UA65452A - Method for treating experimental diabetic polyneuropathy - Google Patents

Abstract

The method for treating the experimental diabetic polyneuropathy provides for the drugs increasing the metabolism. Alpha-lipoic acid is injected intraperitoneally.

Description

Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до ендокринології, хірургії та неврології, і може бути застосований у практичній охороні здоров'я для лікування такого різновиду пізніх ускладнень цукрового діабету, як периферичної діабетичної полінейропатії.The invention relates to the field of medicine, namely to endocrinology, surgery and neurology, and can be applied in practical health care for the treatment of such a variety of late complications of diabetes as peripheral diabetic polyneuropathy.

Цукровий діабет - хронічне метаболічне захворювання, яке характеризується зрушенням метаболізму глюкози завдяки абсолютній чи підносній недостатності інсуліну.Diabetes mellitus is a chronic metabolic disease characterized by a shift in glucose metabolism due to absolute or partial insulin deficiency.

Одним із звичайних порушень при цукровому діабеті є розвиток функціонального зрушення периферичної нервової системи з формуванням діабетичної периферичної полінейропатії (розвивається у більше ніж 6090 хворих на цукровий діабет). До симптомів цього захворювання відносять болі в кінцівках, м'язева слабкість аж до розвитку явищ паралічу, а також різноманітні дисфункції автономної нервової системи, наприклад, діарея або імпотенція. В разі вказаних індукованих діабетом порушень зменшується швидкість проведення збудження по чутливим та моторним нервам, що є мірою визначення ступеня розвитку зрушення периферичної нервової системи.One of the common disorders in diabetes is the development of a functional shift of the peripheral nervous system with the formation of diabetic peripheral polyneuropathy (develops in more than 6090 patients with diabetes). Symptoms of this disease include pain in the limbs, muscle weakness up to the development of paralysis, as well as various dysfunctions of the autonomic nervous system, for example, diarrhea or impotence. In the case of the specified diabetes-induced disorders, the speed of conduction of excitation along sensitive and motor nerves decreases, which is a measure of determining the degree of development of a shift in the peripheral nervous system.

Відомі способи лікування діабетичної полінейропатії шляхом застосування інсулінотерапії, а також вживання пероральних цукрознижуючих препаратів (1,2), що дозволяють досягти нормоглікемії.There are known methods of treating diabetic polyneuropathy through the use of insulin therapy, as well as the use of oral hypoglycemic drugs (1,2), which make it possible to achieve normoglycemia.

Але зниження швидкості проведення нервового імпульсу у пацієнтів з гарними показниками глікемічного контроля не є єдиним фактором розвитку діабетичної полінейропатії. Ось чому досягнення нормоглікемії не завжди надає належного ефекту за умов лікування діабетичної полінейропатії.But a decrease in the speed of nerve impulse conduction in patients with good indicators of glycemic control is not the only factor in the development of diabetic polyneuropathy. That is why the achievement of normoglycemia does not always have the proper effect under the conditions of treatment of diabetic polyneuropathy.

Найбільш близьким до запропонованого є спосіб лікування діабетичної полінейропатії через застосування відомих несиметричних складних ефірів 1,4-дигидропирідін-3,5-дікарбонових кислот, відомих в клінічній практиці як антагоністи кальцієвих рецепторів ІЗ). При застосуванні вказаних похідних дигидропирідіну у вигляді таблеток, драже, гранулятів, мікстур, емульсій, суспензій або розчинів в діапазоні доз від 0.1 до 1Омг/кг маси тіла відмічається їх спеціальна терапевтична дія на периферичну нервову систему.The method of treatment of diabetic polyneuropathy through the use of known asymmetric esters of 1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylic acids, known in clinical practice as calcium receptor antagonists, is the closest to the proposed one. When using these dihydropyridine derivatives in the form of tablets, dragees, granules, mixtures, emulsions, suspensions or solutions in the range of doses from 0.1 to 1Omg/kg of body weight, their special therapeutic effect on the peripheral nervous system is noted.

