TWI828434B - 釘合肽及其應用 - Google Patents
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Abstract
本發明公開了一系列釘合肽及其應用，具體公開了式（I-1）-（I-5）和（II-6）所示序列的多肽及其藥學上可接受的鹽。
Description
本發明涉及一系列釘合肽及其應用，具體涉及式(I-1)-(I-5)和(II-6)所示序列的多肽及其藥學上可接受的鹽。
糖尿病是一組以高血糖為特徵的代謝性疾病，高血糖是由於胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，或兩者共同引起的。長期存在高血糖，會導致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經的慢性損害及功能性障礙。國際糖尿病聯盟2019年最新數據顯示，全球約有4.6億人患有糖尿病，2020年，中國糖尿病患者接近1.3億，成為全球糖尿病患者最多的國家。根據2020年《英國醫學雜誌》發表的中國全國橫斷面研究顯示，全國2型糖尿病(T2D)的患病率為11.2%，而糖化血紅蛋白達標的患者比例僅為49.4%。T2D為進展性疾病，疾病後期發生糖尿病腎病、糖尿病視網膜病變和糖尿病足等併發症的風險非常大。由此可見，T2D是人類面臨的一項重大的健康挑戰。
促胰島素肽(GIP)和胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)都屬腸促胰島素，他們都能促進胰島素的釋放，且為葡萄糖依賴，引起低血糖的風險較低。GLP-1有抑制大腦食欲，延緩胃排空，降低肝臟糖異生，增加肌肉組織糖消耗的效果；GIP有增加脂肪組織糖消耗，促進脂代謝，防止脂肪異位堆積的效果；胰高血糖素(GCG)由胰島α細胞分泌，GCG有抑制肝臟脂
肪合成和膽固醇水平，增加褐色脂肪組織的燃脂率，保護心肌細胞及心臟功能的效果。因此，GIPR，GLP-1R和GCGR三重激動對糖/脂代謝的調節功能將具有協同作用，可能在降血糖、減體重、緩解脂肪肝、心血管保護方面起到更加積極的效果。
本發明提供了下式所示序列的多肽或其藥學上可接受的鹽，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-1Lys-Ala-Gln-1Lys-Ala-Phe-Ile-Glu-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-1)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-1Lys-Lys-Ala-1Lys-Aib-Ala-Phe-Ile-Glu-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-2)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-Lys-Ala-Gln-1Lys-Ala-Phe-1Lys-Glu-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-3)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-Lys-Ala-Gln-Aib-1Lys-Phe-Ile-1Lys-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-4)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-Lys-Ala-Gln-Aib-Ala-Phe-Ile-Glu-1Lys-Leu-Leu-1Lys-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-5)，
Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-Lys-Ala-Gln-Aib-Ala-Phe-Ile-1Lys-Tyr-Leu-1Lys-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (II-6)，其中，Aib的結構為
；X1的結構為
；
X2選自
和
；1Lys表示修飾的離胺酸，所述修飾為兩個離胺酸側鏈上的氨基與
相連；X選自
和
，其中，「*」表示與X0相連的位置；X0選自
；m選自2和3；n選自8、9和10；p選自1和2。
在本發明的一些方案中，上述m選自2，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，上述n選自9，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，上述p選自1，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，上述X2選自
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，上述X0選自
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，上述結構單元
選自：
，其他變量如本發明所定義。
本發明還提供了下式所示多肽或其藥學上可接受的鹽，
本發明還提供了上述藥物組合物，包括作為活性成分的治療有效量根據上述的多肽或其藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
在本發明的一些方案中，上述多肽或其藥學上可接受的鹽或者上述的藥物組合物在製備治療糖尿病和/或肥胖症的藥物上的應用。
技術效果
本發明多肽對GLP-1R/GIPR具有很強的激動活性；其在多個種屬中具有優異的藥代動力學性質，在DIO小鼠中展現了優異的減重藥效，在db/db小鼠中展現了優異的降糖藥效。
定義和說明
除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。
這裡所採用的術語「藥學上可接受的」，是針對那些多肽、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。
術語「藥學上可接受的鹽」是指本發明多肽的鹽，由本發明發現的具有特定取代基的多肽與相對無毒的酸或鹼製備。當本發明的多肽中含有相對酸性的功能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠
量的鹼與這類多肽接觸的方式獲得鹼加成鹽。本發明的某些特定的多肽含有鹼性和酸性的官能團，從而可以被轉換成任一鹼或酸加成鹽。
本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體多肽通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些多肽與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。
「胺基酸」是指天然存在的和合成的胺基酸，以及起到與天然存在的胺基酸類似的作用的胺基酸類似物和胺基酸模擬物。天然存在的胺基酸是由遺傳密碼編碼的那些胺基酸，以及後來修飾的那些胺基酸，例如，羥脯胺酸、γ-羧基麩胺酸和O-磷酸絲胺酸。胺基酸類似物是指具有與天然存在的胺基酸相同的基本化學結構(例如與氫、羧基基團、氨基基團和R基團結合的α碳)的多肽，例如高絲氨酸、正白胺酸、甲硫胺酸亞碸、甲硫胺酸甲基鋶。這樣的類似物可以具有修飾的R基團(例如，正白胺酸)或修飾的肽骨架，但保留與天然存在的胺基酸相同的基本化學結構。胺基酸模擬物是指其結構不同於一般的胺基酸化學結構，但起到與天然存在的胺基酸相似的作用的化學化合物。
