1352596 玖、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明涉及一種中藥組合物,尤其涉及用於治療急、慢 性鼻淵的中藥组合物及其製備方法。 【先前技術】 現代醫學認爲,急慢性鼻竇炎的病因主要是人體抵抗力 降低’鼻道内和外在的病毒及細菌乘隙侵入,造成鼻腔炎 症。急慢性鼻淵是我國常見病和多發病,據文獻報道,各地 鼻病發生率波動在10·7_44 5%之間,尤其在南方各地,氣候 潮濕’發病率甚高’其中76%是發生在3〇歲以下,從4〇5〇 歲間有6.4%,50歲以後僅有1〇/。或2%,該病病程長,易反 復,常因伴有頭痛、頭暈、記憶力減退等症狀,給患者帶來 不利影響。 【發明内容】 本發明的一個目的在於提供一種新的治療急慢性鼻淵 的中藥組合物。 本發明的另一個目的在於提供一種製備所述治療急慢 性鼻淵的中藥組合物的方法。 風本發明的中藥組合物是以中醫藥理論爲指導,結合現代 醫于對於急慢性鼻炎的認識以及中醫藥治療急慢性鼻淵的 最新進展,通過臨床觀察,篩選有效藥物,研製而成的治療 士慢性鼻淵的新配方方中蒼耳子、辛夷善通鼻致爲君 樂H麻黃、薄荷助辛冑、蒼耳子疏散外邪、宣通肺氣、 3 1352596 :鼓::爲臣!,槁本、黃答、連起、野菊花'天花粉、生 *、、茯令爲佐藥’甘草調和諸藥爲使藥。蒼耳子性 =苦溫,入肺經,此藥既散風通鼓,又能解表、祛風止痛。 辛:,性辛溫,入肺、胃經,本品接風散寒,能上行頭面, 用起到疏散外邪、宣通鼻鼓、接濕止痛之功。輔以麻 黃辛散宣肺’助其通竅之力…,性辛溫,入肺、胃έ里, 爲治療鼻淵頭痛的要藥,又辅君藥加強其接風宣肺、通鼓止 痛的作用帛荷’輕清揚散’性升浮則助辛夷蒼耳子疏散 風,,利頭目。鼻爲肺襄,肺氣宜則鼻竅自通,故辅以上三 味藥’以助宣通肺氣,疏散外邪之功,同時,也對頭痛鼻 塞、喷嚏等兼證起直接治療作用。黃芩、連翹、野菊花清熱 解毒’使風熱之邪得以從表解,槁本上㈣目治療頭痛、頭 痛之合併症。天花粉、生地滋陰㈣、涼血生津,以制方中 辛熱藥之燥性。茯苓,祛濕托襄。丹參,;舌血化瘀。諸藥配 合,加強通竅排膿之功;甘草調和諸藥,爲使藥。 本發明的中藥組合物由以下原料藥材所製成: 辛夷10-30重量份蒼耳子3040重量份麻黃20-60重量份 白;£ 30-90重量份薄荷ι〇_3〇重量份 槁本5-15重量份 黃芩20-40重量份 連翹2(Μ0重量份 除上述原料藥材外,製備本發明的中藥組合物的原料藥 材還更包括下述原料藥: 野菊花20-40重量份天花粉20-40重量份地黃30-60重量份 丹參2040重量份 茯苓40-120重量份 製備本發明的中藥組合物的原料藥再更包括甘草5-15 重量份,即爲: 4 1352596 辛夷10-30重量份 蒼耳子30-90重量份 麻黃20-60重量份 白芷30-90重量份 薄荷10-30重量份 槁本5-15重量份 黃荅20·40重量份 連翹2040重量份 野菊花20-40重量份 天花粉20-40重量份 地黃30-60重量份 丹參20-40重量份 茯苓40-120重量份 甘草5-15重量份 製備本發明的中藥組合物的原料藥材優選爲: 辛夷15-25重量份 蒼耳子50-70重量份 麻黃30-50重量份 柄本8-18重量份 野菊花30-50重量份 丹參30-50重量份 白芷50-70重量份 薄荷 15-35重量份 黃芩30-50重量份 連翹30-50重量份 天花粉30-50重量份地黃50-70重量份 茯苓70-90重量份 甘草8-15重量份, 最佳爲: 麻黃40重量份 搞本10重量份 野菊花40重量份 丹參40重量份 辛夷20重量份 蒼耳子60重量份 白芷60重量份 薄荷20重量份 黃芩40重量份 連翹40重量份 天花粉40重量份地黃60重量份 茯苓80重量份 甘草10重量份 上述各原料藥組成中的蒼耳子以炒爲佳。 製備本發明的中藥組合物的方法爲: 按照上述各原料藥材的配方進行本發明中藥組合物的 製備。在辛夷、薄荷、槁本、野菊花四味藥中加入5 -10倍 水(w/v )以提取揮發油,蒸德後的水溶液及藥渣分別另器 收集;其餘原料藥加5-15倍水(w/v)煎煮1-3小時,趁熱 過濾,濾液備用,過濾後的藥渣與上述藥渣合併,再加5 -1 5 倍水(w/v )煎煮1 - 3次,每次0 · 5 -1 · 5小時,過爐、,合併所 5 1352596 有遽液和上述辛夷等蒸箱後的水溶液,濃縮成清膏;然後加 入藥學上可接受的輔料’以常規工藝製成臨床上可接受的劑 型,如丸劑、片劑、顆粒劑、口服液、膠囊劑、膏劑、乳劑 和中藥膜劑等。其中所述劑型以顆粒劑爲較佳。 製備本發明的中藥組合物所使用的常規輔料包括調味 劑、分散劑、粘合劑、增稠劑、潤滑劑'稀釋劑、崩解劑、 防腐劑等。 本發明的中藥組合物在治療急慢性鼻淵中有顯著的致 果,具有收膿弟效果好、見效快的特點,它可作用於炎症反 應的多個環節,從而減輕炎症反應的症狀,使炎症反應消 退,對急慢性炎症均有良好的抗炎作用;對弓丨起急慢性鼻炎 及鼻竇炎的常見致病菌有不同程度的抑菌作用;對非特異免 疫功能及特異性免疫功能,都有一定的促進作用。 【實施方式】 下面結合實施例與藥效試驗對本發明的藥物組合物作 進一步的詳細說明。 本中藥組合物對角叉菜膠所致的大鼠足摭腫脹,對組胺 和5—經色胺所致的毛細血管通透性增加,羧曱基纖維素納 引起的大鼠白細胞遊走以及大鼠皮下棉球肉芽腫增生均有 明顯抑制作用。提示該組合物作用於炎症反應的多個環節, 從而降低炎症反應的症狀,使炎症反應消退。對急、慢性炎 症均有良好的抗炎作用。