WO2000026229A1

WO2000026229A1 - 2-substituted-d-homooxasteroid derivatives

Info

Publication number: WO2000026229A1
Application number: PCT/JP1999/005828
Authority: WO
Inventors: Naoyuki Koizumi; Shigeki Iwashita; Motohiro Kobayashi
Original assignee: Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd.
Priority date: 1998-10-29
Filing date: 1999-10-22
Publication date: 2000-05-11
Also published as: AU6228299A

Abstract

Oxasteroid derivatives represented by general formula (a) which have excellent effects of inhibiting the polymerization of tubulin, inhibiting neovascularization and/or stabilizing p53 protein Zn formula (a) one of A and B represents C=O or CH2 while the other represents O; and R represents lower alkoxy. These compounds are useful in preventing or treating malignant tumor, endometriosis, chronic rheumatoid arthritis, diabetic retinopathy, ischemic heart diseases, arteriosclerosis, intractable skin ulcer, psoriasis, Kaposi's sarcoma, leproma, etc.

Description

明細書 Specification

2—置換— D—ホモォキサステロイド誘導体技術分野 2-Substituted D-Homooxasteroid Derivatives

本発明は新規な 2—置換一 D—ホモォキサステロイド誘導体に関し. さらに詳しくは式 The present invention relates to novel 2-substituted mono-D-homoxosteroid derivatives.

式中、 A及び Bの一方は C = 0又は C H ₂を表わし、且つ他方は

Where one of A and B represents C = 0 or CH ₂ and the other is

0を表わし、 Rは低級アルコキシ基を表わす、 Represents 0, R represents a lower alkoxy group,

で示されるォキサステロイド誘導体に関する。 And a oxasteroid derivative represented by

背景技術 Background art

チューブリンは微小管を構成する基本蛋白質であり、このチューブリン · α 3ヘテロ 2量体が補助的な微小管結合蛋白（M A P s、て蛋白）と規則正しく重合して、微小管を形成している。微小管は、動物，植物真菌等の真核生物の細胞に広く存在する直径 2 5 n m前後の管状蛋白繊維であり、細胞周期のなかで重合 ·脱重合により消長するが、その機能は、有糸***装置の形成、細胞形態の形成と維持、鞭毛 ·繊毛運動、神経細胞 ·色素細胞等における物質輸送、ホルモン分泌、細胞膜の流動性など極めて多岐にわたっている。この微小管系に作用してチューブリンと結合してチューブリンの重合を阻害する化合物は、細胞***阻害など様々な生物活性を示し、抗癌剤をはじめとして、抗カビ剤、駆虫剤、除草剤などとしての幅広い効果が期待される。一方、血管新生とは主に細静脈の血管内皮細胞が新しい血管網を形成することであるが、この血管新生は、固形腫瘍の発育過程をはじめとして、創傷の治癒過程、炎症、子宮内膜症、関節リウマチ、糖尿病性網膜症、虚血性心疾患、動脈硬化、尋常性乾癬など多くの疾病において観察されている。これらの疾病においては、血管新生を誘導する様々な血管新生因子が複雑に作用し合って新しい血管網が形成され、それが腫瘍の増大や転移をはじめとして、種々の疾病に関与する細胞を増殖させ、症状を悪化させていく一因となっていると考えられている。従って、これらの疾病において見られる血管新生を効果的に阻害することができる化合物は、悪性腫瘍、子宮内膜症、関節リウマチ、糖尿病網膜症、動脈硬化などの予防又は処置剤としての幅広い効果が期待される。 Tubulin is a basic protein that constitutes microtubules, and this tubulin α3 heterodimer polymerizes regularly with auxiliary microtubule-associated proteins (MAPs, proteins) to form microtubules. I have. Microtubules are tubular protein fibers with a diameter of about 25 nm, which are widely found in eukaryotic cells such as animals and plant fungi, and are destroyed by polymerization and depolymerization in the cell cycle. The formation of the mitotic apparatus, the formation and maintenance of cell morphology, flagella and ciliary motility, substance transport in neurons and pigment cells, hormone secretion, and fluidity of cell membranes are extremely diverse. Compounds that act on this microtubule system and bind to tubulin to inhibit tubulin polymerization show various biological activities such as cell division inhibition, and include anticancer drugs, antifungal agents, anthelmintics, herbicides A wide range of effects are expected. On the other hand, angiogenesis is mainly the formation of new vascular networks by vascular endothelial cells in venules. This angiogenesis involves the process of solid tumor development, wound healing, inflammation, and intrauterine It has been observed in many diseases, such as meningiosis, rheumatoid arthritis, diabetic retinopathy, ischemic heart disease, arteriosclerosis, and psoriasis vulgaris. In these diseases, various angiogenic factors that induce angiogenesis work in a complex manner to form a new vascular network, which proliferates cells involved in various diseases, including tumor growth and metastasis. It is thought to be one of the causes of worsening the symptoms. Therefore, compounds that can effectively inhibit angiogenesis found in these diseases are useful as preventive or therapeutic agents for malignant tumors, endometriosis, rheumatoid arthritis, diabetic retinopathy, arterial sclerosis, etc. A wide range of effects is expected.

また、 p 5 3蛋白は、癌抑制遺伝子である p 5 3遺伝子により発現される 3 9 3個のアミノ酸から構成される蛋白質であり、 D N Aの完全な状態を保持することを特別の役目としている。この P 5 3蛋白は正常な身体の細胞にはほとんど見られないが、 D N Aに障害が起こると、細胞の P 5 3蛋白のレベルが上昇し、まず、細胞周期を G 1期に止め、 D N A複製を行う S期への進行を阻止し、この間に D N Aの修復を行わせる力、、あるいはその細胞をアポトーシスに導くように作用する。しかし、 P 5 3蛋白は、通常はかなり大きな分子分解速度を有する代謝回転が速い蛋白質であり、 D N Aの障害により起こる細胞の癌化の過程で産生された P 5 3蛋白は、多くの癌細胞には効果のない変異型の p 5 3蛋白が大量に含まれているという事実が示すように、容易に変異を受け不活性化されやすいのである。このように p 5 3蛋白が欠損又は不活性化されることにより、発癌性の変異を受けた細胞の増殖が阻止されなくなり、また、そのような細胞が***してさらに発癌性の変異が作られるのを許すこととなる。従って、 p 5 3蛋白の安定化作用を示す化合物は、 D N A障害の修復を効果的に促進することができ、 D N Aの障害により生じる疾病、例えば癌等の予防又は処置のために、単独であるいは P 5 3遺伝子治療における補助剤としての用途が期待される。 The p53 protein is a protein composed of 393 amino acids expressed by the p53 gene, which is a tumor suppressor gene, and has a special role to maintain the integrity of DNA. . This P53 protein is rarely found in normal body cells, but when DNA damage occurs, the level of P53 protein in the cells rises. It blocks the progression to the replicating S phase, during which it repairs DNA, or acts to lead the cell to apoptosis. However, the P53 protein is a protein with a high rate of turnover that usually has a considerably high molecular degradation rate, and the P53 protein produced in the process of canceration of cells caused by DNA damage is Cancer cells are easily mutated and inactivated, as evidenced by the fact that cancer cells contain large amounts of ineffective mutant p53 protein. Deletion or inactivation of the p53 protein in this way prevents the growth of cells with oncogenic mutations from being blocked, It would also allow such cells to divide and make more oncogenic mutations. Therefore, a compound exhibiting a p53 protein stabilizing effect can effectively promote the repair of DNA damage, and can be used alone for the prevention or treatment of diseases caused by DNA damage, such as cancer. Alternatively, it is expected to be used as an adjunct in P53 gene therapy.

しかしながら、チューブリン重合阻害剤、血管新生阻害剤、 p 5 3蛋白の安定化作用剤として、上記の疾病に十分対処しうるような化合物は未だ開発されていないのが現状である。 However, as a tubulin polymerization inhibitor, an angiogenesis inhibitor, or a p53 protein stabilizing agent, compounds capable of sufficiently coping with the above-mentioned diseases have not yet been developed.

なお、近年、エストラジオールの哺乳動物代謝物である 2—メトキシエストラジオールがチューブリン重合阻害活性、有糸***阻害活性及び抗腫瘍活性を示すこと (J. Med. Chem. Vol. 38, 2041-2049(1995)) 、また、血管新生阻害活性を示すこと（Cancer Research, Vol. 57， 81 - 86 (1997)) 、さらに、 p 5 3蛋白の安定化作用を示すこと（Oncogene, Vo 1. 14, 379-384(1997)) が報告されたが、この化合物は代謝不活性化を受けやすいという欠点を有している。 Recently, 2-metoxyestradiol, a mammalian metabolite of estradiol, has shown tubulin polymerization inhibitory activity, mitosis inhibitory activity and antitumor activity (J. Med. Chem. Vol. 38, 2041-2049). (1995)), exhibiting angiogenesis inhibitory activity (Cancer Research, Vol. 57, 81-86 (1997)), and exhibiting a stabilizing effect on p53 protein (Oncogene, Vo 1.14). 379-384 (1997)), but this compound has the disadvantage of being susceptible to metabolic inactivation.

今回、ステロイドの D環部に酸素原子が導入された前記式（ I ) で示される新規な 2—置換— D—ホモォキサステロイド誘導体が、優れたチュ一プリン重合阻害作用、血管新生阻害作用及びノ又は p 5 3蛋白の安定化作用を示し、しかも代謝不活性化を受けにくいことが見出された。 This time, a novel 2-substituted-D-homoxosteroid derivative represented by the above formula (I) in which an oxygen atom has been introduced into the D ring portion of steroid has an excellent inhibitory action on tuupulin polymerization, It has been found that the compound has an angiogenesis inhibitory effect and a stabilizing effect on the NO or p53 protein and is less susceptible to metabolic inactivation.

しかして、本発明は、前記式（ I ) で示される 2—置換一 D—ホモォキサステロイド誘導体を提供するものである。 Thus, the present invention provides a 2-substituted mono-D-homoxaxasteroid derivative represented by the above formula (I).

発明の開示 Disclosure of the invention

本明細書において「低級」なる語は、この語が付された基又は化合物の炭素原子数が 6以下、好ましくは 4以下であることを意味する。 JP99/05828 しかして、前記式（ I ) において記号 Rで表わされる「低級アルコキシ基」としては、例えばメトキシ、エトキシ、 n—プロボキシ、イソプロボキシ、 n—ブトキシ、ィソブトキシ、 s e c—ブトキシ、 t e r t 一ブトキシ、 _n—ペンチルォキシ、 n _へキシルォキシ基等を挙げることができる。 As used herein, the term "lower" means that the group or compound to which this term is attached has 6 or less, preferably 4 or less carbon atoms. JP99 / 05828 However, the “lower alkoxy group” represented by the symbol R in the above formula (I) includes, for example, methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy, isobutoxy, sec-butoxy, tert One-butoxy, _n -pentyloxy, _n -hexyloxy and the like can be mentioned.

前記式（ I ) において特に好ましい化合物群は、 Rがメトキシ又はヱトキシ基を表わす場合の式（ I ) の化合物である。 A particularly preferred group of compounds in the above formula (I) is the compound of the formula (I) wherein R represents a methoxy or ethoxy group.

また、前記式（ I ) において特に好ましい別の化合物群は、 Aが C = 0又は CH₂を表わし、且つ Bが 0を表わす場合の式（ I ) の化合物である。 Another particularly preferred compound group in the formula (I) is a compound of the formula (I) in which A represents C = 0 or CH ₂ and B represents 0.

本発明によれば、前記式（ I ) の化合物は、例えば、下記式 According to the present invention, the compound of the formula (I) is, for example,

式中、 A及び Bは前記の意味を有する、

Wherein A and B have the meaning described above,

で示される化合物を直接ョ一ドィヒし、得られる 2—ョード化合物をョードーアルコキシ変換反応に付することにより製造することができる。 Can be produced by directly treating the compound represented by the formula (1) and subjecting the obtained 2-ode compound to a sulfur-alkoxide conversion reaction.

