TWI612966B - 南洋山蘇水萃物的用途 - Google Patents
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Abstract
一種南洋山蘇水萃物的用途，係用以製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，其中，該南洋山蘇水萃物係以水作為一萃取溶劑，於115~125℃之溫度、0.35~0.5Kg/cm2G之壓力下萃取一南洋山蘇樣品1.5~3小時所獲得。
Description
本發明係關於一種南洋山蘇水萃物的用途，特別關於一種南洋山蘇水萃物應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物的用途。
脂多糖(lipopolysaccharide)又稱作內毒素(endotoxin)，是革蘭氏陰性菌(Gram-negative bacteria)外膜的主要組成部分，提供細菌以結構的完整性(structural integrity)，並保護細菌膜受某些化學物質的攻擊。當動物體遭受革蘭氏陰性菌感染時，其巨噬細胞(macrophage)會釋放出TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素(proinflammatory cytokine)，這些細胞激素會提升血管通透性(vascular permeability)，導致熱(fever)、痛(pain)、腫(swelling)等發炎反應，並刺激活化巨噬細胞分泌更多促進發炎的細胞激素而造成發炎反應。
一般而言，發炎是身體為移除有害病原體及促進組織修復的保護措施，但是長期發炎將造成人體不適，甚或惡化而破壞生理組織導致壞死；因此發炎反應一旦發生，應密切注意並避免惡化。
吲哚美辛(indomethacin)為一種習用抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的的藥物，主要用以抑制發炎反應所造成的熱、痛、腫等現象，惟其卻可能導致消化性潰瘍(peptic ulcers)而造成嚴重的出血(bleeding)或穿孔(perforated peptic ulcer)，是以，確實仍有必要發展新
的抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物。
為解決上述問題，本發明提供一種南洋山蘇水萃物的用途，係將萃取自南洋山蘇之活性成分，應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物者。
本發明之南洋山蘇水萃物的用途，係應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，其中，該南洋山蘇水萃物係水於115~125℃之溫度、0.35~0.5Kg/cm2G之壓力下萃取1.5~3小時所獲得；如此藉由萃取自南洋山蘇之活性成分，可以抑制脂多糖所誘導之TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的生成，藉此降低發炎反應的發生，因而可以應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，為本發明之功效。
第1圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之存活率的影響結果柱狀圖。
第2a圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之TNF-α RNA生成量的影響結果柱狀圖。
第2b圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之IL-1β RNA生成量的影響結果柱狀圖。
第2c圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之IL-6 RNA生成量的影響結果柱狀圖。
第3a圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之TNF-α蛋白質分泌量的影響結果柱狀圖。
第3b圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之IL-1β
蛋白質分泌量的影響結果柱狀圖。
第3c圖：投予本發明南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株之IL-6蛋白質分泌量的影響結果柱狀圖。
為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂，下文特舉本發明之較佳實施例，並配合所附圖式，作詳細說明如下：本發明所述之「南洋山蘇(Asplenium australasicum(J.Sm.)Hook.)」，係指鐵角蕨科(Aspleniaceae)鐵角蕨屬(Asplenium)的植物，其新生嫩葉(young emerging frond)常被作為食用菜葉。