體外抑菌試驗選擇7種臨床分離菌 株共106株(其中多數菌株對常用抗菌藥物青黴素和鏈黴素 耐藥)及3株標準菌株’對本發明的中藥組合物進行了體外 6 1352596 抗菌作用的實驗研究,結果表明該藥對引起急、慢性鼻炎及 鼻寶炎的常見致病菌,如金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、 綠膿桿菌、變形桿菌、肺炎桿菌等均有不同程度的抑菌作 用。本發明的中藥組合物對小鼠非特異免疫功能—單核巨噬 細胞吞嗟功能具有明顯的促進作用,提高小鼠對血中膠體廓 清速度;在遲發性變態反應中,本發明的中藥組合物也都能 增加DNFB致敏後的耳殼腫服度,提高正常機體對超敏反應 的感受力,提高其細胞免疫功能:在免疫器官方面,對脾臟 重量有增加趨勢。在體液免疫方面’對環磷醢胺所致免疫功 能低下小鼠溶血素生成都具有一定提高作用。以上研究初步 表明,本發明的中藥組合物對非特異免疫功能及特異性免疫 功能,包括細胞免疫’體液免疫都具有一定的促進作用。本 發明的中藥組合物對無芽胞厭氧的體外抑菌試驗:選擇有代 表性的各種厭氧菌共24株,測定了本發明的中藥組合物的 趙外抗厭氧活性’並以甲靖唾作陽性對照。試驗結果表明本 發明的中藥組合物對3種無芽胞厭氧菌均有一定的抑制作 用,但其抑菌活性遠低於對照藥甲硝唑。體内抗菌試驗:採 用預防性給藥,即感染前3天給藥’在較高劑量時對金色葡 萄球菌所致小鼠感染有一定的保護作用,ED50爲I4.4g/Kg。 這一結果與其在體外具有抗金葡萄球菌作用的結果是—致 的。 藥效試驗: I .抗炎作用 一、實驗材料及統計方法 1 、藥物:以實施例10中的清膏爲本發明t藥組合物 7 1352596 的樣品進行下述實驗,其生藥濃度爲3g/mi,以下所用濃度 均以生藥表示。分別取3g/ml的本發明樣品40m卜20m卜 10 ml,加蒸餾水至100ml配成120%、60%、30%的混懸液 備用,用時混勻;***片(合肥制藥廠,批號890572), 用蒸餾水配成〇. 125 g/ml的溶液備用;阿斯匹林片(濟南第三 制藥廢,批號9105812—5),用乙醇溶解,配成2%的溶液 備用;撲爾敏片(山東德州制藥庭,批號920401);用蒸趨水 配成1 %的溶液備用。 2、 試剤:角叉菜膠(Nacala Tesqe,Inc Japan) ; 5 —經色胺(Koch- Light Lab.Ltd.England);組胺(上海生化 所);羥甲基纖維素鈉(上海赛璐珞廠 3、 動物:Wistar大鼠’同濟醫科大學實驗動物中心提 供。 5 統計方法:所有資料均用均數標準表示,各均數間 差異用方差分析進行差昱 歪異顯者性檢驗。顯著性界限 p<0.05 〇 w 二、方法與結果 1、對大鼠足跛腫脹的影黎. J而零.Wistar大鼠50只,艚番 120— 160(157± 12)g,雌雄 遐更 哪雄各半,隨機分成5組,每组H 只,設蒸餾水組 '阿斯匹放釦1 邛,‘且11 ’’和本發明樣品高、中、低劑·§· 組,分別給予每日灌胃_ 4 低劑量 _,連續3天,末次給藥後丨 每鼠右後足跛皮下注射丨y 矛说1小時, 角又萊膠0.1ml,給藥前$ 2、3、4、5和6小時分別:目丨^ 雉則和後卜 1弋固定位置的足疏體積(毛細管 放大測量法),二者之差郎陆de 顸I乇細官 P腫脹度。結果表明阿斯匹林在上 8 1352596 述各時間點對足跛腫脹均有顯著抑制作用。高劑量组在致炎 後2、3、4、5和6小時時間點有明顯抑制作用,中、低劑 量组在4、5小時時間點有抑制作用,見表i。 表1 本發明中藥組合物對大鼠足疏腫脹的影響(x±sD)
2、對也管通透性的影響: ,WlStar 大鼠 50 只,體重 1 50 — 1 90(173± 12)g,雌雄各 隨機分成5組,每組1 〇只,分別設蒸顧水組、揸故 組和本發明k 爾敏 月樣品高、中、低劑量組’給藥容量均爲1 〇ml/k 每曰灌贾― 月一次,連續3天。末次給藥後1小時後在背部已刹 1352596 雄性 Wistar 大鼠 50 只,體重 130- 180(153± 13)g β 隨 機分成5组,每组1〇只’分別設蒸顧水組、***組和 本發明樣品高、中、低劑量組。給藥容量均爲1 〇ml/kg,每 曰灌胃一次,連續三天。致炎前一天在背部肩胛間區皮下注 射5ml空氣’形成氣囊。末次給藥後1小時,抽囊内注入 1·5、3和7.5小時從囊内吸取液體〇·ι ml作白細胞計數。結 果表明***和高劑量組本發明的中藥組合物明顯抑制 白細胞遊走反應,見表3。 表3、本發明的中藥組合物對大鼠白細胞遊走反應的影響(x 土 SD) 組別 劑量 動物數 白細胞數(109/L) 1.5小時 3小時 7.5小時 蒸餾水 10ml/kg 10 4.34+ 0.28 5.79± 0.47 26.26± 2.48 *** 1.25mg/kg 10 2.18土 0.28* 2.80± 0.62* 14.27+ 1.79* 本發明樣品(高) 12g/kg 10 3.70+ 0.46* 4.75± 0.47* 21.88± 3.27* 本發明樣品(中) 6g/kg 10 4.20± 0.28 5·55± 0·48 26.28± 2.30 本發明樣品(低) 3g/kg 10 4.46± 0.31 5.63± 0.45 27.29+ 1.66 與蒸館水組比較 *p<0.01 4、對大鼠皮下棉球肉芽腫增生的影響: 雄性 Wistar 大鼠 50 只,體重 120 — 160(142± 12)g,隨 機分成5組,每組10只,分別設蒸餾水組,***組和 11 本發明描。"*· , °°阿、、低劑量组。淺麻醉無菌條件下,將棉球 -h 31mg)植入兩側腹股溝。術前三天給藥,每日灌胃十 連續1G天。給藥結束後斷頭處死動物,剝出棉球肉芽 ::9〇C烤箱内乾燥,1小時後稱重。結果表明***和 中劑量本發明中藥組合物明顯抑制皮下棉球肉芽腫增 生’抑制率分別爲24.8%、2〇 〇%和u 3%,見表4。 