WO2007086421A1

WO2007086421A1 - 硬組織再生治療に用い得るハニカム状多孔質体

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Publication number: WO2007086421A1
Application number: PCT/JP2007/051080
Authority: WO
Inventors: Masaru Tanaka; Keiko Yoshizawa; Akinori Tsuruma; Sadaaki Yamamoto; Masatsugu Shimomura
Original assignee: National University Corporation Hokkaido University
Priority date: 2006-01-26
Filing date: 2007-01-24
Publication date: 2007-08-02

Description

明細書

硬組織再生治療に用い得るハニカム状多孔質体

技術分野

[0001] 本発明は、硬組織再生治療に好適な、ハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体とその製造方法に関する。

背景技術

[0002] 高齢化社会の進行により、骨粗しょう症や関節疾患に代表される骨、軟骨、歯などの硬組織疾患が増加している。これらの疾患は、老人医療費の増カロにカ卩えてヒトの Q OLを著しく損なわせるために、大きな社会問題ともなつてきて!/、る。

[0003] 現在、硬糸且織疾患の治療のために、例えば bFGF、 TGF- β 1あるいは BMP等の各種増殖因子あるいは骨髄由来細胞を疾患部位に注入したり、生分解性高分子からなるメッシュを移植したり、あるいはチタン等の金属、セラミックスあるいはハイドロキシアパタイトなど力もなる人工歯根や人工骨を移植するなどの治療が行われている。

[0004] しかし、これらの治療法では、治療を達成するための十分な組織再生は未だ達成されていない。特に硬い骨と柔らかい軟骨は結合しにくい組織であるため、軟骨が骨から剥離してしまった疾患に対しては、ピンやねじ等の物理的手段によって軟骨を骨に固定するしか治療法がな、のが現状である。

[0005] このような関節疾患の治療に当たっては、硬い骨と軟骨との界面に配置させたときに速やかに骨と接着して骨としての機能を代行すると共に、骨の代謝系に取り込まれて徐々に患者自身の骨に置き換わるような生体適合性材料 (バイオアクティブインタ一フェイスと呼ばれる）の開発が重要な課題となっている。

[0006] 軟骨の再生医療に利用可能な生体適合性材料の一つとして、非水溶性ポリマーからなるハニカム状多孔質体とこの上で軟骨細胞を増殖させた軟骨組織再生基材の複合体が報告されて、るが（特許文献 1)、これは専ら軟骨細胞の増殖それ自体を目的としたものである。

特許文献 1 :特開 2005— 152006

発明の開示発明が解決しょうとする課題

[0007] 本発明は、軟骨細胞のみならず歯や硬い骨、髄液と接触している骨髄内面等の、いわゆる硬組織の再生医療に用いることのできる新たなバイオアクティブインターフエイスを提供することを目的とするものである。

課題を解決するための手段

[0008] 本発明者らは、ヒトの硬組織を構成する無機物質であるノ、イドロキシアパタイトに着目し、ハ-カム状多孔質体をハイドロキシアパタイトを用いて作成することで新たなバィォアクティブインターフェイスが得られることを見、だし、以下の各発明を完成した。

[0009] (1) 0. 01 μ m〜100 μ mの膜厚ならびにハ-カム状に整列した孔径 0. 01 μ m〜

100 mの孔を有する、ハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[0010] (2)ハニカム状に整列した孔が膜の内部で平面方向に連通している、（1)に記載のノ、イドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[0011] (3)中空状の多孔質体である、（1)または（2)に記載のハイドロキシアパタイト製ノヽ二カム状多孔質体。

[0012] (4)中空部が非水溶性ポリマーによって充填されている、（3)に記載のハイドロキシアパタイト製ノ、二カム状多孔質体。

[0013] (5)硬組織再生治療において細胞増殖用の足場として使用するための、（1)ないし

(4)に記載のハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[0014] (6)非水溶性ポリマー力もなるハ-カム状多孔質体を铸型とし、ノ、イドロキシァパタイトを該多孔質体の表面に析出させることを特徴とする、 0. 01 μ πι〜100 /ζ mの膜厚ならびにハ-カム状に整列した孔径 0. 01 μ m〜100 μ mの孔を有するハイドロキシアパタイト製ハニカム状多孔質体の製造方法。

