WO2007066783A1 - マイクロチップ - Google Patents

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WO2007066783A1
WO2007066783A1 PCT/JP2006/324608 JP2006324608W WO2007066783A1 WO 2007066783 A1 WO2007066783 A1 WO 2007066783A1 JP 2006324608 W JP2006324608 W JP 2006324608W WO 2007066783 A1 WO2007066783 A1 WO 2007066783A1
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chip
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mixing
tip
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Inventor
Yasuhisa Kageyama
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Rohm Co., Ltd.
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Publication date
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    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01FMIXING, e.g. DISSOLVING, EMULSIFYING OR DISPERSING
    • B01F31/00Mixers with shaking, oscillating, or vibrating mechanisms
    • B01F31/10Mixers with shaking, oscillating, or vibrating mechanisms with a mixing receptacle rotating alternately in opposite directions
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    • B01L3/5027Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/50273Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by the means or forces applied to move the fluids
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    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
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    • B01L2300/00Additional constructional details
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    • B01L2300/0809Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0816Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
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    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
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    • B01L2300/0867Multiple inlets and one sample wells, e.g. mixing, dilution
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    • B01L2400/00Moving or stopping fluids
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    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10TTECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/25Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation
    • Y10T436/25375Liberation or purification of sample or separation of material from a sample [e.g., filtering, centrifuging, etc.]

Definitions

  • No. 002 discloses an immunization apparatus which aims to enable high-level immunization simply and in a short time with a small amount of material.
  • Figure 7 shows the composition of this device. The fine particles fixed by the reaction 03 introduced from 05 of the reaction 0 2 react.
  • Antigen / body etc., to enhance targets and to unify the substance concentration in the liquid regardless of the reaction site.
  • This chip has the following elements.
  • the particle is kept in a fluid state with an 8000 chip.
  • the sample target can be recognized as the quality, or the quality can be recognized as the second quality.
  • the diameter of the ink passage in the above-mentioned portion and the above-mentioned portion is also formed to be larger than the particles in the above-mentioned portion, to provide the tip.
  • the chip tip is further provided with a column which is formed in the portion and prevents the particles from coming out of the tank.
  • the small diameter is larger than the fine particles, by providing an outflow column, it is possible to prevent the fine particles from leaking from the mixing tank to the outside, such as in the exhaust tip.
  • an outflow column it is possible to design a large ic path diameter, which facilitates the ic tip body.
  • an ic tip is formed in which the diameter of the iku and the diameter of the iku in the same are smaller than those of the particles.
  • the small diameter of the iku is smaller than that of the fine particles, it is possible to prevent the fine particles from leaking from the mixing tank to the outside, such as in the ic chips.
  • the above-mentioned surface part has a predetermined rolling direction. Providing ic chips made by bending along the line.
  • the IC chip is provided with the IC chip, which is connected to the outer surface which receives the force of the IC when the IC chip is exposed.
  • 002 6 is the same as in 5 above, where the tip is connected to a leak-free position of mixing when the tip is rotating in the predetermined rotation direction and the predetermined 2 rotation directions. provide.
  • 002 3 to 7 provides an icchip in which the above is a polysaccharide, a latex, or a biz.
  • 002 saccharides such as gut (made by Shikisha) In addition to its ability to immobilize antibodies and substances, it has the strength not to be destroyed by rotation. Therefore, it can be suitably used as a material.
  • [00258 provides a method for the above-mentioned in-chip.
  • This application method comprises the step of mixing the particle precursor with the particle by rotating the tip in the rolling direction and rotating the tip in two rolling directions different from the forward direction. Including.
  • the sample introduced into 002 and the fine particles with the recognition quality immobilized are combined in two directions. Regardless of the location, it is almost the same as the recognition quality sample. Furthermore, since the tip is rotated in at least two different directions of rotation, it is possible to unify the degree with the fine particle sample regardless of the position of the mixing section.
  • 00279 provides the method of using the chip in the above 8, further including the following steps.
  • 00290 provides an in-chip method, further comprising the step of repeating the above steps at 89.
  • Numeral 031 3 is a method of using an IC chip for adjusting the rolling direction and the 2 rolling direction so that in the above 8 to 0, the above-mentioned is not included in the surface pressed by the centrifugal force. provide.
  • the mixing liquid can be mixed by the rotational force used for centrifugal separation and the like.
  • the fine particles and the sample are brought into contact with each other by centrifugal force, so that the target substance or the second substance is unified regardless of where it is mixed. Furthermore, by changing the direction of rotation, the fine particle sample is mixed together, so that the degree of reaction during mixing is unified regardless of the location of mixing.
  • FIG. 3 is a front view of an equip chip.
  • the target chip for Ming is a chip targeting the use of heart force without the use of pops in the process of mixing the substance that recognizes the sample target and the fine particles. .
  • Microchip 0 has the following elements.
  • the recognition quality is fixed (below, as fine particles) or the particles before recognition standardization are kept in a fluid state. Is a space where at least sample fine particles are mixed, and a reagent may be further mixed. It is the quality of the sample that reacts with the target, or the quality that reacts with the quality of the sample.
  • the combination of the target quality and the quality and the second quality is at least selected from the group consisting of coenzyme, antigen body, gadoseptor, DNA DNA DNA NA RNA RNA PNA DNA PNA RNA. It is one kind.
  • Iku 3a b (below, collectively referred to as Iku 3) is connected to Mix 2 to introduce a sample or drug into Mix 2, and to discharge the mixture in Mix 2 to the outside.