本文所述的A或Ala表示丙胺酸，結構為
；R或Arg表示
精氨酸，結構為
；N或Asn表示天冬醯胺酸，結構為
；D或Asp表示天冬胺酸，結構為
；C或Cys表
示半胱胺酸，結構為
；Q或Gln表示麩醯胺酸，結構為
；E或Glu表示麩胺酸，結構為
；G或Gly表示甘胺酸，結構為
；H或His表示組胺酸，結構為
；I或Ile表示異白胺酸，結構為
；L或Leu表示白胺酸，結構為
；K或Lys表示離胺酸，結構為
；M或Met表示甲硫胺酸，結構為
；F或Phe表示***酸，結構為
；P或Pro表示脯胺酸，結構為
；S或Ser表示絲胺酸，結構為
；T或Thr表示蘇胺酸，
結構為
；W或Trp表示色胺酸，結構為
；Y或Tyr
表示酪胺酸，結構為
；V或Val表示纈胺酸，結構為
術語「治療」包括抑制、減緩、停止或逆轉現有症狀或病患的進展或嚴重程度。
除非另有說明，術語「異構體」意在包括幾何異構體、順反異構體、立體異構體、對映異構體、旋光異構體、非對映異構體和互變異構體。
本發明的多肽可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明設想所有的這類多肽，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對映體、(R)-和(S)-
對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。
除非另有說明，術語「對映異構體」或者「旋光異構體」是指互為鏡像關係的立體異構體。
除非另有說明，術語「順反異構體」或者「幾何異構體」系由因雙鍵或者成環碳原子單鍵不能自由旋轉而引起。
除非另有說明，術語「非對映異構體」是指分子具有兩個或多個手性中心，並且分子間為非鏡像的關係的立體異構體。
除非另有說明，「(+)」表示右旋，「(-)」表示左旋，「(±)」表示外消旋。
除非另有說明，用楔形實線鍵(
)和楔形虛線鍵(
)表示一個立體中心的絕對構型，用直形實線鍵(
)和直形虛線鍵(
)表示立體中心的相對構型，用波浪線(
)表示楔形實線鍵(
)或楔形虛線鍵(
)，或用波浪線(
)表示直形實線鍵(
)或直形虛線鍵(
)。
除非另有說明，術語「富含一種異構體」、「異構體富集」、「富含一種對映體」或者「對映體富集」指其中一種異構體或對映體的含量小於100%，並且，該異構體或對映體的含量大於等於60%，或者大於等於70%，或者大於等於80%，或者大於等於90%，或者大於等於95%，或者大於等於96%，或者大於等於97%，或者大於等於98%，或者大於等於99%，或者大於等於99.5%，或者大於等於99.6%，或者大於等於99.7%，或者大於等於99.8%，或者大於等於99.9%。
除非另有說明，術語「異構體過量」或「對映體過量」指兩種異構體或兩種對映體相對百分數之間的差值。例如，其中一種異構體或對映體的含量為90%，另一種異構體或對映體的含量為10%，則異構體或對映體過量(ee值)為80%。
可以通過的不對稱合成或掌性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。如果想得到本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有掌性試劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能團(如氨基)或酸性官能團(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的常規方法進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用掌性固定相，並任選地與化學衍生法相結合(例如由胺生成氨基甲酸鹽)。
本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚(3H)，碘-125(125I)或C-14(14C)。又例如，可用重氫取代氫形成氘代藥物，氘與碳構成的鍵比普通氫與碳構成的鍵更堅固，相比於未氘化藥物，氘代藥物有降低毒副作用、增加藥物穩定性、增強療效、延長藥物生物半衰期等優勢。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。
當所列舉的連接基團沒有指明其連接方向，其連接方向是任意的，例如，
中連接基團L為-M-W-，此時-M-W-既可以按與從左
往右的讀取順序相同的方向連接環A和環B構成
，也可以按照與從左往右的讀取順序相反的方向連接環A和環B構成
。所述連接基團、取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
除非另有規定，當某一基團具有一個或多個可連接位點時，該基團的任意一個或多個位點可以通過化學鍵與其他基團相連。當該化學鍵的連接方式是不定位的，且可連接位點存在H原子時，則連接化學鍵時，該位點的H原子的個數會隨所連接化學鍵的個數而對應減少變成相應價數的基團。所述位點與其他基團連接的化學鍵可以用直形實線鍵(／)、直形虛線鍵(
)、或波浪線(
)表示。例如-OCH3中的直形實線鍵表示通過該基團中的氧原子與其他基團相連；
中的直形虛線鍵表示通過該
基團中的氮原子的兩端與其他基團相連；
中的波浪線表示通過該苯基基團中的1和2位碳原子與其他基團相連。
除非另有規定，術語「C1-3烷基」用於表示直鏈或支鏈的由1至3個碳原子組成的飽和碳氫基團。所述C1-3烷基包括C1-2和C2-3烷基等；其可以是一價(如甲基)、二價(如亞甲基)或者多價(如次甲基)。C1-3烷基的實例包括但不限於甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和異丙基)等。
本發明的多肽可以通過本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的常規方法來確認結構，如果本發明涉及化合物的絕對構型，則該絕對構型可以通過本領域常規技術手段予以確證。例如X光單晶繞射(SXRD)，把培養出的單晶用Bruker D8 venture繞射儀收集繞射強度數據，光源為
CuKα輻射，掃描方式：φ/ω掃描，收集相關數據後，進一步採用直接法(Shelxs97)解析晶體結構，便可以確證絕對構型。
本發明的多肽可以通過本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明所使用的溶劑可經市售獲得。
本發明採用下述縮略詞：aq代表水；eq代表當量、等量；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DMSO代表二甲亞碸；MeOH代表甲醇；Boc代表三級丁氧羰基，是一種胺基保護基團；Dde代表(4,4-二甲基-2,6-二氧代環己亞基)乙基，是一種胺基酸的側鏈保護基；r.t.代表室溫；O/N代表過夜；THF代表四氫呋喃；Boc2O代表二(三級丁基)二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIEA代表二異丙基乙基胺；DMF代表N,N-二甲基甲醯胺；HBTU代表苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HOBT代表1-羥基苯並***；HOAT代表1-羥基-7-氮雜苯并***；DIC代表N,N'-二異丙基碳二亞胺；DBU代表1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯；PhSiH3代表苯矽烷；Pd(PPh3)4代表四三苯基膦鈀；AEEA代表2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸；DIEA代表二異丙基乙胺。
