TW201942355A - 表現外源貓副黏液病毒基因之重組病毒載體系統及自其製備之疫苗 - Google Patents

表現外源貓副黏液病毒基因之重組病毒載體系統及自其製備之疫苗 Download PDF

Info

Publication number
TW201942355A
TW201942355A TW108105710A TW108105710A TW201942355A TW 201942355 A TW201942355 A TW 201942355A TW 108105710 A TW108105710 A TW 108105710A TW 108105710 A TW108105710 A TW 108105710A TW 201942355 A TW201942355 A TW 201942355A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
seq
coding sequence
consistent
sequence
protein
Prior art date
Application number
TW108105710A
Other languages
English (en)
Inventor
賀福 波利特
維傑柯 尼柯林
史密特 阿伯拉漢 捷安 迪
德遜 梅貝遜
Original Assignee
德商百靈佳殷格翰維美迪加股份有限公司
美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 德商百靈佳殷格翰維美迪加股份有限公司, 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 filed Critical 德商百靈佳殷格翰維美迪加股份有限公司
Publication of TW201942355A publication Critical patent/TW201942355A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/24011—Poxviridae
    • C12N2710/24041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/24043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本發明係關於由重組病毒載體系統表現之外源貓副黏液病毒基因。

Description

表現外源貓副黏液病毒基因之重組病毒載體系統及自其製備之疫苗
本發明係關於(載體)疫苗之領域，且特定言之係關於由重組病毒載體系統表現之外源貓副黏液病毒基因。此外，本發明係關於基於重組病毒載體之貓副黏液病毒疫苗。
貓副黏液病毒
副黏液病毒係已與人類及動物之多種傳染病關聯的包膜反義單股RNA [(-)ssRNA]病毒。存在兩個副黏液病毒亞科-副黏液病毒亞科(Paramyxovirinae)及肺病毒亞科(Pneumovirinae)，且亞科副黏液病毒亞科內存在至少五個屬，亦即呼吸道病毒屬(Respirovirus)、腮腺炎病毒屬(Rubulavirus)、麻疹病毒屬(Morbillivirus)、亨尼帕病毒屬(Henipavirus)及禽腮腺炎病毒屬(Avulavirus)。副黏液病毒之實例包括犬瘟熱病毒、麻疹病毒、牛瘟病毒、腮腺炎病毒及人類副流行性感冒病毒。副黏液病毒具有編碼七種病毒多肽之線性基因組：核衣殼蛋白、磷蛋白、基質蛋白、融合蛋白、紅血球凝集素蛋白及聚合酶。副黏液病毒之病毒粒子經包膜包覆且可為球形、絲狀或多形，直徑為約150 nm。融合蛋白及附著蛋白質(血球凝集素，「H」)呈尖峰呈現在病毒粒子表面。包膜內部之基質蛋白(「M」)使病毒結構穩定。核衣殼核心由基因組RNA、核衣殼蛋白(「N」)、磷蛋白(「P」)及聚合酶蛋白質(「大蛋白質」之「L」)組成。融合蛋白(「F」)呈三聚體自包膜表面突起，且藉由誘導病毒包膜與細胞膜之間的融合來介導細胞進入。
已例如自包括貓、嚙齒動物及蝙蝠之野生動物及家畜以及人類分離副黏液病毒。副黏液病毒感染，尤其副黏液病毒亞科之副黏液病毒感染已由於不同物種中所展示之腎臟組織損傷而與腎病相關。舉例而言，腎病，尤其慢性腎病(CKD)係最常見疾病且係家貓、尤其年老個體死亡之最常見病因之一。Lulich等人(Compendium on continuing education for the practicing veterinarian (1992) 14(2):127-152)報導總家貓群體中慢性腎病之發病率為約1.5%，且年齡超過10年之家貓中慢性腎病之發病率為約7.5%。此等疾病之病因可極其不同。在許多情況下，無法確定確切病因。另一方面，已知慢性腎病最常由於腎小管及腎臟間質組織發炎而發生。此稱作特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
已於此項技術中描述若干貓副黏液病毒。US 2013/0230529 A1 (WO 2013/107290 A1)及Woo等人(Proc. Nat. Acad. Sci. (2012) 109(14):5435-5440)描述在香港(Hong Kong)分離的貓麻疹病毒(FmoPV)，其與家貓中之TIN有關。來自日本(Sakaguchi等人(2014) General Virology, 95(7), 1464-1468；Furuya等人(2014) Archives of virology, 159(2), 371-373)、意大利(Lorusso等人(2013) Vet Ital. 51(3):235-237)及USA (Sharp等人(2016) Emerging Infectious Diseases 22(4):760)之其他研究小組亦在貓之尿樣品中偵測到副黏液病毒。Sieg等人(Virus Genes (2015) 51(2):294-297)描述在患有慢性腎病之家貓體內發現貓副黏液病毒。
關於此方面之其他先前技術如下：JP 2015 198654 A係關於分離/鑑定貓麻疹病毒新病毒株之手段以及針對貓麻疹病毒感染之有效預防性措施。Marcacci M等人(Journal of Virological Methods 2016, 234: 160-163)描述意大利貓麻疹病毒之基因組特徵。
病毒載體系統
鳥類痘病毒病毒載體系統係基於鳥類痘病毒，其為天然宿主受限的痘病毒。在此類鳥類痘病毒中，金絲雀痘病毒(CPV)已經工程改造以表現外來、異源、外部、外源基因產物(Taylor J等人, Vaccine 1991, 9(3): 190-193；Taylor J等人, Virology 1992, 187(1): 321-328；Taylor J等人, Dev Biol Stand 1994, 82: 131-135)。
可在此項技術中已知之兩個步驟中且以與構建痘病毒之合成重組體之方法類似的方式構築重組痘病毒，該等合成重組體諸如美國專利第4,769,330號、第4,722,848號、第4,603,112號、第5,110,587號、第5,174,993號、第5,494,807號及第5,505,941號中所描述之痘瘡病毒及鳥類痘病毒，該等專利之揭示內容以引用之方式併入本文中。
具體言之，ALVAC為衍生自金絲雀痘病毒之經工程改造痘病毒載體(例如，US 5,756,103)。ALVAC為基於減毒金絲雀痘病毒之載體，其為人類金絲雀痘疫苗Kanapox之溶菌斑選殖衍生物。亦已證實表現外部免疫原的基於ALVAC之重組病毒有效用作疫苗載體(例如參見Tartaglia J等人, J Virology 1993, 67(4): 2370-2375)。此鳥類痘載體之生產性複製限於鳥類物種且不會在非鳥類宿主中進行生產性複製，此特性被視為改良其安全分佈的一個特性。在人類細胞培養方面，金絲雀痘病毒複製在病毒DNA合成之前的病毒複製週期中提前中止。然而，在經工程改造以表現外部免疫原時，在哺乳動物細胞中活體外觀測到確實的表現及加工，且至許多哺乳動物物種中之接種誘導針對外部免疫原之抗體及細胞免疫反應且提供針對同源病原體攻擊之保護(Taylor J等人, Vaccine 1991, 9(3): 190-193；Taylor J等人, Virology 1992, 187(1): 321-328)。ALVAC根據布達佩斯條約(Budapest Treaty)之條款寄存於美國菌種保存中心(American Type Culture Collection；ATCC)，寄存編號為VR-2547 (US 5,756,103，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。
TROVAC係指減毒禽痘病毒載體，其為衍生自FP1之溶菌斑選殖分離物，FP1係經許可用於對1日齡雛雞進行疫苗接種的禽痘病毒疫苗株(例如，US 5,766,599)。親代病毒株Duvette在法國以禽痘瘡痂之形式自雞獲得。藉由在雞受精蛋中進行大約50次連續繼代接著對雞胚胎纖維母細胞進行25次繼代而使病毒減毒。病毒經受四次連續溶菌斑純化。在原代CEF細胞中進一步擴增一種溶菌斑分離物，且形成被稱為TROVAC之儲備病毒。TROVAC根據布達佩斯條約之條款寄存於美國菌種保存中心(ATCC)，寄存編號為VR-2553 (US 5,766,599，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。
舉例而言，基於ALVAC及TROVAC載體之疫苗接種途徑之特定應用描述於WO 2006/073431、WO 2006/115843及WO 2013/123242中，該等文獻之揭示內容以引用之方式併入本文中。
其他先前技術如下：Weli SC等人(Virology J. 2011, 8 (1): 49)描述鳥類痘病毒：感染生物學及其作為疫苗載體之用途。WO 2005/013918係針對包含可溶的截短痘病毒包膜蛋白之痘病毒疫苗。De Vries P等人(J. Gen. Virol. 1988, 69: 2071-2083)揭示犬瘟熱病毒(CDV)免疫刺激複合物(immune-stimulating complex/Iscom)而非麻疹病毒免疫刺激複合物保護狗免受CDV感染。Marciani等人(Vaccine 1991, 9(2): 89-96)描述經基因工程改造之次單位疫苗針對貓中之貓白血病病毒的保護性免疫反應。McEachern JA等人(Vaccine 2008, 26(31): 3842-3852)描述重組次單位疫苗調配物防止貓中之致死性尼帕病毒(Nipah virus)攻擊。
大部分可用的副黏液病毒疫苗且尤其麻疹病毒係改良式活病毒疫苗。該等疫苗通常安全且有效。然而，如同一些典型的經修飾活病毒一樣，偶爾可能會出現毒性恢復。作為實例，已報導一些犬瘟熱疫苗株毒性恢復的一些病例。因此，作為克服典型減毒病毒株之潛在安全性問題的方式，仍然存在對安全載體之需求。
為了克服先前技術中之不足之處，本發明提供由病毒載體疫苗及貓副黏液病毒/貓麻疹病毒疫苗表現的新標靶抗原。
本發明尤其係關於開發使貓科動物對貓副黏液病毒(感染)免疫的有效病毒載體疫苗，該開發較佳藉助於鳥類痘病毒病毒載體，諸如減毒金絲雀痘載體或減毒禽痘載體，例如ALVAC或TROVAC。此類減毒載體編碼至少一種貓副黏液病毒抗原，使得異源蛋白質可在受限制複製或無生產性複製的情況下表現。
本發明係關於一種病毒載體，較佳重組及/或非天然存在之病毒載體，其包含與至少一種感染貓科動物之病原體有關的至少一個外源抗原編碼序列，其中該至少一種感染貓科動物之病原體為貓副黏液病毒。較佳地，該病毒載體選自由以下組成之群：鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體、水痘病毒病毒載體。
本發明係關於一種哺乳動物宿主細胞，其特徵在於其包含如本文中所描述且主張的病毒載體。
本發明係關於如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞之用途，其係用於製造免疫原性組合物或疫苗。
本發明係關於一種免疫原性組合物，其包含
(a) 如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由如本文中所描述且主張的病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 視情況存在之醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用；
其中該免疫原性組合物較佳包含病毒，諸如感染性病毒。
本發明係關於一種疫苗或醫藥組合物，其包含
(a) 如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由如本文中所描述且主張的病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用，
(d) 該疫苗或醫藥組合物視情況進一步包含佐劑。
本發明係關於一種用於製備免疫原性組合物或疫苗之方法，該免疫原性組合物或疫苗用於降低與至少一種病原性副黏液病毒感染有關或由至少一種病原性副黏液病毒感染引起之一或多個臨床徵象之發病率及/或嚴重程度，該方法包含以下步驟：
(a) 用如本文中所描述且主張的病毒載體感染如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，
(b) 在適合之條件下培養經感染細胞，
(c) 收集經感染細胞培養物，
(d) 視情況純化步驟(c)所收集之經感染細胞培養物，
(e) 視情況混合該所收集之經感染細胞培養物與醫藥學上可接受之載劑。
本發明係關於一種如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，該免疫原性組合物或疫苗適用於減少或預防由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病之方法，或適用於治療及/或預防至少一種病原性副黏液病毒感染之方法，其中該貓科動物較佳為貓，更佳為家貓，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該等由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病或該至少一種病原性副黏液病毒感染較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
本發明係關於一種使貓科動物(諸如貓，更佳為家貓)免疫以對抗由該貓科動物中之至少一種病原性副黏液病毒所引起之臨床疾病的方法，該方法包含以下步驟：向貓科動物投與如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，其中該免疫原性組合物或疫苗無法引起感染臨床徵象但能夠誘導使貓科動物對該至少一種副黏液病毒之病原性形式免疫的免疫反應，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該臨床疾病或該等感染臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
本發明係關於一種用於對貓科動物、較佳貓、更佳家貓進行疫苗接種以抵抗貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關之疾病及/或降低貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關或由至少一種病原性副黏液病毒引起之一或多個臨床徵象的發病率或嚴重程度的套組，該套組包含：
(a) 能夠向該貓科動物投與疫苗之分配器；及
(b) 如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，及
(c) 視情況存在之指導手冊；
其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該疾病或該等臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
本發明之優點尤其如下：
(1) 相比於減毒活毒疫苗，載體疫苗之安全性增加
(2) 朝向給定(免疫顯性)抗原之直接免疫接種，從而避免貓副黏液病毒之潛在免疫抑制蛋白質之表現
(3) 能夠使載體疫苗增加至與市售疫苗製品相容的高效價
因此，上述技術問題之解決方案係藉由本說明書及在申請專利範圍中表徵之實施例來達成，且本發明在其不同態樣中係根據申請專利範圍來實施。
序列表
本申請案根據37 C.F.R. 1.821 - 1.825含有序列表。本申請案隨附的序列表以全文引用的方式併入本文中。
本發明解決了先前技術中固有的問題且提供目前先進技術中之明顯進步。
一般而言，本發明係關於一種病毒載體，其包含與至少一種感染貓科動物之病原體有關的至少一個外源抗原編碼序列，其中該至少一種感染貓科動物之病原體為貓副黏液病毒。
在一特定態樣中，如本文中所描述且主張的此類病毒載體係選自由以下組成之群：鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體、水痘病毒病毒載體。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的為貓副黏液病毒的該至少一種感染貓科動物之病原體係選自由以下組成之群：
(a) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(b) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 1之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:1至少70%一致、與SEQ ID NO:1至少75%一致、與SEQ ID NO:1至少80%一致、與SEQ ID NO:1至少85%一致、與SEQ ID NO:1至少90%一致、與SEQ ID NO:1至少91%一致、與SEQ ID NO:1至少92%一致、與SEQ ID NO:1至少93%一致、與SEQ ID NO:1至少94%一致、與SEQ ID NO:1至少95%一致、與SEQ ID NO:1至少96%一致、與SEQ ID NO:1至少97%一致、與SEQ ID NO:1至少98%一致、與SEQ ID NO:1至少99%一致的核酸序列；
(c) 以寄存編號CNCM I-5123寄存於法國國家培養物及微生物保藏中心(Collection Nationale de Culture de Microorganismes；CNCM)之2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(d) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 2之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:2至少70%一致、與SEQ ID NO:2至少75%一致、與SEQ ID NO:2至少80%一致、與SEQ ID NO:2至少85%一致、與SEQ ID NO:2至少90%一致、與SEQ ID NO:2至少91%一致、與SEQ ID NO:2至少92%一致、與SEQ ID NO:2至少93%一致、與SEQ ID NO:2至少94%一致、與SEQ ID NO:2至少95%一致、與SEQ ID NO:2至少96%一致、與SEQ ID NO:2至少97%一致、與SEQ ID NO:2至少98%一致、與SEQ ID NO:2至少99%一致的核酸序列；
(e) 貓麻疹病毒(FeMoV)；
(f) 貓麻疹病毒(FeMoV)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 3之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:3至少70%一致、與SEQ ID NO:3至少75%一致、與SEQ ID NO:3至少80%一致、與SEQ ID NO:3至少85%一致、與SEQ ID NO:3至少90%一致、與SEQ ID NO:3至少91%一致、與SEQ ID NO:3至少92%一致、與SEQ ID NO:3至少93%一致、與SEQ ID NO:3至少94%一致、與SEQ ID NO:3至少95%一致、與SEQ ID NO:3至少96%一致、與SEQ ID NO:3至少97%一致、與SEQ ID NO:3至少98%一致、與SEQ ID NO:3至少99%一致的核酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的為貓副黏液病毒的該至少一種感染貓科動物之病原體係選自由以下組成之群：
(b) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 1之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:1至少70%一致、與SEQ ID NO:1至少75%一致、與SEQ ID NO:1至少80%一致、與SEQ ID NO:1至少85%一致、與SEQ ID NO:1至少90%一致、與SEQ ID NO:1至少91%一致、與SEQ ID NO:1至少92%一致、與SEQ ID NO:1至少93%一致、與SEQ ID NO:1至少94%一致、與SEQ ID NO:1至少95%一致、與SEQ ID NO:1至少96%一致、與SEQ ID NO:1至少97%一致、與SEQ ID NO:1至少98%一致、與SEQ ID NO:1至少99%一致的核酸序列；
(c) 以寄存編號CNCM I-5123寄存於法國國家培養物及微生物保藏中心(CNCM)之2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(d) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 2之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:2至少70%一致、與SEQ ID NO:2至少75%一致、與SEQ ID NO:2至少80%一致、與SEQ ID NO:2至少85%一致、與SEQ ID NO:2至少90%一致、與SEQ ID NO:2至少91%一致、與SEQ ID NO:2至少92%一致、與SEQ ID NO:2至少93%一致、與SEQ ID NO:2至少94%一致、與SEQ ID NO:2至少95%一致、與SEQ ID NO:2至少96%一致、與SEQ ID NO:2至少97%一致、與SEQ ID NO:2至少98%一致、與SEQ ID NO:2至少99%一致的核酸序列。
在另一特定態樣中，病毒載體為重組及/或非天然存在之病毒載體。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體為金絲雀痘載體，較佳為減毒金絲雀痘載體，更佳為ALVAC，甚至更佳為ALVAC-1或ALVAC-2，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2547寄存於美國菌種保存中心(ATCC)之ALVAC。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體為禽痘載體，較佳為減毒禽痘載體，更佳為TROVAC，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2553寄存於美國菌種保存中心(ATCC)之TROVAC。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體係選自由以下組成之群：vCP3025、vCP3029。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列係選自由以下組成之群：血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列、基質蛋白(「M」)編碼序列、融合蛋白(「F」)編碼序列、核衣殼蛋白(「N」)編碼序列、磷蛋白(「P」)編碼序列、RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且更佳為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及/或基質蛋白(「M」)編碼序列及/或融合蛋白(「F」)編碼序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:4至少70%一致、與SEQ ID NO:4至少75%一致、與SEQ ID NO:4至少80%一致、與SEQ ID NO:4至少85%一致、與SEQ ID NO:4至少90%一致、與SEQ ID NO:4至少91%一致、與SEQ ID NO:4至少92%一致、與SEQ ID NO:4至少93%一致、與SEQ ID NO:4至少94%一致、與SEQ ID NO:4至少95%一致、與SEQ ID NO:4至少96%一致、與SEQ ID NO:4至少97%一致、與SEQ ID NO:4至少98%一致、與SEQ ID NO:4至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:6至少70%一致、與SEQ ID NO:6至少75%一致、與SEQ ID NO:6至少80%一致、與SEQ ID NO:6至少85%一致、與SEQ ID NO:6至少90%一致、與SEQ ID NO:6至少91%一致、與SEQ ID NO:6至少92%一致、與SEQ ID NO:6至少93%一致、與SEQ ID NO:6至少94%一致、與SEQ ID NO:6至少95%一致、與SEQ ID NO:6至少96%一致、與SEQ ID NO:6至少97%一致、與SEQ ID NO:6至少98%一致、與SEQ ID NO:6至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:6之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:7至少70%一致、與SEQ ID NO:7至少75%一致、與SEQ ID NO:7至少80%一致、與SEQ ID NO:7至少85%一致、與SEQ ID NO:7至少90%一致、與SEQ ID NO:7至少91%一致、與SEQ ID NO:7至少92%一致、與SEQ ID NO:7至少93%一致、與SEQ ID NO:7至少94%一致、與SEQ ID NO:7至少95%一致、與SEQ ID NO:7至少96%一致、與SEQ ID NO:7至少97%一致、與SEQ ID NO:7至少98%一致、與SEQ ID NO:7至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:9至少70%一致、與SEQ ID NO:9至少75%一致、與SEQ ID NO:9至少80%一致、與SEQ ID NO:9至少85%一致、與SEQ ID NO:9至少90%一致、與SEQ ID NO:9至少91%一致、與SEQ ID NO:9至少92%一致、與SEQ ID NO:9至少93%一致、與SEQ ID NO:9至少94%一致、與SEQ ID NO:9至少95%一致、與SEQ ID NO:9至少96%一致、與SEQ ID NO:9至少97%一致、與SEQ ID NO:9至少98%一致、與SEQ ID NO:9至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:9之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:10至少70%一致、與SEQ ID NO:10至少75%一致、與SEQ ID NO:10至少80%一致、與SEQ ID NO:10至少85%一致、與SEQ ID NO:10至少90%一致、與SEQ ID NO:10至少91%一致、與SEQ ID NO:10至少92%一致、與SEQ ID NO:10至少93%一致、與SEQ ID NO:10至少94%一致、與SEQ ID NO:10至少95%一致、與SEQ ID NO:10至少96%一致、與SEQ ID NO:10至少97%一致、與SEQ ID NO:10至少98%一致、與SEQ ID NO:10至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:12至少70%一致、與SEQ ID NO:12至少75%一致、與SEQ ID NO:12至少80%一致、與SEQ ID NO:12至少85%一致、與SEQ ID NO:12至少90%一致、與SEQ ID NO:12至少91%一致、與SEQ ID NO:12至少92%一致、與SEQ ID NO:12至少93%一致、與SEQ ID NO:12至少94%一致、與SEQ ID NO:12至少95%一致、與SEQ ID NO:12至少96%一致、與SEQ ID NO:12至少97%一致、與SEQ ID NO:12至少98%一致、與SEQ ID NO:12至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:12之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:13至少70%一致、與SEQ ID NO:13至少75%一致、與SEQ ID NO:13至少80%一致、與SEQ ID NO:13至少85%一致、與SEQ ID NO:13至少90%一致、與SEQ ID NO:13至少91%一致、與SEQ ID NO:13至少92%一致、與SEQ ID NO:13至少93%一致、與SEQ ID NO:13至少94%一致、與SEQ ID NO:13至少95%一致、與SEQ ID NO:13至少96%一致、與SEQ ID NO:13至少97%一致、與SEQ ID NO:13至少98%一致、與SEQ ID NO:13至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:13。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:14至少70%一致、與SEQ ID NO:14至少75%一致、與SEQ ID NO:14至少80%一致、與SEQ ID NO:14至少85%一致、與SEQ ID NO:14至少90%一致、與SEQ ID NO:14至少91%一致、與SEQ ID NO:14至少92%一致、與SEQ ID NO:14至少93%一致、與SEQ ID NO:14至少94%一致、與SEQ ID NO:14至少95%一致、與SEQ ID NO:14至少96%一致、與SEQ ID NO:14至少97%一致、與SEQ ID NO:14至少98%一致、與SEQ ID NO:14至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:14之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:15至少70%一致、與SEQ ID NO:15至少75%一致、與SEQ ID NO:15至少80%一致、與SEQ ID NO:15至少85%一致、與SEQ ID NO:15至少90%一致、與SEQ ID NO:15至少91%一致、與SEQ ID NO:15至少92%一致、與SEQ ID NO:15至少93%一致、與SEQ ID NO:15至少94%一致、與SEQ ID NO:15至少95%一致、與SEQ ID NO:15至少96%一致、與SEQ ID NO:15至少97%一致、與SEQ ID NO:15至少98%一致、與SEQ ID NO:15至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:15。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:16至少70%一致、與SEQ ID NO:16至少75%一致、與SEQ ID NO:16至少80%一致、與SEQ ID NO:16至少85%一致、與SEQ ID NO:16至少90%一致、與SEQ ID NO:16至少91%一致、與SEQ ID NO:16至少92%一致、與SEQ ID NO:16至少93%一致、與SEQ ID NO:16至少94%一致、與SEQ ID NO:16至少95%一致、與SEQ ID NO:16至少96%一致、與SEQ ID NO:16至少97%一致、與SEQ ID NO:16至少98%一致、與SEQ ID NO:16至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:16之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:17至少70%一致、與SEQ ID NO:17至少75%一致、與SEQ ID NO:17至少80%一致、與SEQ ID NO:17至少85%一致、與SEQ ID NO:17至少90%一致、與SEQ ID NO:17至少91%一致、與SEQ ID NO:17至少92%一致、與SEQ ID NO:17至少93%一致、與SEQ ID NO:17至少94%一致、與SEQ ID NO:17至少95%一致、與SEQ ID NO:17至少96%一致、與SEQ ID NO:17至少97%一致、與SEQ ID NO:17至少98%一致、與SEQ ID NO:17至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:17。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:18至少70%一致、與SEQ ID NO:18至少75%一致、與SEQ ID NO:18至少80%一致、與SEQ ID NO:18至少85%一致、與SEQ ID NO:18至少90%一致、與SEQ ID NO:18至少91%一致、與SEQ ID NO:18至少92%一致、與SEQ ID NO:18至少93%一致、與SEQ ID NO:18至少94%一致、與SEQ ID NO:18至少95%一致、與SEQ ID NO:18至少96%一致、與SEQ ID NO:18至少97%一致、與SEQ ID NO:18至少98%一致、與SEQ ID NO:18至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:18之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:19至少70%一致、與SEQ ID NO:19至少75%一致、與SEQ ID NO:19至少80%一致、與SEQ ID NO:19至少85%一致、與SEQ ID NO:19至少90%一致、與SEQ ID NO:19至少91%一致、與SEQ ID NO:19至少92%一致、與SEQ ID NO:19至少93%一致、與SEQ ID NO:19至少94%一致、與SEQ ID NO:19至少95%一致、與SEQ ID NO:19至少96%一致、與SEQ ID NO:19至少97%一致、與SEQ ID NO:19至少98%一致、與SEQ ID NO:19至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:19。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:20至少70%一致、與SEQ ID NO:20至少75%一致、與SEQ ID NO:20至少80%一致、與SEQ ID NO:20至少85%一致、與SEQ ID NO:20至少90%一致、與SEQ ID NO:20至少91%一致、與SEQ ID NO:20至少92%一致、與SEQ ID NO:20至少93%一致、與SEQ ID NO:20至少94%一致、與SEQ ID NO:20至少95%一致、與SEQ ID NO:20至少96%一致、與SEQ ID NO:20至少97%一致、與SEQ ID NO:20至少98%一致、與SEQ ID NO:20至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:20之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:21至少70%一致、與SEQ ID NO:21至少75%一致、與SEQ ID NO:21至少80%一致、與SEQ ID NO:21至少85%一致、與SEQ ID NO:21至少90%一致、與SEQ ID NO:21至少91%一致、與SEQ ID NO:21至少92%一致、與SEQ ID NO:21至少93%一致、與SEQ ID NO:21至少94%一致、與SEQ ID NO:21至少95%一致、與SEQ ID NO:21至少96%一致、與SEQ ID NO:21至少97%一致、與SEQ ID NO:21至少98%一致、與SEQ ID NO:21至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:21。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:22至少70%一致、與SEQ ID NO:22至少75%一致、與SEQ ID NO:22至少80%一致、與SEQ ID NO:22至少85%一致、與SEQ ID NO:22至少90%一致、與SEQ ID NO:22至少91%一致、與SEQ ID NO:22至少92%一致、與SEQ ID NO:22至少93%一致、與SEQ ID NO:22至少94%一致、與SEQ ID NO:22至少95%一致、與SEQ ID NO:22至少96%一致、與SEQ ID NO:22至少97%一致、與SEQ ID NO:22至少98%一致、與SEQ ID NO:22至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:22之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:23至少70%一致、與SEQ ID NO:23至少75%一致、與SEQ ID NO:23至少80%一致、與SEQ ID NO:23至少85%一致、與SEQ ID NO:23至少90%一致、與SEQ ID NO:23至少91%一致、與SEQ ID NO:23至少92%一致、與SEQ ID NO:23至少93%一致、與SEQ ID NO:23至少94%一致、與SEQ ID NO:23至少95%一致、與SEQ ID NO:23至少96%一致、與SEQ ID NO:23至少97%一致、與SEQ ID NO:23至少98%一致、與SEQ ID NO:23至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:23。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:24至少70%一致、與SEQ ID NO:24至少75%一致、與SEQ ID NO:24至少80%一致、與SEQ ID NO:24至少85%一致、與SEQ ID NO:24至少90%一致、與SEQ ID NO:24至少91%一致、與SEQ ID NO:24至少92%一致、與SEQ ID NO:24至少93%一致、與SEQ ID NO:24至少94%一致、與SEQ ID NO:24至少95%一致、與SEQ ID NO:24至少96%一致、與SEQ ID NO:24至少97%一致、與SEQ ID NO:24至少98%一致、與SEQ ID NO:24至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:24之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:25至少70%一致、與SEQ ID NO:25至少75%一致、與SEQ ID NO:25至少80%一致、與SEQ ID NO:25至少85%一致、與SEQ ID NO:25至少90%一致、與SEQ ID NO:25至少91%一致、與SEQ ID NO:25至少92%一致、與SEQ ID NO:25至少93%一致、與SEQ ID NO:25至少94%一致、與SEQ ID NO:25至少95%一致、與SEQ ID NO:25至少96%一致、與SEQ ID NO:25至少97%一致、與SEQ ID NO:25至少98%一致、與SEQ ID NO:25至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:25。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:26至少70%一致、與SEQ ID NO:26至少75%一致、與SEQ ID NO:26至少80%一致、與SEQ ID NO:26至少85%一致、與SEQ ID NO:26至少90%一致、與SEQ ID NO:26至少91%一致、與SEQ ID NO:26至少92%一致、與SEQ ID NO:26至少93%一致、與SEQ ID NO:26至少94%一致、與SEQ ID NO:26至少95%一致、與SEQ ID NO:26至少96%一致、與SEQ ID NO:26至少97%一致、與SEQ ID NO:26至少98%一致、與SEQ ID NO:26至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:26之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:27至少70%一致、與SEQ ID NO:27至少75%一致、與SEQ ID NO:27至少80%一致、與SEQ ID NO:27至少85%一致、與SEQ ID NO:27至少90%一致、與SEQ ID NO:27至少91%一致、與SEQ ID NO:27至少92%一致、與SEQ ID NO:27至少93%一致、與SEQ ID NO:27至少94%一致、與SEQ ID NO:27至少95%一致、與SEQ ID NO:27至少96%一致、與SEQ ID NO:27至少97%一致、與SEQ ID NO:27至少98%一致、與SEQ ID NO:27至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:27。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:28至少70%一致、與SEQ ID NO:28至少75%一致、與SEQ ID NO:28至少80%一致、與SEQ ID NO:28至少85%一致、與SEQ ID NO:28至少90%一致、與SEQ ID NO:28至少91%一致、與SEQ ID NO:28至少92%一致、與SEQ ID NO:28至少93%一致、與SEQ ID NO:28至少94%一致、與SEQ ID NO:28至少95%一致、與SEQ ID NO:28至少96%一致、與SEQ ID NO:28至少97%一致、與SEQ ID NO:28至少98%一致、與SEQ ID NO:28至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:28之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:29至少70%一致、與SEQ ID NO:29至少75%一致、與SEQ ID NO:29至少80%一致、與SEQ ID NO:29至少85%一致、與SEQ ID NO:29至少90%一致、與SEQ ID NO:29至少91%一致、與SEQ ID NO:29至少92%一致、與SEQ ID NO:29至少93%一致、與SEQ ID NO:29至少94%一致、與SEQ ID NO:29至少95%一致、與SEQ ID NO:29至少96%一致、與SEQ ID NO:29至少97%一致、與SEQ ID NO:29至少98%一致、與SEQ ID NO:29至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:29。