  • Iku 3 the diameter of the mixture 2 is larger than that of the particles in the mixture.
  • the outflows 7a and b are formed only in the connected part.
  • 7a b Iku 3 is adjusted to be smaller than the fine particles. As a result, the rotation direction is set to 0, and the particles in the mixed 2 parts are prevented from flowing out to 3.
  • a plurality of 004 7a, b may be provided for 3a, b. In that case, the distance of the outflow 7a b is adjusted so as not to exceed the diameter of the fine particles.
  • 4 is a space provided between the sample mixture 2. 4 holds the reagent. The sample and reagent introduced from the above are preliminarily mixed. The combined sample reagent moves to Mix 2 through Buy. Retained in 4, for example As the body. , Sample target reacts. In addition, it promotes chromophoric reaction with the element.
  • the size and shape of 4 are not particularly limited. 4 has 0 to 30 degrees, for example.
  • the reaction part 5 is a space for holding a reagent. 2
  • the reagent in the colorimetric reaction part 5 introduced into the reaction part 5 is further mixed.
  • As the drug a substance that reacts with substances such as enzymes contained in the mixture and develops a certain color is selected. In the case of Ming, the mixture in Mix 2 is unified and it is not necessary to move the mixed amount to the reaction unit 5, so the amount of drug held in the color reaction unit 5 can be suppressed.
  • Responsive part 5 The size and shape are not particularly limited, but for example have a range of 0 to 00 degrees.
  • a reaction substance which has developed a predetermined color in the colorimetric part 5 is introduced.
  • the chromogenic substance introduced in 6 is detected in its frequency and amount, etc., by the prescribed method.
  • An optical method is generally used as the output method.
  • the light input and light output are formed in Detection 6 so that the light can be irradiated inside and the emitted light, scattered light, etc. can be detected.
  • 6 has, for example, a depth of 0 degree and a regular shape with a cross-sectional area of 0 ⁇ 25 to degree.
  • the second surface is formed along the direction of rotation, it facilitates the combination of the fine particles and the sample, making it easier to unify the reaction rate during mixing.
  • the iku tip 0 rotates the iku 0 in different rotation directions on 2, the first rotation direction, and the second rotation direction), and mixes the fine particles in the mixture 2 with the sample.
  • Mix 2 preferably has a curved surface W 2 along the rolling direction and a curved surface W 2 along the rolling direction. Can facilitate particle sampling, and
  • the force generated by rolling in the direction of rolling and the force 2 generated by rolling in the direction of 2 rolling are easy to promote when the degree of rotation is close to 80 degrees, but may be even at a smaller angle, for example, 90 degrees. it can.
  • the curved surface W 2 is smoothly continuous. The particles easily move along the mixing 2 wall when the rolling direction changes.
  • Iku 3 is connected to the outer surface that receives the force of Mix 2 at the time of Mix 2. If so, Iku 3 is connected to the leak-free position in Mix 2 when Iku-Tip 0 rotates in the above-mentioned 2nd rolling direction. In this example, Iku 3 is connected to the outer surface of curved surface W W2.
  • Iku 3a connects the spare 4 mix 2 to the position where the iku tip 0 is rotated in the predetermined 3 rotation directions and the body is introduced into the spare 4 to 2 parts by the force of force in the direction of n. do it .
  • the liquid in the reserve 4 is introduced into the mixture 2 through the nozzle 3a. 005 0
  • the iku 3b is connected to the position and the position where the mixing 2 part can flow out by the action force in the o direction.
  • the mixture is introduced into the colorimetric unit 5 through the mixer 3b.
  • the two qualities may or may not be immobilized.
  • the sample containing the two substances is introduced into Mix 2 before introducing the sample into Mix 2.
  • the sample target can be recognized as the quality or the one quality can be recognized as the second quality.
  • 005 2 or a particle in which two qualities are immobilized, or a material that easily generates a two qualities covalent compound is preferable. Therefore, it is preferable that it does not exceed 00. In addition, it is preferable that even if the granular, ictip 0 is centrifuged, it will not be destroyed in the 2 parts of the mixture.
  • Polysaccharides, latexes, and magnetic beads can be cited as examples of particles that satisfy these conditions.
  • the tomato when used, keep the mixture 2 buffered to prevent drying.
  • the total amount of water vapor and water is 6 degrees, and the 0 weight of the water is the same.
  • the position, number, shape, etc. of the equi-tips are not limited to the above example.
  • the position and shape of each plate from the plate to 2 and the position and shape of each of the mixture 2 to the detection 6 can be changed as required.
  • 00 7 2 is a mixture of the quality of the spare 4 and the mixed 2
  • the target was introduced from the sample to the spare 4 (5, spare
  • step 4 the target material is mixed and reacted (52). Then, the reaction is introduced into the mixture 2 (S3), and the immobilizate is mixed with the target substance and substance (54).
  • the target that has reacted with the target substance is introduced into the reaction part 5 where it is not made into fine particles, and a loose B separation occurs. Then, the reactive substance of the labeled target introduced into the colorimetric part 5 is mixed with the chromogenic substance to cause the labeled substance to develop color depending on the RP property.
  • the sample target can be quantified by, for example, measuring the color and measuring the results obtained.
  • 00593 shows the process in the case where the target is held in the spare 4 and the fine particles whose quality is fixed in the mixture 2 are held respectively.
