UA126900C2 - Антитіловмісний препарат - Google Patents
Антитіловмісний препарат Download PDFInfo
- Publication number
- UA126900C2 UA126900C2 UAA201811471A UAA201811471A UA126900C2 UA 126900 C2 UA126900 C2 UA 126900C2 UA A201811471 A UAA201811471 A UA A201811471A UA A201811471 A UAA201811471 A UA A201811471A UA 126900 C2 UA126900 C2 UA 126900C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- polypeptide
- chain
- antibody
- concentration
- composition
- Prior art date
Links
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 52
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims abstract description 45
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims abstract description 45
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims abstract description 43
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 41
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 14
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 113
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 113
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 112
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 100
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 57
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 52
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 49
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 47
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 10
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 9
- 101100257262 Caenorhabditis elegans soc-1 gene Proteins 0.000 claims description 8
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 claims description 7
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 2
- 229950006925 emicizumab Drugs 0.000 abstract description 14
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 abstract 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 46
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 33
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 15
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 7
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 6
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 4
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 3
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 3
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 3
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 3
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 3
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- -1 pH regulators Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100029117 Coagulation factor X Human genes 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 229940105756 coagulation factor x Drugs 0.000 description 2
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- DYIOSHGVFJTOAR-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s,5r)-6-sulfanylhexane-1,2,3,4,5-pentol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)CS DYIOSHGVFJTOAR-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibutyl-6-methylphenol Chemical compound CCCCC1=CC=C(C)C(O)=C1CCCC SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-2-(4-methylphenyl)-1,3-thiazole Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=NC(CCl)=CS1 MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 208000033316 Acquired hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-araboascorbic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- 101150054880 NASP gene Proteins 0.000 description 1
- 241000468053 Obodhiang virus Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N Rosiglitazone Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(C)CCOC(C=C1)=CC=C1CC1SC(=O)NC1=O YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N [14c]-nicotinamide Chemical compound N[14C](=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 1
- 229940013361 cresol Drugs 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004318 erythorbic acid Substances 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229940043351 ethyl-p-hydroxybenzoate Drugs 0.000 description 1
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 239000007981 phosphate-citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L sodium dithionite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])=O JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000019983 sodium metaphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N thiodiglycol Chemical compound OCCSCCO YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006389 thiodiglycol Drugs 0.000 description 1
- 229940035024 thioglycerol Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Immunology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Винахід стосується стабільного антитіловмісного рідкого препарату, у якого рідко відбувається утворення агрегатів еміцизумабу (Emicizumab) (ACE910), що є біспецифічним антитілом, яке є функціональною альтернативою функції FVIII. Конкретніше цей винахід стосується вищезгаданого антитіловмісного рідкого препарату з рН від 4,5 до 6,5, який містить вищезгадане біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, 10-40 мМ гістидин/аспартатний буферний розчин, полоксамер 188 (Poloxamer 188) у концентрації від 0,2 до 1 мг/мл та 100-300 мМ аргініну.
Description
Галузь техніки
Цей винахід відноситься до складів, що включають біспецифічне антитіло, яке функціонально заміщує фактор коагуляції крові МІ (ЕМ), що зв'язується з фактором коагуляції крові ІХ (ГРІХ) та/або активованим фактором коагуляції крові ЇХ (РІХа) та фактором коагуляції крові Х (ЕХ).
Попередній рівень техніки
Були відкриті біспецифічні антитіла, які функціонально заміщують ЕМІЇЇ, які зв'язуються з фактором коагуляції крові ІЇХ (ГРІХ) та/або активованим фактором коагуляції крові ІХ (РіІХа) та фактором коагуляції крові Х (ЕХ) (непатентні документи 1 та 2; патентні документи 1-3).
Біспецифічне антитіло еміцизумаб (Етісілитар) (АСЕ910) надає поліпшення, коли реакція коагуляції є зниженою внаслідок дефіциту та дисфункції ЕМП, функціонально заміщуючи ЕМ; отже, проводяться клінічні випробування на пацієнтах з гемофілією А.
Розроблено багато складів вна основі антитіл у вигляді розчинів, та склади висококонцентрованих антитіл у вигляді розчинів, про які повідомлялося на цей час, - це склади, де застосовуються гістидин та аргінін (патентний документ 4), та склади, де застосовуються гістидин/аспартатний буфер (патентний документ 5). Між тим, повідомляється про стабільний рідкий фармацевтичний склад на основі антитіла, який містить амілоїд В (АВ) та в якому застосовується гістидин/гістидин-НСІ як буфер (патентний документ 6).
Однак, не повідомлялося про стабільні склади у вигляді розчинів, у яких пригнічується утворення агрегатів та/або пригнічуються компоненти з гетерогенністю заряду, для складів у вигляді розчинів, які містять вищезгадані біспецифічні антитіла.
Перелік цитувань
Патентні документи
Патентний документ 1--4У02005/035756.
Патентний документ 2-4О2006/109592.
Патентний документ 3-4/О2012/0671 76.
Патентний документ 4-4/О2002/030463.
Патентний документ 5-4/О2011/090088.
Патентний документ 6--Х02013/131866.
Непатентні документи
Непатентний документ 1-Маї Мед. 2012; 18(10):1570-74.
Непатентний документ 2-РіІ о5 Опе. 2013; 8(2)'е57479.
Суть винаходу
Технічна задача
Завдання винаходу - отримати стабільні склади у вигляді розчинів, які містять еміцизумаб (Етісігитар) (АСЕ910), що є біспецифічним антитілом, яке функціонально заміщує ЕМІЇЇ, що зв'язується з ГРІХ та/або РіХа та ЕХ.
Засоби розв'язання задач
Внаслідок цільового дослідження на виконання вищезгаданого завдання автори цього винаходу визначили, що склад у вигляді розчину з рН від 4,5 до 6,5, який містить вищезгадане біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, 10 мМ - 40 мМ гістидин/аспартатний буфер, полоксамер 188 (РоІохатег 188) у концентрації від 0,2 до 1 мг/мл та 100 мМ - 300 мМ аргінін, може бути стабільним антитіловмісним складом у вигляді розчину, у якому пригнічується утворення агрегату та/або пригнічуються компоненти з гетерогенністю заряду, та таким чином вони здійснили цей винахід.
Специфічно, цим винаходом пропонується наступне:
ПІ Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН від 4,5 до 6,5, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З
Н-ланцюга за 5ЕО ІЮ МО: 1, 2 та З (СОК Н-ланцюга 0499) відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за ЗЕО
ІО МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга 9327) відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З 1- ланцюга за ЗЕО ІЮО МО: 7, 8 та 9 (СОК І -ланцюга 1 404) відповідно; 10 мМ - 40 мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,2-1 мг/мл полоксамеру 188 та 100 мМ - 300 мМ аргінін.
І2Ї Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за | 1|, де у біспецифічному антитілі бо перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за ЗЕО ІЮО МО: 10; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за ЗЕО ІЮ МО: 11; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за 5ЕО ІЮ МО: 12.
ЇЗЇ Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за (1| або |2), де концентрація полоксамеру 188 становить 0,5 мг/мл.
І4Ї Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з (11 - ЗІ, де згаданий рН становить 6,0.
ІБЇ Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з (11 - (4ї, де концентрація гістидин/аспартатного буфера становить 20 мМ.
І6Ї Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з (11 - (51, де концентрація аргініну становить 150 мМ.
Г/ Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з |11 - (6Ї, який не містить по суті іону хлориду або іону ацетату.
ІВ) Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за 5ЕО ІЮ
МО: 10; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за
ЗЕО ІЮО МО: 11; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за
ЗЕО ІЮ МО: 12; 20 мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,5 мг/мл полоксамеру 188 та 150 мМ аргінін.
ІЗЇ Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з (1) - ІВ) для застосування для підшкірного введення. 191 Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким одним з (11 - (9) для застосування при лікуванні гемофілії А.
М Спосіб стабілізації антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі, який
Зо передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, при цьому концентрація гістидин/(аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл, та концентрація аргініну становить від 100 мМ до 300 мМ. 21 Спосіб пригнічення асоціації (утворення агрегату) антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі, який передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, при цьому концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл, та концентрація аргініну становить від 100 мМ до 300 мм. 131 Спосіб пригнічення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі, який передбачає додавання гістидин/«аспартатного буфера до розчину, де концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ.