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:30至少70%一致、與SEQ ID NO:30至少75%一致、與SEQ ID NO:30至少80%一致、與SEQ ID NO:30至少85%一致、與SEQ ID NO:30至少90%一致、與SEQ ID NO:30至少91%一致、與SEQ ID NO:30至少92%一致、與SEQ ID NO:30至少93%一致、與SEQ ID NO:30至少94%一致、與SEQ ID NO:30至少95%一致、與SEQ ID NO:30至少96%一致、與SEQ ID NO:30至少97%一致、與SEQ ID NO:30至少98%一致、與SEQ ID NO:30至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:30之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:31至少70%一致、與SEQ ID NO:31至少75%一致、與SEQ ID NO:31至少80%一致、與SEQ ID NO:31至少85%一致、與SEQ ID NO:31至少90%一致、與SEQ ID NO:31至少91%一致、與SEQ ID NO:31至少92%一致、與SEQ ID NO:31至少93%一致、與SEQ ID NO:31至少94%一致、與SEQ ID NO:31至少95%一致、與SEQ ID NO:31至少96%一致、與SEQ ID NO:31至少97%一致、與SEQ ID NO:31至少98%一致、與SEQ ID NO:31至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:33至少70%一致、與SEQ ID NO:33至少75%一致、與SEQ ID NO:33至少80%一致、與SEQ ID NO:33至少85%一致、與SEQ ID NO:33至少90%一致、與SEQ ID NO:33至少91%一致、與SEQ ID NO:33至少92%一致、與SEQ ID NO:33至少93%一致、與SEQ ID NO:33至少94%一致、與SEQ ID NO:33至少95%一致、與SEQ ID NO:33至少96%一致、與SEQ ID NO:33至少97%一致、與SEQ ID NO:33至少98%一致、與SEQ ID NO:33至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:33之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:34至少70%一致、與SEQ ID NO:34至少75%一致、與SEQ ID NO:34至少80%一致、與SEQ ID NO:34至少85%一致、與SEQ ID NO:34至少90%一致、與SEQ ID NO:34至少91%一致、與SEQ ID NO:34至少92%一致、與SEQ ID NO:34至少93%一致、與SEQ ID NO:34至少94%一致、與SEQ ID NO:34至少95%一致、與SEQ ID NO:34至少96%一致、與SEQ ID NO:34至少97%一致、與SEQ ID NO:34至少98%一致、與SEQ ID NO:34至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:36至少70%一致、與SEQ ID NO:36至少75%一致、與SEQ ID NO:36至少80%一致、與SEQ ID NO:36至少85%一致、與SEQ ID NO:36至少90%一致、與SEQ ID NO:36至少91%一致、與SEQ ID NO:36至少92%一致、與SEQ ID NO:36至少93%一致、與SEQ ID NO:36至少94%一致、與SEQ ID NO:36至少95%一致、與SEQ ID NO:36至少96%一致、與SEQ ID NO:36至少97%一致、與SEQ ID NO:36至少98%一致、與SEQ ID NO:36至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:36之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:37至少70%一致、與SEQ ID NO:37至少75%一致、與SEQ ID NO:37至少80%一致、與SEQ ID NO:37至少85%一致、與SEQ ID NO:37至少90%一致、與SEQ ID NO:37至少91%一致、與SEQ ID NO:37至少92%一致、與SEQ ID NO:37至少93%一致、與SEQ ID NO:37至少94%一致、與SEQ ID NO:37至少95%一致、與SEQ ID NO:37至少96%一致、與SEQ ID NO:37至少97%一致、與SEQ ID NO:37至少98%一致、與SEQ ID NO:37至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:37。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:38至少70%一致、與SEQ ID NO:38至少75%一致、與SEQ ID NO:38至少80%一致、與SEQ ID NO:38至少85%一致、與SEQ ID NO:38至少90%一致、與SEQ ID NO:38至少91%一致、與SEQ ID NO:38至少92%一致、與SEQ ID NO:38至少93%一致、與SEQ ID NO:38至少94%一致、與SEQ ID NO:38至少95%一致、與SEQ ID NO:38至少96%一致、與SEQ ID NO:38至少97%一致、與SEQ ID NO:38至少98%一致、與SEQ ID NO:38至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:38之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:39至少70%一致、與SEQ ID NO:39至少75%一致、與SEQ ID NO:39至少80%一致、與SEQ ID NO:39至少85%一致、與SEQ ID NO:39至少90%一致、與SEQ ID NO:39至少91%一致、與SEQ ID NO:39至少92%一致、與SEQ ID NO:39至少93%一致、與SEQ ID NO:39至少94%一致、與SEQ ID NO:39至少95%一致、與SEQ ID NO:39至少96%一致、與SEQ ID NO:39至少97%一致、與SEQ ID NO:39至少98%一致、與SEQ ID NO:39至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:39。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:40至少70%一致、與SEQ ID NO:40至少75%一致、與SEQ ID NO:40至少80%一致、與SEQ ID NO:40至少85%一致、與SEQ ID NO:40至少90%一致、與SEQ ID NO:40至少91%一致、與SEQ ID NO:40至少92%一致、與SEQ ID NO:40至少93%一致、與SEQ ID NO:40至少94%一致、與SEQ ID NO:40至少95%一致、與SEQ ID NO:40至少96%一致、與SEQ ID NO:40至少97%一致、與SEQ ID NO:40至少98%一致、與SEQ ID NO:40至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:40之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:41至少70%一致、與SEQ ID NO:41至少75%一致、與SEQ ID NO:41至少80%一致、與SEQ ID NO:41至少85%一致、與SEQ ID NO:41至少90%一致、與SEQ ID NO:41至少91%一致、與SEQ ID NO:41至少92%一致、與SEQ ID NO:41至少93%一致、與SEQ ID NO:41至少94%一致、與SEQ ID NO:41至少95%一致、與SEQ ID NO:41至少96%一致、與SEQ ID NO:41至少97%一致、與SEQ ID NO:41至少98%一致、與SEQ ID NO:41至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:41。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:42至少70%一致、與SEQ ID NO:42至少75%一致、與SEQ ID NO:42至少80%一致、與SEQ ID NO:42至少85%一致、與SEQ ID NO:42至少90%一致、與SEQ ID NO:42至少91%一致、與SEQ ID NO:42至少92%一致、與SEQ ID NO:42至少93%一致、與SEQ ID NO:42至少94%一致、與SEQ ID NO:42至少95%一致、與SEQ ID NO:42至少96%一致、與SEQ ID NO:42至少97%一致、與SEQ ID NO:42至少98%一致、與SEQ ID NO:42至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:42之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:43至少70%一致、與SEQ ID NO:43至少75%一致、與SEQ ID NO:43至少80%一致、與SEQ ID NO:43至少85%一致、與SEQ ID NO:43至少90%一致、與SEQ ID NO:43至少91%一致、與SEQ ID NO:43至少92%一致、與SEQ ID NO:43至少93%一致、與SEQ ID NO:43至少94%一致、與SEQ ID NO:43至少95%一致、與SEQ ID NO:43至少96%一致、與SEQ ID NO:43至少97%一致、與SEQ ID NO:43至少98%一致、與SEQ ID NO:43至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:43。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:44至少70%一致、與SEQ ID NO:44至少75%一致、與SEQ ID NO:44至少80%一致、與SEQ ID NO:44至少85%一致、與SEQ ID NO:44至少90%一致、與SEQ ID NO:44至少91%一致、與SEQ ID NO:44至少92%一致、與SEQ ID NO:44至少93%一致、與SEQ ID NO:44至少94%一致、與SEQ ID NO:44至少95%一致、與SEQ ID NO:44至少96%一致、與SEQ ID NO:44至少97%一致、與SEQ ID NO:44至少98%一致、與SEQ ID NO:44至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體包含兩個或更多個外源抗原編碼序列，較佳包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含基質蛋白(「M」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列以及融合蛋白(「F」)編碼序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體包含兩個或更多個外源抗原編碼序列，較佳包含兩個相同的外源抗原編碼序列(亦即，H + H、F + F、M + M、P + P、L + L、N + N)，但該等編碼序列來自兩個不同的病毒株，諸如一個外源抗原編碼序列來自2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株(更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」)，且另一個外源抗原編碼序列來自貓麻疹病毒株(更佳為「Lapön病毒株」)，例如包含一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列。較佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株，更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」，且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為貓麻疹病毒株，更佳為「Lapön病毒株」。最佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少70%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少75%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少80%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少85%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少90%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少91%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少92%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少93%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少94%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少95%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少96%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少97%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少98%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:19；且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少70%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少75%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少80%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少85%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少90%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少91%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少92%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少93%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少94%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少95%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少96%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少97%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少98%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:94。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列***在至少一個***基因座中，較佳***在病毒載體基因組之非必需區域中。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列***在兩個或更多個***基因座中。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的***基因座為***基因座C3。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體包含***基因座C3之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:45之側接序列(C3側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:46之側接序列(C3側接區域右臂)。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的***基因座為***基因座C5。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體包含***基因座C5之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:47之側接序列(C5側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:48之側接序列(C5側接區域右臂)。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的***基因座為***基因座C6。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的至少一個外源抗原編碼序列可操作地連接於至少一個啟動子序列，較佳至少一個弱啟動子序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的啟動子序列為H6痘瘡啟動子。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的啟動子序列為I3L痘瘡啟動子。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的啟動子序列為42k (long)痘病毒啟動子。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的啟動子序列為7.5k痘瘡啟動子。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的啟動子序列為Pi痘瘡啟動子。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體進一步包含其他調節序列，諸如終止信號及/或聚腺苷酸化序列。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的病毒載體包含與選自由SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51組成之群之核酸序列至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%一致的核酸序列，且較佳為選自由以下組成之群之核酸序列：SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51。
在另一特定態樣中，如本文中所描述且主張的貓科動物為貓，較佳為家貓。
本發明係關於一種哺乳動物宿主細胞，其特徵在於其包含如本文中所描述且主張的病毒載體。
本發明係關於如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞之用途，其係用於製造免疫原性組合物或疫苗。
本發明係關於一種免疫原性組合物，其包含
(a) 如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由如本文中所描述且主張的病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 視情況存在之醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用；
其中該免疫原性組合物較佳包含病毒，諸如感染性病毒。
本發明係關於一種疫苗或醫藥組合物，其包含
(a) 如本文中所描述且主張的病毒載體或如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由如本文中所描述且主張的病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用，
(d) 該疫苗或醫藥組合物視情況進一步包含佐劑。
本發明係關於一種用於製備免疫原性組合物或疫苗之方法，該免疫原性組合物或疫苗用於降低與至少一種病原性副黏液病毒感染有關或由至少一種病原性副黏液病毒感染引起之一或多個臨床徵象之發病率及/或嚴重程度，該方法包含以下步驟：
(a) 用如本文中所描述且主張的病毒載體感染如本文中所描述且主張的哺乳動物宿主細胞，
(b) 在適合之條件下培養經感染細胞，
(c) 收集經感染細胞培養物，
(d) 視情況純化步驟(c)所收集之經感染細胞培養物，
(e) 視情況混合該所收集之經感染細胞培養物與醫藥學上可接受之載劑。
本發明係關於如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，該免疫原性組合物或疫苗適用於減少或預防由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病之方法，或適用於治療及/或預防至少一種病原性副黏液病毒感染之方法，其中該貓科動物較佳為貓，更佳為家貓，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該等由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病或該至少一種病原性副黏液病毒感染較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
本發明係關於一種使貓科動物(諸如貓，更佳為家貓)免疫以對抗由該貓科動物中之至少一種病原性副黏液病毒所引起之臨床疾病的方法，該方法包含以下步驟：向貓科動物投與如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，其中該免疫原性組合物或疫苗無法引起感染臨床徵象但能夠誘導使貓科動物對該至少一種副黏液病毒之病原性形式免疫的免疫反應，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該臨床疾病或該等感染臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
本發明係關於一種用於對貓科動物、較佳貓、更佳家貓進行疫苗接種以抵抗貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關之疾病及/或降低貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關或由至少一種病原性副黏液病毒引起之一或多個臨床徵象的發病率或嚴重程度的套組，該套組包含：
(a) 能夠向該貓科動物投與疫苗之分配器；及
(b) 如本文中所描述且主張的免疫原性組合物或如本文中所描述且主張的疫苗，及
(c) 視情況存在之指導手冊；
其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該疾病或該等臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
定義
除非另外定義，否則在申請時本文所用之所有技術及科學術語均具有與熟習本發明所屬之技術者通常所理解相同的意義。術語之含義及範疇應為清楚的；然而，在任何潛在不明確性之情況下，本文所提供之定義優先於任何字典或外部定義。此外，除非上下文另外需要，否則單數術語應包括複數且複數術語應包括單數。除非另外說明，否則本文中使用「或」意謂「及/或」。此外，術語「包括(including)」以及其他形式(諸如「包括(includes)」及「包括(included)」)之使用不具限制性。本文所提及之所有專利及公開案以引用的方式併入本文中。
除非另外指示，否則本發明之實踐將採用在此項技術內之病毒學、分子生物學、微生物學、重組DNA技術、蛋白質化學及免疫學之習知技術。文獻中充分解釋此類技術。參見例如Sambrook、Fritsch及Maniatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 第I、II及III卷, 第二版(1989)；DNA Cloning, 第I及II卷(D. N. Glover編 1985)；Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait編 1984)；Nucleic Acid Hybridization (B. D. Hames及S. J. Higgins編 1984)；Animal Cell Culture (R. K. Freshney編 1986)；Immobilized Cells and Enzymes (IRL press, 1986)；Perbal, B., A Practical Guide to Molecular Cloning (1984)；the series, Methods In Enzymology (S. Colowick及N. Kaplan編, Academic Press, Inc.)；Protein purification methods - a practical approach (E.L.V. Harris及S. Angal編, IRL Press at Oxford University Press)；及Handbook of Experimental Immunology, 第I至IV卷(D. M. Weir及C. C. Blackwell編, 1986, Blackwell Scientific Publications)。
在詳細描述本發明之前，應瞭解本發明不限於特定DNA，因此多肽序列或方法參數當然可變化。亦應瞭解，本文所用之術語僅用於描述本發明之特定實施例之目的，且不意欲為限制性的。必須注意的係，除非內容明確另外指示，否則如本說明書及所附申請專利範圍中所用，單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數個指示物。因此，舉例而言，對「抗原」之提及包括兩種或更多種抗原之混合物，對「賦形劑」之提及包括兩種或更多種賦形劑之混合物，及其類似者。
如此項技術中已知，術語「載體」係指用於傳輸遺傳物質至宿主細胞之聚核苷酸構築體，通常為質體或細菌人工染色體。載體可為例如細菌、病毒、噬菌體、細菌人工染色體、黏質體或質體。如本文所用，載體可由DNA或RNA構成或含有DNA或RNA。在一些實施例中，載體由DNA構成。在一些實施例中，載體為感染性病毒。此類病毒載體含有經一定方式操縱以攜帶外源基因之病毒基因組，該外源基因在細胞培養物及宿主動物中均不在病毒載體複製方面起作用。根據本發明之特定態樣，載體可用於各個態樣，諸如僅僅傳輸遺傳物質、用於轉染宿主細胞或生物體、用作疫苗(例如DNA疫苗)或用於基因表現目的。基因表現為描述細胞中由稱為基因之特異性聚核苷酸序列引導之蛋白質生物合成的術語。在一特定態樣中，載體可為「表現載體」，其為當存在於適當環境中時能夠引導由載體攜帶之一或多個基因所編碼的蛋白質表現的載體。
製備及/或使用載體(或重組體)用於表現之載體及方法可藉由以下文獻中所揭示之方法或類似於以下文獻中所揭示之方法：美國專利第4,603,112號、第4,769,330號、第5,174,993號、第5,505,941號、第5,338,683號、第5,494,807號、第4,722,848號、第5,942,235號、第5,364,773號、第5,762,938號、第5,770,212號、第5,942,235號、第382,425號；PCT公開案WO 94/16716、WO 96/39491、WO 95/30018；Paoletti, 「Applications of pox virus vectors to vaccination: An update」, PNAS USA 93: 11349-11353, 1996年10月；Moss, 「Genetically engineered poxviruses for recombinant gene expression, vaccination, and safety」, PNAS USA 93: 11341-11348, 1996年10月；Smith等人, 美國專利第4,745,051號(重組桿狀病毒)；Richardson, C. D. (編輯), Methods in Molecular Biology 39, 「Baculovirus Expression Protocols」 (1995 Humana Press Inc.)；Smith等人, 「Production of Human Beta Interferon in Insect Cells Infected with a Baculovirus Expression Vector」, Molecular and Cellular Biology, 1983年12月, 第3卷, 第12期, 第2156-2165頁；Pennock等人, 「Strong and Regulated Expression of Escherichia coli B-Galactosidase in Infect Cells with a Baculovirus vector」, Molecular and Cellular Biology 1984年3月, 第4卷, 第3期, 第406頁；EPA 0 370 573；1986年10月16日申請之美國申請案第920,197號；EP專利公開案第0 265 785號；美國專利第4,769,331號(recombinant herpesvirus)；Roizman, 「The function of herpes simplex virus genes: A primer for genetic engineering of novel vectors」, PNAS USA 93:11307-11312, 1996年10月；Andreansky等人, 「The application of genetically engineered herpes simplex viruses to the treatment of experimental brain tumors」, PNAS USA 93: 11313-11318, 1996年10月；Robertson等人, 「Epstein-Barr virus vectors for gene delivery to B lymphocytes」, PNAS USA 93: 11334-11340, 1996年10月；Frolov等人, 「Alphavirus-based expression vectors: Strategies and applications」, PNAS USA 93: 11371-11377, 1996年10月；Kitson等人, J. Virol. 65, 3068-3075, 1991；美國專利第5,591,439號、第5,552,143號；WO 98/00166；經允許之美國申請案第08/675,556號及第08/675,566號，兩者皆申請於1996年7月3日(重組腺病毒)；Grunhaus等人, 1992, 「Adenovirus as cloning vectors」, Seminars in Virology (第3卷)第237-52頁, 1993；Ballay等人 EMBO Journal, 第4卷, 第3861-65頁, Graham, Tibtech 8, 85-87, 1990年4月；Prevec等人, J. Gen Virol. 70, 42434；PCT WO 91/11525；Felgner等人(1994), J. Biol. Chem. 269, 2550-2561, Science, 259: 1745-49, 1993；及McClements等人, 「Immunization with DNA vaccines encoding glycoprotein D or glycoprotein B, alone or in combination, induces protective immunity in animal models of herpes simplex virus-2 disease」, PNAS USA 93: 11414-11420, 1996年10月；及美國專利第5,591,639號、第5,589,466號及第5,580,859號以及WO 90/11092、WO93/19183、WO94/21797、WO95/11307、WO95/20660；Tang等人, Nature，以及Furth等人, Analytical Biochemistry，尤其與DNA表現載體有關。亦參見WO 98/33510；Ju等人, Diabetologia, 41: 736-739, 1998 (慢病毒表現系統)；Sanford等人, 美國專利第4,945,050號；Fischbach等人(Intracel)；WO 90/01543；Robinson等人, Seminars in Immunology 第9卷, 第271-283頁(1997)，(DNA載體系統)；Szoka等人, 美國專利第4,394,448號(將DNA***活細胞中之方法)；McCormick等人, 美國專利第5,677,178號(細胞病變病毒之用途)；及美國專利第5,928,913號(用於基因傳遞之載體)；以及本文中所引用之其他文獻。
術語「病毒載體」描述一種經遺傳修飾之病毒，其藉由重組DNA技術以一定方式操縱以使其進入宿主細胞，產生特異性生物活性，例如表現由載體攜帶之轉殖基因。在一特定態樣中，轉殖基因係抗原。病毒載體在標靶細胞、組織或生物體中可為或可不為複製勝任型。
病毒載體之產生可使用此項技術中所熟知的任何適合之基因工程技術來實現，包括(但不限於)限制性核酸內切酶消化、連接、轉型、質體純化、DNA定序、在細胞培養物中轉染之標準技術，如Sambrook等人(Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, N.Y. (1989))或K. Maramorosch及H. Koprowski (Methods in Virology Volume VIII, Academic Press Inc. London, UK (2014))中所描述。
病毒載體可併有來自任何已知生物體之基因組的序列。序列可以其天然形式併入或可以任何方式修飾以獲得所需活性。舉例而言，序列可包含***、缺失或取代。
病毒載體可包括兩種或更多種相關蛋白質之編碼區。舉例而言，病毒載體可包括第一相關蛋白質之編碼區及第二相關蛋白質之編碼區。第一相關蛋白質及第二相關蛋白質可相同或不同。在一些實施例中，病毒載體可包括第三或第四相關蛋白質之編碼區。第三相關蛋白質及第四相關蛋白質可相同或不同。由一個病毒載體編碼之兩種或更多種相關蛋白質的總長度可變化。舉例而言，兩種或更多種蛋白質之總長度可為至少約200個胺基酸。至少約250個胺基酸、至少約300個胺基酸、至少約350個胺基酸、至少約400個胺基酸、至少約450個胺基酸、至少約500個胺基酸、至少約550個胺基酸、至少約600個胺基酸、至少約650個胺基酸、至少約700個胺基酸、至少約750個胺基酸、至少約800個胺基酸或更長。
較佳病毒載體包括鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體及水痘病毒病毒載體。
根據本發明之特定態樣，術語「病毒載體」或者「病毒構築體」係指衍生自病毒之重組病毒構築體，該重組病毒構築體係選自鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體及水痘病毒病毒載體。較佳病毒載體包括鳥類痘病毒病毒載體，諸如ALVAC及TROVAC。
根據本發明之特定態樣，術語「鳥類痘病毒病毒載體」或者「鳥類痘病毒載體」係指基於鳥類痘病毒之載體系統，該等鳥類痘病毒為天然宿主受限的痘病毒。在此類鳥類痘病毒中，金絲雀痘病毒(CPV)已經工程改造以表現外來、異源、外部、外源基因產物。具體言之，ALVAC為衍生自金絲雀痘病毒之經工程改造痘病毒載體(US 5,756,103，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。ALVAC為基於減毒金絲雀痘病毒之載體，其為人類金絲雀痘疫苗Kanapox之溶菌斑選殖衍生物。此鳥類痘載體之生產性複製限於鳥類物種且不會在非鳥類宿主中進行生產性複製，此特性被視為改良其安全分佈的一個特性。在人類細胞培養方面，金絲雀痘病毒複製在病毒DNA合成之前的病毒複製週期中提前中止。然而，在經工程改造以表現外部免疫原時，在哺乳動物細胞中活體外觀測到確實的表現及加工，且至許多哺乳動物物種中之接種誘導針對外部免疫原之抗體及細胞免疫反應且提供針對同源病原體攻擊之保護。ALVAC根據布達佩斯條約之條款寄存於美國菌種保存中心(ATCC)，寄存編號為VR-2547 (US 5,756,103，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。根據本發明的衍生自ALVAC ATCC VR-2547寄存物之ALVAC載體包含vCP3025及vCP3029，其包括與所寄存之親代ALVAC ATCC VR-2547載體相同的C3及C5***基因座。TROVAC係指減毒禽痘病毒載體，其為衍生自FP1之溶菌斑選殖分離物，FP1係經許可用於對1日齡雛雞進行疫苗接種的禽痘病毒疫苗株(US 5,766,599，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。親代病毒株Duvette在法國以禽痘瘡痂之形式自雞獲得。藉由在雞受精蛋中進行大約50次連續繼代接著對雞胚胎纖維母細胞進行25次繼代而使病毒減毒。病毒經受四次連續溶菌斑純化。在原代CEF細胞中進一步擴增一種溶菌斑分離物，且形成被稱為TROVAC之儲備病毒。TROVAC根據布達佩斯條約之條款寄存於美國菌種保存中心(ATCC)，寄存編號為VR-2553 (US 5,766,599，其揭示內容以引用之方式併入本文中)。
術語「病毒載體」及「病毒構築體」可互換使用。
如本文所用，術語「構築體」係指重組核酸，諸如質體、BAC或已人工產生之重組病毒。
術語「質體」係指獨立於細菌宿主細胞內之細菌染色體複製的細胞質DNA。在本發明之一特定態樣中，術語「質體」及/或「轉移質體」係指適用於構築(例如)表現卡匣以供***至病毒載體中之重組DNA技術之元件。在另一特定態樣中，術語「質體」可用於限定適用於DNA疫苗接種目的之質體。
如本文所用，術語「核酸」及「聚核苷酸」可互換且係指任何核酸。
如本文所用，術語「核酸」、「核酸序列」、「核苷酸序列」、「聚核苷酸」、「聚核苷酸序列」、「RNA序列」、cDNA序列或「DNA序列」係指寡核苷酸、核苷酸或聚核苷酸以及其片段及部分且係指基因組來源或合成來源之DNA或RNA，其可為單股或雙股的且表示有義股或反義股。序列可為非編碼序列、編碼序列或兩者之混合物。本發明之核酸序列可使用熟習此項技術者熟知的標準技術製備。
術語「核酸」及「聚核苷酸」亦特別包括由除五種生物學上存在之鹼基(腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶及尿嘧啶)外的鹼基構成之核酸。
術語「調節核酸」、「調節元件」及「表現控制元件」可互換使用且係指可影響可操作地連接之編碼序列在特定宿主生物體中之表現的核酸分子。此等術語使用廣泛且涵蓋所有促進或調節轉錄之元件，包括啟動子、啟動子序列、RNA聚合酶及轉錄因子之鹼基相互作用所需的核心元件、上游元件、強化子及反應元件。原核生物中之例示性調節元件包括啟動子、操縱子序列及核糖體結合位點。用於真核細胞中之調節元件可包括(但不限於)轉錄及轉譯控制序列，諸如啟動子、強化子、剪接信號、聚腺苷酸化信號、終止子、蛋白質降解信號、內部核糖體進入位點(IRES)、小核糖核酸病毒科2A序列及其類似物，其提供及/或調節宿主細胞中編碼序列之表現及/或經編碼多肽之產生。
「內部核糖體進入位點」或「IRES」描述功能上促進獨立於IRES之基因5'的轉譯開始且允許在動物細胞中由單個轉錄物轉譯兩個順反子(開放閱讀框架)的序列。IRES提供獨立的核糖體進入位點以轉譯緊接其下游的開放閱讀框架。與可為多順反子(亦即編碼由mRNA依序轉譯之數個不同多肽)的細菌mRNA不同，動物細胞之大多數mRNA為單順反子且編碼合成僅一個多肽。關於真核細胞中之多順反子轉錄物，轉譯將自最5'之轉譯起始位點開始，在第一終止密碼子處終止，且轉錄物將自核糖體釋放，使得mRNA僅轉譯第一經編碼多肽。在真核細胞中，具有可操作地連接至轉錄物中之第二或後續開放閱讀框架之IRES的多順反子轉錄物允許下游開放閱讀框架之依序轉譯，產生由同一轉錄物編碼之兩個或更多個多肽。IRES可具有不同長度且來自不同來源，例如腦心肌炎病毒(EMCV)、小核糖核酸病毒，例如***病毒、FMDV或脊髓灰質炎病毒(PV)，或C型肝炎病毒(HCV)。此項技術中已描述且熟知各種IRES序列及其在載體構築中之用途。下游編碼序列在將不會負面影響下游基因表現之任何距離處可操作地連接至IRES之3'端。IRES與下游基因起點之間的最佳或可容許距離可容易藉由改變距離且量測隨距離而變之表現來確定。
術語「2a」或「2a肽」意謂描述為2a及「2a樣」之短寡肽序列，其充當能夠藉由定義為核糖體跳躍之過程介導蛋白質間的共轉譯裂解的連接子。此類2a及「2a樣」序列(來自小核糖核酸病毒科及其他病毒或細胞序列)可用於將多個基因序列串接成單個基因，確保其在同一細胞內共表現(參見Luke及Ryan，2013)。
如本文所用，術語「啟動子」或「啟動子序列」意謂可以與RNA聚合酶結合且引導基因轉錄之核苷酸序列。通常，啟動子位於基因之5'非編碼區中，鄰近基因之轉錄起始位點。用於起始轉錄之啟動子內的序列元件常常可藉由共同核苷酸序列表徵。啟動子之實例包括(但不限於)來自細菌、酵母、植物、病毒及動物(諸如哺乳動物(包括馬、豬、牛及人類)、鳥類或昆蟲)之啟動子。啟動子可為誘導性、阻抑性及/或組成性。誘導性啟動子會回應於培養條件之一些變化，諸如溫度變化，引發在其控制下的DNA的轉錄水準增加(Ptashne，2014)。熟習此項技術者熟知的啟動子之實例為例如SV40大T、HCMV及MCMV立即早期基因1、人類延長因子α啟動子、桿狀病毒多角體蛋白啟動子。
如本文所用，在本發明之上下文中，術語啟動子尤其係指弱啟動子(序列)，較佳H6痘瘡啟動子、I3L痘瘡啟動子、42k (long)痘病毒啟動子、7.5k痘瘡啟動子及/或Pi痘瘡啟動子，或其互補核苷酸序列，在整個長度上之序列一致性較佳為(至少) 72% (或更高)。
術語「強化子」表示在順式位置作用於啟動子之活性且因此刺激功能上連接至此啟動子之基因或編碼序列轉錄的聚核苷酸序列。不同於啟動子，強化子之作用與位置及定向無關，且其可因此位於轉錄單元之前面或後面中，位於內含子內或甚至位於編碼區內。強化子可緊鄰轉錄單元及在距啟動子相當大的距離處定位。亦可與啟動子具有實體及功能重疊。熟習此項技術者應瞭解來自各種來源之許多強化子(且寄存在諸如GenBank之資料庫中，例如SV40強化子、CMV強化子、多瘤病毒強化子、腺病毒強化子)，其以獨立元件或在聚核苷酸序列中選殖之元件形式得到(例如寄存在ATCC或來自商業及個體來源)。許多啟動子序列亦含有強化子序列，諸如經常使用的CMV啟動子。人類CMV強化子為迄今鑑別之最強的強化子之一。誘導性強化子之一個實例為金屬硫蛋白強化子，其會被糖皮質激素或重金屬所刺激。
