TWI693026B - 黑色素材發酵物及其製備方法與其用於增加抗氧化活性及保護眼睛的用途 - Google Patents

黑色素材發酵物及其製備方法與其用於增加抗氧化活性及保護眼睛的用途 Download PDF

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Abstract

本發明提供一種黑色素材發酵物及其製備方法與其用於增加抗氧化活性及保護眼睛的用途，能有效增加抗氧化活性、預防視網膜細胞受及藍光之傷害、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊的狀況，其中該黑色素材發酵物，係由一黑芝麻、一黑棗、及一黑醋栗所組成之混合物以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌進行三段式發酵所製得。

Description

黑色素材發酵物及其製備方法與其用於增加抗氧化活性及保護眼睛的用途
本發明係關於一種黑色素材發酵物及其製備方法與其用途，尤其是一種黑色素材發酵物用於製備增加抗氧化活性及保護眼睛之組合物的用途；其中，該黑色素材發酵物係由一黑芝麻、一黑棗、及一黑醋栗所組成之混合物，以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌依序進行三段式發酵而獲得。
人類眼睛可感受到的光線稱為可見光，其波長範圍為390-700nm，其中波長主峰在425-475nm的藍光，為可見光中能量最強的光。藍光具有較短的波長而容易在形成視力時發生散射，導致眼睛需更用力聚焦而無法放鬆，因此長時間照射藍光容易導致眼睛的視物影像對比、以及清晰度降低，而增加眼睛疲勞感；且藍光無法被角膜與水晶體吸收而可直達視網膜，會破壞視網膜細胞內分子的結構，可能導致視網膜細胞損傷甚至凋亡，且長期於高能量之藍光的刺激下，亦可能會使代謝物沉積在組織中，或長出微血管修補受損組織，進而產生缺氧性之血管不正常新生，並造成如黃斑部病變等相關眼睛疾病，嚴重可能導致失明。
尤其在現代人經常性地使用手機、平板電腦等3C產品的狀況下，大幅的增加眼睛照射藍光的機會，其中這些產品的螢幕皆以發射高能量藍光的發光二極體為光源，因此使得眼睛受到藍光傷害及刺激的比例增加。其中， 許多眼睛疾病的初期症狀是視力模糊，民眾常認為只是眼睛疲勞，而無感地繼續用眼，等到完全看不見視力已受損，且大部分傷及視力的眼睛疾病是無法回復，只能維持發現時的視力，或減緩日後惡化的速度。
綜上所述，為了藍光對視網膜造成的損傷，以及預防相關眼睛疾病的發生，開發一種可以降低藍光所造成的黃斑部病變、改善大量血管生長所引起的眼疾以及改善眼睛疲勞、視力模糊、及提升眼周肌肉調節靈活度的產品，著實有其必要性。
緣此，本發明之一目的在提供一種黑色素材發酵物，其中該黑色素材係由一黑芝麻、一黑棗、及一黑醋栗所組成之混合物，且該黑色素材發酵物係經由一酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、一乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)、及一醋酸桿菌(Acetobacter aceti)依序進行發酵而獲得。
本發明之又一目的在提供一種如前所述之黑色素材發酵物用於製備一保護眼睛之組合物的用途。
本發明之又一目的在提供一種如前所述之黑色素材發酵物用於製備一提升抗氧化活性之組合物的用途。
本發明之另一目的在提供一種黑色素材發酵物之製造方法，係包含：將一黑色素材經由一酵母菌、一乳酸桿菌、及一醋酸桿菌依序進行三階段發酵而獲得，其中該黑色素材係由一黑芝麻、一黑棗及一黑醋栗以所組成。
在本發明之一實施例中，該酵母菌之添加量為8x109-1.2x1010cfu/g、該乳酸桿菌之添加量為8x1010-1.2x1011cfu/g、該醋酸桿菌之添加量為8x108-1.2x109cfu/g；且該酵母菌係為BCRC20271之菌株、該乳酸桿菌係為BCRC910805之菌株、該醋酸桿菌係為BCRC12324之菌株；該酵母菌、該乳酸桿菌、及該醋酸桿菌之發酵時間比為0.83-1：1-3：3-10。
在本發明之又一實施例中，該保護眼睛係預防視網膜細胞受藍光傷害。
在本發明之又一實施例中，該保護眼睛係增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及/或改善視力模糊，且該黑色素材發酵物之有效劑量為每日至少3克。
在本發明之另一實施例中，該提升抗氧化活性係增加超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性。