[0015] (7)下記の工程 a)〜e)を含む、（6)に記載の製造方法；

a) 50dynZcm以下の表面張力 γ Lを有する非水溶性有機溶媒に非水溶性ポリマーを溶解して非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液を調製する工程、

b)工程 a)で調製される非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液を基板の表面に塗布する工程、ここで該基板の表面張力 γ Sは塗布される非水溶性有機溶媒の表面張力 γ Lならびに該基板と該溶媒との間の表面張力 γ LSに対して γ S— γ SL > T Lの関係を満たす、

c) X@b)で基板上に塗布された非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液に相対湿度 30%以上の空気を接触させて非水溶性有機溶媒を蒸発させて、非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体を調製する工程、及び

d)工程 c)で調製された非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体をリン酸とカルシウムとを含む溶液に浸漬してハイドロキシアパタイトを該非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体に付着させ、ハイドロキシアパタイト製ノ、二カム状多孔質体を形成させる工程。

[0016] (8)さらに工程 d)によって形成されるハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体力非水溶性ポリマー力もなるハ-カム状多孔質体を除去する工程 e)を含む、（7) に記載の製造方法。

[0017] (9)工程 c)における非水溶性有機溶媒の蒸発速度が非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液の基板表面への塗布時の液膜厚を 1秒以内に 1Z5にまで減少させる速度である、（7)又は（8)に記載の製造方法。

[0018] (10)相対湿度 30%以上の湿度を有する流速 10〜： LOOLZ分の気流に接触させることで非水溶性有機溶媒を蒸発させる、（7)又は (8)に記載の製造方法。

[0019] (11)工程 b)にお、て基板に塗布される非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液の液膜厚が 1 μ m〜100 μ mである、 (7)又は（8)に記載の製造方法。

発明の効果

[0020] 本発明のハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体 (以下、 HAハ-カムと称する）は、従来の非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体 (以下、ポリマーハ-力ムと称する）に認められる特徴、例えば製造が簡便であること、規則性を有すること、増殖細胞の足場として機能すること、物質透過性を有すること等を備えている。また、ヒトの硬糸且織の構成成分と同一の成分であるハイドロキシアパタイトでできていることから、軟骨細胞、歯、骨、髄液と接触している骨髄内面を含むいわゆる硬組織の再生医療に必要な細胞の増殖用足場として、特に生体に対してより高い適合性を有し、細胞の機能制御が容易なバイオアクティブインターフェイスとして利用可能である。発明を実施するための最良の形態 [0021] 本発明における HAハ-カムとは、ハイドロキシアパタイトによって形成される多孔性の薄膜であって、膜の垂直方向に向けられた微少な孔 (くぼみを含む）が膜の平面方向に蜂の巣状に (ハ-カム状に)設けられて、るものを意味する。孔は膜を垂直方向に貫通して、てもよく、また平面方向に存在する周囲の孔と連通して、てもよ!/、。本発明の HAノヽニカムの電子顕微鏡写真を図 1に示す。

[0022] また本発明の HAハ-カムは、中空状の多孔質体とすることもできる。ここで中空状とは、多孔質体を構成するノ、イドロキシアパタイト、例えば本発明の HAノヽ-カムの電子顕微鏡写真を示す図 1の膜の裏面と表面並びこれらを結び付けている幹部分が物質の存在しない中空部を有する状態力、あるいはハイドロキシアパタイト以外の物質、特に非水溶性ポリマーで充填されている中空部を有する状態を意味する。なお、この中空状という状態は後述する本発明の製造方法の説明と合わせることによって容易に理解することができることから、本発明の製造方法の説明にお、て改めて説明すること〖こする。

[0023] 本発明の HAノヽ-カムの形状は、膜厚が 0. 01 μ m〜100 μ m、好ましくは 0. 1 μ m〜50 μ m、より好ましく ίま 1 μ m〜20 μ mであり、孑し径カ 0. 01 μ m〜100 μ m、好ましく ίま 0. 1 μ m〜50 μ m、より好ましく ίま 1 μ m〜20 μ m、特に好ましく ίま 3 μ m〜 10 μ mである。

[0024] この様なハ-カム状という規則的な配置で孔が設けられている多孔質の薄膜は、孔の口径、形状あるいは深さなどがまちまちである不規則な孔を有する通常の多孔質体とは全く異なる構造体として理解される。