術語「互補核苷酸序列」描述諸如DNA或RNA之聚核苷酸之兩個成對股中之一股。互補股之核苷酸序列反映其成對股之核苷酸序列，使其含有相對於各腺嘌呤之胸腺嘧啶(或對於RNA而言，尿嘧啶)，相對於各鳥嘌呤之胞嘧啶，反之亦然。例如5'-GCATAC-3'之互補核苷酸序列為3'-CGTATG-5'或對於RNA而言為3'-CGUAUG-5'。
如本文所用，術語「基因」、「相關基因」具有相同含義且係指編碼相關產物之任何長度的聚核苷酸序列。基因可進一步包含在編碼序列之前的調節序列(5'非編碼或非轉譯序列)及之後的調節序列(3'非編碼或非轉譯序列)。所選序列可為全長或截短的融合或加標籤基因，且可為cDNA、基因組DNA或DNA片段。大體上瞭解，編碼多肽或RNA之基因組DNA可包括自成熟信使RNA (mRNA)剪接之非編碼區(亦即內含子)且因此不存在於編碼相同多肽或RNA之cDNA中。其可為天然序列(亦即天然存在之形式)或可為突變序列，或包含衍生自不同來源或視需要以其他方式經修飾之序列。此等修飾包括密碼子最佳化以使所選宿主細胞中之密碼子使用最佳化或加標籤。此外，其可包括移除或添加順式作用位點，諸如(隱蔽的)剪接供體、受體位點及分支點、聚腺苷酸化信號、TATA盒、chi位點、核糖體進入位點、重複序列、二級結構(例如莖環)、轉錄因子或其他調節因子之結合位點、限制酶位點等，僅給出若干但非限制性的實例。所選序列可編碼分泌性、細胞質、細胞核、膜結合或細胞表面多肽。
如本文所用，術語「相關核苷酸序列」為比相關基因更通用的術語，因為其未必包含基因，但可包含基因之元件或部分或其他遺傳資訊，例如ori (複製起點)。相關核苷酸序列可為任何DNA或RNA序列，與其是否包含編碼序列無關。
「開放閱讀框架」或「ORF」係指包含轉譯起始信號或起始密碼子(諸如ATG或AUG)及終止密碼子且可能轉譯成多肽序列之一段核酸序列(DNA或RNA)。
術語「轉錄」描述細胞中mRNA之生物合成。
如本文所用，術語「表現」係指宿主細胞內核酸序列之轉錄及/或轉譯。根據本發明之特定態樣，術語「表現」係指宿主細胞內異源及/或外源核酸序列之轉錄及/或轉譯。宿主細胞中所需產物之表現量可基於細胞中存在之對應RNA或mRNA之量或由所選序列編碼之所需多肽之量來確定。舉例而言，自所選序列轉錄之mRNA可藉由北方墨點雜交、核糖核酸酶RNA保護、與細胞RNA原位雜交或藉由RTqPCR (反轉錄後接定量PCR)來定量。自所選序列表現之蛋白質可藉由各種方法，例如藉由ELISA、藉由西方墨點法、藉由放射免疫分析、藉由免疫沈澱、藉由分析蛋白質之生物活性或藉由蛋白質免疫染色後接FACS分析來定量。
術語「表現卡匣」或「轉錄單元」或「表現單元」定義載體、構築體或聚核苷酸序列內含有一或多個有待轉錄之基因的區域，其中表現卡匣內所含之編碼經轉錄基因之核苷酸序列以及含有調節元件之聚核苷酸序列可操作地彼此連接。其自啟動子轉錄且藉由至少一個聚腺苷酸化信號終止轉錄。在一個特定態樣中，其自一個單一啟動子轉錄。因此，不同基因至少在轉錄上相連。可自各轉錄單元(多順反子轉錄單元)轉錄及表現多於一種蛋白質或產物。各轉錄單元將包含該單元內所含之任何所選序列之轉錄及轉譯必需的調節元件。且各轉錄單元可含有相同或不同的調節元件。舉例而言，各轉錄單元可含有同一終止子、IRES元件或可用於轉錄單元內基因之功能性連接的內含子。載體或聚核苷酸序列可含有大於一個轉錄單元。
術語「增加之表現」、「增加之效價或生產率」或「改良之表現或生產率」意謂引入至宿主細胞中之異源及/或外源序列(例如編碼治療性蛋白質之基因)的表現、合成或分泌與適合之對照物相比(例如由cDNA編碼之蛋白質對比由含有內含子之基因編碼之蛋白質)增加。若根據本發明之細胞根據此處所描述之根據本發明之方法培養，且若此細胞之比生產率或效價具有至少1.2倍、1.5倍、兩倍、三倍、四倍或五倍增加，則存在增加之效價或生產率。若根據本發明之細胞根據此處所描述之根據本發明之方法培養，且若此細胞之比生產率或效價具有至少1.2倍或至少1.5倍或至少兩倍或至少三倍增加，則亦存在增加之效價或生產率。若根據本發明之細胞根據此處所描述之根據本發明之方法培養，且若此細胞之比生產率或效價具有至少1.2倍至五倍、較佳1.5倍至五倍、更佳兩倍至五倍、尤其較佳三倍至五倍增加，則亦尤其存在增加之效價或生產率。「增加之表現」亦可意謂更多細胞實際上表現相關基因/序列。舉例而言，增加之表現可意謂本發明之啟動子在病毒複製週期期間的活性相對於其他啟動子持續較長時間段。
增加之表現、效價或生產率可藉由使用根據本發明之異源病毒載體來獲得。此方法可與其他方法組合，諸如含有作為額外可選標記物之一或多種螢光蛋白質(例如，GFP)或細胞表面標記物之重組宿主細胞之FACS輔助選擇。亦可使用之其他獲得增加之表現的方法及不同方法之組合係基於例如使用順式作用元件操控染色質結構(例如LCR、UCOE、EASE、隔離子、S/MAR、STAR元件)、使用(人工)轉錄因子、用天然或合成試劑處理細胞以上調內源或異源及/或外源基因表現、改良mRNA或蛋白質之穩定性(半衰期)、改良mRNA轉譯之起始、藉由使用游離型質體增加基因劑量(基於使用病毒序列作為複製起點，例如SV40、多瘤病毒、腺病毒、EBV或BPV)、使用擴增促進序列或基於DNA串聯體之活體外擴增系統。
量測「增加之表現」的分析為基於LC-MS/MS之蛋白質量測，諸如多反應監測(MRM)；基於抗體之偵測方法，諸如西方墨點法、點漬墨法或免疫擴散及流式細胞測量術；及藉由血球凝集分析量測生物活性。
「啟動子活性」係藉由定量在各別啟動子控制下轉錄之mRNA來間接量測。mRNA係藉由RTqPCR相對於內源性標準來定量。
術語「病毒載量」為熟習該項技術者所熟知。在本文中，術語病毒載量可與術語「病毒效價」互換使用。病毒載量或病毒效價為活動性病毒感染之嚴重程度的量測值，且可藉由熟習此項技術者已知的方法測定。測定可基於對病毒蛋白之偵測，諸如藉由抗體結合於病毒蛋白且進一步偵測，或替代地藉由諸如RT-PCR之擴增方法偵測病毒核酸。藉由核酸擴增方法監測血漿中之病毒粒子相關病毒RNA為用以分析反轉錄病毒疾病之狀態及進展以及用以評估預防性及治療性干預之效果的廣泛使用參數。例示性的，病毒載量或病毒效價可藉由估計所涉及體液中活病毒之量(諸如每毫升血漿中RNA複本之數目)來計算。較佳地，術語「病毒載量」或「病毒效價」為每體積病毒製劑中感染單位之量測值。病毒效價為生物程序之端點且定義為並行進行之特定比例的測試顯示效應的稀釋度(Reed及Muench，1938)。特定言之，每毫升組織培養物感染劑量五十(TCID50/ml)得到用稀釋液並行接種之多個細胞培養物的50%經感染的病毒製劑的稀釋度。
「轉錄調節元件」通常包含有待表現之基因序列上游的啟動子、轉錄起始及終止位點以及聚腺苷酸化信號。
術語「轉錄起始位點」係指構築體中對應於併入至初級轉錄物(亦即mRNA前驅體)中之第一核酸的核酸。轉錄起始位點可與啟動子序列重疊。
「終止信號」或「終止子」或「聚腺苷酸化信號」或「聚腺苷酸(polyA)」或「轉錄終止位點」或「轉錄終止元件」為在真核mRNA之3'端的特定位點引起裂解及在裂解的3'端轉錄後併入約100-200個腺嘌呤核苷酸序列(聚腺苷酸尾部)且因此致使RNA聚合酶終止轉錄的信號序列。聚腺苷酸化信號包含在裂解位點上游約10-30個核苷酸處之序列AATAAA及位於下游之序列。已知多種聚腺苷酸化元件，諸如tk聚腺苷酸、SV40後期及早期聚腺苷酸、BGH聚腺苷酸(描述於例如美國專利第5,122,458號中)或倉鼠生長激素聚腺苷酸(WO2010/010107)。
對於各有待表現之單個多肽，「轉譯調節元件」包含轉譯起始位點(AUG)、終止密碼子及聚腺苷酸信號。內部核糖體進入位點(IRES)可包括於一些構築體中。為了使表現最佳化，移除、添加或改變有待表現之核酸序列的5'及/或3'非轉譯區以消除任何可能附加的不當替代性轉譯起始密碼子或可能在轉錄或轉譯水準上干擾或減少表現之其他序列可為可取的。共同核糖體結合位點(Kozak序列)可緊接著***起始密碼子上游以增強轉譯且因此增強表現。此核糖體結合位點周圍增加之A/U含量促進更高效的核糖體結合。
按照定義，***於宿主細胞中之每一聚核苷酸序列或每一基因以及尤其編碼之各別蛋白質或RNA在來自不同(病毒)物種時，相對於宿主細胞被稱為「外源」、「外源序列」、「外源基因」、「外源編碼序列」、「外源抗原編碼序列」。因此，本發明之貓副黏液病毒抗原就鳥類痘病毒病毒載體(諸如ALVAC)而言係外源的。如本文所用，關於相關序列或基因(諸如抗原)，術語「外源」或「外源抗原編碼序列」意謂該相關序列或基因(特定言之該抗原)在其天然物種情形以外表現。因此，來自FPaV-2病毒株「Gordon」之H抗原為關於鳥類痘病毒病毒載體(諸如ALVAC)之外源抗原的一個實例。因此，任何貓副黏液病毒相關序列或基因(諸如貓副黏液病毒抗原)為根據本發明之特定態樣的外源相關序列或基因或抗原。
按照定義，***於宿主細胞中之每一聚核苷酸序列或每一基因及由其編碼之各別蛋白質或RNA相對於宿主細胞稱為「異源」、「異源序列」、「異源基因」、「異源編碼序列」、「轉殖基因」或「異源蛋白質」。即使有待引入之序列或有待引入之基因與宿主細胞之內源序列或內源基因一致，其仍適用。舉例而言，按照定義，與ALVAC野生型病毒相比在不同位點或以經修飾形式引入至ALVAC病毒載體中之ALVAC啟動子序列為異源序列。如本文所用，相對於相關序列或基因(諸如抗原)，術語「異源」意謂該相關序列或基因(特定言之該抗原)係在其天然亞種情形以外表現。
因此，任何貓副黏液病毒特定相關序列或基因，諸如抗原(例如來自FPaV-2「Gordon」病毒株之H抗原)，相對於另一(貓)副黏液病毒病毒載體為根據本發明之特定態樣的異源相關序列或基因或抗原。
術語「非天然存在」意謂在此上下文中並非天然存在之任何相關序列或基因(諸如抗原)，諸如雜交序列或來自不同物種之相關序列或基因(諸如抗原)，或由於人工突變、***、缺失或其類似者而並非天然產物之相關序列或基因(諸如抗原)。
貫穿本發明之說明書，術語「重組」可與術語「非天然存在」、「異源」及「外源」互換使用。因此，「重組」蛋白質為自異源或外源聚核苷酸序列表現之蛋白質。如關於病毒所用，術語重組意謂藉由人工操縱病毒基因組產生之病毒。包含異源或外源序列(諸如外源抗原編碼序列)之病毒為重組病毒。術語重組病毒及術語非天然存在之病毒可互換使用。
因此，術語「異源載體」意謂包含異源或外源聚核苷酸序列之載體。術語「重組載體」意謂包含異源或重組聚核苷酸序列之載體。
如本文所用，術語「可操作地連接」用於描述調節元件與基因或其編碼區之間的連接。通常，基因表現在一或多個調節元件控制下，例如(不限於)組成性或誘導性啟動子、組織特異性調節元件及強化子。基因或編碼區稱為「可操作地連接於(operably linked to)」或「可操作地連接於(operatively linked to)」調節元件或「可操作地與調節元件相關」，意謂該基因或編碼區受調節元件控制或影響。舉例而言，若啟動子影響編碼序列之轉錄或表現，則啟動子可操作地連接於編碼序列。
此外，在本說明書之範疇內，術語「功能性連接」、「功能性地連接」或「可操作地連接」意謂兩個或更多個核酸序列或序列元件以允許其按預期方式起作用之方式定位。舉例而言，啟動子/強化子或終止子若能夠在順式位置控制或調節所連接之基因序列的轉錄，則其功能性地連接於編碼基因序列。一般但非必須地，功能性地連接之DNA序列為連續的且必要時接合兩個多肽編碼區，或在分泌信號肽之情況下，為連續的且在閱讀框架中。然而，雖然可操作地連接之啟動子一般位於編碼序列上游或可操作地連接之終止子一般位於編碼序列下游，但不必與其鄰接。強化子無須鄰接，只要其增加編碼序列之轉錄即可。為此，強化子可位於編碼序列上游或下游且甚至在一定距離處。聚腺苷酸化位點若以轉錄前進經過編碼序列至聚腺苷酸化信號之方式位於編碼序列之3'端，則其可操作地連接於編碼序列。連接係藉由此項技術中已知之重組方法實現，例如藉由在適合之限制性位點或鈍端處連接或藉由使用融合PCR方法。若不存在適合之限制性位點，則可根據習知實踐使用合成寡核苷酸連接子或銜接子。
因此，術語啟動子序列之「功能片段或衍生物」意謂該片段或衍生物仍影響啟動子活性。如何評定啟動子活性之功能分析為一般熟習此項技術者所熟知的(Bustin 2000，Nolan等人2006)。此類功能分析之例示性實施例包括例如啟動子動力學實驗。培育感染有載體病毒之細胞持續不同時間，該等載體病毒攜帶表現卡匣，其中啟動子或其片段引導報導體轉殖基因之轉錄。總RNA係由在感染後之不同時間採集之樣品製備。在藉由DNAse I消化破壞污染性DNA之後，使RNA反轉錄。一個複製樣品在添加反轉錄酶(RT)之情況下進行處理，第二複製樣品在不添加RT之情況下進行處理，以便證明污染性DNA自RNA製備物成功移除。將所得cDNA純化且用作習知PCR之模板。僅在添加RT之情況下處理的樣品將產生PCR產物。此等cDNA可隨後與報導體轉殖基因之引子以及病毒載體之必需基因(內標物基因)之引子一起用於qPCR，該內標物基因之轉錄提供感染及複製效率之內標物。使用內標物基因之qPCR值使報導體之qPCR值在不同構築體與感染後的時間之間標準化。此舉允許說明不同啟動子及其片段之啟動子活性。
如本文所用，「序列同源性」係指一種確定兩個序列相關性之方法。為確定序列同源性，將兩種或多於兩種序列最佳比對，且必要時引入間隙。然而，相比於「序列一致性」，在確定序列同源性時，將保守胺基酸取代視為匹配。換言之，為了獲得與參考序列具有95%序列同源性之多肽或聚核苷酸，參考序列中85%，較佳90%、91%、92%、93%、94%，甚至更佳95%、96%、97%、98%、99%、99.9%的胺基酸殘基或核苷酸必須匹配或包含另一胺基酸或核苷酸之保守取代，或者一定數目的胺基酸或核苷酸，多至參考序列中總胺基酸殘基或核苷酸的15%，較佳多至10%、9%、8%、7%、6%，甚至更佳多至5%、4%、3%、2%、1%、0.1% (不包括保守取代)可***參考序列中。較佳地，同源序列包含至少50、甚至更佳100、甚至更佳250、甚至更佳500個核苷酸之延伸。
如此項技術中已知，「序列一致性」係指兩個或更多個多肽序列或兩個或更多個聚核苷酸序列，亦即參考序列及有待與參考序列比較之給定序列之間的關係。序列一致性係藉由在序列已最佳比對產生最高程度之序列相似性後比較給定序列與參考序列來確定，如藉由此類序列串之間的匹配所確定。在此比對後，基於逐位置方式確定序列一致性，例如若核苷酸或胺基酸殘基在特定位置處相同，則序列在該位置處「相同」。此類位置一致之總數隨後除以參考序列中核苷酸或殘基之總數，得到序列一致性%。序列一致性可易於藉由已知方法計算，包括(但不限於) Computational Molecular Biology, Lesk, A. N., 編, Oxford University Press, New York (1988)，Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., 編, Academic Press, New York (1993)；Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M.及Griffin, H. G., 編, Humana Press, New Jersey (1994)；Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinge, G., Academic Press (1987)；Sequence Analysis Primer, Gribskov, M.及Devereux, J., 編, M. Stockton Press, New York (1991)；及Carillo, H.及Lipman, D., SIAM J. Applied Math., 48: 1073 (1988)中所述之方法，其教示內容以引用的方式併入本文中。確定序列一致性之較佳方法經設計以在所測試序列之間產生最大匹配。確定序列一致性之方法編碼在可公開獲得之確定給定序列之間的序列一致性的電腦程式中。此類程式之實例包括(但不限於) GCG程式包(Devereux, J., 等人, Nucleic Acids Research, 12(1):387 (1984))、BLASTP、BLASTN及FASTA (Altschul, S. F. 等人, J. Molec. Biol., 215:403-410 (1990)。BLASTX程式可自NCBI及其他來源公開獲得(BLAST Manual, Altschul, S. 等人, NCVI NLM NIH Bethesda, MD 20894, Altschul, S. F. 等人, J. Molec. Biol., 215:403-410 (1990)，其教示內容以引用的方式併入本文中)。此等程式使用預設間隙權重最佳比對序列，以產生給定序列與參考序列之間的最高序列一致性水準。藉由核苷酸序列與參考核苷酸序列具有至少例如85%，較佳90%、91%、92%、93%、94%，甚至更佳95%、96%、97%、98%、99%、99.9%「序列一致性」的聚核苷酸作為說明，意欲除給定聚核苷酸序列可包括參考核苷酸序列之每100個核苷酸至多15，較佳至多10，甚至更佳至多5個點突變之外，給定聚核苷酸之核苷酸序列與參考序列一致。換言之，在核苷酸序列相對於參考核苷酸序列具有至少85%，較佳90%、91%、92%、93%、94%，甚至更佳95%、96%、97%、98%、99%、99.9%一致性的聚核苷酸中，參考序列中至多15%，較佳10%、9%、8%、7%、6%，甚至更佳5%、4%、3%、2%、1%、0.1%的核苷酸可缺失或經另一核苷酸取代，或者一定數目的核苷酸，多至參考序列中總核苷酸的15%，較佳10%、9%、8%、7%、6%，甚至更佳5%、4%、3%、2%、1%、0.1%可***參考序列中。參考序列中之此等突變可發生於參考核苷酸序列之5'或3'末端位置或彼等末端位置之間的任何位置，此等位置個別地散置於參考序列中之核苷酸中或參考序列內的一或多個鄰接基團中。類似地，藉由給定胺基酸序列與參考胺基酸序列具有至少例如85%，較佳90%、91%、92%、93%、94%，甚至更佳95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的多肽，意欲除給定多肽序列可包括參考胺基酸序列之每100個胺基酸至多15，較佳至多10、9、8、7、6，甚至更佳至多5、4、3、2、1個胺基酸變化之外，多肽之給定胺基酸序列與參考序列一致。換言之，為了獲得與參考胺基酸序列具有至少85%，較佳90%、91%、92%、93%、94%，甚至更佳95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的給定多肽序列，參考序列中至多15%，較佳至多10%、9%、8%、7%，甚至更佳至多5%、4%、3%、2%、1%的胺基酸殘基可缺失或經另一胺基酸取代，或者一定數目的胺基酸，至多參考序列中總胺基酸殘基數目的15%，較佳至多10%、9%、8%、7%，甚至更佳至多5%、4%、3%、2%、1%可***參考序列中。參考序列之此等突變可發生於參考胺基酸序列之胺基或羧基末端位置或彼等末端位置之間的任何位置，此等位置個別地散置於參考序列之殘基中或參考序列內的一或多個鄰接基團中。不一致殘基位置之差異較佳為保守胺基酸取代。然而，在確定序列一致性時，保守取代不包括為匹配。
術語「序列一致性」或「一致性百分比」在本文中可互換使用。出於本發明之目的，在此處定義，為了確定兩個胺基酸序列或兩個核酸序列之一致性百分比，出於最佳比較目的來比對序列(例如可將間隙引入第一胺基酸或核酸中以用於與第二胺基酸或核酸序列最佳比對)。接著比較對應胺基酸位置或核苷酸位置處的胺基酸殘基或核苷酸殘基。當第一序列中之位置與第二序列中之對應位置由相同胺基酸殘基或核苷酸殘基佔據時，則分子在該位置處一致。兩個序列之間的一致性百分比為該等序列共有的一致位置數目的函數(亦即，一致性% =一致位置數目/總位置數目(亦即重疊位置) × 100)。較佳地，兩個序列之長度相同。
可在所比較之兩個序列的整個長度上或在兩個序列之片段上進行序列比較。通常且較佳的，在本發明之範疇內，該比較將在所比較的兩個序列之全長上進行。然而，序列一致性可在例如二十個、五十個、一百個或更多個鄰接胺基酸殘基之區域上進行。
如本文所用，尤其應理解，術語「與根據SEQ ID NO:Y之核酸/胺基酸序列具有至少X%序列一致性」(或者術語「與SEQ ID NO:Y之/中所闡述之核酸/胺基酸序列具有至少X%序列一致性」)分別相當於術語「在SEQ ID NO:Y之長度上與根據SEQ ID NO:Y之核酸/胺基酸序列具有至少X%序列一致性」或相當於術語「在SEQ ID NO:Y之完整長度上與根據SEQ ID NO:Y之核酸/胺基酸序列具有至少X%序列一致性」。
技術人員應瞭解，數個不同電腦程式可用於確定兩個序列之間的同源性。舉例而言，可使用數學演算法進行序列比較及兩個序列之間的一致性百分比確定。在一特定態樣中，使用已併入至Accelrys GCG套裝軟體(可在http://www.accelrys.com/products/gcg/處獲得)中之GAP程式中的Needleman及Wunsch (J. Mol. Biol. (48): 444-453 (1970))演算法，使用Blosum 62矩陣或PAM250矩陣以及間隙權數16、14、12、10、8、6或4及長度權數1、2、3、4、5或6，來確定兩個胺基酸或核酸序列之間的一致性百分比。技術人員應瞭解，所有此等不同參數將產生略微不同之結果，但兩個序列之總體一致性百分比在使用不同演算法時不顯著改變。
本發明之蛋白質序列或核酸序列可進一步用作「查詢序列」，以針對公共資料庫進行搜尋，例如以鑑別其他家族成員或相關序列。此類搜尋可使用Altschul等人 (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10之BLASTN及BLASTP程式(2.0版)進行。BLAST蛋白質搜尋可用BLASTP程式、得分=50、字長=3進行，從而獲得與本發明之蛋白質分子同源的胺基酸序列。為實現間隙比對以達成比較目的，可如Altschul等人 (1997) Nucleic Acids Res. 25(17): 3389-3402中所描述使用間隙BLAST。當利用BLAST及間隙BLAST程式時，可使用各別程式(例如BLASTP及BLASTN)之預設參數。參見美國國家生物技術資訊中心(National Center for Biotechnology Information)在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/之主頁。
在本發明之範疇內，術語「貓科動物」係指貓科(Felidae)家族之成員，特定言之貓屬(Felis) (在本文中較佳)、大山貓屬(Lynx)、豹屬(Panthera)、雲豹屬(Neofelis)、波斯野貓屬(Caracal)、美洲豹貓屬(Leopardus)、美洲獅屬(Puma)、獵豹屬(Acinonyx)、豹貓屬(Prionailurus)及兔猻屬(Otocolobus)之成員。貓屬包括例如野貓物種，例如歐洲野貓(Felis silvestris silvestris) (歐洲野貓(European wildcat))、街貓，較佳家貓(Felis silvestris catus) (亦稱為家貓(Felis catus)，亦即家貓(domestic cat))、叢林貓(Felis chaus)、黑足貓(Felis nigripes)、沙漠貓(Felis margarita)及荒漠貓(Felis bieti)。豹屬例如包括虎(Tiger) (虎(Panthera tigris))、獅(Lion) (獅(Panthera leo))、美洲豹(Jaguar) (美洲豹(Panthera onca))、豹(Leopard) (豹(Panthera pardus))、雪豹(Snow leopard) (雪豹(Panthera uncial))及獅虎。其他貓科動物包括但不限於猞猁(Lynx lynx)、短尾貓(Lynx rufus)、獵豹(Acinonyx jubatus) (獵豹(Cheetah))、美洲山獅(Puma concolor) (美洲山獅(Cougar))、美洲豹貓(Leopardus pardalis) (美洲豹貓(Ocelot))。較佳地，「貓科動物」為貓，最佳為家貓。
「免疫原性或免疫組合物」係指包含至少一個抗原或其免疫原性部分之物質的組合物，該物質在宿主體內引發對該組合物之細胞免疫反應或抗體介導之免疫反應的免疫反應。較佳地，免疫原性組合物誘導免疫反應，且更佳地，賦予對貓副黏液病毒感染之一或多個臨床徵象的保護性免疫。在宿主呈現保護性免疫反應使得對新感染之抗性將增強及/或疾病之臨床嚴重程度將降低的情況下，將免疫原性組合物描述為「疫苗」。
本文所用之術語「抗原」為此項技術中充分理解的且包括具有免疫原性之物質(亦即免疫原)以及誘導免疫無反應性或失能(亦即缺失身體防禦機制對外來物質之反應)之物質。如本文所用，術語「抗原」欲意謂含有或包含抗原決定基之全長蛋白質以及其肽片段。此外，術語「抗原編碼序列」係關於編碼抗原之序列。較佳地，抗原編碼序列為諸如cDNA序列之核酸序列。然而，已在本文中其他處定義術語「核酸序列」。
術語「至少一個外源抗原編碼序列」亦涵蓋多於一個外源抗原編碼序列。由此，必須理解，術語「至少一個外源抗原編碼序列」涵蓋兩個、三個、四個、五個或六個外源抗原編碼序列。因此，術語「至少兩個外源抗原編碼序列」涵蓋三個、四個、五個或六個外源抗原編碼序列。
術語「不同外源抗原編碼序列」為彼此相比較序列不同的序列。
如本文所用，「免疫原性組合物」可指引發如本文所述之免疫反應之多肽或蛋白質，諸如病毒表面蛋白質。術語「免疫原性片段」或「免疫原性部分」係指包括一或多個抗原決定基且因此引發本文所述之免疫反應之蛋白質或多肽的片段或截短及/或取代形式。一般而言，此類截短及/或取代形式或片段將包含來自全長蛋白質之至少六個鄰接胺基酸。此類片段可使用此項技術中熟知的多種抗原決定基定位技術鑑別。參見例如Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, 第66卷(Glenn E. Morris, 編, 1996) Humana Press, Totowa, New Jersey。舉例而言，線性抗原決定基可如下確定：藉由在固體支撐物上並行合成大量肽，該等肽對應於蛋白質分子之部分，且在肽仍附接於支撐物時，使肽與抗體反應。此類技術已知且在此項技術中予以描述，參見例如美國專利第4,708,871號；Geysen等人(1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:3998-4002；以及Geysen等人(1986) Molec. Immunol. 23:709-715。類地似，易藉由諸如利用例如x射線結晶學及二維核磁共振判定胺基酸之空間構形來鑑別構形抗原決定基。參見Epitope Mapping Protocols，見上文。該定義內亦包括合成抗原，例如多抗原決定基、側接抗原決定基及其他重組或合成衍生抗原。參見例如Bergmann等人 (1993) Eur. J. Immunol. 23:2777-2781；Bergmann等人 (1996), J. Immunol. 157:3242-3249；Suhrbier, A. (1997), Immunol. and Cell Biol. 75:402-408；及Gardner等人, (1998) 12th World AIDS Conference, Geneva, Switzerland, 1998年6月28日-7月3日。其教示及內容皆以引用的方式併入本文中。
術語「使…免疫(immunizing)」係關於藉由向待免疫接種之貓科動物投與免疫原性組合物，從而引起針對此免疫原性組合物中所包括之抗原之免疫反應的主動免疫。
如本文所用，術語「有需要(in need/of need)」意謂投藥/治療與接受根據本發明之免疫原性組合物之動物的健康狀況或臨床徵象之強化或改善或者該等動物的健康狀況之任何其他積極醫療效果相關。
如本文所用，術語「疫苗」係指包含至少一種在動物中誘導免疫反應之免疫活性組分及可能(但不一定)一或多種增強活性組分之免疫活性之其他組分的醫藥組合物。疫苗可另外包含醫藥組合物典型之其他組分。作為區別，疫苗之免疫活性組分可包含呈原始形式或呈所謂改良式活毒疫苗(MLV)中之減毒顆粒的完整病毒顆粒，或所謂死疫苗(KV)中藉由適當方法不活化之顆粒。在另一形式中，疫苗之免疫活性組分可包含生物體之適當要素(次單位疫苗)，其中此等要素藉由以下產生：破壞整個顆粒或含有此類顆粒之生長培養基且視情況隨後進行純化步驟，產生所需結構；或合成過程，包括藉由使用基於例如細菌、昆蟲、哺乳動物或其他物種之適合系統進行適當操縱加視情況存在之後續分離及純化程序；或使用適合醫藥組合物直接併入遺傳物質，在需要疫苗之動物中誘發合成過程(聚核苷酸疫苗接種)。痘苗可包含一個或同時超過一個上述要素。如在本發明之特定態樣內所用，「疫苗」係指活毒疫苗或活病毒，亦稱為重組疫苗。在本發明之另一特定態樣中，「疫苗」係指不活化病毒或死病毒，包括病毒樣顆粒(VLP)。因此，疫苗可為次單位疫苗或死疫苗(KV)或不活化疫苗。
術語「DNA疫苗接種」或「聚核苷酸疫苗接種」意謂使用適合之醫藥組合物直接接種遺傳物質。
此項技術中已知不活化之各種物理及化學方法。術語「不活化」係指先前毒性或非毒性病毒，其已經照射(紫外線(UV)、X射線、電子束或γ放射)、加熱或化學上處理以不活化、殺死此類病毒同時保留其免疫原性。適合之不活化劑包括β-丙內酯、二或β-或乙醯基-伸乙基亞胺、戊二醛、臭氧及福馬林(formalin) (甲醛)。
對於藉由福馬林或甲醛進行不活化，甲醛通常與水及甲醇混合以產生福馬林。添加甲醇防止在活化過程期間降解或交叉反應。一個實施例使用約0.1%至1%之37%甲醛溶液以使病毒不活化。關鍵係調節福馬林之量以確保使物質不活化，但不會達到由高劑量引起副作用之程度。
更特定而言，在病毒之上下文中術語「不活化」意謂病毒不能在活體內或活體外複製。舉例而言，術語「不活化」可指病毒已活體外繁殖且隨後已使用化學或物理方式不活化，從而使其不再能夠複製。
如本文所用，術語「不活化」、「死」或「KV」可互換使用。
術語「活毒疫苗」係指包含活有機體或複製勝任型病毒或病毒載體之疫苗。
「醫藥組合物」基本上由一或多種能夠改良其投與之生物體或存活在該生物體中或該生物體上之生物體之生理、例如免疫功能的成分組成。術語包括(但不限於)抗生素或抗寄生蟲劑，以及常用以達成某些其他目標之其他組分，諸如(但不限於)加工特性、無菌性、穩定性、經由經腸或非經腸途徑(諸如經口、鼻內、靜脈內、肌肉內、皮下、皮內或其他適合途徑)投與組合物之可行性、投與後耐受性或控制釋放特性。僅出於示範目的而給出的此類醫藥組合物之一個非限制性實例可如下製備：將經感染細胞培養物之細胞培養清液層與穩定劑(例如亞精胺及/或牛血清白蛋白(BSA))混合且隨後藉由其他方法將混合物凍乾或脫水。在疫苗接種前，混合物接著在水溶液(例如鹽水、磷酸鹽緩衝鹽水(PBS))或非水溶液(例如油乳液、鋁類佐劑)中復原。
如本文所用，「醫藥學或獸醫學可接受之載劑」包括任何及所有溶劑、分散介質、包衣、佐劑、穩定劑、稀釋劑、防腐劑、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑、吸附延遲劑及其類似物。在一些特定態樣且尤其包括凍乾免疫原性組合物之態樣中，用於本發明之穩定劑包括用於凍乾或冷凍乾燥之穩定劑。
在一些實施例中，本發明之免疫原性組合物含有佐劑。如本文所用，「佐劑」可包括氫氧化鋁及磷酸鋁、皂苷，例如Quil A、QS-21 (Cambridge Biotech Inc., Cambridge MA)、GPI-0100 (Galenica Pharmaceuticals, Inc., Birmingham, AL)、油包水乳液、水包油乳液、水包油包水乳液。乳液可尤其基於輕液態石蠟油(歐洲藥典類型)；類異戊二烯油，諸如角鯊烷或角鯊烯；由烯烴、尤其異丁烯或癸烯寡聚產生之油；含有直鏈烷基之酸或醇之酯，更尤其植物油、油酸乙酯、丙二醇二-(辛酸酯/癸酸酯)、甘油基三-(辛酸酯/癸酸酯)或丙二醇二油酸酯；分支鏈脂肪酸或醇之酯，尤其異硬脂酸酯。油與乳化劑組合使用以形成乳液。乳化劑較佳為非離子界面活性劑，特定言之視情況經乙氧基化的脫水山梨糖醇、二縮甘露醇(例如，油酸無水甘露糖醇)、乙二醇、聚丙三醇、丙二醇及油酸、異硬脂酸、蓖麻油酸或羥基硬脂酸之酯，以及聚氧丙烯-聚氧乙烯共聚物嵌段，特定言之Pluronic產品，尤其L121。參見Hunter等人, The Theory and Practical Application of Adjuvants (Ed.Stewart-Tull, D. E. S.), JohnWiley and Sons, NY, 第51-94頁 (1995)及Todd等人, Vaccine 15:564-570 (1997)。例示性佐劑為描述於「Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach」, M. Powell及M. Newman編, Plenum Press, 1995之第147頁上的SPT乳液及描述於此同一本書第183頁上之乳液MF59。
佐劑之另一實例為選自丙烯酸或甲基丙烯酸之聚合物及順丁烯二酸酐與烯基衍生物之共聚物的化合物。有利的佐劑化合物為尤其與糖或多元醇之聚烯基醚交聯的丙烯酸或甲基丙烯酸之聚合物。此等化合物由術語卡波姆(carbomer)已知(Pharmeuropa, 第8卷, 第2期, 1996年6月)。熟習此項技術者亦可參考美國專利第2,909,462號，其描述與具有至少3個羥基、較佳不超過8個羥基之聚羥基化合物交聯之此類丙烯酸聚合物，至少三個羥基之氫原子經具有至少2個碳原子之不飽和脂族基團置換。較佳基團為含有2至4個碳原子之彼等基團，例如乙烯基、烯丙基及其他烯系不飽和基團。不飽和基團本身可含有其他取代基，諸如甲基。以CARBOPOL®為名銷售之產品(BF Goodrich, Ohio, USA)尤其適合。其與烯丙基蔗糖或烯丙基異戊四醇交聯。尤其可提及Carbopol 974P、934P及971P。最佳為使用CARBOPOL® 971P。在順丁烯二酸酐與烯基衍生物之共聚物中的為共聚物EMA (Monsanto)，其為順丁烯二酸酐與乙烯之共聚物。此等聚合物溶解於水中產生酸溶液，其將較佳中和至生理pH值，得到將併入免疫原性、免疫或疫苗組合物本身之佐劑溶液。
其他適合之佐劑尤其包括(但不限於) RIBI佐劑系統(Ribi Inc.)、嵌段共聚物(CytRx, Atlanta GA)、SAF-M (Chiron, Emeryville CA)、單磷醯基脂質A、阿夫立定(Avridine)脂質-胺佐劑、來自大腸桿菌之熱不穩定腸毒素(重組或以其他方式)、霍亂毒素、IMS 1314或胞壁醯二肽、或天然存在或重組的細胞介素或其類似物或內源性細胞介素釋放之刺激劑。
預期佐劑可以每劑約100 µg至約10 mg之量，較佳每劑約100 µg至約10 mg之量，更佳每劑約500 µg至約5 mg之量，甚至更佳每劑約750 µg至約2.5 mg之量且最佳每劑約1 mg之量添加。或者，佐劑可以最終產物之體積計在約0.01%至50%之濃度下、較佳在約2%至30%之濃度下、更佳在約5%至25%之濃度下、再更佳在約7%至22%之濃度下且最佳在10%至20%之濃度下。
「稀釋劑」可包括水、鹽水、右旋糖、乙醇、甘油及其類似物。等張劑可尤其包括氯化鈉、右旋糖、甘露糖醇、山梨糖醇及乳糖。穩定劑尤其包括白蛋白及乙二胺四乙酸之鹼金屬鹽。
「經分離」意謂「人工」自天然狀態改變，亦即若其存在於自然界中，則其自其原始環境改變或移除或兩者。舉例而言，天然存在於活生物體中之聚核苷酸或多肽未「經分離」，但與其天然狀態之共存物質分離的相同聚核苷酸或多肽「經分離」，如該術語在本文中所用。
「減毒」意謂降低病原體毒性。在本發明中，「減毒」與「無毒」同義。在本發明中，減毒病毒為毒性已降低以使其不引起感染臨床徵象，但能夠在目標動物體內誘導免疫反應之病毒，但亦可意謂與感染非減毒病毒或病原體且未接受減毒病毒之動物的「對照組」相比，臨床徵象在感染減毒病毒、尤其所主張之ALVAC病毒載體之動物中的發病率或嚴重程度降低。在此上下文中，術語「降低/降低之」意謂與如上所定義之對照組相比，減少至少10%，較佳25%，甚至更佳50%，再更佳60%，甚至更佳70%，再更佳80%，甚至更佳90%，且最佳100%。因此，減毒、無毒病原體，諸如所主張之減毒病毒載體、尤其所主張之ALVAC病毒載體適於產生改良式活毒疫苗(MLV)或改良式活免疫原性組合物。
如本文所述之術語「減毒」副黏液病毒尤其係針對在活體外及/或活體內減毒，尤其在易感細胞株及/或宿主內減毒之副黏液病毒。在此上下文中，「減毒」尤其係關於副黏液病毒之經降低毒性，其中「毒性」應理解為病原性之程度，且其中「病原性」係針對病原體在宿主或宿主後代中誘發臨床徵象之能力。感染本發明之副黏液病毒之可能臨床徵象包含例如個體口渴增加、排尿增多、體重減輕、食慾下降、嗜睡及嘔吐。與個體感染本發明之副黏液病毒相關聯之可能實驗室發現包含例如肌酐及對稱性二甲基精胺酸(SDMA)含量增加。與個體感染本發明之副黏液病毒相關之可能組織學發現包含例如由於主要淋巴細胞、漿細胞、巨噬細胞及粒細胞之浸潤而引起之皮層及髓質瘢痕形成、腎小管退化、間質發炎。
術語「治療及/或預防」係指特定貓副黏液病毒感染之發病率之減少，或由特定貓副黏液病毒感染所引起或與特定貓副黏液病毒感染有關的臨床徵象之嚴重程度之降低。因此，術語「治療及/或預防」亦係指與動物未接受如本文所提供之免疫原性組合物的動物組相比，在動物接受有效量的此類免疫原性組合物的動物組中，感染特定貓副黏液病毒之動物數目減少(=貓副黏液病毒感染之發病率減少)或者通常與貓副黏液病毒感染有關或由貓副黏液病毒感染所引起之臨床徵象之嚴重程度降低。術語「治療及/或預防」通常涉及向一或多個有需要或可得益於此類治療/預防之動物投與有效量的本發明之免疫原性組合物。術語「治療」係指在動物或至少一些動物已感染此類貓副黏液病毒且其中此些動物已展現由此貓副黏液病毒感染所引起或與此貓副黏液病毒感染有關之一些臨床徵象後投與有效量的免疫原性組合物。術語「預防」係指在此動物感染任何貓副黏液病毒之前或至少在此動物未展現或一組動物中沒有動物展現由此貓副黏液病毒感染所引起或與此貓副黏液病毒感染有關之任何臨床徵象的情況下向動物投與。術語「預防(prophylaxis)」及「預防(preventing)」在本申請案中可互換使用。
如本文所用，術語「臨床徵象」係指動物由於貓副黏液病毒之感染症狀。感染之臨床徵象取決於所選病原體。此類臨床徵象之實例包括(但不限於)個體口渴增加、排尿增多、體重減輕、食慾下降、嗜睡、嘔吐、病毒血症、發熱及環境中之病毒排出。與個體感染本發明之貓副黏液病毒相關之可能實驗室發現包含例如肌酐及對稱性二甲基精胺酸(SDMA)含量增加。與個體感染本發明之副黏液病毒相關之可能組織學發現包含例如由於主要淋巴細胞、漿細胞、巨噬細胞及粒細胞之浸潤而引起之皮層及髓質瘢痕形成、腎小管退化、間質發炎。然而，臨床徵象亦包括(但不限於)可直接自活動物觀測到之臨床徵象。
較佳地，與未經治療之動物或者用在本發明之前可用的免疫原性組合物治療但之後感染特定貓副黏液病毒之動物相比，在經治療動物之發病率或嚴重程度方面減輕的臨床徵象係指個體口渴增加、排尿增多、體重減輕、食慾下降、嗜睡、嘔吐、病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎及特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
在本文中，「有效劑量」意謂(但不限於)抗原在抗原投與之動物體內引發或能夠引發免疫反應，使得臨床症狀減少之量。
在組合物之上下文中，如本文所用，術語「有效量」意謂免疫原性組合物在動物中能夠誘導免疫反應，減少感染或發生疾病之發病率或減輕嚴重程度的量。此有效量能夠減少貓科動物中特定貓副黏液病毒感染之發病率或降低特定貓副黏液病毒感染之臨床徵象之嚴重程度。特定言之，有效量係指每劑之菌落形成單位(CFU)。或者，在療法之上下文中，術語「有效量」係指療法足以降低或改善疾病或病症或其一或多種症狀之嚴重程度或持續時間，阻止疾病或病症進展，引起疾病或病症消退，防止與疾病或病症相關之一或多種症狀復發、顯現、發作或進展，或增強或改善另一療法或治療劑之預防或治療的量。
「免疫反應(immune response/immunological response)」意謂(但不限於)出現針對相關(免疫原性)組合物或疫苗的細胞免疫反應及/或抗體介導之免疫反應。通常，免疫或免疫學反應包括(但不限於)一或多個以下作用：產生或活化特異性針對相關組合物或疫苗中所包括之抗原的抗體、B細胞、輔助T細胞、抑制T細胞及/或細胞毒性T細胞。較佳地，宿主將呈現治療性或保護性免疫(記憶)反應，從而對新感染之抗性將增強及/或疾病之臨床嚴重程度將降低。此類保護將藉由以下證實：症狀次數、症狀嚴重程度減少，或缺乏與病原體感染相關之一或多種症狀，病毒血症發作延遲，病毒續存降低，整體病毒負荷降低及/或病毒分泌減少。
「針對疾病之保護」、「保護性免疫」、「功能性免疫」、「減少臨床症狀」、「誘導/產生中和抗體及/或血清轉換」以及類似片語意謂藉由投與本發明之一或多種治療性組合物而產生的針對疾病或病狀之部分或完全反應或其組合，其與暴露於疾病或感染之未經免疫接種動物中之預期狀況相比產生更少有害作用。亦即，在經疫苗接種之動物中感染之有害作用的嚴重程度減輕。在經疫苗接種之動物中感染可減少、減緩或可能完全預防。本文中，在意謂完全預防感染的情況下，進行特別陳述。若未陳述完全預防，則該術語包括部分預防。「保護性免疫反應」或「保護性免疫」將由以下情形證明：受感染宿主通常所呈現之臨床徵象減少或缺失、恢復時間加快及/或感染持續時間減少、或受感染宿主之組織或體液或***物中之病原體效價降低。
在本文中，「降低臨床徵象之發病率及/或嚴重程度」或「減少臨床症狀」意謂(但不限於)與野生型感染相比，減少一組中感染動物之數目、減少或消除展現感染臨床徵象之動物的數目、或降低一或多個動物中存在之任何臨床徵象的嚴重程度。舉例而言，其應指病原體載量之任何減少、病原體排出、病原體傳播之減少，或貓副黏液病毒感染之任何臨床徵象症狀之減少。較佳地，與未接受本發明之治療性組合物且受感染的動物相比，接受本發明之組合物之一或多個動物中此等臨床徵象減少至少10%。更佳地，接受本發明之組合物之動物中臨床徵象減少至少20%，較佳至少30%，更佳至少40%，且甚至更佳至少50%。
本文中之術語「保護增加」意謂(但不限於)與未經疫苗接種之動物對照組相比，經疫苗接種之動物組中與感染物所引起之感染有關的一或多個臨床症狀在統計學上顯著減少。術語「臨床症狀統計學上顯著減少」意謂(但不限於)在攻擊感染物後，經疫苗接種之動物組中至少一種臨床症狀之發生頻率比未經疫苗接種之對照組中降低至少10%、較佳20%、更佳30%、甚至更佳50%且甚至更佳70%。
術語「病原體」為熟習此項技術者所熟知。術語「病原體」包含細菌及病毒。在本發明之過程中，術語「感染貓科動物之病原體」較佳為貓副黏液病毒。
「持久保護」應係指持續至少3週、但更佳至少3個月、再更佳至少6個月之「改良功效」。
術語「排出」係指諸如鼻涕之分泌物，且另外係指由咳嗽或打噴嚏產生之氣霧。因此，可藉由檢驗鼻拭子中之病毒效價或藉由肺中之病毒效價來確定排出。術語「排出」進一步涵蓋病毒至易感動物(亦即易感者(sentinel))之轉移。量測病毒排出之方式在熟習此項技術者之常識內。
「安全性」係指在疫苗接種後經疫苗接種之動物中無以下不良後果，包括(但不限於)：基於細菌之疫苗可能恢復至毒性、臨床上顯著之副作用，諸如持續全身疾病或疫苗投與部位不可接受之發炎。
如本文所用，術語「疫苗接種(vaccination/vaccinating)」或其變化形式意謂(但不限於)包括投與本發明之免疫原性組合物的過程，該免疫原性組合物在投與給動物時直接或間接地引發或能夠引發該動物中之免疫反應。
在本發明之上下文中，「死亡率」係指由感染引起之死亡，且包括感染嚴重至使動物安樂死以防痛苦且人為終止其生命的情況。
本發明之調配物包含有效免疫量之一或多種免疫原性組合物及生理學上可接受之媒劑。疫苗包含有效免疫量之一或多種免疫原性組合物及生理學上可接受之媒劑。調配物應適合投藥模式。
必要時，免疫原性組合物亦可含有少量濕潤劑或乳化劑，或pH緩衝劑。免疫原性組合物可為液體溶液、懸浮液、乳液、錠劑、丸劑、膠囊、持續釋放調配物或粉末。經口調配物可包括標準載劑，諸如醫藥級之甘露糖醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、纖維素、碳酸鎂等。