表4、本發明的中藥組合物對大鼠棉球肉芽腫的影響(X± SD) 組別 劑量 動物數(只) 肉芽腫重(mg) 抑制率(%) 蒸儀水 10mg/kg 10 105± 15 撲爾敏 1.25mg/kg 10 79± 13** 24.8 本發明樣品(高) 12g/kg 10 84± 14** 20.0 本發明樣品(中) 6g/kg 10 91± 12* 13.3 本發明樣品(低) 3g/kg 10 94+ 13 10.5 結論·該項研究對本發明的中藥組合物在四種大鼠動物 模型上進行了實驗。其劑量由人用量折算而來。人用每曰劑 量 30 — 45g(l〇 - 15g,Tid)相當於生藥 16.8 — 25.2g,按公斤 體重計爲0.3 4-0.50 g/kg/曰,實驗結果表明,本發明的中藥 組合物對角又菜膠所致的大鼠足疏腫脹,對組胺和5—羥色 胺所致的毛細血管通透性增加,羧曱基纖維至少鈉引起的大 鼠白細胞遊走以及大鼠皮下棉球肉芽腫增生均有明顯抑制 作用。提示本發明的中藥組合物對炎症反應的多個環節都有 作用,從而降低炎症反應的症狀,使炎症反應消退。對急、 12 1352596 慢性炎症均有良好的抗炎作用。 π ·想外抑菌作用 一、 實驗材料:1、樣品:以實施例1 〇中的清膏爲例進 行下述實驗,每毫升含生藥3g。配製方法同前,以蒸氣100 °C,30min滅菌備用。2、藥敏紙片:青黴素G,(10IU/片), 批號931211:鏈黴素(ιοιυ/片),批號93 1 127:諾氟沙星(10ug/ 片)。以上藥敏紙片均由北京天壇藥物生物技術開發部生 産。3、培養基:MH(Muller — Hinton)培養基,每100中含 牛肉膏3g,蛋白 17.5g,可溶性澱粉1.5g,瓊脂17g,PH 7.4經高壓滅菌(115 °C,30分鐘後)備用。鏈球菌接種於巧克 力瓊脂平板。4、菌種:選用與該藥主治疾病有關的臨床分 離所得致病菌及部分標準菌株(金黃色葡萄球菌 ATCC25925,大腸桿菌 ATCC25922,綠膿桿菌 ATCC27853) 共109株。其中金黃色葡萄球菌21株,表皮葡萄球菌Η 株,溶血性鏈球菌3株,大腸桿菌22株,綠膿桿菌1 6株, 變形桿菌15株’肺炎桿菌13株。受試菌株經同濟醫科大學 微生物學教研室和協和醫院檢驗科細菌室黎定。 二、 方法和結果: 1、 紙片法藥敏試驗,將測試菌分別接種于肉湯中,置 37°C培養6— 8h,用無菌棉拭子蘸取菌液均勻塗布於遭脂表 面,置37°C培養16- l8h後測量抑菌圈大小。按照統一規 定尚抗菌藥物藥敏試驗判斷標準進行判斷。 2、 ΜIC測疋,將測試崮分別接種于肉湯中,置3 71典 養16 — 18h(大腸桿菌和綠膜桿菌培養8h)後,用益结. ⑺热囷岡湯稀 13 1352596 釋成1:1000的菌液備用。採用平皿内藥液稀釋法,取不同 濃度(6g/ml,3g/ml,l_5g/m卜·· 0.0093 75 g/ml)的鼻淵淨清膏 2ml分別加入1 8 ml MH培養基中,搖勻後倒人無菌平皿 内,使培養基内藥物终濃度分別爲〇.6g/ml 〇.3g/ml 〇 1 5g/ml.......0.009375g/ml) ’同時設藥物對照平皿(僅藥 物與培養基混合’不接種細菌)和受試菌株對照平皿(培養基 内不含藥物)。待瓊脂凝固後’用接種環劃線接種各實驗菌 液,並于平孤底部標明藥物濃度和細菌種類及菌株編號,置 3 7°C培養箱培養24h後觀察結果。MIC爲抑制細菌生長的 最低藥物濃度。 3、結果·紙片法藥敏試驗結果見表5。本試驗所收集 的臨床致病菌92%的菌株對諾i沙星敏感,所有金黃色葡 萄球菌和73 %表皮葡萄球菌對青黴素耐藥,44 %革蘭氏陰 性桿菌對鏈黴素耐藥。本發明的中藥組合物的體外抗菌活性 見表6。由表6可本發明的中藥組合物對受試菌株具有 不同程度的抑菌作用,對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、 大腸桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、肺炎桿_ ·5〇的分別 爲 0.02812 、 0.02344 、 0.18 、 〇 〇9 、 〇 2 •uy 〇-206>〇,6 g/ml ; MIC9〇 分別爲 0.03 75 0.0625 〇 η ία 、λ U·42 0 14 >〇.6 >0.6g/ml . 對溶血性鏈球菌的MIC範圍* 〇 η ή / . ^ 闽舄0·075 — 〇.6g/ml。本試驗所設 藥物對照平m均未見細菌生長,受試菌株對照生長良好表 明藥物本身不含有活菌’培養條件符合試驗要求。 三、結論:本發明的中筚细人、 锻組〇物疋中樂複方製劑,具有 清熱解毒等作用。本試驗選 进擇7種臨床分離菌株共106株(其 中多數菌株對常用抗菌藥物青 月黴素和鏈黴素耐藥)及3株標 14 1352596 準菌株,對本發明的中藥组合物進行了體外抗菌作用的實驗 研究,結果表明該藥對引起急、慢性鼻炎及鼻竇炎的常見致 病菌,如金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌、變形 桿菌、肺炎桿菌等均有不同程度的抑菌作用。 表5 臨床分離株對3種抗菌藥物的紙片法藥敏試驗結果 菌種 株數 青黴素C 鏈黴素 諾氟沙星 S Μ R (%) S Μ R (%) S Μ R(%) 金黃色葡萄球 菌 20 0 0 20 (100) 19 0 1 (5) 19 0 1 (5) 表皮葡萄球菌 15 4 0 11 (73) 4 0 11 (73) 13 0 2 (15) 大腸桿菌 21 — — — 5 3 13 (62) 15 0 6 (29) 綠膿桿菌 15 — — — 2 4 9 (60) 15 0 〇 (〇) 變形桿菌 15 — — — 14 0 1 (7) 14 1 〇 (〇) 肝炎桿菌 12 — — — 7 0 5 (42) 12 0 〇 (〇) S : 敏感菌株數,M:中度敏感菌株數,R(%):耐藥菌株 數(耐藥朱百分比)。 