [3H] nicotin with rat brain membranes. The concentration dependence of the effect of nicotine on the binding of a labeled ligand is described by a classical curve with an IC 5O value of 0.13 μM. Compound Ia shifts the concentration curve to the right to IC 5 Q values of 3.20 μM. This concentration range is considered as a high degree of receptor affinity.
Пример 20. Определение антихолинэстеразной активности соединений.Example 20. Determination of anticholinesterase activity of the compounds.
Антихолинэстеразную активность соединений формулы (I) изучают в опытах iп vitrо с применением стандартного набора реактивов для определения холинэстеразы (ХЭ) фирмы Lасhеmа (Чешская Республика). Принцип метода состоит в том, что ХЭ расщепляет субстрат бутирил-тиохолинийодид на маслянную кислоту и тиохолинийодид, который вступает в реакцию с дитио- биснитробензойной кислотой с образованием желтого окрашивания. Определение проводят на ФЭКе модели KФ-2-УXЛ-4.2 (Россия): Для выявления способности ингибировать ХЭ исследуемые соединения добавляют в раствор, содержащий фермент ХЭ и субстрат и наблюдают за изменением окрашивания по сравнению с контролем. ИнгибирующуюThe anticholinesterase activity of the compounds of formula (I) was studied in vitro experiments using a standard set of reagents for the determination of cholinesterase (CE) of the company Lashema (Czech Republic). The principle of the method is that CE splits the butyryl-thiocholinium iodide substrate into butyric acid and thiocholinium iodide, which reacts with dithio-bisnitrobenzoic acid to form a yellow color. The determination is carried out on the FEK model KF-2-UXL-4.2 (Russia): To determine the ability to inhibit CE, the test compounds are added to a solution containing the CE enzyme and substrate and the color change is observed in comparison with the control. Inhibitory
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) активность выражают в ИK5o - концентрации ингибитора, при которой активность фермента блокируется на 50% по сравнению с контролем.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) activity is expressed in IK 5 o - the concentration of inhibitor at which the enzyme activity is blocked by 50% compared with the control.
В табл.l представлены результаты определения антихолинэстеразной активности наиболее активного соединения данного изобретения в сравнении с наиболее известными лекарственными препаратами данной фармакологической группы.Table l presents the results of determining the anticholinesterase activity of the most active compounds of this invention in comparison with the most well-known drugs of this pharmacological group.
Табл. 1Tab. one
Антихолинэстеразная активность соединения Ia в сравнении с эзерином, прозерином и галантамином.Anticholinesterase activity of compound Ia in comparison with eserin, proserin and galantamine.
Figure imgf000042_0001
Figure imgf000042_0001
Пример 21. Определение активности соединений в отношении адренергической системы.Example 21. Determination of the activity of compounds in relation to the adrenergic system.
Активность соединений, соответствующих настоящему изобретению, по отношению к адренергической системе, исследована в ряде поведенческих тестов с применением фармакологических анализаторов, позволяющих изменять нормальный уровень нейротрансмиттеров в патологическую сторону: влияние наThe activity of the compounds of the present invention with respect to the adrenergic system has been studied in a number of behavioral tests using pharmacological analyzers that make it possible to change the normal level of neurotransmitters in the pathological direction: effect on
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) депримирующие эффекты резерпина, гиподинамический эффект α- метил-п-тирозина.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) depriminating effects of reserpine, hypodynamic effect of α-methyl-p-tyrosine.
Известно, что основным медиатором адренергической (симпатической) передачи является норадреналин (НА), который осуществляет медиаторную функцию в периферических нервных окончаниях и в синапсах ЦНС. По современным представлениям норадреналин, выделяющийся в процессе нервного импульса из пресинаптических нервных окончаний, активирует норадреналино- чувствительную аденилатциклазу клеточной мембраны адренорецепторной системы, что приводит к усилению образования вторичного медиатора цАМФ и далее осуществлению адренергических физиологических эффектов.It is known that the main mediator of adrenergic (sympathetic) transmission is norepinephrine (HA), which performs a mediator function in the peripheral nerve endings and in the synapses of the central nervous system. According to modern concepts, norepinephrine, released during the nerve impulse from the presynaptic nerve endings, activates the norepinephrine-sensitive adenylate cyclase of the cell membrane of the adrenoreceptor system, which leads to increased formation of a secondary cAMP mediator and further the implementation of adrenergic physiological effects.
Центральное симпатомиметическое действие обусловлено возбуждением норадреналин- и дофаминергических структур мозга и выражается в поведенческой гиперактивности, ускорении мнестических и когнитивных функций мозга, активации электроэнцефалографических (ЭЭГ) показателей - электрической активности головного мозга.The central sympathomimetic effect is due to the excitation of norepinephrine and dopaminergic brain structures and is expressed in behavioral hyperactivity, acceleration of the mnemonic and cognitive functions of the brain, activation of electroencephalographic (EEG) indicators - the electrical activity of the brain.
Другой путь активации норадренергической системы характерен для непрямых симпатомиметиков типа амфетамина и других препаратов β-фенилэтиламинового ряда, которые вызывают высвобождение из депо норадреналина, который уже далее воздействует на адренорецепторы. Это характерно для большинства препаратов с психостимулирующим действием амфетаминового ряда и структурно сходных лекарственных препаратов - непрямых симпатомиметиков.Another way of activating the noradrenergic system is characteristic of indirect sympathomimetics such as amphetamine and other drugs of the β-phenylethylamine series, which cause the release of norepinephrine from the depot, which already further affects adrenoreceptors. This is typical for most drugs with the psychostimulating effect of the amphetamine series and structurally similar drugs - indirect sympathomimetics.
В эксперименте центральное симпатомиметическое действие оценивается по показателю усиления спонтанной двигательной активности и поведенческих реакций. Указанные эффекты анализируются в условиях блокады синтеза медиаторов с помощью α-In the experiment, the central sympathomimetic action is evaluated by the rate of increase in spontaneous motor activity and behavioral reactions. These effects are analyzed under conditions of blockade of the synthesis of mediators using α-
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) метил-п-тирозина - ингибитора синтеза НА и дофамина (ДА), а также в условиях опустошения нейрональных депо медиаторов резерпином, так, как описано ниже.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) methyl p-tyrosine, an inhibitor of the synthesis of HA and dopamine (DA), as well as under conditions of emptying neuronal depot of mediators by reserpine, as described below.
А. Влияние соединений на поведение и спонтанную двигательную активность.A. Effect of compounds on behavior and spontaneous motor activity.
Локомоторная активность у животных помещенных в новую обстановку состоит из ориентировочно-исследовательской реакции (ОИР) в течение первых 4-6 мин и локомоции, которая обусловлена циклами поведенческой активности. Введение веществ, имеющих психостимулирующую активность, увеличивает уровень локомоции, т.е. переводит спонтанную локомоцию на уровень локомоторной гиперактивности, минуя ОИР.Locomotor activity in animals placed in a new environment consists of an orientation-research reaction (OIR) during the first 4-6 minutes and locomotion, which is caused by cycles of behavioral activity. The introduction of substances having psychostimulating activity increases the level of locomotion, i.e. transfers spontaneous locomotion to the level of locomotor hyperactivity, bypassing OIR.
Исследование проводят на мышах-самцах массой 20-22г и крысах-самцах массой 180-200г. Регистрацию спонтанной двигательной активности мышей проводят с помощью актометра "Опто-варимекс" (Колумбу с, США) по методу Svепssоп, Тhiеmе (1969).The study is carried out on male mice weighing 20-22 g and male rats weighing 180-200 g. The spontaneous locomotor activity of mice was recorded using an Opto-varimex actometer (Columbus, USA) according to the method of Swssssop, Thieme (1969).
Двигательную активность регистрируют каждые 10 мин в течение 2-4 ч, до и после введения исследуемого соединения. Исследуемые соединения вводят в дозах 1-10-12,5-25-50 и 100 мг/кг. Параллельно регистрируют двигательную активность контрольных животных, которым вводят внутрь соответствующий объем физиологического раствора. С помощью метода пробит-анализа вычисляют значение ЭДгоо - дозы, вызывающей увеличение двигательной активности в 2 раза (200%) по отношению к контролю.Motor activity is recorded every 10 min for 2-4 hours, before and after administration of the test compound. The test compounds are administered in doses of 1-10-12.5-25-50 and 100 mg / kg. At the same time, the locomotor activity of control animals is recorded, to which the corresponding volume of physiological saline is injected. Using the probit analysis method, the EDgo value is calculated - the dose that causes a 2-fold increase in motor activity (200%) in relation to the control.
В табл. 2 представлены результаты определения двигательной активности наиболее активного соединения данного изобретения в сравнении с известными лекарственными препаратами данной фармакологической группы.In the table. 2 presents the results of determining the motor activity of the most active compounds of this invention in comparison with well-known drugs of this pharmacological group.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Результаты испытаний свидетельствуют о том, что соединение формулы (I) при введении мышам подкожно, начиная с дозы 5 мг/кг, увеличивает спонтанную локомоторную активность животных. Увеличение дозы до 10-20 мг/кг ведет к усилению двигательного возбуждения, которое при дальнейшем повышении доз (до 30 - 40 мг/кг) сменяется угнетением, появлением стереотипных и судорожных проявлений. При введении мышам внутрь аналогичные проявления центральной стимулирующей активности соединения Ia проявляются в более высоком диапазоне доз (12,5 - 100 мг/кг). Факт наличия непрямого симпатомиметического действия указывает, что оно в существенной мере компенсируют те побочные явления, которые характерны для ингибиторов NМDА-рецепторов.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) The test results indicate that the compound of formula (I) when administered to mice subcutaneously, starting with a dose of 5 mg / kg, increases the spontaneous locomotor activity of animals. Increasing the dose to 10-20 mg / kg leads to increased motor excitation, which with a further increase in doses (up to 30 - 40 mg / kg) is replaced by inhibition, the appearance of stereotypical and convulsive manifestations. When injected into mice, similar manifestations of the central stimulatory activity of compound Ia are manifested in a higher dose range (12.5 - 100 mg / kg). The fact of the presence of indirect sympathomimetic action indicates that it substantially compensates for those side effects that are characteristic of inhibitors of NMDA receptors.
