TW202413439A

TW202413439A - 包含抗-msln/cd137抗體及化療劑之癌症治療

Info

Publication number: TW202413439A
Application number: TW112132031A
Authority: TW
Inventors: 春曉徐
Original assignee: 德商馬克專利公司
Priority date: 2022-08-26
Filing date: 2023-08-25
Publication date: 2024-04-01

Abstract

本申請案係關於與MSLN及CD137結合之抗體分子及化療劑治療病患之癌症之用途。

Description

包含抗-MSLN/CD137抗體及化療劑之癌症治療

本發明係關於與MSLN及CD137結合之雙特異性抗體分子及化療劑在治療病患之癌症中之用途。

共刺激途徑(諸如CD137/4-1BB途徑)於驅動生產性抗癌免疫力中係至關重要的，存在強有力之遺傳證據支持其等於介導抗癌免疫反應中之作用 ^1-5。因此，越來越多之研究旨在透過使用靶向共刺激分子之促效性抗體來修飾訊號以增強抗腫瘤T細胞反應。

CD137 (亦稱為4-1BB或TNFRSF9)係屬於腫瘤壞死因子受體(TNFR)超家族之誘導型T細胞表面受體，其活化多種細胞功能，包括產生1型干擾素及調節抗原活化之T細胞存活 ⁶。CD137係表現於經活化之CD4 ⁺及CD8 ⁺T細胞、單核細胞及B淋巴細胞之表面上。CD137之表現可經由T細胞受體(TCR)刺激誘導 ⁷，其係稱為「訊號1」 (人類T細胞與靶細胞之間的TCR/CD3/MHC相互作用)。CD137途徑之活化促進T細胞分化及存活 ^8-10，針對活化誘導之T細胞死亡提供強有力之保護，並增加細胞毒性 ^11-13。

已於多種非臨床腫瘤模型中證實抗-CD137療法之效用 ^14-18。已顯示抗-CD137促效性抗體誘導自CD8 ⁺T細胞釋放效應分子，增加增殖並防止細胞毒性T淋巴細胞(CTL)無反應性，藉此破壞T細胞對腫瘤抗原之耐受性 ¹⁹並增加腫瘤特異性T細胞之持久性 ²⁰。基於有前景之非臨床抗腫瘤效應，已開發並臨床上研究兩種第1代CD137促效劑，烏托魯單抗(utomilumab) (PF-05082566)及烏瑞蘆單抗(urelumab) (BMS-663513)。然而，由於烏托魯單抗之低效用及烏瑞蘆單抗之肝毒性，因此暫停烏托魯單抗及烏瑞蘆單抗單一療法兩者之臨床研究 ^21,22。進一步結構分析指示此等結果係由CD137上識別之抗原決定基及由Fc γ受體(FcγR)配體依賴性簇集介導 ²³。

為克服由第1代CD137促效劑之FcγR配體依賴性簇集介導之低抗腫瘤效用或肝毒性，需將CD137促效劑遞送至腫瘤位點之策略以降低全身毒性，同時容許臨床投與 ²⁴。此等第2代CD137促效劑係主張結合CD137抗原決定基的與肝毒性無關聯的單特異性抗體，或係靶向腫瘤微環境(TME)，不結合FcγR，且係與靶向腫瘤抗原或腫瘤組織之抗體連接的CD137/腫瘤相關抗原(TAA)雙特異性抗體 ^15,25,26。

間皮素(MSLN)係40千道爾頓(kD)膜結合蛋白，其係於各種癌症(包括間皮瘤、卵巢癌、肺癌及胰臟癌)中過表現 ^27-38。MSLN於正常人類組織上之有限表現及其於許多常見癌症中之高表現使得其成為癌症療法之有吸引力之候選者。數種藥劑係處於開發之各種階段以治療患有表現MSLN之腫瘤之病患，包括單株抗體、免疫毒素、腫瘤疫苗及抗體藥物結合物 ³⁹。

M9657 (WO 2020/011976之FS22-172-003-AA/FS28-256-271)係一種首創(first-in-class)，靶向腫瘤之條件促效劑抗體，其係經開發以於TME中增強抗腫瘤免疫反應。雙特異性抗體M9657係以四價雙特異性抗體(mAb ²)形式改造，其中Fab部分與腫瘤抗原MSLN結合及經修飾之CH3域作為Fc抗原結合(Fcab)部分與CD137結合。M9657具有人類IgG1-LALA主鏈，其阻斷與Fcγ受體之結合，但保留針對IgG樣藥物動力學(PK)之FcRn結合。MSLN於腫瘤細胞上之高表現應導致增加之抗體分子結合及交聯及與CD137三聚體之相互作用，因此增加CD137促效作用。因此，經簇集之M9657可充當連接該CD137三聚體及腫瘤細胞之橋。由於M9567促進該TME內之CD137活化傳訊，其避免全身免疫活化，因此預期M9657將提供優於單特異性CD137抗體之優勢。在臨床前研究中，M9657顯示MSLN標靶依賴性及劑量依賴性抗腫瘤免疫力。

儘管如此，此項技術中仍需另外抗癌療法。

越來越多證據指示，化療藥物可誘導腫瘤細胞之免疫原性死亡，腫瘤細胞釋放或曝露此等免疫原性死亡腫瘤抗原，容許其等與先天免疫細胞諸如單核細胞、巨噬細胞及樹突細胞(DC)相互作用 ^40,41。此導致此等免疫細胞之活化及成熟，該等免疫細胞遷移至載有來源於癌症之抗原特異性貨物(cargo)之引流淋巴結。然後將癌症抗原呈遞給T細胞，該等T細胞可活化強效抗癌適應性免疫反應。習知化療劑藉由直接干擾DNA或靶向細胞***所需之關鍵蛋白質誘導免疫原性細胞死亡 ⁴²。免疫原性死亡之腫瘤細胞可釋放腫瘤相關抗原(TAA)及危險相關分子模式(DAMP)，其等兩者均以TME陽性募集免疫細胞 ⁴³。已報導一些化療劑耗盡來源於骨髓之抑制細胞(MDSC)、癌症相關中性粒細胞及巨噬細胞 ^{44, 45}。一些化療劑之最佳劑量可促進效應T細胞增殖及Treg耗盡 ⁴⁶。非臨床及臨床試驗兩者中均正積極研究免疫療法與標準護理(SOC)化療之最佳整合以達成加性或協同臨床活性。

如上文描述，化療可促進免疫療法在治療癌症中之用途。然而，免疫細胞活化將不限於出現癌症抗原負荷增加之TME，引起關於其效用及特異性之擔憂。特定言之，CD137促效劑分子在過去由於關於肝臟發炎及臨床效用之擔憂而受抑制。

發明人已認知藉由組合T細胞之MSLN表現依賴性CD137共刺激與化療可增強標靶特異性抗腫瘤活性。令人驚訝地，發明人可顯示相較於當用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑單獨治療小鼠時觀察到的抗腫瘤效應之組合增加，結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合於小鼠腫瘤模型中活體內導致更大之抗腫瘤效應。換而言之，組合治療之抗腫瘤效應不僅為加性且亦為協同的。此係意料之外的。若由兩種藥劑之組合達成之效應係大於兩種組合藥劑之個別效應的總和，則由兩種藥劑之組合達成之該效應係協同的 ⁴⁷。因此，發明人發現結合MLSN及CD137之抗體分子與化療劑之組合於小鼠腫瘤模型中以協同方式活體內增加抗腫瘤效應。當用結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合治療人類病患時，預期相似之協同抗腫瘤效應。

由於M9657 (SEQ ID NO: 2及SEQ ID NO: 10)與小鼠MSLN及CD137蛋白之間缺乏交叉反應性，因此開發抗-mMSLN-mCD137-huIgG1-LALA (FS122m) (SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 85)，一種在小鼠腫瘤模型中用於活體內研究之M9657之替代抗體。與M9657一樣，以四價雙特異性抗體(mAb ²)形式改造FS122m，其中Fab部分與腫瘤抗原小鼠MSLN靶向結合且經修飾之CH3域作為Fcab部分靶向鼠類CD137。FS122m具有人類IgG1主鏈，該主鏈具有LALA突變以廢除與Fcγ受體之結合。FS122m對小鼠MSLN/CD137之結合親和力係與M9657對人類MSLN/CD137之結合親和力相似。

如上文已總結，發明人顯示相較於當用FS122m或用順鉑或吉西他濱(gemcitabine)單獨治療小鼠時觀察到的組合腫瘤生長延緩或腫瘤體積減小，FS122m與兩種化療劑順鉑或吉西他濱中之任一者之組合可於ST26及JC小鼠腫瘤模型中更大程度地延緩腫瘤生長或減小腫瘤體積。發明人亦顯示相較於當用FS122m或用順鉑或吉西他濱單獨治療小鼠時觀察到的組合中位數生存期增加及具有完全腫瘤消退之小鼠之百分比，使用FS122m及順鉑或吉西他濱之組合治療於相同小鼠腫瘤模型中增加中位數生存期及增加具有完全腫瘤消退之小鼠之百分比。因此發明人顯示FS122m與順鉑或吉西他濱之組合以協同方式增強抗腫瘤活性，由ST26及JC小鼠腫瘤模型中之腫瘤生長延緩/腫瘤體積減小、中位數生存期及顯示完全腫瘤消退之小鼠之百分比量測。

小鼠腫瘤模型中之此等非臨床研究支持以下預期：結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合增強抗腫瘤活性且於人類病患中以協同方式。此等發現呈現使用結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑之組合療法作為新穎治療策略以改善癌症治療。

因此本發明提供一種用於治療病患之癌症之方法中之結合MSLN及CD137之抗體分子，其中該方法包括投與抗體與化療劑之組合。本發明亦提供一種用於治療病患之癌症之方法中之化療劑，其中該方法包括投與該化療劑與結合MSLN及CD137之抗體分子之組合。

結合MSLN及CD137之抗體分子可為免疫球蛋白或其抗原結合片段。例如，該抗體分子可為IgG、IgA、IgE或IgM分子，較佳IgG分子，諸如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4分子，更佳IgG1或IgG2分子，最佳IgG1分子或其片段。在一較佳實施例中，該抗體分子係完全免疫球蛋白分子。

抗體分子可包含至少一個(較佳多於一個)針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之結合位點及至少一個(較佳多於一個)位於雙特異性抗體分子之恆定域(較佳CH3域)中之針對CD137之結合位點。

針對CD137之結合位點可包含位於抗體分子之CH3域之AB及EF結構環中之第一序列及第二序列。較佳地，該第一序列具有SEQ ID NO: 87中闡述之序列。較佳地，該第二序列具有SEQ ID NO: 88中闡述之序列。更佳地，該第一序列具有SEQ ID NO: 87中闡述之序列及該第二序列具有SEQ ID NO: 88中闡述之序列。根據IMGT編號方案，該第一序列可位於該抗體分子之CH3域之位置14與17之間。根據該IMGT編號方案，該第二序列可位於該抗體分子之CH3域之位置91與99之間。較佳地，該抗體分子之CH3域之序列具有SEQ ID NO: 86中闡述之序列。

在一較佳實施例中，雙特異性抗體分子包含CH3域，其包含SEQ ID NO: 86中闡述之FS22-172-003之CH3域序列、具有其或由其組成。該雙特異性抗體分子之CH3域可於該CH3域序列之直接C端視需要包含另外離胺酸殘基(K)。

自WO 2020/011976已知許多結合MSLN之Fab。針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之結合位點可包含此等Fab中之任一者之CDR 1至6。因此該結合MSLN及CD137之抗體分子可包含以下中闡述的CDR 1至6：SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-271]；SEQ ID NO 20、22、24、12、14及28[FS28-024-052]；SEQ ID NO 4、6、8、12、14及34[FS28-256-021]；SEQ ID NO 4、6、8、12、14及39[FS28-256-012]；SEQ ID NO 43、6、45、12、14及34[FS28-256-023]；SEQ ID NO 4、6、8、12、14及49[FS28-256-024]；SEQ ID NO 43、6、45、12、14及49[FS28-256-026]；SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-027]；SEQ ID NO 53、6、55、12、14及34[FS28-256-001]；SEQ ID NO 53、6、55、12、14及49[FS28-256-005]；SEQ ID NO 60、6、62、12、14及39[FS28-256-014]；SEQ ID NO 43、6、45、12、14及39[FS28-256-018]；SEQ ID NO 67、6、55、12、14及39[FS28-256]；SEQ ID NO 21、23、72、12、14及28[FS28-024-051]；SEQ ID NO 21、23、77、12、14及28[FS28-024-053]；或SEQ ID NO 21、23、82、12、14及28[FS28-024]。

自WO 2020/011976已知許多結合MSLN及CD137之雙特異性抗體分子。本申請案之抗體M9657係與WO 2020/011976之抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271相同。可使用此等抗體中之任一者並以引用之方式併入本文中。因此該結合MSLN及CD137之抗體分子可分別包含以下中闡述之重鏈及輕鏈：SEQ ID NO 2及10 (FS22-172-003-AA/FS28-256-271)、SEQ ID NO 18及26 (FS22-172-003-AA/FS28-024-052)、SEQ ID NO 30及32 (FS22-172-003-AA/FS28-256-021)、SEQ ID NO 36及37 (FS22-172-003-AA/FS28-256-012)、SEQ ID NO 41及32 (FS22-172-003-AA/FS28-256-023)、SEQ ID NO 30及47 (FS22-172-003-AA/FS28-256-024)、SEQ ID NO 41及47 (FS22-172-003-AA/FS28-256-026)、SEQ ID NO 30及10 (FS22-172-003-AA/FS28-256-027)、SEQ ID NO 51及32 (FS22-172-003-AA/FS28-256-001)、SEQ ID NO 51及47 (FS22-172-003-AA/FS28-256-005)、SEQ ID NO 58及37 (FS22-172-003-AA/FS28-256-014)、SEQ ID NO 41及37 (FS22-172-003-AA/FS28-256-018)、SEQ ID NO 65及37 (FS22-172-003-AA/FS28-256)、SEQ ID NO 70及26 (FS22-172-003-AA/FS28-024-051)、SEQ ID NO 75及26 (FS22-172-003-AA/FS28-024-053)或SEQ ID NO 80及26 (FS22-172-003-AA/FS28-024)。較佳地，該結合MSLN及CD137之抗體分子包含SEQ ID NO: 2中闡述之重鏈序列及SEQ ID NO: 10中闡述之輕鏈序列(FS22-172-003-AA/FS28-256-271)。

