TWI352118B - Cell block embedding system - Google Patents

Description

1352118 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於製備用於顯微鏡檢驗之細胞之系統及方 法，且更特定言之係關於將細胞物質及組織片段包埋於石 壤基質巾，此後可使用標準切片機切成薄片以用於_鏡 檢驗的自動及半自動系統及方法。 【先前技術】 使用光學顯微鏡執行組織細胞樣品之組織學或細胞學檢 驗適用於診斷或偵測疾病過程。此要求首先必須自患者獲 取組織（細胞物質）樣品，且隨後加工以用於顯微鏡檢驗。 可利用若干侵襲程度最小之技術自患者獲取且收集細胞樣 品，例如藉由使用細針吸活檢或藉由刷拭由侵襲程度最小 之内窺鏡技術可達之體腔表面。亦已知多種直接將細胞物 質及組織片段沈積於顯微鏡載玻片上之細胞樣品加工技 術’諸如Cytospin®技術及Thin-prep®技術。另一通常稱為 細胞塊製備之技術將細胞物質及/或小組織片段固定於通 常為石蠟之固體支撐結構中。隨後用切片機切成細胞塊薄 片且安裝於顯微鏡載玻片用於檢驗。 美國專利6,913,921揭示且描述細胞塊之製備方法及裝 置’包括提供一起捕獲細胞樣品物質與提供細胞加工及包 埋a式劑可流經之流體通路之雙重作用的組織收集盒。細胞 樣品物質係以水溶液或液體細胞防腐劑提供，其經由捕集 細胞及組織片段之過濾器穿過組織盒。試劑流動通路係經 組態以使包埋試劑（醇、二甲苯、伊紅染色劑）及液化石蠟 i23714.doc (S ) 1352118 相繼穿過組織盒且細胞樣品已沈積於過濾器上。一旦石堪 冷卻’則剝離過遽器’留下自組織盒突出之石蠛"盤"，其 中包埋之細胞物質位於該盤之末端之某一平面中，可使用 標準切片機在此處切成組織切片以用於顯微鏡檢驗。 雖然’92 1專利中所揭示之方法及裝置呈現優於細胞塊製 備之技術現狀之改進，但其仍為勞動密集型，需要手工操 作及官理，尤其對於當已在過濾器上集聚足夠量之細胞物

質時測定。另外，細胞樣品流體"通路，，（管及樣品接口）在 每次使用後必須更換以避免污染隨後樣品，且過濾器盒 連接依賴一相對厚之。型環以製造用於後面的切片機切片 之足夠長之石蠟細胞塊。 【發明内容】

本文揭不间效製造石蠟包埋細胞塊之系統及方法，巴， 優於美國專利6,913,921中所揭示之方法及裝置之若干’ 制、諸如(但不限於)不需要人類監督之大體自動之細胞 創新的兩件式盒及過濾器組件、所製造之細胞塊 劑且：：田胞物質量、更短的加工時間、減少使用危險 :裹細胞塊更完全以保持核酸完整性。 胞it各例讀實施例中，細胞塊製備系統包括一兩件式 主盒體，且田胞塊加工台及一修整台。該細胞塊盒包括 可:除式中之收集孔;及，器組件 收集井。一—° '"體且界定一與該收集孔流通之樣 以保留八广立於收集井之整個底面上之過濾器係經組

田刀配至收鱼I 井中且流經該過濾器之樣品流體（ 123714.doc 1352118

如，防腐溶液）中所攜帶之細胞物質（例如，子宮頸細胞卜 在本文所揭示之實施例中，該過濾器組件 殼，該外殼具有-形成密封面之基底部分及-自^2 为延伸之頸部。該過濾器組件外殼之頸部界定收集井之一 周邊且具有一頂端’該頂端與一位於主盒體之底面中之環 形槽產生干涉目&合以便使過遽n組件可拆卸式附著於主盒 體。過滤n組件外殼進—步包含—自該基底部分之下侧^ 伸之過渡器支禮保留部分，纟中—導熱多孔㈣器支擇部 件（例如，燒結金屬盤或金屬篩網）保留其中該過濾器係 定位於收料内之該㈣11支料件之頂部。基底^分密 封面與頸部向下成一定角度傾斜’如此密封面之最外邊緣 延伸（或超出）㈣器支撐保留部分之最外邊緣從而與加工 台上之廢棄物腔室介面（如下所述）形成密封。

