TW202400632A - 長效澱粉素受體促效劑及其用途 - Google Patents

長效澱粉素受體促效劑及其用途 Download PDF

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Abstract

本發明係關於醫學領域。更特別地，本發明係屬治療糖尿病、肥胖及/或長期體重管理、血脂異常及/或NASH之領域。本發明係關於促效澱粉素受體且可降低食物攝取量、體重、葡萄糖及/或三酸甘油酯之化合物，因此可用於治療糖尿病、肥胖及/或血脂異常。本發明亦包括含有此類化合物之醫藥組合物及此類化合物及組合物之治療用途。

Description

長效澱粉素受體促效劑及其用途
本發明係關於醫學領域。更特定地，本發明係在治療糖尿病、肥胖及/或長期體重管理、血脂異常及/或非酒精性脂肪肝炎(NASH)之領域中。本發明係關於化合物，該等化合物促效澱粉素受體且可因此降低食物攝取量、體重、葡萄糖、HbA1c (糖化血紅蛋白)及/或三酸甘油酯，且可用於治療糖尿病、肥胖及/或長期體重管理、血脂異常及/或NASH。本發明亦包括含有此類化合物之醫藥組合物及此類化合物及醫藥組合物之治療用途。
在過去幾十年，糖尿病之盛行率持續上升。2型糖尿病(「T2DM」)為糖尿病最常見的形式，佔所有糖尿病的90%。T2DM以高血糖含量表徵且主要與胰島素抗性相關。糖尿病患者之所需治療應降低血糖且使HbA1c穩定。
肥胖是一種導致脂肪組織質量過度積聚之複雜醫學病症。如今，肥胖為全球公共健康問題，經常與非所欲健康結果及發病率相關。肥胖患者之所需治療應減少過量體重、改良與肥胖有關的共病症、及/或維持長期體重減少。
血脂異常係血液中膽固醇及其他脂質(亦稱為脂肪)之異常含量。血脂異常增加動脈阻塞(clogged arteries) (動脈粥樣硬化)及心臟病發作、中風或其他循環問題機率，尤其於吸煙的個體中。
NASH代表非酒精性脂肪肝炎。其為代謝病症之肝臟表現且為非酒精性脂肪肝病(NAFLD)之最嚴重形式。NASH與糖尿病及肥胖之共病症密切相關。
澱粉素為與胰島素從胰臟β細胞共分泌且於糖尿病患者中缺乏之37個胺基酸的肽激素。其抑制升糖素分泌、延遲胃清空且充作飽感劑(satiety agent)。因此，澱粉素有助於調節餐後體內葡萄糖的量。然而，人類澱粉素之生理化學性質使得其難以用作醫藥。例如，澱粉素難以調配，因為其在化學上不穩定且其在生理pH下沉澱，因此其必需在酸性溶液中調配。此外，此藥品之半衰期少於一小時且其在用餐時使用，因此患者在一天內需要多個劑量以在療法中使用此藥品。
普蘭林肽(Pramlintide)為作為補充胰島素(add-on to insulin)用於治療糖尿病之市售澱粉素促效劑肽。由於同時存在雙硫鍵(-S-S-)及脫醯胺，因此普蘭林肽在中性pH下在化學上不穩定。因此，其以酸性調配物提供。與人類澱粉素相比，普蘭林肽中位置25、28及29處的胺基酸經脯胺酸取代。此等修飾減少肽朝向原纖維形成(fibrillogenesis)之傾向。然而，普蘭林肽仍具有極短血漿半衰期且因此必須每天注射兩至三次，此可導致不便及順服性差，且於隨後導致不完整或低於最佳功效。此外，其低pH調配物與用於胰島素及GLP-1類似物之中性pH調配物不相容，此使得其與此類化合物之共同投與變得複雜，該共同投與可具有協同作用且因此具有改良之臨床功效。
人類澱粉素結合至兩種不同受體複合體。此兩種複合體亦含有抑鈣素受體加上受體活性蛋白質RAMP1或RAMP3。抑鈣素受體可見於全身許多組織中，且咸信參與骨代謝之調節。然而，除骨調節外，關於人類中抑鈣素受體之生理學知曉甚少，且因此，對抑鈣素受體具有高親和力之分子可增加脫靶毒性(off-target toxicity)風險。因此，咸信與抑鈣素受體相比針對於澱粉素受體具有增加之選擇性之基於澱粉素之多肽可提供有利之藥物動力學及藥理學特性。
從抑鈣素受體與澱粉素受體之間的緊密關係來看，可預期澱粉素受體促效劑對抑鈣素受體之一些交叉反應性。作為一個實例，普蘭林肽(一種澱粉素促效劑肽)對抑鈣素受體具有某種親和力，然而其於澱粉素受體上強效14倍。
已揭示包含人類澱粉素促效劑肽且具有白蛋白結合部分之多肽。參見WO 2010/046357、WO 2009/034119及WO 2009/034119。儘管與普蘭林肽相比此等具有白蛋白結合部分之多肽顯示改良之藥物動力學(PK)或藥效動力學(PD)特性，但在某些條件下，其可仍顯示差的物理穩定性。此外，多肽一般不顯示針對於澱粉素受體之優於抑鈣素受體之選擇性。US2014/0087995係關於包含具有針對於澱粉素受體之優於抑鈣素受體之選擇性之澱粉素促效劑肽之多肽。然而，仍需要具有較高效價、較低可發展性風險、較低免疫原性風險、改良之化學穩定性及在中性pH下與調配物之相容性之澱粉素促效劑肽藥物候選者。
需要顯示針對於澱粉素受體之促效作用之優於抑鈣素受體之選擇性之化合物(例如肽)。此外，仍需要具有延長時間之作用及保存的效價之澱粉素受體促效劑。治療上期望之化合物會促效於澱粉素受體且提供一或多種有利特性諸如降低以下中之任何者：食物攝取量、體重、血糖含量、HbA1c、三酸甘油酯及/或胰島素含量。此外，治療上期望之化合物可具有一或多種另外有利特性諸如延長時間之作用與在促效於澱粉素受體中保存或改良之效價、低免疫原性反應風險及/或低顫動風險。
此外，希望本發明之澱粉素受體促效劑之組合，視需要與腸促胰島素或腸促胰島素類似物組合可治療糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常。此種組合亦將較佳比單獨任一分子更有效。例如，與單獨每個分子相比，利用此種組合之此種治療可允許使用較低劑量之任一種或兩種分子，潛在地導致副作用較低(或一種或另一種療法之持續時間較短)同時維持效力。咸信本文所提供的新穎組合將是針對於糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常之有效治療。
相應地，本發明提供一種治療糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之本發明之澱粉素受體促效劑及有效量之另外藥劑。
相應地，本發明列舉新穎化合物(肽)，該等化合物(肽)促效澱粉素受體且具有以下性質中之一者或多者：(1)有效降低食物攝取量及體重；(2)葡萄糖及胰島素降低；(3)與普蘭林肽相比，免疫原性風險降低及低顫動風險；(4)與普蘭林肽相比，大大地延長半衰期。本發明揭示的化合物之延長之半衰期將使得能夠每週一次給藥此等化合物以用於療法中。
本發明之一個實施例為一種化合物，其包含：Xaa 1-C-Xaa 3-TATCAT-Xaa 10-Xaa 11-Xaa 12-AE-Xaa 15-LVRSS-Xaa 21-Xaa 22-FGP-Xaa 26-LPPTEVGSNTY-NH 2，其中Xaa 1為K或γE；Xaa 3為E、N或G；Xaa 10為G或Q；Xaa 11為Orn或K；Xaa 12為L或αMeL；Xaa 15為αMeF或F；Xaa 21為N或H；Xaa 22為NMeD、NMeN或N；Xaa 26為I或K或其醫藥上可接受之鹽。(SEQ ID NO: 14)。視需要，該等包含SEQ ID NO: 14之化合物進一步包含另外元件以延長此化合物之時間作用特性。此等另外元件包括具有或沒有連接子且在序列中之任何適宜位置處之免疫球蛋白之Fc部分、免疫球蛋白之Fc部分之片段、人類血清白蛋白(HSA)、VHH (重鏈抗體之可變域)之變異體、奈米抗體、人類血清白蛋白之片段、C 20單酸、C 20二酸、及聚乙二醇(PEG)部分或其他類型之高分子量聚合物。較佳地，另外元件視需要經連接子附接至化合物上的離胺酸。此外，在本文所揭示的任何實施例中，除了已經存在的經附接或連接至肽序列並延長時間作用特性之任何元件之外，或作為現有元件的替代，澱粉素促效劑肽及包含澱粉素促效劑肽之化合物可進一步包含此類元件。
在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，Xaa 26為離胺酸。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸(若存在的話)經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸(若存在的話)經如下式的連接子附接至脂肪酸：AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸(若存在的話)經如下式的連接子附接至脂肪酸：γE-AEEA 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸(若存在的話)經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-AEEA-CO-(CH 2) 18-CO 2H。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之其他實施例中，在位置26處的離胺酸(若存在的話)經由此項技術中已知的另一連接子附接至脂肪酸。此外，在本文所揭示的任何實施例中，澱粉素促效劑肽及包含澱粉素促效劑肽之化合物可包含如本文式的附接脂肪酸之另一連接子。
在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，Xaa 1為離胺酸。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，在位置1處的離胺酸(若存在的話)經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之其他實施例中，在位置1處的離胺酸(若存在的話)經由此項技術中已知的另一連接子附接至脂肪酸。
在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一些實施例中，於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在雙硫鍵。在包含SEQ ID NO: 14之化合物之一個較佳實施例中，於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋。
本文實施例中之一者包含以下序列： γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 1)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 1)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物I的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeN及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物I；SEQ ID NO: 1
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 1至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 1至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
在包含SEQ ID NO: 1之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸經連接子附接至脂肪酸。在包含SEQ ID NO: 1之化合物之一個較佳實施例中，在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
本文一個實施例包含以下序列： γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 2)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 2)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物II的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中肽鍵使用其側鏈羧酸在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeN、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物II；SEQ ID NO: 2
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 2至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 2至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列： γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 3)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 3)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物III的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物III；SEQ ID NO: 3
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 3至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與化合物III (SEQ ID NO: 3)至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
在包含SEQ ID NO: 3之化合物之一些實施例中，在位置26處的離胺酸經連接子附接至脂肪酸。在包含SEQ ID NO: 3之化合物之一個較佳實施例中，在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
本文一個實施例包含以下序列： γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 4)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 4)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物IV的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物IV；SEQ ID NO: 4
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 4至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 4至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：KCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 5)。本文之一個替代實施例由以下序列組成：KCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 5)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物V的描繪，但不包括在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物V；SEQ ID NO: 5
