UA127431C2 - Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю - Google Patents

Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю Download PDF

Info

Publication number
UA127431C2
UA127431C2 UAA201809178A UAA201809178A UA127431C2 UA 127431 C2 UA127431 C2 UA 127431C2 UA A201809178 A UAA201809178 A UA A201809178A UA A201809178 A UAA201809178 A UA A201809178A UA 127431 C2 UA127431 C2 UA 127431C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
fermentation
milk
bacteria
fermented
product
Prior art date
Application number
UAA201809178A
Other languages
English (en)
Inventor
Сесіліє Люкке Марвіґ Нільсен
Сесилие Люкке Марвиг Нильсен
Тіна Хорнбек
Тина Хорнбек
Піа Расмуссен
Пиа Расмуссен
Лоне Поульсен
Томас Екхардт
Томас ЭКХАРДТ
Ґуннар Ереґор
Гуннар Эрегор
Елахе Ґаней Моґхадам
Элахе Ганей Могхадам
Original Assignee
Кр. Гансен А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кр. Гансен А/С filed Critical Кр. Гансен А/С
Publication of UA127431C2 publication Critical patent/UA127431C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1236—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using Leuconostoc, Pediococcus or Streptococcus sp. other than Streptococcus Thermophilus; Artificial sour buttermilk in general
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23L3/3571—Microorganisms; Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/10—Preserving against microbes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/113—Acidophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/137—Delbrueckii
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/143—Fermentum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/147—Helveticus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/157—Lactis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/165—Paracasei
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/169—Plantarum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/175—Rhamnosus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
    • A23V2400/215—Cremoris
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
    • A23V2400/249—Thermophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/31—Leuconostoc
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/519—Breve
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Винахід стосується бактерії виду Lactobacillus rhamnosus, яка депонована у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (DSMZ) під інвентарним номером №DSM32092 з протигрибковими ефектами для продукування ферментованого молочного продукту. Винахід додатково належить до композицій і харчових або кормових продуктів, що містять зазначений штам, способів отримання ферментованих молочних продуктів з використанням зазначеного штаму і продуктів, отриманих таким чином.