ョード化反応は、例えば酢酸、ジクロロメタン、ジクロロェタン等の溶媒中にて、上記式（ I I ) の化合物をヨウ素化試薬、例えばヨウ素一酢酸銅（ I I ) 、ヨウ素一酢酸タリウム（ I ) 等で処理することにより行うことができる。反応温度は、一般に、室温乃至反応混合物の還流温度、好ましくは約 40°C乃至 70°C程度とすることができる。ヨウ素化試薬は、一般に、式（ I I ) の化合物 1モル当たり少なくとも 1モル、好ましくは 1. 1 ~2モル程度の割合で用いることができる。なお、ョゥ素化試薬を構成するヨウ素と酢酸化合物の割合は、通常、ヨウ素対酢酸化合物のモル比でほぼ 1 ： 1であることが好ましい。 In the iodination reaction, the compound of the above formula (II) is treated with an iodination reagent such as copper (II) iodide monoacetate, thallium (I) iodide monoacetate or the like in a solvent such as acetic acid, dichloromethane or dichloroethane. It can be done by doing. The reaction temperature can be generally from room temperature to the reflux temperature of the reaction mixture, preferably about 40 ° C to 70 ° C. The iodination reagent generally comprises at least 1 mole per mole of compound of formula (II), Preferably, it can be used in a ratio of about 1.1 to 2 mol. The ratio of iodine to the acetic acid compound constituting the iodination reagent is usually preferably about 1: 1 in terms of the molar ratio of iodine to the acetic acid compound.

得られる 2—ョード化合物は、次いでョードーアルコキシ変換反応に付すことにより、目的とする前記式（ I ) の化合物に変えることができ o The obtained 2-ode compound can be converted into the desired compound of the above formula (I) by subjecting it to a subsequent alkoxy conversion reaction.

ョード一アルコキシ変換反応は、例えばジメチルホルムアミド、メタノール、エタノール、ピリジン等の溶媒中にて、塩化銅（I I) 等の触媒の存在下に、 2—ョード化合物をアルコキシ化試薬、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキンド、ナトリウムイソプロボキシド等で処理することにより行なうことができる。反応温度は、一般に、室温乃至反応混合物の還流温度、好ましくは約 50°C乃至反応混合物の還流温度とすることができる。 2—ョ一ド化合物に対するアルコキシ化試薬の使用割合は、一般に、 2—ョ一ド化合物 1モル当たりアルコキシ化試薬を少なくとも 1モル、好ましくは 2〜 20モル程度とすることができる o The alkoxide conversion reaction is carried out in a solvent such as dimethylformamide, methanol, ethanol, pyridine or the like, in the presence of a catalyst such as copper (II) chloride, by converting the 2-ode compound to an alkoxylation reagent, for example. It can be carried out by treating with sodium methoxide, sodium ethoxide, sodium isopropoxide and the like. The reaction temperature can be generally from room temperature to the reflux temperature of the reaction mixture, preferably from about 50 ° C. to the reflux temperature of the reaction mixture. In general, the ratio of the alkoxylation reagent to the 2-oxide compound can be at least 1 mol, preferably about 2 to 20 mol, of the alkoxylation reagent per 1 mol of the 2-oxide compound.

かくして、本発明が目的とする前記式（ I ) の化合物が生成する。なお、前記式（I) において、 A又は Bの一方が CH₂を表わす場合の化合物は、 A又は Bの一方が C = 0を表わす場合の式（I ) の化合物を還元反応に付することによつても製造することができる。 Thus, the compound of the above formula (I) aimed at by the present invention is produced. In the above formula (I), when one of A or B represents CH ₂ , the compound of the formula (I) when one of A or B represents C = 0 is subjected to a reduction reaction. Can also be manufactured.

還元反応は、一般に、テトラヒドロフラン、ジォキサン、ジェチレングリコールジメチルエーテル、塩化メチレン、トルエン等の溶媒中にて、氷冷下乃至室温程度の反応温度で、 A又は Bの一方が C = 0を表わす場合の式（ I ) の化合物を水素化ホウ素ナトリウム、トリェチルシラン一三フッ化ホウ素エーテル錯塩、水素化トリー t e r t —ブトキシアルミノリチウム、水素化ジイソブチルアルミニウム等の還元試薬で処理することにより行うことができる。 The reduction reaction is generally carried out in a solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, methylene glycol dimethyl ether, methylene chloride, toluene, etc., at a reaction temperature from ice-cooling to room temperature, and when either A or B shows C = 0. The compound of formula (I) is combined with sodium borohydride and triethylsilane. It can be carried out by treating with a boron trifluoride ether complex, a reducing reagent such as tert-butoxyaluminolithium hydride or diisobutylaluminum hydride.

本発明の方法に従い製造される前記式（ I ) の化合物は、それ自体既知の手段、例えば再結晶、蒸留、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマ卜グラフィ一等の方法により、反応混合物から単離、精製することができる。 The compound of the formula (I) produced according to the method of the present invention can be obtained from the reaction mixture by a means known per se, for example, a method such as recrystallization, distillation, column chromatography, or thin layer chromatography. It can be separated and purified.

以上に説明した本発明の式（ I ) で表わされるォキサステロイド誘導体は、優れたチューブリン重合阻害作用、血管新生阻害作用及び Z又は p 5 3蛋白の安定化作用を有しており、チューブリンの重合、血管新生及び又は P 5 3蛋白の不活性化が関与する疾病、例えば、悪性腫瘍、子宮内膜症、慢性関節リウマチ、糖尿病網膜症、虚血性心疾患、動脈硬化、難治性皮膚潰瘍、乾癬、力ポジ肉腫、ライ結節などの予防又は治療に有用である。 The oxasteroid derivative represented by the formula (I) of the present invention described above has an excellent inhibitory action on tubulin polymerization, an inhibitory action on angiogenesis, and a stabilizing action on Z or p53 protein. Diseases involving polymerization, angiogenesis and / or inactivation of P53 protein, such as malignant tumors, endometriosis, rheumatoid arthritis, diabetic retinopathy, ischemic heart disease, arterial sclerosis, intractable disease It is useful for the prevention or treatment of skin ulcers, psoriasis, positiosarcoma, Rye nodules, etc.

本発明の式（ I ) の化合物の微小管蛋白質重合阻害作用、チューブリン重合阻害作用、血管新生阻害作用及び p 5 3蛋白の安定化作用は、例えば、次のようにして測定することができる。 The microtubule protein polymerization inhibitory action, tubulin polymerization inhibitory action, angiogenesis inhibitory action and p53 protein stabilizing action of the compound of the formula (I) of the present invention can be measured, for example, as follows. it can.