15 1352596 表6本發明中藥组合物對ι〇9株細菌的mic測定 細菌 株 藥物ΐ 1度(g/ml) mic5〇 MIC» MIC範团 數 0.009375 0.01875 0.0375 0.075 0.15 0.3 0.6 >0.6 佥黃色 葡萄球 21 1 18 2 0.02812 0.0375 0.01875-0. 075 表皮» 萄球i 19 5 3 6 5 0.02344 0.0625 0.009375-0 •075 溶血性 鏈球菌 3 1 2 0.075-0.6 大腸桿 菌 22 10 6 6 0.18 0.42 0.15-0.6 綠膿桿 菌 16 6 9 1 0.09 0.14 0.075-0.6 變形桿 结 15 4 2 3 4 2 0.206 >0.6 0.009375-> 0.6 肝炎桿 趄 13 3 10 >0.6 >0.6 0.6->0.6 皿.對免疫功能的作用 一、本發明的中藥組合物對小鼠碳粒廓清的影響: 1、材料:樣品:以實施例1〇中的清膏爲例進行下述實 驗,每毫升含生藥3g,配製方法同前;雲芝多糖膠囊系南 京老山制藥廠産品,批准文號:蘇衛藥准字(87)3612— i號; 規格是0.5克/粒,用去離子水稀釋成ι〇%濃度混懸液,供 试驗使用’使用時振搖:印度墨汁系英國winsor&Newton 產品;7 5 1分光光度計,上海分析儀器廠產品;動物:昆明 種小鼠,由同濟醫科大學動物實驗中心提供; 16 1352596 2、 方法:取20- 24g健康小鼠50只, 分成5组,即蒸餾水組、雲芝多糠陽性對照 高、中、低劑量组,各组均按10m丨/kg體童 每曰一次,連續7天,第7天給藥後每鼠尾 汁10ml/kg體重,於2、1〇分鐘後分別 0 03ml ’加到0.1%碳酸鈉溶液2ml中搖勻 分光度計在680mm波長處測定光密度,按 清指數 K 值。k= (l〇g〇D2- l〇g〇D丨〇)/ (tl0 分別代表2、1 〇分鐘所測血樣的光密度,t 時間,取血完畢後,小鼠頸椎脫臼處死,分 量’然後根據下列公式計算吞噬指數a值: a =(體重/脾肝重)χ 各組的Κ值和a值均以xsd表示,進 各組差異顯著性。 3、 實驗結果:蒸餾水組廓清指數κ值 分別是 5·2± 1.7(Κχ 1000,xsd 下同)和 2 同),而雲芝多糖組分別是13.75± 5.7和3 有顯著性差異(ρ<0·01)。證實此方法是可靠 一致π〇],雲芝多糖能增加小鼠吞噬功能, 合物高、中、低劑量組廓清指數和吞唾指數 都具有顯著差異(Ρ<0·05),與雲芝多糖比較 顯著差異外(Ρ<〇.〇5),高、中劑量則無顯毫 這表明在較高劑量時’本發明的中藥組合物 類似的增加小鼠呑嗔功能的作用,本發明的 劑量組廓清指數與劑量間有一定相關性,劑 雌雄各半,隨機 组、本發明樣品 [口服灌胃給藥, 靜脈注射印度墨 從眼眶靜脈取血 ,用751紫外光 下列公式計算廓 —t2)〇D2 和 ODio :10和代表測定 -別稱取肝、脾重 行F檢驗,比較 和吞嗤指數a值 75± 0· 5(x± sD 下 7± 9,50,兩者具 的,與文獻報道 本發明的中藥組 與蒸傭水組比較 ’除低劑量組有 F 差異(p>〇.〇5), 具有與雲芝多糖 中藥組合物各個 丨量增大,呑噬活 17 1352596 性增強,高低劑量相比較,具有顯著性差異(P<〇.〇5),吞嗤 指數各個劑量组之間則無顯著差m〇5),以上結果表 明;本發明的中藥组合物可増加單核巨嗤細胞系統對血中膠 體碳的廓清速度’提高其吞噬功能,見表7。 表7、本發明的中藥組合物對小鼠碳粒廓清功能的影響 (XSD)
與蒸餾水組比較,*p<0 〇5,"p<〇 〇1 ;與雲芝多糖组 比較,#ρ<〇·〇5 ; 與本發明的中藥組合物低劑量組比較@ρ<〇 〇5 一、本發明的t藥組合物對遲發性變態反應的影響 (一)、材料:1、本發明的中藥組合物樣品,雲芝多糖 膠囊同前,按同法配成試驗所需濃度。2、雷公藤片,系湖 北省黃石市制藥廠産品’批准文號:鄂衛藥准字(89)24〇號, 用去離子水稀釋成0.0033%混懸液供實驗使用,使用時振 摇。3、2, 4一二硝氟苯(DNFB)系上海金山化工廠産品,用 丙綱麻油溶液配製成1 % DNFB。4、動物:昆明種小鼠,同 濟醫科大學動物實驗中心提供 18 機八一)、方法:取22g健康小鼠60只,雌雄各半隨 藤二=6组,即蒸餾水空白對照组,雲芝多糖對照組,雷公 宙“,、組,本發明的中藥组合物高中、低劑量组,按口服 /隹胃給遂 . 樂,每曰一次,連續7天,在第一天給藥的同 液^专毛’範圍約爲3x 3CM2,用1%DNFB丙嗣麻油溶
Ul均勻塗抹皮膚表面致敏,第二天再強化致敏一 給藥第 人 〜、 天,將1 % DNFB溶液1 〇ul均勻塗抹右耳廓兩面進 仃攻擊,左耳作對照。攻擊24小時後,頸部脫白處死小 左右耳殼,用打孔器取下直徑3mm的耳片,稱重,兩 =片重量之差爲耳腫脹度,同時取出各鼠脾臟和胸腺稱重, 刀別以每l〇g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)的,即: 脾指數=脾重(mg)/體重(g)x 1〇 胸腺指數=胸腺重重(mg)/體重(g)x 1〇 將耳殼腫脹度,脾指數、胸腺指數進行F檢驗,判斷各 組差異顯著性。 (三)、結果 雷公藤組其耳殼腫脹度是〇 49± 〇 24,較蒸餾水_ ! ^ ±0.47有較明顯地下降,與文獻報道雷公藤抑制遲發性變熊 反應結果完全一致,而本發明的中藥組合物高、中低三種 劑量給藥組和雲芝多糖給藥組其耳殼腫脹度分別是! 