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 5至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 5至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
在包含SEQ ID NO: 5之化合物之一些實施例中，在位置1處的離胺酸經連接子附接至脂肪酸。在包含SEQ ID NO: 5之化合物之一個較佳實施例中，在位置1處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
本文一個實施例包含以下序列：KCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置1處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 6)。本文之一個替代實施例由以下序列組成：KCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置1處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 6)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物VI的描繪，但不包括在位置1處的離胺酸、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VI；SEQ ID NO: 6
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 6至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與化合物VI (SEQ ID NO: 6)至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：KCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 7)。本文之一個替代實施例由以下序列組成：KCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2(SEQ ID NO: 7)。以下是化合物VII的描繪，但不包括在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置12處的αMeL及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VII；SEQ ID NO: 7
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 7至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 7至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
在包含SEQ ID NO: 7之化合物之一些實施例中，在位置1處的離胺酸經附接至脂肪酸連接部分。在包含SEQ ID NO: 7之化合物之一個較佳實施例中，在位置1處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
本文一個實施例包含以下序列：KCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置1處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 8)。本文之一個替代實施例由以下序列組成：KCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置1處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 8)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物VIII的描繪，但不包括在位置1處的離胺酸、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置12處的αMeL及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VIII；SEQ ID NO: 8
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 8至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 8至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 9)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 9) 以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物IX的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物IX；SEQ ID NO: 9
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 9至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 9至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：γE-AEEA 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 10)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：γE-AEEA 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 10)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物X的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物X；SEQ ID NO: 10
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 10至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 10至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-AEEA-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 11)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-AEEA-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 11)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物XI的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物XI；SEQ ID NO: 11
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 11至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 11至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：γE-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 12)。一個替代實施例由以下序列組成：γE-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經如下式的連接子附接至脂肪酸：AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 12)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物XII的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的鳥胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物12；SEQ ID NO: 12
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 12至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 12至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本文一個實施例包含以下序列：γE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：γE 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 13)。本文一個替代實施例由以下序列組成：γE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2，其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋，且其中該在位置26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：γE 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H (SEQ ID NO: 13)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼之化合物XIII的描繪，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的鳥胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物13：SEQ ID NO: 13
或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 13至少約90%至約99%之序列相似性。或者，該化合物可具有與SEQ ID NO: 13至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之序列相似性。
本發明提供由SEQ ID NO: 1組成之化合物、由SEQ ID NO: 2組成之化合物、由SEQ ID NO: 3組成之化合物、由SEQ ID NO: 4組成之化合物、由SEQ ID NO: 5組成之化合物、由SEQ ID NO: 6組成之化合物、由SEQ ID NO: 7組成之化合物、由SEQ ID NO: 8組成之化合物、由SEQ ID NO: 9組成之化合物、由SEQ ID NO: 10組成之化合物、由SEQ ID NO: 11組成之化合物、由SEQ ID NO: 12組成之化合物、及/或由SEQ ID NO: 13組成之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。本發明亦提供一種醫藥組合物，其含有包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、及一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含由SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14組成之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、及一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
本發明進一步提供包含SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25之化合物或其醫藥上可接受之鹽。在另一個實施例中，本發明提供由SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25組成之化合物或其醫藥上可接受之鹽。較佳地，SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25之化合物包含於在位置2與7處的半胱胺酸之間的雙硫鍵或硫縮醛橋。更佳地，包含SEQ ID NO: 22、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 24、SEQ ID NO: 25之化合物具有於在位置2與7處的半胱胺酸之間的硫縮醛橋且附接至脂肪酸連接部分。較佳地，該脂肪酸部分經附接至離胺酸。
本發明提供一種治療患者之糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH之方法，該方法包括對有需要的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物。本發明進一步提供一種降低食物攝取量、降低體重、降低血糖、降低HbA1c及/或降低三酸甘油酯之方法，該方法包括對有需要的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物。較佳地，本發明提供一種治療患者之糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH之方法，該方法包括對有需要的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或包含其之醫藥組合物。更佳地，本發明提供一種治療患者之糖尿病之方法，該方法包括對有需要的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或包含該等化合物之醫藥組合物。或者，本發明提供一種治療患者之肥胖之方法，該方法包括對有需要的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或包含該等化合物之醫藥組合物。
本申請案提供包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於療法中。本申請案進一步提供包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於治療糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH。本申請案亦提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於療法(治療糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH)中。更佳地，本申請案提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於治療糖尿病。或者，本申請案提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於治療肥胖。或者，本申請案提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於治療血脂異常。或者，本申請案提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之醫藥組合物，其用於治療NASH。