  • the target is introduced from the sample to the spare 4 and the target 4 is mixed with the spare 4 ().
  • the mixture is introduced into the mixture 2 (S 2), and the immobilized body, the target and the labeled target are mixed (S 3).
  • the target-target-immobilized body reacts, and the target-target part is made into fine particles.
  • the particle-targeted target remains within 2.
  • the remaining target is introduced into the reaction part 5, which is made into fine particles, and loosely separated by B (S4).
  • the labeled target introduced into the colorimetric part is mixed with the color-developing substance, and the color is developed by the property of RP in the labeled target.
  • Color for example, the labeled target can be quantified by measuring once and measuring the obtained results. It is possible to quantify the target from the sample of the target that was used for the first time.
  • step 4 adjust the direction of rotation in step 2 when the mixture 3a and b of mixture 2 are not included in the plane that is pressed by the mixing centrifugal force in mixture 2. The same applies when the rolling direction is 3 or higher. This is to prevent leakage from the outside.
  • the second stage of Mixing 2 is not limited to colorimetric detection and processing. Depending on the intended use of iku 0, it is possible to provide the necessary functions in ikuchip 0 and execute the functions using them.
  • Ikuchip 0 related to Ming was created, and experiments were performed using the created Ikuchip 0. A 5 is true, which indicates the Mikken tip.
  • grit was used as granules
  • idiotype was used as the recognition quality
  • CP was used as the target
  • CRP solution adjusted with PS was used as the material containing the target.
  • the amount of the sample solution was 24 and the amount of the sample was 0 017 15a) indicates the stage where the tip 0 was rotated in the rotation direction where the centripetal force n was generated and the sample was introduced into the mixture 2. On this floor, the target reaction is located above the particles.
  • Rolling direction 2 rolling directions in which centrifugal force 2 is generated, and the next is the rolling direction. It can be seen that the reaction with the fine particle target progresses each time the rotation direction is changed. In addition, it can be seen that the fine particles that have reacted and the unreacted particles in the fine particles are evenly distributed. 00 3)
  • the target or the quality and the second quality are unified regardless of the location during the mixing 2. Further, by changing the rotation direction, the fine particles and the sample are mixed together in Mixing 2, so that the degree of mixing reaction is unified regardless of Mixing 2.