較佳投與途徑包括(但不限於)鼻內、經口、皮內、皮下及肌肉內。最佳以單次劑量在飲用水中投與為合乎需要的。技術人員將認識到本發明之組合物亦可以一次、兩次或超過兩次劑量以及藉由其他投與途徑投與。舉例而言，此類其他途徑包括皮下、皮內、腹膜內，且視治療之所需持續時間及效果而定，根據本發明之組合物可一次或分若干次投與，亦可間歇性地投與，例如在數天、數週或數月內每日且以諸如約1×104 至1×109 (參見上述病毒效價)之不同劑量投與。在本發明之特定態樣中，劑量為約1×104 至1×108 TCID50 。
術語「樣品」係指體液樣品、經分離細胞樣品或來自組織或器官之樣品。體液樣品可藉由熟知技術獲得，且較佳包括血液、血漿、血清或尿液樣品，更佳為血液、血漿或血清樣品。組織或器官樣品可藉由例如活檢而自任何組織或器官獲得。經分離細胞可藉由諸如離心或細胞分選之分離技術而自體液或組織或器官獲得。
術語「獲得」可包含熟習此項技術者已知的分離及/或純化步驟，較佳使用沈澱、管柱等。
術語「免疫測試」及「基因組分析測試」為區分用根據本發明之免疫原性組合物進行疫苗接種之動物與感染天然存在之(疾病相關)貓副黏液病毒之動物的基礎。免疫測試之實例包括任何酶免疫或免疫化學偵測方法，諸如ELISA (酶聯免疫吸附分析)、EIA (酶免疫分析)、RIA (放射免疫分析)、夾心酶免疫測試、螢光抗體測試(FAT)、電化學發光夾心免疫分析(ECLIA)、解離-增強鑭系氟免疫分析(DELFIA)或固相免疫測試、免疫螢光測試(IFT)、免疫組織化學染色、西方墨點分析或此項技術之技術人員可用的任何其他適合方法。視所用分析而定，可藉由酶、螢光團或放射性同位素標記抗原或抗體。參見例如Coligan等人 Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons Inc., New York, N.Y. (1994)；及Frye等人, Oncogen 4: 1153-1157, 1987。
術語「基因組分析測試」係指基於以下之基因組分析方法：聚合酶鏈反應(PCR)、反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)、即時PCR (r-PCR)或即時反轉錄PCR (rRT-PCR)、Templex-PCR、基於核酸序列之擴增(NASBA)以及使用聚合酶及特定寡核苷酸作為引子之等溫擴增方法。前述擴增方法為此項技術中所熟知。
術語「蛋白質」、「肽」、「多肽」及「多肽片段」在本文中可互換使用以指任何長度之胺基酸殘基之聚合物。聚合物可為直鏈或分支鏈的，其可包含經修飾胺基酸或胺基酸類似物，且其可雜有除胺基酸以外之化學部分。該術語亦涵蓋已經天然或藉由干預修飾之胺基酸聚合物；例如二硫鍵形成、糖基化、脂質化、乙醯化、磷酸化或任何其他操縱或修飾，諸如與標記或生物活性組分結合。
雜交反應可在不同「嚴格度」條件下進行。增加雜交反應嚴格度之條件已為所熟知。參見例如「Molecular Cloning: A Laboratory Manual」, 第二版(Sambrook等人, 1989)。相關條件(為了增加嚴格度)之實例包括：25℃、37℃、50℃及68℃之培育溫度；10 × SSC、6 × SSC、1 × SSC、0.1 × SSC (其中SSC為0.15 M NaCl及15 mM檸檬酸鹽緩衝液)之緩衝液濃度以及使用其他緩衝液系統之等效濃度；0%、25%、50%及75%之甲醯胺濃度；5分鐘至24小時之培育時間；1個、2個或更多個洗滌步驟；1、2或15分鐘之洗滌培育時間；以及6 × SSC、1 × SSC、0.1 × SSC之洗滌溶液或去離子水。
術語「抗原決定基」係指特異性B細胞及/或T細胞反應之抗原或半抗原上之位點。術語亦可與「抗原決定因素」或「抗原決定因素位點」互換使用。識別相同抗原決定基之抗體可在顯示一個抗體阻斷另一抗體與目標抗原之結合之能力之簡單免疫分析中鑑別。
序列表
本申請案含有序列表。該序列表包含以下序列：
SEQ ID NO:1 FPaV-2「Gordon病毒株」全基因組序列；以對應於負RNA股病毒基因組所轉錄之正RNA股的DNA序列給出，亦即該序列如mRNA一般在5'至3'方向上包含ORF
SEQ ID NO:2 FPaV-2「TV25病毒株」全基因組序列；以對應於負RNA股病毒基因組所轉錄之正RNA股的DNA序列給出，亦即該序列如mRNA一般在5'至3'方向上包含ORF
SEQ ID NO:3 FeMoV「Lapön病毒株」全基因組序列；以對應於負RNA股病毒基因組所轉錄之正RNA股的DNA序列給出，亦即該序列如mRNA一般在5'至3'方向上包含ORF
SEQ ID NO:4 FPaV-2「Gordon病毒株」H抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:5 FPaV-2「Gordon病毒株」H抗原核酸，其已經密碼子最佳化以主要在貓科動物中表現；以DNA序列給出
SEQ ID NO:6 FPaV-2「Gordon病毒株」H抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:7 FPaV-2「Gordon病毒株」M抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:8 FPaV-2「Gordon病毒株」M抗原核酸，其已經密碼子最佳化以主要在貓科動物中表現；以DNA序列給出
SEQ ID NO:9 FPaV-2「Gordon病毒株」M抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:10 FPaV-2「Gordon病毒株」F抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:11 FPaV-2「Gordon病毒株」F抗原核酸，其已經密碼子最佳化以主要在貓科動物中表現；以DNA序列給出
SEQ ID NO:12 FPaV-2「Gordon病毒株」F抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:13 FPaV-2「Gordon病毒株」N抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:14 FPaV-2「Gordon病毒株」N抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:15 FPaV-2「Gordon病毒株」P抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:16 FPaV-2「Gordon病毒株」P抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:17 FPaV-2「Gordon病毒株」L抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:18 FPaV-2「Gordon病毒株」L抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:19 FPaV-2「TV25病毒株」H抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:20 FPaV-2「TV25病毒株」H抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:21 FPaV-2「TV25病毒株」M抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:22 FPaV-2「TV25病毒株」M抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:23 FPaV-2「TV25病毒株」F抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:24 FPaV-2「TV25病毒株」F抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:25 FPaV-2「TV25病毒株」N抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:26 FPaV-2「TV25病毒株」N抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:27 FPaV-2「TV25病毒株」P抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:28 FPaV-2「TV25病毒株」P抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:29 FPaV-2「TV25病毒株」L抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:30 FPaV-2「TV25病毒株」L抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:31 FeMoV「Lapön病毒株」H抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:32 FeMoV「Lapön病毒株」H抗原核酸，其已經密碼子最佳化以主要在貓科動物中表現；以DNA序列給出
SEQ ID NO:33 FeMoV「Lapön病毒株」H抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:34 FeMoV「Lapön病毒株」M抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:35 FeMoV「Lapön病毒株」M抗原核酸，其已經密碼子最佳化以主要在貓科動物中表現；以DNA序列給出
SEQ ID NO:36 FeMoV「Lapön病毒株」M抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:37 FeMoV「Lapön病毒株」F抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:38 FeMoV「Lapön病毒株」F抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:39 FeMoV「Lapön病毒株」N抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:40 FeMoV「Lapön病毒株」N抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:41 FeMoV「Lapön病毒株」P抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:42 FeMoV「Lapön病毒株」P抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:43 FeMoV「Lapön病毒株」L抗原「野生型」核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:44 FeMoV「Lapön病毒株」L抗原轉譯之胺基酸序列
SEQ ID NO:45 ALVAC***基因座C3側接區域左臂；以DNA序列給出
SEQ ID NO:46 ALVAC***基因座C3側接區域右臂；以DNA序列給出
SEQ ID NO:47 ALVAC***基因座C5側接區域左臂；以DNA序列給出
SEQ ID NO:48 ALVAC***基因座C5側接區域右臂；以DNA序列給出
SEQ ID NO:49 vCP3025之第3繼代C5***基因座，包括C5側接區域右臂、H6痘瘡啟動子、密碼子最佳化之Gordon H抗原、C5側接區域左臂，亦即鹼基對304,701至308,870
SEQ ID NO:50 vCP3029之第3繼代C5***基因座，包括C5側接區域右臂、H6痘瘡啟動子、密碼子最佳化之Gordon H抗原、C5側接區域左臂，亦即鹼基對304,166至308,380
SEQ ID NO:51 vCP3029之第3繼代C3***基因座，包括C3側接區域右臂、42k (long)痘病毒啟動子、密碼子最佳化之Gordon M抗原、C3側接區域左臂，亦即鹼基對38,608至42,807
SEQ ID NO:52 PCR引子「Gordon_M_probe_F」
SEQ ID NO:53 PCR引子「Gordon_M_probe_R」
SEQ ID NO:54 PCR引子「C3F」
SEQ ID NO:55 PCR引子「C3R」
SEQ ID NO:56 PCR引子「7520」
SEQ ID NO:57 PCR引子「7521」
SEQ ID NO:58 PCR引子「C3-PCR-F」
SEQ ID NO:59 PCR引子「C3-PCR-R」
SEQ ID NO:60 PCR引子「C3-R1」
SEQ ID NO:61 PCR引子「C3-R2」
SEQ ID NO:62 PCR引子「C3-R3」
SEQ ID NO:63 PCR引子「C3-R4」
SEQ ID NO:64 PCR引子「C3-R5」
SEQ ID NO:65 PCR引子「C3-R6」
SEQ ID NO:66 PCR引子「C3-R7」
SEQ ID NO:67 PCR引子「C3-R8」
SEQ ID NO:68 PCR引子「C3-R9」
SEQ ID NO:69 PCR引子「Gordon_M_1F」
SEQ ID NO:70 PCR引子「Gordon_M_2F」
SEQ ID NO:71 PCR引子「Gordon_M_3F」
SEQ ID NO:72 PCR引子「Gordon_M_1R」
SEQ ID NO:73 PCR引子「C3-F5」
SEQ ID NO:74 PCR引子「C3-F7」
SEQ ID NO:75 PCR引子「7931」
SEQ ID NO:76 PCR引子「7932」
SEQ ID NO:77 PCR引子「7927.DC」
SEQ ID NO:78 PCR引子「7696.CXL」
SEQ ID NO:79 PCR引子「7697.CXL」
SEQ ID NO:80 PCR引子「7925.DC」
SEQ ID NO:81 PCR引子「7792.SL」
SEQ ID NO:82 PCR引子「7793SL」
SEQ ID NO:83 PCR引子「7928.DC」
SEQ ID NO:84 PCR引子「7929.DC」
SEQ ID NO:85 PCR引子「7926.DC」
SEQ ID NO:86 PCR引子「Gordon_H_1R」
SEQ ID NO:87 PCR引子「Gordon_H_2F」
SEQ ID NO:88 PCR引子「Gordon_H_probe_R」
SEQ ID NO:89 PCR引子「Gordon_H_probe_F」
SEQ ID NO:90 PCR引子「Gordon_H_1F」
SEQ ID NO:91 PCR引子「Gordon_H_3F」
SEQ ID NO:92 PCR引子「Gordon_H_4F」
SEQ ID NO:93 PCR引子「Gordon_H_5F」
SEQ ID NO:94 FeMoV「Lapön病毒株」H抗原「野生型」(無BamH1限制酶位點)核酸；以DNA序列給出
SEQ ID NO:95 vCP3041選殖之***基因座C3及其鹼基對38,619至43,588之理論核苷酸序列，包括***基因座C3之右側接序列、42k (long)啟動子、Lapön H (wt；無BamH I限制酶位點)及***基因座C3之左側接序列
另外，本申請案包含以下條項：
1. 一種病毒載體，其包含與至少一種感染貓科動物之病原體有關的至少一個外源抗原編碼序列，其中該至少一種感染貓科動物之病原體為貓副黏液病毒。
2. 根據條項1之病毒載體，其中該病毒載體選自由以下組成之群：鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體、水痘病毒病毒載體。
3. 根據條項1至2中任一項之病毒載體，其中為貓副黏液病毒的該至少一種感染貓科動物之病原體選自由以下組成之群：
(a) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(b) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 1之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:1至少70%一致、與SEQ ID NO:1至少75%一致、與SEQ ID NO:1至少80%一致、與SEQ ID NO:1至少85%一致、與SEQ ID NO:1至少90%一致、與SEQ ID NO:1至少91%一致、與SEQ ID NO:1至少92%一致、與SEQ ID NO:1至少93%一致、與SEQ ID NO:1至少94%一致、與SEQ ID NO:1至少95%一致、與SEQ ID NO:1至少96%一致、與SEQ ID NO:1至少97%一致、與SEQ ID NO:1至少98%一致、與SEQ ID NO:1至少99%一致的核酸序列；
(c) 以寄存編號CNCM I-5123寄存於法國國家培養物及微生物保藏中心(CNCM)之2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(d) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 2之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:2至少70%一致、與SEQ ID NO:2至少75%一致、與SEQ ID NO:2至少80%一致、與SEQ ID NO:2至少85%一致、與SEQ ID NO:2至少90%一致、與SEQ ID NO:2至少91%一致、與SEQ ID NO:2至少92%一致、與SEQ ID NO:2至少93%一致、與SEQ ID NO:2至少94%一致、與SEQ ID NO:2至少95%一致、與SEQ ID NO:2至少96%一致、與SEQ ID NO:2至少97%一致、與SEQ ID NO:2至少98%一致、與SEQ ID NO:2至少99%一致的核酸序列；
(e) 貓麻疹病毒(FeMoV)；
(f) 貓麻疹病毒(FeMoV)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 3之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:3至少70%一致、與SEQ ID NO:3至少75%一致、與SEQ ID NO:3至少80%一致、與SEQ ID NO:3至少85%一致、與SEQ ID NO:3至少90%一致、與SEQ ID NO:3至少91%一致、與SEQ ID NO:3至少92%一致、與SEQ ID NO:3至少93%一致、與SEQ ID NO:3至少94%一致、與SEQ ID NO:3至少95%一致、與SEQ ID NO:3至少96%一致、與SEQ ID NO:3至少97%一致、與SEQ ID NO:3至少98%一致、與SEQ ID NO:3至少99%一致的核酸序列；
且較佳選自由以下組成之群：
(b) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 1之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:1至少70%一致、與SEQ ID NO:1至少75%一致、與SEQ ID NO:1至少80%一致、與SEQ ID NO:1至少85%一致、與SEQ ID NO:1至少90%一致、與SEQ ID NO:1至少91%一致、與SEQ ID NO:1至少92%一致、與SEQ ID NO:1至少93%一致、與SEQ ID NO:1至少94%一致、與SEQ ID NO:1至少95%一致、與SEQ ID NO:1至少96%一致、與SEQ ID NO:1至少97%一致、與SEQ ID NO:1至少98%一致、與SEQ ID NO:1至少99%一致的核酸序列；
(c) 以寄存編號CNCM I-5123寄存於法國國家培養物及微生物保藏中心(CNCM)之2型貓副黏液病毒(FPaV-2)；
(d) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸：
(i) 根據SEQ ID NO: 2之核酸序列，
(ii) 與SEQ ID NO:2至少70%一致、與SEQ ID NO:2至少75%一致、與SEQ ID NO:2至少80%一致、與SEQ ID NO:2至少85%一致、與SEQ ID NO:2至少90%一致、與SEQ ID NO:2至少91%一致、與SEQ ID NO:2至少92%一致、與SEQ ID NO:2至少93%一致、與SEQ ID NO:2至少94%一致、與SEQ ID NO:2至少95%一致、與SEQ ID NO:2至少96%一致、與SEQ ID NO:2至少97%一致、與SEQ ID NO:2至少98%一致、與SEQ ID NO:2至少99%一致的核酸序列。
4. 根據條項1至3中任一項之病毒載體，其中該病毒載體為重組及/或非天然存在之病毒載體。
5. 根據條項1至4中任一項之病毒載體，其中該病毒載體為金絲雀痘載體，較佳為減毒金絲雀痘載體，更佳為ALVAC，甚至更佳為ALVAC-1或ALVAC-2，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2547保藏於美國菌種保存中心(ATCC)之ALVAC。
6. 根據條項1至4中任一項之病毒載體，其中該病毒載體為禽痘載體，較佳為減毒禽痘載體，更佳為TROVAC，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2553保藏於美國菌種保存中心(ATCC)之TROVAC。
7. 根據條項1至5中任一項之病毒載體，其中該病毒載體選自由以下組成之群：vCP3025、vCP3029。
8. 根據條項1至7中任一項之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列選自由以下組成之群：血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列、基質蛋白(「M」)編碼序列、融合蛋白(「F」)編碼序列、核衣殼蛋白(「N」)編碼序列、磷蛋白(「P」)編碼序列、RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且更佳為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及/或基質蛋白(「M」)編碼序列及/或融合蛋白(「F」)編碼序列。
9. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:4至少70%一致、與SEQ ID NO:4至少75%一致、與SEQ ID NO:4至少80%一致、與SEQ ID NO:4至少85%一致、與SEQ ID NO:4至少90%一致、與SEQ ID NO:4至少91%一致、與SEQ ID NO:4至少92%一致、與SEQ ID NO:4至少93%一致、與SEQ ID NO:4至少94%一致、與SEQ ID NO:4至少95%一致、與SEQ ID NO:4至少96%一致、與SEQ ID NO:4至少97%一致、與SEQ ID NO:4至少98%一致、與SEQ ID NO:4至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5。
10. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:6至少70%一致、與SEQ ID NO:6至少75%一致、與SEQ ID NO:6至少80%一致、與SEQ ID NO:6至少85%一致、與SEQ ID NO:6至少90%一致、與SEQ ID NO:6至少91%一致、與SEQ ID NO:6至少92%一致、與SEQ ID NO:6至少93%一致、與SEQ ID NO:6至少94%一致、與SEQ ID NO:6至少95%一致、與SEQ ID NO:6至少96%一致、與SEQ ID NO:6至少97%一致、與SEQ ID NO:6至少98%一致、與SEQ ID NO:6至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:6之胺基酸序列。
11. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:7至少70%一致、與SEQ ID NO:7至少75%一致、與SEQ ID NO:7至少80%一致、與SEQ ID NO:7至少85%一致、與SEQ ID NO:7至少90%一致、與SEQ ID NO:7至少91%一致、與SEQ ID NO:7至少92%一致、與SEQ ID NO:7至少93%一致、與SEQ ID NO:7至少94%一致、與SEQ ID NO:7至少95%一致、與SEQ ID NO:7至少96%一致、與SEQ ID NO:7至少97%一致、與SEQ ID NO:7至少98%一致、與SEQ ID NO:7至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8。
12. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:9至少70%一致、與SEQ ID NO:9至少75%一致、與SEQ ID NO:9至少80%一致、與SEQ ID NO:9至少85%一致、與SEQ ID NO:9至少90%一致、與SEQ ID NO:9至少91%一致、與SEQ ID NO:9至少92%一致、與SEQ ID NO:9至少93%一致、與SEQ ID NO:9至少94%一致、與SEQ ID NO:9至少95%一致、與SEQ ID NO:9至少96%一致、與SEQ ID NO:9至少97%一致、與SEQ ID NO:9至少98%一致、與SEQ ID NO:9至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:9之胺基酸序列。
13. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:10至少70%一致、與SEQ ID NO:10至少75%一致、與SEQ ID NO:10至少80%一致、與SEQ ID NO:10至少85%一致、與SEQ ID NO:10至少90%一致、與SEQ ID NO:10至少91%一致、與SEQ ID NO:10至少92%一致、與SEQ ID NO:10至少93%一致、與SEQ ID NO:10至少94%一致、與SEQ ID NO:10至少95%一致、與SEQ ID NO:10至少96%一致、與SEQ ID NO:10至少97%一致、與SEQ ID NO:10至少98%一致、與SEQ ID NO:10至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11。
14. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:12至少70%一致、與SEQ ID NO:12至少75%一致、與SEQ ID NO:12至少80%一致、與SEQ ID NO:12至少85%一致、與SEQ ID NO:12至少90%一致、與SEQ ID NO:12至少91%一致、與SEQ ID NO:12至少92%一致、與SEQ ID NO:12至少93%一致、與SEQ ID NO:12至少94%一致、與SEQ ID NO:12至少95%一致、與SEQ ID NO:12至少96%一致、與SEQ ID NO:12至少97%一致、與SEQ ID NO:12至少98%一致、與SEQ ID NO:12至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:12之胺基酸序列。
15. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:13至少70%一致、與SEQ ID NO:13至少75%一致、與SEQ ID NO:13至少80%一致、與SEQ ID NO:13至少85%一致、與SEQ ID NO:13至少90%一致、與SEQ ID NO:13至少91%一致、與SEQ ID NO:13至少92%一致、與SEQ ID NO:13至少93%一致、與SEQ ID NO:13至少94%一致、與SEQ ID NO:13至少95%一致、與SEQ ID NO:13至少96%一致、與SEQ ID NO:13至少97%一致、與SEQ ID NO:13至少98%一致、與SEQ ID NO:13至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:13。
16. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:14至少70%一致、與SEQ ID NO:14至少75%一致、與SEQ ID NO:14至少80%一致、與SEQ ID NO:14至少85%一致、與SEQ ID NO:14至少90%一致、與SEQ ID NO:14至少91%一致、與SEQ ID NO:14至少92%一致、與SEQ ID NO:14至少93%一致、與SEQ ID NO:14至少94%一致、與SEQ ID NO:14至少95%一致、與SEQ ID NO:14至少96%一致、與SEQ ID NO:14至少97%一致、與SEQ ID NO:14至少98%一致、與SEQ ID NO:14至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:14之胺基酸序列。
17. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:15至少70%一致、與SEQ ID NO:15至少75%一致、與SEQ ID NO:15至少80%一致、與SEQ ID NO:15至少85%一致、與SEQ ID NO:15至少90%一致、與SEQ ID NO:15至少91%一致、與SEQ ID NO:15至少92%一致、與SEQ ID NO:15至少93%一致、與SEQ ID NO:15至少94%一致、與SEQ ID NO:15至少95%一致、與SEQ ID NO:15至少96%一致、與SEQ ID NO:15至少97%一致、與SEQ ID NO:15至少98%一致、與SEQ ID NO:15至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:15。
18. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:16至少70%一致、與SEQ ID NO:16至少75%一致、與SEQ ID NO:16至少80%一致、與SEQ ID NO:16至少85%一致、與SEQ ID NO:16至少90%一致、與SEQ ID NO:16至少91%一致、與SEQ ID NO:16至少92%一致、與SEQ ID NO:16至少93%一致、與SEQ ID NO:16至少94%一致、與SEQ ID NO:16至少95%一致、與SEQ ID NO:16至少96%一致、與SEQ ID NO:16至少97%一致、與SEQ ID NO:16至少98%一致、與SEQ ID NO:16至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:16之胺基酸序列。
19. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:17至少70%一致、與SEQ ID NO:17至少75%一致、與SEQ ID NO:17至少80%一致、與SEQ ID NO:17至少85%一致、與SEQ ID NO:17至少90%一致、與SEQ ID NO:17至少91%一致、與SEQ ID NO:17至少92%一致、與SEQ ID NO:17至少93%一致、與SEQ ID NO:17至少94%一致、與SEQ ID NO:17至少95%一致、與SEQ ID NO:17至少96%一致、與SEQ ID NO:17至少97%一致、與SEQ ID NO:17至少98%一致、與SEQ ID NO:17至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:17。
20. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:18至少70%一致、與SEQ ID NO:18至少75%一致、與SEQ ID NO:18至少80%一致、與SEQ ID NO:18至少85%一致、與SEQ ID NO:18至少90%一致、與SEQ ID NO:18至少91%一致、與SEQ ID NO:18至少92%一致、與SEQ ID NO:18至少93%一致、與SEQ ID NO:18至少94%一致、與SEQ ID NO:18至少95%一致、與SEQ ID NO:18至少96%一致、與SEQ ID NO:18至少97%一致、與SEQ ID NO:18至少98%一致、與SEQ ID NO:18至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:18之胺基酸序列。
21. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:19至少70%一致、與SEQ ID NO:19至少75%一致、與SEQ ID NO:19至少80%一致、與SEQ ID NO:19至少85%一致、與SEQ ID NO:19至少90%一致、與SEQ ID NO:19至少91%一致、與SEQ ID NO:19至少92%一致、與SEQ ID NO:19至少93%一致、與SEQ ID NO:19至少94%一致、與SEQ ID NO:19至少95%一致、與SEQ ID NO:19至少96%一致、與SEQ ID NO:19至少97%一致、與SEQ ID NO:19至少98%一致、與SEQ ID NO:19至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:19。
22. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:20至少70%一致、與SEQ ID NO:20至少75%一致、與SEQ ID NO:20至少80%一致、與SEQ ID NO:20至少85%一致、與SEQ ID NO:20至少90%一致、與SEQ ID NO:20至少91%一致、與SEQ ID NO:20至少92%一致、與SEQ ID NO:20至少93%一致、與SEQ ID NO:20至少94%一致、與SEQ ID NO:20至少95%一致、與SEQ ID NO:20至少96%一致、與SEQ ID NO:20至少97%一致、與SEQ ID NO:20至少98%一致、與SEQ ID NO:20至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:20之胺基酸序列。
23. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:21至少70%一致、與SEQ ID NO:21至少75%一致、與SEQ ID NO:21至少80%一致、與SEQ ID NO:21至少85%一致、與SEQ ID NO:21至少90%一致、與SEQ ID NO:21至少91%一致、與SEQ ID NO:21至少92%一致、與SEQ ID NO:21至少93%一致、與SEQ ID NO:21至少94%一致、與SEQ ID NO:21至少95%一致、與SEQ ID NO:21至少96%一致、與SEQ ID NO:21至少97%一致、與SEQ ID NO:21至少98%一致、與SEQ ID NO:21至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:21。
24. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:22至少70%一致、與SEQ ID NO:22至少75%一致、與SEQ ID NO:22至少80%一致、與SEQ ID NO:22至少85%一致、與SEQ ID NO:22至少90%一致、與SEQ ID NO:22至少91%一致、與SEQ ID NO:22至少92%一致、與SEQ ID NO:22至少93%一致、與SEQ ID NO:22至少94%一致、與SEQ ID NO:22至少95%一致、與SEQ ID NO:22至少96%一致、與SEQ ID NO:22至少97%一致、與SEQ ID NO:22至少98%一致、與SEQ ID NO:22至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:22之胺基酸序列。
25. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:23至少70%一致、與SEQ ID NO:23至少75%一致、與SEQ ID NO:23至少80%一致、與SEQ ID NO:23至少85%一致、與SEQ ID NO:23至少90%一致、與SEQ ID NO:23至少91%一致、與SEQ ID NO:23至少92%一致、與SEQ ID NO:23至少93%一致、與SEQ ID NO:23至少94%一致、與SEQ ID NO:23至少95%一致、與SEQ ID NO:23至少96%一致、與SEQ ID NO:23至少97%一致、與SEQ ID NO:23至少98%一致、與SEQ ID NO:23至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:23。
26. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:24至少70%一致、與SEQ ID NO:24至少75%一致、與SEQ ID NO:24至少80%一致、與SEQ ID NO:24至少85%一致、與SEQ ID NO:24至少90%一致、與SEQ ID NO:24至少91%一致、與SEQ ID NO:24至少92%一致、與SEQ ID NO:24至少93%一致、與SEQ ID NO:24至少94%一致、與SEQ ID NO:24至少95%一致、與SEQ ID NO:24至少96%一致、與SEQ ID NO:24至少97%一致、與SEQ ID NO:24至少98%一致、與SEQ ID NO:24至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:24之胺基酸序列。
27. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:25至少70%一致、與SEQ ID NO:25至少75%一致、與SEQ ID NO:25至少80%一致、與SEQ ID NO:25至少85%一致、與SEQ ID NO:25至少90%一致、與SEQ ID NO:25至少91%一致、與SEQ ID NO:25至少92%一致、與SEQ ID NO:25至少93%一致、與SEQ ID NO:25至少94%一致、與SEQ ID NO:25至少95%一致、與SEQ ID NO:25至少96%一致、與SEQ ID NO:25至少97%一致、與SEQ ID NO:25至少98%一致、與SEQ ID NO:25至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:25。
28. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:26至少70%一致、與SEQ ID NO:26至少75%一致、與SEQ ID NO:26至少80%一致、與SEQ ID NO:26至少85%一致、與SEQ ID NO:26至少90%一致、與SEQ ID NO:26至少91%一致、與SEQ ID NO:26至少92%一致、與SEQ ID NO:26至少93%一致、與SEQ ID NO:26至少94%一致、與SEQ ID NO:26至少95%一致、與SEQ ID NO:26至少96%一致、與SEQ ID NO:26至少97%一致、與SEQ ID NO:26至少98%一致、與SEQ ID NO:26至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:26之胺基酸序列。
29. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:27至少70%一致、與SEQ ID NO:27至少75%一致、與SEQ ID NO:27至少80%一致、與SEQ ID NO:27至少85%一致、與SEQ ID NO:27至少90%一致、與SEQ ID NO:27至少91%一致、與SEQ ID NO:27至少92%一致、與SEQ ID NO:27至少93%一致、與SEQ ID NO:27至少94%一致、與SEQ ID NO:27至少95%一致、與SEQ ID NO:27至少96%一致、與SEQ ID NO:27至少97%一致、與SEQ ID NO:27至少98%一致、與SEQ ID NO:27至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:27。
30. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:28至少70%一致、與SEQ ID NO:28至少75%一致、與SEQ ID NO:28至少80%一致、與SEQ ID NO:28至少85%一致、與SEQ ID NO:28至少90%一致、與SEQ ID NO:28至少91%一致、與SEQ ID NO:28至少92%一致、與SEQ ID NO:28至少93%一致、與SEQ ID NO:28至少94%一致、與SEQ ID NO:28至少95%一致、與SEQ ID NO:28至少96%一致、與SEQ ID NO:28至少97%一致、與SEQ ID NO:28至少98%一致、與SEQ ID NO:28至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:28之胺基酸序列。
31. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:29至少70%一致、與SEQ ID NO:29至少75%一致、與SEQ ID NO:29至少80%一致、與SEQ ID NO:29至少85%一致、與SEQ ID NO:29至少90%一致、與SEQ ID NO:29至少91%一致、與SEQ ID NO:29至少92%一致、與SEQ ID NO:29至少93%一致、與SEQ ID NO:29至少94%一致、與SEQ ID NO:29至少95%一致、與SEQ ID NO:29至少96%一致、與SEQ ID NO:29至少97%一致、與SEQ ID NO:29至少98%一致、與SEQ ID NO:29至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:29。
32. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:30至少70%一致、與SEQ ID NO:30至少75%一致、與SEQ ID NO:30至少80%一致、與SEQ ID NO:30至少85%一致、與SEQ ID NO:30至少90%一致、與SEQ ID NO:30至少91%一致、與SEQ ID NO:30至少92%一致、與SEQ ID NO:30至少93%一致、與SEQ ID NO:30至少94%一致、與SEQ ID NO:30至少95%一致、與SEQ ID NO:30至少96%一致、與SEQ ID NO:30至少97%一致、與SEQ ID NO:30至少98%一致、與SEQ ID NO:30至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:30之胺基酸序列。
33. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:31至少70%一致、與SEQ ID NO:31至少75%一致、與SEQ ID NO:31至少80%一致、與SEQ ID NO:31至少85%一致、與SEQ ID NO:31至少90%一致、與SEQ ID NO:31至少91%一致、與SEQ ID NO:31至少92%一致、與SEQ ID NO:31至少93%一致、與SEQ ID NO:31至少94%一致、與SEQ ID NO:31至少95%一致、與SEQ ID NO:31至少96%一致、與SEQ ID NO:31至少97%一致、與SEQ ID NO:31至少98%一致、與SEQ ID NO:31至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32。
34. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:33至少70%一致、與SEQ ID NO:33至少75%一致、與SEQ ID NO:33至少80%一致、與SEQ ID NO:33至少85%一致、與SEQ ID NO:33至少90%一致、與SEQ ID NO:33至少91%一致、與SEQ ID NO:33至少92%一致、與SEQ ID NO:33至少93%一致、與SEQ ID NO:33至少94%一致、與SEQ ID NO:33至少95%一致、與SEQ ID NO:33至少96%一致、與SEQ ID NO:33至少97%一致、與SEQ ID NO:33至少98%一致、與SEQ ID NO:33至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:33之胺基酸序列。
35. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO:34至少70%一致、與SEQ ID NO:34至少75%一致、與SEQ ID NO:34至少80%一致、與SEQ ID NO:34至少85%一致、與SEQ ID NO:34至少90%一致、與SEQ ID NO:34至少91%一致、與SEQ ID NO:34至少92%一致、與SEQ ID NO:34至少93%一致、與SEQ ID NO:34至少94%一致、與SEQ ID NO:34至少95%一致、與SEQ ID NO:34至少96%一致、與SEQ ID NO:34至少97%一致、與SEQ ID NO:34至少98%一致、與SEQ ID NO:34至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35。
36. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:36至少70%一致、與SEQ ID NO:36至少75%一致、與SEQ ID NO:36至少80%一致、與SEQ ID NO:36至少85%一致、與SEQ ID NO:36至少90%一致、與SEQ ID NO:36至少91%一致、與SEQ ID NO:36至少92%一致、與SEQ ID NO:36至少93%一致、與SEQ ID NO:36至少94%一致、與SEQ ID NO:36至少95%一致、與SEQ ID NO:36至少96%一致、與SEQ ID NO:36至少97%一致、與SEQ ID NO:36至少98%一致、與SEQ ID NO:36至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:36之胺基酸序列。
37. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO:37至少70%一致、與SEQ ID NO:37至少75%一致、與SEQ ID NO:37至少80%一致、與SEQ ID NO:37至少85%一致、與SEQ ID NO:37至少90%一致、與SEQ ID NO:37至少91%一致、與SEQ ID NO:37至少92%一致、與SEQ ID NO:37至少93%一致、與SEQ ID NO:37至少94%一致、與SEQ ID NO:37至少95%一致、與SEQ ID NO:37至少96%一致、與SEQ ID NO:37至少97%一致、與SEQ ID NO:37至少98%一致、與SEQ ID NO:37至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:37。
38. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:38至少70%一致、與SEQ ID NO:38至少75%一致、與SEQ ID NO:38至少80%一致、與SEQ ID NO:38至少85%一致、與SEQ ID NO:38至少90%一致、與SEQ ID NO:38至少91%一致、與SEQ ID NO:38至少92%一致、與SEQ ID NO:38至少93%一致、與SEQ ID NO:38至少94%一致、與SEQ ID NO:38至少95%一致、與SEQ ID NO:38至少96%一致、與SEQ ID NO:38至少97%一致、與SEQ ID NO:38至少98%一致、與SEQ ID NO:38至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:38之胺基酸序列。
39. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含與SEQ ID NO:39至少70%一致、與SEQ ID NO:39至少75%一致、與SEQ ID NO:39至少80%一致、與SEQ ID NO:39至少85%一致、與SEQ ID NO:39至少90%一致、與SEQ ID NO:39至少91%一致、與SEQ ID NO:39至少92%一致、與SEQ ID NO:39至少93%一致、與SEQ ID NO:39至少94%一致、與SEQ ID NO:39至少95%一致、與SEQ ID NO:39至少96%一致、與SEQ ID NO:39至少97%一致、與SEQ ID NO:39至少98%一致、與SEQ ID NO:39至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:39。
40. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為核衣殼蛋白(「N」)編碼序列，且該核衣殼蛋白(「N」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:40至少70%一致、與SEQ ID NO:40至少75%一致、與SEQ ID NO:40至少80%一致、與SEQ ID NO:40至少85%一致、與SEQ ID NO:40至少90%一致、與SEQ ID NO:40至少91%一致、與SEQ ID NO:40至少92%一致、與SEQ ID NO:40至少93%一致、與SEQ ID NO:40至少94%一致、與SEQ ID NO:40至少95%一致、與SEQ ID NO:40至少96%一致、與SEQ ID NO:40至少97%一致、與SEQ ID NO:40至少98%一致、與SEQ ID NO:40至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:40之胺基酸序列。
41. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含與SEQ ID NO:41至少70%一致、與SEQ ID NO:41至少75%一致、與SEQ ID NO:41至少80%一致、與SEQ ID NO:41至少85%一致、與SEQ ID NO:41至少90%一致、與SEQ ID NO:41至少91%一致、與SEQ ID NO:41至少92%一致、與SEQ ID NO:41至少93%一致、與SEQ ID NO:41至少94%一致、與SEQ ID NO:41至少95%一致、與SEQ ID NO:41至少96%一致、與SEQ ID NO:41至少97%一致、與SEQ ID NO:41至少98%一致、與SEQ ID NO:41至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:41。
42. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為磷蛋白(「P」)編碼序列，且該磷蛋白(「P」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:42至少70%一致、與SEQ ID NO:42至少75%一致、與SEQ ID NO:42至少80%一致、與SEQ ID NO:42至少85%一致、與SEQ ID NO:42至少90%一致、與SEQ ID NO:42至少91%一致、與SEQ ID NO:42至少92%一致、與SEQ ID NO:42至少93%一致、與SEQ ID NO:42至少94%一致、與SEQ ID NO:42至少95%一致、與SEQ ID NO:42至少96%一致、與SEQ ID NO:42至少97%一致、與SEQ ID NO:42至少98%一致、與SEQ ID NO:42至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:42之胺基酸序列。
43. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含與SEQ ID NO:43至少70%一致、與SEQ ID NO:43至少75%一致、與SEQ ID NO:43至少80%一致、與SEQ ID NO:43至少85%一致、與SEQ ID NO:43至少90%一致、與SEQ ID NO:43至少91%一致、與SEQ ID NO:43至少92%一致、與SEQ ID NO:43至少93%一致、與SEQ ID NO:43至少94%一致、與SEQ ID NO:43至少95%一致、與SEQ ID NO:43至少96%一致、與SEQ ID NO:43至少97%一致、與SEQ ID NO:43至少98%一致、與SEQ ID NO:43至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:43。
44. 根據條項8之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且該RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列包含編碼具有如下胺基酸序列之多肽的核酸序列，該胺基酸序列與SEQ ID NO:44至少70%一致、與SEQ ID NO:44至少75%一致、與SEQ ID NO:44至少80%一致、與SEQ ID NO:44至少85%一致、與SEQ ID NO:44至少90%一致、與SEQ ID NO:44至少91%一致、與SEQ ID NO:44至少92%一致、與SEQ ID NO:44至少93%一致、與SEQ ID NO:44至少94%一致、與SEQ ID NO:44至少95%一致、與SEQ ID NO:44至少96%一致、與SEQ ID NO:44至少97%一致、與SEQ ID NO:44至少98%一致、與SEQ ID NO:44至少99%一致，且較佳為根據SEQ ID NO:44之胺基酸序列。
45. 根據條項1至44中任一項之病毒載體，其中該病毒載體包含兩個或更多個外源抗原編碼序列，較佳包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含基質蛋白(「M」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列以及融合蛋白(「F」)編碼序列；或較佳包含兩個相同的外源抗原編碼序列(亦即，H + H、F + F、M + M、P + P、L + L、N + N)，但該等編碼序列來自兩個不同的病毒株，諸如一個外源抗原編碼序列來自2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株(更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」)，且另一個外源抗原編碼序列來自貓麻疹病毒株(更佳為「Lapön病毒株」)，例如包含一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列；更佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株，甚至更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」，且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為貓麻疹病毒株，甚至更佳為「Lapön病毒株」；最佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少70%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少75%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少80%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少85%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少90%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少91%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少92%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少93%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少94%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少95%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少96%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少97%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少98%一致、與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:19；且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少70%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少75%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少80%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少85%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少90%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少91%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少92%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少93%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少94%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少95%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少96%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少97%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少98%一致、與SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:94至少99%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:94。
46. 根據條項1至45中任一項之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列***在至少一個***基因座中，較佳***在病毒載體基因組之非必需區域中。
47. 根據條項46之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列***在兩個或更多個***基因座中。
48. 根據條項46至47中任一項之病毒載體，其中該至少一個***基因座為***基因座C3。
49. 根據條項46至48中任一項之病毒載體，其中該病毒載體包含***基因座C3之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:45之側接序列(C3側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:46之側接序列(C3側接區域右臂)。
50. 根據條項46至49中任一項之病毒載體，其中該至少一個***基因座為***基因座C5。
51. 根據條項46至50中任一項之病毒載體，其中該病毒載體包含***基因座C5之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:47之側接序列(C5側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:48之側接序列(C5側接區域右臂)。
52. 根據條項46至51之病毒載體，其中該至少一個***基因座為***基因座C6。
53. 根據條項1至46中任一項之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列可操作地連接於至少一個啟動子序列，較佳弱啟動子序列。
54. 根據條項53之病毒載體，其中該至少一個啟動子序列為H6痘瘡啟動子。
55. 根據條項53至54中任一項之病毒載體，其中該至少一個啟動子序列為I3L痘瘡啟動子。
56. 根據條項53至55中任一項之病毒載體，其中該至少一個啟動子序列為42k (long)痘病毒啟動子。
57. 根據條項53至56中任一項之病毒載體，其中該至少一個啟動子序列為7.5k痘瘡啟動子。
58. 根據條項53至57中任一項之病毒載體，其中該至少一個啟動子序列為Pi痘瘡啟動子。
59. 根據條項1至58中任一項之病毒載體，其中該病毒載體進一步包含其他調節序列，諸如終止信號及/或聚腺苷酸化序列。
60. 根據條項1至59中任一項之病毒載體，其中該病毒載體包含與選自由SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:95組成之群之核酸序列至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%一致的核酸序列，且較佳為選自由以下組成之群之核酸序列：SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:95。
61. 根據條項1至60中任一項之病毒載體，其中該貓科動物為貓，較佳為家貓。
62. 一種哺乳動物宿主細胞，其特徵在於其包含根據條項1至61中任一項之病毒載體。
63. 一種根據條項1至61中任一項之病毒載體或根據條項62之哺乳動物宿主細胞的用途，其係用於製造免疫原性組合物或疫苗。
64. 一種免疫原性組合物，其包含
(a) 根據條項1至61中任一項之病毒載體或根據條項62之哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由根據條項1至61中任一項之病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 視情況存在之醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用；
其中該免疫原性組合物較佳包含病毒，諸如感染性病毒。
65. 一種疫苗或醫藥組合物，其包含
(a) 根據條項1至61中任一項之病毒載體或根據條項62之哺乳動物宿主細胞，及/或
(b) 由根據條項1至61中任一項之病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及
(c) 醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用，
(d) 該疫苗或醫藥組合物視情況進一步包含佐劑。
66. 一種用於製備免疫原性組合物或疫苗之方法，該免疫原性組合物或疫苗用於降低與至少一種病原性副黏液病毒感染有關或由至少一種病原性副黏液病毒感染引起之一或多個臨床徵象之發病率及/或嚴重程度，該方法包含以下步驟：
(a) 用根據條項1至61中任一項之病毒載體感染根據條項62之哺乳動物宿主細胞，
(b) 在適合之條件下培養經感染細胞，
(c) 收集經感染細胞培養物，
(d) 視情況純化步驟(c)所收集之經感染細胞培養物，
(e) 視情況混合該所收集之經感染細胞培養物與醫藥學上可接受之載劑。
67. 根據條項64之免疫原性組合物或根據條項65之疫苗，該免疫原性組合物或疫苗適用於減少或預防由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病之方法，或適用於治療及/或預防至少一種病原性副黏液病毒感染之方法，其中該貓科動物較佳為貓，更佳為家貓，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該等由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病或該至少一種病原性副黏液病毒感染較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
68. 一種使貓科動物(諸如貓，更佳為家貓)免疫以對抗由該貓科動物中之至少一種病原性副黏液病毒所引起之臨床疾病的方法，該方法包含以下步驟：向貓科動物投與根據條項64之免疫原性組合物或根據條項65之疫苗，其中該免疫原性組合物或疫苗無法引起感染臨床徵象但能夠誘導使貓科動物對該至少一種副黏液病毒之病原性形式免疫的免疫反應，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該臨床疾病或該等感染臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
69. 一種用於對貓科動物、較佳貓、更佳家貓進行疫苗接種以抵抗貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關之疾病及/或降低貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關或由至少一種病原性副黏液病毒引起之一或多個臨床徵象的發病率或嚴重程度的套組，該套組包含：
(a) 能夠向該貓科動物投與疫苗之分配器；及
(b) 根據條項64之免疫原性組合物或根據條項65之疫苗，及
(c) 視情況存在之指導手冊；
其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該疾病或該等臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
實例
實例 1 ： 構築 vCP3025 ： ALVAC C5/H6p 合成性 Gordon H 及 vCP3029 ： ALVAC C3/42k Long 合成性 Gordon M + C5/H6p 合成性 Gordon H ( 包含 SEQ ID NO:49 、 SEQ ID NO:50 及 SEQ ID NO:51 ； 圖 2 、圖 3 及圖 4)
目的：為了產生兩個ALVAC構築體：一個構築體具有單倍***序列且一個構築體具有雙倍***序列。單倍構築體在H6啟動子控制下表現C5***基因座中之密碼子最佳化Gordon H。雙倍構築體在H6啟動子控制下表現C5***基因座中之密碼子最佳化Gordon H且在42k long啟動子控制下表現C3***基因座中之密碼子最佳化Gordon M。
基因：合成性Gordon H；合成性Gordon M
一般重組資訊：
A. 親代病毒：較後繼代衍生之ALVAC，除繼代層級外，基本上為與親代ALVAC ATCC VR-2547相同的病毒；效價= 1.5 × 10^10 pfu/mL
B. 供體質體：pC5 H6p Gordon H (opt)；pC3 42K Gordon M (opt)
C. ***基因座：單倍=C5；雙倍=C3及C5
D. 啟動子：C5位點/***基因座=H6啟動子；C3位點/***基因座=42k Long啟動子
E. 用於活體外重組之細胞：原代雞胚胎纖維母細胞(1° CEF)
F. 用於重組選擇之方法：Gordon H及Gordon M特異性探針之溶菌斑雜交
重組產生之詳細描述。
藉由用Not I線性化供體質體轉染1° CEF細胞來進行活體外重組(IVR)。使用20 µg的各供體質體[pC5 H6p Gordon H (opt)及pC3 42K Gordon M (opt)]進行單次IVR。Fugene HD (Promega目錄號E2311)為轉染試劑。隨後用親代ALVAC作為拯救病毒以MOI 10感染經轉染之細胞。24小時後，收集經轉染之感染細胞，用音波處理，且用於重組病毒篩選。
基於溶菌斑轉移雜交(lift hybridization)方法來篩選重組溶菌斑。將經感染單層轉移至帶正電的耐綸轉印膜(GE Healthcare目錄號RPN82B)上，且藉由在轉移緩衝液存在下將其他耐綸膜按壓在原始轉移物上來製備彼等轉移物之複本。用經生物素標記之Gordon H特異性探針或經生物素標記之Gordon M特異性探針探測該等複本。在第3及4回合中，製備第三轉移物集合且用ALVAC特異性親代探針(在第3回合中用C3探針；在第4回合中用C5探針)進行探測。ALVAC親代探針結合於ORF中在重組期間缺失的區域。使用Thermo Scientific DecaLabel DNA標記套組(產品編號K0622)標記探針。使用Thermo Scientific化學發光核酸偵測模組套組(產品編號89880)使所探測之轉移物顯影。選擇重組溶菌斑，自原始膜分出，且在下一純化回合中用於感染。在按順序的第三溶菌斑純化回合中，挑選表示為vCP3029.2.2.1之重組物。基於薄膜結果，預期此溶菌斑在下一篩選回合中產生雙倍***序列病毒。然而，在第四篩選回合中接種此經挑選之溶菌斑產生單倍***序列[C5位點中之Gordon H (opt)]及雙倍***序列[C5位點中之Gordon H (opt)及C3位點中之Gordon M (opt)]溶菌斑。挑選雙倍***序列溶菌斑且標記為vCP3029.2.2.1.2。挑選單倍***序列溶菌斑且標記為vCP3025.2.2.1.1。
針對vCP3025.2.2.1.1及vCP3029.2.2.1.2進行第五及最終回合之溶菌斑純化。自vCP3025.2.2.1.1之未經稀釋培養盤取出個別溶菌斑之兩個瓊脂糖鑽孔片(vCP3025.2.2.1.1.1及vCP3025.2.2.1.1.2)。類似地，自vCP3029.2.2.1.2之未經稀釋培養盤取出個別溶菌斑之三個瓊脂糖鑽孔片(vCP3029.2.2.1.2.3、vCP3029.2.2.1.2.4及vCP3029.2.2.1.2.5)。擴增此等鑽孔片以獲得P1 (第1繼代) (T-25燒瓶)。PCR測試證實，vCP3025.2.2.1.1.2在C5位點中含有Gordon H (opt)***序列，且其在C3位點中不含有Gordon M (opt)***序列。類似地，PCR測試證實，vCP3029.2.2.1.2.3在C5位點中含有Gordon H (opt)***序列且在C3位點中含有Gordon M (opt)***序列。將vCP3025.2.2.1.1.2 (單倍***序列)及vCP3029.2.2.1.2.3 (雙倍***序列)擴增至P2 (第2繼代) (每一構築體兩個T-150燒瓶)。將此等P2儲備液稱為vCP3025 P2及vCP3029 P2。
將vCP3025 P2及vCP3029 P2按比例擴大至P3 (第3繼代) (每一構築體四個滾瓶)。經由蔗糖離心塊濃縮並純化P3物質。將此等P3儲備液稱為vCP3025及vCP3029。
重組物分析：對P3儲備液進行以下分析
無菌性：對vCP3025及vCP3029之P3儲備液進行無菌性測試。針對每一構築體，將50 µL等分試樣接種至兩個沙氏右旋糖瓊脂(Sabouraud Dextrose Agar；SDA)培養盤中之每一者上，且接種至兩個含5%羊血之胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA II 5% SB)培養盤中之每一者上(BBL目錄號分別為221180及221239)。針對每一構築體，將一個SDA培養盤及一個TSA II 5% SB培養盤在37℃下培育10天，且將另一組培養盤在室溫下培育10天。在10天結束時，培養盤皆未顯示出細菌或真菌生長之任何徵象。
遺傳純度之確認：
經由若干單獨PCR反應來確認P3儲備液之純度。第一PCR反應使用位於C5臂之任一末端處的引子(引子7931及7932)。此等引子針對野生型ALVAC產生2,470bp條帶且針對在C5位點中含有Gordon H (opt)之重組物產生4240 bp條帶。儘管存在將擴增整個C3區域之引子，但彼等引子將針對野生型ALVAC產生4539bp條帶且針對在C3位點中含有Gordon M (opt)之重組物產生4289bp條帶。在凝膠上難以偵測到此大小差異。出於該原因，進行兩次其他PCR以分析C3位點。在第一反應中，使用用於製備Gordon M探針之引子(Gordon_M_probe_F及Gordon_M_probe_R)來擴增樣品。此等引子針對在C3位點中含有Gordon M (opt)之重組物產生621 bp條帶，且針對野生型ALVAC未產生條帶。在第二反應中，使用用於製備野生型C3探針之引子(C3F及C3R)來擴增樣品。此等引子位於在重組期間缺失的區域中，且針對野生型ALVAC產生1007bp條帶且針對在C3位點中含有Gordon M (opt)之重組物未產生條帶。
序列分析：藉由PCR擴增進行P3儲備液之更詳細序列分析，且針對vCP3025進行C5位點之序列分析且針對vCP3029進行C3及C5位點之序列分析。使用正好位於C5重組臂外部之引子7931及7932來擴增C5位點。使用正好位於C3重組臂外部之引子C3-PCR-F及C3-PCR-R來擴增C3位點。在所有情況下，PCR產生具有預期大小之單倍條帶，且定序分析證實重組臂之預期結果。
方法、試劑及引子
用於擴增Gordon H (opt)探針之引子：
Gordon H probe F GTTCGCCACCGTGAACATCC (SEQ ID NO:89)
Gordon H probe R CACTGCCTTCACGGTCACG (SEQ ID NO:88)
用於擴增Gordon M (opt)探針之引子：
Gordon M probe F GGAGATCCTGACTCTGAACATCG (SEQ ID NO:52)
Gordon M probe R CTCCACAGAGTTTTATTCAGCCC (SEQ ID NO:53)
用於擴增ALVAC親代探針(C3位點)之引子：
C3F CGTAGAGTTTTTTGTCTAGTTCTAT (SEQ ID NO:54)
C3R GTTGTTTTATGCGGTAAAGAATAAT (SEQ ID NO:55)
用於擴增ALVAC親代探針(C5位點)之引子：
7520 TCTTGCTTCGCAGTCATCGTTCTG (SEQ ID NO:56)
7521 TCTAAAATGCATAATTTCTAA (SEQ ID NO:57)
用於C3位點之PCR擴增以供進行定序分析之引子：
C3-PCR-F GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC (SEQ ID NO:58)
C3-PCR-R CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC (SEQ ID NO:59)
用於C5位點之PCR擴增以供進行定序分析之引子：
7931 GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT (SEQ ID NO:75)
7932 TGATTATAGCTATTATCACAGACTC (SEQ ID NO:76)
用於對C3位點進行定序分析之引子：
C3-PCR-F GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC (SEQ ID NO:58)
C3-PCR-R CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC (SEQ ID NO:59)
C3-R1 TTTATAGGTAAATCCAGGAA (SEQ ID NO:60)
C3-R2 GCCTACTAAGAAAACTAGAAGATAC (SEQ ID NO:61)
C3-R3 AGATTGATATAAATGAATATGTAA (SEQ ID NO:62)
C3-R4 CGACGTTAGGTTAGATACTG (SEQ ID NO:63)
C3-R5 ATGCGGTACCCTGTTCGAAG (SEQ ID NO:64)
C3-R6 CAGAAATGAGTAATGGAAGA (SEQ ID NO:65)
C3-R7 CTGGAAATAGTCCGTTATAT (SEQ ID NO:66)
C3-R8 CAGTATCTCATAAAGGCACTTA (SEQ ID NO:67)
C3-R9 CCGTTCTAAATATAGCTGTTGCAT (SEQ ID NO:68)
Gordon M 1F ATGACTGAGATCTTCAACCTGG (SEQ ID NO:69)
Gordon M 2F TGAGCATGGGGACCATCCTG (SEQ ID NO:70)
Gordon M 3F GGGCTGAATAAAACTCTGTGGAG (SEQ ID NO:71)
Gordon M probe F GGAGATCCTGACTCTGAACATCG (SEQ ID NO:52)
Gordon M 1R CGATGTTCAGAGTCAGGATCTCC (SEQ ID NO:72)
C3-F5 CACGGATTATCTACTGTGAT (SEQ ID NO:73)
C3-F7 GCAACAGTAGTTATACGATGAG (SEQ ID NO:74)
用於對C5位點進行定序分析之引子：
7931 GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT (SEQ ID NO:75)
7932 TGATTATAGCTATTATCACAGACTC (SEQ ID NO:76)
7927.DC CTCTTGCATATTCGTAATAGTAATTG (SEQ ID NO:77)
7696.CXL ATTCTATCGGAAGATAGGATACCAG (SEQ ID NO:78)
7697.CXL ATGCACAACTTCTTGTCTGCATGATG (SEQ ID NO:79)
7925.DC TACGGCTATATGTAGAGGAGTTAACC (SEQ ID NO:80)
7792.SL CTCTGAGACACAAAAGAGGTAGCTG (SEQ ID NO:81)
7793SL CATAGAACGGTATAGAGCGTTAATC (SEQ ID NO:82)
7928.DC CATCATGAGCAACGCGTTAGTATAT (SEQ ID NO:83)
7929.DC GGAGATACCTTTAGATATGGATCTG (SEQ ID NO:84)
7926.DC TCAACAACCGCTCGTGAACAGCTTC (SEQ ID NO:85)
Gordon H 1R GCTCGGTGCTCATTGCGTTG (SEQ ID NO:86)
Gordon H 2F CAACGCAATGAGCACCGAGC (SEQ ID NO:87)
Gordon H probe R CACTGCCTTCACGGTCACG (SEQ ID NO:88)
Gordon H probe F GTTCGCCACCGTGAACATCC (SEQ ID NO:89)
Gordon H 1F TCGCGATATCCGTTAAGTTTGTA (SEQ ID NO:90)
Gordon H 3F GAATATCCCCACCAGGTCTATCTAC (SEQ ID NO:91)
Gordon H 4F TACCGACGATGTGCCCATCC (SEQ ID NO:92)
Gordon H 5F ATCTCCGACGGCCTGATCAT (SEQ ID NO:93)
用於活體外重組之細胞：使原代雞胚胎纖維母細胞(1° CEF)在1×抗生素/抗黴劑(P/S/A/A，Gibco目錄號15240)存在下，在補充有4 mM麩醯胺酸(Gibco目錄號25030)及1 mM丙酮酸鈉(Gibco編號11360)之10% FBS (Hyclone目錄號SH30071.03) DMEM (Gibco目錄號11960)中生長。Fugene轉染試劑(Promega目錄號E2311)。
將最終病毒濃縮物再懸浮於pH 9.0之1 mM Tris中
vCP3025效價= 2.3 × 10^9 pfu/mL
vCP3029效價= 1.9 × 10^9 pfu/mL
實例 2 ： 疫苗接種實例 (vCP3025-Gordon H ； 包含 SEQ ID NO: 49 ； 圖 2)
在SD0及SD21，向8隻貓之組(第1組)投與效價大約為1×108 TCID50 /mL、總劑量1 mL之ALVAC-Gordon H載體疫苗。預期此劑量遞送足夠量的疫苗病毒，以便促進針對所選抗原(FaPV-2血球凝集素)之免疫反應。用不相關的ALVAC載體構築體(亦即ALVAC狂犬病)對陰性對照組(第3組)進行疫苗接種。在SD0、SD21及SD 42對動物進行血液採樣，且藉由特異性ELISA、免疫螢光分析(IFA)及/或病毒/血清中和測試(VNT/SNT) (實例4)來量測體液性免疫反應。在SD42，用如下文所描述之攻擊病毒(實例5)經靜脈內(IV)對各別組中之動物進行接種，且另外量測所給感染參數(病毒血症、排出、病毒分佈)。
實例 3 ： 疫苗接種實例 (vCP3029-Gordon H + Gordon M ； 包含 SEQ ID NO:50+SEQ ID NO:51 ； 圖 3+ 圖 4)
在SD0及SD21，向8隻貓之組(第2組)投與效價大約為1×108 TCID50 /mL、總劑量1 mL之ALVAC-Gordon H+M載體疫苗。預期此劑量遞送足夠量的疫苗病毒，以便促進針對所選抗原(FaPV-2血球凝集素及基質蛋白)之免疫反應。用不相關的ALVAC載體構築體(亦即ALVAC狂犬病)對陰性對照組(第3組)進行疫苗接種。在SD0、SD21及SD 42對動物進行血液採樣，且藉由特異性ELISA、免疫螢光分析(IFA)及/或病毒/血清中和測試(VNT/SNT) (實例4)來量測體液性免疫反應。在SD42，用如下文所描述之攻擊病毒(實例5)經靜脈內(IV)對各別組中之動物進行接種，且量測所給感染參數(病毒血症、排出、病毒分佈)。
實例 4 ： 病毒中和測試 (VNT)/ 血清中和測試 (SNT)
為了偵測針對貓副黏液病毒(諸如FPaV-2)之中和抗體，進行病毒/血清中和分析(VNT/SNT)。因此，在56℃下處理貓血清樣品30分鐘以使補體因子不活化。將50 µl此等加熱不活化之血清樣品與50 µl含有100螢光形成單位(FFU)貓副黏液病毒(諸如FPaV-2 (分離物「Gordon」))之DMEM混合，且隨後在4℃下培育一小時。混合物用於在96孔細胞培養盤中在37℃下感染LLC-MK2-細胞，歷時兩小時。隨後移除血清/病毒混合物且替換成含有2% (v/v)加熱不活化之FBS、丙酮酸鈉、非必需胺基酸、青黴素及鏈黴素之DMEM。細胞在37℃、5% CO2 及90%濕度下培育五天，隨後如下文所描述，進行免疫螢光染色。測試血清樣品之中和力價定義為與無血清培育之病毒對照相比，使病毒感染力降低50%之最高測試血清稀釋度的倒數。
為了偵測貓副黏液病毒感染，諸如FPaV-2感染，如下文所描述感染LLC-MK2細胞，且使用免疫螢光技術用貓副黏液病毒特異性抗體進行染色。出於此目的，在感染5天之時段後用PBS洗滌黏附細胞且隨後在-20℃下用80%丙酮固定10分鐘。細胞用PBS洗滌兩次且藉由在37℃下與含5% BSA之PBS一起培育一小時來阻斷非特異性結合。此後，在37℃下與於含1% BSA之PBS中最終濃度1 µg/ml之抗貓副黏液病毒抗體(例如，抗FPaV-2核衣殼、多株、兔)進行培育步驟，歷時一小時。細胞用PBS洗滌三次，隨後施加在含1% BSA之PBS中1:1000最終稀釋的「山羊抗兔IgG (H+L)二級抗體，Alexa Fluor® 488結合物」(Thermo Fisher Scientific)。在37℃下培育一小時之時間後，細胞用PBS洗滌兩次且針對FPaV-2之存在使用螢光顯微鏡篩選細胞。
對於病毒培養，在包括5%二氧化碳之氛圍中在37℃及90%濕度下，LLC-MK2及CrFK細胞於75 cm2 細胞培養燒瓶中於具有5% FBS之DMEM (具有丙酮酸鈉及非必需胺基酸)中接種。在70-80%匯合時，細胞在37℃、5% CO2 及90%濕度下用1毫升尿液與5 ml DMEM (具有青黴素及鏈黴素)之混合物感染隔夜。在24小時之後，感染培養基替換成8 ml培養用培養基(DMEM、丙酮酸鈉、非必需胺基酸、5% FBS、青黴素及鏈黴素)且在指定條件下另外培養6天。來自此感染之細胞培養上清液再繼代3次。之後，針對貓副黏液病毒之存在測試600 µl細胞培養上清液。
實例 5 ：攻擊模型
使用用以對早期階段之感染及疾病表現進行研究的攻擊模型臨床研究。以儘可能接近攻擊劑量1×105 TCID50 /mL之劑量，用FPaV-2「Gordon病毒株」進行靜脈內(IV)攻擊，在攻擊後56天內進行追蹤。由於CKD無任何預期臨床徵象，因此攻擊模型臨床研究之主要目標為監測原始感染、對腎功能之可能感染作用、針對感染之免疫反應，以評估可能傳播，且藉由免疫組織化學(IHC)確認腎臟以及可能的其他器官中之病毒附著。
疾病早期階段之預期症狀與病毒血症(神氣呆滯、體溫過高、體重減輕)有關。晚期階段之預期症狀可能與慢性腎衰竭(體重減輕、***、黏膜病變)有關。基於原代貓外周血液單核細胞(PBMC)或基於如LLC-MK2細胞株之其他細胞製備FPaV-2「Gordon病毒株」之病毒儲備液(效價為1×105 TCID50 /ml)。儲備液針對常見貓科動物病原體(分別包括貓白細胞減少症病毒、貓免疫缺乏症病毒、貓白血病病毒及貓冠狀病毒)之存在的測試為陰性。用1 ml (1×105 TCID50/ml)病毒儲備液經靜脈內(IV)對混合品種之貓進行接種。
實驗計劃及追蹤： 圖形概要圖參考圖5。
以下貓組A1、A2、B1、B2、C1及C2表示屍體剖檢之不同時序：在D14處A1及A2，在D28處B1及B2，在D56處C1及C2。細分的動機是避免每天對所有貓進行採樣，以避免對動物施加過多壓力。
· 自D0至D14 (除週末外)每日進行臨床檢查且量測直腸溫度，且自D15至D56一週兩次進行臨床檢查且量測直腸溫度
· 自D0至D56一週兩次稱重
· 採血樣以PCR監測病毒血症
· 藉由PCR及脂肪尿監測針對病毒血症之尿液採樣
(C =囊腫；PM =死後)
· 藉由PCR監測針對病毒血症之口鼻拭子