Ефект винаходу
Цим винаходом пропонуються антитіловмісні склади, які демонструють відмінну стабільність. Крім того, цей винахід також дав можливість отримати антитіловмісні склади, у яких утворення агрегатів та/або компоненти з гетерогенністю заряду пригнічуються у їх розчиненому стані.
Стислий опис ілюстративного матеріалу
Фігура 1 демонструє фотографії, на яких показані нерозчинні сторонні речовини, присутні після тестів впливу вібрації за прикладом 8 (а: 0 мг/мл полоксамеру 188; р: 0,5 мг/мл полоксамеру 188).
Фігура 2 демонструє діаграми, на яких показано кількість нерозчинних мікрочастинок (мікрочастинок/мл), присутніх після тестів впливу вібрації та заморожування-відтаювання за прикладом 8.
Засоби здійснення винаходу
Цей винахід буде докладно описано нижче.
Цим винаходом пропонується склад рідкого лікарського засобу з рН від 4,5 до 7,5, який містить: еміцизумаб (Етісілитар) (АСЕ910) у концентрації від 20 до 180 мг/мл, яке є біспецифічним антитілом, яке функціонально заміщує ЕМІЇ, що зв'язується з РІХ та/або РіХа та
ЕХ; 10 мМ - 40 мМ гістидин/аспартатний буфер; полоксамер 188 (Роіохатег 188) у концентрації 60 від 0,2 до 1 мг/мл та 100 мМ - 300 мМ аргінін.
Еміцизумаб (Етісі7/итаб) (АСЕ910), яке є вищезгаданим біспецифічним антитілом, описано нижче.
Біспецифічне антитіло (0499-2121/)327-2119/1404-К) де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару; де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З
Н-ланцюга за 5ЕО ІЮ МО: 1, 2 та З (СОК Н-ланцюга 0499) відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за ЗЕО
ІО МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга 9327) відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З 1- ланцюга за 5ЕО ІО МО: 7, 8 та 9 (СОК І -ланцюга 1 404) відповідно.
Конкретніше, вищезгадане біспецифічне антитіло - це біспецифічне антитіло, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару; де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність варіабельної ділянки Н-ланцюга за ЗЕО ІЮ МО: 13, другий поліпептид включає Н- ланцюг, який включає амінокислотну послідовність варіабельної ділянки Н-ланцюга за 5ЕО ІЮ
МО: 14, та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність варіабельної ділянки І -ланцюга за ЗЕО ІЮ МО: 15.
Конкретніше, вищезгадане біспецифічне антитіло - це біспецифічне антитіло (0499- 7121/90327-7119/Л .404-К), де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару; де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за 5ЕО ІЮ МО: 10, другий поліпептид включає Н- ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за БЕО ІО МО: 11, та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І-ланцюг за 5ЗЕО ІЮО МО: 12. Такі антитіла можна отримати за способами, описаними у М/О2005/035756, УМО2006/109592, МО2012/067176, та за їм подібними.
Концентрація антитіла у складі цього винаходу особливо не обмежується, однак, вона становить переважно від 20 мг/мл до 180 мг/мл. Приклади включають 20 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл, 120 мг/мл, 150 мг/мл та 180 мг/мл. Верхня границя концентрації антитіла у складі цього винаходу особливо не обмежується, однак, зазвичай становить 250 мг/мл.
Зо Антитіла, що застосовуються у цьому винаході, особливо не обмежуються, доки вони зв'язуються з бажаним антигеном, та вони можуть бути поліклональними або моноклональними антитілами. Перевага віддається моноклональним антитілам, тому що гомогенні антитіла можна стабільно виробляти.
Амінокислоти, що містяться в амінокислотних послідовностях цього винаходу, можуть піддаватися посттрансляційній модифікації (наприклад, фахівцям у цій галузі добре відоме модифікування М-кінцевого глютаміну у піроглютамінову кислоту внаслідок піроглютамілування). Природно, що такі амінокислоти, які зазнали посттрансляційної модифікації, включені в антитіла, що застосовуються у цьому винаході.
У цьому винаході фраза "що функціонально заміщує ЕМІІІ" означає розпізнавання ГРІХ або
КІХа та ЕХ, та стимулювання активації ЕХ фактором РіІХа (сприяння виробництва ЕХа фактором
РІХа). Активність стимулювання виробництва ЕХа можна оцінити, застосовуючи, наприклад, систему вимірювання, яка включає ЕХіа, ЕХ, синтетичний субстрат 5-2222 (синтетичний субстрат ЕХа) та фосфоліпіди. Така система вимірювання демонструє кореляцію зі ступенем суворості хвороби та клінічними симптомами випадків гемофілії А (Козеп 5, Апаегезоп М,
Віотба сК М еї аї. Сііпіса! арріїсайоп5 ої а спготодепіс зирзігасе теїпоад ог аегегтіпайоп ої ЕМП асімпу. ТпготьЬ Наєтозі 1985; 54: 811-23).
У цьому винаході термін "спільний І -ланцюг" означає І-ланцюг, який здатний утворювати пари з кожним з двох або більше різних Н-ланцюгів та здатний демонструвати спроможність зв'язування з кожним антигеном. У цьому описі термін "різні Н-ланцюги" переважно означає Н- ланцюги антитіл проти різних антигенів, проте не обмежується ними; він означає Н-ланцюги, амінокислотні послідовності яких відрізняються одна від одної. Спільні Ї-ланцюги можна отримати, наприклад, згідно зі способом, описаним у УМО 2006/109592.
У цьому винаході термін "стабільний антитіловмісний склад" означає склад, у якому агрегати та/або компоненти з гетерогенністю заряду, які походять від білків, таких як антитіла, навряд чи утворюються, тобто, склади, у яких реакції, які погіршують їх властивості, включаючи утворення нерозчинних агрегатів, розчинних агрегатів, компонентів з гетерогенністю заряду, навряд чи виникають у розчині.
Вираз "компоненти з гетерогенністю заряду" означає компоненти, що мають поверхневі заряди білка, які є відмінними від поверхневих зарядів білка головного компонента внаслідок 60 деамідування, окиснення, гідролізу тощо.
У цьому винаході термін "поліпептид" зазвичай означає пептиди та білки, які мають довжину, яка становить приблизно десять амінокислот або більше. Зазвичай, вони є поліпептидами біологічного походження, проте вони не обмежуються ними, та вони можуть бути, наприклад, поліпептидами, які включають штучно побудовану послідовність. Крім того, вони можуть бути будь-якими природними поліпептидами, синтетичними поліпептидами, рекомбінантними поліпептидами або їм подібними. Додатково, фрагменти вищезгаданих поліпептидів також включені до поліпептидів цього винаходу.
Термін "антитіло" застосовується у найширшому сенсі, та він включає моноклональні антитіла, поліклональні антитіла, димери, мультимери, мультиспецифічні антитіла (такі як біспецифічні антитіла), похідні антитіл та модифіковані антитіла (МіПег К еї аї. У Іттипої. 2003, 170(9), 4854-61), доки вони демонструють бажану біологічну активність. Антитіла можуть бути антитілами мишей, антитілами людини, гуманізованими антитілами, химерними антитілами або антитілами, що походять від іншого виду, або штучно синтезованими антитілами. Антитіла, що описуються у цьому описі, можуть бути будь-якого типу (наприклад, Іде, ІДЕ, ЗМ, дО та ІдА), класу (наприклад, ІДС, Ідс2, ІдоЗ3, Ід04, ІдАЇ та ІдДА2) або підкласу молекул імуноглобуліну.
Імуноглобуліни можуть походити від будь-якого виду (наприклад, людини, миші або кроля).
Терміни "антитіло", "імунний глобулін" та "імуноглобулін" застосовуються взаємозамінним чином у широкому сенсі.
Термін "біспецифічне антитіло" означає антитіло, яке має дві варіабельні ділянки, кожна з яких розпізнає відмінні епітопи, де варіабельні ділянки присутні у тій же самій молекулі антитіла.
Біспецифічні антитіла можуть бути антитілами, які розпізнають два або більше відмінних антигенів, або антитілами, які розпізнають два або більше відмінних епітопів на тому ж самому антигені. Біспецифічні антитіла можуть включати не лише повні антитіла, але й похідні антитіл.
Рекомбінантні антитіла, отримані із застосуванням способів генної інженерії, можна застосовувати як антитіла. Рекомбінантне антитіло можна отримати шляхом клонування ДНК, яка кодує антитіло з гібридом або клітин, що виробляють антитіла, таких як сенсибілізовані лімфоцити, які виробляють антитіла; вставки цієї клонованої ДНК у вектор та наступним введенням вектора у хазяїнів (клітини-хазяїни), щоб отримати антитіло.
Біспецифічні антитіла не обмежуються антитілами типу Ідс; наприклад, біспецифічні
Зо антитіла типу (90 можна виділити з міжвидової гібридоми (квадроми), отриманої внаслідок злиття двох типів гібридом, які виробляють антитіла дос (Міїсіеїп С. еї аїЇ., Маїиге 1983, 305: 537 - 540). Їх можна також виділити внаслідок введення у клітини генів І -ланцюга та Н-ланцюга, які складають два типи Ідс, які представляють інтерес, тобто, загалом чотири типи генів, щоб спільно експресувати гени.
Антитіла цього винаходу можна отримати за відомими фахівцям у цій галузі способами.
Специфічно, ДНК, що кодує антитіло, яке представляє інтерес, вставляють у вектор експресії.
Вставка у вектор експресії здійснюється так, що експресія буде відбуватися під контролем регуляторних ділянок експресії, таких як енхансер та промотор. Далі, клітини-хазяїни трансформуються із застосуванням цього вектора експресії, щоб експресувати антитіло. У цьому випадку можна застосовувати відповідні комбінації хазяїна та вектора експресії.
Отримані за таким способом антитіла цього винаходу можна виділити з внутрішнього вмісту клітин-хазяїнів або ззовні клітин (середовище тощо) та очистити, так щоб вони були по суті чистими гомогенними антитілами. Антитіла можна відокремити та очистити за способами, що зазвичай застосовуються для відокремлення та очищення антитіл, та ці способи жодним чином не обмежуються. Наприклад, антитіла можна відокремити та очистити завдяки відповідному вибору та комбінуванню колоночної хроматографії, фільтрації, ультрафільтрації, висолювання, осадження розчинником, екстракції розчинником, дистиляції, імунопреципітації, електрофорезу на поліакриламідному гелі з додецилсульфатом натрію, ізоелектричного фокусування, діалізу, рекристалізації та їм подібного.
У переважному аспекті гістидин/аспартатний буфер у складі цього винаходу - це буфер, отриманий внаслідок титрування розчину, такого як водний розчин з доданим гістидином як вільної амінокислоти, рідиною, такою як водний розчин, що містить аспарагінову кислоту як вільну амінокислоту. Альтернативно, буфер можна отримати шляхом додавання амінокислот у зворотному порядку або шляхом прямого титрування порошками.
Автори цього винаходу здійснили тести заморожування-відтаювання, тести теплового прискорення, тести довготривалого зберігання та тести кріоконсервації, щоб оцінити вплив різних добавок на стабільність зразків, які містять вищезгадані біспецифічні антитіла, під час їх зберігання. Внаслідок цього автори цього винаходу визначили, що утворення агрегатів та/або компоненти з гетерогенністю заряду пригнічуються завдяки застосуванню гістидинового буфера 60 порівняно з фосфатним буфером, цитратним буфером та ацетатним буфером.
Крім того, автори цього винаходу визначили, що утворення агрегатів та/або компоненти з гетерогенністю заряду пригнічуються завдяки застосуванню аспарагінової кислоти, яка є кислотною амінокислотою, як різновиду протиїона для буфера, тобто завдяки застосуванню гістидин/аспартатного буфера як буфера.
Концентрація (кількість) гістидин/аспартатного буфера у складах цього винаходу становить переважно від 10 до 100 мМ, та переважніше від 10 до 40 мМ. Крім того, прикладами концентрації (кількості) гістидин/аспартатного буфера є 10 мм, 20 мм та 40 мм.
Крім того, порівняно з хлоридом натрію, про який повідомляється як про стабілізатор для антитіловмісних складів, було визначено, що додавання аргініну демонструє вищі ефекти стабілізації (тобто, ефекти пригнічення утворення агрегатів та ефекти пригнічення компонентів з гетерогенністю заряду).
Концентрація (кількість) аргініну у складах цього винаходу становить переважно від 100 мМ до 300 мМ. Приклади концентрації (кількості) аргініну включають 100 мМ, 150 мМ, 200 мМ та 300 мМ. рН розчину складу цього винаходу становить переважно від 4,5 до 6,5, переважніше від 5,5 до 6,5, та навіть переважніше від 5,5 до 6. Приклади рН включають 5,5 та 6.
Поверхнево-активні речовини у складах цього винаходу - це, наприклад, полісорбат 20 (РБЗ20) та Ріпгопіс Е-68 (Роїохатег 188 (полоксамер 188): полієтилен(160)- поліоксипропілен(З0О)гліколь), та полоксамер 188 (Роіохатег 188) є особливо переважним.
Кількість полоксамеру 188 (або РХ188), доданого до складу цього винаходу становить переважно від 0,2 мг/мл до 1 мг/мл. Приклади кількості полоксамеру 188, доданого до складу, включають 0,2 мг/мл, 0,5 мг/мл, 0,8 мг/мл та 1 мг/мл.
Гістидин, що застосовується у цьому винаході, може бути гістидином самим по собі або його похідним, та особливо бажаним є І-гістидин. Аргінін, що застосовується у цьому винаході, може бути аргініном самим по собі, його похідним або його сіллю, та особливо бажаним є І -аргінін або його сіль. Переважні солі аргініну включають аспартатну сіль та глютаматну сіль.
Склади цього винаходу можуть також містити амінокислоти. Переважні амінокислоти для застосування у цьому винаході - це природні амінокислоти або похідні амінокислот, та особливо переважні амінокислоти - це І -метіонін та І -пролін.
Зо Склади цього винаходу можуть також містити цукри. Переважні цукри, що застосовуються у цьому винаході, - це цукроза, трегалоза, меглюмін та сорбіт.
Кількість амінокислоти або цукру, доданих до складів цього винаходу, становить зазвичай від 1 мМ до 1000 мМ, переважно від 5 мМ до 500 мМ, та переважніше від 10 мМ до 300 мм.
Склади цього винаходу можуть також містити неорганічні солі. Переважні неорганічні солі, що застосовуються у цьому винаході, - це солі магнію та солі кальцію.
Крім того, переважно, щоб склади цього винаходу не містили аніони, відмінні від аспарагінової кислоти, як протиіон для буфера (буферного агента) або стабілізатора. В одному аспекті приклади таких складів включають склади, які по суті не містять іон хлориду або іон ацетату. Вираз "по суті не містять іон хлориду або іон ацетату" означає, що концентрації іону хлориду та іону ацетату становлять, наприклад, 5 мМ або менше, переважно 2 мМ або менше, та переважніше 1 мМ або менше. Високостабільні антитіловмісні склади можна отримати без підвищення осмотичного тиску шляхом застосовування аспарагінової кислоти, яка має великий стабілізуючий ефект як протиіон, та без суттєвого включення іону хлориду або іону ацетату з незначним стабілізуючим ефектом.
Якщо необхідно, склади цього винаходу можуть додатково містити відповідні кріопротектори, суспендувальні агенти, солюбілізуючі агенти, ізотонізуючі агенти, консерванти, інгібітори адсорбції, розріджувачі, ексципієнти, регулятори рН, анальгетики, сірковмісні відновлювальні агенти, антиоксиданти та їм подібне.
Кріопротектори включають, наприклад, цукри, такі як трегалоза, цукроза та сорбіт.
Солюбілізуючі агенти включають, наприклад, стужавілу поліоксіетиленом касторову олію, полісорбат 80, нікотинамід, поліоксіетиленсорбітанмонолаурат, макроголь та етиловий естер жирної кислоти касторової олії.
Ізотонізуючі агенти включають, наприклад, хлорид натрію, хлорид калію та хлорид кальцію.
Консерванти включають, наприклад, метил-р-гідроксибензоат, етил-р-гідроксибензоат, сорбінову кислоту, фенол, крезол та хлоркрезол.