本發明將黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁之混合果汁以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌進行三段式發酵所得之黑色素材發酵物，能有效提升其中的SOD活性、減少視網膜細胞照射藍光所產生之活性氧化物與氧化壓力、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊，且較黑色素材果汁有更佳之效果，能更加有效的增加抗氧化活性、預防視網膜細胞受及藍光之傷害、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊的狀況。因此，本發明之黑色素材發酵物可用於製備保護眼睛之組合物的用途，且該組合物是一醫藥品、或一食品，可藉由口服、塗抹等方式給予一個體。
以下將配合圖式進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明，並非用以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
圖1係為本發明之一實施例的黑色素材發酵物提升SOD蛋白質活性的長條圖。
圖2係為本發明之一實施例的黑色素材發酵物減緩視網膜細胞受藍光傷害的長條圖。與正控制組比較下：*p值<0.05；**p值<0.01；***p值<0.001。與空白控制組比較下：#p值<0.05。
圖3係為本發明之一實施例的黑色素材發酵物提升眼睛調節靈活度的長條圖。
圖4係為本發明之一實施例的黑色素材發酵物減緩眼睛疲勞狀況的圓餅圖。
圖5係為本發明之一實施例的黑色素材發酵物減緩視力模糊的圓餅圖。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在20%的範圍內，較佳為在10%的範圍內，最佳為在5%的範圍內。
使用Excel軟體進行統計分析。數據以平均值±標準差(SD)表示，個此之間的差異以學生t檢驗(student's t-test)分析。
黑芝麻(Sesamum indicum)為胡麻科(Pedaliaceae)胡麻屬(Sesamum)年生草本植物，又稱胡麻、脂麻、油麻。植株高度約50-100公分，全株被茸毛，莖為直立呈四棱形，為單幹或分枝；葉則對生或互生，長約4至14公分，呈心臟形或橢圓形；花大多為筒形且四瓣，長約3到5公分，為白色或淡紫色；種子呈扁橢圓形，為黑色。黑芝麻含有優良的脂質、蛋白質與膳食纖維，鈣質和鐵質皆很豐富。黑芝麻具有清除血管膽固醇的功效，有助於降低血糖、改善人體新陳代謝。
黑棗(Diospyros Iotus Linn)為柿科(Ebenaceae)柿屬(Diospyros)落葉喬木，又稱軟棗、丁香棗、牛奶柿，分布於中國遼寧，河北，山東，陝西，中南及西南各地。植株高20公尺，樹皮呈灰暗色，表面裂成小方塊狀；葉呈橢圓狀卵形，表面被有細毛；花為淡黃色至淡紅色；果實呈球型或長橢圓形，熟成時呈黃色，曬乾後成藍黑色，外表則被有蠟質白粉。黑棗具有健胃養脾、及改善氣血不順的功效。
黑醋栗(Ribes nigrum)為虎耳草科(Saxifragaceae)茶藨子屬(Ribes)多年生小型灌木，又稱黑加侖、黑豆果、黑茶藨子、黑穗醋栗，原產於中亞及東歐。植株高1-2公尺；葉呈近圓形，長4-9公分，寬則4.5-11公分，基部呈心臟形，邊緣具不規則粗銳鋸齒；花直徑5-7毫米，總狀花序長3-5公分，為下垂或呈弧形，一總狀花序具花4-12朵花；果實呈近圓形，直徑為8-10毫米，熟成時呈黑色。黑醋栗可預防痛風、貧血、水腫、關節炎、風濕病、口腔和咽喉疾病。
如本文中所使用的，用語「黑色素材果汁」意為黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁之混合果汁，其中該黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁以重量比例1：2-5：1-3進行混合。
如本文中所使用的，用語「黑棗濃縮果汁」意為將黑棗直接榨碎所產生之含有果肉的溶液，於70℃經減壓濃縮30-50分鐘成濃度大於100%之濃縮果汁；並以1：10之比例將該黑棗濃縮果汁與水進行混合後，即為本發明用語之「黑棗果汁」。
如本文中所使用的，用語「黑醋栗果汁」意為將黑醋栗直接榨碎所產生之含有果肉的溶液。
如本文中所使用的，用語「黑色素材發酵物」意為黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁之混合果汁以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌依序進行一三段式發酵而獲得，其中該酵母菌之添加量為8x109-1.2x1010cfu/g；該乳酸桿菌之添加量為8x1010-1.2x1011cfu/g；該醋酸桿菌之添加量為8x108-1.2x109cfu/g。