[0025] 本発明の HAノヽ-カムの製造に利用されるポリマーハ-カムは、種々の公知の方法に従って製造することができる。例えばフォトリソグラフィーゃソフトリソグラフィー（ホヮイトサイドら、 Angew. Chem. Int. Ed. , 1998年、第 37卷、第 550— 575 頁）、ブロックコポリマーの相分離（アルブレヒトら，マクロモレキュール（Macromolec ules)、 2002年、第 35卷、第 8106— 8110頁）、サブミクロンのコロイド微粒子を集積することで 2次元、 3次元の周期構造を作製する方法 (グら、ラングミュア (Langmui r)、第 17卷）、これを铸型にしてインバースドオパール構造を作製する方法 (カルソら、ラングミュア（Langmuir)、 1999年、第 15卷、第 8276— 8281頁）などを挙げることができる。

[0026] また、これらの方法と製造原理を大きく異にする方法である特開平 8— 311231、特開 2001— 157475、特開 2002— 347107ある!/ヽ ίま特開 2002— 335949【こ記載された方法も使用することができる。これらの方法は、高分子の非水性有機溶媒溶液表面上に水滴を結露させ、該水滴を铸型としてハニカム状の多孔質体を調製するものであり、製造コストや効率等の点でその他の製造法に比べて有利である。以下、さらに詳しく説明する。

[0027] この方法では、水不溶性有機溶媒、特に 50dyn/_Cm以下の表面張力 γ Lを有する水不溶性有機溶媒に非水溶性ポリマーを溶解した非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液を、表面の表面張力を γ Sとし、塗布される水不溶性有機溶媒の表面張力 γ Lならびに該基板と該溶媒との間の表面張力 γ LSとした場合に γ S— γ SL> Ύ Lの関係を満たす基板の表面に塗布し、さらに 30%以上の空気の存在下で基板上に塗布された非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液を蒸発させることが好ましい。

[0028] ここにいう水不溶性有機溶媒は、 50dyn/cm以下の表面張力を有し、かつ該溶液表面に結露した水滴を保持し得る程度の水不溶性と、大気圧下で 0〜150°C、好ましくは 10〜50°Cの沸点を有する有機溶媒を言う。例えば四塩化炭素、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素、ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族炭化水素、酢酸ェチル、酢酸ブチル等のエステル類、メチルイソブチルケトン等の非水溶性のケトン類、二硫ィ匕炭素などを挙げることができる。

[0029] また非水溶性ポリマーは、水に不溶性でかつ上記の水不溶性有機溶媒に可溶な、あるいは適当な界面活性剤の存在下で水不溶性有機溶媒に溶解し得るポリマーであれば特別の制限はなぐ適宜選択して使用することができる。

[0030] 例えば、ポリ乳酸やポリヒドロキシ酪酸のような生分解性ポリマー、脂肪族ポリカーボネート、両親媒性ポリマー、光機能性ポリマー、電子機能性ポリマーなどを挙げることができる。

[0031] 特に、表面にハイドロキシアパタイトを付着させるためには、親水性基を側鎖に有する有するポリマー、あるいはアルカリ処理等によってカルボキシル基のような親水性基を持たせることの可能なポリマーの利用が好ましい。この様な好適な例としては、ポリ乳酸やポリ（ _ε—力プロラタトン)等を挙げることができる。

[0032] 上記の水不溶性有機溶媒と非水溶性ポリマーとの具体的な組み合わせの例としては、例えばポリスチレン、ポリカーボネート、ポリスノレホン、ポリエーテノレスノレホン、ポリアルキルシロキサン、ポリメタクリル酸メチルなどのポリアルキルメタタリレートまたはポリアルキルアタリレート、ポリブタジエン、ポリイソプレン、ポリ一（Ν—ビニルカルバゾール）、ポリ乳酸、ポリ一（ ε—力プロラタトン）、ポリアルキルアクリルアミド、およびこれらの共重合体よりなる群力選ばれるポリマーに対しては、四塩化炭素、ジクロロメタン、クロ口ホルム、ベンゼン、トルエン、キシレン、二硫化炭素などの有機溶媒を組み合わせて使用することができる。また、フッ素化アルキルを側鎖に持つアタリレート、メタタリレートおよびこれらの共重合体よりなる群力選ばれるポリマーに対しては、 ΑΚ— 225 (旭硝子株式会社製)などのフッ化炭素溶媒、トリフルォロベンゼン、フルォロエーテル類などの使用も良好な結果を与える。これらの中から、具体的に使用する非水溶性ポリマーに対する溶解性を考慮して、適宜選択して使用することができる

[0033] また、フッ素化アルキルを側鎖に持つポリアタリレートやメタタリレートの側鎖の水素をフッ素に置換したフッ素系ポリマーを用いてハニカム状多孔質体を製造する際には、フッ素系の有機溶媒 (ΑΚ— 225等)の使用も良好な結果を与える。