Description

Винахід стосується бактерії виду / асіобасійи5 птатпозив, яка депонована у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером МеО5М32092 з протигрибковими ефектами для продукування ферментованого молочного продукту.
Винахід додатково належить до композицій і харчових або кормових продуктів, що містять зазначений штам, способів отримання ферментованих молочних продуктів з використанням зазначеного штаму і продуктів, отриманих таким чином.
Винахід стосується бактерії Іасіорасіи5 їєптепішт з протигрибковою активністю, композицій, які містять цю бактерію, зокрема допоміжних культур, які містять цю бактерію, способів отримання кисломолочного продукту із застосуванням цих бактерій або таким чином отриманих культур та ферментованих молочних продуктів, включаючи харчові, кормові та фармацевтичні продукти.
Кисломолочну бактерію (АВ) застосовують протягом десятиріч для збільшення терміну придатності харчових продуктів. Під час сквашування ГАВ утворюють молочну кислоту та інші органічні кислоти, які зменшують рН сквашеного продукту. Продукти, які мають кислий рН не підтримують подальшого росту більшості мікроорганізмів, включаючи патогенні та забруднюючі бактерії, однак, низькі значення рН не впливають на ріст дріжджів та цвілевих грибів та часто викликають забруднення ферментованих молочних продуктів.
Окрім утворення органічних кислот деякі ГАВ також утворюють метаболіти з протимікробною та зокрема з протигрибковою активністю.
Наприклад, у Патентній Заявці ЄС Мо ЕРО221499 описано протигрибкові властивості штаму бактерій І астобасіїй5 "татпозив МАНІ -В-15972, який є здатним до пригнічення росту різних цвілевих грибків у разі культивування на агарному середовищі, доповненому соком огірка.
Подібно до цього, у Патентній Заявці ЄС Мо ЕРО576780 описано штам І асіорасійи5 патпозив
Ї0С-705, який безсумнівно пригнічує ріст грибків Репісійит, Сіадозрогішт, Ризагічт та Сапаїда у середовищі на основі молочної сироватки, яку доповнено гідролізатом казеїну та дріжджовим екстрактом. У Патентній Заявці ЄС Мо ЕР1442113 описано суміші грибків Ргоріопірасієгіцт епзепії та бактерій виду І асіобасіїи5, як-то І асіобасійн5 Патпозив, які мають протимікробну дію, а також застосування цих сумішей для біозахисту. У Патентній Заявці ЄС Мо. ЕР13717237 описано штами І асіобасіїи5 рагасазеї з протигрибковими властивостями та у Патентній Заявці
ЄС Мо ЕР13714671 описано штами І асіобасійи5 птатпозив з протигрибковими властивостями.
Огляд лактобактерій з протигрибковою активністю та їх застосування для захисту хліба та фруктів наведено у роботі Сеге? еї аї!., 2013.
Культури з протигрибковою дією також є наявними у продажу, включаючи культури ЕгехпоФ від Спг. Напзеп, а також культури від компаній Оиропі, БАССО та Віоргох. Розробка культур з протигрибковою дією стикається з великою проблемою через необхідність визначення культур,
Зо які надають значної протигрибкової дії із застосуванням справжніх харчових добавок. Іншим фактором, який потребує обережної оцінки у виборі культур-кандидатів для біозахисту, є їх дія на сенсорні властивості харчового продукту. Проблемою, яку також має бути визначено у наявних у продажу продуктах є їх ступінь залишкового підкислення, тобто тривалість підкислення культури після досягнення продуктом бажаного значення рН. Це являє собою проблему зокрема при підвищених температурах зберігання під час знаходження сквашеного продукту у резервуарах для сквашування перед його охолодженням або під час операцій дозрівання.
Наявні у продажу біозахисні культури також може бути розглянуто, як культури, які утворюють надлишкову кількість діацетилового ароматизатора, який викликає появу "вершкового" запаху, який може бути розцінено, як небажаний ароматичний вплив (А!йп5біег еї а!., 2015).
Відповідно залишається потреба у нових та корисних харчових бактеріях з протигрибковою дією та мінімальним ароматичним впливом.
Винахід стосується бактерії виду І асіобасіїйй5 Тегтепішт, яка має здатність до принаймні 5095 пригнічення росту грибка Репісіййшт в5оїйшШт, депонованого під інвентарним номером р5М32093 або РепісшШіит Бгемісотрасішт, депонованого під інвентарним номером О5М32094.
Винахідниками було відкрито нову групу штамів І асіорбасійи5 Тетппепійт, які надають значних протигрибкових дій та додаткових переваг у разі застосування, як біозахисні штами у способах отримання сквашених продуктів. Взагалі було визначено 10 різних штамів І асіобасіййв5
Тептепішт, які принаймні на 50 95 пригнічували ріст Р. зоїйшт або Р. Бгемісотрасшт.
Штами Іасіюбасійнв5 Тептепішт за винаходом можуть додатково відрізнятися здатністю до принаймні 5095 зменшення концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
У пов'язаному з цим втіленні штами І асіобасіїи5 Тептепішт за винаходом можуть додатково відрізнятися тим, що вони виробляють лише малі кількості діацетилу, наприклад, в межах 0-5 млн...
Як варіант або додатково, штами І асіобасіїш5 Тептепіит за винаходом можуть відрізнятися тим, що вони збільшують рН кисломолочного продукту, який містить І асіобасіш5 Тептепішт протягом його зберігання після сквашування у порівнянні з молочним продуктом,
ферментованим такою ж саме заквашувальною культурою, яка не містить Іасіобасішв5
Теттепіит.
Отже, винахід стосується вищеописаних бактерій, композицій, які їх містять та способів, які полягають у застосуванні цих бактерій для отримання ферментованих молочних продуктів, а також отриманих таким чином продуктів.
Винахід стосується бактерії виду І асіобасійи5 Теппепішт, яка має здатність до принаймні 5095 пригнічення росту грибка Репісіййшт в5оїйшШт, депонованого під інвентарним номером
Ме05М32093 або грибків РепісіШит Бгемісотрасішт, депонованого під інвентарним номером
Ма05М32094. У переважному втіленні винахід стосується бактерії виду І асіорасійи5 Тегтепічт, яка має здатність до принаймні 50 95 пригнічення росту грибка Репісійшт в5оЇйшт, депонованого під інвентарним номером МеОЗМ32093 або грибків Репісіййшт ргемісотрасшт, депонованого під інвентарним номером Ме0О5М32094 у випадку їх росту на молочному субстраті або субстраті на молочній основі, як--о наприклад, на субстраті із застосуванням кисломолочного продукту.
Здатність до пригнічення росту грибка може бути визначено з допомогою численних різних способів аналізу, відомих у цій галузі. У контексті за винаходом здатність до принаймні 50 95 пригнічення росту грибка Репісіййшт воїйШт, депонованого під інвентарним номером
Ме05М32093 або росту грибка Репісіййшт Бгємісотрасішт, депонованого під інвентарним номером МеОЗМ32094 переважно визначено із застосуванням аналізу, який полягає у: (1) отриманні кисломолочного продукту із застосуванням: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) сквашування до досягнення рн 4,6 та (с) загущення сквашеного молока шляхом додавання агару; (2) утворення принаймні однієї плями грибками Р. 5зоїйит або Р. Бгемісотрасішт на загуслому з допомогою агару сквашеному молоці з концентрацією у 500 спор/пляму та їх витримуванні в термостаті протягом 7 днів при температурі 25 "С; (3) визначення відсотку пригнічення шляхом визначення найбільшого діаметру колонії, утвореної внаслідок росту грибка Р. зоїйит або Р. Бгємісотрасішт та вираженні цього діаметру, як відсотка найбільшого діаметру, утвореного за таких же умов, але за відсутністю штаму
І асіорасійи5 Тептепійт.
Штами ІГасіорасіїйш5 їТєптепішт за винаходом мають особливі переваги, оскільки вони збільшують стійкість при зберіганні харчових продуктів, вироблених з цими бактеріями. Як варіант, штами І асіорбасійи5 Тетппепійт за винаходом принаймні на 50 95 пригнічують ріст грибків
РепісшШіит зоЇїйшт, депонованого під інвентарним номером МеО5М32093 та ріст грибків
Репісйит Бгемісотрасшт, депонованого під інвентарним номером МеОЗМ32094. У пов'язаному з цим втіленні, штами І асіобасіїйй5 Тегптепішт за винаходом на 60 95, принаймні на 70 95 або принаймні на 75 95 пригнічують ріст грибків Репісіййшт 5оЇїйит, депонованого під інвентарним номером МеО5М32093 та/або ріст грибків Репісіййшт Бгемісотрасішт, депонованого під інвентарним номером МеО5М32094
Слід розуміти, що концентрація, яка складає принаймні 107 КУО/г штамів І асіобасіїїшв5
Тептепішт за винаходом та яку було визначено у вищенаведеному аналізі є саме тією концентрацією, яка надає відмінної протигрибкової дії. Однак хоча з цієї причини цей винахід стосується штамів Іасіобасійй5 Тептепішт за винаходом з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г, як-то 107-1011 КУО/г, 107-1010 КУО/г та 107-109 КУО/г, він не обмежується цими концентраціями, оскільки прийнятних протигрибкових дій було також отримано із застосуванням менших концентрацій.
Відповідно за одним аспектом бактерії за винаходом додатково відрізняються тим, що вони виробляють малі кількості або суттєво не виробляють летких сполук, які впливають на сенсорні властивості харчового продукту. Відомо, що звичайно застосовані заквашувальні культури, як- то наявні у продажу суміші біеріососсив Шепторнйй5 та Іасіобасійше аеєїБгиескКії 5ирегр.
Бриїданйси5 утворюють певні леткі сполуки, які значно впливають на сенсорні властивості сквашених продуктів. Наприклад, такими видами летких сполук, які впливають на сенсорні властивості харчового продукту є ацетальдегід, діадетил та ацетоїн. У пов'язаному з цим втіленні бактерії за винаходом відрізняються зменшеною наявністю ацетальдегіду, виробленого іншими бактеріями у заквашувальній культурі. Наприклад, певні штами І асіобасіїшв5 Тептепійт за винаходом можуть додатково відрізнятися тим, що вони мають здатність зменшувати принаймні на 50 95 концентрацію ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті. Таким чином, це зменшення визначають у порівнянні з ферментованим продуктом, виробленим без застосування штамів бо І асюбрасійив5 Теппепійт за винаходом. В цій галузі відомі різні способи визначення концентрації ацетальдегіду в ферментованому продукті та їх може бути застосовано для цієї мети відповідно за винаходом. Зазначену здатність до принаймні 50 96 зменшення концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті було переважно визначено з допомогою аналізу, який полягав у: (1) отриманні кисломолочного продукту з допомогою: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) застосуванні сквашування до досягнення рн 4,6, та; (2) зберіганні кисломолочного продукту при температурі 7-1 "С протягом 14 днів; (3) додаванні 200 мкл 4М Нг5О»х до 1г кисломолочного продукту з визначенням концентрації ацетальдегіду із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною.
Ацетальдегід є смаковим компонентом, який виробляють кисломолочна бактерія протягом сквашування. Хоча цей компонент є бажаним у певних втіленнях, в інших випадках може бути корисним зменшення або уникнення його присутності. Бактерії Іасіобасійй5 Теппепішт зменшують концентрацію ацетальдегіду у ферментованому молочному продукті, тим самим надаючи переваги у певних втіленнях, як-то у виготовленні м'якого або підсолодженого йогурту.
Штами г асіовбасін5 Тептепішт за винаходом, наприклад, можуть принаймні на 75 95, принаймні на 9595 або принаймні на 9895 зменшити концентрацію ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
Додатково або як варіант, штами І асіобасіїи5 Тептепіцт за винаходом можуть відрізнятися тим, що вони виробляють діацетил в межах 0-5 млн.7". Секрецію діацетилу може бути визначено із застосуванням різних відомих в цій галузі способів, але переважно її визначають з допомогою способу, який полягає у: (1) отриманні кисломолочного продукту шляхом: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) сквашуванні цього продукту до досягнення рн 4,6, та; (2) зберіганні кисломолочного продукту при температурі 7-1 "С протягом 14 днів; (3) додаванні 200 мкл 4М Нег50О» до 1 г кисломолочного продукту та визначення концентрації
Зо діацетилу із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною.
Бактерії І асіобасійц5 Теппепішт, яка виробляє низькі концентрації діацетилу мають переваги стосовно способів отримання харчових продуктів з цими бактеріями, оскільки інші штами з протигрибковою дією виробляють ці леткі речовини з великими концентраціями, що впливає на смак кінцевого продукту, отже їх не може бути застосовано у всіх втіленнях. Штами І асіорбасійив5
Теппепішт за винаходом можуть відрізнятися тим, що вони виробляють діацетил в межах 0-3 млн." або 0-2 млн...
Штами Іасіорасійш5 Тептепішт за винаходом можуть також відрізнятися наявністю додаткових корисних дій. Наприклад, ці штами можуть відрізнятися тим, що вони збільшують рн (тобто протидіють залишковому підкисленню) кисломолочного продукту, який містить ці бактерії під час зберігання після сквашування у порівнянні з молочним продуктом, який ферментовано тією ж саме заквашувальною культурою, але який не містить Іасіобасійй5 Тепптепшт.
Збільшення показника рН стосується збільшення принаймні на 0,1 та переважно його визначають після зберігання сквашеного продукту протягом більш, ніж 21 днів при температурі 2576. Як було зазначено вище, було спостережено, що протигрибкові бактерії за попереднім рівнем техніки є залученими до залишкового підкислення. Винахідники неочікувано виявили, що штами Іасіорасійй5 Тептепішт за винаходом не тільки не є залученими до залишкового підкислення, але й фактично відіграють роль антагоністів цього процесу, збільшуючи показник рН. Як зазначено у наведених нижче прикладах, цей ефект є особливо відчутним у процесах ферментації із застосуванням заквашувальних культур, які виявляють значне залишкове підкислення, включаючи ряд наявних у продажу заквашувальних культур та зокрема при застосуванні разом з наявними у продажу протигрибковими бактеріями.
Штами І асіорбасійи5 Тегпепішт за винаходом можуть, наприклад, відрізнятися тим, що вони збільшують рН кисломолочного продукту, який містить ці бактерії під час його зберігання після сквашування у порівнянні у молочним продуктом, який ферментовано тією ж саме заквашувальною культурою, але який не містить Іасіорасіїш5 Теппепійт, причому величина зазначеного збільшення рН складає принаймні 0,1 та цей показник визначають після зберігання сквашеного продукту протягом понад 21-денного строку при температурі 25 "С та зазначена заквашувальна культура містить лактобактерії, здатні знижувати рН молочного продукту протягом його сквашування (яке триває 10 год. або менше) до показника у 4,6. Наприклад, може 60 бути здійснено аналіз на основі суміші бактерій бігеріососсиб5 Шепторніше та І асюбрасійив5 деїІргиескії вир5р. рБиїдансив. Відповідні суміші часто застосовують для виготовлення йогурту та, як відомо, вони викликають залишкове підкислення.
У пов'язаному з цим втіленні ферментований молочний продукт, який містить бактерії
І асюрасійив5 Теппепішт зберігає рН вище 4,0 у разі його принаймні 14-денного зберігання при температурі 25"С, причому цей ферментований молочний продукт було отримано із застосуванням способу, який полягає у заквашування молока бактеріями Іасіобасіїшв5
Тептепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою; сквашуванні цього продукту до досягнення рН 4,6 та у перемішуванні та охолодженні сквашеного продукту. Отже, штами ІГасіорасіїйшє Тептепішт за винаходом зменшують дію залишкового підкислення, спостереженого у біозахисних культурах за попереднім рівнем техніки та навіть у традиційних заквашувальних культурах. Слід розуміти, що особливість, яка обумовлює підтримання штамами бактерій І асіобасійй5 Тептепійт за винаходом значення рн вище 4,0 у разі його принаймні 14-денного зберігання при температурі 25 "С лише є показником аналізу, який зазвичай застосовують для визначення цього ефекту. Не має необхідності або потреби в тому, щоб штами І асіобасіїїи5 Теппепішт за винаходом або композиції, які їх містять, включаючи харчові або кормові продукти фактично зберігали у цих умовах. Також, у одному аспекті може бути здійснено аналіз із застосуванням заквашувальної культури, яка містить ГГ АВ, які є здатними до зниження рН молочного продукту до 4,6 протягом 10-годинного сквашування або за менший термін. Цей аналіз, наприклад, може бути здійснено на основі суміші зігеріососсив ІШепторнпіиз5 та І астобасіїи5 аєїбгиескії зирер. Ббиїдансив.
Бактерії за винаходом переважно може бути отримано із застосуванням одного з наступних депонованого штамів: (а) штам Іасіорасійй5 їТеппепішт СНОСС12798, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 32084; (б) штам |Іасіорасійй5 їТеппепішт СНОСС12797, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 32085; (с) штам Іасіорасіш5 їТептепішт СНСС14591, депонований у Німецькій колекції
