TW202039439A - ４（１ｈ）－奎諾酮衍生物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明提供式(I)化合物：

本發明提供用於治療、延緩及/或預防如癌症之增殖性疾病的新化合物、組成物及方法，所述癌症包括例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或白血病(例如，對一或多種抗微管藥物有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)。本發明提供抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡的方法。本發明亦提供使用該化合物治療本發明所述之任何目標疾病之醫藥組成物、套組及方法。

Description

4(1H)-奎諾酮衍生物及其用途

本發明係關於4(1H)-奎諾酮衍生物及其於治療、延緩及/或預防增殖性疾病不利影響之用途。

癌症是全球第二大最常見的死亡原因，而肺癌是癌症相關死亡的主因。儘管在過去20年治療有所進步，但肺癌患者的預後仍然很差。抗藥性限制了抗癌藥的功效，並在大多數情況下導致治療失敗。因此，亟需開發新的藥物，以克服抗藥性並改善癌症患者的存活率。

微管(microtubules)是由異質雙體(heterodimeric)α/β-微管蛋白(tubulin)單元所組成之長中空圓柱體。它們是細胞骨架的重要組成部分，且與有絲***(mitosis)、活動性(motility)及有機質輸送(organelle transport)有關。癌細胞依賴於微管的有絲***及快速***，此使得微管成為抗癌劑的合適標靶。微管的成核作用(nucleation)發生在中心體(centrosome)，且由於它們是不斷組合及拆解的高動態結構，因此抗微管藥物(microtubule-targeting agent,MTA)可調節其動力學，因而導致有絲***期停滯(mitotic arrest)並隨後引發細胞凋亡。MTA(亦即紫杉醇(taxanes)、長春花生物鹼(vinca alkaloid)、秋水仙素(colchicine)及勞力馬來(laulimalide))根據其作用模式與微管蛋白結合位點進行分類。紫杉醇(例如太平洋 紫杉醇(paclitaxel)及伊沙匹隆(ixabepilone))與長春花生物鹼(例如敏克瘤(vincristine)及敏畢瘤(vinblastine))是兩種主要的MTA類型，其在臨床上廣泛用於治療許多不同類型的惡性腫瘤，包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭頸癌及血癌。然而，大多數接受MTA長期治療之患者的癌症對治療計畫產生續發性抗藥性(acquired resistant)。

MTA誘發抗藥性之兩個主要機制涉及β微管蛋白(β-tubulin)及ATP結合盒轉運蛋白(ATP-binding cassette transporter)的突變。β微管蛋白藥物結合位點的結構改變突變或構形改變之β-微管蛋白同種型(isotype)的表達可能會干擾MTA與其在β-微管蛋白上結合位點之間的相互作用，因而導致治療失敗。嵌於細胞膜的排出轉運蛋白(efflux transporter)會將不同類型的抗癌藥從細胞內泵送至細胞外空間，因而減少細胞內的藥物累積，導致多重抗藥性(multidrug resistance,MDR)，使得治療癌症患者更加困難。P-醣蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是第一個鑑定出的ATP結合盒排出泵(ATP-binding cassette efflux pump)，其已獲得良好表徵。P-gp過度表達所引起的MDR是已知涉及臨床癌症治療之最常見的抗藥機制，因此尋找可改善患者預後並防止抗藥性之新藥劑仍是主要且未獲得滿足的需求。

目前仍致力於開發新的治療策略，以克服癌細胞的抗藥性。在2百萬種化學藥品中，本發明已確定4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,AS1712)為肺癌細胞增殖及異位移植(xenograft)腫瘤生長的低毒性抑制劑。此顯現示例性化合物AS1712具有抗 廣泛癌細胞株的活性且能夠結合於β-微管蛋白之秋水仙素-結合袋點(binding pocket)中，因而抑制微管組合，並因此誘導有絲***期停滯及凋亡。本文所述基於細胞之結構-活性關係研究確定了一種新的示例性化合物2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-8)，其對H1975細胞具有更高的抗增殖效能(IC₅₀=24nM)，且維持與AS1712類似的作用機制。值得注意的是，示例性化合物AS1712及RJ-LC-15-8皆克服了P-醣蛋白排出泵及β-微管蛋白改變(其會對癌細胞之抗微管藥物造成續發性抗藥性)。AS1712及RJ-LC-15-8可作為開發藥物之示例性化合物，其可克服癌細胞對抗微管藥物的續發性抗藥性。本發明更致力於進一步鑑定出可藉由克服癌細胞對抗微管藥物之續發性抗藥性來治療增殖性疾病(例如，癌症)之其它化合物。

據此，本發明提供如下式(I)之化合物。本文所述之化合物可用於治療一所需個體之增殖性疾病(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症))。本發明提供新化合物、組成物及治療各種疾病(例如，增殖性疾病，如舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症))之方法。本文所述之癌症可能對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性。本文所述之化合物可抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合，因而誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡。本文所述 之化合物如下式(I)所示。本發明亦提供本文所述之任一化合物之醫藥組成物、套組、方法及用途。

於一態樣中，本發明提供式(I)化合物：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中：

每一R¹獨自為鹵素、-C(=O)(視情況經取代烷基)、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

每一R²獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂,、或-SR^D1；

R³為氫、視情況經取代烷基、或氮保護基；

每一R⁴獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；

每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基、或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環；

m為0、1、2、3、4、或5；

n為0、1、2、3、或4；且

p為0或1。

於一態樣中，本發明提供式(I)化合物：

或其醫藥上可接受之鹽，其中：R¹、R²、R³、R⁴、m、n及p如本文所述。

於某些實施例中，m與n中至少一者不為0。

於某些實施例中，式(I)化合物為式(IA)、(IB)或(IC)：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹、R²、R³、R⁴、m及p如本文所述。較佳為，每一R¹獨自為鹵素、未經取代或經鹵素取代之C_1-10烷基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10烯基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10炔基、未經取代或經鹵素取代之C_3-10碳環基、-OR^D1、或-SR^D1，其中R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；每一R²獨自為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂或-(CH₂)_xOR^2a，其中R^2a、R^2b及x如本文所述，較佳為，每一R²獨自為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、-(CH₂)_xOR^2a、或-C(=O)(OCH₂CH₂)_zO(R^2c)，其中x為0、1、2、3、4、5或6，z為1、2、3、4、5或6，R^2a為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氧保護基，每一R^2b獨自為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氮保護基，且R^2c為氫或氧保護基；R³為氫、未經取代之C_1-10烷基、或氮保護基；m為0、1、2、3、4、或5；且p為0。更佳為，R¹為鹵素、經鹵素取代之C_1-10烷基、經鹵素取代之C_2-10烯基、 經鹵素取代之C_2-10炔基、或-OR^D1，其R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；而R^2a、R^2b、R^2c、R³、x、z、m及p如上所述，R^2a較佳為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、或未經取代之C_6-14芳基；R^2b較佳為其一者為氫，而另一者為未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；R^2c較佳為氫；R³較佳為氫。

於某些實施例中，式(I)化合物為下式：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中，每一R¹獨自為鹵素、未經取代或經鹵素取代之C_1-10烷基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10烯基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10炔基、未經取代或經鹵素取代之C_3-10碳環基、-OR^D1、或-SR^D1，其中R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；每一R²獨自為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、或-(CH₂)_xOR^2a，其中R^2a、R^2b及x如本文所述，較佳為，每一R²獨自為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、-(CH₂)_xOR^2a、或-C(=O)(OCH₂CH₂)_zO(R^2c)，其中x為0、1、2、3、4、5或6，z為1、2、3、4、5或6，R^2a為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氧保護 基，每一R^2b獨自為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氮保護基，且R^2c為氫或氧保護基；R³為氫、未經取代之C_1-10烷基、或氮保護基；m為0、1、2、3、4、或5；且n為0、1、2、3、或4，但m與n中至少一者不為0。較佳為，R¹為鹵素、經鹵素取代之C_1-10烷基、經鹵素取代之C_2-10烯基、經鹵素取代之C_2-10炔基、或-OR^D1，其R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；而R^2a、R^2b、R^2c、R³、x、z、m及n如上所述，R^2a較佳為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、或未經取代之C_6-14芳基；R^2b較佳為其一者為氫，而另一者為未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；R^2c較佳為氫；R³較佳為氫；m較佳為0或1，且n較佳為1。

於某些實施例中，式(I)化合物為下式：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹、R²及R³如本文所述。較佳為，R¹為鹵素、未經取代或經鹵素取代之C_1-10烷基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10烯基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10炔基、未經取代或經鹵素取代之C_3-10碳 環基、-OR^D1、或-SR^D1，其中R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；R²為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、或-(CH₂)_xOR^2a，其中R^2a、R^2b、及x如本文所述，較佳為，R²為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、-(CH₂)_xOR^2a、或-C(=O)(OCH₂CH₂)_zO(R^2c)，其中x為0、1、2、3、4、5或6，z為1、2、3、4、5或6，R^2a為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氧保護基，每一R^2b獨自為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氮保護基，且R^2c為氫或氧保護基；且R³為氫、未經取代之C_1-10烷基、或氮保護基。更佳為，R¹為鹵素、經鹵素取代之C_1-10烷基、經鹵素取代之C_2-10烯基、經鹵素取代之C_2-10炔基、或-OR^D1，其R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；而R^2a、R^2b、R^2c、R³、x及z如上所述，R^2a較佳為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、或未經取代之C_6-14芳基；R^2b較佳為其一者為氫，而另一者為未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；R^2c較佳為氫；R³較佳為氫。最佳為，R¹為鹵素，且R²為-C(=O)OR^2a，其中R^2a為未經取代之C_1-10烷基。

於某些實施例中，式(I)化合物為下式：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹、R^2a、R^2b、R³及x如本文所述。

於某些實施例中，式(I)化合物為下式：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹為鹵素、未經取代或經鹵素取代之C_1-10烷基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10烯基、未經取代或經鹵素取代之C_2-10炔基、未經取代或經鹵素取代之C_3-10碳環基、-OR^D1、或-SR^D1，其中R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；R^2a為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氧保護基；每一R^2b獨自為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、未經取代之C_3-10碳環基、未經取代之C_6-14芳基、或氮保護基；R^2c為氫或氧保護基x為0、1、2、3、4、5或6；z為1、2、3、4、5或6；且R³為氫、未經取代之C_1-10烷基、或氮保護基。較佳為，R¹為鹵素、經鹵素取代之C_1-10烷基、經鹵素取代之C_2-10烯基、經鹵素取代之C_2-10炔基、或-OR^D1，其R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；而R^2a、R^2b、R^2c、R³、x及z如上所述，R^2a較佳為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、或未經取代之C_6-14芳基；R^2b較佳為其一者為氫，而另一者為未經取代之C_1-10 烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；R^2c較佳為氫；R³較佳為氫。

於某些實施例中，式(I)化合物為下式：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹為鹵素、經鹵素取代之C_1-10烷基、經鹵素取代之C_2-10烯基、經鹵素取代之C_2-10炔基、或-OR^D1，其R^D1為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、或未經取代之C_2-10炔基；而R^2a及R³如上所述，R^2a較佳為氫、未經取代之C_1-10烷基、未經取代之C_2-10烯基、未經取代之C_2-10炔基、或未經取代之C_6-14芳基；且R³較佳為氫。更佳為，R¹為鹵素，R^2a為未經取代之C_1-10烷基。

式(I)之示例性化合物包括，但不限於：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。

於另一態樣中，本發明提供醫藥組成物，其包括一或多個本文所述之化合物以及醫藥上可接受之賦形劑。於某些實施例中，本文所述之醫藥組成物包括治療或預防有效量之本文所述化合物。該些醫藥組成物可用於抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘導組織、生物樣本或所需個體對多種藥物具抗性之癌細胞的凋亡，可用於治療所需個體之增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症))。本文所述之癌症可能對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性。在某些實施例中，所施用或使用之化合物可抑制所需個體、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、誘導組織、生物樣本或所需個體對多種藥物具抗性之癌細胞的凋亡、治療所需個體之增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微 管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。在某些實施例中，被治療之個體為哺乳動物(例如，人或非人類之哺乳動物)。本文所述或本領域已知之所有類型的生物樣本均視為於本發明之範疇內。

本發明之另一態樣係關於套組，其包含具有本文所述化合物或其醫藥組成物之容器。本文所述之套組可包含單劑或多劑之化合物或醫藥組成物。該等套組可用於本發明之方法。於某些實施例中，該套組更包含使用該化合物或醫藥組成物之說明。該套組亦可視情況包括用以投予該化合物或組成物之裝置(例如注射器，如腸胃外投藥之預填充注射器)。

於某些實施例中，所投予或使用之該化合物可抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及/或誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡。

本發明之另一態樣係關於治療所需個體之增殖性疾病的方法，該方法包括投予一治療有效量之本發明化合物或醫藥組成物至該個體。於另一態樣中，本發明提供預防所需個體之增殖性疾病的方法，該方法包括投予一預防有效量之本發明化合物或醫藥組成物至該個體。

於再一態樣中，本發明提供本文所述之化合物及醫藥組成物以用於本發明所述之方法(例如，抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及/或誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡的方法、誘發個體之細胞凋亡的方法、治療及/或預防增殖性疾病的方法，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌 症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。

以下將詳細描述特定官能基團及化學名詞的定義。化學元素採用CAS版本的「化學與物理手冊(Handbook of Chemistry and Physics)75級編」內頁封面元素週期表的定義，特定的官能基團一般如本文所定義。此外，有機化學的一般原則及特定的官能基團和反應性則採以下書籍中的定義，包括《Thomas Sorrell,Organic Chemistry,University Science Books,Sausalito,1999；Smith and March,March’s Advanced Organic Chemistry,5^th Edition,John Wiley & Sons,Inc.,New York,2001；Larock,Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers,Inc.,New York,1989；及Carruthers,Some Modern Methods of Organic Synthesis,3^rd Edition,Cambridge University Press,Cambridge,1987》。本發明用意不在於以任何方式受到本文所述之取代基示例性列表所限制。

本文所述之化合物可包括一或多個不對稱中心，因此可存在不同的異構形式，例如，鏡像異構物及/或非鏡像異構物。舉例而言，本文所述之化合物可以是單一鏡像異構物、非鏡像異構物或幾何異構物之形式，亦可為立體異構物之混合物，其包括外消旋混合物、及富集一或多種立體異構物之混合物。對本發明技術領域具有通常知識者而言，可利用包括掌性(chiral)高效液相層析(HPLC)及掌性鹽之形成與結晶而從混合物中分離出異構物，或以不對稱合成法來製備特定異構物。例如可參見《Jacques et al.,Enantiomers,Racemates and Resolutions(Wiley Interscience,New York,1981)；Wilen et al.,Tetrahedron 33：2725(1977)；Eliel,Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；及Wilen,Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p.268(E.L.Eliel,Ed., Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN 1972)》。本發明另涵蓋本文所述之化合物，其為實質上不含其他異構物之單一異構物，或是多種異構物的混合物。

當列出一範圍值時，其意在涵蓋所述範圍內之每個數值及其次範圍。舉例來說，“C_1-6”意在涵蓋C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C_1-6、C_1-5、C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-5、C_2-4、C_2-3、C_3-6、C_3-5、C_3-4、C_4-6、C_4-5、及C_5-6。

「脂肪族」(aliphatic)一詞包含飽和及不飽和直鏈(即，無支鏈)、支鏈、非環狀、環狀、多環的脂肪族烴，其可視情況經一或多個官能基團取代。本發明領域具有通常知識者當可理解，本文中之「脂肪族」意涵包括，但並不限於，烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基及和環炔基基團。因此，術語「烷基」包括直鏈、支鏈及環狀烷基。同樣的語法亦適用於其它上位名詞，如「烯基」(alkenyl)及「炔基」(alkynyl)等。除此之外，術語「烷基」、「烯基」及「炔基」等名詞也涵蓋經取代及未經取代基團。在某些實施例中，「低級烷基」(lower alkyl)是用來表示該些具有1-6個碳原子的烷基(環形、非環形、經取代基、未經取代基、支鏈或直鏈)。

於某些實施例中，本發明所使用之烷基、烯基及炔基含有1-20個脂肪族碳原子。於某些其它實施例中，本發明使用的烷基、烯基和炔基分別含有1-10個脂肪族碳原子。在另外其他實施例中，本發明使用的烷基、烯基和炔基分別含有1-8個脂肪族碳原子。在又其它實施例中，本發明使用的烷基、烯基和炔基分別含有1-6個脂族碳原子。在另外其他實施例中，本發明使用的烷基、烯基和炔基分別含有1-4個碳原子。

說明性之脂肪族基團包含，但不限於，例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、-CH₂-環丙基、乙烯基、丙烯基、正丁基、二級丁基、異 丁基、三級丁基、環丁基、-CH₂-環丁基、正戊基、二級戊基、異戊基、三級戊基、環戊基、-CH₂-環戊基、正己基、二級己基、環己基、-CH₂-環己基及其類似者，其又可帶有一或多個取代基。烯基包含，但不限於，例如，乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁-1-烯基(1-methyl-2-buten-1-yl)及其類似者。代表性的炔基包含，但不限於，乙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丙炔基及其類似者。

「烷基」(alkyl)一詞是指具有1到10個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基團(「C_1-10烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到9個碳原子(「C_1-9烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到8個碳原子(「C_1-8烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到7個碳原子(「C_1-7烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到6個碳原子(「C_1-6烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到5個碳原子(「C_1-5烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到4個碳原子(「C_1-4烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到3個碳原子(「C_1-3烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1到2個碳原子(「C_1-2烷基」)。在某些實施例中，烷基具有1個碳原子(「C₁烷基」)。在某些實施例中，烷基具有2到6個碳原子(「C_2-6烷基」)。C_1-6烷基之示例包含甲烷基(C₁)、乙烷基(C₂)、丙烷基(C₃)(例如正丙基、異丙基)、丁烷基(C₄)(例如正丁基、叔丁基、仲丁基、異丁基)、戊烷基(C₅)(例如正戊基、3-戊基、戊基(amyl)、新戊基、3-甲基-2-丁基、叔戊基)以及己烷基(C₆)(例如正己基)。烷基之其他示例包含正庚基(C₇)、正辛基(C₈)及其類似者。除非另有所指，否則每一烷基可獨自為未經取代(「未經取代之烷基」)或經一或多個取代基(例如鹵素，如F)取代(「經取代之烷基」)。在某些實施例中，烷基為未經取代的C_1-10烷基(例如未經取代的C_1-6烷基，例如-CH₃)。在某些實施例中，烷基為經取代之C_1-10烷基(例如經取代之C_1-6烷基，例如-CF₃)。

「烯基」(alkenyl)是指具有2至20個碳原子、一或多個碳-碳雙鍵、沒有三鍵的直鏈基或支鏈烴基(「C_2-20烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至10個碳原子(「C_2-10烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至9個碳原子(「C_2-9烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至8個碳原子(「C_2-8烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至7個碳原子(「C_2-7烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至6個碳原子(「C_2-6烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至5個碳原子(「C_2-5烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至4個碳原子(「C_2-4烯基」)。在某些實施例中，烯基有2至3個碳原子(「C_2-3烯基」)。在某些實施例中，烯基有2個碳原子(「C₂烯基」)。一或多個碳-碳雙鍵可在內部(如2-丁烯基)或在終端(如1-丁烯基)。C_2-4烯基之示例包括乙烯基(C₂)、1-丙烯基(C₃)、2-丙烯基(C₃)、1-丁烯基(C₄)、2-丁烯基(C₄)、丁二烯基(C₄)及其類似者。C_2-6烯基的例子包括上述的C_2-4烯基以及戊烯基(C₅)、戊二烯基(C₅)、己烯基(C₆)及其類似者。烯基之其他實例包括庚烯基(C₇)、辛烯基(C₈)、辛三烯基(C₈)及其類似者。除非另有所指，否則每一烯基獨自視情況地含有取代基，亦即，未經取代(「未經取代的烯基」)或經一或多個取代基取代(「經取代的烯基」)。在某些實施例中，烯基為未經取代之C_2-10烯基。在某些實施例中，烯基為經取代之C_2-10烯基。於烯基中，若未特別指明C=C雙鍵之立體化學(例如，-CH=CHCH₃或

)，則其可是(E)-或(Z)-雙鍵。

「炔基」(alkynyl)是指具有2至20個碳原子、一或多個碳-碳三鍵、及視情況有一或多個雙鍵的直鏈或支鏈烴基(「C_2-20炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至10個碳原子(「C_2-10炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至9個碳原子(「C_2-9炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至8個碳原子(「C_2-8炔基」)。在某些實施例 中，炔基有2至7個碳原子(「C_2-7炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至6個碳原子(「C_2-6炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至5個碳原子(「C_2-5炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至4個碳原子(「C_2-4炔基」)。在某些實施例中，炔基有2至3個碳原子(「C_2-3炔基」)。在某些實施例中，炔基有2個碳原子(「C₂炔基」)。一或多個碳-碳三鍵可在內部(如2-丁炔基)或終端(如1-丁炔基)。C_2-4炔基之示例包含，但不限於，乙炔基(C₂)、1-丙炔基(C₃)，2-丙炔基(C₃)、1-丁炔基(C₄)、2-丁炔基(C₄)及其類似者。C_2-6炔基的例子包括上述的C_2-4炔基以及戊炔基(C₅)、己炔基(C₆)及其類似者。炔基之其他實例包括庚炔基(C₇)、辛炔基(C₈)及其類似者。除非另有所指，否則每一炔基可獨自視情況被取代，亦即，未經取代(「未經取代之炔基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之炔基」)。在某些實施例中，炔基為未經取代之C_2-10炔基。在某些實施例中，炔基為經取代之C_2-10炔基。

「碳環基」(carbocyclyl)或「碳環的」(carbocyclic)是指具有3至10個環上碳原子(「C_3-10碳環基」)且在該非芳香環系統內不含雜原子之非芳香環狀烴基團。在一些實施例中，碳環基有3至8個環上碳原子(「C_3-8碳環基」)。在一些實施例中，碳環基有3至6個環上碳原子(「C_3-6碳環基」)。在一些實施例中，碳環基有3至6個環上碳原子(「C_3-6碳環基」)。在一些實施例中，碳環基有5至10個環上碳原子(「C_5-10碳環基」)。示例性C_3-6碳環基包含，但不限於，環丙基(C₃)、環丙烯基(C₃)、環丁基(C₄)、環丁烯基(C₄)、環戊基(C₅)、環戊烯基(C₅)、環己基(C₆)、環己烯基(C₆)、環己二烯基(C₆)及其類似者。示例性C_3-8碳環基包含，但不限於，上述的C_3-6碳環基以及環庚基(C₇)、環庚烯基(C₇)、環庚二烯基(C₇)、環庚三烯基(C₇)、環辛基(C₈)、環辛烯基(C₈)、雙環[2.2.1]庚烷基(C₇)、雙環[2.2.2]辛基(C₈)及其類似者。示例性C_3-10碳環基包含，但不限於，上述的C_3-8碳環基以及 環壬基(C₉)、環壬烯基(C₉)、環癸基(C₁₀)、環癸烯基(C₁₀)、八氫-1H-茚基(C₉)、十氫萘基(C₁₀)、螺[4.5]癸基(C₁₀)及其類似者。如上範例中所闡述，在某些實施例中，碳環基是單環(「單環的碳環基」)或是含有稠合(fused)、橋連(bridged)或螺環(spiro)之環狀系統，例如雙環系統(「雙環的碳環基」)，且可為飽和或可為部分不飽和。「碳環基」亦包括多環系統，其中如上所定義之環狀碳環與一或多個芳基或雜芳基稠合，又其中連接點是在環狀碳環上，在此情況下，環狀碳環系統內之碳原子編號是以連續的編號指定之。除非另有所指，否則每一碳環基可獨自視情況地被取代，亦即，未經取代(「未經取代之碳環基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之碳環基」)。在某些實施例中，碳環基是未經取代之C_3-10碳環基。在某些實施例中，碳環基是經取代之C_3-10碳環基。

在一些實施方式中，「碳環基」(carbocyclyl)為具有3至10個環上碳原子之單環飽和碳環基(「C_3-10環烷基」)。在一些實施方式中，環烷基具有3至8個環上碳原子(「C_3-8環烷基」)。在一些實施方式中，環烷基具有3至6個環上碳原子(「C_3-6環烷基」)。在一些實施方式中，環烷基具有5至6個環上碳原子(「C_5-6環烷基」)。在一些實施方式中，環烷基具有5至10個環上碳原子(「C_5-10環烷基」)。C_5-6環烷基之示例包含環戊基(C₅)及環己基(C₆)。C_3-6環烷基之示例包含上述C_5-6環烷基及環丙基(C₃)與環丁基(C₄)。C_3-8環烷基之示例包含上述C_3-6環烷基、環庚基(C₇)及環辛基(C₈)。除非另有所指，否則每一環烷基可獨自視情況地被取代，亦即未經取代基(「未經取代之環烷基」)或經一或多個取代基取代(「經取代基之環烷基」)。在某些實施方式中，環烷基是未經取代之C_3-10環烷基。在某些實施方式中，環烷基是經取代之C_3-10環烷基。

「雜環基」(heterocyclyl)或「雜環的」(heterocyclic)是指具有環上碳原子及1至4個環上雜原子之3至10員非芳香環系統，其中每個雜原子可獨自選自氮、氧、硫、硼、磷及矽(「3-10員雜環基」)。在含有一或多個氮原子之雜環基中，在原子價數允許下，連接點可以是碳原子或氮原子。雜環基可為單環(「單環雜環基」)、或稠合、橋連或螺環的環狀系統，例如雙環系統(「雙環雜環基」)，其可為飽和或可為部分不飽和。雜環基雙環系統可包括一或多個雜原子於一或兩個環內。「雜環基」亦包括其中如上定義之環狀雜環與一或多個碳環基稠合之環狀系統，其中連接點可以是在環狀碳環或環狀雜環、或其中如上定義之環狀雜環與一或多個芳基或雜芳基稠合之環狀系統上(其中連接點是在雜環上)，在此情況下，環狀雜環系統內之環成員編號是以連續環成員編號指定之。除非另有所指，否則每一雜環基可獨自視情況地被取代，亦即，未經取代(「未經取代之雜環基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之雜環基」)。在某些實施例中，雜環基是未經取代之3-10員雜環基。在某些實施例中，雜環基是經取代之3-10員雜環基。

在一些實施例中，雜環基為具有環上碳原子及1-4個環上雜原子之5-10員非芳香環系統，其中每一個雜原子獨自選自氮、氧、硫、硼、磷及矽(「5-10員雜環基」)。在一些實施例中，雜環基為具有環上碳原子及1-4個環上雜原子之5-8員非芳香環系統，其中每個雜原子獨自選自氮、氧及硫(「5-8員雜環基」)。在一些實施例中，雜環基為具有環上碳原子及1-4個環上雜原子之5-6員非芳香環系統，其中每個雜原子獨自選自氮、氧及硫(「5-6員雜環基」)。在一些實施例中，該5-6員雜環基具有1-3個環上雜原子，其選自氮、氧及硫。在一些實施例中， 該5-6員雜環基具有1-2個環上雜原子，其選自氮、氧及硫。在一些實施例中，該5-6員雜環基具有1個環上雜原子，其選自氮、氧及硫。

含有一個雜原子之示例性3員雜環基包含，但不限於，氮丙啶基(azirdinyl)、環氧乙烷基(oxiranyl)、硫雜環丙基(thiiranyl)。含有一個雜原子之示例性4員雜環基包含，但不限於，吖丁啶基(azetidinyl)、環氧丙烷基(oxetanyl)及硫雜環丁基(thietanyl)。含有一個雜原子之示例性5員雜環基包含，但不限於，四氫呋喃基(tetrahydrofuranyl)、二氫呋喃基(dihydrofuranyl)、四氫噻吩基(tetrahydrothiophenyl)、二氫噻吩基(dihydrothiophenyl)、吡咯啶基(pyrrolidinyl)、二氫吡咯基(dihydropyrrolyl)、及吡咯-2,5-二酮(pyrrolyl-2,5-dione)。含有兩個雜原子之示例性5員雜環基包含，但不限於，二氧戊環基(dioxolanyl)、氧硫雜呋喃基(oxasulfuranyl)、二硫雜呋喃基(disulfuranyl)及噁唑啶-2-酮(oxazolidin-2-one)。含有3個雜原子之示例性5員雜環基包含，但不限於，***啉基(triazolinyl)、噁二唑啉基(oxadiazolinyl)、及噻二唑啉基(thiadiazolinyl)。含有一個雜原子之示例性6員雜環基團包含，但不限於，呱啶基(piperidinyl)、四氫吡喃基(tetrahydropyranyl)、二氫吡啶基(dihydropyridinyl)及噻嗯基(thianyl)。含有兩個雜原子之示例性6員雜環基包含，但不限於，呱嗪基(piperazinyl)、嗎啉基(morpholinyl)、二噻環己烷基(dithianyl)及二氧陸圜基(dioxanyl)。含有三個雜原子之示例性6員雜環基包含，但不限於，三嗪基(triazinanyl)。含有一個雜原子之示例性7員雜環基包含，但不限於，氮雜環庚基(azepanyl)、氧雜環庚基(oxepanyl)及硫雜環庚基(thiepanyl)。含有一個雜原子之示例性8員雜環基包含，但不限於，氮雜環辛基(azocanyl)、氧雜環辛基(oxecanyl)及硫雜環辛基(thiocanyl)。示例性5員雜環基團稠合至C₆芳香環(本文亦稱為5,6-雙環雜環)包含，但不限於，吲哚啉基(indolinyl)、異吲哚啉基 (isoindolinyl)、二氫苯並呋喃基(dihydrobenzofuranyl)、二氫苯並噻吩基(dihydrobenzothienyl)、苯並噁唑啉酮基(benzoxazolinonyl)及其類似者。示例性6員雜環基團稠合至芳香環(本文亦稱為6,6-雙環雜環)包含，但不限於，四氫喹啉基(tetrahydroquinolinyl)、四氫異喹啉基(tetrahydroisoquinolinyl)及其類似者。

「芳基」(aryl)是指單環或多環(例如，雙環或三環)之4n+2芳香環系統基團(例如，環狀排列中有6、10或14個共用π電子)，其具有6-14環上碳原子且芳香環系統中不含雜原子(「C_6-14芳基」)。在一些實施例中，芳基具有6個環上碳原子(「C₆芳基」；例如苯基)。在一些實施例中，芳基具有10個環上碳原子(「C₁₀芳基」；例如，萘基，如1-萘基及2-萘基)。在一些實施例中，芳基具有14個環上碳原子(「C₁₄芳基」；例如，蒽基)。「芳基」亦包括多環系統，其中上述定義之芳香環與一或多個碳環基或雜環基稠合，其中基團(radical)或連接點是在芳基環上，在這種情況下，芳香環系統內之碳原子編號是以連續的碳原子編號指定之。除非另有所指，否則每一芳基可獨自視情況地被取代，即未經取代(「未經取代之芳基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之芳基」)。在某些實施例中，芳基是未經取代之C_6-14芳基。在某些實施例中，芳基是經取代之C_6-14芳基。

「芳烷基」(aralkyl)是烷基與芳基之子集合，其係指被視情況取代之芳基所取代之視情況取代的烷基。在某些實施例中，芳烷基為視情況經取代之苯甲基。在某些實施例中，芳烷基是苯甲基。在某些實施例中，芳烷基為視情況經取代之苯乙基。在某些實施例中，芳烷基是苯乙基。