加工台具有-可移除式安置細胞塊盒之盒介面，以及一 經定位或可定位以偵測樣品收集井中之液面之感應器(例 如，超音波感應器），由該液面可計算穿過過渡器之流速 (其係與保留於過遽器表面上之細胞物質之量有關卜一廢 棄物腔室隔室下伏於該盒介面，當細胞塊盒安置（且閉鎖） :盒介面中時，過濾、器組件密封面可密封地喻合廢棄物腔 至介面°各別加Μ空氣及真空源可經選擇性置放以與廢棄 物腔室内部流通’讀錢Μ反向經過過濾器且進入收 :井中；或者自收集井抽取空氣、流體或兩者使其經過過 遽器且進入廢棄物腔室内部。樣品流體係在真空之幫助下 抽取穿過過遽器’可使真空中斷以施加反向氣麼脈衝以將 123714.doc 1352118 細胞物質瞬間推離過遽器表面且使收集井中之流趙得以排 泄。 加。包括自動流體傳送系統及一控制器，該控制器 $得該流體傳送系統將樣品流體自—樣品瓶分配至細胞塊 義收集井中。在一實施例中，自動流體傳送系統包含一自 臂，·且件該自動臂組件包括_經組態以選擇性獲取、搞 及處理吸g穴頭之吸管尖頭固持器…抽吸源係、麵連於 該吸管尖頭固持器，如此由該吸管尖頭固持器固持之一吸 管尖頭之一敞開近端可選擇性連接於該抽吸源以抽吸樣品 流體及液化石蟻。加工台安裝有空（無菌）吸管尖頭、-固 八3有芯浮於液體載劑中之細胞物質之樣品瓶的樣品瓶 "面、-液化石蠟供給(例如’熱石蠟浴)及液體試劑源(例 如’一甲苯及異丙醇），胃等液體試劑源各自亦連接於吸 管固持器以經由一吸管尖頭分配進入樣品收集井中。 就細胞塊加工而t ’自冑臂組件係經組態以選擇性獲取 :吸管尖頭’定位所獲取之吸管尖頭以自一安置於樣品瓶 中之樣口〇瓶抽吸流體，且隨後將所抽取之樣品流體分 配至樣品收集井中。控制器監控收集井中隨時間變化且基 於收集井之固定大小之液面，控制器基於接收自感應器之 ::輸出信號計算穿過過渡器之流速。感應器較佳相對於 固疋同時自動臂組件相對於感應器可移動。在使 用超音波感應器之情況下，感應器應垂直指向收集井中之 液面以獲得精確的傳播反射時間讀數。視所計算:穿過過 濾器之流體流速而定，控制器使得自動臂組件繼續分別自 123714.doc -10- 1352118 樣品瓶抽取且將其分配至收集井中直至達某一流速（即使 偶爾用反向氣壓"間歇自喷"經過過濾器），如此控制器確定 所需之臨限量之細胞物質已沈積於過濾器上。值得注意 地’細胞塊可能另外包括人工置放於過濾器上且隨後藉由 自樣品流體柚吸另外的細胞物質來補充的更大組織片段。 一旦控制器確定所需之臨限量之細胞物質已沈積於過濾 器上’則將液體試劑經由同一吸管尖頭選擇性分配至收集 井中以處理保留之細胞物質，此後自動臂組件捨棄用於分 配樣品流體之吸管尖頭且獲取新的吸管尖頭以抽取液化石 蠟且將其分配至收集井中從而將保留之細胞物質包埋於石 蠟中。使石蠟冷卻（且較佳斷然冷凍），且隨後自細胞處理 器移除盒。自盒移除過濾器組件，留下附著於且伸出主盒 體之收集孔的石壤包埋之細胞物質。可能較佳使已固化之 石蠟冷凍以在分離過濾器組件之前使石蠟熱收縮。隨後， 將包埋之細胞物質（雖然仍附著於盒）置放於（直接接觸）經 組態以安置主盒體之導熱模具中之另一石躐塊的頂部。隨 後，將模具加熱以軟化包埋石蠟及另外石蠟且使其至少部 分摻合在一起，無需加熱至使包埋石蠟軟化或液化之程度 以致其中所保留之細胞物質***且離開包埋石壞。隨後快 速且可控式冷卻模具以使”另外，，石蠟與包埋石蝶結合。 本發明之其他及另外的態樣及實施例係描述於實施方式 中。 【實施方式】 本發明之實施例之系統及方法提供石蠟包埋細胞塊之大 123714.doc < s) 體自動製造’藉由使用與受控真空結合之自動臂在可移除 胞塊i過濾器上沈積—細胞物質層（例如，獲自典型子 呂頌抹片（Pap smear)之子宮頸細胞），使所沈積之細胞物 質用木色劑、試劑及石蠟浸潤，且隨後用另外石蠟包裏所 包埋之細胞物質來製造。 圖1描繪例示性細胞塊加工系統20之主要組件，包括一 細胞塊加工台10; 一兩件式細胞塊盒11(包括一主盒體13 及可拆卸式過濾器組件14)，其捕獲細胞物質且引導試 劑及石蠟之輸注；及一修整台12，將新製造之細胞塊包裹 於另外石蠟中以備隨後切片及製備載玻片。由圖2可見， 細胞塊加工台10包括提供於一單一外殼櫃15中之一試劑隔 室16、加工隔室丨7及廢棄物隔室18。包括電腦處理器及相 關記憶體之控制器（未圖示）安置於加工隔室17之一側且與 位於櫃15之前外表面之使用者介面觸屏19操作性耦連。如 使用者介面之技術領域内所熟知，使用者介面較佳以多種 可能的語言及格式提供。 參考圖3，加工台櫃15之背面較佳使2〇通風以釋放内部 電子設備所產生的熱量。雖然主電源開啟/關閉開關21位 於櫃之背面，但若想要，可使用其他位置。各別以太網接 口 22及USB接口 23亦提供於櫃15之背面。内部櫃腔室較佳 使用炭活化之過遽器使煙霧流通，該炭活化之過滤器可經 由櫃1 5背面之過濾罩殼24接取。 參考圖4，加工隔室17通常包括—經組態以可移除式安 置細胞塊盒及（附著）過濾器組件14之細胞塊盒介面26。一 123714.doc -12- 1352118 面（圖4)之流體廢棄物腔室39及一下伏於吸管尖頭移除器 31(圖4)之吸管尖頭廢棄物箱40。如本文將更詳細地解釋， 廢棄物腔室39係經設定尺寸以用於單一細胞塊加工且結合 安置於盒介面中之細胞塊盒來維持閉合系統。如本文更詳 細地解釋，廢棄物腔室3 9之内容物在各新細胞塊加工之前 (或之後）係排放至大廢棄物容器（未圖示）中。 圖10A-10C展示熱石壌浴組件27之透視圖，其包括一界 定一使用一可移除蓋板66覆蓋之熱蠟貯槽68之主體64(圖 10A;圖10C展示組裝蓋板66降低蠟可能經氣載污染物 污染之可能性。在加工細胞塊之前，將數塊石蠟置放於熱 蠟貯槽68中且熔融。為控制器提供溫度感應器7〇以監測且 調節蠟浴68之溫度。蠟浴係經篩網72分割出浴68之因蓋板 66而暴露之部分74，以允許由自動臂組件上之吸管固持器 攜帶之吸管尖頭定位於浴部分74以自其中抽吸液化石蠟。 較佳係將數塊新蠟***於浴68之下伏於蓋板66之部分中， 且篩網72阻止任何尚未熔融之固體塊堵塞浸沒於浴之暴露 部分74中之吸管尖頭。如本文所述，石蠟抽吸及分配過程 通常應需要兩個獨立的吸管尖頭。基於此目的，在石蠟浴 結構27中建造一對吸管尖頭固持槽76(圖1〇B)以分別固持 一對吸管尖頭82(圖l〇C)。 參考圖6A，試劑隔室16儲存3個獨立的流體容器。第一 谷器41儲存用作乾燥劑之醇（例如，HPLC-UV等級的98% 異丙醇）。第二容器42儲存用作清除劑之二甲苯以移除醇 (例如，試劑等級ACS，組織學實驗室等級的ι〇〇%二甲 < S ) 123714.doc 14 1352118 苯）。第二容器43儲存染色劑（例如，可獲自Fisher Scientific之伊紅Y強化染色劑（e〇sin γ丨⑽叩出以仙⑷）， 在施用醇及二甲苯之前，其（視情況）係用於染色細胞物 質。雖然學術上染色劑本身不為"試劑"，但染色劑容器43 係置於試劑隔室16中。如圖6B所示，基於添加穩定性，流 體容器41、42及43係安置在形成於固持托盤44中之各別井 中。為減小混淆的機帛，流时器之連接器進料管線錄 佳係彼此顏色不同，例如伊紅染色劑具有紅色進料管線， 甲苯具有綠色進料f線且異丙醇具有藍色進料管線。 