化療劑可為烷化劑或抗代謝物。較佳地，該抗代謝物係選自包括以下之群：阿紮胞苷(azacitidine)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、6-巰基嘌呤(6-MP)、卡培他濱(capecitabine) (希羅達(Xeloda))、克拉屈濱(cladribine)、氯法拉濱(clofarabine)、阿糖胞苷(Ara-C)、地西他濱(decitabine)、氟尿苷、氟達拉濱(fludarabine)、吉西他濱(健擇(Gemzar))、羥基脲(hydroxyurea)、甲胺喋呤(methotrexate)、奈拉濱(nelarabine)、培美曲塞(pemetrexed) (愛達寧(Alimta))、噴司他丁(pentostatin)、普拉曲沙(pralatrexate)、硫鳥嘌呤(thioguanine)及三氟尿苷(trifluridine)/替吡嘧啶(tipiracil)組合。更佳地，該抗代謝物可為吉西他濱。

烷化劑較佳係選自包括以下之群：六甲密胺(altretamine)、苯達莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡鉑(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、順鉑、環磷醯胺(cyclophosphamide) (CPA)、達卡巴嗪(dacarbazine)、異環磷醯胺(ifosfamide)、洛莫司汀(lomustine)、甲基二(氯乙基)胺(mechlorethamine)、美法侖(melphalan)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替派(thiotepa)及曲貝替定(trabectedin)。更佳地，該烷化劑可為順鉑。

已顯示膜結合蛋白間皮素(MSLN)表現於數種癌症中。已顯示卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤及非小細胞肺癌中之所有均表現高含量之MSLN。發明人發現針對子宮頸癌，情況亦如此。不希望受理論束縛，認為抗體分子與MSLN之結合預期導致抗體交聯，結合至免疫細胞之表面處表現之CD137，接著CD137簇集並活化，最終導致該免疫細胞之活化。

因此，待治療之癌症較佳係表現或已確定表現MSLN之癌症。更佳地，該癌症係選自包括以下之群：卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤、子宮頸癌及非小細胞肺癌。

相較於當用FS122m或用順鉑或吉西他濱單獨治療小鼠時觀察到的組合抗腫瘤活性，FS122m及順鉑或吉西他濱之組合療法於CT26及JC小鼠腫瘤模型中導致統計學上顯著更大之抗腫瘤活性。若由兩種藥劑之組合達成之效應係大於兩種組合藥劑之個別效應的總和，則由兩種藥劑之組合達成之該效應係協同的 ⁴⁷。因此FS122m及順鉑或吉西他濱之組合療法於CT26及JC小鼠腫瘤模型中以協同方式增強抗腫瘤活性。因此，在一項實施例中，相較於當用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑單獨治療病患時觀察到的抗腫瘤效應，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合之治療導致更大之抗腫瘤效應。較佳地，相較於當用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑單獨治療病患時觀察到的組合抗腫瘤效應，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合之治療導致更大之抗腫瘤效應。該抗腫瘤效應可為腫瘤生長抑制或延緩、腫瘤體積減小、中位數生存期增加或正經歷完全腫瘤消退之病患之百分比增加。較佳地，該抗腫瘤效應係腫瘤生長抑制或延緩或腫瘤體積減小。因此該抗腫瘤效應可為腫瘤生長抑制或延緩。該抗腫瘤效應可為腫瘤體積減小。該抗腫瘤效應可為病患之中位數生存期增加。該抗腫瘤效應可為經歷完全腫瘤消退(諸如臨床完全反應或病理完全反應)之病患之百分比增加。此等抗腫瘤效應之確定係於熟習技工之能力內。

結合MSLN及CD137之雙特異性抗體分子及化療劑可藉由任何合適之方式對個體投與。因此，在一項實施例中，結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑係經腸胃外投與。結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑可靜脈內、肌內、皮下、腹膜內或經脊柱投與。結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑可藉由注射或輸注投與。

結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑可非腸胃外投與。結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑可經口、鼻內、經***、經直腸、舌下或局部投與。

結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑可為相同調配物之部分或各別調配物之部分，但較佳係作為各別調配物提供。因此，結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑可對病患同步或循序投與，但較佳循序投與。

在結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑係對病患循序投與之情況下，其等較佳係彼此於4天內，更佳彼此於3天內，更佳彼此於2天內或在同一天對該病患循序投與。

本發明亦提供一種治療癌症之方法，其包括對有需要個體投與結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。較佳地，該治療癌症之方法包括對有需要個體投與治療有效量之該結合MSLN及CD137之抗體分子及治療有效量之該化療劑。在一項實施例中，該方法可包括確定病患之癌症是否表現MSLN且若該癌症已確定表現MSLN，則治療該病患。或者，該方法可包括以下步驟：整理確定病患之癌症是否表現MSLN之測試結果且若該等測試結果顯示該癌症表現MSLN，則治療該病患。

本發明亦提供結合MSLN及CD137之抗體分子於製造用於治療癌症之藥劑之用途，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係與化療劑組合投與。本發明亦提供化療劑於製造用於治療癌症之藥劑之用途，其中該化療劑係與結合MSLN及CD137之抗體分子組合投與。

本發明亦提供一種套組，其包含結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑及化療劑及醫藥上可接受之賦形劑。

因此本發明提供：

[1] 一種用於治療病患之癌症之方法中之結合MSLN及CD137之抗體分子，其中該方法包括投與該抗體與化療劑之組合。

[2] 一種用於治療病患之癌症之方法中之化療劑，其中該方法包括投與該化療劑與結合MSLN及CD137之抗體分子之組合。

[3] 一種治療個體之癌症之方法，該方法包括對該個體投與結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。

[4] 一種結合MSLN及CD137之抗體分子於製造用於治療癌症之藥劑之用途，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係與化療劑組合投與。

[5] 一種化療劑於製造用於治療癌症之藥劑之用途，其中該化療劑係與結合MSLN及CD137之抗體分子組合投與。

[6] 一種套組，其包含： (a)結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑；及 (b)化療劑及醫藥上可接受之賦形劑。

[7] 根據[1]至[6]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含 (a)針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之抗原結合位點；及 (b)位於該抗體分子之CH3域中之CD137抗原結合位點。

[8] 根據[7]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含以下中之兩者或更多者： (a)針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之抗原結合位點；及 (b)位於該抗體分子之CH3域中之CD137抗原結合位點。

[9] 根據[1]至[8]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係IgG、IgA、IgE、IgM分子或其抗原結合片段。

[10] 根據[9]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係IgG分子或其抗原結合片段。

[11] 根據[10]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係IgG1或IgG2分子或其抗原結合片段。

[12] 根據[11]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子係IgG1分子或其抗原結合片段。

[13] 根據[8]至[12]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該針對MSLN之基於CDR之抗原結合位點包含以下中闡述之CDR 1至6： (i)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-271]； (ii)分別SEQ ID NO 20、22、24、12、14及28[FS28-024-052]； (iii)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及34[FS28-256-021]； (iv)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及39[FS28-256-012]； (v)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及34[FS28-256-023]； (vi)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及49[FS28-256-024]； (vii)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及49[FS28-256-026]； (viii)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-027]； (ix)分別SEQ ID NO 53、6、55、12、14及34[FS28-256-001]； (x)分別SEQ ID NO 53、6、55、12、14及49[FS28-256-005]； (xi)分別SEQ ID NO 60、6、62、12、14及39[FS28-256-014]； (xii)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及39[FS28-256-018]； (xiii)分別SEQ ID NO 67、6、55、12、14及39[FS28-256]； (xiv)分別SEQ ID NO 21、23、72、12、14及28[FS28-024-051]； (xv)分別SEQ ID NO 21、23、77、12、14及28[FS28-024-053]；或 (xvi)分別SEQ ID NO 21、23、82、12、14及28[FS28-024]；及其中該CD137抗原結合位點包含分別位於CH3域之AB及EF結構環中之第一序列及第二序列，其中該第一及第二序列分別具有SEQ ID NO 87及88中闡述之序列。

[14] 根據[13]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中 (i)該第一序列係位於該抗體分子之CH3域之位置14與17之間；及/或 (ii)其中該第二序列係位於該抗體分子之CH3域之91與99之間；及其中胺基酸殘基編號係根據IMGT編號方案。

[15] 根據[1]至[14]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含SEQ ID NO: 86中闡述之CH3域序列。

[16] 根據[15]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該CH3域於CH3域序列之直接C端包含另外離胺酸殘基(K)。

[17] 根據[1]至[16]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含以下抗體之重鏈及輕鏈： (i) SEQ ID NO 2及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-271； (ii) SEQ ID NO 18及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-052； (iii) SEQ ID NO 30及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-021； (iv) SEQ ID NO 36及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-012； (v) SEQ ID NO 41及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-023； (vi) SEQ ID NO 30及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-024； (vii) SEQ ID NO 41及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-026； (viii) SEQ ID NO 30及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-027； (ix) SEQ ID NO 51及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-001； (x) SEQ ID NO 51及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-005； (xi) SEQ ID NO 58及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-014； (xii) SEQ ID NO 41及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-018； (xiii) SEQ ID NO 65及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256； (xiv) SEQ ID NO 70及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-051； (xv) SEQ ID NO 75及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-053；或 (xvi) SEQ ID NO 80及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024。

[18] 根據[1]至[17]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含SEQ ID NO: 2中闡述之重鏈序列及SEQ ID NO: 10中闡述之輕鏈序列[FS22-172-003-AA/FS28-256-271]。

[19] 根據[1]至[18]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該化療劑係烷化劑或抗代謝物。

[20] 根據[19]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該烷化劑係選自由以下組成之群：六甲密胺、苯達莫司汀、白消安、卡鉑、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、順鉑、環磷醯胺(CPA)、達卡巴嗪、異環磷醯胺、洛莫司汀、甲基二(氯乙基)胺、美法侖、奧沙利鉑、替莫唑胺、噻替派及曲貝替定。

[21] 根據[19]或[20]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該烷化劑係順鉑。

[22] 根據[18]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該抗代謝物係選自由以下組成之群：阿紮胞苷、5-氟尿嘧啶(5-FU)、6-巰基嘌呤(6-MP)、卡培他濱、克拉屈濱、氯法拉濱、阿糖胞苷、地西他濱、氟尿苷、氟達拉濱、吉西他濱、羥基脲、甲胺喋呤、奈拉濱、培美曲塞、噴司他丁、普拉曲沙、硫鳥嘌呤及三氟尿苷/替吡嘧啶組合。

[23] 根據[20]或[22]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該抗代謝物係吉西他濱。

[24] 根據[1]至[23]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該癌症表現MSLN或已確定表現MSLN。

[25] 根據[1]至[24]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該癌症係選自由以下組成之群：卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤、子宮頸癌及非小細胞肺癌。

[26] 根據[1]至[25]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中相較於使用該結合MSLN及CD137之抗體分子之單一療法或使用該化療劑之單一療法，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑之治療導致更大之抗腫瘤活性。

[27] 根據[1]至[26]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中相較於使用該結合MSLN及CD137之抗體分子之單一療法治療及使用該化療劑之單一療法治療之組合抗腫瘤活性，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑之治療導致更大之抗腫瘤活性。

[28] 根據[1]至[27]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中相較於使用該結合MSLN及CD137之抗體分子之單一療法治療或使用該化療劑之之單一療法治療，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑之治療導致更大之腫瘤生長延緩、減小腫瘤體積減小、增加中位數生存期增加及/或完全腫瘤消退之數量增加。

[29] 根據[1]至[28]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中相較於使用該結合MSLN及CD137之抗體分子之單一療法治療及使用該化療劑之單一療法治療之組合腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小、中位數生存期增加及/或完全腫瘤消退之數量增加，使用該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑之治療導致更大之腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小、中位數生存期增加及/或完全腫瘤消退之數量增加。

[30] 根據[1]至[29]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑係腸胃外投與。

[31] 根據[30]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑係靜脈內、肌內、皮下、腹膜內或經脊柱投與。

[32] 根據[30]或[31]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑係藉由注射或輸注投與。

[33] 根據[1]至[29]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑係非腸胃外投與。

[34] 根據[33]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑係經口、鼻內、經***、經直腸、舌下或局部投與。

[35] 根據[1]至[34]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係對病患同步或循序投與。

[36] 根據[35]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係對病患循序投與。

[37] 根據[36]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係彼此於不多於4天內對病患投與。

[38] 根據[36]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係彼此於不多於3天內對病患投與。

[39] 根據[36]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係彼此於不多於2天內對病患投與。

[40] 根據[36]使用之抗體分子或化療劑、方法、用途或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係在同一天對病患投與。

[41] 根據[1]至[3]及[7]至[40]中任一項使用之抗體分子或化療劑或方法，其中該方法包括確定癌症是否表現MSLN且若該癌症表現MSLN，則治療個體。

本發明係關於與化療劑組合用於治療病患之癌症之結合MSLN及CD137之抗體分子。本發明亦係關於與結合MSLN及CD137之抗體分子組合用於治療癌症之化療劑。

術語「雙特異性」係指一種不顯示與除其兩個特異性結合配偶體外之分子的任何顯著結合的分子。該術語亦可係指可由其他抗原攜載的兩個結合配偶體之特異性抗原決定基，在該情況下，該抗體亦可與攜載該等特異性抗原決定基之抗原結合。在一較佳實施例中，該雙特異性抗體分子不顯示對OX40、GITR、CD40、CEACAM-5、E-鈣黏素、凝血酶調節素或EpCAM之任何顯著結合活性。

術語「抗體分子」描述一種無論天然或部分或完全合成產生之免疫球蛋白。該抗體分子可為人類或人類化，較佳人類。該抗體分子較佳可為單株抗體。抗體分子之實例係免疫球蛋白同型(諸如免疫球蛋白G)及其等同型亞類，諸如IgG1、IgG2、IgG3及IgG4及其片段。在無污染物的意義上，該等抗體分子可經分離，諸如抗體分子可結合其他多肽及/或血清組分。