· 血液生物化學及細胞計數
· 針對血清學之血清採樣
· 屍體剖檢及組織學
針對每一動物進行完整屍體剖檢，對腎臟、脾臟、肝臟、膀胱及肺進行採樣。對器官進行採樣以用於組織學及PCR之病毒偵測。
攻擊模型臨床研究測試如下假設：根據本發明之基於病毒載體之疫苗能夠預防及/或降低在對貓進行攻擊後貓副黏液病毒病毒血症之強度及/或持續時間。另外，用本發明之病毒載體對貓進行疫苗接種誘導針對例如貓副黏液病毒血球凝集素抗原之抗體。
實例 6 ：構築vCP3041：ALVAC C5/H6p合成性Gordon H + C3/42k Long野生型Lapön H (包含SEQ ID NO:49+SEQ ID NO:95)
目的：為了產生具有雙倍***序列之ALVAC構築體。該構築體在H6啟動子控制下表現C5***基因座中之密碼子最佳化Gordon H (用作親代)且在42k long啟動子控制下表現C3***基因座中之野生型Lapön H (無BamH1限制酶位點；SEQ ID NO:94) (新***序列) (圖6及圖7)。
基因：合成性Gordon H；野生型Lapön H
一般重組資訊：
A. 親代病毒：vCP3025：ALVAC C5/H6p合成性Gordon H；效價= 2.3 × 10^9 pfu/mL
B. 供體質體：pC3 42k long Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)
C. ***基因座：C3
D. 啟動子：42k Long啟動子
E. 用於活體外重組之細胞：原代雞胚胎纖維母細胞(1 CEF)
F. 用於重組選擇之方法：Gordon H (opt)及Lapön H (wt)特異性探針之溶菌斑雜交
重組產生之詳細描述。
G. 藉由用20 µg Not I線性化供體質體[pC3 42k long Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)]轉染1° CEF細胞來進行活體外重組(IVR)。Fugene HD (Promega目錄號E2311)為轉染試劑。隨後用vCP3025作為拯救病毒以MOI 10感染經轉染之細胞。24小時後，收集經轉染之感染細胞，用音波處理，且用於重組病毒篩選。
基於溶菌斑轉移雜交方法來篩選重組溶菌斑。將經感染單層轉移至帶正電的耐綸轉印膜(GE Healthcare目錄號RPN82B)上，且藉由在轉移緩衝液存在下將其他耐綸膜按壓在原始轉移物上來製備彼等轉移物之複本。用經生物素標記之Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)特異性探針或經生物素標記之ALVAC親代C3探針來探測該等複本。ALVAC親代探針結合於ORF中在重組期間缺失的區域。使用Thermo Scientific DecaLabel DNA標記套組(產品編號K0622)標記探針。使用Thermo Scientific化學發光核酸偵測模組套組(產品編號89880)使所探測之轉移物顯影。選擇重組溶菌斑，自原始膜分出，且在下一純化回合中用於感染。在三個或四個依序溶菌斑純化回合之後，分離在C3基因座中含有Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)基因之重組物。
在最終純化回合中，取出單一經分離溶菌斑之若干瓊脂糖鑽孔片。擴增此等鑽孔片以獲得P1 (第1繼代) (T-25燒瓶)。進行PCR測試以確認P1在C5位點中含有Gordon H (opt)***序列且在C3位點中含有Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)***序列。將兩個可接受候選者擴增至P2 (第2繼代) (每一構築體兩個T-150燒瓶)。
將單一P2按比例擴大至P3 (第3繼代) (四個滾瓶)。經由蔗糖離心塊濃縮並純化P3物質，且將其稱為vCP3041。
重組物分析：對P3儲備液進行以下分析
無菌性：對vCP3041之P3儲備液進行無菌性測試。將50 µL等分試樣接種至兩個沙氏右旋糖瓊脂(SDA)培養盤中之每一者上，且接種至兩個含5%羊血之胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA II 5% SB)培養盤中之每一者上(BBL目錄號分別為221180及221239)。針對每一構築體，將一個SDA培養盤及一個TSA II 5% SB培養盤在37℃下培育10天，且將另一組培養盤在室溫下培育10天。若10天後，培養盤中之任一者上無可見的細菌或真菌生長，則構築體通過無菌性測試。
遺傳純度之確認：
經由PCR確認P3儲備液之純度。使用位於C3臂之任一末端處的引子(C3-PCR-F及C3-PCR-R)來擴增樣品。此等引子針對在C3位點處含有野生型序列之ALVAC病毒產生4539bp條帶，且針對在C3位點中含有Lapön H (wt-無BamH1限制酶位點)之重組物產生5063bp條帶。若在第一PCR中難以區分約4.5Kb與約5Kb之條帶，則第二PCR可適用。第二PCR包括用於製備野生型C3探針之引子(C3F及C3R)。此等引子位於在C3位點之重組期間缺失的區域中，且針對野生型ALVAC序列產生1007bp條帶且針對重組物未產生條帶。此第二PCR證實P3樣品中未保留親代病毒。
序列分析：藉由PCR擴增進行P3儲備液之更詳細序列分析，且針對vCP3041進行C3及C5位點之序列分析。使用正好位於C5重組臂外部之引子7931及7932來擴增C5位點。使用正好位於C3重組臂外部之引子C3-PCR-F及C3-PCR-R來擴增C3位點。對經擴增區域進行定序分析以確認啟動子及基因之完整性。
引子
用於擴增ALVAC親代探針(C3位點)之引子：
C3F CGTAGAGTTTTTTGTCTAGTTCTAT (SEQ ID NO:54)
C3R GTTGTTTTATGCGGTAAAGAATAAT (SEQ ID NO:55)
用於擴增C3位點之引子：
C3-PCR-F GCTAACACAAGTTAGAGGCGTATTAC (SEQ ID NO:58)
C3-PCR-R CATTAATTATGTGATGAGGCATCCAAC (SEQ ID NO:59)
用於擴增C5位點之引子：
7931 GAATCTGTTAGTTAGTTACTTGGAT (SEQ ID NO:75)
7932 TGATTATAGCTATTATCACAGACTC (SEQ ID NO:76)
實例 7 ： 疫苗接種實例 (vCP3025-Gordon H ； 包含 SEQ ID NO: 49 ； 圖 2)
在SD0及SD21，向7隻貓之組(組A)投與效價大約為每劑量1×107.7 TCID50 、總劑量1 mL之ALVAC-Gordon H載體疫苗。預期此劑量遞送足夠量的疫苗病毒，以便促進針對所選抗原(FaPV-2血球凝集素)之免疫反應。陰性對照組(組C)不經疫苗接種。在SD0、SD21及SD 35對動物進行血液採樣，且藉由特異性ELISA、免疫螢光分析(IFA)及/或病毒/血清中和測試(VNT/SNT) (實例9)來量測體液性免疫反應。在SD49，用如下文所描述之攻擊病毒(實例10)經靜脈內(IV)對各別組中之動物進行接種，且另外量測所給感染參數(病毒血症、排出、病毒分佈)。
實例 8 ： 疫苗接種實例 (vCP3029-Gordon H + Gordon M ； 包含 SEQ ID NO:50+SEQ ID NO:51 ； 圖 3+ 圖 4)
在SD0及SD21，向7隻貓之組(組B)投與效價大約為每劑量1×107.7 TCID50 、總劑量1 mL之ALVAC-Gordon H+M載體疫苗。預期此劑量遞送足夠量的疫苗病毒，以便促進針對所選抗原(FaPV-2血球凝集素及基質蛋白)之免疫反應。陰性對照組(組C)不經疫苗接種。在SD0、SD21及SD 35對動物進行血液採樣，且藉由特異性ELISA、免疫螢光分析(IFA)及/或病毒/血清中和測試(VNT/SNT) (實例9)來量測體液性免疫反應。在SD42，用如下文所描述之攻擊病毒(實例10)經靜脈內(IV)對各別組中之動物進行接種，且量測所給感染參數(病毒血症、排出、病毒分佈)。
實例 9 ： 病毒中和測試 (VNT)/ 血清中和測試 (SNT)
為了偵測針對貓副黏液病毒(諸如FPaV-2)之中和抗體，進行病毒/血清中和分析(VNT/SNT)。因此，在56℃下處理貓血清樣品30分鐘以使補體因子不活化。將50 µl此等加熱不活化之血清樣品與50 µl含有100 TCID50螢光形成單位(FFU)貓副黏液病毒(諸如FPaV-2 (分離物「Gordon」))之DMEM混合，且隨後在37℃下培育一小時。混合物用於在96孔細胞培養盤中在37℃下感染LLC-MK2-細胞，歷時兩小時。細胞在37℃、5% CO2 及90%濕度下培育五天，隨後如下文所描述，進行免疫螢光染色。測試血清樣品之中和力價定義為與無血清培育之病毒對照相比，使病毒感染力降低50%之最高測試血清稀釋度的倒數。
為了偵測貓副黏液病毒感染，諸如FPaV-2感染，如下文所描述感染LLC-MK2細胞，且使用免疫螢光技術用貓副黏液病毒特異性抗體進行染色。出於此目的，在感染5天之時段後用PBS洗滌黏附細胞且隨後在-20℃下用80%丙酮固定10分鐘。細胞用PBS洗滌兩次且藉由在37℃下與含5% BSA之PBS一起培育一小時來阻斷非特異性結合。此後，在37℃下與於含1% BSA之PBS中最終濃度1 µg/ml之抗貓副黏液病毒抗體(例如，抗FPaV-2核衣殼、多株、兔)進行培育步驟，歷時一小時。細胞用PBS洗滌三次，隨後施加在含1% BSA之PBS中1:1000最終稀釋的「山羊抗兔IgG (H+L)二級抗體，Alexa Fluor® 488結合物」(Thermo Fisher Scientific)。在37℃下培育一小時之時間後，細胞用PBS洗滌兩次且針對FPaV-2之存在使用螢光顯微鏡篩選細胞。
對於臨床樣品中之病毒分離，在包括5%二氧化碳之氛圍中在37℃及90%濕度下，LLC-MK2及CRFK細胞於75 cm2 細胞培養燒瓶中於具有5% FBS之DMEM (具有丙酮酸鈉及非必需胺基酸)中接種。在70-80%匯合時，細胞在37℃、5% CO2 及90%濕度下用1毫升尿液與5 ml DMEM (具有青黴素及鏈黴素)之混合物感染隔夜。在24小時之後，感染培養基替換成8 ml培養用培養基(DMEM、丙酮酸鈉、非必需胺基酸、5% FBS、青黴素及鏈黴素)且在指定條件下另外培養6天。來自此感染之細胞培養上清液再繼代3次。之後，針對貓副黏液病毒之存在測試600 µl細胞培養上清液。
實例 10 ：攻擊模型
使用用以對早期階段之感染及疾病表現進行研究的攻擊模型臨床研究。以儘可能接近攻擊劑量1×105 TCID50 /mL之劑量，用FPaV-2「Gordon病毒株」進行靜脈內(IV)攻擊，在攻擊後56天內進行追蹤。由於CKD無任何預期臨床徵象，因此攻擊模型臨床研究之主要目標為監測原始感染、對腎功能之可能感染作用、針對感染之免疫反應，以評估可能傳播，且藉由免疫組織化學(IHC)確認腎臟以及可能的其他器官中之病毒附著。
疾病早期階段之預期症狀與病毒血症(神氣呆滯、體溫過高、體重減輕)有關。晚期階段之預期症狀可能與慢性腎衰竭(體重減輕、***、黏膜病變)有關。基於原代貓外周血液單核細胞(PBMC)或基於如LLC-MK2細胞株之其他細胞製備FPaV-2「Gordon病毒株」之病毒儲備液(效價為1×105 TCID50 /ml)。儲備液針對常見貓科動物病原體(分別包括貓白細胞減少症病毒、貓免疫缺乏症病毒、貓白血病病毒及貓冠狀病毒)之存在的測試為陰性。用1 ml (1×105 TCID50/ml)病毒儲備液經靜脈內(IV)對混合品種之貓進行接種。
實驗計劃及追蹤：
以下貓組A1、A2、B1、B2、C1及C2表示屍體剖檢之不同時序：在D14處A1及A2，在D28處B1及B2，在D56處C1及C2。細分的動機是避免每天對所有貓進行採樣，以避免對動物施加過多壓力。
· 自D0至D14 (除週末外)每日進行臨床檢查且量測直腸溫度，且自D15至D56一週兩次進行臨床檢查且量測直腸溫度
· 自D0至D56一週兩次稱重
· 採血樣以PCR監測病毒血症
· 藉由PCR及脂肪尿監測針對病毒血症之尿液採樣
(C =囊腫；PM =死後)