本申請案提供包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之組合物，其用於降低食物攝取量、降低體重、降低血糖、降低HbA1c及/或降低三酸甘油酯。更佳地，本申請案提供包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽、或包含其之組合物，其用於降低食物攝取量、降低體重、降低血糖、降低HbA1c及/或降低三酸甘油酯。
本發明進一步提供一種包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽於製造用於治療糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH之藥物之用途。較佳地，本發明進一步提供一種包含SEQ ID NO: 2之化合物於製造用於治療糖尿病、肥胖、血脂異常及/或NASH之藥物之用途。
本發明進一步提供一種包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽於製造降低食物攝取量、降低體重、降低血糖、降低HbA1c及/或降低三酸甘油酯之藥物之用途。較佳地，本發明進一步提供一種包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽於製造降低食物攝取量、降低體重、降低血糖、降低HbA1c及/或降低三酸甘油酯之藥物之用途。
本申請案依35 U.S.C. §119(e)主張2021年3月3日申請之美國臨時申請案序號63/155,894之權益；該案之揭示內容係以引用之方式併入本文中。
除非另外定義，否則本文所用的所有技術及科學術語具有與熟習本發明所屬技術者通常所理解相同的含義。儘管類似於或等效於彼等本文所述者之任何方法及材料可用於實踐或測試澱粉素促效劑肽、醫藥組合物及方法，但本文描述較佳方法及材料。
此外，除非上下文清楚地要求存在一個及僅一個要素，否則以不定冠詞「一(a)」或「一個(an)」提及一個要素時不排除存在超過一個要素之可能性。因此，不定冠詞「一(a)」或「一個(an)」通常意指「至少一個」。
如本文所用，「約」意指在諸如例如規定濃度、長度、分子量、pH、序列相似性、時間框、溫度、體積等一個值或數個值之統計上有意義之範圍內。此一值或範圍可在某一數量級內，通常在給定值或範圍之20%內，更通常在給定值或範圍之10%內，且甚至更通常在給定值或範圍之5%內。以「約」包含的容許變量將取決於所研究的特定系統，且熟習此項技術者可容易明瞭。
如本文所用且提及一或多個受體時，「活性」、「活化(activate)」、「活化(activating)」及類似用詞意指化合物(諸如本文肽)結合至受體處(等)並在受體處誘導反應之能力，如使用此項技術中已知的檢定(諸如下文所述的活體外檢定)測得。
如本文所用術語「胺基酸」意指天然生成之胺基酸及非編碼胺基酸。如此項技術中已知，從化學品觀點來看，胺基酸為特徵係存在一或多個胺基及一或多個羧酸基且可含有其他官能團之分子。此外，胺基酸通常使用標準單字母代碼(例如L=白胺酸)以及天然胺基酸之α-甲基取代之殘基(例如α-甲基白胺酸、或αMeL、及α-甲基***酸、或αMeF)及某些其他非編碼胺基酸諸如「γE」、「NMeN」、「NMeD」、「Orn」及類似者來描繪。本發明之非編碼胺基酸之結構顯示如下： 。
如本文所用，「γE」意指γ-麩胺酸(其中該肽鍵使用側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)。如本文所用，「Orn」意指L-鳥胺酸。如本文所用，「αMeL」意指α-甲基-L-白胺酸。如本文所用，「αMeF」意指α-甲基-L-***酸。如本文所用，「NMeN」意指 N-甲基-天冬醯胺酸及「NMeD」意指 N-甲基-天冬胺酸。
如本文所用，「AEEA」意指2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]乙酸。結構顯示如下： 。
如本文所用，「澱粉素促效劑肽」意指化合物諸如合成肽或多肽，其活化標靶受體且誘發藉由天然促效劑誘發的針對於該受體之至少一種活體內或活體外效應。
如本文所用，「長期體重管理」意指在目前或先前已表徵為具有肥胖的人中維持體重損失之方法，作為減少熱量飲食及增加身體活動之輔佐。
術語「糖尿病」係指其中身體產生或回應於激素胰島素之能力受損從而導致碳水化合物之異常代謝及血液及尿液中葡萄糖含量升高之疾病。如本文所用，術語糖尿病可指影響身體處理血糖或葡萄糖之方式之慢性病狀，例如2型糖尿病(T2DM)；其中胰臟產生少量或不產生胰島素之慢性病狀，例如1型糖尿病(T1DM)；其中血糖高，但高不足以成為2型糖尿病之病狀，例如前期糖尿病(pre-diabetes)；影響孕婦之高血糖的形式，例如妊娠糖尿病。
術語「血脂異常」係指脂蛋白代謝之病症，包括脂蛋白過過度產生或缺乏。血脂異常可藉由血液中總膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)膽固醇及三酸甘油酯濃度之升高、及/或高密度脂蛋白(HDL)濃度之降低表現。血脂異常可與糖尿病相關或無關而發展。
如本文所用，「脂肪酸」由偶數個碳原子之直鏈組成，沿著該鏈之長度具有氫原子且在鏈的一端(單酸)或兩端(二酸)具有羧基(-COOH)。在一個較佳實施例中，「脂肪酸」部分為C 20二酸。
如本文所用，「硫縮醛橋」係指硫縮醛基之有機合成以官能上再橋接肽結構內的雙硫鍵。下文顯示具有亞甲基***於兩個硫原之間之硫縮醛橋(-S-CH 2-S-)。
術語「治療(treatment)」或「治療(treating)」如本文所用係指對具有指示澱粉素受體肽促效劑投與之病狀的患者出於對抗或緩解病狀之症狀及併發症之目的之管理及照護。治療包括對有需要的患者投與本發明揭示之化合物之化合物或含有該化合物之醫藥組合物以預防症狀或併發症之發作、緩解症狀或併發症、或消除疾病、病狀或病症。較佳地，治療包括對有需要的患者投與本發明之化合物或含有該化合物之醫藥組合物以導致體重的淨損失、食物攝取量的降低、血糖含量的降低、HbA1c的降低及/或三酸甘油酯含量的降低。待治療的患者為哺乳動物，且較佳為人類。
如本文所用，術語「有效量」意指本文一或多種化合物之量或劑量，於單次或多次劑量投與至有需要的個體後，在處於診斷或治療的此一個體中提供所需效應(亦即，可產生個體之病狀之臨床上可測量之差異，諸如例如體重的淨損失、食物攝取量的降低、血糖含量的降低、HbA1c的降低及/或三酸甘油酯含量的降低。)。有效量可由熟習此項技術者藉由使用已知技術且藉由觀測到在類似情況下獲得的結果來輕易地證實。在確定個體之有效量中，考慮許多因素，包括但不限於哺乳動物物種、其體型、年齡及一般健康、所涉及的特定疾病或病症、累及程度或疾病或病症之嚴重度、個體之反應、所投與的特定化合物、投與方式、所投與製劑之生物利用度特徵、所選擇的給藥方案、合併用藥之用法及其他相關情況。較佳地，較佳地，投與至有需要之患者的有效量之本發明之化合物或含有該化合物之醫藥組合物將導致體重的淨損失、食物攝取量的降低、血糖含量的降低、HbA1c的降低及/或三酸甘油酯含量的降低。劑量可包括較高初始負載劑量，接著是較低劑量。本文所提供的化合物之有效劑量可在0.05 µg/kg與5000 µg/kg之間或為0.01 nmol/kg至1000 nmol/kg。
如本文所用，「半衰期」或「t 1/2」意指一定量之化合物諸如本文肽的一半藉由生物過程從個體之流體或其他生理空間諸如血清或血漿移除所花費的時間。或者，t 1/2亦可意指一定量之此種肽損失其藥理學、生理學、或放射學活性的一半所花費的時間。
如本文所用，「半數最大有效濃度」或「EC 50」意指導致檢定終點諸如劑量-反應曲線之50%活化/刺激之化合物濃度。
如本文所用，「長效」意指本文組合物之結合親和力及活性持續一段長於天然肽或蛋白質之時間，從而允許至少頻率低至每天一次或甚至每週三次、每週兩次、每週一次或每月投與。可使用已知藥物動力學測試方法諸如彼等描述於以下實例中者測定本文化合物之時間作用特性。
術語「NASH」係指非酒精性脂肪肝炎，亦稱脂肪肝病。「NASH」亦指由於肝臟中脂肪堆積引起之肝臟發炎及損傷。「NASH」亦指非酒精性脂肪肝病(「NAFLD」)之亞型。在一些實施例中，「NASH」可與「NAFLD」同義。
術語「肥胖」如本文所用係指涉及增加健康問題風險之過量身體脂肪之病症。術語「肥胖」亦指高於針對給定高度被認為是健康重量者之重量。術語「肥胖」亦指大於30.0之BMI或27.0或更大之BMI(超重)，具有至少一種體重相關共病病狀(例如高血壓、2型糖尿病或血脂異常)。
如本文所用，身體質量指數(BMI)係指人的體重(單位為公斤)除以身高(單位為米)的平方。
如本文所用，「患者」及「個體」可互換使用，且意指哺乳動物，且較佳為人類。在某些實施例中，該患者(較佳為人類)進一步以將從促效澱粉素及抑鈣素受體的化合物之投與獲益之疾病、病症或病狀表徵。
在一些實施例中，包含本發明揭示的化合物之醫藥組合物可經口投與至需要此種治療的患者。包含本發明揭示的化合物之醫藥組合物可以非經腸方式投與至需要此種治療的患者。非經腸投與可藉由皮下、肌肉內或靜脈內注射藉助於注射器(視需要為筆式(pen-like)注射器)或機械驅動注射器進行。或者，非經腸投與可藉助於輸注泵進行。本發明揭示的化合物之實施例提供適合於投與至患者之醫藥組合物，包括對與需要的個體投與治療有效量之本發明揭示的化合物及一或多種醫藥上可接受之賦形劑。可藉由任何多種技術使用用於此項技術中熟知的藥品之習知賦形劑來製備此類醫藥組合物。(Remington’s Pharmaceutical Sciences，第21版，University of the Sciences in Philadelphia，Philadelphia，PA，USA (2006))。
如本文所用，「序列相似性」意指生物化合物之兩個或更多個核酸序列或胺基酸序列之定量屬性，諸如例如於兩個或更多個序列之整個長度或比較窗口內之一致性。序列相似性可藉由(1)百分比一致性或(2)百分比相似性測定。百分比一致性測定兩種生物化合物之間相同殘基之百分比除以最短序列之長度，而百分比相似性測定一致性且此外在評估中包括序列空位及殘基相似性。用於確定序列相似性之方法及演算法係此項技術中熟知的且因此不需要在本文中詳盡描述。相同核苷酸或胺基酸位置之指定百分比為至少約75%、80%、85%、86、76、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99%或更高。
本發明揭示的化合物可與可用於誘導體重損失、治療糖尿病、與糖尿病有關的病狀、肥胖及/或長期體重管理、血脂異常及/或NASH之一或多種另外治療劑同時、單獨或依序組合使用。可與所主張化合物組合的另外治療劑之非限制性實例包括：胰島素或胰島素類似物；雙胍；磺醯脲；噻唑烷二酮；二肽基肽酶-4 (「DPP-4」)抑制劑；鈉依賴性葡萄糖轉運子(SGLT2)抑制劑；腸促胰島素化合物諸如升糖素樣肽-1 (GLP-1)或GLP-1類似物、胃抑制多肽(GIP)或GIP類似物、調酸素或調酸素類似物；生長分化因子-15 (GDF15)促效劑化合物；肽YY (PYY)類似物；雙重GIP/GLP-1促效劑；Gcg/GIP/GLP-1三重促效劑(triagonists) (升糖素、GIP及GLP-1之三重促效劑)；或任何前述藥劑之組合。所主張化合物及另外治療劑可透過相同遞送途徑及裝置諸如單一丸劑、膠囊、錠劑或可注射調配物共同投與；或在相同時間以單獨遞送裝置或途徑單獨投與；或依序投與。
本發明之另一個實施例係一種治療有需要的患者之病狀之方法，該病狀選自由以下組成之群：糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常，該方法包括對該患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與有效量之腸促胰島素或腸促胰島素類似物之組合。較佳地，本發明之一個實施例係一種治療有需要的患者之病狀之方法，該病狀選自由以下組成之群：糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常，該方法包括對該患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽與有效量之腸促胰島素或腸促胰島素類似物。
在本發明之一個特定實施例中係一種治療需要此種治療的患者之病狀之方法，該病狀選自由以下組成之群：糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常，該方法包括對該患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與GLP-1促效劑之組合。在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含化合物XVII (SEQ ID NO: 18)之GLP-1促效劑之組合。在本發明之另一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含化合物XVII (SEQ ID NO: 18)之GLP-1促效劑之組合。
在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與調酸素之類似物之組合。在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含化合物XVIII (SEQ ID NO: 19)之調酸素之類似物之組合。在本發明之另一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含化合物XVIII (SEQ ID NO: 19)之調酸素之類似物之組合。
在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與升糖素、GIP及GLP-1之三重促效劑之組合。在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與升糖素、GIP及GLP-1 (包括化合物XIX (SEQ ID NO: 20))之三重促效劑之組合。在本發明之另一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽與升糖素、GIP及GLP-1 (包括化合物XIX (SEQ ID NO: 20))之三重促效劑之組合。
在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與雙重GIP/GLP-1促效劑之組合。在本發明之一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含SEQ ID NO: 21之雙重GIP/GLP-1促效劑之組合。在本發明之另一個特定實施例中係一種治療患有糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常的患者之方法，該方法包括對需要此種治療的患者投與有效量之包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽與包含SEQ ID NO: 21之雙重GIP/GLP-1促效劑之組合。
本發明的另一實施例是包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13或SEQ ID NO: 14的化合物或其醫藥上可接受的鹽，以用於與腸促胰島素或腸促胰島素類似物單獨、同時或依序組合使用，以用於治療糖尿病、肥胖症、NASH及/或血脂異常。較佳地，本發明之一個實施例係包含SEQ ID NO: 2之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於與腸促胰島素或腸促胰島素類似物單獨、同時或依序組合以治療糖尿病、肥胖、NASH及/或血脂異常。更佳地，該腸促胰島素或腸促胰島素類似物為包含SEQ ID NO: 21之雙重GIP/GLP-1促效劑。
