WO1991000920A3 - Procede de preparation d'une proteine a partir d'un champignon transforme par integration multicopie d'un vecteur d'expression - Google Patents

Procede de preparation d'une proteine a partir d'un champignon transforme par integration multicopie d'un vecteur d'expression

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Abstract

Le procédé décrit sert à préparer une protéine à partir d'une cellule eukaryotique transformée par intégration multicopie d'un vecteur d'expression en génome d'une levure, telle que les levures Saccharomyces, Hansenula et Kluyveromyces, ou d'une moisissure, telle que les moisissures Aspergillus, Rhizopus et Trichoderma. Le vecteur d'expression utilisé contient à la fois un gène ''exprimable'' codant pour cette protéine et un gène marqueur de sélection déficient nécessaire pour la croissance de la levure ou de la moisissure dans un milieu spécifique, tel que le gène LEU2d, TRP1d ou URA3d, ces gènes étant combinés à une séquence d'ADN à ribosomes, ce qui permet d'obtenir une intégration multicopie stable de 100 à 300 copies par cellule. Grâce à cette intégration multicopie, il s'ensuit une production accrue de la protéine désirée, laquelle peut consister en α-galactosidase de guar, en une oxydase ou en une enzyme hydrolytique, telle qu'une lipase.
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