化合物依據本領域常規命名原則或者使用ChemDraw®軟件命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。
下面通過實施例對本發明進行詳細描述，但並不意味著對本發明任何不利限制。本文已經詳細地描述了本發明，其中也公開了其具體實施例方式，對本發明所屬技術領域具有通常知識者而言，在不脫離本發明精神和範圍的情況下針對本發明具體實施方式進行各種變化和改進將是顯而易見的。
中間體1
1.掛樹脂
1.1 秤取20.0g氯代(鄰氯苯基)二苯基甲烷(2-CTC Resin(替代度S=1.00mmol/g))和7.72g Fmoc-AEEA-OH，加入到反應柱中，再加入DCM(40mL)，隨後加入14.0mL DIEA至反應柱氮氣鼓氣2h，然後加入20.0mL MeOH至反應柱氮氣繼續鼓氣30min，排廢，直至沒有液體流出，加入DMF(300mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
1.2 加入20%的哌啶/DMF(300mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(100mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2.胺基酸的偶聯
2.1 Fmoc-AEEA-OH的偶聯
1)秤取Fmoc-AEEA-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加120mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應20min，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
2.2 Fmoc-Glu-OtBu的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(300mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Glu-OtBu(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(3.00eq)補加300mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF(300mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
2.3 二十碳二酸單三級丁酯的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(300mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出，加入DMF(300mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取二十碳二酸單三級丁酯(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加300mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.切割及粗肽乾燥
3.1 按如下體積配置切割液：六氟異丙醇(HFIP)/DCM=20/80。
3.2 將配好的400mL切割液倒入裝有乾燥後的肽樹脂的反應器中，在反應器中鼓氣20mins，過濾，濾液加入燒瓶中，重複此操作兩次，將兩次收集的切割液旋乾後得到粗肽中間體1。
以下依照標準固相合成方法合成本發明實施例中所涉及的各種類型的多肽，並通過反相HPLC進行純化。
實施例1
1.秤取1.78g 4-(2’,4’-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨甲基)-苯氧基乙醯氨基-甲基二苯甲胺樹脂(Rink Amide MBHA Resin(替代度Sub=0.28mmol/g))，加入到反應柱中，再加入DMF(50mL)至反應柱氮氣鼓氣體2h，排廢，直至沒有液體流出，加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
2.加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
3.胺基酸的偶聯
3.1 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.2 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.3 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.4 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.5 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.6 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.7 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.8 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.9 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.10 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.11 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.12 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.13 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.14 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.15 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Tyr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.16 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.17 Fmoc-Ile-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ile-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.18 Fmoc-Phe-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Phe-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.19 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.20 Fmoc-Lys(Dde)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Dde)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.21 