依據本發明，有關微生物發酵反應的操作程序與參數條件等是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於非經腸道地(parenterally)或局部地(topically)投藥的劑型，這包括，但不限於：注射品(injection)[例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution) 或分散液(dispersion)]、無菌的粉末(sterile powder)、外部製劑(external preparation)以及類似之物。
依據本發明，醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該醫藥上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，該醫藥上可接受的載劑包含有一選自於由下列所構成之群組中的溶劑：水、生理鹽水(normal saline)、磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline,PBS)、含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)以及它們的組合。
依據本發明，該醫藥品可以一選自於由下列所構成之群組中的非經腸道途徑(parenteral routes)來投藥：皮下注射(subcutaneous injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮內注射(intradermal injection)以及病灶內注射(intralesional injection)。
依據本發明，食品產品可被當作食品添加物(food additive)，藉由習知方法於原料製備時添加，或是於食品的製作過程中添加，而與任一種可食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食品產品。
依據本發明，食品產品的種類包括但不限於：飲料(beverages)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)、健康食品(health foods)以及膳食補充品(dietary supplements)。
本發明提供一種黑色素材發酵物及其製備方法與其用於增加抗氧化活性及保護眼睛的用途，本發明之黑色素材發酵物是將黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁之混合果汁以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌依序進行一三段式發酵而獲得，其中該酵母菌為BCRC20271之菌株、該乳酸桿菌為BCRC910805之菌株、該醋酸桿菌為BCRC12324之菌株。本發明之黑色素材發酵物可有效的增加抗氧化活性、預防視網膜細胞受及藍光之傷害、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊的狀況。
同時，本發明用於增加抗氧化活性及保護眼睛之組合物，亦可包含一有效量之黑色素材發酵物及一醫藥上可接受之載體，該組合物係一醫藥品、或一食品。
以下將詳細說明本發明黑色素材發酵物之詳細製備方法、該黑色素材發酵物的SOD活性提升之測試、該黑色素材發酵物減少視網膜細胞照射藍光所產生之活性氧化物與氧化壓力之測試、增加眼睛調節靈活度之測試、改善眼睛疲勞狀況之測試、以及改善視力模糊之測試，以證實該黑色素材發酵物可有效的增加抗氧化活性、預防視網膜細胞受及藍光之傷害、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊的狀況。
實施例1 本發明之黑色素材發酵物的製備方法
在本發明一實施例中，將黑芝麻、黑棗果汁、以及黑醋栗果汁以1：2-5：1-3之重量比均勻混合，並於95℃下加熱1.5小時後，將該混合溶液冷卻至室溫供後續三段式發酵使用。首先，於該混合溶液中植入8x109-1.2x1010cfu/g之酵母菌(Saccharomyces cerevisiae，購買於生物資源保存與研究中心，台灣，編號為BCRC20271)，菌數優選為1x1010cfu/g，於室溫下進行前發酵20-24小時， 實際時間視發酵狀態而異。接著直接植入8x1010-1.2x1011cfu/g之乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum TCI028，專利寄存於生物資源保存與研究中心，台灣，編號為BCRC910805)，菌數優選為1x1011cfu/g，於室溫下進行後發酵1-3天，實際時間視發酵狀態而異。