「雜芳基」(heteroaryl)是指5-10員單環或雙環4n+2芳香族環系統之基團(例如，環狀排列中有6或10個共用π電子)，其具有環上碳原子及1-4個提供於芳香族環系統中之雜原子，其中每個雜原子獨自選自氮、氧及硫(「5-10員 雜芳基」)。於含有一或多個氮原子之雜芳基中，在原子價數允許下，其連接點可以是碳原子或氮原子。雜芳基的雙環系統可包括一或多個雜原子於一或兩個環內。「雜芳基」包括雜芳環(如上文所定義)與一或多個碳環基或雜環基稠合之環狀系統，其中連接點在雜芳環上，在這種情況下，雜芳環系統內之環成員編號是以連續環成員編號指定之。「雜芳基」亦包括雜芳環(如上文所定義)與一個或多個芳基稠合之環狀系統，其連接點是在芳環或雜芳環上，在這種情況下，環成員編號是指定稠合(芳基/雜芳基)環系統中的環成員編號。其中一個環不含有雜原子之雙環雜芳基(例如吲哚基(indolyl)、喹啉基(quinolinyl)、咔唑基(carbazolyl)及其類似者)，其連接點可在任一環上，即，在含雜原子的環上(例如，2-吲哚基)，或不含雜原子的環上(例如，5-吲哚基)。

在一些實施方式中，雜芳基是具有環上碳原子及提供於芳香環系統中之1-4個雜原子的5-10員芳香環系統，其中每個雜原子獨自為氮、氧或硫(「5-10員雜芳基」)。在一些實施例中，雜芳基是具有環上碳原子及提供於芳香環系統中之1-4個環上雜原子之5-8員芳香環系統，其中每個雜原子獨自為氮、氧或硫(「5-8員雜芳基」)。在一些實施例中，雜芳基是具有環上碳原子及提供於芳香環系統中之1-4個環上雜原子之5-6員芳環系統，其中每個雜原子獨自為氮、氧或硫(「5-6員雜芳基」)。在一些實施例中，該5-6員雜芳基具有1-3個環上雜原子，其係選自氮、氧及硫。在一些實施例中，該5-6員雜芳基具有1-2個環上雜原子，其係選自氮、氧及硫。在一些實施例中，該5-6員雜芳基有1個環上雜原子，其係選自氮、氧及硫。除非另有所指，否則每一雜芳基可獨自視情況被取代，即未經取代(「未經取代之雜芳基」)，或經一或多個取代基取代(「經取代之雜 芳基」)。在某些實施例中，雜芳基是未經取代之5-14員雜芳基。在某些實施例中，雜芳基為經取代之5-14員雜芳基。

含有一個雜原子之示例性5員雜芳基包含，但不限於，吡咯基(pyrrolyl)、呋喃基(furanyl)及噻吩基(thiophenyl)。含有兩個雜原子之示例性5員雜芳基包含，但不限於，咪唑基(imidazolyl)、吡唑基(pyrazolyl)、噁唑基(oxazolyl)、異噁唑基(isoxazolyl)、噻唑基(thiazolyl)及異噻唑基(isothiazolyl)。含有3個雜原子之示例性5員雜芳基包含，但不限於，***基(triazolyl)、噁二唑基(oxadiazolyl)及噻二唑基(thiadiazolyl)。含有4個雜原子之示例性5員雜芳基包含，但不限於，四唑基(tetrazolyl)。含有一個雜原子之示例性6員雜芳基包含，但不限於，吡啶基(pyridyl)。含有兩個雜原子之示例性6員雜芳基包含，但不限於，噠嗪基(pyridazinyl)、嘧啶基(pyrimidinyl)及吡嗪基(pyrazinyl)。含有3或4個雜原子之示例性6員雜芳基分別包含，但不限於，三嗪基(triazinyl)及四嗪基(tetrazinyl)。含有一個雜原子之示例性7員雜芳基包含，但不限於，氮庚因基(azepinyl)、氧庚因基(oxepinyl)、硫庚因基(thiepinyl)。示例性5,6-雙環雜芳基包含，但不限於，吲哚基(indolyl)、異吲哚基(isoindolyl)、吲唑基(indazolyl)、苯並***基(benzotriazolyl)、苯並噻吩基(benzothiophenyl)、異苯並噻吩基(isobenzothiophenyl)、苯並呋喃基(benzofuranyl)、苯並異呋喃基(benzoisofuranyl)、苯並咪唑基(benzimidazolyl)、苯並噁唑基(benzoxazolyl)、苯並異噁唑基(benzisoxazolyl)、苯並噁二唑基(benzoxadiazolyl)、苯並噻唑基(benzthiazolyl)、苯並異噻唑基(benzisothiazolyl)、苯並噻二唑基(benzthiadiazolyl)、吲哚嗪基(indolizinyl)及嘌呤基(purinyl)。示例性6,6-雙環雜芳基包含，但不限於，萘啶基(naphthyridinyl)、喋啶基(pteridinyl)、喹啉基 (quinolinyl)、異喹啉基(isoquinolinyl)、噌啉基(cinnolinyl)、喹噁啉基(quinoxalinyl)、酞嗪基(quinoxalinyl)及喹唑啉基(quinazolinyl)。

「雜芳烷基」(heteroaralkyl)為烷基與雜芳基之子集合，其係指被視情況取代之雜芳基所取代之視情況取代的烷基。

「不飽和」(unsaturated)或「部分不飽和」(partially unsaturated)是指包括至少一個雙鍵或三鍵的基團。「部分不飽和」的環狀系統意在涵蓋具有多個不飽和部位的環，但不包括芳香基(例如，芳基或雜芳基)。同樣地，「飽和」是指不含有雙鍵或三鍵的基團，即，皆為單鍵。

二價橋接基之烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基進一步以亞開頭(英文為-ene字尾)來形容，例如，亞烷基(alkylene)、亞烯基(alkenylene)、亞炔基(alkynylene)、亞碳環基(carbocyclylene)、亞雜環基(heterocyclylene)、亞芳基(arylene)及亞雜芳基(heteroarylene)。

除非另有所指，否則在價數允許的情況下，本文所述之原子(atom)、基團(moiety)或基(group)可為未經取代或經取代。「視情況經取代」(optionally substituted)一詞是指經取代或未經取代。

除非另有所指，否則基團均為視情況經取代。「視情況經取代」(optionally substituted)一詞是指經取代或未經取代。在某些實施例中，烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基為視情況經取代(例如，「經取代」或「未經取代」烷基、「經取代」或「未經取代」烯基、「經取代」或「未經取代」炔基、「經取代」或「未經取代」碳環基、「經取代」或「未經取代」雜環基、「經取代」或「未經取代」芳基、或「經取代」或「未經取代」雜芳基)。一般而言，「經取代」一詞，無論前面是否有「視情況」，其意指該基團 有至少一氫原子(例如，碳原子或氮原子上的氫原子)被一允許之取代基所取代，該取代基例如為置換後變成穩定化合物之取代基，該化合物例如為不會透過如重排、環化、消去、或其它反應而自動轉換的化合物。除非另有指明，否則「經取代」基團在基團之一或多個位置處帶有取代基，當其結構有超過一個位置被取代時，每一位置處之取代基可以相同或不同。「經取代」一詞擬包括以所有有機化合物可允許之取代基、本文所述可形成穩定化合物之任何取代基所進行的取代。本發明涵蓋為了達成穩定化合物之任何及全部的組合。為達本發明目的，如本文所述，雜原子(如氮原子)可在滿足該雜原子價數且能形成穩定基團之前提下具有氫的取代基及/或任一合適之取代基。在某些實施例中，該取代基是碳原子上的取代基。在某些實施例中，該取代基是氮原子上的取代基。在某些實施例中，該取代基是氧原子上的取代基。在某些實施例中，該取代基是硫原子上的取代基。

示例性之碳原子上的取代基包含，但不限於，鹵素、-CN、-NO₂、-N₃、-SO₂H、-SO₃H、-OH、-OR^aa、-ON(R^bb)₂、-N(R^bb)₂、-N(R^bb)₃ ⁺X^-、-N(OR^cc)R^bb、-SH、-SR^aa、-SSR^cc、-C(=O)R^aa、-CO₂H、-CHO、-C(OR^cc)₂、-CO₂R^aa、-OC(=O)R^aa、-OCO₂R^aa、-C(=O)N(R^bb)₂、-OC(=O)N(R^bb)₂、-NR^bbC(=O)R^aa、-NR^bbCO₂R^aa、-NR^bbC(=O)N(R^bb)₂、-C(=NR^bb)R^aa、-C(=NR^bb)OR^aa、-OC(=NR^bb)R^aa、-OC(=NR^bb)OR^aa、-C(=NR^bb)N(R^bb)₂、-OC(=NR^bb)N(R^bb)₂、-NR^bbC(=NR^bb)N(R^bb)₂、-C(=O)NR^bbSO₂R^aa、-NR^bbSO₂R^aa、-SO₂N(R^bb)₂、-SO₂R^aa、-SO₂OR^aa、-OSO₂R^aa、-S(=O)R^aa、-OS(=O)R^aa、-Si(R^aa)₃、-OSi(R^aa)₃-C(=S)N(R^bb)₂、-C(=O)SR^aa、-C(=S)SR^aa、-SC(=S)SR^aa、-SC(=O)SR^aa、-OC(=O)SR^aa、-SC(=O)OR^aa、-SC(=O)R^aa、-P(=O)(R^aa)₂,-P(=O)(OR^cc)₂、-OP(=O)(R^aa)₂、-OP(=O)(OR^cc)₂、 -P(=O)(N(R^bb)₂)₂、-OP(=O)(N(R^bb)₂)₂、-NR^bbP(=O)(R^aa)₂、-NR^bbP(=O)(OR^cc)₂、-NR^bbP(=O)(N(R^bb)₂)₂、-P(R^cc)₂,-P(OR^cc)₂、-P(R^cc)₃ ⁺X^-、-P(OR^cc)₃ ⁺X^-、-P(R^cc)₄、P(OR^cc)₄、-OP(R^cc)₂、-OP(R^cc)₃ ⁺X^-、-OP(OR^cc)₂、-OP(OR^cc)₃ ⁺X^-、-OP(R^cc)₄、-OP(OR^cc)₄、-B(R^aa)₂、-B(OR^cc)₂、-BR^aa(OR^cc)、C_1-10烷基、C_1-10全鹵代烷基、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基、及5-14員雜芳基，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代；其中X^-是相對離子(counterion)；

或者，碳原子上之兩個偕(geminal)氫原子是由基團=O、=S、=NN(R^bb)₂、=NNR^bbC(=O)R^aa、=NNR^bbC(=O)OR^aa、=NNR^bbS(=O)₂R^aa、=NR^bb、或=NOR^cc所取代；

每一R^aa獨自選自由C_1-10烷基、C_1-10全鹵代烷基、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基及5-14員雜芳基，或兩個R^aa基連接起來形成3-14員雜環基或5-14員雜芳環，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代；

每一R^bb獨自選自由氫原子、-OH、-OR^aa、-N(R^cc)₂、-CN、-C(=O)R^aa、-C(=O)N(R^cc)₂、-CO₂R^aa、-SO₂R^aa、-C(=NR^cc)OR^aa、-C(=NR^cc)N(R^cc)₂、-SO₂N(R^cc)₂、-SO₂R^cc、-SO₂OR^cc、-SOR^aa、-C(=S)N(R^cc)₂、-C(=O)SR^cc、-C(=S)SR^cc、-P(=O)(R^aa)₂、-P(=O)(OR^cc)₂、-P(=O)(N(R^cc)₂)₂、C_1-10烷基、C_1-10全鹵代烷基、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基、及5-14員雜芳基，或兩個R^bb基連接起來形成3-14員雜環基或5-14員雜芳環，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代；其中X^-是相對離子(counterion)；

每一R^cc獨自選自由氫原子、C_1-10烷基、C_1-10全鹵代烷基、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基及5-14員雜芳基，或兩個R^cc基連接起來形成3-14員雜環基或5-14員雜芳環，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代；

每一R^dd獨自選自由鹵素、-CN、-NO₂、-N₃、-SO₂H、-SO₃H、-OH、-OR^ee、-ON(R^ff)₂、-N(R^ff)₂、-N(R^ff)₃ ⁺X^-、-N(OR^ee)R^ff、-SH、-SR^ee、-SSR^ee、-C(=O)R^ee、-CO₂H、-CO₂R^ee、-OC(=O)R^ee、-OCO₂R^ee、-C(=O)N(R^ff)₂、-OC(=O)N(R^ff)₂、-NR^ffC(=O)R^ee、-NR^ffCO₂R^ee、-NR^ffC(=O)N(R^ff)₂、-C(=NR^ff)OR^ee、-OC(=NR^ff)R^ee、-OC(=NR^ff)OR^ee、-C(=NR^ff)N(R^ff)₂、-OC(=NR^ff)N(R^ff)₂、-NR^ffC(=NR^ff)N(R^ff)₂、-NR^ffSO₂R^ee、-SO₂N(R^ff)₂、-SO₂R^ee、-SO₂OR^ee、-OSO₂R^ee、-S(=O)R^ee、-Si(R^ee)₃、-OSi(R^ee)₃、-C(=S)N(R^ff)₂、-C(=O)SR^ee、-C(=S)SR^ee、-SC(=S)SR^ee、-P(=O)(OR^ee)₂、-P(=O)(R^ee)₂、-OP(=O)(R^ee)₂、-OP(=O)(OR^ee)₂、C_1-6烷基、C_1-6全鹵代烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10碳環基、3-10員雜環基、C_6-10芳基及5-10員雜芳基，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代；或兩個偕R^dd取代基可連接在一起形成=O或=S；其中X^-是相對離子；

每一R^ee獨自選自由C_1-6烷基、C_1-6全鹵代烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10碳環基、C_6-10芳基、3-10員雜環基及3-10員雜芳基，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^gg基所取代；

每一R^ff獨自選自由氫、C_1-6烷基、C_1-6全鹵代烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10碳環基、3-10員雜環基、C_6-10芳基及5-10員雜芳基，或兩個R^ff基連接在一起形成3-14員雜環基或5-14員雜芳環，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^gg基所取代；且

每一R^gg獨自選自由鹵素、-CN、-NO₂、-N₃、-SO₂H、-SO₃H、-OH、-OC_1-6烷基、-ON(C_1-6烷基)₂、-N(C_1-6烷基)₂、-N(C_1-6烷基)₃ ⁺X^-、-NH(C_1-6烷基)₂ ⁺X^-、-NH₂(C_1-6烷基)⁺X^-、-NH₃ ⁺X^-、-N(OC_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-N(OH)(C_1-6烷基)、-NH(OH)、-SH、-SC_1-6烷基、-SS(C_1-6烷基)、-C(=O)(C_1-6烷基)、-CO₂H、-CO₂(C_1-6烷基)、-OC(=O)(C_1-6烷基)、-OCO₂(C_1-6烷基)、-C(=O)NH₂、-C(=O)N(C_1-6烷基)₂、-OC(=O)NH(C_1-6烷基)、-NHC(=O)(C_1-6烷基)、-N(C_1-6烷基)C(=O)(C_1-6烷基)、-NHCO₂(C_1-6烷基)、-NHC(=O)N(C_1-6烷基)₂、-NHC(=O)NH(C_1-6烷基)、-NHC(=O)NH₂、-C(=NH)O(C_1-6烷基)、-OC(=NH)(C_1-6烷基)、-OC(=NH)OC_1-6烷基、-C(=NH)N(C_1-6烷基)₂、-C(=NH)NH(C_1-6烷基)、-C(=NH)NH₂、-OC(=NH)N(C_1-6烷基)₂、-OC(NH)NH(C_1-6烷基)、-OC(NH)NH₂、-NHC(NH)N(C_1-6烷基)₂、-NHC(=NH)NH₂、-NHSO₂(C_1-6烷基)、-SO₂N(C_1-6烷基)₂、-SO₂NH(C_1-6烷基)、-SO₂NH₂、-SO₂C_1-6烷基、-SO₂OC_1-6烷基、-OSO₂C_1-6烷基、-SOC_1-6烷基、-Si(C_1-6烷基)₃、-OSi(C_1-6烷基)₃、-C(=S)N(C_1-6烷基)₂、-C(=S)NH(C_1-6烷基)、-C(=S)NH₂、-C(=O)S(C_1-6烷基)、-C(=S)SC_1-6烷基、-SC(=S)SC_1-6烷基、-P(=O)(OC_1-6烷基)₂、-P(=O)(C_1-6烷基)₂、-OP(=O)(C_1-6烷基)₂、-OP(=O)(OC_1-6烷基)₂、C_1-6烷基、C_1-6全鹵代烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10碳環基、C_6-10芳基、3-10員雜環基、5-10員雜芳基；或兩個偕R^gg取代基可連接在一起形成=O或=S；其中X^-是相對離子。

「相對離子」(counterion)或「陰離子型相對離子」(anionic counterion)是與正電荷基團結合以維持電中性之負電荷基團。陰離子型相對離子可以是單價(即包含一形式負電荷)。陰離子型相對離子亦可為多價(即包含多於一個之形式負電荷)，例如二價或三價。示例性相對離子包含鹵離子(例如F^-、Cl^-、Br^-、I^-)、NO₃ ^-、ClO₄ ^-、OH^-、H₂PO₄ ^-、HSO₄ ^-、磺酸根離子(例如，甲磺酸根、三氟甲磺酸根、對甲苯磺酸根、苯磺酸根、10-樟腦磺酸根、萘-2-磺酸根、萘-1-磺酸-5-磺酸根、乙-1-磺酸-2-磺酸根及其類似者)、羧酸根離子(例如，乙酸根、丙酸根、苯甲酸根、甘油酸根、乳酸根、酒石酸根、羥乙酸根、葡萄糖酸根及其類似者)、BF₄ ^-、PF₄ ^-、PF₆ ^-、AsF₆ ^-、SbF₆ ^-、B[3、5-(CF₃)₂C₆H₃]₄]^-、BPh₄ ^-、Al(OC(CF₃)₃)₄ ^-及碳硼烷陰離子(例如CB₁₁H₁₂ ^-或(HCB₁₁Me₅Br₆)^-)。示例性之多價相對離子包含CO₃ ^2-、HPO₄ ^2-、PO₄ ^3- _、B₄O₇ ^2-、SO₄ ^2-、S₂O₃ ^2-、羧酸根離子(例如酒石酸根、檸檬酸根、反丁烯二酸根、順丁烯二酸根、蘋果酸根、丙二酸根、葡萄糖酸根、琥珀酸根、戊二酸根、己二酸根、庚二酸根、辛二酸根、壬二酸根、癸二酸根、水楊酸根(salicylate)、鄰苯二甲酸根(phthalates)、天門冬胺酸根(aspartate)、麩胺酸根(glutamate)及其類似者)、以及碳硼烷。

「鹵」(halo)或「鹵素」(haolgen)是指氟原子(氟，-F)、氯原子(氯，-Cl)、溴原子(溴，-Br)或碘原子(碘，-I)。

「醯基」(acyl)是指選自由-C(=O)R^aa、-CHO、-CO₂R^aa、-C(=O)N(R^bb)₂、-C(=NR^bb)R^aa、-C(=NR^bb)OR^aa、-C(=NR^bb)N(R^bb)₂、-C(=O)NR^bbSO₂R^aa、-C(=S)N(R^bb)₂、-C(=O)SR^aa及-C(=S)SR^aa所組成之群組，其中R^aa和R^bb如本文所定義。

氮原子於價數允許下可經取代或不經取代，其包括一級、二級、三級及四級氮原子。示例性之氮原子取代基包含，但不限於，氫、-OH、-OR^aa、-N(R^cc)₂、-CN、-C(=O)R^aa、-C(=O)N(R^cc)₂、-CO₂R^aa、-SO₂R^aa、-C(=NR^bb)R^aa、-C(=NR^cc)OR^aa、-C(=NR^cc)N(R^cc)₂、-SO₂N(R^cc)₂、-SO₂R^cc、-SO₂OR^cc、-SOR^aa、-C(=S)N(R^cc)₂、-C(=O)SR^cc、-C(=S)SR^cc、-P(=O)(OR^cc)₂、-P(=O)(R^aa)₂、-P(=O)(N(R^cc)₂)₂、C_1-10烷基、C_1-10全鹵烷基、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基及5-14員雜芳基，或接至N原子之二個R^cc基連結形成3-14員雜環或5-14員雜芳環，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基及雜芳基可獨自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代，其中，R^aa、R^bb、R^cc和R^dd如本文所定義。

在某些實施例中，氮原子上之取代基為氮保護基(亦稱為胺基保護基團)。氮保護基包括，但不限於，-OH、-OR^aa、-N(R^cc)₂、-C(=O)R^aa、-C(=O)N(R^cc)₂、-CO₂R^aa、-SO₂R^aa、-C(=NR^cc)R^aa、-C(=NR^cc)OR^aa、-C(=NR^cc)N(R^cc)₂、-SO₂N(R^cc)₂、-SO₂R^cc、-SO₂OR^cc、-SOR^aa、-C(=S)N(R^cc)₂、-C(=O)SR^cc、-C(=S)SR^cc、C_1-10烷基(例如芳烷基、雜芳烷基)、C_2-10烯基、C_2-10炔基、C_3-10碳環基、3-14員雜環基、C_6-14芳基及5-14員雜芳基，其中每一烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳烷基、芳基及雜芳基可讀自被0、1、2、3、4或5個R^dd基所取代，其中，R^aa、R^bb、R^cc和R^dd如本文所定義。本發明所屬領域具有通常知識者皆知氮保護基團，其包含《Protecting Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene and P.G.M.Wuts,3^rd edition,John Wiley & Sons,1999》所述內容，其併於此作為參考。

舉例來說，諸如醯胺基(如，-C(=O)R^aa)之氮保護基包含，但不限於，甲醯胺、乙醯胺、氯乙醯胺、三氯乙醯胺、三氟乙醯胺、苯乙醯胺、3-苯丙醯胺、吡啶甲醯胺(picolinamide)、3-吡啶羧醯胺(3-pyridylcarboxamide)、N-苯甲醯基***醯基衍生物(N-benzoyl phenylalanyl derivative)、苯甲醯胺(benzamide)、對-苯基苯甲醯胺(p-phenylbenzamide)、鄰-硝基苯乙醯胺(o-nitophenylacetamide)、鄰-硝基苯氧乙醯胺(o-nitrophenoxyacetamide)、乙醯乙醯胺(acetoacetamide)、(N'-二硫苯甲氧醯胺)乙醯胺((N'-dithiobenzyloxyacylamino)acetamide)、3-(對-羥基苯基)丙醯胺((N'-dithiobenzyloxyacylamino)acetamide)、3-(鄰-硝基苯基)丙醯胺(3-(o-nitrophenyl)propanamide)、2-甲基-2-(鄰-硝基苯氧基)丙醯胺(2-methyl-2-(o-nitrophenoxy)propanamide)、2-甲基-2-(鄰-苯偶氮苯氧基)丙醯胺(2-methyl-2-(o-phenylazophenoxy)propanamide)、4-氯丁醯胺(4-chloro butanamide)、3-甲基-3-硝基丁醯胺(3-methyl-3-nitrobutanamide)、鄰-硝基肉桂醯胺(o-nitrocinnamide)、N-乙醯甲硫胺酸衍生物(N-acetyl methionine derivative)、鄰-硝基苯甲醯胺(o-nitrobenzamide)及鄰-(苯甲醯氧基甲基)苯甲醯胺(o-(benzoyloxy methyl)benzamide)。

諸如胺甲酸酯基(例如，-C(=O)R^aa)之氮保護基團包含，但不限於，胺甲酸甲酯(methyl carbamate)、胺甲酸乙酯(ethylcarbamate)、胺甲酸9-茀甲酯(9-fluorenylmethyl carbamate,Fmoc)、胺甲酸9-(2-硫)茀甲酯(9-(2-sulfo)fluorenyl methyl carbamate)、胺甲酸9-(2,7-二溴)茀甲酯(9-(2,7-dibromo)fluoroenylmethyl carbamate)、胺甲酸2,7-二-第三丁基-[9-(10,10-二氧代-10,10,10,10-四氫噻吨基)]甲酯(2,7-di-t-butyl-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahydro thioxanthyl)]methyl carbamate,DBD-Tmoc)、胺甲酸4-甲氧苯甲醯甲酯(4-methoxyphenacyl carbamate, Phenoc)、胺甲酸2,2,2-三氯乙酯(2,2,2-trichloroethyl carbamate,Troc)、胺甲酸2-三甲矽乙酯(2-trimethylsilylethyl carbamate,Teoc)、胺甲酸2-苯乙酯(2-phenylethyl carbamate,hZ)、胺甲酸1-(1-金剛烷基)-1-甲基乙酯(1-(1-adamantyl)-1-methylethyl carbamate,Adpoc)、胺甲酸1,1-二甲基-2-鹵乙酯(1,1-dimethyl-2-haloethyl carbamate)、胺甲酸1,1-二甲基-2,2-二溴乙酯(1,1-dimethyl-2,2-dibromoethyl carbamate,DB-t-BOC)、胺甲酸1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙酯(1,1-dimethyl-2,2,2-trichloroethyl carbamate,TCBOC)、胺甲酸1-甲基-1-(4-聯苯基)乙酯(1-methyl-1-(4-biphenylyl)ethyl carbamate,Bpoc)、胺甲酸1-(3,5-二-第三丁基苯基)-1-甲基乙酯(1-(3,5-di-t-butyl phenyl)-1-methylethyl carbamate,t-Bumeoc)、胺甲酸2-(2'-和4'-吡啶基)乙酯(2-(2'-and 4'-pyridyl)ethyl carbamate,Pyoc)、胺甲酸2-(N,N-二環己基羧醯胺基)乙酯(2-(N,N-dicyclohexylcarboxamido)ethyl carbamate)、胺甲酸三級-丁酯(t-butyl carbamate,BOC或Boc)、胺甲酸1-金剛烷酯(1-adamantyl carbamate,Adoc)、胺甲酸乙烯酯(vinyl carbamate,Voc)、胺甲酸烯丙酯(allyl carbamate,Alloc)、胺甲酸1-異丙基烯丙酯(1-isopropylallyl carbamate,Ipaoc)、胺甲酸肉桂酯(cinnamyl carbamate,Coc)、胺甲酸4-硝基肉桂酯(4-nitrocinnamyl carbamate,Noc)、胺甲酸8-喹啉基酯、(8-quinolyl carbamate)、胺甲酸N-羥呱啶酯(N-hydroxypiperidinyl carbamate)、胺甲酸二硫代烷基酯(alkyldithio carbamate)、胺甲酸苯甲基酯(benzyl carbamate,Cbz)、胺甲酸對-甲氧苯甲基酯(p-methoxy benzyl carbamate,Moz)、胺甲酸對-硝基苯甲基酯(p-nitobenzyl carbamate)、胺甲酸對-溴苯甲基酯(p-bromobenzyl carbamate)、胺甲酸對-氯苯甲基酯(p-chlorobenzyl carbamate)、胺甲酸2,4-二氯苯甲基酯(2,4-dichlorobenzyl carbamate)、胺甲酸4-甲亞磺醯苯甲基酯(4-methylsulfinylbenzyl carbamate,Msz)、胺甲酸9-蒽 甲酯(9-anthrylmethyl carbamate)、胺甲酸二苯甲酯(diphenylmethyl carbamate)、胺甲酸2-甲基硫代乙酯(2-methylthioethyl carbamate)、胺甲酸2-甲基磺醯乙酯(2-methylsulfonylethyl carbamate)、胺甲酸2-(對-甲苯磺醯基)乙酯(2-(p-toluene sulfonyl)ethyl carbamate)、胺甲酸[2-(1,3-二硫雜環己基)]甲酯([2-(1,3-dithianyl)]methyl carbamate,Dmoc)、胺甲酸4-甲基硫代苯酯(4-methylthiophenyl carbamate,Mtpc)、胺甲酸2,4-二甲基硫代苯酯(2,4-dimethylthiophenyl carbamate,Bmpc)、胺甲酸2-磷鎓基乙酯(2-phosphonioethyl carbamate,Peoc)、胺甲酸2-三苯基磷鎓基異丙酯(2-triphenylphosphonioisopropyl carbamate,Ppoc)、胺甲酸1,1-二甲基-2-氰乙酯(1,1-dimethyl-2-cyanoethyl carbamate)、胺甲酸間-氯-對-醯氧苯甲基酯(m-chloro-p-acyloxybenzyl carbamate)、胺甲酸對-(二羥氧硼基)苯甲基酯(p-(dihydroxyboryl)benzyl carbamate)、胺甲酸5-苯並異噁唑基甲酯(5-benzisoxazolyl methyl carbamate)、胺甲酸2-(三氟甲基)-6-色酮基甲酯(2-(trifluoromethyl)-6-chromonyl methyl carbamate,Tcroc)、胺甲酸間-硝基苯酯(m-nitrophenyl carbamate)、胺甲酸3,5-二甲氧基苯甲基酯(3,5-dimethoxy benzyl carbamate)、胺甲酸鄰-硝基苯甲基酯(o-nitrobenzyl carbamate)、胺甲酸3,4-二甲氧基-6-硝基苯甲基酯(3,4-dimethoxy-6-nitro)、胺甲酸苯基(鄰-硝基苯基)甲酯(benzyl carbamate,phenyl(o-nitrophenyl)methyl carbamate)、胺甲酸第三-戊酯(t-amyl carbamate)、硫代胺甲酸S-苯甲基酯(S-benzyl thiocarbamate)、胺甲酸對-氰基苯甲基酯(p-cyanobenzyl carbamate)、胺甲酸環丁酯(cyclobutyl carbamate)、胺甲酸環己酯(cyclohexyl carbamate)、胺甲酸環戊酯(cyclopentyl carbamate)、胺甲酸環丙基甲酯(cyclopropyl methyl carbamate)、胺甲酸對-癸氧苯甲基酯(p-decyloxybenzyl carbamate)、胺甲酸2,2-二甲氧醯基乙烯酯(2,2-dimethoxyacylvinyl carbamate)、 胺甲酸鄰-(N,N-二甲基羧醯胺基)苯甲基酯(o-(N,N-dimethylcarboxamido)benzyl carbamate)、胺甲酸1,1-二甲基-3-(N,N-二甲基羧醯胺基)丙酯(1,1-dimethyl-3-(N,N-dimethylcarbox amido)propyl carbamate)、胺甲酸1,1-二甲基丙炔酯(1,1-dimethylpropynyl carbamate)、胺甲酸二(2-吡啶基)甲酯(di(2-pyridyl)methyl carbamate)、胺甲酸2-呋喃基甲酯(2-furanyl methyl carbamate)、胺甲酸2-碘乙酯(2-iodoethyl carbamate)、胺甲酸異冰片酯(isoborynl carbamate)、胺甲酸異丁酯(isobutyl carbamate)、胺甲酸異菸鹼醯酯(isonicotinyl carbamate)、胺甲酸對-(對’-甲氧苯偶氮)苯甲基酯(p-(p'-methoxyphenylazo)benzyl carbamate)、胺甲酸1-甲基環丁酯(1-methylcyclobutyl carbamate)、胺甲酸1-甲基環己酯(1-methyl cyclohexyl carbamate)、胺甲酸1-甲基-1-環丙基甲酯(1-methyl-1-cyclopropyl methyl carbamate)、胺甲酸1-甲基-1-(3,5-二甲氧苯基)乙酯(1-methyl-1-(3,5-dimethoxy phenyl)ethyl carbamate)、胺甲酸1-甲基-1-(對-苯偶氮苯基)乙酯(1-methyl-1-(p-phenylazophenyl)ethyl carbamate)、胺甲酸1-甲基-1-苯乙酯(1-methyl-1-phenyl ethyl carbamate)、胺甲酸1-甲基-1-(4-吡啶基)乙酯(1-methyl-1-(4-pyridyl)ethyl carbamate)、胺甲酸苯酯(phenyl carbamate)、胺甲酸對-(苯偶氮)苯甲酯(p-(phenylazo)benzyl carbamate)、胺甲酸2,4,6-三-第三-丁基苯酯(2,4,6-tri-t-butylphenyl carbamate)、胺甲酸4-(三甲基銨)苯甲酯(4-(trimethylammonium)benzyl carbamate)、及胺甲酸2,4,6-三甲基苯甲酯(2,4,6-trimethylbenzyl carbamate)。

諸如磺醯胺基(例如，-S(=O)₂R^aa)之氮保護基包含，但不限於，對-甲苯磺醯胺(p-toluenesulfonamide,Ts)、苯磺醯胺(benzenesulfonamide)、2,3,6-三甲基-4-甲氧苯磺醯胺(2,3,6,-trimethyl-4-methoxybenzene sulfonamide,Mtr)、 2,4,6-三甲氧苯磺醯胺(2,4,6-trimethoxybenzenesulfonamide,Mtb)、2,6-二甲基-4-甲氧苯磺醯胺(2,6-dimethyl-4-methoxybenzenesulfonamide,Pme)、2,3,5,6-四甲基-4-甲氧苯磺醯胺(2,3,5,6-tetra methyl-4-methoxybenzenesulfonamide,Mte)、4-甲氧苯磺醯胺(4-methoxybenzene sulfonamide,Mbs)、2,4,6-三甲基苯磺醯胺(2,4,6-trimethylbenzenesulfonamide,Mts)、2,6-二甲氧基-4-甲基苯磺醯胺(2,6-dimethoxy-4-methylbenzenesulfonamide,iMds)、2,2,5,7,8-五甲基色烷-6-磺醯胺(2,2,5,7,8-penta methylchroman-6-sulfonamide,Pmc)、甲烷磺醯胺(methanesulfonamide,Ms)、β-三甲矽基乙烷磺醯胺(methanesulfonamide,SES)、9-蒽磺醯胺(9-anthracene sulfonamide)、4-(4',8'-二甲氧萘基甲基)苯磺醯胺(4-(4',8'-dimethoxynaphthyl methyl)benzenesulfonamide,DNMBS)、苯甲磺醯胺(benzylsulfonamide)、三氟甲基磺醯胺(trifluoromethylsulfonamide)和苯甲醯甲基磺醯胺(phenacyl sulfonamide)。

其他氮保護基包含，但不限於，吩噻嗪基-(10)-醯基衍生物(phenothiazinyl-(10)-acyl derivative)、N’-對-甲苯磺醯胺醯基衍生物(N'-p-toluene sulfonylaminoacyl derivative)、N’-苯胺硫代醯基衍生物(N'-phenylaminothioacyl derivative)、N-苯甲醯基苯基丙胺醯基衍生物(N-benzoylphenylalanyl derivative)、N-乙醯基甲硫胺酸衍生物(N-acetylmethionine derivative)、4,5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮(4,5-diphenyl-3-oxazolin-2-one)、N-酞醯亞胺(N-phthalimide)、N-二硫代丁二醯亞胺(N-dithiasuccinimide,Dts)、N-2,3-二苯基順丁烯二醯亞胺(N-2,3-diphenylmaleimide)、N-2,5-二甲基吡咯(N-2,5-dimethylpyrrole)、N-1,1,4,4-四甲基二矽基氮環戊烷加成物(N-1,1,4,4-tetramethyldisilylazacyclopentane adduct,STABASE)、5-經取代之1,3-二甲基-1,3,5-三氮環己-2-酮(5-substituted 1,3-dimethyl-1,3,5-triazacyclohexan-2-one)、5-經取代之1,3-二苯甲基-1,3,5-三氮環己-2-酮(5-substituted 1,3-dibenzyl-1,3,5-triazacyclohexan-2-one)、1-經取代之3,5-二硝基-4-吡啶酮(1-substituted 3,5-dinitro-4-pyridone)、N-甲胺(N-methylamine)、N-烯丙胺(N-allylamine)、N-[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲胺(N-[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methylamine,SEM)、N-3-乙醯氧基丙胺(N-3-acetoxypropyl amine)、N-(1-異丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)胺(N-(1-isopropyl-4-nitro-2-oxo-3-pyroolin-3-yl)amine)、四級銨鹽(quaternary ammonium salts)、N-苯甲胺(N-benzylamine)、N-二(4-甲氧苯基)甲胺(N-di(4-methoxyphenyl)methylamine)、N-5-二苯並環庚胺(N-5-dibenzosuberylamine)、N-三苯甲基胺(N-triphenylmethylamine,Tr)、N-[(4-甲氧苯基)二苯基甲基]胺(N-[(4-methoxyphenyl)diphenylmethyl]amine,MMTr)、N-9-苯茀胺(N-9-phenylfluorenyl amine,PhF)、N-2,7-二氯-9-茀亞甲胺(N-2,7-dichloro-9-fluorenylmethyleneamine)、N-二茂鐵基甲胺基(N-ferrocenyl methyl amino,Fcm)、N-2-吡啶甲胺N-氧化物(N-2-picolylamino N-oxide)、N-1,1-二甲基硫亞甲胺(N-1,1-dimethyl thiomethyleneamine)、N-苯亞甲基胺(N-benzylideneamine)、N-p-甲氧苯亞甲基胺(N-p-methoxybenzylidene amine)、N-二苯基亞甲基胺(N-diphenylmethyleneamine)、N-[(2-吡啶基)均三甲苯基]亞甲胺(N-[(2-pyridyl)mesityl]methylene amine)、N-(N',N'-二甲基胺亞甲基)胺(N-(N',N'-dimethyl aminomethylene)amine)、N,N'-異亞丙二胺(N,N'-isopropylidene diamine)、N-對-硝苯亞甲基胺(N-p-nitrobenzylideneamine)、N-亞水楊基胺(N-salicylideneamine)、N-5-氯亞水楊基胺(N-5-chloro salicylideneamine)、N-(5-氯-2-羥苯基)苯亞甲胺(N-(5-chloro-2-hydroxyphenyl)phenylmethyleneamine)、N-環亞己基胺(N-cyclohexylideneamine)、N-(5,5-二甲基-3-氧代-1-環己烯基)胺(N-(5,5-dimethyl- 3-oxo-1-cyclohexenyl)amine)、N-硼烷衍生物(N-borane derivative)、N-二苯基硼酸衍生物(N-diphenylborinic acid derivative)、N-[苯基(五醯鉻-或鎢)醯基]胺(N-phenyl(pentaacylchromium-or tungsten)acyl]amine)、N-銅螯合物(N-copper chelate)、N-鋅螯合物(N-zinc chelate)、N-硝基胺(N-nitroamine)、N-亞硝胺(N-nitrosoamine)、胺N-氧化物(amine N-oxide)、二苯基膦醯胺(diphenylphosphinamide,Dpp)、二甲基硫代膦醯胺(dimethylthiophosphinamide,Mpt)、二苯基硫代膦醯胺(diphenylthiophosphin amide,Ppt)、胺基磷酸二烷酯(dialkyl phosphoramidates)、胺基磷酸二苯甲酯(dibenzyl phosphoramidate)、胺基磷酸二苯酯(diphenyl phosphoramidate)、苯次磺醯胺(benzenesulfenamide)、鄰-硝基苯次磺醯胺(o-nitrobenzenesulfen amide,Nps)、2,4-二硝基苯次磺醯胺(2,4-dinitrobenzenesulfenamide)、五氯苯次磺醯胺(pentachloro benzene sulfonamide)、2-硝基-4-甲氧苯次磺醯胺(2-nitro-4-methoxybenzenesulfenamide)、三苯基甲基次磺醯胺(triphenyl methyl sulfonamide)及3-硝基吡啶次磺醯胺(3-nitropyridinesulfenamide,Npys)。

示例性氧原子取代基包括，但不限於，-R^aa、-C(=O)SR^aa、-C(=O)R^aa、-CO₂R^aa、-C(=O)N(R^bb)₂、-C(=NR^bb)R^aa、-C(=NR^bb)OR^aa、-C(=NR^bb)N(R^bb)₂、-S(=O)R^aa、-SO₂R^aa、-Si(R^aa)_3、-P(R^cc)₂、-P(R^cc)₃ ⁺X^-、-P(OR^cc)₂、-P(OR^cc)₃ ⁺X^-、-P(=O)(R^aa)₂、-P(=O)(OR^cc)₂、及-P(=O)(N(R^bb)₂)₂，其中X^-、R^aa、R^bb及R^cc如本文所定義。於某些實施例中，氧原子上之氧原子取代基為氧保護基(亦稱為羥基保護基)。本發明所屬領域具有通常知識者皆知氧保護基，其包含《Protecting Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene and P.G.M.Wuts,3^rd edition,John Wiley & Sons,1999》所述內容，其詳細描述併於此做為參考。示例 性之氧保護基包含，但不限於，甲基、第三丁氧羰基(BOC或Boc)、甲氧甲基(MOM)、甲基硫代甲基(MTM)、第三-丁基硫代甲基、(苯基二甲基矽基)甲氧甲基(SMOM)、苯甲氧甲基(BOM)、對-甲氧苯甲氧甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基(p-AOM)、癒創木酚甲基(guaiacolmethyl，GUM)、第三-丁氧甲基、4-戊烯氧甲基(POM)、矽氧甲基、2-甲氧乙氧甲基(MEM)、2,2,2-三氯乙氧甲基、雙(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基矽基)乙氧甲基(SEMOR)、四氫吡喃基(THP)、3-溴四氫吡喃基(3-bromotetra hydropyranyl)、四氫噻喃基(tetrahydrothiopyranyl)、1-甲氧環己基、4-甲氧四氫吡喃基(MTHP)、4-甲氧四氫噻喃基、4-甲氧四氫噻喃基S,S-二氧化物(4-methoxy tetrahydrothiopyranyl S,S-dioxide)、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧哌啶-4-基(CTMP)、1,4-二

烷-2-基(1,4-dioxan-2-yl)、四氫呋喃基、四氫硫代呋喃基(tetrahydrothiofuranyl)、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氫-7,8,8-三甲基-4,7-甲橋苯並呋喃-2-基(2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahydro-7,8,8-trimethyl-4,7-methanobenzofuran-2-yl)、1-乙氧乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、1-甲基-1-甲氧乙基、1-甲基-1-苯甲氧乙基、1-甲基-1-苯甲氧基-2-氟乙基、2,2,2-三氯乙基、2-三甲基矽基乙基、2-(苯基硒基)乙基、第三-丁基、烯丙基、對-氯苯基、對-甲氧苯基、2,4-二硝基苯基、苯甲基(Bn)、對-甲氧苯甲基、3,4-二甲氧苯甲基、鄰-硝基苯甲基、對-硝基苯甲基、對-鹵苯甲基、2,6-二氯苯甲基、對-氰苯甲基、對-苯基苯甲基、2-吡啶甲基(2-picolyl)、4-吡啶甲基(4-picolyl)、3-甲基-2-吡啶甲基N-氧撐(3-methyl-2-picolyl N-oxido)、二苯基甲基、對，對'-二硝基二苯甲基(p,p'-dinitrobenzhydryl)、5-二苯並環庚基(5-dibenzosuberyl)、三苯基甲基、α-萘基二苯基甲基、對-甲氧苯基二苯基甲基、二(對-甲氧苯基)苯基甲基、三(對-甲氧基苯基)甲基、4-(4'-溴苯甲醯甲氧苯基)二苯基甲基、4,4',4"-三(4,5-二氯酞醯亞胺 苯基)甲基、4,4',4"-三(4-乙醯丙醯基氧基苯基)甲基(4,4',4"-tris(levulinoyloxyphenyl)methyl)、4,4',4"-三(苯甲醯氧苯基)甲基、3-(咪唑-1-基)雙(4',4"-二甲氧基苯基)甲基、1,1-雙(4-甲氧苯基)-1’-芘基甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)吨基(9-(9-phenyl)xanthenyl)、9-(9-苯基-10-氧代)蒽基(9-(9-phenyl-10-oxo)anthryl)、1,3-苯並二硫雜環戊烷-2-基(,3-benzo disulfuran-2-yl)、苯並異噻唑基S,S-二氧撐(benzisothiazolyl S,S-dioxido)、三甲基矽基(TMS)、三乙基矽基(TES)、三異丙基矽基(TIPS)、二甲基異丙基矽基(IPDMS)、二乙基異丙基矽基(DEIPS)、二甲基叔己基矽基(dimethylthexylsilyl)、第三丁基二甲基矽基(TBDMS)、第三丁基二苯基矽基(TBDPS)、三苯甲基矽基、三-對-二甲苯基矽基、三苯基矽基、二苯基甲基矽基(DPMS)、第三丁基甲氧基苯基矽基(TBMPS)、甲酸根、苯甲醯甲酸根、乙酸根、氯乙酸根、二氯乙酸根、三氯乙酸根、三氟乙酸根、甲氧基乙酸根、三苯基甲氧乙酸根、苯氧乙酸根、對-氯苯氧乙酸根、3-苯基丙酸根、4-氧代戊酸根(乙醯丙酸根(levulinate))、4,4-(亞乙基二硫)戊酸根(乙醯丙醯基二硫縮醛(levulinoyldithioacetal))、特戊酸根(pivaloate)、金剛酸根(adamantoate)、巴豆酸根、4-甲氧巴豆酸根、苯甲酸根、對-苯基苯甲酸根、2,4,6-三甲基苯甲酸根(菜酸根)、烷基甲基碳酸根、9-茀甲基碳酸根(Fmoc)、烷基乙基碳酸根、烷基2,2,2-三氯乙基碳酸根(Troc)、2-(三甲基矽基)乙基碳酸根(TMSEC)、2-(苯磺醯基)乙基碳酸根(Psec)、2-(三苯基磷鎓基)乙基碳酸根(Peoc)、烷基異丁基碳酸根、烷基乙烯基碳酸根、烷基烯丙基碳酸根、烷基對-硝苯基碳酸根、烷基苯甲碳酸根、烷基對-甲氧苯甲基碳酸根、烷基3,4-二甲氧苯甲碳酸根、烷基鄰-硝苯甲基碳酸根、烷基對-硝苯甲基碳酸根、烷基S-苯甲基硫代碳酸根、4-乙氧-1-萘基碳酸根、甲基二硫碳酸根、2-碘苯甲酸根、4-疊氮基丁酸根、4-硝基-4-甲基戊酸根、鄰-(二 溴甲基)苯甲酸根、2-甲醯苯磺酸根、2-(甲基硫代甲氧基)乙基、4-(甲基硫代甲氧基)丁酸根、2-(甲基硫代甲氧甲基)苯甲酸根、2,6-二氯-4-甲基苯氧乙酸根、2,6-二氯-4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯氧乙酸根、2,4-雙(1,1,-二甲基丙基)苯氧乙酸根、氯二苯乙酸根、異丁酸根、單丁二酸根、(E)-2-甲基-丁烯酸根、鄰-(甲氧醯基)苯甲酸根、α-萘酸根、硝酸根、烷基N,N,N',N'-四甲基二胺基磷酸根、烷基N-苯基胺甲酸根、硼酸根、二甲基硫膦基(dimethylphosphinothioyl)、烷基2,4-二硝基苯次磺酸根、硫酸根、甲烷磺酸根(甲磺酸根)、苯甲基磺酸根和甲苯磺酸根(Ts)。

示例性硫原子取代基包括，但不限於，-R^aa、-C(=O)SR^aa、-C(=O)R^aa、-CO₂R^aa、-C(=O)N(R^bb)₂、-C(=NR^bb)R^aa、-C(=NR^bb)OR^aa、-C(=NR^bb)N(R^bb)₂、-S(=O)R^aa、-SO₂R^aa、-Si(R^aa)₃、-P(R^cc)₂、-P(R^cc)₃ ⁺X^-、-P(OR^cc)₂、-P(OR^cc)₃ ⁺X^-、-P(=O)(R^aa)₂、-P(=O)(OR^cc)₂、及-P(=O)(N(R^bb)₂)₂，其中R^aa、R^bb、及R^cc如本文所定義。

「烴鏈」(hydrocarbon chain)是指經取代或未經取代之二價烷基、烯基或炔基。烴鏈包含(1)直接介於烴鏈二基團之間的一或多個碳原子鏈；(2)碳原子鏈上可任選之一或多個氫原子；以及(3)碳原子鏈上可任選之一或多個取代基(「非鏈取代基」(non-chain substituents)，其不為氫)。碳原子鏈係由連續連接的碳原子(「鏈原子」(chain atoms)或碳單元)所組成，且不包含氫原子或雜原子。然而，烴鏈的非鏈取代基可包含任何原子，包含氫原子、碳原子及雜原子。舉例來說，烴鏈-C^AH(C^BH₂C^CH₃)-包含一鏈原子C^A、一位在C^A上的氫原子、以及非鏈取代基-(C^BH₂C^CH₃)。「C_x烴鏈」(C_x hydrocarbon chain)(其中x為正整數)一詞係指包含x個鏈原子介於烴鏈二基團之間的烴鏈。若有超過一個可能的x值，則以x 的最小可能值來定義烴鏈。舉例來說，-CH(C₂H₅)-為C₁烴鏈，而

則為 C₃烴鏈。當使用一範圍值時，則該範圍之含義如本文所述。舉例來說，C_3-10烴鏈係指緊介於烴鏈二基團之間的最短碳原子鏈的碳原子數為3、4、5、6、7、8、9或10之烴鏈。烴鏈可為飽和(例如-(CH₂)₄-)。烴鏈亦可為不飽和，其包含一或多個位於烴鏈任何位置之C=C及/或C≡C鍵。舉例來說，-CH=CH-(CH₂)₂-、-CH₂-C≡C-CH₂-及-C≡C-CH=CH-皆為未經取代且未飽和之烴鏈範例。在某些實施方式中，烴鏈為未經取代(例如，-C≡C-或-(CH₂)₄-)。在某些實施方式中，烴鏈為經取代(例如，-CH(C₂H₅)-及-CF₂-)。任二個位於烴鏈上的取代基可連接形成視情況經取代之碳環、視情況經取代之雜環、視情況經取代之芳基，或視情況經取 代之雜芳環。例如，

、

、

、

、

、 及

皆為烴鏈之示例。相較之下，在某些實施例中，

及

非屬本文所述之烴鏈範圍。當以雜原子取代C_x烴鏈的鏈原子時，所得 到的基團為有一鏈原子被雜原子取代之C_x烴鏈，而非C_x-1烴鏈。舉例來說，

為一鏈原子被氧原子取代之C₃烴鏈。「離去基」(leaving group)一詞為 合成有機化學領域中之一般含義，其係指能被親核劑(nucleophile)置換的原子或基團。舉例來說，可參見《Smith,March Advanced Organic Chemistry 6th ed.(501-502)》。離去基之示例包含，但不限於，鹵素(例如，F、Cl、Br或I)、烷氧羰氧基(alkoxycarbonyloxy)、芳氧基羰氧基(aryloxycarbonyloxy)、烷基磺醯氧基 (alkanesulfonyloxy)、芳磺醯氧基(arenesulfonyloxy)、烷基-羰氧基(例如乙醯氧基)、芳基羰氧基、芳氧基、甲氧基、N,O-二甲基羥胺、苯基呫吨基(pixyl)、及鹵代甲酸酯(haloformates)。於一些例子中，離去基為活化經取代之羥基(例如-OC(=O)SR^aa、-OC(=O)R^aa、-OCO₂R^aa、-OC(=O)N(R^bb)₂、-OC(=NR^bb)R^aa、-OC(=NR^bb)OR^aa、-OC(=NR^bb)N(R^bb)₂、-OS(=O)R^aa、-OSO₂R^aa、-OP(R^cc)₂、-OP(R^cc)₃、-OP(=O)₂R^aa、-OP(=O)(R^aa)₂、-OP(=O)(OR^cc)₂、-OP(=O)₂N(R^bb)₂、及-OP(=O)(NR^bb)₂，其中R^aa、R^bb及R^cc如本文所定義)。於一些例子中，離去基為磺酸酯，例如甲苯磺酸酯基(tosylate,-OTs)、甲磺酸酯基(mesylate,-OMs)、對-溴苯磺酸酯基(brosylate,-OBs)、-OS(=O)₂(CF₂)₃CF₃(九氟丁烷磺酸酯(nonaflate),-ONf)、或三氟甲磺酸酯(triflate,-OTf)。於一些例子中，離去基為溴苯磺酸基(brosylate)，例如對-溴苯磺醯基(p-bromobenzenesulfonyloxy)。於一些例子中，離去基為硝基苯磺醯基(nosylate)，例如2-硝基苯磺醯基(2-nitrobenzenesulfonyloxy)。在一些實施例中，離去基為含磺酸根基團。在一些實施例中，離去基為甲苯磺酸酯基。該離去基亦可為氧化膦(phosphineoxide)(例如，在Mitsunobu反應過程中形成)或內部離去基，例如環氧化物或環狀硫酸根。離去基之其他非限制範例為水、氨、醇、醚基團、硫醚基團、鹵化鋅、鎂基團、重氮鹽及銅基團。

「醫藥上可接受之鹽」(pharmaceutically acceptable salt)一詞是指在可靠的醫學判斷範圍內，適合與人類及較為低等動物的組織接觸使用，而不會造成不適當的毒性、刺激性、過敏性反應等的鹽類，且符合合理的利益/風險比例。本發明所屬技術領域具有通常知識者已知醫藥上可接受之鹽。舉例來說，Berge et al.於J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中詳細描述之醫藥上可接受之鹽，其併於此做為標的參考且為參考目的。本發明化合物之醫藥上可接受 之鹽包括衍生自合適無機及有機酸及鹼的鹽類。醫藥上可接受、無毒酸加成鹽為胺基的鹽類，其係由胺基與無機酸(如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及過氯酸)、或與有機酸(如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸)、或通過使用本領域中已知的其它方法(如離子交換法)而形成。其它醫藥上可接受之鹽包括，己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天門冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、酸式硫酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及其類似者。衍生自適當鹼之鹽包括鹼金屬、鹼土金屬、銨及N⁺(C_1-4烷基)₄ ^-的鹽。代表性的鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂鹽等等。此外，醫藥上可接受之鹽包括，在合適的時候，由無毒的銨、四級銨及胺陽離子與相對離子(如鹵素根(halide)、氫氧根(hydroxide)、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低級烷基磺酸根及芳基磺酸根)所共同形成的鹽類。

「溶劑合物」(solvate)一詞是指通常藉由溶劑分解反應(solvolysis)而與溶劑結合在一起的化合物形式。此物理性結合可包含氫鍵。常規的溶劑包含水、甲醇、乙醇、乙酸、二甲亞碸(dimethyl sulfoxide,DMSO)、四氫呋喃(THF)、二***及其類似物。本文所述之化合物可製備成例如晶體形式，亦可為溶劑化。 合適的溶劑合物包含醫藥上可接受之溶劑合物，且更包含化學計量溶劑合物及非化學計量溶劑合物兩者。在某些情況下，舉例來說，當一或多個溶劑分子併於晶形固體之晶格中時，溶劑合物將能夠分離。「溶劑合物」包含溶液相及可分離之溶劑合物。代表性溶劑合物包含水合物(hydrate)、乙醇合物(ethanolate)、以及甲醇合物(methanolate)。

「水合物」(hydrate)一詞是指與水結合之化合物。一般來說，化合物之水合物中所含有之水分子個數與水合物中化合物分子的個數呈一明確比例。因此，舉例來說，可以通式R‧xH₂O來表示化合物的水合物，其中R是化合物，而x則為大於0的數值。一既定化合物可形成多於一種形式的水合物，包含，例如一水合物(x為1)、低水合物(x大於0且小於1，例如半水合物(R‧0.5 H₂O))、及多水合物(x大於1，例如二水合物(R‧2 H₂O)及六水合物(R‧6 H₂O))。

「互變異構物」(tautomers)或「互變異構的」(tautomeric)一詞是指因氫原子之至少一次形式遷移(formal migration)和至少一價數的改變(例如，單鍵變雙鍵、三鍵變單鍵、或反之亦然)所形成的二個或更多可互相轉換的化合物。互變異構物的確切比例取決於幾個因素，包括溫度、溶劑和酸鹼值。可由酸或鹼催化產生互變異構化(即，該反應提供一對互變異構體)。示例性之互變異構化包括酮-至-烯醇、醯胺-至-醯亞胺、內醯胺-至-內醯亞胺、烯胺-至-亞胺、及烯胺-至-(另一種烯胺)之間的互變異構化。

亦可理解，具有相同分子式但不同性質或原子鍵結次序或原子空間排列之化合物稱為「異構物」(isomer)。當其原子空間排列不同時，此種異構物被稱為「立體異構物」(stereoisomer)。

彼此不呈鏡像之立體異構物稱為「非鏡像異構物」(diastereomer)，而彼此呈無法重疊之鏡像物稱為「鏡像異構物」(enantiomer)。當化合物具有不對稱中心(例如，鍵結至四個不同基團)時，會產生一對鏡像異構物。鏡像異構物的特點在於其不對稱中心的絕對組態，其可以Cahn及Prelog的R-和S-排序法則來闡述，或以分子旋轉偏光平面的方式指定為右消旋或左消旋(即，分別為(+)或(-)-異構物)。掌性化合物可以個別鏡像異構物或其混合物的形式存在。含有相同比例之鏡像異構物的混合物稱為「外消旋混合物」(racemic mixture)。

「多形體」(polymorph)一詞是指呈特定晶體堆積排列(crystal packing arrangement)之化合物(或其鹽、水合物或溶劑合物)的晶體形式。所有多形體具有相同元素組成。不同的晶體形式通常具有不同的X射線繞射圖譜、紅外線圖譜、熔點、密度、硬度、晶型、光學及電性特性、安定性及溶解度。再結晶溶劑、結晶速度、儲存溫度以及其他因素均可能導致一種晶體形式成為優勢晶形。可在不同條件下以結晶作用來製備化合物的各種多形體。

「前驅藥」(prodrug)是指具有可裂解基團的化合物，其在溶劑分解作用或生理條件下可轉變為本文所述具有體內醫藥活性之化合物。該等例子包含，但不限於，膽鹼酯(choline ester)衍生物、N-烷基嗎福林酯(N-alkylmorpholine esters)及其類似者。本文所述之化合物的其它衍生物在其酸及酸衍生物形式皆具有活性，但酸敏感形式通常具有溶解度、組織相容性及或於哺乳動物中延緩釋放的優點(可參見Bundgard,H.,Design of Prodrugs,pp.7-9,21-24,Elsevier,Amsterdam 1985)。前驅藥包含本發明所屬領域習知技藝人士所熟知的酸衍生物，舉例來說，以適當的醇與母體酸(parent acid)反應形成的酯類，或是以經取代或未經取代胺或酸酐(acid anhydrides)或混合酐與母體酸化合物反應形成的醯 胺。衍生自側鍵結於本發明化合物上之酸基的簡單脂族或芳香酯、醯胺及酐可作為特定的前驅藥。在一些情況下，需製備雙酯型前驅藥，如(醯氧基)烷酯((acyloxy)alkyl esters)或((烷氧羰基)氧基)烷酯(((alkoxycarbonyl)oxy)alkylesters)。較佳是本發明化合物之C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、C₇-C₁₂經取代芳基及C₇-C₁₂芳烷基酯。

「組成物」(composition)及「製劑」(formulation)用詞可互換使用。

本文使用之「個體」(subject)是指大類(即任何年齡群的男性或女性，例如嬰兒、幼兒或青少年之小兒科個體，或是例如青年、中年或老年之成人個體)。該個體亦包括任何非人類動物，包含但不限於馬來猴或恆河猴、牛、豬、馬、綿羊、山羊、貓、狗、小鼠、大鼠、兔或鳥(諸如雞、鴨、鵝或火雞等商業相關的鳥類)。在某些實施方式中，非人類動物是魚類、爬蟲類或二棲類。在某些實施方式中，非人類動物是哺乳類、靈長類、囓齒類、禽類、馬、綿羊、牛、山羊、貓科或犬科。非人類動物可以是任何發育階段的雄性或雌性個體。非人類動物可以是基因轉殖動物或基因改造動物。「病患」(patient)係指需治療疾病的人類個體。該個體可以是植物。

「生物樣本」(biological sample)一詞是指包含組織樣本(例如，組織切片及組織針穿刺切片)、細胞樣本(例如，細胞抹片(例如，Pap或血液抹片)或微切割所得之細胞樣本)、全生物樣本(例如，酵母菌或細菌的樣本)、或細胞部分、片段或胞器(例如，分解細胞，並藉由離心或其他方式分離之成分)。生物樣本之其它示例包含，血液、血清、尿液、***、糞便、腦脊液、組織間液、黏液、淚液、汗液、膿液、切片組織(例如，外科手術切片或針穿刺切片)、乳頭 抽出物、乳汁、***液、唾液、刮取物(例如，頰部刮取物)、以及任何含有源自第一生物檢體之材料。

「投予」、「給藥」、「投藥」、或「施用」(administer,administering,administration)一詞是指植入、吸收、攝入、注入、吸入或其他可將本發明化合物或其組成物導入至個體的方式。

「治療」(treatment)一詞是指反轉、減緩或延遲本文所述之疾病的發生或抑制該疾病之進程。在某些實施方式中，可於疾病一或多種徵狀或病徵發生後，或是觀察到疾病一或多種徵狀或病徵後，投予治療。在其他實施方式中，可於未出現疾病之徵狀或病徵時，投予治療。舉例來說，可在病徵發生前，對有罹患風險的個體投予治療(例如基於病徵的病史及/或基於病原體的接觸)，藉以延緩或預防疾病的發生。亦可於病徵消除後持續投予治療，舉例來說，藉以延緩或預防復發。

「病狀」(condition)、「疾病」(disease)及「病症」(disorder)可互換使用。

本發明化合物之「有效量」(effective amount)是指足以產生所欲生物反應(亦即治療病狀(治療性或預防性))的劑量。如本領域中具有通常知識者所知，本發明化合物之有效量可依據例如所欲生理終點、化合物的藥物動力學、欲治療的病狀、投藥模式、及個體的年齡及健康狀況等因素作變化。在某些實施方式中，有效量是指治療有效量。在某些實施方式中，有效量是指預防性治療。在某些實施方式中，有效量是指單一劑量之本發明化合物的劑量。在某些實施方式中，有效量是多劑量之本發明化合物的合併劑量。

本發明化合物之「治療有效量」(therapeutically effective amount)是指在治療病狀時，或使該病狀相關之一或多種病徵延緩、降至最小或消除時，足以產生治療效益的劑量。化合物之治療有效量是指單獨或與其他治療併用而於治療病狀中產生治療效益之治療藥劑的劑量。「治療有效量」一詞可包含能夠改善整體治療、減少或避免該病狀之病徵、徵兆或病因，及/或提高另一治療藥劑之治療功效的劑量。

本發明化合物之「預防有效量」(prophylactically effective amount)是指足以預防一病狀、一或多種與該病狀相關之病徵或預防其復發的劑量。化合物之預防有效量意指單獨或與其他藥劑併用而於預防病狀中產生預防效益之治療藥劑的劑量。「預防有效量」一詞可包含能夠改善整體預防或提高另一預防藥劑之預防功效的劑量。

本發明提供用於治療給藥之多種製劑的示例性抗癌藥劑。於一態樣中，該藥劑透過與合適之醫學上可接受的載體或稀釋劑組合而配製成醫藥組成物，其配製成固體、半固體、液體或氣體形式之製劑，例如錠、膠囊、粉末、顆粒、軟膏、溶液，栓劑、注射劑、吸入劑、凝膠，微球(microsphere)及氣霧劑。藉此，可透過各種方式來達成投藥。在某些製劑中，藥劑在給藥後是全身性的；在其它製劑中，藥劑透過劑型而局部化，例如使用植入劑以將活性劑量保持在植入部位。

如本文所用，「測定」、「評估」、「分析」、「測量」及「檢測」等詞是指定量及定性測定，因此，術語「測定」一詞在本文中可與「分析」、「測量」及其類似者互換使用。在欲進行定量測定時，則使用「測定數量」其 其類似描述來表達。在欲進行定性或定量測定時，則使用「測定量」或「檢測量」來表達。

「增殖性疾病」(proliferative disease)是指由細胞增殖異常或擴增所造成的疾病(Walker,Cambridge Dictionary of Biology；Cambridge University Press：Cambridge,UK,1990)。增殖性疾病可與以下因素相關：1)正常靜止細胞的病理性增殖；2)細胞由其正常位置病理性轉移(例如，增殖細胞的轉移)；3)諸如基質金屬蛋白酶(例如，膠原酶、明膠酶及彈性蛋白酶)之蛋白水解酶的病理性表現；或4)增殖性視網膜病變及腫瘤轉移的病理性血管新生。示例性增殖性疾病包含癌症(即，惡性腫瘤)、良性腫瘤、血管新生、發炎性疾病及自體免疫疾病。

「癌症」(cancer)一詞是指由異常細胞所導致的疾病，其中該異常細胞不受控制地增生，且具有侵襲及破壞正常身體組織的能力。例如可參見，《Stedman’s Medical Dictionary,25th ed.；Hensyl ed.；Williams & Wilkins：Philadelphia,1990》。示例性的癌症包含，但不限於，血液惡性腫瘤。其他示例性癌症包含，但不限於，肺癌(例如，支氣管癌、小細胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)、非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、肺腺癌)、腎臟癌(例如，腎母細胞瘤、威爾姆氏(a.k.a.Wilms)腫瘤、腎細胞癌)、聽神經瘤、腺癌、腎上腺癌、肛門癌、血管肉瘤(例***內瘤、***內皮肉瘤、血液性肉瘤)、闌尾癌、良性單克隆丙種球蛋白病(benign monoclonal gammopathy)、膽道癌(例如，膽管癌)、膀胱癌、乳癌(例如，乳腺癌(adenocarcinoma of the breast)、乳突癌、乳腺癌(mammary cancer)、***髓樣癌(medullary carcinoma of the breast))、腦癌(例如，腦膜瘤、神經膠質母細胞瘤、神經膠質瘤(例如，星狀細胞瘤、寡樹突神經膠細胞瘤、神經管胚細胞瘤)、支氣管癌、類癌、子宮頸癌(例如子宮頸腺 癌)、絨毛膜癌、脊索瘤、顱咽管瘤、大腸直腸癌(例如，大腸癌、直腸癌、大腸直腸腺癌)、結締組織癌、上皮細胞癌、室管膜瘤、內皮肉瘤(例如，卡波西氏肉瘤、多特發性出血性肉瘤)、子宮內膜癌(例如，子宮癌、子宮肌瘤)、食道癌(例如，食道腺癌、巴雷特腺癌)、伊文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、眼癌(例如，眼內黑色素瘤、視網膜母細胞瘤)、熟悉嗜伊紅性白血球增高(familiar hypereosinophilia)、膽囊癌、胃癌(例如，胃腺癌)、胃腸道基質瘤(GIST)、生殖細胞癌、頭頸部癌(例如，頭頸部鱗狀細胞癌、口腔癌(例如，口腔鱗狀細胞癌)、咽喉癌(例如，喉癌、咽癌、鼻咽癌、口咽癌))、重鏈病(例如，α-鏈病、γ-鏈病、μ-鏈病)、血管母細胞瘤、舌下癌、炎性肌纖維母腫瘤、免疫細胞性澱粉樣變性、肝癌(例如，肝細胞癌(HCC)、惡性肝腫瘤)、平滑肌肉瘤(LMS)、肥大細胞增多症(例如，系統性肥大細胞增多症)、肌肉癌、骨髓增生異常綜合症(MDS)、間皮瘤、骨髓增殖性疾病(MPD)(例如，真性紅細胞增多症(PV)、原發性血小板增多症(ET)、特發性骨髓性增生(AMM)、骨髓纖維化(MF)、慢性特發性骨髓纖維化、慢性粒細胞白血病(CML)、慢性中性粒細胞白血病(CNL)、增多綜合症(HES))、神經母細胞瘤、神經纖維瘤(例如，第1型或第2型神經纖維瘤(NF)、許旺氏細胞瘤)、神經內分泌癌(例如，胃腸胰神經內分泌腫瘤(GEP-NET)、類癌症候群)、骨肉瘤(例如，骨癌)、卵巢癌(例如，囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)、乳突狀腺癌、胰臟癌(例如，胰臟腺癌、導管內乳頭狀黏液瘤(IPMN)、胰島細胞瘤)、陰莖癌(例如，陰莖和陰囊之佩吉特氏病)、松果體瘤、原始神經外胚層腫瘤(PNT)、漿細胞瘤、腫瘤相關症候群、上皮內增殖、***癌(例如攝護腺癌)、直腸癌、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌(例如，鱗狀細胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底細胞癌(BCC))、小腸癌(例如，闌尾癌)、軟組織肉瘤(例如，惡 性纖維組織細胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、惡性神經鞘瘤(MPNST)、軟骨肉瘤、纖維肉瘤、黏液肉瘤)、皮脂腺癌、小腸癌、汗腺癌、滑液膜瘤、睾丸癌(例如，精原細胞瘤、睾丸胚胎癌)、甲狀腺癌(例如，甲狀腺乳突狀癌(papillary carcinoma of the thyroid)、甲狀腺乳突癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)、甲狀腺髓樣癌)、尿道癌、***癌及外陰癌(例如，外陰之佩吉特氏病(Paget’s disease of the vulva))。

術語「麩丙酮酸轉胺酶(alanine aminotransferase)」與「ALT」可互換使用。術語「天門冬胺酸胺基轉移酶(aspartate transaminase)」與「AST」可互換使用。術語「Bcl-2-性關聯蛋白(Bcl-2-associated X protein)」與「BAX」可互換使用。術語「BUN」是指血液中尿素氮；術語「CBSI」是指秋水仙素結合位點抑制劑；術語「Cre」是指肌酸酐(creatinine)。術語「Cyto.C」是指細胞色素C；術語「DAPI」是指4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)。術語「GAPDH」是指甘油醛-3-磷酸脫氫酶；術語「HFB」是指人纖維母細胞；術語「NBE」是指人正常支氣管上皮細胞。術語「NSCLC」是指非小細胞肺癌；術語「MDR」是指多重抗藥性；術語「Mito」是指粒線體；術語「MTCO1」指粒線體性編碼細胞色素c氧化酶I(Mitochondrially Encoded Cytochrome C Oxidase I.)。術語「MTS」指3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑鎓(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium)；術語「PARP」是指聚[ADP-核醣]聚合酶；術語「P-gp」是指P-醣蛋白；術語「p-HH3」是指磷酸化組織蛋白H3；「PI」一詞是指碘化丙啶。術語「RF」是指抗藥因子；術語「RU」是指共振單元；術語「SPR」是指表面電漿共振。術語「TNBC」是指三陰性乳癌；術語「TKI」是指酪胺酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitor)；術語「TUNEL」是指末端脫氧核苷酸轉移 酶脫氧尿苷三磷酸切口末端標記(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)。

術語「抗微管藥物(microtubule-targeting agent)」或「MTA」是指靶向並干擾癌細胞微管、調節癌細胞微管之動力學、並因而導致有絲***停滯及隨後細胞凋亡之藥物。示例性抗微管藥物包括，但不限於，微管穩定劑(MSA)及去穩定劑(MDA)。示例性微管穩定劑包括，但不限於，紫杉醇及長春花生物鹼。

本文闡述本發明一或多個實施例的細節。根據詳細描述、實施例及申請專利範圍，本發明之其他特徵、目的及優點將顯而易見。

圖1A至1F呈現示例性化合物AS1712在體外及體內抑制癌細胞增殖：(圖1A)示例性化合物AS1712對不同非小細胞肺癌及正常肺細胞株的細胞毒性作用(用示例性化合物AS1712處理細胞72小時，並透過MTS分析檢測細胞存活率；數據為三個測值的平均值)；(圖1B及1C)用AS1712(12.5-200nM)處理CL1-0細胞14天(固定菌落，用結晶紫染色，接著計數；數據為平均值±SD；* p<0.05)；(圖1D及1E)用AS1712(12.5-200nM)處理H1975細胞14天(固定菌落，用結晶紫染色，接著計數；數據為平均值±SD；* p<0.05)；及(圖1F)皮下注射H1975細胞(2×10⁶)至BALB/c裸鼠中(小鼠用DMSO或4或8mg/kg的AS1712進行每週一次的腹膜內注射，連續25天；在每次注射之前測量腫瘤體積；數據是平均值±SEM；* p<0.05)。

圖2A至2D呈現用示例性化合物AS1712(4或8mg/kg)處理以抑制H1975異位移植腫瘤生長(數據是平均值±SEM，* p<0.05)：腫瘤影像(圖2A)；腫瘤重量(圖2B)；犧牲後之代表性蘇木紫-伊紅(H&E)染色切片(圖2C)；及體重(圖2D)。

圖3呈現用指定濃度的示例性化合物AS1712處理CL1-0、H1975及HFB細胞24-72小時後評估促凋亡蛋白表達程度。

圖4A至4F呈現示例性化合物AS1712誘導CL1-0及H1975肺癌細胞株之凋亡及細胞週期停滯(用指定濃度的AS1712處理細胞24小時)：(圖4A)以免疫墨點法檢測促凋亡蛋白表達；(圖4B)評估細胞質及粒線體中之細胞色素c的量；(圖4C)用碘化丙啶染色細胞，以流式細胞儀測定其DNA含量；(圖4D)蛋白質進行免疫墨點法，以檢測其表達量；(圖4E)透過p-HH3染色對細胞進行高通量細胞影像分析，以計算有絲***細胞的比例(數據為平均值±SD；* p<0.05)；(圖4F)用AS1712處理細胞6小時，以透過α-微管蛋白染色(綠色)觀察紡錘絲組織，其中透過共聚焦雷射顯微鏡檢測免疫螢光，並透過DAPI染色(藍色)檢測細胞核。

圖5A至5C呈現檢測AS1712-處理-HFB細胞的凋亡途徑指標(圖5A)、來自粒線體的細胞色素c(圖5B)及細胞週期調節(圖5C)。

圖6A至6E呈現示例性化合物AS1712抑制微管聚合：(圖6A)以α-微管蛋白染色(綠色)檢測微管網絡之前，將細胞與AS1712培養6小時，其中透過DAPI染色(藍色)檢測細胞核)；(圖6B)將細胞與DMSO、AS1712、太平洋紫杉醇或諾考達唑培養6小時，接著收集並分離為可溶(微管蛋白單體)及未溶(微管蛋白聚合物)收集層，其中透過免疫墨點法檢測α-微管蛋白的含量；(圖6C)基於免疫螢光之微管聚合測定法：在低溫暴露30分鐘後，用40nM AS1712處理H1975細胞 1小時，接著在37℃下培養達指定時間；(圖6D)將純化的豬微管蛋白及GTP於37°C下與5μM AS1712、5μM太平洋紫杉醇、5μM敏克瘤、5μM諾考達唑或DMSO(控制組)培養，其透過監測A340，每分鐘評估微管聚合達1小時；(圖6E)純化的中心體先與AS1712培養接著再與微管蛋白培養，其中形成之微管星體用單克隆抗-α-微管蛋白(綠色)染色，測量纖維長度(每組n=20星體)，且數據為平均值±SD。

圖7呈現用40nM AS1712處理6小時後之HFB細胞中的微管網絡。

圖8A至8G呈現示例性化合物RJ-LC-15-8透過干擾微管聚合以抑制腫瘤進展：觀察指定蛋白質表達之前，用RJ-LC-15-8處理H1975細胞24小時(圖8A)；用25nM RJ-LC-15-8處理6小時後之H1975細胞中的微管網絡(圖8B)；純化的微管蛋白與GTP用僅含緩衝液(控制組)、5μM RJ-LC-15-8、5μM太平洋紫杉醇、5μM敏克瘤或5μM諾考達唑之反應混合物培養，其中每分鐘監測微管聚合達1小時(圖8C)；每週3次腹膜內注射DMSO或RJ-LC-15-8(4或8mg/kg)，以處理H1975異位移植腫瘤達21天：腫瘤體積(圖8D)、體重(圖8E)，其中數據是平均值±SEM；每週3次腹膜內注射DMSO或RJ-LC-15-8(4或8mg/kg)，以處理MDA-MB-231異位移植腫瘤達35天：腫瘤體積(圖8F)及體重(圖8G)，其中數據是平均值±SEM。

圖9A至9H呈現示例性化合物AS1712與β-微管蛋白的秋水仙素結合袋點結合：(圖9A)將H1975細胞裂解物與磁珠-控制組或磁珠-AS1712培養過夜，並透過免疫墨點法檢測沉澱的蛋白質；(圖9B)透過表面電漿共振測量AS1712對微管蛋白之結合親和力；(圖9C和9D)將微管蛋白(1mg/mL)與100μM諾考達唑、敏克瘤、AS1712或DMSO(控制組)於30℃下培養30分鐘，接著在冰上對樣本 進行胰蛋白酶消化10分鐘，其中胰蛋白酶水解產物αN、αC及β-col的位置顯示在凝膠右側，數據為平均值±SD；(圖9E)秋水仙素競爭測定：AS1712及諾考達唑降低秋水仙素-微管蛋白複合物的螢光，其中數據為平均值±SD；(圖9F)嵌合的AS1712-微管蛋白(橙色)與秋水仙素-微管蛋白複合物(紫色)重疊；(圖9G)微管蛋白異質雙體與AS1712之間的相互作用；(圖9H)AS1712與微管蛋白-殘基相互作用的示意圖。

圖10A至10E呈現RJ-LC-15-8在不干擾P-gp的情況下抑制KBtax腫瘤生長並誘導細胞凋亡：(圖10A)將KBtax(1×10⁷)細胞皮下注射至BALB/c裸鼠，對小鼠進行每週3次腹膜內注射DMSO、太平洋紫杉醇(15mg/kg)或RJ-LC-15-8(8mg/kg)之處理達21天，每次處理前測量腫瘤體積，其中數據為平均值±SEM；(圖10B)用蘇木紫-伊紅(H&E)對腫瘤切片進行組織學染色，並透過TUNEL染色測定細胞凋亡狀態；(圖10C)P-gp泵送活性之羅丹明排出(rhodamine efflux)分析；(圖10D)用指定濃度的RJ-LC-15-8處理KBtax細胞樣本24小時，接著收集以評估指定蛋白質的表達；(圖10E)用30nM RJ-LC-15-8處理6小時後之KBtax細胞中的微管網絡及紡錘絲組織。

圖11A至圖11B呈現用DMSO、太平洋紫杉醇或RJ-LC-15-8處理帶有KBtax異位移植腫瘤的小鼠：腫瘤重量(圖11A)及體重(圖11B)，其中數據為平均值±SEM；* p<0.05。

本發明提供4(1H)-喹諾酮衍生物，用於治療目標增殖性疾病，例如癌症，包括例如肺癌、乳腺癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌，頭頸 癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，對與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之多種藥物有抗性之癌症))。本文所述之癌症可能對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性。本文所述之化合物可用於治療、延緩及/或預防增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，對與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))、及/或抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及/或誘導組織、生物樣本或個體對多種藥物具抗性之癌細胞的凋亡。本發明亦提供醫藥組成物、套組及使用該等化合物以抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及/或誘導組織、生物樣本或所需個體對多種藥物具抗性之癌細胞凋亡、及用以治療本文所述任一目標增殖性疾病之方法。

化合物

於一態樣中，揭露式(I)化合物：

或其醫藥上可接受之鹽，其中：R¹、R²、R³、R⁴、m、n及p如本文所述。於某些實施例中，本文所述之化合物如式(I)所示：

，或其醫藥上可接受之鹽。於某些實施例中，該 醫藥上可接受之鹽為MsOH之鹽。於某些實施例中，該醫藥上可接受之鹽為CH₃SO₂OH之鹽。

於某些實施例中，式(I)化合物如式(IA)、(IB)或(IC)所示：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中R¹、R²、R³、R⁴、m及p如本文所述。

於一些實施例中，式(I)包括0或更多取代基R¹。於一些實施例中，式(I)包括0個取代基R¹。於一些實施例中，式(I)包括一或多個取代基R¹。於某些實施例中，m為0。於某些實施例中，m為1。於某些實施例中，m為2。於某些實施例中，m為3。於某些實施例中，m為4。於某些實施例中，m為5。於某些實施例中，n為4。於某些實施例中，至少一R¹為鹵素(例如F、Cl、Br、或I)。於某些 實施例中，至少一R¹為溴。於某些實施例中，至少一R¹為氟。於某些實施例中，至少一R¹為氯。於某些實施例中，至少一R¹為碘。

於某些實施例中，至少一R¹為-C(=O)(視情況經取代烷基)(例如，-C(=O)(視情況經取代C_1-6烷基))。於某些實施例中，至少一R¹為視情況經取代烷基(例如，視情況經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R¹為視情況經取代C_1-6烷基(例如，視情況經取代甲基、乙基或丙基)。於某些實施例中，至少一R¹為視情況經鹵素取代之烷基。於某些實施例中，至少一R¹為視情況經鹵素取代之C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R¹為-CF₃。

於某些實施例中，至少一R¹為視情況經取代烯基(例如，視情況經取代C₂-C₆烯基)。於某些實施例中，至少一R¹為視情況經取代炔基(例如，視情況經取代C₂-C₁₀炔基)。於某些實施例中，至少一R¹可為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，至少一R¹可為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R¹可為視情況經取代芳基(例如，苯基或苄基)。於一些實施例中，至少一R¹可為視情況經取代雜芳基(例如，5-至7-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或視情況經取代8-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R¹可為-CN。於某些實施例中，至少一R¹為-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，且R^D1如本文所定義。於一些實施例中，至少一R¹可為-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，其中R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳 環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、氮保護基；或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環。於一些實施例中，至少一R¹可為-OR^D1(例如，-OH或-OMe)。於一些實施例中，至少一R¹可為-OR^D1，且R^D1為氫或視情況經取代烷基。於一些實施例中，至少一R¹為-OH、-OMe、或

。於一些實施例中，至少一R¹為-OH。於一些實施例中，至少一R¹為-O(視情況經取代烷基)(例如，-O(視情況經取代C_1-6烷基))。於某些實施例中，至少一R¹為-O(視情況經取代C_1-6烷基)(例如，-O(視情況經取代甲基)、-O(視情況經取代乙基)、或-O(視情況經取代丙基))。於某些實施例中，至少一R¹為-OMe。於某些實施例中，至少一R¹為-O(CH₂)_y(R^1a)，其中y為1、2、3、4、5、或6；且R^1a為鹵素、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、或視情況經取代雜芳基。於某些實施例中，至少一R¹為-O(CH₂)_y(R^1a)，其中y為1、2、3、或4；且R^1a為鹵素、視情況經取代烯基、或視情況經取代炔基。於一些實施例中，至少一R¹為

。於某些實施例中，至少一R¹為-O(視情況經炔基取代之烷基)。於某些實施例中，至少一R¹為-O(視情況經炔基取代之C_1-6烷基)。於一些實施例中，至少一R¹可為-N(R^D1a)₂(例如，-NH₂或-NMe₂)。於一些實施例中，至少一R¹可為-SR^D1(例如，-SH或-SMe)。

於某些實施例中，R^D1為氫。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代醯基(例如，-C(=O)Me)。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代烷基(例如，經取代或未經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，R^D1為經取代或未經取代甲基。於某些實施例中，R^D1為經取代或未經取代乙基。於某些實施例中，R^D1為經取代或未經取代丙基。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代烯基(例如，經取代或未經取代C_2-6烯基)。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代炔基(例如，經取代或未經取代C_2-6炔基)。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，至少一R^D1為視情況經取代芳基(例如，經取代或未經取代之6-至10-員芳基)。於某些實施例中，R^D1為苄基。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代苯基。於某些實施例中，R^D1為視情況經取代雜芳基(例如，5-至6-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或經取代或未經取代9-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，R^D1當接至氧原子時為氧保護基。於某些實施例中，R^D1當接至硫原子時為硫保護基。

於某些實施例中，至少一R^D1a為氫。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代醯基(例如，-C(=O)Me)。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代烷基(例如，經取代或未經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R^D1a為經取代或未經取代甲基。於某些實施例中，至少一R^D1a為經取代或未經取代乙基。於某些實施例中，至少一R^D1a為經取代或未經取代丙基。於某些實施例中， 至少一R^D1a為視情況經取代烯基(例如，經取代或未經取代C_2-6烯基)。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代炔基(例如，經取代或未經取代C_2-6炔基)。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代芳基(例如，經取代或未經取代之6-至10-員芳基)。於某些實施例中，至少一R^D1a為苄基。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代苯基。於某些實施例中，至少一R^D1a為視情況經取代雜芳基(例如，5-至6-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或經取代或未經取代9-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，至少一R^D1a為氮保護基(例如，苄基(benzyl,Bn)、第三丁氧羰基(t-butyl carbonate,BOC或Boc)、胺基甲酸芐酯(benzyl carbamate,Cbz)、9-芴甲氧羰基(9-fluorenylmethyl carbonate,Fmoc)、三氟乙醯基(trifluoroacetyl)、三苯甲基(triphenylmethyl)、乙醯基(acetyl)、對-甲苯磺醯胺(p-toluenesulfonamide,Ts))。於某些實施例中，兩個R^D1a與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)、或經取代或未經取代之雜芳環(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環雜芳基，其中於雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或經取代或未經取代9-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。

於一些實施例中，式(I)包括0或更多取代基R²。於一些實施例中，式(I)包括0個取代基R²。於一些實施例中，式(I)包括一或多個取代基R²。於某些實施例中，n為0。於某些實施例中，n為1。於某些實施例中，n為2。於某些實施例中，n為3。於某些實施例中，n為4。於某些實施例中，至少一R²為鹵素(例如F、Cl、Br、或I)。

於某些實施例中，至少一R²為視情況經取代醯基(例如，-C(=O)(烷基))。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、或-(CH₂)_xOR^2a，且x為0、1、2、3、4、5或6；R^2a為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氧保護基；每一R^2b為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基。於某些實施例中，x為0。於某些實施例中，x為1。於某些實施例中，x為2。於某些實施例中，x為3。於某些實施例中，x為4。於某些實施例中，x為5。於某些實施例中，x為6。於某些實施例中，R^2a為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氧保護基(例如，甲基、甲氧基甲基(methoxylmethyl,MOM)、三甲基矽基(trimethylsilyl,TMS)、三乙基矽基(triethylsilyl,TES)、三異丙基矽基(triisopropylsilyl,TIPS)、二甲基異丙基矽基(dimethylisopropylsilyl,IPDMS)、二乙基異丙基矽基(diethylisopropylsilyl,DEIPS)、二甲基叔己基矽基(dimethylthexylsilyl)、叔丁基二甲基矽基(t-butyldimethylsilyl,TBDMS)、叔丁基二苯基矽基(t-butyldiphenylsilyl,TBDPS)、 甲磺酸酯(methanesulfonate,mesylate)、苄基磺酸酯(benzylsulfonate)、或甲苯磺醯基(tosylate,Ts))。

於某些實施例中，R^2a為氫。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代烷基(例如，經取代或未經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代烯基(例如，經取代或未經取代C_2-6烯基)。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代炔基(例如，經取代或未經取代C_2-6炔基)。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代芳基(例如，經取代或未經取代之6-至10-員芳基)。於某些實施例中，R^2a為苄基。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代苯基。於某些實施例中，R^2a為視情況經取代雜芳基(例如，5-至6-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或經取代或未經取代9-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，R^2a為氧保護基(例如，甲基、甲氧基甲基(methoxylmethyl,MOM)、三甲基矽基(trimethylsilyl,TMS)、三乙基矽基(triethylsilyl,TES)、三異丙基矽基(triisopropylsilyl,TIPS)、二甲基異丙基矽基(dimethylisopropylsilyl,IPDMS)、二乙基異丙基矽基(diethylisopropylsilyl,DEIPS)、二甲基叔己基矽基(dimethylthexylsilyl)、叔丁基二甲基矽基(t-butyldimethylsilyl,TBDMS)、叔丁基二苯基矽基(t-butyldiphenylsilyl,TBDPS)、甲磺酸酯(methanesulfonate,mesylate)、苄基磺酸酯(benzylsulfonate)、或甲苯磺醯基(tosylate,Ts))。於某些實施例中，至少一R^2b為氫。於某些實施例中，至少一 R^2b為視情況經取代烷基(例如，經取代或未經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代烯基(例如，經取代或未經取代C_2-6烯基)。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代炔基(例如，經取代或未經取代C_2-6炔基)。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代芳基(例如，經取代或未經取代之6-至10-員芳基)。於某些實施例中，至少一R^2b為苄基。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代苯基。於某些實施例中，至少一R^2b為視情況經取代雜芳基(例如，5-至6-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或經取代或未經取代9-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於某些實施例中，至少一R^2b為氮保護基(例如，苄基(benzyl,Bn)、第三丁氧羰基(t-butyl carbonate,BOC或Boc)、胺基甲酸芐酯(benzyl carbamate,Cbz)、9-芴甲氧羰基(9-fluorenylmethyl carbonate,Fmoc)、三氟乙醯基(trifluoroacetyl)、三苯甲基(triphenylmethyl)、乙醯基(acetyl)、對-甲苯磺醯胺(p-toluenesulfonamide,Ts))。

於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OR^2a，且R^2a為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、或視情況經取代炔基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OR^2a，且R^2a為氫或視情況經取代之C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OH、-C(=O)OMe、-C(=O)OEt、-C(=O)O(iPr)、-C(=O)(OCH₂CH₂)₃OH、或-C(=O)(OCH₂CH₂)₄OH。於某些實施例中，至少一R² 為-C(=O)OH。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(未經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OMe。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)OEt。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(正丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(異丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(正丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)O(戊基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)(OCH₂CH₂)_zO(R^2c)，其中z為1、2、3、4、5、或6，且R^2c為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、或視情況經取代炔基。於某些實施例中，z為1。於某些實施例中，z為2。於某些實施例中，z為3。於某些實施例中，z為4。於某些實施例中，z為5。於某些實施例中，z為6。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)(OCH₂CH₂)_zO(R^2c)，其中z為2、3、4、5、或6，且R^2c為氫或視情況經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)(OCH₂CH₂)₃-OH。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)(OCH₂CH₂)₄OH。

於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)N(R^2b)₂，且每一R^2b獨自為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、或視情況經取代炔基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(R^2b)，且R^2b為視情況經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(R^2b)，且R^2b為未經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(Me)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(Et)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(正丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(異丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(正丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-C(=O)NH(戊基)。

於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)_xOR^2a，且x為1、2、3、4、或5，且R^2a為視情況經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)_xOR^2a，x為1、2、3、4、或5，且R^2a為未經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)OMe。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)OEt。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(正丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(異丙基)。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(正丁基)。於某些實施例中，至少一R²為-(CH₂)O(戊基)。

於某些實施例中，至少一R²為視情況經取代烷基(例如，視情況經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R²為視情況經取代C_1-6烷基(例如，視情況經取代之甲基、乙基、或丙基)。於某些實施例中，至少一R²為視情況經取代烯基(例如，視情況經取代C₂-C₆烯基)。於某些實施例中，至少一R²為視情況經取代炔基(例如，視情況經取代C₂-C₁₀炔基(例如，視情況經取代丙炔基或丁炔基))。於某些實施例中，至少一R²可為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於一些實施例中，至少一R²可為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R²可為視情況經取代芳基(例如，苯基或苄基)。於一些實施例中，至少一R²可為視情況經取代雜芳基(例如，5-至7-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或視情況經取代8-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R²可為-CN。於某些實施例中，至少一R²為 -OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，且R^D1如本文所定義。於一些實施例中，至少一R²可為-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，其中R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基；或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環。於一些實施例中，至少一R²可為-OR^D1(例如，-OH或-OMe)。於一些實施例中，至少一R²可為-N(R^D1a)₂(例如，-NH₂或-NMe₂)。於一些實施例中，至少一R²可為-SR^D1(例如，-SH或-SMe)。

式(I)包括取代基R³。於一些實施例中，R³為氫。於一些實施例中，R³為視情況經取代烷基。於一些實施例中，R³為視情況經取代C_1-6烷基。於某些實施例中，R³為視情況經鹵素(例如，F、Cl、Br、或I)取代之C₁-C₆烷基。於一些實施例中，R³為未經取代烷基。於一些實施例中，R³為未經取代C₁-C₆烷基(例如，未經取代甲基、未經取代乙基、未經取代丙基、未經取代丁基)。於某些實施例中，R³為未經取代甲基。於某些實施例中，R³為未經取代乙基。於一些實施例中，R³為氮保護基(例如，苄基(benzyl,Bn)、第三丁氧羰基(t-butyl carbonate,BOC或Boc)、胺基甲酸芐酯(benzyl carbamate,Cbz)、9-芴甲氧羰基(9-fluorenylmethyl carbonate,Fmoc)、三氟乙醯基(trifluoroacetyl)、三苯甲基(triphenylmethyl)、乙醯基(acetyl)、對-甲苯磺醯胺(p-toluenesulfonamide,Ts))。

於一些實施例中，式(I)包括0或更多取代基R⁴。於一些實施例中，式(I)包括0個取代基R⁴。於一些實施例中，式(I)包括一或多個取代基R⁴。於某些實施例中，p為0。於某些實施例中，p為1。於某些實施例中，至少一R⁴鹵素(例如F、Cl、Br、或I)。於某些實施例中，至少一R⁴為視情況取代醯基(例如，-C(=O)(烷基))。

於某些實施例中，至少一R⁴為視情況經取代烷基(例如，視情況經取代C_1-6烷基)。於某些實施例中，至少一R⁴為視情況經取代C_1-6烷基(例如，視情況經取代甲基、乙基或丙基)。於某些實施例中，至少一R⁴為視情況經鹵素取代烯基(例如，視情況經取代C₂-C₆烯基)。於某些實施例中，至少一R⁴為視情況經取代炔基(例如，視情況經取代C₂-C₁₀炔基(例如，經取代丙炔基或丁炔基))。於某些實施例中，至少一R⁴可為視情況經取代碳環基(例如，經取代或未經取代之3-至7-員單環碳環基，其於碳環之環系統中包含0、一或兩個雙鍵)。於某些實施例中，至少一R⁴可為視情況經取代雜環基(例如，經取代或未經取代之5-至10-員單環或雙環雜環，其中於雜環中之一或兩原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R⁴可為視情況經取代芳基(例如，苯基或苄基)。I於一些實施例中，至少一R⁴可為視情況經取代雜芳基(例如，5-至7-員單環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫；或視情況經取代8-至10-員雙環雜芳基，其中雜芳環系統中之一、二、三或四個原子獨自為氮、氧或硫)。於一些實施例中，至少一R⁴可為-CN。於某些實施例中，至少一R⁴為-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，且R^D1如本文所定義。於一些實施例中，至少一R⁴可為-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1，其中R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜 環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、氮保護基；或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環。於一些實施例中，至少一R⁴可為-OR^D1(例如，-OH或-OMe)。於一些實施例中，至少一R⁴可為-N(R^D1a)₂(例如，-NH₂或-NMe₂)。於一些實施例中，至少一R⁴可為-SR^D1(例如，-SH或-SMe)。

於一些實施例，本文所述之化合物如式(I)所示：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中：

每一R¹獨自為鹵素、-C(=O)(視情況經取代烷基)、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

每一R²獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜 環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂,、或-SR^D1；

R³為氫、視情況經取代烷基、或氮保護基；

每一R⁴獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；

每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基、或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環；

m為0、1、2、3、4、或5；

n為0、1、2、3、或4；且

p為0或1。

於一些實施例中，m與n中至少一者不為0。

於一些實施例中，式(I)化合物可為下式之一者：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。

於一些實施例中，式(I)化合物可為下式之一者：：

或其醫藥上可接受之鹽。

本文提供式(I)之示例性化合物。於一些實施例中，式(I)化合物為任一實施例1-2之化合物。於一些實施例中，式(I)化合物為表3之化合物。於一些實施例中，式(I)化合物為表7之化合物。於一些實施例中，式(I)化合物可為下式之一者：

或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。

於一些實施例中，式(I)化合物可為下式之一者：

或其醫藥上可接受之鹽。

於一些實施例中，式(I)化合物可為下式之一者：

可使用本領域已知的方法從容易獲得的起始原料製備本文所述之化合物。應當理解，在提供一般或較佳之製程條件(即反應溫度、時間、反應物的莫耳比、溶劑及壓力等)之情況下，除非另有說明，否則亦可使用其他製程條件。最佳反應條件可依所使用之特定反應物或溶劑而變化，但此等條件可由本領域技術人員透過常規最佳化程序來確定。以下合成途徑中所使用之化學物質可包括，例如溶劑、試劑、催化劑、保護基及去保護基試劑。下文描述之方法亦可在本文具體描述的步驟之前或之後，額外包括添加或去除合適保護基之步驟，以使化合物最終得以合成。此外，可以交替的順序或次序進行各種合成步驟，以得到所欲化合物。用於合成適用化合物之合成化學轉化及保護基方法(保護及去保護)為本領域所知悉，其包括例如《R.Larock,Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers(1989)；T.W.Greene and P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,3^rd Ed.,John Wiley and Sons(1999)；L.Fieser and M.Fieser,Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1994)；及L.Paquette,ed.,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1995)》及其後續版中所載。

本文提供之式(I)化合物可使用以下一般方法及步驟從容易獲得的起始原料製備。以下實施例部分提供用於合成本文所述化合物之示例性示意圖。在提供一般或較佳製程條件(即反應溫度、時間、反應物的莫耳比、溶劑、壓力等)情況下，除非另有說明，否則亦可使用其他製程條件。最佳反應條件可 依所使用之特定反應物或溶劑而變化，但此等條件可由本領域技術人員透過常規最佳化程序來確定。

醫藥組成物及套組

本發明提供醫藥組成物，其包括本文所述之化合物或或其醫藥上可接受之鹽以及視情況包括醫藥上可接受之賦形劑。於某些實施例中，本文所述之醫藥組成物包括本文所述之化合物或或其醫藥上可接受之鹽、以及視醫藥上可接受之賦形劑。本文所述之醫藥組成物可用於治療目標疾病，例如增殖性疾病，如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。本文所述之醫藥組成物可用於治療、延緩及/或預防增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))、及/或抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及因而誘導組織、生物樣本或個體對多種藥物具抗性之癌細胞的凋亡。

於某些實施例中，本文所治療之個體為動物。該動物可以是任何性別，且亦可處於任何發育階段。於某些實施例中，該個體為人。於某些實施例中，該個體為哺乳動物(例如，非人類哺乳動物)。於某些實施例中，該個體為馴養動物，例如狗、貓、牛、豬、馬、綿羊或山羊。於某些實施例中，該個體 為伴生動物，例如狗或貓。於某些實施例中，該個體為家畜動物，例如牛、豬、綿羊或山羊。於某些實施方式中，該個體為動物園動物。於另一實施例中，該個體為實驗動物，例如囓齒動物(例如，小鼠、大鼠)、狗、豬或非人類的靈長類動物。於某些實施方式中，該個體為基因改造動物。於某些實施例中，該個體為基因轉殖或基因改造動物(例如，基因轉殖小鼠或基因轉殖豬)。於某些實施例中，該個體患有或被疑似患有增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。

於某些實施例中，與有效量之本文所述化合物或醫藥組成物接觸的細胞是位於體外。於某些實施例中，接觸的細胞是位於活體外。於某些實施例中，本文所述之細胞是位於體內。

於某些實施例中，本文所述之化合物係以有效量提供於醫藥組成物中。於某些實施例中，該有效量為醫藥有效量(例如，有效治療增殖性疾病的量，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，所需個體中對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。於某些實施例中，該增殖性疾病為癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為三陰性 乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為頸部癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為非小細胞肺癌。

於某些實施例中，該有效量為預防有效量(例如，有效預防、延緩增殖性疾病的量，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。於某些實施例中，該有效量為醫藥有效量(例如，有效治療增殖性疾病的量，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症))。

於某些實施例中，該有效量為有效抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合的量。於某些實施例中，該有效量為有效結合所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之β-微管蛋白的量。於某些實施例中，該有效量為有效抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之微管組合的量。於某些實施例中，該有效量為有效誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡的量。於某些實施例中，該有效量為有效抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合，因而誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡的量。

本文所述之醫藥組成物可透過藥理學領域已知之任何方法製備。一般而言，此等製備方法包括使本文所述之化合物(即”活性成分”)與載體或賦形劑及/或一或多種其他輔助成分結合，接著，若必要及/或想要的話，將產品塑造及/或包裝為單一劑量或多劑量單位。

醫藥組成物可大量製備、包裝及/或販售為單一單位劑量及/或複數單一單位劑量。一「單位劑量」(unit dose)是指包含預定量之活性成分之醫藥組成物的個別量(discrete amount)。活性成分的量通常等於活性成分投予至個體的劑量，及/或此一劑量之方便等分量，例如此一劑量的二分之一或三分之一。

依據欲投予治療之個體的身分、體型及/或狀況，以及依據投予組成物之路徑，可調整醫藥組成物中活性成分、醫藥上可接受之賦形劑、及/或任何額外成分的相對量。組成物可包含介於0.1%至100%(w/w，重量比)之間的活性成分。

用以製備所提供之醫藥組成物之醫藥上可接受的賦形劑包含惰性稀釋劑、分散劑及/或粒化劑、界面活性劑及/或乳化劑、崩解劑、結合劑、防腐劑、緩衝劑、潤滑劑及/或油。例如哥脂及栓劑蠟之賦形劑、著色劑、包衣、甜味劑、調味劑及香味劑亦可存在於該組成物中。

用以口服及非口服投予之液體劑型包含醫藥上可接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除了活性成分，液體劑型亦可包含相關領域慣用之惰性稀釋劑，例如，水或其他溶劑、增溶劑及乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺、油(例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇、脫水山梨醇之脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀 釋劑，口服組成物可包含佐劑，例如潤濕劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑及香味劑。在某些非口服投予之實施方式中，其將本文所述之共軛物與增溶劑混合，例如Cremophor^®、酒精、油、改性油、二醇、聚山梨醇酯、環糊精、聚合物及其混合物。於某些實施例中，本發明之組成物被包覆於載體媒介物(carrier vehicle)中，該載體媒介物可以是剛性液胞(vesicle)、彈性液胞、單層液胞、多層液胞、微脂粒(liposomes)、非離子體(niosomes)，前非離子體(proniosomes)、傳遞體(transfersomes^®)、醇脂體(ethosomes)、L-595-PEG-8-L液胞、奈米乳劑、奈米微脂粒(nanosomes)、奈米顆粒或其組合。

可依據習知方法，利用適當的分散劑或潤濕劑及懸浮劑來製備注射劑，例如，無菌注射之水性或油質懸浮液。可利用無毒性之非口服可接受的稀釋劑或溶劑，將無菌注射劑製備為無菌的注射溶液、懸浮液或乳劑，舉例來說，1,3-丁二醇的溶液。可接受的載體及溶劑可以是水、林格氏液(Ringer’s solution,U.S.P.)、及等張氯化鈉溶液。此外，通常可以無菌之固定油作為溶劑或懸浮介質。據此，可使用任何溫和的固定油，包括合成單-或雙-甘油酯。此外，亦可使用脂肪酸(如油酸)以製備注射劑。

無菌注射劑型可藉由如下舉例來滅菌，利用細菌截留過濾器進行過濾，或於無菌固體組成物(其在使用前可溶解或懸浮於無菌水或其他無菌注射劑)中加入殺菌劑。

為了延長藥物的作用時間，通常希望可減緩經由皮下或肌肉注射之藥物的吸收。此可透過利用水溶性不佳之晶質或非晶形材料的液體懸浮液來達成。如此一來，藥物的吸收率將取決於其溶離率，而其溶離率則取決於結晶 的大小及晶形。或者，可將藥物溶解或懸浮於油性載體中，藉以減緩非口服投予藥物劑型的吸收。

用以直腸或***投予的組成物通常為栓劑，其可藉由混合本文所述之共軛物及適當之無刺激性賦形劑或載體(例如可哥脂、聚乙二醇或栓劑用蠟，其於常溫為固體，於體溫則為液體，因此可於直腸或***腔中融化並釋放活性成分)以製備該栓劑。

適用於口服投予的固體劑型包含膠囊、錠劑、丸劑、粉末及顆粒。固體劑型是將活性成分與至少一惰性、醫藥上可接受賦形劑或載體混合，例如檸檬酸鈉或磷酸氫鈣及/或(a)填充劑或持久劑(extender)，例如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及矽酸、(b)結合劑，舉例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖及***膠、(c)保濕劑，例如甘油、(d)崩解劑，例如洋菜、碳酸鈣、馬鈴薯或樹薯澱粉、海藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉、(e)溶液阻滯劑，例如石蠟、(f)吸收促進劑，例如季銨化合物、(g)潤濕劑，舉例如鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯、(h)吸收劑，例如高嶺土及皂土、以及(i)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉及其混合物。當為膠囊、錠劑及丸劑時，該劑型可包含緩衝劑。

相似類型的固體組成物可作為軟式及硬式填充明膠膠囊中的填充物，其係利用如乳糖及高分子量聚乙二醇及其類似物作為賦形劑。可用包衣(coating)及殼層(例如腸衣(enteric coating)及藥學領域習知之其他包衣)來製備錠劑、糖衣片、膠囊、丸劑及顆粒的固體劑型。其可視情況地包含乳濁劑(opacifying agent)，且可為僅於或較佳於消化道的某些部分釋放活性成分(視情況地以延緩方式釋放)之組成物。可使用之包覆組成物的示例包含聚合物質及蠟。相似類型的 固體組成物可作為軟式及硬式填充明膠膠囊中的填充物，其係利用如乳糖及高分子量聚乙二醇及其類似物之賦形劑。

活性成分可與一或多種上述賦形劑共同配製於微包覆劑型中。可以包衣及殼層(例如腸衣、控制釋放包衣及製藥領域習知之其他包衣)來製備錠劑、糖衣片、膠囊、丸劑及顆粒的固體劑型。固體劑型可將活性成分與至少一種諸如蔗糖、乳糖或澱粉等惰性稀釋劑混合。如一般製劑，該種劑型可包含惰性稀釋劑以外的其他物質，例如壓錠潤滑劑及諸如硬脂酸鎂及微晶質纖維素等其他壓錠輔助物質。若為膠囊、錠劑及丸劑，則該劑型可包含緩衝劑。其可視情況地包含乳濁劑，且可為僅於或較佳於消化道的某些部分釋放活性成分(視情況地以延緩方式釋放)之組成物。可使用之包覆劑的示例包含聚合物質及蠟。

用以局部及/或經皮投予本文所述化合物之劑型可包含，軟膏劑、糊劑、乳膏劑、洗劑、凝膠劑、粉劑、溶液、噴霧劑、吸入劑和/或貼劑。一般來說，活性成分係於無菌條件下與醫藥上可接受之載體或賦形劑及/或任何所需防腐劑及/或需要的緩衝劑混合。此外，本發明可使用經皮貼劑，其通常具有將活性成分可調控地遞送至個體的附加優勢。該種劑型可例如通過將活性成分溶解及/或分散於適當的介質中以進行製備。或者或此外，可藉由提供速率控制膜及/或將活性成分分散於聚合物基質及/或凝膠中以調控速率。

用於遞送本文所述之皮內醫藥組成物的合適裝置包括短針裝置。可藉由限制針進入皮膚之有效穿透長度的裝置來投予皮內組成物。或者或此外，可以常規注射器以慣常孟陀法(mantoux method)來進行皮內投予。可使用快速注射裝置，其可透過液體噴射注射器及/或透過刺穿角質層以產生到達真皮 之射流的針，將液體製劑遞送至真皮。可使用彈道粉末/顆粒遞送裝置，其使用壓縮氣體以加速粉末形式的化合物穿過皮膚外層而到達真皮。

適用於局部投予的製劑包括，但不限於，液體及/或半液體製劑，例如擦劑、洗劑、水包油及/或油包水乳劑，如乳膏劑、軟膏劑、及/或糊劑、及/或溶液及/或懸浮液。局部投予製劑舉例可包含約1%至約10%(w/w)活性成分，儘管該活性成分的濃度可高達該活性成分於該溶劑中的溶解度極限。用於局部投予的製劑可更包含一或多種本文所述之額外成分。

本文所述之醫藥組合物可製成、包裝成適用於藉由口腔來肺部投予之製劑，及/或依此進行販售。該種製劑可包含有活性成分的乾燥顆粒，其直徑介於約0.5至約7奈米，或介於約1至約6奈米。該種組成物為乾燥粉末，因此易於以包含乾燥粉末貯存器的裝置進行投予；該裝置可將推進劑流引導至所述乾燥粉末貯存器中以分散該粉末，以及/或是使用自推進溶劑/粉末分配容器來進行投予，例如包含在密閉容器中溶於及/或懸浮於低沸點推進劑中之活性成分的裝置。該種粉末包含顆粒，其中至少98%(重量計)之顆粒的直徑大於0.5奈米，且至少95%(數量計)之顆粒的直徑小於7奈米。或者，至少95%(重量計)之顆粒的直徑大於1奈米，且至少90%(數量計)之顆粒的直徑小於6奈米。乾燥粉末組成物可包含固體細粉稀釋劑(例如糖)，且為便於提供之單位劑量形式。

低沸點推進劑通常包括在大氣壓下具有低於65℉沸點之液體推進劑。一般來說，推進劑可構成50至99.9%(w/w)之組成物，且活性成分可構成0.1至20%(w/w)之組合物。推進劑可更包含額外的成分，例如液體非離子型及/或固體陰離子型表面活性劑及/或固體稀釋劑(其可與包含有活性成分之顆粒具有同量級的顆粒大小)。

本文所述用於肺部遞送之醫藥組成物可提供溶液及/或懸浮液之液滴形式的活性成分。此等製劑可以包含有活性成分之水性及/或稀釋醇溶液及/或懸浮液(任選地無菌)來製備、包裝及/或販售，且可使用任何霧化及/或霧化裝置以便於施用。此等製劑可進一步包含一或多種額外成分，包括但不限於，調味劑(例如糖精鈉)、揮發油、緩衝劑、表面活性劑及/或防腐劑(例如羥苯甲酸甲酯)。透過此給藥途徑提供之液滴可具有約0.1至約200奈米之平均直徑。

本文所述可用於肺部遞送之製劑可用於鼻內遞送本文所述之醫藥組成物。適於鼻內給藥之另一製劑為包含有活性成分且平均顆粒約0.2至500微米之粗粉。此等製劑係透過從置於鼻腔附近之粉末容器經過鼻道快速吸入來進行給藥。

經鼻給藥之製劑可例如包含約少至0.1%(w/w)至多達100%(w/w)之活性成分，且可包含本文所述之一或多種其他成分。本文所述之醫藥組成物可製備成、包裝成用於口頰(buccal)給藥之製劑、及/或依此販售。此等製劑可例如為利用習知方法製備之錠劑(tablets)及/或***片(lozenges)形式，並可含有例如0.1至20%(w/w)之活性成分，餘量則包含口腔可溶解及/或可降解組成物，及視情況包含本文所述之一或多種額外成分。或者，用於口頰給藥之製劑可包含有活性成分之粉末及/或霧化(aerosolized)及/或霧化溶液(atomized solution)及/或懸浮液。此等粉狀、霧化及/或霧化製劑於分散時可具有約0.1至約200奈米之平均顆粒及/或液滴尺寸，且可進一步包含一或多種本文所述之額外成分。

本文所述之醫藥組成物可製成、包裝成用於眼內給藥之製劑，及/或依此進行販售。此等製劑例如可為眼部滴液形式，其包含例如0.1-1.0%(w/w)於水性或油性液體載體或賦形劑中之活性成分的溶液及/或懸浮液。該種滴液可 更包含緩衝劑、鹽類及/或一或多種本文所述之其他額外成分。其他有用之眼部給藥製劑包括含有微晶形式及/或微脂體(liposomal)製劑之活性成分之製劑。本發明之範疇亦包含滴耳劑及/或滴眼劑。

雖然本文提供之醫藥組成物的敘述主要是關於適用於人類施用之醫藥組成物，但此等組成物一般亦適用於投予至各種動物。可完全理解可修改適用於人類之醫藥組成物，藉以使組成物適於投予至不同動物體內，且具有通常知識之獸醫藥理學家可以慣常實驗設計及/或進行該些修改。

本文提供之化合物通常是配製成劑量單位形式，以便於給藥並使劑量具有一致性。然而，可理解，醫護人員可在合理的醫學判斷範圍內，決定本文所述組成物之總每日用量。對任一特定個體或生物之特定治療有效量將依不同因素而有所調整，包含所治療的疾病、疾病的嚴重程度、所用之特定活性成分的活性、所用之特定組成物、個體之年齡/體重/-一般健康狀況/性別/及飲食習慣、給藥時間、給藥途徑、及所用之特定活性成分的排出速度、治療的持續時間、與所用之特定活性成分合併或共同使用的藥物、以及醫藥領域習知的其他因素。

本發明亦包含套組(例如醫藥包裝)。所提供之套組可包含本文所述之醫藥組成物或化合物，以及一容器(例如小瓶、安瓶、瓶罐、注射器及/或分配器(dispenser)包裝，或是其他適當的容器)。於一些實施例中，所提供之套組可視情況地更包含一第二容器，其包含一醫藥賦形劑，用以稀釋或懸浮本文所述之醫藥組成物或化合物。於一些實施例中，提供於第一容器及第二容器之本文所述的醫藥組成物或化合物可合併形成一單位劑型。

於某些實施例中，本文所述之套組包括一第一容器，其包含有本文所述之一化合物或醫藥組成物。於某些實施例中，本文所述之套組可用於治療增殖性疾病，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))。於某些實施例中，該疾病為癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為非小細胞肺癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為三陰性乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為頸部癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。

於一些實施例中，本文所述之化合物可用於治療、延緩及/或預防增殖性疾病之不良影響，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))；及/或抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡。

於某些實施例中，本文所述之套組更包含套組中所包含之化合物或醫藥組成物的使用說明。本文所述之套組亦可包含監管機構(如美國食品藥物 管理局/FDA)所要求的資訊。於某些實施例中，套組中所包含之資訊為處方資訊。於某些實施例中，該些套組及說明係提供用以治療所需個體之增殖性疾病，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))、及/或治療、延緩及/或預防個體、細胞、組織或生物樣本之β-增殖性疾病的不良影響，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))。於某些實施例中，該些套組及說明係提供用以抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡。於某些實施例中，該些套組可用於誘發癌細胞(例如體內或體外細胞)之凋亡。本文所述之套組可包括一或多種本文所述之額外醫藥劑，以作為一分開的組成物。

治療方法

如下實施例所示，本文所述之示例性化合物成功結合至β-微管蛋白之秋水仙素結合袋點、誘導有絲***細胞週期停滯、及誘導細胞凋亡，以治療對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症，例如，對太平洋紫杉醇及敏克瘤有抗藥性)(例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌))，並證實對 癌細胞(例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌)之微管聚合及腫瘤生長有抑制作用。

據此，本發明提供治療所需個體之增殖性疾病的方法，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))，該方法包括對該個體投予一有效量(例如，治療有效量)之本文所述的化合物或其醫藥組成物。本發明提供抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘導組織、生物樣本或個體對多種藥物具抗性之癌細胞凋亡的方法。

本發明之另一態樣係關於預防所需個體之增殖性疾病的方法，該方法包括對該個體投予一有效量(例如，預防有效量)之本文所述的化合物或其醫藥組成物。

本文所述之化合物及醫藥組成物可用於治療、延緩、及/或預防一所需個體之增殖性疾病，例如癌症，舉例包括肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))；及/或抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘導組織、生物樣本或個體對多種藥物具抗性之癌細胞的凋亡。於某些實施例中，該增殖性疾病為癌症。於某些實施例中，該增殖性疾病為對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有 關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))。於某些實施例中，該癌症與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性。於某些實施例中，該癌症對一或多種抗微管藥物治療有抗性。於某些實施例中，該一或多種抗微管藥物包括紫杉醇或長春花生物鹼。於某些實施例中，該癌症對紫杉醇及/或長春花生物鹼有抗藥性。於某些實施例中，該紫杉醇為太平洋紫杉醇(paclitaxel)及/或伊沙匹隆(ixabepilone)。於某些實施例中，該長春花生物鹼為敏克瘤(vincristine)或敏畢瘤(vinblastine)。於某些實施例中，該癌症對太平洋紫杉醇及敏克瘤有抗藥性。於某些實施例中，該增殖性疾病為對一或多種抗微管藥物治療有抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關之對多種藥物有抗性之癌症(例如，對一或多種抗微管藥物(例如紫杉醇或長春花生物鹼)治療有抗性之癌症)))、及包括如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌之癌症。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為肺癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為小細胞肺癌(SCLC)。於某些實施例中，該增殖性疾病為非小細胞肺癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為復發性乳癌(recurring breast cancer)。於某些實施例中，該增殖性疾病為基因突變乳癌(mutant breast cancer)。於某些實施例中，該增殖性疾病為HER2+乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為HER2-乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為三陰性乳癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為頸部癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為卵巢癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為頭頸癌。於某些實施例中， 該增殖性疾病為結腸癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為***癌。於某些實施例中，該增殖性疾病為血癌。

於某些實施例中，本文所述之該方法更包括對該個體投予一額外醫藥劑。於某些實施例中，本文所述之該方法更包括使該生物樣本接觸一額外醫藥劑。於某些實施例中，本文所述之該方法更包括使該組織接觸一額外醫藥劑。於某些實施例中，本文所述之該方法更包括使該細胞接觸一額外醫藥劑。於某些實施例中，本文所述之該方法更包括治療增殖性疾病(例如癌症)。

本文提供之化合物及組成物可透過任何途徑進行給藥，包含腸道內(例如口服)、非口服(parenteral)、靜脈內(intravenous)、肌肉內(intramuscular)、動脈內(intra-arterial,)、顱內(intracranial)、髓內(intramedullary)、鞘內(intrathecal)、皮下(subcutaneous)、腦室內(intraventricular)、經皮(transdermal)、皮內(intradermal)、皮間(interdermal)、直腸(rectal)、***內(intravaginal)、腹腔內(intraperitoneal)、局部(例如藉由粉末、軟膏、霜劑及/或滴劑)，透過任何有利於在體內/離體(ex vivo)運輸本文所述之化合物或組成物進入或通過個體之組織/皮膚(例如離子導入法)、黏膜、鼻、口頰、舌下之方式；透過氣管內滴注、支氣管滴注及/或吸入；及/或作為口服噴霧劑、鼻噴霧劑及/或氣霧劑。於一些實施例中，該醫藥組成物為口服或非口服給藥。於一些實施例中，該醫藥組成物為口服給藥。於一些實施例中，該醫藥組成物為非口服給藥。具體地說，預期途徑為口服給藥、靜脈內給藥(例如全身性靜脈注射)、輸血、灌注、經血液及/或淋巴供給之局部給藥、及/或直接給藥至受侵部位，例如腫瘤內。一般來說，最佳的給藥途徑會隨著各種因素而有所改變，包含藥劑的特性(例如其於腸胃道中的穩定 度)、及/或個體的狀況(例如個體是否能夠接受口服給藥)。於某些實施例中，本文所述之化合物或醫藥組成物適用於局部給藥至個體的眼部。

化合物可達到有效量之準確量會隨著個體的不同而改變，其決定於例如個體的物種、年齡及一般狀況、副作用或疾病的嚴重程度、特定化合物之特性、給藥模式、及其類似者。有效量可包含於單一劑量(例如單一口服劑量)或多劑量(例如口服多劑量)中。於某些實施例中，當多劑量投予至個體或施用於生物樣本、組織或細胞時，多劑量中之任二劑可包含不同或實質上相同劑量之本發明化合物。於某些實施例中，當多劑量投予至個體或施用於生物樣本、組織或細胞時，多劑量投予至個體或多劑量施用於組織或細胞的頻率可以是每天3劑、每天2劑、每天1劑、每隔1天1劑、每3天1劑、每週1劑、每2週1劑、每3週1劑、或每4週1劑。於某些實施例中，多劑量投予至個體或多劑量施用於組織或細胞的頻率為每天1劑。於某些實施例中，多劑量投予至個體或多劑量施用於組織或細胞的頻率為每天2劑。於某些實施例中，多劑量投予至個體或多劑量施用於組織或細胞的頻率為每天3劑。於某些實施例中，當多劑量投予至個體或施用於生物樣本、組織或細胞時，第一劑與最後一劑的間隔時間為1天、2天、4天、1週、2週、3週、1個月、2個月、3個月、4個月、6個月、9個月、1年、2年、3年、4年、5年、7年、10年、15年、20年或個體、生物樣本、組織或細胞的存活期。於某些實施例中，多劑量之第一劑與最後一劑的間隔時間為3個月、6個月或1年。於某些實施例中，多劑量之第一劑與最後一劑的間隔時間為個體、生物樣本、組織或細胞的存活期。於某些實施例中，本文所述之一劑(例如單一劑量或多劑量中的任一劑)可分別包含介於0.1微克至1微克、介於0.001毫克至0.01毫克、介於0.01毫克至0.1毫克、介於0.1毫克至1毫克、介於1毫克至3毫克、介於3 毫克至10毫克、介於10毫克至30毫克、介於30毫克至100毫克、介於100毫克至300毫克、介於300毫克至1,000毫克，或是介於1公克至10公克(包含各數值本身)之本發明化合物。於某些實施例中，本文所述之一劑量可分別包含介於1毫克至3毫克(包含各數值本身)之本發明化合物。於某些實施例中，本文所述之一劑量可分別包含介於3毫克至10毫克(包含各數值本身)之本發明化合物。於某些實施例中，本文所述之一劑量可分別包含介於10毫克至30毫克(包含各數值本身)之本發明化合物。於某些實施例中，本文所述之一劑量可分別包含介於30毫克至100毫克(包含各數值本身)之本發明化合物。

本文所述之劑量範圍提供對成人投予本發明醫藥組成物之導引。舉例來說，醫護從業人員或本發明所屬領域具有通常知識者可確定對孩童或青少年之給藥量，其可低於、高於或相同於對成人之給藥量。

本文所述之化合物或組成物可與一或多種可用於之治療所需個體之增殖性疾病(例如癌症)之額外醫藥劑(例如治療及/或預防活性劑)合併給藥。該些化合物或組成物可與具有下述作用之額外醫藥劑合併給藥：改善其在所需個體中治療增殖性疾病(例如，癌症)之活性(例如，活性(例如，效力及/或功效))；及/或治療、延緩及/或預防增殖性疾病(例如所需個體之癌症)的不良影響；改善生物利用度；改善安全性；降低抗藥性；減少及/或改變代謝；抑制排出；及/或改變於個體、生物樣本、組織或細胞中的分佈。亦應理解，所採用之療法對於相同疾病、不同疾病可達到所欲效果及/或可達到不同的效果。於某些實施例中，將本文所述包含本發明化合物之醫藥組成物投予至所需患者，以有利地治療一或多種疾病。於某些實施例中，該一或多種疾病為增殖性疾病(例如，癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或 血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症))、或其組合。於一較佳實施例中，該一或多種疾病為皆對一或多種抗微管藥物治療有抗藥性之肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症)、或其組合。

化合物或組成物可與一或多種額外醫藥劑同時或在其之前或之後給藥，其可用作例如聯合療法。於某些實施例中，本文所述之化合物或醫藥組成物可投予至所需患者，其中該患者之癌症(例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌)對至少一醫藥劑有抗藥性(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症))。於某些實施例中，該疾病為癌症(例如，肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌)，且該癌症(例如，肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌)對一或多種抗微管藥物治療有抗藥性(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症)，其包括但不限於紫杉醇或長春花生物鹼。於某些實施例中，對多種藥物有抗性之癌症與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關。於某些實施例中，對多種藥物有抗性之癌症與β-微管蛋白突變有關。

醫藥劑包括治療活性劑。醫藥劑亦包括預防活性劑。醫藥劑包括有機分子，例如藥物化合物(例如美國聯邦法規(CFR)規定而經美國食品藥物管理局核准可供人類或動物使用之化合物)、肽、蛋白質、碳水化合物、單醣、寡醣、多醣、核蛋白、黏蛋白、脂蛋白、合成多肽或蛋白、連接至蛋白、糖蛋白、類固醇、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷、寡核苷酸、反義寡核苷酸、脂質、 荷爾蒙、維生素及細胞之小分子。於某些實施例中，該額外醫藥劑為可用於治療增殖性疾病(如癌症)之醫藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑為可用於預防紅血球增殖性疾病(如癌症)之醫藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑為可用於抑制所需個體、或細胞、組織或生物樣本內之癌細胞微管聚合、結合β-微管蛋白、抑制微管組合、及誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡之醫藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑是由監管機構(例如，美國FDA)批准用於治療及/或預防增殖性疾病(例如，癌症)之醫藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑是由監管機構(例如，美國FDA)批准用於治療及/或預防肺癌(例如，非小細胞肺癌)之醫藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑是由監管機構(例如，美國FDA)批准用於治療及/或預防乳癌(例如，三陰性乳癌)之醫藥劑。每一額外醫藥劑可依針對該醫藥劑所確定之劑量及/或時間表來進行給藥。該額外醫藥劑亦可彼此一起及/或與本文所述之化合物或組成物一起以單一劑量或不同劑量分開給藥。療程中所採用之特定組合將考慮到本文所述化合物與額外醫藥劑之相容性及/或欲達成之治療及/或預防效果。可預期額外醫藥劑在合併治療所使用之劑量不會超過其各別使用時的劑量。於一些實施例中，合併使用的劑量是低於各別使用時的劑量。

於某些實施例中，該額外醫藥劑為抗增殖藥劑(例如抗癌藥劑)、抗血管新生藥劑、抗發炎藥劑、免疫抑制劑、抗菌劑、抗病毒劑、心血管藥劑、降膽固醇藥劑、抗糖尿病藥劑、抗過敏藥劑、止痛藥、或其組合。於某些實施例中，本文所述之化合物或醫藥組成物可與抗癌療法合併給藥。於某些實施例中，該額外醫藥劑為抗血癌藥劑。於某些實施例中，該額外醫藥劑為ABITREXATE(甲氨蝶呤)、ADE、阿黴素RDF(鹽酸多柔比星)、Ambochlorin(苯 丁酸氮芥)、ARRANON(奈拉濱)、ARZERRA(奧法木單抗)、BOSULIF(博舒替尼)、BUSULFEX(白消安)、CAMPATH(阿侖單抗)、CERUBIDINE(鹽酸柔紅黴素)、CLAFEN(環磷醯胺)、CLOFAREX(氯法拉濱)、CLOLAR(氯法拉濱)、CVP、CYTOSAR-U(阿糖胞苷)、CYTOXAN(環磷醯胺)、ERWINAZE(門冬醯胺酶菊歐文氏菌)、FLUDARA(磷酸氟達拉濱)、FOLEX(甲氨蝶呤)、FOLEX PFS(甲氨蝶呤)、GAZYVA(奧比妥球單抗)、GLEEVEC(甲磺酸伊馬替尼)、Hyper-CVAD、ICLUSIG(鹽酸普納替尼)、IMBRUVICA(依魯替尼)、LEUKERAN(苯丁酸氮芥)、LINFOLIZIN(苯丁酸氮芥)、MARQIBO(硫酸長春新鹼脂質體)、METHOTREXATE LPF(甲氨蝶呤)、MEXATE(甲氨蝶呤)、MEXATE-AQ(甲氨蝶呤)、鹽酸米托蒽醌、MUSTARGEN(鹽酸氮芥)、MYLERAN(白消安)、NEOSAR(環磷醯胺)、ONCASPAR(培門冬酶)、PURINETHOL(巰基嘌呤)、PURIXAN(巰基嘌呤)、Rubidomycin(鹽酸柔紅黴素)、SPRYCEL(達沙替尼)、SYNRIBO(三尖杉酯鹼)、TARABINEPFS(阿糖胞苷)、TASIGNA(尼祿替尼)、TREANDA(鹽酸苯達莫司汀)、TRISENOX(三氧化二砷)、VINCASAR PFS(硫酸長春新鹼)、ZYDELIG(艾代拉裡斯)或其組合。在某些實施方式中，該額外添加的藥劑是抗淋巴瘤藥劑。在某些實施方式中，該額外添加的藥劑是ABITREXATE(甲氨蝶呤)、ABVD、ABVE、ABVE-PC、ADCETRIS(本妥昔單抗)、ADRIAMYCIN PFS(鹽酸多柔比星)、ADRIAMYCIN RDF(鹽酸多柔比星)、AMBOCHLORIN(苯丁酸氮芥)、AMBOCLORIN(苯丁酸氮芥)、ARRANON(奈拉濱)、BEACOPP、BECENUM(卡莫司汀)、BELEODAQ(貝利司他)、BEXXAR(托西莫單抗及碘I131托西莫單抗)、BICNU(卡莫司汀)、BLENOXANE(博萊黴素)、CARMUBRIS(卡莫司汀)、CHOP、CLAFEN(環磷醯胺)、COPP、COPP-ABV、CVP、CYTOXAN (環磷醯胺)、DEPOCYT(阿糖胞苷脂質體)、DTIC-DOME(達卡巴嗪)、EPOCH、FOLEX(甲氨蝶呤)、FOLEX PFS(甲氨蝶呤)、FOLOTYN(普拉曲沙)、HYPER-CVAD、ICE、IMBRUVICA(依魯替尼)、INTRON A(重組干擾素α-2b)、ISTODAX(羅米地辛)、LEUKERAN(苯丁酸氮芥)、LINFOLIZIN(苯丁酸氮芥)、洛莫司汀、MATULANE(鹽酸丙卡巴肼)、METHOTREXATE LPF(甲氨蝶呤)、MEXATE(甲氨蝶呤)、MEXATE-AQ(甲氨蝶呤)、MOPP、MOZOBIL(普樂沙福)、MUSTARGEN(鹽酸氮芥)、NEOSAR(環磷醯胺)、OEPA、ONTAK(地尼白介素2)、OPPA、R-CHOP、REVLIMID(來那度胺)、RITUXAN(利妥昔單抗)、STANFORD V、TREANDA(bendamustine hydrochloride)、VAMP、VELBAN(硫酸長春鹼)、VELCADE(硼替佐米)、VELSAR(硫酸長春鹼)、VINCASAR PFS(硫酸長春新鹼)、ZEVALIN(替伊莫單抗)、ZOLINZA(伏立諾他)、ZYDELIG(艾代拉裡斯)或其組合。在某些實施方式中，該額外添加的藥劑是REVLIMID(來那度胺)、DACOGEN(地西他濱)、VIDAZA(阿紮胞苷)、CYTOSAR-U(阿糖胞苷)、IDAMYCIN(伊達比星)、CERUBIDINE(柔紅黴素)、LEUKERAN(苯丁酸氮芥)、NEOSAR(環磷醯胺)、FLUDARA(氟達拉濱)、LEUSTATIN(克拉屈濱)或其組合。在某些實施方式中，該額外添加的藥劑是ABITREXATE(甲氨蝶呤)、ABRAXANE(紫杉醇白蛋白穩定的納米顆粒製劑)、AC、AC-T、ADE、ADRIAMYCIN PFS(鹽酸多柔比星)、ADRUCIL(氟尿嘧啶)、AFINITOR(依維莫司)、AFINITOR DISPERZ(依維莫司)、ALDARA(咪喹莫特)、ALIMTA(培美曲塞二鈉)、AREDIA(帕米膦酸二鈉)、ARIMIDEX(阿那曲唑)、AROMASIN(依西美坦)、AVASTIN(貝伐單抗)、BECENUM(卡莫司汀)、BEP、BICNU(卡莫司汀)、BLENOXANE(博萊黴素)、CAF、CAMPTOSAR(鹽酸伊立替康)、 CAPOX、CAPRELSA(凡德他尼)、CARBOPLATIN-TAXOL、CARMUBRIS(卡莫司汀)、CASODEX(比卡魯胺)、CEENU(洛莫司汀)、CERUBIDINE(鹽酸柔紅黴素)、CERVARIX(重組HPV二價疫苗)、CLAFEN(環磷醯胺)、CMF、COMETRIQ(卡博替尼-s-蘋果酸鹽)、COSMEGEN(放線菌素D)、CYFOS(異環磷醯胺)、CYRAMZA(雷莫蘆單抗)、CYTOSAR-U(阿糖胞苷)、CYTOXAN(環磷醯胺)、DACOGEN(地西他濱)、DEGARELIX、DOXIL(鹽酸多柔比星脂質體)、鹽酸多柔比星、DOX-SL(鹽酸多柔比星脂質體)、DTIC-DOME(達卡巴嗪)、EFUDEX(氟尿嘧啶)、ELLENCE(鹽酸表柔比星)、ELOXATIN(奧沙利鉑)、ERBITUX(西妥昔單抗)、ERIVEDGE(維莫德吉)、EVACET(鹽酸多柔比星脂質體)、FARESTON(托瑞米芬)、FASLODEX(氟維司群)、FEC、FEMARA(來曲唑)、FLUOROPLEX(氟尿嘧啶)、FOLEX(甲氨蝶呤)、FOLEX PFS(甲氨蝶呤)、FOLFIRI、FOLFIRI-BEVACIZUMAB、FOLFIRI-CETUX頂AB、FOLFIRINOX、FOLFOX、FU-LV、GARDASIL(重組人乳頭狀瘤病毒(HPV)四價疫苗)、GEMCITABINE-CISPLATIN、GEMCITABINE-OXALIPLATIN、GEMZAR(吉西他濱鹽酸鹽)、GILOTRIF(二馬來酸阿法替尼)、GLEEVEC(甲磺酸伊馬替尼)、GLIADEL(卡莫司汀植入物)、GLIADEL WAFER(卡莫司汀植入物)、HERCEPTIN(曲妥珠單抗)、HYCAMTIN(鹽酸拓撲替康)、IFEX(異環磷醯胺)、IFOSFAMIDUM(異環磷醯胺)、INLYTA(阿西替尼)、INTRON A(重組干擾素α-2b)、IRESSA(吉非替尼)、IXEMPRA(伊沙匹隆)、JAKAFI(磷酸盧梭替尼)、JEVTANA(卡巴他賽)、KADCYLA(曲妥珠單抗)、KEYTRUDA(pembrolizumab)、KYPROLIS(卡非佐米)、LIPODOX(鹽酸多柔比星脂質體)、LUPRON(乙酸亮丙瑞林)、LUPRON DEPOT(乙酸亮丙瑞林)、LUPRON DEPOT-3MONTH(乙酸亮丙瑞林)、LUPRON DEPOT-4MONTH(乙酸亮丙瑞林)、LUPRON DEPOT-PED(乙酸亮丙瑞林)、MEGACE(乙酸甲地孕酮)、MEKINIST(曲美替尼)、METHAZOLASTONE(替莫唑胺)、METHOTREXATE LPF(甲氨蝶呤)、MEXATE(甲氨蝶呤)、MEXATE-AQ(甲氨蝶呤)、鹽酸米托蒽醌、MITOZYTREX(絲裂黴素c)、MOZOBIL(普樂沙福)、MUSTARGEN(鹽酸氮芥)、MUTAMYCIN(絲裂黴素c)、MYLOSAR(阿紮胞苷)、NAVELBINE(酒石酸長春瑞濱)、NEOSAR(環磷醯胺)、NEXAVAR(甲苯磺酸索拉非尼)、NOLVADEX(檸檬酸他莫昔芬)、NOVALDEX(檸檬酸他莫昔芬)、OFF、PAD、PARAPLAT(卡鉑)、PARAPLATIN(卡鉑)、PEG-INTRON(聚乙二醇化干擾素α-2b)、培美曲塞二鈉、PERJETA(帕妥珠單抗)、PLATINOL(順鉑)、PLATINOL-AQ(順鉑)、POMALYST(泊馬度胺)、潑尼松、PROLEUKIN(阿地白介素)、PROLIA(地諾單抗)、PROVENGE(西普魯塞-t)、REVLIMID(來那度胺)、RUBIDOMYCIN(鹽酸柔紅黴素)、SPRYCEL(達沙替尼)、STIVARGA(瑞戈非尼)、SUTENT(蘋果酸舒尼替尼)、SYLATRON(聚乙二醇化干擾素α-2b)、SYLVANT(西妥昔單抗)、SYNOVIR(沙利度胺)、TAC、TAFINLAR(達拉非尼)、TARABINE PFS(阿糖胞苷)、TARCEVA(鹽酸埃羅替尼)、TASIGNA(尼祿替尼)、TAXOL(紫杉醇)、TAXOTERE(多西紫杉醇)、TEMODAR(替莫唑胺)、THALOMID(沙利度胺)、TOPOSAR(依託泊苷)、TORISEL(西羅莫司)、TPF、TRISENOX(三氧化二砷)、TYKERB(二甲苯磺酸拉帕替尼)、VECTIBIX(帕尼單抗)、VEIP、VELBAN(硫酸長春鹼)、VELCADE(硼替佐米)、VELSAR(硫酸長春鹼)、VEPESID(依託泊苷)、VIADUR(乙酸亮丙瑞林)、VIDAZA(阿紮胞苷)、VINCASAR PFS(硫酸長春新鹼)、VOTRIENT(鹽酸帕唑帕尼)、WELLCOVORIN (亞葉酸鈣)、XALKORI(克唑替尼)、XELODA(卡培他濱)、XELOX、XGEVA(地諾單抗)、XOFIGO(二氯化鐳223)、XTANDI(恩紮魯胺)、YERVOY(伊匹單抗)、ZALTRAP(ziv-阿柏西普)、ZELBORAF(威羅菲尼)、ZOLADEX(醋酸戈舍瑞林)、ZOMETA(唑來膦酸)、ZYKADIA(色瑞替尼)、ZYTIGA(乙酸阿比特龍)、ENMD-2076、PCI-32765、AC220、多韋替尼乳酸鹽(TKI258,CHIR-258)、BIBW 2992(TOVOK^TM)、SGX523、PF-04217903、PF-02341066、PF-299804、BMS-777607、ABT-869、MP470、BIBF 1120(VARGATEF®)、AP24534、JNJ-26483327、MGCD265、DCC-2036、BMS-690154、CEP-11981、替沃紮尼(AV-951)、OSI-930、MM-121、XL-184、XL-647及/或XL228)、蛋白酶抑制劑(例如，硼替佐米(Velcade))、mTOR抑制劑(例如，雷帕黴素、西羅莫司(CCI-779)、依維莫司(RAD-001)、雷帕黴素衍生物(ridaforolimus)、AP23573(Ariad)、AZD8055(AstraZeneca)、BEZ235(Novartis)、BGT226(Norvartis)、XL765(Sanofi Aventis)、PF-4691502(Pfizer)、GDC0980(Genetech)、SF1126(Semafoe)及OSI-027(OSI))、奧利默森(oblimersen)、吉西他濱(gemcitabine)、洋紅黴素(carminomycin)、甲醯四氫葉酸(Ieucovorin)、培美曲塞(pemetrexed)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、達卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴餅(procarbizine)、潑尼龍(prednisolone)、***(dexamethasone)、卡普熱新(campathecin)、普卡黴素(plicamycin)、天冬醯胺酶(asparaginase)、氨基噪呤(aminopterin)、甲胺噪呤(methopterin)、泊非羅黴素(porfiromycin)、美法侖(melphalan)、異長春堿(Ieurosidine)、環氧長春堿(Ieurosine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、曲貝替定(trabectedin)、丙卡巴餅(procarbazine)、迪斯德莫來(discodermolide)、洋紅黴素(carminomycin)、氨基噪呤及六甲基三聚氨胺(hexamethyl melamine)、或其組合。

本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、前驅藥、或其組成物，用於治療所需個體之增殖性疾病，例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如紫杉醇或長春花生物鹼)。

本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、前驅藥、或其組成物之用途，用以製備治療所需個體之增殖性疾病之藥物，該增殖性疾病例如癌症，包括舉例如肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌(例如，對一或多種抗微管藥物治療具抗性之癌症(例如，與P-醣蛋白(P-gp)過度表達相關之對多種藥物有抗性之癌症)(例如紫杉醇或長春花生物鹼))。

於某些實施例中，其提供抑制所需個體之癌細胞微管聚合之方法，該方法包括對該個體投予一治療有效量之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥、或本文所述之醫藥組成物。

於一些實施例中，其提供誘導組織、生物樣本或個體對多種藥物具抗性之癌細胞凋亡之方法，該方法包括將一治療有效量之式(I)化合物或其醫 藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥、或本文所述之醫藥組成物投予至該個體或接觸該細胞、組織或生物樣本。於一些實施例中，該等方法更包括使該細胞、組織或生物樣本接觸一治療有效量之額外醫藥劑合併本發明化合物。

為了可更充分地理解本發明，闡述了以下實施例。此提供描述於本申請中之合成及生物實施例，以舉例說明本文提供之化合物、醫藥組成物及方法，且不以任何方式解釋為限制其範圍。

[實施例1]分析示例性化合物之生物活性

於本研究中，對2百萬種化合物進行兩步高通量篩選(high-throughput screening)，以尋找對肺癌具有治療活性之新分子。本研究發現示例性化合物4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(AS1712)在體外及體內具有抗癌活性，且對癌症(而不對正常細胞)具有優異的治療專一性(specificity)。本研究發現AS1712抑制各種類型癌細胞的生長，包括肺癌、***癌、卵巢癌、乳癌、結腸癌、頭頸癌及血癌。透過靶向β-微管蛋白之秋水仙素結合位點，AS1712誘導有絲***細胞週期停滯及凋亡。值得注意的是，AS1712之獨特微管蛋白結合位點可防止β-微管蛋白變異及P-gp過度表達所引起之抗藥性。

AS1712於體外及體內抑制肺癌細胞增殖並具有廣泛的抗癌活性

利用兩步高通量篩選程序，示例性化合物4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(AS1712)呈現大幅降低許多不同肺癌細胞株之增殖，包括EGFR TKI-抗藥細胞株H1975及PC9/IR；臨床分離株CL25、CL83、CL97、CL100、CL141及CL152；以及ATCC細胞株PC-9。首先使用MTS分析，以評估示例性化合物 AS1712對不同非小細胞肺癌細胞株之細胞毒性作用，其發現AS1712可在不同EGFR狀態之細胞株中誘導細胞死亡，包括A549(野生型EGFR)、CL1-0(野生型EGFR)、PC9(EGFR外顯子19缺失/EGFR exon 19 deletion)及H1975(EGFR中T790M及L858R突變)。受作用之細胞株的IC₅₀值範圍為16至33nM(圖1A)，此表示AS1712之細胞毒性作用與肺癌細胞之EGFR狀態無關。此外，AS1712對正常氣管上皮細胞(NBE)及人纖維母細胞(HFB)相對無毒性(IC₅₀>10μM；圖1A)。示例性化合物AS1712呈現劑量依賴性地抑制CL1-0及H1975細胞之群落形成能力(圖1B-1E)。上述數據表示，AS1712可在體外抑制非小細胞肺癌之增殖。

為了評估示例性化合物AS1712之體內抗腫瘤功效，對無胸腺BALB/c裸鼠(每隻均帶有建立之皮下H1975腫瘤)進行每週三次腹膜內注射DMSO(控制組)或4或8mg/kg AS1712達25天(每組n=6)。在整個治療過程中，監測每隻小鼠之腫瘤體積及體重。相較於控制組，AS1712之處理明顯降低H1975異位移植腫瘤的生長(平均腫瘤大小：DMSO治療為1749±234.5mm³，4mg/kg治療為871.3±106mm³，8mg/kg治療為587.2±67mm³；所有均在第25天測量且兩者p<0.01；圖1F、2A-2D及表1)。體重及肝臟與腎臟功能之血清生化指標(包括ALT、AST、BUN及Cre)在實驗的第25天呈現無毒性影響(圖2D及表1)。因此，AS1712在體內以低毒性抑制腫瘤生長。

表1-肝及腎功能之血清生化指標ALT、AST、BUN及Cre(數據為平均值±SEM)

亦評估示例性化合物AS1712對各種類型癌細胞之細胞毒性，其發現AS1712降低許多不同類型之惡性細胞的存活率，包括源自肺(A549、CL1-0、PC9及H1975)、***(BT-549、Hs578t、MDA-MB-231、37T及82T)、卵巢(SKOV-3、IGR-OV1及Ovcar-3)、頭及頸(SAS、OECM1及KB)、結腸(HCT116、HT-29、Colon205及SW620)、***癌(Du-145及PC-3)及血癌(Molt4及CCRF-CEM)。對於測試的23種癌細胞株，其IC₅₀值範圍於16至84nM(表2)，此呈現示例性化合物AS1712或示例性化合物AS1712之衍生物可用於治療各種類型的癌症。

表2-AS1712對不同癌細胞株或正常細胞株增殖之抑制活性

AS1712誘導凋亡及細胞週期停滯

為了評估示例性化合物AS1712之細胞毒性作用是否與凋亡細胞死亡相關，以AS1712處理CL1-0、H1975及HFB細胞達24至72小時，接著監測主要促凋亡蛋白(pro-apoptotic protein)之活化。本研究發現AS1712呈現時間依賴性地誘導CL1-0及H1975細胞中之聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶(Poly ADP-ribose Polymerase，PARP)及半胱天冬酶-3(caspase-3)裂解(cleavage)；正常HFB細胞中的PARP及半胱天冬酶-3(caspase-3)則不受AS1712影響(圖3)。接著，研究可能已被AS1712活化之凋亡途徑蛋白，並發現AS1712呈現劑量依賴性地誘導兩個內源性凋亡途徑指標，即半胱天冬酶-9(caspase-9)裂解及Bax表達(圖4A)。相反地， AS1712處理並未活化外源性凋亡途徑指標半胱天冬酶-8(caspase-8)(圖4A)。亦發現用AS1712進行24小時處理增加了細胞色素c(cytochrome c)之細胞質內濃度(圖4B)，而相同劑量的AS1712並未誘導HFB細胞凋亡或細胞色素c釋放(圖5A及5B)。因此，AS1712僅誘導癌細胞中內源性凋亡途徑之活化。

接著，研究AS1712的凋亡作用是否由異常的細胞週期進程所引起。通過流式細胞技術檢測CL1-0、H1975及HFB細胞在細胞週期各期之間的分佈。AS1712處理呈現劑量依賴性地增加CL1-0及H1975細胞之亞倍體(sub-G1，凋亡細胞群)及G2/M期細胞群(圖4C)，而HFB細胞則無此現象(圖5C)。為了釐清AS1712是否誘導G2或有絲***細胞週期停滯，在CL1-0及H1975細胞之檢查點對細胞週期進行表徵，其發現AS1712增加有絲***期指標之細胞週期蛋白B1(cyclin B1)及磷酸化組織蛋白H3(phospho-histone H3，p-HH3)，但G2期指標之細胞週期蛋白A則沒有(圖4D)。亦使用高通量細胞影像(high-content imaging)，對特定的有絲***期指標p-HH3進行染色，以測量有絲***指數(有絲***細胞比例)，其發現AS1712處理導致CL1-0及H1975細胞呈現劑量依賴地累積於有絲***期(圖4E)。此外，使用α-微管蛋白免疫螢光染色法(immunofluorescence staining)，直接評估紡錘絲(mitotic spindle)組織，並觀察到紡錘絲之排列受到AS1712處理的破壞(圖4F)。上述數據表示AS1712誘導有絲***細胞週期停滯。

AS1712直接抑制微管聚合

觀察到AS1712處理會破壞紡錘絲組織即表示，該處理可能干擾動態微管結合(association)及/或解離(dissociation)。因此，進行免疫螢光分析，以檢測經AS1712處理之CL1-0、H1975及HFB細胞中微管網絡的狀態。AS1712處理CL1-0及H1975細胞導致其微管去聚合化(depolymerization)(圖6A)，而此等處理 對HFB細胞中的微管則僅有很小的影響(圖7)。在藉由離心將組合及拆解之微管分別分離成顆粒及可溶收集層(fraction)之後，進行細胞內微管組合測定(microtubule assembly assay)。值得注意的是，AS1712實質上增加了可溶收集層(fraction)中α-微管蛋白的量，此發現與諾考達唑(nocodazole)相似，但不同於太平洋紫杉醇處理(圖6B)。利用基於免疫螢光之微管聚合測定進一步證實，AS1712誘導微管的去聚合化。首先，用40nM AS1712處理H1975細胞達1小時，接著置於低溫環境中30分鐘，隨後移至37℃達不同時間。當用AS1712處理時，微管在37℃下無法聚合(圖6C)。接下來，用純化的微管蛋白進行體外微管蛋白聚合測定法，以檢測AS1712是否直接干擾無細胞系統中的微管組合。如預期地，發現參考藥物諾考達唑及敏克瘤可抑制微管蛋白聚合，而太平洋紫杉醇可增強聚合反應。亦發現AS1712直接抑制微管蛋白聚合(圖6D)。進行體外微管成核分析(microtubule nucleation assay)，以測試AS1712是否直接抑制純化中心體處之新微管組合。用AS1712或DMSO培養純化的中心體及微管蛋白。AS1712實質上抑制了來自中心體之微管星體(microtubule aster)的形成(圖6E，左圖)。微管纖維長度之定量分析亦顯示AS1712與DMSO處理之間有顯著差異(圖6E，右圖)。上述數據表示，AS1712直接抑制微管聚合。

[實施例2]示例性化合物之合成

流程1-合成AS1712類似物2a-2m

AS1712之基於細胞的結構-活性關係(SAR)研究-鑑定出較有效之抗癌化合物RJ-LC-15-8

利用H1975細胞及示例性AS1712類似物(具有4(1H)-喹諾酮骨架)，進行SAR研究以找出具有增強抗癌活性之更有效的AS1712系列化合物。如上流程1A及下表3所示，首先將AS1712水解為酸2a，其IC₅₀>5μM。接著，將2a轉化為乙醯胺2b(其IC₅₀=3.7μM)。相較於AS1712，此兩種類似物對H1975細胞均具有明顯較低的活性。而後，將重點移到4(1H)-喹諾酮骨架之C-2位置處苯基之結構優化。利用2c-2j探討芳環之間位或對位取代基的作用，其係透過涉及3-芳基-3-氧基丙酸乙酯(ethyl 3-aryl-3-oxypropanoate)與4-胺基苯甲酸乙酯(ethyl 4-aminobenzoates)之反應及所得之β-烯胺酯(β-enamino ester)1於熱的二苯醚中進行環化而合成(流程1B)。於苯基之對位位置處加上推電子基(2c，IC₅₀=2.2μM)、拉電子基(2d，IC₅₀=2.1μM；2e，IC₅₀=4.5μM)或羥基(2f，IC₅₀=475nM)導致 對H1975細胞之抑制活性大幅降低。有趣的是，在探討間位取代基之作用時發現，具有間位-氟苯基基團的2h對H1975細胞有增強的抑制活性(IC₅₀=24nM)，而2i及2j(於苯環的間位位置上分別帶有三氟甲基及羥基)相較於AS1712則呈現明顯降低的效力(分別為IC₅₀=780nM及1.95μM)。在尾端芳環上引入間位-甲氧基(2g)會稍微降低活性(IC₅₀=44nM)。亦透過以較小或較大立體障礙基團(分別為2k，IC₅₀=207nM及2l，IC₅₀=48nM)取代乙基或是移除氧代基(2m，流程1C，IC₅₀=810nM)，以探討4(1H)-喹諾酮骨架之6-位置上取代基的作用。結果呈現，原本的碳酸乙酯是C-6位置處最佳的取代基。總而言之，從SAR研究所獲得的數據表示，相較於AS1712，2h(稱為RJ-LC-15-8)對H1975細胞有較大之抗細胞增殖效力(IC₅₀=24nM)。

表3-AS1712對於抑制H1975細胞之基於細胞的SAR研究

RJ-LC-15-8利用類似AS1712的機制抑制H1975腫瘤生長

為了驗證RJ-LC-15-8之作用機理與AS1712類似，對H1975細胞進行額外實驗。免疫墨點法(immunoblot)顯示，RJ-LC-15-8誘導PARP的裂解，並增加有絲***期指標細胞週期蛋白B1(cyclin B1)及磷酸化組織蛋白H3(p-HH3)的表達(圖8A)。α-微管蛋白染色之原位免疫螢光顯示，RJ-LC-15-8處理抑制了微管聚合(圖8B)。體外微管蛋白聚合測定亦呈現RJ-LC-15-8對微管聚合之直接抑制(圖8C)。接著，使用H1975異位移植模型評估RJ-LC-15-8的抗腫瘤能力，其數據顯示，相較於控制組，RJ-LC-15-8可抑制腫瘤生長(在第21天之平均腫瘤大小：DMSO控制組處理為2153±126.3mm³；4mg/kg處理為1333±121.9mm³；8mg/kg RJ-LC-15-8處理為972.5±52.3mm³；兩者p<0.01；圖8D)。在實驗結束時，發現RJ-LC-15-8處理並未影響體重(圖8E)。亦評估RJ-LC-15-8對三陰性乳癌(TNBC)之細胞毒性。本研究發現在不同TNBC細胞株中，RJ-LC-15-8比AS1712更有效，其IC₅₀值範圍為21至35nM(表4)。MDA-MB-231異位移植模型顯示，相較於控制組，RJ-LC-15-8可抑制TNBC腫瘤生長(在第35天之平均腫瘤大小：DMSO控制組處理為218±20.9mm³；4mg為105±9.4mm³；8mg/kg RJ-LC-15-8處理為73.6±8.2mm³；兩者p<0.05；圖8F)。在MDA-MB-231異位移植模型中，RJ-LC-15-8處理不影響體重(圖8G)。

表4-示例性化合物RJ-LC-15-8對不同三陰性乳癌細胞株之細胞毒性作用(以RJ-LC-15-8處理細胞72小時，以MTS分析檢測細胞存活率，數據為三個測值的平均值)

流程2-製備示例性化合物

AS1712結合β-微管蛋白之秋水仙素-結合袋點

示例性化合物AS1712對微管聚合之抑制表示AS1712可能直接靶向微管蛋白。為了提供此種可能結果的證據，使用與AS1712結合之磁珠進行拉下試驗(pull-down assay)。首先，透過三步驟程序由3-(3-羥苯基)-3-氧代丙酸乙酯炔烴(ethyl 3-(3-hydroxyphenyl)-3-oxopropanoatealkyne)合成炔烴4(流程2A)，接著耦接至裝有聚乙二醇₁₂-疊氮連接體(linker)的磁珠上，以產生“磁珠-AS1712”(流程2B)。將H1975裂解物分別與磁珠-AS1712(mag-beads-AS1712)或磁珠-控制組(mag-beads-control)於4℃培養過夜後，免疫墨點法呈現mag-beads-AS1712僅拉下β-微管蛋白(圖9A)。接著，進行表面電漿共振(surface plasmon resonance)研究，以測量微管蛋白-AS1712複合物的解離常數(K_D)值。將不同濃度的AS1712注入微管蛋白固定之感測晶片表面，並監測複合物之形成。共振單元數量(其反應出所形成之複合物量)呈現劑量依賴性地增加(圖9B)。透過將數據擬合至穩態模型，以確定該複合物的K_D值為13.8μM。此數據表示AS1712與微管蛋白直接相互作用。

利用蛋白質限制水解分析(limited proteolysis)進一步表徵微管蛋白上的AS1712-結合位點。對於微管去穩定劑(microtubule destabilizing agent)，已知有兩種不同的微管蛋白結合位點：長春花鹼位點及秋水仙素位點。當藥物與微管蛋白結合時，其會誘導構形變化，此構形變化可透過胰蛋白酶限制水解 (limited trypsin digestion)分析進行探測(圖9C及9D)。在胰蛋白酶限制水解後，秋水仙素-位點藥物諾考達唑會導致β-微管蛋白解構(unfold)並產生增加量的βcol。相反地，相較於控制組水解反應(digestion)，長春花鹼-位點藥物敏克瘤穩定了α-及β-微管蛋白的折疊，並減少產生的βcol、αN及αC片段的數量。暴露於AS1712之微管蛋白樣品在胰蛋白酶作用後之產物型態類似於諾考達唑(圖9C及9D)。使用秋水仙素及AS1712進行秋水仙素位點的競爭測定，以確認AS1712結合於秋水仙素位點(圖9E)。如同於諾考達唑，AS1712的存在呈現劑量依賴性地降低秋水仙素螢光，而敏克瘤則沒有。

進行分子建模研究，以探討AS1712在異質雙體微管蛋白晶體結構之秋水仙素袋點中的結合模式。以秋水仙素(為晶體結構中之原始配體)的定位(orientation)作為參考。透過分子嵌合(docking)至秋水仙素結合袋點中而產生的AS1712結合模式(binding pose)可疊加於RMSD值為0.383Å之秋水仙素結構上(圖9F)。AS1712複合物之嵌合能量(docking energy)值(-32.8706kcal/mol)高於秋水仙素複合物的嵌合能量值(-4.47969kcal/mol)。於AS1712與α/β-微管蛋白二聚體之間發現各種距離於7Å內的鍵(圖9G)，包括AS1712與β-微管蛋白Ala250及Lys254之間的氫鍵、AS1712與α-微管蛋白Gln11之間的氫鍵、AS1712與β-微管蛋白Leu248、Lys254、Met259、Ala316及Lys352間的π-鍵(圖9H)。此等結果表示，AS1712結合於β-微管蛋白之秋水仙素結合袋點處。

示例性化合物AS1712克服P-醣蛋白介導之多重抗藥性

MTA誘導MDR之主要機制是P-gp過度表達，其亦是臨床上與癌症治療相關之最常見的抗藥機制。因此，測試AS1712及RJ-LC-15-8對KBtax、KBvin及CEM/VBL癌細胞株(過度表達P-gp)之細胞毒性作用。透過將人類口腔癌細胞 株KB分別暴露於太平洋紫杉醇及敏克瘤，以建立KBtax及KBvin細胞株。透過將人類T淋巴細胞白血病細胞株CCRF-CEM暴露於太平洋紫杉醇，以建立CEM/VBL細胞。KBtax、KBvin及CEM/VBL細胞對太平洋紫杉醇的抗藥因子(RF)值分別為10、70及214，對敏克瘤的抗藥因子分別為32、163及440(表5)。此等結果證實，該些細胞株對太平洋紫杉醇及敏克瘤具有抗性。相比之下，AS1712及RJ-LC-15-8對該些細胞株具有細胞毒性，其對該些細胞的作用等於或大於對母細胞的作用(表5)。值得注意的是，易莎平(ixabepilone)，用於晚期乳癌(不再對可用的化學療法產生反應)之第二線MTA，不能有效地抑制此等多重抗藥性細胞株的存活率(表5)。

表5-AS1712對KB、CCRF-CEM細胞及其多重抗藥性子細胞株之細胞毒性

^aRF：抗藥因子(於抗藥性細胞株之IC₅₀/於母細胞株之IC₅₀)

亦測試AS1712及RJ-LC-15-8對三陰性乳癌(TNBC)細胞株(HDPQ1)及其太平洋紫杉醇-抗藥性子細胞株(HDPQ1/TAX)之細胞毒性。HDPQ1/TAX細胞對太平洋紫杉醇之RF值為167。AS1712及RJ-LC-15-8對 HDPQ1/TAX細胞具有細胞毒性，其對該些細胞的作用等於或大於對母細胞的作用。

表6-AS1712及RJ-LC-15-8對HDPQ1細胞及其太平洋紫杉醇-抗藥性子細胞株之細胞毒性

^aRF：抗藥因子(於抗藥性細胞株之IC₅₀/於母細胞株之IC₅₀)

為了評估RJ-LC-15-8在體內對腫瘤存活率之活性，對BAtax/c小鼠移植KBtax細胞，接著用DMSO、太平洋紫杉醇(15mg/kg)或RJ-LC-15-8(8mg/kg)進行每週3次之腹膜內注射(每組n=5)。處理21天後，相較於太平洋紫杉醇及DMSO組，RJ-LC-15-8組呈現腫瘤生長顯著降低(平均腫瘤大小：DMSO為1109±128.3mm³；太平洋紫杉醇為868.7±121.4mm³；RJ-LC-15-8為528.4±101.6mm³；圖10A及11A)。腫瘤組織之TUNEL染色顯示RJ-LC-15-8處理誘導細胞凋亡(圖10B)。在實驗結束時，對體重及肝及腎功能之血清生化指標沒有負面影響(圖11B和表7)。因此，RJ-LC-15-8低毒性地抑制MDR型癌症腫瘤的生長。

表7-對KBtax異位移植腫瘤之血清生化指標活性(數據為平均值±SEM)

由於RJ-LC-15-8對KBtax細胞呈現抑制活性，因而試圖確定其作用是否與P-gp有關，即其是透過直接抑制或是由於其不是P-gp受質藥物(P-gp substrate)。因此，研究RJ-LC-15-8對P-gp排出活性及其表達的影響。羅丹明排出(rhodamine efflux)分析顯示，RJ-LC-15-8不能直接抑制KBtax細胞中之泵活性，但已知的P-gp抑制劑維拉帕米(Verapamil)卻可以(圖10C)。免疫墨點研究顯示，RJ-LC-15-8不會影響KBtax細胞中的P-gp表達，而會誘導凋亡指標PARP及半胱天冬酶-9(caspase-9)的裂解，並增加有絲***期指標細胞週期蛋白B1(cyclin B1)及磷酸化組織蛋白H3(p-HH3)(圖10D)。α-微管蛋白的原位免疫螢光染色顯示，RJ-LC-15-8處理會抑制微管聚合，並破壞紡錘絲組織(圖10E)。RJ-LC-15-8誘導多重抗藥性細胞凋亡，而不直接干擾P-gp表達或活性，更廣泛地講，RJ-LC-15-8之細胞毒性機制與P-gp無關。

實驗部分

[一般實驗]在使用前，透過習知方法，對無水溶劑進行新乾燥及純化。使用預先塗有silia gel 60 F254(Merck)的TLC玻璃片，透過TLC檢測所有反應的進度。在Geduran^® Si 60(Merck)上進行管柱層析。以Bruker AV-III 400MHz、Bruker N-600、Bruker AV-400或AV-500 MHz光譜儀記錄¹H及¹³C NMR光譜，並以δ(ppm)測量化學位移，且以殘留溶劑峰作為內標(CDCl₃，在¹H NMR中為δ 7.26ppm，在¹³C NMR中為δ 77ppm；CD₃OD，在¹H NMR中為δ3.31ppm，在¹³C NMR 中為δ 49.0ppm；DMSO-d₆，在¹H NMR中為δ 2.50ppm，在¹³C NMR中為δ 39.52ppm。耦合常數(J)以赫茲(Hz)為單位，所用的***(splitting)縮寫如下：s/單峰；d/二重峰；t/三重峰；d/四重峰。在Buchi 565設備上記錄熔點。

抗PARP、半胱天冬酶-3、半胱天冬酶-8、半胱天冬酶-9、Bax及MDR-1之抗體購自Cell Signaling。抗細胞週期蛋白B1、細胞週期蛋白A、GADPH及MTCO1之抗體獲自Santa Cruz。抗α-微管蛋白、β-微管蛋白及β-肌動蛋白之抗體來自Sigma Aldrich。抗細胞色素c之抗體製劑來自Abcam。抗p-HH3(S10)之抗體製劑來自Merck Millipore。辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase)標記抗小鼠及抗兔抗體購自Santa Cruz。異硫氰酸螢光素(Fluorescein isothiocyanate)標記抗小鼠抗體來自Thermo Fisher Scientific。Roswell Park Memorial Institute(RPMI)1640培養基、DMEM培養基(Dulbecco’s Modified Eagle medium)及胎牛血清購自GIBCO Life Technologies。原位細胞死亡測定(TUNEL)套組購自Roche。微管蛋白聚合測定套組獲自Cytoskeleton。BCA蛋白測定套組購自Pierce。S系列感測晶片(Series S Sensor Chip)SA及HBS-EP+電泳緩衝液(running buffer)購自GE Healthcare。

藉由高通量篩選鑑定AS1712

通過高通量篩選，利用2百萬個化合物之資料庫來評估10μM濃度下對H1975肺癌細胞之抗增殖活性。初步篩選的變異係數(CV%)及Z'值分別確定為4.9%及0.58。在第一次篩選中，~6,800個小分子對H1975細胞表現出>80%的生長抑制。針對其他八種肺癌細胞，對該些化合物作進一步篩選，包括臨床分離株(CL25、CL83、CL97、CL100、CL141、CL152)、ATCC細胞株(PC-9)及其衍生抗藥克隆(PC9/IR)。對所有測試細胞進行IC₅₀

6μM的標準過濾，僅保留232 個小分子作進一步研究。AS1712是該些分子中的其中一者，其在肺癌細胞上表現優異的細胞毒性作用，及癌細胞與正常細胞之間顯著的治療窗(therapeutic window)。

細胞株及細胞培養

從一名分化不良腺癌(poorly differentiated adenocarcinoma)的64歲男性患者中分離出CL1-0細胞。PC9細胞獲自C.H.Yang博士(國立臺灣大學腫瘤醫學研究所腫瘤研究中心)。Molt4血癌細胞獲自Tang K.Tang博士(中央研究院生物醫學科學研究所)。KB、KBtax、KBvin、CCRF-CEM及CEM/VBL細胞獲自T.C.Lee博士(中央研究院生物醫學科學研究所)。KB細胞株最初源自於口腔表皮癌，且已被HeLa細胞污染。Hs578T、MDA-MB-231、37T及82T細胞獲自Y.S.Lu博士(國立臺灣大學醫學院內科部)。37T及82T細胞是分離自乳癌患者，並於2% IH培養基中培養。SKOV-3、IGR-OV1、Ovcar-3、HCT116、HT-29、Colon205、SW620、Du-145及PC-3細胞獲自S.L.Yu博士(國立臺灣大學醫學院-醫學檢驗暨生物技術學系)。NBE細胞供自Reen Wu博士(加州大學戴維斯分校生理與细胞生物學解剖學系)，並在氣管上皮基底培養基(bronchial epithelial basal medium)中培養。SAS及OECM1細胞獲自C.Y.Chen博士(長庚科技大學民生學院健康產業科技研究所/Graduate Institute of Health Industry Technology and Research Center for Industry of Human Ecology)。A549、H1975、BT-549及HFB細胞購自美國典型培養物保藏中心ATCC(Rockville,MD,USA)。通常，於5%CO₂及95%空氣之氛圍下，在潮濕培養箱中以RPMI 1640培養基或DMEM(補充有10%熱滅活胎牛血清及1%青黴素-鏈黴素)中培養細胞。

細胞毒性分析

將細胞接種到96孔板之孔中(2000個細胞/孔)。過夜培養後，將細胞用不同濃度的化合物處理72小時。使用CellTiter 96 AQueous單溶液細胞增殖檢測(MTS)試劑測定細胞毒性。用化合物處理後，將20μL MTS試劑添加至每孔中，並將板在37℃下培養1~4小時。接著，使用VersaMax微量盤分析儀(Molecular Devices)測定各孔中培養基在490nm的吸光度。

細胞群落形成試驗

將細胞接種到六孔板之孔中(1000細胞/孔)。過夜培養後，將細胞用各種濃度的AS1712處理2週。接著，將每孔中的菌落用3.7%多聚甲醛固定，用0.04%結晶紫(crystal violet)染色，並溶於1ml DMSO中。使用VersaMax微量盤分析儀讀取各DMSO溶液在590nm處的吸光度。

細胞週期分析

處理後，將細胞用胰蛋白酶作用並在冰冷的70%乙醇中固定過夜。用PBS洗滌固定的細胞，並用0.5mL的碘化丙錠(10μg/mL)/RNase(20μg/mL)溶液染色30分鐘。用FACSCanto流式細胞儀(Becton Dickinson)分析細胞內DNA含量。

免疫沉澱法及免疫墨點法

收集細胞，並在具有蛋白酶抑制劑(Roche)之RIPA緩衝液(20mM Tris-HCl、150mM NaCl、1mM Na₂EDTA、1%脫氧膽酸鈉、1% IGEPAL CA-630、0.1%SDS、pH 7.5)中裂解細胞。通過BCA測定法測量蛋白質濃度。為了進行免疫沉澱，將蛋白質萃取物與磁珠-AS1712(mag-beads-AS1712)或磁珠-控制組(mag-beads-control)在4℃培養過夜，接著於進行免疫墨點之前用PBS洗滌五次。為了進行免疫墨點法，將等量的變性蛋白通過SDS-PAGE凝膠分離，接著轉漬至 PVDF膜(Millipore)，其分別用含5%脫脂牛奶之PBS及0.1% Tween-20(Sigma Aldrich)進行阻攔(blocking)1小時。接著，將各個膜與一抗在4℃下培養過夜，隨後與辣根過氧化物酶偶聯的二抗在室溫下培養1小時。通過增強的化學發光檢測(enhanced chemiluminescence detection)，直接觀察訊號，並使用高感度自動冷光影像分析儀(UVP Biospectrum Imaging System)擷取影像。

免疫螢光染色法

以3.7%多聚甲醛固定細胞或微管星體(microtubule aster)，並用0.1% Triton X-100進行透化(permeabilized)，且在4℃下用抗α-微管蛋白(1：1000稀釋)染色過夜，接著再與異硫氰酸螢光素偶聯的二抗(1：500)在37℃下培養1小時。隨後，用抗褪色封固劑(Prolong Gold Antifade Reagent)將細胞固定並用DAPI(Thermo Fisher Scientific)染色，之後用LSM 700雷射掃描式共軛焦顯微鏡(Carl Zeiss)擷取影像。

體內微管組合檢測

用化合物處理細胞樣本6小時，接著收集細胞並在20mM Tris-HCl、1mM MgCl₂、2mM EGTA、0.5% IGEPAL CA-630、2mM PMSF、200U/mL抑肽酶(aprotinin)及蛋白酶抑制劑混合物(protease inhibitor cocktail,pH 6.8)中進行裂解。在室溫下將各裂解物以16,000rpm離心15分鐘後，將其含有可溶性單體微管蛋白之上清液與含有聚合微管蛋白之顆粒收集層(fraction)分開進行免疫墨點法。

體外微管蛋白聚合檢測

根據製造商的說明，使用微管蛋白聚合分析套組(Cytoskeleton公司)中的試劑。將含純化豬微管蛋白(4mg/mL；純度>99%)之G-PEM緩衝液(80 mM PIPES、2mM MgCl₂、0.5mM EGTA、1mM GTP、15%甘油、pH 6.9)與各測試化合物混合於96孔板之孔中。接著，VersaMax微量盤分析儀在37℃下每分鐘記錄A340值1小時。

體外微管成核檢測

於37℃下，將純化的中心體與豬微管蛋白(Cytoskeleton公司，於80mM PIPES、1mM MgCl₂、1mM EGTA及1mM GTP中，pH 6.8)在含有或不含AS1712下培養8分鐘。將微管星體固定於1%戊二醛中，並沉渣於經酸處理之蓋玻片上，最後用抗α-微管蛋白進行免疫螢光。使用MetaMorph影像分析軟體測量微管星體的纖維長度(n=20/組)。

結合親合性分析

利用表面電漿子共振技術，分析AS1712對微管蛋白的結合親合力。對S系列感測晶片SA進行三次連續1分鐘注射1M NaCl(於50mM NaOH中)之處理，接著將50μg/mL生物素-微管蛋白(Cytoskeleton公司)固定在Biacore T200系統(GE Healthcare)之感測晶片表面上，以達到3,000個共振單位。保留晶片上之一個流動槽(flow cell)以作為負控制組。使用Biocytin(Sigma Aldrich)，以封閉(block)任何剩餘之未修飾的鏈霉親合素(streptavidin)位點。在感測晶片表面上分別注入不同濃度的AS1712(於10mM HEPES、150mM NaCl、3mMEDTA及0.05%表面活性劑P20中，pH 7.4)，以在25℃下測量AS1712與微管蛋白之結合及解離。使用數據分析軟體(Biacore T200 Evaluation Software)中之穩態擬合模式(steady-state fitting mode)來計算K_D值。

蛋白質限制水解(limited proteolysis)分析

微管蛋白(1mg/mL)分別與測試化合物於0.1M嗎啉乙磺酸(morpholino ethanesulfonic acid)、1mM MgCl₂、1mM EGTA、pH 6.9中以30℃培養30分鐘，接著將25μg/mL胰蛋白酶(經TPCK處理，Sigma Aldrich；1：40[w/w]胰蛋白酶/微管蛋白)加入溶液，於4℃下進行10分鐘的消化作用(digestion)。樣本透過15% SDS-PAGE凝膠進行電泳，並用考馬斯亮藍(Coomassie brilliant blue)R250進行染色。使用高感度自動冷光影像分析儀(UVP Biospectrum Imaging System)掃描並量化影像。

秋水仙素競爭分析

將微管蛋白(3M)及秋水仙素(3M)與各種濃度的AS1712、諾考達唑、或敏克瘤在80mM PIPES、2mM MgCl₂、0.5mM EGTA、pH 6.9中以37℃培養1小時。使用Infinite M200 plate reader(Tecan)記錄螢光強度(激發及放光波長分別於365及435nm處)。螢光值歸一化(normalized)至DMSO控制。

分子建模

使用DMA-秋水仙素-結合的微管蛋白異質雙體晶體結構(PDB-ID：1SA0)進行嵌合(docking)研究。使用Discovery Studio(Accelrys Inc.)進行分子嵌合，以評估AS1712於微管蛋白之秋水仙素結合位點中之可能結合模式。使用Discovery Studio中之Prepare Protein protocol(其對結構進行質子化並***missing loop區域)，以準備初始的晶體結構。利用Discovery Studio中之CDOCKER docking protocol，基於格子為基礎(grid-based)之分子嵌合方法以及將結合能最小化之CHARMm力場來進行嵌合。透過隨機旋轉及高溫分子動力學，從每個初始配體結構產生隨機配體構形。透過格子為基礎之模擬退火及最小化，對隨機構形進行精修(refine)。每個模式係基於其最高docking score作選擇， 以進行進一步的交互分析。使用Discovery Studio中之View Interactions工具執行嵌合後分析，以鑑定出配體-蛋白質氫鍵、突起(bump)及π相互作用。

羅丹明(Rhodamine)排出測定

收集KBtax細胞(2.5×10⁵/測試)，並在含有5mM羅丹明之低溫培養基中在冰上放置1小時。接著，將細胞與一指定化合物重懸(resuspend)於加熱至37℃的培養基中，並於相同溫度之水浴中培養1小時，以進行排出測定。透過FACSCanto流式細胞技術以定量螢光強度。

異位移植模型

使用H1975、MDA-MB-231及KBtax異位移植模型，於6週齡BALB/c裸鼠(NARLabs，台灣台北)之右腹腸部進行接種後，建立腫瘤。形成腫瘤後，將已溶於DMSO之賦形劑及測試化合物分別以每週三次腹膜內注射至各別組動物中。在每次給藥之前測量每隻動物的體重及腫瘤體積。腫瘤體積計算為0.5W²L(W為較小直徑的寬度，L為較大直徑的長度)。根據中央研究院生物醫學科學研究所實驗動物照護及使用委員會(Institutional Animal Care and Use Committee)所訂之程序及指南進行動物實驗。

一般程序A：合成AS1712及其類似物

將4-苯胺(0.616mmol)、苯甲醯乙酸酯(0.71mmol)、TsOH￭H₂O(0.03mmol)及Na₂SO₄(6.16mmol)之CHCl₃(3ml)溶液攪拌迴流48小時。將反應混合物真空濃縮並用己烷或Et₂O洗滌。接著，收集濾液並蒸發以獲得亞胺。將亞胺溶於二苯醚(1ml)中，並加熱至250℃達10分鐘。將反應混合物冷卻至室溫。以Et₂O進行溶提(trituration)後，進行過濾收集產物。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,AS1712)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率79%；熔點308-311℃；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.98(s,1H),8.71(s,1H),8.17(dd,J=8.7Hz,J=1.5Hz,1H),7.87-7.83(m,3H),7.61-7.58(m,3H),6.43(s,1H),4.35(q,J=7.1Hz,2H),1.36(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.1,165.8,151.4,144.1,134.4,132.0,131.2,129.5,128.0,127.5,124.8,124.6,120.0,108.7,61.3,14.7。

2-(4-甲氧基苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(4-methoxyphenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2c)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率73%；熔點325-330℃；IR(neat)：3260,3159,2981,1697,1635,1574,1538,1486,1456,1395,1248,1230,1191,1124,1022,820,786cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.84(s,1H),8.69(s,1H),8.15(dd,J=8.7Hz,J=2.2Hz,1H),7.95-7.90(m,2H),7.83(d,J=8.5Hz,1H),7.14(d,J=8.5Hz,1H),6.40(s,1H),4.35(q,J=7.2Hz,2H),3.85(s,3H),1.36(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.2,165.8,161.8,150.9,143.9,132.0,129.5,127.5,126.3,124.7,124.5,119.7,114.9,108.0,61.3,56.0,14.7.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₉H₁₆NO₄[(M)-]322.1079，測得值[(M)-]322.1084。

2-(4-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(4-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2d)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率83%；熔點335-340℃；IR(neat)：3261,3145,3083,2979,2912,1711,1639,1552,1502,1487,1417,1391,1257,1223,1130,1111,1027,923,844,774,761cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.97(s,1H),8.70(s,1H),8.18(dd,J=8.5Hz,J=1.9Hz,1H), 7.95-7.90(m,2H),7.83(d,J=9.0Hz,1H),7.44(t,J=8.5Hz,1H),6.42(s,1H),4.35(q,J=7.1Hz,2H),1.36(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.2,165.8,164.8,163.2,150.2,143.9,132.1,130.7,130.5,130.5,127.5,124.9,124.5,119.8,116.6,116.4,108.9,61.3,14.7；ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₃NO₃F[(M)-]310.0879，測得值[(M)-]310.0871。

2-(4-溴苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(4-bromophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2e)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率87%；熔點345-350℃；IR(neat)：3255,3140,3085,2976,1711,1638,1571,1491,1409,1364,1269,1254,1074,1010,914,820,776,764cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.99(s,1H),8.70(s,1H),8.18(dd,J=8.6Hz,J=1.9Hz,1H),7.85-7.79(m,5H),6.45(s,1H),4.35(q,J=6.9Hz,2H),1.37(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.7,150.0,143.9,133.4,132.5,132.2,130.1,127.5,124.9,124.8,124.6,119.8,109.0,61.3,14.7.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₃NO₃Br[(M)-]370.0079，測得值[(M)-]370.0081。

2-(4-羥苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2f)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率48%；熔點313-316℃；IR(neat)：3252,3148,3082,2986,2906,1715,1638,1557,1505,1496,1487,1443,1262,1231,1174,1128,1028,965,898,839,804,789,772,755,705,667cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.76(s,1H),10.11(s,1H),8.69(s,1H),8.14(dd,J=9.0Hz,J=1.8Hz,1H),7.83(d,J=8.6Hz,1H),7.71(d,J=8.7Hz,2H),6.95(d,J=8.9Hz,2H),6.34(s,1H),4.35(q,J=7.0Hz,2H),1.36(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 176.6,165.3,159.9,150.7,143.4,131.4,129.0,127.0, 124.1,124.0,119.1,115.8,107.0,60.8,14.2.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₄NO₄[(M)-]308.0923，測得值[(M)-]308.0930。

2-(3-甲氧基苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-methoxyphenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2g)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率85%；熔點277-280℃；IR(neat)：3140,3077,2968,1713,1643,1550,1504,1265,1235,1128,1032,882,840,771,754,706,669cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.93(s,1H),8.71(s,1H),8.18(dd,J=9.0Hz,J=1.5Hz,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),7.51(t,J=8.2Hz,1H),7.43-7.38(m,2H),7.17(d,J=8.5Hz,1H),6.45(s,1H),4.36(q,J=7.1Hz,2H),3.87(s,3H),1.36(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.8,160.0,151.0,143.8,135.6,132.1,130.7,127.5,124.8,124.6,120.2,119.8,116.9,113.4,108.9,61.3,55.9,14.7.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₉H₁₆NO₄[(M)-]322.1079，測得值[(M)-]322.1085。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2h)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率88%；熔點307-310℃；IR(neat)：3247,3143,3079,2981,2901,1715,1639,1583,1505,1486,1444,1264,1233,1174,1130,1026,901,840,790,773,756,706cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.98(s,1H),8.71(s,1H),8.19(dd,J=9.1Hz,J=2.4Hz,1H),7.85(d,J=8.7Hz,1H),7.79-7.70(m,2H),7.68-7.63(m,1H),7.45(t,J=8.7Hz,1H),6.48(s,1H),4.37(q,J=7.1Hz,2H),1.37(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.7,163.5,161.9,149.7,143.8,136.5,132.2,131.7,131.6,127.5,125.0,124.6,124.2,119.9,118.0,117.9,115.1,114.9,109.2,61.3,14.7.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₃NO₃F[(M)-]310.0879，測得值[(M)-]322.0873。

4-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 4-oxo-2-(3-(trifluoromethyl)phenyl)-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2i)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率82%；熔點320-325℃；IR(neat)：3255,3140,3082,2984,2906,1715,1637,1582,1505,1486,1443,1262,1174,1128,1111,1025,840,804,789,772,755,705,668cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 12.08(s,1H),8.72(s,1H),8.24-8.15(m,3H),7.97(d,J=8.0Hz,1H),7.84(t,J=8.2Hz,2H),6.52(s,1H),4.37(q,J=7.1Hz,2H),1.37=8(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.7,149.6,143.9,135.3,132.3,130.7,130.5,130.3,130.1,129.9,127.7,127.5,125.3,125.0,124.7,123.5,119.9,109.6,61.3,14.7.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₉H₁₃NO₃F₃[(M)-]360.0848，測得值[(M)-]360.0842。

2-(3-羥苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-hydroxyphenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2j)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率27%；熔點268-309℃；IR(neat)：3204,1724,1583,1500,1488,1272,1135,833,759,711,683cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.92(s,1H),9.88(s,1H),8.70(s,1H),8.17(dd,J=1.4,8.7Hz,1H),7.84(d,J=8.7Hz,1H),7.39(t,J=7.9Hz,1H),7.24(d,J=7.5Hz,1H),7.18(s,1H),6.99(d,J=7.6Hz,1H),6.33(s,1H),4.36(q,J=7.1Hz,2H),1.36(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.8,158.2,151.3,143.8,135.6,132.0,130.7,127.5,124.8,124.6,119.8,118.6,118.1,114.6,108.6,61.3,14.7；ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₅NO₄[M+H]⁺ 310.1079，測得值310.1079。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸甲酯(methyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2k)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率82%；熔點357-360℃；IR(neat)：3252,3143,3082,2978,1704,1636,1578,1489,1437,1395,1279,1257,1236,1119,973,840,768,697,683,669cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.98(s,1H),8.73(s,1H),8.18(d,J=8.9Hz,1H),7.89-7.83(m,3H),7.64-7.59(m,3H),6.42(s,1H),3.91(s,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,166.3,151.3,143.9,134.3,132.0,131.2,129.5,128.0,127.7,124.7,124.6,119.9,108.9,52.7.EI-HRMS(m/z)：計算值C₁₇H₁₃NO₃[(M)-]279.0895，測得值[(M)-]279.0900。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸異丙酯(isopropyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,2l)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率73%；熔點291-294℃；IR(neat)：3260,3146,3085,2973,1713,1644,1580,1549,1497,1266,1128,838,750,690,683cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.97(s,1H),8.70(s,1H),8.18(dd,J=8.5Hz,J=1.8Hz,1H),7.88-7.84(m,3H),7.63-7.59(m,3H),6.43(s,1H),5.19(sept,J=6.2Hz,1H),1.37(d,J=6.2Hz,6H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,165.3,151.2,143.9,134.3,132.1,131.2,129.5,128.0,127.5,125.2,124.6,119.8,108.8,68.7,22.2.EI-HRMS(m/z)：計算值C₁₉H₁₇NO₃[(M)-]307.1208，測得值[(M)-]307.1206。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸甲酯(methyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-22)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率71%；熔點370℃；¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.98(s,1H),8.71(d,J=1.8Hz,1H),8.19(dd,J=8.6Hz,J=1.9Hz,1H),7.84(d,J=8.8Hz,1H),7.78-7.70(m,2H),7.67-7.62(m,1H),7.48-7.42(m,1H),6.47(s,1H),3.90(s,3H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.3,166.2,163.7,161.7,149.7,143.9,136.5,132.1,131.7,131.6,127.6,124.7,124.2,119.9,118.1,117.9,115.1,114.9,109.2,52.7；¹⁹F NMR(470MHz,DMSO-d ₆ )δ -111.9；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₁₇H₁₃NO₃F[M+H]⁺ 298.0879，測得值[M+H]⁺ 298.0871。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸異丙酯(isopropyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-23)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率68%；熔點310℃；¹H NMR(500MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ 8.95(d,J=1.9Hz,1H),8.21(dd,J=8.7Hz,J=2.3Hz,1H),7.68(d,J=8.8Hz,1H),7.55-7.44(m,3H),7.25-7.20(m,1H),6.54(s,1H),5.29-5.20(m,1H),1.37(d,J=6.3Hz,6H)；¹³C NMR(125MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ 179.7,166.2,164.2,162.2,151.0,143.5,136.3,136.3,132.8,131.2,131.2,128.3,126.6,124.5,123.5,123.5,118.9,118.1,117.9,114.8,114.6,109.3,69.4,22.0；¹⁹F NMR(470MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ -111.7；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₁₉H₁₇NO₃F[M+H]⁺ 326.1192，測得值[M+H]⁺ 326.1196。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸苯基酯(phenyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-24)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率65%；熔點322℃；¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆ )δ 12.06(s,1H),8.88(d,J=1.2Hz,1H),8.33(dd,J=8.9Hz,J=2.1Hz,1H),7.92(d,J=8.8Hz,1H),7.81-7.73(m,2H),7.69-7.63(m,1H),7.53-7.43(m,3H),7.36-7.31(m,3H),6.53(s,1H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 176.8,164.1,163.2,161.2,150.7,149.4,143.9,136.0,132.1,131.2,131.2,129.6,128.0,126.0,124.2,123.8,123.8,123.5,122.0,119.8,117.6,117.5,114.7,114.5,108.9；¹⁹F NMR(470MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ -111.8；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₂₂H₁₅NO₃F[M+H]⁺ 360.1036，測得值[M+H]⁺ 360.1031。

2-(3-溴苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-bromophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-25)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率88%；熔點325℃；¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆ )δ 12.00(s,1H),8.70(d,J=2.1Hz,1H),8.18(dd,J=8.9Hz,J=2.1Hz,1H),8.07(s,1H),7.88-7.78(m,3H),7.54(t,J=7.9Hz,1H),6.45(s,1H),4.36(q,J=6.9Hz,2H),1.36(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 176.8,165.2,149.1,143.4,136.1,133.4,131.6,131.1,130.0,127.0,126.8,124.5,124.1,122.2,119.4,108.8,60.9,14.2；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₅NO₃Br[M+H]⁺372.0235，測得值[M+H]⁺ 372.0232。

2-(2-(2-(2-(2-羥基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸酯(2-(2-(2-(2-hydroxyethoxy)ethoxy)ethoxy)ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-3)

將含有SM(10mg，1eq.)及CDI(6.4mg，1.05eq.)之除水DMF(0.05M，0.8mL)加至乾燥且氮氣充填之10mL Schlenk燒瓶(裝有攪拌棒及橡皮塞(septum))中，並於室溫下攪拌4小時。加入K₂CO₃(7.8μL，1.5eq.)及TEG(9.8μL，1.5eq.)，使反應混合物在室溫攪拌過夜。反應完成後，抽真空移除DMF，且粗固體透過管柱層析進行純化，以得到固體產物(10mg，60%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.90(s,1H),8.10(d,J=7.1Hz 1H),7.82-7.60(m,3H),7.39(br,3H),6.36(s,1H),4.43(t,J=4.5Hz,2H),3.79(t,J=4.6Hz,2H),3.73-3.59(m,10H),3.55(t,J=4.6Hz,2H)；¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)178.7,165.9,151.3,143.2,133.9,132.4,130.7,129.1,128.4,127.2,125.2,124.3,118.8,109.1,72.5,70.7,70.6,70.5,70.3,69.2,64.3。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸(4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylic acid,2a)

AS1712(50mg，0.17mmol)、1：9 EtOH/H₂O(1.9ml)及NaOH(70mg，1.71mmol)加至裝有攪拌棒及橡皮塞之試管中。所得之混合物於40℃下攪拌4小時。抽真空移除EtOH後，以10%HCl酸化混合物並收集白色沉澱物。產率99%；熔點285-290℃；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 12.06(s,1H),8.70(s,1H),8.16(d,J=8.7Hz,1H),7.91-7.84(m,3H),7.62-7.58(m,3H),6.40(s,1H)；¹³C NMR (100MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.4,167.3,151.1,143.7,134.3,132.3,131.1,129.5,128.0,127.7,125.8,124.6,119.6,108.7。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸鈉(sodium 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,RJ-LC-15-21)

將化合物2a(20mg，0.075mmol)、1：1 EtOH/H₂O(0.5ml)及NaOH(3mg，0.075mmol)加至裝有攪拌棒及橡皮塞之試管中。所得之混合物於室溫攪拌10分鐘。抽真空移除溶劑，以得到產物。產率93%；IR(neat)：3152,1604,1577,1545,1492,1403,765cm^-1；¹H NMR(400MHz,CD₃OD)8.93(d,J=1.8Hz,1H),8.27(dd,J=8.6Hz,J=2.0Hz,1H),7.83-7.78(m,2H),7.71(d,J=8.7Hz,1H),7.60-7.55(m,3H),6.54(s,1H)；¹³C NMR(150MHz,CD₃OD)δ179.6,172.8,152.1,141.8,134.1,133.9,133.0,130.5,128.9,127.1,126.2,123.8,117.5,107.4；HRMS(ESI)(m/z)：計算值C₁₆H₁₁NO₃Na₂[M+Na]⁺ 310.0450，測得值310.0451。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸(2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylic acid,RJ-LC-15-26)

將RJ-LC-15-8(200mg，0.64mmol)、1：9 EtOH/H₂O(7.1ml)及NaOH(256mg，0.64mmol)加至裝有攪拌棒及橡皮塞之試管中。所得之混合物於40℃下攪拌4小時。抽真空移除EtOH後，以10%HCl酸化混合物並收集白色沉澱物。產率99%；熔點>400℃；¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆ )δ 12.15(s,1H),12.04 (s,1H),8.70(d,J=2.1Hz,1H),8.17(dd,J=8.7Hz,J=2.0Hz,1H),7.89(d,J=8.8Hz,1H),7.80-7.71(m,2H),7.67-7.62(m,1H),7.48-7.42(m,1H),6.51(s,1H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 176.6,166.8,163.2,161.2,149.4,143.3,136.1,131.9,131.2,131.1,127.1,125.6,123.9,123.8,123.8,119.4,117.6,117.4,114.7,114.5,108.4；¹⁹F NMR(470MHz,DMSO-d ₆ )δ -111.9；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₁₆H₁₁NO₃F[M+H]⁺ 284.0723，測得值[M+H]⁺ 284.0722。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸2-乙基丁基酯(2-ethyl butyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate)

將含有RJ-LC-15-26(50mg，0.18mmol)及CDI(30mg，0.19mmol)之無水DMF溶液(5ml)加至乾燥且經N₂充填之10mL Schlenk燒瓶(裝有攪拌棒及橡皮塞)中。反應混合物於室溫下攪拌1.5小時，接著用K₂CO₃(26mg，0.19mmol)、2-乙基丁醇(19mg，0.19mmol)處理並攪拌過夜。反應完成後，抽真空移除DMF，並透過管柱層析進行純化，以得到固體產物。¹H NMR(500MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ 8.95(d,J=2.1Hz,1H),8.24(dd,J=8.9Hz,J=1.9Hz,1H),7.75(d,J=8.6Hz,1H),7.59-7.49(m,3H),7.30-7.25(m,1H),6.56(s,1H),4.29(d,J=5.8Hz,2H),1.74-1.65(m,1H),1.54-1.44(m,4H),0.96(t,J=7.4Hz,6H)；¹³C NMR(125MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ 180.1,167.1,164.7,162.7,151.8,144.1,136.7,136.7,133.2,131.7,131.7,128.6,126.7,124.9,124.0,123.9,119.6,118.5,118.3,115.2,115.0,109.6,68.0,41.3,24.0,11.3；¹⁹F NMR(470MHz,CDCl₃/CD₃OD)δ -112.3。

N-乙基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧醯胺(N-ethyl-4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxamide,2b)

將RJ-LC-15-01(10mg，0.038mmol)及CDI(6.4mg，0.04mmol)之無水DME溶液(0.8ml)加至乾燥且經N₂充填之10mL Schlenk燒瓶(裝有攪拌棒及橡皮塞)中。反應混合物於室溫下攪拌4小時，接著用TEA(7.9μL，0.057mmol)、乙胺鹽酸鹽(ethylamine hydrochloride，4.6mg，0.057mmol)處理並攪拌過夜。反應完成後，抽真空移除DMF，並透過管柱層析進行純化，以得到固體產物。產率64%；熔點330-340℃；IR(neat)：3561,3271,3070,2969,1629,1577,1494,1295,1253,1149,1081,1048,969,914,836,803,765,692,681cm^-1；¹H NMR(600MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 8.59(s,1H),8.15(d,J=8.8Hz 1H),7.76-7.71(m,3H),7.56-7.52(m,3H),6.59(s,1H),3.46(q,J=7.4Hz,2H),1.26(t,J=7.4Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 179.4,167.5,152.4,142.3,133.9,131.6,130.9,130.1,129.1,127.3,123.9,123.5,118.9,108.6,35.0,14.3.ESI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₇N₂O₂[(M)-]293.1290，測得值[(M)-]293.1287。

N-乙基-2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧醯胺(N-ethyl-2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxamide,RJ-LC-15-27)

將RJ-LC-15-26(50mg，0.18mmol)及CDI(30mg，0.18mmol)之無水DMF溶液(3.5ml)加至乾燥且經N₂充填之10mL Schlenk燒瓶(裝有攪拌棒及橡皮塞)中。反應混合物於室溫下攪拌4小時，接著用TEA(26μL，0.18mmol)、乙胺鹽酸鹽(15mg，0.18mmol)處理並攪拌過夜。反應完成後，抽真空移除DMF，並透過管柱層析進行純化，以得到固體產物。產率82%；熔點358℃；¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.87(s,1H),8.70(t,J=5.5Hz,1H),8.64(d,J=2.0Hz,1H), 8.13(dd,,J=8.7Hz,,J=2.1Hz,1H),7.81-7.70(m,3H),7.67-7.61(m,1H),7.47-7.41(m,1H),6.45(s,1H),3.32(m,2H),1.14(t,J=7.4Hz,3H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.1,165.2,163.2,161.2,148.9,142.0,136.2,131.2,131.1,130.7,129.5,124.0,123.7,118.8,117.4,117.3,114.6,114.4,108.3,34.1,14.8；¹⁹F NMR(470MHz,DMSO-d ₆ )δ -112.0；FAB-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₆N₂O₂F[M+H]⁺ 311.1196，測得值[M+H]⁺ 311.1187。

6-(乙氧基甲基)-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(6-(ethoxymethyl)-2-phenylquinolin-4(1H)-one,2m)

將AS1712(100mg，0.341mmol)之無水THF(0.7ml)加至裝有攪拌棒及橡皮塞之燒瓶中，接著於冰浴及N₂氛圍下滴加DIBAL-H(0.85ml，1.2M於甲苯中)。在0℃下攪拌1小時後，用MeOH淬熄溶液並進行蒸發，以得到粗產物。粗產物透過快速管柱層析(MeOH/DCM)進行純化，以得到一級醇。接著，將一級醇(80mg，0.318mmol)懸浮於無水Et₂O(1.1ml)上，並在N₂氛圍上用PBr₃(30μL，0.318mmol)緩慢處理。迴流2小時後，用H₂O淬熄混合物，並過濾收集固體產物。最後，將溴化芐(100mg，0.318mmol)懸浮於EtOH(10.6ml)上，並用DIPEA(498μL，2.86mmol)處理。於室溫下攪拌過夜後，澄清溶液進行蒸發除去溶劑，並透過快速管柱層析(MeOH/DCM)進行純化，以得到RJ-LC-15-16。產率46%；熔點218-222℃；IR(neat)：3059,2966,2925,2853,1649,1594,1577,1543,1500,1252,1097,1084,800,773,696,684,664,560,516cm^-1；¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ 10.08(s,1H),8.24(s,1H),7.69-7.64(m,4H),7.46-7.43(m,3H),6.43(s,1H),4.57(s,2H),3.54(q,J=7.2Hz,2H),1.23(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ 178.9,150.8,140.1,134.4,132.0,130.4,129.0,127.2,124.9,124.4,118.9,108.2,72.3,65.8,15.2.EI-HRMS(m/z)：計算值C₁₈H₁₇NO₂[(M)-]279.1259,測得值[(M)-]279.1253。

3-氧代-3-(3-(戊-4-炔基-1-氧基)苯基)丙酸乙酯(Ethyl 3-oxo-3-(3-(pent-4-yn-1-yloxy)phenyl)propanoate,3)

3-(3-羥苯基)-3-氧代丙酸乙酯(ethyl 3-(3-hydroxyphenyl)-3-oxopropanoate，30mg，0.144mmol)及Cs₂CO₃(47mg，0.144mmol)之乙腈(1mL)混合物於室溫下加入戊-4-炔基對甲苯磺酸酯(pent-4-yn-1-yl 4-methylbenzene sulfonate，35mg，0.144mmol)之乙腈溶液，並加熱至50℃達26小時。將反應混合物冷卻，透通過棉過濾，蒸發溶劑，並用EA萃取。合併的有機層經Na₂SO₄除水，接著進行過濾及真空濃縮，以得到粗產物，隨後透過管柱層析(50% CH₂Cl₂/正己烷)進行純化，以得到乙基3-氧代-3-(3-(戊-4-炔基)-1-氧基)苯基)丙酸酯(ethyl 3-oxo-3-(3-(pent-4-yn-1-yloxy)phenyl)propanoate)之無色液體(含酮-烯醇互變異構體)。產率48%；¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ 12.56(s,0.2H，烯醇型),7.49(m,2H),7.37(t,J=7.9Hz,1H),7.13(dd,J=2.2,8.2Hz,1H),5.65(s,0.2H，烯醇型),4.26(q,J=7.0Hz,0.4H，烯醇型),4.21(q,J=7.2Hz,2H),4.12(t,J=6.0Hz,2.4H，酮+烯醇，3.97(s,2H),2.41(td,J=2.4,7.0Hz,2.4H，酮+烯醇),2.02(quin,J=6.5Hz,2.6H，酮+烯醇),1.98(t,J=2.5Hz,1H),1.33(t,J=7.1Hz,0.6H),1.26(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ 192.3,173.2(烯醇型),171.3(烯醇型),167.5,159.3,159.0(烯醇型),137.4,134.9(烯醇型),129.8,129.6(烯醇型),121.2,120.7,118.5(烯醇型),117.8(烯醇型),113.3,111.9(烯醇型),87.6(烯醇型),83.4(烯醇型),83.2,69.1,69.0(烯醇型),66.4,66.3(烯醇型),61.5,60.3(烯醇型),46.1,28.1(烯醇型),28.0,15.1,14.3(烯醇型),14.1；HRMS(ESI+)：計算值C₁₆H₁₈O₄[M+H]⁺ 275.1283，測得值275.1283。

2-(3-(丁-3-炔基-1-氧基)苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯(ethyl 2-(3-(but-3-yn-1-yloxy)phenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate,4)

藉由上述一般程序A製得目標化合物。產率53%；熔點223-229℃；IR(neat)：3300,3145,3085,2987,1711,1646,1581,1506,1491,1266,1236,1126,1042,841,792,758,711cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d ₆ )δ 11.93(s,1H),8.72(d,J=1.8Hz,1H),8.19(dd,J=1.8,8.7Hz,1H),7.86(d,J=8.7Hz,1H),7.51(t,J=7.9Hz,1H),7.42(d,J=8.6Hz,2H),7.18(dd,J=1.9,7.8Hz,1H),6.45(s,1H),4.37(q,J=7.0Hz,2H),4.17(t,J=6.2Hz,2H),2.84(t,J=2.5Hz,1H),2.38(td,J=2.5,7.2Hz,2H),1.95(quin,J=6.6Hz,2H),1.38(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d ₆ )δ 177.1,165.8,159.2,151.2,144.1,135.9,131.9,130.7,127.5,124.7,124.6,120.2,117.1,113.9,108.8,84.1,72.2,66.7,61.3,28.2,15.0,14.7；ESI-HRMS(m/z)：計算值C₂₃H₂₁NO₄[M-H]^- 374.1392，測得值374.1390。

1,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十三氟-8-(戊-4-炔基-1-氧基)辛烷(1,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-tridecafluoro-8-(pent-4-yn-1-yloxy)octane)

將全氟1-辛醇(perfluro-1-octanol，48μL，0.218mmol)、戊-4-炔基對甲苯磺酸酯(pent-4-yn-1-yl 4-methylbenzene sulfonate，52mg，0.218mmol)、KOH(600mg，10.7mmol)及TBAI(10mg，0.03mmol)溶於9：1的THF/H₂O(1ml)中，接著迴流過夜。抽真空移除THF後，用DCM萃取溶液並透過管柱層析進行純化，以得到液體產物(50mg，53%)。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ 3.72(t,J=6.9Hz,2H),3.55(t,J=6.2Hz,2H),2.45-2.34(m,2H),2.31-2.26(m,2H),1.94(t,J=2.6Hz,1H),1.78(quint,J=6.7Hz,2H),3.54(q,J=7.2Hz,2H),1.23(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ 83.6,69.4,68.5,62.7,31.7,31.5,31.4,28.4,15.1；¹⁹F NMR(564MHz,CDCl₃)δ -127.2,-124.7,-123.9,-122.9,-114.4,-81.9。

疊氮-(聚乙二醇) ₁₂ -磁珠(Azido-PEG ₁₂ -MBs)

將羧化的磁珠(10mg)分散到MES(50mM，pH 6.0，300μL)中。將N-羥基琥珀醯亞胺(N-hydroxysuccinimide,NHS，3.5mg，0.03mmol)及1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC．HCl，5.7mg，0.03mmol)加至溶液中，並於室溫下攪拌1.5小時。所得之珠子用PBS(50mM，pH 7.0，300μLx 2)洗滌，以移除過量的NHS及EDC．HCl。將200μL、1mM之羧化-PEG₁₂-胺(於50mM HEPES中，pH 7.8)添加至珠子中，接著於室溫下攪拌6小時。用磁鐵分離後，用MES(50mM，pH 6.0)洗滌珠子，以得到羧基-PEG₁₂-磁珠。將羧基-PEG₁₂-磁珠(10mg)分散至MES(50mM，pH6.0，300μL)中。將N-羥基琥珀醯亞胺(NHS，3.5mg，0.03mmol)及1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC．HCl，5.7mg，0.03mmol)加至溶液中，並於室溫下攪拌1.5小時。所得之珠子用PBS(50mM，pH 7.0，300μLx 2)洗滌，以移除過量的NHS及EDC．HCl。將200μL、1mM之3-疊氮基-1-丙胺(3-azidopropan-1-amine，在50mM PBS中，pH 7.0)添加至珠子，接著於室溫下攪拌16小時。用磁鐵分離後，用MES(50mM，pH 6.0)洗滌珠子，以得到疊氮-PEG₁₂-磁珠。

磁珠-控制組(Mag-beads-control)

叔丁醇/dd-H₂O(0.3mL，1/1，v/v)加至疊氮-PEG₁₂-磁珠(10mg)、1,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十三氟-8-(戊-4-炔基-1-氧基)辛烷(1.72mg，4.0μmol)、CuSO₄(0.1M dd-H₂O，6.6μL)及抗壞血酸鈉(0.1M dd-H₂O，1.3μL)之溶液中，並置於微波條件下：100W、60℃達30分鐘。用磁體分離後，用MES(50mM，pH 6.0)洗滌珠子，以得到磁珠-控制組。

磁珠-AS1712(Mag-beads-AS1712)

叔丁醇/dd-H₂O(0.3mL，1/1，v/v)加至疊氮-PEG₁₂-磁珠(10mg)、RJ-LC-15-12(1.5mg，4.0μmol)、CuSO₄(0.1M dd-H₂O，6.6μL)及抗壞血酸鈉(0.1 M dd-H₂O，1.3μL)之溶液中，並置於微波條件下：100W、60℃達30分鐘。用磁鐵分離後，用MES(50mM，pH 6.0)洗滌珠子，以得到磁珠-AS1712。

一般程序B-合成RJ-LC-15-17及RJ-LC-15-18

攪拌3-胺基苯甲酸乙酯(0.605mmol)、苯甲醯乙酸酯(0.96mmol)、TsOH￭H₂O(0.15mmol)及Na₂SO₄(6.16mmol)之DCM(3.3ml)溶液，並迴流72小時。於真空下濃縮反應混合物，並用己烷洗滌。接著，將濾液過濾並蒸發以獲得亞胺。將亞胺溶於二苯醚(1ml)中，並加熱至250℃達10分鐘。將反應混合物冷卻至室溫。用Et₂O溶提後，過濾收集產物，並透過快速管柱層析(DCM/ACN/MeOH)進行純化，以分離出RJ-LC-15-17及RJ-LC-15-18。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-5-羧酸乙酯(ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-5-carboxylate,RJ-LC-15-17)

藉由上述一般程序B製得目標化合物。產率16%；熔點220℃；IR(neat)：3067,2396,1718,1627,1577,1507,1500,1277,1147,1124,1089,1028,1028,765,697cm^-1；¹H NMR(600MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 7.75-7.55(m,4H),7.50-7.42(m,3H),7.20(d,J=7.4Hz,3H),6.42(s,1H),4.42(q,J=7.1Hz,2H),1.37(t,J=7.2Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 177.8,171.5,151.5,140.8,133.9,133.2,131.4,130.6,129.0,127.2,122.2,121.5,119.7,108.2,61.9,13.7。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-7-羧酸乙酯(ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-7-carboxylate,RJ-LC-15-18)

藉由上述一般程序B製得目標化合物。產率14%；熔點271℃；IR(neat)：2961,1723,1638,1594,1583,,1552,1499,1462,1366,1272,1245,1211,1031,760,744,687cm^-1；¹H NMR(600MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 7.39-7.29(m,2H),7.92(d,J=8.6Hz,1H),7.77-7.69(m,2H),7.55-7.49(m,3H),6.58(s,1H),4.41(q,J=7.1Hz,2H),1.41(t,J=6.9Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,CD₃OD/CDCl₃)δ 178.4,165.6,152.3,139.6,133.3,133.1,130.4,128.6,126.8,126.7,125.1,123.3,120.2,108.1,61.3,13.4。

一般程序C-合成RJ-LC-15-19及RJ-LC-15-20

用MsOH(0.068mmol)處理AS1712或化合物2h(0.068mmol)之MeOH/DCM(1：1)(1.4ml)溶液，並於室溫下攪拌30分鐘。接著，於真空下濃縮溶液，以得到RJ-LC-15-19或RJ-LC-15-20。

4-氧代-2-苯基-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯甲磺酸鹽(ethyl 4-oxo-2-phenyl-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate methanesulfonate,RJ-LC-15-19)

藉由上述一般程序C製得目標化合物。產率99%；熔點245℃；IR(neat)：3093,2497,1714,1645,1231,1085,1037,1027,917,771,762cm^-1；¹H NMR(600MHz,CD₃OD/CDCl₃)9.08(d,J=1.5Hz,1H),8.56(dd,J=9.0Hz,J=2.0Hz, 1H),8.22(d,J=8.8Hz,1H),7.98-7.93(m,2H),7.77-7.66(m,3H),4.48(q,J=7.3Hz,2H),2.71(s,3H),1.46(t,J=7.1Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 171.5,164.9,157.4,142.2,134.3,132.9,131.5,129.7,129.4,128.3,126.3,120.2,119.6,105.0,61.9,38.5,13.6。

2-(3-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫喹啉-6-羧酸乙酯甲磺酸鹽(ethyl 2-(3-fluorophenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-6-carboxylate methanesulfonate,RJ-LC-15-20)

藉由上述一般程序C製得目標化合物。產率99%；熔點258℃；IR(neat)：3088,2499,1715,1586,1228,1136,1040,878,794,774,763cm^-1；¹H NMR(600MHz,CD₃OD/CDCl₃)9.06(d,J=1.6Hz,1H),8.55(dd,J=9.0Hz,J=2.0Hz,1H),8.24(d,J=8.9Hz,1H),7.81-7.63(m,3H),7.48-7.41(m,1H),4.47(q,J=7.3Hz,2H),2.73(s,3H),1.46(t,J=7.0Hz,3H)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d ₆ )δ 171.8,164.8,164.3,161.8,155.7,142.2,134.5,133.5,131.7,129.5,126.4,124.4,120.3,119.8,119.6,115.5,115.3,105.3,61.9,38.6,13.7。

表8-示例性化合物之IC₅₀

於H1975及MDA-MB-231中，類似物RJ-LC-15-23呈現較AS1712及RJ-LC-15-8更優異之抗增殖能力。RJ-LC-15-23對人纖維母細胞(HFB)亦相對無毒(IC₅₀>10μM)。此數據表示RJ-LC-15-23具有強大之癌症治療潛力。

表9-RJ-LC-15-23之IC₅₀

討論

癌症是全球第二大死亡原因，約佔全球人口的40%。肺癌、乳癌，結腸直腸癌及***癌是最常見的類型，約佔所有癌症死亡人數的46%，其中肺癌是導致死亡人數最多的原因。MTA被廣泛用於治療晚期癌症，但MTA的長期治療因癌症之抗藥性而降低其臨床療效。因此，目前仍持續努力開發改善藥物功效並克服抗藥性之新藥。本文揭露之研究呈現示例性化合物AS1712具有治療各種類型癌症之潛力，且能夠克服由MTA引起的MDR，具備良好的功效及良好的治療窗。

癌細胞仰賴於微管，以透過有絲***及迅速***而發展，此使得微管在超過50年的癌症治療中成為重要的治療標靶。當MTA改變微管動力學時，它們會導致有絲***停滯並觸發粒線體介導的內在凋亡。本發明已證明示例性化合物AS1712可抑制微管聚合及成核並破壞紡錘絲組織。AS1712亦可誘導有絲***停滯，接著觸發細胞色素c釋放及caspase-9裂解，以活化幾種癌細胞珠的內在凋亡。AS1712亦具有良好的體內抗腫瘤生長活性，其無明顯毒性。示例 性化合物AS1712的抗癌活性與目前臨床上使用的MTA相似，但AS1712具有不同的微管蛋白結合位點。

微管蛋白上至少有四個具穩定或去穩定功能的結合位點。秋水仙素結合位點位於β-微管蛋白與α-微管蛋白的交界處。秋水仙素結合位點抑制劑(CBSIs)使得微管組合不穩定，並展現抗血管新生及血管破壞的活性，而其他功能位點的抑制劑則未發現。不同於紫杉醇及長春花生物鹼，CBSI可以抵抗β-微管蛋白同種型過度表達的作用，而MDR機制對CBSI活性的影響很小。結果顯示，AS1712與β-微管蛋白的秋水仙素結合袋點直接相互作用，此表示AS1712應該被歸類為CBSI，並暗示由於其結合位點，AS1712可能不易因突變導致β-微管蛋白構形改變而引起抗藥性。

由於秋水仙素及其衍生物對人類有毒性，目前尚無任何CBSI被批准用於癌症治療。然而，示例性化合物AS1712對於此處分析的細胞株展現超過100倍的治療窗，且在用於癌細胞的最高治療劑量下並未抑制HFB細胞中的微管聚合、細胞週期停滯或凋亡。AS1712在動物模型中亦呈現無明顯毒性。因此，AS1712可能是毒性低的CBSI，並具有作為進一步開發抗癌藥物之先導化合物的潛力。

MDR是各種癌症療法中治療失敗的主要原因。P-gp的過度表達是MTA誘導抗藥性的主要MDR機制，原因在於，大多數MTA，包括太平洋紫杉醇、敏克瘤、敏畢瘤及歐洲紫杉醇(docetaxel)，都是透過P-gp從細胞輸出。P-gp從癌細胞中泵出許多不同類型的細胞毒性藥物，從而降低細胞內藥物的濃度並導致治療失敗。AS1712抑制過度表達P-gp之KBtax、KBvin及CEM/VBL細胞增殖，其IC₅₀值相當於其相應之母細胞株(控制組)。結果顯示，AS1712直接抑制P-gp活 性或是不作為P-gp受質，因而可對抗過度表達P-gp的癌細胞。羅丹明排出測定及免疫墨點研究排除了AS1712直接抑制P-gp泵活性或P-gp表達的可能性，其支持了AS1712不是P-gp受質的假設。雖然其他P-gp抑制劑(例如維爾寧(verapamil)、環孢靈(cyclosporine)及伐司撲打(valspodar))可逆轉癌細胞的MDR表現型(phenotype)，但涉及此些抑制劑的臨床試驗顯示出毒性副作用，且未能改善臨床結果。由於無法作為P-gp受質，AS1712為MDR癌症提供了不同的治療策略。伊沙匹隆是用於治療對現有化學療法不再有反應之晚期乳癌的二線MTA；然而，已發現某些MDR細胞株對伊沙匹隆治療有抗性，因而限制了其臨床應用。相反地，AS1712具有治療各種類型癌症之潛力，包括首先在臨床上以紫杉醇或長春花生物鹼治療之肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭頸癌及血癌。結果顯示，示例化合物AS1712或如RJ-LC-15-8之示例性衍生物可抵制各種類型癌症的多重抗藥性。

結論

本發明研究顯示，示例性化合物AS1712可直接靶向β-微管蛋白的秋水仙素結合位點，以分解微管，其隨後誘導有絲***停滯並活化細胞凋亡。示例性化合物AS1712可克服MTA誘導的續發性抗藥性，包括β-微管蛋白改變及P-gp介導的多重抗藥性。示例性化合物AS1712及如RJ-LC-15-8之示例性衍生物具有強大的癌症治療潛力。

均等用語與範圍

除非另有所指，否則在本文及申請專利範圍中諸如「一」及「該」等詞彙均涵蓋一或多個。本文及申請專利範圍所述之群組中的一或多個元素間包含「或」(or)一詞時，除非另有所指，否則視為有一(個、者)、一個(或一者) 以上或所有的群組元素皆包含於、使用於、或相關於一給定產物或流程。本發明包含了該群組之一特定元素包含於、使用於或相關於一給定產物或流程之實施方式。本發明包含了多於一個群組元素或所有群組元素包含於、使用於、或相關於一給定產物或流程之實施方式。

此外，本發明包含所有變化、組合及排列，其中一或多個請求項所述之一或多個限制、元素、字詞及敍述性字語皆可引用至另一請求項中。舉例來說，任何依附於另一請求項的請求項可修飾為包含依附於相同請求基礎之任何其他請求項所述之一或多個限制條件。當以例如馬庫西群組形式(Markush group format)方式條列元素時，亦包含元素的每個次群組，且可將任何元素由該群組中移除。當理解，一般來說，當本揭示內容或所述之態樣指的是包含特定元素及/或特徵時，本文所述之某些實施例或態樣是由該等元素及/或特徵所組成、或基本上由該些元素及/或特徵所組成。為求簡潔，本揭示內容不再具體闡述該些實施方式。「包含」、「包括」及「含有」應當被理解為開放式用詞，其允許包含額外的元素或步驟。當給予一範圍時，該範圍應包含其端點值。此外，除非另有所指，且本發明所屬技術領域具有通常知識者當可理解，在不同實施方式中，以範圍表示之數值可為該範圍內的任何特定數字或次範圍，至該範圍下限單位的十分之一。

本申請案包含不同的核准專利、公開專利申請案、期刊文獻及其他公開文件，該些文件在此一併納入全文以供參照。若參照文獻及本案說明書有任何衝突矛盾之處，應以本案說明書揭示內容為準。此外，若本發明之特定實施方式落入前案的揭示範圍，可由一或多項請求項中明確排除該內容。基於該些實施方式應視為本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的內容，即使 本文未明確排除，亦可排除該些內容。無論是否與前案的揭示內容相關，本案請求項可基於任何理由排除本發明的特定實施方式。

本發明所屬技術領域中具有通常知識者無須過度實驗，即可瞭解或查明本文所描述之特定實施方式的許多均等方式。本發明具體實施例之範圍並非用以限於上述【實施方式】，而是如隨附申請專利範圍中所述。在不悖離如隨附申請專利範圍所定義之本發明精神及範疇下，本發明所屬技術領域中具有通常知識者當可理解，可對該描述進行各種改變和修改。

Claims (43)

1. 一種化合物，其為下式(I)：

   

   或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，其中：

   每一R¹獨自為鹵素、-C(=O)(視情況經取代烷基)、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

   每一R²獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂,、或-SR^D1；

   R³為氫、視情況經取代烷基、或氮保護基；

   每一R⁴獨自為鹵素、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、-CN、-OR^D1、-N(R^D1a)₂、或-SR^D1；

   R^D1為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、當接至氧原子時之氧保護基、或當接至硫原子時之硫保護基；

   每一R^D1a為氫、視情況經取代醯基、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基、或R^D1a中任選兩者與介於其間之原子一起形成經取代或未經取代之雜環或經取代或未經取代之雜芳環；

   m為0、1、2、3、4、或5；

   n為0、1、2、3、或4；且

   p為0或1，

   但m與n中至少一者不為0。
2. 如請求項1所述之化合物，其中m為0。
3. 如請求項1所述之化合物，其中m為1。
4. 如請求項1或3所述之化合物，其中至少一R¹為鹵素。
5. 如請求項1或3所述之化合物，其中至少一R¹為氟或溴。
6. 如請求項1或3所述之化合物，其中至少一R¹為視情況經取代之烷基。
7. 如請求項6所述之化合物，其中至少一R¹為-CF₃。
8. 如請求項1或3所述之化合物，其中至少一R¹為-OR^D1，且-OR^D1為氫或視情況經取代之烷基。
9. 如請求項8所述之化合物，其中至少一R¹為-OH、-OMe、或如下式所示：

   
10. 如請求項1所述之化合物，其中R³為氫。
11. 如請求項1所述之化合物，其中n為1。
12. 如請求項11所述之化合物，其中該化合物為下式(IA)、(IB)或(IC)：

    

    或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
13. 如請求項1-3及10-12中任一項所述之化合物，其中至少一R²為-C(=O)OR^2a、-C(=O)N(R^2b)₂、或-(CH₂)_xOR^2a；且x為0、1、2、3、4、5或6；其中

    R^2a為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氧保護基；且

    每一R^2b獨自為氫、視情況經取代烷基、視情況經取代烯基、視情況經取代炔基、視情況經取代碳環基、視情況經取代雜環基、視情況經取代芳基、視情況經取代雜芳基、或氮保護基。
14. 如請求項13所述之化合物，其中至少一R²為-C(=O)OR^2a，且R^2a為氫或視情況經取代C_1-6烷基。
15. 如請求項14所述之化合物，其中至少一R²為-C(=O)OH、-C(=O)OMe、-C(=O)OEt、-C(=O)O( ⁱ Pr)、-C(=O)(OCH₂CH₂)₃OH、或-C(=O)(OCH₂CH₂)₄OH。
16. 如請求項13所述之化合物，其中至少一R²為-C(=O)NH(R^2b)，且R^2b為視情況經取代C_1-6烷基。
17. 如請求項13所述之化合物，其中至少一R²為-C(=O)NH(Et)。
18. 如請求項13所述之化合物，其中至少一R²為-(CH₂)_xOR^2a，x為0、1、2、3、4、或5，且R^2a為視情況經取代C_1-6烷基。
19. 如請求項18所述之化合物，其中至少一R²為-(CH₂)OEt。
20. 如請求項1所述之化合物，其中p為0。
21. 如請求項13所述之化合物，其中該化合物為下式：

    

    或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
22. 如請求項1所述之化合物，其中該化合物為下式：

    

    

    

    或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
23. 如請求項22所述之化合物，其中該化合物為下式：

    
24. 一種醫藥組成物，其包括如請求項1至23中任一項所述之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，且視情況更包括一醫藥上可接受之賦形劑。
25. 如請求項24所述之醫藥組成物，其中該醫藥組成物包括用以治療一所需個體之疾病之一治療有效量的該化合物。
26. 如請求項25所述之醫藥組成物，其中該疾病為增殖性疾病。
27. 一種化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該醫藥組成物係用以投予至一所需個體，且包括一治療有效量之如請求項1至23中任一項所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物 (tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
28. 如請求項27所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該增殖性疾病為癌症。
29. 如請求項28所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該癌症為肺癌、乳癌、卵巢癌、***癌、頭部癌、頸部癌、頭頸癌或血癌。
30. 如請求項29所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該肺癌為非小細胞肺癌。
31. 如請求項29所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該乳癌為三陰性乳癌。
32. 如請求項28至31中任一項所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該癌症對一或多種抗微管藥物治療具抗性。
33. 如請求項32所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該一或多種抗微管藥物包含紫杉醇或長春花生物鹼。
34. 如請求項33所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該紫杉醇為太平洋紫杉醇(paclitaxel)或伊沙匹隆(ixabepilone)。
35. 如請求項33所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該長春花生物鹼為敏克瘤(vincristine)或敏畢瘤(vinblastine)。
36. 如請求項32所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該一或多種抗微管藥物包含太平洋紫杉醇或敏克瘤。
37. 如請求項28所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中該癌症對多種藥物有抗性。
38. 如請求項37所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中對多種藥物有抗性之該癌症與P-醣蛋白(P-gp)過度表達有關。
39. 如請求項37所述之化合物用以製備治療增殖性疾病之醫藥組成物的用途，其中對多種藥物有抗性之該癌症與β-微管蛋白突變有關。
40. 一種化合物用以製備抑制細胞、組織、生物樣本或所需個體中癌細胞微管聚合之醫藥組成物的用途，其中該醫藥組成物係用以投予至該所需個體或接觸該細胞、該組織或該生物樣本，且包括一治療有效量之如請求項1至23中任一項所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
41. 如請求項40所述之化合物用以製備抑制細胞、組織、生物樣本或所需個體中癌細胞微管聚合之醫藥組成物的用途，其中該化合物係結合β-微管蛋白之秋水仙素結合袋點。
42. 一種化合物用以製備誘發組織、生物樣本或個體內對多種藥物有抗性之癌細胞凋亡之醫藥組成物的用途，其中該醫藥組成物係用以投予至該個體或接觸該細胞、該組織或該生物樣本，且包括一治療有效量之如請求項1至23中任一項所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥。
43. 一種套組，包括：

    如請求項1至23中任一項所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)、或前驅藥，或如請求項24至26中任一項所述之醫藥組成物；以及

    將該化合物或其醫藥上可接受之鹽、共晶體、互變異構物(tautomer)、立體異構物(stereoisomer)、溶劑合物、水合物、多形體(polymorph)、同位素富集衍生物(isotopically enriched derivative)或前驅藥、或該醫藥組成物投予至一個體或接觸一生物樣本之說明。

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