鲁 如圖6八所不，藉由提供一歧管48以在試劑隔室内使管 線保持分開以進-步減小流體進料管線4 7之可能的混清或 扭結。流體容器41、42、43具備各別進氣口(或若其經加 壓，則為進氣管線）以在其分配時取代流體内容物。舉例 而言’圖6C展示二甲苯容器42之一容器蓋，其包括一綠色 3出（進料）管線45及-白色進氣管線46。各別流體進料管 線47係各自耗連於吸管尖頭固持器，藉由可由控制器操作 之各別閥門以使各別流體進料管線與由吸管固持器攜帶之 吸管尖頭流體流通。在所說明之實施例中，伊紅染色劑及 二甲苯進料管線係使用標準線上泵(未圖示)加壓，且里丙 ^進料管線係與線上注射系（未圖示）耗連，此使得醇進料 管線藉由吸管固持器另外作為樣品流體及石壤抽吸源。 再次參考圖1以及參考圖7,細胞塊盒U包括一主各體 13,其係由模製塑膠製成且具有形成於其中之收集孔5〇; 及一過慮器組件14 ’其可移除式附著於主盒體13上且當电 123714.doc 15 1352118 之最外邊緣58從而與加工台10上之廢棄物腔室介面（如下 所述）形成密封。 詳言之’過濾器60上須含有細胞且須使樣品流體、染色 劑、試劑及石蠟穿過系統且捨棄於廢棄物腔室中，僅留下 細胞及硬化之石蠟。如以上所提及，與廢棄物腔室内部流 . 體流通的真空藉由控制器穿過過濾器60施加不同強度（本 . 文所述）以實現該流體穿過。在某些條件下，亦可自收集 ^ 井之下側施加加壓空氣以確保濾膜之小孔不阻塞。濾膜6〇 須能夠承受所有該等狀況；且基於此目的，外殼8〇提供一 容器。可在（聚酯）外殼80之整個底部區域使過濾器加熱加 樁以限定收集井54轉動。過濾器支撐部件59(在一實施例 中’燒結青銅或其他金屬盤）提供相對於濾膜6〇擠壓以在 真空與加壓空氣循環期間起支撐作用的多孔導熱支撐件。 外殼（或過濾器固持器）80及附著（加熱加樁）之過濾器6〇 界定各種液體及蠟之收集井54以形成自配合盒體13之硬化 ^ 犬起。該過慮器允許流體穿過但使細胞留下以收集於膜之 表面上。因為在加工中涉及真空以牵引流體穿過過濾器， 所以使用金屬或其他硬支撐部件59保持過濾器6〇以免由真 空牽引至廢棄物腔室中。該支撐部件59具有諸如8〇微米之 既定孔隙率以允許流體在穿過小得多的過濾器小孔後輕易 地繼續穿過過濾器組件。當盒安置於（且閉鎖於）加工台中 之盒介面中時，基底部分52之密封面在廢棄物腔室介面之 外部密封邊緣上形成真空密封。當密封面52在背面脈衝 (加壓空氣脈衝）期間經壓縮以承受施加於下表面上之壓力 17 123714.doc < s) 1352118 時，其之外部塑膠"蘑菇"形狀之順應性質提供充分的真空 從封與適當的預負荷。基底52之密封面亦向系統操作員提 供自主盒體丨3移除過濾器組件14的可抓住構件，因此當 、’’田胞塊已加工完成時，留下在蠟突起之最頂端處含有細胞 層之石蠟之固體突起。基於說明之目的，圖8描繪在加工 新々胞塊之則，操作員將過遽器組件14附著於主盒體13 上。圖9描繪在製造新細胞塊62之後，操作員自細胞塊盒 13拆卸過濾器組件14。 較佳地，主盒體具有一大體上平坦之頂面及一大體上平 一之底面，且該頂面與該底面大體上相互平行以允許多個 已移除其各別過遽器組件之盒體易於堆疊（例如，以貼標 籤、施用條形碼等）。 在替代實施例中，可能有獲得製造收集井之相同結果之 許多其他結構及方法。舉例而言，可使用徑向密封件有些 類似於注射器中所使用之密封件製造真空密封。此將需要 使用更具順應性之材料且可能使用橡膠***物形式作為密 封件。亦可使用面密封件形成真空密封，此將包括使用某 類密封墊或自由漂浮於儀器上或固定於介面上之類似材 料。視設計而定，亦可將密封墊材料置放於過濾器固持器 之基底上。過濾器外殼80可使用其他形狀及幾何尺寸，此 將製造多種形狀及尺寸之收集井。一種如此可選之形狀為 卵形，此將降低對再熔融步驟（與修整台2〇結合討論）的需 要，因為切片機將能夠製造原樣無阻塞之條帶。 基於說明之目的，圖11A及UB描繪製造新細胞塊之 123714.doc •18· 1352118 及縱向運動中之一者或兩者。縱向振動之頻率似乎對於收 集井中所存在之樣品之量（質量）更敏感。細胞塊盒之機械 振動之致動可以多種方式實現。舉例而言，可使用設計成 引擎組件中之習用壓電致動器傳送使細胞物質收集最大化 所需之適當能量。音圈設計亦可能能夠傳送增強樣品流體 傳达之足夠低頻率之能量。另一選擇將為將能量傳送至細 胞塊盒中經由聲壓波誘導至濾膜以下之廢棄物腔室内部 中。在樣品收集期間，聲能將使濾膜振動，從而使小孔保 持敞開更久。 如進一步結合圖15-20之細胞塊加工流程圖所述，當將 樣品流體分配至收集井中時，在保留足夠的細胞物質層之 前，某些樣品將傾向於堵塞過遽器。$等樣品通常含有諸 如淋巴細胞及其他炎性細胞之個別小細胞，該等細胞具有 堆疊傾向且幾乎立即阻礙流體流經過濾器。為收集其他細 胞物質且因此由過滤器保留更大細胞層，推動（或脈衝）氣 泡自廢棄物管線、經由過濾器以使細胞物質暫時升離過滤器 表面且使更多液體穿過。此藉由在廢棄物管線内施加僅比 過遽器材料之起泡點大之壓力以使細胞物f稍升離過遽器 表面來實現。 圖41展示廢棄物腔室之真空及壓力傳送系統的實施例。 廢力脈衝閥門使小壓力注入廢棄物腔室中。該小壓力僅比 過渡膜之起泡點之壓力大。當樣品收集已停止時，該小壓 力脈衝可使樣品升離過濾器且使更多樣品得以收集。 似乎增加所收集樣品之量的樣品攪拌的替代形式為簡單 123714.doc -20- (S ) 1352118 機械振動盒/過遽益。該機械運動延長完全堵塞 小 孔花費之時間’從而使更多樣品得以收集。與涛膜平/ 橫向振動似乎比縱向或垂直運動更起作用。縱向振動之 • 率似乎亦對所存在之樣品之量（質量）更敏感。盒/過濾2 = . 致動可以多種方式實現。設計成引擎組件中之習用壓電之 動器可傳送使樣品收集最大化所需之適當能量。更簡單 ' 音圈設計亦可能能夠傳送增強樣品傳送之足夠低頻率 • 量。另一選擇將為將能量傳送至盒/過濾器中經由聲壓= 誘導至濾膜以下之廢棄物腔室容積中。在樣品收集期間’ 聲能將使濾膜振動以使小孔保持敞開更久。 圖1 5-20為說明當加工細胞塊時，由加工台丨〇進行之過 程的詳細流程圖。值得注意地，加工台之處理器保持大量 細胞塊事件，該等事件可使用以太網或USB連接列印或轉 移。 詳言之，圖15為使用圖卜14之系統2〇之細胞塊加工的流 鲁 程圖。使用者已將一新（且無菌）的細胞塊盒及過濾器組件 . 加載至盒介面中，其中過濾器組件之密封面52與廢棄物腔 , 至形成真空密封。該過程以加工台之初始化循環開始（圖 16) ’其包括使用樣品瓶介面處所提供之液體廢棄物管線 起動異丙醇進料管線（圖16中未圖示）。隨後，系統加載一 吸管尖頭且測試液面感應器及廢棄物腔室真空系統。將廢 棄物腔室抽真空且亦測試加熱/冷卻過濾器組件之系統。 假疋初始化期間未遇到錯誤，則使用者指示細胞塊加工 係το全自動或部分自動（例如，其中除流體樣品外，使用 123714.doc •21 · !352118 者將細胞片段人工加載至收集井中 "部分自動"’則系統暫停以給予使 工***（例如，用鑷子或其類似物）收集 後’系統撤回且過程自該點起一直自動 選擇人工加載則完全自動進行）。