Інгібітори адсорбції включають, наприклад, альбумін сироватки людини, лецитин, декстран, сополімер етиленоксиду/пропіленоксиду, гідроксипропілцелюлозу, метилцелюлозу, стужавілу поліоксіетиленом касторову олію та поліеєтиленгліколь.
Сірковмісні відновлювальні агенти включають, наприклад, агенти, які містять сульфгідрильні бо групи, такі як М-ацетилцистеїн, М-ацетилгомоцистеїн, ліпоєву кислоту, тіодигліколь,
тіоетаноламін, тіогліцерин, тіосорбіт, меркаптооцтову кислоту та її солі, натрію тіосульфат, глютатіон та тіоалконові кислоти, які мають від одного до семи атомів вуглецю.
Антиоксиданти включають, наприклад, ериторбінову кислоту, дибутилгідрокситолуол, бутилгідроксіанізол, «а-токоферол, токоферолу ацетат, І-аскорбінову кислоту та її солі, пальмітат І -аскорбінової кислоти, стеарат І -аскорбінової кислоти, гідросульфіт натрію, сульфіт натрію, триамілгаллат, пропілталлат та хелатори, такі як динатрійетилендіамінтетраацетат (ЕОТА), натрію пірофосфат та натрію метафосфат.
У варіанті здійснення склад цього винаходу є наступним: склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за 5ЕО ІЮ
МО: 10, другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за
ЗЕО ІЮО МО: 11, та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за
ЗЕО ІЮ МО: 12; мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,5 мг/мл полоксамеру 188 та 150 мМ аргінін; або 20 склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло еміцизумаб (АСЕ910) у концентрації від 20 до 180 мг/мл, 20 мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,5 мг/мл полоксамеру 188 та 150 мМ аргінін.
В іншому варіанті здійснення склад цього винаходу є наступним: склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за 5ЕО ІЮ
Зо МО: 10, другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за
ЗЕО ІЮО МО: 11, та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за
ЗЕО ІЮ МО: 12; 20 мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,05 мг/мл РБб20 та 150 мМ аргінін; або склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло еміцизумаб (АСЕ910) у концентрації від 20 до 180 мг/мл, 20 мМ гістидин/аспартатний буфер; 0,05 мг/мл РБ5З20 та 150 мМ аргінін.
Антитіловмісні склади цього винаходу можна вводити пацієнтові будь-яким відповідним способом, наприклад, шляхом ін'єкції ударної дози речовини або безперервної інфузії протягом певного періоду, внутрівенно, внутрішньом'язово або підшкірно. Переважними є внутрівенне введення або підшкірне введення.
Доза еміцизумабу (АСЕ910) становить, наприклад, від 0,001 до 1000 мг/кг, та інтервал введення становить принаймні один день або довше.
Конкретніше, наприклад, після введення еміцизумабу (АСЕ910) у початковій дозі 1 мг/кг, еміцизумаб (АСЕ91О0) можна вводити у безперервній дозі 0,3 мг/кг один раз на тиждень.
Альтернативно, наприклад, після введення еміцизумабу (АСЕ910) у початковій дозі З мг/кг, еміцизумаб (АСЕ910) можна вводити у безперервній дозі 1 мг/кг один раз на тиждень. В іншому прикладі після введення еміцизумабу (АСЕ910) у початковій дозі З мг/кг, еміцизумаб (АСЕ910) можна вводити у безперервній дозі З мг/кг один раз на тиждень.
Антитіловмісні склади цього винаходу можна застосовувати для хвороб, які виникають та/або прогресують внаслідок зниження або дефіциту активності ЕМ та/або активованого фактору коагуляції крові МІ (ЕМІШа). Наприклад, їх можна застосовувати для гемофілії А, гемофілії А, при якій виник інгібітор проти ЕМ /ЕМШа, набутої гемофілії А, хвороби
Віллебранда, при цьому особливо не обмежуючись ними.
Інший варіант здійснення цього винаходу - це спосіб стабілізації антитіла в антитіловмісному бо рідкому лікарському складі. Переважно, спосіб стабілізації антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину.
Інший варіант здійснення цього винаходу - це спосіб зменшення асоціації (утворення агрегату) антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі. Переважно, спосіб зменшення асоціації (утворення агрегату) антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину.
Крім того, вищезгадані спосіб стабілізації антитіла та спосіб зменшення асоціації (утворення агрегату) антитіла включають додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, та переважно концентрація антитіла становить від 20 до 180 мг/мл, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл, концентрація аргініну становить від 100 мМ до 300 мМ, та рН становить від 4,5 до 6,5; або переважніше концентрація антитіла становить 20 мг/мл, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить 20 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить 0,5 мг/мл, концентрація аргініну становить 150 мМ, та рН становить 6.
Інший варіант здійснення цього винаходу - це спосіб зменшення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі. Переважно, спосіб зменшення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера до розчину. Переважніше, спосіб зменшення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі передбачає додавання гістидин/(аспартатного буфера до розчину, де концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ, або 20 мм.
В іншому варіанті здійснення винаходу спосіб зменшення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі передбачає додавання гістидин/(аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину. Переважніше, спосіб зменшення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, та переважно концентрація антитіла становить від 20 до 180 мг/мл, концентрація гістидин/(аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мм, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл, концентрація аргініну становить від 100 мМ до 300 мМ, та рН становить від 4,5 до 6,5; або переважніше концентрація антитіла
Зо становить від 20 до 180 мг/мл, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить 20 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить 0,5 мг/мл, концентрація аргініну становить 150 мМ, та рН становить 6.
У вищезгаданому способі стабілізації антитіла, способі зменшення асоціації (утворення агрегату) антитіла та способі зменшення компонента з гетерогенністю заряду антитіло є переважно біспецифічним антитілом або переважніше еміцизумабом (АСЕ910).
Як застосовується у цьому описі, аспекти, про які йде мова з використанням виразу "що включає" включають аспекти, про які йде мова з використанням виразу "що по суті складається з", та аспекти, про які йде мова з використанням виразу "що складається 3".
Числові значення, вказані у цьому описі, можуть варіюватися у межах певного діапазону, наприклад, залежно від приладів або обладнання, умов вимірювання та процедури, що застосовуються фахівцями цій у галузі, доки вони відповідають діапазону, який дозволяє виконати завдання винаходу, вони можуть охоплювати відхилення, наприклад, у приблизно 10 95.
Усі патенти та посилання, які прямо цитуються у цьому описі, включено у їх повному обсязі до посилань цього опису.
Цей винахід буде далі проілюстровано наступними прикладами, проте вони не призначені для обмеження винаходу.
Приклади
Приклад 1
Вплив гістидину на пригнічення агрегатів під час термічно прискореного старіння гуманізованого антитіла Ід4 - АСЕ910 (1) Матеріали
АСЕ910 - це біспецифічне гуманізоване антитіло Ідс4, яке розпізнає як фактор коагуляції крові ЇХ, так і фактор коагуляції крові Х, та яке, як очікується, запобігатиме кровотечі при гемофілії А за рахунок функціонального заміщення активованого фактора коагуляції крові МІ. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910 у концентрації 100 мг/мл, Масі при 150 ммоль/л та будь-який один з наступних буферів: фосфатний буфер при 20 ммоль/л; цитратний буфер при 20 ммоль/л; ацетатний буфер при 20 ммоль/л та гістидиновий буфер при 60 20 ммоль/л. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у терморегульованій бані при 25 "С протягом восьми тижнів (МУ), а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Кількість агрегатів у зразках вимірювали шляхом гель-фільтраційної хроматографії (ЗЕС), застосовуючи колонку 530005УУхі (То50п) з фосфатним буфером (50 ммоль/л, ріН7,0), яка містила натрію хлорид при 300 ммоль/л для рухомої фази при витраті потоку 0,5 мл/хв.
Серед виявлених піків визначили, що пік з найбільшою площею та висотою - це мономер, а піки, детектовані раніше мономеру, разом визначили як піки агрегатів (високомолекулярні сполуки, НМУУБ).
Площі піків розрахували для усіх піків, а коефіцієнт площі піка, який представляє інтерес, розрахували, застосовуючи наступне рівняння:
Коефіцієнт площі піка, що представляє інтерес (965) - 100 х (площа піка, що представляє інтерес) / (площа піка, що представляє інтерес ж сумарна площа інших піків). (4) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 1.
Таблиця 1.