在下文中，術語「雙特異性抗體分子」用於係指結合MSLN及CD137之抗體分子。

在一項實施例中，雙特異性抗體分子獨立地與MSLN及CD137結合。在一項實施例中，該雙特異性抗體同步結合MSLN及CD137。

雙特異性抗體分子可為天然或部分或完全合成產生。例如，該抗體分子可為重組抗體分子。

雙特異性抗體分子可包含至少一個(較佳多於一個)針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之結合位點及至少一個(較佳多於一個)位於該雙特異性抗體分子之恆定域(較佳至少一個CH3域)中之針對CD137之結合位點。

雙特異性抗體分子可為免疫球蛋白或其抗原結合片段。例如，該雙特異性抗體分子可為IgG、IgA、IgE或IgM分子，較佳IgG分子，諸如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4分子，更佳IgG1或IgG2分子，最佳IgG1分子或其片段。在一較佳實施例中，該雙特異性抗體分子係完全免疫球蛋白分子。

在其他實施例中，雙特異性抗體分子可為抗原結合片段，其包含針對MSLN之基於CDR之抗原結合位點及位於恆定域中之針對CD137之抗原結合位點。該抗原結合片段可為scFv、Fab、Fcab、VhH、單價IgG、雙功能或三功能抗體、IGNAR、V-NAR、hclgG、微型抗體或奈米抗體。例如，該抗原結合片段可為其中scFv與MSLN結合及Fc與CD137結合的scFv-Fc融合物，或包含與CH3域連接之scFv的微型抗體(Hu等人，(1996), Cancer Res., 56(13):3055-61)。

在一較佳實施例中，雙特異性抗體分子係mAb ²(TM)雙特異性抗體。如本文提及之mAb ²雙特異性抗體係一種IgG免疫球蛋白，其於其可變區之各者中包括基於CDR之抗原結合位點及於該抗體分子之恆定域中包括至少一個抗原結合位點。

抗體及其等構築及使用方法為此項技術中熟知且係描述(例如)於Holliger及Hudson, 2005中。可能採用單株及其他抗體並使用重組DNA科技之技術來產生保留原始抗體之特異性之其他抗體或嵌合分子。此等技術可涉及將一個抗體分子之CDR或可變區引入不同之抗體分子內(EP-A-184187、GB 2188638A及EP-A-239400)。針對已知標靶之新穎抗體可由熟習此項技術者例行性產生且可在無過度負擔之情況下獲得。

自WO 2020/011976已知許多結合MSLN及CD137之抗體分子。本申請案之抗體M9657係與WO 2020/011976之抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271相同。可使用此等抗體中之任一者。因此雙特異性抗體分子之基於CDR之抗原結合位點可包含三個VH CDR或三個VL CDR，較佳以下之三個VH CDR及三個VL CDR：抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052、FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024、FS22-172-003-AA/FS28-256-026、FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014,FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053或FS22-172-003-AA/FS28-024，較佳抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271或FS22-172-003-AA/FS28-024-052，最佳抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271。

CDR之序列可使用例行性技術自抗體分子之VH及VL域序列容易地確定。抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052、FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024、FS22-172-003-AA/FS28-256-026,FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014、FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053及FS22-172-003-AA/FS28-024之VH及VL域序列係經本文描述，且因此該等抗體之三個VH及三個VL域CDR可由該等序列確定。例如，該等CDR序列可根據Kabat等人，1991或國際ImMunoGeneTics資訊系統(IMGT) (Lefranc等人，2015)確定。

雙特異性抗體分子可攜載或不攜載LALA突變。該LALA突變描述一種用於破壞抗體分子或其片段之抗體效應功能之突變。該LALA突變係與數種有利之抗體性質(諸如毒性減小)相關聯(Lo等人，(2017), The Journal of Biological Chemistry, 292(9): 3900-3908)。該突變消除該抗體分子或其片段與Fcγ-受體之結合且係位於CH2域中。含有該LALA突變之抗體之VH域及VL域且因此VH域CDR1、CDR2及CDR3及VL域CDR1、CDR2及CDR3之序列係與不含有該LALA突變之抗體相同。該LALA突變涉及根據IMGT編號方案用丙胺酸取代於CH2域之位置1.3及1.2處之白胺酸殘基(L1.3A及L1.2A)。根據Kabat編號系統，該LALA突變構成L247A L248A取代。亦已知補體活化(C1q結合)及ADCC係透過根據IMGT編號系統於該CH2域之位置114處之脯胺酸突變為丙胺酸或甘胺酸(P114A或P114G)減小(Idusogie等人，2000；Klein等人，2016)。根據該Kabat編號系統，此突變構成P348A或P348G取代。此突變及該LALA突變亦可組合以產生ADCC或CDC活性進一步減小或無ADCC或CDC活性之抗體分子。

因此，雙特異性抗體分子可包含CH2域，其中該CH2域包含於位置1.3丙胺酸殘基及於位置1.2丙胺酸殘基，其中胺基酸編號係根據IMGT編號系統。該雙特異性抗體分子可包含CH2域，其中該CH2域包含於位置247丙胺酸殘基及於位置248丙胺酸殘基，其中該胺基酸編號係根據Kabat編號系統。例如，該CH2域可具有SEQ ID NO: 90中闡述之胺基酸序列。在一替代實施例中，該抗體分子可包含CH2，其中該CH2域包含於位置91丙胺酸殘基。該抗體分子可包含CH2，其中該CH2域包含於位置1.3丙胺酸殘基、於位置1.2丙胺酸殘基及於位置114丙胺酸殘基。例如，該CH2域可具有SEQ ID NO: 92中闡述之胺基酸序列。

根據IMGT編號，雙特異性抗體分子之VH域CDR1、CDR2及CDR3序列可為分別位於該抗體分子之VH域之位置27至38、56至65，及105至117之序列。

根據Kabat編號，雙特異性抗體分子之VH域CDR1、CDR2及CDR3序列可為分別位於VH域之位置31至35、50至65，及95至102之序列。

根據IMGT編號，雙特異性抗體分子之VL域CDR1、CDR2及CDR3序列可為分別位於VL域之位置27至38、56至65，及105至117之序列。

根據Kabat編號，雙特異性抗體分子之VL域CDR1、CDR2及CDR3序列可為分別於VL域之位置24至34、50至56，及89至97之序列。

例如，VH域CDR1、CDR2及CDR3之序列： (i) FS22-172-003-AA/FS28-256-271可分別如SEQ ID NO 4、6及8中闡述； (ii) FS22-172-003-AA/FS28-024-052可分別如SEQ ID NO 20、22及24中闡述； (iii) FS22-172-003-AA/FS28-256-021可分別如SEQ ID NO 4、6及8中闡述； (iv) FS22-172-003-AA/FS28-256-012可分別如SEQ ID NO 4、6及8中闡述； (v) FS22-172-003-AA/FS28-256-023可分別如SEQ ID NO 42、6及44中闡述； (vi) FS22-172-003-AA/FS28-256-024可分別如SEQ ID NO 4、6及8中闡述； (vii) FS22-172-003-AA/FS28-256-026可分別如SEQ ID NO 43、6及45中闡述； (viii) FS22-172-003-AA/FS28-256-027可分別如SEQ ID NO 4、6及8中闡述； (ix) FS22-172-003-AA/FS28-256-001可分別如SEQ ID NO 53、6及55中闡述； (x) FS22-172-003-AA/FS28-256-005可分別如SEQ ID NO 53、6及55中闡述； (xi) FS22-172-003-AA/FS28-256-014可分別如SEQ ID NO 60、6及62中闡述； (xii) FS22-172-003-AA/FS28-256-018可分別如SEQ ID NO 43、6及45中闡述； (xiii) FS22-172-003-AA/FS28-256可分別如SEQ ID NO 67、6及55中闡述； (xiv) FS22-172-003-AA/FS28-024-051可分別如SEQ ID NO 21、23及72中闡述； (xv) FS22-172-003-AA/FS28-024-053可分別如SEQ ID NO 21、23及77中闡述；及 (xvi) FS22-172-003-AA/FS28-024可分別如SEQ ID NO 21、23、82中闡述；其中該等CDR序列係根據IMGT編號方案定義。

以下之VL域CDR1、CDR2及CDR3之序列： (i) FS22-172-003-AA/FS28-256-271可分別如SEQ ID NO 12、14及16中闡述； (ii) FS22-172-003-AA/FS28-024-052可分別如SEQ ID NO 12、14及18中闡述； (iii) FS22-172-003-AA/FS28-256-021可分別如SEQ ID NO 12、14及34中闡述； (iv) FS22-172-003-AA/FS28-256-012可分別如SEQ ID NO 12、14及39中闡述； (v) FS22-172-003-AA/FS28-256-023可分別如SEQ ID NO 12、14及34中闡述； (vi) FS22-172-003-AA/FS28-256-024可分別如SEQ ID NO 12、14及49中闡述； (vii) FS22-172-003-AA/FS28-256-026可分別如SEQ ID NO 12、14及49中闡述； (viii) FS22-172-003-AA/FS28-256-027可分別如SEQ ID NO 12、14及16中闡述； (ix) FS22-172-003-AA/FS28-256-001可分別如SEQ ID NO 12、14及34中闡述； (x) FS22-172-003-AA/FS28-256-005可分別如SEQ ID NO 12、14及49中闡述； (xi) FS22-172-003-AA/FS28-256-014可分別如SEQ ID NO 12、14及39中闡述； (xii) FS22-172-003-AA/FS28-256-018可分別如SEQ ID NO 12、14及39中闡述； (xiii) FS22-172-003-AA/FS28-256可分別如SEQ ID NO 12、14及39中闡述； (xiv) FS22-172-003-AA/FS28-024-051可分別如SEQ ID NO 12、14及28中闡述； (xv) FS22-172-003-AA/FS28-024-053可分別如SEQ ID NO 12、14及28中闡述；及 (xvi) FS22-172-003-AA/FS28-024可分別如SEQ ID NO 12、14及28中闡述；其中該等CDR序列係根據IMGT編號方案定義。

例如，以下之VH域CDR1、CDR2及CDR3之序列： (i) FS22-172-003-AA/FS28-256-271可分別如SEQ ID NO 5、7及9中闡述； (ii) FS22-172-003-AA/FS28-024-052可分別如SEQ ID NO 21、23及25中闡述； (iii) FS22-172-003-AA/FS28-256-021可分別如SEQ ID NO 5、31及9中闡述； (iv) FS22-172-003-AA/FS28-256-012可分別如SEQ ID NO 5、31及9中闡述； (v) FS22-172-003-AA/FS28-256-023可分別如SEQ ID NO 44、31及46中闡述； (vi) FS22-172-003-AA/FS28-256-024可分別如SEQ ID NO 5、31及9中闡述； (vii) FS22-172-003-AA/FS28-256-026可分別如SEQ ID NO 44、31及46中闡述； (viii) FS22-172-003-AA/FS28-256-027可分別如SEQ ID NO 5、31及9中闡述； (ix) FS22-172-003-AA/FS28-256-001可分別如SEQ ID NO 54、31及56中闡述； (x) FS22-172-003-AA/FS28-256-005可分別如SEQ ID NO 54、31及56中闡述； (xi) FS22-172-003-AA/FS28-256-014可分別如SEQ ID NO 61、31及63中闡述； (xii) FS22-172-003-AA/FS28-256-018可分別如SEQ ID NO 44、31及46中闡述； (xiii) FS22-172-003-AA/FS28-256可分別如SEQ ID NO 68、31及56中闡述； (xiv) FS22-172-003-AA/FS28-024-051可分別如SEQ ID NO 22、24及73中闡述； (xv) FS22-172-003-AA/FS28-024-053可分別如SEQ ID NO 22、24及78中闡述；及 (xvi) FS22-172-003-AA/FS28-024可分別如SEQ ID NO 22、24及83中闡述；其中該等CDR序列係根據Kabat編號方案定義。

以下之VL域CDR1、CDR2及CDR3之序列： (i) FS22-172-003-AA/FS28-256-271可分別如SEQ ID NO 13、15及16中闡述； (ii) FS22-172-003-AA/FS28-024-052可分別如SEQ ID NO 13、15及28中闡述； (iii) FS22-172-003-AA/FS28-256-021可分別如SEQ ID NO 13、15及34中闡述； (iv) FS22-172-003-AA/FS28-256-012可分別如SEQ ID NO 13、15及39中闡述； (v) FS22-172-003-AA/FS28-256-023可分別如SEQ ID NO 13、15及34中闡述； (vi) FS22-172-003-AA/FS28-256-024可分別如SEQ ID NO 13、15及49中闡述； (vii) FS22-172-003-AA/FS28-256-026可分別如SEQ ID NO 13、15及49中闡述； (viii) FS22-172-003-AA/FS28-256-027可分別如SEQ ID NO 13、15及16中闡述； (ix) FS22-172-003-AA/FS28-256-001可分別如SEQ ID NO 13、15及34中闡述； (x) FS22-172-003-AA/FS28-256-005可分別如SEQ ID NO 13、15及49中闡述； (xi) FS22-172-003-AA/FS28-256-014可分別如SEQ ID NO 13、15及39中闡述； (xii) FS22-172-003-AA/FS28-256-018可分別如SEQ ID NO 13、15及39中闡述； (xiii) FS22-172-003-AA/FS28-256可分別如SEQ ID NO 13、15及39中闡述； (xiv) FS22-172-003-AA/FS28-024-051可分別如SEQ ID NO 13、15及28中闡述； (xv) FS22-172-003-AA/FS28-024-053可分別如SEQ ID NO 13、15及28中闡述；及 (xvi) FS22-172-003-AA/FS28-024可分別如SEQ ID NO 13、15及28中闡述；其中該等CDR序列係根據Kabat編號方案定義。

基於CDR之抗原結合位點可包含以下抗體之VH或VL域，較佳VH及VL域：抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052、FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024,FS22-172-003-AA/FS28-256-026、FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014、FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053或FS22-172-003-AA/FS28-024，較佳抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271或FS22-172-003-AA/FS28-024-052，最佳抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271。

抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052、FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024、FS22-172-003-AA/FS28-256-026、FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014、FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053及FS22-172-003-AA/FS28-024之VH域可分別具有SEQ ID NO 3、19、3、3、42、3、42、3、52、52、59、42、66、71、76及81中闡述之序列。

抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052、FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024、FS22-172-003-AA/FS28-256-026、FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014、FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053及FS22-172-003-AA/FS28-024之VL域可分別具有SEQ ID NO 11、27、33、38、33、48、48、11、33、48、38、38、38、27、27及27中闡述之序列。

在一項實施例中，本發明之雙特異性抗體分子包含CD137抗原結合位點。該CD137抗原結合位點可位於該抗體分子之恆定域(較佳CH3域)中。CD137抗原結合可包含位於該抗體分子之恆定域中之一或多個經修飾之結構環。改造抗體恆定域結構環以產生針對靶抗原之抗原結合位點為此項技術中已知且係描述(例如)於Wozniak-Knopp G等人，(2010) Protein Eng Des. 23 (4): 289-297；WO2006/072620及WO2009/132876中。本發明之抗體分子中所包含之CD137恆定域抗原結合位點係在廣泛選擇及親和力成熟程序後鑑別，且相較於單體人類CD137優先與二聚體結合。

雙特異性抗體分子之CD137抗原結合位點可包含第一及第二序列，其中該第一及第二序列係分別位於該雙特異性抗體分子之恆定域(較佳CH3域)之AB及EF結構環中。該第一序列及第二序列較佳分別為SEQ ID NO 87及88中闡述之FS22-172-003之第一及第二序列。該第一及第二序列較佳係分別位於該雙特異性抗體分子之CH3域之位置14與17及位置91與99之間，其中殘基編號係根據IMGT編號。該雙特異性抗體分子之CD環序列較佳係未經修飾，即野生型。

因此CD環序列較佳具有SEQ ID NO: 89中闡述之序列。該CD環序列較佳係位於雙特異性抗體分子之CH3域之位置43至78處，其中殘基編號係根據IMGT編號。

在一較佳實施例中，雙特異性抗體分子包含CH3域，其包含SEQ ID NO: 86中闡述之FS22-172-003之CH3域序列、具有該序列或由該序列組成。該雙特異性抗體分子之CH3域可於CH3域序列之直接C端視需要包含另外離胺酸殘基(K)。

在一較佳實施例中，抗體分子包含以下抗體之重鏈及/或輕鏈，較佳重鏈及輕鏈： (i) SEQ ID NO 2及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-271； (ii) SEQ ID NO 18及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-052； (iii) SEQ ID NO 30及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-021； (iv) SEQ ID NO 36及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-012； (v) SEQ ID NO 41及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-023； (vi) SEQ ID NO 30及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-024； (vii) SEQ ID NO 41及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-026； (viii) SEQ ID NO 30及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-027； (ix) SEQ ID NO 51及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-001； (x) SEQ ID NO 51及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-005； (xi) SEQ ID NO 58及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-014； (xii) SEQ ID NO 41及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-018； (xiii) SEQ ID NO 65及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256； (xiv) SEQ ID NO 70及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-051； (xv) SEQ ID NO 75及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-053；或 (xvi) SEQ ID NO 80及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024。

在一更佳實施例中，雙特異性抗體分子包含以下之重鏈及/或輕鏈，較佳重鏈及輕鏈：抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271或FS22-172-003-AA/FS28-024-052，最佳抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271，其中此等抗體之重鏈及輕鏈序列係如上文概述。

本發明之雙特異性抗體分子亦可包含本文揭示之第一、第二或第三序列、AB、CD或EF結構環序列、CH3域、CH2域、CDR、VH域、VL域、輕鏈及/或重鏈序列之變體。合適之變體可藉助於序列改變或突變及篩選之方法獲得。在一較佳實施例中，包含一或多個變體序列之抗體分子保留母體抗體分子之功能特性中之一或多者，諸如針對MSLN及CD137之結合特異性及/或結合親和力。例如，包含一或多個變體序列之抗體分子較佳以與(母體)抗體分子相同之親和力或更高之親和力與MSLN及/或CD137結合。該母體抗體分子係不包含已併入變體抗體分子內之胺基酸取代、缺失及/或***之抗體分子。

包含抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-271、FS22-172-003-AA/FS28-024-052 FS22-172-003-AA/FS28-256-021、FS22-172-003-AA/FS28-256-012、FS22-172-003-AA/FS28-256-023、FS22-172-003-AA/FS28-256-024、FS22-172-003-AA/FS28-256-026、FS22-172-003-AA/FS28-256-027、FS22-172-003-AA/FS28-256-001、FS22-172-003-AA/FS28-256-005、FS22-172-003-AA/FS28-256-014、FS22-172-003-AA/FS28-256-018、FS22-172-003-AA/FS28-256、FS22-172-003-AA/FS28-024-051、FS22-172-003-AA/FS28-024-053或FS22-172-003-AA/FS28-024之CDR 1至6、VH域及/或重鏈之抗體分子可於該VH域之位置55或57包含胺基酸取代，其中胺基酸殘基編號係根據IMGT編號方案。

例如，抗體分子可包含抗體FS22-172-003-AA/FS28-256-027之CDR 1至6、VH域及/或重鏈，其中該抗體分子於該VH域之位置55包含胺基酸取代，且其中胺基酸殘基編號係根據IMGT編號方案。例如，本發明之抗體分子可包含第一、第二或第三序列、AB、CD或EF結構環序列、CH3域、CH2域、CDR、VH域、VL域、輕鏈及/或重鏈序列，其與本文揭示之結構環、CH3域、CH2域、CDR、VH域、VL域、輕鏈或重鏈序列具有至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、至少99.1%、至少99.2%、至少99.3%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%或至少99.9%序列一致性。

在一較佳實施例中，本發明之雙特異性抗體分子包含與如本文揭示之CH3域具有至少97%、至少98%、至少99%、至少99.1%、至少99.2%、至少99.3%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%或至少99.9%序列一致性之CH3域序列。

在另一較佳實施例中，雙特異性抗體分子具有或包含CH2域序列，其與如本文揭示之CH2域具有至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、至少99.1%、至少99.2%、至少99.3%、至少99.4%、至少99.5%、至少99.6%、至少99.7%、至少99.8%或至少99.9%序列一致性。

序列一致性通常係參考演算法GAP (Wisconsin GCG套裝軟體，Accelerys Inc, San Diego USA)定義。GAP使用Needleman及Wunsch演算法來比對兩個完整序列，使匹配數最大化及使空位數最小化。一般而言，使用默認參數，及空位產生罰分等於12及空位擴展罰分等於4。使用GAP可係較佳的，但可使用其他演算法，例如BLAST (其使用Altschul等人，1990之方法)、FASTA (其使用Pearson及Lipman, 1988之方法)或Smith-Waterman演算法(Smith及Waterman, 1981)或Altschul等人，1990同上，一般採用默認參數之TBLASTN程式。特定言之，可使用psi-Blast演算法(Altschul等人，1997)。

本發明之雙特異性抗體分子亦可包含第一、第二或第三序列、AB、CD或EF結構環序列、CH3域、CH2域、VH域、VL域、輕鏈及/或重鏈，其相較於本文揭示之第一、第二或第三序列、AB、CD或EF結構環序列、CH3域、CH2域、Fcab、CDR、VH域、VL域、輕鏈或重鏈序列具有一或多個胺基酸序列改變(胺基酸殘基之添加、缺失、取代及/或***)，較佳20個改變或更少個、15個改變或更少個、10個改變或更少個、5個改變或更少個、4個改變或更少個、3個改變或更少個、2個改變或更少個或1個改變。特定言之，可於抗體分子之VH及VL域序列外之一或多個框架區中及/或於CH3域之一或多個框架區中作出改變。例如，該等改變可於本文描述為第一、第二及第三序列或描述為AB、CD或EF結構環序列之序列外之CH3域中。

雙特異性抗體分子可包含VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2及/或VL CDR3，其相較於如本文揭示之VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2及/或VL CDR3具有一或多個胺基酸序列改變(胺基酸殘基之添加、缺失、取代及/或***)，較佳3個改變或更少個、2個改變或更少個或1個改變。

在一較佳實施例中，本發明之雙特異性抗體分子包含相較於如本文揭示之CH3域具有一或多個胺基酸序列改變(胺基酸殘基之添加、缺失、取代及/或***)，較佳20個改變或更少個、15個改變或更少個、10個改變或更少個、5個改變或更少個、4個改變或更少個、3個改變或更少個、2個改變或更少個或1個改變之CH3域序列。

在一或多個胺基酸係經另一胺基酸取代之較佳實施例中，該等取代為保守取代，例如根據下表。在一些實施例中，例如，中間行中相同類別之胺基酸係經彼此取代，即非極性胺基酸係經另一非極性胺基酸取代。在一些實施例中，最右側行中相同行之胺基酸係經彼此取代。

脂族	非極性	G A P
I L V
極性-不帶電	C S T M
N Q
極性-帶電	D E
K R
芳族		H F W Y

在一些實施例中，取代在功能上係保守的。即在一些實施例中，相較於等效未經取代之抗體分子，該取代不影響(或不實質性影響)包含該取代之抗體分子之一或多個功能性質(例如結合親和力)。

術語「化療劑」描述用於治療癌症之範圍廣泛之藥劑。化療劑可為天然生成化合物或可經部分或完全合成產生。

例如，化療劑可為烷化劑、亞硝基脲、抗代謝物、細胞毒性抗生素、拓撲異構酶抑制劑、有絲***抑制劑、皮質類固醇或包括以下藥劑之群中之任一者：反式維甲酸、三氧化二砷、天冬醯胺酶、艾瑞布林(eribulin)、羥基脲、伊沙匹隆(ixabepilone)、米托坦(mitotane)、高三尖杉酯鹼(omacetaxine)、培門冬酶(pegaspargase)、丙卡巴肼(procarbazine)、羅米地辛(romidepsin)或伏立諾他(vorinostat)。該拓撲異構酶抑制劑可為I型拓撲異構酶抑制劑或II型拓撲異構酶抑制劑。該有絲***抑制劑可為紫杉烷(taxane)或長春花生物鹼類(vinca alkaloid)。

較佳地，化療劑係烷化劑或抗代謝物。較佳地，該抗代謝物係選自包括以下之群：阿紮胞苷、5-氟尿嘧啶(5-FU)、6-巰基嘌呤(6-MP)、卡培他濱、克拉屈濱、氯法拉濱、阿糖胞苷、地西他濱、氟尿苷、氟達拉濱、吉西他濱、羥基脲、甲胺喋呤、奈拉濱、培美曲塞、噴司他丁、普拉曲沙、硫鳥嘌呤及三氟尿苷/替吡嘧啶組合。更佳地，該抗代謝物係吉西他濱。較佳地，該烷化劑係選自包括以下之群：六甲密胺、苯達莫司汀、白消安、卡鉑、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、順鉑、環磷醯胺(CPA)、達卡巴嗪、異環磷醯胺、洛莫司汀、甲基二(氯乙基)胺、美法侖、奧沙利鉑、替莫唑胺、噻替派及曲貝替定。更佳地，該烷化劑係順鉑。

較佳地，亞硝基脲係選自包括以下之群：卡莫司汀(camustine)、洛莫司汀及鏈脲菌素(streptozocin)。較佳地，細胞毒性抗生素係選自由以下組成之群：道諾黴素(daunorubicin)、阿黴素(doxorubicin)、脂質體阿黴素(liposomal doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊達比星(idarubicin)、戊柔比星(valrubicin)、博來黴素(bleomycin)、更生黴素(dactinomycin)及絲裂黴素C (mitomycin C)。較佳地，I型拓撲異構酶抑制劑係選自包括以下之群：伊立替康(irinotecan)、脂質體伊立替康及拓撲替康(topotecan)。較佳地，II型拓撲異構酶抑制劑係選自包括以下之群：依託泊苷(etoposide)、米托蒽醌(mitoxantrone)及替尼泊苷(teniposide)。較佳地，紫杉烷係選自包括以下之群：卡巴他賽(cabazitaxel)、多西他賽(docetaxel)、白蛋白結合型紫杉醇(nab-paclitaxel)及紫杉醇(paclitaxel)。較佳地，長春花生物鹼類係選自包括以下之群：長春花鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、脂質體長春新鹼(liposomal vincristine)及長春瑞濱(vinorelbine)。較佳地，皮質類固醇係選自包括以下之群：強體松(prednisone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)及***(dexamethasone)。

字組「腫瘤」係指由細胞之增殖增加及/或生存期延長產生之尺寸及/或組成異常之細胞團。腫瘤可為良性或惡性的。在後一種情況下，其等係稱為「癌症」。因此「腫瘤」細胞係相較於相同細胞類型之其他細胞，具有異常增加之***及/或抵抗細胞死亡之能力的細胞。

癌症之特徵在於惡性腫瘤細胞之異常增殖。在提及特定類型之癌症(諸如卵巢癌)之情況下，此係指相關組織(諸如***組織)之惡性細胞之異常增殖。位於***中但係另一組織(諸如卵巢組織)之惡性細胞異常增殖之結果的繼發性癌症於本文中不稱為乳癌但稱為卵巢癌。

MSLN係表現於一些腫瘤細胞之表面上及可溶性MSLN之高表現含量已與數種癌症之不良預後相關。已研究抗-MSLN抗體作為抗癌治療劑。此等抗-MSLN抗體透過其等ADCC活性誘導直接細胞殺死或係以ADC之形式使用。

因此，待使用結合MSLN及CD137之雙特異性抗體分子與化療劑之組合治療之癌症因此較佳表現或已確定表現MSLN。更佳地，待治療之癌症之細胞於其等細胞表面處包含或已確定包含MSLN，即包含細胞表面結合之MSLN。

癌症較佳包含或已確定包含表現CD137之腫瘤浸潤性淋巴細胞(TIL)。具體言之，該等TIL較佳於其等細胞表面處包含或已確定包含CD137。

癌症可為原發性或繼發性癌症。因此，如本文描述之結合MSLN及CD137之抗體分子可與化療劑組合用於治療個體之癌症之方法中，其中該癌症係原發性腫瘤及/或腫瘤轉移。

待治療之癌症可為實體癌症。

如上文提及，待治療之癌症可為表現MSLN或已確定表現MSLN之癌症。較佳地，該癌症係選自包括以下之群：卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤、子宮頸癌及非小細胞肺癌。