  • the detection 6 in 2 can be mentioned as a part that is used in a proper manner.
  • the size of microchip 0 can be reduced by shortening it.
  • 007 5 2 6 is a plan view of the iku related to 6 and 2 states.
  • the components that have the same function as the IC chip 0 in the same state are given the same symbols.
  • the diameter of the nozzle 3 is smaller than that of the particles in the mixture 2 part in the mixture 2 part.
  • a process using the IC chip 20 and a method of using the IC chip 20 are the same as those in the above embodiment.
  • Ming iku chip is medical, food. It is applicable to clinical chips, environmental analysis chips, gene analysis chips, tank chips, chips, chromatograph chips, cell chips, pharmaceutical drug chips, and iodine chips, which are used in fields such as medicines.

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Abstract

抗原・抗体など試料中のターゲットなどの捕捉率を高め、ターゲットを認識する認識物質とターゲットとの反応生成物の濃度を、反応場の場所にかかわらず均一化する。遠心力により微粒子と試料とを接触させることで、ターゲットと認識物質との接触時間が、混合槽12中の場所にかかわらず均一化される。さらに、回転方向を変えることにより、微粒子と試料とを混合槽12で均一に混合するので、混合液中の反応物の濃度が混合槽12の場所にかかわらず均一化される。均一な濃度を有する混合液が得られれば、混合工程後の後工程には、混合液全てを用いなくてもその一部を抽出して用いればよい。従って、混合工程の後工程に用いる部分に導入する溶液の量を減らし、マイクロチップ10全体を小型化することができる。

Description

術分野
0001 、 イク チップ 用方法、 イク 路及び イク チップに関し、生 体物質を分離、混合、検出するために利用される イク 路及びこれを備えた イ ク チップの 用方法、 イク 路及び イク チップに関する。
0002 には、微量 料で簡便に短時間で高 度な免疫 可能とすること を目的とする免疫 置が開示されて る。 7は、この 置の 成を 示す である。 0 の 05 ら導入された 、反応 03に固定 れた微粒子 02 反応する。
200 004628 報
発明の
0003 し し、特許 の 置では、 液を 粒子 02 接触させるためには 、ポ プが用 られる 推測される。この 0 は、遠心 能な構成 を有して な らである。し しポ プでの では、 の 置に わらず、 流速を一定に制御することが困難である。これは、 速 合や、 何ら の ンクションを通過する場合、顕著に表れる。その 果、 液中の 抗体を確 実に するこ ができず、試料などの 液 微粒子との 間が、反応 03 の 所によ て変わ てしま 、抗原 応などにより じる反応物の 度が反応 03内で不均一になる。
0004 8は、インク 、試料 タ ゲッ 反応する 質が固定された微粒子 、をポンプの により接触させた場合の を示す 真である。 しての チヤン の 入口 らチヤ 内に導入された試料 、ポ プロQに取り 付けられるポ プにより、 入口 らポンプ Qに流動する。その 中で、試料 液とチヤ 内の微粒子 が接触することにより、タ ゲット 認識 質 の 応を 生じさせる。タ ゲットの 、チヤン の 子の色の変化により れて る。 ポ プにより 液を送 するに 、 入口 を中心 してタ ゲットがチヤ 内に広が て 。ただし、その 、 入口 高 、 入口 ら離 れるに 低 な 、チヤン の ではタ ゲットを で確認できな ほどである 0005 8が示すよ に、ホンプで反応 に送 した場合、タ ゲッ 認識 質と
反応 内で不均一にな てしま 。これでは、反応 内で生成された反応 を部 分 出し、その後の処理に用 るこ が難し 。 内での 度の 均一さが後 段 理に影響するこ を防止するためには、反応 内の てを後段 理 に用 る 要がある。このため、反応 の 段の 部分、例え に お て、試料や 薬の量を減量することが難し 、 イク チップ 体の きさを小型 化しに と 題がある。
0006 、抗原・ 体など タ ゲットなどの を高め、 液中に存在 する物質 度を、反応 所に わらず 一化するこ を目的 する。
0007 題を解決するために、 は、遠心力を用 て 料を処理する イク チップを提供する。この イク チップは、以下 素を供えて る。
・ タ ゲットを認識する または前記 質を認識す る 2 質が に固定化されてなる微粒子と、前記 料 、を混合する 、
・ に連結されて る イク 。
0008 イク チップにお て、前記 、前記 粒子を流動 能な状態に保 持して る。
0009 心力に り微粒子と試料とを接触 ることで、タ ゲット 質と
または 質 第2 質と 間が、混合 の 所に わ らず 一化される。さらに、回転方向を変えるこ により、微粒子と試料とを混合 一に混合するので、混合 中の 応物の 度が混合 所に わらず 一 化される。
0010 記のよ に な 度を有する 得られれば、混合 の 程には 、混合 てを用 な てもそ 部を抽出して れば 。 て、混合 程 程に用 る部分に導入する 液の量を減らし、 イク チップ 体を小型化す ることができる。 程の 程に用 る部分としては、例え 2の 検 出 を挙げることができる。また、混合 にさらに キシ グのための を 設けて る場合、その を短 したり するなどによ 、 イク チップ 体をⅡ、 型化するこ ができる。