接著再直接植入8x108-1.2x109cfu/g之醋酸桿菌(Acetobacter sp.，購買於生物資源保存與研究中心，台灣，編號為BCRC12324)，菌數優選為1x109cfu/g，於室溫下進行深層發酵3-10天，實際時間視發酵狀態而異；其中，乳酸桿菌TCI028係已於中華民國專利申請號第106145146號完成專利寄存，此三種菌之發酵依序為：酵母菌、乳酸桿菌、醋酸桿菌，且無法前後對調，最後在不移除此三種菌之情況下，使用設定的糖度範圍<4°、pH2-4、酒精>5%等規格，如檢驗符合該規格，則判定發酵完成並得到發酵液。接著，將該發酵液於45-70℃進行減壓濃縮，並以200mesh網篩過濾，再添加1%檸檬酸及40%異麥芽寡糖調整規格後於95℃下加熱90分鐘進行滅菌，即得到本發明之黑色素材發酵物，其中藉由微生物發酵製成，使黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁混合物中之效性物質大量釋出。
實施例2 本發明之黑色素材發酵物的超氧化物歧化酶(SOD)活性提升
本發明之一實施例為測試本發明之發酵三階段步驟提高黑色素材發酵物中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性，以抑制五倍子酚(1,2,3-Trihydroxybenzene,Pyrogallol，純度>99.7%)自氧化反應的效率進行SOD活性之定量。其中，SOD是一種能夠催化超氧化物通過歧化反應，並使其轉化為氧氣和過氧化氫的酵素，其廣泛存在於各種動物、植物、及微生物中，是生物體內一種重要的抗氧化劑，保護暴露於氧氣中的細胞。
首先，配置用於測定之A溶液與B溶液，其中A溶液為將1.2114g之三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,Tris)和37.2mg之乙二胺四乙酸(EDTA-2Na)溶於62.4mL濃度為0.1mole/L之鹽酸(HCl)溶液中，並待溶解後以蒸餾水定容至100mL，B溶液則為將56.7mg之五倍子酚以10mmole/L 之鹽酸定容至100mL。接著，於試管中依序加入10mL之A溶液、2mL之蒸餾水、及0.15mL之B溶液，加入B溶液混合後，立即倒入比色管中測定其於325nm波長下的吸光值，放置1分鐘後再檢測一次其於325nm波長下的吸光值，兩數值的差值即為△A235；接著，取另一新的試管，依序加入10mL之A溶液、2mL黑色素材果汁或2mg/mL本發明之黑色素材發酵物、及0.15mL之B溶液，加入B溶液混合後，立即倒入比色管中測定其於325nm波長下的吸光值，放置1分鐘後再檢測一次其於325nm波長下的吸光值，兩數值的差值即為△A'235。再以下列公式計算本發明之黑色素材發酵物的SOD活性，其中V為4.5、D為0.5。
Figure 108100576-A0101-12-0009-1
△A325：鄰苯三酚自氧化速度
△A′325：樣品抑制鄰苯三酚自氧化速度
V：樣品的體積
D：樣品的稀釋倍數
本發明之黑色素材發酵物中SOD蛋白質活性上升之結果如圖1所示。黑色素材果汁經本發明之三段式發酵作用後，相較於發酵前之黑色素材果汁，可提升其中20%之SOD活性。此結果顯示本發明之黑色素材發酵物在經過微生物發酵步驟後，可有效提升其中的SOD活性以及抗氧化力，能預防或減緩氧化壓力對眼睛的傷害。
實施例3 本發明之黑色素材發酵物預防視網膜細胞受藍光傷害之功效
本發明之一實施例為測試本發明之黑色素材發酵物預防視網膜細胞受藍光傷害之功效，以ARPE-19細胞測試其減緩細胞中活性氧化物(Reactive Oxygen Species,ROS)累積之情形。其中，該人類視網膜色素上皮細胞ARPE-19係購自美國典型培養物保藏中心，編號為ATCC®CRL-2302，且該細胞係培養於含有10%之胎牛血清(Fetal Bovine Serum)以及90%之DMEM/F12培養液，該培養液含有1：1比例之DMEM培養液(Dulbecco's Modified Eagle Medium，購自Gibco，美國，12100-046)與漢氏F12培養液(Ham's F12 Nutrient Mixture，購自Gibco，美國，12500-026)其中加入0.5mM之丙酮酸鈉(sodium pyruvate)以及15mM之4-羥乙基哌嗪乙磺酸(hydroxyethyl piperazineethanesulfonic acid,HEPES)緩衝溶液。