Зо мікроорганізмів та клітинних культур (ЮОецізспе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еПКкийигеп
Стрн; О5М2), Іппоїепвіг. 7В, 0-38124 Вгашпоспуеїд під інвентарним номером Мо 32086; (4) штам Іасіорасійй5 їТептпепішт СНСОСС14588, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стрн; О5М2), ІппоїМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Ме32087; (6) штам |Іасіорасійй5 їТептпепішт СНСОСС15844, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 32088; () штам асіорасіїш5 їєптепішт СНОСС15865, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 32089; (9) штам Іасіорасійй5 їТеппепішт СНОСС15847, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стрн; О5М2), ІппоїМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Ме32090; (п) штам |Іасіорасійй5 їТеппепішт СНСОСС15848, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (ЮОецізспе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еПКкийигеп
Стрн; О5М2), ІппоїМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Ме32091; () штам ІасіорасіШи5 їеппепішт СНСС15926, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 32096; () штам ІасіорасіШи5 їеппепішт СНСС2008, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
Стр; О5М2), ІппоМепзвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5спмеїд під інвентарним номером Мо 22584; (К) мутантний штам, який можна отримати з одного з депонованого штамів бактерій відповідно за пп. (а) - () та який має здатність до принаймні 50 95 пригнічення росту грибка
РепісшШіит зоїйшт, депонованого у О5МА під інвентарним номером Мо 32093 або Репісійййт
Бргемісотрасішт, депонованого у Ю5М під інвентарним номером Ме 32094, отриманого з допомогою аналізу, який полягає у: (1) отриманні кисломолочного продукту із застосуванням: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає бо принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою,
(р) сквашуванні до досягнення рн 4,6 та (с) затвердінні сквашеного молока шляхом додавання агару; (2) утворенні принаймні однієї плями грибками Р. 5оЇйшт або Р. Бгемісотрасішт на загуслому з допомогою агару сквашеному молоці з концентрацією у 500 спор/пляму та їх інкубуванні протягом 7 днів при температурі 25 С; (3) визначенні відсотка пригнічення шляхом визначення найбільшого діаметру колонії, утвореної внаслідок росту грибка Р. зоїйит або Р. Бгємісотрасішт та вираженні цього діаметру, як відсотка найбільшого діаметру, утвореного за таких же умов, але за відсутністю штаму
І асіорасійи5 Тептепійт.
У контексті цієї заявки, термін "кисломолочна бактерія" або "АВ" застосовують по відношенню до бактерій, прийнятних для застосування у харчовій промисловості, які виробляють молочну кислоту, як головний метаболічний кінцевий продукт вуглеводного сквашування. Ці бактерії мають спільні загальні метаболічні та фізіологічні характеристики та, як правило, є грампозитивними кислотостійкими неспорогенними анаеробними паличкоподібними бацилами або коками з низьким вмістом СС-пар. Споживання цими бактеріями лактози під час сквашування призводить до утворення молочної кислоти, що в свою чергу веде до зменшення рН та до утворення білкового коагуляту. Ці бактерії таким чином є відповідальними за підкислення молока та за текстуру молочного продукту. Як тут застосовано, термін "кисломолочна бактерія" охоплює, але без обмеження, бактерії, які належать до видів
І асіорасійи5 5рр., Віїдобасієгішт 5рр., Зігеріососсив 5рр., І асіососсив5 5рр., як-то І асіорасіив5 деїбгиескКії 5ирер. БиЇїдансив, бгеріососсив Шепторнпіїшв5, І асіобасійие Іасіїз, Війдобрасієгйт апітаїййв, Іасіососсив |асії5, І асіорбасійй5 рагасавзеї, Іасіорасійш5 ріапіагит, Іасіобасіїшв5
Пеїмеїйсив, І асіобасіїив5 асідорніш5, Віїдобасіепит Бгеме та І еисоповіос 5рр.
В залежності від оптимальної температури розповсюдження, ГАВ можна розділити на мезофільні або термофільні. Термін "мезофільні" стосується мікроорганізмів, які мають кращий розвиток при помірних температурах. Зазначений тут термін "мезофільне сквашування" стосується сквашування при температурі приблизно у 22-35"С. Термін "мезофільні ферментовані молочні продукти" стосується ферментованих молочних продуктів, отриманих шляхом мезофільного сквашування мезофільної заквашувальної культури та включає такі
Зо ферментовані молочні продукти, як пахту, кисляк, сметану, сквашені вершки та свіжий сир, як-то кварк, домашній сир та вершковий сир. У промисловості здебільшого застосовують мезофільні бактерії видів І асіососсиз та І еисопозіос.
Термін "термофільні" стосується мікроорганізмів, які мають кращий розвиток при високих температурах. Термін "термофільне сквашування" стосується способів сквашування при температурі приблизно у 35"С - 45"С. Термін "термофільний ферментований молочний продукт" стосується ферментованих молочних продуктів, отриманих шляхом термофільного сквашування із застосуванням термофільної заквашувальної культури та включає такі ферментовані молочні продукти, як йогурт термостатного способу виробництва, перемішаний йогурт, зціджений йогурт та питний йогурт. У промисловості здебільшого застосовують термофільні бактерії видів Зігеріососсиз та І асіобасіїшв.
Як буде підкреслено нижче, винахід стосується способів, які полягають у застосуванні мезофільного та термофільного сквашування.
Термін "пригнічення" стосовно грибків, дріжджів та цвілі стосується зниження їх росту або спороутворення або зменшення їх кількості або концентрації, наприклад, у харчових продуктах та/або на поверхні харчових продуктів, які містять бактерії за винаходом відносно харчових продуктів, які не містять ці бактерії. Ступінь пригнічення, наданого бактеріями Іасіобасійив5
Тептпепішт за винаходом переважно визначають, досліджуючи ріст цих бактерій на загуслому через додавання агару сквашеному молоці за наявністю або у відсутності бактерій І асіобасіїїшв
Теттепіит.
В цьому контексті, під терміном "мутант" слід розуміти штам, отриманий зі штаму бактерій за винаходом із застосуванням, наприклад, генно-інженерних способів, дії випромінювання та/або хімічної обробки. Переважно мутант є функціонально еквівалентним мутантом, наприклад, мутантом, який має суттєво такі ж саме або покращені властивості, зокрема стосовно протигрибкових властивостей, як і депонований штам, отже такий мутант є частиною цього винаходу. Особливо термін "мутант" стосується штаму, отриманого шляхом піддавання штаму за винаходом дії будь-якого звичайно застосованого мутагенезу, включаючи обробку хімічним мутагеном, як-то етилметансульфонат (ЕМС) або М-метил-М'-нітро-М-нітрогуанідин (НТГ), дію
Уф-випромінювання або спонтанне виникнення мутанту. Мутант також може бути піддано різним мутагенним обробкам (під одиничною обробкою слід розуміти одну операцію мутагенезу бо з наступною операцією скринінгу/відбору), але ця кількість переважно не перевищує 20 або переважно не перевищує 10 або переважно не перевищує 5 здійснених обробок (або операцій скринінгу/відбору). У порівнянні з батьківським штамом, менш, ніж 5 96 або менш, ніж 1 95 або навіть менш, ніж 0,195 нуклеотидів бактеріального мутантного геному замінено іншими нуклеотидами або видалено.
Терміни, якими в цьому тексті позначено однину та множину та подібні об'єкти посилання у контексті опису цього винаходу (особливо у контексті з наступною Формулою Винаходу) треба тлумачити як для однини, так і для множини, якщо тільки в цьому документі не буде зазначено іншого або якщо тільки це не буде явно суперечити контексту.
Винахід додатково стосується композицій, який містять принаймні один тип бактерії виду
Іасіобасійи5 Теппепійт, яка має здатність до принаймні 5095 пригнічення росту грибка
РепісшШіит воїйшит СНСОС16948, депонованого у О5МА під інвентарним номером Мо 32093 або росту грибка Репісіїййшт Бргемісотрасішт СНОСС16935, депонованого у ОЗМА під інвентарним номером Мо 32094 на загуслому з допомогою агару сквашеному молоці, виявлене з допомогою вищеописаного аналізу.
Відповідні композиції можуть містити численні додаткові бактерії, включаючи кисломолочна бактерія. Отже, переважна композиція за винаходом відрізняється тим, що вона додатково містить ще принаймні один додатковий вид бактерій, вибраний з одного чи більше родів та видів, як-то І асіобасійи5 в5рр., Вітідорасієтішт врр., Зіперіососсив 5рр., І астососси5 5рр., як-то
Іасюбрасіййв5 аєїБгиесКії виИирер. Биїданпйсив, Зтперіососсиб5 ІШепторпНішв5, Іасіобасіїйи5 асіїв,
Вітдорасієгішт апітаїйв, І асісоссив Іасіїв, І асіобасіїш5 рагасазеї, І асіюбрасійш5 ріапіагит,
Гасюбасійи5 Пеїмеїйсив, І астобасіїйив5 асідорпійи5, Віїйдобасіепит Бгеме та І еисоповіос 5рр.
У особливо бажаному втіленні, композиції за винаходом містять принаймні один тип бактерій виду І асіорасшШив5 Теппепішт з протигрибковою активністю, як зазначено вище та один (або більше) інший тип бактерій з протигрибковою активністю. У одному втіленні застосовано поєднання кількох різних штамів бактерій І асіобасійи5 Теппепішт з протигрибковою активністю за винаходом. Як варіант, ці додаткові штами бактерій, наприклад, може бути вибрано з наступного: (а) штам бактерій І асіорасіи5 пПтатпозих СНОС15860, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (О5М2) під інвентарним номером Мо О5М32092;
Зо (5) штам бактерій І асюрасійше Шатпозивє СНОСС5366, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме ОБМ23035; (с) штам бактерій І асіобасійш5 "татпозивє СНОС12697, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме О5М24616; (4) штам бактерій І асіобасіїш5 рагасазєїі СНОС12777, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (О5М2) під інвентарним номером Мо О5М24651; та (е) штам бактерій І асіобасіїш5 рагасазєї СНОС14676, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме О5М25612.
Винахідники виявили, що ці штами мають додаткову протигрибкову дію та несподівано виявили наявність синергетичної протигрибкової дії комбінації штамів 16. тПТатпозив
СНОСС15860 та 156. Тептепішт СНОСС14591 у порівнянні з пригнічувальною дією кожного застосованого окремо штаму.
Композиції за винаходом також можуть містити численні додаткові компоненти, включаючи одну або більше кріозахисних сполук, а також ароматизаторів.
Найчастіше лактобактерії додають у молоко у вигляді заквашувальної культури. Як застосовано в цьому контексті, термін "заквашування" або "заквашувальна культура" стосується культури одного або більше прийнятних для харчового застосування мікроорганізмів, зокрема молочнокислих бактерій, які є відповідальними за підкислення молочної основи. Заквашувальні культури можуть бути свіжими, але є більшість з них часто знаходиться в замороженому стані або висушено шляхом заморожування. Ці продукти також відомі, як культури "прямого внесення" ("Рігесі Маї Зег (0М5)) та їх розроблено для безпосередньої заквашування у посудину або резервуар для сквашування для виготовлення молочного продукту, як-то кисломолочного продукту або сиру. Відповідні заквашувальні культури можна придбати з численних джерел, як-то чотири культури (Е-ЮМ5 МоРієх Міїа 2,0, Е-0М5 МЕ-І 901, ЕО-СУ5 МЕ- 812 та Е-ЮУ5 СН-1) від Спг. Напзеп, які містять суміші бактерій 5ігеріюсоссив Шепторнійшв5 та
Гасюбасійиз аеїІргескії зиб5р. Биїдансив.
В одному аспекті винахід стосується композицій у вигляді замороженої або підданої сушінню заморожуванням заквашувальної культури, яка містить кисломолочна бактерія з концентрацією, яка складає принаймні 109 КУО/г замороженого матеріалу або з концентрацією, яка складає принаймні 1019 КУО/г замороженого матеріалу або з концентрацією, яка складає принаймні 10! б
КУО/г замороженого матеріалу, які містять бактерії виду Іасіобрасійи5 Теппепішт з протигрибковою активністю, як зазначено вище.
Винахід також стосується бактерій І асіорасіййи5 Тегтепішт та композицій, які їх містять, які відрізняються більш, ніж однією з вищезазначених особливостей та композицій, які містять ці бактерії та композиції за винаходом. Наприклад, винахід стосується бактерії виду І асіобасіїи5
Теппепішт, яка має здатність до принаймні 50 95 пригнічення росту грибка Репісіййшт воїйшт, депонованого під інвентарним номером Мо 0О5М32093 або росту грибка РепісшШит ргемісотрасішт, депонованого під інвентарним номером Ме ЮО5М32094, як було визначено з допомогою аналізу, який полягає у: (1) отриманні кисломолочного продукту із застосуванням: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) сквашування до досягнення рн 4,6 та (с) загущення сквашеного молока шляхом додавання агару; (2) утворення принаймні однієї плями грибками Р. 5оЇїйшт або Р. Бгемісотрасішт на загуслому з допомогою агару сквашеному молоці з концентрацією у 500 спор/пляму та їх витримуванні в термостаті протягом 7 днів при температурі 25 "С; (3) визначення відсотку пригнічення шляхом визначення найбільшого діаметру колонії, утвореної внаслідок росту грибка Р. зоїйит або Р. Бгєемісотрасішт та вираженні цього діаметру, як відсотка найбільшого діаметру, утвореного за таких же умов, але за відсутністю штаму
І асорасйив Теппепішт; та додатково відрізняється тим, що бактерії виду Іасіорасійш5 Тептепішт виробляють діацетил в межах 0-5 млн.7, причому концентрація діацетилу є такою, як було визначено з допомогою аналізу, який полягає у: (4) отриманні кисломолочного продукту із застосуванням: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) сквашуванні до досягнення рн 4,6, та; (5) зберіганні кисломолочного продукту при температурі 7-1 "С протягом 14 днів;
Зо (6) додаванні 200 мкл 4М Не5О5 до 1 г кисломолочного продукту та визначенні концентрації діацетилу із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною.
Ці бактерії можуть додатково відрізнятися здатністю до принаймні 5095 зниження концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
Як варіант або додатково, ці бактерії виду І асіобасіїш5 Тептепішт можуть також відрізнятися здатністю до збільшення рН кисломолочного продукту, який містить бактерії І асіобасшШив
Теппепішт протягом зберігання після сквашування у порівнянні з молочним продуктом, підданим ферментації із застосуванням такої ж саме заквашувальної культури, яка не містить
І асіорасійи5 Тептепійт.
В окремому втіленні винахід також стосується бактерій І асіобасіїш5 Теппепіцт, які мають здатність до принаймні 50 95 пригнічення росту грибка РепісіПишт воїйшт, депонованого під інвентарним номером Мо 0О5М32093 або Репісійшт Бгємісотрасішт, депонованого під інвентарним номером Ме О5М32094, визначеного з допомогою способу, який полягає у: (1) отриманні кисломолочного продукту із застосуванням: (а) заквашування молока бактеріями І асіорасійй5 Теппепішт з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г та заквашувальною культурою, (р) сквашуванні до досягнення рн 4,6 та (с) затвердінні сквашеного молока шляхом додавання агару; (2) утворенні принаймні однієї плями грибками Р. 5оЇйшт або Р. Бгемісотрасішт на загуслому з допомогою агару сквашеному молоці з концентрацією у 500 спор/пляму та їх витримуванні в термостаті протягом 7 днів при температурі 25 "С; (3) визначенні відсотка пригнічення шляхом визначення найбільшого діаметру колонії, утвореної внаслідок росту грибка Р. зоЇйшт або Р. Бгемісотрасішт та відображенні цього діаметру, як відсотка найбільшого діаметру, утвореного за таких же умов, але за відсутністю штаму І асіорасійи5 Тептепішт;
Ці бактерії за винаходом додатково відрізняються тим, що вони збільшують рн кисломолочного продукту, який містить бактерії І асіюобасійй5 Теппепішт протягом зберігання після сквашування у порівнянні з молочним продуктом, підданим ферментації із застосуванням такої ж саме заквашувальної культури, яка не містить І асіорасійй5 Тепптепішт, причому це бо збільшення рН відбувається принаймні на 0,1 та його визначають після зберігання сквашеного продукту протягом понад 21-денного строку при температурі 25 "С. Також, у одному втіленні ці бактерії можуть додатково бути здатними зменшувати принаймні на 50 95 концентрацію ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
У додатковому втіленні винахід стосується способів отримання кисломолочного продукту, які полягають у додаванні бактерій І асіобасійи5 Тептепішт з протигрибковою активністю, як зазначено вище або композиції, яка їх містить, до молока або до молочного продукту та у ферментації отриманої суміші при температурі приблизно у 22 "С-43 "С до досягнення значення рН, яке буде меншим за 4.6.