00 粒子は、 に保持 れて る。 の 粒子は、
または 2 質が固定化 れた でもよ し、 または 2 質が固定化されて な であ てもよ 。 者の 合、第 または 2 質を含 薬を混合 に導入するこ により、混合 部で に第 または 2 質を固定化し、微粒子を生成することがで きる。そ 、生成された微粒子 、試料 、を遠心力に り接触させるこ で、試料 タ ゲットを 質に、または前記 質を第2 質に認識さ せることができる。
0012 2は、前記 にお て、前記 イク と前記 分に おける前記 イク 路の径が、前記 部の 粒子 りも大き 形 成されて イク チップを提供する。この イク チップは、前記 分に形成 され、前記 槽からの 粒子の 出を防止する 柱をさらに備えて る。
0013 イク 小径が微粒子 よりも大き 場合、流出 柱を設けてお こ とにより、 イク チップの 中などに微粒子が混合槽 ら外部に漏れてしま こと を防ぐ。また、流出 柱を設けるこ により、 イク 路 径を大き 設計できる で、 イク チップ 体 容易になる。
0014 3は、前記 にお て、前記 イク と前記 の 分に おける前記 イク 路の径が、前記 粒子の よりも小さ 形成されて る イク チップを提供する。
0015 イク の 小径が微粒子 よ も小さ 場合、 イク チップの 中など に微粒子が混合槽 ら外部に漏れてしま ことを防ぐこ ができる。
[0016 4は、発明 ~3にお て、前記 の 面の 部が、所定の 転方向 沿 て 曲して 成されて る イク チップを提供する。
001 の 面が回転方向に沿 て 成されて ると、回転方向に沿 て イク チ ップが回転した場合、混合 が湾曲した壁面に沿 て移動しやす 。その ため、微粒子 試料とを 一に混合しやす なる。
0018 2 上 回転軸を中心 して イク チップを回転 せる場合、それぞれの 転方 向に沿 た 曲面を混合 有して るこ が好まし 。 なる回転方向に沿 て 回転さ るこ に り、それぞれの 転にお て内容 が混合 れやす なる。その 果、混合 の 度がさらに 一化されやす なる。
0019 5は、前記 ~4にお て、前記 イク 、前記 に ける 合時に、前記 の の 力を受ける 外の 面に連結されて る イク チップを提供する。
0020 イク 、混合 における 程で、混合 の 力を受けな 面に連 結 れて ることが好まし 。 えば、 イク 、混合時に混合 力を受 ける 面と対向する 面などに連結されて ることが好ま 。 料を混合 に導入 する イク 、混合 を後段の 程のために排出する イク 路から
部に、混合 流出することを防止しやす なる。
0021 6は、前記 ~5にお て、前記 イク 、所定の 転方向と 所定の 2 転方向とに イク チップ 身が回転して る場合に、混合 の 漏れな 位置に連結されて る イク チップを提供する。
0022 粒子と試料とを回転に り 合するには、実際には イク チップを 少な も2 向に回転する必要がある。 方向の だけでは、遠心力が一方向に し ず、混合 の 度を 一化することができな らである。そのため、 イク の 、 転方向と第2 転方向とに イク チップが回転して るときに、混合 漏れな 位置に設けられる。なお、 イクロチップの 転軸は、 3 上あ ても わな 。
0023 7は、前記 ~6にお て、前記 が多糖類 、ラテッ クス 子、または ビ ズである イク チップを提供する。
0024 糖類 、例えば ト ( 式会社製 )は、抗原 抗体、 素などを固定化する としての 能に加え、回転により破壊されな 強 度を有して る。そのため、 明の として好適に用 ることができる。
[0025 8は、前記 の イク チップ 用方法を提供する。この 用方法は 、 の 転方向に前記 イク チップを回転させ、その 前 転方向とは 異なる 2の 転方向に前記 イク チップを回転させるこ により、前記 粒子 前 記 料とを前記 で混合する ステップを含む。
0026 に導入された試料と、認識 質が固定化された微粒子 、を2 向の 転に より 合する。 の 所に かわらず、認識 質 試料との はおおむ ね 一になる。さらに少な も異なる2 の 転方向に イク チップを回転さ る ため、微粒子 試料との の 度を、混合 部の 置に わらず 一化す るこ ができる。
0027 9は、前記 8にお て、以下 ステップをさらに含む イク チップの 用方法を提供する。
・ 2 転方向とは異なる 3 転方向に前記 イク チップを回転さ せるこ によ 、前記 の の 部を前記 イク の ずれ により 出する ステップ、
・ ステップで排出された 部を用 、前記 タ ゲットの ステップ。
0028 8で得られる の の 所に わらず 一であるため、混 合 の の 部を抽出するだけで、後 程を実行することができる。そのた め、 程に必要 される 薬の量などを削減するこ ができる。
0029 0は、前記 8 9にお て、前記 ステップを繰 返す り返し ステップをさらに含む イク チップ 用方法を提供する。
0030 なる方向の 転を繰 返すこ により、混合 の 度の 一化を高めることができ る。
0031 は、前記 8~ 0にお て、前記 遠心力を受け て押し けられる 面内に、前記 イク 前記 の が含まれな よ 、前記 転方向及び 2 転方向を調整する イク チップの 用方法 提供する。
0032 合時に、 イク 路 ら 外部に漏れな 、回転方向を調整する。
これによ 、遠心 離などに用 られる回転力に り、混合 の 液を混合するこ とができる。
0033 明の イク チップを用 れば、遠心力により微粒子と試料とを接触させること で、タ ゲット 質 の または 質 第2 質との 間が、混合 の 所に わらず 一化される。さらに、回転方向を変えるこ とにより、微粒子 試料とを混合 一に混合するので、混合 中の 応物の 度が混合 の 所に わらず 一化 れる。
面の 単な説明
0034 明の イク チップの 態を示す 面図
2 明 イク チップを用 た プ セス( )の
3 明の イク チップを用 た プ セス(2)の