首先，將1.5x105個ARPE-19細胞種植於含2mL細胞培養液之6孔培養盤中，在含5% CO2之37℃恆溫培養箱中培養24小時後，在不擾動貼附盤底細胞的情況下移除細胞培養液，並將細胞分成下列四組處理(n=2)：(1)僅加入細胞培養液且未照射藍光之空白控制組、(2)僅加入細胞培養液且照射藍光之正控制組、(3)加入0.5%的黑色素材果汁作用1小時之比較組、(4)加入0.5%的本發明之黑色素材發酵物作用1小時之實驗組，接著於各組加入5μg/mL之二氯二氫螢光素二乙酸酯(2,7-dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA，購自Sigma，美國，編號SI-D6883-50MG，5mg/mL保存於DMSO中)於室溫下處理15分鐘以標記細胞中的活性氧化物，接著將細胞移置藍光箱(Chamber)中於室溫下照射藍光15分鐘後，在不擾動細胞之情況下將培養液移入15mL試管並置於暗處。接著以下步驟皆須避光，將移除培養液之細胞以1mL之1xPBS沖洗細胞二次，並加入200μL胰蛋白酶(Trypsin)在室溫下反應5分鐘，使細胞由培養盤上脫落，並將細胞收集至先前收集培養液之15mL試管，將該試管以300g離心10分鐘後移除上清液，再以1mL之PBS沖洗細胞一次，接 著再以300g離心10分鐘並移除上清液，並以1mL之PBS使細胞懸浮。接著，使用流式細胞儀(購自Beckman，美國)偵測細胞中激發波長為450-490nm且放射波長為510-550nm之螢光強度。
2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate(DCFH-DA)是一種穩定的非極性化合物，可自由通透細胞膜，當DCFH-DA進入細胞後，會被細胞內的脂質酶水解，形成具有極性的2’,7’-dichlorodihydrofluorescin(DCFH)，停留在細胞內無法出來，而細胞內的活性氧化物與DCFH產生氧化還原反應形成2’,7’-dichlorofluorescin(DCF)，以450-490nm波長激發後，會產生的綠色螢光可以被於510-550nm波長被偵測出，因此偵測經DCFH-DA處理之細胞的螢光強度，能反映細胞內活性氧物質之含量。
本發明之黑色素材發酵物預防視網膜細胞受藍光傷害的實驗結果如圖2所示。未照射藍光之空白控制組中，含有活性氧化物的ARPE-19細胞約佔5%；而經藍光照射後之正控制組中，約有63%之ARPE-19細胞含有活性氧化物，此結果顯示照射藍光確實能使人類視網膜細胞產生活性氧化物。經本發明之黑色素材發酵物預處裡之實驗組中，僅有約28%之ARPE-19細胞含有活性氧化物，與正控制組相比可顯著的降低54%的ARPE-19細胞產生活性氧化物；而經黑色素材果汁預處理之比較組，仍有約46%之ARPE-19細胞含有活性氧化物，與正控制組相比僅可顯著的降低約26%的ARPE-19細胞產生活性氧化物。此結果顯示本發明之黑色素材發酵物在經過微生物發酵步驟後，可有效降低視網膜細胞因照射藍光所誘發產生之活性氧化物，能有效降低視網膜細胞之氧化壓力，減少視網膜細胞照射藍光所造成之傷害。
實施例4 本發明之黑色素材發酵物增加眼睛調節靈活度之功效
本發明之一實施例為測試本發明之黑色素材發酵物於增加眼睛調節靈活度之效果，首先募集10位受試者，每日服用一瓶含有10mL本發明之 黑色素材發酵物的飲品，並分別於服用前、及服用4週後，進行鏡片擺動法測試眼睛調節之靈活度，該測試係委託聚英視光眼科診所進行。首先，請受試者佩戴一副一側為+2.00D鏡片、另一側為-2.00D鏡片的翻轉鏡(Flipper)，並請受試者於轉動翻轉鏡後，於近距離看Snellen字母，一旦字母變清晰時，則立即告知，並記錄每分鐘的循環數，該結果即為眼睛調節變化的敏感度。
本發明之黑色素材發酵物增加人體眼睛調節靈活度的實驗結果如圖3所示。服用本發明之黑色素材發酵物後，比使用前增加了7.6%的眼睛調節靈活度；同時，高達67%之受試者於使用後眼睛靈活度有明顯地獲得改善。此結果顯示本發明之黑色素材發酵物能有效增加人體眼睛調節的靈活度，能作為眼睛保健之素材。
實施例5 本發明之黑色素材發酵物改善眼睛疲勞狀況之功效
本發明之一實施例為證實本發明之黑色素材發酵物於改善眼睛疲勞狀況之效果，首先募集10位受試者，每日服用一瓶含有10mL本發明之黑色素材發酵物的飲品，並分別於服用前、及服用4週後，請受試者填寫眼睛疲勞狀況之問卷，以評估眼睛疲勞之狀況。該問卷內容如下表1所示：
Figure 108100576-A0101-12-0012-2
Figure 108100576-A0101-12-0013-3
本發明之黑色素材發酵物改善眼睛疲勞狀況的實驗結果如圖4所示。服用本發明之黑色素材發酵物前，有67%的使用者感覺眼睛疲勞狀況很嚴重，有33%的使用者感覺眼睛疲勞狀況普通；服用本發明之黑色素材發酵物後，則有67%的使用者感覺眼睛疲勞狀況普通，有33%的使用者感覺眼睛疲勞狀況輕微。此結果顯示本發明之黑色素材發酵物能有效降低人體眼睛疲勞的發生，能作為眼睛保健之素材。