Fmoc-Gln(Trt)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gln(Trt)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.22 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.23 Fmoc-Lys(Alloc)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Alloc)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.24 Fmoc-Lys(Boc)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Boc)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.25 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應2h，茚三酮檢測，樹脂藍色。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.26 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOAT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOAT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應1h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.27 Fmoc-α-Me-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-α-Me-Leu-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.28 Fmoc-Ile-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ile-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.29 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.30 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Tyr(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.31 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.32 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOBT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOBT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.33 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應過夜，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.34 Fmoc-Phe-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Phe-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOBT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOBT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.35 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應過夜，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.36 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Boc-His(Trt)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.37 Fmoc-Gln(Trt)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gln(Trt)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.38 Fmoc-Aib-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Aib-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.39 Boc-Tyr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Boc-Tyr(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.40 脫Alloc
1)加入PhSiH3(10.0eq)和DCM(10mL)至反應柱中，氮氣鼓氣後加入Pd(PPh3)4(0.1eq)，氮氣鼓氣20min，反應二次，排廢，直至沒有液體流出。
2)用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.41 Fmoc-Ida-OH的偶聯
1)秤取Fmoc-Ida-OH(CAS#：112918-82-8)(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.42 中間體1的偶聯
1)加入10%的DBU/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取中間體1(1.50eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(3.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(1.45eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.43 脫Dde
1)加入3%的水合肼/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣15min，排廢，加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
3.44 關醯胺環
1)將DIEA(3.0eq)加入到上述樹脂的DMF溶液中，後把用DMF溶解好的HATU(1.5eq)緩慢滴加至反應柱中，鼓氮氣。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
4)用MeOH(50mL)收縮樹脂，每次3min，排廢，直至沒有液體流出，將樹脂倒出乾燥，備用。
4.切割及粗肽乾燥
4.1.按如下體積配置切割液：TFA/Tis/H2O/Mpr=90/2.5/2.5/5。