Б. Исследование поведенческих реакций в тесте "открытого поля".B. The study of behavioral reactions in the test "open field".
Влияние на поведенческие реакции у крыс изучают по методу "открытого поля" с помощью актометра "Варимекс" (Колумбус, США). Выраженность стереотипных поведенческих реакций оценивают в баллах, а спонтанную двигательную активность - в абсолютных значениях счетчика прибора за 10 мин в течение 2-4 часов после введения исследуемого соединения в дозах 1-12,5-25-50 и 100 мг/кг, внутрь. В сравнительных экспериментах используют фенамин и сиднокарб. Результаты исследования представлены в тaбл.2.The effect on behavioral reactions in rats is studied using the "open field" method using the Varimex actometer (Columbus, USA). The severity of stereotypic behavioral reactions is scored, and spontaneous motor activity is measured in absolute values of the device counter for 10 minutes within 2-4 hours after administration of the test compound in doses of 1-12.5-25-50 and 100 mg / kg, inside. In comparative experiments, phenamine and sydnocarb are used. The results of the study are presented in Table 2.
В сравнительных экспериментах с фенамином и сиднокарбом соединение Ia при подкожном введении уступает по силе центрального стимулирующего действия фенамину, а при введении внутрь действует более чем в 3 раза слабее фенамина и близок к сиднокарбу. По выраженности локомоторного возбуждения у мышей эффект соединения Ia сходен с эффектами фенамина и сиднокарба.In comparative experiments with phenamine and sydnocarb, compound Ia, when administered subcutaneously, is inferior in strength to the central stimulating effect of phenamine, and when administered orally, it is more than 3 times weaker than phenamine and close to sydnocarb. According to the severity of locomotor excitation in mice, the effect of compound Ia is similar to the effects of phenamine and sydnocarb.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Соединения (I f-h) при введении внутрь животным в диапазоне доз до 100 мг/кг оказывают центральный возбуждающий эффект, сравнимый с действием соединения Ia.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Compounds (I fh), when administered orally to animals in a dose range of up to 100 mg / kg, have a central excitatory effect comparable to that of compound Ia.
Табл. 2Tab. 2
Сравнительная активность соединения Ia , фенамина и сиднокарба по тестам локомоторного возбуждения у мышей и стереотипии у крыс.Comparative activity of compound Ia, phenamine and sydnocarb according to tests of locomotor arousal in mice and stereotype in rats.
Figure imgf000046_0001
Figure imgf000046_0001
ЭД5o - доза, вызывающая появление стереотипных реакций у 50% крыс ЭДгоо — доза, вызывающая повышение спонтанной двигательной активности у мышей в 2 раза.ED 5 o is the dose causing the appearance of stereotypic reactions in 50% of rats. EDgo is the dose causing a 2-fold increase in spontaneous motor activity in mice.
В. Влияние соединений на депримирующий эффект резерпина у мышей.B. The effect of the compounds on the depriving effect of reserpine in mice.
Способность соединений формулы (I) высвобождать НА из нейрональных депо (непрямое симпатомиметическое действие) изучают в антирезерпиновом тесте (при опустошении этих депо резерпином).The ability of the compounds of formula (I) to release HA from neuronal depots (indirect sympathomimetic effect) is studied in the antireserpine test (when emptying these depots with reserpine).
Исследование проводят на мышах-самцах массой 18-20 г, которым внутрибрюшинно вводят резерпин в дозе 2 мг/кг. Резерпин оказывает депрессивное действие на ЦНС, вызывая уменьшение двигательной активности (гиполокомоцию), птоз и гипотермию. Гиполокомоцию регистрируют с помощью актометра "Опто-Варимекс" (Колумбус, США), птоз оценивают визуально в баллах по 4-х бальной шкале,The study is carried out on male mice weighing 18-20 g, which are administered intraperitoneally with reserpine at a dose of 2 mg / kg. Reserpine has a depressive effect on the central nervous system, causing a decrease in motor activity (hypolocomotion), ptosis and hypothermia. The hypolocation is recorded using the Opto-Varimex actometer (Columbus, USA), ptosis is evaluated visually in points on a 4-point scale,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) гипотермию определяют с помощью электротермометра TПЭM-1 по температуре в прямой кишке.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) hypothermia is determined using a TPEM-1 electrothermometer by temperature in the rectum.
Исследуемые соединения вводят перорально и подкожно в дозах 1, 5 и 10 мг/кг.The test compounds are administered orally and subcutaneously at doses of 1, 5 and 10 mg / kg.
Введение резерпина мышам в дозе 2 мг/кг (внутрибрюшинно) вызывает через 2 ч снижение спонтанной двигательной активности животных более чем на 80%, птоз выраженностью 3,4 ± 0,4 балла и снижение ректальной температуры на 2,8 ± 0,6 0C.Administration of reserpine to mice at a dose of 2 mg / kg (intraperitoneally) after 2 h causes a decrease in spontaneous motor activity of animals by more than 80%, ptosis with a severity of 3.4 ± 0.4 points and a decrease in rectal temperature by 2.8 ± 0.6 0 C.
Соединение Ia, введенное в дозе 10 мг/кг (подкожно) через 2 часа после резерпина, восстанавливает сниженную двигательную активность мышей до уровня активности животных контрольной группы, уменьшает более чем на 70% птоз и полностью устраняет гипотермический эффект резерпина, переводя его в гипертермический.Compound Ia, administered at a dose of 10 mg / kg (subcutaneously) 2 hours after reserpine, restores the reduced locomotor activity of mice to the level of activity of animals in the control group, reduces ptosis by more than 70% and completely eliminates the hypothermic effect of reserpine, converting it to hyperthermic.
Соединение Ia действует на эффекты резерпина примерно в 2 раза слабее фенамина (в равной дозе). Сиднокарб в дозе 25 мг/кг в этих опытах оказывает незначительное влияние на эффекты резерпина.Compound Ia acts on the effects of reserpine about 2 times weaker than phenamine (in equal dose). Sydnocarb at a dose of 25 mg / kg in these experiments has a negligible effect on the effects of reserpine.
Соединения (I f-h) при введении внутрь животным в диапазоне доз до 100 мг/кг изменяют выраженность депримирующих эффектов резерпина (гиподинамия, птоз, гипотермия) подобно соединению Ia.Compounds (I f-h), when administered orally to animals in a dose range of up to 100 mg / kg, change the severity of the depriving effects of reserpine (inactivity, ptosis, hypothermia) similar to compound Ia.
Результаты антирезерпинового теста наиболее активного соединения данного изобретения в сравнении с известными лекарственными препаратами данной фармакологической группы представлены в табл. 3.The results of the antireserpine test of the most active compounds of this invention in comparison with known drugs of this pharmacological group are presented in table. 3.
Таким образом, проведенные на мышах эксперименты показали, что в центральном действии соединений настоящего изобретения присутствует компонент, связанный с непрямыми симпатомиметическими свойствами, выражающимися в антагонизме к эффектам резерпина. В то же время, по выраженности указанныхThus, experiments performed on mice showed that in the central action of the compounds of the present invention there is a component associated with indirect sympathomimetic properties, expressed in antagonism to the effects of reserpine. At the same time, according to the severity of these
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) свойств соединения формулы (I) существенно уступают фенамину, психостимулирующее действие которого связано с влиянием на высвобождение медиатора из быстрообновляемых (лабильных) депо НА в пресинаптической области нейрона.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) the properties of the compounds of formula (I) are significantly inferior to phenamine, the psychostimulating effect of which is associated with the effect on the release of the mediator from the rapidly renewable (labile) NA depot in the presynaptic region of the neuron.
Табл. 3.Tab. 3.
Влияние соединения Ia на депримирующие эффекты резерпина у мышей в сравнении с фенамином и сиднокарбом.The effect of compound Ia on the depriving effects of reserpine in mice compared to phenamine and sydnocarb.
Figure imgf000048_0001
Figure imgf000048_0001
Г. Влияние соединений на гиподинамический эффект α-метил-п- тирозина у мышей.D. Effect of compounds on the hypodynamic effect of α-methyl-p-tyrosine in mice.
Механизм центрального действия исследуемых соединений оценивают также в экспериментах с использованием в качестве фармакологического анализатора α-метил-п-тирозина (альфа-МТ) - ингибитора фермента тирозин-гидроксилазы, участвующего в биосинтезе дофамина из тирозина в нервных окончаниях. Опыты проводят на мышах-самцах массой 18-20г, которым вводят α-метил-п--The central action mechanism of the studied compounds is also evaluated in experiments using α-methyl-p-tyrosine (alpha-MT), an inhibitor of the tyrosine hydroxylase enzyme, which is involved in the biosynthesis of dopamine from tyrosine in nerve endings as a pharmacological analyzer. The experiments are carried out on male mice weighing 18-20 g, which are administered α-methyl-p--
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) тирозина в дозе 250 мг/кг, внутрибрюшинно. Введение α-метил-п- тирозина вызывает снижение локомоторной активности животных более, чем в 6 раз, что отражает снижение уровня дофамина в головном мозгу.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) tyrosine at a dose of 250 mg / kg, intraperitoneally. Administration of α-methyl-p-tyrosine causes a decrease in locomotor activity of animals by more than 6 times, which reflects a decrease in the level of dopamine in the brain.