Збільшення агрегатів (о) після зберігання при 2570 с А НММ С) кла
Й 2Бес-2М | 259С-4М | 25с-81
Як видно з Таблиці 1, коли додавався гістидин у концентрації 20 ммоль/л, тоді зразок демонстрував високий ефект пригнічення агрегатів після теплового прискорення при 25 "С протягом восьми тижнів (8МУ).
Приклад 2
Ефекти пригнічення агрегатів сольовою концентрацією та аргініном під час термічно прискореного старіння та заморожування-відтаювання гуманізованого антитіла Ід(4 - АСЕ910 (1) Матеріали
Зо Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910 у концентрації 100 мг/мл, гістидин при 20 ммоль/л та будь-яку одну з наступних добавок: Масі при 50 ммоль/л; Масі при 75 ммоль/л; Масі при 150 ммоль/л та аргінін при 150 ммоль/л. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у терморегульованій бані при 25 "С протягом восьми тижнів, або піддали їх десяти циклам заморожування-відтаювання (Е/Т) (57С/-20 С), а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали так, як описано у Прикладі 1. (4) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 2.
Таблиця 2.
Збільшення агрегатів (о) після зберігання при 25"Стапісля заморожування--відтаювання
Склад А НМ С)
ДІ 1ОР/Т 1250-92 25'С-АМ | 257С-81
Боммнасі | 1.00.) 207 0.09 | 016 0,26 твим пас
ГБомм час!
Томмаєє | 0.03 | 005. 003 | 006. 01
Як видно з Таблиці 2, коли додавався аргінін у концентрації 150 ммоль/л, тоді зразки демонстрували високий ефект пригнічення агрегатів після теплового прискорення при 25 "С протягом восьми тижнів (8МУ) та заморожування-відтаювання (ЕЛ).
Приклад З
Ефекти пригнічення агрегатів завдяки аспарагіновій кислоті під час заморожування- відтаювання гуманізованого антитіла Ід4 - АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910 у концентрації 100 мг/мл, гістидин при 20 ммоль/л та Масі при 150 ммоль/л або натрієву сіль І -аспарагінової кислоти при 150 ммоль/л як протиіон. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, піддали десяти циклам заморожування-відтаювання (5 "С/-20 "С), а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали так, як описано у Прикладі 1. (4) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 3.
Таблиця 3.
Збільшення агрегатів (5) після заморожування--відтаювання
А НМ так 5Р/Т ОБЛ с
Натрієва сіль
Як видно з Таблиці 3, коли додавалася аспарагінова кислота, тоді зразки демонстрували високий ефект пригнічення агрегатів після заморожування-відтаювання (Г/Л).
Приклад 4
Ефекти пригнічення агрегатів та компонентів з гетерогенністю заряду завдяки рН під час термічно прискореного старіння гуманізованого антитіла Ід(04 - АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції, які містили АСЕ9У1О у концентрації 100 мг/мл, гістидин/аспартатний буфер при 20 ммоль/л та аргінін-аспарагінову кислоту при 150 ммоль/л та які мали рН 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0 або 7,5. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у терморегульованій бані при 25"С протягом восьми тижнів, а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали так, як описано у Прикладі 1. (4) Способи вимірювання та розрахунку компонентів АСЕ910 з гетерогенністю заряду
Кількість компонентів з гетерогенністю заряду у зразку вимірювали шляхом іонообмінної хроматографії (ІЕС) з використанням колонки ВіоРго ОА-Е (УМО), застосовуючи буфер Ттгі5-НОЇ (20 ммоль/л, рН 7,8) як рухому фазу А та буфер Ттгіб5-НСЇІ (20 ммоль/л, рН 7,8), що містив хлорид натрію (500 ммоль/л), як рухому фазу В при витраті потоку 0,5 мл/хв.
Серед виявлених піків пік з найбільшою площею та висотою визначили як головний пік, а піки, виявлені пізніше головного піка, разом назвали кислотним піком.
Площі піків розрахували для усіх піків, а коефіцієнт площі піка, який представляє інтерес, розрахували, застосовуючи наступне рівняння:
Коефіцієнт площі піка, що представляє інтерес (965) - 100 х (площа піка, що представляє інтерес) / (площа піка, що представляє інтерес я сумарна площа інших піків). (5) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 4.
Таблиця 4.
Збільшення агрегатів (95) та збільшення кислотного піка-1 (95) після зберігання при 2570 с А НМ (0) А Кислотний - 1 (Х) клад о, о, о, о, о, о, 25'С-2М | 25'Є-4М | 25'Є-8М | 25'С-2М | 95'Є-АМ 25'Є-8 рН 5 ро | 0.09. 0,1 | 0.20. 046. | 0,96. 2,57 рн, 5 вно | 0.07. | бл. 0и7. 1 038.) 0,47 3,23 рнв5 0.09. | 014 | 0,5. 0,4 117 | 3,90 рн нт,
Як видно з Таблиці 4, зразки при рН від 4,5 до 6,5, а особливо при рН 5,5 та рн 6,0, демонстрували високий ефект пригнічення агрегатів та компонентів з гетерогенністю заряду після зберігання при 25 "С.
Приклад 5
Зо Ефекти пригнічення агрегатів та компонентів з гетерогенністю заряду завдяки концентрації гістидину під час термічно прискореного старіння гуманізованого антитіла Іде4 - АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910 у концентрації 100 мг/мл, аргінін при 150 ммоль/л та гістидин/(аспартатний буфер при 5 ммоль/л, 10 ммоль/л, 20 ммоль/л або 40 ммоль/л. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у терморегульованій бані при 25"С протягом восьми тижнів, а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи визначення та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали, як описано у Прикладі 1. (4) Способи вимірювання та розрахунку компонентів АСЕ910 з гетерогенністю заряду.
Способи здійснювали, як описано у Прикладі 4. (5) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 5.
Таблиця 5.
Збільшення агрегатів (25) та збільшення кислотного піка-1 (905) після зберігання при 252С
Концентрація А НМ С) А Кислотний - 1 (Х) пстидину 1 257С-9М | 257С-4М | 25"С-8М | 25'С-2М | 25"С-4М | 257С-89М бюл | 0.01. | 009 | 017 | 0,87. 3.01. 99
Сомеютія 001.1 0,04 | 012. | 006. | 1,04 | 7.1 ;
Як видно з Таблиці 5, зразки, що містили 10 ммоль/л або більше гістидину - аспарагінової кислоти, демонстрували високий ефект пригнічення агрегатів та компонентів з гетерогенністю заряду після зберігання при 25 "С.
Приклад 6
Ефекти пригнічення агрегатів завдяки концентрації аспарагіну під час заморожування- відтаювання, термічно прискореного старіння та кріоконсервації гуманізованого антитіла Ідс4 -
АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ9У1О у концентрації 100 мг/мл, гістидин/аспартатний буфер при 20 ммоль/л та аргінін при 75 ммоль/л, 100 ммоль/л, 150 ммоль/л, 200 ммоль/л або 300 ммоль/л. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі від 5 до 15 мкл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, піддали десяти циклам заморожування-відтаювання (5"С/-20 С) або залишили стояти у терморегульованій бані при 25 "С протягом восьми тижнів (МУ) або при -20 "С протягом шести місяців (М), а потім застосовували їх як тестові зразки. (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали, як описано у Прикладі 1. (4) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 6.
Зо Таблиця 6.
Збільшення агрегатів (95) після заморожування--відтаювання, після зберігання при 252С та після зберігання при -2070 к | А НММ (0) онцентрація о о пеОТряА о о о -дяс | -20с арпніну 5/1 10Б/Т 125"'С-2М | 25"С-4М | 25'С-8М -ЗМ -6М 75 ммолил. 010 | бло | 0,02 7 0,06 | 017 | 019 053 омнолії | 0.04 | 0011 0011 0011 0721 008 005 150 ммоль 001 | 0,01 | 001 | 0,01. 0,04 | 0,00 | бо бо меті 001. | 001 | 0.01.) 0.00. 002 0,00. 5001
З00 ммоль | 0,00 | 0,00 | 002 | 0,02 | 0,00 | 0,00 | 001
Як видно з Таблиці 6, зразки, що містили аргінін у концентрації 100 ммоль/л або більше, демонстрували високі ефекти пригнічення агрегатів після заморожування-відтаювання, після зберігання при 25 "С та після зберігання при -20 "С.
Приклад 7
Ефекти пригнічення нерозчинних сторонніх речовин та нерозчинних мікрочастинок завдяки полоксамеру 188 під час зберігання при 5 "С гуманізованого антитіла Ідо4 - АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910О0 у концентрації 80 мг/мл, гістидин/аспартатний буфер при 20 ммоль/л, аргінін при 150 ммоль/л та будь-яку одну з наступних добавок: полоксамер 188 при 0 мг/мл; полоксамер 188 при 0,2 мг/мл; полоксамер 188 при 0,5 мг/мл; полоксамер 188 при 1,0 мг/мл; Роїузограсе20 при 0,05 мг/мл та Роїузограсе20 при 1,0 мг/мл. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі 1,0 мл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у холодильнику при 5 "С протягом п'яти місяців (М), а потім застосовували як тестові зразки. (3) Способи спостерігання нерозчинних сторонніх речовин
Присутність нерозчинних сторонніх речовин оцінювали, розташувавши зразок на платформі для зразків стенда для візуального обстеження пробірок, потім платформу зі зразком перевертали та спостерігали за пробіркою. (4) Способи вимірювання нерозчинних мікрочастинок
Кількість нерозчинних мікрочастинок у розчині визначали, застосовуючи лічильник мікрочастинок у рідині (Насп ОПга Апаїуїс5, Модеї! 9703). (5) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 7.
Таблиця 7.
Кількість нерозчинних мікрочастинок (міирочастинкимми) та частота виявлення нерозчинних сторонніх речовин (75) після зберігання при 57С а 00000000
Почалюва 1МО0ОЗКО 05 Позажова МОЗМ ВМО Пбозанюва о 1КОЇ ЗМО БМ і врозчикі хом 0-1 ор 0:01 о слини шечович пількоть пробірок, що мітить сторонні; і і і і і і і і | :
Бехвнни сторони ор ОбИБОРОбИО ОБ |ОМБООБО Б ОВО ОВО ОБОВ ! РОЮ рр птн нн оеткова ТАОЇІОЗНОЇ ВМО Поло ПОЗОВИ ння (жати в 5 вм г в п
Мастоте вкнапення нерозчинних стронніх : : і | і ! '
Мечовиментьчить рення рю 0000/5505 Об 0500 БИБОЕОВ/В
Як видно з Таблиці 7, зразки, які містили РБ20 при 0,05 мг/мл, та зразки, які містили полоксамер 188 при 0,2 мг/мл або більше, демонстрували високий ефект пригнічення утворення
Зо нерозчинних мікрочастинок та нерозчинних сторонніх речовин після зберігання при 5 "С.
Приклад 8
Ефекти пригнічення нерозчинних сторонніх речовин та нерозчинних мікрочастинок за допомогою полоксамеру 188 під час впливу вібрації та зберігання в умовах заморожування- відтаювання гуманізованого антитіла Ід4 - АСЕ910 (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Приготували рідкі композиції з рН 6,0, які містили АСЕ910О у концентрації 150 мг/мл, гістидин/аспартатний буфер при 20 ммоль/л, аргінін-аспарагінову кислоту при 150 ммоль/л та будь-яку одну з наступних добавок: полоксамер 188 при 0 мг/мл; полоксамер 188 при 0,2 мг/мл; полоксамер 188 при 0,5 мг/мл та полоксамер 188 при 0,8 мг/мл. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі 0,9 мл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, піддали вібрації при кімнатній температурі протягом 24 годин з частотою 200 коливань/хв., застосовуючи вібраційний пристрій, або десяти циклам заморожування-відтаювання (5 "С/- 20 7С), а потім застосовували як тестові зразки.
(3) Спосіб спостерігання нерозчинних речовин
Спосіб здійснювали, як у Прикладі 7. (4) Спосіб вимірювання нерозчинних мікрочастинок
Спосіб здійснювали, як описано у Прикладі 7. (5) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 8 та на фігурах 1 та 2.
Таблиця 8.
Частота виявлення (бо) нерозчинних сторонніх речовин після вібрацій та зберігання в умовах заморожування--відтаювання
Частота виявлення нерозчинних сторонніх речовин , (кількість пробірок, що містять сторонні речовини/кількість перевірених пробірок)
Концентрація
Струшування | Струшування | Заморожування-
РоЇохатек 188 | Початкова протягом протягом відтаювання 30 хвилин 24 годин 0500/1093. 505 (5/103. | 1005 (10/10). | ОК (0/10) ох (0/1) | 05 (0/103. | 05 (0/103. | 05 (0/10) ох (0/103 05 (00/10) 05 (00/10) | 05 (0/10) ох 00/10). | (0/103 | 05(0/105 ок (0/10)
Як видно з Таблиці 8 та фігур 1 та 2, зразки, які містили полоксамер 188 у концентрації 0,2 мг/мл або більше, демонстрували високий ефект пригнічення утворення нерозчинних мікрочастинок та нерозчинних сторонніх речовин після того, як їх піддали впливу вібрації та зберіганню в умовах заморожування-відтаювання.
Приклад 9
Вплив концентрації гуманізованого антитіла Ід4 (АСЕ910) на стабільність під час термічно прискореного старіння та зберігання в умовах заморожування-відтаювання (1) Матеріали
Застосовували антитіло, описане у Прикладі 1. (2) Тестові зразки
Отримали рідкі композиції з рН 6,0, які містили гістидин/аспартатний буфер при 20 ммоль/л, аргінін-аспарагінову кислоту при 150 ммоль/л, полоксамер 188 при 0,5 мг/мл та АСЕ910 при 20 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл, 120 мг/мл, 150 мг/мл або 180 мг/мл. Скляні пробірки відповідним чином наповнили композиціями в об'ємі 0,65 мл.
Отримані за таким способом рідкі лікарські склади, які містили гуманізоване антитіло, залишили стояти у терморегульованій бані при 40 "С протягом восьми тижнів та піддали п'яти або десяти циклам заморожування-відтаювання (25 "С/-20 "С), а потім застосовували як тестові зразки.
Зо (3) Способи вимірювання та розрахунку кількості агрегатів АСЕ910
Способи здійснювали, як описано у Прикладі 1. (4) Способи вимірювання та розрахунку компонентів АСЕ910 з гетерогенністю заряду
Кількість компонентів з гетерогенністю заряду у зразку вимірювали за допомогою аніонообмінної хроматографії (АІЕС) з використанням колонки ТЗКде! О-5ТАТ (УмМаїегв), застосовуючи буфер Тті5-НСІ (50 ммоль/л, рН 8,0) як рухому фазу А та буфер Тті5-НОСЇ (50 ммоль/л, рН 8,0), що містив хлорид натрію (200 ммоль/л), як рухому фазу В при витраті потоку 0,5 мл/хв.
Серед виявлених піків пік з найбільшою площею та висотою визначили як головний пік, та піки, виявлені раніше головного піка, разом назвали лужними піками, а піки, виявлені пізніше головного піка, разом назвали кислотними піками.
Крім того, кількість компонентів з гетерогенністю заряду вимірювали за допомогою катіонообмінної хроматографії (СІЕС) з використанням колонки РгоРас УУСХ-102. (Тнепто
Зсіепійіс), застосовуючи буфер, що містив Ттгі5 при 9,6 ммоль/л, піперазин при 6,0 ммоль/л та імідазол при 11,0 ммоль/л (рН 6,0), як рухому фазу А та буфер, що містив Ттгі5 при 9,6 ммоль/л, піперазин при 6,0 ммоль/л, імідазол при 11,0 ммоль/л та Масі при 100 ммоль/л (рН 10,1), як рухому фазу В при витраті потоку 0,5 мл/хв.
Серед виявлених піків пік з найбільшою площею та висотою визначили як пік ВіАБ, піки, виявлені раніше піка ВіАб, разом назвали піками Рге та піки, виявлені пізніше піка ВіІАБ, разом назвали піками Розі.
Площу піків розрахували для усіх піків, а коефіцієнт площі піка, який представляє інтерес, розрахували, застосовуючи наступне рівняння:
Коефіцієнт площі піка, що представляє інтерес (965) - 100 х (площа піка, що представляє інтерес) / (площа піка, що представляє інтерес, - сумарна площа інших піків). (5) Результати
Отримані результати наведено у Таблиці 9. "ЗЕ", "АЕ" та "СЕ" відповідно вказують на результати, отримані за допомогою гель-фільтраційної хроматографії, аніонообмінної хроматографії та катіонообмінної хроматографії.