4.2.將乾燥後的肽樹脂加入到配好的切割液中，在搖床震盪2.5h，過濾，濾液加入到10倍體積冰異丙醚中，離心，再用異丙醚洗滌5次。在真
空乾燥2h得到粗肽，純化得到WX001。多肽分子量經ESI-MS確認，計算值[M+3H]/3為1673.2，檢測值為1673.0。
實施例2
參考WX001的合成，得到多肽WX002。多肽分子量經ESI-MS進行確認，計算值[M+3H]/3為1658.9，檢測值為1658.7。
實施例3
參考WX001的合成，得到多肽WX003。多肽分子量經ESI-MS進行確認，計算值[M+3H]/3為1678.2，檢測值為1678.1。
實施例4
參考WX001的合成，得到多肽WX004。多肽分子量經ESI-MS進行確認，計算值[M+3H]/3為1677.6，檢測值為1677.6。
實施例5
1.秤取2g 4-(2’,4’-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨甲基)-苯氧基乙醯氨基-甲基二苯甲胺樹脂(Rink Amide MBHA Resin(替代度Sub=0.28mmol/g))，加入到反應柱中，再加入DMF(50mL)至反應柱氮氣鼓氣體2h，排廢，直至沒有液體流出，加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
2.加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
3.胺基酸的偶聯
3.1 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.2 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.3 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.4 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.5 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.6 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.7 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.8 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.9 Fmoc-Pro-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.10 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.11 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.12 Fmoc-Lys(Dde)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓起20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Dde)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出
3.13 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.14 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.15 Fmoc-Lys(Alloc)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Alloc)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.16 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.17 Fmoc-Ile-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ile-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.18 Fmoc-Phe-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Phe-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.19 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.20 Fmoc-Aib-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Aib-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.21 Fmoc-Gln(Trt)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gln(Trt)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.22 Fmoc-Ala-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.23 Fmoc-Lys(Boc)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Boc)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.24 Fmoc-Lys(Boc)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Lys(Boc)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.25 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應2h，茚三酮檢測，樹脂藍色。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.26 Fmoc-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Leu-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOAT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOAT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應1h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.27 Fmoc-α-Me-Leu-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-α-Me-Leu-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.28 Fmoc-Ile-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ile-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.29 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.30 