Через 6 часов после инъекции α-метил-п-тирозина, животным вводят подкожно исследуемые соединения в дозе 10 мг/кг и регистрируют двигательную активность. Регистрацию двигательной активности осуществляют на актометре "Опто-Варимекс" (Колумбус, США). В качестве препарата сравнения используют фенамин (10 мг/кг, подкожно) и сиднокарб (25 мг/кг, подкожно). Результаты исследования представлены в табл. 4.6 hours after the injection of α-methyl-p-tyrosine, the animals were injected subcutaneously with the studied compounds at a dose of 10 mg / kg and their motor activity was recorded. Registration of motor activity is carried out on the Opto-Varimex actometer (Columbus, USA). Phenamine (10 mg / kg, subcutaneously) and Sydnocarb (25 mg / kg, subcutaneously) are used as a comparison drug. The results of the study are presented in table. four.
На фоне предварительного введения α-метил-п-тирозина соединение Ia оказывает слабое влияние на гиподинамию, чем отличается от фенамина и в еще большей степени от сиднокарба, которые - первый частично, а второй полностью - устраняют изменения двигательной активности животных, вызванные введением ингибитора тирозин-гидроксилазы. Соединения (I f-h) при введении внутрь в диапазоне доз до 100 мг/кг проявляют эффект, подобный соединению Ia.Against the background of the preliminary administration of α-methyl-p-tyrosine, compound Ia has a weak effect on physical inactivity, which differs from phenamine and even more so from sydnocarb, which, the first partially and the second completely, eliminate the changes in the motor activity of animals caused by the introduction of a tyrosine inhibitor hydroxylases. Compounds (I f-h), when administered orally in a dose range of up to 100 mg / kg, exhibit an effect similar to compound Ia.
Таким образом, проведенные эксперименты показывают, что соединения формулы (I) практически не влияют на эффект α-метил-п- тирозина у мышей и отличаются в этом отношении от фенамина и сиднокарба. В частности, соединения по изобретению уступают фенамину по влиянию на спонтанную двигательную активность животных, не вызывают дезорганизации целенаправленной деятельности, но превосходят фенамин по силе и продолжительностиThus, the experiments performed show that the compounds of formula (I) have practically no effect on the effect of α-methyl-tyrosine in mice and differ in this respect from phenamine and sydnocarb. In particular, the compounds of the invention are inferior to phenamine in influencing the spontaneous motor activity of animals, do not cause disorganization of targeted activity, but surpass phenamine in strength and duration.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) активирующего влияния на ЭЭГ у крыс. Кроме того, они не оказывает существенного периферического симпатомиметического действия.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) activating effect on EEG in rats. In addition, they do not have a significant peripheral sympathomimetic effect.
С учетом наличия у соединений по изобретению психостимулирующих свойств в исследуемых дозах можно полагать, что механизм их центрального действия не определяется влиянием на биосинтез нейромедиатора дофамина и превращением последнего в норадреналин с последующим накоплением в стабильных депо в нервных окончаниях, что показывает отсутствие у исследуемых соединений негативных эффектов, связанных с психостимулирующей активностью.Considering the presence of psychostimulating properties in the studied doses for the compounds of the invention, it can be assumed that the mechanism of their central action is not determined by the influence of dopamine on the neurotransmitter biosynthesis and the conversion of the latter into norepinephrine with subsequent accumulation in stable depots in the nerve endings, which indicates the absence of negative effects in the studied compounds associated with psychostimulating activity.
Taбл.4Table 4
Влияние соединения Ia на гиподинамию, вызванную альфа-метилпаратирозином у мышей, в сравнении с фенамином и сиднокарбом.The effect of compound Ia on the inactivity induced by alpha-methyl paratyrosine in mice compared to phenamine and sydnocarb.
Figure imgf000050_0001
Figure imgf000050_0001
#- альфа-МТ, - α-метил-п-тирозин, 250 мг/кг, внутрибрюшинно# - alpha-MT, - α-methyl-p-tyrosine, 250 mg / kg, intraperitoneally
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) * - различие с контролем (альфа-МТ) достоверно при P<0,05, **- при P=0,05SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) * - difference with control (alpha-MT) is significant at P <0.05, ** - at P = 0.05
Пример 22. Оценка нейропротективной активности соединений на модели рассеянного склероза.Example 22. Evaluation of the neuroprotective activity of compounds in a model of multiple sclerosis.
Способность соединений формулы (I) оказывать нейропротективное действие при лечении или предотвращении нейродегенеративных заболеваний была определена iп vivо на экспериментальной модели рассеянного склероза человека. Такой моделью служит экспериментальный аутоиммунный (аллергический) энцефаломиелит (ЭАЭ) - индуцируемое антигенами миелина и опосредованное Т-клетками аутоиммунное заболевание лабораторных животных, которое сходно по клиническим и гистологическим признакам с рассеянным склерозом человека (Stеiпmап, L. // Sрriпgеr Sеmiпаrs Immuпораthhоl., 1992, v.14, р. 79-93). Методика оценки влияния соединений формулы (I) на снижение степени тяжести ЭАЭ у экспериментальных животных представлена ниже.The ability of the compounds of formula (I) to have a neuroprotective effect in the treatment or prevention of neurodegenerative diseases was determined ip vivo in an experimental model of human multiple sclerosis. Such a model is experimental autoimmune (allergic) encephalomyelitis (EAE), a myelin antigen-induced and T-cell-mediated autoimmune disease in laboratory animals that is similar in clinical and histological features to multiple human sclerosis (Steimp, L. // Sprimps. , v. 14, p. 79-93). The methodology for assessing the effect of the compounds of formula (I) on reducing the severity of EAE in experimental animals is presented below.
А. Ингибирование развития ЭАЭ у мышей. Влияние на течение нейровоспаления при ЭАЭ у мышей.A. Inhibition of the development of EAE in mice. Effect on the course of neuroinflammation in EAE in mice.
В эксперименте используют мышей линии SJL/J в возрасте 6 - 7 недель, которых перед началом исследования в течение недели содержат в лаборатории в условиях отсутствия неспецифической патогенной флоры, со свободным доступом к пище и воде, для адаптации к окружающей обстановке. Все процедуры выполняют в соответствии с правилами Iпstitutiопаl Апimаl Саге апd Usе оf thе Uпivеrsitу оf Саtапiа, Itаlу. Формируют одну контрольную и три экспериментальные группы животных, каждая из которых состоит из 7-8 животных.In the experiment, SJL / J mice aged 6 to 7 weeks were used, which were kept in the laboratory for one week before the start of the study in the absence of non-specific pathogenic flora, with free access to food and water, to adapt to the environment. All procedures are carried out in accordance with the rules of Institute Apical Ap sage ap Us оf thе Opеvіrsitu оf Satapia, Italu. One control group and three experimental groups of animals are formed, each of which consists of 7-8 animals.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) У всех животных контрольной и экспериментальных групп индуцируют ЭАЭ по методу J. St. Lоuis еt аl. ( Rоsi S, еt al.//Neuroscience, 2006,142, рр.1303-1315). Для этого мышей иммунизируют 75 мкг миелинового липопротеидного белка (далее обозначенным как PLP), эмульгированного с адьювантом Фрейнда (CFA) и 0.6 мг/мл Мусоbасtеrium tubеrсulоsis H37RA (Difсо, Dеtrоit, MI, USA) для создания эмульсии в соотношении 1:1. PLP был синтезирован Gепеmеd sупthеsis (Sап Francisco CA). Каждая мышь получает подкожную инъекцию 200 мкл эмульсии разделенной на 4 части в подмышечную область и паховые лимфоузлы. В качестве ко-адьюванта используют коклюшный токсин (Реrtussis tохiп, Саlbiосhеm, Nоttiпghаm, UK), который вводят внутрижелудочно в дозе 200 нг/на мышь через 0 и 2 дня после иммунизации.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) EAE was induced in all animals of the control and experimental groups by J. St. Louis et al. (Rosi S, et al. // Neuroscience, 2006,142, pp. 1303-1315). To do this, mice are immunized with 75 μg of myelin lipoprotein protein (hereinafter referred to as PLP) emulsified with Freund's adjuvant (CFA) and 0.6 mg / ml Musobacterium tubulosis H37RA (Difso, Detroit, MI, USA) to create an emulsion in a 1: 1 ratio. PLP was synthesized by Heped supеsis (Sap Francisco CA). Each mouse receives a subcutaneous injection of 200 μl of the emulsion divided into 4 parts into the axillary region and inguinal lymph nodes. As a co-adjuvant, pertussis toxin (Pertussis toxip, Calbiochem, Nottham, UK) is used, which is administered intragastrically at a dose of 200 ng / mouse 0 and 2 days after immunization.
Начиная со второго дня после иммунизации, животным экспериментальных групп вводят перорально исследуемое соединение формулы (I) 6 раз в неделю: 1-й экспериментальной группе - в дозе 1,0 мг/кг; 2 -й экспериментальной группе - в дозе -3,0 мг/кг; 3-й экспериментальной группе - в дозе -5,0 мг/кг. Лечение исследуемым соединением проводят в течение 30 дней.Starting from the second day after immunization, the animals of the experimental groups are administered an orally tested compound of the formula (I) 6 times a week: to the 1st experimental group - at a dose of 1.0 mg / kg; The 2nd experimental group - at a dose of -3.0 mg / kg; The 3rd experimental group - at a dose of -5.0 mg / kg. Treatment with the test compound is carried out for 30 days.
Мышей контрольной и экспериментальных групп наблюдают ежедневно в течение 30 дней после иммунизации, взвешивают и регистрируют проявление клинических признаков ЭАЭ.The mice of the control and experimental groups were observed daily for 30 days after immunization, the clinical signs of EAE were weighed and recorded.
В зависимости от степени выраженности клинических признаков ЭАЭ, животных сортируют, используя следующую шкалу: 0 - отсутствие симптомов (нет болезни); 1 - понижение тонуса хвоста; 2 - ослабление мышц задних конечностей, нарушение походки (умеренный парапарез ); 3- паралич задних конечностей (сильный парапарез); 4 -Depending on the severity of the clinical signs of EAE, animals are sorted using the following scale: 0 - no symptoms (no disease); 1 - lowering the tone of the tail; 2 - weakening of the muscles of the hind limbs, impaired gait (moderate paraparesis); 3- hind limb paralysis (severe paraparesis); four -
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) полная паралитическая неподвижность (состояние умирания); 5 — смерть животного.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) complete paralytic immobility (state of dying); 5 - the death of an animal.