若癌症表現MSLN，則可選擇待治療之病患進行治療。若該癌症已確定表現MSLN，則可選擇該病患。較佳地，若該癌症係卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤、子宮頸癌或非小細胞肺癌中之任一者且表現MSLN，則選擇該病患進行治療。

發明人顯示相較於當小鼠係用FS122m或用順鉑或吉西他濱單獨治療時觀察到的組合腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小、中位數生存期增加及具有完全腫瘤消退之小鼠之百分比增加，使用FS122m (SEQ ID NO: 84及SEQ ID NO: 85)及順鉑或吉西他濱之組合治療於ST26及JC小鼠腫瘤模型中導致更大之腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小、增加之中位數生存期及具有完全腫瘤消退之小鼠之百分比增加。因此，發明人顯示使用FS122m及順鉑或吉西他濱之組合治療於ST26及JC小鼠腫瘤模型中以協同方式延緩腫瘤生長、減小腫瘤體積、增加中位數生存期及增加具有完全腫瘤消退之小鼠之百分比。

在一項實施例中，因此結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合減小腫瘤體積、延遲腫瘤生長、增加生存期及/或增加具有完全腫瘤消退之病患之百分比。較佳地，相較於使用結合MSLN及CD137之雙特異性抗體分子之單一療法或使用化療劑之單一療法，該結合MSLN及CD137之抗體分子與該化療劑之組合減小腫瘤體積、延遲腫瘤生長、增加生存期及/或增加具有完全腫瘤消退之病患之百分比至統計學上顯著更大之程度。更佳地，即相較於當用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑單獨治療病患時之組合腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小、中位數生存期增加及/或具有完全腫瘤消退之病患之百分比增加，該結合MSLN及CD137之雙特異性抗體分子與該化療劑之組合以協同方式減小腫瘤體積、延遲腫瘤生長、增加生存期及/或增加具有完全腫瘤消退之病患之百分比。

在一項實施例中，結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑係作為一(「前」)線治療投與(例如，初始或首次治療)。在另一實施例中，該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係作為二線治療投與(例如，在用相同或不同治療劑之初始治療後，包括在復發及/或該首次治療已無效後)。

如本文使用之「投與」係指使用熟習此項技術者已知的各種方法及遞送系統中之任一者，將治療劑物理引至個體。用於結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑之例示性投與途徑包括靜脈內、肌內、皮下、腹膜內、脊髓或其他腸胃外投與途徑，例如藉由注射或輸注。如本文使用之片語「腸胃外投與」意謂除腸內及局部投與外之投與模式，通常藉由注射，且包括(但不限於)靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、***內、病灶內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊椎內、硬膜外及胸骨內注射及輸注，及活體內電穿孔。治療劑可經由非腸胃外途徑投與。非腸胃外途徑包括局部、表皮或黏膜投與途徑，例如，經口、鼻內、經***、經直腸、舌下或局部。

因此，在一些實施例中，結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑係腸胃外投與。該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑可靜脈內、肌內、皮下、腹膜內或經脊柱投與。或者，該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑可藉由注射或輸注投與。

在其他實施例中，結合MSLN及CD137之抗體分子及/或化療劑係非腸胃外投與。該結合MSLN及CD137之抗體分子及/或該化療劑可經口、鼻內、經***、經直腸、舌下或局部投與。

「同步投與」描述以相同或以各別調配物同時投與結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。「循序投與」係指以各別調配物適時分別投與該雙特異性抗體分子及該化療劑。

因此，結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑可為相同調配物之部分或各別調配物之部分。較佳地，該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係作為各別調配物提供。

在本發明之一項實施例中，結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑係同步投與。例如，該結合MSLN及CD137之抗體分子可與該化療劑以相同調配物投與。或者，該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑可在彼此之前或之後立即以各別調配物投與。

較佳地，結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑係對病患循序投與。更佳地，該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係彼此於4天內，較佳彼此於3天內，更佳彼此於2天內，或在同一天循序對病患投與。

本發明亦係關於一種治療癌症之方法，其包括對有需要個體投與結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。

投與可係以「治療有效量」，此係足以對個體顯示益處。投與之實際量及投與速率及時程將取決於治療中之病症之性質及嚴重程度、治療中之特定個體、個體之臨床病症、疾患之病因、組合物之遞送位點、抗體分子之類型、投與方法、投與時間表及執業醫師已知的其他因素。治療處方(例如對劑量之決定等)係由全科醫生及其他醫生負責，且可取決於治療中之疾病之症狀及/或進展之嚴重程度。抗體分子之適當劑量為此項技術中熟知(Ledermann等人，1991；Bagshawe等人，1991)。抗體分子之治療有效量或合適劑量可藉由於動物模型中比較活體外活性及活體內活性確定。已知用於將小鼠及其他測試動物之有效劑量外推至人類之方法。精確劑量將取決於許多因素，包括待治療區域之尺寸及位置，及該抗體分子之精確性質。

因此，本發明可係關於一種治療癌症之方法，其包括對有需要個體投與治療有效量之結合MSLN及CD137之抗體分子及治療有效量之化療劑。

本發明亦提供一種套組，其包含結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。較佳地，該套組包含結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑及化療劑及醫藥上可接受之賦形劑。

套組可為包含第一容器及第二容器之包裝，該第一容器包含結合MSLN及CD137之抗體分子，該第二容器包含化療劑。該包裝可包含使用該結合MSLN及CD137之抗體分子與該化療劑之組合治療個體之癌症之說明書。

在一項實施例中，套組可為包含至少一個劑量之包含結合MSLN及CD137之抗體分子之藥劑及一個劑量之包含化療劑之藥劑的包裝。較佳地，該套組包含至少一個劑量之包含該結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑之藥劑及一個劑量之包含該化療劑及醫藥上可接受之賦形劑之藥劑。更佳地，該套組包括包含使用該等藥劑治療個體之癌症之說明書的包裝插頁。

在另一實施例中，套組可為包含第一容器及第二容器之包裝，該第一容器包含結合MSLN及CD137之抗體分子，該第二容器包含化療劑。該第一容器可包含至少一個劑量之包含該結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑之藥劑及該第二容器可包含至少一個劑量之包含該化療劑之藥劑。該包裝可進一步包括包含使用該等藥劑來治療個體之癌症之說明書的插頁。

前述描述或隨附申請專利範圍或隨附圖式中揭示之特徵，以其等特定形式或鑑於用於進行本發明揭示之功能方式，或用於獲得本發明揭示之結果之方法或過程表現視需要可單獨或以此等特徵之任何組合用於以其各種形式實現本發明。

儘管已結合上文描述之例示性實施例描述本發明，但當給定本發明時，熟習此項技術者將顯而易見許多等效修飾及變化。因此，認為上文闡述之本發明之例示性實施例係說明性且非限制性的。可對本發明描述之實施例作出各種改變而不背離本發明之精神及範圍。

為避免任何疑問，出於改善讀者之瞭解之目的提供本文提供之任何理論解釋。發明人不希望受此等理論解釋中之任一者束縛。

本文使用之任何章節標題係僅出於組織目的且不應解釋為限制本文描述之標的。

在整個本說明書(包括隨附申請專利範圍)中，除非內文另有要求，否則將瞭解字組「包含(comprise)」及「包括(include)」及變化(諸如「包含(comprises)」、「包含(comprising)」及「包括(including)」)隱含包括規定之整數或步驟或整數或步驟之組但不排除任何其他整數或步驟或整數或步驟之組。

必須注意如本說明書及隨附申請專利範圍中使用，除非內文另有明確規定，否則單數形式「一」、「一個」及「該」包括複數個參考物。範圍於本文中可表現為自「約」一個特定值及/或至「約」另一特定值。當表現此範圍時，另一實施例包括自該一個特定值及/或至該另一特定值。同樣地，當藉由使用先行詞「約」將值表示為近似值時，將瞭解特定值形成另一實施例。與數值相關之術語「約」係任選的且意謂例如+/- 10%。

實例 材料及方法

藉由於小鼠腫瘤模型中研究經時平均腫瘤體積及延長之生存期評估結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合相較於使用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑之單一療法於增強抗癌免疫反應之效用。下文更詳細描述此等小鼠腫瘤模型。

CT26細胞係獲自ATCC並於含有2 mM L-麩醯胺酸、10 mM HEPES、1 mM丙酮酸鈉、4500 mg/L葡萄糖、1500 mg/L碳酸氫鈉及10%胎牛血清(FBS)之RPMI培養基中培養。JC細胞係獲自ATCC並在無錫作為單層培養物活體外維持在用10%熱滅活FBS補充之RPMI-1640中。此等腫瘤細胞系係作為單層培養物活體外個別維持並在37℃下在5% CO ₂氣氛中生長。藉由TrypLE處理每週兩次例行性繼代培養該等細胞。收穫以指數生長期生長之細胞並計數用於腫瘤接種。野生型BALB/c雌性小鼠係購自Charles River實驗室，或購自Lingchang Biological Technology Co. LTD。所有小鼠在研究開始時均為8至12週齡及在符合實驗室動物護理及使用指南，第8版之條件下如下文描述飼養並維持。所有動物實驗均根據默克研究機構(EMD Serono Research Institutional) (方案17-008、20-005)及無錫藥明康得(Wuxi AppTec)動物護理和使用委員會(Animal Care and Use Committee，IACUC)指南進行。

到達研究所之動物飼養場(vivarium)後，所有動物均接受研究人員之詳細體檢，包括體重量測。發現所有動物之健康均令人滿意。將動物安置於默克之無特定病原體屏障動物設施中。將該等小鼠飼養於恆溫恆濕之單獨通風籠中，及每個籠中5隻動物。每個籠子之鑑別標籤含有下列資訊：動物之數量、性別、品系、接受日期、處理、研究編號、組編號及治療開始之日期。動物係由耳朵缺口或耳朵標籤進行標記。動物飼養室係維持在20至26℃及40至70%濕度下。燈光係以12小時亮/暗週期點亮。動物可免費獲得標準認證之商業實驗室飲食。該飲食中污染物之最大容許濃度係由製造商控制並例行性分析。該等動物將可隨意使用適用於人類飲用之高壓滅菌市政自來水。認為在膳食材料中不存在可影響腫瘤生長之已知污染物。在動物到達與腫瘤接種之間容許大約一週之週期，以容許該等動物適應實驗室環境。研究中所有與動物處理、護理及治療相關之程序係根據由默克機構動物護理及使用委員會(IACUC)批准之指南及遵循實驗室動物護理評估及認證協會(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care，AAALAC)之指南進行。

CT26及JC腫瘤模型係用於研究結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合相較於使用結合MSLN及CD137之抗體分子或化療劑之單一療法的抗腫瘤效應。小鼠係用抗-mMSLN-mCD137-huIgG1-LALA抗體分子FS122m與兩種化療劑順鉑或吉西他濱中之任一者之組合治療。針對CT26模型，雌性BALB/c小鼠係於右側腹中經由皮下(sc)注射接種於0.1 mL PBS中之0.3 × 10 ⁶個CT26細胞。當平均腫瘤體積達成大約50至100 mm ³時，將小鼠隨機分配至治療組(n = 10隻小鼠/組)。針對JC模型，雌性BALB/c小鼠係於右上腹經由sc注射接種於0.1 mL PBS中之JC腫瘤細胞(5 × 10 ⁶)。當平均腫瘤尺寸達成大約80 mm ³時，在腫瘤接種後第14天開始治療。FS122m及抗-HEL hIgG1 LALA同型對照係於治療之第一、第三及第五天(第0、2及4天)經由腹膜內(ip)注射以5 mg/kg給藥。順鉑係在第0天經由ip注射以10 mg/kg給藥，及吉西他濱係在第0天經由ip注射以120 mg/kg給藥。

每天一次進行死亡率檢查。每天檢查動物的腫瘤生長及治療對正常行為之任何影響，諸如活動性、食物及水消耗(僅藉由觀察)、眼睛/頭髮失去光澤及如方案中規定之任何其他異常影響。每週兩次記錄體重並將任何初始體重減輕20%之小鼠人道處死。若其等皮下腫瘤達成2500 mm ³之體積，則將小鼠人道安樂死。

若發生腫瘤潰瘍，則根據臨床徵象，每週至少3次，及增加頻率，最多每天一次監測具有潰瘍腫瘤之動物。用適當之傷口清潔溶液(例如，Novalsan)清潔未結痂之潰瘍腫瘤。僅在獸醫工作人員之指導下，將抗生素乳膏施用至潰瘍/病變。

安樂死之標準包括於1週內未癒合或結痂之病變、直徑大於5 mm之病變、出現空洞或正發展感染徵象之病變(諸如膿液之存在)或出血，或動物顯示不適之徵象(例如針對該部位之過度舔舐及撕咬)或全身疾病徵象(嗜睡、活動減少、食物消耗減少、身體狀況下降或體重減輕)。聯繫獸醫工作人員以討論任何可能之例外情況。

若發現動物瀕臨死亡，則使其等安樂死。發病率之臨床實例可包括動物縮成一團、持續斜臥及對處理或其他刺激缺乏反應、嚴重之器官或系統衰竭徵象、消瘦、體溫過低、CNS缺陷(抽搐)、呼吸系統症狀(呼吸急促、呼吸困難、咳嗽、囉音)、胃腸道症狀(腹瀉持續＞ 2天，黃疸)。藉由CO ₂將顯示上文臨床問題之任何動物人道處死。

每週兩次量測並記錄體重，直至達到終點。腫瘤尺寸係使用卡尺每週兩次以三維量測，及體積係以mm ³使用下式表示：寬度x長度x高度x 0.5236。

使用雙向方差分析(ANOVA)及圖基多重比較檢驗確定治療組之間腫瘤生長之差異。使用對數秩(Mantel-Cox)檢驗確定生存之顯著性。所有分析均使用GraphPad Prism軟體包(用於Windows之Prism 5，第8.0版，GraphPad Software Inc., San Diego, CA)進行並於p ≤ 0.05水準下接受統計學顯著性。