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Tyr(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.31 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.32 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Ser(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOBT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOBT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.33 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應過夜，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.34 Fmoc-Phe-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Phe-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入HOBT(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸和HOBT溶解後加入DIC(6.00eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.35 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(6.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(2.85eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應過夜，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.36 Fmoc-Gly-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Boc-His(Trt)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.37 Fmoc-Gln(Trt)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Gln(Trt)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.38 Fmoc-Aib-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取Fmoc-Aib-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.39 Boc-Tyr(tBu)-OH的偶聯
1)加入20%的哌啶/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。四氯苯醌檢測，樹脂綠色。
2)秤取Boc-Tyr(tBu)-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HATU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，四氯苯醌檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.40脫Alloc
1)加入PhSiH3(10.0eq)和DCM(10mL)至反應柱中，氮氣鼓氣後加入Pd(PPh3)4(0.1eq)，氮氣鼓氣20min，反應二次，排廢，直至沒有液體流出。
2)用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.41 Fmoc-Ida-OH的偶聯
1)秤取Fmoc-Ida-OH(6.0eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(12.0eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(5.70eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.42 中間體1的偶聯
1)加入10%的DBU/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣20min，排廢，直至沒有液體流出。加入DMF(50mL)洗滌5次，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
2)秤取中間體1(1.50eq)加入到上述樹脂中，加入DIEA(3.00eq)補加10mL DMF至反應柱中，鼓氮氣，待胺基酸溶解後加入HBTU(1.45eq)。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
3)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
4)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
3.43 脫Dde
1)加入3%的水合肼/DMF(50mL)至反應柱中，氮氣鼓氣15min，排廢，加入DMF(50mL)洗滌5次每次1min，排廢，直至沒有液體流出。茚三酮檢測，樹脂藍色。
3.44 關醯胺環
1)將DIEA(3.0eq)加入到上述樹脂的DMF溶液中，後把用DMF溶解好的HATU(1.5eq)緩慢滴加至反應柱中，鼓氮氣。調節好氮氣使樹脂均勻鼓起。
2)在25℃的環境中反應0.5h，茚三酮檢測，樹脂無色透明。
3)抽掉反應液，用DMF洗滌5次(50mL每次)，每次1min，排廢，直至沒有液體流出。
4)用MeOH(50mL)收縮樹脂，每次3min，排廢，直至沒有液體流出，將樹脂倒出乾燥，備用。
4.切割及粗肽乾燥
4.1.按如下體積配置切割液：TFA/Tis/H2O/Mpr=90/2.5/2.5/5。
4.2.將乾燥後的肽樹脂加入到配好的切割液中，在搖床震盪2.5h，過濾，濾液加入到10倍體積冰異丙醚中，離心，再用異丙醚洗滌5次。在真空乾燥2h得到粗肽，純化得到多肽WX005。多肽分子量經ESI-MS確認，計算值[M+3H]/3為1646.9，檢測值為1646.9。
實施例6
參考WX001的合成，得到多肽WX006。多肽分子量經ESI-MS進行確認，計算值[M+3H]/3為1663.5，檢測值為1663.3。
生物測試數據
實驗例1：體外GLP-1R/GIPR/GCGR激動活性測試
A：主要材料：
1)細胞株
該細胞株由上海藥明康德新藥開發有限公司構建。詳情見表1。
2)試劑與耗材見表2：
3)儀器見表3：
B.方法
I)實驗材料
實驗緩衝液見表4：
檢測試劑製備見表5：
II)實驗方法
a)製備化合物板：
待測化合物做10個點4倍稀釋，起始濃度為30μM，Bravo完成稀釋
b)轉移化合物：
1)使用Echo轉移100nL化合物至OptiPlate-384 plate。
2)將OptiPlate-384 plate在1000rpm離心5秒。
c)細胞懸液的製備
1)將一支GLP-1R/GIPR/GCGR細胞凍存管迅速置於37℃溫水中解凍。