[0034] 水不溶性有機溶媒に非水溶性ポリマーを溶解する際には、同溶媒に対して 0. lg /L〜： LOg/Lの非水溶性ポリマーを溶解して使用することが好ましい。ここで、溶液中の非水溶性ポリマー濃度は、製造されるハ-カム状多孔質体に求める特性、物性並びに使用する水不溶性有機溶媒に応じて、適宜定めることができる。

[0035] さらにかかる非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液を塗布する基板は、基板表面の表面張力 γ Sど塗布される水不溶性有機溶媒の表面張力 γ Lならびに該基板と該溶媒との間の表面張力 γ LSとの間で、 γ S— γ SL> γ Lの関係を満たす基板を選択して用いることが望ましい。これは、非水溶性ポリマー溶液の水不溶性有機溶媒溶液を塗布する基板自体の水不溶性有機溶媒に対する濡れ性が、基板上に形成される液膜の厚みに影響を与え得るためである。基板には、塗布される非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液との親和性が高、ものであることが好まし、。具体的には、水不溶性有機溶媒の表面張力 γ Lを指標にして上記式で表すことのできる表面張力を示す表面を有する基板を利用すればよい。そのような基板の好適な例としては、ガラス板、シリコン製板あるいは金属板などを挙げることができる。

[0036] また、水不溶性有機溶媒溶液との親和性を高めることのできる加工を表面に施した基板の使用も可能である。この様な基板表面の濡れ性の改良は、基板と使用する水不溶性有機溶媒に合わせて、自体公知の方法、例えばガラス製や金属製の基板に対してはそれぞれシランカップリング処理ゃチオール化合物による単分子膜形成処理方法などを利用することができる。

[0037] 例えば、クロ口ホルムなどの疎水性有機溶媒を水不溶性有機溶媒として用いる場合の基板としては、十分に洗浄された Si基板や、アルキルシランカップリング剤などで表面を修飾したガラス基板などの使用が好ましい。また、フッ素系溶媒を用いる場合は、テフロン (登録商標）基板、あるいはフッ素化アルキルシランカップリング剤などで修飾したガラス基板などの使用が好まし!/ヽ。

[0038] 非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液を基板に塗付して同溶液の液膜を形成させる際の液膜厚としては 1 μ m〜100 μ m、好ましくは 30 μ m以下とすることが望まヽ。また基板に非水溶性ポリマーの水不溶性有機溶媒溶液を塗付する方法としては、基板に同溶液を滴下する方法の他、バーコート、ディップコート、スピンコート法などを挙げることができ、バッチ式、連続式の何れも利用することができる。

[0039] 本発明においては、上記に例示したような方法により調製することができるポリマーハ-カムをリン酸源並びにカルシウム源を含む溶液に浸漬し、ハ-カム状多孔質体の表面にハイドロキシアパタイトを自己組織的に付着させることで、本発明の HAノヽ- カムを製造することができる。

[0040] リン酸源としてはリン酸カリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウムなどから、また力ルシゥム源としては塩化カルシウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウムなどから、それぞれ適宜選択して利用することができる。これらのリン酸源並びにカルシウム源を溶解する溶液としては特に制限はないが、生理的な緩衝液の利用が好ましい。

[0041] 典型的には、小久保らの方法 (J. Biomed. Mater. Res., 24(3)331-343, 1990)に従つて調製される生体類似溶液 (SBF溶液)を用いることが好ましい。 SBF溶液は、 Na C1 7. 996mg、 NaHCO 0. 350mg、 KC1 0. 224mg、 K ΗΡΟ· 3Η O 0. 22

3 2 2

8mg、 MgCl - 6H O 0. 305mg、 lkmolZm³の HC1溶液 40ml、 CaCl 0. 278

2 2 2 mg、 Na SO 0. 071mg、 (CH OH) CNH 6. 057mg、 lkmolZm³の HC1溶

2 4 2 3 2

液 2mlを、この順序で 1000mlの蒸留水に溶解させて調製することができる。

[0042] 非水溶性ポリマー力なるハ-カム状多孔質体のリン酸源並びにカルシウム源を含む溶液への浸漬は、 4°C〜40°Cで 1時間〜 30日静置すればよい。ポリマーハ-カムへのハイドロキシアパタイトの析出量は、浸漬時間、溶液中のリン酸源並びにカルシゥム源の濃度に比例して増加する。よって浸漬時間と溶液中のリン酸源並びにカルシゥム源の濃度を調節することで、ポリマーハ-カムへのハイドロキシアパタイトの析出量を制御することもできる。浸漬時間は 1日〜30日、好ましくは 2日〜28日、より好ましくは 3日〜 28日である。