( 1 ) 微小管蛋白質重合阻害作用の測定 (1) Measurement of microtubule protein polymerization inhibitory action

Shelanski らの方法 (Shelanski et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. U SA， 70, 765〜768 ， 1973) に準じて微小管蛋白質を精製した。即ち、微小管蛋白質がグアノシン三リン酸（G T P ) 及び M g ^{2 +}の存在下で 3 4 °Cに加温すると重合し， G T P非存在下で 0 °Cにすれば脱重合するという性質を利用し、ブタ脳のホモジネートから、 2回、重合一脱重合させることにより精製し、バッファ一 A ( 1 0 O mM 2-(N-モルホリノ）ヱタンスルホン酸（ME S) — N a OH p H 6. 9， 2 mM エチレンク'、リコ-ルビス（2 -アミ/ ェチル I -テル）四酢酸（EG T A) ， 1 mM Mg S 0₄ · 7 H₂0, 2mM シ、、チオトレイト-ル（DDT) ) に溶解した。 Microtubule proteins were purified according to the method of Shelanski et al. (Shelanski et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 70, 765-768, 1973). That is, the microtubule protein polymerizes when heated to 34 ° C in the presence of guanosine triphosphate (GTP) and Mg ²⁺ , and depolymerizes when heated to 0 ° C in the absence of GTP. Purified from a pig brain homogenate by polymerizing and depolymerizing twice, using buffer-A (10 O mM 2- (N-morpholino) Sulfonic acid (ME S) - N a OH p H 6. 9, 2 mM Echirenku ', Rico - bis (2 - amino / Echiru I - ether) tetraacetic acid (EG TA), 1 mM Mg S 0 4 · 7 H _It was dissolved in 20 and 2 mM thiothreitol (DDT)).

薬物は、初期濃度 40%ジメチルスルホキシド（DM S O) で溶解あるいは希釈し、最終濃度 4%DMS O溶解時で実験を施行した。薬物非添加 4% DM S O をコントロールとした。 Drugs were dissolved or diluted with an initial concentration of 40% dimethylsulfoxide (DMSO) and experiments were performed at a final concentration of 4% DMSO. A drug-free 4% DMSO was used as a control.

重合測定は、 Bai らの方法（Bai et al. , Biochem. Pharmacol, 39, 12, 1941〜1949 ， 1990) に従って行った。即ち、バッファー B (20 0 mM ME S -N a OH p H 6. 9, 1 mM M g C 1₂) 1 m 1に、所用濃度の薬物 200m 1及び微小管蛋白質溶液（最終濃度 1. 5mg /m 1 ) を加え、蒸留水で全量 1. 98m lにした。氷上で 10分間ィンキュペートした後、 50mM GTP 20m 1の添加とともに恒温セルホルダ一（EHC-363, 日本分光）中で 37 °Cに加温することにより重合反応を開始させ、 350 nmにおける吸光度の増加（AA 350) を分光光度計（UNIVEC- 610C, 日本分光）で 30分間測定した。なお、 0 °Cにおける GTP非添加時の A 350をベースラインの A 350とした。抑制率は、 30分後におけるコントロールの ΔΑ 350に対する薬物の △ A 350の減少率として算出した。その結果、 2—メトキシ一 D—ホモー 1 7—ォキサエストラ一 1， 3， 5 (10) — トリェン一 3—才一ル（実施例 3の化合物）は、 100 //Mの濃度で 38%の抑制率を示し The polymerization was measured according to the method of Bai et al. (Bai et al., Biochem. Pharmacol, 39, 12, 1941-1949, 1990). That is, the buffer B (20 0 mM ME S -N a OH p H 6. 9, 1 mM M g C 1 2) 1 m to 1, Shoyo concentration of the drug 200 meters 1 and microtubule protein solution (final concentration 1. 5 mg / m 1) and made up to 1.98 ml with distilled water. After incubating on ice for 10 minutes, the polymerization reaction was started by heating at 37 ° C in a constant temperature cell holder (EHC-363, JASCO) together with the addition of 20 mM 1 of 50 mM GTP, and the absorbance at 350 nm was measured. Increase (AA 350) was measured with a spectrophotometer (UNIVEC-610C, JASCO) for 30 minutes. A350 at 0 ° C when GTP was not added was defined as A350 of the baseline. The inhibition rate was calculated as a reduction rate of ΔA350 of the drug relative to ΔΔ350 of the control after 30 minutes. As a result, 2-methoxy-D-homo 17-oxaestra 1,3,5 (10) —trien 13-total (compound of Example 3) was obtained at a concentration of 100 // M. Shows a% suppression rate

(2) チューブリン重合阻害作用の測定 (2) Measurement of tubulin polymerization inhibitory action

チューブリンは、ゥシ脳由来チューブリン（l OmgZm l , 100 1 ： Lot No. 035 及び 036： Cytoskelton 社から購入）を実験に使用した o For tubulin, tubulin derived from human brain (lOmgZml, 1001: Lot No. 035 and 036: purchased from Cytoskelton) was used for the experiment. O

重合測定は、 Bai らの方法（Bai et al. , Biochem. Pharmacol, 39, 12, 1941〜1949 ， 1990) 及び Cytoskelton 社のプロトコールに準じて行った。即ち、 2 X グルタメートバッファー（2M モノナトリウムグノレタメート p H 6. 8， 2 mM M g C 1 ₂, 2mM E GT A) 0. 9 m 1 に、所用濃度の薬物 1 80〃 1及びバッファー A ( 1 0 OmM M E S -N a OH p H 6. 9， 2 mM EGTA, 1 mM Mg S 0₄ · 7 H₂0, 2mM D D T ) に対して溶解した精製チューブリン（最終濃度 1. OmgZm 1 ) を加え、全量を 1. 62m 1 にし、 5 OmM GT P 1 8〃 1の添加とともに恒温セルホルダー（EHC- 363, 日本分光）中で 3 7°Cに加温することにより重合反応を開始させ、 350 nmにおける吸光度の増加（ΔΑ 350) を分光光度計（UVIDEC- 610C, 日本分光）にて 30分間測定した。なお、コントロール.における G T P添加直後の A 350をベースラインの A 350とした。抑制率は、 30分後におけるコントロールの ΔΑ 350に対する薬物の ΔΑ 350の減少率として算出した。その結果、実施例 3の化合物は、 30 ^Mの濃度で56 %の抑制率を示した。 The polymerization was measured according to the method of Bai et al. (Bai et al., Biochem. Pharmacol, 39, 12, 1941-1949, 1990) and the protocol of Cytoskelton. That, 2 X glutamate buffer (2M monosodium grayed Noretame preparative p H 6. 8, 2 mM M g C 1 2, 2mM E GT A) to 0. 9 m 1, Drug 1 Shoyo concentration 80〃 1 and Buffer A (1 0 OmM MES -N a OH p H 6. 9, 2 mM EGTA, 1 mM Mg S 0 4 · 7 H 2 0, 2mM DDT) was dissolved in the purified Chuburi emission (final concentration 1. OmgZm 1) To a total volume of 1.62m1, and the polymerization reaction was started by adding 5 OmM GT P18-1 and heating to 37 ° C in a constant temperature cell holder (EHC-363, JASCO). The increase in absorbance at 350 nm (ΔΑ350) was measured with a spectrophotometer (UVIDEC-610C, Nippon Spectroscopy) for 30 minutes. The A350 immediately after GTP addition in the control was defined as the baseline A350. The inhibition rate was calculated as the reduction rate of the drug ΔΑ350 relative to the control ΔΑ350 after 30 minutes. As a result, the compound of Example 3 showed a 56% inhibition rate at a concentration of 30 ^ M.