)進行。若使用者選擇 用者將所有組織片段人 井中之時間。此 進行（且若開始未 隨後，系統進行使用-吸管尖頭自樣品瓶抽吸樣品流體 且將該流體分配至收集井中的獨立過程("圖，，ΐ7Α·Β之"加 載樣品"）。雖然所分配之樣品流體之量通常限定為2〇⑹， 但：用更少的樣品流體由過濾器收集到足夠的細胞層，則 該量可能更少。任何一次分配之量視收集井中之液面(由 感應器量測)及穿過過濾器之當前流速而定。最初，將真 空設定為低程度（例如，完全真空之1〇%)，且隨後提高至 50%以用於樣品流體抽吸加工（圖18a_b)。在某種情況下， 可實施”間歇自噴”過程’其中自廢棄物腔室背面迫使加壓 空氣經由過濾器以使組織片段瞬間升離過濾器表面且使流 體穿過（圖18C-D)。然而，在某點時（如流程圖所示），系統 確定已沈積足夠的細胞層或已分配所有2〇 m丨樣品流體。 值得注意地，穿過過濾器之流速為細胞塊加工之基本要 素且可基於液面隨時間之變化計算（考慮引入任何其他亦 仔細跟蹤以定量之流體），因為收集井之大小為已知且固 定的。 此後（視情況）將伊紅染色劑注入收集井中，接著注入 醇（乾燥劑）且隨後注入二甲苯（清除劑）（圖19)，所有均經由 用於引入樣品流體之同一吸管注入。此時，小部分二曱苯 I23714.doc -22· 1352118 仍留在收集井中以防止細胞層直接露天曝置，經由加熱下 伏於過攄器60之金屬支撐部件59加熱收集井。加熱收集井 之原因在於防止液化石壤接觸後立即固化。自動#處_ 於樣品流體、染色劑及試劑之吸管且在壤台處連接新的吸 .· f尖頭。隨後，將大量液化石蠛抽吸至該新吸管中且分配 至收集井中。僅在將石蠟引入至收集井令之前，將真空轉 '換為開啟（滿強度）以經由過遽器抽取剩餘二甲苯（圖20a • B)。當分配石蠛時必須特別小心以確保吸管尖頭不因固化 之蠟塊而堵塞或固體塊引入收集井中，因為此可能引起細 胞塊稍後開裂或破裂。因此，系統在同一吸管尖頭允許持 續分配石蠟多長時間方面實行嚴格的時間限制。 在由真空引人石蠛且將其抽取至細胞物質（且穿過㈣ =60及基板59)中後，在真空關閉之情況下，將更多之數 量傾入井中以完全包埋細胞物質。隨後，(例如)藉由使用 以加熱基板59之泊耳帖系統反向以便其立刻冷陳該基板來 翁冷凍收集井，從而在操作員自合介 響呆作貝目面移除盒及新形成的細 -胞塊且自盒及石壤塊移除過渡器組件之前，固化收集井中 之石蠟。 在一實施例中，就完全自動加卫而言，分配3g辦， 其中在收集井中細胞物質暴露於醇（乾燥試劑以移除水份） =90秒’且此後分配3.〇 ml二甲笨，其中在收集井中細 =暴露於二甲苯(清除劑以除去醇K又)至少9。秒。就 丰自動加工(意謂一些細胞片段人工引入細胞收集井”而 ^，暴露於15 ml醇至少5分鐘，接著再暴露於20 ml二甲苯 123714.doc •23· < S ) 1352118 至少5分鐘。在任一情況下，僅在石蠟第一分配於其中的 時間之前將剩餘二甲苯真空脈衝出收集腔室。就全自動加 工而5 ，引入約1.5 ml石蠟，其中暴露時間為2〇秒。在半 . 自動加工中，引入1.5 ml石蠟歷時至少7.5分鐘。就抽吸樣 '品流體相對於抽吸石墩而言，使用獨立的吸管尖頭有助於 避免細胞樣品之間交又污染。基於相同的原因，若蠟浴需 ' S —種以上抽吸形4，則抽吸石墩使用獨iL的吸管尖頭。 φ 為自主盒體13分離過濾器組件14,可能可取的是首先冷 凍已固化之石蠟以引起其進一步熱收縮。此可（例如）藉由 將冷氣體（塵縮空氣）嗜濃於細胞塊上或將細胞塊短期置放 於冰相中來實現。當徵枚縮時，其自各別過遽器及支樓部 件釋放》 圖12為修整台12之透視圖，其通常包括__用於封閉處理 器及電子設備及熱交換器之外殼92、一導熱加熱/冷卻板 %、一簡單的使用者介面（控制面板）88(圖14)及一加熱/冷 • 卻板％之透明塑膠蓋90。如圖13A-UC所說明，使用修整 . 台將細胞塊、尤其含有細胞層之細胞塊之末端包埋於另外 石蠟中。 詳言之，首先將一塊石蠟91自其封裝89轉移至導熱（例 如，模壓金屬）包埋模具87之再炫融井93中（圖i3A)。隨 後’使包埋模具87位於修整台12上之加熱/冷卻板^上（圖 13B) ’且操作M使用使用者介㈣啟始該單元開始溶融壤 91。當包輯91完全溶融（約兩分鐘）時，藉由將細胞塊盒 11之-端配合於模具87中1降低該盒直至其完全***模具 123714.doc -24- 丄以118 將細胞塊益11置放於模具87之井93中，其中細胞塊石填 側面對側面且變為液體石蠟。較佳地，熔融石蠟與細胞塊 石壤之間未捕集到氣泡。隨後，該單元繼續向板86施加熱 里直至細胞塊上之包埋石蠟軟化且開始熔融。此時，將板 突然轉換為冷卻m ’再熔融加工使用快速且受控加 熱、接著快速且受控冷卻很重要。在—實施例中，石蠟再 熔融方法包括將石蠟包埋細胞物質置放於其他量之石蠟之 頂部；可控式加熱從而將包埋石蠟與其他石蠟軟化且至少 分摻合在一起，而不使包埋石蠟軟化或液化至其中保留 之細胞物質***且離開包埋石蠟的程度；且可控式冷卻從 而使其他石蠟與包埋石蠟結合。 圖21A-J描繪細胞塊加工台之其他實施例，即使其在大 多數態樣中與上述系統20之加工台1〇不同，但兩者類似， 且經本文展示且描述以提供關於製造及使用本發明實施例 之其他細節。詳§之，圖21A-E描續一個加工台1 〇〇之結構 及特徵，其如圖22Α所示係組裝在各別基底1〇1及底座1〇2 上。圖21F-J描繪另一加工台15〇之結構及特徵，其如圖 22Β所示係組裝在底座152上。 樣品臂104係經由一機器人臂1〇6連接於加工台1〇〇之底 座102。圖23Α展示樣品臂104之透視圖。機器人臂1〇6係經 組態以沿底座102在一水平軌道1〇8上橫向移動。機器人臂 106亦可相對於底座1〇2沿一縱向執道11〇縱向移動。縱向 軌道110係連接於水平軌道1〇8。因此，使用水平軌道1〇8 與縱向軌道110之組合，樣品臂104可移動至加工台1〇〇内 123714.doc -25- < S ) 1352118 之各個位置。詳言之，縱向執道11()較佳以與垂直方向成 微小角度（例如約15。）連接於水平轨道1〇8(如此縱向軌道 110與水平軌道108形成一約75。角），以使附著吸管之尖頭 繞過液面感應器124在盒井1612上方對準（更詳細討論於下 文中）。 如圖24 A-B所示，樣品臂1〇4上附著有一吸管連接器 402。吸管連接器402之下端404係經組態以附著於一諸如 拋棄式塑膠吸管之吸管。 當吸管連接器402係置放於樣品臂ι〇4上時，複數個管 (未圖示）係連接於吸管連接器402之上端4〇6。管中之一者 為一真空管，其裝滿醇（作為試劑源，其用途係如下所述 般）且連接於一真空源（未圖示）。當一吸管附著於吸管連接 器402且該吸管之遠端尖頭係浸沒於流體中時，真空使得 流體流入吸管中》 連接於吸管連接器402之上端406之其他管使得吸管連接 器402與複數個液體源112流體流通。液體源112容納用於 製備細胞塊之諸如二甲苯及醇之試劑。 