У контексті цієї заявки, термін "молоко" широко застосовано в загальному значенні для позначення рідин, вироблених молочними залозами тварин або рослин. Згідно за винаходом, це молоко може бути оброблено та термін "молоко" включає цільне молоко, збиране молоко, знежирене чи незнежирене молоко, молоко з низьким вмістом жиру, молоко з низьким вмістом лактози або концентроване молоко. Знежирене молоко є позбавленим жиру молочним продуктом або збираним молоком. Молоко з низьким вмістом жиру звичайно визначають, як молоко, яке містить приблизно 1 95 - 2 95 жиру. Незнежирене молоко часто містить 2 95 жиру або більше. Термін "молоко" призначений охоплювати молоко з різних тваринних (ссавці) та рослинних джерел. Ссавці, які є джерелами молока включають, але без обмеження, корів, овець, кіз, буйволів, верблюдів, лам, коней та оленів. Рослинні джерела молока включають, але без обмеження, молоко, екстраговане з соєвих бобів, гороху, арахісу, ячменю, рису, вівса, кіноа, мигдалю, кеш'ю, кокосу, фундука, коноплі, кунжуту та з насіння соняшнику. У способах та продуктах за винаходом, як початковий матеріал для сквашування переважніше було застосовано коров'яче молоко.
Термін "молоко" також включає молочні продукти зі зменшеним вмістом жиру та/або лактози. Відповідні продукти може бути отримано із застосуванням добре відомих в цій галузі способів та вони є наявними у продажу (наприклад, їх можна придбати у виробника 5еїесі МІіЇК
Ргодисег» Іпс., Теха5, ОБА). Молоко з низьким вмістом лактози може бути отримано відповідно із застосуванням будь-якого відомого в цій галузі способу, включаючи гідроліз лактози ферментом лактазою до глюкози та галактози або шляхом нанофільтрації, електродіалізу,
Зо іонообмінної хроматографії та центрифугування.
У контексті цієї заявки, термін "молочний продукт" або "молочна основа" широко застосовано по відношенню до композиції на основі молока або компонентів молока, яку може бути застосовано, як середовище для росту та бродінню ГАВ. Зазначений молочний продукт або основа містить компоненти, отримані з молока та будь-які інші компоненти, які може бути застосовано з метою підрощування або сквашування І АВ.
Операція сквашування цього процесу виробництва ферментованих молочних продуктів полягає у додаванні молочнокислих бактерій до молока. Процеси сквашування, застосовані для отримання молочних продуктів є добре відомими та пересічний фахівець в цій галузі може вибрати належні умови процесу сквашування, включаючи температуру, насичення киснем, кількість та характеристики мікроорганізму(мікроорганізмів) та час сквашування.
Перед сквашуванням молочний субстрат може бути гомогенізовано та пастеризовано відповідно за способами, відомими в цій галузі. "Гомогенізування", як тут застосовано, означає інтенсивне перемішування для отримання розчинної суспензії або емульсії. Якщо гомогенізування було здійснено перед сквашуванням, то його може бути здійснено для того, щоб подрібнити молочний жир на частинки меншого розміру, щоб він більше не відділявся від молока. Це може бути здійснено шляхом пропускання молока під високим тиском крізь невеликі отвори. Під "пастеризуванням", як тут застосовано, мається на увазі обробка молочного субстрату для зменшення або усунення наявності в ньому живих організмів, як-то мікроорганізмів. Переважно цю операцію здійснюють шляхом підтримання зазначеної температури протягом зазначеного періоду часу, причому цієї зазначеної температури завжди досягають шляхом нагрівання. Температуру та тривалість цієї операції може бути вибрано для того, щоб вбити або інактивувати певні бактерії, як-то шкідливі бактерії. Також може бути здійснено й наступну операцію швидкого охолодження.
У особливо корисному способі за винаходом, бактерії ІасіобрасніШив5 Тептепішт з протигрибковою дією, як зазначено вище або композицію, яка їх містить додають до молока або до молочного продукту та отриману суміш піддають бродінню таким чином, що: (а) концентрація бактерій І асіорбасійи5 Теппепійт з протигрибковою дією складає принаймні 1х106 КУО/г або принаймні 1х107 КУО/г по закінченню сквашування у ферментованому молочному продукті; та/або
(Б)концентрація бактерій Іасіобасійй5 Тептепішт з протигрибковою дією на поверхні кисломолочного продукту складає принаймні 1 х105 КУО/см-.
Цей шлях розвитку має перевагу, оскільки може бути повністю застосовано протигрибкову дію бактерій І асіюбрасіи5 Тептепійт.
Одним шляхом досягнення цієї концентрації є застосування способу отримання кисломолочного продукту з підтриманням параметрів сквашування з підвищенням протягом цього процесу концентрації вищеописаних бактерій Іасіорасіїйй5 ТептпепіШт. Застосування загальноприйнятних умов та заквашувальних культур для сквашування (як описано у
Прикладах) звичайно призведе до зростання під час цього процесу концентрації вищеописаних бактерій І асіорасійй5 Тептепішт принаймні на 0,5 Ід. Як варіант, параметри сквашування зберігають такими, щоб уникнути суттєвого зниження концентрації вищеописаних бактерій
І асюбрасіййе Тептепішт, із досягненням, наприклад, зниження концентрації протягом сквашування та зберігання в межах не більш, ніж на 30 95, не більш, ніж на 25 95 або не більш, ніж на 20 95.
Винахід також стосується Сквашений продукту, який можна отримати шляхом сквашування молочного продукту з бактеріями Іасіобасіїше Тептепішт за винаходом. Термін "Сквашений продукт" тут застосовано саме по відношенню до продукту сквашування. Відповідний
Сквашений продукт може бути рідиною, отриманою внаслідок процесу сквашування із застосуванням бактерій Іасіорасіи5 Тептепішйт за винаходом. Ця рідина може, але не обов'язково, містити бактерії та переважно вона містить утворені бактеріями І асіорбасіййв5
Тептепішт за винаходом протигрибкові метаболіти. Цей Сквашений продукт може бути застосовано для отримання харчових, кормових або фармацевтичних продуктів, наприклад, його може бути розпилено на харчові або кормові продукти для досягнення протигрибкової дії.
Винахід додатково стосується способів отримання харчових, кормових або фармацевтичних продуктів, які полягають у застосуванні способу отримання кисломолочного продукту, як зазначено вище. Винахід також стосується харчового, кормового або фармацевтичного продукту, який можна отримати з допомогою цього способу.
Сквашування здійснюють для отримання харчових, кормових або фармацевтичних продуктів. Терміни "ферментований молочний продукт", "харчовий" або "кормовий" продукт
Зо стосуються продуктів, які можна отримати з допомогою способів сквашування за винаходом та включає сир, йогурт, фруктовий йогурт, йогуртовий напій, зціджений йогурт (грецький йогурт,
Лабнех), кварк, м'який сир низької жирності та вершковий сир. Термін "харчовий продукт" додатково охоплює інші ферментовані харчові продукти, включаючи ферментоване м'ясо, як-то ферментовану ковбасу та ферментовані рибні продукти.
Термін "сир" охоплює будь-який сир, в тому числі тверді, напівтверді та м'які сири, як-то сири наступних типів: Котедж, Фета, Чеддер, Пармезан, Моцарела, Емменталер, Данбо, Гауда,
Едам, сири типу Фета, блакитні сири, солоні сири, Камамбер та Брі. Досвідченому фахівцеві в цій галузі добре відомо, як перетворити коагулят на сир та способи цього перетворення може бути знайдено у літературі, див., наприклад, Ковзікому5Кі, Е.М., апа М.М. Мівігу, "Спеезе апа
Еегтепієй Мік Рооаз»("Сир та кисломолочні продукти харчування"), 1997, За Еа. ЕК. мМ.
Козікомувкі, Г.. С Умевірогі, СТ. Як тут застосовано, сир, який має концентрацію масі з масовою часткою, меншою за 1,7 95 має відношення до слабосолоних сирів.
У контексті цієї заявки, термін "йогурт" стосується продуктів, які містять бактерії зігеріососсив ІПепторНій5 та Іасіобасійше аеїЇБбгесКі взиб5р. Биїданси5 та вибірково інші мікроорганізми, як-то І астобрасійи5 аеїбгиескії 5,ирзр. Іасіїв, Віїідобасієтішт апітаїїв 5!,рзр. Іасіїв,
Ї асюсоссиз Іасії5, І асіобасійив5 асідорнішв5 та І асіюбасіїшив5 рагасазеї або будь-які мікроорганізми на їх основі. Інші, ніж Зігеріососсив ІПегторпйн5 та І асіорасіїи5 аеїргиескії вир5р. Биїдансив штами молочнокислих бактерій також може бути включено до складу йогурту для надання готовому продукту різних властивостей, як-то для сприяння рівновазі його мікрофлори.
Застосований тут термін "йогурт" охоплює йогурт термостатного способу виробництва, перемішаний йогурт, питний йогурт, йогурт типу Реїй бийіб55е, термічно оброблений йогурт, зціджений або йогурт "грецького типу", який відрізняється високим вмістом білка та йогуртові продукти.
Зокрема, термін "йогурт" охоплює, але без обмеження, йогурт, як визначено відповідно до французького та європейського законодавства, наприклад, коагульовані молочні продукти, отримані шляхом молочнокислого сквашування із застосуванням лише певних термофільних лактомолочних бактерій (тобто Іасіорасіййв5 авеєїргиескКії 5!ирер. Биїдансив та 5ігеріососсив5
ІШепторпінв5) які є спільно культивованими та щодо яких виявлено, що вони живуть у кінцевому продукті в кількості, яка складає принаймні 10 мільйонів КУО (колонієутворюючих одиниць) / г. бо Йогурти можуть вибірково містити додані молочні сировинні матеріали (наприклад, вершки) або інші інгредієнти, як-то цукор або підсолоджувачі, один або більше ароматизаторів, фрукти, крупи або живильні речовини, особливо вітаміни, мінерали та волокна, а також стабілізатори та загусники. Вибірково йогурт має відповідати специфікаціям для ферментованих молочних продуктів та йогуртів за стандартами АЕМОК МЕ 04-600 та/або кодексу за стандартом ЗіапА-Іа- 1975. Для того, щоб задовольняти стандарту АЕМОК МЕ 04-600, продукт не повинен бути нагрітим після сквашування та масова частка молочної сировини готового продукту повинна становити принаймні 70 95.
У додатковому втіленні винахід стосується харчових, кормових або фармацевтичних продуктів, які містять один або більше штамів бактерій виду Іасіорбасйи5 Тептепішт з протигрибковою дією, як зазначено вище та одне або більше з наступного: (а) принаймні один додатковий штам бактерій, вибраний з одного або більше з наступних видів, як-то Іасіососсив 5рр., Зперіососсивз врр., Іасіорасіййє5 5рр., Іейсопов5іос 5рр.,
РзепйдоІеисоповісос 5рр., Редіососсив 5рр., Вгемірасієтіцт 5рр. та Епівегососсиз 5рр.; (5) штам бактерій І асіорасШив5 "татпозих СНОС15860, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме О5М32092; (с) штам бактерій І асіорасійй5 птатпобзиє СНОСС5366, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме ОБМ23035; (4) штам бактерій І асіорасійи5 гпатпозиє СНОСС12697, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Ме О5М24616; (е) штам бактерій І асіобасіїйш5 рагасазеї СНОС12777, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Мо О5М24651;та () штам бактерій І асіорасійй5 рагасахзеі СНСОС14676, депонований у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Мо О5БМ25612.
Опис фігур.
Фіг 1: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з культурою Егезпсхб4 (другий стовпчик), разом з культурою Ноідрасе УМ-С Ріиз (третій стовпчик) або разом з 15. Теппепішт СНОСС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 721 "С протягом 19 днів (верхній рядок) та 27 днів (нижній рядок). Досліджувані
Зо забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А) Р. сагпешт, (В) Р. рапешит та (С) Р. годиегогі.
Фіг. 2: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з культурою Егезпсхб4 (другий стовпчик), разом з культурою Ноїдбасю УМм-С Різ (третій стовпчик) або разом з 15. Теппепішт СНОСС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 25-41 "С протягом 6 днів (верхній рядок) та 11 днів (нижній рядок). Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А) Р. сагпешт, (В) Р. рапешит та (С) Р. годиегогі.
Фіг. 3: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з культурою Егезпсхб4 (другий стовпчик), разом з культурою Ноїдбасю УМм-С Різ (третій стовпчик) або разом з 15. Теппепішт СНОС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 721 "С протягом 19 днів (верхній рядок) та 27 днів (нижній рядок). Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А) Р. ргемісотрасішт, (В) Р. стивюзит та (С) Р. зоїйшт.
Фіг. 4: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з культурою Егезпсхб4 (другий стовпчик), разом з культурою Ноїдбасю УМм-С Різ (третій стовпчик) або разом з 15. Теппепішт СНОСС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 25:21 "С протягом 6 днів (верхній рядок) та 11 днів (нижній рядок). Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А) Р.
Бгемісотрасшт (05М32093), (В) Р. стивіозит та (С) Р. зоїйшт (05М32093).
Фіг. 5: Ріст дріжджів на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з культурою ЕгезпОФа (другий стовпчик), разом з культурою Ноїдбаст? УМ-С Рісиз (третій стовпчик) або разом з 15. Теппепійт
СНеС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 751 "С протягом 11 днів (верхній рядок) або при температурі 25:41 "С протягом 5 днів (нижній рядок). Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 1х103 КУО/пляму (верхній рядок), 1х102 КУО/пляму (середній рядок) та 1х10' КУО/пляму (нижній рядок): (А) Тогиіазрога 60 аєїргиескії, (В) Стурюсоссиз Напзепії, (С) Оерагуотусез Напзепії та (0) Маїтом/ла Ігроїуїїса.
Фіг. 6: Рівні діацетилу після зберігання при температурі 7-1 "С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні з культурою ЕгезпОба,
Ноїдрасте ММ-С Ріи5 або 15. Теппепішт СНОСС14591. 00: межа визначення. 00: межа кількісної оцінки.
Фіг. 7: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого лише заквашувальною культурою (контроль, перший стовпчик), разом з 16. "патозив СНОС15860 (другий стовпчик), разом з ІБ. Теппепійт СНОС14591 (третій стовпчик) або у поєднанні з б. шТтатпозих СНОСС15860 та 16. Тїеппепішт СНСС14591 (четвертий стовпчик). Чашки інкубували при температурі 25-1"С протягом 5 днів. Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А) Р. сагпешт, (В) Р. рапешит та (С) Р. годиегогі.
Фіг. 8: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого (1) лише заквашувальною культурою, разом з (2) 15. Тепгтепішт СНСОС12798, (3) 16. тептепішт СНОС12797, (4) 150. Ттептпепішт СНОС14591, (5) 16. Тептпепішт СНОС14588, (6) 15. Теппепшт СНОС15844, (7) 16. Ттептепішт СНОС15865, (8) 16. Тептепшт СНОС15847, (9) 15.
Тептепішт СНОС15848, (10) 15. Ттептепішт СНОС15926 та (11) ГБ. Тептпепшт СНОС2008. Чашки інкубували при температурі 25:11 "С протягом 5 днів (лівий стовпчик фотографій) або 7 днів (правий стовпчик фотографій).
Досліджувані забруднювачі було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму: (А)
Р. Огемісотрасійт (05М32094), (В) Р. спивіовит та (С) Р. взоїйшт (05М32093).
Фіг. 9: Рівні діацетилу після зберігання при 7-1 С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні з культурою Еге5пОФЯ, Ноїдарасте
УМ-С Рісизх або І Б. Тептепішт. ГО: межа визначення. І 00): межа кількісної оцінки.
Фіг. 10: Розвиток рН у ферментованих молочних продуктах протягом часу при зберіганні при (А) 7-1"С та (В) 25:41 С протягом 28 днів. Сквашування продуктів було здійснено із застосуванням лише заквашувальної культури (контроль) або заквашувальної культури у поєднанні з культурою ЕгезпоОФа, Ноїдбасехю УМ-С Ріи5 або штамами 1 Б. Тептепішт.
Зо Фіг. 11: Розвиток рН у ферментованих молочних продуктах протягом часу при зберіганні при (А) 7-1 С або (В) 25:41 С протягом 21 днів. Сквашування продуктів було здійснено із застосуванням лише заквашувальної культури (контроль, А) або заквашувальної культури у поєднанні з культурою Егезпофа (9), Ноїдрасю УМ-С Різ (о) або ІБ. тептепійт СНОС14591 (1).
Фіг. 12: Рівні ацетальдегіду після зберігання при 7-1 "С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні зі штамами ГБ. Теппепішт. 00: межа визначення. І 00): межа кількісної оцінки.
Фіг. 13: Рівні ацетальдегіду після зберігання при 7-1 "С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні з ІБ. Тептепішт СНОС14591. 1 00: межа визначення. І 00): межа кількісної оцінки.
Фіг. 14: Криві підкислення чотирьох наявних у продажу заквашувальних культур, ЕО-ЮМ5 МЕ- 812, г-ОМ5 УБ-1901, -ЮУ5 МоРіІех Міїа 2,0 та Е-ЮМ5 СН-1, які росли у молоці (1 95 жиру та 4,5 95 білків) при 43 "С.
Фіг. 15: Криві залишкового підкислення йогурту, ферментованого однією з чотирьох наявних у продажу заквашувальних культур, ЕО-ЮМУ5 УБ-І 812, Е-БУ5 УБ-1 901, Е-ОМ5 ХогРієх Міда 2,0 та
Е-ОМ5 СН-1 після зберігання при 6 "С протягом терміну до 43 днів.
Фіг. 16: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого (1) лише заквашувальною культурою, ЕО-ЮОМ5 МЕ-1812, разом з (2) 15.
Тептепішт СНОС12798, (3) 15. Теппепішт СНОС12797, (4) 10. Тептепішт СНОС14591, (5) 15.
Теппепішт СНОС14588, (6) 156. Теппепішт СНОС15844, (7) 16. Теппепшт СНОС15865, (8) 15.