Первичные критические точки: средние клинические кумулятивные показатели (средние показатели накопления препарата в организме животного), атака, продолжительность болезни.Primary critical points: average clinical cumulative indicators (average indicators of drug accumulation in the animal’s body), attack, duration of illness.
Статистический анализ для значимых различий клинических показателей проводят путем ANOVA для непарных данных. P величина <0.05 принята как статистически значимая.Statistical analysis for significant differences in clinical performance is performed by ANOVA for unpaired data. P value <0.05 is accepted as statistically significant.
Как показали исследования, соединения формулы (I) оказывают значительное нейропротективное действие, т.к. обладают способностью ингибировать развитие ЭАЭ у мышей.Studies have shown that the compounds of formula (I) have a significant neuroprotective effect, because have the ability to inhibit the development of EAE in mice.
Установлено, что в контрольной группе животных средние кумулятивные значения клинических показателей ЭАЭ в течение 2 недель после иммунизации составляют 87.5% . Это стандартный уровень показателей проявления ЭАЭ в контроле в диапазоне 2 недель после иммунизации. В опытных группах мышей исследуемые соединения формулы (I) оказывают дозо-зависимым образом положительное влияние на развитие болезни в сравнении с контрольной группой. Например, соединение Ia в высокой дозе (5,0 мг/кг) значительно уменьшает кумулятивные эффекты ЭАЭ, которые отмечаются только у 33.3% (2 из 6) мышей в течение 30- дневного периода наблюдения. В низкой и средней дозах соединение Ia также вызывает снижение уровня проявлений болезни, который составляет в группах 60 и 71.4% соответственно. В этих дозах отмечается также снижение кумуляции и продолжительности проявлений заболевания.It was found that in the control group of animals the average cumulative values of the clinical parameters of EAE within 2 weeks after immunization are 87.5%. This is the standard level of manifestations of EAE in the control in the range of 2 weeks after immunization. In the experimental groups of mice, the studied compounds of formula (I) have a dose-dependent way to positively influence the development of the disease in comparison with the control group. For example, compound Ia in a high dose (5.0 mg / kg) significantly reduces the cumulative effects of EAE, which are observed only in 33.3% (2 out of 6) mice during the 30-day observation period. In low and medium doses, compound Ia also causes a decrease in the level of manifestations of the disease, which is in the groups 60 and 71.4%, respectively. At these doses, there is also a decrease in cumulation and the duration of the manifestations of the disease.
Таким образом, по набранным клиническим оценкам установлено достоверное отклонение (p<0,05) между экспериментальными группамиThus, according to the clinical estimates, a significant deviation (p <0.05) between the experimental groups was established.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) (от 33,3%) и контрольной группой (87,5%), подтверждающее, что исследуемые соединения подавляют симптомы ЭАЭ. Кроме того, средний день начала болезни в экспериментальных группах составляет от 4,2 дней до 6 дней в зависимости от дозы исследуемого соединения, что значительно выше, чем в контрольной группе. Это свидетельствует о том, что выражение симптомов склонно к замедлению в экспериментальных группах и что соединения формулы (I) подавляют проявление симптомов ЭАЭ.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) (from 33.3%) and the control group (87.5%), confirming that the studied compounds suppress the symptoms of EAE. In addition, the average day of onset of the disease in the experimental groups is from 4.2 days to 6 days depending on the dose of the test compound, which is significantly higher than in the control group. This suggests that the expression of symptoms tends to slow down in the experimental groups and that the compounds of formula (I) inhibit the onset of symptoms of EAE.
У животных, которым были введены исследуемые соединения, общее состояние практически возвращалось к норме, в то время как у контрольных животных состояние полного развития болезни, было стабильным и длилось до конца эксперимента.In animals to which the test compounds were introduced, the general condition almost returned to normal, while in control animals the state of complete development of the disease was stable and lasted until the end of the experiment.
Эти результаты показывают, что соединения формулы (I) могут явиться эффективными агентами для лечения рассеянного склероза человека, поскольку способствует предупреждению развития ЭАЭ.These results show that the compounds of formula (I) can be effective agents in the treatment of human multiple sclerosis, as it helps to prevent the development of EAE.
Пример 23. Определение влияния соединений на активацию когнитивных функций.Example 23. Determination of the effect of compounds on the activation of cognitive functions.
Когнитивно-стимулирующую активность соединений настоящего изобретения оценивают в ряде поведенческих экспериментов на животных по их способности улучшать память и обучение у мышей, а также оказывать антиамнестическое действие у животных с экспериментально вызванной амнезией.The cognitive-stimulating activity of the compounds of the present invention is evaluated in a number of behavioral experiments on animals by their ability to improve memory and learning in mice, as well as exert anti-amnestic effects in animals with experimentally induced amnesia.
А. Оценка антиамнестического действия соединений в тесте условного рефлекса пассивного избегания на живой модели скополамин- индуцированной амнезии.A. Evaluation of the antiamnestic effect of the compounds in the test of the conditioned reflex of passive avoidance in a living model of scopolamine-induced amnesia.
Оценку влияния соединений на способность животных к обучению и воспроизведению навыков проводят в условиях выработки простых условно-рефлекторных реакций с использованием УРПИEvaluation of the effect of compounds on the ability of animals to learn and reproduce skills is carried out in the conditions of the development of simple conditioned reflex reactions using passive avoidance reaction
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) (условный рефлекс пассивного избегания). Нарушение обучения и хранения информации моделируют с помощью амнестического действия центрального холиноблокирующего средства скополамина.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) (conditioned reflex of passive avoidance). Violation of training and information storage is modeled using the amnestic action of the central anticholinergic scopolamine.
Эксперименты проводят на мышах-самцах массой 20-22г, формируя группы по 10-12 животных на каждую исследуемую дозу. УРПИ вырабатывают по методу stер dоwп, в освещаемой камере с электродным полом и спасательной платформой посредине. В новых условиях поведение животного при помещении его в камеру (новую обстановку) выражается в виде ориентировочно-исследовательской активности (обследовании камеры). Как только животное спустится с платформы на электродный пол, оно получает электрический удар по лапам (50 В в течение 3-5 секунд), после чего его возвращают обратно в жилую клетку. Обучение проводят в три сессии, критерием обученности животных является удержание на платформе в течение 1 минуты. Функциональное состояние памяти оценивают по способности мышей к воспроизведению выработанного навыка УРПИ при помещении животного в камеру на спасательную платформу через 2 часа после выработки условно-рефлекторной реакции и амнестического воздействия.The experiments are carried out on male mice weighing 20-22 g, forming groups of 10-12 animals for each study dose. Passive avoidance reaction is produced according to the ster dowp method, in an illuminated chamber with an electrode floor and a rescue platform in the middle. Under new conditions, the behavior of an animal when it is placed in a chamber (new environment) is expressed in the form of tentative research activity (examination of the chamber). As soon as the animal descends from the platform to the electrode floor, it receives an electric shock on its paws (50 V for 3-5 seconds), after which it is returned back to the living cage. The training is carried out in three sessions, the criterion for the training of animals is to stay on the platform for 1 minute. The functional state of memory is evaluated by the ability of mice to reproduce the developed passive avoidance reaction skill when an animal is placed in a chamber on a rescue platform 2 hours after the development of a conditioned reflex reaction and amnestic effect.
Для моделирования амнезии мышам вводят скополамин в дозе 1 мг/кг, внутрибрюшинно, за 15-20 мин. до введения исследуемых соединений. Скополамин является центральным М-холиноблокатором, который вызывает расстройство памяти (амнезию) и снижает способность к обучению. Исследуемые соединения вводят перорально, в дозе 10 мг/кг, за 40 мин до обучения. Основанием для использования указанных доз является начальная активная доза соединения Ia, взятого в качестве препарата сравнения, и составляющая 3 мг/кг, перорально.To simulate amnesia, scopolamine is administered to mice at a dose of 1 mg / kg, intraperitoneally, for 15-20 minutes. before the introduction of the test compounds. Scopolamine is a central M-anticholinergic drug that causes memory impairment (amnesia) and reduces learning ability. The test compounds are administered orally, at a dose of 10 mg / kg, 40 minutes before training. The basis for the use of these doses is the initial active dose of compound Ia, taken as a comparison drug, and component 3 mg / kg, orally.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Как показали исследования, в группах мышей, получавших соединение формулы (1), способных к обучению животных было в 1,5 - 2,5 раза больше, чем в контрольной группе.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) As studies have shown, in groups of mice treated with a compound of formula (1), animals capable of learning animals were 1.5 - 2.5 times more than in the control group.
Результаты исследования представлены в табл. 5, из которой видно, что соединения настоящего изобретения значительно ослабляют выраженность амнестического действия скополамина и активируют выработку и воспроизведение УРПИ в условиях скополамин- индуцированной амнезии.The results of the study are presented in table. 5, from which it can be seen that the compounds of the present invention significantly reduce the severity of the amnestic effect of scopolamine and activate the production and reproduction of passive avoidance reaction under conditions of scopolamine-induced amnesia.
Табл. 5Tab. 5
Влияние соединений формулы (I) на процессы обучения и памяти в тесте УРПИ мышей.The effect of the compounds of formula (I) on the learning and memory processes in the passive avoidance reaction test of mice.
Figure imgf000056_0001
Figure imgf000056_0001
Б. Активность соединений в сравнении с известными ноотропными препаратами.B. Activity of compounds in comparison with known nootropic drugs.