實例 1 ：概念之活體內驗證為測試相較於使用雙特異性抗體分子之單一療法及使用化療劑之單一療法，結合MSLN及CD137之抗體分子與化療劑之組合是否顯示改善之抗腫瘤活性，用該結合MSLN及CD137之抗體分子與該化療劑之組合治療活體內小鼠腫瘤模型。然後將腫瘤生長延緩、腫瘤體積減小及生存率之結果與使用該結合MSLN及CD137之抗體分子之單一療法及使用該化療劑之單一療法進行比較。

由於雙特異性抗-MSLN/CD137抗體分子M9657與小鼠MSLN及小鼠CD137之間缺乏交叉反應性，因此開發具有對小鼠CD137之結合親和力與M9657對人類CD137之結合親和力相似的抗-mMSLN-mCD137-huIgG1-LALA (FS112m)雙特異性抗體作為替代抗體(SEQ ID NO: 84及85)。順鉑及吉西他濱係分別屬於烷化劑及抗代謝物之群之兩種化療劑。FS112m係與順鉑或吉西他濱組合，及於兩種不同小鼠腫瘤模型中將該組合之腫瘤效用與使用FS122m之單一療法及使用順鉑或吉西他濱之單一療法進行比較。為此，對雌性小鼠接種CT26結腸癌或JC乳癌細胞，且當平均腫瘤體積達到大約50至100 mm ³時，將該等小鼠隨機分配至治療組。根據材料及方法中描述之方法對小鼠進行接種、治療及終止治療。

1.1 FS221m及順鉑組合首先於BALB/c小鼠之CT26結腸腫瘤模型中評估FS122m與順鉑組合之抗腫瘤效用。FS122m及順鉑單一療法誘導相對於同型對照顯著之腫瘤生長抑制(TGI) (分別61.3%及77.8%) (針對兩者，第17天，P ≤ 0.0001)及相對於同型對照(17天)延長中位數生存期(分別為24及36.5天)(圖1A、B及D)。相較於以FS122m單一療法(P ≤ 0.0001，第17天)及順鉑單一療法(P ≤ 0.0001，第17天)觀察到的TGI，FS122m及順鉑組合導致更大之TGI (96.3%) (圖1A及D)。FS122m及順鉑組合亦延長中位數生存期(圖1B)，且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中2隻小鼠完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的10隻小鼠中無完全腫瘤消退，FS122m及順鉑組合於10隻小鼠之7隻小鼠中誘導完全腫瘤消退(圖1D)。

在攜載JC腫瘤之小鼠中，相較於同型對照，用順鉑治療在治療開始後第22天誘導邊際，但統計學顯著之TGI (44.9%，P ≤ 0.0001)，及FS122m單一療法在第22天誘導中度TGI (60.1% P ≤ 0.0001) (圖2A及D)。順鉑及FS122m單一療法相對於同型對照延長生存期(分別22天相比於29及33天) (圖2B)。相較於以順鉑單一療法(P ≤ 0.0001)及FS122m單一療法(P ≤ 0.001)觀察到的TGI，FS122m及順鉑之組合導致更大之TGI (83.3%) (圖2A及D)。FS122m及順鉑之組合亦延長中位數生存期(36.5天) (圖2B)且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中2隻小鼠誘導完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的10隻小鼠中無完全腫瘤消退，FS122m及順鉑之組合於10隻小鼠之2隻小鼠中誘導完全腫瘤消退(圖2D)。

在攜載CT26結腸腫瘤及JC腫瘤兩者之小鼠中，相較於當小鼠係用FS122m單一療法或順鉑單一療法治療時觀察到的TGI，FS122m及順鉑之組合導致更大之TGI。於CT26小鼠腫瘤模型中，相較於FS122m及順鉑單一療法之差異係特別明顯的，其中相較於使用FS122m單一療法的10隻小鼠中2隻小鼠及順鉑單一療法組中無小鼠，FS122m及順鉑之組合於10隻小鼠之7隻小鼠中導致完全腫瘤消退(圖1D)。於小鼠腫瘤模型中在用FS122m及順鉑之組合治療後未觀察到顯著體重減輕，表明該組合治療係於動物中耐受性良好(圖1C及2C)。

1.2 FS221m及吉西他濱組合首先於攜載JC腫瘤之小鼠中評估FS122m與吉西他濱之組合之抗腫瘤效用。相對於同型對照(針對兩者，P ≤ 0.0001，第25天)，用吉西他濱或FS122m單一療法治療誘導邊際，但統計學顯著之TGI (分別47.8%及45.8%) (圖3A及D)。吉西他濱及FS122m單一療法相對於同型對照延長生存期(分別27天相比於36及34天)(圖3B)。FS122m及吉西他濱之組合導致比吉西他濱單一療法(P ≤ 0.0001)及FS122m單一療法(P ≤ 0.001)更大之TGI (80.2%) (圖3A)。FS122m及吉西他濱之組合亦延長中位數生存期(74.5天) (圖3B)且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中1隻小鼠誘導完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的10隻小鼠中無完全腫瘤消退，FS122m及吉西他濱之組合於10隻小鼠之5隻小鼠中誘導完全腫瘤消退(圖3D)。

在BALB/c小鼠之CT26結腸腫瘤模型中，相對於同型對照(P ≤ 0.0001，第14天)，FS122m及吉西他濱單一療法誘導中度TGI (分別61.4%及58.2%)，及相對於同型對照(17天)，延長中位數生存期(分別35及22天) (圖4A、B及D)。FS122m及吉西他濱之組合導致比吉西他濱單一療法(P ≤ 0.0001，第18天)及FS122m單一療法(P = 0.0113，第18天)更大之TGI (86.1%) (圖4A)。組合療法亦延長中位數生存期(35天) (圖4B)且相較於用FS122m單一療法治療的9隻小鼠中3隻小鼠誘導完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的9隻小鼠中無完全腫瘤消退，組合療法於9隻小鼠之1隻小鼠中誘導完全腫瘤消退(圖4D)。

在攜載JC腫瘤及CT26結腸腫瘤兩者之小鼠中，相較於當小鼠係用FS122m單一療法或吉西他濱單一療法治療時觀察到的TGI，用FS122m及吉西他濱之組合治療導致更大之TGI。於JC小鼠腫瘤模型中，相較於FS122m及吉西他濱單一療法之差異係特別明顯的，其中相較於用FS122m單一療法之10隻小鼠中之1隻小鼠及吉西他濱單一療法組中無小鼠，FS122m及順鉑之組合於10隻小鼠之5隻小鼠中導致完全腫瘤消退(圖3D)。FS122m及吉西他濱之組合於任一小鼠腫瘤模型中均不引起顯著之體重減輕，表明該組合治療係於動物中耐受性良好(圖3C及4C)。

序列表 重鏈注釋

i. 在mAb ²之重鏈之胺基酸序列中，可變域係以斜體顯示，根據IMGT之CDR以粗體斜體顯示，根據Kabat之CDR係以斜體及加底線顯示(因此任何重疊之IMGT及Kabat CDR序列均係以粗體、斜體及加底線顯示)，CH1域係以加底線顯示，鉸鏈區係以雙加底線顯示，CH2域係以粗體顯示(且其中若適用，則LALA突變之位置係以粗體及加底線顯示)，CH3域係以普通字體顯示，及CH3結構環之經修飾區域係以加底線顯示(若環不變，則無底線)。

ii. 在可變域之胺基酸序列中，根據IMGT之CDR係以粗體及斜體顯示，根據Kabat之CDR係以斜體及加底線顯示(因此任何重疊之IMGT及Kabat CDR序列均係以粗體、斜體及加底線顯示)。

iii. 提供根據IMGT及Kabat兩者之CDR胺基酸序列。

輕鏈注釋

i. 在mAb ²之輕鏈之胺基酸序列中，可變域係以斜體顯示，根據IMGT之CDR係以粗體及斜體顯示，及根據Kabat之CDR係以斜體及加底線顯示(因此任何重疊之IMGT及Kabat CDR序列均係以粗體、斜體及加底線顯示)。

ii. 在可變域之胺基酸序列中，根據IMGT之CDR係以粗體及斜體顯示，及根據Kabat之CDR係以斜體及加底線顯示(因此任何重疊之IMGT及Kabat CDR序列均係以粗體、斜體及加底線顯示)。

iii. 提供根據IMGT及Kabat兩者之CDR胺基酸序列。

FS22-172-003-AA/FS28-256-271 mAb2 之胺基酸序列SEQ ID NO: 1 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS A ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 2 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS A ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 3 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 4 HCDR1 (AA) (IMGT)GFTFTHTY SEQ ID NO: 5 HCDR1 (AA) (Kabat) HTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT)ISPTYSTT SEQ ID NO: 7 HCDR2 (AA) Kabat) AISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 8 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYHAALDY SEQ ID NO: 9 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYHAALDY SEQ ID NO: 10 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQTVPYPYT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 11 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQTVPYPYT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 16 LCDR3 (AA) (IMGT)QQTVPYPYT SEQ ID NO: 16 LCDR3 (AA) (Kabat)QQTVPYPYT FS22-172-003-AA/FS28-024-052 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 17 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTI SRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALLFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 18 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALLFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 19 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALLFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 20 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTLSYSS SEQ ID NO: 21 HCDR1 (AA) (Kabat) YSSMS SEQ ID NO: 22 HCDR2 (AA) (IMGT) ITPSTGYT SEQ ID NO: 23 HCDR2 (AA) Kabat) FITPSTGYTHYADSVKG SEQ ID NO: 24 HCDR3 (AA) (IMGT) ARRALLFDY SEQ ID NO: 25 HCDR3 (AA) (Kabat) RALLFDY SEQ ID NO: 26 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 27 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (IMGT) QQASSYPLT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (Kabat) QQASSYPLT FS22-172-003-AA/FS28-256-021 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 29 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 30 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 3 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 4 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTHTY SEQ ID NO: 5 HCDR1 (AA) (Kabat) HTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 8 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYHAALDY SEQ ID NO: 9 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYHAALDY SEQ ID NO: 32 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 33 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (IMGT) QQHNQYPNT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (Kabat) QQHNQYPNT FS22-172-003-AA/FS28-256-012 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 35 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 36 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 3 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 4 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTHTY SEQ ID NO: 5 HCDR1 (AA) (Kabat) HTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 8 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYHAALDY SEQ ID NO: 9 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYHAALDY SEQ ID NO: 37 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 38 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (IMGT)QQSYYYPIT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (Kabat)QQSYYYPIT FS22-172-003-AA/FS28-256-023 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 40 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 41 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 42 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 43 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTQTY SEQ ID NO: 44 HCDR1 (AA) (Kabat) QTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 45 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYQIGLDY SEQ ID NO: 46 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYQIGLDY SEQ ID NO: 32 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 33 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (IMGT) QQHNQYPNT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (Kabat) QQHNQYPNT FS22-172-003-AA/FS28-256-024 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 29 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 30 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 3 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 4 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTHTY SEQ ID NO: 5 HCDR1 (AA) (Kabat) HTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 8 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYHAALDY SEQ ID NO: 9 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYHAALDY SEQ ID NO: 47 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 48 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (IMGT) QQALGYPHT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (Kabat) QQALGYPHT FS22-172-003-AA/FS28-256-026 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 40 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 41 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 42 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 43 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTQTY SEQ ID NO: 44 HCDR1 (AA) (Kabat) QTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 45 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYQIGLDY SEQ ID NO: 46 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYQIGLDY SEQ ID NO: 47 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 48 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (IMGT) QQALGYPHT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (Kabat) QQALGYPHT FS22-172-003-AA/FS28-256-027 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 29 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 30 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 3 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT HTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNNKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYHAALDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 4 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTHTY SEQ ID NO: 5 HCDR1 (AA) (Kabat) HTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 8 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYHAALDY SEQ ID NO: 9 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYHAALDY SEQ ID NO: 10 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQTVPYPYT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 11 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQTVPYPYT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 16 LCDR3 (AA) (IMGT) QQTVPYPYT SEQ ID NO: 16 LCDR3 (AA) (Kabat) QQTVPYPYT FS22-172-003-AA/FS28-256-001 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 50 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELPYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVGADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 51 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 52 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 53 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTETY SEQ ID NO: 54 HCDR1 (AA) (Kabat) ETYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 55 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNSYQGGLDY SEQ ID NO: 56 HCDR3 (AA) (Kabat) YNSYQGGLDY SEQ ID NO: 32 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 33 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQHNQYPNT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (IMGT) QQHNQYPNT SEQ ID NO: 34 LCDR3 (AA) (Kabat) QQHNQYPNT FS22-172-003-AA/FS28-256-005 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 50 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 51 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 52 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT ETY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 53 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTETY SEQ ID NO: 54 HCDR1 (AA) (Kabat) ETYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 55 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNSYQGGLDY SEQ ID NO: 56 HCDR3 (AA) (Kabat) YNSYQGGLDY SEQ ID NO: 47 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 48 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQALGYPHT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (IMGT) QQALGYPHT SEQ ID NO: 49 LCDR3 (AA) (Kabat) QQALGYPHT FS22-172-003-AA/FS28-256-014 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 57 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT DTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYAAGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 58 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT DTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYAAGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 59 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT DTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYAAGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 60 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTDTY SEQ ID NO: 61 HCDR1 (AA) (Kabat) DTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 62 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYAAGLDY SEQ ID NO: 63 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYAAGLDY SEQ ID NO: 37 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 38 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (IMGT) QQSYYYPIT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (Kabat) QQSYYYPIT FS22-172-003-AA/FS28-256-018 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 40 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 41 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 42 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT QTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNAYQIGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 43 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTQTY SEQ ID NO: 44 HCDR1 (AA) (Kabat) QTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 45 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNAYQIGLDY SEQ ID NO: 46 HCDR3 (AA) (Kabat) YNAYQIGLDY SEQ ID NO: 37 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 38 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (IMGT) QQSYYYPIT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (Kabat) QQSYYYPIT FS22-172-003-AA/FS28-256 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 64 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT NTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 65 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT NTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 66 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTFT NTY MSWVRQAPGKGLEWVS N ISPTYSTTNYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR YNSYQGGLDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 67 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTFTNTY SEQ ID NO: 68 HCDR1 (AA) (Kabat) NTYMS SEQ ID NO: 6 HCDR2 (AA) (IMGT) ISPTYSTT SEQ ID NO: 31 HCDR2 (AA) Kabat) NISPTYSTTNYADSVKG SEQ ID NO: 55 HCDR3 (AA) (IMGT) ARYNSYQGGLDY SEQ ID NO: 56 HCDR3 (AA) (Kabat) YNSYQGGLDY SEQ ID NO: 37 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 38 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQSYYYPIT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (IMGT) QQSYYYPIT SEQ ID NO: 39 LCDR3 (AA) (Kabat) QQSYYYPIT FS22-172-003-AA/FS28-024-051 mAb ²之胺基酸序列 SEQ ID NO: 69 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALIFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 70 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALIFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 71 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALIFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 21 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTLSYSS SEQ ID NO: 22 HCDR1 (AA) (Kabat) YSSMS SEQ ID NO: 23 HCDR2 (AA) (IMGT) ITPSTGYT SEQ ID NO: 24 HCDR2 (AA) Kabat) FITPSTGYTHYADSVKG SEQ ID NO: 72 HCDR3 (AA) (IMGT) ARRALIFDY SEQ ID NO: 73 HCDR3 (AA) (Kabat) RALIFDY SEQ ID NO: 26 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 27 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (IMGT) QQASSYPLT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (Kabat) QQASSYPLT FS22-172-003-AA/FS28-024-053 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 74 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALVFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 75 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALVFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 76 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALVFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 21 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTLSYSS SEQ ID NO: 22 HCDR1 (AA) (Kabat) YSSMS SEQ ID NO: 23 HCDR2 (AA) (IMGT) ITPSTGYT SEQ ID NO: 24 HCDR2 (AA) Kabat) FITPSTGYTHYADSVKG SEQ ID NO: 77 HCDR3 (AA) (IMGT) ARRALVFDY SEQ ID NO: 78 HCDR3 (AA) (Kabat) RALVFDY SEQ ID NO: 26 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 27 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (IMGT) QQASSYPLT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (Kabat) QQASSYPLT FS22-172-003-AA/FS28-024 mAb ² 之胺基酸序列SEQ ID NO: 79 重鏈AA (無LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALTFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 80 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALTFDY WGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKV EPKSCDKTHTCPPCP APE AAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 81 VH域AA EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAS GFTLS YSS MSWVRQAPGKGLEWVS F ITPSTGYTHYADSVKG RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AR RALTFDY WGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 21 HCDR1 (AA) (IMGT) GFTLSYSS SEQ ID NO: 22 HCDR1 (AA) (Kabat) YSSMS SEQ ID NO: 23 HCDR2 (AA) (IMGT) ITPSTGYT SEQ ID NO: 24 HCDR2 (AA) Kabat) FITPSTGYTHYADSVKG SEQ ID NO: 82 HCDR3 (AA) (IMGT) ARRALTFDY SEQ ID NO: 83 HCDR3 (AA) (Kabat) RALTFDY SEQ ID NO: 26 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 27 VL域AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSC RAS QSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIY GAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYC QQASSYPLT FGQGTKVEIK SEQ ID NO: 12 LCDR1 (AA) (IMGT) QSVSSSY SEQ ID NO: 13 LCDR1 (AA) (Kabat) RASQSVSSSYLA SEQ ID NO: 14 LCDR2 (AA) (IMGT) GAS SEQ ID NO: 15 LCDR2 (AA) (Kabat) GASSRAT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (IMGT) QQASSYPLT SEQ ID NO: 28 LCDR3 (AA) (Kabat) QQASSYPLT FS122m ( 替代抗 -mMSLN mCD137 Fcab G1-AA) 之胺基酸序列 ：SEQ ID NO: 84 重鏈AA (具有LALA) EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYFMVWVRQAPGKGLEWVSMISPKSSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYHISPRFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPE AA GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEPYWSYVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVMNYRWELGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 85 輕鏈AA EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQPFPFSFTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC CH3 域之胺基酸序列 及所有含有 FS22-172-003 Fcab 之 mAb ² 純系及 FS22-172-003 Fcab 之 CH3 AB 及 EF 結構環之經修飾區域之 胺基酸序列SEQ ID NO: 86 CH3域 GQPREPQVYTLPPSRDEL PYIIPPYNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV GADRWLEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG SEQ ID NO: 87 AB環 PYIIPPY SEQ ID NO: 88 EF環 GADRWLE SEQ ID NO: 89 CD環 SNGQPENNY 含有 LALA 突變、 PA 突變或 LALA-PA 突變之 CH2 域之胺基酸序列 ( 突變以粗體及加底線顯示 )SEQ ID NO: 90 CH2 (LALA) APE AA GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK SEQ ID NO: 91 CH2 (PA) APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKAL A APIEKTISKAK SEQ ID NO: 92 CH2 (LALA-PA) APE AA GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKAL A APIEKTISKAK