83 + 〇·38’1·66±0.38’2·51±〇·36 和 2.31±0_35,均較蒸餾水 組有明顯增加’低劑量組作用更強(見表8)。對脾臟指數有 一定的提高作用,但無顯著意義,中高劑量對胸腺指數有降 低作用低劑量對其無影響,通過本實驗揭示本發明的中藥 組合物能增強小鼠致敏反應,參與機體的免疫功能的調節作 19 1352596 用。 表 8本發明的中藥组合物對小鼠耳殼腫脹、脾指數和胸腺 指數的影響(x± SD) 組別 劑量 動物 腫脹度(mg) 脾指數(mg/lOg 胸腺指數 數 體重) (mg/lOg 體重) 蒸餾水組 10ml/kg 10 1.24± 0.47 42.9± 12.3 24.8± 6.7 雷公藤組 330ug/kg 10 0.49± 0.24** 26.7+ 16.7* 5.80± 4.5** 雲芝多糖 1 g/kg 10 2.31+ 0.35** 44.4± 12.4 19.1± 6.3* 本發明樣品(高) 12g/kg 10 1.83+ 0.38* 49.3± 10.6 17.1+ 5.9* 本發明樣品(中) 6g/kg 10 1.66+ 0.38* 51.3± 16.3 17.2+ 6.7* 本發明樣品(低) 3g/kg 10 2.51+ 0.36** 50.3+ 10.4 24.1± 4.5 與蒸顧水組比較,*p<〇.〇5,**ρ<〇.〇ι ; 三、本發明的中藥組合物對環磷醯胺所致小鼠免疫功能 低下血清溶血素生成的影響 (一)、材料: 1、 本發明中藥組合物、雷公藤、雲芝多糖膠囊同前實驗。 2、 環磷醯胺系上海十二制藥廠産品,批准文號:滬衛藥准 字(1981)第 0364 號一(十二)。 3、 SRBC保存液(AlSever)葡萄糖2.05g,氣化鈉〇 . 42g,檸 檬酸鈉0.8g,檸檬酸〇.〇5g,蒸餾水} 〇〇ml,溶解混合過濾, 在8碎壓力下滅菌1〇分鐘,在4。〇保存備用。 4、 都氏溶液(用測定血紅蛋白使用):碳酸氫鈉1 〇 g ’高鐵 氣化鋼’ 0.2g’氰化鉀〇 〇5g加蒸餾水1〇〇〇ml。 5、 補體:取新鮮豚鼠(3只)混合血清經SRBC(以1〇:1)的體 20 1352596 積比例(於4°C吸收30分鐘,靈技私 辰湯離心(2〇〇〇rpm,1〇分鐘) 取上清液,用蒸餾水按1:10將 將血清稀釋備用。 6、SRBC :在無菌條件下,從 健康成年綿羊頸靜脈取血,將 血液放入有玻璃珠的三角燒杯申 +干輕搖10分鐘以除去纖維蛋 白,加入2倍量的保存液,放 4(^冰箱備用,臨時用生理 鹽水洗滌3次,經2000rpm,1〇么从 Ρ 分鐘,得壓積紅細胞,再按 所需濃度稀釋。 7、見明種小鼠:由同濟醫科大學動物實驗中心提供。 (二)、方法:取健康小鼠60只,體重在2〇_24g,雌 雄各半隨機分成6組,即“水組,環㈣胺組,環罐酿胺 加雲芝多糖組,環磷醯胺加本發明的中藥組合物高、中、低 劑量組。給藥前先給各鼠(除蒸餾水組外)環磷醢胺按 11 Omg/kg皮下注射造成免疫功能低下的病理模型,然後連 續口服給藥7天,在給藥第二天每鼠腹腔注射致敏。第八天 從小鼠眼眶摘除眼球取血,分離血清,將血清稀釋8〇〇倍, 在試管内依次加入經稀釋的血清lrn卜5% SRBC0.5m卜10 %補體丨m卜加都氏液3ml,搖勻後放置1〇分鐘,在54〇nm 波長處比色記錄吸光度,另外取5% SRBC〇.25m卜加都氏 液4ml ’記錄其吸光度值’此值即爲實驗所用srbc半數溶 血時的肖光度值,最後按下式計算樣品的半數溶血值。 半數溶血值(HC5〇)= 樣品的吸光唐俏 X 稀釋倍數 SRBC半數溶血時吸光度值 (三)、結果:環磷醯胺组半數溶血值 (HC5〇)325.4166.10(XSD)明顯地低於蒸館水組 464.8615.85,其差異有顯著性(Ρ<〇·〇ι),通過給環碟醢胺造 21 1352596 成體液免疫功能低下,在給予環磷醯胺同時,給予本發明的 中藥組合物,都能提高半數溶血值,其高、中、低劑量組 HC5〇 值分另U 是 427.94土 33.63 , 396.9675.66 f口 397.29± 71.32,與單用環磷醯胺組比較,差異都具有顯著性(P<0.05 或P<0.01),雲芝多糖組作用非常明顯,其HC50值與環磷醯 胺組比較明顯提高(P<0.01),在本發明的中藥組合物各組 中,高劑量組作用最強,見表9。 表9 ·本發明的中藥組合物對免疫功能低下小鼠血清溶血素 組別 劑量 動物數 HC50 值(X土 SD) 蒸餾水組 10ml/kg 10 464.84± 15.85 環磷醯胺組 llg/kg 10 325.4166.10## 環磷醯胺+低劑量本發明樣品 llg/kg 10 397.29± 71.32* 3g/kg 環磷醯胺+中劑量本發明樣品 llg/kg 10 396.96+ 75.56* 6g/kg 環磷醯胺+高劑量本發明樣品 llg/kg 10 427.94± 33.63** 12g/kg 環磷醯胺+雲芝多糖 llg/kg 10 539.23± 101.13** 1 g/kg 生産的影響(x± SD)