Сравнительную оценку когнитивно-стимулирующей активности соединений настоящего изобретения и известных ноотропов проводят наA comparative assessment of the cognitive-stimulating activity of the compounds of the present invention and known nootropics is carried out on
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) мышах и крысах с помощью стандартных тестов, таких как УРПИ, УРАИ (тест условного рефлекса активного избегания), на модели амнезии, вызванной электорошоком (МЭШ), модели скополаминой амнезии и в элекстрофизиологических экспериментах. В качестве препаратов сравнения используют пирацетам, меклофеноксатSUBSTITUTE SHEET (RULE 26) mice and rats using standard tests, such as passive avoidance reaction, URAI (active avoidance conditioned reflex test), electroshock-induced amnesia (MES), scopolamine amnesia, and electrophysiological experiments. As reference drugs use piracetam, meclofenoxate
(центрофеноксин) и такрин. Результаты сравнительных испытаний представлены в табл. 6.(centrophenoxin) and tacrine. The results of comparative tests are presented in table. 6.
Как видно из табл. 6, соединения настоящего изобретения оказывают положительное влияние на когнитивные функции у животных с дефицитом обучаемости, а также на моделях амнезии, вызванной введением холинолитического препарата скополамина (1,0 мг/кг, п/к) и воздействием максимального электрошока. По величине эффективных доз соединение Ia, при выработке УРАИ и УРПИ, превосходит ноотропные препараты пирацетам и меклофеноксат. В отличие от пирацетама и ацефена, соединение Ia оказывает положительное влияние на когнитивные функции как у нормальных животных, так и у животных с дефицитом обучения, тогда как ноотропные препараты действуют преимущественно в условиях нарушения указанных функций. Под влиянием соединения Ia наблюдается улучшение ассоциативных функций головного мозга, о чем свидетельствуют результаты экспериментов по решению животными экстраполяционной задачи в условиях стрессорной ситуации, в которых он также превосходил пирацетам и ацефен.As can be seen from the table. 6, the compounds of the present invention have a positive effect on cognitive functions in animals with learning disabilities, as well as on amnesia models caused by the administration of the cholinolytic drug scopolamine (1.0 mg / kg, s / c) and the effect of maximum electroshock. In terms of effective doses, compound Ia, when producing URAI and passive avoidance reaction, surpasses the nootropic drugs piracetam and meclofenoxate. Unlike piracetam and acefen, compound Ia has a positive effect on cognitive function in both normal animals and animals with learning deficits, whereas nootropic drugs act primarily in conditions of impaired function. Under the influence of compound Ia, an improvement in the associative functions of the brain is observed, as evidenced by the results of experiments to solve the extrapolation problem in animals under stressful conditions, in which it also exceeded piracetam and acefen.
В электрофизиологических экспериментах соединение Ia оказывает активирующее влияние на ЭЭГ старых крыс, увеличивая мощность ее спектра и восстанавливая нарушенную функциональную асимметрию между полушариями головного мозга, характерную дляIn electrophysiological experiments, compound Ia has an activating effect on the EEG of old rats, increasing the power of its spectrum and restoring impaired functional asymmetry between the cerebral hemispheres, which is characteristic of
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) молодых животных, чем отличается от пирацетама, вызывающего противоположный эффект.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) young animals, than differs from piracetam, causing the opposite effect.
Табл. 6Tab. 6
Когнитивно-стимулирующая активность соединений формулы (I) в сравнении с известными ноотропами.Cognitive-stimulating activity of compounds of formula (I) in comparison with known nootropics.
Figure imgf000058_0001
Figure imgf000058_0001
# - дозы препаратов, оказывающие одинаково выраженный эффект >50%)# - doses of drugs that have an equally pronounced effect> 50%)
Пример 24, Определение антидепрессивной активности соединений.Example 24, Determination of the antidepressant activity of the compounds.
Антидепрессивную активность соединений оценивают по их влиянию на психоэмоциональные и поведенческие характеристики животных в стандартных тестах, моделирующих развитие эмоционально-стрессового состояния.The antidepressant activity of the compounds is evaluated by their effect on the psychoemotional and behavioral characteristics of animals in standard tests simulating the development of an emotional-stress state.
Стрессовое состояние у животных вызывают при помещении их в камеру с водой, оснащенной вращающимся ребристым колесом. ПослеThe stress state in animals is caused when they are placed in a chamber with water equipped with a rotating ribbed wheel. After
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) неудачных попыток выбраться из воды животные принимают характерную неподвижную позу, которую расценивают, как проявление подавленности, «oтчaяния». Антидепрессивное действие исследуемых соединений устанавливают по увеличению активности животных относительно контрольной группы в эксперименте, как описано ниже.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) unsuccessful attempts to get out of the water, animals adopt a characteristic motionless posture, which is regarded as a manifestation of depression, “despair”. The antidepressant effect of the studied compounds is established by increasing the activity of animals relative to the control group in the experiment, as described below.
А. Оценка антидепрессивного действия соединений на модели вращающегося колеса.A. Evaluation of the antidepressant effect of the compounds on a rotating wheel model.
Опыты проводят на мышах- самцах массой 20-22 г. Исследуемое соединение вводят опытным животным подкожно в дозах 5 и 10 мг/кг. Контрольной группе животных вводят физиологический раствор в тех же дозах. На каждую дозу берут 8-10 животных.The experiments were carried out on male mice weighing 20-22 g. The test compound was administered subcutaneously to experimental animals at doses of 5 and 10 mg / kg. The control group of animals injected with saline in the same doses. For each dose, 8-10 animals are taken.
Через 1 ч после введения соединений или физиологического раствора опытных и контрольных животных помещают в камеру с водой (с температурой 24-26° С), оснащенной вращающимся встроенным ребристым колесом со счетным выходом. Регистрируют интенсивность вращения колеса по числу вращений колеса при попытках выбраться из воды. Регистрацию проводят в течение 1 ч. Результаты оценивают на 6-й и 12-ой минутах опыта.One hour after the introduction of compounds or physiological saline, experimental and control animals were placed in a chamber with water (with a temperature of 24-26 ° C) equipped with a rotating built-in ribbed wheel with a counting output. The wheel rotation intensity is recorded by the number of wheel rotations when trying to get out of the water. Registration is carried out within 1 h. The results are evaluated at the 6th and 12th minutes of the experiment.
Результаты исследований представлены в табл. 7, из которых видно, что соединения формулы (I) существенно увеличивают интенсивность вращений ребристого колеса, что свидетельствуют о выраженном антидепрессивном эффекте. Так, через 1 ч после введения исследуемых соединений интенсивность вращения увеличивалась в 1,5-2 раза на 6-й мин и в 5 раза на 12-ой мин наблюдения по сравнению с контролем. По активности соединения настоящего изобретения сопоставимы с фенамином (использованным в эквиэффективной дозе) и в 2-3 раза превосходят меридил (на 12-ой мин).The research results are presented in table. 7, from which it is seen that the compounds of formula (I) significantly increase the intensity of rotation of the ribbed wheel, which indicates a pronounced antidepressant effect. So, 1 hour after the administration of the studied compounds, the rotation intensity increased 1.5-2 times for the 6th minute and 5 times for the 12th minute of observation compared to the control. In terms of activity, the compounds of the present invention are comparable to phenamine (used in an equivalent dose) and are 2–3 times higher than meridyl (by the 12th minute).
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Табл. 7SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Tab. 7
Оценка антидепрессивного действия соединений на модели вращающегося колесаEvaluation of the antidepressant effect of compounds on a rotating wheel model
Figure imgf000060_0001
Figure imgf000060_0001
Пример 25. Влияния соединений на работоспособность.Example 25. The effect of connections on health.
Оценку влияния соединений формулы (I) на физическую работоспособность исследуют в «плaвaтeльнoм» тесте. Опыты проводят на мышах. Исследуемое соединение вводят опытным животным подкожно в дозах 5-15 мг/кг. Контрольной группе животных вводят физиологический раствор в тех же дозах. На каждую дозу берут 8-10 животных. Через 30 мин и через 1 ч после введения соединений (опытная группа) или физиологического раствора (контрольная группа) на каждом животном фиксируют груз, составляющий 7,5% от массы тела, и помещают в камеру с водой при температуре воды 24-260C. Регистрируют время, в течение которого мышь способна удерживатьсяAn assessment of the effect of the compounds of formula (I) on physical performance is examined in a “swimming” test. The experiments are carried out on mice. The test compound is administered to experimental animals subcutaneously in doses of 5-15 mg / kg. The control group of animals injected with saline in the same doses. For each dose, 8-10 animals are taken. After 30 minutes and 1 hour after the administration of the compounds (experimental group) or physiological solution (control group), a load of 7.5% of body weight was recorded on each animal and placed in a chamber with water at a water temperature of 24-26 0 C Record the time during which the mouse is able to hold
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) на поверхности воды. Активность исследуемых соединений оценивают по увеличению продолжительности плавания мышей с грузом в сравнении с контролем. Результаты исследовании представлены в табл. 8.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) on the surface of the water. The activity of the studied compounds is evaluated by the increase in the duration of swimming mice with cargo in comparison with the control. The results of the study are presented in table. 8.
Табл. 8Tab. 8
Оценка влияния соединений на работоспособность животных в плавательном тестеAssessment of the effect of compounds on the performance of animals in a swimming test
Figure imgf000061_0001
Figure imgf000061_0001
* - Соединение Ia из-за нерастворимости в воде вводили внутрь. ** - Доза, составляющая - 0,1 от ЛД50.* - Compound Ia was administered orally due to insolubility in water. ** - Dose component - 0.1 from LD 50 .
Пример 26. Получение фармацевтической композиции в форме таблетки, содержащей 0,1 мг активного ингредиента.Example 26. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a tablet containing 0.1 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), полученное по примерам 1, смешивают с расчетным количеством целлюлозы микрокристаллической, двуокиси кремния, стеариновойAs the active ingredient, take the compound of formula (I) obtained in examples 1, mixed with the calculated amount of microcrystalline cellulose, silicon dioxide, stearic
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) кислоты, тщательно перемешивают и прессуют до получения таблеток массой 52 мг каждая.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) acid, thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 52 mg each.
Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - 0,1 мг Целлюлоза микрокристаллическая - 30 мг Двуокись кремния - 20 мг Стеариновая кислота - 1 ,9 мг Масса таблетки — 52 мг.The compound of formula (I) - 0.1 mg Microcrystalline cellulose - 30 mg Silicon dioxide - 20 mg Stearic acid - 1, 9 mg Tablet weight - 52 mg.
Пример 27. Получение фармацевтической композиции в форме таблетки, содержащей 1 мг активного ингредиента.Example 27. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of tablets containing 1 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством кукурузного крахмала, целлюлозы микрокристаллической, лактозы, повидона, кроскармеллоза натрия, стеарата магния тщательно перемешивают и прессуют до получения таблеток массой 90 мг каждая.As the active ingredient, a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of corn starch, microcrystalline cellulose, lactose, povidone, croscarmellose sodium, magnesium stearate are thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 90 mg each.
Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - 1.0 мг Лактоза - 46.9 мг Кукурузный крахмал - 23.5 мг Повидон - 1.8 мгThe compound of formula (I) - 1.0 mg Lactose - 46.9 mg Corn starch - 23.5 mg Povidone - 1.8 mg
Микрокристаллическая целлюлоза - 14.4 мг Кроскармеллоз натрия тип А - 1.8 мг Стеарат магния - 0.6 мг Масса таблетки - 90,0 мг.Microcrystalline cellulose - 14.4 mg Croscarmellose sodium type A - 1.8 mg Magnesium stearate - 0.6 mg Tablet weight - 90.0 mg.
Пример 28. Получение фармацевтической композиции в форме таблетки, содержащей 2, 5 мг активного ингредиента.Example 28. Obtaining a pharmaceutical composition in tablet form containing 2.5 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством сахара молочного, поливинилпирролидон низкомолекулярного крахмала картофельного,As the active ingredient, a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of milk sugar, polyvinylpyrrolidone of low molecular weight potato starch,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) стеарата кальция тщательно перемешивают и прессуют до получения таблеток массой 80 мг каждая.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) calcium stearate is thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 80 mg each.
Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - 2,5 мг Сахар молочный - 50,0 мгThe compound of formula (I) - 2.5 mg Milk sugar - 50.0 mg
Поливинилпирролидон -. 2,5 мг Кальция стеарат - 0,5 мгPolyvinylpyrrolidone -. 2.5 mg Calcium stearate - 0.5 mg
Крахмал картофельный - 24,5 мг Масса таблетки - 80,0 мг.Potato starch - 24.5 mg. Tablet weight - 80.0 mg.
Пример 29. Получение фармацевтической композиции в форме таблетки, содержащей 5 мг активного ингредиента.Example 29. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a tablet containing 5 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством кукурузного крахмала, лактозы, гидроксипропилцелюлозой и кристаллической целлюлозой. Добавляют растворенную в воде гидроксипропилцеллюлозу и снова тщательно перемешивают. Полученную смесь сушат, гранулируют и добавляют стеарат магния и светлую безводную кремниевую кислоту и прессуют до получения таблеток массой 70 мг. Далее таблетки покрывают обычным образом пленочным покрытием, используя гидроксипропилцеллюлозу.As the active ingredient, a compound of formula (I) is taken, mixed with the calculated amount of corn starch, lactose, hydroxypropylcellulose and crystalline cellulose. Hydroxypropyl cellulose dissolved in water is added and thoroughly mixed again. The resulting mixture was dried, granulated and magnesium stearate and light anhydrous silicic acid were added and pressed to obtain tablets weighing 70 mg. The tablets are then coated in the usual manner with a film coating using hydroxypropyl cellulose.
Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) 5 мгThe compound of formula (I) 5 mg
Кукурузный крахмал 20 мгCorn Starch 20 mg
Лактоза 19 мгLactose 19 mg
Кристаллическая целлюлоза 10 мгCrystalline Cellulose 10 mg
Гидроксипропилцеллюлоза 15мгHydroxypropylcellulose 15mg
Стеарат магния 0,5 мг Безводная кремниевая кислота ' 0,5 мгMagnesium stearate 0.5 mg Anhydrous silicic acid '0.5 mg
Масса ядра таблетки 70 мг.The mass of the tablet core is 70 mg.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 30. Приготовление таблеток, содержащих 10 мг активного ингредиента.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Example 30. Preparation of tablets containing 10 mg of active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством сахара молочного, поливинилпирролидон низкомолекулярного крахмала картофельного, стеарата кальция тщательно перемешивают и прессуют до получения таблеток массой 320 мг каждая. Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of milk sugar, polyvinylpyrrolidone of low molecular weight potato starch, calcium stearate is thoroughly mixed and pressed to obtain tablets weighing 320 mg each. Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - IO мг Сахар молочный - 200 мгThe compound of formula (I) - IO mg Milk sugar - 200 mg
Поливинилпирролидон -. 20 мг Кальция стеарат - 2 мгPolyvinylpyrrolidone -. 20 mg Calcium stearate - 2 mg
Крахмал картофельный - 98 мг Масса таблетки - 320 мг.Potato starch - 98 mg. Tablet weight - 320 mg.
Пример 31. Приготовление таблеток, содержащих 100 мг активного ингредиента.Example 31. Preparation of tablets containing 100 mg of active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством крахмала, измельченной лактозы, талька, тщательно перемешивают и спрессовывают в брусок.A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of starch, crushed lactose, talc, mixed thoroughly and pressed into a block.
Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 460 мг каждая.The resulting bar is crushed into granules and sieved through sieves. The granules obtained are tabletted into a suitable tablet form weighing 460 mg each.
По указанной схеме получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):According to this scheme, tablets of the following composition are obtained, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - 100 мгThe compound of formula (I) - 100 mg
Лактоза - 160 мгLactose - 160 mg
Крахмал кукурузный - 160 мгCorn starch - 160 mg
Тальк - 40 мгTalc - 40 mg
Масса таблетки - 460 мг.The weight of the tablet is 460 mg.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 32. Приготовление таблеток, содержащих 60 мг активного ингредиента.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Example 32. Preparation of tablets containing 60 mg of active ingredient.
Активный ингредиент (соединение формулы 1), крахмал и целлюлозу пропускают через сито и тщательно перемешивают. Полученный порошок смешиваю с раствором поливинилпирролидона и гранулируют. Гранулы высушивают при 50° С и соединяют с карбоксиметил натрием, стеаратом магния и тальком. Тщательно перемешивают и прессуют в машине для изготовления таблеток до получения таблеток массой 150 мг каждая.The active ingredient (compound of formula 1), starch and cellulose are passed through a sieve and mixed thoroughly. The resulting powder is mixed with a solution of polyvinylpyrrolidone and granulated. The granules are dried at 50 ° C and combined with sodium carboxymethyl, magnesium stearate and talc. Thoroughly mixed and pressed in a machine for making tablets to obtain tablets weighing 150 mg each.
Получают таблетки следующего состава, мг (на одну таблетку):Get tablets of the following composition, mg (per tablet):
Соединение формулы (I) - 60 мгThe compound of formula (I) - 60 mg
Крахмал - 45 мгStarch - 45 mg
Целлюлоза микрокристаллическая - 35 мгMicrocrystalline cellulose - 35 mg
Поливинилпирролидон - 4 мгPolyvinylpyrrolidone - 4 mg
Карбоксиметил натрия - 4,5 мгCarboxymethyl Sodium - 4.5 mg
Стеарат магния - 0,5 мгMagnesium Stearate - 0.5 mg
Тальк - 1 мгTalcum - 1 mg
Масса таблетки - 150 мг.The weight of the tablet is 150 mg.
Пример 33. Получение фармацевтической композиции в форме суппозиториев.Example 33. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of suppositories.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством ланолина и растопленного масла какао и тщательно перемешивают. Изготовление суппозиториев осуществляют на автоматах при необходимых технологических режимах методом формования.A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of lanolin and melted cocoa butter and mixed thoroughly. The manufacture of suppositories is carried out on machines with the necessary technological conditions by molding.
По вышеуказанной схеме получают суппозитории следующего состава, мг (на один суппозиторий): Соединение формулы (I) - 25 мгAccording to the above scheme, suppositories of the following composition are obtained, mg (per suppository): Compound of formula (I) - 25 mg
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Ланолин безводный - 1800 мг Масло какао - 1200 мг.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Anhydrous lanolin - 1800 mg Cocoa butter - 1200 mg.
Пример 34. Получение фармацевтической композиции в форме капсулы, содержащей 5 мг активного ингредиента.Example 34. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a capsule containing 5 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством кристаллической лактозы и крахмала кукурузного, тщательно перемешивают. Далее добавляют тальк и стеарат магния и снова перемешивают. Полученной смесью наполняют твердые желатиновые капсулы соответствующего размера.A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of crystalline lactose and corn starch, mixed thoroughly. Next, talc and magnesium stearate are added and mixed again. The resulting mixture is filled in hard gelatin capsules of the appropriate size.
Получают капсулы следующего состава, мг (на одну капсулу):Capsules of the following composition are obtained, mg (per capsule):
Соединение формулы (I) - 5 мгThe compound of formula (I) - 5 mg
Лактоза - 159 мгLactose - 159 mg
Крахмал - 25 мгStarch - 25 mg
Тальк - 10 мгTalcum - 10 mg
Стеарат магния - 1 мгMagnesium Stearate - 1 mg
Масса содержимого капсулы- 200 мг.The mass of the contents of the capsule is 200 mg.
Пример 35. Получение фармацевтической композиции в форме капсулы, содержащей 50 мг активного ингредиента.Example 35. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of a capsule containing 50 mg of the active ingredient.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством кристаллической лактозы и целлюлозы микрокристаллической до гомогенного состояния, просеивают, а затем примешивают тальк и стеарат магния. Готовой смесью наполняют твердые или мягкие желатиновые капсулы соответствующего размера.A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of crystalline lactose and microcrystalline cellulose to a homogeneous state, sieved, and then talc and magnesium stearate are mixed. Hard or soft gelatin capsules of the appropriate size are filled with the finished mixture.