Тептепішт СНОС15847, (9) 156. Тептпепішт СНОСС15926 та (10) ІБ. тептепійт СНОСС2008. Чашки інкубували при температурі 25:11 "С протягом 4 днів (лівий стовпчик фотографій) або 8 днів (правий стовпчик фотографій). Досліджуваний забруднювач, Р. Бгемісотрасішт (05М32094), було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму.
Фіг 17: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого (1) лише заквашувальною культурою, Е-ЮМ5 СН-1, разом з (2) 15. Тептепійт
СНОС12798, (3) 16. теппепшт СНОС12797, (4) 10. Теппепшт СНОС14591, (5) 15. Тетптепійт
СНОС14588, (6) 15. Ттеппепшт СНОС15844, (7) 15. Теппепішт СНОС15865, (8) 15. Ттеппепішт 60 СНОоС15847, (9) 15. Теппепшт СНОСС15926 та (10) ІБ. тептепішт СНОС2008. Чашки інкубували при температурі 25:21 "С протягом 4 днів (лівий стовпчик фотографій) або 8 днів (правий стовпчик фотографій). Досліджуваний забруднювач, Р. Бгємісотрасійт (05М32094), було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму.
Фіг. 18: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого (1) лише заквашувальною культурою, ЕО-ЮОМ5 МЕ-І812, разом з (2) 15.
Теппепішт СНОС12798, (3) 156. Теппепішт СНОС12797, (4) 16. Теппепшт СНОС14591, (5) 15.
Теппепішт СНОС14588, (6) 156. Теппепішт СНОС15844, (7) 16. Теппепшт СНОС15865, (8) 15.
Тептепішт СНОС15847, (9) 156. Тептпепішт СНОСС15926 та (10) І Б. тептепійцт СНОСС2008. Чашки інкубували при температурі 25:11 "С протягом 4 днів (лівий стовпчик фотографій) або 8 днів (правий стовпчик фотографій). Досліджуваний забруднювач, Р. воїйшт (05М32093), було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму.
Фіг. 19: Ріст цвілевих грибків на чашках, отриманий із застосуванням молока, ферментованого (1) лише заквашувальною культурою, Е-ЮМ5 СН-1, разом з (2) ГБ. Тептепішт
СНОС12798, (3) 16. тептпепшт СНОС12797, (4) 10. Теппепшт СНОС14591, (5) 156. Ттетптепішт
СНОС14588, (6) 15. Теппепішт СНОС15844, (7) ГБ. теппепішт СНОС15865, (8) 15. Тептепішт
СНОС15847, (9) 15. Теппепшт СНОСС15926 та (10) ГБ. тептепішт СНОС2008. Чашки інкубували при температурі 25:21 "С протягом 4 днів (лівий стовпчик фотографій) або 8 днів (правий стовпчик фотографій). Досліджуваний забруднювач, Р. зоїйшт (05М32093), було додано з концентраціями, які складали 500 спор/пляму.
Фіг. 20: Рівні діацетилу після зберігання при 7-1 С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою, ЕО ЮУ5
МЕ-І812 або г-ЮМ5 СН-1 (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні з одним з дев'ятьох штамів І Б. Тептепішт. ГО: межа визначення. І 00): межа кількісної оцінки.
Фіг. 21: Рівні ацетальдегіду після зберігання при 7-1 "С протягом 14 днів у ферментованих молочних продуктах із застосуванням сквашування лише з заквашувальною культурою, ЕО ЮУ5
МЕ-Г812 або г-0М5 СН-1 (контроль) або з заквашувальними культурами у поєднанні з одним з дев'ятьох штамів І 6. Тептепішт. ГО: межа визначення. І 00): межа кількісної оцінки.
Приклад 1:
Наближено-кількісний аналіз пригнічувальної дії 5. Теппепішт СНОСС14591 проти різних
Зо дріжджових та цвілевих забруднювачів та утворення діацетилу.
Для наближено-кількісного аналізу пригнічувальної дії 5. Тептпепішт СНСОСС14591 було застосовано аналіз зразків на агарі, який нагадує процес виробництва та виготовлення йогурту:
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 9021 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Б-0ОМ5 Мій 2,0) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. одну таку пляшку було інокульовано ІБ. Тептепішт СНОСС14591 із загальною концентрацією у 2х107 КУО/г, дві пляшки було інокульовано однією з двох промислових біозахисних культур (ЕгезпОФа та
Ноїдбасе УМ-СРІи5) з рекомендованими дозуваннями (100 одиниць/тонну та 20 одиниць сухого продукту (ОСІ) /100 л відповідно для культур ЕгезпПоХВ4 та Ноїдрасе УМ-С Ріиз) та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 43:51 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Далі ферментоване молоко нагріли до температури 40"С та додали 40 мл 595 стерильного розчину агару, розтопленого та охолодженого до 60 "С. Потім цей розчин сквашеного молока та агару розлили по стерильним чашкам Петрі та чашки було піддано сушінню у ламінар-боксі протягом 30 хв.
Було нанесено плями із застосуванням суспензії спор шести різних цвілевих грибків (Репісйит Бгємісотрасійт (05М32094), Р. стивіозит, Р. зоїйшт (05М32093), Р. сатецт, Р. рапешйт та Р. Водиеїогії) з концентрацією у 500 спор/пляму, причому три цвілевих грибки було нанесено на плями у кожну чашку. Чотири типи дріжджів, включаючи Тогцазрога аеїргиескії,
Стуріососсив Напзепії, Оерагуотусев Напзепії та Маїтоула Іроїуїса було нанесено на плями з концентраціями, які складали 107, 103 та 107 КУО/пляму. Чашки інкубували при температурі 7-1 С та 25:21 "С та регулярно здійснювали перевірку росту цвілевих грибків та дріжджів.
На 14 добу досліджень було здійснено аналіз зразків на діацетил із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною (НЗОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІО). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання: бо Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази:
Н5сСопоЇ м.2.00, Режкіп ЕІтег".
Газовий хроматограф: Ашозузіет Хі, РегКіп ЕІтег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕЕАР 25 м х 0,20 мм х 0,33 мкм, Адіепі Тесппоіодіев
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібрації) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн.-") у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів чутливості. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н25О4 до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НЗОС.
Результати аналізу зразків на агарі, які наведено на Фіг. 1-5 вказують на те, що всі з досліджених цвілевих грибків дуже добре росли на чашках з агаром та молоком, яке зазнало сквашування тільки з заквашувальною культурою (контроль). Однак, у разі наявності під час сквашування молока культур бактерій ГБ. Теппепшт СНСОСС14591 на отриманих чашках було виявлено пригнічення росту всіх досліджених грибків роду РепісіїййШт. Рівень пригнічення був порівнянним або навіть перевищував рівень пригнічення, спостережений для двох промислових біозахисних культур. На Фіг. З показано, що всі досліджені дріжджі росли на чашках з агаром та молоком, яке зазнало сквашування тільки з заквашувальною культурою (контроль). У разі наявності під час сквашування молока культур бактерій 16. Теппепійт СНСОСС14591 на отриманих чашках було виявлено пригнічення росту доданих у всіх концентраціях грибків С. тацдіоіа та У. Іроїуїїса. Також у разі наявності під час сквашування молока культур бактерій І 5.
Тептепішт СНОСС14591 на отриманих чашках було спостережено пригнічення росту з нижчими концентраціями грибків Т. аеїІргоесКі та 0. Напзепії Отриманий рівень пригнічення був порівнянним або навіть перевищував рівень пригнічення, спостережений для двох промислових біозахисних культур.
Дію застосування бактерій за винаходом на утворення діацетилу зображено на фіг. б, де показано, що додавання І б. Тептепішт СНОСС14591 під час сквашування молока призводить до вироблення мінімальних кількостей діацетилу у порівнянні з наявними у продажу альтернативними засобами.
Приклад 2:
Наближено-кількісний аналіз пригнічувальної дії І 60. Тептепійт СНОСС14591 у поєднанні з І Б.
Патпозив СНОС15860 проти різних цвілевих забруднювачів
Для наближено-кількісного аналізу пригнічувальної дії б. їТеппепішт СНОС14591 у поєднанні з ГБ. ппатпозих СНОС15860 було застосовано аналіз зразків на агарі, який нагадує процес виробництва та виготовлення йогурту:
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 90241 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Б-0ОМ5 Мій 2,0) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Одну таку пляшку було інокульовано Гб. Шатпобзи5 СНОСС15860 із загальною концентрацією у 1х107
КУО/г, одну пляшку було інокульовано І Б. Тептепішт СНОСС14591 із загальною концентрацією у 1х107 КУО/г, ще одну пляшку було інокульовано ІБ. Тептпепійт СНСС14591 та 15. Птатпов5ив
СНеС15860, причому кожну культуру було застосовано з концентрацією у 5х105 КУО/г та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 43:41 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Далі ферментоване молоко нагріли до температури 40"С та додали 40 мл 5595 стерильного розчину агару, розтопленого та охолодженого до 60 "С. Потім цей розчин сквашеного молока та агару розлили по стерильним чашкам Петрі та чашки було піддано сушінню у ламінар-боксі протягом 30 хв.
Було нанесено плями із застосуванням суспензії спор шести різних цвілевих грибків, як-то Р. сагпешт, Р. рапешт та Р. Кодишеїйогії з концентрацією у 500 спор/пляму, причому три цвілевих грибки було нанесено на плями у кожну чашку. Чашки інкубували при температурі 25:11 "С та регулярно здійснювали перевірку росту цвілевих грибків.
Результати аналізу зразків на агарі, які наведено на Фіг.7 вказують на те, що всі з досліджених цвілевих грибків дуже добре росли на чашках з агаром та молоком, яке зазнало бо сквашування тільки з заквашувальною культурою (контроль). Однак, у разі присутності бактерій
ІБ. птатповзив 15860 або ІБ. Теппепішт СНОСС14591 під час сквашування молока на отриманих чашках було виявлено пригнічення росту трьох досліджених грибків роду Репісійййшт. Більш того, у разі спільного застосування бактерій І б.ипатпозив СНОС15860 та 15. Тептепшт СНОС14591 було виявлено наявність пригнічувальної дії, яка була синергетичною у порівнянні з пригнічувальною дією кожного окремо застосованого штаму.
Приклад 3:
Наближено-кількісний аналіз пригнічувальної дії десятьох штамів І Б. Тептепійт проти різних цвілевих забруднювачів
Для наближено-кількісного аналізу пригнічувальної дії десятьох штамів ІБ. Теппепішт було застосовано аналіз зразків на агарі, який нагадує процес виробництва та виготовлення йогурту:
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 9021 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Б-0ОМ5 МЕ-1І901) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Десять пляшок було інокульовано зі штамами ГБ. їєппепішт з концентраціями, які складали 1х107 КУО/г та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано її лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 4321 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Далі ферментоване молоко нагріли до температури 40 "С та додали 40 мл 5 9о стерильного розчину агару, розтопленого та охолодженого до 60 "С. Потім цей розчин сквашеного молока та агару розлили по стерильним чашкам Петрі та чашки було піддано сушінню у ламінар-боксі протягом
ЗО хв.
Було досліджено наступні штами бактерій ІБ. Теппепішт: ГБ. Тептпепішт СНОС12798, 156.
Тептпепішт СНОС12797, 15. Теппепішт СНОС14591, 15. Теппепішт СНОС14588, ІБ. Теппепійт
СНОС15844, І Б. теппепішт СНОС15865, 15. тептепішт СНОС15847, ІБ. Тептпепшт СНОС15848, 15. Теппепішт СНОС15926 та 1 Б. Ттептепішт СНОС2008.
Було нанесено плями із застосуванням суспензії спор шести різних цвілевих грибків, як-то
Репісіййшт Бгемісотрасішт (05М32094), Р. сгивіозит, Р. зоїйшт (05М32093),Р. сатецйт, Р.
Зо рапешт та Р. ВКодиеїогі! у концентрації 500 спор/пляму, причому три цвілевих грибки було нанесено на плями у кожну чашку. Чашки інкубували при температурі 25441 "С та регулярно здійснювали перевірку росту цвілевих грибків.
На 14 добу досліджень було здійснено аналіз зразків на діацетил із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною (НЗОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІО). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання:
Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази:
Н5сСопої м.2.00, Режіп ЕЇІтег".
Газовий хроматограф: Ашозузіет Хі, РегКіп ЕІтег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕЕАР 25 м х 0,20 мм х 0,33 мкм, Адіепі Тесппоіодіев
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібраці) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн.-") у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів відгуку. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н»5бО»4 до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НБЗОС.
Для перевірки дії досліджуваних культур на залишкове підкислення, одинадцять зразків сквашеного молока (включаючи зразок із застосуванням лише однієї заквашувальної культури та зразки із застосуванням заквашувальної культури у поєднанні з десятьма штамами 16.
Тептепішт) зберігали при температурі 7-1 С та 25:21 "С протягом 28 днів з вимірюванням рН на 1, 7, 14, 21 та 28 день зберігання.
Результати аналізу зразків на агарі, які наведено на Фіг.8 вказують на те, що всі з досліджених цвілевих грибків дуже добре росли на чашках з агаром та молоком, яке зазнало сквашування тільки з заквашувальною культурою (контроль). Для грибків Р. Ббгемісотрасійт бо (05М32094) та Р. зоїйшт (05М32093) було спостережено велику затримку їх росту у разі застосування всіх присутніх протягом молочного сквашування штамів Б. ЕРептепішт. Для позосталих досліджених цвілевих грибків було спостережено різночасну затримку їх росту у разі наявності штамів ІБ. Теппепійт під час молочного сквашування. Застосування бактерій штаму 6. Тептепішт СНОСС14591 призвело до значного пригнічення суттєво всіх досліджених в цьому аналізі цвілевих грибків.
Дію досліджуваних бактерій на утворення діацетилу зображено на фіг. 9, де показано, як кожен з цих штамів, як-то ІБ. Тептпепішт СНОС12798, 15. тептепішт СНОС12797, 15. Тептепішт
СНОС14591, 15. теппепішт СНОС14588, 15. теппепішт СНОС15844, ІБ. Тептпепішт СНОС15865, 15. Теппепшт СНОС15847, 15. Тептепішт СНОС15848, 16. Теппепішт СНСОСС15926 та 15.
Тептепішт СНОСС2008 або виробляють дуже мало або зовсім не виробляють діацетилу.
Дію досліджуваних бактерій на залишкове підкислення зображено на Фіг. 10, де показано, як кожен з цих штамів, як-то ІБ. Тептпепішт СНОС12798, 15. тептепішт СНОС12797, 15. Тептепішт
СНОС14591, 15. теппепішт СНОС14588, 15. теппепішт СНОС15844, ІБ. Тептпепішт СНОС15865, 15. Теппепшт СНОСС15847, 15. Тептепішт СНОС15848, 16. Теппепішт СНСОСС15926 та 15.
ІїТеппепішт СНОСС2008 зовсім не впливають на залишкове підкислення або навіть його зменшують у порівнянні з контрольним зразком йогурту.
Ці виявлені дані були неочікуваними та дуже важливими, оскільки було спостережено, що прийнятні для харчового застосування протигрибкові бактерії за попереднім рівнем техніки є залученими до секреції летких сполук та до збільшення викликаних заквашувальною культурою ефектів залишкового підкислення.
Приклад 4:
Вплив одного штаму І Б. Тептепішт на залишкове підкислення
В цьому прикладі описано дослідження впливу одного штаму ГБ. Тептепійт (СНСС14591) на залишкове підкислення.
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 9021 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Б-0ОМ5 Мій 2,0) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл, причому одну таку пляшку було інокульовано ІБ. Тептепіцт СНОСС14591 із загальною концентрацією у 2х107
Зо КУО/Гг, дві пляшки було інокульовано однією з двох промислових біозахисних культур (ЕгезпОоФаА та Ноїдрастю ММ-С Ріих) з рекомендованими дозуваннями (1000/ї та 20 ОСИОЛО0Ї для
ЕгезпоФі4 та Ноїдбаст УМ-С Рісш5, відповідно) та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано її лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 43:11 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60-0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді.
Для перевірки дії бактеріальної культури на залишкове підкислення, чотири зразки сквашеного молока (тільки заквашувальну культуру, Еге5пОФЯі, Ноїдрася УмМ-С Ріи5 та 15.
Теппепішт СНеОСС14591) зберігали при температурі 7-1 С та 25-41 С протягом 21 днів з вимірюванням рн на 1, 7, 14 та 21 день зберігання.
Дію бактеріальної культури на залишкове підкислення зображено на Фіг. 11, де показано, як додавання штаму 10. їеппепішт СНСС14591 під час сквашування молока запобігає залишковому підкисленню кисломолочного продукту. Додавання однієї лише заквашувальної культури призводить до появи легкого залишкового підкислення та застосування двох промислових біозахисних культур в обох випадках призводить до залишкового підкислення.
Приклад 5:
Дія десятьох штамів ІБ. Тептепішт на вміст ацетальдегіду
Десять штамів 15. їєптепішт було досліджено на їх здатність до зниження вмісту ацетальдегіду.
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 9021 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Е-ПСОУ5 МЕ-1901 мМо-РІехФ) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Десять пляшок було інокульовано зі штамами ГБ. Теппепішт з концентраціями, які складали 1х107 КУО/г та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано її лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 4321 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Пляшки зберігали при температурі 7521 "С протягом 14 днів.