4 明の イク チップの 用方法を説明するための 連動作を示す 面図 5 明に係る イク チップの 用方法の における一連の 作を示す 6 2 態に係る イク チップの 面図
7 来の イク チップの 成を示す
8 来の イク チップ 用方法を説明する平面
明を実施するための 良の
0035
( ) イク チップの 体構成
は、 態に る イク チップ 面図である。 明が対象とする イク チップは、試料 タ ゲット タ ゲットを認識する物質と微粒子とを混合 する工程にお て、 の 動にポ プを使わず 心力を用 ることを前提とした イク チップである。
0036 イクロチップ 0は、以下 素を有して る。
0037 (a) は、試料を外部 ら イク チップ 0 部に導入する。
は、 入した試料を一時的に保持する機能を有して て よ 。
0038 b)
2は、認識 質が固定化された ( 下、微粒子と )または認識 定化前の粒 、流動 能な状態に保持して る。 は、少な とも試料 微粒子 が混合される空間であり、さらに試薬が混合される場合 ある。 定化される 、試料 タ ゲッ 反応する 質か、または前記 質と反応する 2 質である。タ ゲット 質 み合 わせ、 質と第2 質との み合わせは、例えば、 、 助酵素 、抗原 体、 ガ ド セプタ 、DNA DNA DNA NA RNA RNA PNA DNA PNA RNA らなる群 ら選択される少な も1種である。
2に ては、詳細を後述する。
0039 c) イク
イク 3a b( 下、まとめて イク 3と )は、混合 2に連結さ れ、混合 2に試料や 薬を導入したり、混合 2内 混 を外部に排出した りする。 イク 3にお て、混合 2 の 分に ける径は、混合 部の 粒子の よりも大き 形成されて る。ただし連結 分にほ、流出 7a, bが形成されて る。 7a b イク 3 の 、微粒子の よ 小さ なる に調整されて る。これにより、 なる回転方向が イク 0に されて 、混合 2 部 粒子が イク 3に流出することを防 止する。
0040 7a, bは、 の 3a、bに対して複数 設けても良 。そ 合 には、流出 7a bの 隔が微粒子の径を超えな よ に調整 れる。
0041 d)
4は、試料 混合 2 の間に設けられた空間である。 4は、試薬を保持して る。 ら導入された試料と試薬 は 、予備 4 混合される。 合された試料 試薬とは、 イク aを通 混合 2に移動する。 4に保持 れる 、例えば としての 体である。 、試料 タ ゲット 反応する。さら に、 、 素の きによ て発色 応を促進する。 4の きさや形状は特に限定されな 。 4は、例え 0~30 度 有して る。
0042 (e) 応部
応部 5は、試薬を保持する空間である。 2 ら 応部 5に導 入された 、比色 応部 5内 試薬とは、 らに混合される。 薬としては、 混合 に含まれる酵素などの 質と反応し、一定の色を発色する物質が選択 される。 明では、混合 2内 混 の 一化されており、混合 量を 応部 5に移動させる必要がな ため、比色 応部 5の 保持する 薬の量を抑えることができる。 応部 5 きさや形状は特に限定されな が、例えば 0~ 00 度の 有して る。
0043 ㈲
6には、比色 応部 5にお て所定の色を発色した反応物質が導入され る。 6に導入された発色 応物質は、所定の 出方法により、その 度や量 などが検出される。 出方法は、光学的方法が一般的に用 られる。 学的 出方 法を用 る場合、検出 6には、内部に光を照射し、その 射光 、散乱光 などを検出できるよ 、光の入 、光の出 が形成されて る。
6は、例えば 0 度の さを有し、断面積が0・ 25~ 度の 定形状を 有して る。
0044 (2)
(2 ) の
前 2の 面の 、所定の 転方向に沿 て 曲して 成されて る。 2の 面が回転方向に沿 て 成されて ると、微粒子と試料と 合 を促進し、混合 中の 応物 度を 一化しやす 。
0045 明の イク チップ 0は、 2 上の異なる回転方向 下、第 転方向、 2 転方向 )に イク 0を回転させ、混合 2内の微粒子と試料とを混 合する。 2内の微粒子 試料とを回転により 合するには、一方向の けでは、混合 の 度を 一化するこ ができな らである。そのため、混合 2 は、 転方向に沿 た 曲面W 2 転方向に沿 た 曲面W2を有し て るこ が好ま 。 粒子 試料 合を促進するこ ができ、 ては
度 一性を高めるこ ができる。
0046 転方向の 転で生じる 心力 、 2 転方向の 転で生じる 心力 2 は、なす 度が 80度に近 ほど 合を促進しやす が、より さな角度、例えば 90 度の 度でも 合することができる。し し、湾曲面W 2は、滑ら に連 続して るこ が好まし 。 転方向が変わるときに、微粒子が混合 2 壁に沿 て移動しやす らである。
0047 (2 2) イク と
イク 3は、混合 2における 合時に、混合 2の の 力を受 ける 外の 面に連結されて 。 えれば、 イク 3は、前述の 転方向 第2 転方向 に イク チップ 0が回転して 場合、混合 2 内の混 漏れな 位置に連結されて 。この例では、湾曲面W W2 外の面に、 イク 3は連結されて 。
0048 これにより、試料を混合 2に導入する イク 3aや、混合 応部
5に排出する イク 3b ら 2 部に、混合 流出するこ を防止 しやす なる。
0049 なお、 イク 3aは、所定 3 転方向に イク チップ 0を回転させた き、 nの 向に働 心力により予備 4 ら 2 部に 体 が導入される 置及び きに、予備 4 混合 2 を連結して 。これに より、予備 4内 液 、 イク 3aを通 て混合 2に導入される。 0050 また、 イク 3bは、所定の 4 転方向に イク チップ 0を回転させたと き、 o 向に働 心力によ 、混合 2 部の 流出 能 な位置及び きに連結されて 。これにより、混合 、 イク 3bを通 て 比色 応部 5に導入される。
0051 (2 3)
、 2に保持されて 。 には、 または 2 質が固定化されて てもよ 、固定化されて な てもよ 。 者 の 合、試料を混合 2に導入するに先立ち、 または 2 質を 含む 薬を混合 2に導入する。これにより、混合 2 部で に第 、 または 2 質を固定化し、微粒子を生成することができる。その 、混 合 2内に試料を導入し、生成された微粒子と試料 を遠心力により接触させること で、試料 タ ゲットを 質に、または 1 質を第2 質に、認、 させることができる。