[0043] また、リン酸源並びにカルシウム源を含む溶液に浸漬する前に、ポリマーハ-カムをアルカリ溶液に浸漬する（アルカリ処理を行う）ことが好まヽ。アルカリ溶液としては 1N〜5Nのアルカリ金属（NaOHあるいは KOH)溶液を典型例として挙げることができるが、他のアルカリ溶液であってもよい。ポリマーハ-カムへのハイドロキシァパタイトの析出量は、アルカリ処理の時間に比例して増加する。よってポリマーハ-カムのアルカリ処理時間を調節することでも、該ハニカム状多孔質体へのハイドロキシァパタイトの析出量を制御することができる。アルカリ処理時間は 1分〜 24時間、好ましくは 5分〜 8時間、より好ましくは 5分〜 3時間である。

[0044] さらに、非水溶性ポリマーを溶解することのできる適当な有機溶媒に浸す、酸素プラズマによって分解する、あるいは焼成するなどの処理を行って、 HAノヽ-カム力も非水溶性ポリマーを除去することができる。この様にして得られる構造、すなわち中空部分がポリマー等の物質によって充填されて、な、、膜の垂直方向に向けられた微少な孔が膜の平面方向に蜂の巣状に (ハ-カム状に)設けられて、る中空状 HAノ、二カムもまた、本発明の一態様である。ポリマー等によって充填された HAノヽ-カムは、有機物と無機物とのハイブリッド効果による柔軟性を持たせることができる。また中空状の HAハニカムでは、物質の透過性等に優れ、これを足場として増殖する細胞の機能制御に優れると、う特徴を有する。

[0045] 以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する力本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

図面の簡単な説明

[0046] [図 1]本発明の HAノ、二カムの部分拡大図（電子顕微鏡写真)である。

実施例 1

[0047] <実施例 >

1)ハニカム状多孔質体の作製

生分解性高分子であるポリ（ ε -力プロラタトン）（PCL) (Wako M.W.70,000〜100,00 0)と両親媒性ポリアクリルポリマーを重量比 10:1で 5 mg/mLとなるようにクロ口ホルムに溶解した。この溶液をカバーガラス（ φ 15 mm)を敷き詰めたガラスシャーレ上にスビンコ一ターによってキャストした後、相対湿度 80%の雰囲気下でクロ口ホルムを蒸発させてハ-カム状多孔質体を作製した。

[0048] フィルムの孔径、幹径および空孔率を走査型電子顕微鏡 (SEM)写真を用いて測定した。孔径は垂直に交わる 2直径の平均を求め、幹径は最も細い部位を測定した。空孔率は画像解析ソフト Scion Image (Scion Corporation)を用いて測定した。空孔率については約 2400 μ m²の範囲を測定した。結果は、孔径が 6.9(± 0.04) μ m、幹径が 2. 8(±0.05) μ m空孔率が 53.2(±0.81)%であった。

[0049] またこのハ-カム状多孔質体の接触角を、薄膜上に 10 Lの蒸留水をキャストし、 3 0秒後の水の静的接触角を接触角計 (ERMA G-1)を用いることで測定したところ、約 130° であった。

[0050] 2)アルカリ溶液への浸漬

1)で調製したポリマーハ-カムを 1Nの NaOH溶液 60mlに置、て 23°Cで 1分間浸漬した後、溶液から取り出し、 30mlの蒸留水に浸して洗浄を行った。その後、 200 1のエタノールを滴下し、脱気を行った。

[0051] 3)ハイドロキシアパタイトの付着

エタノールで脱気を行ったポリマーハ-カムを小久保らの方法に従って調製した S BF溶液 400mlに浸漬し、 37°Cで 21日間静置して、 HAノヽ-カムを製造した。 [0052] HAノ、二カムを回収し、走査型電子顕微鏡 (SEM)で表面形状を、元素分析 (EDAX )でハイドロキシアパタイトの析出を、水に対する静的接触角を接触角計 (ERMA G-1 )でそれぞれ確認した。

[0053] HAノヽ-カムの操作電子顕微鏡写真を図 1に示す。 EDAX測定の結果から、ポリマーハ-カムの表面にハイドロキシアパタイトが析出していることが確認された。