· 藉由PCR監測針對病毒血症之口鼻拭子
· 血液生物化學及細胞計數
· 針對血清學之血清採樣
· 屍體剖檢及組織學
針對每一動物進行完整屍體剖檢，對腎臟、脾臟、肝臟、膀胱及肺進行採樣。對器官進行採樣以用於組織學及PCR之病毒偵測。
攻擊模型臨床研究測試如下假設：根據本發明之基於病毒載體之疫苗能夠預防及/或降低在對貓進行攻擊後貓副黏液病毒病毒血症之強度及/或持續時間。另外，用本發明之病毒載體對貓進行疫苗接種誘導針對例如貓副黏液病毒血球凝集素抗原之抗體。
實例 11 ：貓血清之血清學檢測
使用病毒中和測試(VNT) (實例9)及免疫螢光抗體測試(IFA)進行貓血清之血清學檢測。將貓劃分成四個組：A) 用表現2型貓副黏液病毒「Gordon」病毒株之血球凝集素(H)蛋白的重組ALVAC載體(vCP3025)進行疫苗接種；B) 用表現2型貓副黏液病毒「Gordon」病毒株之血球凝集素(H)蛋白及基質(M)蛋白的重組ALVAC載體(vCP3029)進行疫苗接種；C) 貓不經疫苗接種(攻擊對照組)；D) 貓不經疫苗接種(嚴格陰性組)。
在第 0 天 (第一次疫苗接種當日)、第 21 天 (第一次疫苗接種後21天)及第 35 天 (第二次接種疫苗後14天)自貓獲取血清樣品。
藉由同時使用VNT及IFA方法，明確地偵測到所有動物在第0天在疫苗接種之前顯示陰性。此外，攻擊對照組及嚴格對照組中之貓在攻擊之前的所有時間點保持血清反應陰性，此為有效研究之要求。
藉由使用IFA，在疫苗接種後21天，組A中一隻貓顯示陽性，而所有其他貓保持陰性。類似地，使用病毒中和測試，兩隻貓(組A中一隻及組B中一隻)反應陽性，而所有其他貓保持陰性。
最後，在第35天(第二次接種疫苗後14天)，組A中所有貓(6/6)在IFA中發生陽性反應，且所有貓具有有效中和效價(組中值效價1:160)。在組B中，5/6的貓在IFA中發生陽性反應，且5/6的貓具有針對攻擊病毒之有效中和效價(組中值效價1:160)。
總體而言，用表現2型貓副黏液病毒之H蛋白或H及M蛋白之重組ALVAC載體進行疫苗接種的絕大部分貓在疫苗接種之後發生強力反應及血清轉化，如藉由IFA測試所測定。又，在兩個組中偵測到針對攻擊病毒之有效病毒中和效價值(組A. 中值效價1:160/組B. 中值效價1:160)，其表明針對2型貓副黏液病毒之良好疫苗接種反應。
本文中所揭示且主張之所有組合物及方法均可根據本發明製備及執行，無需過多實驗。雖然本發明之組合物及方法已根據特定態樣加以描述，但熟習此項技術者將顯而易見的係，變化形式可適用於本文所描述之組合物及方法以及方法之步驟或方法之步驟順序，而不脫離本發明之概念、精神及範疇。更特定言之，顯而易知在化學上及生理上相關之某些藥劑可取代本文所描述之藥劑，同時獲得相同或類似結果。熟習此項技術者顯而易見的所有此類類似取代及修改視為在由隨附申請專利範圍所界定之本發明之精神、範疇及概念內。
參考文獻
以下參考文獻特定地以引用的方式併入本文中，以便其對本文所述內容提供例示性程序或其他細節補充。
(1) De Vries P et al., J. Gen. Virol. 1988, 69: 2071-2083
(2) Furuya et al., Archives of virology 2014, 159(2): 371-373
(3) JP 2015 198654 A
(4) Lorusso et al., Vet Ital. 2013, 51(3): 235-237
(5) Lulich JP et al., Compendium on continuing education for the practicing veterinarian 1992; 14(2): 127-152
(6) Marcacci M et al., Journal of Virological Methods 2016, 234: 160-163
(7) Marciani DJ et al., Vaccine 1991, 9(2): 89-96
(8) McEachern JA et al., Vaccine 2008, 26(31): 3842-3852
(9) Sakaguchi et al., General Virology 2014, 95(7): 1464-1468
(10) Sharp et al., Emerging Infectious Diseases 2016, 22(4): 760
(11) Sieg et al., Virus Genes 2015, 51(2): 294-297
(12) Tartaglia J et al., J Virology 1993, 67(4): 2370-2375.
(13) Taylor J et al., Vaccine 1991, 9(3): 190-193
(14) Taylor J et al., Virology 1992, 187(1): 321-328
(15) Taylor J et al., Dev Biol Stand 1994, 82: 131-135
(16) US 4,769,330
(17) US 4,722,848
(18) US 4,603,112
(19) US 5,110,587
(20) US 5,174,993
(21) US 5,494,807
(22) US 5,505,941
(23) US 5,756,103
(24) US 5,766,599
(25) US 2013/0230529
(26) Weli SC et al., Virology J. 2011, 8 (1): 49
(27) WO 2005/013918
(28) WO 2006/073431
(29) WO 2006/115843
(30) WO 2013/107290
(31) WO 2013/123242
(32) Woo et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 2012; 109(14): 5435-5440
以下圖式形成本說明書之一部分且包括在此以進一步展示本發明之某些態樣。參照此等圖式中之一或多者，結合本文中呈現之特定實施例之詳細描述，可更好地理解本發明。
圖1A及圖1B描繪關於與兩個供體質體pC3 42k Gordon M (opt)及pC5 H6p Gordon H (opt)之活體外重組(IVR)以及兩個所得構築體vCP3025及vCP3029之示意性概要圖。
圖2描繪vCP3025選殖之***基因座C5以及其鹼基對304,701至308,870之經確認核苷酸序列，包括***基因座C5之右側接序列、H6啟動子、Gordon H (opt)及***基因座C5之左側接序列。
圖3描繪vCP3029選殖之***基因座C5以及其鹼基對304,166至308,380之經確認核苷酸序列，包括***基因座C5之右側接序列、H6啟動子、Gordon H (opt)及***基因座C5之左側接序列。
圖4描繪vCP3029選殖之***基因座C3以及其鹼基對38,608至42,807之經確認核苷酸序列，包括***基因座C3之右側接序列、42k啟動子、Gordon M (opt)及***基因座C3之左側接序列。
圖5描繪關於攻擊模型臨床研究(實例4)之實驗計劃及後續的圖形概要圖。
圖6描繪關於與親代ALVAC載體vCP3025及供體質體pC3 42k long Lapön H (wt (無BamH1限制酶位點))之活體外重組(IVR)以及所得構築體vCP3041之示意性概要圖。
圖7描繪vCP3041選殖之***基因座C3以及其鹼基對38,619至43,588之理論核苷酸序列，包括***基因座C3之右側接序列、42k long啟動子、Lapön H (wt；無BamH I限制酶位點)及***基因座C3之左側接序列。
Figure TW201942355A_D0011
Figure TW201942355A_D0012
Figure TW201942355A_D0013
Figure TW201942355A_D0014
Figure TW201942355A_D0015
Figure TW201942355A_D0016
Figure TW201942355A_D0017
Figure TW201942355A_D0018
Figure TW201942355A_D0019
Figure TW201942355A_D0020
Figure TW201942355A_D0021
Figure TW201942355A_D0022
Figure TW201942355A_D0023
Figure TW201942355A_D0024
Figure TW201942355A_D0025
Figure TW201942355A_D0026
Figure TW201942355A_D0027
Figure TW201942355A_D0028
Figure TW201942355A_D0029
Figure TW201942355A_D0030
Figure TW201942355A_D0031
Figure TW201942355A_D0032
Figure TW201942355A_D0033
Figure TW201942355A_D0034
Figure TW201942355A_D0035
Figure TW201942355A_D0036
Figure TW201942355A_D0037
Figure TW201942355A_D0038
Figure TW201942355A_D0039
Figure TW201942355A_D0040
Figure TW201942355A_D0041
Figure TW201942355A_D0042
Figure TW201942355A_D0043
Figure TW201942355A_D0044
Figure TW201942355A_D0045
Figure TW201942355A_D0046
Figure TW201942355A_D0047
Figure TW201942355A_D0048
Figure TW201942355A_D0049
Figure TW201942355A_D0050
Figure TW201942355A_D0051
Figure TW201942355A_D0052
Figure TW201942355A_D0053
Figure TW201942355A_D0054
Figure TW201942355A_D0055
Figure TW201942355A_D0056
Figure TW201942355A_D0057
Figure TW201942355A_D0058
Figure TW201942355A_D0059
Figure TW201942355A_D0060
Figure TW201942355A_D0061
Figure TW201942355A_D0062
Figure TW201942355A_D0063
Figure TW201942355A_D0064
Figure TW201942355A_D0065
Figure TW201942355A_D0066
Figure TW201942355A_D0067
Figure TW201942355A_D0068
Figure TW201942355A_D0069
Figure TW201942355A_D0070
Figure TW201942355A_D0071
Figure TW201942355A_D0072
Figure TW201942355A_D0073
Figure TW201942355A_D0074
Figure TW201942355A_D0075
Figure TW201942355A_D0076
Figure TW201942355A_D0077
Figure TW201942355A_D0078
Figure TW201942355A_D0079
Figure TW201942355A_D0080
Figure TW201942355A_D0081
Figure TW201942355A_D0082
Figure TW201942355A_D0083
Figure TW201942355A_D0084
Figure TW201942355A_D0085
Figure TW201942355A_D0086
Figure TW201942355A_D0087
Figure TW201942355A_D0088
Figure TW201942355A_D0089
Figure TW201942355A_D0090
Figure TW201942355A_D0091
Figure TW201942355A_D0092
Figure TW201942355A_D0093
Figure TW201942355A_D0094
Figure TW201942355A_D0095
Figure TW201942355A_D0096
Figure TW201942355A_D0097
Figure TW201942355A_D0098
Figure TW201942355A_D0099
Figure TW201942355A_D0100
Figure TW201942355A_D0101
Figure TW201942355A_D0102
Figure TW201942355A_D0103
Figure TW201942355A_D0104
Figure TW201942355A_D0105
Figure TW201942355A_D0106
Figure TW201942355A_D0107
Figure TW201942355A_D0108
Figure TW201942355A_D0109
Figure TW201942355A_D0110
Figure TW201942355A_D0111
Figure TW201942355A_D0112
Figure TW201942355A_D0113
Figure TW201942355A_D0114
Figure TW201942355A_D0115
Figure TW201942355A_D0116
Figure TW201942355A_D0117
Figure TW201942355A_D0118
Figure TW201942355A_D0119
Figure TW201942355A_D0120
Figure TW201942355A_D0121
Figure TW201942355A_D0122
Figure TW201942355A_D0123
Figure TW201942355A_D0124
Figure TW201942355A_D0125
Figure TW201942355A_D0126
Figure TW201942355A_D0127
Figure TW201942355A_D0128
Figure TW201942355A_D0129
Figure TW201942355A_D0130
Figure TW201942355A_D0131
Figure TW201942355A_D0132
Figure TW201942355A_D0133
Figure TW201942355A_D0134
Figure TW201942355A_D0135
Figure TW201942355A_D0136
Figure TW201942355A_D0137
Figure TW201942355A_D0138
Figure TW201942355A_D0139
Figure TW201942355A_D0140
Figure TW201942355A_D0141
Figure TW201942355A_D0142
Figure TW201942355A_D0143