Получают капсулы следующего состава, мг (на одну капсулу):Capsules of the following composition are obtained, mg (per capsule):
Соединение формулы (1) - 50 мгThe compound of formula (1) - 50 mg
Лактоза - 60 мгLactose - 60 mg
Микрокристаллическая целлюлоза - 34 мгMicrocrystalline Cellulose - 34 mg
Тальк - 5 мгTalcum - 5 mg
Стеарат магния - 1 мгMagnesium Stearate - 1 mg
Масса содержимого капсулы - 150 мг.The mass of the contents of the capsule is 150 mg.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 36. Получение фармацевтической композиции в форме растворов для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Example 36. Obtaining a pharmaceutical composition in the form of solutions for intramuscular, intraperitoneal or subcutaneous injection.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством вспомогательных веществ. Полученный раствор фильтруют и разливают в ампулы соответствующего размера, которые запаивают и стерилизуют в автоклаве.As the active ingredient, take the compound of formula (I), mix with the calculated amount of excipients. The resulting solution is filtered and poured into ampoules of the appropriate size, which are sealed and sterilized in an autoclave.
A. Получают раствор для инъекций, содержащий в 1 мл:A. Get a solution for injection containing 1 ml:
Соединение формулы (I) - 0,5 мг Сорбитол - 5,1 мг Уксусная кислота - 0,08 мг Вода для инъекций - до 1 мл.The compound of formula (I) - 0.5 mg Sorbitol - 5.1 mg Acetic acid - 0.08 mg Water for injection - up to 1 ml.
B. Получают раствор для инъекций, содержащий в 5 мл:B. Get a solution for injection containing 5 ml:
Соединение формулы (1) - 100 мг Маннит - 100 мг 5 н гидроксид натрия - 200 мкл Очищенная вода - до 5 мл.The compound of formula (1) - 100 mg Mannitol - 100 mg 5 n sodium hydroxide - 200 μl Purified water - up to 5 ml.
C. Получают раствор для инъекций, содержащий в 1 мл:C. An injection solution containing 1 ml is obtained:
Соединение формулы (I) - 0,2 мг лактат натрия - 1,67 мг хлорид натрия - 8,1 мг (D,L) молочная кислота - 1 ,44 мг дистиллированная вода - до 1 мл.The compound of formula (I) - 0.2 mg sodium lactate - 1.67 mg sodium chloride - 8.1 mg (D, L) lactic acid - 1, 44 mg distilled water - up to 1 ml.
D. Получают раствор для инъекций, содержащий в 10 мл:D. Get a solution for injection containing 10 ml:
Соединение формулы (1) - 50 мг Лимонная кислота - 210 мг D-маннитол - 100 мг дистиллированная вода - до 10 мл.The compound of formula (1) - 50 mg Citric acid - 210 mg D-mannitol - 100 mg distilled water - up to 10 ml.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) Пример 37., Получение фармацевтической композиции в аэрозольной форме.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) Example 37. Obtaining a pharmaceutical composition in aerosol form.
В качестве активного ингредиента берут соединение формулы (I), смешивают с расчетным количеством этанола, добавляют диспергатор хлордифторметан, охлажденный до -3O0C и заполняют аэрозольные баллончики.A compound of formula (I) is taken as the active ingredient, mixed with the calculated amount of ethanol, a dispersant of chlorodifluoromethane cooled to -3O 0 C is added and aerosol cans are filled.
Содержание компонентов, мае. % (на один баллочик):Content Components, May. % (for one scoop):
Соединение формулы (I) - 0,25 Этанол - 29,75 хлордифторметан - 70,00 Всего - 100,00.The compound of formula (I) - 0.25 Ethanol - 29.75 chlorodifluoromethane - 70.00 Total - 100.00.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) SUBSTITUTE SHEET (RULE 26)

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ. CLAIM.
1. Соединение общей формулы (I)1. The compound of General formula (I)
Figure imgf000069_0001
где R1 означает водород,
Figure imgf000069_0001
where R 1 means hydrogen,
R означает водород или CrC7-aлкил, арилалкил, либоR is hydrogen or C r C 7 -alkyl, arylalkyl, or
R1 и R2 вместе означают пиперидино-, морфолино-, N- метилпиперазино-, пирролидино, гексагидроазепино,R 1 and R 2 together mean piperidino, morpholino, N-methylpiperazino, pyrrolidino, hexahydroazepino,
R3 " фенил или замещенный фенил,R 3 " phenyl or substituted phenyl,
X означает водород, циано-группу,X is hydrogen, a cyano group,
XR3 вместе означают (CH2)n, n=2-4,XR 3 together means (CH 2 ) n , n = 2-4,
Y означает водород, циано-группу, карбоксильную группу, N- замещенную или N-,N-дизaмeщeннyю карбамидную группы,Y is hydrogen, a cyano group, a carboxyl group, an N-substituted or an N-, N-disubstituted urea group,
1 "X O при R = H, и поименованными выше R , X и Y, R означает незамещенный и замещенные бензилы, Ci-C8-aлкил, аминоалкил, гидроксиалкил, незамещенный и различно замещенные арилы , фармакологически приемлемые соли и/ или сольваты.1 "XO at R = H, and with the above R, X and Y, R means unsubstituted and substituted benzyls, Ci-C 8 -alkyl, aminoalkyl, hydroxyalkyl, unsubstituted and variously substituted aryls, pharmacologically acceptable salts and / or solvates.
2. Соединение по п. I5 выбранное из группы, включающей 2- aминo-4-фeнилaминoпиpидин, 2-мopфoлинo-3-циaнo-4- фениламинопиридин, 2-N-мeтилпипepaзинo-3-циaнo-4- фениламинопиридин, 2-N-мeтилпипepaзинo-4-фeнилaминoпиpидин, 2- бeнзилaминo-З-циaнo-4-фeнилaминoпиpидин, 2-бeнзилaминo-4-фeнил- аминопиридин, 2-мopфoлинo-4-п-xлopфeнилaминoпиpидин.2. The compound according to claim I 5 selected from the group comprising 2-amino-4-phenylaminopyridine, 2-morpholin-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-N-methylpiperazino-3-cyano-4-phenylaminopyridine -methylpiperazino-4-phenylaminopyridine, 2-benzylamine-3-cyano-4-phenylaminopyridine, 2-benzylamino-4-phenyl-aminopyridine, 2-morpholin-4-p-chlorophenyl.
3. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли или3. A pharmaceutical composition comprising an effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable salt or
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) сольвата по любому из пп.1-2 в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) MES according to any one of claims 1 to 2 in a mixture with pharmaceutically acceptable excipients.
4. Композиция по п.З, обладающая антагонистической активностью в отношении NMDA- глутаматных рецепторов.4. The composition according to claim 3, having antagonistic activity against NMDA glutamate receptors.
5. Композиция по п.З, обладающая когнитивно- стимулирующей активностью.5. The composition according to claim 3, having cognitively stimulating activity.
6. Композиция по п.З, обладающая агонистической активностью в отношении никотиновых холинорецепторов.6. The composition according to claim 3, having agonistic activity against nicotinic cholinergic receptors.
7. Композиция по п.З, обладающая активностью ингибитора ацетилхолинэстеразы.7. The composition according to claim 3, having the activity of an acetylcholinesterase inhibitor.
8. Композиция по п.З, проявляющая свойства симпатомиметиков .8. The composition according to p. 3, showing the properties of sympathomimetics.
9. Средство для лечения или предупреждения заболеваний и расстройств, связанных с гиперактивацией NMDA- рецепторов, содержащее соединение или его фармацевтически приемлемую соль или сольват по любому из пп.1-2 или фармацевтическую композицию по любому из пп. 3-8.9. An agent for treating or preventing diseases and disorders associated with hyperactivation of NMDA receptors, comprising a compound or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof according to any one of claims 1 to 2, or a pharmaceutical composition according to any one of claims. 3-8.
10. Средство по п.9, где указанное заболевание и расстройство выбрано из группы, включающей церебрососудистую недостаточность, церебральную ишемию, инсульт, нейропатии, вызванные гипоксией или гипогликемией, мозговой травмой или повреждением спинного мозга, амиотрофический боковой склероз, спиноцеребеллярную дегенерацию, дегенеративные атаксии, кортико-базальную дегенерацию, комплекс Гуама, подострый склерозирующий панэнцефалит, рассеянный (множественный) склероз, рассеянный энцефаломиелит, склероз Шильдера, миелинопатии воспалительного и сосудистого характера, воспалительную демиелинизирующую полинейропатию, синдром Гийена-Барре, болезнь Маркиафавы-Бигнами, центральный понтинный10. The tool according to claim 9, where the specified disease and disorder is selected from the group including cerebrovascular insufficiency, cerebral ischemia, stroke, neuropathies caused by hypoxia or hypoglycemia, brain injury or damage to the spinal cord, amyotrophic lateral sclerosis, spinocerebellar degeneration, degenerative ataxia cortico-basal degeneration, Guam complex, subacute sclerosing panencephalitis, multiple (multiple) sclerosis, multiple encephalomyelitis, Schilder's sclerosis, myelinopathy inflammatory of vascular and vascular nature, inflammatory demyelinating polyneuropathy, Guillain-Barré syndrome, Marciafava-Bignami disease, central pontine
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) миелинолиз, нейрооптикомиелит, синдром Девика, болезнь Бало, миелопатии при ВИЧ, красную волчанку ЦНС, узелковый полиартериит, синдром Шегрена, саркоидоз, локализованный церебральный васкулит, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, мультиинфарктное слабоумие, болезнь Гентингтона; нейродегенеративные заболевания, ассоциированные с бактериальной или вирусной инфекциями; неврологические и психиатрические расстройства и заболевания, связанные с эксайтотоксическим нейрональным повреждением, включающие чувство беспричинной тревоги, психоз, депрессию, шизофрению, эпилепсию, мигрень, мышечные спазмы, недержание мочи, паралич, лекарственную, наркотическую или алкогольную зависимость, синдром отмены; состояния с острым или хроническим болевым синдромом.SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) myelinolysis, neurooptomyelitis, Devik's syndrome, Balo's disease, HIV myelopathy, central nervous system lupus, polyarteritis nodosa, Sjogren's syndrome, sarcoidosis, localized cerebral vasculitis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, multi-infarction dementia, Huntington's disease; neurodegenerative diseases associated with bacterial or viral infections; neurological and psychiatric disorders and diseases associated with excitotoxic neuronal damage, including a sense of causeless anxiety, psychosis, depression, schizophrenia, epilepsy, migraine, muscle cramps, urinary incontinence, paralysis, drug, drug or alcohol dependence, withdrawal syndrome; conditions with acute or chronic pain syndrome.