本文所用的某些縮寫定義如下：「ACN」係指乙腈；「AMY1R」係指澱粉素受體1；「cAMP」係指環狀腺苷單磷酸；「CT」係指抑鈣素；「DCM」係指二氯甲烷；「DIEA」係指二異丙基乙胺；「DMF」係指 N, N-二甲基甲醯胺；「DMSO」係指二甲基亞碸；「DODT」係指2,2’-(伸乙基二氧基)二乙烷硫醇；「FBS」係指胎牛血清；「Fmoc」係指茀基甲基氧基羰基；「GDF15」係指生長分化因子15；「GPCR」係指G-蛋白偶聯受體；「HEPES」係指4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸；「HTRF」係指均相時間解析螢光；「IBMX」係指1-甲基-3-異丁基黃嘌呤；「MEM」係指最小必需培養基；「Mtt」係指4-甲基三苯甲基；「NASH」係指非酒精性脂肪肝病；「NEAA」係指非必需胺基酸；「PyAOP」係指六氟磷酸(7-氮雜苯并***-1-基氧基)三吡咯啶基鏻；「RP-HPLC」係指逆相高壓液體層析；「TCEP」係指參(2-羧乙基)膦鹽酸鹽；「TFA」係指三氟乙酸；及「TRIS」係指參(羥甲基)胺基甲烷。 實例 1 ：化合物 I 及 II 之製備及純化
根據以下步驟來製備化合物I及化合物II。首先，使用茀基甲基氧基羰基(Fmoc)/第三丁基(t-Bu)化學品於Symphony 12-通道多路肽合成儀(Protein Technologies，Inc. Tucson，AZ)上合成化合物I (SEQ ID NO: 1)。
聚苯乙烯Rink Amide MBHA樹脂LL樹脂(Novabiochem，sub：0.35 meq/g，100至200篩目，目錄號855045)用於0.13 mmol規模的合成。使用標準側鏈保護基。Boc-Glu-OtBu用於位置1。Fmoc-Lys(Mtt)-OH用於在位置26處的離胺酸。在各偶聯步驟(2 x 7分鐘)之前使用含在DMF中之20%哌啶移除Fmoc基。所有胺基酸偶聯在60℃下使用等莫耳比之Fmoc胺基酸(0.3M)、二異丙基碳二亞胺(0.9M)及Oxyma (0.9M)在7.7倍莫耳過量超過理論肽負載下進行30分鐘。在60℃下分別進行在位置15處的αMeF及在位置22處的NMeN之後的胺基酸偶聯3小時及6小時。對於化合物I (SEQ ID NO: 1)，此時(在添加脂肪酸-連接部分以產生化合物II之程序後所描述的條件)用裂解混合物(cleavage cocktail)處理樹脂。以下為使用標準單字母胺基酸代碼的化合物I (SEQ ID NO: 1)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeN及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物I；SEQ ID NO: 1
然後，用DCM徹底洗滌樹脂6次以移除殘餘DMF。使用含在DCM中之30%六氟異丙醇(Oakwood Chemical)兩次處理(2 x 40-分鐘處理)，從肽樹脂選擇性移除在位置26處的離胺酸上的Mtt保護基。 脂肪酸-連接部分之後續附接藉由偶聯Fmoc-麩胺酸α-第三丁酯(Fmoc-Glu-OtBu，Ark Pharm, Inc.)、單-OtBu-二十烷酸(WuXi AppTec，Shanghai, China)來達成。3倍過量的試劑(AA: PyAOP: DIEA=1: 1:1 mol/mol)用於各1-小時長的偶聯。
在合成完成後，用DCM洗滌肽樹脂，且然後徹底風乾。在室溫下用10 mL裂解混合物(TFA:DODT:TIS:H 2O = 89:3:3:5 v/v)處理無水樹脂2小時。過濾出樹脂，各用2 mL純淨TFA洗滌兩次，且用4倍冷***(-20℃)處理已合併的濾液以沉澱粗製肽。然後以3500 rpm離心肽/醚懸浮液2分鐘以形成固體小球，丟棄懸浮液，且再用醚研磨固體小球兩次。為了製備硫縮醛橋，將風乾後的小球溶解於5 mL 20 mM磷酸鉀緩衝液及3 mL ACN中。一旦完全溶解，在良好攪拌下，添加含在H 2O中之TCEP (30 µM，5當量)、二碘甲烷(8當量)及三乙胺(10當量)且讓其攪拌5至30分鐘。使用LCMS以監測反應，該反應通常在5分鐘內完成。在反應完成後，將1 mL H 2O w / 0.1% TFA添加至該混合物以及6 mL乙酸。若溶液為渾濁，則會根據需要添加更多ACN。
藉由RP-HPLC於Phenomenex PhenylHexyl管柱(5 µm，100A，250x21.2 mm，部件號：00G-4257-P0-AX)上利用線性梯度使用100%乙腈及0.1% TFA/水緩衝液體系，純化粗製肽。使用分析型RP-HPLC利用Waters SymmetryShield RP18管柱(3.5 um，6x100 mm，部件186000179)，評估肽之純度且池化標準為＞95%。發現化合物II (SEQ ID NO: 2)之主要池純度為＞98.4%。最終主要產物池之後續凍乾產生經凍乾之肽TFA鹽。化合物I (SEQ ID NO: 1)之分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1315.2；計算值[M+3H] 3+=1315.5；實測值MW (avg)=3942.6；計算值MW (avg)=3943.4)。化合物II (SEQ ID NO: 2)之分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1509.5；計算值[M+3H] 3+=1509.7；實測值MW (avg)=4525.5；計算值MW (avg)=4526.1)。以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物II (SEQ ID NO: 2)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeN、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物II；SEQ ID NO: 2
類似於彼等描述於上文且為熟習此項技術者已知之製程之製程可用於合成肽主鏈、結合脂肪酸-連接部分、檢查純度及確認本文所述的本化合物之分子量。 實例 2 ：化合物 III 及 IV 之製備及純化
化合物III及IV根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物III (SEQ ID NO: 3)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物III；SEQ ID NO: 3 化合物III (SEQ ID NO: 3)之分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1314.9；計算值[M+3H] 3+=1315.8；實測值MW (avg)=3941.7；計算值MW (avg)=3944.4)。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物IV (SEQ ID NO: 4)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物IV；SEQ ID NO: 4 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1509.7；計算值[M+3H] 3+=1510.0；實測值MW (avg)=4526.1；計算值MW (avg)=4527.1)。 實例 3 ：化合物 V 及 VI 之製備及純化
化合物V及VI係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物V (SEQ ID NO: 5)的示意圖，但不包括在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物V；SEQ ID NO: 5 化合物V (SEQ ID NO: 5)之分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1314.9；計算值[M+3H] 3+=1315.5；實測值MW (avg)=3941.7；計算值MW (avg)=3943.4)。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物VI (SEQ ID NO: 6)的示意圖，但不包括在位置1處的離胺酸、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置15處的αMeF、在位置22處的NMeD及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VI；SEQ ID NO: 6 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1509.4；計算值[M+3H] 3+=1509.7；實測值MW (avg)=4525.2；計算值MW (avg)=4526.1)。 實例 4 ：化合物 VII 及 VIII 之製備及純化
化合物VII及VIII係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物VII (SEQ ID NO: 7)的示意圖，但不包括在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置12處的αMeL及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VII；SEQ ID NO: 7 化合物VII (SEQ ID NO: 7)之分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1317.9；計算值[M+3H] 3+=1318.1；實測值MW (avg)=3950.7；計算值MW (avg)=3951.4)。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物VIII (SEQ ID NO: 8)的示意圖，但不包括在位置1處的離胺酸、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置12處的αMeL及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物VIII；SEQ ID NO: 8 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1512.2；計算值[M+3H] 3+=1512.4；實測值MW (avg)=4533.6；計算值MW (avg)=4534.2)。 實例 5 ：化合物 IX 之製備及純化
化合物IX係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物IX (SEQ ID NO: 9)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物IX；SEQ ID NO: 9 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1558.3；計算值[M+3H] 3+=1558.8；實測值MW (avg)=4671.9；計算值MW (avg)=4673.3)。 實例 6 ：化合物 X 之製備及純化
化合物X係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物X (SEQ ID NO: 10)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物X；SEQ ID NO: 10 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1558.5；計算值[M+3H] 3+=1558.8；實測值MW (avg)=4672.5；計算值MW (avg)=4673.3)。 實例 7 ：化合物 XI 之製備及純化
化合物XI係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物XI (SEQ ID NO: 11)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物XI；SEQ ID NO: 11 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1553.2；計算值[M+3H] 3+=1553.4；實測值MW (avg)=4656.6；計算值MW (avg)=4657.2)。 實例 8 ：化合物 XII 之製備及純化
化合物XII係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物XII (SEQ ID NO: 12)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物XII；SEQ ID NO: 12 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1577.4；計算值[M+3H] 3+=1577.8；實測值MW (avg)=4729.2；計算值MW (avg)=4730.3)。 實例 9 ：化合物 XIII 之製備及純化
化合物XIII係根據概述於實例1中之製程來製備。
以下是使用標準單字母胺基酸代碼的化合物XIII (SEQ ID NO: 13)的示意圖，但不包括在位置1處的麩胺酸(γE) (其中該肽鍵使用其側鏈羧酸基在γ位置而不是典型α位置處形成)、在位置2與7處的半胱胺酸、在位置11處的Orn、在位置26處的離胺酸及在位置37處的酪胺酸，其中已擴展此等胺基酸殘基之結構： 化合物XIII；SEQ ID NO: 13 分子量藉由LC/MS測定(實測值：[M+3H] 3+=1481.2；計算值[M+3H] 3+=1481.3；實測值MW (avg)=1440.6；計算值MW (avg)=4441.0)。 雙硫鍵橋製備
為製備雙硫鍵，藉由在燒瓶中將10滴碘溶液(2%碘含於AcOH中)添加至40 mL 20% MeCN/20% AcOH/60%水來製備氧化溶液。另外，藉由將風乾後的肽小球溶解於5 ml AcOH中來製備肽溶液。在攪拌下，將該肽溶液逐滴添加至該氧化溶液。根據需要添加另外碘溶液(2%碘含在AcOH中)以維持燒瓶內的淡黃色溶液。在添加所有肽溶液後，淡棕色/黃色維持5分鐘。藉由將一滴飽和抗壞血酸添加至該氧化溶液來中和額外碘。用0.45 µm過濾器過濾該溶液且該肽準備好進行純化。 實例 10 ：澱粉素促效劑肽之活體外功能活性
AMY1及CT受體為在功能上偶聯至Gαs蛋白之GPCR。此等受體之刺激會導致細胞內cAMP之產生增加，此可使用標準活體外技術偵測到。肽之活體外活性藉由形成於人類AMY1R及CTR過度表現之細胞中之cAMP之量來測量。
人類CT受體在人類膀胱細胞(UM-UC-3，或UMUC3)中於pcDNA表現載體之控制下穩定表現。將UMUC3细胞系培養於補充10% FBS、1%抗生素/抗黴菌溶液、1 mM丙酮酸鈉、1X MEM NEAA、1X GlutaMAX-I之MEM 1X (Meditech Inc.，17-305-CV)中。使用LipofectAMINE 2000轉染試劑(Invitrogen，11668-019)將人類CTa-pcDNA3.1Hygro(+)(T2616) DNA之質粒轉染至UMUC3細胞中。在選擇下20天之後，測定不同純系之mRNA含量以確認hCTR之表現。為了確定過度表現之hCTR細胞之功能，測定回應於鮭魚抑鈣素之細胞內cAMP含量且與各純系中hCTR mRNA之表現進行比較。