一安瓶固持器塊114係位於加工台1〇〇中。亦展示於圖25 中之安瓶固持器塊114係經組態以固持含有生物樣品之安 瓶。該生物樣品包含待包埋於蠘中之細胞。 加工台100亦包含一吸管移除元件。該吸管移除元件包 含一亦展示於圖26令之吸管移除柱塞116及一亦展示於圖 27中之吸管移除刀ι18。安裝於吸管移除柱塞ιΐ6頂部之吸 管移除刀118包含一喇,八開口 702。當其上附著有一吸管之 I23714.doc -26- < S ) 1352118 吸管連接器402橫向***該開口中且隨後向上移動時吸 管隨後自吸管連接器402脫離。提供一液體廢棄物管線以 於其中處理一吸管尖頭之内容物。 加工台100包括一樣品平台123。在一些實施例中樣品 平台123包含一散熱片1102(圖29卜—頂板12〇2(圖31)覆蓋 散熱片1102。-細胞塊盒及過濾、器組件固持器13〇2(圖32) 係經組態以置放於頂板1202之開口 12〇4中。盒固持器 係經組態以固持一盒組件（例如，細胞塊盒丨丨）。夾鉗板 1402(圖33)係經組態以置放於盒固持器13〇2上方如此夾 鉗板1402之開口 1404係置放於盒固持器13〇2之開口 13〇4上 方。 提供一感應器124，其（例如）係使用超音波能，如在由 Cosense生產之ML系列超音波感應器中所進行般，量測盒 井1612中之液面。感應器124係由一感應器臂15〇2(展示於 圖34中之組件）固持就位。 加工台1〇〇亦包括一真空源n6。真空源126係經由一氣 密通道128連接於過濾器組件14上之細胞塊密封面52，如 此其可將真空施加於收集井且經由過濾器6〇抽取液體。將 自收集井抽取之液體容納於廢棄物腔室39中。在一些實施 例中’真空源126包含一可量測收集井1612上之空氣與氣 密通道128之間的壓差之壓力計。 圖2 1F-I描繪加工台1 50之組件’其全部附著於底座 152。加工台150包括與台1〇〇相同的機器人臂丨〇6、水平軌 道108及縱向軌道110，其以如上所述之類似方式操作。 123714.doc •27- 1352118 圖23B展示一樣品臂154經由一機器人臂106連接於加工 台150之水平執道1〇8及縱向轨道11〇。圖23C展示樣品臂 154之透視圖。 樣品臂154上經由一連接器頭351附著有一如圖23c及 23D所示之吸管連接器4〇2。吸管連接器4〇2之下端4〇4係經 組態以附著於一如圖23B所示之諸如拋棄式塑膠吸管的吸 管352。一彈簧354衰減吸管連接器402在一吸管352附著於 其上時之壓力。 樣品臂154上亦附著有複數個諸如電磁閥之閥門356。複 數個管358 —端連接於閥門356且另一端連接於試劑源 156。¥吸管連接器402位於樣品臂154上時，複數個管（未 圖示）使閥門356連接於吸管連接器4〇2之上端406。為真空 管及其他試劑管之管係以如上所述之類似方式操作。 安瓶固持器塊164位於加工台150上。安瓶固持器塊 164(圖25)係經絚態以將安瓶固持於開口 552中。安瓶（未圖 示）通常含有生物樣品。該生物樣品包含待包埋於蠘中之 細胞。安瓶固持器塊1 64包含洞或開口 554，其經組態以允 許螺桿穿過以將安瓶固持器塊164緊扣於底座152上》塊 164亦包含一經組態以固持一吸管尖頭之開口 556。塊164 進一步包含一沖洗開口 5 5 8，在一些實施例中，其連接於 以下所討論之廢棄物處理單元。在一些實施例中，樣品臂 154獲得一吸管尖頭。將吸管尖頭之遠端降低至位於開口 552中之女瓶中之生物樣品溶液中。將真空施加於吸管尖 頭之内部，此使得一些樣品溶液經抽吸進入吸管尖頭。在 123714.doc -28 · < s > 战 2118 些實施例中，樣品臂154自生物溶液移出吸管尖頭且將 其轉移至沖洗開口 558，其中吸管尖頭内之生物樣品被迫 .脫離吸f尖頭且進入沖洗開口 558。冑得樣品及將其沖洗 .T過程可能重複更多次。該過程降低吸管尖頭内之生物樣 . °口將爻任何無意存在於吸管尖頭中之污染物污染的危險。 亦預想吸管尖頭清洗或其内容物沖洗的任何時間，吸管 ’ &頭之内容物均可注人沖洗開心8中。此包括使用各種 • 試劑之間洗滌吸管尖頭之任何時間。加工台150亦包含一 吸言尖頭移除元件。該吸管尖頭移除元件包含一亦展示於 圖28中之吸管移除元件166。吸管尖頭移除元件I”包含一 吸管移除柱塞750及一吸管移除刀158。在一些實施例中， 吸管移除柱塞750及吸管尖頭移除刀158係作為一單件模製 在一起。在其他實施例中，吸管尖頭移除刀158為吸管尖 頭移除柱塞750之一獨立單元。在該等實施例中，吸管尖 頭移除刀158係安裝於吸管尖頭移除柱塞752之頂部。吸管 # 尖頭移除刀1 58包含一喇叭開口 752，其以類似於以上所討 . 論之喇叭開口 7〇2之方式操作。亦提供與圖1〇A_c所示之蠟 台相同的蠟台（未圖示 加工台100亦包含一樣品平台173(圖3〇A)。在一些實施 例中，樣品平台153係安裝於一熱機1151(圖3〇B)上方。_ 頂板1152覆蓋熱機1151。一廢棄物管117〇位於熱機1151之 一開口 1172中，其允許盒中來自樣品製備之廢棄物流至以 下所討論之廢棄物處理單元。盒固持器丨164係經組態以置 放於廢棄物管1170上方之頂板1152之開口 1156中。盒固持 123714.doc •29· 1352118 器1164係經組態以固持細胞塊盒及過濾器組件丨〗。盒固持 器1164係進一步由一鉸鏈蓋1154固持就位。鉸鏈蓋丨丨“一 端附著於一鉸鏈1158’其又連接於頂板1152。鉸鏈蓋1154 另一端經一附著於一螺桿（未圖示）之旋鈕116〇固持就位。 為將一盒置放於樣品平台173上，轉動旋鈕116〇以釋放螺 桿。鉸鏈蓋1154繞鉸鏈1158向上轉動。 圖30C展示當鉸鏈蓋1154繞鉸鏈1158向上轉動時，附著 有以下所討論之感應器124之鉸鏈蓋1154之構型《隨後， 將盒置放於盒固持器1164中》鉸鏈蓋1154隨後繞鉸鏈ιι58 向下轉動且藉由轉動旋鈕1160緊固就位。樣品平台173包 含孔或開口 11 62，其經組態以允許螺桿穿過以將樣品平台 173緊扣於底座152上。提供一感應器124，其（例如）使用超 音波能，如在由Cosense生產之ML系列感應器中進行，或 由諸如UNAM 12U9914/S14D之具有光束柱之Baumer Ultrasonic Level Sensor量測盒收集井中之液面。感應器 124係由一感應器臂1174固持就位。 加工台150亦包含一觸屏顯示器174。觸屏顯示器174係 電耦連於系統中之其他組件且允許使用者選擇使用何試 劑、所使用之試劑之量、使用試劑之順序及使用加工台 150之其他功能元件。 另一態樣係針對一種可控且安全地排空細胞塊加工期間 所產生之可燃液體及固體廢棄物之加熱廢棄物排空系統、 裝置及方法。根據一實施例，排空細胞塊加工廢棄物之裝 置包括一定位於一收集廢棄物之儲集'器下方之諸如加熱球