Claims (28)

  1. 一種病毒載體，較佳地重組及/或非天然存在之病毒載體，該病毒載體包含與至少一種感染貓科動物之病原體有關的至少一個外源抗原編碼序列/至少一種感染貓科動物之病原體的至少一個外源抗原編碼序列，其中該至少一種感染貓科動物之病原體為貓副黏液病毒。
  2. 如請求項1之病毒載體，其中該病毒載體選自由以下組成之群：鳥類痘病毒病毒載體、犬麻疹病毒病毒載體、疱疹病毒病毒載體、水痘病毒病毒載體。
  3. 如請求項1或2之病毒載體，其中為貓副黏液病毒的該至少一種感染貓科動物之病原體選自由以下組成之群： (a) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)； (b) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸： (i) 根據SEQ ID NO: 1之核酸序列， (ii)與SEQ ID NO: 1至少70%一致的核酸序列； (c)以寄存編號CNCM I-5123寄存於法國國家培養物及微生物保藏中心(Collection Nationale de Culture de Microorganismes；CNCM)之2型貓副黏液病毒(FPaV-2)； (d) 2型貓副黏液病毒(FPaV-2)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸： (i) 根據SEQ ID NO: 2之核酸序列， (ii)與SEQ ID NO: 2至少70%一致的核酸序列； (e)貓麻疹病毒(FeMoV)； (f)貓麻疹病毒(FeMoV)，其基因組包含與選自由以下組成之群之核酸序列互補的核糖核酸： (i) 根據SEQ ID NO: 3之核酸序列， (ii)與SEQ ID NO: 3至少70%一致的核酸序列。
  4. 如請求項1或2之病毒載體，其中該病毒載體為金絲雀痘載體，較佳為減毒金絲雀痘載體，更佳為ALVAC，甚至更佳為ALVAC-1或ALVAC-2，最佳為根據布達佩斯條約(Budapest Treaty)之條款以寄存編號VR-2547寄存於美國菌種保存中心(American Type Culture Collection；ATCC)之ALVAC；或其中該病毒載體為禽痘載體，較佳為減毒禽痘載體，更佳為TROVAC，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2553寄存於美國菌種保存中心(ATCC)之TROVAC；或其中該病毒載體選自由以下組成之群：vCP3025、vCP3029、vCP3041。
  5. 如請求項3之病毒載體，其中該病毒載體為金絲雀痘載體，較佳為減毒金絲雀痘載體，更佳為ALVAC，甚至更佳為ALVAC-1或ALVAC-2，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2547寄存於美國菌種保存中心(ATCC)之ALVAC；或其中該病毒載體為禽痘載體，較佳為減毒禽痘載體，更佳為TROVAC，最佳為根據布達佩斯條約之條款以寄存編號VR-2553寄存於美國菌種保存中心(ATCC)之TROVAC；或其中該病毒載體選自由以下組成之群：vCP3025、vCP3029、vCP3041。
  6. 如請求項1或2之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列選自由以下組成之群：血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列、基質蛋白(「M」)編碼序列、融合蛋白(「F」)編碼序列、核衣殼蛋白(「N」)編碼序列、磷蛋白(「P」)編碼序列、RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且更佳為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及/或基質蛋白(「M」)編碼序列及/或融合蛋白(「F」)編碼序列。
  7. 如請求項3之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列選自由以下組成之群：血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列、基質蛋白(「M」)編碼序列、融合蛋白(「F」)編碼序列、核衣殼蛋白(「N」)編碼序列、磷蛋白(「P」)編碼序列、RNA依賴性RNA聚合酶蛋白(「L」)編碼序列，且更佳為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及/或基質蛋白(「M」)編碼序列及/或融合蛋白(「F」)編碼序列。
  8. 如請求項6之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 4至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5；或其中該至少一個外源抗原編碼序列為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含編碼具有與SEQ ID NO: 6至少70%一致之胺基酸序列之多肽的核酸序列，且較佳為根據SEQ ID NO: 6之胺基酸序列。
  9. 如請求項6之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 7至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8；或其中該至少一個外源抗原編碼序列為基質蛋白(「M」)編碼序列，且該基質蛋白(「M」)編碼序列包含編碼具有與SEQ ID NO:9至少70%一致之胺基酸序列之多肽的核酸序列，且較佳為根據SEQ ID NO: 9之胺基酸序列。
  10. 如請求項6之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 10至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11；或其中該至少一個外源抗原編碼序列為融合蛋白(「F」)編碼序列，且該融合蛋白(「F」)編碼序列包含編碼具有與SEQ ID NO:12至少70%一致之胺基酸序列之多肽的核酸序列，且較佳為根據SEQ ID NO:12之胺基酸序列。
  11. 如請求項1或2之病毒載體，其中該病毒載體包含兩個或更多個外源抗原編碼序列，較佳包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含基質蛋白(「M」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列以及融合蛋白(「F」)編碼序列。
  12. 如請求項3之病毒載體，其中該病毒載體包含兩個或更多個外源抗原編碼序列，較佳包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含基質蛋白(「M」)編碼序列及融合蛋白(「F」)編碼序列，或包含血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及基質蛋白(「M」)編碼序列以及融合蛋白(「F」)編碼序列。
  13. 如請求項1或2之病毒載體，其中該病毒載體包含兩個相同的外源抗原編碼序列(亦即，H + H、F + F、M + M、P + P、L + L、N + N)，但該等編碼序列來自兩個不同的病毒株，諸如一個外源抗原編碼序列來自2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株(較佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」)，且另一個外源抗原編碼序列來自貓麻疹病毒株(較佳為「Lapön病毒株」)，例如包含一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列；更佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株，甚至更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」，且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為貓麻疹病毒株，甚至更佳為「Lapön病毒株」；最佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:19至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:19；且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: 94至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 94。
  14. 如請求項3之病毒載體，其中該病毒載體包含兩個相同的外源抗原編碼序列(亦即，H + H、F + F、M + M、P + P、L + L、N + N)，但該等編碼序列來自兩個不同的病毒株，諸如一個外源抗原編碼序列來自2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株(較佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」)，且另一個外源抗原編碼序列來自貓麻疹病毒株(較佳為「Lapön病毒株」)，例如包含一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列及另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列；更佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為2型貓副黏液病毒(FPaV-2)病毒株，甚至更佳為「Gordon病毒株」或「TV25病毒株」，且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為貓麻疹病毒株，甚至更佳為「Lapön病毒株」；最佳地，「一個病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該一個病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 19至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 19；且「另一病毒株之血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列」中之該另一病毒株為血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列，且該血球凝集素蛋白(「H」)編碼序列包含與SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: 94至少70%一致的核酸序列，且較佳選自由以下組成之群：SEQ ID NO: 31、SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 94。
  15. 如請求項1或2之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列***在至少一個***基因座中，較佳***在病毒載體基因組之非必需區域中；或其中該至少一個外源抗原編碼序列***在兩個或更多個***基因座中；及/或其中該至少一個***基因座為***基因座C3；及/或其中該病毒載體包含***基因座C3之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:45之側接序列(C3側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:46之側接序列(C3側接區域右臂)；或其中該至少一個***基因座為***基因座C5；及/或其中該病毒載體包含***基因座C5之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO:47之側接序列(C5側接區域左臂)及根據SEQ ID NO:48之側接序列(C5側接區域右臂)。
  16. 如請求項3之病毒載體，其中該至少一個外源抗原編碼序列***在至少一個***基因座中，較佳***在病毒載體基因組之非必需區域中；或其中該至少一個外源抗原編碼序列***在兩個或更多個***基因座中；及/或其中該至少一個***基因座為***基因座C3；及/或其中該病毒載體包含***基因座C3之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO: 45之側接序列(C3側接區域左臂)及根據SEQ ID NO: 46之側接序列(C3側接區域右臂)；或其中該至少一個***基因座為***基因座C5；及/或其中該病毒載體包含***基因座C5之側接序列，較佳為根據SEQ ID NO: 47之側接序列(C5側接區域左臂)及根據SEQ ID NO: 48之側接序列(C5側接區域右臂)。
  17. 如請求項1或2之病毒載體，其中該病毒載體包含與選自由SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 95組成之群之核酸序列至少70%一致的核酸序列，且較佳為選自由以下組成之群之核酸序列：SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 95。
  18. 如請求項3之病毒載體，其中該病毒載體包含與選自由SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 95組成之群之核酸序列至少70%一致的核酸序列，且較佳為選自由以下組成之群之核酸序列：SEQ ID NO: 49、SEQ ID NO: 50、SEQ ID NO: 51、SEQ ID NO: 95。
  19. 如請求項1或2之病毒載體，其中該貓科動物為貓，較佳為家貓。
  20. 如請求項3之病毒載體，其中該貓科動物為貓，較佳為家貓。
  21. 一種哺乳動物宿主細胞，其中其包含如請求項1至20中任一項之病毒載體。
  22. 一種如請求項1至20中任一項之病毒載體或如請求項21之哺乳動物宿主細胞的用途，其係用於製造免疫原性組合物或疫苗。
  23. 一種免疫原性組合物，其包含 (a) 如請求項1至20中任一項之病毒載體或如請求項21之哺乳動物宿主細胞，及/或 (b) 由如請求項1至20中任一項之病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及 (c) 視情況存在之醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用； 其中該免疫原性組合物較佳包含病毒，諸如感染性病毒。
  24. 一種疫苗，其包含 (a) 如請求項1至20中任一項之病毒載體或如請求項21之哺乳動物宿主細胞，及/或 (b) 由如請求項1至20中任一項之病毒載體編碼之多肽，諸如病毒、經修飾之活病毒、病毒樣顆粒(VLP)或其類似者，及 (c) 醫藥學或獸醫學可接受之載劑或賦形劑，該載劑較佳適於經口、皮內、肌肉內或鼻內施用， (d) 該疫苗或醫藥組合物視情況進一步包含佐劑。
  25. 一種用於製備免疫原性組合物或疫苗之方法，該免疫原性組合物或疫苗用於降低與至少一種病原性副黏液病毒感染有關或由至少一種病原性副黏液病毒感染引起之一或多個臨床徵象之發病率及/或嚴重程度，該方法包含以下步驟： (a) 用如請求項1至20中任一項之病毒載體感染如請求項21之哺乳動物宿主細胞， (b) 在適合之條件下培養經感染細胞， (c) 收集經感染細胞培養物， (d) 視情況純化步驟(c)所收集之經感染細胞培養物， (e) 視情況混合該所收集之經感染細胞培養物與醫藥學上可接受之載劑。
  26. 一種如請求項23之免疫原性組合物或如請求項24之疫苗的用途，其係用於製造用以減少或預防由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病或者用以治療及/或預防至少一種病原性副黏液病毒感染之藥劑，其中該貓科動物較佳為貓，更佳為家貓，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該等由至少一種病原性副黏液病毒感染所引起之臨床徵象或疾病或該至少一種病原性副黏液病毒感染較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
  27. 一種如請求項23之免疫原性組合物或如請求項24之疫苗的用途，其係用於製造用以使貓科動物(諸如貓，更佳為家貓)免疫以對抗由該貓科動物中之至少一種病原性副黏液病毒所引起之臨床疾病的藥劑，其中該藥劑無法引起感染臨床徵象但能夠誘導使貓科動物對該至少一種副黏液病毒之病原性形式免疫的免疫反應，其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該臨床疾病或該等感染臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
  28. 一種用於對貓科動物、較佳貓、更佳家貓進行疫苗接種以抵抗貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關之疾病及/或降低貓科動物之與至少一種病原性副黏液病毒有關或由至少一種病原性副黏液病毒引起之一或多個臨床徵象的發病率或嚴重程度的套組，該套組包含： (a) 能夠向該貓科動物投與疫苗之分配器；及 (b) 如請求項23之免疫原性組合物或如請求項24之疫苗，及 (c) 視情況存在之指導手冊； 其中該至少一種病原性副黏液病毒較佳為至少一種貓副黏液病毒，其中該疾病或該等臨床徵象較佳選自由以下組成之群：病毒血症、發熱、環境中之病毒排出、泌尿生殖系統感染、泌尿系統感染、腎病、慢性腎病(CKD)、腎小管及腎臟間質組織發炎、特發性腎小管間質性腎炎(TIN)。
TW108105710A 2018-02-23 2019-02-20 表現外源貓副黏液病毒基因之重組病毒載體系統及自其製備之疫苗 TW201942355A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP18158450 2018-02-23
EP18158450.9 2018-02-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201942355A true TW201942355A (zh) 2019-11-01

Family

ID=61526550

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW108105710A TW201942355A (zh) 2018-02-23 2019-02-20 表現外源貓副黏液病毒基因之重組病毒載體系統及自其製備之疫苗

Country Status (13)

Country Link
US (1) US11033616B2 (zh)
EP (1) EP3668988A1 (zh)
JP (1) JP2021514196A (zh)
KR (1) KR20200124713A (zh)
CN (1) CN111712575B (zh)
AR (1) AR115256A1 (zh)
AU (1) AU2019223768A1 (zh)
BR (1) BR112020017239A2 (zh)
CA (1) CA3088646A1 (zh)
EA (1) EA202091958A1 (zh)
MX (1) MX2020008779A (zh)
TW (1) TW201942355A (zh)
WO (1) WO2019162294A1 (zh)

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US382425A (en) 1888-05-08 Brandt
US2909462A (en) 1955-12-08 1959-10-20 Bristol Myers Co Acrylic acid polymer laxative compositions
US4394448A (en) 1978-02-24 1983-07-19 Szoka Jr Francis C Method of inserting DNA into living cells
US4769331A (en) 1981-09-16 1988-09-06 University Patents, Inc. Recombinant methods and materials
US5505941A (en) 1981-12-24 1996-04-09 Health Research, Inc. Recombinant avipox virus and method to induce an immune response
US5110587A (en) 1981-12-24 1992-05-05 Health Research, Incorporated Immunogenic composition comprising synthetically modified vaccinia virus
US5364773A (en) 1991-03-07 1994-11-15 Virogenetics Corporation Genetically engineered vaccine strain
US5833975A (en) 1989-03-08 1998-11-10 Virogenetics Corporation Canarypox virus expressing cytokine and/or tumor-associated antigen DNA sequence
US4722848A (en) 1982-12-08 1988-02-02 Health Research, Incorporated Method for immunizing animals with synthetically modified vaccinia virus
US5338683A (en) 1981-12-24 1994-08-16 Health Research Incorporated Vaccinia virus containing DNA sequences encoding herpesvirus glycoproteins
US4603112A (en) 1981-12-24 1986-07-29 Health Research, Incorporated Modified vaccinia virus
US5174993A (en) 1981-12-24 1992-12-29 Health Research Inc. Recombinant avipox virus and immunological use thereof
US4769330A (en) 1981-12-24 1988-09-06 Health Research, Incorporated Modified vaccinia virus and methods for making and using the same
JPS60500673A (ja) 1983-03-08 1985-05-09 コモンウエルス　セラム　ラボラトリ−ズ　コミツシヨン 抗原活性を有するアミノ酸配列
US4745051A (en) 1983-05-27 1988-05-17 The Texas A&M University System Method for producing a recombinant baculovirus expression vector
EP0173552B1 (en) 1984-08-24 1991-10-09 The Upjohn Company Recombinant dna compounds and the expression of polypeptides such as tpa
US4945050A (en) 1984-11-13 1990-07-31 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
IE872748L (en) 1986-10-16 1988-04-16 Arjomari Europ Polypeptides derived from the evvelope gene of human¹immunodeficiency virus in recombinant baculovirus infected¹insect cells
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
WO1990001543A1 (fr) 1988-07-29 1990-02-22 Intracel Corporation Procede d'expression genetique de proteines heterologues par des cellules transfectees in vivo
CA2003300A1 (en) 1988-11-21 1990-05-21 Franklin Volvovitz Skin test and test kit for aids
ATE240401T1 (de) 1989-03-21 2003-05-15 Vical Inc Expression von exogenen polynukleotidsequenzen in wirbeltieren
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5591439A (en) 1989-03-24 1997-01-07 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Recombinant cytomegalovirus vaccine
US5552143A (en) 1989-03-24 1996-09-03 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Recombinant cytomegalovirus vaccine
GB9001766D0 (en) 1990-01-25 1990-03-28 Univ Court Of The University O Vaccines
US5997878A (en) 1991-03-07 1999-12-07 Connaught Laboratories Recombinant poxvirus-cytomegalovirus, compositions and uses
KR100242671B1 (ko) 1991-03-07 2000-03-02 고돈 에릭 유전학적으로 처리한 백신 균주
US5643578A (en) 1992-03-23 1997-07-01 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of DNA transcription unit
US5801029A (en) 1993-02-16 1998-09-01 Onyx Pharmaceuticals, Inc. Cytopathic viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia
EP0620277A1 (en) 1993-03-18 1994-10-19 Merck & Co. Inc. Nucleic acid pharmaceuticals
FR2711670B1 (fr) 1993-10-22 1996-01-12 Pasteur Institut Vecteur nucléotidique, composition le contenant et vaccin pour l'immunisation à l'encontre d'une hépatite.
CA2181832C (en) 1994-01-27 2012-11-27 Harriet L. Robinson Immunization by inoculation of dna transcription unit
ES2243937T3 (es) 1994-04-29 2005-12-01 Baxter Healthcare S.A. Poxvirus recombinados en regiones esenciales con la ayuda de polinucleotidos extraños.
WO1996029421A1 (en) 1995-03-23 1996-09-26 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Vectors for gene delivery
JP2002512501A (ja) 1996-07-03 2002-04-23 メリアル インコーポレイテッド 外来性ｄｎａを含む組換えイヌアデノウィルス（ｃａｖ）
US6183752B1 (en) 1997-02-05 2001-02-06 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Restenosis/atherosclerosis diagnosis, prophylaxis and therapy
WO2005013918A2 (en) 2003-02-28 2005-02-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions, methods and kits relating to poxvirus subunit vaccines
EP1773387B1 (en) 2004-06-25 2013-06-12 Merial Ltd. Avipox recombinants expressing foot and mouth disease virus genes
PT1881845E (pt) 2005-04-25 2010-05-31 Merial Ltd Vacinas de vírus nipah
MX2011000535A (es) 2008-07-23 2011-02-22 Boehringer Ingelheim Pharma Nuevos elementos reguladores.
CN104471064B (zh) * 2012-01-20 2018-11-02 中华人民共和国香港特别行政区政府 副粘病毒及其用途
ES2866108T3 (es) 2012-02-14 2021-10-19 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vectores poxvirales recombinantes que expresan proteínas de la rabia y OX40 y vacunas fabricadas a partir de los mismos
JP6589159B2 (ja) * 2014-04-01 2019-10-16 共立製薬株式会社 新規ネコモルビリウイルス株、不活化ワクチン製剤、並びにネコモルビリウイルス感染症予防方法
CN109563491B (zh) * 2016-08-25 2024-02-13 勃林格殷格翰动物保健有限公司 新颖的副粘病毒及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
BR112020017239A2 (pt) 2020-12-22
US20200206339A1 (en) 2020-07-02
EP3668988A1 (en) 2020-06-24
MX2020008779A (es) 2020-10-01
CN111712575B (zh) 2024-07-19
AR115256A1 (es) 2020-12-16
WO2019162294A1 (en) 2019-08-29
CN111712575A (zh) 2020-09-25
EA202091958A1 (ru) 2021-02-04
CA3088646A1 (en) 2019-08-29
US11033616B2 (en) 2021-06-15
KR20200124713A (ko) 2020-11-03
AU2019223768A1 (en) 2020-08-27
JP2021514196A (ja) 2021-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6913747B2 (ja) イヌアデノウイルスベクター
JP6951429B2 (ja) 新規のブタインフルエンザワクチン
US10619169B2 (en) EHV insertion site ORF70
TWI780070B (zh) 新穎之啟動子
US10905758B2 (en) Intranasal vector vaccine against porcine epidemic diarrhea
JP2023012474A (ja) 不活性化ｕｌ１８および／またはｕｌ８を有する新しいｅｈｖ
JP7038804B2 (ja) パラミクソウイルス科の発現系
JP7245260B2 (ja) Ｅｈｖ挿入部位ｕｌ４３
US11033616B2 (en) Recombinant viral vector systems expressing exogenous feline paramyxovirus genes and vaccines made therefrom