0052 または 2 質が固定化される粒状 、 また は 2 質 共有 合を生成しやす 子が好まし 。 の 、 00 を超えな ことが好まし 。さらに、粒状 、 イク チップ 0が遠心 離に けられても、混合 2 部で破壊されな 度の 度を有して るこ が好 ま 。このよ な条件を充足する粒状 の 例として、多糖類 、ラテ クス 子、磁性ビ ズを挙げるこ ができる。
0053 糖類 まし としては、 ト ( 式会社製
)が挙げられる。なお、 ト を として 場合、混合 2に緩 衝 を保持させ、 ト 燥を防止する。 ト とを合わ た容 量は、例えば 6 ット 度であり、この中で ト が占める 0 イク ット 度である。
0054 ビ ズの 例としては Fe O Y FeO Co Y eO NC Zn)O・FeO (
2 3 2 2 C Zn) ・FeO Mn Zn) ・Fe O NZn)O FeO S 6Fe O Ba ・6FeO O
2 3 2 2 2 2 で被覆したF 、各種 分子 (ナイ 、ポ アク ア ド、タ ク質など) ライト 粒子、磁性 粒子などを挙げることができる。 0055 なお、 イク チップの 置や数、形状などは、上記 例に限定されな 。 、 皿 ら 2に至る各 の 置や形状、混合 2 ら 検出 6に至る各 の 置や形状は、必要に応じて 計変更するこ が できる。
0056 (3) イク チップにおける反応プ セス
次に 2 3を 、 イク チップ 0における反応プ セスの れに て説明する。
00 7 2は、予備 4に 質 しての 体が、混合 に 2
質を固定化した微粒子が、それぞれ 持されて る場合の プ セスを示す。 こ 図では、 2 質 して、 質 応を示す 定化
体を考える。
0058 まず、試料 ら予備 4にタ ゲットを導入し(5 、予備
4でタ ゲット 質とを混合して反応させる(52)。 で、反応 を混合 2に導入し(S3)、固定化 体と、タ ゲット 質 の 応物質 、 質 、を混合する(54)。これによ 、 質 固定化
体とが反応し、 質が微粒子に される。 粒子に された
2内に留まる。 方 第 質と反応したタ ゲットが微粒子に されることな 応部 5に導入され、 わゆるB 離が行われる 。 そ 、比色 応部 5に導入された、標識 体 タ ゲット の 応物質を発色物 質と混合し、標識 体におけ RPの 性によ て発色させる。 色した を 例えば 度測定し 得られた結果を 算するこ によ 、試料 タ ゲットを定 量することができる。
0059 3は、予備 4に タ ゲットが、混合 2に 質を固定化し た微粒子が、それぞれ 持されて る場合の プ セスを示す。この図では、 質 して、タ ゲッ 応を示す 定化 体を考える。 0060 まず、試料 ら予備 4にタ ゲットを導入し、予備 4でタ ゲット タ ゲッ を混合する( )。 で、混合 を混合 2 導入し( S 2)、固定化 体 、タ ゲット 、標識タ ゲット 、を混合する(S 3)。こ れに り、タ ゲット タ ゲット 固定化 体 が反応し、タ ゲット タ ゲッ の 部が微粒子に される。 粒子に されたタ ゲット タ ゲットは 2内に留まる。 方、残りのタ ゲット タ ゲットは 、微粒子に されるこ な 応部 5に導入され、 わゆるB 離が行わ れる(S 4)。その 、比色 応部 に導入された、標識タ ゲット タ ゲットを 発色物質と混合し、標識タ ゲットにおける RPの 性によ て発色させる。 色し を例えば 度測定し、得られた結果を 算することにより、標識タ ゲット を定量する。 初に用 た タ ゲットの 試料の の 、定量した タ ゲットの 、 らタ ゲットを定量するこ ができる。
0061 (4) イク チップ 用方法
4は、 の イク チップ 0の 用方法の である。ここでは、混合 2 には、 または 2 質が固定化された が予 保持されて る場合を説明する。 下の 用方法は、試料 ステップ、 ステップ、 2 4 ステップ ステップを含む。
0062 (4 ) ステップ
まず、 4(a)に示すよ に、 3 転方向に イク チップ 0を回転さ 、
nで示す方向の 心力を印 する。これにより、試料 の 料及び
4 薬を、混合 2に導入する。これにより、試料 タ ゲット 混合 2中の第 質と、または予備 4 ら導入される 質と混合 2中の第2 質と、が接触する。 2における反応物質同士の 、混合 2 部の 所に わらず 一となる。
0063 (4 2) ステップ
で 4(b)に示すよ に、 転方向に イク チップ 0を回転さ 、 で示す方向の 心力を印 する。これにより、混合 2内 液体 微粒子 を 合する。 異なる方向の 心力が加わることで、 出物質 度 の 一性を高めることができる。 転方向 心力 、試料を混合 に導 入する時に印 される 心力 n 80度に近 ほど、反応物質の 度を 一化 しやす 向にある。 (4 3) 2~ 4 ステップ
4(c)に示すよ に、 2 転方向に イク チップ 0を回転させ、 2 ステッ プを 。これにより、混合 2内の液体と微粒子 を 合する。 異 なる方向の 心力が加わることで、 出物質 度の 性を らに高めることが できる。 転方向に回転中に働 心力 と、 2 転方向に回転中に働 心力 2 80度に近 ほど、反応物質の 度を 一化しやす 向にある。 0064 なお、混合 の 粒子と試料とを回転によ 合するには、実際には イク を少な も異なる2 向に回転する必要がある。 方向の だけでは、遠心 力が一方向にし ず、混合 度を 一化することができな らである。な お、 イク チップの 転軸は、3 上あっても わな 。
0065 その 、再度 転方向に イク チップ 0を回転させ( 4 ))、 3 ステ ップを 。さらにその後も 2 転方向に イク チップ 0を回転させ( ( c )、 4 ステップを行 。このよ に、回転方向を変えるこ により 心力 2 を繰 返し 、混合 中の 応物質 度の 一性をさらに高めるこ ができる 0066 転方向の 少な とも 行 ( ステッ )、その後は試料や 薬の 度、粒状 の きさや重さ、混合 2の 状などに応じ、 2, 3 ‥の ステップを 行すれば 。 要に応じ、 5, 6‥・ ステップを実行 して 。