##與蒸餾水組比較Ρ<〇.〇1 ; *與環磷醯胺比較Ρ<〇·〇5;"與環磷醯胺組比較Ρ<0.(Η。 本發明的中藥組合物對免疫功能藥效學結論:實驗結果 22 1352596 表明,三種劑量本發明的中藥组合物對小鼠非特異免疫功 能一單核巨噬細胞吞噬功能都具有明顯的促進作用提高小 鼠對血中膠體廓清速度,高劑量組較低劑量組作用更爲明 顯;在遲發性變態反應中,三種劑量本發明的中藥組合物也 都能增加DNFB致敏後的耳殼腫脹度,提高正常機體對超敏 反應的感受力,提高其細胞免疫功能,其中以低劑量組作用 更強:在免疫器官方面,對脾臟重量有增加趨勢;在體液免 疫方面,三種劑量本發明樣品對環磷醯胺所致免疫功能低下 小鼠溶血素生成都具有一定提高作用。 以上研究初步表明,本發明的中藥組合物對非特異免疫 功能及特異性免疫功能,包括細胞免疫,體液免疫都具有一 定的促進作用。 IV·對無芽胞厭氧的體外抑菌試驗 、材料和方法:1、試驗藥品,試驗藥:本發明實施 例的樣品清膏,每毫升含生藥3g。用蒸銷水配製 5 000mg/m卜以蒸氣100 c,3〇min滅菌備用用時稀釋。陽 性·對”.、藥.甲硝唑,武漢濱湖制藥廠生產,批號96〇54 ^, 配製成320ug/ml。 2、試驗菌株,試驗用菌株均爲武漢地區臨床病例標本 的刀離株’其中脆弱類桿菌2〇株,齒齦類桿菌2株共計 3種24株。受試菌株經同濟醫科大學微生物學教研室細菌 室鑒定。標準菌株(脆弱類桿菌5524)購於北京生物藥品檢驗 所所有菌株均;束幹存於.30^,使用時用無菌生理鹽水稀 釋,接種於厭氧分離培養基,3rc厭氧培養樣,再挑取單 個菌落接種於厭氧菌基礎培養基,厭氧培養24h,調整 23 1352596 菌液至I 0 cfu/mi。3、培養基,厥氧培養基,賭於上海醫工 所。 4、試驗方法,瓊脂平板稀釋法取5〇〇〇mg/mj的本發 明的中藥組合物和32〇ug/ml甲確唾2ml分別作對倍稀釋, 最小滚度分別爲〇.3ug/ml。分別取兩種藥物各種 濃度藥液2ml加入18ml厭氧瓊脂培養基中,搖勻後分別倒 人無菌平皿内。待璦脂凝固後,用接種環劃線接種各實驗菌 液’同時接種不含藥物的平皿’于平皿底部標明藥物濃度和 細菌種類及菌株編號’ 37°c厭氧條件下培# 48h後觀察結 果。MIC爲抑制細菌生長的最低藥物濃度。 二、結果:本發明的中藥組合物和甲硝唑對24株無芽 胞厭氣菌的最小抑菌濃度見表1〇。 表10、本發明的中藥組合物和皿硝嗅對24株厭氧菌的體外 抑菌作用 24 菌數 株數 藥物 MIC 脆弱類桿菌 20 本發明樣品(mg/ml) 31 〜250 曱硝唑(ug/ml) 0.06 〜32 齒齦類桿菌 2 本發明樣品(mg/ml) 125 曱確唾(ug/ml) 0.03,0.125 瘡皰丙酸桿菌 2 本發明樣品(mg/ml) 125 甲硝唑(ug/ml) 0.06,0.25 脆弱類桿菌5542 1 本發明樣品(mg/ml) 62.5 甲硝唾(ug/ml) 0.125 1352596 討論:本試驗選擇有代表性的各種厭氧菌共24株,測 定了本發明的中藥組合物的體外抗厭氧活性,並以甲硝唑做 陽性對照。試驗結果表明本發明的中藥組合物對3種無芽厭 氧菌均有一定的抑制作用’但其抑菌活性遠低於對照藥甲硝 σ坐 〇 ν ·體内抗菌試驗 材料和方法:1、藥品’試驗藥:本發明實施例10的清 膏爲樣品,棕色液體,每ml含生藥3g。用蒸餾水配成不同 濃度(0·3、〇.6、〇.9、1.2、1.5g/ml)的混懸液,用時混勻。 對照藥:乳酸環丙沙星注射液(2〇〇mg/l 00ml),廣州僑光制 藥庭生產,批號95091 502,用無菌生理鹽水配製成 0_3mg/mi。 2、試驗菌株, 用於感染動物的細菌爲臨床分離的金黃色葡萄球菌,經 @濟醫科大學附屬同濟醫院檢驗科細菌室鑒定。 25 ‘乃() 3·菌夜製備,試驗前—日,取5個菌落移種於5ml肉 湯試管,37。(:培養18h後作爲原菌液。原菌液用生理鹽水適 當稀釋,取稀釋後的菌液1«1丨加5%胃膜素9ml,製成均勻 混懸液。根據MLD預試驗結果最终用5%胃膜素製成感染 動物用菌液。MLD爲最小1〇0%致死病菌(Minimall〇〇% lethal dose of bacteria)» 本試驗選用 8〇% _ 9〇% 小鼠 死亡的細菌量感染動物。 4·試驗動物,昆明種小鼠,體重18— 22g,雌雄各半, 試驗前18h禁食供水。試驗動物由同濟醫科大學醫學實驗動 物中心提供。 5、試驗方法,按動物體重,性別分層隨機分組,每組 1〇只,共分7 ·组,即蒸德水陰性對照,環丙沙星(3mg/kg/ 次)陽性對照,5組不同劑量的本發明的中藥組合物組(3、6、 9 12 i5g/Kg/日)。用準備好的菌液採用腹腔注射感染動 物’每只小鼠G.5m卜本發明的中藥組合物於感染前3天及 感染後4天每天灌胃一次,環丙沙星於感染後即刻及感染後 6h各靜脈注射一次,陰性對照組給予等容量蒸餾水,給藥 今量爲0.1 ml/l〇g。觀察時間7天’記錄各組小鼠死亡數, 按BUSS法計算本發明的中藥組合物的ED5〇e 二、結果 小鼠感染金黃色葡萄球菌後,本發明的中藥組合物及對 照組小鼠死亡數見表u, 本發明的中藥組合物的εε>5〇與95知可信限分別爲 14.4g/kg 和 9.1 〜22.8g/Kg。 表11本發明的中藥組合物金黃色葡萄球菌感染小鼠 26 1352596 的體内保護試驗 菌濃 討给:由於中藥抗菌作用較弱,難以在體内達到有效抗 度’且中藥常可能通過調動非特異抗感染能力而起效, 菌 種 — - 金黃 色葡 萄球 菌 藥物 劑 量 (g/kg) 對數劑 量X 動物數 (只) 死亡動物 數(只) 死亡率 (%) ED5G與95可 信限(g/kg) 本發 明樣 品 — 3 0.4771 10 9 90 ------- 14.4 (9.1 〜22.8) 6 0.7782 10 10 100 9 0.9542 10 7 70 12 1.0792 10 6 60 15 1.1761 10 4 40 環丙 沙星 3mg/kg 10 0 0 蒸餾 水 丨丨 10 9 90