2)將細胞懸液轉移至Transfer15mL離心管中，用10mL HBSS輕柔沖洗。
3)將離心管在1000rpm室溫離心1分鐘。
4)棄去上清。
5)輕柔打散底部細胞並再用10mL HBSS輕柔沖洗，離心沉降細胞，最後用實驗緩衝液重懸細胞。
6)利用Vi-cell測量細胞密度與活度。
7)用實驗緩衝液將GLP-1R/GIPR/GCGR細胞濃度稀釋至2.0*105/mL。
8)在OptiPlate-384 plate中轉入100nL稀釋好的細胞懸液。
9)室溫孵育30分鐘。
d)加入檢測試劑：
1)在OptiPlate-384 plate空孔中加入10μL 800nM梯度稀釋好的cAMP標準品。
2)加入10μL cAMP檢測試劑。
3)用TopSeal-A film覆蓋OptiPlate-384 plate，室溫孵育60分鐘。
揭去TopSeal-A，在EnVision讀數。
C.實驗結果見表6：
結論：本發明多肽對GLP-1R/GIPR具有很強的激動活性。其中，不同多肽對於GCG的激動活性存在較大差異，對於研究三靶點活性的平衡將具有指導意義。
實驗例2：大鼠藥代動力學評價
A.實驗目的
測試本發明多肽在SD大鼠體內藥代動力學
B.實驗操作
以標準方案測試本發明多肽皮下注射後的齧齒類動物藥代特徵，實驗中多肽配成澄清溶液，給予大鼠單次皮下注射(SC,0.048mpk)。注射溶媒為檸檬酸鹽緩衝液(20mM,pH=7)。收集全血，製備得到血漿，以LC-MS/MS方法分析藥物濃度，並用Phoenix WinNonlin軟件計算藥代參數。
C.實驗結果
實驗結果如表7所示。
結論：本發明多肽具有優異的大鼠藥代動力學性質。
實驗例3：小鼠藥代動力學評價
A.實驗目的
測試本發明多肽在C57BL/6小鼠體內藥代動力學
B.實驗操作
以標準方案測試本發明多肽靜脈注射及皮下注射給藥後的齧齒類動物藥代特徵，實驗中多肽配成澄清溶液，給予小鼠單次皮下注射給藥(SC,0.048mpk)。皮下注射溶媒為檸檬酸鹽緩衝液(20mM,pH=7)。收集全血，製備得到血漿，以LC-MS/MS方法分析藥物濃度，並用Phoenix WinNonlin軟件計算藥代參數。
C.實驗結果
實驗結果如表8所示。
結論：本發明多肽具有優異的小鼠藥代動力學性質。
實驗例4：食蟹猴藥代動力學評價
A.實驗目的
測試本發明多肽在食蟹猴體內藥代動力學
B.實驗操作
以標準方案測試本發明多肽靜脈注射及皮下注射給藥後的哺乳類動物藥代特徵，實驗中多肽配成澄清溶液，給予食蟹猴單次皮下注射給藥(SC,0.02mpk)。皮下注射溶媒為檸檬酸鹽緩衝液(20mM,pH=7)。收集全血，製備得到血漿，以LC-MS/MS方法分析藥物濃度，並用Phoenix WinNonlin軟件計算藥代參數。
C.實驗結果
實驗結果如表9所示。
結論：本發明多肽具有優異的猴藥代動力學性質。
實驗例5：在DIO小鼠中的藥效研究-體內藥效評價
A.實驗目的
研究本發明多肽在DIO小鼠中的減重作用
B.實驗操作
1. DIO小鼠動物到達藥明康德設施後，將其飼養於嚴格控制環境條件的動物飼養間中，飼養間的溫度維持在20~24℃，濕度維持在30~70%。通過溫濕度計對飼養間的溫度和濕度進行實時監控，並且每天對溫度和濕度記錄兩次(上午和下午各1次)。動物飼養間的採光由一個電子定時開燈系統來控制，每天開燈12小時關燈12小時(上午7：00開，下午19：00關)。實驗過程中，動物單籠飼養，並給每個籠中提供玩具。實驗過程中動物自由採食(大小鼠生長/繁殖飼料)和飲水。
2.對每組動物分別皮下注射溶媒(20mM的檸檬酸鈉緩衝液，pH=7.0)和本發明多肽(10nmol/kg)，給藥時間：早上9：30，給藥頻率三天一次，給藥週期為22天。
C.實驗結果
實驗結果如表10所示。
結論：本發明多肽在DIO小鼠中展現了優異的減重藥效。
實驗例6：在db/db小鼠中的藥效研究-體內藥效評價
A.實驗目的
研究本發明多肽對於II型糖尿病db/db小鼠的血糖控制作用。
B.實驗操作
1. db/db小鼠動物到達設施後，將其飼養於嚴格控制環境條件的動物飼養間中，飼養間的溫度維持在20~24℃，濕度維持在30~70%。通過溫濕度計
對飼養間的溫度和濕度進行實時監控，並且每天對溫度和濕度記錄兩次(上午和下午各1次)。動物飼養間的採光由一個電子定時開燈系統來控制，每天開燈12小時關燈12小時(上午7：00開，下午19：00關)。實驗過程中，動物單籠飼養，並給每個籠中提供玩具。實驗過程中動物自由採食(大小鼠生長/繁殖飼料)和飲水。
2.對每組動物分別皮下注射溶媒(20mM的檸檬酸鈉緩衝液，pH=7.0)和本發明多肽(15nmol/kg)，給藥時間：早上9：30-11：00，給藥頻率一天一次，連續給藥4周。
C.實驗結果
實驗結果如表11所示。
結論：本發明多肽在db/db小鼠中展現了優異的降糖藥效。
Claims (10)
- 一種如下列所示序列的多肽或其藥學上可接受的鹽，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-1Lys-Ala-Gln-1Lys-Ala-Phe-Ile-Glu-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-1)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-1Lys-Lys-Ala-1Lys-Aib-Ala-Phe-Ile-Glu-Tyr-Leu-Leu-Glu-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-2)，Tyr-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Ile-X1-Leu-Asp-Lys-Lys-Ala-Gln-Aib-Ala-Phe-Ile-Glu-1Lys-Leu-Leu-1Lys-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-X2 (I-5)，其中，Aib的結構為；X1的結構為
；X2選自
和
；1Lys表示修飾的離胺酸，所述修飾為兩個離胺酸側鏈上的氨基與
相連；X選自
和
，其中，「*」表示與X0相連的位置；X0選自
；m選自2和3；n選自8、9和10； p選自1和2。
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，m選自2。
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，n選自9。
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，p選自1。
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，X2選自
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，X0選自
- 如請求項1所述的多肽或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元選自
- 一種如下式所示多肽或其藥學上可接受的鹽，
- 一種藥物組合物，包括作為活性成分的治療有效量的根據請求項1~8任意一項所述的多肽或其藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體。
- 一種如請求項1~8任意一項所述的多肽或其藥學上可接受的鹽或者根據請求項9所述的藥物組合物在製備治療糖尿病和/或肥胖症的藥物上的應用。
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