[0054] <試験例>

実施例の 1)の方法によって複数枚のポリマーハ-カムを調製し、アルカリ処理時間ならびに SBF溶液への浸漬時間を変化させたときのハイドロキシアパタイトの析出量の変化を確認した。

[0055] アルカリ処理時間は 1分、 5分、 30分、 180分、 360分、 720分とし、 SBF溶液への浸漬時間を 7日としたところ、 EDAX測定によるノ、イドロキシアパタイトの析出量はァルカリ処理の時間に比例して増加することが確認された。また、アルカリ処理時間を 3 0分とし、 SBF溶液への浸漬時間を 3日、 7日、 14日、 21日、 28日としたところ、 ED AX測定によるノ、イドロキシアパタイトの析出量は SBF溶液への浸漬時間に比例して増加することが確認された。

[0056] また、アルカリ処理ならびに SBF溶液への浸漬、ずれにつ、ても、ハイド口キシァパタイトの析出量が増加するに従い、 X線回折を用いた観察による該ハイド口キシァノ《タイトの結晶性が向上することも確認された。

[0057] さらに、アルカリ処理時間ならびに浸漬時間に比例して、ハ-カム上多孔質体の静的接触角が低下しており、より親水性が高まることが確認された。この親水性の増加は、これを足場とする細胞に対する適合性の向上を意味する。

Claims

請求の範囲

[1] 0. 01 μ m〜100 μ mの膜厚ならびにハ-カム状に整列した孔径 0. 01 μ m〜100 μ mの孔を有する、ハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[2] ハ-カム状に整列した孔が膜の内部で平面方向に連通している、請求の範囲第 1項に記載のハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[3] 中空状の多孔質体である、請求の範囲第 1項または第 2項に記載のハイドロキシアバタイト製ハニカム状多孔質体。

[4] 中空部が非水溶性ポリマーによって充填されている、請求の範囲第 3項に記載のハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[5] 硬組織再生治療において細胞増殖用の足場として使用するための、請求の範囲第 1項ないし第 4項に記載のハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体。

[6] 非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体を铸型とし、ハイドロキシアパタイトを該多孔質体の表面に析出させることを特徴とする、 0. 01 μ πι〜100 /ζ mの膜厚ならびにハ-カム状に整列した孔径 0. 01 μ m〜100 μ mの孔を有するハイドロキシァパタイト製ハニカム状多孔質体の製造方法。

[7] 下記の工程 a)〜e)を含む、請求の範囲第 6項に記載の製造方法；

a) 50dynZcm以下の表面張力 γ Lを有する非水溶性有機溶媒に非水溶性ポリマ一を溶解して非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液を調製する工程、 b)工程 a)で調製される非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液を基板の表面に塗布する工程、ここで該基板の表面張力 γ Sは塗布される非水溶性有機溶媒の表面張力 γ Lならびに該基板と該溶媒との間の表面張力 γ LSに対して γ S— γ SL> の関係を満たす、

c) TMb)で基板上に塗布された非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液に相対湿度 30%以上の空気を接触させて非水溶性有機溶媒を蒸発させて、非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体を調製する工程、及び

d)工程 c)で調製された非水溶性ポリマー力なるハ-カム状多孔質体をリン酸と力ルシゥムとを含む溶液に浸漬してハイドロキシアパタイトを該非水溶性ポリマー力なるハ-カム状多孔質体に付着させ、ハイドロキシアパタイト製ノ、二カム状多孔質体を形成させる工程。

[8] さらに工程 d)によって形成されるハイドロキシアパタイト製ノヽ-カム状多孔質体力も非水溶性ポリマーからなるハ-カム状多孔質体を除去する工程 e)を含む、請求の範囲第 7項に記載の製造方法。

[9] 工程 c)における非水溶性有機溶媒の蒸発速度が非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液の基板表面への塗布時の液膜厚を 1秒以内に 1Z5にまで減少させる速度である、請求の範囲第 7項又は第 8項に記載の製造方法。

[10] 相対湿度 30%以上の湿度を有する流速 10〜： LOOLZ分の気流に接触させることで非水溶性有機溶媒を蒸発させる、請求の範囲第 7項又は第 8項に記載の製造方法。

[11] 工程 b)におヽて基板に塗布される非水溶性ポリマーの非水溶性有機溶媒溶液の液膜厚が: L πι〜100 /ζ mである、請求の範囲第 7項又は第 8項に記載の製造方法。