實施例6 本發明之黑色素材發酵物改善視力模糊之功效
本發明之一實施例為證實本發明之黑色素材發酵物於改善視力模糊之效果，首先募集10位受試者，每日服用一瓶含有10mL本發明之黑色素材發酵物的飲品，並分別於服用前、及服用4週後，請受試者填寫視力模糊之問卷，以評估視力模糊之狀況。該問卷內容如下表2所示：
Figure 108100576-A0101-12-0013-4
本發明之黑色素材發酵物改善視力模糊的實驗結果如圖5所示。服用本發明之黑色素材發酵物前，有50%的使用者感覺視力模糊狀況嚴重，有33%的使用者感覺視力模糊狀況普通，有17%的使用者感覺視力模糊狀況輕微；服用本發明之黑色素材發酵物後，則有83%的使用者感覺力是模糊狀況輕微，有17%的使用者感覺力是模糊狀況極輕微。此結果顯示本發明之黑色素材發酵物能有效改善人體視力模糊的狀況，能作為眼睛保健之素材
綜上所述，本發明將黑芝麻、黑棗果汁、及黑醋栗果汁之混合果汁以酵母菌、乳酸桿菌、及醋酸桿菌進行三段式發酵所得之黑色素材發酵物，能有效提升其中的SOD活性、減少視網膜細胞照射藍光所產生之活性氧化物與氧化壓力、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊，且較黑色素材果汁有更佳之效果，能更加有效的增加抗氧化活性、預防視網膜細胞受及藍光之傷害、增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及改善視力模糊的狀況。因此，本發明之黑色素材發酵物可用於製備保護眼睛之組合物的用途，且該組合物是一醫藥品、或一食品，可藉由口服、塗抹等方式給予一個體。

Claims (9)

  1. 一種黑色素材發酵物用於製備一提升抗氧化活性以保護眼睛之組合物的用途，其中該黑色素材係由一黑芝麻、一黑棗、及一黑醋栗所組成之混合物。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該黑色素材發酵物係經由一酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、一乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)、及一醋酸桿菌(Acetobacter aceti)依序進行發酵而獲得。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之用途，其中該酵母菌之添加量為8x109-1.2x1010cfu/g；該乳酸桿菌之添加量為8x1010-1.2x1011cfu/g；該醋酸桿菌之添加量為8x108-1.2x109cfu/g。
  4. 如申請專利範圍第2項所述之用途，其中該酵母菌係為BCRC20271之菌株；該乳酸桿菌係為BCRC910805之菌株；該醋酸桿菌係為BCRC12324之菌株。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該保護眼睛係預防視網膜細胞受藍光傷害。
  6. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該保護眼睛係增加眼睛調節靈活度、改善眼睛疲勞狀況、及/或改善視力模糊。
  7. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該黑色素材發酵物之有效劑量為每日至少3克。
  8. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該提升抗氧化活性係增加超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性。
  9. 如申請專利範圍第2項所述之用途，其中該酵母菌、該乳酸桿菌、及該醋酸桿菌之發酵時間比為0.83-1：1-3：3-10。
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網路資料，黑棗的食用功效和禁忌，每日頭條，2014/12/11，https://kknews.cc/zh-tw/health/ovgm62o.html
網路資料，黑營養價值黑芝麻護眼攻略，每日頭條，2014/06/27，https://kknews.cc/zh-tw/health/kz892xv.html
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網路資料，黑醋栗護眼有效嗎？，全民愛健康眼睛篇27，2017/12/09，http://www.dreye.net.tw/about/newsview/638

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