123714.doc -30- < S 丄ό 閥的熱閥門。該龆Ρ爿 元件加熱。根由一或多個諸如筒式加熱器之加熱 置包括埶閥門盥 施例’排空細胞塊加工廢棄物之裝 ·、，、間門與-加熱健集器之一組合 多個諸如筒式㈣H之純1 “、、_可由-或 羯片加熱器之加：-杜 。儲集器可由-諸如 關閉…= 熱。閱門可以可控性方式打開及 關閉以使液體及固體 U體廢棄物及其混合物得以收集、加熱且 八㈣、廢棄物組件確保諸如石蠘之固體仍紐融或部 ::有利於以受控且高效之方式處理廢棄物。 一更：疋S之，參考圖35_38’廢棄物排空系統2800包括 中界疋廢棄物收集區域2804之儲集器或外崎 2802。固體及液體廢棄物(諸如蠟、二甲苯、醇及其混； 2 )自、”田胞塊引擎2803穿過一諸如廢棄物管11 70之廢棄物 管且進入廢棄物收集區域Mo*。細胞塊引擎28〇3泛指產生 攜帶、’、田胞之塊之單元或組件。廢棄物可由重力以及由可經 由真空接口 2806供給之真空自細胞塊引擎28〇3收集。 在所說明之實施例中，廢棄物管丨丨7〇包括兩個管：一外 管1170a及一内管U7〇b。内管1170b之底部邊緣2808界定 廢棄物滴邊緣2808。内管1170b允許來自細胞塊引擎2803 之廢棄物自刀邊緣滴下，且外管1170a阻止下降之廢棄物 吸入真空中。在所說明之實施例中，外管1丨7〇a向下延伸 至儲集器2802中比内管1170b遠。管1170a及1170b可以如 圖35所示之雙套管構型同心排列。容納廢棄物之儲集器 2802可為（例如）由6061陽極化鋁製成之單體式外殼。 將加熱元件28 12施加於或圍繞於儲集器2802以加熱收集 123714.doc 31 1352118 區域28〇4中所容納之廢棄物。舉例而言’根據一實施例， 一諸如Minco箱片式加熱器之落片式加熱器2812包裹在儲 集器2802周圍。根據需要，可添加一切槽以定位箔片式加 熱益2812。·名片2812加熱諸如石蠟之固體以將固體維持在 熔融或半熔融狀態。此阻止蠟聚集於閥門282〇之腔室之内 壁上。 儲集器2802之底部連接於閥門282〇之頂部。根據一實施 例，閥門2820可為球閥。閥門282〇可具有單體式設計以最 小化滲漏通道。將加熱元件2822施加於閥門282〇以有利於 自上述儲集器2802排空廢棄物。在一實施例中，加熱元件 2822係與閥門2820直接接觸◊舉例而言，在一實施例中， 將筒式加熱器2822施加於閥門282〇以藉由傳導熱閥門 2820 ° 在該實施例中，可經由閥門2820在靠近閥門282〇之喉部 邊緣處形成洞（如圖35中之閥門2820之剖示圖所示）。可將 可為伸長鉛筆狀部件之筒式加熱器2822***該等洞中及插 入閥門2820中。可使用之例示性筒式加熱器2822包括用於 射出成形之筒式加熱器。舉例而言，例示性筒式加熱器 2822為具有約〇.125m之直徑2FIRER〇d筒式加熱器。筒式 加熱器2822使用電流加熱。例示性筒式加熱器2822之設定 包括48 VAC及80瓦。若需要，則可使用其他電壓級，諸如 115 VAC。在所說明之實施例中，筒式加熱器2822包括兩 個加熱元件，一個延伸至閥門2820之喉部上方，另一個延 伸至該喉部下方。可使用電阻式溫度偵測器（rtd)監測器 123714.doc -32- < S ) 監測筒式加熱器2822之熱量。熟習此項技術者應瞭解，可 使用其他加熱元件2822及將加熱元件2822施加於閥門2820 上或施加於其中之方式。 藉由直接接觸且熱閥門2820，筒式加熱器2822可即時加 熱廢棄物且當閥門2820處於關閉位置時充當”熱板"。閥門 2820有利地經加熱，如此穿過閥門282〇之廢棄物仍得以加 熱。此對石蠟廢棄物而言尤其有利’其在不使熱量施加於 蝶後即可開始固化。舉例而言，石蠟可具有約5 5。之熔 點’且儲集器2802及/或閥門2820之加熱元件可設定將儲 集器2802及/或閥門2820之内部加熱至該熔點以上之溫度 以將固態石蠟及液體或其混合物維持在半熔融或熔融狀 態。 閥門2820之底部係連接於廢棄物排出腔室2830。廢棄物 經由腔室2830排出排空系統2800且進入存儲箱中。閥門 2820係經由螺桿2832及一密封套或内膽2834連接於腔室 2830。内膽2834提供閥門282〇與廢棄物排出腔室283〇之間 的密封。基於此目的，閥門2820之底部可具有夾緊於内膽 2834之彎曲。内膽2834之密封材料可為pFA(全氟烷氧 基）。或者，内膽2834材料可為PTFE鐵氟龍（Tefl〇n卜螺桿 2832阻止内膽2834旋轉或平移且阻止閥門2820平移。若内 膽2834需要替換時，則螺桿2832亦使更換内膽2834變得容 易。廢棄物手柄2810自閥門2820以下之區域延伸，鄰接廢 棄物排出腔室2830。 根據一實施例，當閥門2820關閉時，固體及液體廢棄物 123714.doc -33- 1352118 積聚於儲集器2802中。經由接口 2806施加真空以自細胞塊 引擎2803抽取廢棄物直至細胞塊加工完成，此後啟始冷凍 或冷卻循環。當冷卻細胞塊時，可將廢棄物加熱至（例 如）60°C。在開啟閥門2820之前，可將閥門2820及/或閥體 在（例如）70°C下加熱約兩分鐘或其他合適之時間。根據需 要’可使用不同溫度及加熱持續時間來實現想要的加熱程 度。 隨後，致動馬逹或其他致動器2840以開啟閥門2820。一 例示性馬達2840包括3/16"插銷/1/2"傳動軸及一約500 in-lbs之最大轉矩（無銷屈服）。馬達2840失速轉距可為約3〇〇 in-lbs。閥門2820可以約50 in-lbs(最大）致動。閥門2820可 由馬達2840直接驅動來旋轉。例示性馬達284〇包括12伏 特 ’ 1.2女培 ’ 300 in-lb Brush DC Gearmotor。熟習此項技 術者應瞭解，實施例可使用多種馬達及馬達參數及構型。 由於開啟閥門2820，固體/液體廢棄物自廢棄物收集區 域2804經由閥門2820經由廢棄物排出腔室2830排出且進入 定位於腔室2830下方之收集箱或廢棄物貯槽中。舉例而 言，閥門2820可具有一具有約〇.8，ι直徑之喉部，廢棄物可 經由該喉部穿過。排空廢棄物後，未必需要繼續加熱閥門 2820。因.此，可關閉筒式加熱器2822以停止向閥門282〇施 加熱量。關閉閥門2820,且系統2800準備製備下一塊細胞 塊’且根據需要重複上述加熱及致動過程。 參考圖35及39,為確保閥門2820適當開啟及關閉，閥門 2820之旋轉位置可由限位開關或反饋系統285〇監控。可使 123714.doc -34- < S ) 用反饋系統2850之輸出控制開啟及關閉閥門2820之馬達 2840。在一實施例中，反饋系統2850可包括一或多個感應 器3200。在所說明之實施例中，反饋系統2850包括兩個霍 爾效應感應器（Hall Effect sensor)3200及一轉輪3202 »井 3204包括一自轉輪3202之外邊緣延伸之突起3204。外殼 3206封閉且保護感應器3200以免受廢棄物及其他碎片影 響。 在所說明之實施例中，感應器3200定位於12點鐘及3點 鐘之位置’亦即，相隔90度。在一實施例中，閥門2820為 如圖35所示之％回轉閥門。因此，在某一位置，閥門2820 為關閉的，且將閥門2820旋轉90度則開啟閥門2820。基於 解釋及說明之目的，當轉輪突起3204位於12點鐘之感應器 3200處時’閥門2820為關閉的，則當突起3204位於3點鐘 之感應器3200處時，閥門2820為開啟的。 使用中’當閥門2820關閉時，廢棄物積聚於儲集器2802 中’且可致動馬達2840以將閥門2820旋轉至開啟位置。當 閥門2820旋轉時，連接其上之轉輪3202亦自12點鐘之關閉 位置移動至3點鐘之開啟位置。閥門2820之移動受感應器 3200限制。更詳言之，自12點鐘之位置移動90度至3點鐘 之位置的轉輪2302的突起2304係由3點鐘位置處之第二感 應器3200偵測。在該例示性構型中，突起32〇4中斷個別感 應器3200之部分間傳輸的信號。偵測突起32〇4之後，第二 感應器3200可產生關閉馬達2840之信號以限制閥門2820旋 轉且使閥門保持開啟。 < S ) 123714.doc -35- 1352118 類似地，當廢棄物已排空且閥門2820待關閉時，可啟動 馬達2840以使閥門2820(其使轉輪3202旋轉）自3點鐘之位置 旋轉返回至12點鐘之位置。閥門2820在相反方向上之移動 受轉輪3202之突起3204限制，逆時針方向移動9〇度且由12 點鐘位置處之第一感應器3200偵測（作為間歇信號之結 果）。偵測突起3204之後，突起中斷12點鐘位置處之個別 感應器之部分間所傳輸的信號，且作為回應，該感應器