參考文獻上文援引許多公開案以更充分描述並揭示本發明及本發明所屬之當前最先進技術。下文提供此等參考文獻之完整引文。此等參考文獻中之各者之全部內容均係以引用之方式併入本文中。 1 Bartkowiak, T. & Curran, M. A. 4-1BB Agonists: Multi-Potent Potentiators of Tumor Immunity. Front Oncol 5, 117, doi:10.3389/fonc.2015.00117 (2015). 2 Compte, M.等人，A tumor-targeted trimeric 4-1BB-agonistic antibody induces potent anti-tumor immunity without systemic toxicity. Nat Commun 9, 4809, doi:10.1038/s41467-018-07195-w (2018). 3 Kataoka, K.等人，Integrated molecular analysis of adult T cell leukemia/lymphoma. Nat Genet 47, 1304-1315, doi:10.1038/ng.3415 (2015). 4 Sanmamed, M. F.等人，Agonists of Co-stimulation in Cancer Immunotherapy Directed Against CD137, OX40, GITR, CD27, CD28, and ICOS. Semin Oncol 42, 640-655, doi:10.1053/j.seminoncol.2015.05.014 (2015). 5 Yonezawa, A., Chester, C., Rajasekaran, N. & Kohrt, H. E. Harnessing the innate immune system to treat cancer: enhancement of antibody-dependent cellular cytotoxicity with anti-CD137 Ab. Chin Clin Oncol 5, 5, doi:10.3978/j.issn.2304-3865.2016.02.05 (2016). 6 Yonezawa, A., Dutt, S., Chester, C., Kim, J. & Kohrt, H. E. Boosting Cancer Immunotherapy with Anti-CD137 Antibody Therapy. Clin Cancer Res 21, 3113-3120, doi:10.1158/1078-0432.CCR-15-0263 (2015). 7 Melero, I., Johnston, J. V., Shufford, W. W., Mittler, R. S. & Chen, L. NK1.1 cells express 4-1BB (CDw137) costimulatory molecule and are required for tumor immunity elicited by anti-4-1BB monoclonal antibodies. Cell Immunol 190, 167-172, doi:10.1006/cimm.1998.1396 (1998). 8 Vinay, D. S. & Kwon, B. S. Role of 4-1BB in immune responses. Semin Immunol 10, 481-489, doi:10.1006/smim.1998.0157 (1998). 9 Cannons, J. L., Hoeflich, K. P., Woodgett, J. R. & Watts, T. H. Role of the stress kinase pathway in signaling via the T cell costimulatory receptor 4-1BB. J Immunol 163, 2990-2998 (1999). 10 Sica, G. & Chen, L. Biochemical and immunological characteristics of 4-1BB (CD137) receptor and ligand and potential applications in cancer therapy. Arch Immunol Ther Exp (Warsz) 47, 275-279 (1999). 11 Lee, H. W.等人，4-1BB promotes the survival of CD8+ T lymphocytes by increasing expression of Bcl-xL and Bfl-1. J Immunol 169, 4882-4888, doi:10.4049/jimmunol.169.9.4882 (2002). 12 Lee, H. W., Nam, K. O., Park, S. J. & Kwon, B. S. 4-1BB enhances CD8+ T cell expansion by regulating cell cycle progression through changes in expression of cyclins D and E and cyclin-dependent kinase inhibitor p27kip1. Eur J Immunol 33, 2133-2141, doi:10.1002/eji.200323996 (2003). 13 Chacon, J. A.等人，Co-stimulation through 4-1BB/CD137 improves the expansion and function of CD8(+) melanoma tumor-infiltrating lymphocytes for adoptive T-cell therapy. PLoS One 8, e60031, doi:10.1371/journal.pone.0060031 (2013). 14 Fisher, T. S.等人，Targeting of 4-1BB by monoclonal antibody PF-05082566 enhances T-cell function and promotes anti-tumor activity. Cancer Immunol Immunother 61, 1721-1733, doi:10.1007/s00262-012-1237-1 (2012). 15 Claus, C.等人，Tumor-targeted 4-1BB agonists for combination with T cell bispecific antibodies as off-the-shelf therapy. Sci Transl Med 11, doi:10.1126/scitranslmed.aav5989 (2019). 16 Qi, X.等人，Optimization of 4-1BB antibody for cancer immunotherapy by balancing agonistic strength with FcgammaR affinity. Nat Commun 10, 2141, doi:10.1038/s41467-019-10088-1 (2019). 17 Azpilikueta, A.等人，Successful Immunotherapy against a Transplantable Mouse Squamous Lung Carcinoma with Anti-PD-1 and Anti-CD137 Monoclonal Antibodies. J Thorac Oncol 11, 524-536, doi:10.1016/j.jtho.2016.01.013 (2016). 18 Narazaki, H., Zhu, Y., Luo, L., Zhu, G. & Chen, L. CD137 agonist antibody prevents cancer recurrence: contribution of CD137 on both hematopoietic and nonhematopoietic cells. Blood 115, 1941-1948, doi:10.1182/blood-2008-12-192591 (2010). 19 Wilcox, R. A.等人，Provision of antigen and CD137 signaling breaks immunological ignorance, promoting regression of poorly immunogenic tumors. J Clin Invest 109, 651-659, doi:10.1172/JCI14184 (2002). 20 Weigelin, B.等人，Focusing and sustaining the antitumor CTL effector killer response by agonist anti-CD137 mAb. Proc Natl Acad Sci U S A 112, 7551-7556, doi:10.1073/pnas.1506357112 (2015). 21 Segal, N. H.等人，Results from an Integrated Safety Analysis of Urelumab, an Agonist Anti-CD137 Monoclonal Antibody. Clin Cancer Res 23, 1929-1936, doi:10.1158/1078-0432.CCR-16-1272 (2017). 22 Timmerman, J.等人，Urelumab alone or in combination with rituximab in patients with relapsed or refractory B-cell lymphoma. Am J Hematol 95, 510-520, doi:10.1002/ajh.25757 (2020). 23 Chin, S. M.等人，Structure of the 4-1BB/4-1BBL complex and distinct binding and functional properties of utomilumab and urelumab. Nat Commun 9, 4679, doi:10.1038/s41467-018-07136-7 (2018). 24 Eskiocak, U.等人，Differentiated agonistic antibody targeting CD137 eradicates large tumors without hepatotoxicity. JCI Insight 5, doi:10.1172/jci.insight.133647 (2020). 25 Trub, M.等人，Fibroblast activation protein-targeted-4-1BB ligand agonist amplifies effector functions of intratumoral T cells in human cancer. J Immunother Cancer 8, doi:10.1136/jitc-2019-000238 (2020). 26 Mardiana, S.等人，A Multifunctional Role for Adjuvant Anti-4-1BB Therapy in Augmenting Antitumor Response by Chimeric Antigen Receptor T Cells. Cancer Res 77, 1296-1309, doi:10.1158/0008-5472.CAN-16-1831 (2017). 27 Ordóñez, N. G. Application of mesothelin immunostaining in tumor diagnosis. Am J Surg Pathol 27, 1418-1428, doi:10.1097/00000478-200311000-00003 (2003). 28 Chang, K. & Pastan, I. Molecular cloning of mesothelin, a differentiation antigen present on mesothelium, mesotheliomas, and ovarian cancers. Proc Natl Acad Sci U S A 93, 136-140, doi:10.1073/pnas.93.1.136 (1996). 29 Miettinen, M. & Sarlomo-Rikala, M. Expression of calretinin, thrombomodulin, keratin 5, and mesothelin in lung carcinomas of different types: an immunohistochemical analysis of 596 tumors in comparison with epithelioid mesotheliomas of the pleura. Am J Surg Pathol 27, 150-158, doi:10.1097/00000478-200302000-00002 (2003). 30 Hassan, R.等人，Anti-tumor activity of K1-LysPE38QQR, an immunotoxin targeting mesothelin, a cell-surface antigen overexpressed in ovarian cancer and malignant mesothelioma. J Immunother 23, 473-479, doi:10.1097/00002371-200007000-00011 (2000). 31 Hassan, R.等人，Phase 1 study of the immunotoxin LMB-100 in patients with mesothelioma and other solid tumors expressing mesothelin. Cancer 126, 4936-4947, doi:10.1002/cncr.33145 (2020). 32 Hassan, R.等人，Clinical Response of Live-Attenuated, Listeria monocytogenes Expressing Mesothelin (CRS-207) with Chemotherapy in Patients with Malignant Pleural Mesothelioma. Clin Cancer Res 25, 5787-5798, doi:10.1158/1078-0432.CCR-19-0070 (2019). 33 Hassan, R.等人，First-in-Human, Multicenter, Phase I Dose-Escalation and Expansion Study of Anti-Mesothelin Antibody-Drug Conjugate Anetumab Ravtansine in Advanced or Metastatic Solid Tumors. J Clin Oncol 38, 1824-1835, doi:10.1200/JCO.19.02085 (2020). 34 Hassan, R.等人，Mesothelin Immunotherapy for Cancer: Ready for Prime Time? J Clin Oncol 34, 4171-4179, doi:10.1200/JCO.2016.68.3672 (2016). 35 Hassan, R.等人，Inhibition of mesothelin-CA-125 interaction in patients with mesothelioma by the anti-mesothelin monoclonal antibody MORAb-009: Implications for cancer therapy. Lung Cancer 68, 455-459, doi:10.1016/j.lungcan.2009.07.016 (2010). 36 Kreitman, R. J., Hassan, R., Fitzgerald, D. J. & Pastan, I. Phase I trial of continuous infusion anti-mesothelin recombinant immunotoxin SS1P. Clin Cancer Res 15, 5274-5279, doi:10.1158/1078-0432.CCR-09-0062 (2009). 37 Hassan, R.等人，Phase I study of SS1P, a recombinant anti-mesothelin immunotoxin given as a bolus I.V. infusion to patients with mesothelin-expressing mesothelioma, ovarian, and pancreatic cancers. Clin Cancer Res 13, 5144-5149, doi:10.1158/1078-0432.CCR-07-0869 (2007). 38 Ho, M.等人，Mesothelin expression in human lung cancer. Clin Cancer Res 13, 1571-1575, doi:10.1158/1078-0432.CCR-06-2161 (2007). 39 Kelly, R. J., Sharon, E., Pastan, I. & Hassan, R. Mesothelin-targeted agents in clinical trials and in preclinical development. Mol Cancer Ther 11, 517-525, doi:10.1158/1535-7163.MCT-11-0454 (2012). 40 Fucikova, J.等人，Detection of immunogenic cell death and its relevance for cancer therapy. Cell Death Dis 11, 1013, doi:10.1038/s41419-020-03221-2 (2020). 41 Vanmeerbeek, I.等人，Trial watch: chemotherapy-induced immunogenic cell death in immuno-oncology. Oncoimmunology 9, 1703449, doi:10.1080/2162402x.2019.1703449 (2020). 42 Wang, Q.等人，Immunogenic cell death in anticancer chemotherapy and its impact on clinical studies. Cancer Lett 438,17-23 (2018). 43 Bracci, L.等人，Immune-based mechanisms of cytotoxic chemotherapy: implications for the design of novel and rationale-based combined treatments against cancer. Cell Death Differ 21(1), 15-25 (2014). 44 Vincent, J.等人，5-Fluorouracil selectively kills tumor-associated myeloid-derived suppressor cells resulting in enhanced T cell-dependent antitumor immunity. Cancer Res 70(8), 3052-61 (2010). 45 Welters, M.J.等人，Vaccination during myeloid cell depletion by cancer chemotherapy fosters robust T cell responses. Sci Transl Med 8(334), 334-352 (2016). 46 Gattinoni, L.等人，Removal of homeostatic cytokine sinks by lymphodepletion enhances the efficacy of adoptively transferred tumor-specific CD8+ T cells. J Exp Med 202(7), 907-12 (2005). 47 Tallarida RJ. Quantitative methods for assessing drug synergism. Genes Cancer 2(11):1003-8. doi: 10.1177/1947601912440575 (2011). 針對標準分子生物學科技，參見Sambrook, J., Russel, D.W. Molecular Cloning, A Laboratory Manual.第3版，2001, Cold Spring Harbor, New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press。