故正式試驗時感染菌量應低於MLD,以選取 亡的細菌量感染動物,並且研究中藥體内抗菌作用時常採死 預防性給藥。本試驗蒸餾水組和環丙沙星對照組小鼠死亡用 分別爲90%和0% ,說明所選用的感染菌量是適當的。率 藥本發明的中藥組合物採用預防性給藥,即感染 °殮 藥。研究結果表明,本品在較高劑量時對金黃色葡萄球菌户 致小鼠感染有一定的保護作用,ED”爲14 4g/kg。這一妗斤 與其在體外具有抗金葡萄球菌作用的結果是一致的。 果 27 1352596 以下爲本發明中藥组合物的製備實施例: 實施例1 : 辛夷10g 蒼耳子30g 麻黃20g 白芷30g 槁本5g 黃芩20g 連翹20g 野菊花20g 地黃30g 丹參20g 茯苓40g 甘草5g 其中’蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、野菊, 450ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分 其他十味藥加水2000ml煎煮2小時,趁熱過 藥渣與上述藥渣合併,再加水28〇〇ml煎煮1 小時,過濾,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的 成清膏;最後經過常規工序加入藥學上可接受 製成軟膠囊。 實施例2 : 辛夷10g 蒼耳子30g 麻黃60g 白芷3〇g 槁本5g 黃芩20g 連翹20g 野菊花20g 地黃30g 丹參20g 茯苓40g 甘草5g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、野菊· 230ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分 其他十咮藥加水2000ml煎煮3小時,趁熱過 藥渣與上述藥渣合併,再加水16〇〇Inl煎煮# 分鐘,過濾,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的 薄荷10g 天花粉20g 四味藥加水 別另器收集; 濾;過濾後的 次,每次0.5 水溶液,濃縮 的賦形劑輔料 薄荷l〇g 天花粉20g 四味藥加水 別另器收集; 濾;過濾後的 j次,每次50 水溶液,濃縮 28 1352596 成清膏;最後經過常規工序加入藥學上可接受的賦形劑輔料 製成軟膠囊。 實施例3: 辛夷30g蒼耳子90g麻黃2〇g自g9〇g薄荷3〇g 槁本l5g黃答4〇g連翹4〇g野菊花4〇g天花粉40g 地黃6〇g 丹參40g 茯苓i2〇g 甘草15g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、野菊花四味藥加水 6〇〇ml提取揮發油,蒸潑後的水溶液及藥渣分別另器收集; 其他十味藥加水280〇ml煎煮2.5小時,趁熱㈣;過滤後 的藥渣與上述藥潰合併,再加水3500m丨煎煮兩次,每次1>5 小時,過渡,合併渡液與上述辛夷等蒸顧後的水溶液,濃縮 成’月膏’最後經過常規工序加入藥學上可接受的賦形劑輔料 製成軟膠囊。 貫施例4 : 白芷30g 野菊花20g 甘草5g 薄荷l〇g 天花粉20g 辛夷10g蒼耳子3〇g麻黃2〇g 槁本5g 黃答40g 連翹2〇g 地黃30g丹參20g 茯苓4〇g 其中’蒼耳子以炒爲佳。 槁本、野菊花四味藥加水 以上十四味,辛夷、薄荷 675ml提取揮發油,蒸館後的水溶液及㈣分別另器收集: 其他十味藥加7"8〇〇ml煎煮1.5小時,趁熱過濾;過濾後 的藥渣與上述藥造合併,再加水45〇〇mi煎煮3次,每次i 29 1352596 小時,過遽,合併渡液與上述辛夷等蒸餾後的 成清膏;最後經過常規工序加入藥學上可接為水溶液,壤堆 製成膠囊。 又的蜱形劑輔料 實施例5 : 辛夷30g 蒼耳子90g 麻黃60g 白芷9(^ 槁本15g 黃 芩20g 連翹40g 野菊花4〇j 地黃60g 丹 參40g 获茶120g 甘草I5j 其中, 蒼耳子以炒爲佳。 1725m丨提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥/四味藥如水 集;其他十味藥加水7575ml煎煮2小時趁查分別另器收 述兩種藥邊合併,再加水93〇〇ml煎煮3次/ ^過遽;將上 過濾’合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶次Μ小時, 膏:最後經過常規工序加入藥學上可接受的’濃缩成凊 膠囊。 劑輔料製成 薄荷% 天花给% 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、 實施例: 辛夷15g 蒼耳子50g 麻黃30g 白 芷50g 薄荷15g 搞本8g 黃答30g 連顧30g 野菊花30g 天花粉30g 地黃50g 丹參30g 茯苓70g 甘 草8g 其中, 蒼耳子以炒爲佳。 以上十 四味,辛夷、 薄荷 '槁 本、 野菊花 四味藥加水 600ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分別另器收集; 其他十味藥加水3600m丨煎煮!小時,趁熱過濾;將上述兩 30 1352596 種藥渣合併,再加水4200ml煎煮兩次,每次i小時,過濾, 合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶液,濃縮成清膏;最後 經過常規工序加入藥學上可接受的賦形劑輔料製成片劑。 實施例 辛夷15g 蒼耳子50g麻黃30g自2 5〇g薄荷15g 柄本% 黃答5〇g連起3〇g野菊花3〇g天花粉30g 地黃5〇g 丹參3〇g茯苓70g 甘草% 其中’蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、簿祛 技 行杬本、野菊花四味藥加水 500ml提取揮發油,蒸餾後的 隹灿丄a垃 樂凌分別另器收集; 其他十味藥加水3800ml煎煮K5小時, ώ插磁.