3200可產生關閉馬達2840之信號。此限制閥門2820旋轉且 使閥門保持關閉。

熟習此項技術者應瞭解，可使用不同感應器3200來限制 或控制閥門2820之移動。另外、熟習此項技術者應瞭解， 可視所使用之閥門2820之類型及開啟及關閉閥門2820所需 之旋轉度數而定使用不同感應器3200構型》另外，可使用 反饋系統2850限制閥門2820在關閉與開啟位置之間或根據 需要關閉與部分開啟位置之間的移動。因此，圖中所示之 感應器3200、感應器3200構型及閥門2820係基於解釋及說 明之目的而非限制之目的提供。 在另一替代實施例中，圖40通常說明系統3300之一替代 實施例，其中固體廢棄物（諸如石蠟）及液體廢棄物（諸如二 曱苯及醇）為分開的且單獨處理。在所說明之實施例中， 包括固體（諸如石蠟）及液體（諸如二甲苯及醇）之混合物之 廢棄物可由分離器3302分開或分離為固體及液體組分，分 離器3302輸出液體廢棄物3304及固體廢棄物3306。可將所 分離之液體3304儲存於液體儲集器2802a中，且將所分離 < £ ) 123714.doc •36· 1352118 咕个又所迷之彼等形式外， 施。因此，認為上述實施例在:::::其他特定形式實 性的。 為說明性的而非限制 【圖式簡單說明】 陡實施例構造之細胞塊製備系 加工台、一目士 π, 具有可拆卸式過濾 統 器 圖1為根據本發明之例示 的透視圖’該系統包括一 之細胞塊盒及一修整台。

圖2為加工台之正面透視圖 隔室及内容物。 其櫃門敞開以展現其内部 圖3為加工台之側後透視圖。 圖4為加工台之加工隔室之部分透視圖。 圖5為加工台之廢棄物隔室之部分透視圖。 圖6Α為加工台之試劑隔室之部分透視圖。 圖6Β為安置於試劑隔室中之試劑固持托盤之透視圖。

圖6C為試劑容器頂部及蓋子之部分透視圖，其說明流出 及流入管連接。 圖7為細胞塊盒及過遽器組件之分解透視圖。 圖8描繪在製造新細胞塊之前，使用者將過濾器組件附 著於細胞塊盒。 圖9描繪在製造新細胞塊之後’使用者自細胞塊盒拆卸 過濾器組件》 圖10A-10C展示細胞加工台中之熱石蠟浴組件之透視 圖。 圖11Α-Β描搶在製造新細胞塊之前，使用者將細胞塊盒 123714.doc • 38- < S ) 1352118 及附著之過濾器組件加載至細胞塊介面中。 圖12為修整台之透視圖。 圖13 A-13C描繪將另一石蠟塊及細胞塊盒置放於導熱模 具中以使用修整台進行熱處理。 圖14展示修整台上之使用者介面。 圖15為細胞塊加工台進行製造新細胞塊之過程之流程 圖。 圖16為當細胞塊加工台進行製造新細胞塊時，其系統初 始化過程之流程圖。 圖17Α-Β為用於製造新細胞塊之樣品流體傳送過程之流 程圖。 圖1 8 Α為圖17 Α-Β之流體傳送過程中樣品吸取過程之流 程圖。 圖1 8B為圖17A-B之流體傳送過程中樣品液面降低過程 之流程圖。 圖18C-D為圖17A-B之流體傳送過程中樣品液面降低過 程之流程圖。 圖19為試劑傳送過程之流程圖。 圖20A-B為用於製造新細胞塊之石蠟傳送過程之流程 圖。 圖21A-E為根據本發明之實施例構造之細胞塊加工台的 另一實施例的各別透視圖、俯視圖及側視圖。 圖2 1F - J為根據本發明之實施例構造之細胞塊加工台的 又一實施例的各別透視圖、俯視圖及側視圖。 123714.doc -39· (S ) 1352118 圖22A描繪圖21A-E之加工台之底座β 圖22Β描繪圖21F-J之加工台之底座。 圖23Α至23D為用於本文所揭示之細胞塊加工台實施例 中之自動臂組件之實施例的透視表示圖。 圖24Α及24Β描繪與自動臂組件一起使用之吸管尖頭連 接器之一實施例。 圖25為樣品瓶介面（或固持器）塊之一實施例的透視表示 圖0