Але негативною стороною застосування даного засобу лікування діабетичної полінейропатії є той факт, що вказані фармакологічні засоби є ефективними за умов компенсації та субкомпенсації вуглеводного обміну, а для досягнення результату необхідним є їх прийом протягом тривалого часу, що пов'язано з побічною та токсичною дією на органи та тканини. Не слід також забувати про високу ціну цих препаратів. Окрім цього, автори не можуть пояснити механізм реалізації терапевтичної дії похідних дигидропирідіну при лікуванні діабетичної поліне йропатії, називаючи його "неочікуванним" (ЗЇ, через що можливо припустити недосліджуваність можливих негативних ефектів внаслідок його прийому протягом тривалого терміну.But the negative side of using this remedy for the treatment of diabetic polyneuropathy is the fact that these pharmacological agents are effective under the conditions of compensation and subcompensation of carbohydrate metabolism, and to achieve the result, it is necessary to take them for a long time, which is associated with side and toxic effects on organs and fabrics. Do not forget about the high price of these drugs. In addition, the authors cannot explain the mechanism of implementation of the therapeutic effect of dihydropyridine derivatives in the treatment of diabetic polyneuropathy, calling it "unexpected" (ZI), due to which it is possible to assume that possible negative effects due to its long-term use have not been investigated.

В основу винаходу поставлено задачу вдосконалення способу лікування діабетичної гюлінейропатії за рахунок застосування препаратів, які блокують активність ключового ферменту синтезу окису азоту - МО-синтази та сприяють інтенсифікації метаболізму, що дозволить підвищити ефективність вказаного ускладнення цукрового діабету та запобігти його прогресуванню й розвитку якнайменше синдрому стопи діабетика.The invention is based on the task of improving the method of treating diabetic neuropathy by using drugs that block the activity of the key enzyme of nitric oxide synthesis - MO-synthase and contribute to the intensification of metabolism, which will increase the effectiveness of the indicated complication of diabetes and prevent its progression and the development of diabetic foot syndrome as little as possible .

Поставлена задача вирішується тим, що, згідно винаходу, щурам із стрептозотоцин-індукованим цукровим діабетом одноразово внутрішньоочеревинно вводять 100 мг/кг пентоксифіліну, механізм дії якого полягає у блокуванні активності МО-синтази, а також додатково протягом 4 тижнів вводять альфа-ліпоєву кислоту внутрішньоочеревинно дозою 5Омг/кг.The task is solved by the fact that, according to the invention, rats with streptozotocin-induced diabetes are given a single intraperitoneal injection of 100 mg/kg of pentoxifylline, the mechanism of action of which is to block the activity of MO-synthase, and additionally for 4 weeks alpha-lipoic acid is administered intraperitoneally in a dose 5Omg/kg.

Суть винаходу полягає у блокуванні активності ендогенного окису азота за умов цукрового діабету, а також у підсиленні метаболічних процесів в організмі.The essence of the invention is to block the activity of endogenous nitric oxide under the conditions of diabetes, as well as to strengthen metabolic processes in the body.

Відомо, що майже 10 років тому окис азоту (МО) британським журналом "Зсіепсе" було оголошено "молекулою року. Останнім часом було встановлено, що найпростіша речовина -МО - безперервно синтезується ферментативним шляхом в організмі людини та тварин, виконуючи при цьому функцію одного з універсальних регуляторів метаболізму. Окрім регуляції фізіологічних функцій організму - регуляції тонусу судин в якості адреноблокатора, гальмування агрегації тромбоцитів та їх адгезії на стінках судин, регуляції синаптичної передачі нервового імпульсу, активації та/або пригнічення активності багатьох білків та ферментів, та ін. - відомою є роль МО у опосередкуванні гострих запальних реакцій. Показана продукція МО активованими макрофагами. Доведено, що цитостатичні та цитотоксичні ефекти макрофагів за умов запалення здійснюються через МО - шляхом активації МО-синтази, котра перетворює аргінін у МО. Синтезований окис азоту за умов гострого запалення сприяє розвитку вазодилятації (частіше всього локальної), локальному ураженню паренхіми органу, який підпадає під запалення, та його послідуючу ішемію. Зазначені ефекти МО сприяють розвитку гострого запального ураження паренхіми підшлункової залози, - такий ланцюговий процес передує розвитку цукрового діабету.It is known that almost 10 years ago nitric oxide (NO) was declared the "molecule of the year" by the British magazine Zsiepse. Recently, it was established that the simplest substance -NO - is continuously synthesized by an enzymatic pathway in the human and animal body, performing the function of one of universal regulators of metabolism. In addition to the regulation of the body's physiological functions - regulation of vascular tone as an adrenoblocker, inhibition of platelet aggregation and their adhesion to vessel walls, regulation of synaptic transmission of nerve impulses, activation and/or suppression of the activity of many proteins and enzymes, etc. - is known the role of MO in mediating acute inflammatory reactions. The production of MO by activated macrophages has been shown. It has been proven that the cytostatic and cytotoxic effects of macrophages under conditions of inflammation are carried out through MO - by activating MO synthase, which converts arginine into MO. Synthesized nitric oxide under conditions of acute inflammation contributes to the development vasodilatation (most often local ), local damage to the parenchyma of the organ subject to inflammation, and its subsequent ischemia. The specified effects of MO contribute to the development of acute inflammatory damage to the parenchyma of the pancreas - such a chain process precedes the development of diabetes.