На 14 день зберігання було здійснено аналіз зразків на ацетальдегід із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною (НЗОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІВ). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання:
Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази:
Н5сСопоЇ м.2.00, Режкіп ЕІтег".
Газовий хроматограф: Ашозувзіет ХГ, Регкіп ЕІптег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕЕАР 25 м х 0,20 мм х 0,33 мкм, Адіепі Тесппоіодіев
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібрації) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн"? у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів відгуку. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н2о5Ох до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НЗОС.
Результати зображено на фіг. 12, де показано, як кожен з цих штамів, як-то штами 16.
Тептпепішт СНОС12798, 15. тТеппепішт СНОС12797, 15. Теппепішт СНОС14591, І р. Теппепійт
СНОС14588, 15. теппепійт СНОС15844, І Б. тептепішт СНОС15865, ІБ. Тептпепшт СНОС15847, 15. Теппепішт СНОС15848, 15. Теппепшт СНОС15926 та 16. Теппепшт СНСОСС2008 мають здатність до зменшення концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
Приклад 6:
Дія одного штаму ГБ. Тептепішт на вміст ацетальдегіду.
Один штам 16. їєптепішт було досліджено на його здатність до зниження вмісту ацетальдегіду.
Зо Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 9021 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Промислову заквашувальну культуру (Б-0ОМ5 Мій 2,0) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по двом пляшкам об'ємом 200 мл, причому одну таку пляшку було інокульовано штамами ГБ. Тептепішт з концентраціями, які складали 1х107 КУО/г та одну пляшку було застосовано, як контрольний зразок та інокульовано лише однією заквашувальною культурою. Обидві пляшки інкубували на водяній бані з температурою 4321 "С та сквашування в цих умовах тривало до досягнення рН 4,60:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Пляшки зберігали при температурі 7-1 "С протягом 14 днів.
На 14 день зберігання було здійснено аналіз зразків на ацетальдегід із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною (НЗОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІО). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання:
Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази:
Н5сСопоЇ м.2.00, Режкіп ЕІтег".
Газовий хроматограф: Ашозузіет Хі, РегКіп ЕІтег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕРЕАР 25 м х 0,20 мм х 0,33 мкм, Адііїепі Тесппоіодіеб
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібрації) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн) у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів відгуку. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н»5бО»4 до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НЗОС.
Результати зображено на Фіг. 13 та вони свідчать про те, що бактерії штаму І Б. Тептепійт
СНОССІ14591 мають здатність до зменшення концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
Приклад 7:
Функціональний аналіз промислових заквашувальних культур
Чотири включені сюди промислові заквашувальні культури було вибрано на основі їх різних профілів підкислення. Три з них, а саме Е-ЮМ5 СН-1, Е-ЮМ5 МогРіех МІЇа 2,0 та Е-ЮМ5 МрЕ-І 901, знаходилися в замороженому стані та одну, РО-ЮМ5 МЕ-1Ї812, було піддано сушінню заморожуванням. Для перевірки різниці профілів підкислення було здійснено стандартизування молока середньої жирності порошком збираного молока до досягнення 1 95 вмісту жиру та 4,5 95 вмісту білків, після чого молоко піддали 3З0-хвилинній тепловій обробці з температурою у 85-41 С та негайно охолодили. Одну з чотирьох різних промислових заквашувальних культур (Е-ОМ5 СН-1, г-0У5 МоРієех Міїа 2,0, -ОМ5 МЕ-І 901 або ЕО-ЮОМУ5 Уг-І 812) було інокульовано з концентрацією 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Пляшки інкубували на водяній бані з температурою 43:21 "С та піддали бродінню в цих умовах до досягнення рН 4,5 із постійним вимірюванням рН впродовж всього процесу сквашування. Потім ці пляшки зберігали ще 43 дні при температурі 6 С зі щотижневим вимірюванням рН для визначення рівнів залишкового підкислення
Отримані профілі підкислення чотирьох промислових заквашувальних культур (Е-ЮУ5 СН-1,
Е-ОМ5 ЖМоРієх Міга 2,0, Е-ЮУ5 МУР-І1901 та ЕО-БУ5 МУг-І 812) наведено на Фіг. 14. Культура Е-ЮОУ5
СН-1 мала швидкий час сквашування з досягненням рн 4,55 за 4,87 год. Культура Е-ЮОМ5 МоРієх
Ма 2,0 мала помірний час сквашування з досягненням рн 4,55 за 5,29 год. Культури ЕО-ЮУ5
МЕ-812 та Е-0М5 МУБЕ-1901 виявили повільніший час сквашування з досягненням рН 4,55 за, відповідно, 6,45 та 5,87 год. Залишкові профілі підкислення показали наявність дуже низьких рівнів залишкового підкислення для культур БО-ЮМ5 МЕ-1812 та Р-ОМ5 МоБіех Мій 2,0 (відповідно, ДрН-0О,12 та ДрнН:-0,11 після зберігання при 6 "С протягом 43 днів), помірні рівні залишкового підкислення для культури Е-ЮМУ5 МЕ-1901 (АрН-0,26 після зберігання при 6 "С протягом 43 днів) та високий рівень залишкового підкислення для культури Б-ЮОМ5 СН-1 (ДрН.О,55 після зберігання при 6 "С протягом 43 днів) (Фіг. 15).
Приклад 8:
Наближено-кількісний аналіз пригнічувальної дії дев'ятьох штамів Б. Теппепішт проти різних цвілевих забруднювачів в умовах сквашування із застосуванням двох різних заквашувальних культур
Для наближено-кількісного аналізу пригнічувальної дії дев'ятьох штамів 15. Теппепійт було застосовано аналіз зразків на агарі, який нагадує процес виробництва та виготовлення йогурту:
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 90:21 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Молоко було інокульовано однією з двох промислових заквашувальних культур (Е-ЮУЗ СН-1 або ЕО-ЮМ5 УгЕ-
І 812) при 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Дев'ять пляшок, інокульованих кожною заквашувальною культурою було додатково інокульовано штамами ІБ. їептепішт з концентраціями, які складали 1х107 КУО/г та одну пляшку, інокульовану кожною з заквашувальних культур було застосовано, як контроль та інокульовано її лише однією заквашувальною культурою. Далі всі ці пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 43:21 "С та піддано бродінню в цих умовах до досягнення рН у 4,55:0,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Далі ферментоване молоко нагріли до температури 40 "С та додали 40 мл 596 стерильного розчину агару, розтопленого та охолодженого до 60 "С. Потім цей розчин сквашеного молока та агару розлили по стерильним чашкам Петрі та чашки було піддано сушінню у ламінар-боксі протягом 30 хв.
Було досліджено наступні штами бактерій 1 Б. Теппепіит: І Б. Ттептепійт
СНОС12798, 15. тептепшт СНОС12797, 16. тептепішт СНОС14591, І р. тептепійт
СНОСІ14588, 15. Теппепішт СНОСС15844, 16. Теппепішт СНОСС15865, 15. Теппепійт
СНОС15847, І Б. тептепшт СНОС15926 та І Б. тептепішт СНОС2008.
Було нанесено плями із застосуванням суспензій спор двох різних цвілевих грибків, як-то
Репісйит Бгемісотрасшт (05М32094) та Р. зоїйшт (05М32093) у концентрації 500 спор/пляму, причому по одному виду цвілевих грибків було нанесено на плями у кожну чашку. Чашки інкубували при температурі 7-1 С та 25-41 "С та регулярно здійснювали перевірку росту цвілевих грибків.
На 14 день зберігання було здійснено аналіз зразків на діацетил із застосуванням бо хроматографії газової фази над рідиною (Н5ОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІО). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання:
Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази:
Н5сСопоЇ м.2.00, Режкіп ЕІтег".
Газовий хроматограф: Ашозузіет Хі, РегКіп ЕІтег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕЕАР 25 м у 0,20 мм х 0,33 мкм, Адіїепі Тесппоіодієв
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібрації) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн- 7) у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів відгуку. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н»5бО»4 до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НЗОС.
Результати аналізу зразків на агарі наведено на Фіг. 16-19 та вони свідчать, що обидва з досліджених цвілевих грибків дуже добре росли на чашках з агаром та молоком, ферментованим лише однією з заквашувальних культур (контроль). Як для Р. Бгемісотрасійт (05М32094), так і для та Р. воїШшт (05М32093) було спостережено велику затримку росту грибка у випадку застосування будь-якого з досліджуваних штамів Ір. Тептепішт у разі їх присутності під час сквашування молока незалежно від застосованої заквашувальної культури.
Дію досліджуваних бактерій на утворення діацетилу зображено на Фіг. 20. Було виявлено, що застосування будь-якого з протигрибкових штамів, як-то ГБ. Теппепішт СНОСС12798, 16.
Тептпепішт СНОС12797, 15. Теппепішт СНОС14591, 15. Теппепішт СНОС14588, ІБ. Теппепійт
СНОС15844, І Б. тептепішт СНОС15865, 16. Геппепішт СНОС15847, І Б. Тептпепшт СНОС15926 та ГБ. Тепгтепішт СНОСС2008 не призводить до додаткового додавання діацетилу до існуючого рівню цієї сполуки, утвореного за рахунок заквашувальної культури.
Зо Слід зазначити, що ці знахідки були неочікуваними та дуже важливими, оскільки було спостережено, що прийнятні для харчового застосування протигрибкові бактерії за попереднім рівнем техніки є залученими до секреції викликаних заквашувальною культурою летких сполук.
Приклад 9:
Дія дев'ятьох штамів 0. Тептепішт на вміст ацетальдегіду в умовах сквашування із застосуванням двох різних заквашувальних культур
В цих дослідженнях було здійснено перевірку дев'ятьох штамів ІБ. їептепіит на їх здатність знижувати вміст ацетальдегіду.
Гомогенізоване молоко зі зменшеною кількістю жиру (1,5 95 маса/об'єм) було оброблено нагріванням при температурі 90:21 "С протягом 20 хв. та негайно охолоджено. Молоко було інокульовано однією з двох промислових заквашувальних культур (Е-ОУЗ СН-1 або ЕО-ЮОМ5 УгЕ-
І 812) при 0,02 95 (маса/об'єм) та інокульоване молоко було розлито по пляшкам об'ємом 200 мл. Дев'ять пляшок було інокульовано штамами ІБ. Теппепійт з концентраціями, які складали 1х107 КУО/г та одну пляшку, інокульовану кожною з заквашувальних культур було застосовано, як контроль та інокульовано її лише однією заквашувальною культурою. Всі пляшки було інкубовано на водяній бані з температурою 4351 "С та піддано бродінню в цих умовах до досягнення рН у 4,55:240,1. Після сквашування пляшки ретельно струсили для руйнування коагуляту та охолодили на льоді. Пляшки зберігали при температурі 7-12 протягом 14 днів.
Було досліджено наступні штами бактерій 1 Б. Теппепіит: І Б. Ттептепійт
СНОС12798, 15. тТеппепішт СНОС12797, 16. Теппепішт СНОСС14591, 15. тТептпепійт
СНОСІ14588, ІБ. теппепішт СНОС15844, І Б. Ттептепійт СНОС15865, 15. тТептепішт СНОС15847, 15. Теппепішт СНОС15926 та 1 Б. Ттептепішт СНОС2008.
На 14 день зберігання було здійснено аналіз зразків на ацетальдегід із застосуванням хроматографії газової фази над рідиною (НЗОС), чутливого способу аналізу летких речовин у складних матричних структурах. Для цього було налаштовано прилад для відбору рівноважної парової фази, приєднаний до газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором (РІО). Для цієї мети було застосовано наступне обладнання:
Автоматичний прилад для відбору рівноважної парової фази:
НБЗБЯОХІ, ТигроМаїгіх 110, Режкіп ЕЇІтег.
Програмне забезпечення для аналізу рівноважної парової фази: 60 Н5сСопоЇ м.2.00, Режкіп ЕІтег".
Газовий хроматограф: Ашозувзіет Хі, РегКіп ЕІтег.
Програмне забезпечення для газової хроматографії:
Титбоспгот памідайг, РегКіп ЕІтег.
Колонка: НР-ЕЕАР 25 м у 0,20 мм х 0,33 мкм, Адйепі Тесппоіодіев
Для визначення коефіцієнтів відгуку (калібрації) було застосовано стандарти відомої концентрації, контролі було застосовано для регулювання стійкості коефіцієнтів відгуку в аналітичних серіях, а також у проміжних серіях та з часом (місяці). Концентрацію летких речовин (млн.-") у зразках та контролях було визначено із застосуванням отриманих зі стандартів коефіцієнтів відгуку. Зразки було отримано шляхом додавання 200 мкл 4М Н»5бО»4 до 1 г зразка йогурту із негайним наступним аналізом із застосуванням НБЗОС.
Зображені на Фіг. 21 результати свідчать, що кожен з цих штамів, як-то штами І Б. Тептепійт
СНОС12798, 15. теппепішт СНОС12797, 15. тептепішт СНОС14591, ІБ. Тептпепішт СНОС14588, 15. Теппепішт СНОСС15844, 16. Теппепішт СНОСС15865, 16. Теппепішт СНОС15847, ІБ.
Тептепішт СНОС15926 та 1 Б. Тептепішт СНОС2008 мають здатність до зменшення концентрації ацетальдегіду, виробленого заквашувальною культурою протягом сквашування у ферментованому молочному продукті.
Посилання
ЕРО221499
ЕРО576780
ЕР1442113
И5Б5,378,458
ЕР2 693 885
ЕР13717237
ЕР13714671
Сеге? єї аї., Сопігої ої зройаде їтипді Бу Іасіїс асід расіепа ("Контроль забруднюючих грибків молочнокислими бактеріями"), Віоіодіса! Сопігої, мої. 64 (2013): 231-237
А!цпзбіего сеї аї., Сопіпршіоп ої моїайшШев то Ше апійипда! еМесі ої І асіобасіїи5 рагасавзеї іп деїіпед теєдійт апа уодпигі ("Вплив летючих речовин на протигрибковий ефект Іасіобасійшв рагасазеї у визначеному середовищі та йогурті"), Іпї У Роса Місгобіоіоду, мої. 194 (2015): 46-53
Козікомувкі, Е.М. апа Мівігу, М.М., "Спеезе апа Регітепієй МІК Росав" ("Сир та кисломолочні продукти харчування"), 1997, Зга Ей. Е.М. Козікому»вкі, І... Умевірогі, СТ
Депоновані штами та експертне рішення
Заявник вимагає, щоб зразок зазначених нижче депонованого мікроорганізмів міг бути доступним лише експерту до дати надання патенту
Штам Гасіорасійй5 їТепптпепішт СНСС12798 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо 32084.
Штам Гасіорасійй5 їТеппепішт СНСС12797 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (ЮОецізспе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еПКкийигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо з2гов85.
Штам Гасіорасійй5 бТептпепішт СНСС14591 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М7), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо з2гов86.
Штам Гасіорасійй5 Тептпепішт СНСС14588 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М7), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо
Бо з2087.
Штам Гасіорасійй5 Тептпепішт СНСС15844 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; 0О5М7), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5зспуеїід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо з2го88.
Штам Гасіорасійй5 Тептпепішт СНСС15865 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; 0О5М7), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5зспуеїід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо з2089.
Штам Гасіорасійй5 Тепптпепішт СНСС15847 було депоновано у Німецькій колекції бо мікроорганізмів та клітинних культур (ЮОецізспе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еПКкийигеп
СтЬн; О5М7), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгайп5зспмеїд, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо з2г090.
Штам Гасіорасійй5 Тептпепішт СНСС15848 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо 32091.
Штам Гасіорасійй5 бТепптпепішт СНСС15926 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 22.07.2015 під інвентарним номером Мо 32096.
Штам Гасіорасійй5 Теппепішт СНСС2008 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 19.05.2009 під інвентарним номером Мо 22584.
Штам ІасіорасіШи5 ппатпозих СНОСС15860 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Юецізспе Заттійпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еїКкийКигеп
СтЬн; О5М7), Іпройепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо 32092.
Штам Репісйшіит воїйшт СНОС16948 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (Оеці5спе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 7ейКийигеп ЗтЬн; О5М2),
ІпроїПепзіг. 7В, 0-38124 Вгайпзспуеїд, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо 32093.
Штам РепісшШішт Бгемісотрасішт СНСС16935 було депоновано у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (ЮОецізспе Заттіцйпуд моп Мікгоогдапізтеп ипа 2еПКкиПпйигеп
СтЬн; О5М27), Іппойепвіг. 7В, 0-38124 Вгацпзспугеід, 16.07.2015 під інвентарним номером Мо 32094.
Ці депонування було здійснено відповідно до Будапештської угоди про міжнародне визнання депонування мікроорганізмів для цілей патентної процедури.