圖28為其上附著吸管 另一實施例的表示圖。 之一實施例的透視表示圖 一實施例的表示圖。 尖頭移除刀之吸管尖頭移除柱塞之 圖29為散熱片之—實施例的表示圖。

圖 圖30Α為樣品平台之一實施例的表示圖 圖3 0Β為具有樣品平台之熱機之一實 施例的分解表示 圖30C為樣品平台之另一實施例的表示圖。 圖31為散熱片頂板之一實施例的表示圖。 圖32為盒固持器之一實施例的表示圖。 圖33表示夾板之一實施例的表示圖。 圖34表示感應臂之一實施例的表示圖。 圖35為根據一實施例包括一熱閥門及一加熱儲集器之之 廢棄物排空系統的表示圖。 ”。 圖36為廢棄物排空系統的另一表示圖。 i23714.doc •40· < S ) 1352118 圖37為熱閥門之更詳細表示圖。 圖38為進一步展示排空系統之加熱儲集器及熱間門組件 之表示圖。 /圖39為控制廢棄物排空系統之閥門之定位及旋轉的反饋 糸統的表示圖。 圖40為另一分離且單獨處理細胞塊加工期間所產生之液 體廢棄物及固體廢棄物之廢棄物排空系統的表示圖。 圖41為細胞塊加工台之廢棄物管線中所使用之真空及壓 力傳送系統的例示性示意方框圖。 【主要元件符號說明】 10 細胞塊加工台 11 兩件式細胞塊盒 12 修整台 13 主盒體 14 可拆卸式過濾器組件/過濾器組件 15 櫃/單一外殼植/加工台櫃 16 試劑隔室 17 加工隔室 18 廢棄物隔室 19 使用者介面觸屏 20 細胞塊加工系統 21 主電源開啟/關閉開關 22 以太網接口 23 USB 接口 123714.doc •41 - (S ) 1352118 24 過濾罩殼 25 液面感應器 26 細胞塊盒介面/盒介面 27 熱石蠟儲集器/熱石蠟浴組件/石蠟浴 結構 28 傳送臂

29 30 31 32 33 34 35 吸管尖頭感應器 吸管尖頭 吸管尖頭移除器 樣品吸管尖頭固持器 樣品瓶介面/固持器 液體廢棄物接口 井 36 軌道 37 自動臂組件

38 39 40 41 42 43 44 執道 液體廢棄物腔室 吸管尖頭廢棄物箱 第一容器/流體容器 第二容器/流體容器 第三容器/染色劑容器/流體容器 固持托盤 45 綠色輸出（進料）管線 46 白色進氣管線 123714.doc -42- 1352118 47 進料管線 48 歧管 50 收集孔 52 基底部分/細胞塊密封面 53 頸部 54 收集井 55 周邊 56 過濾器支撐保留部分 57 密封面之最外邊緣 58 過濾器支撐保留部分56之最外邊緣 59 過濾器支撐部件/支撐件/基板 60 過濾器/濾膜 62 細胞塊 64 .主體 66 可移除蓋板 68 熱蠟貯槽/蠟浴 70 溫度感應器 72 篩網 74 浴部分 76 吸管尖頭固持槽 79 夾鉗部件 80 單件式外殼或體/過濾器固持器 81 感應器組件 82 吸管尖頭 123714.doc -43 - 1352118 84 環形槽 86 導熱加熱/冷卻板 87 包埋模具 88 使用者介面/控制面板 89 封裝 90 透明塑膠蓋 91 石蠟 92 外殼 93 再熔融井 100 加工台 101 基底 102 底座 104 樣品臂 106 機器人臂 108 水平執道 110 縱向轨道 112 液體源 114 安瓶固持器塊 116 吸管移除柱塞 118 吸管移除刀 123 樣品平台 124 液面感應器/感應器 126 真空源 128 氣密通道 123714.doc •44. 1352118 150 加工台 152 底座 153 樣品平台 154 樣品臂 156 試劑源 158 吸管尖頭移除刀 164 安瓶固持器塊 166 吸管移除元件/吸管尖頭移除元件 173 樣品平台 174 觸屏顯示器 351 連接器頭 352 吸管 354 彈簧 356 閥門 358 管 402 吸管連接器 404 下端 406 上端 552 開口 554 洞/開口 556 開口 558 沖洗開口 702 味J σ八開口 750 吸管移除柱塞 123714.doc .45· 1352118

752 1102 115 1 1152 1154 1156 1158 1160 1162 1164 1170 1170a 1170b 1172 1174 1202 1204 1302 1304 1402 1404 1502 1612 吸管尖頭移除柱塞/喇σ八開口 散熱片 熱機 頂板 鉸鏈蓋 開口 鉸鏈 旋紐 孔/開口 盒固持器 廢棄物管 外管 内管 開口 感應器臂 頂板 開口 細胞塊盒及過濾器組件固持器/盒固 持器 開口 夾钳板 開口 感應器臂 盒井/收集井 123714.doc -46- 1352118

2800 廢棄物排空系統 2802 儲集器/外殼 2802a 液體儲集器 2802b 固體儲集器 2803 細胞塊引擎 2804 廢棄物收集區域 2806 真空接口 2808 底部邊緣/廢棄物滴邊緣 2812 加熱元件/羯片式加熱器/箔片 2820 閥門 2822 加熱元件/筒式加熱器 2830 廢棄物排出腔室 2832 螺桿 2834 密封套/内膽 2840 廢棄物手柄/致動器/馬達 2850 限位開關/反饋系統 3200 感應器 3202 轉輪 3204 井/突起 3206 外殼 3300 系統 3302 分離器 3304 液體廢棄物 3306 固體廢棄物 123714.doc -47-

Claims (1)

1352118

月/e修正本

第096130261號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(1〇〇年7月） ； 十、申請專利範圍： 一種細胞塊盒及過濾器組件，其包含： 細胞塊盒，其具有一形成於其中之收集孔，該細嚴 塊盒界定一形成於其底面的下游面向環形槽該槽環繞 該收集井，及 可移除式地附著於該細胞塊盒之過濾器組件，該過 濾器組件界定一與該收集孔流通之收集井且具有一定位 於該收集井之整個底面之過濾器，該過濾器係經設定尺 寸以保留經由該收集孔A配至㈣集彳中之《體中所攜 帶的細胞物質， 該過濾器組件包含一基底部分及一自該基底部分向外 L伸之頸部，該頸部界定收集井之一周邊且具有一環形 頂端，該頂端與一位於該基底部分底面的下游面向環形 槽產生干涉配合，以便使過濾器組件可拆卸式地附著於 該細胞塊盒， 其中該細胞塊盒之收集井及該過濾器組件之收集井係 經組態及固定尺寸（dimensioned)，以使分配於其中之液 化石蠟可固化，而當該過濾器組件之後被拆下時沿著該 細胞塊盒之底面上方形成固態蠟突起，且先前留在該過 濾器組件之細胞物質在該蠟突起之最外端形成細胞層。 2.如請求項丨之細胞塊盒及過濾器組件，該過濾器組件進 一步包含一自該基底部分之下側延伸之過濾器支撐保留 邰刀，並有一多孔過濾器支撐部件保留於其中，該過滹 器係放置於該收集井内該過濾器支撐部件之整個頂面 123714-1000701.doc 1352118 3. 如請求項2之細胞塊盒及過濾器組件，其中該基底部分 與該頸部形成一鈍角’且其中該基底部分之最外邊緣延 伸且超出該過濾器支撐保留部分之最外邊緣。 4. 如請求項2或3之細胞塊盒及過濾器組件，其中該過濾器 支撐部件具有導熱性。 5·如請求項2或3之細胞塊盒及過濾器組件，其中該過濾器 支撐部件係選自包含以下各物之群： 一燒結金屬盤， 一金屬篩網，^ _ 一具声一或多個***洞冬固體金屬盤·<： 6. 如請求項！之-細胞塊盒及過濾器組件，該適·齋器包含直 徑小於5微米之小孔。' ...-ri： *· ·. ^ …’ r 7. 如請求項6之細胞塊盒及過濾器組件，…其中該過濾器小 孔的直徑為約3微米。 8. 如請求項1之細胞塊盒及過濾器組件，該細胞塊盒包含 一大體上平坦之頂面及一大體上平坦之底面，該頂面與 該底面大體上相互平行以允許多個已移除各別過濾器組 件之細胞塊盒堆疊。 123714-1000701.doc