Відомо також, що альфа-ліпоєва кислота (ЛК) надає антиоксидантну, мембраностабілізуючу, гіполіпідемічну, а також антидиабетичну дію.It is also known that alpha-lipoic acid (AL) has antioxidant, membrane-stabilizing, hypolipidemic, and antidiabetic effects.

Спосіб здійснюється таким чином.The method is carried out as follows.

Експериментальні дослідження проводили за умов хронічного експерименту на 61 щурі-самці лінії Вістар, котрих годували стандартною дієтою. Щурам був забезпечений вільний доступ до їжі та води, їх містили у стандартних умовах із 12-год. зміною світла та темряви.Experimental studies were conducted under the conditions of a chronic experiment on 61 male Wistar rats fed a standard diet. Rats were provided with free access to food and water, they were housed in standard conditions from 12:00 p.m. by the change of light and darkness.

Експериментальний цукровий діабет (ЕЦД) моделювали через внутрішньоочеревинне застосування стрептозотоцину (СТ3; бомг/кг; "Зегма, Німеччина; препарат готували у розчині натрієвого цитратного буферу, рн:4.5), котрий індукує селективну загибель В клітин підшлункової залози. Формування ЕЦД перевіряли на 2-у добу після введення СТЗ через визначення вмісту глюкози в крові щурів, отриманій з хвостової вени, за допомогою стріп-смуги (Опе Тошсі", Німеччина). До послідуючих дослідів обиралися лише ті щури, концентрація глюкози в крові котрих перевищувала 15ммоль/л. Щурів досліджували б тижнів без лікування - цей термін є достатнім для формування експериментальної діабетичної периферичної полінейропатії (ЕДПН), - після чого починали лікування. Щурам із ЕДПН внутрішньоочеревинно одноразово уводили пентоксифілін дозою 100 мг/кг, а також ЛК дозою 50 мг/кг одноразово на добу 6 разів на тиждень (1-6 доби, за винятком першого тижня, коли введення ЛК здійснювали впродовж 2-6 доби) впродовж 4 тижнів.Experimental diabetes mellitus (ECD) was modeled by intraperitoneal administration of streptozotocin (ST3; bomg/kg; "Zegma, Germany; the drug was prepared in a solution of sodium citrate buffer, pH: 4.5), which induces the selective death of B cells of the pancreas. The formation of ECD was checked for 2 - a day after the introduction of STZ by determining the glucose content in the blood of rats, obtained from the tail vein, using a strip-strip (Ope Toshsi, Germany). Only those rats whose blood glucose concentration exceeded 15 mmol/l were selected for subsequent experiments. The rats would be studied for weeks without treatment - this period is sufficient for the formation of experimental diabetic peripheral polyneuropathy (EDPN) - after which the treatment would begin. Rats with EDPN were intraperitoneally injected with pentoxifylline at a dose of 100 mg/kg, as well as LC at a dose of 50 mg/kg once a day 6 times a week (1-6 days, except for the first week, when LC was administered for 2-6 days) during 4 weeks.

Виділяли таки дослідні групи: 1) контрольна група (п-10), щурам якої вводили розчин натрієвого цитратного буферу (рН-4.5); 2) щури з ЕДПН (п-10), котрих не лікували; 3) щури з ЕДПН, котрим вводили пентоксифілін дозою 100 мг/кг (п-12); 4) щури з ЕДПН, котрим вводили ЛК дозою 50 мг/кг (п-12); 5) щури з ЕДПН, котрим вводили пентоксифілін дозою 100мг/кг та ЛК дозою 5О0мг/кг (п--17).Research groups were also distinguished: 1) a control group (n-10), whose rats were injected with a solution of sodium citrate buffer (pH-4.5); 2) rats with EDPN (n-10), which were not treated; 3) rats with EDPN injected with pentoxifylline at a dose of 100 mg/kg (p-12); 4) rats with EDPN, which were injected with LC at a dose of 50 mg/kg (p-12); 5) rats with EDPN, which were injected with pentoxifylline at a dose of 100 mg/kg and LC at a dose of 500 mg/kg (p--17).