藉由進一步轉染人類RAMP1-pCMVpuroPB (T14213)至UMUC3 hCTR純系細胞中來產生人類AMY1R穩定細胞系。在選擇之後，測定不同純系之mRNA含量人類RAMP1以確認人類AMY1R之表現。
將hAMY1R細胞培養於補充10% FBS、1%抗生素/抗黴菌溶液、1 mM丙酮酸鈉、1X MEM NEAA、1X GlutaMAX-I、200 µg/mL潮黴素B及0.4 µg/mL嘌呤黴素之MEM 1X (Corning)中。將該等hCTR細胞培養於缺乏嘌呤黴素之相同培養基中。使經培養之細胞生長至70%匯合率且然後用新鮮培養基培養過夜。
在檢定當天，將10 µL檢定緩衝液(無酚紅MEM (Corning，目錄號17-305-CV)、0.1%酪蛋白、0.5 mM IBMX、5 mM HEPES，pH 7.4)分配至白色聚-D-離胺酸塗佈384孔板(Corning目錄號354661)的各孔中。使用ECHO 聲液體處理器(Beckman)添加(200 nL/孔) 以1:3稀釋系列經稀釋於DMSO中之肽。用TrypLE Express (Gibco)分離經培養之細胞，再懸浮液檢定緩衝液中，且將含有1200個細胞/孔(hCTR)或1500個細胞/孔(hAMY1R)之10 µL分配至各孔中。在室温下培養該等板1小時。
使用HTRF技術(均相時間解析螢光；Cisbio)按照供應商指示定量細胞內cAMP之量。簡言之，在室溫下，將10 µL cAMP-d2結合物及10 µL抗-cAMP-穴狀化合物(cryptate)結合物在裂解緩衝液中與經處理之細胞培養60分鐘。使用Envision板式讀取器(Perkin-Elmer)立即偵測HTRF信號以計算在665至620 nm下螢光之比。使用針對於各實驗產生的cAMP標準曲線，將原始數據轉換為cAMP量(pmol/孔)。從使用1 nM鮭魚CT (Bachem)作為最大值及使用單獨緩衝液作為最小值限定的濃度反應曲線之頂-底範圍，利用四參數邏輯曲線擬合程序(Genedata Screener ®v12.0.4)，計算相對EC 50值。如表1中所示，本申請案之化合物顯示在澱粉素受體處相對於抑鈣素受體之選擇性活性。 表 1. 在澱粉素及抑鈣素受體 處 之功能活性數據之比較
化合物編號 hAMY1R cAMP EC50 (pM，±SE) hCTR cAMP EC50 (pM，±SE)
I 133 ± 12 18000 ± 1080
II 75 ± 12 2340 ± 272
III 156 ± 27 16300 ± 3030
IV 107 ± 16 6140 ± 764
V 139 ± 17 17000 ± 2440
VI 107 ± 15 13200 ± 2230
VII 173 ± 34 11900 ± 1530
VIII 107 ± 20 9690 ± 2010
IX 132 ± 20 18900 ± 3830
X 80 ± 13 14000 ± 3320
XI 38 ± 7.8 10500 ± 2200
XII 113 ± 34 25900 ± 7620
XIII 78 ± 14 9490 ± 1540
XV 43 ± 4.4 2400 ± 402
XVI 393 ± 51 103 ± 20
實例 11 ：澱粉素促效劑肽對 hAMY1 及 hCT 受體之活體外結合親和力
來自人類AMY1R及CTR過度表現之細胞(描述於實例10中)之膜經由標準方法分離且用於結合檢定。如以下針對於化合物測試所述藉由使用相同試劑及緩衝液之飽和結合分析來確定各種受體/放射性配位體相互作用之平衡解離常數(Kd)。針對於用於本研究中之受體製劑測定的Kd值如下：hAMY1R、0.067 nM；人類抑鈣素受體(hCTR)，0.046 nM。 hAMY1R 結合協定
自競爭性放射性配位體結合過濾檢定，測定rAMY、hCT及hAMY促效劑肽之受體結合親和力(Ki)。檢定緩衝液由(單位為mM) 50 HEPES (pH 7.1)、5 MgCl 2、5 KCl、0.2% (w/v)桿菌肽、0.003% (w/v)皂素組成且用於稀釋放射性配位體及膜製劑。在聚苯乙烯96深孔檢定方塊中，在0.1 mL總反應體積中進行結合反應。最初將碘化大鼠澱粉素(ViTrax定製合成；2200 Ci/mmol；125I-rAMY)在檢定緩衝液中稀釋至約50 pM。將測試化合物及非特異性結合(NSB，定義為300 nM rAMY)添加至放射性緩衝液之等分試樣。簡言之，將測試化合物稀釋至200 nM初始濃度，在4倍步驟中在125I-rAMY中連續稀釋，且然後將0.05 ml經稀釋測試化合物、NSB或總結合(定義為純淨125I-rAMY)轉移至96孔聚苯乙烯檢定方塊。結合反應藉由添加0.05 mL經稀釋於檢定緩衝液中之200 µg/mL hAMY1R至放射性來引發。輕輕地渦旋檢定方塊，用石蠟膜密封，且在RT下培養約20小時。在培養完成前三十分鐘，將過濾墊(filter mat) (Perkin Elmer印刷過濾墊，目錄號1450-421)浸泡於由檢定緩衝液減去皂素但補充0.1% (w/v)無脂肪酸牛血清白蛋白(FAF-BSA)及0.5% (v/v)聚伸乙基亞胺(PEI)組成之溶液中。在培養結束時，藉由添加由100 mM NaCl、50 mM TRIS-HCl pH 7.1組成之冰冷淬滅緩衝液將結合的配位體與游離的配位體分離且立即使用以下過濾協定(乾燥時間，7；循環3重複，0；洗滌時間，1；浸泡時間，1；第1次吸清時間，4；洗滌 / 吸清時間，7；第2次吸清，4；空氣壓力2 PSI)，藉由利用TomTec 96孔過濾收穫機之真空過濾經過濾墊來收集。在反應曲線中測試的肽之最終檢定濃度範圍為100 nM至0.00038 nM。 hCTR 結合協定
藉由競爭性放射性配位體結合過濾檢定，測定hCTR膜上rAMY、hCT及hAMY促效劑肽之受體結合親和力(Ki)。檢定程序類似於hAMY1R結合檢定之檢定程序，不同之處為將125I-hCT (ViTrax定製合成；2200 Ci/mmol)用作熱配位體。在0.2 mL總反應體積中用14 pM 125I-hCT及20 µg/ml hCTR膜進行結合反應且培養20小時。在反應曲線中測試的肽之最終檢定濃度範圍為2500 nM至0.00128 nM。如表2中所示，本申請的化合物顯示出在澱粉素受體處相對於抑鈣素受體之選擇性活性。 表 2. 在人類澱粉素及抑鈣素受體 處 之活體外結合 (Ki)
化合物編號 hAMY1R，Ki (nM ± SE) hCTR，Ki (nM ± SE)
II 0.017 ± 0.006 202 ± 45
IV 0.0296 ± 0.0099 665 ± 113
VI 0.0445 ± 0.0082 235 ± 45
VIII 0.0435 ± 0.0072 927 ± 120
XV 0.0196 ± 0.0020 0.256 ± 0.087
XVI 0.701 ± 0.148 0.104 ± 0.043
實例 12 ： 對 於正常大鼠 之 食物攝取量及體重之活體內效應
將來自Envigo RMS (Indianapolis, IN)之雄性史-道二氏大鼠基於標準飼料(chow diet) (2014；Teklad Global，Envigo RMS，Indianapolis, IN)飼養且單獨圈養在具有反轉的12:12小時光照循環(10 AM關燈)之溫度受控設施(72.0°F；22.2℃)中且自由獲取食物及水。在10週齡時，記錄非空腹體重及初始食物重量，且動物經單次皮下注射(SC)投與媒劑或經醯化之肽(1 mL/kg)，接著給藥後4天每天測量體重及食物攝取量。計算體重及食物攝取量對媒劑之分析曲線下面積(AUC)。 表 3 ：在長效澱粉素促效劑肽之單次給藥後史 - 道二氏大鼠中 4 天之體重及食物攝取量變化
化合物編號 劑量 (nmol/kg，SC) Δ體重 (%)* 累積食物攝取量抑制 (%)**
II 0.1 1.8 -4.1
0.3 2.4 -3.7
1 0.5 -18.6
3 -3.3 -37.9
10 -7.4 -57.3
30 -10.1 -69.8
100 -12.9 -77.9
300 -14.9 -84.5
1000 -17.2 -87.1
IV 0.1 1.4 -1.1
0.3 1.8 -2.0
1 0.8 -5.6
3 -2.0 -20.5
10 -5.2 -46.8
30 -9.2 -59.2
100 -11.9 -68.1
300 -14.2 -79.2
1000 -16.4 -82.9
VI 0.1 2.2 2.3
0.3 1.2 -0.4
1 1.2 -0.4
3 -0.9 -23.8
10 -3.6 -36.4
30 -8.3 -58.9
100 -12.7 -73.4
300 -14.1 -76.9
1000 -16.2 -84.6
VIII 0.1 2.0 1.3
0.3 1.6 3.2
1 -1.0 -17.5
3 -3.9 -37.7
10 -7.2 -58.5
30 -10.8 -67.0
100 -13.8 -75.2
300 -13.6 -74.9
1000 -18.9 -84.7
*與未處理的動物(naïve animals)之初始體重相比之給藥後96小時時的平均體重變化。 **與給藥後96小時時的經媒劑處理之動物相比，給藥後96小時時的經肽處理之動物之累積食物攝取量。 實例 13 ： 對 於飲食誘導 之 肥胖大鼠 之 食物攝取量及體重之活體內效應
將來自Envigo RMS (Indianapolis, IN)的14週齡Long Evan雄性大鼠進行高脂肪飲食(40%的熱量來自脂肪，TD.95217；Envigo RMS，Indianapolis, IN)直至35至45週齡。將動物單獨圈養在具有12小時反轉光照/黑暗循環(在10 AM時關燈)之溫度受控設施(75.0°F；23.9℃)中且自由獲取食物及水。記錄體重且使用定量核磁共振分析(ECHO MRI，3–1綜合分析儀；Echo Medical Systems，Houston, TX)來測定身體組成(脂肪質量)，接著隨機分為實驗組(n=5)。每三天(第1天、第4天、第7天、第10天及第13天)皮下注射媒劑或肽(1 mL/kg)對大鼠投與。每天記錄體重且治療結束時(第14天)的變化經計算為相對於治療前體重(第1天)的百分比。在第14天測定身體組成，且從治療前值以公克變化計算得脂肪質量及無脂肪質量(體重 – 脂肪質量)之變化。 表 4 ：飲食誘導 之 肥胖大鼠中利用澱粉素促效劑肽之 2 週研究中之體重變化
化合物編號 劑量 (nmol/kg，SC) Δ體重 (%)* Δ脂肪質量 (g)* Δ無脂肪質量 (g)*
II 1 -7.1 -43.8 -7.5
10 -9.0 -59.6 -5.6
100 -10.7 -61.0 -15.4
IV 1 -4.5 -31.0 -0.2
10 -8.5 -53.5 -6.4
100 -8.9 -52.9 -8.6
VI 1 -3.2 -25.5 1.9
10 -8.8 -51.9 -9.1
100 -9.8 -54.7 -15.2
VIII 1 -6.0 -36.6 -4.7
10 -9.0 -54.3 -7.2
100 -11.5 -56.4 -26.9
*與未處理的動物之初始體重相比，2週時的平均體重或脂肪質量或無脂肪質量的變化。 實例 14 ：史 - 道二氏雄性大鼠中之藥物動力學
在對史-道二氏雄性大鼠單次皮下投與30 nmol/kg後，評估化合物II (SEQ ID NO: 2)、化合物IV (SEQ ID NO: 4)、化合物VI (SEQ ID NO: 6)及化合物VIII (SEQ ID NO: 8)之藥物動力學。在SC給藥後1小時、3小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時、96小時時收集血液樣本。所得個別血漿濃度用於計算藥物動力學參數。使用測量肽之完整質量的合格LC/MS方法來測定肽血漿(K 3EDTA)濃度。從血漿提取每種肽及類似物作為內部標準。高解析度Thermo Q-Exactive用於LC/MS偵測。平均藥物動力學參數顯示於表5中。 表 5. 對史 - 道二氏雄性大鼠單次皮下投與 30 nmol/kg 後肽之平均藥物動力學參數。
化合物編號 T 1/2(小時) T max(小時) C max/D (kg*nmol/L/nmol) AUCINF/D (hr*kg*nmol/L/nmol) Cl/F (mL/hr/kg)
II 52.8±6.6 24.0±0.0 4.9±0.9 473±63.8 2.1±0.3
IV 66.9±27.6 20.0±6.9 5.5±2.1 551±27.1 1.8±0.1
VI 54.0±8.4 24.0±0.0 5.4±0.5 506±26.6 2.0±0.1
VIII 36.4±2.93 16.0±6.9 3.8±0.4 270±22.4 3.7±0.3
縮寫：T 1/2= 半衰期，T max= 達至最大濃度之時間，C max/D = 最大血漿濃度除以劑量，AUCINF/D = AUCinf除以劑量，CL/F = 清除率/生物利用度。備註：數據為平均值，其中n=3/組。 實例 15 ：雄性食蟹獼猴中之藥物動力學
在對雄性食蟹獼猴單次皮下投與20 nmol/kg後，評估化合物II (SEQ ID NO: 2)、化合物IV (SEQ ID NO: 4)、化合物VI (SEQ ID NO: 6)及化合物VIII (SEQ ID NO: 8)之藥物動力學。在SC給藥後1小時、3小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時、120小時、168小時、240小時、336小時、408小時、504小時時收集血液樣本。所得個別血漿濃度用於計算藥物動力學參數。使用測量肽之完整質量的合格LC/MS方法來測定肽血漿(K 3EDTA)濃度。從血漿提取每種肽及類似物作為內部標準。 高解析度Thermo Q-Exactive用於LC/MS偵測。平均藥物動力學參數顯示於表6中。 表 6. 在對食蟹獼猴單次皮下投與 20 nmol/kg 後肽之平均藥物動力學參數。
化合物編號 T 1/2(hr) T max(hr) C max/D (kg*nmol/L/nmol) AUCINF/D (hr*kg*nmol/L/nmol) Cl/F (mL/hr/kg)
II 159±7.7 64.0±13.9 6.7±1.0 1752±313 0.58±0.1
IV 177±13.5 48.0±24.0 6.2±1.0 1607±104 0.62±0.04
VI 85.0±5.8 40.0±13.9 4.9±0.7 794±27 1.26±0.04
VIII 62.0±4.7 28.0±18.3 7.2±0.3 942±67 1.07±0.1
縮寫：T 1/2= 半衰期，T max= 達至最大濃度之時間，C max/D = 最大血漿濃度除以劑量，AUCINF/D = AUCinf除以劑量，CL/F = 清除率/生物利用度。備註：數據為平均值，其中n=3/組。 實例 16 ：免疫原性風險評估 樹突細胞 (DC) 內部化檢定
此檢定評估人類DC內部化所測試抗體之能力。用IL-4及GM-CSF培養CD14+細胞且分化為未成熟的DC。用偵測試劑(Fab-QSY7-TAMRA)以1:1比，預培養所測試抗體、同型對照或陽性對照以形成複合體且然後添加至培養物。培養細胞一天。於內部化及裂解後，藉由流動式細胞測量術偵測陽性TAMRA信號，且使用IgG1-EN同型對照及抗-CXCR抗體計算標準化內部化指數。 MAPPS 檢定 (MHC 相關肽蛋白質 組 )