Claims (10)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 30
1. Бактерія виду Гасіобасійиє татповзив, депонована у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Мо ЮО5М32092, з протигрибковим ефектом для продукування ферментованого молочного продукту.
2. Композиція для продукування ферментованого молочного продукту, яка містить штам 35 Іасіорбасійи5 пптатповзиз за п. 1.
З. Композиція за п. 2, яка додатково містить штам /асіобасійих Тегптепійт, депоновий у Німецькій колекції мікроорганізмів та клітинних культур (05М2) під інвентарним номером Мо рзм32086.
4. Композиція за п. 2 або 3, яка додатково містить принаймні одну кріозахисну сполуку. 40
5. Композиція за будь-яким з пп. 2-4, яка є твердою, замороженою або підданою сушінню заморожуванням, заквашувальною культурою, яка містить молочнокислі бактерії з концентрацією, яка складає принаймні 107 КУО/г замороженого матеріалу, або з концентрацією, яка складає принаймні 1019 КУО/г замороженого матеріалу, або з концентрацією, яка складає принаймні 1077 КУО/г замороженого матеріалу. 45
6. Спосіб отримання ферментованого молочного продукту, який полягає у додаванні бактерії Іасіорасійи5 пПатповзив за п. 1 або композиції за будь-яким з пп. 2-5 до молока або до молочного продукту та у заквашуванні отриманої суміші при температурі приблизно 22-43 "С до досягнення значення рн, меншого за 4,6.
7. Ферментований молочний продукт для харчового призначення, який містить бактерію виду 50 Іасіобасійив5 гратповиз за п. 1 або композицію за будь-яким з пп. 2-5.
8. Ферментований молочний продукт для кормового призначення, який містить бактерію виду Іасіобасійив5 гратповиз за п. 1 або композицію за будь-яким з пп. 2-5.
9. Застосування бактерії виду /асіобасілйибх ппатповивз за п. 1 або композиції за будь-яким з пп. 2-5 для виготовлення харчового продукту. 55
10. Застосування бактерії виду / асіобасійи5 гпатпозив за п. 1 або композиції за будь-яким з пп. 2-5 для виготовлення кормового продукту.
Фіг а лак
Фіг.2 с. о с. . в в
Фіг. З ТТ: с в. о) 3,
Фіг.4
Ії ЩІ (ор соля мин" ще чи Ба уся и Тк
З о. - в хо і-жве 5 5 я 5 а у з 8 1 З В же ща А її і дпдв Ву лем Ів т оо - п, Ман а «її ект В ле стае фОобеола мин" яко ше нав юн Ки СО а НЯ х лука ож А ж х е х а х а «тет емо о що су
Фіг.З А 436 «кі зв : З | .
ак. пен Кн Ед ннижяна ни фут стик нелост ит рюй
48. НЕК ЕЕЕ вес 42 жа Що ; --ке Контроль ші пня Ева за снетден Найда МАС Ршх за сен СНССІЗТ9В з ---СНОСІЗТ9 о в: іо 15 о 25 Зо пек--СНССЗаБЯВ В за і Час іднів) ее ЗСНОСІ58аЙ 455 сне СНССІ5ВБ5 444 шнн-СТОСІ5В87 413 В сен СНОСІ5ВАВ ха В ЗМК а допднндоннн и сен СНОСІОЮВ
З. ОН р НН ВЕ дн за. - Тв зе фен» тя ни т М сел ж т т 7 пт о 5 1 15 20 25 зо Час іднів)
Фіг.10
А 46 44 Кн Ки кине А, 42 що за З 36 4 ТКУ У УК ККУ т, 0 в 10 15 20 23 Час (днів) В 4 з 4,5 5 44 43 4 , 4 о Пн
39 . у, чик . Ше оч 3,8 - ев о В 16 15 20 25 Час (днів)
Фіг.11
-- а Ей ж а. Ух з БЕ а ши ще дру рнннннннятенненент нене неменеемежеухихехетеккнетеннанжекетннн реехотиснеькотнсхехокс МОН ВІ мин" «йо и в сн нн ее с етнни іс: Об м пн вової ооо вх М шик и ши и с и ШИ ВИ І Фо сег ге Я
Фіг.12 б х ' п с ! б ша не і в о ща в о ї ВО 5-5 | о «о і ВУ 52 - п тя панянок 1ннннненлннентннннкачоннчнях Од «х 0,51 млн" йо о т о Ох ВІВ мин" Контроль ССС Фіг З
7 я 5,5 4 ох ак : с ях ;
в. ж х х : х х чне РЗ-ВУВ УК-1 ВІЗ - : у з, краях ме кВ 4 Ж т. тек сю БОМИВ УВО ; , У якою «БМ уобіех МИ Л.О ж ск я А вечкях ВУ СН ! К і ше , 0 2 4 6 К Чає годині
Фіг.14 а, ч 4,5 Ши Ж ні, - ; Бо у 4 ж вот саме осо зано меж : око 43 4 ве ш пнкофрння КТЗ УЕАВІЗ х Е ме ожк - я 42 тей БОМ Е-ТО01 41 и шенйе я Е-0М5 Жатіек МН 2.0 ши ша ей ОУН 44 я. ! Па ееж юр ххасовснзкавахиттекх о ю 20 зо 30 ко Час (днів)
Фіг.15
ОС Ор Че г; о т в. - Б 25 в, 4 зе : шо ру ї І ще нн нн В ВЕНИ еф сн дбддд яких --85--- зт ВД схо дод и т жосжлкохяот ОВ фі пн ап я ТТ ВИ ТТ ТТ ЛВ ГО В: ЕТО " 4812 УБАВийМ. Рая УКаВІ я ЖЕІЯІ)е ЖЕО. ВЕР Я ЖЕ4А8І) о УБАВЬЯа УБІВЮА ковтропь) СИНИ СНАУ; СОДИ НЕСЕ СНОСІВЯХ СНСС1ВБА СНОГІЗаЯТ СНКІ5326 СНОСМяВ я з 71 шов о: Ж кі дев є : що її
4. Митні нечичупннпядмлкнниппунклнтюттипсенкчетіасолнотіт хорди петт тні птткснтнігсонодкчттілотнккиснтнчюнннмот ВЛА ВБІ МН Ху ддшшшдтн витають кт титецитскаситсткчшишитсшшшишишши. МО біб ман" й зречннтннння уст тт дуття чити тні КОЮ Же осттттн
«НА. са Із ТВ сі сія їі» СВ КН щі» м "ЗОжНЄСТтУя вен Я силач сюгі5ЕЛа ЄНССІВОЗ СНЕСРЖЯУ сНнспІмоа СВОСНЮВ (Контроль)
Фіг.20
12 з т ща Ж ! щ і Ж я: що! я : уаяной я 5: В щи г З й : В ч« з- . ший ому у му НВ КМ ин ув дк инх Мерм нн вною МО хом" ника в в о кв і нак вв я Я ТВ ЧК ЗАЯВІ. ЖЖ УРА ВКАа РАНИ ЖАВ Є ОЗРАВЕК ОХРАНЕ іКонтрояьі ОК чХ СОС? сне СНрСжаВ снссічаяа СНУ СНССТВяу сис ЄНОСтюВ в сн 15 ї звяеняяя 0 сш НЕ
Б я. ЕІ в : Ва «3 Ву Собеббі мин" нав сном де п Кк т пк вм кв вне нки МОЮ 2 015 мав" пре КЕ МИЛИ МИ КЕПКИ ПЕД ЛЕ КО ОМ ОК КПК (Контроль СК Ні СА Ся с їн свя сах НА я НЕСІОУЗВ СМОЛИ Х НОСІННІ НСБ СНОСІ58аа СНОСВЯБІ СНІраБУа» гНОСНКедЕ СВеОВХ
Фіг.21
UAA201809178A 2015-08-31 2016-08-30 Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю UA127431C2 (uk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15183198 2015-08-31