(3) 血管新生阻害作用の測定 (3) Measurement of angiogenesis inhibitory action

血管新生阻害作用は、血管内皮細胞の管腔形成モデルを用いて測定した。すなわち、マトリゲル（MATRIGEL^TM，べクトンデッキンソン社）上に EGM BULLET KIT/EBM 基礎培地（クロンテック社）を用いて培養したヒト臍帯静脈血管内皮細胞（8 X 1 04個 Zm 1 ) 懸濁液 1 m 1を 24 ゥエルのプレート分注した。各ゥヱルに EGM BULLET KIT/EBM 基礎培地で希釈した薬物 1 00 1を添加し、さらに 37°C、 5%C 0₂ インキュベ—ター中で培養し、 24時間後その管腔形成の程度を写真撮影した。撮影した写真の管腔部分を黒ペンでトレースし、画像解析装置（ピアス， LA-555) でその長さを測定した。本アツセィにおいて、本発明の化合物は良好な血管新生阻害作用を示す。 The angiogenesis inhibitory effect was measured using a vascular endothelial cell tube formation model. That is, human umbilical vein vascular endothelial cells (8 × 104 cells Zm 1) suspension cultured on Matrigel (MATRIGEL ^™ , Becton Dickinson) using EGM BULLET KIT / EBM basal medium (Clontech) 1 ml of the solution was dispensed into a 24-well plate. Drug 1 00 1 diluted in EGM BULLET KIT / EBM basal medium to each Uweru added, further 37 ° C, 5% C 0 2 incubator The cells were cultured in a beaker, and after 24 hours, the degree of the tube formation was photographed. The lumen of the photograph was traced with a black pen and its length was measured with an image analyzer (Pierce, LA-555). In the present invention, the compound of the present invention exhibits a good angiogenesis inhibitory action.

(4) p 53蛋白の安定化作用の測定 (4) Measurement of stabilizing action of p53 protein

正常 p 53を有するヒト乳癌 MC F― 7細胞を 5%C 0₂ィンキュベ —ター中 3 7°Cで培養し、それに所用濃度（5 M) の薬物と 1 0 /z g /m 1 シクロへキシミドを添加した群（薬物処理細胞群）及び 1 0 g Zm l シクロへキシミドのみ添加した群（薬物非処理細胞群）を調製した。添加後、 1、 3、 6、 9、 1 6、 24、 48時間目に、経時的に、両細胞群から核あるいは細胞質画分を抽出した。なお、抽出は、 1 %界面活性剤 NP— 40およびタンパク質分解酵素阻害剤含有の Tris- HC1 (p H 7. 5) バッファ一を各細胞群に添加し、懸濁後、氷上で 30分静置し、その後、 1 000 X g、 5分の遠心により得られた沈査（核画分）を回収し、さらに、 1 00000 X g、 60分の超遠心後の上清（細胞質画分）を回収することにより行った。得られたこれらの画分はそれぞれ分注して使用時まで一 70°Cで保存した。これらの画分について B CA (bicinchoninic acid) Protein Assay Reagent Kit (Pierce) を用いてタンパク質定量を行った後、各レーンごとに一定タンパク質量となるように薬物非処理細胞又は薬物処理細胞の画分を 1 0 %非変性ポリァクリルアミドゲルに添加し、分子量マ一力一とともに電気泳動を行った。ゲルを二トロセル口一スメンブレンに転写し、メンブレンのブロッキング処理を行った。洗浄後、所用濃度の抗ヒト p 53—次抗体を添加し、 1時間振盪し、洗浄後、所用濃度の二次抗体を添加し、 1時間振盪した。その後、洗浄を行い、暗室内で発光試薬を添加し、発光したバンドを X 線フィルムで検出した。得られた薬物非処理細胞群のバンドと薬物処理細胞群のバンドを経時的に比較することにより p 5 3蛋白の安定化作用を評価した。本アツセィにおいて、本発明の化合物は良好な p 5 3蛋白の安定化作用を示す。 Human breast cancer MC F-7 cells with normal p53 were cultured at 37 ° C in a 5% CO ₂ incubator, and the desired concentration (5 M) of the drug and 10 / zg / m 1 cyclohexane were added. A group to which xymid was added (drug-treated cell group) and a group to which only 10 g Zml cycloheximide was added (non-drug-treated cell group) were prepared. At 1, 3, 6, 9, 16, 24, and 48 hours after the addition, nuclear or cytoplasmic fractions were extracted from both cell groups over time. For extraction, add 1% surfactant NP-40 and Tris-HC1 (pH 7.5) buffer containing a protease inhibitor to each cell group, suspend, and on ice for 30 minutes. After allowing to stand still, the precipitate (nuclear fraction) obtained by centrifugation at 1 000 X g for 5 minutes was collected, and the supernatant (cytoplasmic fraction) after ultracentrifugation at 100 000 X g for 60 minutes. Min) was collected. Each of these obtained fractions was dispensed and stored at 170 ° C. until use. After performing protein quantification of these fractions using the BCA (bicinchoninic acid) Protein Assay Reagent Kit (Pierce), the fractions of drug-untreated cells or drug-treated cells were adjusted to a constant protein level in each lane. The mixture was added to a 10% non-denaturing polyacrylamide gel and subjected to electrophoresis together with the molecular weight. The gel was transferred to a membrane with a 2-trocell mouth and subjected to a membrane blocking treatment. After washing, the required concentration of anti-human p53-secondary antibody was added and shaken for 1 hour. After washing, the required concentration of the secondary antibody was added and shaken for 1 hour. After washing, a luminescent reagent was added in a dark room, and the luminescent band was detected with an X-ray film. The stabilizing effect of the p53 protein was evaluated by comparing the obtained band of the drug-untreated cell group with the band of the drug-treated cell group over time. In the present invention, the compound of the present invention exhibits a good p53 protein stabilizing action.