本發明之南洋山蘇水萃物，係可以抑制脂多糖所誘導之TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的生成，藉此降低發炎反應的發生，因而可以應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，該南洋山蘇水萃物與醫藥學上可以接受之載劑或賦形劑組合形成一醫藥組合物，其中，該南洋山蘇水萃物係可以製備成任何方便食用之型式，如錠劑、膠囊、粉劑、粒劑或液劑等，或者將該南洋山蘇水萃物與其他食品或飲料組合，以適於食用之樣態供生物體以口服方式服用。
其中，該南洋山蘇水萃物較佳係可以藉由一包含以下步驟之方法所製得：提供一南洋山蘇樣品；以水作為一萃取溶劑萃取該南洋山蘇樣品；及將南洋山蘇粗萃液進行濃縮，以獲得該南洋山蘇水萃物。
詳而言之，該南洋山蘇樣品係可以為南洋山蘇之成熟老葉(三年以上，背面分布孢子)，較佳係可以預先將該南洋山蘇樣品於110~120℃之溫度下進行乾燥(將100克南洋山蘇樣品乾燥至20克)，得到一南洋山蘇乾燥物；此外，該南洋山蘇樣品亦可以預先碎成粉粒(粒徑約為1~2mm)，以增加該南洋山蘇樣品與該萃取溶劑之接觸表面積，藉此提升後續萃取之萃取效率。
舉例而言，每4.8kg之南洋山蘇樣品係能夠混合該萃取溶劑，使二者總體積達80L，並於115~125℃之溫度、0.35~0.5Kg/cm2G之壓力下進行萃取1.5~3小時，上述萃取亦可以重複數次，使該南洋山蘇樣品所富含之活性成分可以完整溶出於該萃取溶劑，此為本發明所屬技術領域中具有通常知識者所廣泛應用，在此不加以贅述。
前述之南洋山蘇粗萃液可以經過減壓濃縮及冷凍乾燥，以獲得該南洋山蘇水萃物，藉由此一程序，係可以使該南洋山蘇水萃物之活性成分更加濃縮，是以僅需使用少量之該南洋山蘇水萃物即可以發揮最佳療效。
為證實本發明之南洋山蘇水萃物係可以抑制TNF-α、IL-1β、IL-6等細胞激素的生成，遂進行以下試驗。
(A)南洋山蘇水萃物對細胞存活率的影響
請參照第1表所示，本試驗係分別以不同濃度之南洋山蘇水萃物處理RAW264.7細胞株1小時後，加入LPS(1μg/mL)處理24小時，續以CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay之方式偵測各組細胞的存活率，其結果如第1圖所示。
請參照第1圖所示，濃度為50μL/mL以下的南洋山蘇水萃物對RAW264.7細胞株不具細胞毒性(第A1~A4組)。
(B)南洋山蘇水萃物對促發炎細胞激素生成量的影響
請參照第2表所示，本試驗係分別以不同濃度之南洋山蘇水萃物處理RAW264.7細胞株1小時後，加入LPS(1μg/mL)處理24小時，續收取各組細胞的總RNA，進行反轉錄反應後，利用對應的引子對偵測其中的TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的RNA含量，其結果分別如第2a、2b、2c圖所示。
請參照第2a~2c圖所示，南洋山蘇水萃物的處理均能夠抑制TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的RNA表現，且抑制效果具有劑量依賴性。
(C)南洋山蘇水萃物對促發炎細胞激素分泌量的影響
請參照第3表所示，本試驗係分別以不同濃度之南洋山蘇水萃物處理RAW264.7細胞株1小時後，加入LPS(1μg/mL)處理24小時，
續收取各組的細胞上清液，以ELISA之方式偵測其中的TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的蛋白質含量，其結果分別如第3a、3b、3c圖所示。
請參照第3a~3c圖所示，南洋山蘇水萃物的處理均能夠抑制TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的蛋白質分泌量，且抑制效果具有劑量依賴性。
綜合上述，本發明之南洋山蘇水萃物的用途係藉由萃取自南洋山蘇之活性成分，可以抑制脂多糖所誘導之TNF-α、IL-1β、IL-6等促發炎細胞激素的生成，藉此降低發炎反應的發生，因而可以應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，為本發明之功效。
雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內，相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
Claims (1)
- 一種南洋山蘇水萃物的用途，係應用於製備抑制革蘭氏陰性菌感染所造成之發炎的藥物，其中，該南洋山蘇水萃物係以水作為一萃取溶劑，於115~125℃之溫度、0.35~0.5Kg/cm2G之壓力下萃取一南洋山蘇樣品1.5~3小時所獲得。
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| Date | Code | Title | Description |
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| MM4A | Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees |