TW202321255A - 經取代之三環醯胺及其類似物的合成 - Google Patents

Abstract

本揭示內容包括用於製備某些經取代之三環醯胺的合成方法，所述經取代之三環醯胺可用於在受試者中治療、減輕及/或預防B型肝炎病毒(HBV)及/或D型肝炎病毒(HDV)感染。

Description

經取代之三環醯胺及其類似物的合成

根據35 U.S.C. § 119(e)，本申請要求2021年7月19日提交的美國臨時專利申請號63/223,297的優先權，在此其藉由引用以其整體併入本文。

本揭示係關於經取代之三環醯胺及其類似物的合成。

B型肝炎是世界上最流行的疾病之一，被美國過敏和傳染病研究所(NIAID)列為高度優先感興趣的領域。儘管大多數人會在急性症狀後解決感染，但是大約30%的病例會變成慢性病。據估計，全世界有3.5-4億人患有慢性B型肝炎，每年導致50-100萬人死亡，這主要是由於肝細胞癌、肝硬化及/或其他併發症的發展。

目前已批准用於治療慢性B型肝炎的藥物數量有限，包括抑制α-干擾素的兩種製劑(標準和聚乙二醇化的)和抑制HBV DNA聚合酶的五種核苷/核苷酸類似物(拉米夫定(lamivudine)、阿德福韋(adefovir)、恩替卡韋(entecavir)、替比夫定(telbivudine)和替諾福韋(tenofovir))。目前，一線治療的選擇是恩替卡韋、替諾福韋及/或聚乙二醇干擾素α-2a。然而，聚乙二醇干擾素α-2a僅在三分之一的治療患者中達到了理想的血清學里程碑，並且經常伴有嚴重的副作用。恩替卡韋和替諾福韋是有效的HBV抑制劑，但需要長期或可能終生施用以持續抑制HBV複製，並可能由於耐藥病毒的出現而最終失敗。因此，迫切需要為慢性B型肝炎引入新型、安全和有效的療法。

HBV是屬於肝病毒科( Hepadnaviridae)的非致細胞病變型嗜肝DNA病毒。前基因組(Pregenomic，pg)RNA是HBV DNA反轉錄複製的模板。pg RNA與病毒DNA聚合酶一起衣殼化為核衣殼對於隨後的病毒DNA合成至關重要。抑制pg RNA衣殼化可能會阻止HBV複製，並為HBV治療提供新的治療方法。衣殼抑制劑通過直接或間接抑制衣殼蛋白的表現及/或功能發揮作用：例如，它可以抑制衣殼裝配、誘導非衣殼聚合物形成、促進過量的衣殼裝配或衣殼裝配方向錯誤、影響衣殼穩定及/或抑制RNA衣殼化。衣殼抑制劑還可以藉由在複製過程中的一個或多個下游事件中抑制衣殼功能來發揮作用，這些事件比如但不限於病毒DNA合成、鬆弛環狀DNA(rcDNA)轉運入細胞核中、共價閉合環狀DNA(cccDNA)的形成、病毒成熟、出芽及/或釋放。

在臨床上，抑制pg RNA衣殼化或更普遍地抑制核衣殼裝配可能提供某些治療優勢。在一方面，抑制pg RNA衣殼化可藉由向無法耐受或無法從當前藥物中獲益的患者亞群提供選擇來補充當前的藥物。在另一方面，基於其獨特的抗病毒機制，對pg RNA衣殼化的抑制可有效地抵抗對當前可用的DNA聚合酶抑制劑具有抗性的HBV變體。在另一方面，pg RNA衣殼化抑制劑與DNA聚合酶抑制劑的聯合治療可協同抑制HBV複製並防止耐藥性的出現，因此為慢性B型肝炎感染提供了更有效的治療。

D型肝炎病毒(HDV)是僅在HBV存在時才能繁殖的一種小的環狀包膜RNA病毒。具體而言，HDV需要HBV表面抗原蛋白自我繁殖。與單獨感染HBV相比，感染HBV和HDV會導致更嚴重的併發症。這些併發症包括在急性感染中經歷肝衰竭的可能性更大，並迅速發展為肝硬化，並且增加在慢性感染中發展為肝癌的機會。與B型肝炎結合時，D型肝炎在所有肝炎感染中死亡率最高。HDV的傳播途徑與HBV相似。感染主要限於處於HBV感染的高風險人群，特別是注射吸毒者和接受凝血因子濃縮物的人群。

當前，沒有有效的可用於治療急性或慢性D型肝炎的抗病毒療法。每週給予干擾素-α，持續12至18個月是D型肝炎的唯一許可療法。對該療法的反應有限，因為僅約四分之一的患者在治療後6個月無法檢測到血清HDV RNA。

在臨床上，抑制pg RNA衣殼化或更普遍地抑制核衣殼裝配可能為B型肝炎及/或D型肝炎的治療提供某些治療優勢。在一方面，抑制pg RNA衣殼化可以通過向無法耐受或無法從當前藥物中獲益的患者亞群提供選擇來補充當前的藥物。在另一方面，基於其獨特的抗病毒機制，對pg RNA衣殼化的抑制可有效地抵抗對當前可用的DNA聚合酶抑制劑具有抗性的HBV及/或HDV變體。在另一方面，pg RNA衣殼化抑制劑與DNA聚合酶抑制劑的聯合治療可以協同抑制HBV及/或HDV複製並防止耐藥性的出現，因此為慢性B型肝炎及/或D型肝炎感染提供了更有效的治療。

因此，本領域中需要鑒定可用於在受試者中治療及/或預防HBV及/或HDV感染的新型化合物。在某些實施方式中，新型化合物抑制HBV及/或HDV核衣殼裝配。在其他實施方式中，新型化合物可用於HBV及/或HBV-HDV感染的患者、有被HBV及/或HBV-HDV感染的風險的患者及/或感染了耐藥性HBV及/或HDV的患者中。本領域還需要確定允許大規模批量製備這種化合物的可放大合成方案。本發明解決了這一需求。

在一方面，本揭示內容包括製備( S)- N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1-基)-5,6-二氟- N-甲基-1 H-吲哚-2-甲醯胺( X)、或其鹽、溶劑化物、前藥、同位素標記衍生物、立體異構物(比如在非限制性實例中，鏡像異構物或其任意混合物，比如在非限制性實例中，其鏡像異構物的任意比例的混合物)及/或互變異構物及任意混合物的方法，

( X)。

在另一方面中，式( X)的化合物、或其鹽、溶劑化物、前藥、同位素標記衍生物、立體異構物及/或互變異構物及任意混合物可用於在受試者中治療、減輕及/或預防B型肝炎(HBV)及/或D型肝炎(HDV)感染和相關病症。

在某些方面，本揭示內容涉及發現可放大的合成路線，該路線允許可重複的多克合成可用於治療、減輕及/或預防受試者中的B型肝炎病毒(HBV)及/或D型肝炎病毒(HDV)感染和相關病症的某些含經取代之三環醯胺的化合物。在某些實施方式中，本揭示內容的化合物是病毒衣殼抑制劑。

2021年5月13日提交的PCT國際申請號PCT/US2021/032155和2020年5月14日提交的美國臨時申請號63/024,559的公開內容通過引用以其整體併入本文。 定義

如本文所使用的，以下每個術語在本節中具有與其相關的含義。除非另有定義，否則本文使用的所有技術和科學術語通常具有與本揭示內容所屬領域的普通技術人員通常所理解的相同的含義。通常，本文所用的命名法以及動物藥理學、藥物科學，分離科學和有機化學中的實驗室程序是本領域眾所周知的和常用的。應當理解，只要本教導仍然可操作，步驟的順序或用於執行某些動作的順序是不重要的。章節標題的任何使用均旨在幫助閱讀文件，而不應理解為限制性的；與章節標題相關的信息可能發生在該特定章節之內或之外。該文件中引用的所有出版物、專利和專利文件都通過引用以其整體併入本文，如同通過引用將其單獨併入。

在本申請中，在敘述元素或組分被包括在所列舉的元素或組分的列表中及/或選自所列舉的元素或組分的列表的情況下，應當理解，該元素或組分可以是所列舉的元素或組分中的任一個並且可以選自所列舉的元件或組分中的兩個或更多個。

在本文描述的方法中，可以以任何順序執行動作，除非明確地陳述了時間或操作序列。此外，指定的動作可以同時執行，除非明確的聲明語言陳述了它們是分開執行的。例如，可以在單個操作中同時進行要求保護的X動作和要求保護的Y動作，並且所得過程將落入要求保護的過程的字面範圍內。

在本文中，除非上下文另外明確指出，否則術語「一」、「一種」或「該」用於包括一個或多個。除非另有說明，否則術語「或」用於表示非排他性的「或」。陳述「A和B中的至少一個」或「A或B中的至少一個」具有與「A、B或A和B」相同的含義。

如本文中所使用的，術語「約」將被本領域普通技術人員理解，並且將在使用它的上下文中在某種程度上變化。如本文中所使用的，當「約」指代可測量值比如量、時間持續時間等時，旨在涵蓋與指定值具有±20%、±10%、±5%、±1%或±0.1%的變化，因為這樣的變化適合執行所公開的方法。

如本文所使用的，除非另有說明，否則單獨或與其他術語組合使用的術語「烯基」係指具有規定數目的碳原子的穩定的單不飽和或二不飽和直鏈或支鏈烴基。實例包括乙烯基、丙烯基(或烯丙基)、丁烯基(crotyl)、異戊烯基、丁二烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基以及更高的同系物和異構物。代表烯烴的官能團的實例為-CH ₂-CH=CH ₂。

如本文所使用的，除非另有說明，否則單獨或與其他術語組合使用的術語「烷氧基」係指經由氧原子連接到分子的其餘部分的如本文其他地方所定義的具有指定數目的碳原子的烷基，諸如例如甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基(或異丙氧基)和更高的同系物和異構物。具體實例是(C ₁-C ₃)烷氧基，比如，但不限於乙氧基和甲氧基。

如本文所使用的，除非另有說明，術語「烷基」本身或作為另一取代基的一部分係指具有指定數目的碳原子(即，C ₁-C ₁₀表示1至10個碳原子)的直鏈或支鏈烴，並且包括直鏈、支鏈或環狀取代基。實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、三級丁基、戊基、新戊基、己基和環丙基甲基。具體實施方式是(C ₁-C ₆)烷基，比如，但不限於乙基、甲基、異丙基、異丁基、正戊基、正己基和環丙基甲基。

如本文所使用的，除非另有說明，否則單獨或與其他術語組合使用的術語「炔基」係指具有規定數目的碳原子的具有碳-碳三鍵的穩定的直鏈或支鏈烴基。非限制性實例包括乙炔基和丙炔基，以及更高的同系物和異構物。術語「炔丙基」係指以-CH ₂-C≡CH為例的基團。術語「均炔丙基(homopropargylic)」係指以-CH ₂CH ₂-C≡CH為例的基團。

如本文所使用的，術語「芳族」係指具有一個或多個多不飽和環並且具有芳族特徵，即具有(4n+2)個離域的π (pi)電子(其中‘n’是整數)的碳環或雜環。

如本文所使用的，除非另有說明，否則單獨或與其他術語組合使用的術語「芳基」係指含有一個或多個環(通常為一個、兩個或三個環)的碳環芳族系統，其中這些環可以以側鏈方式連接在一起，比如聯苯，或者可以稠合，比如萘。實例包括苯基、蒽基和萘基。芳基還包括例如與一個或多個飽和或部分飽和的碳環(例如，雙環[4.2.0]八-1,3,5-三烯基或二氫茚基)稠合的苯環或萘環，其可以在芳環及/或飽和或部分飽和的環的一個或多個碳原子處被取代。

如本文所使用的，術語「芳基-(C ₁-C ₆)烷基」係指其中1至6個碳亞烷基鏈連接至芳基的官能團，例如，-CH ₂CH ₂-苯基或-CH ₂-苯基(或苄基)。具體實例是芳基-CH ₂-和芳基-CH(CH ₃)-。術語「經取代之芳基-(C ₁-C ₆)烷基」係指其中芳基被取代的芳基-(C ₁-C ₆)烷基官能團。具體實例是經取代之芳基(CH ₂)-。類似地，術語「雜芳基-(C ₁-C ₆)烷基」係指其中1至3個碳亞烷基鏈連接至雜芳基的官能團，例如，-CH ₂CH ₂-吡啶基。具體實例是雜芳基-(CH ₂)-。術語「經取代之雜芳基-(C ₁-C ₆)烷基」係指其中雜芳基被取代的雜芳基-(C ₁-C ₆)烷基官能團。具體實例是經取代之雜芳基-(CH ₂)-。

如本文所使用的，除非另有說明，術語「環烷基」本身或作為另一取代基的一部分係指具有指定數目的碳原子的環鏈烴(即，C ₃-C ₆係指包括由3至6個碳原子組成的環基團的環狀基團)並且包括直鏈、支鏈或環狀取代基。(C ₃‑C ₆)環烷基的實例是環丙基、環丁基、環戊基和環己基。環烷基環可以任選地被取代。環烷基的非限制性實例包括：環丙基、2-甲基-環丙基、環丙烯基、環丁基、2,3-二羥基環丁基、環丁烯基、環戊基、環戊烯基、環戊二烯基、環己基、環己烯基、環庚基、環辛基、十氫萘基、2,5-二甲基環戊基、3,5-二氯環己基、4-羥基環己基、3,3,5-三甲基環己-1-基、八氫戊烯基、八氫-1 H-茚基、3a,4,5,6,7,7a-六氫-3 H-茚-4-基、十氫薁基(azulenyl)；雙環[6.2.0]癸基、十氫萘基和十二氫-1 H-芴基。術語「環烷基」還包括雙環烴環，其非限制性實例包括雙環[2.1.1]己烷基、雙環[2.2.1]庚烷基、雙環[3.1.1]庚烷基、1,3-二甲基[2.2.1]庚烷-2-基、雙環[2.2.2]辛烷基和雙環[3.3.3]十一烷醯基。

如本文所使用的，「疾病」是受試者的健康狀態，其中受試者不能維持體內穩態，並且如果疾病沒有得到改善，則受試者的健康繼續惡化。

如本文所使用的，受試者中的「病症」是其中受試者能夠維持穩態的健康狀態，但是其中受試者的健康狀態比沒有病症時的健康狀態不利。如果不及時治療，病症不一定會導致受試者的健康狀態進一步下降。

如本文所使用的，術語「鹵離子」係指帶有負電荷的鹵素原子。鹵化物陰離子是氟離子(F ⁻)、氯離子(Cl ⁻)、溴離子(Br ⁻)和碘離子(I ⁻)。

如本文所使用的，除非另有說明，術語「鹵基」或「鹵素」單獨或作為另一取代基的一部分係指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。

如本文所使用的，除非另有說明，術語「雜烯基」本身或與另一術語組合係指由規定數目的碳原子和選自O、N和S的一個或兩個雜原子組成的穩定的直鏈或支鏈單不飽和或二不飽和烴基，並且其中氮原子和硫原子可任選地被氧化，和氮雜原子可任選地被季銨化。可以連續放置至多兩個雜原子。實例包括-CH=CH-O-CH ₃、-CH=CH-CH ₂-OH、-CH ₂-CH=N-OCH ₃、-CH=CH-N(CH ₃)-CH ₃和-CH ₂-CH=CH-CH ₂-SH。

如本文所使用的，除非另有說明，術語「雜烷基」本身或與另一術語組合係指由規定數目的碳原子和選自O、N和S的一個或兩個雜原子組成的穩定的直鏈或支鏈烷基，並且其中氮原子和硫原子可以任選地被氧化，和氮雜原子可以任選地被季銨化。雜原子(一個或多個)可位於雜烷基的任何位置，包括在雜烷基的其餘部分和其連接的片段之間，以及連接至雜烷基中最遠端的碳原子。實例包括：-OCH ₂CH ₂CH ₃、-CH ₂CH ₂CH ₂OH、-CH ₂CH ₂NHCH ₃、-CH ₂SCH ₂CH ₃和-CH ₂CH ₂S(=O)CH ₃。至多兩個雜原子可以是連續的，諸如例如-CH ₂NH-OCH ₃或-CH ₂CH ₂SSCH ₃。

如本文所使用的，術語「雜芳基」或「雜芳族」係指具有芳族特性的雜環。多環雜芳基可以包括一個或多個部分飽和的環。實例包括四氫喹啉和2，3-二氫苯并呋喃基。

如本文所使用的，除非另有說明，否則術語「雜環」或「雜環基」或「雜環的」本身或作為另一取代基的一部分係指包括碳原子和選自N、O和S的至少一個雜原子的未取代或經取代的、穩定的單環或多環雜環系統，並且其中氮和硫雜原子可以任選地被氧化，和氮原子可以任選地被季銨化。除非另有說明，雜環系統可以連接在提供穩定結構的任何雜原子或碳原子上。雜環本質上可以是芳族的或非芳族的。在某些實施方式中，雜環是雜芳基。

非芳族雜環的實例包括單環基團，比如氮丙啶、環氧乙烷、硫雜丙環(thiirane)、氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、硫雜環丁烷、吡咯啶、吡咯啉、咪唑啉、吡唑啶、二氧戊環、環丁碸、2,3-二氫呋喃、2,5-二氫呋喃、四氫呋喃、四氫噻吩(thiophane)、哌啶、1,2,3,6-四氫吡啶、1,4-二氫吡啶、哌𠯤、嗎啉、硫代嗎啉、哌喃、2,3-二氫哌喃、四氫哌喃、1,4-二㗁烷、1,3-二㗁烷、高哌𠯤、高哌啶、1,3-二氧雜環庚烷、4,7-二氫-1,3-二㗁呯(dioxepin)和環氧己烷(hexamethyleneoxide)。

雜芳基的實例包括吡啶基、吡𠯤基、嘧啶基(比如，但不限於2-和4-嘧啶基)、嗒𠯤基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、㗁唑基、吡唑基、異噻唑基、1,2,3-***基、1,2,4-***基、1,3,4-***基、四唑基、1,2,3-噻唑基、1,2,3-㗁二唑基、1,3,4-噻唑基和1,3,4-㗁二唑基。

多環雜環的實例包括吲哚基(比如，但不限於2-、3-、4-、5‑、6-和7-吲哚基)、二氫吲哚基、喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基(比如，但不限於1-和5-異喹啉基)、1,2,3,4-四氫異喹啉基、㖕啉基(cinnolinyl)、喹㗁啉基(比如，但不限於2-和5-喹㗁啉基)、喹唑啉基、酞𠯤基、1,8-萘啶基、1,4-苯并二㗁烷基、香豆素、二氫香豆素、1,5-萘啶基、苯并呋喃基(比如，但不限於3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氫苯并呋喃基、1,2-苯并㗁唑基、苯并噻吩基(比如，但不限於3-、4-、5-、6-和7-苯并噻吩基)、苯并㗁唑基、苯并噻唑基(比如，但不限於2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并***基、硫代黃嘌呤基(thioxanthinyl)、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯啶基(pyrrolizidinyl)和喹𠯤啶基(quinolizidinyl)。

雜環基和雜芳基部分的上述列舉旨在是代表性的，而不是限制性的。

如在本文中使用的，術語「NMT」指的是不超過。

如本文所使用的，術語「醫藥組成物」或「組成物」係指在本揭示內容中有用的至少一種化合物與醫藥上可接受的載劑的混合物。醫藥組成物促進將化合物施用至受試者。

如本文所使用的，術語「醫藥上可接受的」係指不消除本揭示內容中有用的化合物的生物活性或特性並且相對無毒的材料，比如載劑或稀釋劑，即可以在不引起不良生物效應或不會以有害方式與包含其的組成物的任何組分相互作用的情況下將該材料施用至受試者。

如本文所使用的，術語「醫藥上可接受的載劑」係指參與在受試者中或向受試者攜帶或運輸本揭示內容中有用的化合物使得它可以執行預期的功能的醫藥上可接受的材料、組成物或載劑，比如液體或固體填充劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑或封裝材料。典型地，將這種構建體從一個器官或身體的一部分攜帶或運輸到另一器官或身體的一部分。在與製劑的其他成分(包括本揭示內容中有用的化合物)相容的意義上，每種載劑必須是「可接受的」，並且對受試者無害。可用作醫藥上可接受的載劑的材料的的一些實例包括：糖，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；澱粉，比如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，比如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉末狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，比如可可脂和栓劑蠟；油，比如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，比如丙二醇；多元醇，比如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，比如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，比如氫氧化鎂和氫氧化鋁；表面活性劑；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；和藥物製劑中使用的其他無毒的相容性物質。如本文所使用的，「醫藥上可接受的載劑」還包括與本揭示內容中有用的化合物的活性相容的並且是受試者生理上可接受的任何和所有包衣、抗細菌和抗真菌劑，以及吸收延遲劑等。補充活性化合物也可以併入組成物中。「醫藥上可接受的載劑」可以進一步包括在本揭示內容中有用的化合物的醫藥上可接受的鹽。在本揭示內容的實踐中使用的醫藥組成物中可以包含的其他另外的成分是本領域已知的，並且在例如《雷明頓藥物科學》(Genaro，Ed.，Mack Publishing Co.，1985，Easton，PA)中描述，其通過引用併入本文。

如本文所使用的，語言「醫藥上可接受的鹽」係指由包括無機酸、無機鹼、有機酸、無機鹼、溶劑化物(包括水合物)和其包合物(clathrate)的醫藥上可接受的無毒酸及/或鹼製備的施用化合物的鹽。

如本文所使用的，化合物的「醫藥上有效量」、「治療有效量」或「有效量」是足以向施用化合物的受試者提供有益作用的化合物的量。

如本文所使用的，術語「預防」、「防止」和「避免」係指在開始施用藥劑或化合物時在未發展出這種症狀的受試者中避免或延遲與疾病或病症相關的症狀的發作。疾病、病症和病症在本文可互換使用。

如本文所使用的術語「特異性結合的」或「特異性結合」係指第一分子優先結合第二分子(例如，特定受體或酶)，但不一定僅結合該第二分子。

如本文所使用的，術語「受試者」和「個體」和「患者」可以互換使用，並且可以指人類或非人類哺乳動物或鳥類。非人類哺乳動物包括例如牲畜和寵物，比如綿羊、牛科、豬科、犬科、貓科和鼠科哺乳動物。在某些實施方式中，受試者是人類。

如本文所使用的，術語「經取代之」係指原子或原子團已取代氫作為連接至另一基團的取代基。

如本文所使用的，術語「經取代之烷基」、「經取代之環烷基」、「經取代之烯基」或「經取代之炔基」係指如本文其他地方所定義的烷基、環烷基、烯基或炔基，其被獨立地選自鹵素、-OH、烷氧基、四氫-2-H-哌喃基、-NH ₂、-NH(C ₁-C ₆烷基)、-N(C ₁-C ₆烷基) ₂、1-甲基-咪唑-2-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、-C(=O)OH、-C(=O)O(C ₁-C ₆)烷基、三氟甲基、-C≡N、-C(=O)NH ₂、-C(=O)NH(C ₁-C ₆)烷基、-C(=O)N((C ₁-C ₆)烷基) ₂、-SO ₂NH ₂、-SO ₂NH(C ₁-C ₆烷基)、-SO ₂N(C ₁-C ₆烷基) ₂、-C(=NH)NH ₂和-NO ₂的一個、兩個或三個取代基取代，在某些實施方式中含有獨立地選自鹵素、-OH、烷氧基、-NH ₂、三氟甲基、-N(CH ₃) ₂和-C(=O)OH的一個或兩個取代基，在某些實施方式中獨立地選自鹵素、烷氧基和-OH。經取代之烷基的實例包括但不限於2,2-二氟丙基、2-羧基環戊基和3-氯丙基。

對於芳基、芳基-(C ₁-C ₃)烷基和雜環基，應用於這些基團的環的術語「經取代之」係指在允許這種取代的地方的任何取代水平，即單、二、三、四或五取代。取代基是獨立選擇的，並且取代可以在任何化學可及的位置。在某些實施方式中，取代基的數目在1和4之間變化。在其他實施方式中，取代基的數目在1和3之間變化。在另一個實施方式中，取代基的數目在1和2之間變化。在又其他實施方式中，取代基獨立地選自C ₁-C ₆烷基、-OH、C ₁-C ₆烷氧基、鹵素、胺基、乙醯胺基和硝基。如本文所使用的，當取代基是烷基或烷氧基時，碳鏈可以是支鏈、直鏈或環狀的。

除非另有說明，當兩個取代基一起形成具有指定數目的環原子的環時(例如，R ²和R ³與它們所連接的氮一起形成具有3至7個環成員的環)，該環可以具有碳原子和任選地一個或多個(例如，1至3個)獨立地選自氮、氧或硫的另外的雜原子。該環可以是飽和的或部分飽和的，並且可以任選地被取代。

每當術語或其前綴根中的任一個出現在取代基的名稱中時，該名稱應解釋為包括本文提供的那些限制。例如，每當術語「烷基」或「芳基」或其前綴根中的任一個出現在取代基(例如芳基烷基、烷基胺基)的名稱中時，該名稱應解釋為包括本文其他地方分別對「烷基」和「芳基」給出的那些限制。

在某些實施方式中，化合物的取代基以組或範圍公開。具體期望該描述包括這些組和範圍的成員的每個和每一個單獨的子組合。例如，術語「C _1-6烷基」明確地旨在單獨公開C ₁、C ₂、C ₃、C ₄、C ₅、C ₆、C ₁-C ₆、C ₁-C ₅、C ₁-C ₄、C ₁-C ₃、C ₁-C ₂、C ₂-C ₆、C ₂‑C ₅、C ₂‑C ₄、C ₂‑C ₃、C ₃‑C ₆、C ₃‑C ₅、C ₃‑C ₄、C ₄‑C ₆、C ₄‑C ₅和C ₅‑C ₆烷基。

本文所用的術語「治療」、「處理」和「處置」係指通過向受試者施用藥劑或化合物來降低受試者經歷疾病或病症的症狀的頻率或嚴重程度。

本文使用的某些縮寫如下：cccDNA，共價閉合的環狀DNA；DMSO，二甲基亞碸；HBsAg，HBV表面抗原；HBV，B型肝炎病毒；HDV，D型肝炎病毒；HPLC，高壓液相層析法；LCMS，液相層析質譜法；NARTI或NRTI，反轉錄酶抑制劑；NMR，核磁共振；NtARTI或NtRTI，核苷酸類似物反轉錄酶抑制劑；pg RNA，前基因組RNA；rcDNA，鬆弛環狀DNA；RT，保留時間；sAg，表面抗原；TLC，薄層層析法。

範圍：在整篇公開內容中，可以以範圍格式來呈現本揭示內容的各個方面。應當理解，範圍格式的描述僅是為了方便和簡潔，而不應被解釋為對本揭示內容範圍的僵化限制。因此，應該將範圍的描述視為已明確公開了所有可能的子範圍以及該範圍內的各個數值。例如，對範圍比如從1至6的描述應視為已明確公開了子範圍，比如從1至3、從1至4、從1至5、從2至4、從2至6、從3至6等，以及該範圍內的單個數值，例如，1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。例如，「約0.1%至約5%」或「約0.1%至5%」的範圍應視為不僅包括約0.1%至約5%，而且還包括指示範圍內的單個值(例如，1%、2%、3%和4%)和子範圍(例如，0.1%至0.5%、1.1%至2.2%、3.3%至4.4%)。除非另外指出，否則陳述「約X至Y」具有與「約X至約Y」相同的含義。同樣，除非另外指出，否則陳述「約X、Y或Z」與「約X、約Y或約Z」具有相同的含義。無論範圍的廣度如何，這都適用。 合成

本揭示內容進一步提供了製備本揭示內容的化合物的方法。本教導的化合物可以通過使用本領域技術人員已知的標準合成方法和程序，根據本文概述的程序，由商業上可獲得的起始原料、文獻中已知的化合物或容易製備的中間體製備。可從相關的科學文獻或本領域的標準教科書中容易地獲得用於製備有機分子以及官能團轉化和操縱的標準合成方法和程序。

應當理解，除非另有說明，在給出典型的或優選的工藝條件(即反應溫度、時間、反應物的莫耳比、溶劑、壓力等)的情況下，也可以使用其他工藝條件。最佳反應條件可以隨所使用的特定反應物或溶劑而變化，但是這種條件可以由本領域技術人員通過常規優化程序來確定。有機合成領域的技術人員將認識到，出於優化本文所述化合物的形成的目的，可以改變所呈現的合成步驟的性質和順序。

可以根據本領域中已知的任何合適的方法來監測本文描述的過程。例如，產物形成可以通過光譜方法(spectroscopic means)，比如核磁共振光譜法(例如， ¹H或 ¹³C)、紅外光譜法、分光光度法(例如紫外可見)、質譜法，或通過層析法比如高效液相層析法(HPLC)、氣相層析法(GC)、凝膠滲透層析發的(GPC)或薄層層析法(TLC)來監測。

化合物的製備可以涉及各種化學基團的保護和脫保護。保護和脫保護的需要以及合適保護基團的選擇可以由本領域技術人員容易地確定。保護基團的化學性質可以在例如Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed. (Wiley & Sons, 1991)中找到，出於所有目的通過引用將其全部公開內容併入本文。

本文所述的反應或方法可以在有機合成領域的技術人員可以容易選擇的合適溶劑中進行。在進行反應的溫度下，即在溶劑的冷凍溫度至溶劑的沸騰溫度的範圍內的溫度下，合適的溶劑通常與反應物、中間體及/或產物基本上不反應。給定的反應可以在一種溶劑或多於一種溶劑的混合物中進行。取決於特定的反應步驟，可以選擇用於特定反應步驟的合適溶劑。

本揭示內容包括製備( S)- N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1-基)-5,6-二氟- N-甲基-1 H-吲哚-2-甲醯胺(也稱為化合物 (X))或其鹽、溶劑化物、前藥、同位素標記的衍生物、立體異構物(比如，在非限制性實例中，鏡像異構物或其任意混合物，比如，在非限制性實例中，其鏡像異構物的任意比例的混合物)及/或互變異構物及任意混合物的方法：

(X)，

在某些實施方式中，式(X)的化合物或其鹽、溶劑化物、前藥、同位素標記的衍生物及/或互變異構物可根據流程1-2中概述的非限制性合成流程製備。

可以在例如兩步法中將可商購的芳基溴(A)轉化為相應的異色烯酮(B)，其中(A)與哌喃-3,5-二酮在過渡金屬催化劑比如但不限於銅(I)鹽的存在下，在鹼比如但不限於鹼性碳酸鹽的存在下反應以產生酮-酸中間體，可以對該酮-酸中間體進行酸催化環化以產生異色烯酮(B）。

異色烯酮(B)可以與銨鹽比如但不限於氫氧化銨反應，以提供相應的異喹啉酮(C)。

可以在例如兩步法中將異喹啉酮(C)轉化為苄胺(D)，其中(C)與α-甲基苄胺在路易斯酸比如但不限於鈦(IV)醇鹽的存在下反應以產生亞胺中間體，可以使用還原劑比如但不限於硼氫化物試劑(比如但不限於NaBH ₄)將該亞胺中間體還原為苄胺(D)。

可以使用甲醛或甲醛供體(比如但不限於多聚甲醛)在酸存在下通過還原烷基化將苄胺(D)在苄基氮處甲基化以產生亞銨(iminium)中間體，可以使用還原劑比如但不限於NaBH(OAc) ₃(即，STAB)將該亞銨中間體還原為三級胺(E)。

可以在Pd/C存在下使用合適的還原劑(比如但不限於H ₂)將三級胺(E)還原裂解成相應的甲胺(F)。

可以通過使羧酸(G)與合適的醯基氯化試劑(包括但不限於草醯氯和亞硫醯氯)反應來製備醯基氯(acid chloride)(H)。

化合物(F)和化合物(H)可以在鹼(包括但不限於鹼性碳酸鹽)的存在下偶聯，以提供化合物(X)。

在某些實施方式中，可以在例如兩步法中將異喹啉酮(C)轉化為苄胺(D’)，其中(C)與α-甲基4-甲氧基-苄胺在路易斯酸比如但不限於鈦(IV)醇鹽的存在下反應，以產生亞胺中間體，可以使用還原劑比如但不限於硼氫化物(比如但不限於NaBH ₄)將該中間體還原為苄胺(D’)。

可以通過還原烷基化，在酸存在下使用甲醛或甲醛供體比如但不限於多聚甲醛將4-甲氧基-苄胺(D’)在苄基氮處甲基化，以產生亞銨中間體，可以使用還原劑，比如但不限於NaBH(OAc) ₃(即，STAB)將該中間體還原為三級胺(E’)。

流程 1．

可以使用酸比如但不限於三氟乙酸(TFA)將三級胺(E’)裂解成相應的甲胺(F)。在某些實施方式中，將( E’)裂解成(F)進一步包括三烷基矽烷，比如但不限於三乙基矽烷。

在某些實施方式中，化合物(X)可以由化合物(F)和化合物(H)製備，如本文其他地方所描述的。

流程 2

本揭示內容的化合物可以具有一個或多個立構中心，並且每個立構中心可以以( R)或( S)構型獨立存在。在某些實施方式中，本文所述的化合物以旋光或外消旋形式存在。本文所述的化合物包括具有本文所述的治療有用特性的外消旋、旋光、區域異構和立體異構形式或其組合。旋光形式的製備以任何合適的方式實現，作為非限制性實例，包括通過用重結晶技術外消旋形式的解析、由旋光原材料合成、手性合成或使用手性固定相進行層析分離。本文由外消旋式說明的化合物進一步代表兩種鏡像異構物或其任何混合物，或者在存在兩個或更多個手性中心的情況下，代表所有非鏡像異構物或其任何混合物。

在某些實施方式中，本揭示內容的化合物以互變異構物存在。所有互變異構物均包括在本文所述的化合物的範圍內。

本文所述的化合物還包括同位素標記的化合物，其中一個或多個原子被具有相同原子序數但原子質量或原子質量數不同於通常在自然界發現的原子質量或原子質量數的原子替代。適於包含在本文所述的化合物中的同位素的實例包括但不限於 ²H、 ³H、 ¹¹C、 ¹³C、 ¹⁴C、 ³⁶Cl、 ¹⁸F、 ¹²³I、 ¹²⁵I、 ¹³N、 ¹⁵N、 ¹⁵O、 ¹⁷O、 ¹⁸O、 ³²P和 ³⁵S。在某些實施方式中，用較重的同位素比如氘取代提供更高的化學穩定性。可通過任何合適的方法或使用合適的同位素標記的試劑代替否則採用未標記的試劑的方法製備同位素標記的化合物。

在某些實施方式中，本文所述的化合物通過其他方式標記，包括但不限於使用發色團或熒光部分、生物發光標記或化學發光標記。

在本文提供的所有實施方式中，合適的任選取代基的實例不旨在限制要求保護的公開內容的範圍。本揭示內容的化合物可以包含本文提供的任何取代基或取代基的組合。 鹽

本文所述的化合物可與酸或鹼形成鹽，並且這種鹽包括在本揭示內容中。術語「鹽」包括在本揭示內容的方法中有用的游離酸或鹼的加成鹽。術語「醫藥上可接受的鹽」係指具有在藥學應用中有用的範圍內的毒性特徵的鹽。在某些實施方式中，鹽是醫藥上可接受的鹽。然而，藥學上不可接受的鹽可以具有比如高結晶度的性質，其在本揭示內容的實踐中具有實用性，諸如例如在本揭示內容的方法中有用的化合物的合成、純化或配製過程中的實用性。

合適的醫藥上可接受的酸加成鹽可以由無機酸或有機酸製備。無機酸的實例包括硫酸鹽、硫酸氫鹽(hydrogen sulfate)、鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸(包括磷酸氫鹽和磷酸二氫鹽)。合適的有機酸可以選自脂族、脂環族、芳族、芳脂族、雜環、羧酸和磺酸類的有機酸，其實例包括甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、葡糖醛酸、馬來酸、富馬酸、丙酮酸、天冬胺酸、谷胺酸、苯甲酸、鄰胺基苯甲酸、4-羥基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、撲酸(或帕莫酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、磺胺酸、2-羥基乙磺酸、三氟甲磺酸、對甲苯磺酸、環己基胺基磺酸、硬脂酸、海藻酸、β-羥基丁酸、水楊酸、半乳糖二酸、半乳糖醛酸、甘油膦酸和糖精(例如，糖精鹽(saccharinate)、糖酸鹽(saccharate))。相對於本揭示內容的任何化合物，鹽可以由1莫耳當量、1或多於1莫耳當量的酸或鹼的部分組成。

本揭示內容的化合物的合適的醫藥上可接受的鹼加成鹽包括例如銨鹽和金屬鹽，包括鹼金屬、鹼土金屬和過渡金屬鹽，諸如例如鈣、鎂、鉀、鈉和鋅鹽。醫藥上可接受的鹼加成鹽還包括由鹼性胺諸如例如 N, N’-二苄基乙二胺、氯普魯卡因、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(或 N-甲葡糖胺)和普魯卡因製備的有機鹽。所有這些鹽可以通過例如使合適的酸或鹼與化合物反應而由相應的化合物製備。 聯合治療

在一個方面，本揭示內容的化合物與用於治療HBV及/或HDV感染的一種或多種另外的試劑組合用於本揭示內容的方法中。這些另外的試劑可以包括本文鑒定的化合物或組成物，或已知用於治療、預防或減輕HBV及/或HDV感染的症狀的化合物(例如，商業上可獲得的化合物)。

用於治療HBV及/或HDV感染的一種或多種另外的試劑的非限制性實例包括：(a)反轉錄酶抑制劑；(b)衣殼抑制劑；(c) cccDNA形成抑制劑；(d) RNA去穩定劑；(e)靶向HBV基因組的寡聚核苷酸；(f)免疫刺激劑，比如檢查點抑制劑(例如，PD-L1抑制劑)；(g)靶向HBV基因轉錄體的GalNAc-siRNA綴合物；和(h)治療性疫苗。 (a) 反轉錄酶抑制劑

在某些實施方式中，反轉錄酶抑制劑為反轉錄酶抑制劑(NARTI或NRTI)。在其他實施方式中，反轉錄酶抑制劑為核苷酸類似物反轉錄酶抑制劑(NtARTI或NtRTI)。

報道的反轉錄酶抑制劑包括但不限於恩替卡韋、克拉夫定(clevudine)、替比夫定、拉米夫定、阿德福韋和替諾福韋、替諾福韋二吡呋酯(tenofovir disoproxil)、替諾福韋艾拉酚胺(tenofovir alafenamide)、阿德福韋酯(adefovir dipovoxil)、(1 R,2 R,3 R,5 R)-3-(6-胺基-9 H-9-嘌呤基)-2-氟-5-(羥甲基)-4-亞甲基環戊-1-醇(描述於美國專利號8,816,074中，通過引用以其整體併入本文)、恩曲他濱(emtricitabine)、阿巴卡韋(abacavir)、依維他濱(elvucitabine)、更昔洛韋(ganciclovir)、洛布卡韋(lobucavir)、泛昔洛韋(famciclovir)、噴昔洛韋(penciclovir)和氨多索韋(amdoxovir)。

報道的反轉錄酶抑制劑進一步包括但不限於恩替卡韋、拉米夫定和(1 R,2 R,3 R,5 R)-3-(6-胺基-9 H-9-嘌呤基)-2-氟-5-(羥甲基)-4-亞甲基環戊-1-醇。

報道的反轉錄酶抑制劑進一步包括但不限於上面提到的反轉錄酶抑制劑的共價結合的胺基磷酸酯或膦醯胺部分，或如例如美國專利號8,816,074、美國專利申請公開號US 2011/0245484 A1和US 2008/0286230A1中描述的，所有這些通過引用以其整體併入本文。

報道的反轉錄酶抑制劑進一步包括但不限於包括胺基磷酸酯部分的核苷酸類似物，諸如例如((((1 R,3 R,4 R,5 R)-3-(6-胺基-9 H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羥基-2-亞甲基環戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷醯基)-(D或L)-丙胺酸酯和((((1 R,2 R,3 R,4 R)-3-氟-2-羥基-5-亞甲基-4-(6-氧代-1,6-二氫-9 H-嘌呤-9-基)環戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷醯基)-(D或L)-丙胺酸酯。還包括其單獨的非鏡像異構物，其包括例如(( R)-(((1 R,3 R,4 R,5 R)-3-(6-胺基-9 H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羥基-2-亞甲基環戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷醯基)-(D或L)-丙胺酸酯和(( S)-(((1 R,3 R,4 R,5 R)-3-(6-胺基-9 H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羥基-2-亞甲基環戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷醯基)-(D或L)-丙胺酸酯。

報道的反轉錄酶抑制劑進一步包括但不限於包括膦醯胺部分的化合物，諸如例如替諾福韋艾拉酚胺，以及在美國專利申請公開號US 2008/0286230 A1中描述的那些，通過引用以其整體併入本文。在例如，美國專利號8,816,074以及美國專利申請公開號US 2011/0245484 A1和US 2008/0286230 A1中描述了用於製備含有立體選擇性胺基磷酸酯或膦醯胺的活性物的方法，其全部通過引用以其整體併入本文。 (b) 衣殼抑制劑

如本文所描述的，術語「衣殼抑制劑」包括能夠直接或間接抑制衣殼蛋白的表現及/或功能的化合物。例如，衣殼抑制劑可以包括但不限於抑制衣殼裝配、誘導非衣殼聚合物形成、促進過量的衣殼裝配或衣殼裝配方向錯誤、影響衣殼穩定及/或抑制RNA (pgRNA)衣殼化的任何化合物。衣殼抑制劑還包括在複製過程的下游事件(一個或多個) (例如，病毒DNA合成、鬆弛環狀DNA(rcDNA)轉運到細胞核、共價閉合環狀DNA(cccDNA)形成、病毒成熟、出芽及/或釋放等)中抑制衣殼功能的任何化合物。例如，在某些實施方式中，該抑制劑可檢測地抑制衣殼蛋白的表現水平或生物活性，例如使用本文所述的測定法所測量的。在某些實施方式中，抑制劑將rcDNA和病毒生命週期下游產物的水平抑制至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少75%或至少90%。

報道的衣殼抑制劑包括但不限於在國際專利申請公開號WO 2013006394、WO 2014106019和WO2014089296中描述的化合物，其全部通過引用以其整體併入本文。

報道的衣殼抑制劑還包括但不限於下述化合物和其醫藥上可接受的鹽及/或溶劑化物：Bay-41-4109 (參見國際專利申請公開號WO 2013144129)、AT-61 (參見國際專利申請公開號WO 1998033501；和King等人，1998，Antimicrob. Agents Chemother. 42(12):3179–3186)、DVR-01和DVR-23 (參見國際專利申請公開號WO 2013006394；和Campagna等人，2013，J. Virol. 87(12):6931，其全部通過引用以其整體併入本文。

另外，報道的衣殼抑制劑包括但不限於在美國專利申請公開號US 2015/0225355、US 2015/0132258、US 2016/0083383、US 2016/0052921和國際專利申請公開號WO 2013096744、WO 2014165128、WO 2014033170、WO 2014033167、WO 2014033176、WO 2014131847、WO 2014161888、WO 2014184350、WO 2014184365、WO 2015059212、WO 2015011281、WO 2015118057、WO 2015109130、WO 2015073774、WO 2015180631、WO 2015138895、WO 2016089990、WO 2017015451、WO 2016183266、WO 2017011552、WO 2017048950、WO2017048954、WO 2017048962、WO 2017064156中一般和具體地描述的那些，並通過引用以其整體併入本文。 (c) cccDNA 形成抑制劑

共價封閉的環狀DNA (cccDNA)在病毒rcDNA的細胞核中產生，並用作病毒mRNA的轉錄模板。如本文所描述的，術語「cccDNA形成抑制劑」包括能夠直接或間接抑制cccDNA的形成及/或穩定性的化合物。例如，cccDNA形成抑制劑可以包括但不限於抑制衣殼解體，rcDNA進入細胞核及/或將rcDNA轉化為cccDNA的任何化合物。例如，在某些實施方式中，抑制劑可抑制地抑制cccDNA的形成及/或穩定性，例如使用本文所述的測定法所測量的。在某些實施方式中，抑制劑將cccDNA的形成及/或穩定性抑制至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少75%或至少90%。

報道的cccDNA形成抑制劑包括但不限於在國際專利申請公開號WO 2013130703中描述的化合物，並且通過引用以其整體併入本文。

另外，報道的cccDNA形成抑制劑包括但不限於在美國專利申請公開號US 2015/0038515 A1中一般和具體描述的那些，並且通過引用以其整體併入本文。 (d) RNA 去穩定劑

如本文所使用的，術語「RNA去穩定劑」係指在哺乳動物細胞培養物中或在活的人類受試者中減少HBV RNA總量的分子或其鹽或溶劑化物。在非限制性實例中，RNA去穩定劑減少了編碼以下一種或多種以下HBV蛋白的RNA轉錄體(一種或多種)的量：表面抗原，核心蛋白，RNA聚合酶和e抗原。在某些實施方式中，RNA去穩定劑使哺乳動物細胞培養物中或活的人類受試者中的HBV RNA的總量減少至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少75%或至少90%。

報道的RNA去穩定劑包括在美國專利號8,921,381中描述的化合物，以及在美國專利申請公開號US 2015/0087659和US 2013/0303552中描述的化合物，其全部通過引用以其整體併入本文。

另外，報道的RNA去穩定劑包括但不限於在國際專利申請公開號WO 2015113990、WO 2015173164、US 2016/0122344、WO 2016107832、WO 2016023877、WO 2016128335、WO 2016177655、WO 2016071215、WO 2017013046、WO 2017016921、WO 2017016960、WO 2017017042、WO 2017017043、WO 2017102648、WO 2017108630、WO 2017114812、WO 2017140821、WO 2018085619中一般和具體地描述的那些，並且通過引用以其整體併入本文。 (e) 靶向 HBV 基因組的寡聚核苷酸

報道的靶向HBV基因組的寡聚核苷酸包括但不限於Arrowhead-ARC-520 (參見美國專利號8,809,293；和Wooddell等人，2013，Molecular Therapy 21(5):973–985，其全部通過引用以其整體併入本文)。

在某些實施方式中，寡聚核苷酸可以設計為靶向HBV基因組的一個或多個基因及/或轉錄體。靶向HBV基因組的寡聚核苷酸還包括但不限於分離的雙鏈siRNA分子，每個siRNA分子包括有義鏈和與有義鏈雜交的反義鏈。在某些實施方式中，siRNA靶向HBV基因組的一個或多個基因及/或轉錄體。 (f) 免疫刺激劑 檢查點抑制劑

如本文所描述的，術語「檢查點抑制劑」包括能夠抑制作為免疫系統調節劑(例如，刺激或抑制免疫系統活性)的免疫檢查點分子的任何化合物。例如，一些檢查點抑制劑阻斷抑制性檢查點分子，從而刺激免疫系統功能，比如刺激針對癌細胞的T細胞活性。檢查點抑制劑的非限制性實例是PD-L1抑制劑。

如本文所描述的，術語「PD-L1抑制劑」包括能夠直接或間接抑制程序性死亡配體1(PD-L1)蛋白的表現及/或功能的任何化合物。PD-L1，也稱為分化簇274 (CD274)或B7同系物1 (B7-H1)，是在抑制妊娠期間的免疫系統適應性臂、組織同種異體移植、自身免疫性疾病和肝炎中起重要作用的1型跨膜蛋白。PD-L1與其受體、抑制性檢查點分子PD-1 (在激活的T細胞、B細胞和骨髓細胞上發現)結合，以便調節免疫系統適應性臂的激活或抑制。在某些實施方式中，PD-L1抑制劑將PD-L1的表現及/或功能抑制至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少75%或至少90%。

報道的PD-L1抑制劑包括但不限於下述專利申請出版物之一中所述的化合物：US 2018/0057455；US 2018/0057486；WO 2017/106634；WO 2018/026971；WO 2018/045142；WO 2018/118848；WO 2018/119221；WO 2018/119236；WO 2018/119266；WO 2018/119286；WO 2018/121560；WO 2019/076343；WO 2019/087214；並且通過引用以其整體併入本文。 (g) 靶向 HBV 基因轉錄體的 GalNAc-siRNA 綴合物

「GalNAc」是N-乙醯基半乳糖胺的縮寫，和「siRNA」是小干擾RNA的縮寫。在本揭示內容的實踐中有用的GalNAc-siRNA綴合物中，將靶向HBV基因轉錄體的siRNA與GalNAc共價結合。儘管不希望受到理論的束縛，但據信GalNAc與肝細胞上的脫唾液酸糖蛋白受體結合，從而促進siRNA靶向感染HBV的肝細胞。siRNA進入感染的肝細胞，並通過RNA干擾現象刺激HBV基因轉錄體的破壞。

在本揭示內容的這一方面的實踐中有用的GalNAc-siRNA綴合物的實例在公開的國際申請PCT/CA2017/050447 (2017年10月19日公開的PCT申請公開號WO/2017/177326)中闡述，其通過引用以其整體併入本文。 (h) 治療疫苗

在某些實施方式中，治療性疫苗的施用在本揭示內容的實踐中用於治療受試者中的病毒性疾病。在某些實施方式中，病毒性疾病為肝炎病毒。在某些實施方式中，肝炎病毒是選自B型肝炎病毒(HBV)和D型肝炎病毒(HDV)中的至少一種。在某些實施方式中，受試者是人。

例如，可以使用合適的方法，諸如例如Sigmoid-E _max方程式(Holford & Scheiner，1981，Clin. Pharmacokinet. 6:429-453)、Loewe可加性方程式(Loewe & Muischnek，1926，Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114：313-326)和中值效應方程式(Chou & Talalay，1984，Adv. Enzyme Regul. 22:27-55)計算協同效應。本文別處提及的每個方程式可以應用於實驗數據以生成相應的曲線，以幫助評估藥物組合的效果。與本文其他地方提及的方程式相關的相應曲線分別是濃度-效果曲線、等效線圖曲線和組合指數曲線。 方法

在一方面，本揭示內容提供了在受試者中治療或預防肝炎病毒感染的方法。在某些實施方式中，感染包括B型肝炎病毒(HBV)感染。在其他實施方式中，該方法包括向需要其的受試者施用治療有效量的至少一種本揭示內容的化合物。在又其他實施方式中，將至少一種化合物在醫藥上可接受的組成物中施用至受試者。在又其他實施方式中，進一步向受試者施用用於治療肝炎感染的至少一種另外的藥劑。在又其他實施方式中，至少一種另外的藥劑包括選自反轉錄酶抑制劑、衣殼抑制劑、cccDNA形成抑制劑、RNA去穩定劑、靶向HBV基因組的寡聚核苷酸、免疫刺激劑比如檢查點抑制劑(例如，PD-L1抑制劑)和靶向HBV基因轉錄體的GalNAc-siRNA綴合物；和治療性疫苗中的至少一種。在又其他實施方式中，向受試者共同施用至少一種化合物和至少一種另外的藥劑。在又其他實施方式中，至少一種化合物和至少一種另外的藥劑是共同配製的。

本揭示內容進一步提供了在受試者中直接或間接抑制病毒衣殼蛋白的表現及/或功能的方法。在某些實施方式中，該方法包括向需要其的受試者施用治療有效量的至少一種本揭示內容的化合物。在其他實施方式中，將至少一種化合物在醫藥上可接受的組成物中施用至受試者。在又其他實施方式中，進一步向受試者施用用於治療HBV感染的至少一種另外的藥劑。在又其他實施方式中，至少一種另外的藥劑包括選自反轉錄酶抑制劑、衣殼抑制劑、cccDNA形成抑制劑、RNA去穩定劑、靶向HBV基因組的寡聚核苷酸、免疫刺激劑比如檢查點抑制劑(例如，PD-L1抑制劑)和靶向HBV基因轉錄體的GalNAc-siRNA綴合物；和治療性疫苗中的至少一種。在又其他實施方式中，向受試者共同施用至少一種化合物和至少一種另外的藥劑。在又其他實施方式中，至少一種化合物和至少一種另外的藥劑是共同配製的。

在某些實施方式中，受試者是哺乳動物。在其他實施方式中，哺乳動物為人。 醫藥組成物和製劑

本揭示內容提供了包括至少一種本揭示內容的化合物或其鹽或溶劑化物的醫藥組成物，其用於實踐本揭示內容的方法。這樣的醫藥組成物可由適合施用至受試者的形式的至少一種本揭示內容的化合物或鹽或溶劑化物組成，或醫藥組成物可以包括至少一種本揭示內容的化合物或其鹽或溶劑化物以及一種或多種醫藥上可接受的載劑、一種或多種另外的成分或這些的一些組合。如本領域眾所周知的，至少一種本揭示內容的化合物可以以生理學上可接受的鹽的形式，比如與生理學上可接受的陽離子或陰離子組合存在於醫藥組成物中。

在某些實施方式中，可以施用用於實踐本揭示內容的方法的醫藥組成物以遞送在1 ng/kg/天和100 mg/kg/天之間的劑量。在其他實施方式中，可以施用用於實踐本揭示內容的醫藥組成物以遞送在1 ng/kg/天和1,000 mg/kg/天之間的劑量。

本揭示內容的醫藥組成物中的活性成分、醫藥上可接受的載劑和任何另外的成分的相對量將變化，這取決於所治療的受試者的身份、體型(size)和病症，並且進一步取決於該組成物被施用的途徑。舉例來說，組成物可以包括在0.1%至100%(w/w)之間的活性成分。

用於本揭示內容的方法中的醫藥組成物可以適當地開發用於經鼻、吸入、口服、直腸、***、胸膜、腹膜、腸胃外、局部、經皮、經肺、鼻內、口頰、眼內、硬膜外、鞘內、靜脈內或另一施用途徑。可以將在本揭示內容的方法中使用的組成物直接施用至哺乳動物或鳥類的中樞神經系統的大腦、腦幹或任何其他部分。其他考慮的製劑包括設計(project)的納米顆粒、微球、脂質體製劑、包被的顆粒、聚合物綴合物、含有活性成分的重新密封的紅細胞以及基於免疫學的製劑。

在某些實施方式中，本揭示內容的組成物是藥物基質的一部分，其允許處理不溶性材料並改善其生物利用度、開發控釋或緩釋產品以及產生均質組成物。舉例來說，可以使用熱熔擠出、固溶體、固體分散體、尺寸減小技術、分子複合物(例如，環糊精等)、微粒以及顆粒和製劑包衣方法來製備藥物基質。非晶相或結晶相可用於這種工藝中。

施用途徑(一種或多種)對技術人員來說是顯而易見的，並且將取決於許多因素，包括所治療的疾病的類型和嚴重程度、所治療的獸醫或人類患者的類型和年齡等。

本文描述的醫藥組成物的製劑可以通過藥理學和製藥學領域中已知的或以後開發的任何方法來製備。通常，這種製備方法包括以下步驟：使活性成分與載劑或一種或多種其他輔助成分結合，並且然後，如果必要或期望，將產品成型或包裝成所需的單劑量或多劑量單位。

如本文所使用的，「單位劑量」是包括預定量的活性成分的離散量的醫藥組成物。活性成分的量通常等於將被施用至受試者的活性成分的劑量或這樣的劑量的方便部分，諸如例如這樣的劑量的一半或三分之一。單位劑型可以是單次日劑量或多次日劑量之一(例如，每天約1-4次或更多次)。當使用多次日劑量時，每次給藥的單位劑型可以相同或不同。

儘管本文提供的醫藥組成物的描述主要針對適合於對人類進行倫理施用的醫藥組成物，但是技術人員將理解，這種組成物通常適合於施用至各種動物。為了使組成物適合於向各種動物施用，適合於向人施用的醫藥組成物的改進是眾所周知的，並且普通技術的獸醫藥理師可以僅通過普通的實驗來設計和進行這種改進。預期向其施用本揭示內容的醫藥組成物的受試者包括但不限於人和其他靈長類動物，哺乳動物，包括與商業相關的哺乳動物，比如牛、豬、馬、綿羊、貓和狗。

在某些實施方式中，使用一種或多種醫藥上可接受的賦形劑或載劑配製本揭示內容的組成物。在某些實施方式中，本揭示內容的醫藥組成物包括治療有效量的至少一種本揭示內容的化合物和醫藥上可接受的載劑。有用的醫藥上可接受的載劑包括但不限於甘油、水、鹽水、乙醇、重組人白蛋白(例如，Recombumin®)、可溶凝膠(例如，Gelofusine®)和其他醫藥上可接受的鹽溶液，比如磷酸鹽和有機酸的鹽。在Remington’s Pharmaceutical Sciences (1991, Mack Publication Co., New Jersey)中描述了這些和其他醫藥上可接受的載劑的實例。

載劑可以是溶劑或分散介質，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)、重組人白蛋白、可溶明膠、其合適的混合物和植物油。例如，可以通過使用包衣比如卵磷脂，通過在存在分散體的情況下維持所需的粒徑以及通過使用表面活性劑來維持合適的流動性。可以通過各種抗細菌劑和抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、三氯三級丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞等，來防止微生物的作用。在許多情況下，組成物中包括等滲劑，例如糖、氯化鈉或多元醇，比如甘露糖醇和山梨糖醇。可以通過在組成物中包含延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鋁或明膠來實現可注射組成物的延長吸收。

製劑可以與常規賦形劑混合使用，即適合於口服、腸胃外、經鼻、吸入、靜脈內、皮下、經皮腸內或本領域已知的任何其他合適的施用方式的醫藥上可接受的有機或無機載劑物質。可以對藥物製劑進行滅菌，並且如果需要，可以與輔助劑例如潤滑劑、防腐劑、穩定劑、潤濕劑、乳化劑、用於影響滲透壓緩衝劑的鹽、著色劑、調味劑及/或賦予香氣的物質等混合。在需要時，它們也可以與其他活性劑，例如其他鎮痛劑、抗焦慮劑或催眠劑組合。如本文所使用的，「另外的成分」包括但不限於可用作藥物載劑的一種或多種成分。

本揭示內容的組成物可以包括按組成物的總重量計約0.005%至2.0%的防腐劑。在暴露於環境中的污染物的情況下，防腐劑用於防止變質。根據本揭示內容有用的防腐劑的實例包括但不限於選自苄醇、山梨酸、對羥基苯甲酸、咪唑烷脲(imidurea)及其組合的那些。一種這樣的防腐劑是約0.5%至2.0%的苄醇和0.05-0.5%的山梨酸的組合。

該組成物可以包括抑制化合物降解的抗氧化劑和螯合劑。對於某些化合物，抗氧化劑是BHT、BHA、α-生育酚和抗壞血酸，按組成物的總重量計，其示例性範圍為按重量計約0.01%至0.3%，或BHT範圍為按重量計0.03%至0.1%。按組成物的總重量計，螯合劑存在的量可以是按重量計0.01%至0.5%。按組成物的總重量計，示例性螯合劑包括在約0.01%至0.20%的重量範圍內或在按重量計0.02%至0.10%的範圍內的乙二胺四乙酸鹽(例如乙二胺四乙酸二鈉)和檸檬酸。螯合劑可用於螯合組成物中的金屬離子，這可能對製劑的保存期限有害。對於某些化合物，儘管BHT和乙二胺四乙酸二鈉分別是示例性的抗氧化劑和螯合劑，但是如本領域技術人員所知，可以用其他合適的和等同的抗氧化劑和螯合劑替代。

可以使用常規方法製備液體懸浮液，以使活性成分懸浮在水性或油性媒介物中。水性媒介物包括例如水和等滲鹽水。油性媒介物包括例如杏仁油、油性酯、乙醇、植物油比如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油、分餾的植物油和礦物油比如液體石蠟。液體懸浮液可以進一步包括一種或多種另外的成分，包括但不限於懸浮劑、分散劑或潤濕劑、乳化劑、緩和劑、防腐劑、緩衝劑、鹽、調味劑、著色劑和甜味劑。油性懸浮液可以進一步包括增稠劑。已知的懸浮劑包括但不限於山梨糖醇糖漿劑、氫化可食用脂肪、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍樹膠、***樹膠和纖維素衍生物比如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素。已知的分散劑或潤濕劑包括但不限於天然存在的磷脂比如卵磷脂，烯化氧與脂肪酸、與長鏈脂族醇、與源自脂肪酸和己糖醇的偏酯或與源自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯(例如，分別是聚氧乙烯硬脂酸酯、十七碳亞乙氧基鯨蠟醇、聚氧乙烯山梨醇單油酸酯和聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯)的縮合產物。已知的乳化劑包括但不限於卵磷脂、***膠和離子或非離子表面活性劑。已知的防腐劑包括但不限於對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯、抗壞血酸和山梨酸。已知的甜味劑包括例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、蔗糖和糖精。

可以以與液體懸浮液基本相同的方式製備活性成分在水性或油性溶劑中的液體溶液，主要區別在於活性成分是溶解而不是懸浮在溶劑中。如本文所使用的，「油性」液體是包括含碳液體分子並且展現出比水小的極性的液體。本揭示內容的醫藥組成物的液體溶液可包含關於液體懸浮液描述的每種組分，應當理解，懸浮劑不一定會幫助活性成分溶解在溶劑中。水性溶劑包括例如水和等滲鹽水。油性溶劑包括例如杏仁油、油性酯、乙醇、植物油比如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油、分餾的植物油和礦物油比如液體石蠟。

可以使用已知方法製備本揭示內容的藥物製劑的粉末狀和顆粒製劑。這樣的製劑可以直接施用至受試者，例如用於形成錠劑、填充膠囊，或通過向其中添加水性或油性媒介物來製備水性或油性懸浮液或溶液。這些製劑中的每一種可以進一步包括分散劑或潤濕劑、懸浮劑、離子和非離子表面活性劑和防腐劑中的一種或多種。這些製劑中還可以包括另外的賦形劑，比如填充劑和甜味劑、調味劑或著色劑。

本揭示內容的醫藥組成物也可以水包油乳劑或油包水乳劑的形式製備、包裝或出售。油相可以是植物油比如橄欖油或花生油，礦物油比如液體石蠟，或這些的組合。這樣的組成物可以進一步包含一種或多種乳化劑，比如天然存在的樹膠比如***樹膠或黃蓍樹膠；天然存在的磷脂，例如大豆或卵磷脂；源自脂肪酸和己糖醇酐的組合的酯或偏酯，比如山梨聚糖單油酸酯，以及這種偏酯與環氧乙烷的縮合產物，比如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯。這些乳劑還可以包含另外的成分，包括例如甜味劑或調味劑。

用化學組成物浸漬或塗覆材料的方法在本領域中是已知的，並且包括但不限於將化學組成物沉積或結合到表面上的方法，在合成材料(即，比如使用生理學上可降解的材料)期間將化學組成物結合到材料結構中的方法，以及將水性或油性溶液或懸浮液吸收到吸收性材料中的方法，隨後進行乾燥或不進行乾燥。混合組分的方法包括本領域技術人員已知的物理研磨、在固體和懸浮液製劑中使用丸粒以及在透皮貼劑中混合。 施用 / 給藥

給藥方案可能會影響有效量的構成。可以在疾病或病症發作之前或之後將治療製劑施用至患者。此外，可以每天或順序施用幾種分開的劑量以及交錯劑量，或者可以連續輸注該劑量，或者可以是推注注射。此外，治療製劑的劑量可以根據治療或預防情況的緊急程度成比例地增加或減少。

可以使用已知的程序，以有效治療本文考慮的疾病或病症的劑量和時間段將本揭示內容的組成物施用至患者，比如哺乳動物，比如人。實現治療效果所必需的治療化合物的有效量可以根據以下因素而變化，比如所採用的特定化合物的活性；施用時間；該化合物的***速率；治療的持續時間；與該化合物組合使用的其他藥物、化合物或材料；疾病或病症的狀態，所治療患者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康狀況以及既往病史，以及醫學領域眾所周知的類似因素。可以調整劑量方案以提供最佳的治療反應。例如，如治療狀況的緊急情況所指示，可以每天施用數個分開的劑量或可以成比例地減少劑量。本揭示內容的治療化合物的有效劑量範圍的非限制性實例為每天約0.01 mg/kg至100 mg/kg體重。本領域普通技術人員將能夠研究相關因素並確定治療化合物的有效量而無需過度實驗。

可以將該化合物每天幾次頻繁地施用至動物，或者可以更不頻繁地施用，比如每天一次、每週一次、每兩週一次、每月一次或甚至更不頻繁地，比如每幾個月一次，甚至一年一次或更低。應當理解，在非限制性實例中，每天給藥的化合物的量可以每天、每隔一天、每2天、每3天、每4天或每5天施用一次。例如，每隔一天施用一次，可以在星期一開始5 mg的每日劑量，在星期三施用第一個隨後5 mg的每日劑量，在星期五施用第二個隨後5 mg的每日劑量，等等。劑量的頻率對技術人員而言是顯而易見的，並且取決於許多因素，比如但不限於所治療的疾病的類型和嚴重程度以及動物的類型和年齡。

可以改變本揭示內容的醫藥組成物中活性成分的實際劑量水平，以便獲得有效實現特定患者、組成物和給藥方式所需的治療反應的活性成分的量，而對患者是無毒的。

具有本領域普通技術的醫生，例如醫師或獸醫，可以容易地確定和開處方所需的有效量的醫藥組成物。例如，醫師或獸醫可以以低於所需要的水平開始在醫藥組成物中使用的本揭示內容化合物的劑量，以便獲得所需的治療效果並逐漸增加劑量，直到獲得所需的效果。

在具體實施方式中，以劑量單位形式配製化合物對於施用的容易性和劑量的均勻性是特別有利的。如本文所使用的劑量單位形式係指適合作為待治療患者的單位劑量的物理上離散的單位；每個單位都包含預定量的治療化合物，該化合物經計算可與所需的藥物媒介物結合以產生所需的治療效果。本揭示內容的劑量單位形式由以下決定並直接取決於(a)治療化合物的獨特特徵和要實現的特定治療效果，以及(b)在配製/配製用於治療患者的疾病或病症的這種治療化合物的領域中固有的局限性。

在某些實施方式中，本揭示內容的組成物以每天1-5次或更多次的範圍內的劑量施用至患者。在其他實施方式中，本揭示內容的組成物以包括但不限於每天一次、每兩天一次、每三天一次至一週一次以及每兩週一次的劑量範圍施用至患者。對於本領域技術人員而言顯而易見的是，本揭示內容的各種組合組成物的施用頻率將因受試者而異，這取決於許多因素，包括但不限於年齡、待治療的疾病或病症、性別、整體健康狀況和其他因素。因此，本揭示內容不應被解釋為限於任何特定的劑量方案，並且將由主治醫師考慮到患者的所有其他因素來確定要施用至任何患者的精確劑量和組成。

用於施用的本揭示內容的化合物可以在以下範圍內：約1 µg至約7,500 mg、約20 µg至約7,000 mg、約40 µg至約6,500 mg、約80 µg至約6,000 mg、約100 µg至約5,500 mg、約200 µg至約5,000 mg、約400 µg至約4,000 mg、約800 µg至約3,000 mg、約1 mg至約2,500 mg、約2 mg至約2,000 mg、約5 mg至約1,000 mg、約10 mg至約750 mg、約20 mg至約600 mg、約30 mg至約500 mg、約40 mg至約400 mg、約50 mg至約300 mg、約60 mg至約250 mg、約70 mg至約200 mg、約80 mg至約150 mg和它們之間的任何完整增量和部分增量。

在一些實施方式中，本揭示內容的化合物的劑量為約0.5 µg和約5,000 mg 。在一些實施方式中，本文描述的組成物中使用的本揭示內容的化合物的劑量小於約5,000 mg、或小於約4,000 mg、或小於約3,000 mg、或小於約2,000 mg、或小於約1,000 mg、或小於約800 mg、或小於約600 mg、或小於約500 mg、或小於約200 mg、或小於約50 mg。類似地，在一些實施方式中，如本文描述的第二化合物的劑量小於約1,000 mg、或小於約800 mg、或小於約600 mg、或小於約500 mg、或小於約400 mg、或小於約300 mg、或小於約200 mg、或小於約100 mg、或小於約50 mg、或小於約40 mg、或小於約30 mg、或小於約25 mg、或小於約20 mg、或小於約15 mg、或小於約10 mg、或小於約5 mg、或小於約2 mg、或小於約1 mg、或小於約0.5 mg、以及其任何完全增量和部分增量。

在某些實施方式中，本揭示內容涉及包裝的醫藥組成物，其包含單獨地或與第二種藥物組合地容納治療有效量的本揭示內容化合物的容器；以及使用該化合物治療、預防或減輕患者的疾病或病症的一種或多種症狀的說明書。

術語「容器」包括用於容納醫藥組成物或用於管理穩定性或水吸收的任何接受器(receptacle)。例如，在某些實施方式中，容器是包含醫藥組成物的包裝，比如存在於雙室中的液體(溶液和懸浮液)、半固體、凍幹固體、溶液和粉末或凍幹製劑。在其他實施方式中，容器不是包含醫藥組成物的包裝，即，容器是接受器，比如包含包裝的醫藥組成物或未包裝的醫藥組成物以及醫藥組成物使用說明書的盒子或小瓶。此外，包裝技術是本領域眾所周知的。應當理解，醫藥組成物的使用說明書可以包含在含有醫藥組成物的包裝上，並且因此，說明書與包裝的產品形成增加的功能關係。然而，應當理解，說明書中可能包含有關該化合物執行其預期功能的能力，例如治療、預防或減輕患者的疾病或病症的信息。 施用

本揭示內容任何組成物的給藥途徑包括吸入、口服、經鼻、直腸、腸胃外、舌下、經皮、經黏膜(例如舌下、舌、(經)口頰、(經)尿道、***(例如，經***和***周圍)、鼻(內)和((經)直腸)、膀胱內、肺內、十二指腸內、胃內、鞘內、硬膜外、胸膜內、腹膜內、皮下、肌內、皮內、動脈內、靜脈內、支氣管內、吸入和局部施用。

合適的組成物和劑型包括例如錠劑、膠囊、囊片、丸劑、軟膠囊、***錠、乳劑、分散劑、懸浮劑、溶液、糖漿劑、顆粒劑、珠劑、透皮貼劑、凝膠劑、粉末、丸粒、乳漿劑(magma)、菱形錠、乳膏、糊劑、膏藥、洗劑、片劑(discs)、栓劑、用於經鼻或口服施用的液體噴霧劑、用於吸入的乾粉或霧化製劑、用於膀胱內施用的組成物和製劑等。應當理解，可用於本揭示內容的製劑和組成物不限於本文描述的特定製劑和組成物。 口服施用

對於口服施用，特別地合適的是錠劑、糖衣錠、液體、滴劑、膠囊、囊片和軟膠囊。其他適合口服施用的製劑包括但不限於粉末或顆粒製劑、水性或油性懸浮劑、水性或油性溶液、糊劑、凝膠劑、牙膏、漱口劑、膜衣劑、口腔沖洗劑或乳劑。可以根據本領域已知的任何方法來製備預期用於口服使用的組成物，並且這種組成物可以包含選自適合用於製造錠劑的惰性、無毒、通常被認為是安全的(GRAS)藥學上的賦形劑的一種或多種試劑。這種賦形劑包括例如惰性稀釋劑比如乳糖；製粒劑和崩解劑，例如玉米澱粉；黏合劑，比如澱粉；和潤滑劑，比如硬脂酸鎂。

錠劑可以是未被塗覆的，或者可以使用已知方法塗覆，以在受試者的胃腸道中實現延遲崩解，從而提供活性成分的持續釋放和吸收。舉例來說，可以使用比如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料塗覆錠劑。進一步舉例來說，可以使用在美國專利號4,256,108；4,160,452；和4,265,874中描述的方法塗覆錠劑以形成滲透控釋片。錠劑可以進一步包含甜味劑、調味劑、著色劑、防腐劑或這些的某種組合以提供藥學上鮮美(elegant)且可口的製劑。包括活性成分的硬膠囊可以使用生理學上可降解的組成物例如明膠來製備。膠囊包括活性成分，並且可以進一步包括另外的成分，包括例如惰性固體稀釋劑，比如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土。

包括活性成分的硬膠囊可以使用生理學上可降解的組成物比如明膠來製備。這種硬膠囊包括活性成分，並且可以進一步包含另外的成分，包括例如惰性固體稀釋劑，比如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土。

包括活性成分的軟膠囊可以使用生理學上可降解的組成物比如來自動物膠原或羥丙甲纖維素(纖維素的改性形式)的明膠來製備，並使用明膠、水和增塑劑比如山梨糖醇或甘油的任選的混合物製造。這樣的軟膠囊包括可以與水或油介質比如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的活性成分。

對於口服施用，本揭示內容的化合物可以是通過常規方法與醫藥上可接受的賦形劑比如黏合劑；填充劑；潤滑劑；崩解劑；或潤濕劑製備的錠劑或膠囊的形式。如果期望的，可以使用合適的方法和包衣材料比如可獲得自Colorcon, West Point, Pa. (例如，OPADRY® OY型、OYC型、有機腸溶型OY-P型、水性腸溶型OY-A型、OY-PM型和OPADRY® White, 32K18400)的OPADRY®膜包衣系統塗覆錠劑。應當理解，可以使用其他公司的類似類型的膜塗層或聚合產物。

包括活性成分的錠劑可以例如通過將活性成分任選地與一種或多種另外的成分一起壓制或模制來製備。製備壓制錠劑可以通過在合適的裝置中壓制自由流動形式的活性成分比如粉末或顆粒製劑，任選地與一種或多種黏合劑、潤滑劑、賦形劑、表面活性劑和分散劑混合。模制錠劑可以通過在合適的裝置中模制活性成分、醫藥上可接受的載劑和至少足以潤濕混合物的液體的混合物來製備。用於製造錠劑的醫藥上可接受的賦形劑包括但不限於惰性稀釋劑、製粒劑和崩解劑、黏合劑和潤滑劑。已知的分散劑包括但不限於馬鈴薯澱粉和羥甲基澱粉鈉。已知的表面活性劑包括但不限於月桂基硫酸鈉。已知的稀釋劑包括但不限於碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、微晶纖維素、磷酸鈣、磷酸氫鈣和磷酸鈉。已知的製粒劑和崩解劑包括但不限於玉米澱粉和藻酸。已知的黏合劑包括但不限於明膠、***膠、預糊化的玉米澱粉、聚乙烯吡咯啶酮和羥丙基甲基纖維素。已知的潤滑劑包括但不限於硬脂酸鎂、硬脂酸、二氧化矽和滑石。

製粒技術在製藥領域是眾所周知的，用於改性活性成分的起始粉末或其他顆粒材料。通常將粉末與黏合劑材料混合成較大的永久性自由流動的附聚物或顆粒，稱為「製粒」。例如，使用溶劑的「濕法」製粒工藝的一般特徵是，將粉末與黏合劑材料混合，並在一定條件下用水或有機溶劑潤濕，形成濕的粒狀物料，然後必須將溶劑從中蒸發。 熔融製粒通常包括使用在室溫下為固體或半固體的材料(即，具有相對較低的軟化或熔點範圍)在基本上沒有添加水或其他液體溶劑的情況下促進粉末或其他材料的製粒。當加熱到熔點範圍內的溫度時，低熔點固體液化以充當黏合劑或製粒介質。液化的固體將其自身散佈在與之接觸的粉末狀材料的表面上，並在冷卻後形成固體顆粒狀物質，在其中將初始物質黏合在一起。然後可以將所得的熔融製粒提供給壓片機或封裝以製備口服劑型。熔融製粒通過形成固體分散體或固溶體來改善活性物質(即，藥物)的溶解速率和生物利用度。

美國專利號5,169,645公開了具有改善的流動特性的可直接壓縮的含蠟顆粒。當蠟在熔體中與某些改善流動性的添加劑混合，然後將混合物冷卻並製粒時，可得到顆粒。在某些實施方式中，在蠟(一種或多種)和添加劑(一種或多種)的熔融組成物中只有蠟本身熔融，並且在其他情況下，蠟(一種或多種)和添加劑(一種或多種)二者都將熔融。

本揭示內容還包括多層錠劑，其包括提供用於延遲釋放在本揭示內容的方法中有用的一種或多種化合物的層，和提供用於立即釋放在本揭示內容的方法中有用的一種或多種化合物的其他層。使用蠟/pH敏感的聚合物混合物，可以獲得胃不溶性組成物，其中捕獲(entrap)了活性成分，從而確保了其延遲釋放。

用於口服施用的液體製劑可以是溶液、糖漿劑或懸浮劑的形式。液體製劑可以通過常規方式用醫藥上可接受的添加劑比如懸浮劑(例如，山梨糖醇糖漿劑、甲基纖維素或氫化可食用脂肪)；乳化劑(例如，卵磷脂或***膠)；非水性媒介物(例如，杏仁油、油性酯或乙醇)；和防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸)製備。適用於口服施用的本揭示內容的醫藥組成物的液體製劑可以以液體形式或乾燥產物的形式製備、包裝和出售，該乾燥產物旨在在使用前用水或另一種合適的載劑重構。 腸胃外施用

如本文所使用的，醫藥組成物的「腸胃外施用」包括特徵在於對受試者的組織進行物理破壞和通過組織中的破壞施用醫藥組成物的任何施用途徑。因此腸胃外施用包括但不限於通過注射組成物施用醫藥組成物、通過外科切口施用組成物、通過穿透組織的非外科傷口施用組成物等方式施用醫藥組成物。特別地，預期腸胃外施用包括但不限於皮下、靜脈內、腹膜內、肌內、胸骨內注射和腎透析輸注技術。

適用於腸胃外施用的醫藥組成物的製劑包括與醫藥上可接受的載劑，比如無菌水或無菌等滲鹽水組合的活性成分。這樣的製劑可以以適合於推注施用或連續施用的形式製備、包裝或出售。可注射製劑可以在單位劑型，比如在含有防腐劑的安瓿或多劑量容器中製備、包裝或出售。還可以在裝置比如患者自控的鎮痛(PCA)裝置中製備、包裝或出售可注射製劑。腸胃外施用的製劑包括但不限於混懸劑、溶液、在油性或水性媒介物中的乳劑、膏劑和可植入的緩釋或生物可降解的製劑。這樣的製劑可以進一步包含一種或多種另外的成分，包括但不限於懸浮劑、穩定劑或分散劑。在用於腸胃外施用的製劑的一個實施方式中，活性成分以乾燥(即，粉末或顆粒)形式提供，以與合適的媒介物(例如，無菌無熱原水)重構，然後腸胃外施用重構的組成物。

醫藥組成物可以以無菌可注射的水性或油性懸浮液或溶液的形式製備、包裝或出售。該懸浮液或溶液可以根據已知技術配製，並且除了活性成分外還可以包含另外的成分，比如本文所述的分散劑、潤濕劑或懸浮劑。可以使用無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑，諸如例如水或1,3-丁二醇來製備這種無菌可注射製劑。其他可接受的稀釋劑和溶劑包括但不限於林格氏溶液、等滲氯化鈉溶液和不揮發性油比如合成的甘油單酯或甘油二酯。有用的其他可腸胃外施用的製劑包括包含活性成分的那些，該活性成分為重組人白蛋白、流化明膠、脂質體製劑或生物可降解的聚合物體系的組分中的微晶形式。用於持續釋放或植入的組成物可以包括醫藥上可接受的聚合物或疏水材料，比如乳劑、離子交換樹脂、微溶聚合物或微溶鹽。 局部施用

局部施用藥物製劑的障礙是表皮的角質層。角質層是由蛋白質、膽固醇、鞘脂、游離脂肪酸和各種其他脂質組成的高抗蝕層，並且包括角質化細胞和活細胞。限制化合物穿過角質層的滲透率(通量)的因素之一是可以負載或施加到皮膚表面上的活性物質的量。每單位皮膚面積施加的活性物質的量越大，皮膚表面與皮膚下層之間的濃度梯度越大，進而活性物質穿過皮膚的擴散力越大。因此，與其他濃度較低的製劑相比，含有較高濃度的活性物質的製劑更可能導致更多的活性物質以更一致的速率滲透穿過皮膚，所有其他內容都是一樣的。

適用於局部施用的製劑包括但不限於液體或半液體製劑，比如擦劑、洗劑、水包油或油包水乳劑，比如乳膏、藥膏或糊劑，以及溶液或懸浮液。儘管活性成分的濃度可以與活性成分在溶劑中的溶解度極限相同，但是可局部施用的製劑可以例如包括約1%至約10%(w/w)的活性成分。用於局部施用的製劑可以進一步包括一種或多種本文所述的另外的成分。

可以使用滲透促進劑。這些材料增加了藥物穿過皮膚的滲透率。本領域中典型的促進劑包括乙醇、單月桂酸甘油酯、PGML (聚乙二醇單月桂酸酯)、二甲基亞碸等。其他促進劑包括油酸、油醇、乙氧基乙二醇、月桂氮酮、鏈烷羧酸、二甲基亞碸、極性脂質或N-甲基-2-吡咯啶酮。

用於局部遞送本揭示內容的一些組成物的一種可接受的媒介物可以包含脂質體。脂質體的組成及其用途是本領域已知的(即，美國專利號6,323,219)。

在可選的實施方式中，局部活性醫藥組成物可以任選地與其他成分比如佐劑、抗氧化劑、螯合劑、表面活性劑、發泡劑、潤濕劑、乳化劑、增黏劑、緩衝劑、防腐劑等組合。在其他實施方式中，滲透或滲透促進劑包括在組成物中，並且相對於缺乏滲透促進劑的組成物，對於改善活性成分滲透到皮膚中和穿過角質層是有效的。各種滲透促進劑，包括油酸、油醇、乙氧基乙二醇、月桂氮酮、鏈烷羧酸、二甲基亞碸、極性脂質或N-甲基-2-吡咯啶酮是本領域技術人員已知的。在另一方面，所述組成物可以進一步包含水溶助劑，其起到增加角質層結構的病症的作用，並因此允許增加穿過角質層的運輸。各種水溶助劑比如異丙醇、丙二醇或二甲苯磺酸鈉是本領域技術人員已知的。

局部活性醫藥組成物應以有效影響所需變化的量施用。如本文所使用的「有效量」係指足以覆蓋需要改變的皮膚表面區域的量。活性化合物應該以按組成物的重量體積計約0.0001%至約15%的量存在。例如，它應該以組成物的約0.0005%至約5%的量存在；例如，它應該以組成物的約0.001%至約1%的量存在。這樣的化合物可以源自合成的或天然的。 口頰施用

本揭示內容的醫藥組成物可以適合於含服施用的製劑來製備、包裝或出售。這樣的製劑可以例如為使用常規方法製備的錠劑或菱形錠的形式，並且可以包含例如0.1至20% (w/w)的活性成分，餘量包括口腔可溶解的或可降解的組成物，以及任選地本文所述的一種或多種另外的成分。可選地，適合含服施用的製劑可以包括包含活性成分的粉末狀或氣霧化(aerosolized)或噴霧化(atomized)溶液或懸浮液。當分散時，這種粉末狀、氣霧化或噴霧化的製劑可具有在約0.1至約200微米範圍內的平均顆粒或液滴尺寸，並且可以進一步包括一種或多種本文所述的另外的成分。本文描述的製劑的實例不是窮舉的，並且應當理解，本揭示內容包括本文未描述但本領域技術人員已知的這些和其他製劑的另外的修改。 直腸施用

本揭示內容的醫藥組成物可以以適於直腸施用的製劑製備、包裝或出售。這樣的組成物可以是例如栓劑、保留灌腸製劑和用於直腸或結腸灌洗的溶液的形式。

栓劑製劑可通過將活性成分與無刺激性的醫藥上可接受的賦形劑混合來製備，該賦形劑在正常室溫(即，約20℃)下呈固體，並且在受試者的直腸溫度(即，在健康人體內約37℃)下呈液體。合適的醫藥上可接受的賦形劑包括但不限於可可脂、聚乙二醇和各種甘油酯。栓劑製劑可以進一步包含各種另外的成分，包括但不限於抗氧化劑和防腐劑。

用於直腸或結腸灌洗的保留灌腸製劑或溶液可通過將活性成分與醫藥上可接受的液體載劑混合來製備。如本領域中眾所周知的，可以使用適合於受試者的直腸解剖結構的遞送裝置來施用灌腸製劑，並且可以將灌腸製劑包裝在遞送裝置中。灌腸製劑可以進一步包含各種另外的成分，包括但不限於抗氧化劑和防腐劑。 另外的施用形式

本揭示內容的另外的劑型包括如在美國專利號6,340,475、6,488,962、6,451,808、5,972,389、5,582,837和5,007,790中描述的劑型。本揭示內容的另外的劑型還包括如在美國專利申請號20030147952、20030104062、20030104053、20030044466、20030039688和20020051820中描述的劑型。本揭示內容的另外的劑型還包括如在PCT申請號WO 03/35041、WO 03/35040、WO 03/35029、WO 03/35177、WO 03/35039、WO 02/96404、WO 02/32416、WO 01/97783、WO 01/56544、WO 01/32217、WO 98/55107、WO 98/11879、WO 97/47285、WO 93/18755和WO 90/11757中描述的劑型。 控釋製劑 和藥物遞送系統：

在某些實施方式中，本揭示內容的組成物及/或製劑可以是但不限於短期、快速補償以及受控的例如持續釋放、延遲釋放和脈衝釋放製劑。

術語持續釋放在其常規意義上係指可在延長的時間段內逐漸釋放藥物的藥物製劑，儘管不一定，但在延長的時間段內可導致藥物的血液水平基本恒定。該時間段可以長達一個月或更長時間，並且應該是長於以推注形式施用相同量的釋放。

為了持續釋放，可以將化合物與合適的聚合物或疏水材料一起配製，所述聚合物或疏水材料為化合物提供持續釋放特性。這樣，用於本揭示內容方法的化合物可以以微粒形式通過例如注射施用，或者以晶片或圓盤形式通過植入施用。

在本揭示內容的某些實施方式中，使用緩釋製劑將本揭示內容中有用的化合物單獨或與另一種藥物製劑組合施用至受試者。

術語延遲釋放在本文中在其常規意義上係指在藥物施用後的一定延遲之後提供藥物的初始釋放的藥物製劑，並且儘管不是必須的，但是可以包括從約10分鐘直至大約12個小時。

術語脈衝釋放在本文中在其常規意義上係指以藥物施用後產生脈衝血漿分佈的方式提供藥物釋放的藥物製劑。

術語立即釋放在其常規意義上係指在藥物施用後立即提供釋放藥物的藥物製劑。

如本文所使用的，短期指在藥物施用之後的任何時間段，至多並且包括在藥物施用之後約8小時、約7小時、約6小時、約5小時、約4小時、約3小時、約2小時、約1小時、約40分鐘、約20分鐘或約10分鐘和其任何或所有完整增量或部分增量。

如本文所使用的，快速補償指在藥物施用之後的任何時間段，至多並且包括約8小時、約7小時、約6小時、約5小時、約4小時、約3小時、約2小時、約1小時、約40分鐘、約20分鐘或約10分鐘，以及其任何完整增量和部分增量。

僅使用常規實驗，本領域技術人員將認識到或能夠確定本文所述的具體程序、實施方式、申請專利範圍和實施例的許多等同方案。這樣的等同方案被認為在本揭示內容的範圍內，並由所附申請專利範圍涵蓋。例如，應當理解，利用本領域公認的替代方案並且僅使用常規實驗，包括但不限於反應時間、反應規格(size)/規模(volume)和實驗試劑比如溶劑、催化劑、壓力、大氣條件例如氮氣氣氛、以及還原劑/氧化劑的反應條件的改進均在本申請的範圍內。

應當理解，無論在本文何處提供數值和範圍，範圍格式的描述僅是為了方便和簡潔，而不應被解釋為對本揭示內容範圍的僵化限制。因此，這些值和範圍所涵蓋的所有值和範圍意在被涵蓋在本揭示內容的範圍內。此外，本申請還考慮了落入這些範圍內的所有值以及該值的範圍的上限或下限。範圍的描述應被認為已明確公開了所有可能的子範圍以及該範圍內的單個數值，以及在合適時該範圍內的數值的部分整數。例如，對範圍從1到6的描述應被視為已明確公開了從1到3、從1到4、從1到5、從2到4、從2到6、從3到6等的子範圍，以及該範圍內的單個數值，例如1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。無論該範圍的廣度如何，這都適用。

本文提供的實施例說明了本揭示內容的方面。然而，它們絕不是對如本文所述的公開內容的教導或公開內容的限制。提供本文中的實施例僅出於說明的目的，並且本揭示內容不限於這些實施例，而是涵蓋由於本文提供的教導而顯而易見的所有變型。 實施例

現在參考以下實施例描述本揭示內容。提供這些實施例僅出於說明的目的，並且本揭示內容不限於這些實施例，而是涵蓋由於本文提供的教導而顯而易見的所有變型。 步驟 1 – 8,9- 二氟哌喃并 [3,4-c] 異色烯 -1,6(2 H,4 H)- 二酮 (B) 的合成

將DMF (20.5 L)加入50 L反應器中並將內容物抽氣並用N ₂兩次回填。接著，加入哌喃-3,5-二酮(1.28 kg，11.22 mol，1.2 eq.)，隨後加入2-溴-4,5-二氟苯甲酸( A) (2.20 kg，9.28 mol，1.0 eq.)、L-脯胺酸(214 g，1.86 mol，0.2 eq.)、K ₂CO ₃(2.59 kg，18.6 mol，2 eq.)和碘化銅(I)(177 g，0.93 mol，0.1 eq.)。將混合物再次脫氣並再用N ₂回填兩次。在1小時內將反應混合物加熱到70℃並在該溫度下攪拌不少於10小時，直到通過LCMS確認反應完成。將反應混合物冷卻至5℃，在此之後在1.5小時內將其用水(20 L)稀釋，同時保持溫度低於12℃。使用4 N HCl (7.5 L)將所得黑色懸浮液緩慢酸化至pH 2。加入乙酸異丙酯(4.5 L)，並在1小時內將所得混合物升溫至20℃。因為白色固體沉澱，將混合物在20℃下攪拌不少於48小時，直到通過LCMS確認反應完成(＞90%的 B形成)。過濾固體，並依次用水(2×3 L)和乙酸異丙酯(2×3 L)洗滌濕濾餅。在完全脫液之後，將濕濾餅在40℃下真空乾燥16小時，以提供化合物( B) (1.659 kg，71%)，為灰白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ 8.65 (dd，J=7.8，12.4 Hz，1H)，8.21 (dd，J=8.0，10.1 Hz，1H)，4.80 (s，2H)，4.33 (s，2H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：192.4 (s)，168.4 (d， J=2.0 Hz)，157.0 (s)，154.2 (dd， J=13.2，256.1 Hz)，149.1 (dd， J=14.0，251.5 Hz)，130.9 (d， J=10.0 Hz)，118.3 (d， J=19.3 Hz)，117.6 (d， J=6.5 Hz)，113.6 (d， J=21.3 Hz)，107.3 (s)，71.4 (s)，64.2 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−124.9 (ddd， J=8.5，12.4，22.0 Hz，1F)，−134.5 (dt， J=9.0，23.3 Hz，1F)。 步驟 2 – 8,9- 二氟 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -1,6(4 H,5 H)- 二酮 (C) 的合成

將化合物 B(1.649 kg，6.54莫耳)和28-30% NH ₄OH (aq.) (6.27 L)裝入20 L反應器中，並在45 min內將所得漿液加熱到50℃。固體在加熱之後完全溶解，並且在10 min之後產物開始沉澱。在50℃下攪拌不少於5小時之後，通過LCMS確認反應完成( B消失且 C形成)。將反應混合物冷卻至5℃並攪拌30 min。將冷漿液過濾，並依次用水(3×1 L)和甲醇(2×1 L)洗滌濕濾餅。在完全脫液之後，將濕濾餅在40℃下真空乾燥12小時，以提供化合物( C) (1.536 kg，94%)，為白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：12.35 (br s，1H)，8.90 (dd， J=8.0，13.2 Hz，1H)，8.09 (dd， J=8.6，10.8 Hz，1H)，4.77 (s，2H)，4.27 (s，2H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：191.7 (s)，160.2 (s)，153.9 (s)，153.5 (dd， J=13.1，251.5 Hz)，148.9 (dd， J=14.1，249.5 Hz)，132.0 (d， J=9.1 Hz)，122.5 (s)，115.2 (d， J=17.1 Hz)，113.7 (d， J=20.1 Hz)，104.9 (s)，72.2 (s)，64.4 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−128.7 (ddd， J=8.5，13.2，22.4 Hz，1F)，−137.1 (ddd， J=8.0，11.0，23.6 Hz，1F)；MS (ESI−， m/z)：[C ₁₂H ₇F ₂NO ₃−H] ⁻的計算值：250.0；實測值：250.0。 步驟 3 – ( S)-8,9- 二氟 -1-((( R)-1- 苯乙基 ) 胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮 (D) 的合成

將酮 C(670 g，2.67 mol)、( R)-1-苯乙-1-胺(388 g，3.20 mol，1.2 eq.)和Ti(OEt) ₄(913 g，4.00 mol，1.5 eq.)裝入100 L反應器中。接著，加入2-MeTHF (6.7 L)，並將所得懸浮液加熱到內部溫度為80℃，持續不少於21小時，直到通過HPLC確認反應完成(在以NaBH ₄和EtOH淬滅等分試樣後形成化合物 D)。將反應混合物冷卻至50℃並加入另外的2-MeTHF (13.4 L)。將所得溶液冷卻至–11℃，並在1小時內分4份交替加入EtOH (1.34 L)和NaBH ₄(151.4 g，4.0 mol，1.5 eq.)，同時保持反應溫度低於–8℃。將所得混合物在–11℃和–8℃之間攪拌，持續不少於5小時，直到通過HPLC確認反應轉化率＞99% (形成化合物 D)。

通過加入檸檬酸(3.86 kg)和NaOH (643 g)在水(20.1 L)中的預製溶液來淬滅反應混合物，同時保持溫度低於24℃。另外的2-MeTHF (2.0 L)用於定量轉移。將所得混合物在24℃下攪拌12小時，在此期間混合物分成兩個均質層。分離有機層，並用2-MeTHF (6.7 L)進一步萃取水性層。用水(6.7 L)、8% NaHCO ₃(aq.) (13.4 L)和水(10.0 L)依次洗滌合併的有機層。將有機層用2-MeTHF (5.4 L)稀釋並通過濾紙過濾。

將過濾的溶液濃縮至總體積為5.4 L，在此期間一些固體從混合物中沉澱出來。將混合物用2-MeTHF (1.3 L)稀釋，同時沖洗反應容器的側面。將所得漿液在22℃下攪拌6.5小時，在此之後在1.5小時內將混合物加熱到40℃。將混合物在40℃下攪拌1.5小時，並且然後在1.5小時內冷卻回至22℃。將漿液在相同溫度下攪拌3.5小時，在此之後過濾固體。在0℃下將濕濾餅用預冷的2-MeTHF (0.67 L)洗滌並完全脫液。將濕濾餅在40℃下真空乾燥16小時，以提供化合物( D) (503.1 g，53%)，為淺棕褐色粉末。通過在結晶過程中使用正庚烷作為抗溶劑可以將分離的產率提高到＞65%。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.31 (br s，1H)，7.94 (dd， J=8.4，11.0 Hz，1H)，7.69 (dd， J=7.6，12.4 Hz，1H)，7.31–7.10 (m，5H)，4.37 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.27 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.09 (q， J=6.5 Hz，1H)，3.97 (d， J=11.8 Hz，1H)，3.79 (s，1H)，3.48 (dd， J=2.3，11.7 Hz，1H)，2.10 (br s，1H)，1.34 (d， J=6.5 Hz，3H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：159.8 (d， J=3.1 Hz)，152.5 (dd， J=14.1，251 Hz)，147.9 (dd， J=14.2，246 Hz)，146.9 (s)，136.7 (d， J=2.2 Hz)，135.6 (dd， J=2.4，8.8 Hz)，128.1 (s)，126.6 (s)，126.4 (s)，122.4 (dd， J=1.7，5.5 Hz)，114.6 (d， J=18.0 Hz)，111.2 (d， J=18.7 Hz)，107.3 (d， J=2.9 Hz)，67.2 (s)，63.4 (s)，54.8 (s)，47.2 (s)，23.7 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−131.6 (ddd， J=8.5，12.4，23.6 Hz，1F)，−139.9 (ddd， J=7.6，11.0，23.1 Hz，1F)；MS (ESI+，m/z)：[C ₂₀H ₁₈F ₂N ₂O ₂+H] ⁺的計算值：357.1；實測值：357.1。 步驟 3’ – ( S)-8,9- 二氟 -1-((( R)-1-(4- 甲氧苯基 ) 乙基 ) 胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮 (D’) 的合成

向50 L反應器加入酮 C(650 g，2.59 mol)、( R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺(470 g，3.11 mol，1.2 eq.)和Ti(OEt) ₄(890 g，3.89 mol，1.5 eq.)。加入2-MeTHF (6.5 L)並將所得懸浮液加熱到溫度為80℃，持續不少於15小時，直到通過HPLC確認反應完成(在以NaBH ₄和EtOH淬滅等分試樣之後形成 D’)。將反應混合物冷卻至50℃並加入另外2-MeTHF (13 L)。將懸浮液加熱到溫度為70℃並且混合物變成澄清溶液。

將溶液冷卻至50℃並加入乙醇(1.05 L，834 g，18.1 mol，7 eq.)。將混合物冷卻至-2℃並加入NaBH ₄(28.6 g，778 mmol，0.3 eq.)，並將混合物在-2至0℃的溫度下攪拌30 min。加入另外的NaBH ₄(28.6 g，778 mmol，0.3 eq.)並將混合物在相同溫度下攪拌30 min。加入第三份NaBH ₄(57.2 g，1.55 mol，0.6 eq.)並將混合物在0℃下攪拌1.5小時。加入另外的NaBH ₄(28.6 g，778 mmol，0.3 eq.)並將混合物在0℃下攪拌30 min。加入乙醇(150 mL，2.59 mol，1 eq.)和NaBH ₄(28.6 g，778 mmol，0.3 eq.，共1.8 eq.)並將混合物在0℃下攪拌30 min。在0℃下攪拌反應混合物直到通過HPLC確認反應完成(形成 D’)。

在0℃下通過控制添加檸檬酸鈉水溶液(1.0 M檸檬酸/0.8 M NaOH緩衝液，6.0 L)來淬滅反應混合物，使溫度上升至24℃。將反應混合物在室溫下攪拌12小時。分離各層，並將有機層依次用10% NaCl水溶液(2×3 L)、8% NaHCO ₃(aq.) (2.4 L)和水(3 L)洗滌。向分離的有機層加入庚烷(3 L)，使另外的水性層分開。將有機層通過燒結的玻璃漏斗過濾並通過真空蒸餾濃縮至體積為~6.5 L。將所得紅色溶液加熱到35℃並在1.5小時內逐滴加入庚烷(2.0 L)。將所得稀漿液在35℃下攪拌2小時，在此之後將其冷卻至27℃並在該溫度下攪拌30 min。將混合物過濾，並用2-MeTHF–庚烷的1:2混合物(2×650 mL)洗滌濕濾餅。在完全脫液之後，將濕濾餅在40℃下真空乾燥4小時，以提供 D’(397 g，40%)，為灰白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.16 (br s，1H)，7.97 (dd， J=8.5，11.0 Hz，1H)，7.70 (dd， J=7.6，12.4 Hz，1H)，7.20 (d， J=8.6 Hz，2H)，6.77 (d， J=8.6 Hz，2H)，4.37 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.28 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.05 (q， J=6.5 Hz，1H)，3.97 (d， J=11.6 Hz，1H)，3.78 (s，1H)，3.68 (s，3H)，3.48 (dd， J=2.4，11.7 Hz，1H)，1.98 (br s，1H)，1.30 (d， J=6.4 Hz，3H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：159.9 (d， J=3.0 Hz)，158.0 (s)，152.6 (dd， J=14.1，251.0 Hz)，148.1 (dd， J=14.3，246.9 Hz)，138.9 (s)，136.7 (d， J=2.2 Hz)，135.6 (d， J=8.8 Hz)，127.4 (s)，122.4 (d， J=5.4 Hz)，114.6 (d， J=18.0 Hz)，113.5 (s)，111.2 (d， J=18.7 Hz)，107.4 (d， J=2.8 Hz)，67.2 (s)，63.5 (s)，55.0 (d， J=1.6 Hz)，54.1 (s)，47.2 (s)，23.7 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−131.6 (ddd， J=8.5，12.4，23.4 Hz，1F)，−139.9 (ddd， J=7.6，11.1，23.0 Hz，1F)；MS (ESI+，m/z)：[C ₂₁H ₂₀F ₂N ₂O ₃+H] ⁺的計算值：387.2；實測值：387.2。 步驟 4 – ( S)-8,9- 二氟 -1-( 甲基 (( R)-1- 苯乙基 ) 胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮 (E) 的合成

向20 L反應器加入胺 D(480.0 g，1.347 mol)並將固體懸浮在2-MeTHF (9.6 L)中。然後加入乙酸(97.1 g，1.62 mol，1.2 eq.)和37%甲醛(273.3 g，101 g甲醛，3.37 mol，2.5 eq.)。將所得懸浮液冷卻至16℃並在25 min內分4份加入NaBH(OAc) ₃(571 g，2.69 mol，2.0 eq.)，保持溫度低於23℃。將反應混合物在21℃下攪拌不長於3小時，直到通過HPLC確認反應完成( D的轉化率＞99%並形成 E)。在20 min內將混合物用1 M NaOH (aq.) (4.8 L)淬滅並且然後用水(3.4 L)稀釋。在室溫下攪拌所得懸浮液直到固體被完全溶解。分離有機層，並將水性層用2-MeTHF (4.8 L)進一步萃取。將合併的有機層用水(4.8 L)洗滌並經Na ₂SO ₄(0.96 kg)乾燥1小時。將混合物過濾，和通過真空蒸餾將過濾的溶液濃縮至總體積為7.2 L。加入環戊基甲醚(CPME，4.8 L)，並將混合物濃縮至7.2 L，為固體沉澱。加入另外的CPME (4.8 L)並將混合物濃縮至總體積為5.8 L。加入另外的CPME (1.4 L)並用於沖洗反應容器的側面。將所得漿液在21℃下攪拌2小時，並過濾固體。將濕濾餅依次用CPME (0.96 L)和正庚烷(2×0.96 L)洗滌，然後完全脫液。將濕濾餅在55℃下真空乾燥，以提供化合物( E) (454.0 g，用殘留的正庚烷和CPME進行修正，為449.5 g，90%)，為灰白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.46 (s，1H)，8.02 (dd， J=8.5，10.8 Hz，1H)，7.98 (dd， J=7.8，12.7 Hz，1H)，7.28–7.11 (m，5H)，4.44 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.29 (d， J=16.1 Hz，1H)，4.26 (d， J=12.8 Hz，1H)，4.12 (s，1H)，3.95 (q， J=6.7 Hz，1H)，3.54 (dd， J=3.4，12.4 Hz，1H)，2.05 (s，3H)，1.41 (d， J=6.7 Hz，3H)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−131.5 (ddd， J=8.6，12.8，22.2 Hz，1F)，−139.4 (ddd， J=7.9，11.1，23.1 Hz，1F)；MS (ESI+，m/z)：[C ₂₁H ₂₀F ₂N ₂O ₂+H] ⁺的計算值：371.2；實測值：371.2。 步驟 4’ – ( S)-8,9- 二氟 -1-((( R)-1-(4- 甲氧苯基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮 (E’) 的合成

向20 L反應器加入 D’(803.5 g，2.079 mol)並將固體懸浮在CH ₂Cl ₂(8.8 L)中。將懸浮液冷卻至溫度為13℃並加入乙酸(143 mL，150 g，2.50 mol，1.2 eq.)和37%甲醛(422 g，156 g甲醛，5.20 mol，2.5 eq.)。在1小時內分6份加入NaBH(OAc) ₃(882 g，4.19 mol，2.0 eq.)，保持溫度低於18℃。在最終加入之後，將溶液在12-14℃下攪拌不少於1小時，直到通過HPLC確認反應完成( D’消失並形成 E’)。將反應混合物用3M NaOH (4 L)分批淬滅。將所得混合物攪拌20 min，並加入CH ₂Cl ₂(4 L)，隨後加入水(1 L)。分離各層，並將有機層用另外的水(4 L)洗滌。將有機層通過無水Na ₂SO ₄墊過濾，在此之後通過真空蒸餾將其濃縮至總體積為5 L。將含有化合物( E’)的有機層原樣用於下一步( 步驟 5’)。 步驟 5 – ( S)-8,9- 二氟 -1-( 甲胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮三氟乙酸鹽 (F) 的合成

向20 L高壓釜反應器加入化合物 E(420.0 g，1.134 mol)並將固體懸浮在甲醇(4.2 L)中。加入三氟乙酸(420 mL)並在室溫下攪拌該混合物直到固體完全溶解。將混合物脫氣並用N ₂吹掃5 min，並加入10% Pd/C (濕的，12.1 g原樣，1.21 g Pd，11.4 mmol，0.01 eq.)。將懸浮液脫氣並用氫氣吹掃5 min，並將混合物用氫氣(0.8巴)回填。該吹掃和回填過程再重複兩次。將反應混合物在氫氣氣氛(0.8巴)下攪拌不少於3.5小時，直到通過HPLC確認反應完成( E的轉化率＞99%並形成 F)。將混合物用N ₂吹掃5 min，並將反應器的頂部空間用N ₂回填。該吹掃和回填過程再重複三次。將反應混合物通過CELITE®墊過濾，並用甲醇(2.1 L)洗滌固體。通過真空蒸餾將濾液濃縮至總體積為2.1 L，在此之後加入2-MeTHF (8.4 L)。將混合物濃縮至總體積為6.3 L，並且為固體沉澱，加入另外的2-MeTHF (8.4 L)。將漿液濃縮至總體積為5.5 L，並使用另外2-MeTHF (0.8 L)沖洗反應容器的側面。將懸浮液在室溫下攪拌2小時，在此之後過濾固體，並將濕濾餅用2-MeTHF (2×0.65 L)洗滌。在完全脫液之後，將濕濾餅在50℃下真空乾燥，以提供化合物( F) (462.9 g，用殘留的2-MeTHF進行修正，為411.5 g，95%)，為白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.82 (br s，1H)，9.04 (br s，2H)，8.08 (dd， J=8.4，10.8 Hz，1H)，8.02 (dd， J=7.3，12.3 Hz，1H)，4.64–4.51 (m，3H)，4.46 (d， J=12.8 Hz，1H)，3.89 (dd， J=1.8，12.9 Hz，1H)，2.66 (s，3H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：159.9 (d， J=2.9 Hz)，158.3 (q， J=31.2 Hz)，153.0 (dd， J=13.9，252.2 Hz)，148.5 (dd， J=14.4，248.4 Hz)，140.0 (d， J=2.2 Hz)，133.9 (dd， J=2.4，8.6 Hz)，122.2 (dd， J=2.2，6.1 Hz)，117.2 (q， J=299.6 Hz)，115.2 (d， J=18.2 Hz)，111.6 (d， J=19.4 Hz)，100.9 (s)，63.9 (s)，62.5 (s)，48.6 (s)，30.5 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−73.7 (s，3F)，−130.5 (ddd， J=8.4，12.2，22.9 Hz，1F)，−138.7 (ddd， J=7.3，10.7，22.9 Hz，1F)；MS (ESI+，m/z)：[C ₁₃H ₁₂F ₂N ₂O ₂+H] ⁺的計算值：267.1；實測值：267.1。 步驟 5’ – ( S)-8,9- 二氟 -1-( 甲胺基 )-1,5- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -6(4 H)- 酮三氟乙酸鹽 (F) 的合成

向 E’的溶液加入三乙基矽烷(484 g，4.16 mol，2 eq.)，隨後加入三氟乙酸(3.7 L)。將所得溶液在室溫下攪拌不少於35小時，直到通過HPLC確認反應完成( E’消失並且形成 F)。將反應混合物在減壓下蒸餾至總體積為5 L。加入甲醇(1 L)並將混合物進一步蒸餾至體積為5 L，此時一些固體開始沉澱。將稀漿液用2-MeTHF/甲醇(4 L，3:1 v/v)的混合物稀釋，使固體溶解。將溶液濃縮至體積為7 L，並加入另外2-MeTHF/甲醇(2 L，3:1 v/v)。將溶液濃縮至體積為8 L。加入2-MeTHF (2 L)並將混合物再次濃縮至總體積為8 L，此時固體開始沉澱。將該過程再重複兩次。將所得漿液調節至溫度為27℃並過濾固體。在脫液之後，將濕濾餅用2-MeTHF (1 L，然後2×0.5 L)洗滌。在完全脫液之後，將濕濾餅在40℃下真空乾燥24小時，以提供化合物( F) (673 g，用殘留的2-MeTHF進行修正，為628 g，79%)，為白色固體。在某些實施方式中，通過進行另外的溶劑交換以確保在過濾前完全除去甲醇來提高產率。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.82 (br s，1H)，9.04 (br s，2H)，8.08 (dd， J=8.4，10.8 Hz，1H)，8.02 (dd， J=7.3，12.3 Hz，1H)，4.64–4.51 (m，3H)，4.46 (d， J=12.8 Hz，1H)，3.89 (dd， J=1.8，12.9 Hz，1H)，2.66 (s，3H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：159.9 (d， J=2.9 Hz)，158.3 (q， J=31.2 Hz)，153.0 (dd， J=13.9，252.2 Hz)，148.5 (dd， J=14.4，248.4 Hz)，140.0 (d， J=2.2 Hz)，133.9 (dd， J=2.4，8.6 Hz)，122.2 (dd， J=2.2，6.1 Hz)，117.2 (q， J=299.6 Hz)，115.2 (d， J=18.2 Hz)，111.6 (d， J=19.4 Hz)，100.9 (s)，63.9 (s)，62.5 (s)，48.6 (s)，30.5 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−73.7 (s，3F)，−130.5 (ddd， J=8.4，12.2，22.9 Hz，1F)，−138.7 (ddd， J=7.3，10.7，22.9 Hz，1F)；MS (ESI+，m/z)：[C ₁₃H ₁₂F ₂N ₂O ₂+H] ⁺的計算值：267.1；實測值：267.1。 步驟 6 – ( S)- N-(8,9- 二氟 -6- 氧 -1,4,5,6- 四氫 -2 H- 哌喃并 [3,4-c] 異喹啉 -1- 基 )-5,6- 二氟 - N- 甲基 -1 H- 吲哚 -2- 甲醯胺 (X) 的合成

向10 L反應器加入5,6-二氟-1 H-吲哚-2-羧酸( G) (159.7 g，0.81 mol，1.1 eq.)和DMF (5.4 g，73.9 mmol，0.1 eq.)，並將內容物溶解在THF (3.36 L)中。將所得溶液冷卻至3℃並在12 min內加入草醯氯(102.8 g，0.81 mol，1.1 eq.)。將溶液在3℃下攪拌1小時，在此之後將溫度調整至22℃，並將混合物在該溫度下攪拌30 min。加入另外的草醯氯(4.7 g，37 mmol，0.05 eq.)並將溶液在室溫下再攪拌30 min，直到通過HPLC確認反應完成(在用5%甲醇鈉的甲醇溶液淬滅之後5,6-二氟-1 H-吲哚-2-羧酸消失並且形成相應的甲酯)。

向單獨的30 L反應器加入化合物 F(280.0 g，0.736 mol)並將固體溶解在水(1.4 L)和THF (7.0 L)的混合物中。加入K ₂CO ₃(305.3 g，2.21 mol，3 eq.)在水(0.56 L)中的溶液並將混合物加熱到32℃。在7 min內將如本文所述製備的醯氯( H)溶液加入該混合物，並使用THF (0.84 L)來定量轉移。將反應混合物在35℃下攪拌不少於45 min，在此之後HPLC指示轉化率＞99% ( F的轉化率並且形成 X)。將混合物用水(0.84 L)和乙酸乙酯(5.6 L)稀釋並將內容物在35℃下攪拌20 min。分離各層，並將有機層用水(2.8 L)洗滌，將內部溫度保持在34℃，持續20 min。分離各層，並通過CELITE®墊過濾有機層。用THF (1.4 L)洗滌固體，並將所得濾液冷卻至12℃。少量的固體從溶液沉澱出來，並通過濾紙過濾混合物。通過真空蒸餾將溶液濃縮至總體積為8.4 L，在此之後加入乙醇(8.4 L)。將溶液濃縮至總體積為8.4 L，並加入另外的乙醇(5.6 L)。將混合物濃縮至體積為4.2 L，呈固體沉澱。加入乙醇(5.6 L)，並將漿液濃縮至體積為3.9 L。使用另外的乙醇(0.3 L)來沖洗反應容器的側面。加入水(0.42 L)，並將漿液的溫度調節至38℃。將懸浮液在相同溫度下攪拌1小時，在此之後將其冷卻至22℃並在該溫度下攪拌2小時。將混合物過濾，並將濕濾餅用乙醇(0.76 L)洗滌。在完全脫液之後，將濕濾餅在60℃下真空乾燥，以提供化合物( X) (316.0 g，用殘留的乙醇和水進行修正，為310.9 g，95%)，為白色固體。 ¹H NMR (400 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：11.92 (br s，1H)，11.74 (br s，1H)，8.12 (dd， J=8.4，10.8 Hz，1H)，7.61 (dd， J=8.0，11.1 Hz，1H)，7.43 (dd， J=7.5，12.0 Hz，1H)，7.38 (dd， J=7.2，11.1 Hz，1H)，6.95 (s，1H)，5.73 (app s，1H)，4.62 (d， J=16.2 Hz，1H)，4.46 (d， J=15.7 Hz，1H)，4.15 (d， J=12.2 Hz，1H)，4.02 (dd， J=3.4，12.3 Hz，1H)，3.13 (s，3H)； ¹³C NMR (100.6 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：162.3 (s)，160.0 (d， J=2.9 Hz)，153.0 (dd， J=13.9，252 Hz)，148.4 (dd， J=14.2，248 Hz)，148.2 (dd， J=16.3，241 Hz)，145.7 (dd， J=15.2，236 Hz)，139.8 (s)，134.7 (d， J=8.3 Hz)，131.6 (d， J=3.6 Hz)，131.3 (d， J=11.3 Hz)，123.0 (d， J=5.9 Hz)，122.3 (d， J=8.6 Hz)，115.4 (d， J=18.3 Hz)，109.9 (d， J=19.0 Hz)，108.0 (s)，102.2 (s)，99.7 (d， J=21.4 Hz)，70.6 (s)，63.5 (s)，45.6 (s)，33.6 (s)； ¹⁹F NMR (376.5 MHz，SO(CD ₃) ₂) δ：−129.7 (dt， J=10.1，21.4 Hz)，−138.8 (dt， J=9.1，20.8 Hz)，−141.3 (ddd， J=8.1，11.1，21.9 Hz)，−147.1 (ddd， J=7.0，10.9，21.6 Hz)；MS (ESI+，m/z)：[C ₂₂H ₁₅F ₄N ₃O ₃+H] ⁺的計算值：446.1；實測值：446.1。 列舉的實施方式

提供了以下示例性實施方式，其編號不應解釋為指定重要程度：

實施方式1提供了一種製備(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氫-2H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲醯胺(X)或其鹽或溶劑化物的方法：

(X)， 所述方法包括使( S)-8,9-二氟-1-(甲胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (F)與5,6-二氟-1 H-吲哚-2-碳醯氯 (H)反應，從而產生包括 (X)的第一反應體系，

(F)，

(H)。

實施方式2提供了實施方式1所述的方法，其中 (F)和 (H)的反應在鹼存在下進行。

實施方式3提供了實施方式2所述的方法，其中鹼包括K ₂CO ₃。

實施方式4提供了實施方式1-3中任一項所述的方法，其中 (F)和 (H)在包括THF和H ₂O中的至少一種的溶劑中反應。

實施方式5提供了實施方式1-4中任一項所述的方法，其中(X)的純化包括將至少一種有機溶劑加入第一反應體系中以產生雙相體系。

實施方式6提供了實施方式5所述的方法，其中所述有機溶劑包括乙酸乙酯。

實施方式7提供了實施方式5-6中任一項所述的方法，其中所述(X)的純化進一步包括分離所述雙相體系以提供水相和有機相。

實施方式8提供了實施方式7所述的方法，其中所述(X)的純化進一步包括將至少一部分所述有機相與乙醇交換以產生第一溶液。

實施方式9提供了實施方式8所述的方法，其中所述(X)的純化進一步包括將水加入所述第一溶液中以提供第二溶液。

實施方式10提供了實施方式9所述的方法，其中所述(X)的純化進一步包括加熱和冷卻所述第二溶液以產生固體 (X)。

實施方式11提供了實施方式1-10中任一項所述的方法，其中通過使5,6-二氟-1 H-吲哚-2-羧酸 (G)與氯化劑反應來製備 (H)。

實施方式12提供了實施方式11所述的方法，其中所述氯化劑選自(COCl) ₂和SOCl ₂。

實施方式13提供了實施方式1-10中任一項所述的方法，其中通過使( S)-8,9-二氟-1-(甲基(( R)-1-苯乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (E)與氫氣(H ₂)在氫化催化劑和酸存在下反應來製備 (F)，

(E)。

實施方式14提供了實施方式13所述的方法，其中所述氫化催化劑包括披鈀碳(Pd/C)。

實施方式15提供了實施方式13-14中任一項所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

實施方式16提供了實施方式13-15中任一項所述的方法，其中 (E)和氫氣在包括甲醇的溶劑中反應。

實施方式17提供了實施方式13-16中任一項所述的方法，其中 (F)的純化包括將至少一部分所述甲醇與2-甲基四氫呋喃交換，從而產生第一溶液。

實施方式18提供了實施方式17所述的方法，其中所述第一溶液的至少部分濃縮產生固體 (F)。

實施方式19提供了實施方式13-18中任一項所述的方法，其中通過( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-苯乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (D)與甲醛的還原烷基化來製備 (E)，

(D)。

實施方式20提供了實施方式19所述的方法，其中 (D)的還原烷基化在包括2-甲基四氫呋喃的溶劑中進行。

實施方式21提供了實施方式19-20中任一項所述的方法，其中通過使( R)-1-苯乙-1-胺：

與8,9-二氟-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1,6(4 H,5 H)-二酮 (C)反應，從而形成亞胺中間體，並用還原劑處理所述亞胺中間體來形成 (D)，從而製備 (D)，

(C)。

實施方式22提供了實施方式21所述的方法，其中 (C)和( R)-1-苯乙-1-胺在鈦(IV)醇鹽存在下反應以形成所述亞胺中間體。

實施方式23提供了實施方式22所述的方法，其中所述鈦(IV)醇鹽包括Ti(OEt) ₄。

實施方式24提供了實施方式21-23中任一項所述的方法，其中所述還原劑包括硼氫化物。

實施方式25提供了實施方式1-10中任一項所述的方法，其中通過使( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)(甲基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (E’)與酸反應來製備 (F)，

(E’)。

實施方式26提供了實施方式25所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

實施方式27提供了實施方式25-26中任一項所述的方法，其中 (E')和所述酸在三烷基矽烷存在下反應。

實施方式28提供了實施方式25-27中任一項所述的方法，其中通過( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (D’)與甲醛的還原烷基化來製備 (E’)：

(D’)。

實施方式29提供了實施方式28所述的方法，其中通過使( R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺：

與8,9-二氟-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1,6(4 H,5 H)-二酮 (C)反應，從而形成亞胺中間體，並用還原劑處理所述亞胺中間體來形成 (D’)，從而製備 (D’)

(C)。

實施方式30提供了實施方式29所述的方法，其中 (C)和所述( R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺在鈦(IV)醇鹽存在下反應以形成所述亞胺。

實施方式31提供了實施方式29-30中任一項所述的方法，其中所述還原劑包括硼氫化物。

實施方式32提供了實施方式21-24和29-31中任一項所述的方法，其中通過使8,9-二氟哌喃并[3,4-c]異色烯-1,6(2H,4H)-二酮 (B)與銨鹽反應來製備 (C)，

(B)。

實施方式33提供了實施方式32所述的方法，其中所述銨鹽包括氫氧化銨。

實施方式34提供了實施方式33所述的方法，其中所述氫氧化銨包括水溶液。

實施方式35提供了實施方式32-34中任一項所述的方法，其中 (B)與所述銨鹽的反應在約50℃的溫度下發生。

實施方式36提供了實施方式32-35中任一項所述的方法，其中通過使2-溴-4,5-二氟苯甲酸 (A)與3,5-哌喃二酮反應，從而形成酮-酸中間體，並用酸處理酮-酸中間體以形成 (B) ，從而製備 (B)：

(A)。

實施方式37提供了實施方式36所述的方法，其中 (A)與3,5-哌喃二酮在路易斯酸存在下反應。

實施方式38提供了實施方式37所述的方法，其中所述路易斯酸包括銅(I)鹽。

實施方式39提供了實施方式36-38中任一項所述的方法，其中所述 (A)與3,5-哌喃二酮在L-脯胺酸存在下反應。

實施方式40提供了實施方式36-39中任一項所述的方法，其中所述 (A)與3,5-哌喃二酮在鹼存在下反應。

實施方式41提供了實施方式40所述的方法，其中所述鹼包括鹼性碳酸鹽。

實施方式42提供了實施方式36-41中任一項所述的方法，其中用酸處理所述酮-酸中間體包括將所述酮-酸中間體酸化至pH約為2。

實施方式43提供了實施方式36-42中任一項所述的方法，其中(A)與3,5-哌喃二酮的反應在約70℃的溫度下發生。

實施方式44提供了實施方式36-43中任一項所述的方法，其中 (A)與所述3,5-哌喃二酮以約1：1.2的莫耳比反應。

本文引用的每篇專利、專利申請和出版物的公開內容通過引用以其整體併入本文。儘管已經參考特定實施方式公開了本揭示內容，但是顯而易見，本領域的其他技術人員可以設計出本揭示內容的其他實施方式和變型而不背離本揭示內容的真實精神和範圍。所附申請專利範圍旨在被解釋為包括所有這樣的實施方式和等同變型。

無

無

Claims (44)

1. 一種製備( S)- N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1-基)-5,6-二氟- N-甲基-1 H-吲哚-2-甲醯胺 (X)或其鹽或溶劑化物的方法，

   

   (X)， 所述方法包括使( S)-8,9-二氟-1-(甲胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮 (F)與5,6-二氟-1 H-吲哚-2-碳醯氯 (H)反應，從而產生包括(X)的第一反應體系，

   

   (F)，

   

   (H)。
2. 如請求項1所述的方法，其中 (F)和 (H)的反應在鹼存在下進行。
3. 如請求項2所述的方法，其中該鹼包括K ₂CO ₃。
4. 如請求項1至3中任一項所述的方法，其中 (F)和 (H)在包括THF和H ₂O中的至少一種的溶劑中反應。
5. 如請求項1至4中任一項所述的方法，其中(X)的純化包括將至少一種有機溶劑加入該第一反應體系中以產生雙相體系。
6. 如請求項5所述的方法，其中該有機溶劑包括乙酸乙酯。
7. 如請求項5或6所述的方法，其中該(X)的純化進一步包括分離該雙相體系以提供水相和有機相。
8. 如請求項7所述的方法，其中該(X)的純化進一步包括將至少一部分所述有機相與乙醇交換以產生第一溶液。
9. 如請求項8所述的方法，其中該(X)的純化進一步包括將水加入該第一溶液中以提供第二溶液。
10. 如請求項9所述的方法，其中該(X)的純化進一步包括加熱和冷卻該第二溶液以產生固體(X)。
11. 如請求項1至10中任一項所述的方法，其中藉由使5,6-二氟-1 H-吲哚-2-羧酸(G)與氯化劑反應來製備(H)。
12. 如請求項11所述的方法，其中該氯化劑選自(COCl) ₂和SOCl ₂。
13. 如請求項1至12中任一項所述的方法，其中藉由使( S)-8,9-二氟-1-(甲基(( R)-1-苯乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮(E)與氫氣(H ₂)在氫化催化劑和酸存在下反應來製備(F)，

    

    (E)。
14. 如請求項13所述的方法，其中該氫化催化劑包括披鈀碳(Pd/C)。
15. 如請求項13或14所述的方法，其中該酸包括三氟乙酸(TFA)。
16. 如請求項13至15中任一項所述的方法，其中(E)和氫氣在包括甲醇的溶劑中反應。
17. 如請求項16所述的方法，其中(F)的純化包括將至少一部分甲醇與2-甲基四氫呋喃交換，從而產生第一溶液。
18. 如請求項17所述的方法，其中該第一溶液的至少部分濃縮產生固體(F)。
19. 如請求項13至18中任一項所述的方法，其中藉由( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-苯乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮(D)與甲醛的還原烷基化來製備(E)，

    

    (D)。
20. 如請求項19所述的方法，其中(D)的還原烷基化在包括2-甲基四氫呋喃的溶劑中進行。
21. 如請求項19所述的方法，其中藉由使( R)-1-苯乙-1-胺：

    

    與8,9-二氟-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1,6(4 H,5 H)-二酮(C)反應，從而形成亞胺中間體，並用還原劑處理該亞胺中間體來形成(D)，從而製備(D)，

    

    (C)。
22. 如請求項21所述的方法，其中(C)和( R)-1-苯乙-1-胺在鈦(IV)醇鹽存在下反應以形成該亞胺中間體。
23. 如請求項22所述的方法，其中該鈦(IV)醇鹽包括Ti(OEt) ₄。
24. 如請求項21至23中任一項所述的方法，其中該還原劑包括硼氫化物。
25. 如請求項1至10中任一項所述的方法，其中藉由使( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)(甲基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮(E’)與酸反應來製備(F)，

    

    (E’)。
26. 如請求項25所述的方法，其中該酸包括三氟乙酸(TFA)。
27. 如請求項25或26所述的方法，其中(E')和該酸在三烷基矽烷存在下反應。
28. 如請求項25所述的方法，其中藉由( S)-8,9-二氟-1-((( R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)胺基)-1,5-二氫-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-6(4 H)-酮(D’)與甲醛的還原烷基化來製備(E’)，

    

    (D’)。
29. 如請求項28所述的方法，其中藉由使( R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺：

    

    與8,9-二氟-2 H-哌喃并[3,4-c]異喹啉-1,6(4 H,5 H)-二酮(C)反應，從而形成亞胺中間體，並用還原劑處理該亞胺中間體來形成(D’)，從而製備(D’)，

    

    (C)。
30. 如請求項29所述的方法，其中(C)和該( R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺在鈦(IV)醇鹽存在下反應以形成該亞胺中間體。
31. 如請求項29或30所述的方法，其中該還原劑包括硼氫化物。
32. 如請求項21-24和29-31中任一項所述的方法，其中藉由使8,9-二氟哌喃并[3,4-c]異色烯-1,6(2H,4H)-二酮(B)與銨鹽反應來製備(C)，

    

    (B)。
33. 如請求項32所述的方法，其中該銨鹽包括氫氧化銨。
34. 如請求項33所述的方法，其中該氫氧化銨包括水溶液。
35. 如請求項32至34中任一項所述的方法，其中(B)與該銨鹽的反應在約50℃的溫度下發生。
36. 如請求項32所述的方法，其中藉由使2-溴-4,5-二氟苯甲酸(A)與3,5-哌喃二酮反應，從而形成酮-酸中間體，並用酸處理該酮-酸中間體來形成(B)，從而製備(B)，

    

    (A)。
37. 如請求項36所述的方法，其中(A)與3,5-哌喃二酮在路易斯酸(Lewis acid)存在下反應。
38. 如請求項37所述的方法，其中該路易斯酸包括銅(I)鹽。
39. 如請求項36至38中任一項所述的方法，其中該(A)與3,5-哌喃二酮在L-脯胺酸存在下反應。
40. 如請求項36至39中任一項所述的方法，其中該(A)與3,5-哌喃二酮在鹼存在下反應。
41. 如請求項40所述的方法，其中該鹼包括鹼性碳酸鹽。
42. 如請求項36至41中任一項所述的方法，其中用酸處理該酮-酸中間體包括將該酮-酸中間體酸化至pH約為2。
43. 如請求項36至42中任一項所述的方法，其中(A)與3,5-哌喃二酮的反應在約70℃的溫度下發生。
44. 如請求項36至43中任一項所述的方法，其中(A)和該3,5-哌喃二酮以約1：1.2的莫耳比反應。