MAPPS剖析經所測試分子處理之人類樹突細胞上之MHC-II呈現肽。藉由與IL-4及GM-CSF一起培養來培養從正常人類供體之PBMC分離的CD14+細胞且分化為未成熟的DC。在第4天，培養基改用包含所測試分子之新鮮培養基替換。在第5天，添加LPS以將細胞轉化為成熟DC。在第6天，將細胞於具有蛋白酶抑制劑之RIPA緩衝液中裂解。使用經偶聯至鏈黴親和素珠粒之生物素化抗-MHC-II抗體進行MHC-II複合體之免疫沉澱。洗脫結合的複合體然後過濾。藉由質譜儀分析分離的MHC-II肽。肽識別藉由在無酵素情況下使用搜尋演算法之內部蛋白質組學管線及牛/人類資料庫與附屬於資料庫之測試序列來產生。KNIME工作流程用於處理樣本之識別檔案。將從測試物品識別的肽針對於測試分子之母序列進行比對。該輸出用於確定展示來自測試分子之區域之MHC-II肽之供體之百分比。在MAPP檢定中測試化合物II、化合物IV、化合物VI、化合物VIII (代表US 9,023789之化合物) (下文中稱為「化合物‘789」)及普蘭林肽。在檢定中，化合物II、化合物IV、化合物VI、化合物VIII未顯示展示於MHC-II複合體上之肽。化合物‘789展示跨越MHC-II複合體上的殘基8至23之肽簇。普蘭林肽顯示展示於MHC-II複合體上之以總跨越殘基1至34的兩個肽簇。 電腦模擬 TCEM (T 細胞暴露 之 基序 ) 分析
此分析評估藉由MAPPS識別的特異性肽簇將活化CD4+ T細胞之可能性。將含有非生殖系殘基的MAPPS識別肽序列輸入至ImmunoEpitope資料庫(IEDB)分析資源MHCII結合預測頁上。選擇IEDB建議的預測方法。該預測考慮到27個最常見的HLA-DR、-DP及-DQ對偶基因以涵蓋大部分的人類人口。將長度等於或多於15個殘基的各輸入序列分為重疊15聚體偏位1個胺基酸以跨越整個序列。對於各肽，百分位數排位藉由肽分數對選自SWISSPROT資料庫之500萬個隨機15聚體之分數之比較來產生。位於暫存器之推定P-1、P2、P3、P5、P7及P8位置處的胺基酸產生TCEM，且風險基於此等位置處存在非生殖系殘基來限定。非生殖系殘基及核結合至多個對偶基因之可能性以圖形再現(graphic rendering)報告且考慮免疫原性風險評估。 MS 血清結合
此檢定評估測試候選物對人類血清蛋白之脫靶結合。將所測試抗體塗覆至Immulon 4 HBX微量滴定板上。於阻斷之後，添加人類血清且培養過夜。洗滌該板，且將所結合的蛋白質洗脫、還原、烷基化及消化。藉由質譜儀分析肽。藉由在胰蛋白酶酵素特異性情況下使用搜尋演算法之內部蛋白質組管線及人類資料庫與隨附之測試分子序列，產生肽識別。藉由內部蛋白質組工具(Chrom-Alignment，Metaconsense及Quant)定量離子且在JMP中使用單因子分析(Oneway analysis)/每對、司圖登特t-檢定(Student’s t test)平臺來分析。使用JMP進行基於log2auc之離子之分析：按照每個離子擬合Y乘以X/比較平均值/所有對、塔基HSD。 T 細胞增殖檢定
此檢定評估所測試抗體或所測試MAPPS肽藉由誘導細胞增殖來活化CD4+ T細胞之能力。製備CD8+ T細胞耗竭PBMC且用CFSE標記。用培養基對照、鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH；陽性臨床基準對照)、所測試抗體或所測試MAPPS肽測試各樣本。將培養物培養7天。在第7天，藉由流動式細胞測量術分析樣本。 預先存在的反應性 (ACE AssayFormat)
此檢定評估未處理的正常人類血清(NHS)中預先存在的抗所測試分子之抗體(ADA)之存在。將經稀釋之NHS於經塗佈經生物素化之所測試分子之Pierce鏈黴親和素板上培養過夜。在第二天，將所捕獲的結合蛋白質進行酸洗脫，硬塗佈至中規模(MSD)板，且用生物素標記之分子及釕標記之鏈黴親和素之組合來偵測。若存在抗藥物抗體，則其將結合經標記之藥物且所得信號稱為Tier 1信號(表示為電化學發光)。在Tier 2中藉由在偵測步驟中添加過量的未標記之所測試分子證實此信號，此導致Tier 1信號的抑制。預先存在的抗藥物抗體之存在表示為Tier 2抑制之第90百分位數量級。Tier 2抑制之第90百分位數是評估Tier 1反應性之特異性量級之統計工具。此第90百分位數用於在就ADA風險方面將分子排位。 表 7. 免疫原性風險評估總結
檢定 普蘭林肽 化合物‘789 化合物II 化合物IV 化合物VI 化合物VIII
MAPPS 檢定10名具有不同MHC之供體 高風險 10/10供體展示肽 高風險 5/10供體展示肽 低風險 未展示肽 低風險 未展示肽 低風險 未展示肽 低風險 未展示肽
T 細胞增殖檢定：蛋白質7至10名具有不同MHC之供體 高風險 (7/7陽性供體) 低風險(1/7陽性供體) 低風險(0/9陽性供體) 低風險(0/9陽性供體) 低風險 (1/9陽性供體) 低風險 (1/9陽性供體)
預先存在的反應性第90百分位數T2抑制 ＞ 50名供體 N/A 58.0% 48.8% 33.2% 43.9% 51.4%
縮寫：ACE = 酸捕獲洗脫；ADA = 抗藥物抗體；CDR = 互補決定區；DC = 樹突細胞；H1 = VH CDR1；H2 = VH CDR2；H3 = VH CDR3；L1 = VL CDR1；L2 = VL CDR2；MAPPs = MHC相關肽蛋白質組；MHC = 主要組織相容性複合體；MS = 質譜法；T2 = Tier 2；TCEM = T細胞暴露之基序；VH = 可變重鏈；VL = 可變輕鏈；VHFR3 = 可變重鏈框架3 實例 17 ：飲食誘導 之 肥胖 (DIO) 大鼠中化合物 II 與其他腸促胰島素化合物之組合之活體內 功效
進行本研究以研究DIO大鼠中化合物II當與其他腸促胰島素化合物(包括GLP-1促效劑(化合物XVII)、調酸素類似物(化合物XVIII)、及升糖素、GLP-1及GIP之三重促效劑(化合物XIX))組合投與時針對於糖尿病及/或肥胖病狀之效應。在以下研究中使用飲食誘導之肥胖(DIO)雄性Long Evans (Envigo)大鼠，自從Lilly (TD95217；Teklad，Madison，WI)抵達維持處於富含卡路里飲食。將動物單獨圈養在具有12小時照明/黑暗循環(開燈2200)之溫度受控(24℃)設施中且自由獲取食物(TD95217)及水。
將大鼠根據其體重隨機分組，因此各實驗組動物將具有相似體重。體重在529至823公克之範圍內。
每組包含五隻大鼠。將媒劑及化合物II (1 nmol/kg)溶解於媒劑(20 mM Tris-HCl pH8 + 0.02% PS80)中且在開始黑暗循環之前每3天藉由皮下(SC)注射(1 mL/kg)至隨意餵養的DIO大鼠30至90分鐘來投與持續14天。在第1天、第4天、第7天、第10天及第13天進行SC注射。在整個研究中每天測量體重及食物攝取量。藉由減去第一次注射分子前相同動物之體重來計算絕對體重變化。
在本研究結束時，收集血液以測量血糖及血漿胰島素。藉由AccuChek血糖計(Roche，Indianapolis, IN)測量血糖。藉由ELISA (MSD，Rockville, MD)測量胰島素。
所有數據以每組5隻動物之平均值 ± SEM呈現。使用單因子ANOVA，接著使用塔基多重比較檢驗(Tukey’s multiple comparison test)進行統計分析以比較治療組與媒劑組或彼此比較。在p＜0.05下識別出顯著差異。 表 8 ：化合物 II 與及不與化合物 XVII 、化合物 XVIII 或化合物 XIX 組合之 對 於體重及累積食物攝取 量 之效應。
治療組* 體重變化(g)* 累積食物攝取量(g)***
媒劑 (10 ml/kg) -3.42±6.10 212.08±16.84
化合物II (1 nmol/kg) -35.90±3.95* 149.94±10.88*
化合物XVII (10 nmol/kg) -54.20±6.52* 150.04±5.71*
化合物XVIII (10 nmol/kg) -50.24±6.36* 165.86±7.45*
化合物XIX (3 nmol/kg) -43.28±2.54* 157.50±10.63*
化合物II + 化合物XVII -80.68±6.44* + 98.60±16.46*
化合物II + 化合物XVIII -59.96±6.87* # 137.78±14.66*
化合物II + 化合物XIX -63.22±10.11* # 118.84±11.99*
*在第1天、第4天、第7天、第10天及第13天每三天皮下投與治療。**每天進行體重測量。體重變化為從第1天至第14天的差異，以公克表示。***累積食物攝取量為整個14天治療期所消耗的食物總量。藉由單因子ANOVA接著藉由塔基來進行統計分析。*p＜0.05，與媒劑組相比； #p＜0.05，與化合物XVII組、化合物XVIII組或化合物XIX組中任一組相比； +p＜0.05，與化合物II相比。
針對化合物II與化合物XVII、化合物XVIII或化合物XIX之組合之重量損失大於單獨化合物II。 SEQ ID NO: 1 ：化合物 IγE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 SEQ ID NO: 2 ：化合物 IIγE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H之脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 3 ：化合物 IIIγE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 SEQ ID NO: 4 ：化合物 IVγE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H之脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 5 ：化合物 VKCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 SEQ ID NO: 6 化合物 VIKCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置1處的離胺酸經附接至如式(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 7 ：化合物 VIIKCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 SEQ ID NO: 8 ：化合物 VIIIKCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置1處的離胺酸經附接至如式(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 9 ：化合物 IXγE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 10 ：化合物 XγE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中於在位置26處的離胺酸經附接至如式γE-AEEA 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 11 ：化合物 XIγE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式(γE) 2-AEEA-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 12 ：化合物 XIIγE-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式AEEA 2-γE-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 13 ：化合物 XIIIγE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在硫縮醛橋 其中該在位置26處的離胺酸經附接至如式γE 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H的脂肪酸連接部分 SEQ ID NO: 14 ：化合物 XIVXaa 1-C-Xaa 3-TATCAT-Xaa 10-Xaa 11-Xaa 12-AE-Xaa 15-LVRSS-Xaa 21-Xaa 22-FGP-Xaa 26-LPPTEVGSNTY-NH 2。其中 Xaa 1為K或γE Xaa 3為E、N或G Xaa 10為G或Q； Xaa 11為Orn或K； Xaa 12為L或αMeL Xaa 15為αMeF或F Xaa 21為N或H Xaa 22為NMeD、NMeN或N Xaa 26為I或K SEQ ID NO: 15 ：化合物 XV ；普蘭林肽KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在雙硫鍵 SEQ ID NO: 16 ：化合物 XVI ； hCTCGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAP-NH 2其中於在位置1與7處的半胱胺酸之間存在雙硫鍵 SEQ ID NO: 17 ： hAMYKCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY-NH 2其中於在位置2與7處的半胱胺酸之間存在雙硫鍵 SEQ ID NO: 18 化合物 XVIIH-Aib-EGTFTSDVSSYLEGQAAK((2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基) 2-(γGlu)-CO-(CH 2) 16-CO 2H)EFIAWLVRGRG SEQ ID NO: 19 化合物 XVIIIH-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKKAK((2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基) 2-(γGlu)-CO-(CH 2) 18-CO 2H)EFVEWLLEGGPSSG-NH 2 SEQ ID NO: 20 化合物 XIXY-Aib-QGTFTSDYSI-αMeL-LDKK((2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基)-(γGlu)-CO-(CH 2) 18-CO 2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH 2 SEQ ID NO: 21YX 1EGTFTSDYSIX 2LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS 其中X 1為Aib；X 2為Aib；在位置20處的K透過經(2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基) 2-(γGlu) 1-CO-(CH 2) 18-CO 2H結合至K側鏈之ε-胺基而化學修飾；且該C端胺基酸經醯胺化為C端一級醯胺。 SEQ ID NO: 22 ：化合物 I 主鏈γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2 SEQ ID NO: 23 ：化合物 III 主鏈γE-CNTATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH 2 SEQ ID NO: 24 ：化合物 V 主鏈KCETATCATG-Orn-LAE-αMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH 2 SEQ ID NO: 25 ：化合物 VII 主鏈KCETATCATG-Orn-αMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH 2 