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA127431C2 true UA127431C2 (uk) 2023-08-23

Family

ID=56852257

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201809178A UA127431C2 (uk) 2015-08-31 2016-08-30 Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю

Country Status (15)

Country Link
US (2) US20180249727A1 (uk)
EP (2) EP3553166A1 (uk)
JP (2) JP2018526993A (uk)
KR (2) KR20180101636A (uk)
CN (2) CN108138124A (uk)
AR (2) AR105866A1 (uk)
AU (2) AU2016315133A1 (uk)
BR (2) BR112018003018A2 (uk)
EA (2) EA201890404A1 (uk)
IL (2) IL257682A (uk)
MX (1) MX2018002278A (uk)
PE (2) PE20181133A1 (uk)
UA (1) UA127431C2 (uk)
WO (1) WO2017037046A1 (uk)
ZA (2) ZA201800859B (uk)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180038562A (ko) * 2015-08-31 2018-04-16 시에이치알. 한센 에이/에스 후산성화를 억제하는 락토바실러스 퍼멘텀 박테리아
JP2018533910A (ja) * 2015-08-31 2018-11-22 セーホーエル．ハンセン アクティーゼルスカブ アセトアルデヒドの濃度を低減するラクトバチルス・ファーメンタム菌
CN108138124A (zh) 2015-08-31 2018-06-08 科.汉森有限公司 具有抗真菌活性的发酵乳杆菌细菌
US11178884B2 (en) 2017-10-27 2021-11-23 Chr. Hansen A/S Lactobacillus rhamnosus with increased diacetyl production
US11707070B2 (en) * 2018-04-19 2023-07-25 Chr. Hansen A/S Inhibition of fungal growth by manganese depletion
CN109370948B (zh) * 2018-11-26 2020-08-04 江南大学 一株高产6-磷酸-β-半乳糖苷酶的乳酸乳球菌及其应用
MX2022004679A (es) * 2019-10-23 2022-05-10 Chr Hansen As Composicion bacteriana para controlar la degradacion fungica y usos de la misma.
CN111647521A (zh) * 2020-04-02 2020-09-11 玉林市容县奇昌种猪养殖有限公司 一种乳杆菌gm_1及其选育方法
WO2021209600A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Chr. Hansen A/S Method of reducing growth of listeria in food products
US12011011B2 (en) 2020-07-27 2024-06-18 Sargento Cheese Inc. Natural cheese and method for making natural cheese with specific texture attributes
US11510416B1 (en) 2021-02-18 2022-11-29 Sargento Foods Inc. Natural pasta-filata style cheese with improved texture
JP7207804B1 (ja) 2022-10-23 2023-01-18 規雄 酒井 乳酸菌株、乳酸菌の取得方法、ヨーグルトの製造方法、ヨーグルトのスターター、ヨーグルトおよび乳酸菌発酵豆乳食品
NL2035217B1 (en) * 2023-03-01 2024-01-05 Chongqing Tianyou Dairy Co Ltd Lactobacillus fermentum ty—f13 and application thereof

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4956177A (en) 1985-11-04 1990-09-11 Microlife Technics, Inc. Method for inhibiting fungi
FI92498C (fi) 1992-06-10 1994-11-25 Valio Meijerien Uusi mikro-organismikanta, sitä sisältävät bakteerivalmisteet ja näiden käyttö hiivojen ja homeiden torjuntaan
EP1308506A1 (en) 2001-11-06 2003-05-07 Eidgenössische Technische Hochschule Zürich Mixtures of Propionibacterium jensenii and Lactobacillus sp. with antimicrobial activities for use as a natural preservation system
JP2004236638A (ja) 2003-02-10 2004-08-26 Taiyo Corp 発酵乳乳清発酵液の製造法
ITMI20062451A1 (it) * 2006-12-20 2008-06-21 Mofin S R L Metodo per la preparazione di un latte destinato ad applicazioni lattiero-casearie il latte ottenuto con detto metodo ed i suoi usi
CN101273738B (zh) * 2007-03-28 2011-06-01 哈尔滨正方科技有限公司 在常温下保持高活菌数的调配型酸性乳饮料的制备方法
TW200927141A (en) * 2007-11-22 2009-07-01 Bayer Schering Pharma Oy Vaginal delivery system
US20120107451A1 (en) * 2009-06-30 2012-05-03 Chr-Hansen A/S Method for producing a fermented milk product
IT1405780B1 (it) 2010-07-12 2014-01-24 Giuliani Spa Miscela arricchita di isoflavoni-agliconi, equolo e lunasina a base di soia fermentata, procedimento per la sua preparazione e relativi usi in campo alimentare, medico e cosmetico.
WO2012088261A1 (en) * 2010-12-23 2012-06-28 Danisco A/S Cryoprotective compositions and uses thereof
PL2699097T3 (pl) * 2011-04-08 2017-01-31 Chr. Hansen A/S Lactobacillus rhamnosus wzmacniający smak i zapach
PT2693885T (pt) 2011-04-08 2018-06-04 Chr Hansen As Efeito antimicrobiano sinérgico
UA115330C2 (uk) * 2012-04-09 2017-10-25 Кр. Хансен А/С Біозахист із застосуванням штамів lactobacillus rhamnosus
PL2836588T3 (pl) * 2012-04-09 2017-08-31 Chr. Hansen A/S Bioprotekcja z zastosowaniem szczepów Lactobacillus paracasei
CN104797705B (zh) * 2012-05-21 2018-07-20 杜邦营养生物科学有限公司 具有抗真菌性的乳杆菌属菌株
JP6153218B2 (ja) 2012-12-28 2017-06-28 日本ブレーキ工業株式会社 金属異物検知装置
CN104855674A (zh) * 2015-05-18 2015-08-26 上海佳俊生物科技有限公司 组合菌种联合转化的微生物发酵全价饲料生产方法
JP2018533910A (ja) * 2015-08-31 2018-11-22 セーホーエル．ハンセン アクティーゼルスカブ アセトアルデヒドの濃度を低減するラクトバチルス・ファーメンタム菌
KR20180038562A (ko) * 2015-08-31 2018-04-16 시에이치알. 한센 에이/에스 후산성화를 억제하는 락토바실러스 퍼멘텀 박테리아
CN108138124A (zh) 2015-08-31 2018-06-08 科.汉森有限公司 具有抗真菌活性的发酵乳杆菌细菌

Also Published As

Publication number Publication date
ZA201804542B (en) 2019-09-25
AR105866A1 (es) 2017-11-15
BR122018013713A2 (pt) 2019-09-10
AU2018204698A1 (en) 2018-07-19
BR112018003018A2 (pt) 2018-09-18
AU2018204698B2 (en) 2020-05-21
KR20180042407A (ko) 2018-04-25
CN108587968A (zh) 2018-09-28
EA037612B1 (ru) 2021-04-21
PE20211663A1 (es) 2021-08-26
CN108138124A (zh) 2018-06-08
KR20180101636A (ko) 2018-09-12
US20190059406A1 (en) 2019-02-28
WO2017037046A1 (en) 2017-03-09
AR112198A2 (es) 2019-10-02
AU2016315133A1 (en) 2018-03-08
PE20181133A1 (es) 2018-07-17
IL261588A (en) 2018-10-31
JP7094850B2 (ja) 2022-07-04
US20180249727A1 (en) 2018-09-06
BR122018013713B1 (pt) 2024-01-23
US11096396B2 (en) 2021-08-24
JP2018526993A (ja) 2018-09-20
EP3553166A1 (en) 2019-10-16
IL257682A (en) 2018-04-30
ZA201800859B (en) 2019-01-30
MX2018002278A (es) 2018-03-23
JP2019013240A (ja) 2019-01-31
EA201891889A1 (ru) 2019-02-28
EA201890404A1 (ru) 2018-09-28
EP3344749A1 (en) 2018-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA127431C2 (uk) Бактерія lactobacillus rhamnosus з протигрибковою активнiстю
US10653161B2 (en) Flavor-enhancing Lactobacillus rhamnosus
EP3344052B1 (en) Lactobacillus fermentum bacteria inhibiting post-acidification
JP7050915B2 (ja) ジアセチル産生量が増加したラクトバチルス・ラムノーサス
EA034173B1 (ru) Противогрибковая композиция, содержащая штамм lactobacillus paracasei
US20180235249A1 (en) Lactobacillus fermentum bacteria reducing the concentration of acetaldehyde
EA032303B1 (ru) Способ получения сыра, обладающего одним или более вкусоароматическими свойствами овечьего или козьего сыра
Vapur et al. Effects of starter culture combination on the characteristic of white cheese
US20230232851A1 (en) Method of reducing growth of listeria in food products
EA042154B1 (ru) Lactobacillus rhamnosus с повышенным продуцированием по диацетилу
EA043270B1 (ru) Молочнокислые бактерии для термически обработанного пищевого продукта, хранящегося при температуре окружающей среды