11. Средство для лечения или предупреждения заболеваний и расстройств, связанных с нарушениями когнитивных функций, способности к обучению, расстройства памяти, запоминания или нарушения внимания, содержащее соединение или его фармацевтически приемлемую соль или сольват по любому из пп.1-2 или фармацевтическую композицию по любому из пп. 3-8.11. An agent for treating or preventing diseases and disorders associated with impaired cognitive function, learning ability, memory impairment, memorization or impaired attention, containing the compound or its pharmaceutically acceptable salt or solvate according to any one of claims 1 to 2, or the pharmaceutical composition according to any of paragraphs. 3-8.
12. Средство по п. 11, где указанное заболевание и расстройство выбрано из группы, включающей острые или хронические нейродегенеративные нарушения, связанные с возрастной деменцией, сосудистой деменцией, деменцией эндокринного или метаболического происхождения, травматической деменцией и диффузных повреждений мозга, умственной отсталостью, приемом алкоголя или наркотических средств, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона12. The tool according to claim 11, where the specified disease and disorder is selected from the group comprising acute or chronic neurodegenerative disorders associated with age-related dementia, vascular dementia, dementia of endocrine or metabolic origin, traumatic dementia and diffuse brain damage, mental retardation, alcohol intake or narcotic drugs, Alzheimer's disease, Parkinson's disease
13. Способ лечения или предупреждения заболеваний и нарушений, вызванных гиперактивацией NMDA- рецепторов,13. A method of treating or preventing diseases and disorders caused by hyperactivation of NMDA receptors,
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) включающий введение пациенту соединения, фармацевтически приемлемой соли или сольвата по любому из пп.1-2 или средства по любому из пп. 9-10 .SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) comprising administering to a patient a compound, a pharmaceutically acceptable salt or solvate according to any one of claims 1 to 2, or an agent according to any one of claims. 9-10.
14. Способ лечения или предупреждения заболеваний и расстройств, связанных с нарушениями когнитивных функций, способности к обучению, расстройства памяти, запоминания или нарушения внимания, включающий введение пациенту соединения, фармацевтически приемлемой соли или сольвата по любому из пп.1-2 или средства по любому из пп. 11-12 .14. A method of treating or preventing diseases and disorders associated with impaired cognitive function, learning ability, memory impairment, remembering or impaired attention, comprising administering to a patient a compound, a pharmaceutically acceptable salt or solvate according to any one of claims 1 to 2, or an agent according to any from paragraphs 11-12.
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) SUBSTITUTE SHEET (RULE 26)
PCT/RU2009/000083 2008-02-21 2009-02-20 2,4-diaminopyridine derivatives, a pharmaceutical composition and a medicinal agent which are based thereon and used for treating or preventing diseases and disturbances caused by the hyperactivation of nmda-receptors and/or in the form of cognitive function stimulators and a method for the use thereof WO2009104990A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA200801639 2008-02-21
EA200801639A EA014100B1 (en) 2008-02-21 2008-02-21 2,4-diaminopyridine derivatives, pharmaceutical composition, medicament based thereon for treating and preventing diseases and disorders caused by nmda-receptors hyperactivation and/or as stimulators of cognitive function and method of treatment

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2009104990A1 true WO2009104990A1 (en) 2009-08-27

Family

ID=40985739

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2009/000083 WO2009104990A1 (en) 2008-02-21 2009-02-20 2,4-diaminopyridine derivatives, a pharmaceutical composition and a medicinal agent which are based thereon and used for treating or preventing diseases and disturbances caused by the hyperactivation of nmda-receptors and/or in the form of cognitive function stimulators and a method for the use thereof

Country Status (2)

Country Link
EA (1) EA014100B1 (en)
WO (1) WO2009104990A1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011101774A1 (en) 2010-02-16 2011-08-25 Pfizer Inc. (r)-4-((4-((4-(tetrahydrofuran-3-yloxy)benzo[d]isoxazol-3-yloxy)methyl)piperidin-1-yl)methyl)tetrahydro-2h-pyran-4-ol, a partial agonist of 5-ht4 receptors
WO2013048949A3 (en) * 2011-09-26 2013-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Selective nr2b antagonists

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2438672C1 (en) 2010-04-30 2012-01-10 Общество с ограниченной ответственностью "Клевер Фарм" Agent showing properties of cognitive function activator (versions)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004024711A1 (en) * 2002-09-10 2004-03-25 Pharmacia Italia S.P.A. Substituted pyridine derivatives as antitumor agent
RU2303037C2 (en) * 2001-11-09 2007-07-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Derivatives of pyridine and medicinal agent based on thereof possessing selective blocking activity with respect to subspecies of nmda-receptors

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUP0700086A2 (en) * 2000-08-11 2007-05-29 Eisai Co Ltd 2-aminopyridine compounds, use thereof as drugs and pharmaceutical compositions containing them
EP2044051B1 (en) * 2006-06-22 2010-01-27 BIOVITRUM AB (publ) Pyridine and pyrazine derivatives as mnk kinase inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2303037C2 (en) * 2001-11-09 2007-07-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Derivatives of pyridine and medicinal agent based on thereof possessing selective blocking activity with respect to subspecies of nmda-receptors
WO2004024711A1 (en) * 2002-09-10 2004-03-25 Pharmacia Italia S.P.A. Substituted pyridine derivatives as antitumor agent

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011101774A1 (en) 2010-02-16 2011-08-25 Pfizer Inc. (r)-4-((4-((4-(tetrahydrofuran-3-yloxy)benzo[d]isoxazol-3-yloxy)methyl)piperidin-1-yl)methyl)tetrahydro-2h-pyran-4-ol, a partial agonist of 5-ht4 receptors
WO2013048949A3 (en) * 2011-09-26 2013-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Selective nr2b antagonists
US8841301B2 (en) 2011-09-26 2014-09-23 Bristol-Myers Squibb Company Selective NR2B antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
EA014100B1 (en) 2010-08-30
EA200801639A1 (en) 2009-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2024003253A (en) Pharmaceutical compositions comprising an antipsychotic drug and a vmat2 inhibitor and uses thereof
CN102046176B (en) 5-HT3 receptor modulators, methods of making, and use thereof
US9492440B2 (en) Bicyclic amides for enhancing glutamatergic synaptic responses
JP2010540439A (en) Fluorine-containing derivatives of hydrogenated pyrido [4,3-b] indoles with neuroprotective and cognitive enhancing properties, processes for preparing and use
CA2896871A1 (en) Heterocyclic compounds and methods of use thereof
JP6302480B2 (en) Triazolo-pyrazine derivatives useful for the treatment of central nervous system diseases
US6258807B1 (en) Method for treating pain
WO2009104990A1 (en) 2,4-diaminopyridine derivatives, a pharmaceutical composition and a medicinal agent which are based thereon and used for treating or preventing diseases and disturbances caused by the hyperactivation of nmda-receptors and/or in the form of cognitive function stimulators and a method for the use thereof
AU2011345414B2 (en) Substituted methyl amines, serotonin 5-HT6 receptor antagonists, methods for the production and use thereof
AU2012258339A1 (en) New combination between 4-{3-[Cis-Hexahydrocyclopenta[c]Pyrrol-2(1H)-yl]Propoxy}Benzamide and an NMDA receptor antagonist, and pharmaceutical compositions containing it
JPH0222280A (en) Optical isomer of spiroquinuquilidine derivative, production thereof, drug composition containing said compound and treatment method using the same
US20110257208A1 (en) Compounds useful as faah modulators and uses thereof
NO139733B (en) ANALOGICAL PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF THERAPEUTICALLY ACTIVE DERIVATIVES OF METYLAMINE
US20120122861A1 (en) Bicyclic amide derivatives for enhancing glutamatergic synaptic responses
NO318553B1 (en) Use of 2-methyl-4- (4-methyl-1-piperazinyl) -10H-thieno [2,3-b] [1,5] benzodiazepine for the treatment of cognitive dysfunction.
JP2020536070A (en) New salt
JP3048068B2 (en) Novel spiro [2H-1-benzopyran-2,4&#39;-piperidin] -4 (3H) -one derivative, acid addition salt thereof and pharmaceutical composition containing the same
AU8713291A (en) Indenoindole compounds
JP3681770B2 (en) Treatment for senile dementia or Alzheimer&#39;s disease
AU655227B2 (en) Substituted benzofuranylpiperidine as a nootropic agent
JP2802403B2 (en) Brain metabolism activating / protecting agent and brain function improving agent
CN115850270A (en) Alpha-carboline compound or pharmaceutical composition thereof, and preparation method and application thereof
WO2002051416A1 (en) Drugs for improving ability of daily life behaviors in alzheimer&#39;s disease
AU2013205446A1 (en) Bicyclic amides for enhancing glutamatergic synaptic responses
JP2011509973A (en) Monomaleate monohydrate salt of 5HT1A receptor antagonist

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09712627

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 30.11.2010)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 09712627

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1