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          Val Arg Ser Ser Asn Xaa Phe Gly Pro Lys Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
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          Val Arg Ser Ser Asn Xaa Phe Gly Pro Lys Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
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                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
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          Val Arg Ser Ser His Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
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          Val Arg Ser Ser His Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
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          Gly Ser Asn Thr Tyr 
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          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (15)..(15)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置15處的Xaa為α-甲基-Phe或Phe]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (21)..(21)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置21處的Xaa為Asn或His]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (22)..(22)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置22處的Xaa為N-甲基-Asp、N-甲基-Asn或Asn]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (26)..(26)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置26處的Xaa為Ile或Lys]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  C端經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  14]]>
          Xaa Cys Xaa Thr Ala Thr Cys Ala Thr Xaa Xaa Xaa Ala Glu Xaa Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ser Ser Xaa Xaa Phe Gly Pro Xaa Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  15]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  DISULFID]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(7)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tyr經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  15]]>
          Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  16]]>
          <![CDATA[<211>  32]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  DISULFID]]>
          <![CDATA[<222>  (1)..(7)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (32)..(32)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置32處的Pro經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  16]]>
          Cys Gly Asn Leu Ser Thr Cys Met Leu Gly Thr Tyr Thr Gln Asp Phe 
          1               5                   10                  15      
          Asn Lys Phe His Thr Phe Pro Gln Thr Ala Ile Gly Val Gly Ala Pro 
                      20                  25                  30          
          <![CDATA[<210>  17]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  DISULFID]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(7)]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tyr經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  17]]>
          Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Ala Ile Leu Ser Ser Thr Asn Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  18]]>
          <![CDATA[<211>  31]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(2)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置2處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (20)..(2]]>0)
          <![CDATA[<223>  在位置20處的離胺酸經附接至如式(2-[2-(]]>2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基)2-(γ-Glu)-CO-(CH2)16-CO2H之脂肪酸連接部分
          <![CDATA[<400>  18]]>
          His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 
          1               5                   10                  15      
          Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Arg Gly Arg Gly 
                      20                  25                  30      
          <![CDATA[<210>  19]]>
          <![CDATA[<211>  34]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(2)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置2處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (20)..(20)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置20處的Lys藉由Lys側鏈之ε-胺基與(2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基)2-(γ-Glu)-CO-(CH2)18-CO2H之結合而化學修飾]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (34)..(34)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置34處的Gly經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  19]]>
          His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu 
          1               5                   10                  15      
          Lys Lys Ala Lys Glu Phe Val Glu Trp Leu Leu Glu Gly Gly Pro Ser 
                      20                  25                  30          
          Ser Gly 
          <![CDATA[<210>  20]]>
          <![CDATA[<211>  39]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(2)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置2處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (13)..(13)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置13處的Xaa為α-甲基-Leu]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (17)..(17)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置17處的Lys藉由Lys側鏈之ε-胺基與(2-[2-(2-胺基-乙氧基)-乙氧基]-乙醯基)-(γ-Glu)-CO-(CH2]]>)18-CO2H之結合而化學修飾
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (20)..(20)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置20處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (39)..(39)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置39處的Ser經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  20]]>
          Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Xaa Leu Asp Lys 
          1               5                   10                  15      
          Lys Ala Gln Xaa Ala Phe Ile Glu Tyr Leu Leu Glu Gly Gly Pro Ser 
                      20                  25                  30          
          Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser 
                  35                  
          <![CDATA[<210>  21]]>
          <![CDATA[<211> ]]> 39
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (2)..(2)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置2處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (13)..(13)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置13處的Xaa為Aib]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (20)..(20)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置20處的K透過經(2-[2-(2-胺基-乙氧基)-]]>乙氧基]-乙醯基)2-(γ-Glu)1-CO-(CH2)18-CO2H結合至K側鏈之ε-胺基而化學修飾
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (39)..(39)]]>
          <![CDATA[<223>  絲胺酸經醯胺化為C端一級醯胺]]>
          <![CDATA[<400>  21]]>
          Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Xaa Leu Asp Lys 
          1               5                   10                  15      