かくして得られる本発明の式（ I ) のォキサステロイド誘導体は、チュ一プリン重合阻害剤、血管新生阻害剤及び Z又は p 5 3蛋白の安定化作用剤として、ヒト、その他の哺乳動物に対する治療、処置等のために経口投与又は非経口投与（例えば筋注、静注、直腸投与、経皮投与など）することができる。 The thus obtained oxasteroid derivative of the formula (I) of the present invention can be used as a tulprin polymerization inhibitor, an angiogenesis inhibitor and a stabilizing agent for Z or p53 protein, such as human and other agents. Oral administration or parenteral administration (for example, intramuscular injection, intravenous injection, rectal administration, transdermal administration, etc.) can be performed for the treatment and treatment of mammals.

本発明に係る化合物は、薬剤として用いる場合、その用途に応じて、固体形態（例えば錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、丸剤、トローチ錠など）、半固体形態（例えば坐剤、軟膏など）又は液体形態（注射剤、乳剤、懸濁液、ローション、スプレーなど）のいずれかの製剤形態に調製して用いることができる。しかして、上記製剤に使用し得る無毒性の添加物としては、例えばでん粉、ゼラチン、ブドウ糖、乳糖、果糖、マルトース、炭酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はその塩、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、 p—ヒドロキシ安息香酸アルキルエステル、シロップ、エタノール、プロピレングリコール、ワセリン、カーボワックス、グリセリン、塩化ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クェン酸等が挙げられる。該薬剤はまた、治療学的に有用な他の薬剤を含有することもできる。 When the compound of the present invention is used as a drug, it may be in a solid form (for example, tablet, hard capsule, soft capsule, granule, powder, fine granule, pill, troche, etc.) depending on the use. It can be prepared and used in either solid form (eg, suppository, ointment, etc.) or liquid form (injection, emulsion, suspension, lotion, spray, etc.). Examples of non-toxic additives that can be used in the above-mentioned preparations include, for example, starch, gelatin, glucose, lactose, fructose, maltose, magnesium carbonate, talc, magnesium stearate, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose or the like. Salt, gum arabic, polyethylene glycol, alkyl p-hydroxybenzoate, syrup, ethanol, propylene glycol, vaseline, carbowax, glycerin, sodium chloride, sodium sulfite, sodium phosphate, Cunic acid and the like. The agent may also contain other therapeutically useful agents.

該薬剤中における本発明の化合物の含有量はその剤形等に応じて異なるが、一般に、周体及び半固体形態の場合には 0. 1〜50重量％の濃度で、そして液体形態の場合には 0. 05〜10重量％の濃度で含有していることが望ましい。 The content of the compound of the present invention in the drug varies depending on the dosage form and the like. However, in general, it may be contained in a concentration of 0.1 to 50% by weight in the case of the peripheral or semi-solid form, and in a concentration of 0.05 to 10% by weight in the case of the liquid form. desirable.

本発明の化合物の投与量は、対象とするヒトをはじめとする温血動物の種類、投与経路、症状の軽重、医者の診断等により広範に変えることができるが、一般的には、 1日当たり、 0. 05〜： L OmgZk g、好適には 0. l〜5mg/k gの範囲内とすることができる。しかし、上記の如く患者の症状の軽重、医者の診断に応じて上記範囲の下限よりも少ない量又は上限よりも多い量を投与することはもちろん可能である。上記投与量は 1日 1回又は数回に分けて投与することができる。 The dose of the compound of the present invention can be varied widely depending on the kind of human or other warm-blooded animals, the administration route, the severity of the symptoms, the diagnosis of a doctor, and the like. From 0.05 per day: L OmgZkg, preferably in the range of 0.1-5 mg / kg. However, as described above, it is of course possible to administer an amount smaller than the lower limit or larger than the upper limit of the above range depending on the severity of the patient's symptoms and the diagnosis of a doctor. The above dosage can be administered once or several times a day.

実施例 Example

以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。 Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples.

実施例 1 Example 1

3—ヒドロキシー D—ホモ一 1 7—ォキサエストラ一 1 , 3, 5 (1 0) — トリェンー 17 a—オン 100mg、酢酸銅（II) 一水和物 10 5mg、ヨウ素 133 mg及び酢酸 3 m 1の混合物を 55°Cで 22時間攪拌した。反応混合物に水を加えて生成物を酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液、 5%チォ硫酸ナトリゥム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、得られた残査に塩化銅（Π) 12. 6mg、 28%ナトリウムメトキシド 0. 48m lおよび DMF 0. 94 m 1を加え、窒素雰囲気下、 15分間加熱還流した。放冷後、反応混合物に塩酸 0. 5m lを加え、室温で 30分間攪拌した。反応混合物に水を加えて生成物を酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、得られた粗生成物を T L C (展開溶媒、クロロホルム：アセトン = 19 ： 1 ) で精製して、 3—ヒドロキシ一 2—メトキシー D—ホモ一 1 7—ォキサェストラ一 1， 3, 5 (10) 一トリェンー 1 7 a—オン 27mgを得た。 3-Hydroxy D—Homo-17-Oxaestra 1,3,5 (10) — Trien-17a-one 100 mg, Copper (II) acetate monohydrate 105 mg, Iodine 133 mg and Acetic acid 3 m 1 Was stirred at 55 ° C. for 22 hours. Water was added to the reaction mixture and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed successively with a saturated aqueous solution of sodium hydrogencarbonate, a 5% aqueous solution of sodium thiosulfate and a saturated saline solution, and dried over sodium sulfate. The solvent was distilled off, and 12.6 mg of copper chloride (Π), 0.48 ml of 28% sodium methoxide and 0.94 ml of DMF were added to the obtained residue, and the mixture was heated and refluxed for 15 minutes under a nitrogen atmosphere. . After cooling, 0.5 ml of hydrochloric acid was added to the reaction mixture, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. Water was added to the reaction mixture, and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated saline. It was washed successively and dried over sodium sulfate. The solvent was distilled off, and the resulting crude product was purified by TLC (developing solvent, chloroform: acetone = 19: 1) to give 3-hydroxy-12-methoxy D-homo-17-oxestera. One, three, five (10) One triene 17 a-one 27 mg was obtained.