Таблиця 9.
Кільк.агрегатів (95) і компонентів з гетероген. заряду (бо) після зберігання при 4070. та після заморожування-відтаювання
Почтов | бло | 01 0131014 04. зве (ати дос обо 0,20 0,34 0,38 | ом
Буль вл бІои| 0и2 01304 04 о циєів БТІ ОТ 101 021 | 013 013 о влРіс
Фф мономера -
Поатова | 1621.) 16,2.) 16,1. 16,3) 16,0. 163 лв-нис (лин 406 | 14,3 | 14,6) 14,4 14,5) 14,5) 145 о циів БТ) 15,9) 16,0.) 16,2. 16,4.) 16,5. 16,4. тн лю во 66 647 65 63,9 644 ян
Початова | 121122 121122 9 12 де-нРіс о циків БТ) 1.5 7,63 1.7 | 12,1 12,0 1.8)
Ріс кві
Початова | 96,6 96,8 96,7 96,6 96,6 96,6.
СЕ-НРІ С : х Віль
Був Р/Т| 96,6 97,0. 96,8) 96,9) 97.0 96,9 лоциклв в/Т| 96,8 96,7 97,2) 96,8 96,9 96,9
Почетов 00.00. 00 01 010 вс зл гот 00100) 00 00 90 00 рію ати то 00 | 00 0000 00 00 (Б циклв Р/Т/ 0,0 00) 0,0. 00 00 | оо то цикле в/т| 0,0 | бо | бо | бо 00 | оо
Як видно з Таблиці 9, при порівнянні зразків, що містили АСЕ910 у концентрації від 20 мг/мл до 180 мг/мл, було показано, що ці зразки мали еквівалентну достатню стабільність після зберігання при 40 "С та після заморожування-відтаювання.
Промислова придатність
Порівняно з традиційними складами склади рідких лікарських засобів на основі антитіла цього винаходу мають неперевершену стабільність у стані розчину та демонструють пригнічене утворення агрегатів білків, таких як молекули антитіла, після зберігання при низькій, кімнатній та високій температурі та після заморожування-відтаювання. Склади рідких лікарських засобів на основі антитіла цього винаходу, у яких реакції, що погіршують їх властивості, навряд чи виникають, можна застосовувати, наприклад, для лікування гемофілії А шляхом підшкірного введення.
Claims (13)
1. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН від 4,5 до 6,5, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІО МО: 1, 2 та З (СОК Н-ланцюга 0499), відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за ЗЕО ІО МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга 9327), відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З 1- ланцюга за 5ЕО ІЮО МО: 7, 8 та 9 (СОК І -ланцюга 1 404), відповідно; 10-40 мМ гістидин/аспартатного буфера; 0,2-1 мг/мл полоксамеру 188 (РоІохатег 188) та 100-300 мМ аргініну.
2. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за п. 1, де у біспецифічному антитілі перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за ЗЕО ІЮО МО: 10; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за ЗЕО ІЮ МО: 11; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за 5ЕО ІЮ МО: 12.
З. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за п. 1 або 2, де концентрація полоксамеру 188 становить 0,5 мг/мл.
4. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-3, де згаданий рн становить 6,0.
5. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-4, де концентрація гістидин/аспартатного буфера становить 20 мМ.
6. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-5, де концентрація аргініну становить 150 мМ.
7. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-6, де концентрація іону хлориду або іону ацетату в складі рідкого лікарського засобу на основі антитіла становить не більше 5 мМ.
8. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла з рН 6, який містить: біспецифічне антитіло у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за 5ЕО ІЮ МО: 10; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотну послідовність за ЗЕО ІО МО: 11; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг за ЗЕО ІЮ МО: 12; 20 мМ гістидин/аспартатного буфера; 0,5 мг/мл полоксамеру 188 та 150 мМ аргініну.
9. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-8 для застосування для підшкірного введення.
10. Склад рідкого лікарського засобу на основі антитіла за будь-яким з пп. 1-9 для застосування при лікуванні гемофілії А.
11. Спосіб стабілізації антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі, який передбачає додавання гістидин/(аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, при цьому бо рН складу становить від 4,5 до 6,5, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл та концентрація аргініну становить від 100 до 300 мМ, де антитіло є біспецифічним антитілом у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІЮ МО: 1, 2 та З (СО Н-ланцюга 0499), відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІЮО МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга ./)327), відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З І -ланцюга за ЗЕО ІЮО МО: 7, 8 та 9 (СОК І - ланцюга 1 404), відповідно.
12. Спосіб пригнічення асоціації (утворення агрегату) антитіла в антитіловмісному рідкому лікарському складі, який передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера, полоксамеру 188 та аргініну до розчину, при цьому рН складу становить від 4,5 до 6,5, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 мМ до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл та концентрація аргініну становить від 100 мМ до 300 мМ, де антитіло є біспецифічним антитілом у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1,2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІЮО МО: 1, 2 та З (СОК Н-ланцюга 0499), відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н- ланцюга за 5ЕО ІЮ МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга 9327), відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Ї -ланцюга за 5ЕО ІЮ МО: 7, 8 та 9 (СОК І -ланцюга 1 404), відповідно.
13. Спосіб пригнічення компонента з гетерогенністю заряду в антитіловмісному складі, який передбачає додавання гістидин/аспартатного буфера до розчину, де рН складу становить від 4,5 до 6,5, концентрація гістидин/аспартатного буфера становить від 10 до 40 мМ, концентрація полоксамеру 188 становить від 0,2 до 1 мг/мл та концентрація аргініну становить від 100 до 300 ММ, де антитіло є біспецифічним антитілом у концентрації від 20 до 180 мг/мл, де перший поліпептид та третій поліпептид утворюють пару, та другий поліпептид та четвертий поліпептид Зо утворюють пару, де перший поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІЮО МО: 1, 2 та З (СОК Н-ланцюга 0499), відповідно; другий поліпептид включає Н-ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З Н-ланцюга за 5ЕО ІЮО МО: 4, 5 та 6 (СОК Н-ланцюга .)327), відповідно; та третій поліпептид та четвертий поліпептид включають спільний І -ланцюг, який включає амінокислотні послідовності СОК 1, 2 та З І-ланцюга за 5ЕБЕО ІО МО: 7, 8 та 9 (СОК І -ланцюга 1404), відповідно.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2016090590 | 2016-04-28 | ||
| PCT/JP2017/016658 WO2017188356A1 (ja) | 2016-04-28 | 2017-04-27 | 抗体含有製剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA126900C2 true UA126900C2 (uk) | 2023-02-22 |
Family
ID=60160798
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201811471A UA126900C2 (uk) | 2016-04-28 | 2017-04-27 | Антитіловмісний препарат |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210189006A1 (uk) |
| EP (1) | EP3449940A4 (uk) |
| JP (3) | JP7320943B2 (uk) |
| KR (1) | KR102456742B1 (uk) |
| CN (2) | CN108883178B (uk) |
| AR (1) | AR108240A1 (uk) |
| AU (1) | AU2017255077B2 (uk) |
| BR (1) | BR112018067792A2 (uk) |
| CA (1) | CA3016301A1 (uk) |
| CL (1) | CL2018003022A1 (uk) |
| CR (1) | CR20180554A (uk) |
| HK (1) | HK1257953A1 (uk) |
| IL (1) | IL262589A (uk) |