現將參考隨附圖式討論闡述本發明之原理之實施例及實驗，其中：

圖1顯示BALB/c小鼠之CT26結腸腫瘤小鼠模型中之治療效用。該腫瘤小鼠模型之進展係以經時平均腫瘤體積(A)、中位數生存期(B)、體重變化% (C)及個別腫瘤體積之經時變化(D)。小鼠係用抗-HEL-hIgG1-LALA、FS122m、順鉑或FS122m +順鉑治療。當相較於抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照(A)時，用FS122m +順鉑治療延緩腫瘤體積生長至比FS122m及順鉑單一療法大得多的程度。FS122m +順鉑相對於FS122m或順鉑單一療法(B)亦增強中位數生存期，且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中2隻誘導完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的10隻小鼠無任一隻誘導完全腫瘤消退，FS122m +順鉑於10隻小鼠之7隻中誘導完全腫瘤消退(D)。體重變化在所有治療(包括抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照)之間均可比較，證實所有治療均耐受性良好(C)。腫瘤體積資料係經對數變換並進行雙向方差分析(ANOVA)，接著進行圖基(Tukey’s)多重比較檢驗，其中** = P ≤ 0.01，*** = P ≤ 0.001，**** = P ≤ 0.0001。生存期係以中位數生存期百分比呈現及平均腫瘤體積及體重變化係以平均值± SEM顯示。

圖2顯示BALB/c小鼠之JC腫瘤小鼠模型中之治療效用。該腫瘤小鼠模型之進展係以經時平均腫瘤體積(A)、中位數生存期(B)、體重變化% (C)及個別腫瘤體積之經時變化(D)量測。小鼠係用抗-HEL-hIgG1-LALA、FS122m、順鉑或FS122m +順鉑治療。當相較於抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照(A)時，用FS122m +順鉑治療延緩腫瘤體積生長至比FS122m及順鉑單一療法大得多的程度。FS122m +順鉑相對於FS122m或順鉑單一療法(B)亦增強中位數生存期，且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中2隻誘導完全腫瘤消退及用順鉑單一療法治療的10隻小鼠無任一隻誘導完全腫瘤消退，FS122m +順鉑於10隻小鼠之2隻中誘導完全腫瘤消退(D)。體重變化在所有治療(包括抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照)之間均可比較，證實所有治療均耐受性良好(C)。腫瘤體積資料係經對數變換並進行雙向方差分析(ANOVA)，接著進行圖基多重比較檢驗，其中** = P ≤ 0.01，*** = P ≤ 0.001，**** = P ≤ 0.0001。生存期係以中位數生存期百分比呈現及平均腫瘤體積及體重變化係以平均值± SEM顯示。

圖3顯示BALB/c小鼠之JC腫瘤小鼠模型中之治療效用。該腫瘤小鼠模型之進展係以經時平均腫瘤體積(A)、中位數生存期(B)、體重變化% (C)及個別腫瘤體積之經時變化(D)量測。小鼠係用抗-HEL-hIgG1-LALA、FS122m、吉西他濱或FS122m +吉西他濱治療。當相較於抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照(A)時，用FS122m +吉西他濱治療延緩腫瘤體積生長至比FS122m及吉西他濱單一療法大得多的程度。FS122m +吉西他濱相對於FS122m或吉西他濱單一療法亦增強中位數生存期(B)，且相較於用FS122m單一療法治療的10隻小鼠中1隻誘導完全腫瘤消退及用吉西他濱單一療法治療的10隻小鼠中無任一隻誘導完全腫瘤消退，FS122m +吉西他濱於10隻小鼠之5隻中誘導完全腫瘤消退(D)。體重變化在所有治療(包括抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照)之間均可比較，證實所有治療均耐受性良好(C)。腫瘤體積資料係經對數變換並進行雙向方差分析(ANOVA)，接著圖基多重比較檢驗，其中** = P ≤ 0.01，*** = P ≤ 0.001，**** = P ≤ 0.0001。生存期係以中位數生存期百分比呈現及平均腫瘤體積及體重變化係以平均值± SEM顯示。

圖4顯示BALB/c小鼠之CT26結腸腫瘤小鼠模型中之治療效用。該腫瘤小鼠模型之進展係以經時平均腫瘤體積(A)、中位數生存期(B)、體重變化% (C)及個別腫瘤體積之經時變化(D)量測。小鼠係用抗-HEL-hIgG1-LALA、FS122m、吉西他濱或FS122m +吉西他濱治療。當相較於抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照(A)時，用FS122m +吉西他濱治療延緩腫瘤體積生長至比FS122m及吉西他濱單一療法大得多的程度。FS122m +吉西他濱相對於FS122m或吉西他濱單一療法(B)亦增強中位數生存期，且相較於在用FS122m單一療法治療的9隻小鼠中3隻誘導完全腫瘤消退，及用吉西他濱單一療法(D)治療的9隻小鼠中無任一隻誘導完全腫瘤消退，FS122m +吉西他濱於9隻小鼠之1隻中誘導完全腫瘤消退。體重變化在所有治療(包括抗-HEL-hIgG1-LALA同型對照)之間均可比較，證實所有治療均耐受性良好(C)。腫瘤體積資料係經對數變換並進行雙向方差分析(ANOVA)，接著圖基多重比較檢驗，其中** = P ≤ 0.01，*** = P ≤ 0.001，**** = P ≤ 0.0001。生存期係以中位數生存期百分比呈現及平均腫瘤體積及體重變化係以平均值± SEM顯示。

TW202413439A_112132031_SEQL.xml

Claims

一種結合MSLN及CD137之抗體分子，其用於治療病患之癌症之方法中，其中該方法包括投與該抗體與化療劑之組合。
一種治療個體之癌症之方法，該方法包括對該個體投與治療有效量之結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑。
一種套組，其包含： (a)結合MSLN及CD137之抗體分子及醫藥上可接受之賦形劑；及 (b)化療劑及醫藥上可接受之賦形劑。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子包含： (a)針對MSLN之基於互補決定區(CDR)之抗原結合位點；及 (b)位於該抗體分子之CH3域中之CD137抗原結合位點。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該針對MSLN之基於CDR之抗原結合位點包含下述之CDR 1至6： (i)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-271]； (ii)分別SEQ ID NO 20、22、24、12、14及28[FS28-024-052]； (iii)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及34[FS28-256-021]； (iv)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及39[FS28-256-012]； (v)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及34[FS28-256-023]； (vi)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及49[FS28-256-024]； (vii)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及49[FS28-256-026]； (viii)分別SEQ ID NO 4、6、8、12、14及16[FS28-256-027]； (ix)分別SEQ ID NO 53、6、55、12、14及34[FS28-256-001]； (x)分別SEQ ID NO 53、6、55、12、14及49[FS28-256-005]； (xi)分別SEQ ID NO 60、6、62、12、14及39[FS28-256-014]； (xii)分別SEQ ID NO 43、6、45、12、14及39[FS28-256-018]； (xiii)分別SEQ ID NO 67、6、55、12、14及39[FS28-256]； (xiv)分別SEQ ID NO 21、23、72、12、14及28[FS28-024-051]； (xv)分別SEQ ID NO 21、23、77、12、14及28[FS28-024-053]；或 (xvi)分別SEQ ID NO 21、23、82、12、14及28[FS28-024]；且其中該CD137抗原結合位點包含分別位於CH3域之AB及EF結構環中之第一序列及第二序列，其中該第一及第二序列分別具有SEQ ID NO 87及88中闡述之序列[FS22-172-003]。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中 (i)該第一序列係位於該抗體分子之CH3域之位置14與17之間；及/或 (ii)其中該第二序列係位於該抗體分子之CH3域之91與99之間；及其中該胺基酸殘基編號係根據IMGT編號方案。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該抗體分子包含SEQ ID NO: 86中闡述之CH3域序列[FS22-172-003]。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該抗體分子包含下列抗體之重鏈及輕鏈： (i) SEQ ID NO 2及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-271； (ii) SEQ ID NO 18及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-052； (iii) SEQ ID NO 30及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-021； (iv) SEQ ID NO 36及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-012； (v) SEQ ID NO 41及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-023； (vi) SEQ ID NO 30及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-024； (vii) SEQ ID NO 41及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-026； (viii) SEQ ID NO 30及10中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-027； (ix) SEQ ID NO 51及32中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-001； (x) SEQ ID NO 51及47中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-005； (xi) SEQ ID NO 58及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-014； (xii) SEQ ID NO 41及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256-018； (xiii) SEQ ID NO 65及37中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-256； (xiv) SEQ ID NO 70及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-051； (xv) SEQ ID NO 75及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024-053；或 (xvi) SEQ ID NO 80及26中分別闡述之FS22-172-003-AA/FS28-024。
如請求項8使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該抗體分子包含SEQ ID NO: 2中闡述之重鏈序列及SEQ ID NO: 10中闡述之輕鏈序列[FS22-172-003-AA/FS28-256-271]。
如前述請求項中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該化療劑係烷化劑或抗代謝物。
如請求項10使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該烷化劑係選自由以下組成之群：六甲密胺(altretamine)、苯達莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡鉑(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、順鉑(cisplatin)、環磷醯胺(cyclophosphamide) (CPA)、達卡巴嗪(dacarbazine)、異環磷醯胺(ifosfamide)、洛莫司汀(lomustine)、甲基二(氯乙基)胺(mechlorethamine)、美法侖(melphalan)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替派(thiotepa)，及曲貝替定(trabectedin)。
如請求項10使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該抗代謝物係選自由以下組成之群：阿紮胞苷(azacitidine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil) (5-FU)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine) (6-MP)、卡培他濱(capecitabine)、克拉屈濱(cladribine)、氯法拉濱(clofarabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、地西他濱(decitabine)、氟尿苷(floxuridine)、氟達拉濱(fludarabine)、吉西他濱(gemcitabine)、羥基脲(hydroxyurea)、甲胺喋呤(methotrexate)、奈拉濱(nelarabine)、培美曲塞(pemetrexed)、噴司他丁(pentostatin)、普拉曲沙(pralatrexate)、硫鳥嘌呤(thioguanine)，及三氟尿苷(trifluridine)/替吡嘧啶(tipiracil)組合。
如請求項1、2及4至12中任一項使用之抗體分子或治療癌症之方法，其中該癌症表現MSLN或已確定表現MSLN且係選自由以下組成之群：卵巢癌、胰臟腺癌、間皮瘤、子宮頸癌及非小細胞肺癌。
如請求項1、2及4至13中任一項使用之抗體分子或治療癌症之方法，其中用結合MSLN及CD137之抗體分子及化療劑治療造成抗腫瘤效應大於病患使用該結合MSLN及CD137之抗體分子或該化療劑單獨治療之組合抗腫瘤效應。
如請求項14使用之抗體分子或治療癌症之方法，其中該抗腫瘤效應係腫瘤生長抑制、腫瘤體積減小、中位數生存期增加，及/或經歷完全腫瘤消退之病患之百分比增加。
如請求項1、2及4至15中任一項使用之抗體分子或治療癌症之方法，其中該結合MSLN及CD137之抗體分子及該化療劑係對該病患同步或循序投與。
如請求項1、2及4至16中任一項使用之抗體分子、治療癌症之方法或套組，其中該方法包括確定該癌症是否表現MSLN，且若該癌症表現MSLN，則治療該個體。