У щурів із ЕДПН визначали маси тіла, вміст глюкози в крові та вимірювали швидкість проведення збудження по хвостовому нерву. Усі визначення проводили на 3-ю та 6-у доби кожного тижня лікування (тобто впродовж 7-10 тижнів дослідів). За нормалізацією досліджуваних показників висловлювали про ефективність застосування лікувальних заходів.In rats with EDPN, body weight and blood glucose content were determined, and the speed of conduction of excitation along the tail nerve was measured. All determinations were made on the 3rd and 6th days of each week of treatment (that is, during 7-10 weeks of experiments). According to the normalization of the studied indicators, the effectiveness of the use of medical measures was expressed.

Завдяки сумісному введенню пентоксифіліну та ЛК відзначалася нормалізація швидкості проведення збудження по хвостовому нерву щурів.Thanks to the simultaneous introduction of pentoxifylline and LC, the speed of conduction of excitation along the tail nerve of rats was normalized.

Приклад конкретного застосування способу.An example of a specific application of the method.

У щурів-самців лінії Вістар експериментальний цукровий діабет відтворювали через введення стрептозотоцину (бОмг/кг, в/очер). На другу добу після введення стрептозотоцину концентрація в крові глюкози зросла втричі стосовно попереднього показника, а також даних контрольних спостережень. Впродовж шести тижнів у щурів дослідної групи тривало зниження швидкості проведення збудження по хвостовому нерву.Experimental diabetes mellitus was reproduced in male Wistar rats by administration of streptozotocin (bOmg/kg, IV). On the second day after the introduction of streptozotocin, the concentration of glucose in the blood increased three times compared to the previous indicator, as well as the data of control observations. Over the course of six weeks, the rats in the experimental group continued to experience a decrease in the speed of conduction of excitation along the tail nerve.

Після сумісного введення пентоксифіліну (10Омг/кг) та ЛК (50мг/кг) досліджуваний показник став статистично аналогічний такому, що його вимірювали у щурів у контрольних спостереженнях.After the simultaneous administration of pentoxifylline (10mg/kg) and LC (50mg/kg), the studied indicator became statistically similar to that measured in rats in control observations.

У порівнянні з прототипом, запропонований спосіб лікування експериментальної діабетичної полінейропатії є легше відтворюваним та метою при цукровому діабеті фармакологічних сполук, які сприяють інтенсифікації метаболізму в організмі хворих.In comparison with the prototype, the proposed method of treatment of experimental diabetic polyneuropathy is more easily reproduced and the goal of pharmacological compounds in diabetes that contribute to the intensification of metabolism in the body of patients.

Література 1. ОССТ Кезеагсп сгоцир. Тпе епесі ої іпіепзіме ігеаїтепі ої діареге5 оп Ше демеюртепі апа ргодгезвіоп оїReferences 1. OSST Kezeagsp sgotsir. Tpe epesi oi ipiepzime igeaitepi oi diarege5 op She demyurtepi apa rgodgezviop oi

Іопд-їегт сотріїсайопв іп іпзцїп-дерепаепі аіаресге5 теййиз // М. Епаі. У. Мей. -1993. -МоІ.329. -Р.977-986. 2. ОК РБбгозресіїме Оіарегез 5ішау Стгоишр. Іпіепвіме ріоса діисовзе сопіго! мій зцІрпопуїшгеаз ог іпвиїїп сотрагей м/п сопуепіїопа! (еаїтепі апа гізК ої сотріїсайопв іп райепів м їуре 2 аіарегез // І апсеї. - 998. - МоІ.253. -Р.837- 853.Iopd-iegt sotriisayopv ip ipztsip-derepaepi aiaresge5 teyyiz // M. Epai. U. May. -1993. -MoI.329. -R.977-986. 2. OK RBbgozresiime Oiaregez 5ishau Stgoyshr. Ipiepvime riosa diysovze sopigo! my zcIrpopuishgeaz og ipvyiip sotragey m/p sopuepiiyopa! (eaitepi apa gizK oi sotriisaiopv ip rayepiv m iuure 2 aiareges // I apsei. - 998. - MoI.253. -R.837- 853.

З. Трабер Й., Гиспан В.Х. Средство для лечения диабетической полинейропатии. - Патент РоссийскойZ. Traber Y., Hispan V.H. Means for the treatment of diabetic polyneuropathy. - Russian patent

Федерации ВО Мо2043102. -1995.Federation VO Mo2043102. -1995.

Claims (1)

Спосіб лікування експериментальної діабетичної полінейропатії, оснований на застосуванні препаратів, що підсилюють метаболізм, який відрізняється тим, що внутрішньоочеревинно вводять альфа-ліпоєву кислоту дозою 50 мг /кг протягом 4 тижнів.The method of treatment of experimental diabetic polyneuropathy, based on the use of drugs that enhance metabolism, which differs in that alpha-lipoic acid is administered intraperitoneally at a dose of 50 mg/kg for 4 weeks.