| MA (1) | MA44780A (uk) |
| MX (1) | MX2018012648A (uk) |
| PE (1) | PE20181889A1 (uk) |
| RU (1) | RU2748046C2 (uk) |
| SG (1) | SG11201807765PA (uk) |
| TW (2) | TWI820000B (uk) |
| UA (1) | UA126900C2 (uk) |
| WO (1) | WO2017188356A1 (uk) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3623473A1 (en) | 2005-03-31 | 2020-03-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Process for production of polypeptide by regulation of assembly |
| JP5624276B2 (ja) | 2006-03-31 | 2014-11-12 | 中外製薬株式会社 | 抗体の血中動態を制御する方法 |
| US9670269B2 (en) | 2006-03-31 | 2017-06-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies |
| EP3689912A1 (en) | 2007-09-26 | 2020-08-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in cdr |
| TWI609698B (zh) | 2010-01-20 | 2018-01-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 穩定化的含抗體溶液製劑 |
| MX355060B (es) | 2010-11-17 | 2018-04-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula multiespecifica de union a antigeno que tiene funcion alternativa a la funcion del factor viii de coagulacion sanguinea. |
| DK3050896T3 (da) | 2013-09-27 | 2021-07-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fremgangsmåde til fremstilling af en polypeptid-heteromultimer |
| TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法 |
| TWI700300B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體 |
| WO2016159213A1 (ja) | 2015-04-01 | 2016-10-06 | 中外製薬株式会社 | ポリペプチド異種多量体の製造方法 |
| JP7219005B2 (ja) | 2015-12-28 | 2023-02-07 | 中外製薬株式会社 | Ｆｃ領域含有ポリペプチドの精製を効率化するための方法 |
| CN109661241A (zh) | 2016-09-06 | 2019-04-19 | 中外制药株式会社 | 使用识别凝血因子ix和/或活化凝血因子ix以及凝血因子x和/或活化凝血因子x的双特异性抗体的方法 |
| MX2020002710A (es) | 2017-09-29 | 2020-07-20 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union al antigeno multiespecifica que tiene actividad de sustitucion de la funcion de cofactor del factor viii de coagulacion de sangre (fviii) y formulacion farmaceutica que contiene tal molecula como ingrediente activo. |
| FR3082427B1 (fr) | 2018-06-14 | 2020-09-25 | Lab Francais Du Fractionnement | Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispecifique anti-facteurs ix et x |
| WO2020053301A1 (en) * | 2018-09-11 | 2020-03-19 | Ichnos Sciences S.A. | Compositions comprising a bispecific antibody, bufffer and one or more stabilizing agents |
| CN111665352B (zh) * | 2020-06-23 | 2024-05-17 | 广州市丹蓝生物科技有限公司 | 一种储存剂及由其制备的抗体溶液制剂及其应用 |
| US20240115698A1 (en) * | 2021-02-05 | 2024-04-11 | Bio-Thera Solutions, Ltd. | Anti-il-5 antibody formulation, preparation method therefor and use thereof |
| JPWO2023058723A1 (uk) * | 2021-10-08 | 2023-04-13 | ||
| WO2023100975A1 (ja) * | 2021-12-01 | 2023-06-08 | 中外製薬株式会社 | 抗体含有製剤の調製方法 |
| CN114544839A (zh) * | 2022-01-20 | 2022-05-27 | 未名生物医药有限公司 | 一种抗人神经生长因子抗体的电荷变异体检测方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5530101A (en) * | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
| WO2002030463A2 (en) | 2000-10-12 | 2002-04-18 | Genentech, Inc. | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
| AU2003271174A1 (en) | 2003-10-10 | 2005-04-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Double specific antibodies substituting for functional protein |
| WO2006109592A1 (ja) | 2005-04-08 | 2006-10-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 血液凝固第viii因子の機能代替抗体 |
| PE20091174A1 (es) * | 2007-12-27 | 2009-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo |
| TWI609698B (zh) * | 2010-01-20 | 2018-01-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 穩定化的含抗體溶液製劑 |
| MX355060B (es) | 2010-11-17 | 2018-04-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula multiespecifica de union a antigeno que tiene funcion alternativa a la funcion del factor viii de coagulacion sanguinea. |
| SG11201404481RA (en) | 2012-03-08 | 2014-09-26 | Hoffmann La Roche | Abeta antibody formulation |
| TWI831106B (zh) * | 2014-06-20 | 2024-02-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物 |
-
2017
- 2017-04-27 JP JP2018514687A patent/JP7320943B2/ja active Active
- 2017-04-27 MA MA044780A patent/MA44780A/fr unknown
- 2017-04-27 RU RU2018141173A patent/RU2748046C2/ru active
- 2017-04-27 MX MX2018012648A patent/MX2018012648A/es unknown
- 2017-04-27 CN CN201780020233.XA patent/CN108883178B/zh active Active
- 2017-04-27 KR KR1020187033718A patent/KR102456742B1/ko active IP Right Grant
- 2017-04-27 SG SG11201807765PA patent/SG11201807765PA/en unknown
- 2017-04-27 PE PE2018001975A patent/PE20181889A1/es unknown
- 2017-04-27 WO PCT/JP2017/016658 patent/WO2017188356A1/ja active Application Filing
- 2017-04-27 CA CA3016301A patent/CA3016301A1/en active Pending
- 2017-04-27 AU AU2017255077A patent/AU2017255077B2/en active Active
- 2017-04-27 UA UAA201811471A patent/UA126900C2/uk unknown
- 2017-04-27 CR CR20180554A patent/CR20180554A/es unknown
- 2017-04-27 BR BR112018067792-2A patent/BR112018067792A2/pt unknown
- 2017-04-27 CN CN202310130344.3A patent/CN116059353A/zh active Pending
- 2017-04-27 AR ARP170101082A patent/AR108240A1/es unknown
- 2017-04-27 TW TW106114061A patent/TWI820000B/zh active
- 2017-04-27 TW TW112137276A patent/TW202402326A/zh unknown
- 2017-04-27 EP EP17789638.8A patent/EP3449940A4/en active Pending
- 2017-04-27 US US16/093,495 patent/US20210189006A1/en active Pending
-
2018
- 2018-10-24 CL CL2018003022A patent/CL2018003022A1/es unknown
- 2018-10-25 IL IL262589A patent/IL262589A/en unknown
-
2019
- 2019-01-09 HK HK19100315.7A patent/HK1257953A1/zh unknown
-
2021
- 2021-12-09 JP JP2021199702A patent/JP2022037069A/ja active Pending
-
2023
- 2023-08-08 JP JP2023129455A patent/JP2023145766A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108883178A (zh) | 2018-11-23 |
| PE20181889A1 (es) | 2018-12-11 |
| IL262589A (en) | 2018-12-31 |
| AU2017255077B2 (en) | 2024-05-16 |
| HK1257953A1 (zh) | 2019-11-01 |
| MX2018012648A (es) | 2019-01-30 |
| CL2018003022A1 (es) | 2019-01-18 |
| JPWO2017188356A1 (ja) | 2019-03-07 |
| BR112018067792A2 (pt) | 2019-02-12 |
| CN108883178B (zh) | 2023-03-14 |
| KR20190003596A (ko) | 2019-01-09 |
| JP2023145766A (ja) | 2023-10-11 |
| CA3016301A1 (en) | 2017-11-02 |
| TW201737942A (zh) | 2017-11-01 |
| TWI820000B (zh) | 2023-11-01 |
| RU2018141173A3 (uk) | 2020-06-11 |
| AU2017255077A1 (en) | 2018-10-04 |
| KR102456742B1 (ko) | 2022-10-19 |
| CR20180554A (es) | 2019-01-10 |
| AR108240A1 (es) | 2018-08-01 |
| EP3449940A1 (en) | 2019-03-06 |
| EP3449940A4 (en) | 2020-01-22 |
| WO2017188356A1 (ja) | 2017-11-02 |
| JP7320943B2 (ja) | 2023-08-04 |
| US20210189006A1 (en) | 2021-06-24 |
| CN116059353A (zh) | 2023-05-05 |
| SG11201807765PA (en) | 2018-10-30 |
| TW202402326A (zh) | 2024-01-16 |
| JP2022037069A (ja) | 2022-03-08 |
| RU2018141173A (ru) | 2020-05-28 |
| RU2748046C2 (ru) | 2021-05-19 |
| MA44780A (fr) | 2019-03-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA126900C2 (uk) | Антитіловмісний препарат | |
| US10919980B2 (en) | Methods of treating TTP with immunoglobulin single variable domains and uses thereof | |
| US20180117157A1 (en) | Stable pharmaceutical composition, comprising an aqueous solution of an antibody-derived therapeutically active protein | |
| US20210322550A1 (en) | Antibody-containing formulations | |
| CA3220545A1 (en) | Formulations of anti-pd1 antibodies | |
| KR20240053633A (ko) | Vegf 수용체 융합 단백질을 위한 제제 | |
| KR20230121797A (ko) | 항-il5r 항체 제형 |