*人你 暫熱過渡;將上述 兩種樂渣合併,再加水4500mi煎煮兩次, 、 過渡.,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶:,1 : 膏;最後經過常規工序加入藥學 ,,成清 片劑。 』接又的賦形劑輔料製成 實施例 辛夷25g蒼耳子70g 麻黃5〇 白 搞本呢黃签5〇g連趣%野菊花5〇S %^ 358 地黃7〇g丹參50g茯荟%甘草l5j天化氣5〇g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、 η η λ 1 ^ 野菊花四味藥加水 1200ml提取揮發油,蒸餾後 查·甘“。 的水'合液及藥渣分別另器收 集,其他十咮樂加水5600ml前者7 …、煮3小時’趁熱過濾;將上 31 1352596 述兩種藥渣合併,再加永5400ml煎煮兩次, 過濾,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶 膏;最後經過常規工序加入藥學上可接受的賦 軟踢囊。 實施例9 : 辛夷25g 蒼耳子70g 麻黃50g 白芷70g 槁本18g 黃芩30g 連翹50g 野菊花50g 地黃70g 丹參50g 茯苓90g 甘草15g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、野菊花 1 200ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥潰 集;其他十咮藥加水5000ml煎煮2小時,趁卖 述兩種藥渣合併,再加水6000ml煎煮兩次,肩 過濾,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶液 膏;最後經過常規工序加入藥學上可接受的賦升 軟膠囊。 實施例10 : 辛夷20g 蒼耳子60g 麻黃40g 白芷60g 槁本10g 黃芩40g 連翹40g 野菊花40g 地黃60g 丹參4〇g 茯苓80g 甘草10g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十四味,辛夷、薄荷、槁本、野菊: 900ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分 次1小時, ,濃縮成清 劑輔料製成 薄荷35g 天花粉50g 四味藥加水 分別另器收 過濾;將上 次1小時, ,濃縮成清 劑輔料製成 薄荷20g 天花粉40g 四味藥加水 另器收集; 32 1352596 其他十味藥…編煎煮K5小時,趁熱過遽:將上述 兩種藥渣合併,再加水6200mI煎煮兩次,每次】小時過 濾,合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶液,濃縮至6〇艺 相對密度1.35.1.4G的清膏;與輔料混合制粒乾燥整粒, 裝成200粒’噴揮發油,密閉24小時,即得顆粒劑。每粒 0.3克,相當原料2.8g,開水沖服,一日3次一次1〇_ , 每袋裝10g。 實施例11 : 辛夷2〇g蒼耳子6〇g 麻黃4〇g白:£ 6〇g 薄荷20g搞本10g黃㈣g連麵4〇g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 个,〒免 岬啊、摘尽 %樂加水450ml提取插 發油蒸餾後的水溶液及藥渣分別另器收集;其他五 水議(煎煮2小時,趁熱過遽;將上述兩種藥渣合併, t t 2 Μ:,1烈煮兩次,每次1小時,過遽,合併濾液與 、夷蒸德後的水溶液,濃縮成清膏;最後經過常規工 序加入藥學上可接受的賦形劑辅料製成軟膠囊。 實施例1 2 : 辛夷10g蒼耳子3〇g麻黃6〇g白定30g 薄荷10g搞本5g黃荅20g連魅2〇g 其中’蒼耳子以炒爲佳。 j知+三味藥加水300ml提 發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分 眾'置刀別另益收集;其他五味 水1 500ml煎煮1小時,趁鼓 ^ ^熱過濾,將上述兩種藥渣合 再加水2000ml煎煮兩次,每 母人1小時,過濾,合併濾 33 1352596 上述辛夷等蒸箱後的水溶液,濃缩成清膏;最後經過常規工 序加入藥學上可接受的賦形劑辅料製成軟膠囊。 實施例1 3 : 辛夷30g 蒼耳子90g 麻黃20g 白芷90g 薄荷l〇g 槁本5g 黃芩40g 連翹40g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上八味,辛夷 '薄荷、槁本三味藥加水4〇〇mi提取揮 發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分別另器收集;其他五味藥加 水3 000ml煎煮1.5小時,趁熱過濾;將上述兩種藥渣合併, 再加水3500ml煎煮1次’每次〇·5小時,過滤,合併濾液 與上述辛夷等蒸餾後的水溶液,濃縮成清膏;最後經過常規 工序加入藥學上可接受的賦形劑輔料製成軟膠囊。 實施例7 : 辛夷20g 蒼耳子60g 麻黃40g 白芷60g 薄荷20g 槁本10g 黃荅40g 連翹40g 野菊花4〇g 天花粉40g 地黃60g 丹參40g 茯苓80g 其中,蒼耳子以炒爲佳。 以上十二味,辛夷、薄荷、槁本、野菊花四味藥加水 8 00ml提取揮發油,蒸餾後的水溶液及藥渣分別另器收集; 其他九味藥加水4000ml煎煮2小時,趁熱過濾;將上述兩 種藥渣合併,再加水4000ml煎煮兩次,每次1小時,過濾, 合併濾液與上述辛夷等蒸餾後的水溶液,濃縮成清膏;最後 經過常規工序加入藥學上可接受的賦形劑輔料製成軟膠囊。 34 1352596 【圖式簡單說明】 【主要元件代表符號簡單說明】 35