!H-NMRCCDC , δ):1.25(3H, s), 3.86(3H, s)， 4.0-4.7(2H, m)， 5.45(1H, s) ! H-NMRCCDC, δ): 1.25 (3H, s), 3.86 (3H, s), 4.0-4.7 (2H, m), 5.45 (1H, s)

， 6.64(1H, s)， 6.78(1H， s) , 6.64 (1H, s), 6.78 (1H, s)

MS(m/z):316(M⁺), 301 MS (m / z): 316 (M ⁺ ), 301

実施例 2 Example 2

実施例 1において、 28%ナトリウムメトキシドの代わりに、ナトリゥムエトキシド 1 72mg及びエタノール 0. 42m lを用いて同様に操作して、 2—エトキシ一 3—ヒドロキシ一 D—ホモ一 1 7—才キサェストラー 1， 3， 5 (10) 一トリェン一 1 7 a—オン 1 7 m gを得た。 In Example 1, the same operation was conducted using 72 mg of sodium methoxide and 0.42 ml of ethanol instead of 28% sodium methoxide to obtain 2-ethoxy-13-hydroxy-1-D-homo-17-. 1,3,5 (10) 1-triene 17 a-one 17 mg was obtained.

^-NMRCCDC , (5):1.25(3H, s), 1.43(3H, t, J=7Hz), 4.09(2H, q, J=7Hz), 4.1-4.7(2H, ra)， 5.51(1H, s), 6.65C1H, s), 6.77(1H, s) ^ -NMRCCDC, (5): 1.25 (3H, s), 1.43 (3H, t, J = 7Hz), 4.09 (2H, q, J = 7Hz), 4.1-4.7 (2H, ra), 5.51 (1H, s), 6.65C1H, s), 6.77 (1H, s)

MS(m/z):330(M⁺),301 MS (m / z): 330 (M ⁺ ), 301

実施例 3 Example 3

実施例 1において、 3—ヒドロキシ一 D—ホモ一 1 7 _ォキサエストラー 1， 3, 5 (10) — トリェンー 17 a—オンの代わりに、 D—ホモー 1 7—ォキサエストラ一 1， 3, 5 ( 10) — トリェンー 3—才一ル 1 gを用いて同様に操作し、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィ一（溶出溶媒、クロ口ホルム：アセトン = 39 ： 1) で精製し、さらに TL C (展開溶媒、へキサン：酢酸ェチル = 4 ： 1) で精製した後、メタノールから再結晶して、 2—メトキシ一 D—ホモ一 1 7—才キサェストラ一 1, 3， 5 (10) — トリェン一 3—オール 198mgを得た。 !H-NMRCCDCls, δ :1.02(3H, s), 3.0-3. KIH, m)， 3.3-3.6(2H, m), 3.85(3 H， s)， 3.9-4.2(1H, m)， 5.42(1H, s)， 6.64(1H， s)， 6.78C1H, s) In Example 1, 3-hydroxy-D-homo- 17-oxa-estra 1,3,5 (10) -triene 17a-one was replaced by D-homo 17-ox-a-estra 1,3,3. 5 (10) — Triene 3 — The same operation was performed using 1 g of crude oil, and the resulting crude product was purified by column chromatography (elution solvent, pore-form: acetone = 39: 1). After further purification by TLC (developing solvent, hexane: ethyl acetate = 4: 1), recrystallization from methanol yielded 2-methoxy-D-homo- 3, 5 (10) — Trien-1-ol 198 mg was obtained. ! H-NMRCCDCls, δ: 1.02 (3H, s), 3.0-3. KIH, m), 3.3-3.6 (2H, m), 3.85 (3H, s), 3.9-4.2 (1H, m), 5.42 (1H, s), 6.64 (1H, s), 6.78C1H, s)

MS(m/z):302(M⁺), 287 MS (m / z): 302 (M ⁺ ), 287

実施例 4 Example 4

実施例 1において、 3—ヒドロキシ一 D—ホモ _ 17—才キサェストラ一 1， 3， 5 (10) 一トリェン一 17 a—オンの代わりに、 3—ヒドロキシ一 D—ホモ一 17 a _ォキサエストラー 1， 3， 5 (10) - トリェンー 17—オン 5 Omgを用いて同様に操作し、得られた粗生成物を T L C (展開溶媒、クロロホルム：アセトン = 19 ： 1 ) で精製して、 3—ヒドロキシ一 2—メトキシ一 D—ホモ一 17 a—才キサェストラー 1， 3， 5 (10) — トリェン _ 17—オン 5mgを得た。 In Example 1, 3-hydroxy-D-homo_17-year-old 1,3,5 (10) -triene- 17a-one was replaced by 3-hydroxy-D-homo- 17a. Oxaestler 1,3,5 (10) -Trien-17-one The same operation was carried out using 5 Omg, and the obtained crude product was purified by TLC (developing solvent, chloroform: acetone = 19: 1). 5-hydroxy-1,2-methoxy-D-homo 17a-year-old 1,3-, 5- (10) -trien_17-one 5 mg was obtained.

'H-NMRCCDCla, δ) 1.35(3H, s), 3.85(3H, s), 5.46(1H, s), 6.64(1H, s) ， 6.76(1H, s) 'H-NMRCCDCla, δ) 1.35 (3H, s), 3.85 (3H, s), 5.46 (1H, s), 6.64 (1H, s), 6.76 (1H, s)

MS(m/z):316(M⁺), 301 MS (m / z): 316 (M ⁺ ), 301

実施例 5 Example 5

実施例 1において、 3—ヒドロキシ一 D—ホモ一 17—才キサェストラ一 1， 3, 5 (10) 一トリェンー 17 a—オンの代わりに、 D—ホモ一 17 a _ォキサエストラ一 1， 3， 5 (10) 一トリェン一 3—ォール 67 mgを用いて同様に操作し、得られた粗生成物を TLC (展開溶媒、へキサン：酢酸ェチル = 2 : 1) で精製して、 2—メトキシ— D 一ホモ一 17 a—ォキサエストラ一 1, 3, 5 (10) — トリェン一 3 —オール 18 m gを得た。 In Example 1, 3-hydroxy D-homo 17-year-old 1,3,5 (10) instead of triene 17a-one, D-homo 17a_oxaestra 1, The same operation was performed using 67 mg of 3,5 (10) -triene-3-ol, and the obtained crude product was purified by TLC (developing solvent, hexane: ethyl acetate = 2: 1). , 2-methoxy-D-homo-17 a-oxaestra 1,3,5 (10)-trien-1-ol 18 mg was obtained.

¹ H~NMR(CDC1₃, 20C3H, s), 3.6-3.9(2H, m)， 3.85(3Η, s), 5.42(1Η, s) ^{_{1 H ~ NMR (CDC1 3,}} 20C3H, s), 3.6-3.9 (2H, m), 3.85 (3Η, s), 5.42 (1Η, s)

，6.63(1Η， s), 6.78(lH, s) MS(m/z):302(M⁺), 287 , 6.63 (1Η, s), 6.78 (lH, s) MS (m / z): 302 (M ⁺ ), 287

実施例 6 Example 6

3—ヒドロキシ一 2—メトキシ一 D—ホモ一 17 a—ォキサエストラ — 1， 3, 5 (10) — トリェン一 1 7—オン 63 mgを三フッ化ホウ素エーテル錯塩 lm 1に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム 30mg、 T H F 0. 25m 1およびジエチレングリコールジメチルエーテル 0. 2 5m 1の混合物に氷冷下加え、室温で 30分間攪拌した。反応混合物を氷水にあけ、希塩酸で酸性とし、生成物を酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液及び水で順次洗浄し、硫酸ナトリゥムで乾燥した。溶媒を留去し、得られた粗生成物を TL C (展開溶媒、へキサン：酢酸ェチル = 2 : 1) で精製して、 2—メトキシー D—ホモ一 1 7 a—ォキサエストラ一 1, 3， 5 (10) — トリェン一 3—ォール 42mgを得た。 3-Hydroxy-1- 2-D-Homo- 17a-Oxaestradi — 1,3,5 (10) — Trien-17-one 63 mg was dissolved in boron trifluoride etherate complex lm1, A mixture of 30 mg of sodium borohydride, 0.25 ml of THF and 0.25 ml of diethylene glycol dimethyl ether was added under ice-cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The reaction mixture was poured into ice water, acidified with dilute hydrochloric acid, and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed successively with a saturated aqueous solution of sodium hydrogen carbonate and water, and dried over sodium sulfate. The solvent was distilled off, and the resulting crude product was purified by TLC (developing solvent, hexane: ethyl acetate = 2: 1) to give 2-methoxy D-homo 17a-oxaestra 1,1 3, 5 (10) — Trien-1-ol 42 mg was obtained.

次に本発明の化合物を含有する薬剤の製剤例を示す。 Next, preparation examples of a drug containing the compound of the present invention will be shown.

製剤例 A ：錠剤 Formulation Example A: Tablet

錠剤： Tablets:

mg/錠活性成分 50 0 でん粉 15 0 乳糖 87 0 カルボキシメチルセルロースカルシウム 15 0 タルク 2 0 ステアリン酸マグネシゥム 0 mg / tablet Active ingredient 50 0 Starch 15 0 Lactose 87 0 Calcium carboxymethylcellulose 15 0 Talc 2 0 Magnesium stearate 0

1 70. 0 5 活性成分を 7 0 ミクロン以下の粒度に粉砕し、それにでん粉、乳糖及びカルボキシメチルセルロースカルシウムを加えてよく混合する。 1 0 %のでん粉のりを上記混合粉体に加えて撹拌混合し、顆粒を製造する。乾燥後粒径を 1 0 0 0 ミクロン前後に整粒し、これにタルク及びステアリン酸マグネシウムを混合し、打錠する。 1 70. 0 5 Grind the active ingredient to a particle size of 70 microns or less, add starch, lactose and calcium carboxymethylcellulose and mix well. 10% starch paste is added to the mixed powder and mixed with stirring to produce granules. After drying, the particle size is adjusted to around 1000 micron, mixed with talc and magnesium stearate and compressed.

Claims

請求の範囲 The scope of the claims

1 . 一般式 1. General formula

式中、 A及び Bの一方は C = 0又は C H ₂を表わし、且つ他方は 0を表わし、 Rは低級アルコキシ基を表わす、

Wherein one of A and B represents C = 0 or CH ₂ , and the other represents 0, and R represents a lower alkoxy group;

で示されるォキサステロイド誘導体。 An oxasteroid derivative represented by the formula:

2 . Rがメトキシ又はエトキシ基を表わす請求の範囲第 1項記載のォキサステロイド誘導体。 2. The oxasteroid derivative according to claim 1, wherein R represents a methoxy or ethoxy group.

3 . Aが C = 0又は C H ₂を表わし、且つ Bが 0を表わす請求の範囲第 1項記載のォキサステロイド誘導体。 3. The oxasteroid derivative according to claim 1, wherein A represents C = 0 or CH ₂ , and B represents 0.

4 . 請求の範囲第 1項記載のォキサステロイド誘導体を有効成分として含有することを特徴とするチューブリン重合阻害剤、血管新生阻害剤及び/又は p 5 3蛋白の安定化作用剤。 4. A tubulin polymerization inhibitor, an angiogenesis inhibitor, and / or an agent for stabilizing p53 protein, comprising the oxasteroid derivative according to claim 1 as an active ingredient.

5 . 請求の範囲第 1項記載の化合物及び製薬学的に許容しうる添加剤からなる薬剤組成物。 5. A pharmaceutical composition comprising the compound according to claim 1 and a pharmaceutically acceptable additive.

6 . チューブリン重合、血管新生及び Z又は p 5 3蛋白の不活性化が関与する疾病の予防又は処置のための請求の範囲第 1項記載のォキサステロイド誘導体の使用。 6. Use of the oxasteroid derivative according to claim 1 for the prevention or treatment of a disease involving tubulin polymerization, angiogenesis and inactivation of Z or p53 protein.

7 . 請求の範囲第 1項記載の化合物をヒト又はその他の哺乳動物に投与することからなるヒト又はその他の哺乳動物におけるチューブリンの重合、血管新生及び Z又は P 5 3蛋白の不活性化が関与する疾病の予防又は処置方法。 7. Administering the compound according to claim 1 to a human or other mammal, comprising polymerizing tubulin, angiogenesis and inhibiting Z or P53 protein in a human or other mammal. Prevention of diseases associated with activation Or a treatment method.