0067 4 ステップにお て、混合 2内の混 遠心力を受けて押し けられる 面内に、 イク 3a, b 混合 2 の が含まれな 、 ステップにおける回転方向を調整する。 転方向が3 上の場合も同様であ る。 2 ら 外部に流出するのを防止するためである。
0068 (4 4) ステップ
合の 後、図4( )に示すよ に、 4 転方向に イク チップ 0を回転させ る。これに り、混合 2 ら 応部 5に移動させる。この き、混合 2中の混 てを 応部 5に移動 せる必要はな 。 中の 応 部の 、混合 2の 所によらず 一化されて る で、そ 部を 応 部 5に移動さ れば りる。そのため、比色 応用 薬 量を抑えることができる。 その 、比色 応部 5で発色した反応 を検出 6に導入し、反応物質 析や 定を行 ことに り、タ ゲットの 出を行 。
0069 なお、混合 2の後段 、比色 検出 ・ 理に限定されな 。 イク 0の 用目的に応じ、必要な機能 イク チップ 0に設け、 それら を用 た 理を実行するこ ができる。
0070 明に係る イク チップ 0を作成し、作成した イク チップ 0を用 て実験 を行 た。 5は、 明の イク チップ を示す 真である。こ 験にお て、粒状 としては ト を、認識 質 しては イディオタイプ 体を、タ ゲット してはC Pを、タ ゲットを含む 料 してはP Sで調整したCRP 液を用 た。また、試料 液の量は 24 、 ト の量は であ た 0071 5 a)は、 向 心力 nが発生する回転方向に イク チップ 0を 回転し、混合 2に試料を導入した段階を示す。こ 階では、微粒子の ち 上 に位置する のが、タ ゲット 反応して る。
00 2 5(b 、 ( 、 (d)は、それぞれ順に、 向の 心力 が発生する
転方向、遠心力 2が発生する 2 転方向、次 でも 転方向に、 0 ず イク チップ 0を回転した後の状態を示す。 転方向を変えて回転する度 に、微粒子 タ ゲットとの 応が進行して ることが分 る。また、微粒子 中で反 応した微粒子と未 応の 粒子 は、偏りな 等に分布して るこ が分 る。 00 3 )
心力によ 微粒子と試料とを接触させることで、タ ゲッ 質との または 質と第2 質との 間が、混合 2中 場所に わらず 一化される。さらに、回転方向を変えることに り、微粒子と試料とを混合 2で 一に混合するので、混合 中 応物の 度が混合 2の 所に わ らず 一化される。
0074 記のよ に 一な 度を有する 得られれば、混合 の 程には 、混合 てを用 な てもそ 部を抽出して れ よ 。 て、混合 程の 程に用 る部分に導入する 液 量を減らし、 イク チップ 0 体を小型化 するこ ができる。 程の 程に用 る部分 しては、例え 2の 検出 6を挙げることができる。また、混合 2の に らに キ グのため の を設けて る場合、その を短 したり するなどにより、 イクロチップ 0 体を小型化することができる。
0075 2 6 、 2 態に係る イク の 面図である。 態の イ ク チップ 0 同様の 能を有する構成 素に ては、同一の 号を付して して る。 実施 態 イク チップ20では、 イク 3の径が、混合 2との 分にお て、混合 2 部の 粒子の よりも小さ 形成されて る。 これによ 、 なる回転方向が イク チップ 0に されても、混合 2 部の 粒子が イク 3に流出するこ を防止することができる。 実施 態の イ ク チップ20の他の構成、 イク チップ20を用 た プ セス、 イク チップ2 0の 用方法などに ては、前記 態と同様である。
上の
明の イク チップは、医療、食品。、 薬など 野で使用される臨床 チ ップ、環境分析チップ、遺伝子分析チップ、タン ク チップ、 チップ、ク トグラフチップ、細胞 チップ、製薬スク グチップ、 イオセ サなどに適 用 能である。

Claims

求の
心力を用 て 料を処理する イク チップであ て、
前記 タ ゲットを認識する または前記 質を認識 する 2 質が に固定化されてなる微粒子 、前記 料 、を混合す る 、
前記 に連結されて る イク 、を備え、
前記 、前記 粒子を流動 能な状態に保持して る、
イク チップ。
2 イク と前記 分における前記 イク 路 径が、前 記 部の 粒子の より 大き 形成されてお 、
前記 分に形成され、前記 槽 らの 粒子の 出を防止する 柱をさらに備える、請求 に記載の イク チップ。
3 イク と前記 と 分における前記 イク 路の径が、前 記 粒子の よりも 、さ 形成されて る、請求 に記載 イク チップ。
4 の 面の 、所定の 転方向に沿 て 曲して 成されて る、 請求 ~3 ずれ に記載 イク チップ。
5 イク 、前記 における 合時に、前記 の の 力 を受ける 外の 面に連結されて る、請求 ~4の ずれ に記載の イク チップ。
6 イク 、所定の 転方向 所定の 2 転方向 に イク チップ 身が回転して る場合に、混合 の 漏れな 位置に連結されて る、 請求 ~4の ずれ に記載の イク チップ。
7 、多糖類 、ラテックス 子、または ビ である、 請求 6の ずれ に記載の イク チップ。
8 に記載の イク チップの 用方法であ て、
転方向に前記 イク チップを回転させ、その 前 の 転方向 は 異なる 2の 転方向に前記 イク チップを回転させることに り、前記 粒子 前 記 料 を前記 で混合する ステップを含む、 イク チップの 用方 。
9 2 転方向とは異なる 3 転方向に前記 イク チップを回転さ せるこ に り、前記 の の 部を前記 イク の ずれ によ 出する ステップ 、
前記 ステップで排出された の 部を用 、前記 タ ゲット ステップ 、
をさらに含む、請求 8に記載の イク チップの 用方法。
0 ステップを繰 返す 返しステップをさらに含む、請求 8または9 に記載の イク チップの 用方法。
ステップにお て、前記 遠心力を受けて押し けら れる 面内に、前記 イク 前記 の が含まれな 、前記 転方向及び 2 転方向を調整する、請求 8、9または 0に記載の イク チップの 用方法。
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