          Ile Ala Gln Lys Ala Phe Val Gln Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser 
                      20                  25                  30          
          Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser 
                  35                  
          <![CDATA[<210>  22]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (1)..(1]]>)
          <![CDATA[<223>  在位置1處的Xaa為γ-Glu]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (11)..(11)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置11處的Xaa為Orn]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (15)..(15)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置15處的Xaa為α-Me-Phe]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (22)..(22)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置22處的Xaa為N-Me-Asn]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tys經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  22]]>
          Xaa Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gly Xaa Leu Ala Glu Xaa Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ser Ser Asn Xaa Phe Gly Pro Lys Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  23]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (1)..(1)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置1處的Xaa為γ-Glu]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (11)..(11)]]>
          <![CDATA[<223>  Xaa在位置11 is Orn]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (15)..(15)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置15處的Xaa為α-Me-Phe]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (22)..(22)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置22處的X]]>aa為N-Me-Asp
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tys經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  23]]>
          Xaa Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gly Xaa Leu Ala Glu Xaa Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ser Ser Asn Xaa Phe Gly Pro Lys Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  24]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (11)..(11)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置11處的Xaa為Orn]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (15)..(15)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置15處的Xaa為α-Me-Phe]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (22)..(22)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置22處的Xaa為N-Me-Asp]]>
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          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tys經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  24]]>
          Lys Cys Glu Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gly Xaa Leu Ala Glu Xaa Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ser Ser Asn Xaa Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35          
          <![CDATA[<210>  25]]>
          <![CDATA[<211>  37]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人造序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  合成構築體]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (11)..(11)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置11處的Xaa為Orn]]>
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          <![CDATA[<221>  MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222>  (12)..(12)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置12處的Xaa為α-Me-Leu]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221>  MOD_RES]]>
          <![CDATA[<222>  (37)..(37)]]>
          <![CDATA[<223>  在位置37處的Tys經醯胺化]]>
          <![CDATA[<400>  25]]>
          Lys Cys Glu Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gly Xaa Xaa Ala Glu Phe Leu 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ser Ser His Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Glu Val 
                      20                  25                  30          
          Gly Ser Asn Thr Tyr 
                  35
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
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Claims (30)

  1. 一種化合物，其包含： Xaa 1-C-Xaa 3-TATCAT-Xaa 10-Xaa 11-Xaa 12-AE-Xaa 15-LVRSS-Xaa 21-Xaa 22-FGP-Xaa 26-LPPTEVGSNTY (SEQ ID NO: 14)，其中： Xaa 1為K或γE； Xaa 3為E、N或G； Xaa 10為G或Q； Xaa 11為Orn或K； Xaa 12為L或αMeL； Xaa 15為αMeF或F； Xaa 21為N或H； Xaa 22為NMeD、NMeN或N；且 Xaa 26為I或K， 或其醫藥上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其中 Xaa 1為γE； Xaa 3為N； Xaa 10為G； Xaa 11為Orn； Xaa 12為L； Xaa 15為αMeF； Xaa 21為N； Xaa 22為NMeN；且 Xaa 26為K (SEQ ID NO: 22)， 或其醫藥上可接受之鹽。
  3. 如請求項1之化合物，其中 Xaa 1為γE； Xaa 3為N； Xaa 10為G； Xaa 11為Orn； Xaa 12為L； Xaa 15為αMeF； Xaa 21為N； Xaa 22為NMeD；且 Xaa 26為K (SEQ ID NO: 23)， 或其醫藥上可接受之鹽。
  4. 如請求項2或3之化合物，其中該在Xaa 26處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
  5. 如請求項1之化合物，其中 Xaa 1為K； Xaa 3為E； Xaa 10為G； Xaa 11為Orn； Xaa 12為L； Xaa 15為αMeF； Xaa 21為N； Xaa 22為NMeD；且 Xaa 26為I (SEQ ID NO: 24)， 或其醫藥上可接受之鹽。
  6. 如請求項1之化合物，其中 Xaa 1為K； Xaa 3為E； Xaa 10為G； Xaa 11為Orn； Xaa 12為αMeL； Xaa 15為F； Xaa 21為H； Xaa 22為N；且 Xaa 26為I (SEQ ID NO: 25)， 或其醫藥上可接受之鹽。
  7. 如請求項5或6之化合物，其中該在Xaa 1處的離胺酸經附接至如下式的脂肪酸連接部分：(γE) 2-CO-(CH 2) 18-CO 2H。
  8. 如前述請求項中任一項之化合物，其中介於位置2與7處的該等半胱胺酸之間存在硫縮醛橋。
  9. 如請求項1之化合物，其中該化合物選自由SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12及SEQ ID NO: 13或其醫藥鹽組成之群。
  10. 一種由SEQ ID NO: 2組成之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  11. 一種由SEQ ID NO: 4組成之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  12. 一種由SEQ ID NO: 6組成之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  13. 一種由SEQ ID NO: 8組成之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  14. 一種治療有需要患者之2型糖尿病之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  15. 一種治療有需要患者之肥胖之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  16. 一種治療有需要患者之血脂異常之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  17. 一種治療有需要患者之NASH之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  18. 一種降低有需要患者之食物攝取量之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  19. 一種降低有需要患者之體重之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  20. 一種降低有需要患者之血糖之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  21. 一種降低有需要患者之三酸甘油酯之方法，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  22. 如請求項13至21中任一項之方法，其中該化合物係每週投與一次。
  23. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，及一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
  24. 一種治療有需要患者之病狀之方法，該病狀選自由以下組成之群：臨床或臨床前糖尿病、肥胖、NASH及血脂異常，該方法包括對該患者投與有效量之如請求項1之化合物與有效量之腸促胰島素或腸促胰島素類似物之組合。
  25. 如請求項24之治療方法，其中該化合物選自由SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6及SEQ ID NO: 8或其醫藥鹽組成之群，且其中該腸促胰島素或腸促胰島素類似物為SEQ ID NO: 21。
  26. 如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於療法中。
  27. 如請求項23之醫藥組合物，其用於療法中。
  28. 如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療選自由2型糖尿病、肥胖、血脂異常及NASH組成之群之病狀。
  29. 如請求項23之醫藥組合物，其用於治療選自由2型糖尿病、肥胖、血脂異常及NASH組成之群之病狀。
  30. 一種如請求項1至13中任一項之化合物之用途，其用於製造用於治療選自由2型糖尿病、肥胖、血脂異常及NASH組成之群之病狀之藥物。
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